N－(芳基/雜芳基)胺基酸衍生物、包括這些衍生物的藥用組合物以及用這些化合物抑制β...的製作方法

2023-05-21 20:41:06

專利名稱：N－(芳基/雜芳基)胺基酸衍生物、包括這些衍生物的藥用組合物以及用這些化合物抑制β ...的製作方法
相關申請的相互參考本申請要求美國臨時申請第60/＿,＿號(該申請根據37 C.F.R.§1.53(b)(2)(ⅱ)由1996年11月22日提交的美國專利申請第08/755,334號轉變而來)的權益，該申請通過引用其全部結合到本文中作為參考。發明背景發明領域本發明涉及抑制β-澱粉樣肽釋放和/或其合成的化合物，並因此在治療阿爾茨海默氏病中具有實用性。本發明也涉及包含這類化合物的藥用組合物以及抑制β-澱粉樣肽釋放的方法。參考文獻以下出版物、專利和專利申請在本申請中以上標數字引用1Glenner等，「阿爾茨海默氏病新的腦血管澱粉狀蛋白的純化和鑑定的初步報導」，Biochem.Biophys.Res.
Commun.,120:885-890(1984).
2Glenner等，「阿爾茨海默氏病的多肽標記及其診斷用途」，於1987年5月19日頒發的美國專利第4,666,829號。
3Selkoe，「阿爾茨海默氏病的分子病理學」Neuron,6:487-498(1991)。
4Goate等，「患有家族性阿爾茨海默氏病的澱粉狀蛋白前體蛋白基因中錯義突變的分離」，Nature,349:704-706(1990)。
5Chartier-Harlan等，「由β-澱粉狀蛋白前體蛋白基因中密碼子717突變引起的阿爾茨海默氏病的早期發作」，Nature,353:844-846(1989)。
6Murrell等，「β-澱粉狀蛋白前體蛋白與遺傳性阿爾茨海默氏病有關的突變」，Science,254:97-99(1991)。
7Mullan等，「β-澱粉狀蛋白N末端的APP基因中可能的阿爾茨海默氏病的病理突變，Nature Genet.,1:345-347(1992)。
8Schenk等，「檢測可溶性β-澱粉樣肽的方法和組成」，於1994年5月11日公開的國際專利申請公開第WO94/10569號。
9Selkoe，「澱粉狀蛋白和阿爾茨海默氏病」，ScientificAmerican，第2-8頁，1991年11月。
10 Yates等，「N,N-二取代的胺基酸除草劑」，美國專利號3,598,859,1991年8月10日頒發。
11 Citron等，「家族性阿爾茨海默氏病中β-澱粉狀蛋白前體蛋白突變增加β-蛋白的產生，Nature,360:672-674(1992)。
12 Hansen等，「測定細胞生長和細胞殺傷的精確和快速的染料法」的再檢查和進一步開發，J.Immun.Meth.,119:203-210(1989)。
所有以上出版物、專利和專利申請均通過引用全部結合到本文中作為參考，其程度與每個單獨的出版物、專利或專利申請專門而單獨地表明通過引用全部結合到本文中作為參考一樣。本領域的狀況阿爾茨海默氏病(AD)是一種退行性腦病，其臨床特徵在於進行性記憶、認知、推理、判斷和情緒穩定性的喪失，它逐漸導致深度精神退化(mental deterioration)，最終導致死亡。AD為老年人中進行性精神障礙(痴呆)的非常常見的原因，據信在美國為死亡的第四個主要醫學原因。已經在世界範圍的人種和人種群中觀察到AD，並是目前和未來的主要的公眾健康問題。目前估計該病僅在美國就影響大約二至三百萬人。目前AD是不可治癒的。目前已知沒有有效預防AD或逆轉其症狀和進程的療法。
患有AD的個體的大腦表現出特徵性損害，稱為老年(或澱粉狀蛋白)斑、澱粉樣血管病(澱粉狀蛋白在血管中沉積)和神經原纖維纏繞。大量的這些損害，特別是澱粉狀蛋白斑和神經原纖維纏繞，一般在患有AD的患者中對記憶和認知功能重要的人腦的幾個區域中發現。更有限解剖分布的少數這些損害也在不具有臨床AD的大多數老年人的腦中發現。澱粉狀蛋白斑和澱粉樣血管病也特徵鑑定了第21對染色體三體性(唐氏症候群)個體的大腦和具有Dutch類型澱粉狀蛋白病的遺傳性大腦出血(HCHWA-D)。目前，AD的確診通常需要在死於此病的患者腦組織中或極少情況下在侵入性神經外科手術期間取出的腦組織小活檢樣品中觀察上述損害。
AD和上述其它疾病的澱粉狀蛋白斑和血管澱粉樣沉積(澱粉樣血管病)特徵性的主要化學組分，為大約39-43個胺基酸的約4.2千道爾頓(kD)蛋白，稱為β-澱粉樣肽(βAP)，或有時為Aβ、AβP或β/A4。G1enner等人1首先純化β-澱粉樣肽，並提供部分胺基酸序列。在美國專利第4,666,8292中描述了前28個胺基酸的分離步驟和序列的數據。
分子生物學和蛋白化學分析已經表明，β-澱粉樣肽為大得多的前體蛋白(APP)的小片段，APP通常由各種動物(包括人)的許多組織中的細胞產生。對編碼APP的基因結構的了解已經證明，β-澱粉樣肽被蛋白酶從APP切下，作為肽片段產生。β-澱粉樣肽片段從APP切下以及隨後作為澱粉狀蛋白斑在腦組織和腦血管壁和腦膜血管壁中沉積的精確的生物化學機制目前尚不清楚。
幾方面的證據表明，進行性β-澱粉樣肽腦沉積在AD發病中機理起初期(seminal)作用，並可以數年或數十年先於認知症狀出現。參見例如Selkoe3。最重要的證據是這樣一個發現，即在具有遺傳決定(家族性)形式的AD的幾個家族中，APP的770個胺基酸的同種型的人胺基酸717的錯義DNA突變可以在受影響成員中發現，而在未受影響的成員中沒有發現(Goate等4；Chartier-Harlan等5；和Murrell等6)，該突變形式稱為瑞典變異體。1992年報導了在瑞典人家族中發現的賴氨酸595-甲硫氨酸596變為天冬醯胺595-亮氨酸596(參考695同種型)的雙突變(Mullan等7)遺傳連鎖分析已經證明，這些突變以及APP基因中的某些其它突變是這類家族中受影響成員AD的特異性分子原因。另外，已經鑑定APP的770個胺基酸同種型的胺基酸693的突變為β-澱粉樣肽沉積病HCHWA-D的原因，而在其它情況下，在某些非HCHWA-D的患者中，於胺基酸692處由丙氨酸向甘氨酸的變化引起類似AD的表型。基於遺傳的AD病例中APP的這些突變和其它突變的發現證明，APP的改變和其β-澱粉樣肽片段的沉積隨後可以引起AD。
儘管在了解AD和其它β-澱粉樣肽相關疾病的發病機制(underlying mechanisms)方面已取得進展，但仍需要開發治療所述疾病的方法和組合物。理想的是，所述治療方法最好基於能夠抑制β-澱粉樣肽釋放和/或其合成的藥物。
本發明概述本發明涉及發現一類抑制β-澱粉樣肽釋放和/或其合成的化合物，因此它們可用於在易患AD患者中預防AD和/或治療患有AD的患者，以抑制其病情的進一步惡化。具有上述性質的該類化合物由以下式Ⅰ定義
Ⅰ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自醯基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、滷代、氫、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環稠合形成雜芳基或雜環，Rb和Rb』獨立選自氫、滷代、硝基、氰基、三滷代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當Rc為氫時，那麼Rb和Rb』或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、滷代、氰基、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，
(e)雜芳基，和(f)含有1-3個選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、滷代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、1-4個碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環烷基、環烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-滷代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環，(i)-NR』R」，其中R』和R」獨立選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環，以及R』和R」結合形成具有2-8個碳原子、任選還含有1-2個選自氧、硫和氮的雜原子的環基團，並任選被一個或多個烷基或烷氧基取代，和當R3含有至少3個碳原子時，X也可以為-CR4R4Y』，其中每個R4獨立選自氫、烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，Y』選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，前提為當R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的苄基時，那麼X不為-C(O)OCH3。
因此，在其一個方法方面，本發明涉及抑制細胞中β-澱粉樣多肽釋放和/或其合成的方法，該方法包括給予這種細胞以上式Ⅰ化合物或式Ⅰ化合物的混合物，給予量應足以抑制細胞釋放和/或合成β-澱粉樣多肽。
因為β-澱粉樣多肽的體內產生與AD的發病機理相關8,9，因此式Ⅰ化合物也可以與一種藥用組合物結合使用，以預防性和/或治療性地預防和/或治療AD。因此，在另一方法方面，本發明涉及在有發展為AD風險的患者中預防AD發作的預防性方法，該方法包括給予所述患者一種藥用組合物，所述藥用組合物包含藥學上惰性的載體和有效量的一種上述式Ⅰ化合物或式Ⅰ化合物的混合物。
在另一方法方面，本發明涉及一種治療性方法，治療患有AD的患者，以便抑制該患者病症的進一步惡化，該方法包括給予所述患者一種藥用組合物，該組合物包含藥學上惰性的載體和有效量的一種上述式Ⅰ化合物或式Ⅰ化合物的混合物。
在上述式Ⅰ中，R1取代的苯基優選為4-取代的、3,5-二取代的或3,4-二取代的苯基，其中在3位和/或5位的取代基如上述Rb和Rb』定義，在4位的取代基如上述Rc定義。特別優選的3,5-二取代的苯基包括(如)3,5-二氯苯基、3,5-二氟苯基、3,5-二(三氟甲基)苯基和3,5-二甲氧基苯基等。特別優選的3,4-二取代的苯基包括(如)3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、3-(三氟甲基)-4-氯苯基、3-氯-4-氰基苯基、3-氯-4-碘代苯基、3,4-亞甲基二氧基苯基等。特別優選的4-取代的苯基包括(例如)4-疊氮基苯基、4-溴代苯基、4-氯代苯基、4-氰基苯基、4-乙基苯基、4-氟代苯基、4-碘代苯基、4-(苯基羰基)苯基和4-(1-乙氧基)乙基苯基等。
其它優選的R1取代基包括(例如)2-萘基、喹啉-3-基、2-甲基喹啉-6-基、苯並噻唑-6-基、苯並噻唑-2-基、5-吲哚基、苯基、2-萘基等。
優選的R2選自1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、1-4個碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與連接碳原子的芳基或雜芳基原子不是鄰位。特別優選的R2取代基包括(例如)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、-CH2CH2SCH3和苯基等。
優選的R3取代基包括烷基，如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和仲丁基等；取代的烷基如α-羥基乙基、-CH2-環己基、苄基、對-羥基苄基、3-碘代-4-羥基苄基、3,5-二碘代-4-羥基苄基、-CH2-引哚-3-基、苯基、-(CH2)4-NH-BOC、-(CH2)4-NH2、-CH2-(1-N- 苄基-咪唑-4-基)、-CH2-咪唑-4-基、-CH2CH2SCH3、-(CH2)4NHC(O)(CH2)4CH3和-(CH2)yC(O)OR5，其中y為1或2,R5氫、甲基或叔丁基、苯基等。
優選的X取代基包括-C(O)Y基團，其中Y為甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、叔丁氧基、氨基-NH2)、N-(異丁基)氨基、N-甲氨基、N,N-二甲氨基和N-苄氨基等，以及其中X為-CH2OH等。
本發明也提供包括藥用惰性載體和上述式Ⅰ化合物的新的藥用組合物。
用於本發明的方法和組合物的特別優選的化合物包括(如)下列化合物及其藥學上可接受的鹽，其中R2和R3基團的立體化學優選由L-胺基酸衍生N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N-異丁醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]蘇氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸乙酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸叔丁酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨醯胺N-(3,4-二氯苯基)丙氨酸N-(1-羥基-3-甲基-2-丁基)醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N,N-二甲基醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N-甲基醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]異亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]色氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-N-BOC-賴氨酸甲酯N-[N-苯並噻唑-6-基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-1-苄基組氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]穀氨酸γ-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]亮氨醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]穀氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-(3,5-二碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-(3-碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)甘氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-Nε-(己醯基)賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-β-環己基丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N,N-二甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]甲硫氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N,N-二甲基)-醯胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醯胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]組氨酸甲酯N-[N-(喹啉-3-基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-苯並噻唑-2-基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-苄基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)苯基甘氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醇N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二-(三氟甲基)苯基)丙氨醯基]苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二甲氧基苯基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯。
本發明進一步提供新的式Ⅲ化合物
Ⅲ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自醯基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、滷代、氫、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環稠合形成雜芳基或雜環，Rb和Rb』獨立選自氫、滷代、硝基、氰基、三滷代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當Rc為氫時，那麼Rb和Rb』或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、滷代、氰基、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、滷代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、1-4個碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環烷基、環烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-滷代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環，(i)-NR』R」，其中R』和R」獨立選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環，以及R』和R」結合形成具有2-8個碳原子、任選還含有1-2個選自氧、硫和氮的雜原子的環基團，並任選被一個或多個烷基或烷氧基取代，和當R3含有至少3個碳原子時，X也可以為-CR4R4Y』，其中每個R4獨立選自氫、烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，Y』選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，前提為當R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的苄基時，那麼X不為-C(O)OCH3，另外的前提為不包括下列已知的化合物當R1為苯基，R2為甲基，X為-C(O)NHΦ時，那麼R3不是甲基、異丙基、異丁基；和當R1為苯基，R2為甲基，X為-C(O)NH2時，那麼R3不是苄基。優選的式Ⅲ化合物包括下列表Ⅰ列出的化合物
Ⅲ
發明詳述如上所述，本發明涉及抑制β-澱粉樣多肽釋放和/或其合成的方法，並因此在治療阿爾茨海默氏病中具有實用性。然而，在詳細描述本發明之前，首先定義以下術語。定義術語「β-澱粉樣多肽」是指分子量大約為4.2kD的39-43個胺基酸的肽，該肽與Glenner等人1描述的蛋白形式大致同型，包括正常β-澱粉樣多肽的突變和翻譯後修飾。無論為何種形式，所述β-澱粉樣多肽均為大跨膜(membrane-spanning)糖蛋白的大約39-43個胺基酸的片段，稱為β-澱粉樣前體蛋白(APP)。其43個胺基酸的序列為1Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr11Glu Val His His Gln Lys Leu Val Phe Phe21Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys Gly Ala31Ile Ile Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val41Ile Ala Thr(SEQ ID NO:1)或為與其基本同型的序列。
「烷基」是指優選具有1-10個碳原子、更優選具有1-6個碳原子的一價烷基。該術語的例子有諸如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、正己基等。
「取代的烷基」是指優選1-10個碳原子、具有1-3個選自以下的取代基的烷基烷氧基、取代的烷氧基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、氨基醯基、氨基醯氧基、氰基、滷素、羥基、羧基、羧基烷基、環烷基、氧醯基氨基、硫羥基、取代的硫代烷氧基、芳基、雜芳基、雜環、硝基和一-和二-烷基氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-環烷基氨基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環氨基以及具有選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環的不同取代基的不對稱二取代胺。
「亞烷基」是指優選具有1-10個碳原子、更優選具有1-6個碳原子的二價亞烷基。該術語的例子有諸如亞甲基(-CH2-)、亞乙基(-CH2CH2-)、亞丙基異構體(例如-CH2CH2CH2-和-CH(CH3)CH2-)等。
「烷芳基」是指優選在亞烷基部分中具有1-10個碳原子、在芳基部分中具有6-10個碳原子的-亞烷基-芳基。這類烷芳基的例子為苄基、苯乙基等。
「烷氧基」是指「烷基-O-」基團。優選的烷氧基包括例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、仲丁氧基、正戊氧基、正己氧基、1,2-二甲基丁氧基等。
「取代的烷氧基」是指「取代的烷基-O-」基團，其中取代的烷基如上所定義。
「烷基烷氧基」是指「-亞烷基-O-烷基」基團，這裡亞烷基和烷基如上定義。這類基團包括例如亞甲基甲氧基(-CH2OCH3)、亞乙基甲氧基(-CH2CH2OCH3)、正亞丙基異丙氧基(CH2CH2CH2OCH(CH3)2)、亞甲基叔丁氧基(-CH2-O-C(CH3)3)等。
「烷基硫代烷氧基」是指「-亞烷基-S-烷基」基團，其中亞烷基和烷基如上定義。這類基團包括例如亞甲基硫代甲氧基(CH2SCH3)、亞乙基硫代甲氧基(-CH2CH2SCH3)、正亞丙基異硫代丙氧基(-CH2CH2CH2SCH(CH3)2)、亞甲基硫代叔丁氧基(-CH2SC(CH3)3)等。
「鏈烯基」是指優選具有2-10個碳原子、更優選具有2-6個碳原子和至少1個、優選1-2個烯不飽和位點的鏈烯基。優選的鏈烯基包括乙烯基(-CH=CH2)、正丙烯基(-CH2CH=CH2)、異丙烯基(-C(CH3)=CH2)等。
