作為11β-羥基類固醇脫氫酶1型的調節劑的異噁唑衍生物的製作方法

2023-04-22 22:32:46

專利名稱：作為11β-羥基類固醇脫氫酶1型的調節劑的異噁唑衍生物的製作方法
技術領域：
本發明涉及新穎的式(I)的異噁唑化合物，其為11 β-羥基類固醇脫氫酶1型 (11 β -HSD1)的調節劑並且可以用於治療與11 β -HSDl活性相關的醫學疾病。本發明還涉 及包含這些化合物的藥物組合物、這些化合物在製備治療青光眼的藥物中的應用以及這些 化合物的製備方法。
背景技術：
青光眼是多相群疾病，其中原發性開角型青光眼(POAG)最為普遍，這種疾病是 導致14%總體失明的不可逆視力喪失的主要原因。其特徵在於具有相應視野喪失的視 神經病變，這種視野喪失與一定範圍的包括眼內壓升高(IOP)的危險因素相關，它能夠 治療和控制。IOP通過因睫狀體上皮產生房水(AH)與經過小梁網(TM)排出(Schlemm 管和色素層鞏膜流出途徑)之間的良好平衡而得到調節。該過程可以受到皮質類固醇 調節，因為用局部用皮質類固醇治療的約三分之一的正常群體發生中度IOP升高，而實 際上具有POAG的全部患者在局部用皮質類固醇療法後均發生IOP升高[Armaly，Arch. Ophthalmol. 1963，70，483-491 ；Armaly, Arch. Ophthalmol. 1963，70，492-499 ；Becker, Invest. Ophthalmol. 1965，4，198-205 ；Armaly, Arch. Ophthalmol. 1967，77，747-751]。 此外，患有庫欣症候群的患者發生IOP升高[Sayegh等人，Ophthalmic Res. 1975,7, 390-394]。羥基類固醇脫氫酶(HSDs)調節類固醇激素受體的佔有率和活化，所述酶將類固 醇激素轉化成它們的無活性代謝物[有關近期綜述參見Nobel等人，Eur. J. Biochem. 2001， 268,4113-4125]。存在大量類型的HSDs，其中11 β -羥基類固醇脫氫酶(11 β -HSDs)催化活 性糖皮質激素(例如皮質醇和皮質酮)及它們的惰性形式(例如可的松和11-脫氫皮質甾 酮)互變。將可的松活化成氫化可的松的同種型11 羥基類固醇脫氫酶1型(11 β-HSD1) 在肝、脂肪組織、腦、肺和其他糖皮質激素組織等中表達，並且是定向於可以通過減少糖皮 質激素作用改善的大量疾病例如糖尿病、肥胖和與年齡相關的認知功能障礙的療法的潛在 靴標[Seckl 等人，Endocrinology 2001，142，1371-1376]。有意義的是，在健康志願者試驗非對照中，顯示非選擇性11 β -HSD1/11 β -HSD2 抑制劑甘珀酸(CBX)在口服給藥時將眼內壓(IOP)降低了 20% [Rauz等人，Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 2001，42，2037-2042]。類似地，在具有高眼壓患者的安慰劑對照的研 究中，口服給藥的CBX誘導10% IOP降低[Rauz等人，Q. J.Med. 2003，96，481-490]。組織表 達研究已經顯示，在人睫狀上皮細胞中存在ΙΙβ-HSDl，而不存在Ili3-HSD2。這種佔優勢 的11 β -HSDl在眼組織中的表達得到了健康受試者和患者AH中氫化可的松相對可的松的 水平過度的支持，而在尿中觀察到了相反的結果，這反映出lli3_HSD2在腎中的活性。這些 結果共同暗示眼中ΙΙβ-HSDl的選擇性抑制可以是降低已經升高的IOP的有效手段，且由 此治療青光眼[US 6,548,053 ；另外參見Walker等人，P3-698海報，在Endocrine Society
5Meeting,1999 年 6 月 12-15 日，San Diego]。給眼局部施用是藥理學幹預眼病的優選途徑，因為這導致活性化合物在期望作用 部位上的高濃度，而同時降低全身副作用的風險。水溶液通常被接受為用於青光眼藥物的 優選製劑。從現有技術中已知幾種取代的異噁唑化合物。WO 01/29015描述了對α la腎 上腺素能受體具有增強的選擇性的異噁唑衍生物，用於治療下泌尿道阻塞症候群。WO 2007/114124描述了取代的異噁唑衍生物作為治療肥胖的11 β -HSDl抑制劑。然而，在先尚未顯示取代的異噁唑化合物適合於局部施用於眼以治療青光眼。

發明內容
令人意外地發現是有效和選擇性11 β -HSDl抑制劑的式(I)的異噁唑化合物具有 使得它們特別適合於局部施用於眼治療青光眼的理化特性。在第一個方面中，本發明涉及式(I)的化合物 或其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物、幾何異構體、互變體、旋光異構體或 N-氧化物，其中X-Y 表示 N-O 或 O-N ；R1獨立地選自滷素、氰基、CF3> OCF3> C^4-烷基、羥基-(^4-烷基、C^4-烷氧 基-C 1-4 烷基和 烷氧基；或兩個取代基R1與所連接的碳原子一起形成5-或6-元芳族或非芳族環，其任選 包含一個或多個選自0和N的雜原子，且該環任選被一個或多個取代基取代，所述取代基 選自滷素、氰基、CF3、OCF3、C1^4-烷基、羥基-CV4-烷基、Cy-烷氧基-Ch-烷基和C^4-烷氧 基；R2獨立地選自Cp8-烷基、羥基-Cu-烷基、CV8-烷氧基-CV8-烷基、C1^8-烷氧基、 羥基-Ch8-烷氧基、C1^8-烷氧基-CV8-烷氧基、c3_8-環烷基、羥基-c3_8-環烷基、C1^8-烷氧 基-c3_8-環烷基、c3_8-環烷氧基、羥基-c3_8-環烷氧基和Ch8-烷氧基-c3_8-環烷氧基；a 是 0，1 或 2;且m和η各獨立地是0、1或2 ；條件是該化合物不選自· 1- [ (5-苯基-4-異噁唑基)羰基]_哌啶；· 5-苯基-4-(吡咯烷-1-基羰基)異噁唑；· 5-(4-氟苯基)-4_(吡咯烷-1-基羰基)異噁唑；· 5- (4-氯苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)異噁唑；· 5- (4-溴苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)異噁唑；
· 5- (4-甲基苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)異噁唑；· 5- (4-甲氧基苯基)-4-(吡咯烷-1-基羰基)異噁唑；· 4- {[2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基} -5- (4-甲基苯基)異噁唑；· 4- {[ (2S) -2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基} _5_ (4_甲基苯基)異噁唑；· 4- {[ (2R) -2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基} _5_ (4_甲基苯基)異噁唑；· 5-(2-氯苯基)-4-{[2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基}異噁唑；· 5-(2-氯苯基)-4-{[(2幻-2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基}異噁唑；· 5-(2-氯苯基)-4-{[(21 )-2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基}異噁唑；· 4-{[(2S)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷-1-基]羰基}-5-[4_(三氟甲基)苯基] 異噁唑；· 4-{[(2R)-2-(甲氧基甲基)吡咯烷基]羰基} _5-[4_ (三氟甲基)苯基] 異噁唑；· 5- (4-氯苯基)-4- {[2-(異丙基)吡咯烷基]羰基}異噁唑；· 2- (1- {[5- (4-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- (1- {[5- (2-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；·2-[1-({5-[4_(三氟甲基)苯基]異噁唑_4_基}羰基)哌啶_3_基]丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[3-(4-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[5-(4-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；·2-((3Κ)-1-{[3_(4-甲氧基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-((3R)-l-{[3_(3-氯-4-甲氧基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 3- (1- {[5- (4-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)戊_3_醇；· 3- (1- {[3- (4-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)戊_3_醇；· 3，5_ 二甲基-l-{[5-(4-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶；· 1-{[5-(2_氯苯基)異噁唑-4-基]羰基} _3，5-二甲基哌啶；· 3，5-二甲基-1-( {5-[4-(三氟甲基)苯基]異噁唑_4_基}羰基)哌啶；· 5-乙基-2-甲基-1- {[5- (4-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶；· 1-{[5- (2-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基} -5-乙基_2_甲基哌啶；和· 5-乙基-2-甲基-1-({5-[4-(三氟甲基)苯基]異噁唑_4_基}羰基)哌啶。在本發明的一個優選的實施方案中，R1是滷素或CV4-烷基或兩個取代基R1與所 連接的碳原子一起形成5-或6-元環。在一個最優選的實施方案中，R1是F、Cl或甲基或 兩個取代基R1與所連接的碳原子一起形成6-元芳族環。在另一個優選的實施方案中，帶有取代基R2的雜環是哌啶環。因此，a優選是1。在另一個優選的實施方案中，哌啶環被一個取代基R2取代。因此，η優選是1。在另一個優選的實施方案中，R2是羥基-CV8-烷基或Cp8-烷氧基-Cu-烷氧基。 在一個最優選的實施方案中，R2是1-羥基乙基、2-羥基乙基或1-羥基-1-甲基乙基。本發明特別優選的化合物是選自如下這樣的化合物· 2- (1- {[5- (2-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[5-(2-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；
7
