石斛育苗方法與流程
2023-04-22 21:26:21 1
本發明涉及組織培養
技術領域:
,特別涉及一種石斛育苗方法。
背景技術:
:石斛在我國是一大類傳統名貴中藥材,傳統上既可做藥用,又可作保健品用,同時,從很久以前開始到現在還一直被作為一種高檔湯料(食品)使用,目前石斛傳統的藥用和保健功能已得到人們的高度認同與喜愛。由於石斛在自然條件下需要和真菌共生提供營養才能萌發,且萌發率極低,野生石斛喜陰涼,溼潤,通風多霧的氣候環境,對生長環境極為苛刻,遇強光、暴雨、寒潮、乾旱即會死亡,是一種生長緩慢,自身繁殖能力非常低的蘭科附身植物,由於石斛具有巨大的藥用和保健價值,導致長期掠奪性採挖,再加上生存環境越來越惡劣,致使野生資源嚴重枯竭。現如今石斛繁殖技術有種子萌發,扦插、分株繁殖,組織培養,其中種子萌發萌發率極低,扦插、分株繁殖繁殖速度也很慢。組織快繁技術是一種有效提高種苗生產效率的方法,運用組織培養進行石斛的培育能大大提高石斛的繁殖效率。目前生產上大多採用愈傷組織誘導來進行擴繁,但都是在激素配比上進行調試,然而,激素配比調試難以滿足石斛所需最佳條件,從而導致出芽率較低。技術實現要素:本發明的主要目的是提出一種石斛育苗方法,旨在提高石斛育苗的出芽率。為實現上述目的,本發明提出一種石斛育苗方法,包括以下步驟:a、將帶節的石斛莖段在培養基中培養,誘導腋芽;b、待腋芽生長高度超過1cm時,將芽點切除,誘導叢生芽;c、待眾生芽生長達到1cm~2cm時,切割叢生芽,叢生芽進行增值及生根培養,並將切割完叢生芽的原莖段繼續在培養基中培養,誘導愈傷組織;d、當愈傷組織形成後,將愈傷組織切割並轉入培養基中繼續培養,誘導叢生芽;e、將叢生芽轉入培養基中增殖培養;f、當叢生芽生長高度達到2cm~3cm時,將其轉入培養基中進行生根培養。優選的,上述步驟b還包括:在切除芽點時,保留0.1cm~0.5cm的芽點在莖段上。優選的,上述步驟b還包括:在切除芽點後,對保留的芽點的切面上進行縱切。優選的,步驟a中選取的莖段為石斛的靠近根部的莖段。優選的,上述步驟a還包括:在培養基培養之前,對莖段進行消毒、殺菌處理。優選的,對步驟a中培養基的配方為:MS,NAA:0.4mg/L~0.6mg/L,碳粉:0.2~1.0g/L,6-BA:1.0mg/L~2.0mg/L,KT:0.2mg/L~0.4mg/L,香蕉:10g/L~25g/L。優選的,對步驟c中培養基的配方為:1/2MS培養基,花寶4號:1.0~2.0g/L,香蕉:40g/L~60g/L,碳粉0.2g/L~1.0g/L,NAA:0.3mg/L~0.4mg/L,6-BA:0mg/L~2.0mg/L,KT:0.1mg/L~0.3mg/L,碳粉:0.2~1.0g/L。優選的,步驟d中培養基的配方為:1/2MS培養基,花寶4號:1.0~2.0g/L,香蕉:40g/L~60g/L,碳粉0.2g/L~1.0g/L,NAA:1.0mg/L~1.2mg/L,6-BA:1.5mg/L~1.7mg/L。優選的,步驟e中培養基的配方為:1/2MS培養基,香蕉:100g/L~120g/L,碳粉0.2g/L~1.0g/L,NAA:0.5mg/L~1.5mg/L,IBA:0.5mg/L~1.0mg/L。本發明的技術方案通過芽點切割以打破頂端優勢,促進萌發更多的叢生芽,縮短培養周期,並通過叢生芽的切割,以促進誘導愈傷組織的形成,利用愈傷組織進行擴繁,可以有效的增加擴繁數量,從而能生產出大量優質的石斛苗。附圖說明為了更清楚地說明本發明實施例或現有技術中的技術方案,下面將對實施例或現有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹,顯而易見地,下面描述中的附圖僅僅是本發明的一些實施例,對於本領域普通技術人員來講,在不付出創造性勞動的前提下,還可以根據這些附圖示出的結構獲得其他的附圖。