嘌呤化合物及其作為大麻素受體配體的用途的製作方法

2023-05-06 16:46:26

專利名稱：嘌呤化合物及其作為大麻素受體配體的用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及嘌呤化合物和可用於合成所述嘌呤化合物的中間體。嘌呤化合物可用作大麻素受體配體，特別是CB-1受體拮抗劑。因而，本發明也涉及嘌呤化合物在治療受大麻素受體配體調節的疾病、病症和障礙中的用途，包括用於這種用途的藥物組合物。
背景肥胖是公眾所關注的主要健康問題之一，因其不僅日益普遍，而且危及健康。肥胖和超重一般是由體重指數(BMI)所定義的，它與總體脂水平相關，可估計疾病的相對危險性。BMI是這樣計算的，體重的千克數除以身高的米數的平方(kg/m2)。超重通常被定義為BMI達25-29.9kg/m2，肥胖通常被定義為BMI達30kg/m2。例如參見National Heart，Lung，and Blood Instiyute，Clinical Guidelines on theIdentification，Evaluation，and Treatment of Overweight andObesity in Adults，The Evidence Report，Washington，DCU.S.Department of Health and Human Services，NIH publication no.98-4083(1998)。
肥胖的增加受到關注，因為大量健康危險因素與肥胖有關，包括冠心病、中風、高血壓、2型糖尿病、血脂異常、睡眠呼吸暫停、骨關節炎、膽囊疾病、抑鬱和某些形式的癌症(例如子宮內膜、乳腺、前列腺和結腸)。肥胖的消極健康後果使其在美國成為可預防的死亡的第二主導原因，為社會帶來顯著的經濟與精神社會影響。參見McGinnis M，Foege WH.，″Actual Causes of Death in the United States，″JAMA，270，2207-12(1993)。
肥胖現在被認為是一種慢性疾病，它需要治療以減少其有關的健康危險因素。儘管體重減輕是重要的治療結果，不過肥胖調控的主要目標之一是改善心血管與代謝值以減少肥胖相關性發病率和死亡率。已經顯示，體重減輕5-10％能夠基本上改善代謝值，例如血糖、血壓和脂質濃度。因此，據信有意的減少體重5-10％可以減少發病率和死亡率。
目前可用於調控肥胖的處方藥一般通過誘發飽滿感或降低飲食脂肪吸收來減少體重。飽滿感是通過增加去甲腎上腺素、血清素或此二者的突觸水平得以實現的。例如，刺激血清素受體亞型1B、1D與2C和1-與2-腎上腺素能受體可通過調節飽滿感降低食物攝取。參見Bray GA，″The New Era of Drug Treatment.Pharmacologic Treatment ofObesitySymposium Overview，″Obes Res.，3(suppl 4)，415s-7s(1995)。腎上腺素能藥(例如安非拉酮、苄非他明、苯甲曲秦、馬吲哚和芬特明)通過促進兒茶酚胺的釋放，調節中樞去甲腎上腺素與多巴胺受體，從而發揮其作用。過去的腎上腺素能減重藥(例如苯丙胺、脫氧麻黃鹼和芬美曲嗪)主要藉助多巴胺途徑，由於被濫用的危險而不再被推薦。芬氟拉明和右芬氟拉明都是用於調節食慾的血清素能藥，也不再可得。
最近，CB1大麻素受體拮抗劑/反激動劑已被建議作為潛在的食慾抑制劑。例如參見Arnone，M.，et al.，″Selective Inhibition ofSucrose and Ethanol Intake by SR141716，an Antagonist of CentralCannabinoid(CB1)Receptors，″Psychopharmacol，132，104-106(1997)；Colombo，G.，et al.，″Appetite Suppression and WeightLoss after the Cannabinoid Antagonist SR141716，″Life Sci.，63，PL113-PL117(1998)；Simiand，J.，et al.，″SR141716，a CB1Cannabinoid Receptor Antagonist，Selectively Reduces Sweet Foodintake in Marmose，″Behav.Pharmacol.，9，179-181(1998)；andChaperon，F.，et al.，″Involvement of Central Cannabinoid(CB1)Receptors in the Establishment of Place Conditioning in Rats，″Psychopharmacology，135，324-332(1998)。關於大麻素CB1和CB2受體調節劑的綜述，參見Pertwee，R.G.，″Cannabinoid ReceptorLigandsClinical and Neuropharmacological Considerations，Relevant to Future Drug Discovery and Development，″Exp.Opin.Invest.Drugs，9(7)，1553-1571(2000)。
儘管研究尚在進行中，不過仍然存在對更加有效安全的治療性處置的需求，供減少或預防體重增加。
除了肥胖以外，也尚未滿足對酒精濫用治療的需求。在美國，酗酒影響大約一千零九十萬男性和四百四十萬女性。每年有大約十萬例死亡歸因於酒精濫用或依賴。與酗酒有關的健康危險因素包括運動控制性與作決定能力減退、癌症、肝疾病、先天缺損、心臟病、藥物/藥物相互作用、胰腺炎和人際關係問題。研究提示，內源性大麻素狀況在乙醇攝取的控制中扮演決定性角色。已經顯示內源性CB1受體拮抗劑SR-141716A阻滯大鼠和小鼠的自願乙醇攝取。參見See，Arnone，M.，etal.，″Selective Inhibition of Sucrose and Ethanol Intake bySR141716，an Antagonist of Central Cannabinoid(CB1)Receptors，″Psvchopharmacol，132，104-106(1997)。關於綜述，參見Hungund，B.L and B.S.Basavarajappa，″Are Anadamide and CannabinoidReceptors involved in Ethanol Tolerance？A Review of theEvidence，″Alcohol Alcoholism.35(2)126-133，2000。
目前對酒精濫用或依賴的治療一般面臨不依從性或者潛在的肝毒性；因此，尚未滿足對更有效的酒精濫用/依賴治療的迫切需求。
概述本發明提供用作大麻素受體配體(特別是CB1受體拮抗劑)的式(I)化合物