.2-((3S)-l-{[5-(2-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- (1- {[5- (3-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3S)-l-{[5-(4-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (2-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；
· 2- ((3S)-1-{[5- (2-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[5- (3-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (4-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[5- (4-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- (1- {[5- (2-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶_2_基)乙醇；·2-(1-{[5_(3-氯-2-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-(1_{ [5-(3，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-((3R)-l-{[5_(3，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2-((3S)-l-{[5_(3，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2-((3R)-l-{[5_(2，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2-((3S)-l-{[5_(2，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (2-氟苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (4-氟苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[5- (4-氟苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[5- (1-萘基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3S)-l-{[3-(2-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；.2-((3R)-l-{[3-(2-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3R)-1-{[3- (2-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2- ((3S)-1-{[3- (2-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇；· 2-((3R)-l-{[3_(2，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇；· 1-(1_{[3-(2-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)乙醇；和· 2-((3S)-l-{[3_(2，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基) 丙-2-醇。本發明的另一個方面是用於療法的式(I)的化合物。如上述定義的化合物是有效 和選擇性的11 β-HSDl抑制劑。照此，它們用於治療或預防青光眼。本發明由此包括用於 治療或預防青光眼的式(I)的化合物。本發明在另一個方面中包括式(I)的化合物在製備治療或預防青光眼的藥物中 的應用。本發明在另一個方面中包括治療或預防青光眼的方法，包括對有這種治療需要的 人受試者給予有效量的式(I)的化合物。
本發明在另一個方面中提供了包含作為活性成分的式(I)的化合物與藥學可接 受的稀釋劑或載體的藥物製劑。所述藥物製劑用於治療或預防青光眼。本文所述的方法包括這樣的方法，其中將受試者鑑定為需要特定的所述治療。鑑 定需要這種治療的受試者可以是受試者或健康護理職業者的判斷並且可以是主觀(例如 意見)或客觀的(例如可通過試驗或診斷方法測定)。定義下列定義應適用於本說明書和附屬權利要求上下文中。除非另做陳述或另有指示，否則術語"(^8-烷基」表示具有1-8個碳原子的直鏈或 支鏈烷基。所述C"-烷基的實例包括甲基、乙基、正_丙基、異_丙基、正_ 丁基、異_ 丁基、 仲-丁基、叔-丁基和直鏈和支鏈戊基、己基、庚基和辛基。就"(V8-烷基」部分範圍而言， 關注其全部亞組，例如Ci_7-烷基、Ch6-烷基、CV5-烷基、CV4-烷基、Cp3-烷基、Ci_2-烷基、 C2-S-焼基、C2-7—焼基、C2-Q~焼基，C2-5—焼基、C2-4—焼基、C2-3—焼基、C3-S-焼基、C3-7—焼基等。除非另做陳述或另有指示，否則術語「羥基-Cm-烷基」表示具有其氫原子被OH替 代的直鏈或支鏈Cp8-烷基。所述羥基-CV8-烷基的實例包括羥基甲基、2-羥基乙基、2-羥 基丙基、2-羥基-2-甲基丙基和1-羥基-1-甲基乙基。除非另做陳述或另有指示，否則術語「C"-烷氧基」表示通過氧連接分子其餘部分 的直鏈或支鏈Cu-烷基。所述Cu-烷氧基的實例包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異-丙 氧基、正-丁氧基、異-丁氧基、仲-丁氧基、叔-丁氧基和直鏈和支鏈戊氧基、己氧基、庚氧 基和辛氧基。就「Cu-烷氧基」的部分範圍而言，關注其全部亞組例如CV7-烷氧基、Ch6-烷氧 基、C1-5_焼氧基、Cp4- -燒氧基、C"-燒氧基、C"-燒氧基、c2_8-燒氧基、c2_7-燒氧基、c2_6-燒 氧基、c2_5-烷氧基、 C2—4_焼氧基、C2—3_焼氧基、C3-S-焼氧基、C3—7_焼氧基等。除非另做陳述或另有指示，否則術語"(^8-烷氧基-Cu-烷基」表示具有其氫原子 被直鏈或支鏈Cu-烷氧基替代的直鏈或支鏈Cu-烷基。所述Cu-烷氧基-Ch8-烷基的實 例包括甲氧基甲基、1-甲氧基乙基、2-甲氧基乙基和2-乙氧基乙基。除非另做陳述或另有指示，否則術語「羥基-Cm-烷氧基」表示具有其氫原子被OH 替代的直鏈或支鏈CV8-烷基。所述羥基-Cm-烷氧基的實例包括羥基甲氧基、2-羥基乙氧 基和2-羥基丙氧基。除非另做陳述或另有指示，否則術語「Cm-烷氧基-CM-烷氧基」表示具有其氫原 子被直鏈或支鏈Cu-烷氧基替代的直鏈或支鏈Cu-烷基。所述Cu-烷氧基-Ch8-烷氧基 的實例包括甲氧基甲氧基、2-甲氧基乙氧基和3-甲氧基丙氧基。除非另做陳述或另有指示，否則術語「C3_8_環烷基」表示具有3-8個碳原子的單環 飽和烴環系。C3_8_環烷基的實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基和環辛基。就 「c3_8-環烷基」的部分範圍而言，關注其全部亞組例如c3_7-環烷基、c3_6-環烷基、c3_5-環烷 ■、C3_4_ C5_g-C5_7-燒基、C6_8_環燒基禾口 C6_7_環燒基。除非另做陳述或另有指示，否則術語「羥基-C3_8_環烷基」表示具有其氫原子被OH 替代的C3_8_環烷基。所述羥基-C3_8_環烷基的實例包括3-羥基環戊基和4-羥基環己基。除非另做陳述或另有指示，否則術語「Cm-烷氧基-C3_8_環烷基」表示具有其氫原 子被直鏈或支鏈Cu-烷氧基替代的c3_8-環烷基。所述Ch8-烷氧基-c3_8-環烷基的實例包
9括3-甲氧基環戊基和4-甲氧基環己基。除非另做陳述或另有指示，否則術語「C3_8_環烷氧基」表示通過氧與分子其餘部分 連接的C3_8-環烷基。所述c3_8-環烷氧基的實例包括環丙氧基、環戊氧基和環己氧基。除非另做陳述或另有指示，否則術語「羥基-c3_8-環烷氧基」表示具有其氫原子被 OH替代的C3_8_環烷氧基。所述羥基-C3_8_環烷氧基的實例包括3-羥基環戊氧基和4-羥 基環己氧基。除非另做陳述或另有指示，否則術語「Cm-烷氧基-C3_8-環烷氧基」表示具有其氫 原子被直鏈或支鏈Cu-烷氧基替代的c3_8-環烷氧基。所述Cu-烷氧基-c3_8-環烷氧基的 實例包括3-甲氧基環戊氧基和4-甲氧基環己氧基。當本文所述的兩個取代基R1與所連接的碳原子一起形成5-或6-元芳族或非芳 族環時，所述環可以任選包含一個或多個選自0和N的雜原子。這種二價取代基R1的實例 包括-CH = CH-CH = CH-、-O-CH2-O-(亞甲二氧基)和-O-CH2-CH2-O-(亞乙二氧基)。「滷素」意指氟、氯、溴或碘。「羥基」意指-OH基團。「氰基」意指-CN基團。「CF3」意指三氟甲基。「 OCF3 」意指三氟甲氧基。「任選」或「任選地」意指隨後所述的結果或情況不一定發生，且該描述包括其中該 結果或情況發生的例子和其不發生的例子。「藥學可接受的」意指用於製備的藥物組合物一般是安全的、無毒性的、且既不是 生物學也不是其它方面不期望的特性，並且用於人體藥物應用。本文所用的「治療」包括預防所述病症或疾病，或改善或消除一旦已確立的病症。「有效量」意指賦予治療劑對所治療受試者的治療效果(例如治療，控制，改善，預 防，延緩疾病、障礙或病症或其症狀發生或減輕其風險)的用量。治療效果可以是客觀的 (即可通過一些試驗或標記測定)或主觀的(即受試者給出的效果的表示或感覺)。「前體藥物」意指在生理學條件下或通過溶劑解轉化成本發明生物活性化合物的 化合物。前體藥物在對有此需要的受試者給藥時可以是無活性的，但在體內被轉化成本發 明的活性化合物。前體藥物典型地在體內被轉化成本發明的母體化合物，例如通過水解。 前體藥物化合物通常提供在哺乳動物生物體中溶解性、組織相容性或延緩釋放的優點(參 見 Silverman, R. B. , The Organic Chemistry of Drug Designand Drug Action,第 2 版， Elsevier Academic Press (2004), pp. 498-549)。可以通過修飾存在於本發明化合物上的 官能團例如羥基製備本發明化合物的前體藥物，按照這種方式，用常規操作或在體內裂解 修飾物，得到本發明的母體化合物。前體藥物的實例包括但不限於羥基官能團的乙酸酯、甲 酸酯和琥珀酸酯衍生物。在本說明書和附屬權利要求上下文中，指定化學式或名稱還應包括其所有的鹽、 水合物、溶劑合物、N-氧化物和前體藥物形式。此外，指定化學式或名稱應包括其所有互變 體和立體異構體形式。立體異構體包括對映體和非對映異構體。對映體可以以其純形式或 兩種對映體的外消旋(相等)或不相等混合物存在。非對映異構體可以以其純的形式或作 為非對映異構體混合物存在。非對映異構體還包括幾何異構體，它們可以以其純的順式或