圖1為霍山石斛增殖培養約60d後的分櫱數;圖2為霍山石斛增殖培養60d後的生長值;圖3為霍山石斛通過土豆處理後的生根培養株高圖;圖4為霍山石斛通過土豆處理後的生根培養莖粗圖;圖5為霍山石斛通過土豆處理後的生根培養根數圖;圖6為霍山石斛通過土豆處理後的生根培養根粗圖;圖7為霍山石斛通過香蕉處理後的生根培養株高圖;圖8為霍山石斛通過香蕉處理後的生根培養莖粗圖;圖9為霍山石斛通過香蕉處理後的生根培養根數圖;圖10為霍山石斛通過香蕉處理後的生根培養根粗圖。本發明目的的實現、功能特點及優點將結合實施例,參照附圖做進一步說明。具體實施方式下面將結合本發明實施例中的附圖,對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述,顯然,所描述的實施例僅僅是本發明的一部分實施例,而不是全部的實施例。基於本發明中的實施例,本領域普通技術人員在沒有作出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例,都屬於本發明保護的範圍。需要說明,若本發明實施例中有涉及方向性指示(諸如上、下、左、右、前、後……),則該方向性指示僅用於解釋在某一特定姿態(如附圖所示)下各部件之間的相對位置關係、運動情況等,如果該特定姿態發生改變時,則該方向性指示也相應地隨之改變。另外,若本發明實施例中有涉及「第一」、「第二」等的描述,則該「第一」、「第二」等的描述僅用於描述目的,而不能理解為指示或暗示其相對重要性或者隱含指明所指示的技術特徵的數量。由此,限定有「第一」、「第二」的特徵可以明示或者隱含地包括至少一個該特徵。另外,各個實施例之間的技術方案可以相互結合,但是必須是以本領域普通技術人員能夠實現為基礎,當技術方案的結合出現相互矛盾或無法實現時應當認為這種技術方案的結合不存在,也不在本發明要求的保護範圍之內。本發明提出一種石斛育苗方法。在本發明實施例中,石斛育苗方法包括以下步驟:a、將帶節的石斛莖段在培養基中培養,誘導腋芽。選擇粗壯,膠質含量高,無病蟲害的霍山石斛植株,去除葉片,洗潔精清洗乾淨,流水衝洗大約1小時,蒸餾水清洗乾淨,在超淨工作檯上用70%酒精搽拭乾淨,去除葉鞘,並將石斛鮮條切成大約1.5cm的帶節莖段。然後通過大約0.1%升汞浸泡5min-8min,再用10%左右的次氯酸鈉溶液消毒8min,用無菌水衝洗5-6次。最後將莖段平放接種於培養基中培養大約15天。b、待腋芽生長高度超過1cm時,將芽點切除,誘導叢生芽。在步驟a中,莖段經過15天培養,節點處長出高約1cm的奶綠色芽點,此時進行切割芽點。具體操作如下:①、用刀片將芽點割下,也就是去除頂芽,除去頂端優勢;而後將其接種到培養基中。需要說明的是,在切割時,不能將芽點完全割完,應保留約0.1cm~0.5cm左右的芽點在莖段上,例如包括0.3cm。為了驗證芽點保留長度與叢生芽的數量的關係,實驗數表如下:芽點保留長度(cm)30個莖段,15d後叢生芽平均數量00.20.14.60.25.60.35.50.45.30.54.90.63.50.72.7由此,可見,當芽點保留長度在0.1~0.5cm時,叢生芽的數量最多。當芽點全部被切除後,幾乎沒有叢生芽。當芽點保留長度超過0.6cm時,顯然叢生芽的數量較少,誘導效果不明顯。②、用刀片在保留的芽點的切面上縱切一刀,以增加切口面積,提高愈傷組織成功率。而後繼續放入原培養基中培養約25天。c、待眾生芽生長達到1cm~2cm時,切割叢生芽,並將切割完叢生芽的原莖段繼續在培養基中培養,誘導愈傷組織。經過25天左右培養,莖段切口處長出4-6棵叢生芽,高約1-2cm左右,此時要切割叢生芽。