「取代的鏈烯基」是指如上定義的具有1-3個選自以下取代基的鏈烯基烷氧基、取代的烷氧基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、氨醯基、氨基醯氧基、氰基、環烷基、氧基醯氨基、滷素、羥基、羧基、羧烷基、硫羥基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、芳基、雜芳基、雜環、硝基、以及一-和二-烷氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-環烷基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環氨基、和具有選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環的不同取代基的不對稱二取代胺。
「鏈炔基」是指優選具有2-10個碳原子、更優選具有2-6個碳原子和具有至少1個、優選1-2個炔不飽和位點的鏈炔基。優選的鏈炔基包括乙炔基(-C≡CH)、炔丙基(-CH2C≡CH)等。
「取代的鏈炔基」是指如上定義的具有選自以下的1-3個取代基的鏈炔基烷氧基、取代的烷氧基、醯基、醯氨基、醯氧基、氨基、氨醯基、氨基醯氧基、氰基、環烷基、氧醯基氨基、滷素、羥基、羧基、羧烷基、硫羥基、硫代烷氧基、取代硫代烷氧基、芳基、雜芳基、雜環、硝基、以及一-和二-烷氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-環烷氨基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環氨基、和具有選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環的不同取代基的不對稱二取代胺。
「醯基」是指烷基-C(O)-、取代的烷基-C(O)-、環烷基-C(O)-、芳基-C(O)-、雜芳基-C(O)-和雜環-C(O)-，其中烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環如上定義。
「醯氨基」是指-C(O)NRR基團，這裡每個R獨立地為氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，而每個烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環如上定義。
「氨醯基」是指-NRC(O)R基團，這裡每個R獨立地為氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，而每個烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環如上定義。
「醯氧基」是指基團-OC(O)-烷基、-OC(O)-取代的烷基、-OC(O)-環烷基、-OC(O)-芳基、-C(O)O-雜芳基和-C(O)O-雜環，這裡烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環如上定義。
「氨基醯氧基」是指-NRC(O)O-烷基、-NRC(O)O-取代的烷基、-NRC(O)O-環烷基、-NRC(O)O-芳基、-NRC(O)O-雜芳基和-NRC(O)O-雜環，這裡R為氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，而每個烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環如上定義。
「氧醯氨基」是指基團-OC(O)NR-烷基、-OC(O)NR-取代的烷基、-OC(O)NR-芳基、-OC(O)NR-雜芳基和-OC(O)NR-雜環，這裡R為氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，而每個烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環如上定義。
「芳基」是指具有單環(例如苯基)或多個稠環(例如萘基或蒽基)的6-14個碳原子的不飽和芳族碳環基團。優選的芳基包括苯基、萘基等。
除非對芳基取代基定義另外進行限制，否則這類芳基可任選地用1-3個選自以下的取代基取代羥基、醯基、醯氧基、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、鏈烯基、取代的鏈烯基、鏈炔基、取代的鏈炔基、氨基、氨醯基、醯氨基、氨基醯氧基、氧醯氨基、芳基、芳氧基、羧基、羧基烷基、氰基、滷素、硝基、雜芳基、三滷甲基、硫代烷氧基、取代的硫代烷氧基、一-和二-烷氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-環烷氨基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環氨基、以及具有選自烷基、取代的烷基、芳基、雜芳基和雜環等的不同取代基的不對稱二取代胺等。優選的取代基包括烷基、烷氧基、滷素、氰基、硝基、三滷甲基和硫代烷氧基。當為如此取代時，這樣的芳基有時稱為「取代的芳基」。
「芳氧基」是指基團芳基-O-，其中所述芳基如上定義，包括也如上定義的可任選取代的芳基。
「羧烷基」是指基團-C(O)O-烷基和-C(O)O-取代的烷基，這裡烷基和取代的烷基如上定義。
「環烷基」是指具有3-20個碳原子的單環或多個稠環(包括與環烷基環稠合的芳環)的環烷基，它可任選地用1-3個烷基取代。這類環烷基包括例如單環結構，諸如環丙基、環丁基、環戊基、環辛基、1-甲基環丙基、2-甲基環戊基、2-甲基環辛基等；或多個環結構，諸如金剛烷基等。
「環烯基」是指具有單環或多個稠合環和至少一個內部不飽和點的4-8個碳原子的環烯基，它可任選地用1-3個烷基取代。合適的環烯基的實例包括例如環丁-2-烯基、環戊-3-烯基、環辛-3-烯基等。
「滷代」或「滷素」是指氟、氯、溴和碘，最好是氯或者是溴。
「雜芳基」是指具有2-10個碳原子和環內具有1-4個選自氧、氮和硫的雜原子的一價芳族基團。
除非對雜芳基取代基定義另外限制，否則這類雜芳基可任選地用選自以下的1-3個取代基取代羥基、醯基、醯氧基、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、鏈烯基、取代的鏈烯基、鏈炔基、取代的鏈炔基、氨基、氨醯基、醯氨基、氨基醯氧基、氧醯氨基、芳基、芳氧基、羧基、羧烷基、氰基、滷素、硝基、雜芳基、三滷甲基、硫代烷氧基、取代硫代烷氧基、一-和二-烷氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-環烷氨基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環氨基、以及具有選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環的不同取代基的不對稱二取代胺等。這類雜芳基可以具有單環(例如吡啶基或呋喃基)或多個稠環(例如中氮茚基或苯並噻吩基)。優選的雜芳基包括吡啶基、吡咯基和呋喃基。當為如此取代時，這樣的雜芳基有時稱為「取代的雜芳基」。
「雜環」或「雜環的」是指具有單環或多個稠環、具有1-12個碳原子和環內具有1-4個選自氮、硫或氧的雜原子的單價(即一個連接點)飽和或不飽和基團。
除非對雜環取代基定義另外限制，否則這類雜環基可任選地用1-3個選自以下的取代基取代羥基、醯基、醯氧基、烷基、取代的烷基、烷氧基、取代的烷氧基、鏈烯基、取代的鏈烯基、鏈炔基、取代的鏈炔基、氨基、氨醯基、醯氨基、氨基醯氧基、氧醯氨基、芳基、芳氧基、羧基、羧烷基、氰基、滷素、硝基、雜芳基、三滷甲基、硫代烷氧基、取代硫代烷氧基、一-和二-烷氨基、一-和二-(取代的烷基)氨基、一-和二-芳氨基、一-和二-雜芳氨基、一-和二-雜環氨基、以及具有選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環的不同取代基的不對稱二取代胺等。這類雜環基可以具有單環或多個稠環。優選的雜環包括嗎啉代、哌啶基等。
雜環基和雜芳基的實例包括但不限於呋喃、噻吩、噻唑、噁唑、吡咯、咪唑、吡唑、吡啶、吡嗪、嘧啶、噠嗪、中氮茚、異吲哚、吲哚、吲唑、嘌呤、喹嗪、異喹啉、喹啉、2,3-二氮雜萘、萘基吡啶、喹喔啉、喹唑啉、噌啉、蝶啶、咔唑、咔啉、菲啶、吖啶、菲咯啉、異噻唑、吩嗪、異噁唑、吩噁嗪、吩噻嗪、咪唑烷、咪唑啉、哌啶、哌嗪、二氫吲哚、鄰苯二甲醯亞胺、1,2,3,4-四氫異喹啉、4,5,6,7-四氫苯並[b]噻吩、噻唑、噻唑烷、噻吩、苯並[b]噻吩、嗎啉代、哌啶基、吡咯烷、四氫呋喃基等。
「硫羥基」是指基團-SH。
「硫代烷氧基」是指基團-S-烷基。
「取代的硫代烷氧基」是指基團-S-取代的烷基。
「硫代芳氧基」是指基團芳基-S-，其中所述芳基如上定義，包括如上定義的可任選取代的芳基。
「硫代雜芳氧基」是指基團雜芳基-S-，其中所述雜芳基如上定義，包括如上定義的可任選取代的芳基。
在式Ⅰ化合物中，Rb和Rc可以與苯環稠合形成雜芳基或雜環。以該方式稠合時得到具有下式結構的稠合的雙環
其中Rb』與上述定義相同，A為稠合的雜芳基或雜環基，這些術語定義如上，其中苯環的兩個原子包括在存在於雜芳基或雜環基的總原子數內。此類稠合的環系的實例包括如吲哚-5-基、吲哚-6-基、硫代萘次甲-5-基、硫代萘次甲-6-基、異硫代萘次甲-5-基、異硫代萘次甲-6-基、indoxazin-5-基、indoxazin-6-基、苯並噁唑-5-基、苯並噁唑-6-基、anthranil-5-基、anthranil-6-基、喹啉-6-基、喹啉-7-基、異喹啉-6-基、異喹啉-7-基、噌啉-6-基、噌啉-7-基、喹唑啉-6-基、喹唑啉-7-基、苯並呋喃-5-基、苯並呋喃-6-基、異苯並呋喃-5-基、異苯並呋喃-6-基等。
「藥學上可接受的鹽」是指式Ⅰ化合物的藥學上可接受的鹽，所述鹽衍生自種種本領域熟知的有機和無機相反離子，僅僅作為實例包括鈉、鉀、鈣、鎂、銨、四烷基銨等；而當該分子含有一個鹼性官能度時，包括有機或無機酸的鹽，諸如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、酒石酸鹽、甲磺酸鹽、乙酸鹽、馬來酸鹽、草酸鹽等。
化合物的製備通過幾種多樣化的合成途徑，而相對於化合物製備的容易性、原料的市場可得性等選定具體途徑，容易地製備上述的式Ⅰ化合物。
在一個合成方法中，首先向分子中引入胺基酸NH2CH(R2)COOH或其酯的R1基團。此後，使R1NHCH(R2)COOH或其酯與胺NH2CH(R3)C(O)Y偶合，從而得到其中X為-C(O)Y的式Ⅰ化合物。
同樣，對-C(O)Y進行還原得到-CH2OH等。
向胺基酸NH2CH(R2)COOH或其酯引入R1基團可以通過數種途徑完成。例如，使滷代乙酸與伯胺偶合可以形成如下面反應(1)所示的胺基酸
其中R1和R2如上定義，而X優選為滷代基團，如氯代或溴代。或者可以使用不是滷代的離去基團，如三氟甲磺酸酯、甲磺酸酯、對甲苯磺酸酯等。另外，在該反應中可以使用1的適當的酯。
反應(1)只涉及在提供胺基酸3的條件下，將合適的滷代乙酸衍生物1與伯芳基/雜芳基胺2偶合。該反應由如Yates等10所述，可以通過將約化學計算量的滷代乙酸1與伯芳基/雜芳基胺2在適當的惰性溶劑如水、二甲基亞碸(DMSO)中混合進行。該反應使用過量的鹼如碳酸氫鈉、氫氧化鈉等以清除反應中產生的酸。該反應優選在約25℃至約100℃進行至反應完全，一般為1至約24小時。該反應在美國專利號3,598,859中有描述，在此引入作參考。反應完成後，通過常規方法包括沉澱、層析、過濾等方法回收N-芳基/N-雜芳基胺基酸。
在反應(1)中，各種試劑(滷代乙酸1、伯芳基/雜芳基胺2和醇3)是本領域熟知的，並且每種試劑可由商業獲得。
在另一個實施方案中，通過常規N-芳基化使R1基團與丙氨酸酯(或其它適當的胺基酸酯)偶合。例如，將化學計算量或微微過量的胺基酸酯溶於適當的稀釋劑如DMSO中，與滷代芳基化合物X-R1偶合，其中X為滷代基團，如氟、氯或溴，R1與上述定義相同。該反應在過量的鹼如氫氧化鈉存在下進行，以便清除反應中產生的酸。該反應一般於15℃至約250℃進行約1至24小時完成。反應完成後，可以通過常規方法包括層析和過濾等回收N-芳基胺基酸酯。
在再一個實施方案中，可以用下面反應(2)說明的方法還原氨化適當的2-氧代羧酸酯(如丙酮酸酯)可以製備酯化的式Ⅰ胺基酸
其中R1和R2與上述定義相同。
在反應(2)中，將約化學計算量的2-氧代羧酸酯6和芳胺2在惰性稀釋劑如甲醇、乙醇等中混合，在得到胺(未示出)的條件下處理反應溶液。然後在常規的條件下，用適當的還原劑如氰基硼氫化鈉、H2/鈀炭等還原形成的胺形成N-芳基胺基酸酯5。在特別優選的實施方案中，還原劑為H2/鈀炭，可以將其摻入到最初的反應介質中，這樣可以在一罐方法中在位進行胺還原，得到N-芳基胺基酸酯5。
該反應優選在約20℃至約80℃、於1-10atm壓力下進行至反應完成，一般為1至約24小時。反應完成後，可以通過常規方法包括層析、過濾等方法回收N-芳基胺基酸酯5。
隨後進行酯5的水解得到相應的羧酸衍生物。
製備N-芳基胺基酸的另一個實施方案包括用胺基酸的胺基團對氟代苯進行芳基親核取代。
然後在本領域熟知的常規條件下，使羧酸衍生物5與式NH2CH(R3)C(O)Y(其中R3和Y與上述定義相同)偶合。此偶合可以得到式Ⅰ化合物。隨後對其進行修飾(如還原)得到另外的式Ⅰ化合物。
當Y為酯基時，可以使用常規的酯轉移方法以製備具有不同的酯基的式Ⅰ化合物。本領域已知各種用來進行酯轉移的技術，每種技術用衍生自相應的醇或硫代醇的不同的酯基取代所述酯基團，在某些情況下可以使用催化劑如異丙醇鈦(Ⅳ)以利於反應的進行。在一種技術中，首先在適當的稀釋劑如甲苯中用氫化鈉處理醇或硫代醇得到相應的醇化鈉或硫代醇化鈉，然後將其進行酯轉移。該技術的效能使其特別適於使用高沸點和/昂貴的醇。
在另一個酯轉移技術中，將待酯轉移的酯置於大量過量的進行酯轉移的醇或硫代醇中。然後加入催化量的氫化鈉，在常規條件下該反應快速進行得到所需的酯轉移產物。因為該方案需要使用大量過量的醇或硫代醇，因此當所述醇比較便宜時該方法特別有用。
酯轉移提供了一個在上述式Ⅰ化合物上得到不同的酯取代基的多種方法。在所有這些情況下，用於進行酯轉移的醇和硫代醇均是本領域熟知的，大多數可由商業獲得。
製備本發明酯的其它方法包括如首先將酯水解為游離酸、接著在鹼如碳酸鉀存在下用滷代烷基進行O-烷基化。
製備式Ⅰ化合物的其它方法在下面實施例中提供。
其中X為-CR4R4Y』的化合物可以通過在肽偶合化學中熟知的標準的偶合條件下，使如氨基醇H2NCHR3CR4R4OH與R1NHCHR2C(O)OH偶合而容易地製備，該反應使用熟知的偶合試劑如碳二亞胺並可以使用或不使用熟知的輔助劑如N-羥基琥珀醯亞胺、1-羥基苯並三唑等。如果需要，在Y』上可以使用保護基團以在偶合中保護該基團。當Y』為氨基時特別需要適當的保護基團。
該反應一般在惰性非質子傳遞溶劑如二甲基甲醯胺、二氯甲烷、氯仿、乙腈、四氫呋喃中進行。反應完成後，可以選擇性去除Y』上的保護基團得到所需化合物。
當Y』為-OH或-SH時，用熟知的化學方法進行這些基團的合成後轉化以得到相應的酯(即-OC(OR5)、二硫化物(即-SSR5)和-SSC(O)R5基團。例如，酯合成反應僅需要在適當的酯化條件下用適當的酸如乙酸(R7=甲基)、醯滷(如醯氯)或酸酐反應。
當一個R4基團為氫時，對-CHR4OH基團進行合成後氧化得到酮衍生物。或者，通過使適當的氨基酮鹽酸鹽與胺基酸的末端羧基偶合可以製備此類酮化合物。
在這些合成方法中，原料(如丙氨酸)可能含有手性中心，因此當使用外消旋的原料時，產生的產物為非對映體或R,S對映體的混合物。或者，可以使用原料的手性異構體，並且如果使用的反應方案不使該原料外消旋化，那麼可以獲得手性產物。此類反應方案可以包括手性中心在合成過程中轉化。
因此，除非另外說明，否則本發明的產物為非對映異構體(如果存在兩個或多個手性中心)或R,S對映體(如果存在一個手性中心)的混合物。然而最好是，當需要手性產物時，那麼該手性產物相應於L-胺基酸衍生物。或者，手性產物可以通過純化技術獲得，所述技術從R,S混合物中分離對映體，以提供一種或另一種立體異構體。這類技術是本領域眾所周知的。
藥用製劑當用作藥劑時，式Ⅰ化合物通常以藥用組合物的形式給予。這些化合物可以通過各種途徑給予，包括口服、直腸、經皮、皮下、靜脈、肌內和鼻內途徑。這些化合物作為注射組合物和口服組合物均是有效的。這類化合物以製藥領域熟知的方式製備，並包含至少一種活性化合物。
本發明也包括藥用組合物，所述藥用組合物含有作為活性組分的一種或多種與藥學上可接受的載體結合的上述式Ⅰ化合物。在製備本發明的組合物中，通常將所述活性組分與一種賦形劑混合，用一種賦形劑稀釋或用膠囊、小藥囊、紙或其它容器形式的載體包裹。當該賦形劑用作稀釋劑時，它可以是固體、半固體或液體材料，它可以用作該活性組分的溶媒、載體或介質。因此，所述組合物可以為片劑、丸劑、粉劑、錠劑、小藥囊、扁囊劑、酏劑、懸浮劑、乳劑、溶液劑、糖漿劑、氣溶膠(作為固體或在液體介質中)、含有例如多至10％(重量)的活性化合物軟膏劑、軟和硬明膠膠囊劑、栓劑、無菌注射液和無菌包裝的粉劑。
在製劑製備中，在與其它組分混合之前可能需要研磨該活性化合物，以提供合適的顆粒大小。如果該活性化合物是基本上不溶的，則通常將其研磨成小於200目的顆粒大小。如果該活性化合物基本上是水溶性的，則通常通過研磨調節顆粒大小，以在製劑中提供基本均一的分布，例如大約40目。
合適賦形劑的某些實例包括乳糖、葡萄糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、澱粉、阿拉伯膠、磷酸鈣、藻酸鈉、西黃蓍膠、明膠、矽酸鈣、微晶纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素、無菌水、糖漿和甲基纖維素。所述製劑還可以包含潤滑劑，諸如滑石粉、硬脂酸鎂和礦物油；潤溼劑；乳化劑和懸浮劑；防腐劑，諸如苯甲酸甲酯和羥基苯甲酸丙酯；甜味劑和添味劑。可以配製本發明化合物，以便在採用本領域已知的方法給予該患者後，提供該活性組分的速釋、緩釋或延釋。
所述組合物最好以單位劑型配製，每個劑量含有約5-約100mg、更常見為約10-約30mg的活性組分。術語「單位劑型」是指適合作為單一劑量用於人類受治療者和其它哺乳動物的物理上分離的單位。每個單位含有計算產生所需治療效果的預定量的活性物質和合適的藥用賦形劑。最好是，以不高於藥用組合物的大約20％(重量)使用以上式Ⅰ化合物，更優選不高於大約15％(重量)，餘量為藥用惰性載體。
該活性化合物在很寬的劑量範圍內有效，通常以藥用有效量給予。然而，應該理解，該化合物的實際給予量將由醫師根據包括以下的相關因素決定待治療的疾病、選擇的給藥途徑、實際給予的化合物、個體患者的年齡、體重和反應、該患者症狀的嚴重性等。
在製備諸如片劑的固體組合物時，將主要的活性組分與藥用賦形劑混合，形成含有本發明化合物的均一混合物的固體預配製組合物。當稱這些預配製組合物是均一的時，意味著該活性組分均勻分散在該組合物中，使得該組合物可以容易地亞分為同等有效單位劑型，諸如片劑、丸劑和膠囊。該固體預配製物然後亞分為上述類型的單位劑型，含有例如0.1至大約500mg的本發明活性組分。
可以對本發明片劑或丸劑包衣，或者進行混合，以提供獲得延長作用優點的劑型。例如，該片劑或丸劑可以包含一個內部劑量和外部劑量組分，後者為前者上的包膜形式。這兩個組分可以由用作在胃中抗崩解的腸衣層分離，並使得內部組分完整通過進入十二指腸，或延緩釋放。可以使用多種材料用於這類腸衣層或包衣，這類材料包括多種聚合酸和聚合酸的混合物，諸如蟲膠、鯨蠟醇和乙酸纖維素。
可以加入本發明的新組合物中用於口服或注射給藥的液體形式，包括水溶液、適當矯味糖漿、水性或油性懸浮液和用諸如玉米油、棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油之類的食用油矯味的乳劑、以及酏劑和相似的藥用載體。
用於吸入或吹入的組合物包括在藥學上可接受的水性或無機溶劑、或其混合物中的溶液和懸浮液以及粉劑。液體或固體組合物可以含有上文所述的合適的藥學上可接受的賦形劑。最好是通過口服或鼻呼吸途徑給予所述組合物，以用於局部或全身性作用。在優選的藥學上可接受的溶劑中的組合物可以利用惰性氣體進行霧化。霧化溶液可以直接從霧化裝置中吸入，或可以將該霧化裝置連接至面罩(face masks tent)或間歇式正壓呼吸機。最好以適當方式從釋放該製劑的裝置經口或經鼻給予溶液、懸浮液或散劑組合物。
以下製劑實施例說明本發明的藥用組合物。
製劑實施例1製備含有以下組分的硬明膠膠囊組分 量(mg/膠囊)活性組分 30.0澱粉 305.0硬脂酸鎂 5.0將以上組分混合，並以340mg的量填充到硬明膠膠囊中。
製劑實施例2採用以下組分製備片劑組分 量(mg/片)活性組分 25.0微晶纖維素200.0膠體二氧化矽 10.0硬脂酸5.0將以上組分混合，並壓制形成片劑，每片重240mg。
製劑實施例3製備含有以下組分的乾粉吸入製劑組分重量％活性組分 5乳糖 95
將該活性組分與乳糖混合，並將混合物加入乾粉吸入用具中。
製劑實施例4如下製備片劑，每片含有30mg活性組分組分量(mg/片)活性組分 30.0mg澱粉 45.0mg微晶纖維素35.0mg聚乙烯吡咯烷酮 4.0mg(作為無菌水中的10％溶液)羧甲基澱粉鈉 4.5mg硬脂酸鎂 0.5mg滑石粉1.0mg總計 120mg使活性組分、澱粉和纖維素通過第20目美國篩並充分混合。將聚乙烯吡咯烷酮溶液與產生粉劑混合，然後將其通過第16目美國篩。如此產生的顆粒於50℃-60℃乾燥，並通過第16目美國篩。然後，將預先通過第30目美國篩的羧甲基澱粉鈉、硬脂酸鎂和滑石粉加至顆粒中，混合後在壓片機壓制，產生每片重120 mg的片劑。
製劑實施例5如下製備每片含有40 mg藥物的膠囊組分量(mg/膠囊)活性組分 40.0mg
澱粉 109.0mg硬脂酸鎂 1.0mg總計 150.0mg將活性組分、澱粉和硬脂酸鎂混合，通過第20目美國篩，並以150mg的量填充到硬明膠膠囊中。
製劑實施例6如下製備每個含有25mg活性組分的栓劑組分 量活性組分 25mg飽和脂肪酸甘油酯至 2,000mg使活性組分通過第60目美國篩，懸浮於預先用最小的所需熱量熔化的飽和脂肪酸甘油酯中。然後將混合物注入2.0g標示量的栓劑模中，讓其冷卻。
製劑實施例7如下製備每5.0ml含有50mg藥物的懸浮劑組分 量活性組分 50.0mg黃原膠 4.0mg羧甲基纖維素鈉(11％)微晶纖維素(89％) 50.0mg蔗糖 1.75g苯甲酸鈉 10.0mg矯味劑和著色劑 適量純淨水至 5.0ml
將活性組分、蔗糖和黃原膠混合，通過第10目美國篩，然後與預先製備的水中的微晶纖維素和羧甲基纖維素鈉溶液混合。苯甲酸鈉、矯味劑和著色劑用一些水稀釋，邊攪拌邊加入。然後加入足夠的水，產生所需體積。
製劑實施例8組分 量(mg/膠囊)活性組分 15.0mg澱粉 407.0mg硬脂酸鎂 3.0mg總計 425.0mg將活性組分、澱粉和硬脂酸鎂混合，通過第20目美國篩，並以425.0mg的量填充到硬明膠膠囊中。
製劑實施例9如下製備皮下用製劑組分 量活性組分 5.0mg玉米油 1ml製劑實施例10如下製備局部用製劑組分 量活性組分 1-10g乳化蠟 30g液體石蠟 20g
白軟石蠟 至100g將白軟石蠟加熱直至熔化。加入液體石蠟和乳化蠟並攪拌直至溶解。加入活性組分並繼續攪拌，直至分散。然後冷卻混合物直至成為固體。
用於本發明方法中的另一優選的製劑採用經皮傳遞裝置(「貼劑」)。可以用這類透皮貼劑來以控制量連續或不連續輸注提供本發明化合物。傳遞藥物的透皮貼劑的構建和使用是本領域眾所周知的。參見例如1991年6月11日頒發的美國專利5,023,252，該專利通過引用結合到本文中。可以構建這類貼劑用於連續、脈衝或按要求釋放藥物。
通常需要或必需直接或者間接地將該藥用組合物引入大腦。直接技術通常涉及將藥物傳遞插管置於宿主腦室，以繞過血腦屏障。在美國專利5,011,472中描述了用來將生物學因子輸送到個體特定解剖區域的一個這種可植入傳遞系統，該專利通過引用結合到本文中。
一般優選使用的間接技術涉及配製所述組合物，即通過將親水性藥物轉化為脂溶性藥物，以提供藥物潛伏化。一般通過保護該藥物上存在的羥基、羰基、硫酸酯和伯胺基團，以賦予該藥物更強的脂溶性，並更易通過血腦屏障轉運，而達到潛伏化。或者，可以通過動脈內輸注可以瞬時打開血腦屏障的高滲溶液，以增強親水藥物的釋放。