其中A是可選被取代的芳基或可選被取代的雜芳基(優選地，A是取代的苯基，更優選被一至三個取代基取代的苯基，所述取代基獨立地選自滷素(優選氯或氟)、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、滷素-取代的(C1-C4)烷基(優選氟-取代的烷基)和氰基，更優選地，A是2-氯苯基、2-氟苯基、2，4-二氯苯基、2-氟-4-氯苯基、2-氯-4-氟苯基或2，4-二氟苯基)；B是可選被取代的芳基或可選被取代的雜芳基(優選地，B是取代的苯基，更優選被一至三個取代基取代的苯基，所述取代基獨立地選自滷素(優選氯或氟)、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、滷素-取代的(C1-C4)烷基(優選氟-取代的烷基)和氰基，最優選地，B是4-氯苯基或4-氟苯基)；R1是氫、(C1-C4)烷基、滷素-取代的(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基(優選地，R1是氫、甲基、乙基、滷素-取代的甲基或乙基或者(C1-C4)烷氧基，更優選地，R1是氫、甲基、乙基、氟-取代的甲基或乙基或者(C1-C4)烷氧基，最優選地，R1是氫、甲基或氟-取代的甲基)；R4是(i)式(IA)或式(IB)基團 其中R4a是氫或(C1-C3)烷基；R4b和R4b』各自獨立地是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、((C1-C4)烷基)2氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4b或R4b』與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；X是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4c)(R4c』)-，其中R4c和R4c』各自獨立地是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、二(C1-C4)烷基氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4c或R4c』與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；Y是氧、硫、-C(O)-、-C(＝N-OH)-或-C(R4d)(R4d』)-，其中R4d和R4d』各自獨立地是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、HO-NH-、(C1-C6)烷基氨基-、二(C1-C4)烷基氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4d和R4d』一起構成部分或完全飽和的3-至6-元雜環、5-或6-元內酯環或4-至6-元內醯胺環，其中該雜環、內酯環和內醯胺環是可選被取代的，該內酯環和內醯胺環可選地含有另外的選自氧、氮或硫的雜原子，或者Y是-NR4d」-，其中R4d」是氫或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C3-C6)環烷基、(C1-C3)烷基磺醯基-、(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、二(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、醯基、(C1-C6)烷基-O-C(O)-、芳基和雜芳基，其中該部分是可選被取代的；Z是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4e)(R4e』)-，其中R4e和R4e』各自獨立地是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、二(C1-C4)烷基氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4e或R4e』與R4b、R4b』、R4c』或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；R4f和R4f』各自獨立地是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、二(C1-C4)烷基氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4f或R4f』與R4b、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；其條件是若R4是式(IA)基團，則(a)R4b、R4b』、R4c、R4c』、R4d、R4d』、R4d」、R4e、R4e』、R4f和R4f』至少有一個不是氫、(C1-C4)烷基或滷素-取代的(C1-C4)烷基；和(b)若X和Z是一條鍵、-CH2-或-CH2CH2-，R4b、R4b』、R4f和R4f』是氫，則Y不是氧、硫或-NH-；或者(ii)式(IC)基團
其中R5和R6各自獨立地是氫或(C1-C4)烷基，並且R7是(C1-C4)烷基-、滷素-取代的(C1-C4)烷基-、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基-、(C1-C4)烷基氨基(C1-C4)烷基-、二(C1-C4)烷基氨基(C1-C4)烷基-或者部分或完全飽和的4-至6-元雜環，所述雜環含有1至2個獨立選自氧、硫或氮的雜原子，或者R5和R6或R5和R7一起構成5-或6-元內酯、4-至6-元內醯胺或者4-至6-元部分或完全飽和的雜環，所述雜環含有1至2個獨立選自氧、硫或氮的雜原子，其中該內酯、內醯胺和雜環是可選被取代的；其藥學上可接受的鹽、該化合物或鹽的前體藥物或者該化合物、鹽或前體藥物的溶劑化物或水合物。
優選的本發明化合物是這樣的式(I)化合物，其中R4是式(IA)基團。優選地，R4b和R4b』各自獨立地是氫、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4b或R4b』與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；X是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4c)(R4c』)-，其中R4c是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、((C1-C4)烷基)2氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4c與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋，並且R4e』是氫、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，