步操如下:叢生芽增殖:將切割下的叢生芽轉入培養基中進行培養60天。60天後通過培養基進行生根培養。愈傷組織誘導:將切割完叢生芽的原誘導莖段繼續放入培養基中誘導愈傷組織。d、當愈傷組織形成後,將愈傷組織切割並轉入培養基中繼續培養,誘導叢生芽。經過大約30天的培養,莖段切口已產生愈傷組織,部分愈傷組織已分化出叢生芽,平均一個莖段產生叢生小芽6-8棵左右,將愈傷組織用刀切成小塊繼續培養基中。再經過大約30天的培養,莖段叢生芽數量激增,愈傷組織已全部分化出芽,變成叢生芽簇,高度大概1cm左右,此時將叢生芽切出轉接以進行增殖培養,愈傷組織可繼續轉入培養基進行叢生芽誘導培養。e、將叢生芽轉入培養基中增殖培養。為了提高出芽數量,將上一步驟中的眾生芽轉入培養基中進行增殖培養,以得到更多的眾生芽。f、當叢生芽生長高度達到2cm~3cm時,將其轉入培養基中進行生根培養。通過步驟e的培養,培養大約60天後石斛苗足夠健壯,高度大概2-3cm左右,可進行生根培養。將培養出的石斛小苗轉入培養基中進行生根。g、出苗。石斛小苗在培養生根培養約75天後,石斛苗長出根系,石斛根達5cm左右且根,發綠,石斛苗達到7-8cm以上,長出葉片5片以上,葉色濃綠,即可移出室外煉苗移栽。本發明的技術方案通過芽點切割以打破頂端優勢,促進萌發更多的叢生芽,縮短培養周期,並通過叢生芽的切割,以促進誘導愈傷組織的形成,利用愈傷組織進行擴繁,可以有效的增加擴繁數量,從而能生產出大量優質的石斛苗。石斛條上部生長素含量較高,理論上,在選取莖段時,應當優先選取上部,以在培養時生長出更多的叢生芽。為了驗證石斛條個個位置的莖段對叢生芽數量的影響,選取霍山石斛為材料,實驗數表如下:由此可見,對於霍山石斛而言,並不是上部莖段產生的叢生芽數量最對,相反,靠近根部莖段產生的叢生芽數量更多,這與技術人員的認知恰恰相反。因此,在選取石斛莖段時,優選靠近根部的莖段。下述內容中,將以石斛中的一種,霍山石斛的培育為例進行闡述。在上述步驟a中,雖然培育石斛莖段的培養基可以有多種,但是,在本實施例中,通過實驗,得出較佳的M1培養基配方。實驗如下:以MS為基本培養基,添加香蕉10g/L~25g/L(為石斛提供各種營養元素,例如胺基酸和微量元素等),NAA,碳粉,KT、6-BA,配置9種不同激素配比的培養基,具體激素配方如表一:表一莖段誘導叢生芽培養基配方表40d後統計觀察可得(表二),從接種的9種培養基來看,9號培養基即激素配比為6-BA2mg/L+KT0.4mg/L的腋芽誘導率最高,誘導的腋芽達到102個,誘導的芽葉色濃綠、粗壯,高度最高。其次是6號培養基即激素配比為6-BA1mg/L+KT0.4mg/L,誘導的腋芽數為90個,誘導的芽葉色綠色、較粗壯。再次是處理5即激素配比為6-BA1mg/L+KT0.2mg/L。最差的是1、2、7號培養基,基本不萌發腋芽,只有少數萌發腋芽且萌發腋芽數較少,腋芽細弱,長勢較弱,只有極少數有萌發現象且健壯度較弱,不適合進行下一步的轉接。因此1、2、7號培養基不適合作為霍山石斛莖段誘導叢生芽培養基。表二莖段誘導叢生芽60d統計表++++非常健壯;+++健壯;++一般健壯;+弱帶節莖段需要在細胞分裂素與生長素的共同作用下才能萌發出較理想的腋芽。在一定範圍內,較高濃度的細胞分裂素KT和6-BA與較低濃度的NAA協同有利於芽的誘導,激素濃度過高或過低都不利於腋芽的誘導萌發,6-BA濃度一定的情況下,一定範圍內KT越高莖段誘導腋芽數越多。綜合考慮,霍山石斛莖段誘導叢生芽的較適培養基為基本培養基為:MS,NAA:0.4mg/L~0.6mg/L,6-BA:1.0mg/L~2.0mg/L,KT:0.2mg/L~0.4mg/L,香蕉:10g/L~25g/L。