可以在Remington’s pharmaceutical Sciences,Mace PublishingCompany,Philadelphia,PA，第17版(1985)中發現其它適用於本發明的製劑。用途本發明的化合物和藥用組合物可用來抑制β-澱粉樣多肽的釋放和/或其合成，並因此在治療包括人類的哺乳動物阿爾茨海默氏病中具有實用性。
如上所述，本文所述的化合物適用於種種上述藥物傳遞系統。另外，為了增加所給予化合物體內的半衰期，可以將所述化合物制為膠囊、引入脂質體腔中、製備為膠體，或可以採用其它常規技術以延長所述化合物的血漿半衰期。可利用種種方法，製備脂質體，如在例如Szoka等的美國專利4,235,871、4,501,728和4,837,028中描述的，這些專利均通過引用結合到本文中。
給予患者的化合物的量隨以下因素而變化待給予的化合物、諸如預防或治療的給藥目的、患者的狀態、給藥方式等。在治療應用中，將組合物給予已經患有AD的患者，給予量足以至少部分抑制該疾病及其併發症症狀的進一步發作。適於完成這一目的的量定義為「治療有效劑量」。對於該用途有效的量將取決於主治醫師根據一些因素的判斷，所述因素包括諸如該患者AD的程度或嚴重性、該患者的年齡、體重和一般狀況等。當作為治療劑時，最好以大約0.1-約500mg/kg/天的劑量範圍給予本文所述化合物。
在預防性應用中，將化合物給予有發展為AD(例如由遺傳篩選或家族特性確定)風險的患者，其給予量足以抑制該疾病症狀的發作。適於完成該目的的量定義為「預防有效劑量」。對於該用途的有效量將取決於主治醫師根據一些因素的判斷，所述因素諸如該患者年齡、體重和一般狀況等。作為預防藥物使用時，最好以大約0.1-約500mg/kg/天的劑量範圍給予本文所述化合物。
如上所述，給予患者的化合物為上述藥用組合物形式。這些組合物可以通過常規滅菌技術滅菌，或可以過濾除菌。當使用水溶液時，可以包裝使用，也可以凍幹使用，凍幹製劑在給藥前與無菌水性溶媒混合。所述化合物製劑的pH通常為3-11，更優選為5-9，最優選為7-8。應該理解，使用某些上述賦形劑、載體或穩定劑將導致形成藥用鹽。
提供以下合成實施例和生物學實施例以說明本發明，這些實施例不應解釋為以任何方式限制本發明的範圍。除非另外陳述，否則所有溫度均為攝氏度。
實施例在以下實施例中，以下縮寫具有以下含義。如果一個縮寫沒有定義，則它具有普遍接受的含義。
BOC =叔丁氧基羰基bd=寬雙峰bs=寬單峰Cbz =羰基苄氧基cc=立方釐米CDI =1,1』-羰基二咪唑d =雙峰dd=雙雙峰DMF =二甲基甲醯胺DMSO =二甲基亞碸EDC =1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽EDTA =乙二胺四乙酸eq. =當量ether =乙醚g =克L =升m =多峰M =摩爾濃度max =最大mg=毫克min =分鐘
mL =毫升mM =毫摩爾濃度mmol =毫摩爾N=正常ng =納克nm =納米OD =光密度pg =皮克pM =皮摩爾濃度psi =磅/平方英寸q=四峰quint=五重峰rpm =轉/分鐘rt =室溫s=單峰sept =七峰t=三峰THF =四氫呋喃tlc =薄層層析μg =微克μL =微升UV =紫外w/v =重量∶體積另外，術語「Aldrich」是指用於以下方法中的化合物或試劑購自Aldrich Chemical Company,Inc.,1001 West Saint Paul Avenue,Milwaukee,WI 53233 USA；術語「Bachem」是指該化合物或試劑購自Bachem Biosciences Inc.,3700 Horizon Drive,Renaissance atGulph Mills,King of Prussia,PA 19406 USA；術語「Fluka」是指所述化合物或試劑購自Fluka Chemical Corp.,980 South 2nd Street,Ronkonkoma NY 11779 USA；術語「Lancaster」是指該化合物或試劑購自Lancaster Synmesis Inc.,P.O.Box 100 Windham,NH 03087USA；術語「Sigma」是指該化合物或試劑購自Sigma,P.O.Box14508,St Louis MO 63178 USA；術語「Sennchem」是指該化合物或試劑購自Senn Chemicals AG,P.O.Box 267,CH-9157 Dielsdorf,Switzerland。
在以上實施例中，所有的溫度均為攝氏度(除非另外陳述)，通過以下通用方法製備指定的混合物。
通用方法A還原胺化向在氫化燒瓶中的芳胺的乙醇溶液中加入1當量的2-氧代羧酸酯(如丙酮酸酯)，接著加入10％鈀炭(芳胺重量的25％)。於20psi氫氣壓力下，將該反應物在Parr震動器上氫化至tlc檢測反應完成(30分鐘至16小時)。然後將該反應混合物通過硅藻土545(購自AldrichChemical Company,Inc.)墊過濾，並在旋轉蒸發儀上蒸發溶劑。將粗品產物通過層析進一步純化。
通用方法B丙氨酸的H-雜芳基化於室溫下，將1.1當量的L-丙氨酸和2當量的氫氧化鈉的DMSO溶液攪拌1小時，然後加入1當量的2-氯代苯並三唑。將該混合物加熱至100℃4小時，然後冷卻至室溫並傾至冰中。將產生的水溶液的pH調至約2，過濾取出沉澱的固體。將該固體溶於1N氫氧化鈉中，通過硅藻土545墊過濾。將濾液的pH調至約2，過濾取出白色沉澱，用水洗滌得到產物。
通用方法C酯水解為游離酸通過常規方法進行酯水解為游離酸的反應。下面為兩個常規脫酯化方法的實施例。
向羧酸酯化合物(通過如通用方法A的還原胺化製備得到的N-芳基胺基酸酯)的1∶1甲醇/水的混合液中加入2-5當量的碳酸鉀。將該混合物加熱至50℃0.5-1.5小時至tlc顯示反應完成。將該反應物冷卻至室溫，在旋轉蒸發儀上去除甲醇。將剩餘的水溶液的pH調至約2，加入乙酸乙酯以萃取產物。然後用飽和的氯化鈉洗滌有機相，經硫酸鎂乾燥。在旋轉蒸發儀上去除該溶液的溶劑得到產物。
將上述胺基酸酯溶於二氧六環/水(4∶1)中，向其中加入溶於水中的氫氧化鋰(約2當量)，使加入後總溶劑為約2∶1的二氧六環∶水。攪拌該反應混合物至反應完成，減壓去除二氧六環。用乙酸乙酯稀釋殘留物，分離各層，將水層鹼化至pH為2。用乙酸乙酯回萃取水層，經硫酸鈉乾燥合併的有機物，過濾後減壓去除溶劑。殘留物經常規方法純化(如重結晶)。
下面說明後一個實施例。將3-硝基苯基乙醯基丙氨酸的甲酯9.27g(0.0348mol)溶於60ml二氧六環和15ml水中，加入溶於15ml水中的氫氧化鋰(3.06g,0.0731mol)。攪拌4小時後，減壓去除二氧六環，用乙酸乙酯稀釋殘留物，分離各層，酸化水層至pH為2。用乙酸乙酯(4×100ml)回萃取水層，經硫酸鈉乾燥合併的有機物，過濾後減壓去除溶劑。使殘留物從乙酸乙酯/異辛烷中重結晶，得到7.5g(85％)。C11H12N2O5計算值C=52.38,H=4.80,N=11.11。分析實測值，C=52.54,H=4.85,N=11.08。[α]23=-29.9,589nm。
通用方法D
第一種EDC偶合方法於0℃，向所需酸和氨基酯/醯胺的二氯甲烷的1∶1的混合液中加入1.5當量的三乙胺，接著加入2.0當量的羥基苯並三唑一水合物，然後加入1.25當量的乙基-3-(3-二甲基氨基)-丙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)。於室溫下將該反應物攪拌過夜，然後轉移至分液漏鬥中，用水、飽和的碳酸氫鈉水溶液、1N鹽酸和飽和的氯化鈉水溶液洗滌，然後經硫酸鎂乾燥。在旋轉蒸發儀上蒸發去除該溶液的溶劑得到粗品產物。
通用方法E第二種EDC偶合方法將所述羧酸衍生物溶於二氯甲烷中。順序加入胺基酸酯/醯胺(1eq.)、N-甲基嗎啉(5eq.)和羥基苯並三唑一水合物(1.2eq.)。在圓底燒瓶底部放置冷卻浴使該溶液至約0℃。此時，加入1.2eq.的1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)。將該溶液攪拌過夜，在N2下達到室溫。通過用飽和Na2CO3水溶液、0.1M檸檬酸和鹽水洗滌有機相來處理反應混合物，然後經Na2SO4乾燥。然後除去溶劑得到粗品產物。通過在合適溶劑中的快速層析獲得純品產物。
通用方法FBOC和叔丁酯的去除方法將BOC或叔丁酯化合物加至二氯甲烷和三氟乙酸的1∶1的混合液中，並攪拌至tlc顯示轉化完成，一般為2小時。然後將該溶液蒸發至幹，將殘留物溶於乙酸乙酯中。若為BOC保護的化合物，則用稀鹽酸洗滌該溶液。將水相的pH調至鹼性，然後用乙酸乙酯萃取。若為叔丁酯化合物，則用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗滌該溶液。然後將水相的pH調至2，然後用乙酸乙酯萃取。然後不論在何種情況下均用飽和的氯化鈉水溶液洗滌有機相，經硫酸鎂乾燥。在旋轉蒸發儀上去除該溶液的溶劑得到產物。
通用方法GN-烷基化向3-氨基喹啉的二氯甲烷溶液中加入1.1當量的三乙胺，接著加入對硝基苯磺醯氯(nosyl)的二氯甲烷溶液。於室溫下將該反應物攪拌5小時，然後通過過濾分離二磺醯化的氨基喹啉，用乙酸乙酯洗滌。接著將該物質加至二氧六環和1N氫氧化鈉的1∶1的混合液中，將該溶液加熱至60℃，此時所有的固體均已溶解。將該反應物冷卻至室溫，然後將pH調至約4。通過過濾分離沉澱的一磺醯化的氨基喹啉，用水洗滌。然後將該化合物的THF溶液加至-78℃的氫化鈉的THF懸浮液中，然後加入2-溴代丙酸乙酯。將該反應物溫熱至室溫，然後回流4天。在旋轉蒸發儀上去除該溶液中的溶劑，層析獲得烷基化磺醯化的氨基喹啉。然後將該產物溶於DMF中，加入3當量的碳酸鉀，隨後加入1.2當量的苯硫酚。於室溫下將該反應物攪拌過夜。然後用水和乙醚驟冷該反應物，用飽和的碳酸氫鈉水溶液和飽和的氯化鈉水溶液洗滌有機相，然後經硫酸鎂乾燥。在旋轉蒸發儀上蒸發去除該溶液的溶劑得到粗品產物，通過層析將其進一步純化。
通用方法H酯/醯胺交換向3當量的所需胺的1,2-二氯乙烷的溶液中加入5.2當量的三甲基鋁，其中所述加入通過注射器在溶液表面之下進行。於室溫下攪拌30分鐘後，加入溶於1,2-二氯乙烷的所需的酯溶液。回流該反應物至tlc顯示轉化完成，一般為3小時。然後將該反應物冷卻至0℃，用10％鹽酸(注由於在加入過程中會產生泡沫，所以該酸應緩慢加入)驟冷。對於不溶於含水酸的產物，則將所述混合物轉移至分液漏鬥中，分離各層。用乙酸乙酯洗滌水相，用飽和的氯化鈉水溶液洗滌有機相，經硫酸鎂乾燥，減壓濃縮得到粗品產物。
對於可以溶於酸的水溶液的產物，則在反應物驟冷後，在減壓下將反應物的體積減小至約為原體積的1/3。向產生的溶液中加入20％酒石酸鉀鈉(Rochelle氏鹽)水溶液和乙酸乙酯。將該溶液的pH調至約13，將鋁鹽溶於水溶液中。分離有機相，用乙酸乙酯萃取水相。用飽和的氯化鈉水溶液洗滌合併的有機溶液，經硫酸鎂乾燥，減壓濃縮得到粗品產物。
通用方法I酯還原為醇向0℃的原料酯的無水THF溶液中加入1.0當量的硼氫化鋰的THF溶液。於室溫下將該反應物攪拌過夜，然後用水驟冷。在旋轉蒸發儀上去除THF，加入乙酸乙酯。分離各相。用飽和的氯化鈉水溶液洗滌有機相，經硫酸鎂乾燥，減壓濃縮得到產物。
通用方法J三氟甲磺酸酯的置換向0℃的R-(+)-乳酸異丁酯的二氯甲烷溶液中加入1.1當量的三氟甲磺酸酐。於室溫下攪拌20分鐘後，加入1.1當量2,6-二甲基吡啶，繼續攪拌10分鐘。然後於0℃將該溶液中轉移至含有1當量芳胺和1當量二異丙基乙胺的二氯甲烷或硝基甲烷的燒瓶中。將該反應物保持於室溫過夜，然後在旋轉蒸發儀上去除溶劑。將殘留物溶於乙酸乙酯中，用5％檸檬酸和飽和的氯化鈉水溶液依次洗滌，在旋轉蒸發儀上去除該溶液的溶劑得到粗品產物，然後經層析將其進一步純化。
通用方法K
由胺基酸形成甲酯將胺基酸(胺基酸或胺基酸鹽酸鹽)懸浮於甲醇中，並冷至0℃。向該溶液中通入HCl氣體5分鐘。使反應物溫至室溫，然後攪拌4小時。隨後減壓除去溶劑，得到所需的胺基酸甲酯鹽酸鹽。通常不用進一步純化而使用該產物。
實施例AN-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸的合成根據美國專利號3,598,859(在此引入其全部公開作參考)所述的方法，製備N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸。具體地講，向3,4-二氯苯胺(1當量，Aldrich)的異丙醇(每摩爾3,4-二氯苯胺約500ml)溶液中加入水(每ml異丙醇約0.06ml)和2-氯丙酸(2當量，Aldrich)。將該混合物溫熱至40℃，然後連續分次加入碳酸氫鈉(0.25當量)，隨後回流4-5天。冷卻後，將該混合物傾至水中，過濾去除未反應的3,4-二氯苯胺。用濃鹽酸將濾液酸化至pH為3-4，過濾產生的沉澱，洗滌並乾燥得到目標化合物，m.p.=148-149℃。
或者，根據上述通用方法，用3,4-二氯苯胺(Aldrich)和丙酮酸乙酯(Aldrich)，製備為油狀物的N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸乙酯。用矽膠(Rf=0.4，用25％乙酸乙酯/己烷展開)監測該反應，經製備性板層析純化(矽膠，用25％乙酸乙酯/己烷作為展開劑)。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.2(d,1 H)；6.7(d,1H)；6.4(dd,1H)；4.30(bs,1H)；4.2(q,2H)；4.1(q,1H)；1.5(d,3H)；1.3(t,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175；146.7；133；131；121；114.9；112.6；72.0；52.4；28.3；19.5。
C11H13Cl2NO2(MW=262.14；質譜儀(MH+)263。
通過如通用方法C水解該酯得到目標化合物。
實施例BN-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸的合成根據美國專利號3,598,859(或上述實施例A)的方法，用3,5-二氯苯胺(Aldrich)和2-氯丙酸(Aldrich)製備N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸。
實施例CN-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨酸的合成根據美國專利號3,598,859(或上述實施例A)的方法，用3,5-二氟苯胺(Aldrich)和2-氯丙酸(Aldrich)製備N-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨酸。
實施例DL-纈氨酸N,N-二甲基醯胺的合成向2.51g(10mmol)的Cbz-L-纈氨酸(Bachem)的20ml DMF攪拌溶液中加入1.46g(9mmol)CDI，將該混合物攪拌50分鐘。向該混合物中加入6ml(12mmol)二甲基胺(Aldrich)的5ml THF溶液，將該反應混合物攪拌18小時。將混合物溶於100ml乙酸乙酯中，用10％鹽酸(3×40ml)、10ml鹽水和20％碳酸鉀(2×50ml)洗滌，經硫酸鎂乾燥。過濾該混合物並濃縮，得到Cbz-L-纈氨酸N,N-二甲基醯胺，在標準條件下，用10％Pd/C作為催化劑將其氫化，以去除Cbz基團並得到為油狀物的目標化合物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=3.47(d,J=5.4Hz,1H),3.03(s,3H),2.96(s,3H),1.83(m,1H),1.60(s,2H),0.95(d,J=6.8Hz,3H),0.89(d,J=6.8Hz,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175.1,56.2,37.0,35.7,32.0,19.9,16.8。
實施例EL-纈氨酸N-甲基醯胺的合成按照上述實施例D所述的方法，但是用甲胺代替二甲基胺製備目標化合物。該目標化合物為油狀物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.27(bs,1H),3.20(d,J=3.8Hz,1H),2.79(d,J=5.0Hz,3H),2.27(m,1H),1.40(bs,2H),0.96(d,J=7.1Hz,3H),0.79(d,J=6.8Hz,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175.0,60.1,30.7,25.6,19.7,15.9。
實施例FBOC-正亮氨醯胺的合成於0℃，向3.47g(15mmol)BOC-正亮氨酸(Bachem)、3.44g(22.5mmol)1-羥基苯並三唑一水合物和50ml二氯甲烷的攪拌混合物中加入3.45g(1.2mmol)EDC。於0℃將產生的混合物攪拌1小時，然後向該混合物中通入氨氣10分鐘。使冷卻浴溫熱至室溫，將該混合物攪拌18小時。將混合物蒸發至幹，用20％碳酸鈉研磨。過濾收集產生的固體，用水洗滌得到2.69g(11.7mmol,78％)目標化合物。
實施例GN-[3,5-二(三氟甲基)苯基]-L-丙氨酸的合成步驟A根據以上通用方法J，採用3,5-二(三氟甲基)苯胺(Aldrich)和R-(+)-乳酸異丁酯(Aldrich)、N-[3,5-二(三氟甲基)苯基]-L-丙氨酸異丁酯製備目標化合物，為油狀物。通過tlc在矽膠(Rf=0.38,10％乙酸乙酯/己烷展開)上監測反應。經製備性板薄層層析純化，用10％乙酸乙酯/己烷作為展開劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.13(s,1H),6.91(s,2H),4.97(d,J=8.24Hz,1H),4.18(m,1H),3.93(d,J=6.59Hz,2H),1.93(七峰，J=6.71Hz,1H),1.49(d,J=7.02Hz,3H),0.89(d,J=6.59Hz,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.4,147.9,133.6,133.2,132.7,132.3,129.4,125.8,122.2,1 1 8.6,112.81,112.76,111.42,111.37,111.32,111.27,111.22,72.2,52.0,32.1,28.24,28.17,23.2,19.5,19.3,19.2,18.9,14.6。
C15H17F6NO2(MW=357.30)；質譜MH+358。
步驟B然後根據通用方法C，在THF中用氫氧化鋰水解N-[3,5-二(三氟甲基)苯基-L-丙氨酸異丁酯。
實施例HN-(3,5-二甲氧基苯基)-D,L-丙氨酸的合成根據美國專利號3,598,859(或上述實施例A)的方法，用3,5-二甲氧基苯胺(Aldrich)和2-氯丙酸(Aldrich)製備目標化合物。
實施例IN-(3,4-二氯苯基)甘氨酸的合成根據美國專利號3,598,859的方法，用3,4-二氯苯胺(Aldrich)和2-氯乙酸(Aldrich)製備N-(3,4-二氯苯基)甘氨酸。
實施例JN-(3,5-二氯苯基)-D,L-苯基甘氨酸的合成將3,5-二氯苯胺(leq,Aldrich)和α-溴代苯基乙酸甲酯(leq,Aldrich)在乙醇中與N-甲基嗎啉(Aldrich)回流3天。經標準處理後，使殘留物從乙酸乙酯/己烷/乙醚/水中重結晶，得到N-(3,5-二氯苯基)-D,L-苯基甘氨酸甲酯。然後在甲醇中用1M氫氧化鈉/水水解該甲酯得到目標化合物。
實施例1N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基-L-纈氨酸甲酯的合成按照以上通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，採用L-纈氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)丙氨酸(得自上述實施例A)，製備目標化合物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.20(m,1H),6.92-7.03(m,1H),6.69(m,1H),6.44(m,1H),4.50(m,1H),4.19(m,1H),3.78(m,1H),3.71(s,1.5H),3.65(s,1.5H),2.12(m,1H),1.50(d,J=7.0Hz,3H),0.80-0.92(m,4.5H),0.71(d,J=6.8Hz,1.5H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.4,173.0,172.2,171.8,146.0,145.8,132.9,132.8,130.7,130.6,121.7,115.1,114.8,113.5,113.1,56.9,56.6,55.1,54.8,52.2,31.1,31.0,30.9,19.6,19.4,17.7,17.4。
實施例2N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-纈氨酸N-異丁醯胺的合成按照以上通用方法H，採用N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-纈氨酸甲酯(得自上述實施例1)和異丁胺(Aldrich)，製備為油狀物的目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.3,10％甲醇/二氯甲烷作為展開劑)。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.2(d,1H),7.0(m,1H),6.7(m,1H),6.4(m,1H),4.6(m,1H),4.1(m,1H),3.8(m,3H),3.6(s,3H),1.9(m,2H),1.4(d,3H),1.1(m,6H),0.9(m,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.8,173.4,172.9,146.6,133.6,133.4,131.3,122.5,122.4,115.8,113.8,56.9,55.7,38.2,25.6,20,16,12.1。
C18H27N3O2Cl2(MW=388.3)，質譜(MH+)389。
實施例3N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-蘇氨酸甲酯的合成按照以上通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，採用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)和L-蘇氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，製備為油狀物的目標化合物。經矽膠層析純化反應產物，用50％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=1.06(d,J=6.4)和1.17(d,J=6.3；2∶1比例的3H總)，1.53(d,J=7,3H),2.31(d,J=5.6)和2.58(d,J=4.7；1H,2∶1的比例)，3.68(s)和3.75(s)(3H總，1∶2的比例)，3.8-3.9(m,1H),4.15-4.25(m,1H),4.3-4.25(m,1H),4.3-4.45(m,1H),4.5-4.6(m,1H),6.4-6.5(m,1H),6.65-6.7(m,1H),7.4-7.55(m,2H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=19.96,20.23,20.39,20.49,53.23,53.28,55.35,55.59,57.5,68.13,68.21,113.72,114.20,115.42,115.60,122.26,122.35,1 31.22,131.33,133.41,133.55,146.47,146.6,171.63,171.80,174.69,174.86。