10反式形式或作為它們的混合物存在。式(i)的化合物可以照此使用或(如果適合)作為其藥理學可接受的鹽(酸或鹼 加成鹽)使用。下文舉出的藥理學可接受的加成鹽意指包括化合物能夠形成的治療活性無 毒性酸和鹼加成鹽形式。可以通過用適宜酸處理鹼形式將具有鹼性特性的化合物可以被轉 化成其藥學可接受的酸加成鹽。典型酸包括無機酸例如氯化氫、溴化氫、碘化氫、硫酸、磷 酸；和有機酸例如甲酸、乙酸、丙酸、羥基乙酸、乳酸、丙酮酸、乙醇酸、馬來酸、丙二酸、草酸、 苯磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、三氟乙酸、富馬酸、琥珀酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、水楊酸、對 氨基水楊酸、撲酸、苯甲酸、抗壞血酸等。典型鹼加成鹽形式是鈉、鉀、鈣鹽和與藥學可接受 胺類形成的鹽，所述胺類例如氨、烷基胺類、苄星青黴素和胺基酸例如精氨酸和賴氨酸。本 文所用的術語加成鹽還包括化合物及其鹽能夠形成例如水合物、醇化物等的溶劑合物。組合物就臨床應用而言，將本發明的化合物配製成用於眼給藥的藥物製劑。將要理解的 是可以將本發明的化合物與生理學可接受的載體、賦形劑或稀釋劑一起給予。包含溶於、分散於或混懸於其中的活性成分的藥物組合物的製備是本領域眾 所周知的。典型地，將這種組合物製備成作為水性或非水性液體溶液或混懸液滴注 (oculoguttae)的無菌組合物，然而，還可以製備適合於在使用前溶解、分散或混懸在液體 中的固體劑型。還可以乳化製劑。活性成分可以與藥學可接受並且與活性成分相容賦形劑混合，且用量適用於本文 所述的治療方法。如果需要，組合物可以包含輔助物質例如溼潤劑或乳化劑、ph緩衝劑等， 它們增強活性成分的有效性。藥學可接受的載體是本領域眾所周知的。典型液體載體是不舍除活性成分和水外 的物質的無菌水溶液，或包含生理ph值的緩衝液例如磷酸鈉、生理鹽水或它們兩者，例如 磷酸緩衝的鹽水。其他水性載體可以包含一種以上緩衝鹽以及鹽，例如氯化鈉和氯化鉀、葡 萄糖、丙二醇、聚乙二醇和其他溶質。液體組合物還可以包含除了水以及與水相排斥的液相。這種額外液相的實例是甘 油、植物油、有機酯類和水_油乳劑。優選藥物組合物包含一種或多種用作增溶劑、乳化劑和/或滲透促進劑的試劑。 為本領域眾所周知的這種試劑包括例如在Cremophor (basf)名稱下銷售的試劑。實例 是Cremophor rh 40(聚氧乙烯醚氫化蓖麻油；cas No. 61788-85-0)。本發明化合物的製備可以通過常規方法或與之類似的方法製備上述式(i)的化合物。本發明實施例的 中間體和化合物的製備特別闡明在下列反應路線1和2中。本文反應路線中結構上的變量 的定義與本文所述式中相應位置的定義相符。以適宜苯乙酮(ii)為原料，在幾個合成步驟中容易地得到5_(苯基)異噁 唑-4-甲酸甲酯(v)。在水解該酯後，通過用tbtu處理活化甲酸(vi)或轉化成相應醯氯， 使其與適宜環胺(vii)反應，導致形成期望的式(i)的化合物。該過程一般表示在反應路 線1中。反應路線1
11 其中R1-R^Eun和m如式⑴所定義。反應路線2顯示了式(I)的異構體異噁唑化合物的製備。以適當取代的苯甲醛 (VIII)為原料，在三步中得到3-(苯基)異噁唑-4-甲酸乙酯(XI)。然後通過水解酯(XI) 並且使得到的酸(XII)與適宜的環胺(VII)在作為活化劑的TBTU的存在下縮合或通過將 酸轉化成相應醯氯容易地形成式(I)的化合物。反應路線2 其中R1-R^Eun和m如式⑴所定義。用於製備式(I)化合物的必要原料是商購的或可以通過本領域公知的方法製備。可以實施下述實驗部分中的方法，得到游離鹼或酸加成鹽形式的本發明化合物。 可以通過下列步驟得到藥學可接受的酸加成鹽根據由鹼化合物製備酸加成鹽的常規方法 將游離鹼溶於適宜有機溶劑，用酸處理該溶液。形成加成鹽的酸的實例如上所述。式(I)的化合物可以具有一個或多個手性碳原子且由此可以以旋光異構體形式 得到它們，例如作為純的對映體或對映體混合物(外消旋物)或作為包含非對映異構體的 混合物。得到純對映體的旋光異構體的混合物的分離是本領域眾所周知的並且例如可以通 過用旋光(手性)酸對鹽分級結晶或通過手性柱色譜分離實現。用於本文所述合成途徑的化學物質可以包括，例如溶劑、試劑、催化劑和保護基和 脫保護基試劑。保護基的實例是叔-丁氧羰基(Boc)、苄基和三苯甲基(三苯基甲基)。上述 方法還可以包括如下步驟在本文具體描述的步驟之前或之後，添加或除去適宜的保護基， 以最終能夠合成所述化合物。此外，可以以交替順序或次序進行各種合成步驟，得到期望的 化合物。用於合成適用的化合物的合成化學轉化和保護基方法(保護和脫保護)是本領域 公知的並且包括，例如描述在如下文獻中這樣的方法R. Larock，Comprehensive Organic Transformations,VCH Publishers (1989) ；T. W. Greene禾口P. G. M. Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd Ed. , John Wiley 禾口 Sons (1999) ；L. Fieser 禾口 M. Fieser, Fieser and Fieser' s Reagents for Organic Synthesis, John Wiley 禾口 Sons(1994)； 禾口 L. Paquette，ed.，Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley 禾口 Sons (1995)及其後續版本。使用如下縮寫
DMF-DMA二甲基甲醯胺二甲基乙縮醛
EtOAc乙酸乙酯
ESI電噴霧電離
h小時
HPLC高效液相色譜法
HRMS高解析度質譜法
LCMS液相色譜法_質譜法
M摩爾
MeCN乙腈
MeOH甲醇
min分鐘
MS質譜法
NCSN-氯琥珀醯亞胺
NEt3三乙胺
TBTU2-(1Η-苯並三唑-1-基)-1，1，3，3_四甲基脲四
氟硼酸鹽
THF四氫呋喃
本文變量的任意定義中列出的化學基團的描述包括該變量作為列出基團的任
單一基團或組合的定義。本文實施方案的描述包括作為任意單一實施方案或與任意其他實 施方案或其部分組合的該實施方案。現在通過下列非限制性實施例進一步示例本發明。下文具體實施例認作為僅僅是 示例性的，但不以任何方式限定本說明書公開內容的其餘部分。儘管沒有進一步闡述，但是 認為本領域技術人員基於本文描述可以以其最完整的程度利用本發明。將所用參考出版物 和公開出版物完整地引入本文參考。實施例和中間體化合物實驗方法除非另有指定，否則全部試劑均為商品級並且無需進一步純化接受使用。除非另 有指定，否則在所有其他情況中使用試劑級溶劑。使用Waters/Micromass Platform ZQ 系統進行製備型HPLC/MS，並且使用Gilson系統、根據實施例中具體描述的實驗進行製備 型HPLC/UV。使用安裝了電噴霧接口的Agilent 1100/1200系列液相色譜儀/質量選擇檢 測器(MSD)(單一四極)(1946A/1946C/1956C/6110)進行分析型 HPLC/MS。使用 Merck 矽 膠60(230-400目)進行製備性快速色譜。使用Personal Chemistry Smith Creator或 Personal Chemistry SmithOptimizer、應用配有鋁蓋和隔片的 0. 5_2mL 或 2_5mL Smith Process小瓶進行微波反應。使用連接Agilent 1100HPLC系統的AgilentMSD-TOF得到高 分辨質譜(HRMS)。在分析過程中，根據兩種質量檢驗校準並且如果需要自動校正。以正電 噴霧模式獲取光譜。獲取的質量範圍是m/z 100-1100。使用質量峰的分布檢測。使用ACD Name 6.0命名化合物。中間體15-(2-甲基苯基)異噁唑-4-甲酸
步驟1 3- (2-甲基苯基)-3-氧代丙酸甲酯 將2-甲基苯乙酮(20g，149mmol)溶於甲苯(20mL)，在室溫緩慢加入攪拌的 NaH(7. 16g,298mmol)和碳酸二甲酯(14. 8g，164mmol)在甲苯(約150mL)的淤漿中。通過 LCMS監測反應。當原料苯乙酮耗盡時，在約IOmin內加入MeOH(約IOmL)，同時攪拌，然後 加入約50mL碎冰。用CH2Cl2稀釋該混合物，用HCl水溶液(9-12M)酸化。分離有機相，用 CH2Cl2萃取水相。乾燥合併的有機相(Na2SO4),蒸發溶劑，得到27. 2g標題化合物(>95% 純)。MS m/z 193[m+1]。步驟2: (2Z)-3-( 二甲氨基)-2-(2-甲基苯甲醯基)丙烯酸甲酯將3-(2-甲基苯基)-3-氧代丙酸甲酯(27. lg, 141mmol)溶於甲苯(IOOmL)。加入 DMF-DMA (17. 6g，148. Ommol)，將該反應混合物在70°C攪拌。當原料耗盡時(通過LCMS監 測)，將該反應混合物冷卻至室溫，蒸發溶劑，得到34. Ig標題化合物(> 95%純)，將其用 於下一步。MS m/z 248[m+1] 步驟3 5-(2-甲基苯基)異噁唑-4-甲酸甲酯 將(2Z)-3_( 二甲氨基)-2-(2_甲基苯甲醯基)丙烯酸甲酯(34. 0g，138mmol)和 羥基胺鹽酸鹽(10. lg,145mmol)溶於Me0H(150mL)，在室溫攪拌得到的溶液。通過HPLC監 測反應。18h後，蒸發90%的溶劑，將殘餘物溶於CH2Cl2，用水洗滌，乾燥(Na2SO4)15蒸發溶 劑，得至IJ 28. 5g( > 95%純)標題化合物。MS m/z 218[m+1]。步驟4 5-(2-甲基苯基)異噁唑-4-甲酸 將5-(2_甲基苯基)異噁唑-4-甲酸甲酯(8. OOg, 36. 8mmol)溶於HOAc (40mL)。 加入HCl (濃)，同時在室溫攪拌，直到觀察到混濁(約40mL)。在70°C攪拌該反應混合物， 通過HPLC監測。18h後，將該反應體系冷卻至室溫，用水(IOOmL)稀釋，用CH2Cl2(2x50mL) 萃取。用水(50mL)洗滌合併的有機相。用K2CO3中和有機相，用K2COwK溶液(3xl00mL)萃 取。用012(12(約50mL)洗滌合併的鹼水相，用HCl水溶液(濃)酸化，用CH2Cl2 (3xl00mL)萃取。乾燥合併的有機相(Na2SO4),蒸發溶劑，得到6.51g淺褐色固體(>98%純)。MS m/ z204[m+l]。中間體 2-12以適當取代的苯乙酮為原料，按照如中間體1所述方法製備中間體2-12。
中間體133-(2，4-二甲基苯基)異噁唑-4-甲酸步驟1 :2，4_ 二甲基苯甲醛肟