此時將叢生芽切下進行增殖培養,剩餘的莖段進行愈傷組織的誘導。在此需要說明的是,由於莖段在培養過程中容易褐變的,因為培養基中其所含的氨基化合物如蛋白質、胺基酸及醛、酮等與還原糖相遇,經過一系列反應生成褐色聚合物的現象稱為褐變反應,而褐變會引起莖段發芽。添加一定量的碳粉,可有效防止褐變,從而提高從生芽的出芽率,在此,碳粉添加量在0.2~1.0g/L範圍內,例如0.3g/L、0.5g/L或0.8g/L。為了防止褐變,下述其它實施例中將一併加入碳粉。因此,霍山石斛的基本培養基M1為:MS,NAA:0.4mg/L~0.6mg/L,6-BA:1.0mg/L~2.0mg/L,KT:0.2mg/L~0.4mg/L,香蕉:10g/L~25g/L,碳粉:0.2g/L~1.0g/L。在上述步驟c中,通過正交設計,得出較佳的M3培養基配方。設計三因素三水平正交實驗,各因素表為表三,正交實驗表為表四,基本培養基為花寶4號:1.0~2.0g/L,香蕉:40g/L~60g/L,碳粉0.2g/L~1.0g/L。將第一步實驗剩餘的莖段接種於正交實驗表中的9個處理中,每個處理接種5瓶,每瓶接種5個莖段,30d時觀察愈傷組織誘導數,60d後觀察愈傷組織誘導芽數。表三因素水平表表四愈傷組織誘導正交實驗表30d後各個觀察可得各個處理均有產生愈傷組織,繼續培養60d後發現愈傷組織均已產生不定芽,實驗結果如表五。通過正交實驗分析可得,個因素適宜的水平為,NAA:0.3mg/L,6-BA:1mg/L,KT:0.3mg/L,且個因素影響大小為NAA>KT>6-BA。因此適宜的莖段誘導愈傷組織的M3培養基配方為:1/2MS培養基,花寶4號:1.0~2.0g/L,香蕉:40g/L~60g/L,碳粉0.2g/L~1.0g/L,NAA:0.3mg/L左右,6-BA:0mg/L~2.0mg/L,KT:0.1mg/L~0.3mg/L,碳粉:0.2~1.0g/L。表五愈傷組織誘導實驗結果表六愈傷組織誘導實驗結果通過表六,可以得出,NAA在0.3mg/L~0.4mg/L時,愈傷組織誘導數和不定芽平均誘導數最高,因此,M3培養基配方為:1/2MS培養基,花寶4號:1.0~2.0g/L,香蕉:40g/L~60g/L,碳粉0.2g/L~1.0g/L,NAA:0.3mg/L~0.4mg/L,6-BA:0mg/L~2.0mg/L,KT:0.1mg/L~0.3mg/L,碳粉:0.2~1.0g/L。在上述步驟e中,通過正交設計,得出較佳的M2培養基配方。基本培養基為:1/2MS培養基,花寶4號:1.0~2.0g/L,香蕉:40g/L~60g/L,碳粉0.2g/L~1.0g/L。添加不同濃度的NAA、6-BA、配置9個不同激素配比的增殖培養基,培養基配方如表五,將高度一致,約為1cm的增殖苗接種於這9個不同處理的培養基中,每個處理接種20瓶,每瓶接種5棵霍山石斛增殖苗,大約60d後統計觀察並記錄小苗分櫱棵數、生長值、顏色、生長勢。生長勢:+長勢較弱,顏色較黃,苗矮或纖細;++長勢一般,顏色黃綠,苗過高或纖細;+++長勢較好,顏色綠色;++++長勢最好,顏色濃綠,苗粗壯。表七霍山石斛增值培養60d統計表60d後統計觀察可得,從分櫱數來看(參照圖1),處理5最好,其次是處理2,處理4,處理3,處理9分櫱數最差。從生長值來看(參照圖2),處理5最好,其次是處理4,處理2,處理1,同樣處理9最差。從生長勢、顏色來看,處理4和處理5最好,顏色濃綠,苗粗壯,處理1和處理2次之,長勢較好,顏色綠色,處理7和處理9最差,長勢最弱。綜合分析可得,處理5、處理4最適宜做霍山石斛增殖培養培養基。其中處理5最好即NAA1mg/L+6-BA1.5mg/L組合最適宜做霍山石斛增殖培養培養基。