C14H18N2OXCl2(MW=349.22)；質譜(MH+)349。
實施例4N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基-L-纈氨酸乙酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)和L-纈氨酸乙酯鹽酸鹽，製備為油狀物的目標化合物。經矽膠層析純化反應產物，用35％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.7-1.0(d的重疊基團，J=7,6H),1.19和1.27(成對的t,J=7,3H),1.5(d,J=7,3H),2.05-2.2(m,1H),3.7-3.9(m,1H),4.0-4.3(m,3H),4.5-4.6(m,1H),6.4-6.5(m,1H),6.5-6.6(m,1H),6.9-7.1(M,1H),7.2-7.3(M,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=14.65,14.77,17.96,18.25,19.56,20.06,20.31,31.77,31.81,55.50,55.73,57.22,57.46,61.88,61.94,113.76,114.01,115.48,115.76,122.40,122.46,131.30,131.33,133.48,133.61,146.41,146.60,171.86,172.36,173.54,173.84。
C16H22N2O3Cl2(MW=361.27)；質譜(MH+)361。
實施例5N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基-L-纈氨酸叔丁酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)和L-纈氨酸叔丁酯鹽酸鹽(Sigma)，製備為油狀物的目標化合物。經矽膠層析純化反應產物，用25％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.7-1.0(d的重疊基團，J=7,6H),1.36(s)和1.45(s)(9H),1.5-1.54(2 d,J=7,3H),2.0-2.2(m,1H),3.7-3.85(m,1H),4.1-4.2(m,1H),4.3-4.5(m,1H),6.4-6.5(m,1H),6.7(s,1H),6.9-7.1(m,1H),7.15-7.3(m,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=17.84,18.25,19.50,20.06,20.29,28.42,28.62,31.96,32.16,55.45,55.65,57.53,57.92,82.72,113.75,114.00,115.43,115.63,122.26,122.32,131.29,131.50,146.46,146.65,170.88,171.48,173.39,173.65。
C18H26N2O3Cl2(MW=389.33)；質譜(MH+)389。
實施例6N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基-L-纈氨醯胺的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)和L-纈氨醯胺鹽酸鹽(Sigma)，製備為固體的目標化合物，熔點為156-158℃。經矽膠層析純化反應產物，用90∶10∶1的二氯甲烷∶甲醇∶氫氧化銨洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=0.6-0.9(m,6H),1.2-1.4(重疊的d,3H),1.8-2.0(m,1H),3.9-4.2(m,2H),6.3-6.4(m,1H),6.35-6.4(m,1H),6.7-6.8(m,1H),7.0-7.1 5(m,1H),7.2-7.3(m,1H),7.4(bs,1H),7.8(d,J=10)和8.0(d,J=10)(總1H的比例為3∶2)。
13C-nmr(DMSO-d6):δ=17.8,18.2,19.00,19.25,19.6,19.7,31.36,31.20,51.9,52.7,57.11,57.4,113.46,113.58,113.67,113.85,117.20,117.45,130.64,130.76,131.53,131.56,148.25,148.45,173.06,173.11,173.38,173.51。
C14H19N3O2Cl2(MW=331)；質譜(MH+)332。
實施例7N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨酸N-(1-羥基-3-甲基-2-丁基)醯胺的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)和纈氨醇(Sigma)，製備為油狀物的目標化合物。經矽膠層析純化反應產物，用45∶55的乙酸乙酯/己烷和90∶10∶1的二氯甲烷∶甲醇∶氫氧化銨洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=0.86(d,J=7,3H),0.91(d,J=7,3H),1.50(d,J=7,3H),1,8-2.0(m,1H),2.6(bs,1H),3.5-3.8(m,4H),4.1(bs,1H),6.45(dd,J=2.8,8.7,1H),6.7(d,J=2.8,1H),6.8(bd,1H),7.2(d,J=5,1H)。
13C-nmr(DMSO-d6):δ=19.3,20.1,20.2,29.5,55.8,57.4,64.1,113.7,115.7,122.4,131.4,133.5,146.6,174.6。
C14H20N2O2Cl2(MW=319.23)；質譜(MH+)319。
實施例8N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-纈氨酸N,N-二甲基醯胺的合成根據通用方法D，用纈氨酸N,N-二甲基醯胺(得自上述實施例D)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為固體的目標化合物(mp=145-160℃)。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.38(m,1H),7.14(m,1H),6.66(m,1H),6.41(m,1H),4.78(m,1H),3.88(m,1H),3.10和3.09(s,s,3H),2.94和2.90(s,s,3H),1.96(m,1H),1.43(m,3H),0.88和0.67(m,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.6,173.1,171.4,171.3,146.3,146.0,132.7,132.6,130.52,130.46,120.9,120.8,114.5,113.4,113.0,54.25,54.15,53.4,53.2,37.4,35.6,31.4,31.3,19.50,19.46,19.2,17.5,17.0。
C16H23N3O2Cl2(MW=360.29)；質譜(MH+)360。
實施例9N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-纈氨酸N-甲基醯胺的合成根據通用方法D，用L-纈氨酸N-甲基醯胺(得自上述實施例E)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為固體的目標化合物(mp=145-160℃)。
NMR數據如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=8.10和7.90(m,2H),7.23(m,1H),6.76和6.69(m,1H),6.57(m,1H),6.34(m,1H),3.90-4.14(m,2H),2.57和2.56(s,s,3H),1.88(m,1H),1.27(m,3H),0.65-0.86(m,6H)。
13C-nmr(DMSO-d6):δ=173.1,171.2,171.1,148.1,147.9,131.19,131.16,130.4,130.2,116.8,113.5,113.2,113.1,57.5,57.3,52.2,51.5,30.9,30.8,25.4,19.2,19.1,18.8,18.6,18.2,17.9。
C15H21N3O2Cl2(MW=346.26)；質譜(MH+)346。
實施例10N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-丙氨酸甲酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為油狀物的目標化合物。經tlc監測反應(Rf=0.24，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並將產物經快速層析純化，用1∶1乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.1 5(m,2H),6.63(dd,1H),6.40(m,1H),4.50(m,2H),3.75(m,1H),3.67(s,1.5H),3.61(s,1.5H),1.45(d,3H),1.31(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.5,173.2,173.0,172.8,146.3,146.2,132.6,130.6,130.5,121.2,114.9,114.7,113.3,113.0,54.6,54.5,52.43,52.39,47.9,47.8,19.3,19.1,17.9,17.8。
C13H16N2O3Cl2(MW=319.19)；質譜(MH+)319。
實施例11N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-L-亮氨酸甲酯的合成根據通用方法D，用L-亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為固體的目標化合物(mp=120-132℃)。經tlc監測反應(Rf=0.49，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並將產物經快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數據如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.18(d,1H),6.95(bd,1H),6.69(d,1H),6.43(dd,1H),4.58(m,1H),4.32(d,1H),3.75(m,1H),3.61(s,3H),1.54(m,6H),0.90(m,6H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.1,173.4,146.8,133.3,131.2,122.2,115.7,114.1,55.5,52.9,51.1,41.6,25.5,23.4,22.2,20.0。
C16H22N2O3Cl2(MW=361.27)；質譜(MH+)361.1。
實施例12N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-L-苯丙氨酸甲酯的合成根據通用方法D，用L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為固體的目標化合物(mp=122-124.5℃)。經tlc監測反應(Rf=0.47，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並將產物經快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(m,4H),7.05(m,2H),6.91(d,1H),6.64(d,1H),6.38(dd,1H),4.84(q,1H),4.05(bs,1H),3.71(m,4H),3.20(m,1H),3.04(m,1H),1.37(d,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.6,172.1,146.5,136.2,133.4,131.2,129.7,129.1,127.7,122.3,115.6,113.9,55.4,53.3,53.0,38.1,19.9。
C19H20N2O3Cl2(MW=395.29)；質譜(MH+)395。
實施例13N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-異亮氨酸甲酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-異亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為固體的目標化合物(mp=95.5-101.5℃)。經tlc監測反應(Rf=0.62,用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並將產物經快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(d,1H),6.98(m,1H),6.70(m,1H),6.45(m,1H),4.55(m,1H),4.11(m,1H),3.79(m,1H),3.72(s,1.5H),3.67(s,1.5H),1.87(m,1H),1.51(d,3H),1.10(m,8H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=1 73.8,173.4,172.9,172.4,146.6,146.4,133.6,133.4,131.30,131.28,122.5,122.4,115.8,115.4,114.1,113.8,56.9,56.8,55.7,55.5,52.8,52.7,38.3,38.2,25.6,25.5,20.2,20.0,16.05,16.03,12.1,12.0。
C16H22N2O3Cl2(MW=361.27)；質譜(MH+)361.1。
實施例14N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基戊酸甲酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-正纈氨酸甲酯鹽酸鹽(Sennchem)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為固體的目標化合物(mp=150-153℃)。經tlc監測反應(Rf=0.57，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並將產物經快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(d,1H),6.95(bd,1H),6.70(d,1H),6.47(dd,1H),4.57(m,1H),4.13(bd,1H),3.78(m,1H),3.67(s,3H),1.81(m,1H),1.62(m,1H),1.51(d,3H),1.30(m,2H),0.9(t,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.8,173.0,146.6,133.4,131.3,122.4,115.7,114.1,55.6,52.9,52.4,34.8,20.2,19.2,14.2。
C15H20N2O3Cl2(MW=347.24)；質譜(MH+)347。
實施例15
N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為固體的目標化合物(mp=163-165℃)。經tlc監測反應(Rf=0.55,用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並將產物經快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.18(d,1H,J=8.7Hz),6.99(bd,1H,J=8.2Hz),6.69(d,1H,J=2.7Hz),6.45(dd,1H,J=8.7Hz,J=2.7Hz),4.53(m,1H),4.23(d,1H,J=4.2Hz),3.77(m,1H),3.66(s,3H),1.83(m,1H),1.62(m,1H),1.48(d,3H,J=7.0Hz),1.27(m,4H),0.85(t,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.9,173.1,146.7,133.4,131.2,122.3,11 5.7,114.1,55.5,52.9,52.6,32.4,28.0,22.8,20.1,14.4。
C16H22N2O3Cl2(MW=361.27)；質譜(MH+)361。
實施例16N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-色氨酸甲酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-色氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為固體的目標化合物(mp=54-66℃)。經tlc監測反應(Rf=0.43，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並將產物經快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.1 5(bs,0.5H),7.98(bs,0.5H),7.51(d,0.5H),7.12(m,6H),6.60(d,0.5H),6.53(dd,1H),6.24(m,1H),4.88(m,1H),3.90(d,0.5H),3.70(m,4.5H),3.32(m,1H),3.22(m,1H),1.40(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.8,173.6,172.8,172.4,146.4,146.3,136.6,133.3,133.2,131.2,131.1,128.2,,127.7,123.3,122.8,122.05,122.02,120.3,120.2,119.0,118.7,115.5,115.4,113.8,113.3,112.1,111.9,110.2,109.9,55.3,55.1,53.5,53.1,53.0,52.9,27.9,27.7,19.8,19.6。
C21H21N3O3Cl2(MW=434.33)；質譜(MH+)434。
實施例17N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯鹽酸鹽(Bachem)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備目標化合物。經tlc監測反應(Rf=0.56，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並將產物經快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.52(d,0.5H),7.42(d,0.5H),7.1 3(m,1H),6.66(d,0.5H),6.60(d,0.5H),6.40(m,1H),4.76(m,1H),4.40(d,0.5H),4.31(d,0.5H),3.75(m,1H),3.69(s,1.5H),3.62(s,1.5H),2.88(m,1H),2.62(m,1H),1.47(m,3H),1.32(s,4.5H),1.21(s,4.5H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.0,173.7,171.7,171.4,170.30,170.27,146.7,146.6,133.4,133.3,131.2,131.1,122.0,115.6,115.1,114.0,113.4,82.4,55.4,55.2,53.24,53.19,49.0,48.7,37.9,37.8,28.4,28.2,19.9,19.8。
C18H24N2O5Cl2(MW=419.31)；質譜(MH+)418。
實施例18
N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-天冬氨酸α-甲酯的合成根據通用方法F，去除N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯(得自上述實施例17)的叔丁酯基團，得到為固體目標化合物(mp=53.5-56℃)。經tlc監測反應(Rf=0.54，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.59(d,1H),7.18(m,1H),6.79(d,0.5H),6.69(d,0.5H),6.58(m,0.5H),6.47(m,0.5H),4.84(m,1H),3.82(m,1H),3.73(s,1.5H),3.68(s,1.5H),3.04(m,1H),2.79(m,0.5H),2.73(m,0.5H),1.49(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175.7,175.6,175.14,175.07,171.1,171.0,145.0,144.6,133.6,133.5,131.44,131.40,124.2,123.4,55.9,55.4,53.8,53.7,49.05,49.00,36.1,19.2,19.1。
C14H16N2O5Cl2(MW=363.20)；質譜(MH+)363。
實施例19N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-Nε-BOC-L-賴氨酸甲酯的合成根據通用方法D，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)和Nε-BOC-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)，製備為油狀物的目標化合物。經tlc監測反應(Rf=0.23，用45％的乙酸乙酯∶己烷展開)。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.22(m,4H),6.63(q,1H),6.43(m,1H),4.72(t,0.5H),4.63(t,0.5H),4.53(m,1H),4.42(q,1H),3.78(m,1H),3.68(s,1.5H),3.62(d,1.5H),3.00(m,2H),1.90-1.05(m,4H),1.48(d,3H),1.42(s,9H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.2,173.9,173.1,172.8,156.7,156.6,146.8,146.7,133.4,133.3,131.2,131.1,121.9,121.8,115.5,115.1,114.0,113.8,79.7,79.6,60.9,55.2,55.1,53.0,52.9,52.4,52.1,40.6,40.5,32.3,32.2,30.1,28.9,22.8,21.6,19.9,14.7。