或者R4c』與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；Y是氧、硫、-C(O)-或-C(R4d)(R4d』)-，其中R4d是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、((C1-C4)烷基)2氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，並且R4d』是氫、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4d和R4d』一起構成部分或完全飽和的3-至6-元雜環、5-或6-元內酯環或4-至6-元內醯胺環，其中該雜環、內酯環和內醯胺環是可選被取代的，該內酯環和內醯胺環可選地含有另外的選自氧、氮或硫的雜原子，或者Y是-NR4d」-，其中R4d」是氫或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C3-C6)環烷基、(C1-C3)烷基磺醯基-、(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、二(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、醯基、(C1-C6)烷基-O-C(O)-、芳基和雜芳基，其中該部分是可選被取代的；Z是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4e)(R4e』)-，其中R4e是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、((C1-C4)烷基)2氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4e與R4d、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋，並且R4e』是氫、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4e』與R4b、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；R4f和R4f』各自獨立地是氫、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4f或R4f』與R4b、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；其藥學上可接受的鹽、該化合物或鹽的前體藥物或者該化合物、鹽或前體藥物的溶劑化物或水合物。
優選地，R4b是氫、可選被取代的(C1-C3)烷基或者與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；R4b』是氫、可選被取代的(C1-C3)烷基或者與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；R4f是氫、可選被取代的(C1-C3)烷基或者與R4b、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；並且R4f』是氫、可選被取代的(C1-C3)烷基或者與R4b、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋。進而更優選地，R4b、R4b』、R4f和R4f』都是氫。
若Y是-NR4d」-，則R4d」優選地是氫或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C3-C6)環烷基、(C1-C3)烷基磺醯基-、(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、二(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、醯基、(C1-C6)烷基-O-C(O)-、芳基和雜芳基，其中該部分是可選被取代的；更優選地，R4d」是氫或選自下列基團的化學部分(C1-C3)烷基磺醯基-、(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、二(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、醯基、(C1-C6)烷基-O-C(O)-和雜芳基，其中該部分是可選被取代的；優選地，該(C1-C3)烷基磺醯基-、(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、二(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、醯基和(C1-C6)烷基-O-C(O)-可選地被1至3個氟取代，該雜芳基可選地被1至2個取代基取代，所述取代基獨立地選自氯、氟、(C1-C3)烷氧基、(C1-C3)烷基和氟-取代的(C1-C3)烷基；X是-C(R4c)(R4c』)-，其中R4c和R4c』各自獨立地是氫、H2NC(O)-、可選被取代的(C1-C6)烷基、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-或((C1-C4)烷基)2N-C(O)-，或者R4c或R4c』與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；並且Z是-C(R4e)(R4e』)-，其中R4e和R4e』各自獨立地是氫、H2NC(O)-、可選被取代的(C1-C6)烷基、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-或((C1-C4)烷基)2N-C(O)-，或者R4e或R4e』與R4b、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋。
若Y是-C(R4d)(R4d』)-，則R4d是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、((C1-C4)烷基)2氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的(優選地，R4d是氨基、(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C4)烷基氨基、(C3-C6)環烷基氨基、醯基氨基、芳基(C1-C4)烷基氨基-或雜芳基(C1-C4)烷基氨基-，更優選地，R4d是氨基、(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C4)烷基氨基、(C3-C6)環烷基氨基)，並且R4d』是氫、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的(優選地，R4d』是(C1-C6)烷基、H2NC(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-或芳基，更優選地，R4d』是H2NC(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-或((C1-C4)烷基)2N-C(O)-)，
