含有人參果提取物的組合物的製作方法

2023-05-18 04:34:26 1

專利名稱：含有人參果提取物的組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及促進血液循環的組合物，預防血管老化的組合物，治療血管炎症的組合物，促進血管發生的組合物，治療缺血性心臟病的組合物，改善和治療局部血液循環不足的組合物，改善皮膚美觀的組合物，和改善男性性功能的組合物，其含有人參果提取物作為活性成分。更具體地，本發明涉及含有人參果提取物作為活性成分的組合物，其促進內皮細胞中一氧化氮(NO)的生成，提高內皮細胞的活力，增強內皮細胞的流動性，並通過血管形成促進血管發生；通過促進內皮細胞中NO的生成使海綿體得到鬆弛並改善陰莖勃起，從而改善男性性功能；並提供抗氧化作用、通過促進膠原蛋白生物合成及抑制MMP-I防止皮膚老化並使皺紋得到改善；通過抑制黑色素合成提供皮膚美白效果，並提供皮膚保溼效果。
背景技術：
人參(Panax ginseng C. A. Meyer)是人參屬五加科植物，並且在韓國、中國、日本及一些其它國家作為草藥使用已超過2000年。在經驗上，它已經被用於預防疾病和延長壽命。到目前為止，已知人參具有如下作用對中樞神經系統的正面作用，抗致癌作用，抗癌活性，免疫功能控制，抗糖尿病作用，肝功能改善作用，心血管障礙改善，抗動脈硬化作用， 血壓控制，更年期改善，骨質疏鬆狀況改善，抗壓力及抗疲勞作用，抗氧化作用，預防衰老作用等等(The Recent Korean Ginseng -Constituents and Effects，Korea Ginseng and Tobacco Research Institute，56-112，1996)。人參皂苷，作為人參典型的活性化合物，均勻地分布於植物的地上及地下部分。特別是，眾所周知不僅是人參皂苷的含量，其組成也因人參根部分、人參葉部分或人參果部分而不同(Attele AS 等，Biochem. Pharmacol. ,58 ；1685-1693，1999)。據報導，它們之中與人參根部相比，人參果提供更為優異的抗糖尿病作用，並擁有特徵性的人參皂苷含量和組成 (Dey L. φ, Phytomedicine, 10 ；600—605，2003)。自古以來，相比人參的其它部分，人參果就已經備受珍視。已對其進行挑選和收割來獲得種子。從人參果收集種子僅在四年的人參中進行一次。三年的人參很難產出好的一年生苗，原因是其種子太小。收集自五年或五年以上人參的種子堅實，但人參根部可能並未生長充分，並且由於組織不那麼稠密很難產出高質量的紅參。而且如果進行兩次或兩次以上的種子收集，紅參的數量和質量都會遭到嚴重的破壞(The Recent Korean Ginseng Cultivation, Korea Ginseng and Tobacco Research Institute,130-131,1996)。對血液循環來說，毛細血管的擴張在外周血液循環中尤為重要。即沒有血管的擴張，血管中的血流量不可能增加。在eNOS(內皮細胞一氧化氮合成酶)的作用下，NO參與血管擴張的過程。因此，高血壓時，NO的生成減少(Forete，P.等，Basal nitric acidsynthesis in essential hypertension. Lancet. 1997 ;349 :837-842)。