實施例20N-[N-苯並噻唑-6-基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成步驟A:N-[N-苯並噻唑-6-基)-D,L-丙氨酸的合成於室溫下，用0.63g吡啶處理1 g 6-氨基苯並噻唑(Lancaster)的60ml二氯甲烷溶液，然後用2.1g三氟乙酸酐處理。將反應物攪拌3小時，在此過程中最初溫熱的反應混合物冷卻至室溫。用5％檸檬酸水溶液洗滌該混合物，用硫酸鎂乾燥，去除溶劑，得到定量產率的6-氨基苯並三唑三氟乙醯胺，為奶油色固體，將其立即用於下一步反應。
將300mg 6-氨基苯並三唑三氟乙醯胺溶於35ml THF中，於室溫下加入1.2當量的氫化鉀。將該溶液回流5小時，冷卻，加入18-冠-6的晶體(Aldrich)和331mg 2-溴代丙酸乙酯(Aldrich)，將產生的混合物回流36小時。冷卻該反應混合物，減壓去除溶劑，將殘留物溶於乙酸乙酯中。用水洗滌有機物。將水層的pH調至5，用乙酸乙酯萃取。合併有機層，用硫酸鎂乾燥並除去溶劑。粗品物質經tlc純化，用二氯甲烷/甲醇(94∶4)展開得到N-(苯並噻唑-6-基)-D,L-丙氨酸乙酯(Rf=0.5)。於回流下，用甲醇和5當量的碳酸鉀處理該物質，然後冷卻並去除溶劑。將殘留物溶於水和乙酸乙酯中。將水層的pH調至2，用乙酸乙酯萃取。乾燥乙酸乙酯萃取物，去除溶劑得到N-(苯並噻唑-6-基)-D,L-丙氨酸。步驟B:N-[N-苯並噻唑-6-基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成根據通用方法D(用DMF作為反應溶劑，用乙酸乙酯萃取且不用1N鹽酸洗滌)，用L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(苯並噻唑-6-基)-D，L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備目標化合物。經tlc監測反應(Rf=0.28，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並將產物經快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.74(s,1H),7.91(s,1H,J=8.8Hz),7.15(m,1H),7.06(d,0.5H,J=2.3Hz),7.00(d,0.5H,J=2.3Hz),6.87(m,1H),4.58(m,1H),4.20(bs,2H),3.87(m,1H),3.70(s,1.5H),3.59(s,1.5H),1.30(m,10H),0.84(t,1.5H,J=6.9Hz),0.60(t,1.5H,J=6.9H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.3,174.0,173.4,173.0,151.1,151.0,147.2,145.5,145.3,136.2,136.1,124.4,124.2,116.1,115.9,104.6,103.9,56.2,55.69,53.0,52.9,52.5,52.2,32.42,32.36,28.0,27.7,22.8,22.6,20.3,20.1,14.4,14.2。
C17H23N3O3S2(MW=349.46)；質譜(MH+)350。
實施例21N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-賴氨酸甲酯的合成根據通用方法F，用N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-Nε-BOC-L-賴氨酸甲酯鹽酸鹽(得自上述實施例19)，製備為油狀物的目標化合物。經矽膠快速層析純化反應產物，用89∶10∶1的二氯甲烷∶甲醇∶氫氧化銨洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3,-2非對映體)δ=7.21(d,1H),7.09(bd,1H),6.68(q,1H),6.46(m,1H),4.56(m,1H),4.22(bs,1H),3.78(m,1H),3.70(s,1.5H),3.67(s,1.5H),2.66(t,1H),2.54(t,1H),1.80(m,1H),1.62(m,1H),1.51(d,1.5H),1.50(d,1.5H),1.32(m,2H),1.11(m,1H)。
13C-nmr(CDCl3,-2非對映體)δ=174.8,174.3,173.1,172.8,171.8,146.9,146.7,133.3,133.1,131.2,131.1,121.7,121.5,115.2,115.1,113.9,113.8,60.9,55.0,54.9,53.1,53.0,52.5,52.3,32.1,32.09,32.05,31.8,23.1,22.9,21.6,19.9,19.8和14.7。
C13H23N3O3Cl2(MW=376.28)。
實施例22N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-酪氨酸甲酯的合成根據通用方法D，用L-酪氨酸甲酯(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為丙氨酸的立體異構體混合物的目標化合物。經tlc監測反應(Rf=0.29,10％甲醇/二氯甲烷展開)，並經快速層析純化，用甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.22-7.50(m,7H),6.36(dd,0.5H),6.28(dd,0.5H),4.83(m,1H),4.04(dd,1H),3.73(s,1.5H),3.70(m,1H),3.68(s,1.5H),3.14(dd,0.5H),2.97(m,1.5H),1.43(d,1.5H),1.35(d,1.5H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.20,174.08,172.75,172.26,156.10,155.99,146.45,146.32,133.50,133.38,131.39,131.26,130.81,130.67,127.43,127.00,122.41,122.22,116.15,116.12,115.68,115.39,113.94,1 13.46,55.47,55.08,53.54,53.18,37.62,37.44,19.91,19.87。
C19H20N2O4Cl2(MW=411.28)。
實施例23N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-丙氨酸甲酯的合成根據通用方法D，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例B)和L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，製備為油狀物的目標化合物。經矽膠快速層析純化反應產物，用50％的乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=1.3-1.55(在1.34、1.39和1.48處有三組雙峰，均為J=7，共6H),3.7-3.9(在3.67和3.72處具有m和單峰，4H),4.3-4.4(m,1H),4.5-4.65(m,1H),6.4-6.6(m,2H),6.73(s,1H),6.95-7.1(m,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=15.52,15.59,16.75,16.87,45.29,45.39,50.02,51.89,51.99,108.9,109.2,109.5,1 16.14,1 16.19,132.96,133.96,133.05,145.67,145.76,170.13,170.32,170.40,170.63。
C13H16N2O3Cl2(MW=319.19)；質譜(MH+)319。
實施例24N-[N-(3,5-二氧苯基)-L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基戊酸甲酯的合成根據通用方法D，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例B)和L-正纈氨酸甲酯鹽酸鹽(Sennchem)，製備目標化合物。經矽膠層析純化反應產物，用50％的乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.92(t,J=7,3H),1.2-1.4(m,2H),1.50(d,J=7,3H),1.5-1.7(m,1H),1.75-1.9(m,1H),3.69(s,3H),3.75-3.9(m,1H),4.2(bs,1H),4.5-4.65(m,1H),6.5(bs,2H),6.73(s,1H),6.85(bs,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=14.2,19.25,20.13,34.8,52.4,53.0,55.2,112.7,119.5,136.1,148.7,173.0,173.5。
C15H20N2O3Cl2(MW=347.24)；質譜(MH+)346。
實施例25N-[N-(3,5-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-L-苯丙氨酸甲酯的合成根據通用方法D，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸和L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，製備目標化合物。經矽膠層析純化反應產物，用50％的乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數據如下
1H-nmr(CDCl3):δ=1.40(d,J=7,3H),3.10(dd,J=7,14,1H),3.23(dd,J=5,14,1H),3.74(s,3H),3.75-3.9(m,1H),4.0(bs,1H),4.8-4.95(m,1H),6.45(bs,2H),6.73(s,2H),7.0-7.2(m,2H),7.2-7.3(m,5H)。
13C-nrmr(CDCl3):δ=19.4,37.5,52.4,52.7,54.5,112.0,118.9,127.1,128.5,129.1,135.5,135.6,148.0,171.4,172.6。
C19H20N2O3Cl2(MW=395.29)；質譜(MH+)394。
實施例26N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備目標化合物(mp=113.5-118℃)。經tlc監測反應(Rf=0.29，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並將產物經快速層析純化，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.47(bd,1H),7.20(m,1H),6.69(d,0.5H),6.60(d,0.5H),6.44(m,1H),4.83(m,1H),4.25(bs,0.5H),4.18(bs,0.5H),3.79(m,1H),3.72(s,1.5H),3.67(s,1.5H),3.65(s,1.5H),3.48(s,1.5H),3.00(m,1H),2.79(m,1H),1.50(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.0,173.6,172.0,171.7,171.4,170.3,146.6,146.4,133.43,133.37,131.22,131.20,122.2,122.0,115.5,115.0,114.1,113.6,55.4,55.2,53.46,53.44,52.7,52.5,48.8,48.7,36.4,36.3,19.9,19.7。
C15H18N2O5Cl2(MW=377.23)；質譜(MH+)377。
實施例27N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(N』-1-苄基)-L-組氨酸甲酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用1-苄基-L-組氨酸甲酯鹽酸鹽為固體(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備目標化合物(mp=49-51℃)。經tlc監測反應(Rf=0.21，用5％的甲醇/二氯甲烷展開)，並將產物經快速層析純化，用5％的甲醇∶二氯甲烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.22(d,0.5H),7.88(d,0.5H),7.29(m,3H),7.08(m,4H),6.65(d,0.5H),6.44(m,2.5H),4.90(s,1H),4.86(s,1H),4.62(m,1H),4.47(m,1H),3.72(m,1H),3.61(s,1.5H),3.47(s,1.5H),2.95(m,2H),1.42(d,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.0,173.9,172.4,172.0,146.9,138.1,137.9,137.6,136.7,136.5,133.1,133.0,131.0,130.9,129.6,129.5,128.84,128.79,127.74,127.71,121.1,121.0,117.3,115.3,115.1,113.9,113.6,54.9,54.8,53.2,52.9,52.8,52.7,51.3,51.2,30.2,29.8,19.8。
C23H24N4O3Cl2(MW=475.38)；質譜(MH+)475。
實施例28N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-穀氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-穀氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯鹽酸鹽(Bachem)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為油狀物的目標化合物。經tlc監測反應(Rf=0.52和0.59，用1∶1乙酸乙酯∶己烷展開)，並將產物經快速層析純化，用1∶1乙酸乙酯∶己烷作為洗脫劑。
NMR數據如下
1H-nmr(CDCl3):δ=7.25(m,2H),6.69(m,1H),6.45(m,1H),4.54(m,1H),3.78(m,1H),3.70(s,1.5H),3.65(s,1.5H),2.10(m,4H),1.49(d,3H),1.40(s,9H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.2,173.9,172.8,172.7,172.5,172.3,146.6,146.5,133.5,133.3,131.3,131.2,122.16,122.14,115.7,115.4,114.0,113.6,81.6,81.5,55.4,55.2,53.1,53.0,52.3,51.9,32.0,31.7,28.6,27.6,27.3,20.0,19.8。
C19H26N2O5Cl2(MW=433.34)；質譜(MH+)432。
實施例29N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-穀氨酸α-甲酯的合成根據通用方法F(省略碳酸氫鈉洗滌並從乙酸乙酯相回收產物)，去除N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]穀氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯(得自上述實施例28)的叔丁酯基，提供為固體的目標化合物(mp=42-45℃)。經tlc監測反應(Rf=0.42和0.50，用10％甲醇/二氯甲烷展開)。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.57(bs,1H),7.25(d,1H),6.75(d,1H),6.51(m,1H),4.67(m,1H),3.91(m,1H),3.76(s,1.5H),3.69(s,1.5H),2.50-2.15(m,3H),2.10-1.85(m,1H),1.51(bs,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=177.98,177.73,175.17,174.94,172.64,172.26,146.60,146.45,133.52,133.33,131.41,131.27,122.32,122.28,115.68,155.47,113.98,113.59,55.37,55.17,53.35,53.29,52.20,51.85,30.68,30.26,227.29,27.18,19.86,19.77。
C15H18N2O5Cl2(MW=377.23)。
實施例30N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-L-亮氨醯胺的合成根據通用方法D，用L-亮氨醯胺鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備目標化合物。經柱層析純化該化合物，首先用1∶1乙酸乙酯/己烷洗脫，然後用5％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.32(d,8.6,1H),7.1 7(d,8.7,1H),6.66(d,2.7,1H),6.54(s,1H),6.41(dd,2.7,8.7,1H),6.13(s,1H),4.48(m,1H),4.33(d,5.3,1H),3.83(五峰，6.9,1H),1.58(m,3H),1.44(d,7.0,3H),0.89(d,6.0,3H),0.85(d,5.9,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.5,173.9,146.0,132.8,130.7,121.5,114.7,113.3,54.3,51.1,40.8,24.8,22.9,21.7,19.2。
C15H21N3O2Cl2(MW=346.26)；質譜(MH+)346。
實施例31N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(3,5-二碘代)-L-酪氨酸甲酯的合成根據通用方法D，用3,5-二碘代-L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽(Bachem)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為丙氨酸立體異構體混合物的目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.29，用10％甲醇/二氯甲烷展開)並經快速層析純化，用10％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3，-部分純的非對映體)δ=7.37(s,2H),7.19(d,1H),6.99(bd,1H),6.65(d,1H),6.40(m,1H),5.78(s,1H),4.73(q,1H),3.72(m,1H),0.70(s,3H)。
13C-nmr(CDCl3，-兩個非對映體)δ=173.86,171.87,171.41,171.37,170.90,153.48,150.74,146.37,146.30,141.01,140.09,138.39,133.50,133.45,132.14,131.62,131.34,131.28,122.80,122.62,121.82,115.89,115.78,115.72,115.47,114.54,113.79,113.21,82.97,77.08,61.01,55.69,53.32,53.28,53.18,53.14,52.97,52.90,52.76,36.37,36.15,21.67,20.20,20.11,19.76,14.79。
C19H18N2O4Cl2I2(MW=663.08)；質譜(MH+)=663。
實施例32N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(3-碘代)-L-酪氨酸甲酯的合成根據通用方法D，用3-碘代-L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽(根據通用方法K並用3-碘代-L-酪氨酸(Aldrich)製備)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為丙氨酸立體異構體混合物的目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.29，用10％甲醇/二氯甲烷展開)並經快速層析純化，用10％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.37-7.20(m,3H),6.97-6.60(m,3H),6.42(dd,1.5H),6.32(dd,1.5H),5.52(bs,0.5H),5.43(bs,0.5H),4.80(m,1H),3.94(dd,1H),3.73(s,1.5H),3.70(s,1.5H),3.12(dd,0.5H),2.94(m,1.5H),1.48(d,1.5H),1.43(d,1.5H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.56,171.80,171033,154.52,154.47,145.69,139.15,138.74,132.88,132.71,130.83,130.61,130.40,130.26,129.14,128.81,121.76,121.73,115.04,114.97,114.86,113.20,112.71,84.96,84.68,54.85,54.65,52.78,52.60,52.57,52.51,36.29,36.08,19.40,19.27。
C19H19N2O4Cl2I(MW=537.1 8)；質譜(MH+)=538。