處理4未添加6-BA其分櫱性較處理5和處理2差,但苗的長勢較好,而且實驗發現處理4的苗無需進行生根壯苗可實現一步成苗,既節約生產資料又縮短了時間,弊端在於出苗質量稍差於進行生根壯苗的種苗,且出苗數量稍低於轉接一代的生根苗。實驗發現添加一定濃度的6-BA和NAA能促進霍山石斛增殖誘導,NAA濃度不變,在一定範圍內,隨著6-BA濃度的升高其增殖誘導效果也逐漸變強,實驗可得添加6-BA1.5mg/L誘導效果最強,但濃度高於6-BA1.5mg/L時,誘導效果反而變弱,說明高濃度的6-BA能抑制霍山石斛增殖培養。但6-BA濃度不變的情況下,添加一定濃度梯度的NAA,其增殖效果也是隨著NAA濃度的上升先加強後減弱,因此高濃度的NAA對霍山石斛的增殖效果無益。表八霍山石斛增值培養60d統計表通過表八可得,NAA:1.0mg/L~1.2mg/L,6-BA:1.5mg/L~1.7mg/L時,霍山石斛的生長式及顏色都最好。綜合分析可得,最適宜霍山石斛增殖培養的培養基為1/2MS培養基+花寶4號1.5g/L+香蕉50g/L+碳粉0.5g/L+NAA1mg/L+6-BA1.5mg/L。M2培養基配方:1/2MS培養基,花寶4號:1.0~2.0g/L,香蕉:40g/L~60g/L,碳粉0.2g/L~1.0g/L,NAA:1.0mg/L~1.2mg/L,6-BA:1.5mg/L~1.7mg/L。在上述步驟f中,通過正交設計,得出較佳的M4培養基配方。基本培養基為1/2MS培養基,碳粉0.2g/L~1.0g/L,並且添加不同濃度的NAA、IBA,配置9個不同激素配比的生根培養基,添加物分別選擇香蕉和土豆,濃度分別為100g/L。培養基配方如表五,將高度一致,約為2.5cm的增殖苗接種於這9個不同處理的培養基中,每個處理接種20瓶,每瓶接種5棵霍山石斛增殖苗,75d統計觀察一次並記錄小苗生長勢、健壯度、苗高、莖粗、根數、根粗。培養條件為溫度約25℃,光照約2000lx10個小時。表九霍山石斛生根激素配比表各個處理培養約75d後取出試管苗,洗淨,測量株高,莖粗、根數、根粗,比較分析如圖3至圖10。分析結果如下:香蕉處理株高(參照圖7):添加100g/L香蕉培養40d後,處理8,激素配比為NAA1.5mg/L+IBA0.5mg/L株高最高為8.2cm,其次為處理1激素配比為NAA0.5mg/L+IBA0mg/L株高為6.5cm,處理7最低,激素配比為NAA1.5mg/L+IBA0mg/L株高僅為4.8cm。高濃度的NAA(1.5mg/L)配合一定濃度的IBA(0.5mg/L)能有效的促進霍山石斛生根苗的增高。香蕉處理莖粗(參照圖8):添加100g/L香蕉培養40d後,石斛莖粗平均達到0.34cm,其中處理8即激素配比為NAA1.5mg/L+IBA0.5mg/L莖粗最大為0.39cm,其次為處理2即激素配比為NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L、處理5即激素配比為NAA1mg/L+IBA0.5mg/L莖粗其次為0.38cm,處理6即激素配比為NAA1mg/L+IBA1mg/L莖粗最低,僅為0.28cm。單獨添加一定濃度的NAA對莖粗的生長效果不明顯,而添加較高濃度的NAA(1.5mg/L)配合一定濃度的IBA(0.5mg/L)能有效的促進霍山石斛莖的橫向生長,增強莖粗。香蕉處理根數、根粗(參照圖9和圖10):添加100g/L香蕉培養40d後根數明顯增加,各個處理根數均較多,平均根數達到8根,其中處理1即激素配比為NAA0.5mg/L+IBA0mg/L根數最大,為10根,而處理3即激素配比為NAA0.5mg/L+IBA1mg/L、處理8即激素配比為NAA1.5mg/L+IBA0.5mg/L根數均較多,平均根數達到8.5以上。