^OH H將 2，4_ 二甲基苯甲醛(10.0g;74. 5mmol)、羥基胺鹽酸鹽(7. 73g ;lllmmol)和吡啶(IOmL)在Me0H(75mL)中的溶液在室溫攪拌過夜。蒸發溶劑，將粗混合物溶於 CH2Cl2 (150mL)，用水(4x25mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)。蒸發溶劑，得到10. Ig透明油狀物，在 其在室溫固化，用於下一步。MS m/z 150 [m+1]。步驟2 :2，4-二甲基-N-羥基苯羧亞氨醯氯(carboximidoylchloride) 在室溫在90min內向2，4_ 二甲基苯甲醛肟(6. 12g，41. Immo 1)在DMF (IOOmL)中 的攪拌溶液中分小部分加入N-氯琥珀醯亞胺(6.30g，47.2mmol)在DMF中的溶液。將該反 應混合物攪拌過夜，然後用乙醚稀釋，用冰水洗滌，乾燥(MgS04)，蒸發溶劑，得到6. 92g標 題化合物，為黃色油狀物。MS m/z 184[m+l]。步驟3 :3-(2，4-二甲基苯基)異噁唑_4_甲酸乙酯 向乙基-3-( 二甲氨基)丙烯酸酯(1.56g，10.9mmOl)在乙醚(30mL)中的冰冷溶 液中加入三甲胺(1.52ml，10.9mmOl)，然後滴加(在Ih內)溶於乙醚(15mL)的2，4_ 二甲 基-N-羥基苯羧亞氨醯氯(2. 012g, 10. 96mmol)。白色沉澱形成，再加入乙醚(50mL)。除去 冰浴，將該反應混合物在22°C攪拌過夜。通過過濾除去固體，用5% HOAc水溶液(3x)洗滌 有機相，乾燥(MgSO4)，蒸發溶劑，得到2. 54g標題化合物。MSm/z246 [m+1]。步驟4 :3-(2，4-二甲基苯基)異噁唑_4_甲酸在微波反應器中將3-(2，4-二甲基苯基)異噁唑-4-甲酸乙酯(890mg，3.63mmol) 在HOAc (IOmL)和12M HCl水溶液(5mL)中的溶液在110°C加熱70min。將該反應混合物濃 縮至約一半體積，用甲苯稀釋。除去水相，用IM HCl水溶液萃取有機相。用甲苯萃取合併 的水相，合併有機相，濃縮。通過快速色譜法純化殘餘物(CH2Cl2/MeOH 9 1)，得到723mg 標題化合物，為棕色油狀物。MS m/z 224[m+l]。中間體 14-16以適當取代的苯甲醛為原料，按照如中間體13的方法所述製備中間體14-16。
中間體172- [ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇鹽酸鹽 在室溫將(S)-哌啶-3-甲酸乙酯(25. 0g, 159mmol)在CH2Cl2(25mL)中的溶液滴 加到攪拌的二碳酸二叔丁酯(36. 5g，167mmol)在CH2Cl2(150mL)中的溶液中。將該反應體 系攪拌過夜。用飽和NaHCO3水溶液洗滌粗混合物，然後與10% NH3水溶液(約30mL) —起 攪拌90min。分離有機相，乾燥(Na2SO4),蒸發溶劑，得到39. 7g 1_叔丁基3-乙基(3S)-哌 啶-1，3-二甲酸酯，為透明油狀物，在靜置時固化。將1-叔丁基3-乙基(3S)-哌啶-1，3-二甲酸酯(16. 0g，62. 2mmol)在無水 THF(IOOmL)中的溶液在Ih內滴加到攪拌的MeMgBr的THF/甲苯溶液中(IOOmL, 1. 4M， HOmmol)。通過用冰冷卻將該反應混合物保持在低於25°C。將該反應混合物攪拌過夜，通 過滴加水(約5mL)淬滅，然後加入HCl水溶液(6M)，直到用pH_試紙顯示呈酸性。分離有 機相，蒸發溶劑。將殘餘物溶於CH2Cl2，用水(約50mL)洗滌，乾燥(Na2SO4)，蒸發溶劑，得到 14. 7g淡黃色油狀物。將粗產物溶於EtOAc/HCl (g) (IOOmL ；由鼓泡HCl (g)進入EtOAc制 備)，在室溫攪拌過夜。蒸發溶劑。將粗產物溶於CH2Cl2 (IOOmL)，攪拌5min。蒸發溶劑(重 復一次)，將粗產物真空溫熱至50°C 3h。將粗產物與乙醚一起研磨，導致形成白色晶體，其 被過濾，乾燥至得到6. 41g標題化合物。MSm/zl44[m+l]。中間體18 2- [ (3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇鹽酸鹽
如中間體17方法所述由(R)-哌啶-3-甲酸乙酯(25. 0g, 159mmol)和二碳酸二叔 丁酯(36. 5g，167mmol)製備標題化合物，得到6. 88g產物，為白色固體。MSm/z 144[m+l]。中間體192-[哌啶-3-基]丙-2-醇鹽酸鹽 如中間體17方法所述由-哌啶-3-甲酸乙酯(6. 837g，47. 75mmol)和二碳酸二叔 丁酯(10. 42g，47. 75mmol)製備標題化合物，得到4. 85g產物，為白色固體。MSm/zl44[m+1]。中間體201-(哌啶-3-基)乙-1-醇 在微波反應器中將1_(吡啶-3-基)乙醇(249mg，2.03mmol)、甲酸銨(557mg， 8. 83mmol)和 Pd/C(10%,65. 5mg)在 EtOH(15mL)中的混合物加熱至 110°C 20min。再加入 一定量的甲酸銨(412mg，6. 53mmol)，將該反應混合物加熱至110°C 20min。過濾該反應混合 物，蒸發溶劑，得到165mg標題化合物。MS m/z 130 [m+1]。實施例12-(l-{[5-(2-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(2-甲基苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體 1 ； 103mg，0. 51mmol)和 TBTU(195mg， 0. 607mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇鹽酸鹽(中間體19 ； 116mg,0. 645mmol)和三乙胺(0. 142mL，1. Olmmol)在 CH2Cl2(2mL)中的混合物中。將該 混合物在室溫攪拌30min。用乙醚稀釋該混合物，用飽和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液 洗滌，然後乾燥(MgS04)。蒸發溶劑，通過快速色譜法純化殘餘物(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)，得到145mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C19H24N2O3 328. 1786，測定值 328. 1784.實施例22-((3R)-l-{[5_(2-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(2-甲基苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體1 ； 102mg，0. 507mmol)和 TBTU(196mg,0. 611mmol)在 CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 鹽酸鹽(中間體 18 ；84. Img, 0. 471mmol)和三乙胺(0. 142mL, 1. Olmmol)在 CH2Cl2 (2mL)中 的混合物中。將該混合物在室溫攪拌過夜，然後用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液、5%HOAc水溶液洗滌，乾燥(MgSO4)。蒸發溶劑，通過快速色譜法純化殘餘物(乙醚/石油醚/ MeOH 60 35 5)，得到IOlmg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C19H24N2O3 328. 1786，測定值 328. 1790。實施例32- ((3S)-1-{[5- (2-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(2-甲基苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體1 ；64. Omg, 0. 36mmol)和 TBTU(101mg,0. 315mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液加入到 2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 鹽酸鹽(中間體 17 ；54. Img, 0. 379mmol)和三乙胺(0. 048mL，0. 341mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中 的混合物中。將該混合物在室溫攪拌lhr。通過製備性HPLC純化粗產物(Xterra C18，IOmM NH4HC03 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)，得到 23mg 標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C19H24N2O3 328. 1786，測定值 328. 1788。實施例42- (1- {[5- (3-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(3-甲基苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體2 ； 112mg,0. 551mmol)和 TBTU(194mg,0. 607mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇鹽酸鹽(中 間體 19 ； 136mg，0. 757mmol)和三乙胺(0. 196mL, 1. 41mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。 將該混合物在室溫攪拌30min，用乙醚稀釋，用飽和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶液洗滌，幹 燥(MgS04)。蒸發溶劑，通過快速色譜法純化殘餘物(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)， 得到174mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C19H24N2O3 328. 1786，測定值 328. 1785。實施例52- ((3S)-1-{[5- (4-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將DMF(3滴)加入到5_(4_甲基苯基)異噁唑_4_甲酸(中間體3 ;1. IOg, 5. 41mmol)在SOCl2 (8mL)中的溶液中。將該混合物溫熱至110°C 30min，然後真空濃縮。在-20 V將醯氯在CH2Cl2 (20mL)中的冷(-20 °C )溶液加入到2- [ (3S)-哌啶-3-基] 丙-2-醇鹽酸鹽(中間體17 ；0. 973g，5. 41mmol)和三乙胺(1. 49mL, 11. 8_ο1)在 CH2Cl2(IOmL)中的溶液中。將該反應混合物攪拌30min，然後用CH2Cl2稀釋。用0. 5M HCl 水溶液(3xl5mL)洗滌該混合物，乾燥(Na2SO4),蒸發溶劑，得到澄清糖漿狀物/油狀物。將 糖漿狀物溶於乙醚，在室溫蒸發溶劑。將固體部分在乙醚中研磨，導致形成750mg標題化合 物，為白色固體。HRMS (ESI+)計算值 C19H24N2O3 328. 1786，測定值 328. 1797。實施例62- ((3R)-1-{[5- (2-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5- (2-氯苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體 4 ； 148mg, 0. 