實施例33根據在此所述的通用方法和實施例，製備下列化合物N-[N-(4-氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-苯丙氨酸甲酯實施例34N-[N-(3,4-二氯苯基)甘氨醯基]-(S)-2-氨基戊酸甲酯的合成根據通用方法D，用N-(3,4-二氯苯基)甘氨酸(得自上述實施例Ⅰ)和L-正纈氨酸甲酯鹽酸鹽(Sennchem)，製備目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.32，用50％乙酸乙酯/己烷展開)並經快速層析純化，用乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(d,J=8.7,1H),6.94(d,J=7.8,1H),6.68(d,J=2.6,1H),6.4(m,1H),4.6(m,2H),3.79(d,J=2.6,2H),3.71(s,3H),1.7(m,2H),1.2(m,2H),0.88(t,J=7.3,7.3,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.3,170.2,147.2,133.6,131.2,122.2,115.0,113.6,53.0,52.3,48.8,34.8,19.2,14.1。
C14H18N2O3Cl2(MW=333.22)；質譜(MH+)=334。
實施例35N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-Nε-(己醯基)-L-賴氨酸甲酯的合成根據通用方法D，用N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-賴氨酸甲酯(得自上述實施例21)和己酸(Aldrich)，製備目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.38，用60％二氯甲烷/10％己烷/27％乙酸乙酯/3％甲醇展開)並經快速層析純化，用60％二氯甲烷/10％己烷/27％乙酸乙酯/3％甲醇作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.70(d),7.25(m),7.15(m),6.68(m),6.42(m),5.95(bs),5.79(bs),4.70(bs),4.50(m),3.80(m),3.78(s),3.72(s),3.45(m),3.20(m),3.05(m),2.12(m),1.98(m),1.80(m),1.60(m),1.45(m),1.30(m),1.10(m)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175.6,174.4,174.0,173.9,173.7,173.1,156.6,146.9,146.8,133.5,133.2,131.2,131.1,121.7,115.4,115.23,115.1,114.0,113.9,79.6,55.1,54.9,54.8,53.0,52.9,52.4,52.0,42.6,40.9,39.4,37.1,32.1,31.7,30.3,29.4,28.9,28.5,26.9,25.9,23.0,19.9,19.7。
C22H33N3O4Cl2(MW=474.43)；質譜(MH+)=NA。
實施例36N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-苯丙氨醯胺的合成根據通用方法D，用苯丙氨醯胺(Bachem)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備目標化合物(mp=177-179℃)。將該化合物用氯仿研磨純化。
NMR數據如下1H-nmr(DMSO-d6):δ=8.0-8.2(d,1H),7.45(m,1H),7.05-7.30(m,7H),7.65-7.72(m,1H),6.24-6.51(m,2H),4.45(m,1H),3.82(m,1H),2.95(m,1H),2.78(m,1H),1.05-1.25(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.0,172.9,172.8,172.7,147.9,137.7,131.1,130.3,129.21,129.15,128.0,127.9,126.21,126.19,116.8,113.5,113.0,112.6,53.4,53.3,52.0,51.8,37.92,37.86,18.9,18.6。
C18H19N3O2Cl2(MW=380.23)；質譜(MH+)=380。
實施例37N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己-(N-甲基)-醯胺的合成根據通用方法D，用L-正亮氨酸N-甲基醯胺(根據通用方法F使BOC-L-正亮氨酸(Bachem)與甲胺(Aldrich)偶合、接著根據通用方法F去除BOC基團製備)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸，製備目標化合物。然後用碳酸鉀洗滌將該化合物純化。
NMR數據如下1H-nmr(CD3OD):δ=6.99(t,1H),6.48(d,10.8,1H),6.32(d,8.7,1H),4.09(m,1H),3.68(q,7.0,0.5H),3.59(q,7.1,0.5H),2.50(s,1.5H),2.47(s,1.5H),1.28-1.60(m,2H),1.23(t,6.5,3H),0.80-1.20(m,4H),0.68(t,6.7,1.5H),0.59(t,7.1,1.5H)。
13C-nmr(CD3OD):δ=176.6(重疊)，174.54,174.51,148.8,148.5,133.6,133.5,131.7,131.6,121.0,120.8,115.2,115.1,114.5,114.2,55.3,54.7,54.3,54.1,33.3(重疊)，29.0,28.8,26.3,26.2,23.4,23.3,19.0(重疊)，14.3,14.2。
C16H23N3O2Cl2(MW=360.29)；質譜(MH+)=360。
實施例38和39N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-β-環己基丙氨酸甲酯的合成根據通用方法D，用β-環己基丙氨酸甲酯(根據通用方法K由β-環己基丙氨酸製備)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸，製備為丙氨酸非對映體的目標化合物，為油狀物。經tlc監測該反應(Rf=0.27(第二種個異構體)和0.30(第一種異構體)，用35％乙酸乙酯/己烷展開)，並經快速層析純化，用35％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數據如下(第一種異構體-實施例38)1H-nmr(CD3OD):δ=7.21(d,1H),6.81(bd,1H),6.70(d,1H),6.46(dd,1H),4.62(m,1H),4.19(d,1H),3.77(m,1H),3.65(s,3H),1.65-0.90(m,10H),1.50(d,3H)。
13C-nmr(CD3OD):δ=173.78,173.48,146.62,133.45,131.26,122.51,115.84,114.17,55.64,52.91,50.47,40.18,34.81,34.04,32.88,26.86,26.71,26.55,20.13。
NMR數據如下(第二種異構體-實施例39)1H-nmr(CD3OD):δ=7.23(d,1H),6.83(bd,1H),6.67(d,1H),6.45(dd,1H),4.63(m,1H),4.10(d,1H),3.69(m,1H),3.72(s,3H),1.65-0.90(m,10H),1.51(d,3H)。
13C-nmr(CD3OD):δ=173.98,173.56,146.38,133.65,131.34,122.49,115.35,113.78,55.39,52.95,50.21,40.26,34.61,34.10,32.68,26.82,26.64,26.41,19.98。
C19H26N2O3Cl2(MW=401.34)；質譜(MH+)=401。
實施例40N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己醯胺的合成根據通用方法D，用L-正亮氨醯胺(根據通用方法F，由BOC-L-正亮氨醯胺(得自上述實施例F)製備)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸，製備為固體的目標化合物(mp=156-161℃)。
NMR數據如下1H-nmr(CD3OD):δ=6.49(m,1H),6.32(m,1H),1.14(m,1H),3.54-3.71(m,1H),0.80-1.62(m,9H),0.68(m,1.5H),0.58(m,1.5H)。
13C-nmr(CD3OD):δ=176.63,176.56,148.8,148.5,133.6,133.5,131.7,131.6,120.8,115.2,115.1,114.4,114.2,55.3,54.7,53.9,53.7,33.4,33.3,29.0,28.6,23.4,23.3,19.03,18.99,14.3,14.2。
C16H21N3O2Cl2(MW=346.26)；質譜(MH+)346。
實施例41N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己-(N,N-二甲基)-醯胺的合成根據通用方法D，用L-正亮氨酸N,N-二甲基醯胺(根據通用方法E使BOC-L-正亮氨酸(Bachem)與二甲胺(Aldrich)偶合，接著根據通用方法F去除BOC基團製備)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸，製備為固體的目標化合物(mp=137-160℃)。經tlc監測該反應(0.20和0.24，用5％甲醇的二氯甲烷溶液展開)，並從水中沉澱純化該化合物。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.77(m,3H),1.11(m,1H),1.24(m,3H),1.47(m,3H),1.40-1.80(m,2H),2.92和2.94(兩個s,3H),3.07(s,3H),3.84(m,1H),4.32(d,J=5.3Hz,1H),4.90(m,1H),6.44(m,1H),6.65(s,1H),7.17(m,1H),7.35(m,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=13.8,13.9,19.3,19.4,22.38,22.45,27.06,27.14,32.3,32.5,35.7(可能重疊)，37.0,37.1,48.6,48.8,54.3,54.5,113.1,113.5,114.4,114.7,121.1,121.3,130.6(重疊)，132.7,132.9,146.0,146.2,171.4,171.5,172.6,172.9。
C17H25N3O2Cl2(MW=374.31)；質譜(MH+)374。
實施例42N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-1-甲硫氨酸甲酯的合成根據通用方法D，用L-甲硫氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)，製備為非對映體化合物的目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.35，用43％乙酸乙酯/己烷展開)，並經快速層析純化該化合物，用43％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.21(d,2H),6.68(m,1H),6.43(m,1H),4.68(m,1H),4.21(dd,1H),3.79(m,1H),3.73(s,1.5H),3.68(s,1.5H),2.46(m,1H),2.31(t,1H),2.23-1.88(m,2H),2.06(s,1.5H),1.93(s,1.5H),1.50(d,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.09,173.81,172.73,172.38,146.60,146.47,133.43,131.37,131.27,122.36,122.33,115.65,115.31,114.05,113.65,55.48,55.32,53.19,53.16,51.99,51.68,31.74,31.64,30.62,30.42,20.10,19.92,16.08,15.91。
C15H20N2O2Cl2(MW=379.31)；質譜(MH+)379。
實施例43N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己-(N,N-二甲基)-醯胺的合成根據通用方法E，用L-正亮氨酸N,N-二甲基醯胺(根據通用方法E使BOC-L-正亮氨酸(Bachem)與二甲胺(Aldrich)偶合，接著根據通用方法F去除BOC基團製備)和N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例B)，製備目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.25-0.30，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，並經層析純化該化合物，用3％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.8-0.95(重疊t,3H),1.2-1.8(m，在1.45和1.48處含有重疊的d,9H,2.95(s,3H),3.10(s,3H),3.8-3.9(m,1H),4.3-4.4(m,1H),4.8-4.95(m,1H),6.45(s,2H),6.6-6.7(m,1H)。
C17H25N3O2Cl2(MW=374.31)。
實施例44N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己醯胺的合成根據通用方法D，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例B)和L-正亮氨醯胺(得自上述實施例F)，製備目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.15，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，並經快速層析純化該化合物，用3％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CD3OD):δ=0.9(t,J=7,3H),1.2-1.4(m,2H),1.45(d,J=7,3H),1.5-1.7(m,1H),1.75-1.9(m,1H),3.9-4.0(m,1H),4.1-4.3(m,1H),4.3-4.4(m,1H),6.5(bs,2H),6.6(bs,1H)。
C15H21N3O2Cl2(MW=346.26)。
實施例45N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己-(N-甲基)-醯胺的合成根據通用方法D，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸和L-正亮氨酸N-甲基醯胺(根據通用方法E使BOC-L-正亮氨酸(Bachem)與甲胺(Aldrich)偶合，接著根據通用方法F去除BOC基團製備)，製備目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.25，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，並經薄層層析純化該化合物，用3％甲醇/二氯甲烷展開。
NMR數據如下1H-nmr(CD3OD):δ=0.9(t,J=7,3H),1.2-1.4(m,2H),1.45(d,J=7,3H),1.5-1.7(m,1H),1.75-1.9(m,1H),2.6-2.7(在2.7處具有s的m,4H),3.8-4.0(m,1H),4.1-4.3(m,2H),6.5(bs,2H),6.6(bs,1H)。
C16H23N3O2Cl2(MW=360.29)。
實施例46N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-組氨酸甲酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用L-組氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸，製備為固體的目標化合物(mp=55-60℃)。經tlc監測該反應(Rf=0.52，用10％甲醇/二氯甲烷展開)，並經快速層析純化該化合物，用50％乙酸乙酯/己烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CD3Cl3):δ=8.14(bd,J=7.02 Hz,0.5H),7.79(bd,7.57Hz,0.5H),7.33(s,1H),7.14(m,1H),6.73(s,0.5H),6.69(s,0.5H),6.59(m,1H),6.47(m,0.5H),6.37(m,0.5H),4.74(m,1H),4.33(m,1H),3.79(m,1H),3.69(s,1.5H),3.62(s,1.5H),3.05(m,2H),1.47(d,J=7.02Hz,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.35,174.15,172.45,172.08,146.80,146.67,135.48,135.07,134.65,133.24,133.12,131.13,131.04,121.54,121.49,115.96,115.78,115.38,115.05,113.90,113.72,61.04,54.98,53.11,52.97,52.71,29.71,19.43,21.68,19.86,19.84,14.77。
C16H18N4O3Cl2(MW=385.25)；質譜(MH+)385。
實施例47N-[N-(喹啉-3-基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成根據通用方法G，接著根據通用方法C進行水解製備N-(喹啉-3-基)-D,L-丙氨酸。然後根據通用方法D使該化合物與L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)偶合，得到為油狀物的目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.76，用10％甲醇/二氯甲烷展開；0.07，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並經快速層析純化該化合物，用10％甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=8.53(t,J=2.8 Hz,1H),7.95(m,1H),7.63(m,1H),7.46(m,2H),7.20(m,1H),7.10(d,J=2.75 Hz,0.5H),7.01(d,J=2.75 Hz,0.5H),4.60(m,2H),3.94(m,1H),3.71(s,1.5H),3.54(s,1.5H),1.90-0.80(m,12H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.82,173.50,173.40,172.96,143.65,143.60,143.39,143.32,140.34,140.26,129.57,129.49,127.86,127.78,126.94,126.78,126.54,113.39,112.65,55.69,55.46,53.00,52.86,52.62,52.28,34.42,32.35,28.03,27.79,22.78,22.62,20.22,20.01,14.41,14.12。
C19H25N3O3(MW=343.43)。
實施例48N-[N-(苯並噻唑-2-基)-L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成根據通用方法B，用2-氯代苯並噻唑(Aldrich)和L-丙氨酸(Aldrich)，製備N-(苯並噻唑-2-基)-L-丙氨酸。然後根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)使該化合物與L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)偶合，得到為固體的目標化合物(mp=99-120℃)。經tlc監測後一反應(Rf=0.42，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷展開)，並經製備性板層析純化該產物，用1∶1的乙酸乙酯∶己烷和5∶95的甲醇∶二氯甲烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.66-7.03(m,6H),4.69(m,1H),4.58(m,1H),3.72(s,1.9H),3.61(s,1.1H),1.91-1.50(m,5H),1.32-1.08(m,4H),0.87-0.65(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=175.8,170.3,166.8,160.2,152.3,148.4,132.1,131.1,126.8,126.5,122.6,122.0,121.4,120.9,119.4,54.3,54.2,53.0,52.9,3.5,28.1,28.0,23.9,22.9,19.0,18.8,14.2。
C17H23N3O3S(MW=349.46)；質譜(MH+)350。
實施例49N-[N-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨醯基]-L-丙氨酸甲酯的合成根據通用方法E，用L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例C)，製備為固體的目標化合物(mp=93-95℃)。經tlc監測該反應(Rf=0.4，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，並經快速層析純化該化合物，用3％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.9(q),6.25(t),6.10(q),5.3(s),4.6(m),4.25(m),33.7-3.8(m),1.8(s),1.5(d),1.4(q),1.25(s)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.78,173.51,173.44,173.27,166.24,166.09,163.04,162.83,149.41,149.37,97.47,97.34,97.20,97.09,96.82,95.08,95.03,94.73,94.69,94.39,94.34,55.27,55.22,53.10,53.02,48.46,48.35,19.99,19.87,18.72,18.66。
C13H16N2O3F2(MW=286.3)；質譜(MH+)287。