或者R4d和R4d』一起構成部分或完全飽和的3-至6-元雜環、5-或6-元內酯環或4-至6-元內醯胺環，其中該雜環、內酯環和內醯胺環是可選被取代的，該內酯環和內醯胺環可選地含有另外的選自氧、氮或硫的雜原子；X是一條鍵或-C(R4c)(R4c』)-，其中R4c和R4c』各自是氫；Z是一條鍵或-C(R4e)(R4e』)-，其中R4e和R4e』各自是氫。
另一種實施方式是這樣的化合物，其中Y是-C(R4d)(R4d』)-，R4d、R4d』、R4f或R4f』都是氫；R4d是氫、羥基、氨基或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-和二(C1-C4)烷基氨基-，其中該部分是可選被取代的(優選地，R4d是氫、羥基、氨基或這樣一種化學部分，選自(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C6)烷基氨基-和二(C1-C4)烷基氨基-)；R4d』是氫或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、芳基和雜芳基，其中該部分是可選被取代的(優選地，R4d』是氫或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基和芳基，其中該部分是可選被取代的)。在這種實施方式中，X優選地是-C(R4c)(R4c』)-，其中R4c和R4c』各自獨立地是氫或可選被取代的(C1-C6)烷基，或者R4c或R4c』與R4e或R4e』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋(優選地，R4c和R4c』各自是氫，或者R4c或R4c』與R4e或R4e』一起構成一條鍵)；Z優選地是-C(R4e)(R4e』)-，其中R4e和R4e』各自獨立地是氫或可選被取代的(C1-C6)烷基，或者R4e或R4e』與R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋(優選地，R4e和R4e』各自是氫，或者R4e或R4e』與R4c或R4c』一起構成一條鍵)。
另一種實施方式是這樣的化合物，其中Y是-C(R4d)(R4d』)-，R4b、R4b』、R4f或R4f』都是氫；R4d和R4d』一起構成部分或完全飽和的3-至6-元雜環、5-至6-元內酯環或者4-至6-元內醯胺環，其中該雜環、內酯環和內醯胺環是可選被取代的，該內酯環或內醯胺環可選地含有另外的選自氧、氮或硫的雜原子(優選地，R4d和R4d』一起構成5-至6-元內醯胺環，其中該內醯胺環是可選被取代的，並且可選地含有另外的選自氮或氧的雜原子)。在這種實施方式中，X優選地是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4c)(R4c』)-，其中R4c和R4c』各自獨立地是氫或可選被取代的(C1-C6)烷基，或者R4c或R4c』與R4e或R4e』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋(更優選地，X是一條鍵或-C(R4c)(R4c』)-，其中R4c和R4c』各自是氫)；Z優選地是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4e)(R4e』)-，其中R4e和R4e』各自獨立地是氫或可選被取代的(C1-C6)烷基，或者R4e或R4e』與R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋(更優選地，Z是一條鍵或-C(R4e)(R4e』)-，其中R4e和R4e』各自是氫)。
另一種優選的本發明化合物是這樣的式(I)化合物，其中R4是式(IB)基團，其中R4a是如上所定義的，R4b是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、((C1-C4)烷基)2氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，R4b』是氫、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4b或R4b』與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；X是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4c)(R4c』)-，其中R4c是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、((C1-C4)烷基)2氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4c與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋，並且
R4c』是氫、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4c』與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋(優選地，X是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4c)(R4c』)-，其中R4c和R4c』各自獨立地是氫或(C1-C6)烷基)；Y是氧、硫、-C(O)-或-C(R4d)(R4d』)-，其中R4d是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、((C1-C4)烷基)2氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，並且R4d』是氫、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4d和R4d』一起構成部分或完全飽和的3-至6-元雜環、5-或6-元內酯環或4-至6-元內醯胺環，其中該雜環、內酯環和內醯胺環是可選被取代的，該內酯環和內醯胺環可選地含有另外的選自氧、氮或硫的雜原子，或者Y是-NR4d」-，其中R4d」是氫或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C3-C6)環烷基、(C1-C3)烷基磺醯基-、(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、二(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、醯基、(C1-C6)烷基-O-C(O)-、芳基和雜芳基，其中該部分是可選被取代的(優選地，Y是-NR4d」，其中R4d」是氫或