664mmol)和 TBTU (264mg, 0. 822mmol)在CH2Cl2 (IOmL)中的溶液加入到2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙_2_醇鹽酸鹽(中 間體 18 ； 169mg, 0. 940mmol)和 NEt3 (236 μ L, 172mg, 1. 70mmol)在 CH2Cl2 (5mL)中的混合 物中。將該混合物在室溫攪拌30min。蒸發溶劑，通過快速色譜法純化殘餘物(石油醚/ EtOAc (1 1,1-6% MeOH))，得到 179mg 標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，測定值 348. 1247。實施例72- ((3S)-1-{[5- (2-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(2-氯苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體 4 ； 149mg，0. 666mmol)和 TBTU(246mg， 0. 766mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的混合物加入到2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇鹽酸鹽(中 間體 17 ； 147mg,0. 818mmol)和 NEt3 (190 μ L，1. 34mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液中。將該混 合物在室溫攪拌30min，用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3水溶液、鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)。蒸 發溶劑，通過快速色譜法純化殘餘物(石油醚/EtOAc 1 1，梯度1-6% MeOH)，得到23. Img 標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，測定值 348. 1249。實施例82- ((3S)-1-{[5- (3-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(3-氯苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體 5 ；67mg，0. 30mmol)和 TBTU(1 OOmg, 0. 312mmol)在CH2Cl2(5mL)中的溶液加入到2_[ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇鹽酸鹽(中間體 17 ；57mg，0. 32mmol)和 NEt3 (120 μ L，1. 34mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。將該混合物 在室溫攪拌 30min。蒸發溶劑，通過製備性 HPLC(Xterra C18, IOmM NH4HCO3 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)純化殘餘物，得到12mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，測定值 348. 1244。實施例92- ((3R)-1-{[5- (4-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(4-氯苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體6 ； 117mg，0. 524mmol)和 TBTU (195. 7mg，0. 609mmol)在 CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇 鹽酸鹽(中間體 I8 ;107mg，0. 595mmol)和三乙胺(ΙδΟ μ L，1. OSmmol)在 CH2Cl2(2mL)中 的混合物中。將該混合物在室溫攪拌30min。用乙醚稀釋該混合物，用飽和NaHCO3水溶 液、5% HOAc水溶液洗滌，乾燥(MgSO4)。蒸發溶劑，通過快速色譜法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)純化殘餘物，得到120mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，測定值 348. 1247。實施例102- ((3S)-1-{[5- (4-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(3-氯苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體 6 ；57mg，0. 30mmol)和 TBTU(80mg, 0. 249mmol)在CH2Cl2 (5mL)中的溶液加入到2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇鹽酸鹽(中間體 17 ； 147mg，0. 818mmol)和 NEt3 (120 μ L，1. 34mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。將該混合 物在室溫攪拌 30min。蒸發溶劑，通過製備性 HPLC (Xterra C18，IOmMNH4HCO3 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)純化殘餘物，得到19mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，測定值 348. 1245。實施例112- (1- {[5- (2-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_2_基)乙醇 將2-(2-羥基乙基)哌啶(203mg, 1. 57mmol)加入到5_(2_氯苯基)異噁唑-4-甲 酸(中間體 4 ； 120mg,0. 54mmol)和 TBTU(206mg，0. 642mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液中。 將該反應在室溫攪拌30min。用乙醚稀釋該混合物，用飽和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶 液洗滌，然後乾燥(MgS04)。蒸發溶劑，通過快速色譜法純化殘餘物(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)，得到5mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C17H19ClN2O3 334. 1084，測定值 334. 1081。實施例122- (1- {[5- (3-氯_2_甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(3_氯-2-甲基苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體7 ；95. 5mg,0. 402mmol)和 TBTU(147mg,0. 458mmol)在CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇鹽酸鹽(中 間體 19 ；84. Omg, 0. 467mmol)和三乙胺(0. 112mL，0. 80mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。 將該混合物在室溫攪拌30min。用乙醚稀釋該混合物，用飽和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶 液洗滌，然後乾燥(MgS04)。蒸發溶劑，通過快速色譜法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5) 純化殘餘物，得到63mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C19H23ClN2O3 362. 1397，測定值 362. 1392。實施例132-(1_{ [5-(3，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5- (3，4- 二甲基苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體8 ；56. Omg, 0. 26mmol)和 TBTU(103mg,0. 321mmol)在CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到2-哌啶-3-基丙-2-醇(中間體 19 ；52. 2mg，0. 290mmol)和三乙胺(0. 072mL，0. 52mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。將 該混合物在室溫攪拌lh。用乙醚稀釋該混合物，用飽和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液洗 滌，乾燥(MgSO4),然後濃縮。通過快速色譜法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)純化殘 餘物，得到46mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值C20H26N2O3 342. 1943，測定值342. 1941。實施例14
23