諸如衰老、吸菸、高血脂及糖尿病等其它因素也會降低血管中NO的生成量(Crossman，DC.More problems with endothelium. Q J Med. 1997 ；90 :157-160)。血管發生是涉及由已經存在的血管成長為新血管的過程。它以幾個階段發生組成血管的內皮細胞的遷移、經由細胞外基質(ECM)——一種細胞間屏障——的侵入、增殖以及向血管的分化(管形成)(Folkman，J.等，Angiogenesis. The Journal of Biological Chemistry,1992，267(16)，10931-10934)。從生理上講，血管發生出現於胚胎發育期或月經期，並可能由於局部缺氧而暫時出現。應用治療性血管發生以避免缺血性疾病、骨折等中的血流量不足。世界範圍內，動脈硬化引起的缺血性心血管疾病是主要死因之一，而且這些疾病在韓國也增長迅速(Jeong， Jin-Ok 等，Therapeutic angiogenesis. Journal of Korean Society for Vascular Surgery. 2000. 16(2)，265-269)。L-精氨酸是化學式為C6H14N4O2,分子量為174. 21的鹼性胺基酸。它最初從羽扇豆 (一種豆類)幼苗提取物中分離出來。L-精氨酸是組成蛋白質的胺基酸之一。它富含在魚精子和以游離態存在於植物種子中的精蛋白裡。而且，它是尿素循環(也稱為鳥氨酸循環) 的主要組成部分。在精氨酸酶的作用下，它被分解成尿素和鳥氨酸。L-精氨酸由瓜氨酸和天門冬氨酸合成。儘管L-精氨酸對成人來說是非必需胺基酸，但它對嬰兒卻是營養上必需的。已知NO-硝基-L-精氨酸為一氧化氮合成酶抑制劑。有研究表明NO-硝基-L-精氨酸可能干擾血管鬆弛。但其它研究表明在L-精氨酸(3X10_3mOl/L)的存在下，NO-硝基-L-精氨酸的抑制作用能夠被逆轉(Simonsen等，Nitric oxide is involved in the inhibitory neurotransmission and endothelium-dependent relaxations of human small penial arteries, Clin. Sci. 92 :3,265-75.) 該研究主張 L-精氨酸能夠成為一氧化氮合成酶的有效底物，並能刺激血管中游離NO的釋放。男性性功能包括性慾、陰莖勃起、射精以及性高潮。這種性功能取決於神經系統、 內分泌系統以及血液循環系統間複雜的生理相互作用。它們中任何一方的失調都可能導致性功能障礙。到僅僅大約10年前為止，性功能障礙還被認為是由精神因素引起的。但是， 隨著現代醫學科學的發展，已發現大約50%患者的性功能障礙是由包括血液循環系統、神經系統和內分泌系統失調、糖尿病、高血壓、藥物攝入等在內的多種原因引起的。最近，西地那非，一種磷酸二酯酶V抑制劑，在對於性功能障礙的治療方面引起了廣泛興趣。但是，這種應用化學藥品的治療僅引起短暫的勃起，而且它價格昂貴並伴有包括頭痛、血壓升高、心臟病發作等在內的多種不良反應。特別是有不少與心臟病發作相關的死亡病例報導。因此，需要能夠從根本上增強勃起功能的安全有效的治療方法。最近的趨勢傾向於開發增加 NO和cGMP生成的治療性功能障礙的方法，NO和cGMP是引起海綿體平滑肌的強烈鬆弛，從而增強陰莖勃起的信號轉導物質。出現在陰莖勃起過程中的變化是複雜的，並且需要外周及中樞神經系統和內分泌系統高度協調的控制。海綿體平滑肌的收縮受到突觸後α 1腎上腺素能受體激活而產生的去甲腎上腺素能神經刺激的控制，而且勃起功能障礙可能與海綿體平滑肌張力的增強有關。