因此香蕉能有效的促進霍山石斛髮根。而香蕉處理其根粗平均達到1.1mm,其中處理3即激素配比為NAA0.5mg/L+IBA1mg/L根粗最大為0.14cm,而處理6即激素配比NAA1mg/L+IBA1mg/L和處理1即激素配比NAA0.5mg/L+IBA0mg/L根粗其次為0.12cm。單純加低濃度的NAA培養能有效的促進根的橫向生長。添加香蕉處理的霍山石斛生根培養培養基中,綜合生根苗株高、莖粗、根數、根粗這幾個指標分析可得,適合霍山石斛生根壯苗的激素配比為NAA1.5mg/L+IBA0.5mg/L。土豆處理株高(參照圖3):添加100g/L土豆培養40d後,處理7,激素配比為NAA1.5mg/L+IBA0mg/L株高最高為6.7cm,其次為處理9激素配比為NAA1.5mg/L+IBA1mg/L株高為6.2cm,處理1激素配比為NAA0.5mg/L+IBA0mg/L株高為5.8cm,處理2最低,激素配比為NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L株高僅為5.34cm。高濃度的NAA(1.5mg/L)能有效的促進霍山石斛生根苗的增高。土豆處理莖粗(參照圖4):添加100g/L土豆培養40d後,各個處理石斛莖粗差異不大,均達到0.3cm以上,處理1即激素配比為NAA0.5mg/L+IBA0mg/L莖粗相對最大為0.4cm。處理2即激素配比為:NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L、處理4即激素配比為NAA1mg/L+IBA0mg/L培養莖粗相對較少為0.37cm,而處理5即激素配比為NAA1mg/L+IBA0.5mg/L莖粗最低為0.29cm,最大值於最小值相差僅為1mm,差異不大。因此添加土豆處理的不同激素配比對石斛莖粗的增長影響效果不大。土豆處理根數、根粗(參照圖5和圖6):添加100g/L土豆培養40d後,各個處理石斛根數和根粗差異不大。根數方面處理9即激素配比為NAA1.5mg/L+IBA1mg/L根數最大為7.8,處理6即激素配比為NAA1mg/L+IBA1mg/L和處理1即激素配比為:NAA0.5mg/L+IBA0mg/L根數次之,依次為5.9和5.1。根粗方面處理1即激素配比為NAA0.5mg/L+IBA0mg/L和處理8即激素配比為NAA1.5mg/L+IBA0.5mg/L根粗最大為0.14cm,處理4即激素配比為NAA1mg/L+IBA0mg/L根粗對小僅為0.08cm。添加土豆處理的霍山石斛生根培養培養基中,綜合生根苗株高、莖粗、根數、根粗這幾個指標分析可得,適合霍山石斛生根壯苗的激素配比為NAA0.5mg/L+IBA0mg/L。綜合分析可得:添加香蕉處理霍山石斛生根苗長勢普遍比添加土豆處理好,添加香蕉處理組石斛株高和根數明顯比添加土豆處理好,而莖粗和根粗差異不顯著,且添加香蕉處理石斛苗顏色濃綠,添加土豆處理石斛苗顏色淺綠。綜合分析可得,添加香蕉100g/L更適宜霍山石斛生根培養。從表十可以看出,無論是從株高、根數還是根粗上看,香蕉濃度值為100g/L~120g/L時,石斛根系生長最好。表十霍山石斛生根激素配比表由此可得,適宜霍山石斛生根壯苗M4培養基為:1/2MS培養基,香蕉:100g/L~120g/L,碳粉0.2g/L~1.0g/L,NAA:0.5mg/L~1.5mg/L,IBA:0.5mg/L~1.0mg/L。以上所述僅為本發明的優選實施例,並非因此限制本發明的專利範圍,凡是在本發明的發明構思下,利用本發明說明書及附圖內容所作的等效結構變換,或直接/間接運用在其他相關的
技術領域:
均包括在本發明的專利保護範圍內。當前第1頁1 2 3