2-((3 -1-{[5-(3，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇將5-(3，4- 二甲基苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體8 ； 139mg，0. 642mmol)和 TBTU(245mg,0. 766mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 (中間體 18 ； 140mg，0. 779mmol)和三乙胺(0. 225mL, 1. 6mmol)在 CH2Cl2(2mL)中的混合物 中。將該混合物在室溫攪拌lh，用乙醚稀釋，用飽和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液洗滌， 乾燥(MgSO4),濃縮。通過快速色譜法(乙醚/石油醚/Me0H70 25 5)純化殘餘物，得 到202mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，測定值 342. 1946。實施例152-((3幻-1-{[5-(3，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5- (3，4- 二甲基苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體8 ；68. Omg, 0. 31mmol)和 TBTU(101mg,0. 315mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液加入到 2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 鹽酸鹽(中間體 17 ;54mg，0. 3(kimol)和三乙胺(120 μ L, 1. 34mmol)在 CH2Cl2(2mL)中的 混合物中。將該混合物在室溫攪拌Ihr。通過製備性HPLC(Xterra C18, IOmM NH4HCO3(pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)純化粗產物，得到 9mg 標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，測定值 342. 1949。實施例162-((3 -1-{[5-(2，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5- (2，4- 二甲基苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體9 ； 104mg, 0. 478mmol)和 TBTU(166mg,0. 517mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 (中間體 18 ;92. 5mg，0. 515mmol)和三乙胺(133 μ L，97mg，0. 96mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的 混合物中。將該混合物在室溫攪拌lh。蒸發溶劑，通過快速色譜法(乙醚/石油醚/MeOH 70 26 4)純化殘餘物，得到105mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，測定值 342. 1945。
實施例172-((3幻-1-{[5-(2，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將DMF(3滴)加入到5_(2，4_ 二甲基苯基)異噁唑_4_甲酸(中間體9 ； 1. OOg, 4. 60mmol)在SOCl2 (8mL)中的溶液中。將該混合物溫至110 °C 30min,然後真 空濃縮。在-70 V將醯氯在CH2Cl2 (20mL)中的冷(-20 °C )溶液加入到2- [ (3S)-哌 啶-3-基]丙-2-醇鹽酸鹽(中間體17;0. 827g，4. 60mmol)和三乙胺(1. 3mL,9. 2mmol)在 CH2Cl2(IOmL)中的溶液中。在室溫將該反應混合物攪拌30min，用CH2Cl2稀釋。用0. 5M HCl 水溶液(3xl5mL)洗滌該混合物，然後乾燥(Na2SO4)，蒸發溶劑，得到澄清糖漿狀物/油狀物。 將糖漿狀物溶於乙醚，在室溫蒸發溶劑。將固體部分在乙醚中研磨，導致形成1. 32g標題化 合物，為淺褐色固體。HRMS (ESI+)計算值 C20H26N2O3 342. 1943，測定值 342. 1951。實施例182- ((3R)-1-{[5- (2-氟苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(2-氟苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體10 ；81. 6mg，0. 394mmol)和 TBTU(132mg,0. 411mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇鹽 酸鹽(中間體 18 ；73. 4mg，0. 408mmol)和三乙胺(0. ImL, 0. 719mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混 合物中。將該混合物在室溫攪拌30min。用乙醚稀釋，用飽和NaHCO3水溶液、5% HOAc水溶 液洗滌，然後乾燥(MgS04)。蒸發溶劑，通過快速色譜法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5) 純化殘餘物，得到49mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C18H21FN2O3 332. 1536，測定值 332. 1543。實施例19 2- ((3R)-1-{[5- (4-氟苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇
將5-(4-氟苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體11 ； 116. Omg, 0. 560mmol)和 TBTU(195mg,0. 607mmol)在 CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到 2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇鹽酸鹽(中間體 18 ；107. Omg, 0. 595mmol)和三乙胺(0. 083mL,0. 600mmol)在 CH2C12(2mL) 中的混合物中。將該混合物在室溫攪拌lh，然後用乙醚稀釋。用飽和NaHCOyK溶液、5% HOAc水溶液洗滌有機相，然後乾燥(MgSO4)。蒸發溶劑，通過快速色譜法(乙醚/石油醚/ MeOH 70 25 5)純化殘餘物，得到174mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C18H21FN2O3 332. 1536，測定值 332. 1527。實施例202- ((3S)-1-{[5- (4-氟苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(4-氟苯基)異噁唑-4-甲酸(中間體11 ；52. Omg, 0. 301mmol)和 TBTU(101mg,0. 315mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的溶液加入到 2-[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇 鹽酸鹽(中間體 17 ；54. Img, 0. 301mmol)和三乙胺(0. 048mL，0. 3mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中 的混合物中。將該混合物在室溫攪拌Ihr。通過製備性HPLC (Xterra C18, IOmM NH4HCO3 (pH 10)-CH3CN) (5-30% MeCN)純化粗產物，得到24mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C18H21FN2O3 332. 1536，測定值 332. 1534。實施例212-((3R)-l-{[5_(l-萘基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將5-(1_ 萘基)異噁唑-4-甲酸(中間體 12 ；IOlmg, 0. 424mmol)和 TBTU(140mg, 0.436mmol在CH2Cl2 (6mL)中的溶液加入到2-[ (3R)-哌啶-3-基]丙_2_醇鹽酸鹽(中間 體 18 ；80. Img, 0. 446mmol)和三乙胺(118μ L，0. 85mmol)在 CH2Cl2 (2mL)中的混合物中。將 該混合物在室溫攪拌30min，然後用乙醚稀釋。用飽和NaHCO3水溶液、5 % HOAc水溶液洗滌 有機相，乾燥(MgS04)。蒸發溶劑，通過快速色譜法(乙醚/石油醚/MeOH 70 25 5)純 化殘餘物，得到44mg標題化合物。HRMS (ESI+)計算值 C22H24N2O3 364. 1787，測定值 364. 1781。實施例222-((3S)-l-{[3_(2-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將溶於CH2Cl2 (4mL)的3_ (2-甲基苯基)異噁唑_4_甲酸(中間體14 ； 137mg, 0. 674mmol)和 TBTU(221mg, 0. 688mmol)加入到 2_[ (3S)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇鹽酸鹽 (中間體 17 ;121mg，0. 673mmol)和 NEt3 (189 μ L，1. 35mmol)在 CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。 將該混合物在22°C攪拌90min，濃縮，通過快速色譜法純化(石油醚/EtOAc/MeOH梯度 6 4 0 —48 48 4)，得到47mg標題化合物，為灰色固體。HRMS (ESI+)計算值 C19H24N2O3 328. 1787，測定值 328. 1788。實施例232-((3R)-l-{[3_(2-甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 將溶於CH2Cl2(5mL)的3_(2_甲基苯基)異噁唑~4~甲酸(中間體14 ；92. Omg, 0. 452mmol)和 TBTU(145mg, 0. 452mmol)加入到 2_[ (3R)-哌啶-3-基]丙 _2_ 醇鹽酸鹽 (中間體 18 ；97. 5mg, 0. 545mmol)和 NEt3 (126 μ L, 0. 935mmol)在 CH2Cl2 (4mL)中的溶液 中。將該混合物在22°C攪拌90min，濃縮，通過快速色譜法純化(石油醚/EtOAc/MeOH梯度 6 4 0 —48 48 4)，得到81mg標題化合物，為白色泡沫。HRMS (ESI+)計算值 C19H24N2O3 328. 1787，測定值 328. 1786。實施例242-((3R)-l-{[3_(2-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇在微波反應器中將溶於SOCl2 (IOmL)的3_(2_氯苯基)異噁唑_4_甲酸(中間體 15 ；795mg,3. 56mmol)加熱至110°C 20min。真空濃縮該混合物，溶於CH2Cl2 (5mL)，在室溫加 入到 2-[(3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇鹽酸鹽(中間體 18 ；630mg,3. 51mmol)和NEt3(l. 24mL， 8. 90mmol)在CH2Cl2 (20mL)中的溶液中。將該反應混合物攪拌30min，用CH2Cl2 (20mL)稀 釋。用5% HOAc水溶液、鹽水洗滌有機相，乾燥(MgS04)。