實施例50N-[N-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己酸甲酯的合成根據通用方法E，用L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)和N-(3,5-二氟苯基)-D,L-丙氨酸，製備為固體的目標化合物(mp=93-95℃)。經tlc監測該反應(Rf=0.6，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，並經快速層析純化該化合物，用3％甲醇/二氯甲烷洗脫。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=6.95(q),6.85(d),6.25(t),6.15(t),4.6(m),4.3(m),3.8(m),3.75(s),3.70(s),1.8(m),1.65(m),1.55(d),1.3(m),1.1(m),0.85(t),0.80(t)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.64,173.42,173.35,173.04,149.38,149.23,97.52,97.21,97.14,96.83,95.10,95.05,94.75,94.70,94.41,77.61,77.19,55.34,55.25,52.97,52.87,52.58,52.25,32.41,27.96,27.74,22.79,22.68,20.05,19.87,14.39,14.25。
C16H22N2O3F2(MW=328.3)；質譜(MH+)329。
實施例51N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己醯胺的合成根據通用方法D(用DMF作為溶劑，用乙酸乙酯萃取，不用1N鹽酸洗滌)，用L-正亮氨醯胺(根據通用方法F，由BOC-L-正亮氨醯胺(得自上述實施例F)製備)和N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨酸(根據通用方法J使3,4-二氯苯胺(Aldrich)和R-(+)-乳酸異丁酯(Aldrich)反應，接著根據通用方法C進行水解)，製備為固體的目標化合物(mp=184-186℃)。經tlc監測該反應(Rf=0.48，用12％甲醇/二氯甲烷展開)，並經製備性板層析純化該化合物，用12％甲醇/二氯甲烷作為展開劑。
NMR數據如下1H-nmr(CD3OD):δ=6.97(d,J=8.79Hz,1H),6.51(d,J=2.68Hz,1H),6.32(dd,J=8.73Hz,J=2.68Hz,1H),4.14(m,1H),3.67(q,J=6.96 Hz,1H),1.40(m,10H),0.70(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=177.19,177.11,149.41,134.05,132.13,121.38,115.82,114.96,55.26,54.48,33.92,29.54,23.95,19.58,14.83。
C15H21N3O2Cl2(MW=346.26)；質譜(MH+)346。
實施例52N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己(N-苄基)-醯胺的合成根據上述通用方法H，用N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己酸甲酯(得自上述實施例15)和苄胺(Aldrich)，製備為固體的目標化合物(mp=141-146℃)。經矽膠tlc監測該反應(Rf=0.32，用5％甲醇/二氯甲烷展開)，並經製備性板層析純化該化合物，矽膠，用5％甲醇/二氯甲烷作為展開劑。
NMR數據如下1H-nmr(CD3OD):δ=7.6(m,2H),7.2(m,6H),6.6(m,1H),6.3(m,1H),4.47(m,4H),3.75(m,1H),1.28(m,12H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174.56,174.50,172.39,172.32,146.78,146.65,138.38,133.43,133.38,131.22,129.21,128.06,121.98,121.72,121.66,115.21,115.08,113.73,113.55,54.94,54.36,53.60,53.22,43.95,33.10,32.98,28.24,27.95,22.96,22.90,19.78,19.70,14.49,14.41。
C22H27Cl2N3O2(MW=436.39)；質譜(MH+)436。
實施例53N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基-2-苯基乙醇的合成根據上述通用方法E，用N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例A)和(S)-(+)-2-苯基甘氨醇(Aldrich)，製備為固體的目標化合物(mp=66-70℃)。經矽膠tlc監測該反應(Rf=0.25，用5％甲醇/二氯甲烷展開)，並經快速柱層析純化該化合物，矽膠，用5％甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.4-7.1(m,6H),6.75(d,J=3Hz,1H),6.5-6.4(m,1H),5(m,1H),4.2-4.0(m,J=4Hz,1H),3.8(2H),1.7(s,1H),1.55(m,3H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=174,146,139,134,131.8,129.5,128.5,127,123,116,114,112,67,56.5,55.5,20。
C16H18Cl2N2O2(MW=341)；質譜(MH+)342。
實施例54和55N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-苯基甘氨醯基H-丙氨酸甲酯的合成根據上述通用方法E，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-苯基甘氨酸(得自上述實施例J)和L-丙氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，製備目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.95，用3％甲醇/二氯甲烷展開)，並經從乙酸乙酯、己烷和乙醚中重結晶純化該化合物。得到兩個部分分離的非對映體的混合物NMR數據如下1H-nmr(CDCl3-75％異構體A/25％異構體B):δ=7.45-7.35(m,5H),6.7(m,2H),6.47(m,2H),5.1-5.0(dd,J=3Hz,1H),4.75(d,J=3.5Hz,1H),4.65-4.5(m,7.2Hz,1H),3.75-3.68(2s,3∶1的比例,3H),1.43-1.3(2d,3∶1的比例，J=7.2Hz,3H)。
13C-nmr(CDCl3-75％異構體A/25％異構體B):δ=173.27,170.24,148.61,138.23,136.07,136.00,130.11,129.60,129.58,127.83,127.69,119.10,112.68,112.56,78.03,63.27,53.20,48.94,18.85。
1H-nmr(CDCl3-25％異構體A/75％異構體B):δ=7.45-7.35(m,5H),6.7(m,2H),6.47(m,2H),5.1-5.0(2×d,J=3Hz,1H),4.75(d,J=3.5Hz,1H),4.65-4.5(m,J=7.2 Hz,1H),3.75-3.68(2s,3∶1的比例，3H),1.43-1.3(2d,1∶3的比例，J=7.2Hz,3H)。
13C-nmr(CDCl3-25％異構體A/75％異構體B):δ=173.27,170.24,148.61,138.23,136.07,136.00,130.11,129.60,129.58,127.83,127.69,119.10,112.68,112.56,78.03,63.27,53.20,48.94,18.85。
C18H18N2O3Cl2(MW=381.26)；質譜(MH+)381。
實施例56N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己醇的合成根據上述通用方法Ⅰ，用N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己酸甲酯(得自上述實施例15)，製備為油狀物的目標化合物。經矽膠tlc監測該反應(Rf=0.16和0.17，用5％甲醇/二氯甲烷展開)，並經製備性板層析純化該化合物，用5％甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑。
NMR數據如下1H-nmr(CD3OD):δ=7.20(d,1H),6.79(m,1H),6.68(dd,1H),6.43(d,1H),4.42(bd,0.6H),4.30(bd,0.4H),3.89(m,1H),3.75(m,1H),3.70-3.40(m,2H),1.60-0.95(m,9H),0.90-0.70(m,3H)。
13C-nmr(CD3OD):δ=174.42,174.17,146.06,145.96,132.89,132.85,130.74,130.69,121.64,121.49,114.98,114.70,113.14,113.08,65.42,65.11,55.00,54.76,51.69,51.48,30.67,30.59,28.16,28.00,22.48,22.36,19.44,13.92,13.82。
C15H22C12N2O2(MW=333.26)；質譜(MH+)333。
實施例57N-[N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基-2-苯基乙醇的合成根據上述通用方法E，用N-(3,5-二氯苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例B)和(S)-(+)-2-苯基甘氨醇(Aldrich)，製備目標化合物。
實施例58N-[N-(3,5-二氨苯基)-L-丙氨醯基]-L-苯基甘氨酸叔丁酯的合成根據通用方法D(不用1N鹽酸洗滌)，用N-(3,5-二氯苯基)-L-丙氨酸(根據通用方法J使3,5-二氯苯胺(Aldrich)和R-(+)-乳酸叔丁酯(Aldrich)反應，接著根據通用方法C進行水解製備)和L-苯基甘氨酸叔丁酯鹽酸鹽(Bachem)，製備目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.39，用25％乙酸乙酯/己烷展開)，並經製備性板層析純化該化合物，用25％乙酸乙酯/己烷展開。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.55(bd,J=7.39Hz,1H),7.30(s,5H),6.73(t,J=1.68Hz,1H),6.46(d,J=1.71Hz,2H),5.45(d,J=7.45Hz,1H),4.47(d,J=5.19Hz,1H),3.82(m,1H),1.40(d,J=6.96Hz,3H),1.34(s,9H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=173.23,169.92,148.93,137.43,136.07,129.40,128.85,127.40,119.04,112.48,83.42,57.37,54.70,28.29,19.79。
C21H24N2O3Cl2(MW=423.34)；質譜(MH+)423。
實施例59N-[N-(3,5-二(三氟甲基)苯基)-L-丙氨醯基]-L-苯基甘氨酸叔丁酯的合成根據通用方法D，用N-[3,5-二(三氟甲基)苯基]-L-丙氨酸(得自上述實施例G)和L-苯基甘氨酸叔丁酯鹽酸鹽(Bachem)，製備目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.46，用25％乙酸乙酯/己烷展開)。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=7.39(d,J=7.39Hz,1H),7.29(s,5H),6.96(s,2H),5.45(d,J=7.51Hz,1H),4.69(d,J=5.31Hz,1H),3.95(m,1H),1.48(d,J=6.96Hz,3H),1.33(s,9H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=172.7,169.9,147.9,137.3,132.8,132.4,129.42,139.34,129.31,128.9,127.4,127.2,127,122.1,113.50,113.47,112.34,112.29,112.24,83.5,57.3,54.6,28.34,28.30,28.2,19.8。
C23H24N2O3F6(MW=490.45)。
實施例60N-[N-(3,5-二甲氧基苯基)-D,L-丙氨醯基]-(S)-2-氨基己酸甲酯-的合成根據通用方法E(用稀鹽酸洗滌，用乙酸乙酯萃取)，用N-(3,5-二甲氧基苯基)-D,L-丙氨酸(得自上述實施例H)和L-正亮氨酸甲酯鹽酸鹽(Sigma)，製備為淡黃色油狀物的目標化合物。經tlc監測該反應(Rf=0.3，用30％乙酸乙酯/己烷展開)。
NMR數據如下1H-nmr(CDCl3):δ=0.6-0.9(在0.72和0.82處有兩個三峰，J=7Hz,3H),1.0-1.9(m,9H),3.6-3.7(在3.60、3.65、3.66和3.67處有四個單峰，10H),3.7-3.8(m,1H),4.6-4.7(m,1H),5.7-5.95(m,3H),7.1-7.3(m,1H)。
13C-nmr(CDCl3):δ=14.21,14.35,19.8,20.0,22.69,22.74,27.8,28.0,32.20,32.45,52.18,52.57,52.65,52.78,55.31,55.52,55.59,55.63,91.6,91.8,92.86,93.24,149.02,149.27,162.11,162.18,173.02,173.44,174.47,174.82。
C18H28N2O5(MW=352.43)。
實施例61β-澱粉狀蛋白產生的抑制劑的檢測的細胞篩選在具有Swedish突變的細胞系中測定上述多種式Ⅰ化合物，以評價它們抑制β-澱粉狀蛋白產生的能力。該篩選測定使用細胞(K293=人腎細胞系)，可以根據國際專利公布號94/105698和Citron等11所述的方法，用澱粉狀蛋白前體蛋白751(APP751)基因對該細胞系進行穩定轉染，所述前體蛋白具有雙突變，即由Lys651Met652突變為Asn651Leu652(APP751編號)。該突變通常被稱為Swedish突變，將稱為「293 751 SWE」的細胞以每孔1.5-2.5×104細胞的濃度加至Coming 96-孔培養板的各孔(含有購自Sigma,St.Louis,MO的Dulbecco氏極限必需培養基+10％胎牛血清)中。為了在測定的線性範圍內(約0.2-2.5ng/ml)獲得β-澱粉狀蛋白的ELISA結果，細胞的數目是很重要的。
於37℃、在用10％二氧化碳平衡的孵箱內孵育過夜後，去除培養基，每孔加入200μl含有式Ⅰ化合物(藥物)的培養基替代進行兩個小時的預處理，並如前孵育細胞。在100％的DMSO中製備藥物儲備液，使在處理時所用的藥物終濃度中，二甲基亞碸的濃度不超過0.5％，事實上通常為0.1％。
在預處理結束後，再次去除培養基，用含有藥物的新鮮培養基代替，將細胞再孵育兩個小時。處理後，於室溫、1200rpm，將培養板在Beckman GPR上離心5分鐘，以從條件培養基中沉澱細胞碎片。根據國際專利公布號94/105698所述方法，從各孔中取100μl條件培養基或其適當的稀釋液，轉移至用抗體266[P.Seubert,Nature(1992)359:325-327]預包被的ELISA培養板上，該抗體為β-澱粉樣肽的胺基酸13-28的抗體，將上述培養板於4℃儲存過夜。在第二天，用標記抗體6C6[P.Seubert,Nature(1992)359:325-327]進行ELISA測定，以檢測β-澱粉樣肽產生的量，該抗體為抗β-澱粉樣肽胺基酸1-16的抗體。
根據Hansen等12方法的改良方法，測定化合物的細胞毒效應。向組織培養板中的殘留細胞中加入25μl的3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑鎓溴化物(MTT)(購自Sigma,St.Louis,MO)儲備液(5mg/ml)，至終濃度為1mg/ml。於37℃，將細胞孵育1小時，加入等體積的MTT裂解緩衝液(20％w/v十二烷基硫酸鈉的50％二甲基甲醯胺溶液，pH4.7)終止細胞活性。於室溫振搖過夜以獲得完全萃取。在Molecular Device’s UVmax微量滴定板讀板儀上測定OD562nm和OD650nm的差異，作為細胞生存率的指標。
將β-澱粉樣肽ELISA的結果擬合為標準曲線，並以ng/ml的β-澱粉樣肽表示。為進行細胞毒性的歸一化，將這些結果除以MTT的結果，並以不含藥物的對照結果的百分比表示。所有的結果為至少六個重複測定的平均值和標準差。
用該測定檢測受試化合物在細胞中對β-澱粉樣肽產生的抑制活性。該測定的結果證明與對照相比，實施例1-60中的每個化合物均對β-澱粉樣肽產生至少有30％的抑制。
實施例62β-澱粉狀蛋白釋放和/或合成的體內抑制該實施例說明如何檢測本發明的化合物對β-澱粉狀蛋白釋放和/或合成的體內抑制。在這些實驗中，使用3-5月齡的PDAPP小鼠[Games等(1995)Nature 373:523-527]。根據待實驗的化合物的不同，通常將化合物配製為5或10mg/ml的濃度。由於這些化合物的低的溶解性的因素，所以可以在各種溶媒中進行配製，如玉米油(Safeway,South San Francisco,CA)；10％乙醇玉米油；2-羥丙基-β-環糊精(Research Biochemicals Intemational,Natick MA)以及羧甲基纖維素(Sigma Chemical Co.,St.Louis MO)。
用26號針皮下給小鼠藥物，3小時後，經二氧化碳窒息使所述動物安樂死，用1 cc 25G 5/8」結核菌素注射器/針(塗有0.5M EDTA溶液，pH8.0)進行心臟穿剌取血。將血液置於含有EDTA的Becton-Dickinson真空(vacutainer)管中，於5℃、以1500×g旋轉15分鐘。然後取出小鼠腦，解剖出皮層和海馬，置於冰上。
1．腦測定用Kontes電動研棒(Fisher,Pittsburgh PA)，將每個腦區域在10倍體積的冰冷的胍緩衝液(5.0M鹽酸胍，50mM Tris-HCl,pH8.0)中勻化，以製備用於酶聯免疫吸附測定(ELISAs)的海馬和皮層組織。於室溫下，將勻漿在旋轉臺上輕輕搖動3-4小時，於-20℃儲存待進行β-澱粉狀蛋白的定量。
用冰冷的酪蛋白緩衝液
以1∶10稀釋腦勻漿，因此胍的終濃度降低為0.5M，然後於4℃、16,000×g離心20分鐘。製備β-澱粉狀蛋白標準品(1-40或1-42胺基酸)，使終組成含有0.5M胍和0.1％牛血清白蛋白(BSA)。
總的β-澱粉狀蛋白夾層ELISA含有β-澱粉狀蛋白的兩個單克隆抗體(mAb)，該夾層ELISA可定量β-澱粉狀蛋白(aa1-40)和β-澱粉狀蛋白(aa1-42)。捕捉抗體266[P.Seubert,Nature(1992)359:325-327]為β-澱粉狀蛋白的胺基酸13-28的特異抗體。生物素化的抗體3D6[Johnson-Wood等，PNAS USA(1997)94:1550-1555]為β-澱粉狀蛋白的胺基酸1-5的特異抗體，該抗體在測定中用作報告抗體。3D6生物素化的方法根據生產商[pierce,Rockford IL]關於免疫球蛋白的NHS-生物素標記的方法，但是用100mM碳酸氫鈉的pH為8.5的緩衝液。3D6抗體不能識別分泌的澱粉狀蛋白的前體蛋白(APP)或全長的APP，但是可以檢測具有氨基末端天冬氨酸的β-澱粉狀蛋白類。該測定的敏感度下限約為50pg/ml(11pM)，在濃度高至1ng/ml時對內源性β-澱粉樣肽不顯示交叉反應性。
定量β-澱粉狀蛋白水平的夾層ELISA構型使用作為捕捉抗體的mAb 21F12[Johnson-Wood等，PNAS USA(1997)94:1550-1555](可以識別β-澱粉狀蛋白的胺基酸33-42)。在該測定中使用的生物素化的3D6也是報告抗體，其敏感度下限約為125pg/ml(28pM)。
於室溫下，將266和21F12捕捉mABs在96孔免疫培養板(Costar,Cambidge MA)中以10μg/mL包被過夜。然後吸出培養板中的培養基，於室溫下，用0.25％人血清白蛋白的PBS緩衝液封閉至少1小時，然後於4℃、乾燥下儲存待用。將樣品和標準品加至培養板中，於4℃孵育過夜。在測定的每個步驟之間均用洗滌緩衝液將所述培養板洗滌至少3次。於室溫下，將生物素化的3D6(用酪蛋白孵育緩衝液(0.25％酪蛋白，PBS,0.05％Tween 20,pH7.4)稀釋至0.5μg/ml)在各孔中孵育1小時。於室溫下，將用酪蛋白孵育緩衝液以1∶4000稀釋的抗生物素蛋白-HRP(載體，Burlingame CA)加至各孔中1小時。加入生色底物SloW TMB-ELISA(Pierce,CambridgeMA)，使其反應15分鐘，然後加入2N硫酸終止酶反應。用MolecularDevices Vmax(Molecular Devices,Menlo Park CA)，於450nm和650nm處測定吸收度的差異，以對反應產物進行定量。
2．血液測定將EDTA血漿在樣品稀釋液(0.2g/L磷酸鈉一水合物(一元鹼)、2.1 6g/L磷酸鈉七水合物(二元鹼)、0.5g/L硫柳汞，8.5g/L氯化鈉，0.5ml Triton X-405,6.0g/L不含球蛋白的牛血清白蛋白和水)中進行1∶1稀釋。根據上述腦測定中所述方法，用總β-澱粉狀蛋白測定(266捕捉/3D6報告抗體)測定樣品稀釋液中的樣品和標準品，但是用樣品稀釋液代替所述的酪蛋白稀釋液。
從上述的描述中可以看出，本領域的技術人員可以對組合物和方法進行各種修改和改變。所有此類修改均在所附的權利要求包括的範圍內。
序列表(1)一般資料(ⅰ)申請人ATHENA NEUROSCIENCES,INC.
ELILILLYCOMPANYJAMES E.AUDIABEVERLY K.FOLMERVARCHESE JOHNLEE H.LATIMERJEFFREY S.NISSENWARREN J.PORTEREUGENE D.PHORSETTJING WU(ⅱ)發明名稱N-(芳基/雜芳基)胺基酸衍生物、包括這些衍生物的藥用組合物以及用這些化合物抑制β-澱粉樣肽釋放和/或其合成的方法(ⅲ)序列數1(ⅳ)通信地址
(A)收信人Burns,Doane,SweckerMathis,LLP(B)街道P.O.Box 1404(C)城市Alexandria(D)州Virginia(E)國家美國(F)郵政編碼22313-1404(ⅴ)計算機可讀形式(A)媒體類型軟盤(B)計算機IBM兼容機(C)作業系統PC-DOS/MS-DOS(D)軟體PatentIn Release#1.0，版本1.30(ⅵ)當前申請數據(A)申請號未頒發(B)提交日期Unassigned(C)分類(ⅶ)在先申請數據(A)申請號US 08/755,334(B)提交日期1996年11月22日(ⅷ)代理律師/代理人資料(A)姓名Swiss,Gerald F.