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C3-C6)環烷基、(C1-C3)烷基磺醯基-、(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、二(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、醯基、(C1-C6)烷基-O-C(O)-、芳基和雜芳基，其中該部分是可選被取代的)；Z是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4e)(R4e』)-，其中R4e是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、((C1-C4)烷基)2氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4e與R4b、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋，並且R4e』是氫、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4e』與R4b、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋(優選地，Z是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4c)(R4c』)-，其中R4c和R4c』各自獨立地是氫或(C1-C6)烷基)；R4f是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、((C1-C4)烷基)2氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，R4f』是氫、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4f或R4f』與R4b、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；其藥學上可接受的鹽、該化合物或鹽的前體藥物或者該化合物、鹽或前體藥物的溶劑化物或水合物。
另一種優選的本發明化合物是這樣的式(I)化合物，其中R4是式(IC)基團，其中R5和R6各自獨立地是氫或(C1-C4)烷基，R7是(C1-C4)烷基-、滷素-取代的(C1-C4)烷基-、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基-、(C1-C4)烷基氨基(C1-C4)烷基-、二(C1-C4)烷基氨基(C1-C4)烷基-或者部分或完全飽和的4-至6-元雜環，所述雜環含有1至2個獨立選自氧、硫或氮的雜原子，或者R5和R6或R5和R7一起構成5-至6-元內酯、4-至6-元內醯胺或者部分或完全飽和的4-至6-元雜環，所述雜環含有1至2個獨立選自氧、硫或氮的雜原子，其中該內酯、內醯胺和雜環是可選被取代的；其藥學上可接受的鹽、該化合物或鹽的前體藥物或者該化合物、鹽或前體藥物的溶劑化物或水合物。
優選地，R5和R6各自獨立地是氫或(C1-C4)烷基，R7是(C1-C4)烷基。
優選的本發明化合物包括1-[9-(4-氯-苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-乙基氨基-氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺；1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-異丙基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺；1-{1-[9-(4-氯-苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-苯基哌啶-4-基}-乙酮；{3-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-(1α，5α，6α)-氮雜二環[3.1.0]己-6-基}-二甲基胺；6-(1-苄基吡咯烷-3-基氧基)-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤；9-(4-氯苯基)-6-(1-環己基氮雜環丁烷-3-基氧基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤；6-叔丁氧基-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤；9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-6-異丙氧基-9H-嘌呤；1-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-丙基氨基哌啶-4-羧酸醯胺；1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-丙基氨基哌啶-4-羧酸醯胺；1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-丙基氨基哌啶-4-羧酸醯胺；1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-2-甲基-9H-嘌呤-6-基]-4-異丙基氨基哌啶-4-羧酸醯胺；1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-吡咯烷-1-基-哌啶-4-羧酸醯胺；1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-乙基氨基-哌啶-4-羧酸醯胺；1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-異丙基氨基哌啶-4-羧酸醯胺；4-氨基-1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌啶-4-羧酸醯胺；1-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-甲基氨基哌啶-4-羧酸醯胺；1-[9-(4-氯-苯基)-8-(2-氟苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-異丙基氨基哌啶-4-羧酸醯胺；8-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-1-異丙基-1，3，8-三氮雜螺[4.5]癸烷-4-酮；9-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-1-甲基-4-氧雜-1，9-二氮雜螺[5.5]十一烷-2-酮；8-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