蒸發溶劑，將粗產物在甲苯中研 磨，得到977mg標題化合物，為白色固體。HRMS (ESI+)計算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，測定值 348. 1240。實施例252- ((3S)-1-{[3- (2-氯苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 在微波反應器中將溶於SOCl2 (IOmL)的3_(2_氯苯基)異噁唑_4_甲酸(中間體 15 ；1. OOg, 4. 48mmol)加熱至110°C 20min。真空濃縮該混合物，溶於CH2Cl2 (5mL)，在室溫加 入到 2-[(3S)-哌啶-3-基]丙-2-醇鹽酸鹽(中間體 17 ；807mg,4. 49mmol)和 NEt3 (1. 56mL， 11. 2mmol)在CH2Cl2 (20mL)中的溶液中。將該反應混合物攪拌30min，用CH2Cl2 (20mL)稀 釋。用5% HOAc水溶液、鹽水洗滌，然後乾燥(MgS04)。蒸發溶劑，將粗產物在甲苯中研磨， 得到1.32g標題化合物，為白色固體。HRMS (ESI+)計算值 C18H21ClN2O3 348. 1241，測定值 348. 1242。實施例261- (1- {[3- (2-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶_3_基)乙醇 在微波反應器中將溶於SOCl2 (3mL)的3_(2_氯苯基)異噁唑_4_甲酸(中間體15 ； 149mg，0. 666mmol)在120°C加熱15min。真空濃縮該混合物，溶於CH2Cl2 (5mL)，在室溫加入 到 I-(哌啶-3-基)乙-1-醇(中間體 20 ； 130mg, 0. 785mmol)和 NEt3 (0. 228mL, 1. 64mmol) 在CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。將該反應混合物攪拌30min。用CH2Cl2 (20mL)稀釋該混合物。 用IM HCl水溶液和鹽水洗滌，然後乾燥(MgS04)。通過快速色譜法純化物(CH2Cl2/MeOH梯 度98 2 — 94 6)，得到99. Img澄清油狀物的標題化合物，為4種非對映異構體的混合 物。HRMS (ESI+)計算值 C17H19ClN2O3 334. 1084，測定值 334. 1085。實施例272-((3 -1-{[3-(2，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 在微波反應器中將溶於SOCl2 (2mL)的3_ (2，4_ 二甲基苯基)異噁唑_4_甲酸(中 間體13 ； 135mg,0. 621mmol)加熱至110°C 30min。真空濃縮該混合物，溶於CH2Cl2(5mL)， 在室溫加入到2-[(3R)-哌啶-3-基]丙-2-醇鹽酸鹽(中間體18 ;112mg，0. 623mmol)和 NEt3 (0. 173mL, 1. 24mmol)在CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。將該反應混合物攪拌30min，然後用 乙醚稀釋。用IM HCl水溶液、鹽水洗滌有機相，然後乾燥(MgS04)。使殘餘物從乙醚/石油醚中結晶，得到152mg標題化合物，為白色固體。HRMS (ESI+)計算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，測定值 342. 1947。實施例282-((3幻-1-{[3-(2，4-二甲基苯基)異噁唑_4_基]羰基}哌啶_3_基)丙_2_醇 在微波反應器中將溶於SOCl2 (2mL)的3_ (2，4_ 二甲基苯基)異噁唑_4_甲酸(中 間體13 ； 115mg,0. 529mmol)在110°C加熱20min。真空濃縮該混合物，溶於CH2Cl2 (5mL)，在 室溫加入到2-[(3S)_哌啶-3-基]丙-2-醇鹽酸鹽(中間體17 ； 105mg,0. 584mmol)和三 乙胺(0. 173mL, 1. 24mmol)在CH2Cl2 (4mL)中的溶液中。將該反應混合物攪拌30min，然後 用乙醚稀釋。用IM HCl水溶液、鹽水洗滌有機相，然後乾燥(MgS04)。使殘餘物從乙醚/石 油醚中結晶，得到11 Img標題化合物，為淺褐色固體。HRMS (ESI+)計算值 C2tlH26N2O3 342. 1943，測定值 342. 1949。生物學方法閃爍迫近分析法(1，2 (n)-3H)-可的松購自 Amersham Pharmacia Biotech。抗可的松單克隆小 鼠抗體克隆6D6.7獲自Immimotech，且包被了單克隆抗小鼠抗體的閃爍親近測定(SPA) 珠購自 Amersham Pharmacia Biotech。NADPH 四鈉鹽來自 Calbiochem，且葡糖 _6_ 磷酸 (G-6-P)由Sigma提供。人11 β-羥基類固醇脫氫酶1型酶(ΙΙβ-HSDl)在巴斯德畢赤酵 母(Pichia pastoris)中表達。18-β-甘草亭酸(GA)獲自Sigma。將化合物的連續稀釋 液溶於 DMSO(ImM)並且用包含 ImM EDTA 的 50mMTris_HCl，pH 7. 2 稀釋。在 Wallac Quadra 上進行培養板增殖。用Packard，Top Count微量培養板液體閃爍計數器測定與珠結合的 [3H]-氫化可的松的量。11 β -HSDl酶測定在96孔微量滴定板(Packard Optiplate)中進行，總孔體積 為220 μ L並且包含30mM Tris-HCl，pH 7.2與ImM EDTA、底物混合物氚標記的可的松/ NADPH(175ηΜ/181 μ Μ)、G_6_P (InM)和連續稀釋的抑制劑。通過加入作為巴斯德畢赤酵母細 胞勻化物或由巴斯德畢赤酵母製備的微粒體的人11 β -HSDl開始反應。在混合後，在室溫 將培養板振搖30-45分鐘。用IOyL ImM GA終止溶液終止反應。然後加入單克隆小鼠抗體 (IOyL 4μΜ)，然後加入IOOyL SPA珠(根據製造商的說明混懸)。通過不添加11 β-HSDl 設定適宜對照組，得到非特異性結合(NSB)值。用塑料薄膜覆蓋培養板，在室溫、在振蕩器 上孵育30分鐘，然後計數。用微量培養板液體閃爍計數器測定與珠結合的[3H]-氫化可的 松的量。通過使用活性鹼計算抑制劑的Ki值。根據IC5tl計算Ki值，使用Cheng Prushoff 等式計算Km值(其中可逆抑制遵循Michaelis-Menten等式)=Ki = IC50 (1+[S]/Kffl) [Cheng, Y. C. ；Prushoff，W. H. Biochem. Pharmacol. 1973，22，3099-3108]。在測定中以實驗方式測定 IC5tl，其中可的松更新成氫化可的松的減少依賴於每一物質的抑制潛能。實施例1-28的化合物對11 β -HSDl的Ki值典型地在約5ηΜ_約600ηΜ。
HTM-細胞試驗MYOC基因產物-myocilin在許多眼組織包括小梁網(TM)和睫狀體中表達(牽連 眼內壓的調節的眼的結構)。MYOC基因突變涉及眼內壓升高和一些形式的開角型青光眼。 該蛋白質被糖皮質激素誘導至較高程度並且啟示它涉及眼房水流出阻力的調節(例如，參 見Nguyen Τ. D.等人(1998) J. Biol. Chem. 273，6341-6350，Tamm Ε. R. (2002) ProgRetin Eye Res 21,395-428)。此外，11 β -羥基類固醇脫氫酶1型(ΙΙβ-HSDl)是負責無活性糖皮質 激素可的松胞內轉化成活性類固醇激素氫化可的松的酶。人小梁網(HTM)細胞初級培養物分離自由人眼庫獲得的外植塊並且用於兩種不 同類型的實驗。就劑量響應實驗而言，將細胞與連續稀釋的測試化合物(在包含IOOnM可 的松的細胞培養基中10 μ Μ-565ρΜ) 一起孵育24小時。對照組僅是培養基(陰性對照)和 IOOnM可的松(陽性對照)。使用氫化可的松-EIA試劑盒測定收集的培養基中的氫化可的 松水平，並且根據得到的劑量響應曲線測定IC5tl值為3-30ηΜ。進行長期實驗以檢驗MYOC和11 β -HSDl基因的表達是否可能與氫化可的松水平 相關。實驗持續3周並且從與可的松的7天孵育期開始，然後在可的松的存在下與化合物 一起孵育7天。為了研究化合物的效果是否持續1至最多3天，從培養基中取出它並且僅 加入可的松。收集培養基用於氫化可的松分析並且製備細胞裂解液以便在第7、14、15和17 天時進行基因表達分析。所有步驟中的對照組僅是培養基(陰性對照)和IOOnM可的松 (陽性對照)。每個第3天進行培養基改變。用氫化可的松-EIA試劑盒測定收集的培養基 中的氫化可的松水平。在17-天處理後從細胞裂解液中提取RNA，並且通過相對定量和實時 TaqMan聚合酶鏈反應測定基因表達。作為對照組，使用18S RNA和β-肌動蛋。與對照組 校準RNA水平以避免因細胞密度導致的差異。與陽性對照相比，用抑制劑+可的松的7-天處理導致防止了 98%的氫化可的松 產生。有趣的是，在取出抑制劑後1和3天，氫化可的松產生仍然保持較低水平且停留在其 相應對照組的約20%和50%。在類似的方式中，MYOC和11 β -HSDl基因受到抑制劑影響。 在相應可的松處理7-14天後測定了 MYOC基因的2-至10-倍的向上調節。另一方面，僅 用可的松處理7天和用抑制劑+可的松處理的又7天期限的細胞停止了基因的向上調節， 並且保持在與可的松處理第一周後相同的表達水平。除去抑制劑後1天，MYOC表達恢復至 對照組的約40%，且在向上調節後3天，它達到可的松對照組的約70%。在相同條件下， 11 β -HSDl基因表達增加了 2-至5-倍，以及取出抑制劑逐步恢復了可的松實現的向上調 節。總之，本發明化合物對抑制氫化可的松產生的寬泛影響與對涉及眼內壓升高的基 因產物表達的效果相關，並且證實它對藥理學相關小梁網細胞具有長效作用。角膜透性篩選工具測試如本文所述選擇的許多化合物在體外局部施用於豬眼後的它們的眼穿透性， 作為決定其作為眼內藥物候選物的潛能的輔助。新鮮的眼來自在每天早晨實驗期過程中處 死的動物。將眼轉入包含+37°C BSS的50ml Falcon試管，以允許角膜內皮變成有代謝活 性。在局部施用測試物質前，將眼放入溼度室，以避免較長孵育過程中眼過度乾燥。使豬眼暴露在化合物的磷酸鹽緩衝液的溶液或混懸液。Cremophor RH40 (聚 氧乙烯醚氫化蓖麻油，BASF)通常用作製劑賦形劑。對每一製劑而言，使用三種孵育時間。對每一時間點而言，使用6隻眼。在施用前，用BSS洗滌眼，然後施用50 μ 1磷酸鹽緩衝液， 以溼潤角膜表面。在孵育開始時施加1滴(20 μ 1)製劑。在孵育時間結束時，用30G套管 給角膜穿孔並且抽取房水(AH)，轉入塑料管。將房水樣品貯存在_18°C至分析為止。就測試化合物而言，在IOmin接觸後，將AH濃度測定為在0. 001-6 μ M的範圍。作 為篩選工具，然後使用AH2tlminAC5tl的化合物濃度比進行化合物分類。對測試化合物發現該 比值在30-400範圍。結果，顯示本發明所述的化合物在體外局部施用於豬眼後能夠透過眼。
權利要求