然而，陰莖平滑肌的鬆弛部分地受非腎上腺素能非膽鹼能(NANC)神經遞質的調節，而陰莖海綿體平滑肌張力的下降源於由NO引起的海綿體鬆弛。在性興奮過程中，NO從神經元和內皮細胞釋放出來，與存在於平滑肌細胞和內皮細胞中的可溶性鳥苷酸環化酶(sGC)結合併將其激活，從而提高細胞內環鳥苷3' -5'-單磷酸(cGMP)的水平。通過不明機制， 儘管認為這與蛋白激酶G的活化有關，但增高的cGMP水平通過降低細胞內鈣水平引起海綿體的鬆弛(這可能是由Ca2+激活的K+通道的活化而引起的)(Chuang等，cGMP mediates corpus cavernosum smooth muscle relaxation with altered cross-bridge function. Life Sci. 1998 ；63 (3) :185-94)。隨著生活水平的提高以及人們對外表的日趨重視，通過可食用產品而不僅僅是施用於皮膚的化妝品來改善皮膚美觀的願望也愈加強烈。即對有效預防衰老，改善皺紋，並提供皮膚美白及皮膚保溼效果的皮膚美容食品的關注和期望提高。皮膚是覆蓋我們身體的器官。它由三層基本層組成表皮、真皮和皮下組織。還包括其它諸如汗腺、皮脂腺、乳腺、毛囊等的附屬器官。表皮被進一步劃分為以下幾層角質層、透明層、顆粒層、棘細胞層和基底層。構成表皮的細胞主要類型是角質形成細胞和黑色素細胞。真皮被分為兩個區域稱為乳頭區的淺表區域和稱為網狀區的深層較厚區域。它由粘彈性組織構成，並由無定形基質以及膠原蛋白、彈性蛋白等纖維狀蛋白質組成。乳頭區由較細的膠原纖維和它們間的空隙組成，並且富含細胞成分和基質成分。另一方面，網狀區由較粗的聚集膠原纖維和它們間的空隙組成。膠原纖維通過彈性蛋白被連接起來。皮膚老化依據其起因可以分為自然老化和非自然老化。自然老化是隨著時間的推移皮膚結構及生理功能的退化，而不考慮環境的變化。非自然老化是由於長期暴露於外在環境如陽光下所致。特別是，由光線引起的皮膚老化被稱作光老化。紫外(UV)線是引起皮膚老化過程中生理學及形態學變化的主要原因。除了自然和非自然老化因素，現代社會環境的影響和季節因素也導致透明質酸生物合成的減少，而它是表皮和真皮中糖蛋白的主要組成部分。結果，皮膚變得粗糙和乾燥。如果皮膚發生自然老化，則皮膚變得乾燥，同時纖細的皺紋增加並加深。而且，由於表皮、真皮等結構和功能的改變，皮膚失去其大部分彈性並且看起來下垂。真皮變薄，而膠原蛋白的數量以每年的速度減少，並且剩餘的膠原纖維也逐漸變粗並趨於交聯，導致溶解性、彈性等的降低。同時，彈性蛋白纖維也變粗並趨於交聯。此外，真皮中成纖維細胞的增殖減少，並且膠原蛋白的合成和分解能力降低。膠原蛋白是皮膚組織的主要組成部分，它與皮膚老化相關。該蛋白質佔不含脂肪的皮膚乾重總量的77%，並且佔真皮纖維成分的90%。它負責維持皮膚的強度、彈性和柔性。因此，促進膠原蛋白的合成以及抑制膠原蛋白的降解已成為皮膚美觀和預防皮膚老化方面的重要問題。很明顯，光老化類似於自然老化，但是，從組織學上講，它與角質形成細胞增殖增加引起的表皮增厚、黑色素細胞增加以及光線破壞區域的色素沉著有關。擁有光亮、透明和白暫的皮膚是現代人的強烈渴望之一。人的膚色取決於皮膚中黑色素的濃度和分布。除了遺傳因素，還與諸如紫外線、疲勞、壓力等的環境或生理因素相關。黑色素的合成過程如下酪氨酸被轉化為多巴，然後在酪氨酸酶的作用下轉化成多巴奎寧(dopaquinine)，之後，多巴奎寧通過非酶促氧化轉化為黑色素。皮膚內黑色素的過分合成導致皮膚變黑、黃褐斑和雀斑。因此，可以通過抑制皮膚內黑色素的合成達到皮膚美白效