-1-異丙基-1，3，8-三氮雜螺[4.5]癸烷-4-酮；1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-(4-氟苯基)-哌啶-4-醇；1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-苯基哌啶-4-醇；4-苄基-1-[9-(4-氯-苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌啶-4-醇；4-[9-(4-氯-苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌嗪-2-羧酸甲基醯胺；9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-6-(4-吡啶-2-基-哌嗪-1-基)-9H-嘌呤；和9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-6-(4-嘧啶-2-基-哌嗪-1-基)-9H-嘌呤；其藥學上可接受的鹽或者該化合物或鹽的溶劑化物或水合物。
優選的藥學上可接受的鹽包括鹽酸鹽、甲磺酸鹽和苯磺酸鹽。在有些情形中，游離鹼是優選的。「游離鹼」表示具有孤電子對的氨基。
本發明的另一種實施方式包括中間體(1c/d)和(1b)，它們可用於合成本發明化合物 其中A和B各自獨立地是被1至3個取代基取代的苯基，所述取代基獨立地選自滷素、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、滷素-取代的(C1-C4)烷基和氰基；R1是氫、(C1-C4)烷基、滷素-取代的(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基；R4是羥基或滷素； 其中A和B各自獨立地是被1至3個取代基取代的苯基，所述取代基獨立地選自滷素、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、滷素-取代的(C1-C4)烷基和氰基；R1是氫、(C1-C4)烷基、滷素-取代的(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基。
優選地，A和B各自獨立地是被1至2個取代基取代的苯基，所述取代基獨立地選自氯、氟、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、氟-取代的(C1-C4)烷基和氰基。更優選地，A是2-氯苯基、2-氟苯基、2，4-二氯苯基、2-氟-4-氯苯基、2-氯-4-氟苯基或2，4-二氟苯基；並且B是4-氯苯基或4-氟苯基。
本發明的另一種實施方式包括藥物組合物，包含(1)本發明化合物和(2)藥學上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。優選地，組合物包含治療上有效量的本發明化合物。組合物還可以含有至少一種附加藥用成分(如本文所述)。優選的成分包括菸鹼受體部分激動劑、阿片樣物質拮抗劑(例如納曲酮和納美芬)、多巴胺能藥(例如阿樸嗎啡)、注意渙散多動症(ADHD)藥(例如RitalinTM、StratteraTM、ConcertaTM和AdderallTM)和抗肥胖藥(如下文所述)。
本發明的另一種實施方式包括治療動物受大麻素受體(特別是CB1受體)拮抗劑調節的疾病、病症或障礙的方法，包含給予需要這類治療的動物治療有效量的式(II)化合物(或其藥物組合物)的步驟，
其中A是可選被取代的芳基或可選被取代的雜芳基；B是可選被取代的芳基或可選被取代的雜芳基；R1是氫、(C1-C4)烷基、滷素-取代的(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基；R4是(i)式(IA)或式(IB)基團 其中R4a是氫或(C1-C3)烷基；R4b和R4b』各自獨立地是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、((C1-C4)烷基)2氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4b或R4b』與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；X是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4c)(R4c』)-，其中R4c和R4c』各自獨立地是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、二(C1-C4)烷基氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4c或R4c』與R4e、R4e』、R4f或R4f』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；Y是氧、硫、-C(O)-或-C(R4d)(R4d』)-，其中R4d和R4d』各自獨立地是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、HO-NH-、(C1-C6)烷基氨基-、二(C1-C4)烷基氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4d和R4d』一起構成部分或完全飽和的3-至6-元雜環、5-或6-元內酯環或4-至6-元內醯胺環，其中該雜環、內酯環和內醯胺環是可選被取代的，該內酯環和內醯胺環可選地含有另外的選自氧、氮或硫的雜原子，或者Y是-NR4d」-，其中R4d」是氫或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C3-C6)環烷基、(C1-C3)烷基磺醯基-、(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、二(C1-C3)烷基氨基磺醯基-、醯基、(C1-C6)烷基-O-C(O)-、芳基和雜芳基，其中該部分是可選被取代的；Z是一條鍵、-CH2CH2-或-C(R4e)(R4e』)-，其中R4e和R4e』各自獨立地是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、二(C1-C4)烷基氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4e或R4e』與R4b、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；R4f和R4f』各自獨立地是氫、氰基、羥基、氨基、H2NC(O)-或選自下列基團的化學部分(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、醯氧基、醯基、(C1-C3)烷基-O-C(O)-、(C1-C4)烷基-NH-C(O)-、((C1-C4)烷基)2N-C(O)-、(C1-C6)烷基氨基-、二(C1-C4)烷基氨基-、(C3-C6)環烷基氨基-、醯基氨基-、芳基(C1-C4)烷基氨基-、雜芳基(C1-C4)烷基氨基-、芳基、雜芳基、部分或完全飽和的3-至6-元雜環和部分或完全飽和的3-至8-元碳環，其中該部分是可選被取代的，或者R4f或R4f』與R4b、R4b』、R4c或R4c』一起構成一條鍵、亞甲基橋或亞乙基橋；或者(ii)式(IC)基團 