式(I)的化合物，或其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物、幾何異構體、互變體、旋光異構體或N 氧化物，其中X Y表示N O或O N；R1獨立地選自滷素、氰基、CF3、OCF3、C1 4 烷基、羥基 C1 4 烷基、C1 4 烷氧基 C1 4 烷基和C1 4 烷氧基；或兩個取代基R1與所連接的碳原子一起形成5 或6 元芳族或非芳族環，其任選包含一個或多個選自O和N的雜原子，且該環任選被一個或多個取代基取代，所述取代基選自滷素、氰基、CF3、OCF3、C1 4 烷基、羥基 C1 4 烷基、C1 4 烷氧基 C1 4 烷基和C1 4 烷氧基；R2獨立地選自C1 8 烷基、羥基 C1 8 烷基、C1 8 烷氧基 C1 8 烷基、C1 8 烷氧基、羥基 C1 8 烷氧基、C1 8 烷氧基 C1 8 烷氧基、C3 8 環烷基、羥基 C3 8 環烷基、C1 8 烷氧基 C3 8 環烷基、C3 8 環烷氧基、羥基 C3 8 環烷氧基和C1 8 烷氧基 C3 8 環烷氧基；a是0，1或2；且m和n各獨立地是0、1或2；條件是該化合物不選自·1 [(5 苯基 4 異噁唑基)羰基] 哌啶；·5 苯基 4 (吡咯烷 1 基羰基)異噁唑；·5 (4 氟苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)異噁唑；·5 (4 氯苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)異噁唑；·5 (4 溴苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)異噁唑；·5 (4 甲基苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)異噁唑；·5 (4 甲氧基苯基) 4 (吡咯烷 1 基羰基)異噁唑；·4 {[2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 (4 甲基苯基)異噁唑；·4 {[(2S) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 (4 甲基苯基)異噁唑；·4 {[(2R) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 (4 甲基苯基)異噁唑；·5 (2 氯苯基) 4 {[2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基}異噁唑；·5 (2 氯苯基) 4 {[(2S) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 異噁唑；·5 (2 氯苯基) 4 {[(2R) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 異噁唑；·4 {[(2S) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 [4 (三氟甲基)苯基]異噁唑；·4 {[(2R) 2 (甲氧基甲基)吡咯烷 1 基]羰基} 5 [4 (三氟甲基)苯基]異噁唑；·5 (4 氯苯基) 4 {[2 (異丙基)吡咯烷 1 基]羰基}異噁唑；·2 (1 {[5 (4 甲基苯基)異噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 (1 {[5 (2 氯苯基)異噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 [1 ({5 [4 (三氟甲基)苯基]異噁唑 4 基}羰基)哌啶 3 基]丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[3 (4 甲基苯基)異噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[5 (4 甲基苯基)異噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[3 (4 甲氧基苯基)異噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·2 ((3R) 1 {[3 (3 氯 4 甲氧基苯基)異噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)丙 2 醇；·3 (1 {[5 (4 甲基苯基)異噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)戊 3 醇；·3 (1 {[3 (4 甲基苯基)異噁唑 4 基]羰基}哌啶 3 基)戊 3 醇；·3，5 二甲基 1 {[5 (4 甲基苯基)異噁唑 4 基]羰基}哌啶；·1 {[5 (2 氯苯基)異噁唑 4 基]羰基} 3，5 二甲基哌啶；·3，5 二甲基 1 ({5 [4 (三氟甲基)苯基]異噁唑 4 基}羰基)哌啶；·5 乙基 2 甲基 1 {[5 (4 甲基苯基)異噁唑 4 基]羰基}哌啶；·1 {[5 (2 氯苯基)異噁唑 4 基]羰基} 5 乙基 2 甲基哌啶；和·5 乙基 2 甲基 1 ({5 [4 (三氟甲基)苯基]異噁唑 4 基}羰基)哌啶。FPA00001184106900011.tif
2.權利要求1的化合物，其中a是1。
3.權利要求1或2的化合物，其中R1是滷素或CV4-烷基，或其中兩個取代基R1與所連 接的碳原子一起形成5-或6-元環。
4.權利要求1-3任一項的化合物，其中R1是F、Cl或甲基，或其中兩個取代基R1與所 連接的碳原子一起形成6-元芳族環。
5.權利要求1-4任一項的化合物，其中R2是羥基-Cm-烷基或C"-烷氧基-CM-烷氧基。
6.權利要求1-5任一項的化合物，其中R2是1-羥基乙基、2-羥基乙基或1-羥基-1-甲 基乙基。
7.權利要求1的化合物，選自 2-(1-{[5-(2_甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3R)-l-{[5-(2-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2- ((3S)-1-{[5- (2-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-(1-{[5-(3_甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (4-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (2-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (2-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (3-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (4-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (4-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-(1-{[5-(2-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-2-基)乙醇； 2-(1-{[5-(3_氯-2-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-(1-{ [5-(3，4-二甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3 -1-{[5-(3，4-二甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3幻-1-{[5-(3，4-二甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3 -1-{[5-(2，4-二甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3幻-1-{[5-(2，4-二甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2- ((3R)-1-{[5- (2-氟苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (4-氟苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[5- (4-氟苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3R)-1-{[5- (1-萘基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3S)-l-{[3-(2-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2-((3R)-l-{[3-(2-甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 2- ((3R)-1-{[3- (2-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2- ((3S)-1-{[3- (2-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙-2-醇； 2-((3 -1-{[3-(2，4-二甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇； 1-(1_{[3-(2-氯苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)乙醇；和 2-((3幻-1-{[3-(2，4-二甲基苯基)異噁唑-4-基]羰基}哌啶-3-基)丙_2_醇。
8.藥物組合物，包含作為活性成分的權利要求1-7任一項的化合物和藥學可接受的載 體、稀釋劑或賦形劑。
9.權利要求1-7任一項的化合物，用於療法。
10.權利要求1-7任一項的化合物，用於治療或預防青光眼。
11.權利要求1-7任一項的化合物在製備治療或預防青光眼的藥物中的應用。
12.治療或預防青光眼的方法，包括對有這種治療需要的人受試者給予有效量的權利 要求1-7任一項的化合物。全文摘要
本發明涉及新穎的式(I)的異噁唑化合物，及其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物、幾何異構體、互變體、旋光異構體或N-氧化物，它們是11β-羥基類固醇脫氫酶1型(11β-HSD1)調節劑。本發明還涉及包含這些化合物的藥物組合物和這些化合物在製備治療青光眼的藥物中的應用。
文檔編號A61P27/00GK101910160SQ200980102362
公開日2010年12月8日 申請日期2009年1月16日 優先權日2008年1月17日
發明者J·泰吉布蘭特, L·喬漢松, M·哈拉德森, S·比斯託姆 申請人:比奧維特羅姆股份公開公司