發明公開技術問題本發明針對解決上述問題。本發明的發明人發現，人參果(即人參地上部分之一) 的提取物與包括人參根部或紅參根部在內的其它部分相比具有不同的組成和作用。因此，本發明的目的是應用人參果提取物提供通過改善內皮細胞活力，提升內皮細胞流動性以及促進內皮細胞管形成從而促進血液循環和血管發生的組合物，防止皮膚老化，改善皺紋並提供皮膚美白和皮膚保溼效果的改善皮膚美觀的組合物，以及通過增加 NO——一種引起海綿體平滑肌鬆弛的信號轉導物質——的生成從而增強陰莖勃起進而改善男性性功能的組合物。技術方案一方面，本發明提供促進血液循環的組合物，預防血管老化的組合物，治療血管炎症的組合物，促進血管發生的組合物，治療缺血性心臟病的組合物以及改善並治療局部血液循環不足的組合物，其含有人參果提取物作為活性成分。根據本發明的實施方案，在治療缺血性心臟病的組合物中，所述缺血性心臟病是動脈硬化、心絞痛或心肌梗死。根據本發明的實施方案，組合物中人參果提取物的製備方法如下向乾燥的人參果中加入乙醇，之後回流提取，過濾，濃縮，除去油溶性組分，加入丁醇提取並濃縮。另一方面，本發明提供含有人參果提取物作為活性成分的改善皮膚美觀的組合物。另一方面，本發明提供含有人參果提取物作為活性成分的改善男性性功能的組合物。另一方面，本發明提供含有人參果提取物作為活性成分並且還含有L-精氨酸的改善男性性功能的組合物。有益效果本發明的含有人參果提取物的組合物擴張血管，從而促進血液循環，抑制血管老化，治療血管炎症，有助於通過促進血管發生治療諸如動脈硬化、心絞痛及心肌梗死的缺血性心臟病，有助於改善和治療由關節炎或骨折引起的局部血液循環不足。此外，它還具有優異的皮膚老化抑制作用、皮膚皺紋改善作用、皮膚美白效果及皮膚保溼效果。因此，可以用本發明的組合物製備用於改善皮膚美觀的功能性保健食品。此外，本發明的人參果提取物增加內皮細胞中NO的生成，從而使陰莖勃起的改善成為可能。當將其與作為一氧化氮合成酶底物的L-精氨酸聯合使用時，這種作用可能進一步加強。因此，含有人參果提取物和 L-精氨酸作為活性成分的組合物可能有效改善男性性功能。附圖簡要說明通過以下詳細說明並結合隨附的權利要求，將更加清楚地理解本發明的上述和其它目的及特點和其它優勢，其中圖Ia是內皮細胞的共聚焦雷射顯微圖像，圖Ib中對螢光強度與未處理組的螢光強度進行了對比；圖加所示為存活內皮細胞的增殖，圖2b中對染色的內皮細胞的吸光度進行了對比；
圖3a所示為染色的內皮細胞的流動性，圖北中對細胞的流動性與未處理組細胞的流動性進行了對比；圖如所示為固定的染色內皮細胞，圖4b中對管長與未處理組的管長進行了對比；圖fe是從主動脈環延伸出的新生毛細血管的光學顯微圖像，圖恥所示為通過測量新生血管的長度和數量所評估的血管萌發的促進作用；圖6a是小鼠內血管發生的實時活體螢光顯微圖像，圖6b所示為使用電腦程式分析的血管變化(0 最少變化，5 最多變化)；圖7中對比了對LPS誘導的NO生成的抑制作用；圖8中對比了小鼠血液中NO和炎症因子PGE2、TNF-α禾Π ILl-β的生成；圖9所示為所測物質的活性氧清除活性；