其中R5和R6各自獨立地是氫或(C1-C4)烷基，並且R7是(C1-C4)烷基-、滷素-取代的(C1-C4)烷基-、(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基-、(C1-C4)烷基氨基(C1-C4)烷基-、二(C1-C4)烷基氨基(C1-C4)烷基-或者部分或完全飽和的4-至6-元雜環，所述雜環含有1或2個獨立選自氧、硫或氮的雜原子，或者R5和R6或R5和R7一起構成5-或6-元內酯、4-至6-元內醯胺或者4-至6-元部分或完全飽和的雜環，所述雜環含有1或2個獨立選自氧、硫或氮的雜原子，其中該內酯、內醯胺和雜環是可選被取代的；(iii)被一個或多個取代基取代的氨基，所述取代基獨立地選自(C1-C8)烷基、芳基(C1-C4)烷基、部分或完全飽和的(C3-C8)環烷基、羥基(C1-C6)烷基、(C1-C3)烷氧基(C1-C6)烷基、雜芳基(C1-C3)烷基和完全或部分飽和的雜環；或者
(iv)被一個或多個取代基取代的(C1-C6)烷基，所述取代基獨立地選自羥基、(C1-C6)烷氧基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C6)烷基氨基、(C1-C3)烷基磺醯基、(C1-C3)烷基氨磺醯基、二(C1-C3)烷基氨磺醯基、醯氧基、完全或部分飽和的雜環和完全或部分飽和的環烷基；其藥學上可接受的鹽、該化合物或鹽的前體藥物或者該化合物、鹽或前體藥物的溶劑化物或水合物。
受大麻素受體拮抗劑調節的疾病、病症和/或障礙包括進食障礙(例如良性進食障礙、食慾缺乏和食慾過盛)、體重減輕或控制(例如熱量或食物攝取的減少和/或食慾抑制)、肥胖、抑鬱、非典型抑鬱、雙極性精神障礙、精神病、精神分裂症、行為成癮、回報相關行為的抑制(例如條件性場所迴避，例如古柯鹼-與嗎啡-誘發的條件性場所偏愛的抑制)、精神作用物質濫用、成癮性精神障礙、衝動、酗酒(例如酒精濫用、成癮和/或依賴，包括戒酒治療、酒癮減少和復飲的預防)、菸草濫用(例如吸菸成癮、中止和/或依賴，包括菸癮減少的治療和復吸的預防)、痴呆(包括記憶喪失、阿爾茨海默氏病、老年性痴呆、血管性痴呆、輕微認知減退、衰老相關性認知衰退和輕微神經認知障礙)、男性性功能障礙(例如勃起困難)、癲癇發作、癲癇、胃腸障礙(例如胃腸運動或腸推進功能障礙)、注意渙散多動症(ADHD)、帕金森氏病和II型糖尿病。在優選的實施方式中，該方法用於治療肥胖、ADHD、酗酒和/或菸草濫用。
本發明化合物可以與其他藥用成分聯合給藥。優選的藥用成分包括菸鹼受體部分激動劑、類阿片拮抗劑(例如納曲酮(包括納曲酮藥庫製劑)、安塔布司和納美芬)、多巴胺能藥(例如阿樸嗎啡)、ADHD藥(例如鹽酸哌醋甲酯(例如RitalinTM和ConcertaTM)、阿託西汀(例如StratteraTM)和苯丙胺(例如AdderallTM))和治肥胖藥(例如apo-B/MTP抑制劑、MCR-4激動劑、CCK-A激動劑、單胺再攝取抑制劑、擬交感神經藥、β3腎上腺素能受體激動劑、多巴胺受體激動劑、黑素細胞刺激激素受體類似物、5-HT2c受體激動劑、黑素富集激素受體拮抗劑、來普汀、來普汀類似物、來普汀受體激動劑、促生長激素神經肽受體拮抗劑、脂酶抑制劑、蛙皮素受體激動劑、神經肽-Y受體拮抗劑、擬甲狀腺藥、脫氫表雄甾酮或其類似物、糖皮質激素受體拮抗劑、阿立新受體拮抗劑、高血糖素樣肽-1受體激動劑、睫狀神經營養因子、人刺鼠相關蛋白拮抗劑、ghrelin受體拮抗劑、組胺3受體拮抗劑或反激動劑和神經介素U受體激動劑等。
聯合療法可以以下列方式給予(a)單一的藥物組合物，它包含本發明化合物、至少一種本文所述附加藥用成分和藥學上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體；或者(b)兩種單獨的藥物組合物，包含(i)第一組合物，包含本發明化合物和藥學上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體，和(ii)第二組合物，包含至少一種本文所述附加藥用成分和藥學上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。藥物組合物可以被同時或者以任意順序先後給藥。
本發明的另一方面包括由消費者使用的藥物試劑盒，以治療動物受大麻素受體拮抗劑調節的疾病、病症或障礙。試劑盒包括a)適合的劑型，包含本發明化合物；和b)說明書，描述使用該劑型治療受大麻素受體(特別是CB1受體)拮抗劑調節的疾病、病症或障礙的方法。
另一種實施方式包括藥物試劑盒，包含a)第一劑型，包含(i)本發明化合物，和(ii)藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑；b)第二劑型，包含(i)本文所述附加藥用成分，和(ii)藥學上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑；和c)容器。
定義本文所用的術語「烷基」表示通式CnH2n+1的烴原子團。烷烴原子團可以是直鏈或支鏈的。例如，術語「(C1-C6)烷基」表示含有1至6個碳原子的一價直鏈或支鏈脂族基團(例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、新戊基、3，3-二甲基丙基、己基、2-甲基戊基等)。類似地，烷氧基、醯基(例如烷醯基)、烷基氨基、二烷基氨基和烷硫基的烷基部分具有上述相同定義。當被指示為「可選被取代」時，烷烴原子團或烷基部分可以是未取代的或者被一個或多個取代基取代(一般為一至三個取代基，滷素取代基的情況例外，例如全氯或全氟烷基)，所述取代基獨立地選自在下文「取代」的定義中所列舉的取代基組。「滷素-取代的烷基」表示被一個或多個滷素原子取代的烷基(例如氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、全氟乙基等)。當被取代時，烷烴原子團或烷基部分優選地被1至3個氟取代基取代，或者被1或2個取代基取代，所述取代基獨立地選自(C1-C3)烷基、(C3-C6)環烷基、(C2-C3)鏈烯基、芳基、雜芳基、3-至6-元雜環、氯、氰基、羥基、(C1-C3)烷氧基、芳氧基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C4)烷基氨基、氨基羧酸酯(即(C1-C3)烷基-O-C(O)-NH-)、羥基(C2-C3)烷基氨基或酮基(氧基)，更優選1至3個氟代基團，或者1個取代基，所述取代基選自(C1-C3)烷基、(C3-C6)環烷基、(C6)芳基、6-元雜芳基、3-至6-元雜環、(C1-C3)烷氧基、(C1-C4)烷基氨基或二(C1-C2)烷基氨基。