(B)註冊號30,113(C)參考/檔案號002010-057(ⅸ)電訊資料
(A)電話650-854-7400(B)傳真650-854-8275(2)SEQ ID NO:1的信息(ⅰ)序列特徵(A)長度43個胺基酸(B)類型肽(D)拓撲學線性(ⅱ)分子類型肽(ⅹⅰ)序列描述SEQ ID NO 1Asp Ala Glu Phe Arg His Asp Ser Gly Tyr Glu Val His His1 5 10Gln Lys Leu Val Phe Phe Ala Glu Asp Val Gly Ser Asn Lys15 20 25Gly Ala Ile Ile Gly Leu Met Val Gly Gly Val Val Ile Ala30 35 40Thr
權利要求
1．在細胞中抑制β-澱粉樣多肽釋放和/或其合成的方法，該方法包括給予此類細胞抑制細胞內β-澱粉樣多肽釋放和/或其合成有效量的化合物或化合物的混合物，其中所述化合物由式Ⅰ代表
Ⅰ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自醯基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、滷代、氫、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環稠合形成雜芳基或雜環，Rb和Rb』獨立選自氫、滷代、硝基、氰基、三滷代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當Rc為氫時，那麼Rb和Rb』或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、滷代、氰基、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、滷代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、1-4個碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環烷基、環烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-滷代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環，(i)-NR』R」，其中R』和R」獨立選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環，以及R』和R」結合形成具有2-8個碳原子、任選還含有1-2個選自氧、硫和氮的雜原子的環基團，並任選被一個或多個烷基或烷氧基取代，和當R3含有至少3個碳原子時，X也可以為-CR4R4Y』，其中每個R4獨立選自氫、烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，Y』選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，前提為當R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的苄基時，那麼X不為-C(O)OCH3。
2．在有AD發病危險的病人中預防AD起病的方法，該方法包括給予所述病人包括藥用惰性載體以及有效量的式Ⅰ化合物或化合物的混合物的藥用組合物
Ⅰ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自醯基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、滷代、氫、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環稠合形成雜芳基或雜環，Rb和Rb』獨立選自氫、滷代、硝基、氰基、三滷代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當Rc為氫時，那麼Rb和Rb』或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、滷代、氰基、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、滷代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、1-4個碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環烷基、環烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-滷代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環，(i)-NR』R」，其中R』和R」獨立選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環，以及R』和R」結合形成具有2-8個碳原子、任選還含有1-2個選自氧、硫和氮的雜原子的環基團，並任選被一個或多個烷基或烷氧基取代，和當R3含有至少3個碳原子時，X也可以為-CR4R4Y』，其中每個R4獨立選自氫、烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，Y』選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，前提為當R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的苄基時，那麼X不為-C(O)OCH3。
3．治療患有AD的病人以抑制該病人病情進一步惡化的方法，該方法包括給予所述病人包括藥用惰性載體以及有效量的式Ⅰ化合物或化合物的混合物的藥用組合物
Ⅰ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自醯基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、滷代、氫、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環稠合形成雜芳基或雜環，Rb和Rb』獨立選自氫、滷代、硝基、氰基、三滷代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當Rc為氫時，那麼Rb和Rb』或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、滷代、氰基、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、滷代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與連接-NH基團的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、1-4個碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環烷基、環烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-滷代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環，(i)-NR』R」，其中R』和R」獨立選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環，以及R』和R」結合形成具有2-8個碳原子、任選還含有1-2個選自氧、硫和氮的雜原子的環基團，並任選被一個或多個烷基或烷氧基取代，和當R3含有至少3個碳原子時，X也可以為-CR4R4Y』，其中每個R4獨立選自氫、烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，Y』選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，前提為當R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的苄基時，那麼X不為-C(O)OCH3。
4．權利要求1、2或3的方法，其中R1為苯基、2-萘基、喹啉-3-基、苯並噻唑-6-基和5-吲哚基。
5．權利要求1、2或3的方法，其中R1為下式的取代的苯基
其中Rc選自醯基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、滷代、氫、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環稠合形成雜芳基或雜環，Rb和Rb』獨立選自氫、滷代、硝基、氰基、三滷代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當Rc為氫時，那麼Rb和Rb』或者都為氫或者都為不是氫的取代基。
6．權利要求1、2或3的方法，其中R1為在4、5、6、7和/或8位被1-5個選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、滷代、氰基、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基。
7．權利要求1、2或3的方法，其中R1為含有1-3個選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、滷代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與連接-NH基團的雜芳基不是鄰位。
8．權利要求7的方法，其中R1為4-取代的、3,5-二取代的或3,4-二取代的苯基。
9．權利要求8的方法，其中R1為3,5-二取代的苯基。
10．權利要求9的方法，其中所述3,5-二取代的苯基選自3,5-二氯苯基、3,5-二氟苯基、3,5-二(三氟甲基)苯基和3,5-二甲氧基苯基。
11．權利要求8的方法，其中R1為3,4-二取代的苯基。
12．權利要求11的方法，其中所述3,4-二取代的苯基選自3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、3-(三氟甲基)-4-氯苯基、3-氯-4-氰基苯基、3-氯-4-碘苯基和3,4-亞甲基二氧基苯基。
13．權利要求8的方法，其中R1為4-取代的苯基。
14．權利要求13的方法，其中所述4-取代的苯基選自4-疊氮基苯基、4-溴代苯基、4-氯代苯基、4-氰基苯基、4-乙基苯基、4-氟代苯基、4-碘代苯基、4-(苯基羰基)苯基和4-(1-乙氧基)乙基苯基。
15．權利要求1、2或3的方法，其中R1為2-甲基喹啉-6-基。
16．權利要求1、2或3的方法，其中R2選自1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、1-4個碳原子的烷基硫代烷氧基和芳基。
17．權利要求16的方法，其中R2選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、-CH2CH2SCH3和苯基。
18．權利要求1、2或3的方法，其中R3為烷基。
19．權利要求18的方法，其中所述烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和仲丁基。
20．權利要求1、2或3的方法，其中R3為取代的烷基。
21．權利要求20的方法，其中所述取代的烷基選自α-羥基乙基、-CH2-環己基、苄基、對-羥基苄基、3-碘代-4-羥基苄基、3,5-二碘代-4-羥基苄基、-CH2-吲哚-3-基、-(CH2)4-NH-BOC、-(CH2)4-NH2、-CH2-(1-N-苄基-咪唑-4-基)、-CH2-咪唑-4-基、-CH2CH2SCH3、-(CH2)4NHC(O)(CH2)3CH3和-(CH2)yC(O)OR5，其中y為1或2,R5氫、甲基或叔丁基。
22．權利要求1、2或3的方法，其中X為-C(O)Y，其中Y選自烷氧基和硫代烷氧基。
23．權利要求22的方法，其中Y為選自下列的烷氧基甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基和叔丁氧基。
24．權利要求1、2或3的方法，其中X為-C(O)Y,Y為-NR』R」，其中R』和R」獨立選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環，以及R』和R」結合形成具有2-8個碳原子、任選還含有1-2個選自氧、硫和氮的雜原子的環基團，並任選被一個或多個烷基或烷氧基取代。
25．權利要求24的方法，其中Y選自氨基(-NH2)、N-(異丁基)氨基、N-甲氨基、N,N-二甲氨基和N-苄氨基。
26．權利要求1、2或3的方法，其中X為-CH2OH。
27．權利要求1、2或3的方法，其中所述式Ⅰ化合物選自下列化合物及其藥學上可接受的鹽N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N-異丁醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]蘇氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸乙酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸叔丁酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨醯胺N-(3,4-二氯苯基)丙氨酸N-(1-羥基-3-甲基-2-丁基)醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N,N-二甲基醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N-甲基醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]異亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]色氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-N-BOC-賴氨酸甲酯N-[N-苯並噻唑-6-基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-1-苄基組氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]穀氨酸γ-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]亮氨醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]穀氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-(3,5-二碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-(3-碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)甘氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-Nε-(己醯基)賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-β-環己基丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N,N-二甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]甲硫氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N,N-二甲基)-醯胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醯胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]組氨酸甲酯N-[N-(喹啉-3-基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-苯並噻唑-2-基)-L-丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-S-2-氨基己醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-苄基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)苯基甘氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醇N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二-(三氟甲基)苯基)-L-丙氨醯基]-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二甲氧基苯基)-L-丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯。
28．含有藥用惰性載體和藥學上有效量的式Ⅰ化合物的藥用組合物
Ⅰ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自醯基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、滷代、氫、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環稠合形成雜芳基或雜環，Rb和Rb』獨立選自氫、滷代、硝基、氰基、三滷代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當Rc為氫時，那麼Rb和Rb』或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個選自下列取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、滷代、氰基、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、滷代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、1-4個碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環烷基、環烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-滷代烷基、α-重氮烷基α-OC(O)或烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環，(i)-NR』R」，其中R』和R」獨立選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環，以及R』和R」結合形成具有2-8個碳原子、任選還含有1-2個選自氧、硫和氮的雜原子的環基團，並任選被一個或多個烷基或烷氧基取代，和當R3含有至少3個碳原子時，X也可以為-CR4R4Y』，其中每個R4獨立選自氫、烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，Y』選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，前提為當R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的苄基時，那麼X不為-C(O)OCH3。
29．權利要求26的藥用組合物，其中R1為苯基、2-萘基、喹啉-3-基、苯並噻唑-6-基和5-吲哚基。
30．權利要求26的藥用組合物，其中R1為下式的取代的苯基
其中Rc選自醯基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、滷代、氫、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環稠合形成雜芳基或雜環，Rb和Rb』獨立選自氫、滷代、硝基、氰基、三滷代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當Rc為氫時，那麼Rb和Rb』或者都為氫或者都為不是氫的取代基。
31．權利要求26的藥用組合物，其中R1為在4、5、6、7和/或8位被1-5個選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、滷代、氰基、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基。
32．權利要求26的藥用組合物，其中R1為含有1-3個選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、滷代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與連接-NH基團的雜芳基不是鄰位。
33．權利要求30的藥用組合物，其中R1為4-取代的、3,5-二取代的或3,4-二取代的苯基。
34．權利要求31的藥用組合物，其中R1為3,5-二取代的苯基。
35．權利要求32的藥用組合物，其中所述3,5-二取代的苯基選自3,5-二氯苯基、3,5-二氟苯基、3,5-二(三氟甲基)苯基和3,5-二甲氧基苯基。
36．權利要求31的藥用組合物，其中R1為3,4-二取代的苯基。
37．權利要求34的藥用組合物，其中所述3,4-二取代的苯基選自3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、3-(三氟甲基)-4-氯代苯基、3-氯-4-氰基苯基、3-氯-4-碘代苯基和3,4-亞甲基二氧基苯基。
38．權利要求31的藥用組合物，其中R1為4-取代的苯基。
39．權利要求36的藥用組合物，其中所述4-取代的苯基選自4-疊氮基苯基、4-溴代苯基、4-氯代苯基、4-氰基苯基、4-乙基苯基、4-氟代苯基、4-碘代苯基、4-(苯基羰基)苯基和4-(1-乙氧基)乙基苯基。
40．權利要求26的藥用組合物，其中R1為2-甲基喹啉-6-基。
41．權利要求26的藥用組合物，其中R2選自1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、1-4個碳原子的烷基硫代烷氧基和芳基。
42．權利要求39的藥用組合物，其中R2選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、-CH2CH2SCH3和苯基。
43．權利要求26的藥用組合物，其中R3為烷基。
44．權利要求41的藥用組合物，其中所述烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和仲丁基。
45．權利要求26的藥用組合物，其中R3為取代的烷基。
46．權利要求43的藥用組合物，其中所述取代的烷基選自α-羥基乙基、-CH2-環己基、苄基、對-羥基苄基、3-碘代-4-羥基苄基、3,5-二碘代-4-羥基苄基、-CH2-吲哚-3-基、-(CH2)4-NH-BOC、-(CH2)4-NH2、-CH2-(1-N-苄基-咪唑-4-基)、-CH2-咪唑-4-基、-CH2CH2SCH3、-(CH2)4NHC(O)(CH2)3CH3和-(CH2)yC(O)OR5，其中y為1或2,R5為氫、甲基或叔丁基。
47．權利要求26的藥用組合物，其中X為-C(O)Y，其中Y選自烷氧基和硫代烷氧基。
48．權利要求45的藥用組合物，其中Y為選自下列的烷氧基甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基和叔丁氧基。
49．權利要求26的藥用組合物，其中X為-C(O)Y,Y為-NR』R」，其中R』和R」獨立選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環，以及R』和R」結合形成具有2-8個碳原子、任選還含有1-2個選自氧、硫和氮的雜原子的環基團，並任選被一個或多個烷基或烷氧基取代。
50．權利要求47的藥用組合物，其中Y選自氨基(-NH2)、N-(異丁基)氨基、N-甲氨基、N,N-二甲氨基和N-苄氨基。
51．權利要求26的藥用組合物，其中X為-CH2OH。
52．權利要求26的藥用組合物，其中所述式Ⅰ化合物選自下列化合物及其藥學上可接受的鹽N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N-異丁醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]蘇氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸乙酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸叔丁酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨醯胺N-(3,4-二氯苯基)丙氨酸N-(1-羥基-3-甲基-2-丁基)醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N,N-二甲基醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N-甲基醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]異亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]色氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-N-BOC-賴氨酸甲酯N-[N-苯並噻唑-6-基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-1-苄基組氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]穀氨酸γ-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]亮氨醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]穀氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-(3,5-二碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-(3-碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)甘氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-Nε-(己醯基)賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-β-環己基丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N,N-二甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]甲硫氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N,N-二甲基)-醯胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醯胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]組氨酸甲酯N-[N-(喹啉-3-基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-苯並噻唑-2-基)-L-丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-S-2-氨基己醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-苄基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)苯基甘氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醇N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二-(三氟甲基)苯基)-L-丙氨醯基]-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二甲氧基苯基)-L-丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯。
53．式Ⅲ化合物
Ⅲ其中R1選自(a)苯基，(b)式Ⅱ的取代的苯基
Ⅱ其中Rc選自醯基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、滷代、氫、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環稠合形成雜芳基或雜環，Rb和Rb』獨立選自氫、滷代、硝基、氰基、三滷代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當Rc為氫時，那麼Rb和Rb』或者都為氫或者都為不是氫的取代基，(c)2-萘基，(d)在4、5、6、7和/或8位被1-5個選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、滷代、氰基、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基，(e)雜芳基，和(f)含有1-3個選自下列取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、滷代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與-NH基團連接的雜芳基不是鄰位；R2選自氫、1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、1-4個碳原子的烷基硫代烷氧基、芳基、雜芳基、取代的芳基和取代的雜芳基，前提為所述取代基與所述碳原子連接的芳基或雜芳基原子不是鄰位；R3選自烷基、鏈烯基、炔基、芳基、環烷基、環烯基、雜芳基、取代的烷基、取代的鏈烯基、取代的炔基和雜環；X為-C(O)Y，其中Y選自(a)烷基，(b)取代的烷基，前提為所述取代的烷基上的取代不包括α-滷代烷基、α-重氮烷基或α-OC(O)烷基，(c)烷氧基或硫代烷氧基，(d)取代的烷氧基或取代的硫代烷氧基，(e)羥基，(f)芳基，(g)雜芳基，(h)雜環，(i)-NR』R」，其中R』和R」獨立選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環，以及R』和R」結合形成具有2-8個碳原子、任選還含有1-2個選自氧、硫和氮的雜原子的環基團，並任選被一個或多個烷基或烷氧基取代，和當R3含有至少3個碳原子時，X也可以為-CR4R4Y』，其中每個R4獨立選自氫、烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，Y』選自羥基、氨基、硫羥基、-OC(O)R5、-SSR5、-SSC(O)R5，其中R5選自烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基和雜環，前提為當R1為3,4-二氯苯基，R2為甲基，R3為由D-苯丙氨酸衍生的苄基時，那麼X不為-C(O)OCH3，另外的前提為不包括下列已知的化合物當R1為苯基，R2為甲基，X為-C(O)NHΦ時，那麼R3不是甲基、異丙基、異丁基；和當R1為苯基，R2為甲基，X為-C(O)NH2時，那麼R3不是苄基。
54．權利要求51的化合物，其中R1為苯基、2-萘基、喹啉-3-基、苯並噻唑-6-基和5-吲哚基。
55．權利要求51的化合物，其中R1為下式的取代的苯基
其中Rc選自醯基、烷基、烷氧基、烷基烷氧基、疊氮基、氰基、滷代、氫、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基，以及Rb和Rc與苯基環稠合形成雜芳基或雜環，Rb和Rb』獨立選自氫、滷代、硝基、氰基、三滷代甲基、烷氧基和硫代烷氧基，前提為當Rc為氫時，那麼Rb和Rb』或者都為氫或者都為不是氫的取代基。
56．權利要求51的化合物，其中R1為在4、5、6、7和/或8位被1-5個選自下列的取代基取代的2-萘基烷基、烷氧基、滷代、氰基、硝基、三滷代甲基、硫代烷氧基、芳基和雜芳基。
57．權利要求51的化合物，其中R1為含有1-3個選自下列的取代基的取代的雜芳基烷基、烷氧基、芳基、芳氧基、氰基、滷代、硝基、雜芳基、硫代烷氧基和硫代芳氧基，前提為所述取代基與連接-NH基團的雜芳基不是鄰位。
58．權利要求55的化合物，其中R1為4-取代的、3,5-二取代的或3,4-二取代的苯基。
59．權利要求56的化合物，其中R1為3,5-二取代的苯基。
60．權利要求57的化合物，其中所述3,5-二取代的苯基選自3,5-二氯苯基、3,5-二氟苯基、3,5-二(三氟甲基)苯基和3,5-二甲氧基苯基。
61．權利要求56的化合物，其中R1為3,4-二取代的苯基。
62．權利要求59的化合物，其中所述3,4-二取代的苯基選自3,4-二氯苯基、3,4-二氟苯基、3-(三氟甲基)-4-氯代苯基、3-氯-4-氰基苯基、3-氯-4-碘代苯基和3,4-亞甲基二氧基苯基。
63．權利要求56的化合物，其中R1為4-取代的苯基。
64．權利要求61的化合物，其中所述4-取代的苯基選自4-疊氮基苯基、4-溴代苯基、4-氯代苯基、4-氰基苯基、4-乙基苯基、4-氟代苯基、4-碘代苯基、4-(苯基羰基)苯基和4-(1-乙氧基)乙基苯基。
65．權利要求51的化合物，其中R1為2-甲基喹啉-6-基。
66．權利要求51的化合物，其中R2選自1-4個碳原子的烷基、1-4個碳原子的烷基烷氧基、1-4個碳原子的烷基硫代烷氧基和芳基。
67．權利要求64的化合物，其中R2選自甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、-CH2CH2SCH3和苯基。
68．權利要求51的化合物，其中R3為烷基。
69．權利要求66的化合物，其中所述烷基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基和仲丁基。
70．權利要求51的化合物，其中R3為取代的烷基。
71．權利要求68的化合物，其中所述取代的烷基選自α-羥基乙基、-CH2-環己基、苄基、對-羥基苄基、3-碘代-4-羥基苄基、3,5-二碘代-4-羥基苄基、-CH2-吲哚-3-基、-(CH2)4-NH-BOC、-(CH2)4-NH2、-CH2-(1-N-苄基-咪唑-4-基)、-CH2-咪唑-4-基、-CH2CH2SCH3、-(CH2)4NHC(O)(CH2)3CH3和-(CH2)yC(O)OR5，其中y為1或2,R5為氫、甲基或叔丁基。
72．權利要求51的化合物，其中X為-C(O)Y，其中Y選自烷氧基和硫代烷氧基。
73．權利要求70的化合物，其中Y為選自下列的烷氧基甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基和叔丁氧基。
74．權利要求51的化合物，其中X為-C(O)Y,Y為-NR』R」，其中R』和R」獨立選自氫、烷基、取代的烷基、環烷基、芳基、雜芳基、雜環，以及R』和R」結合形成具有2-8個碳原子、任選還含有1-2個選自氧、硫和氮的雜原子的環基團，並任選被一個或多個烷基或烷氧基取代。
75．權利要求72的化合物，其中Y選自氨基(-NH2)、N-(異丁基)氨基、N-甲氨基、N,N-二甲氨基和N-苄氨基。
76．權利要求51的化合物，其中X為-CH2OH。
77．權利要求51的化合物，其中所述式Ⅰ化合物選自下列化合物及其藥學上可接受的鹽N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N-異丁醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]蘇氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸乙酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸叔丁酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨醯胺N-(3,4-二氯苯基)丙氨酸N-(1-羥基-3-甲基-2-丁基)醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N,N-二甲基醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]纈氨酸N-甲基醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]異亮氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]色氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸β-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-N-BOC-賴氨酸甲酯N-[N-苯並噻唑-6-基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]天冬氨酸β-(甲酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-1-苄基組氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]穀氨酸γ-(叔丁酯)α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]亮氨醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]穀氨酸α-甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-(3,5-二碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-(3-碘代)酪氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)甘氨醯基]-2-氨基戊酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-Nε-(己醯基)賴氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]苯丙氨醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-β-環己基丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N,N-二甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]甲硫氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N,N-二甲基)-醯胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醯胺N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-甲基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]組氨酸甲酯N-[N-(喹啉-3-基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-苯並噻唑-2-基)-L-丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,5-二氟苯基)丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-S-2-氨基己醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己-(N-苄基)-醯胺N-[N-(3,4-二氯苯基)-D,L-丙氨醯基]-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)苯基甘氨醯基]丙氨酸甲酯N-[N-(3,4-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基己醇N-[N-(3,5-二氯苯基)丙氨醯基]-2-氨基-2-苯基乙醇N-[N-(3,5-二氯苯基)-L-丙氨醯基]-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二-(三氟甲基)苯基)-L-丙氨醯基]-L-苯基甘氨酸叔丁酯N-[N-(3,5-二甲氧基苯基)-L-丙氨醯基]-2-氨基己酸甲酯。
全文摘要
公開可以抑制β－澱粉樣肽釋放和/或其合成並因此可以治療阿爾茨海默氏病的化合物。也公開含有可以抑制β－澱粉樣肽釋放和/或其合成的化合物的藥用組合物，以及用此藥用組合物預防和治療阿爾茨海默氏病的方法。
文檔編號A61P25/28GK1237978SQ97199776
公開日1999年12月8日 申請日期1997年11月20日 優先權日1996年11月22日
發明者J·E·奧迪爾, B·K·福爾默, V·約翰, L·H·拉蒂默, J·S·尼森, W·J·波特, E·D·託爾瑟特, J·吳 申請人:伊蘭藥品公司, 伊萊利利公司