圖10所示為實施例1的人參果提取物的膠原蛋白生成；圖11所示為實施例1的人參果提取物對MMP-I合成的抑制作用；圖12所示為實施例1的人參果提取物的皺紋抑制作用；圖13所示為實施例1的人參果提取物的減少皺紋作用；圖14為表明L-精氨酸、紅參提取物及人參果提取物在內皮細胞中的促NO生成作用的共聚焦雷射顯微圖像；圖15為通過相對螢光強度表明L-精氨酸、紅參提取物及人參果提取物在內皮細胞中的促NO生成作用的圖表；圖16為通過相對螢光表明人參果提取物和L-精氨酸促進NO生成的協同作用的圖表。實施本發明的最佳方式 下文中將對本發明做出更詳細的說明。本發明提供組合物，它含有人參果提取物作為活性成分，促進內皮細胞中NO的生成從而改善血液循環，改善內皮細胞活力，促進內皮細胞的分化和遷移，並促進血管發生。 本發明的組合物可能含有人參果提取物作為活性成分從而通過提高內皮細胞中NO的生成改善陰莖的勃起，進而改善男性性功能，該組合物可能還含有L-精氨酸。為了改善男性性功能，需要通過使海綿體充分鬆弛來促進陰莖的勃起。這與NO生成的增加有關。在動物實驗中，發現NO在陰莖勃起過程中起到重要作用。性刺激後，在陰莖副交感神經的外周，內皮細胞中NO的生成增加。NO激活鳥苷酸環化酶，從而將鳥苷三磷酸(GTP)轉化成環鳥苷單磷酸(cGMP)。由此產生的cGMP提供觸發海綿體平滑肌及陰莖動脈鬆弛的信號，從而引起陰莖勃起。因此，NO的生成對於維持陰莖勃起至關重要。所以，將作為一氧化氮合成酶底物的L-精氨酸和促進血管內NO生成的物質聯合使用將會觸發海綿體中NO的充分釋放，從而引起平滑肌的鬆弛，使血液充分地流入並治療勃起功能障礙。本發明的用於改善男性性功能的組合物基於所述組合物的總重量，取決於所述組合物的類型，可以含有0.01-100重量％的人參果提取物。當與L-精氨酸聯合使用時，基於組合物的總重量，L-精氨酸的含量可以為0. 01-99. 9重量％。為了預防皮膚老化，改善皺紋並達到皮膚美白和皮膚保溼效果，需要有效清除由自然或非自然原因產生的活性氧(氧自由基)，促進膠原蛋白生成，抑制MMP-1，抑制酪氨酸酶，抑制黑色素生成，以及促進透明質酸生成。本發明的用於改善皮膚美觀的含有人參果提取物的組合物可以製備成用於預防皮膚老化，改善皮膚皺紋，使皮膚美白和皮膚保溼的功能性保健食品。本發明的功能性保健食品組合物基於所述組合物的總重量，取決於所述組合物的類型，可以含有0.01-100重量％的人參果提取物。本發明的含有人參果提取物的組合物可以用作食品、藥品等的添加劑。用於藥品時，本發明的含有人參果提取物作為活性成分的組合物可以通過加入常用無機或有機載體製備成固體、半固體或液體劑型用於口服或腸胃外給藥。口服給藥製劑形式可包括片劑、丸劑、顆粒劑、軟/硬膠囊劑、散劑、微粒劑、乳劑、 糖漿劑、彈丸劑等等。腸胃外給藥製劑形式可包括注射劑、滴劑、軟膏劑、洗劑、噴霧劑、混懸劑、乳化劑、栓劑等等。本發明的活性成分可以通過本領域中的常用方法製備成製劑形式。 可以適當地使用表面活性劑、賦形劑、著色劑、芳香劑、防腐劑、穩定劑、緩衝劑、助懸劑或其他輔劑。本發明的組合物可依據常用方法製備成藥物製劑。當製備製劑時，優選用載體與活性成分混合或使其稀釋，或者在容器型載體中將其封裝。如果以稀釋劑作為載體，它可以是固體、半固體或液體物質，對活性成分起到載體、賦形劑或介質的作用。適當的載體、賦形劑或稀釋劑的實例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、矽酸鈣、纖維素、甲基纖維素、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、水、羥苯甲酯 (methylhydroxybenzoate)、輕苯丙酉旨(propylhydroxybenzoate)、滑石粉、硬月旨酸續及礦物油。製劑還可能含有填充劑、防絮凝劑、潤滑齊 、溼潤齊 、芳香齊 、乳化劑、防腐劑等等。本發明的組合物可以通過本領域中公知的方法製備成製劑，以便在給予哺乳動物後，活性成分能夠以速釋、緩釋或控釋方式釋放出來。本發明的藥物組合物可以製備成各種途徑給藥，包括口服、皮內、皮下、靜脈內、腹膜內、肌內給藥，通過使用貼劑或離子透入療法進行局部施用。其中，優選局部施用和口服給藥。對於人，活性成分的每日劑量可為1-100毫克/公斤體重，優選為5-70毫克/公斤體重。每日可一次或多次給藥。然而，活性成分實際劑量的確定應考慮多種因素，包括要治療的特定疾病、給藥途徑、病人的年齡、性別和體重、疾病的嚴重程度等等。因此，上述提到的給藥劑量決不限制本發明的範圍。作為功能性食品使用時，本發明的含有人參果提取物作為活性成分的組合物可以通過加入相關領域中常用的組分製備成片劑、膠囊劑、軟膠囊劑、丸劑、顆粒劑、飲料、膳食條(diet bar)、巧克力、焦糖、糖果等。而且可以適當地添加適合於功能性食品的功能性成分。發明方式下面的實施例對本發明做出更為詳細的闡述，但不是為了限制本發明的範圍。實施例1 人參果提取物的製備1)人參果的預處理從收穫的未加工的人參果中將種子分離並移出。人參果的果肉和果皮經日光曬乾或熱風乾燥得到乾燥的人參果。2)人參果提取物的製備向Ikg乾燥的人參果中加入3L乙醇，然後回流提取，接著過濾，在40-45 V下減壓濃縮，得到300g人參果提取物。實施例2 人參果提取物的製備1)將IOOg實施例1中得到的人參果提取物溶解於IL水中。通過加入500mL乙醚，使用分液漏鬥除去油溶性成分。隨後，向剩餘的水層中加入500mL水飽和丁醇。此過程重複3次。所得的丁醇層減壓濃縮，得到60g人參果提取物(粗皂苷)。比較例1 人參根部提取物的製備人參根部提取物通過與實施例1類似的方法製備，除了使用紅參根部代替人參^ ο實驗例1 人參果提取物與人參根部提取物成分的對比
1.人參皂苷(人參皂甙)成分的分析分別用乙醚處理實施例1和比較例1中製備的人參果提取物和人參根部提取物以去除油溶性成分。然後，用丁醇(BuOH)提取粗皂苷並濃縮。應用HPLC對人參皂苷(人參皂甙)成分進行分析。結果如下表1所示。表1
權利要求
1.人參果提取物在製備用於改善男性性功能的組合物中的用途。
2.權利要求1的用途，其中所述組合物還含有L-精氨酸。
3.權利要求1的用途，其中所述組合物含有基於所述組合物總重量的0.01-100重量％ 的人參果提取物。
4.權利要求2的用途，其中所述組合物含有基於所述組合物總重量的0.01-99. 9重量％的L-精氨酸。
5.權利要求1的用途，其中所述組合物提高血管內皮細胞中一氧化氮(NO)的生成。
6.權利要求1的用途，其中所述組合物改善陰莖勃起。
7.權利要求1的用途，其中所述組合物為片劑、丸劑、彈丸劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、軟膏劑、飲料或注射劑的製劑形式。
全文摘要
本發明涉及含有人參果提取物的組合物。具體而言，本發明涉及人參果提取物在製備用於改善男性性功能的組合物中的用途。
文檔編號A61K31/198GK102429940SQ20111040111
公開日2012年5月2日 申請日期2008年5月28日 優先權日2007年5月28日
發明者全喜瑩, 崔榮德, 廉明勳, 樸燦雄, 李償閔, 李常峻, 李真鍈, 趙南勳, 金春基, 金榮明 申請人:株式會社太平洋