術語「部分或完全飽和的碳環」(也稱之為「部分或完全飽和的環烷基」)表示非芳族環，它們是部分或完全氫化的，可以存在單環、雙環或螺環。除非另有指定，碳環一般是3-至8-元環(優選3-至6-元環)。例如，部分或完全飽和的碳環(或環烷基)包括這樣的基團，例如環丙基、環丙烯基、環丁基、環丁烯基、環戊基、環戊烯基、環戊二烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、降冰片基(雙環[2.2.1]庚基)、降冰片烯基、雙環[2.2.2]辛基等。當被稱為「可選被取代」時，部分飽和或完全飽和的環烷基可以是未取代的或者被一個或多個取代基取代(通常一至三個取代基)，所述取代基獨立地選自在下文「取代」的定義中所列舉的取代基組。取代的碳環也包括這樣的基團，其中碳環是與苯基環稠合的(例如二氫茚基)。碳環可以通過碳環系統內任意一個碳原子與化學實體或部分連接。當被取代時，碳環基團優選地被1或2個取代基取代，所述取代基獨立地選自(C1-C3)烷基、(C2-C3)鏈烯基、(C1-C6)亞烷基、芳基、雜芳基、3-至6-元雜環、氯、氟、氰基、羥基、(C1-C3)烷氧基、芳氧基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C4)烷基氨基、氨基羧酸酯(即(C1-C3)烷基-O-C(O)-NH-)、羥基(C2-C3)烷基氨基或酮基(氧基)，更優選1或2個取代基，所述取代基獨立地選自(C1-C2)烷基、3-至6-元雜環、氟、(C1-C3)烷氧基、(C1-C4)烷基氨基或二(C1-C2)烷基氨基。類似地，一個基團(例如環烷基烷基、環烷基氨基等)的任意環烷基部分具有上述相同定義。
術語「部分飽和或完全飽和的雜環的環」(也稱之為「部分飽和或完全飽和的雜環」)表示非芳族環，它們是部分或完全氫化的，可以存在單環、雙環或螺環。除非另有指定，雜環一般是3-至6-元環，含有1至3個獨立選自硫、氧或氮的雜原子(優選1或2個雜原子)。部分飽和或完全飽和的雜環包括這樣的基團，例如環氧基、吖丙啶基、四氫呋喃基、二氫呋喃基、二氫吡啶基、吡咯烷基、N-甲基吡咯烷基、咪唑烷基、咪唑啉基、哌啶基、哌嗪基、吡唑烷基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、2H-苯並吡喃基、嗪基、嗎啉代基、硫嗎啉代基、四氫噻吩基、四氫噻吩基1，1-二氧化物等。當被指示為「可選被取代」時，部分飽和或完全飽和的雜環基團可以是未取代的或者被一個或多個取代基取代(通常一至三個取代基)，所述取代基獨立地選自在下文「取代」的定義中所列舉的取代基組。取代的雜環包括這樣的基團，其中雜環與芳基或雜芳基環稠合(例如2，3-二氫苯並呋喃基、2，3-二氫吲哚基、2，3-二氫苯並噻吩基、2，3-二氫苯並噻唑基等)。當被取代時，雜環基團優選地被1或2個取代基取代，所述取代基獨立地選自(C1-C3)烷基、(C3-C6)環烷基、(C2-C4)鏈烯基、芳基、雜芳基、3-至6-元雜環、氯、氟、氰基、羥基、(C1-C3)烷氧基、芳氧基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C3)烷基氨基、氨基羧酸酯(即(C1-C3)烷基-O-C(O)-NH-)或酮基(氧基)，更優選1或2個取代基，所述取代基獨立地選自(C1-C3)烷基、(C3-C6)環烷基、(C6)芳基、6-元雜芳基、3-至6-元雜環或氟。雜環基團可以通過雜環系統內任意一個環原子與化學實體或部分連接。類似地，一個基團(例如雜環-取代的烷基、雜環羰基等)的任意雜環部分具有上述相同定義。
術語「芳基」或「芳族碳環」表示具有單一(例如苯基)或稠合環系(例如萘、蒽、菲等)的芳族部分。典型的芳基是6-至10-元芳族碳環。當被指示為「可選被取代」時，芳基可以是未取代的或者被一個或多個取代基取代(優選不多於三個取代基)，所述取代基獨立地選自在下文「取代」的定義中所列舉的取代基組。取代的芳基包括芳族部分鏈(例如聯苯、三聯苯、苯基萘基等)。當被取代時，芳族部分優選地被1或2個取代基取代，所述取代基獨立地選自(C1-C4)烷基、(C2-C3)鏈烯基、芳基、雜芳基、3-至6-元雜環、溴、氯、氟、碘、氰基、羥基、(C1-C4)烷氧基、芳氧基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C3)烷基氨基或氨基羧酸酯(即(C1-C3)烷基-O-C(O)-NH-)，更優選1或2個取代基，所述取代基獨立地選自(C1-C4)烷基、氯、氟、氰基、羥基或(C1-C4)烷氧基。芳基可以通過芳族環系內任意一個碳原子與化學實體或部分連接。類似地，芳醯基或芳醯氧基(即(芳基)-C(O)-O-)的芳基部分具有上述相同定義。
術語「雜芳基」或「雜芳族環」表示在5-至10-元芳族環系內含有至少一個雜原子(例如氧、硫、氮或其組合)的芳族部分(例如吡咯基、吡啶基、吡唑基、吲哚基、吲唑基、噻吩基、呋喃基、苯並呋喃基、唑基、咪唑基、四唑基、三嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻唑基、嘌呤基、苯並咪唑基、喹啉基、異喹啉基、苯並噻吩基、苯並唑基等)。雜芳族部分可以由單一或稠合的環系組成。典型的單一雜芳基環是5-至6-元環，含有一至三個獨立選自氧、硫和氮的雜原子，典型的稠合雜芳基環系是9-至10-元環系，含有一至四個獨立選自氧、硫和氮的雜原子。當被指示為「可選被取代」時，雜芳基可以是未取代的或者被一個或多個取代基取代(優選不多於三個取代基)，所述取代基獨立地選自在下文「取代」的定義中所列舉的取代基組。當被取代時，雜芳族部分優選地被1或2個取代基取代，所述取代基獨立地選自(C1-C4)烷基、(C2-C3)鏈烯基、芳基、雜芳基、3-至6-元雜環、溴、氯、氟、碘、氰基、羥基、(C1-C4)烷氧基、芳氧基、氨基、(C1-C6)烷基氨基、二(C1-C3)烷基氨基或氨基羧酸酯(即(C1-C3)烷基-O-C(O)-NH-)，更優選1或2個取代基，所述取代基獨立地選自(C1-C4)烷基、氯、氟、氰基、羥基、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基氨基或二(C1-C2)烷基氨基。雜芳基可以通過芳族環系內任意一個原子與化學實體或部分連接(例如咪唑-1-基、咪唑-2-基、咪唑-4-基、咪唑-5-基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基、吡啶-5-基或吡啶-6-基)。類似地，雜芳醯基(即(雜芳基)-C(O)-O-)的雜芳基部分具有上述相同定義。
術語「醯基」表示烷基、部分飽和或完全飽和的環烷基、部分飽和或完全飽和的雜環、芳基和雜芳基取代的羰基。例如，醯基包括這樣的基團，例如(C1-C6)烷醯基(例如甲醯基、乙醯基、丙醯基、丁醯基、戊醯基、辛醯基、叔丁基乙醯基等)、(C3-C6)環烷基羰基(例如環丙基羰基、環丁基羰基、環戊基羰基、環己基羰基等)、雜環羰基(例如吡咯烷基羰基、吡咯烷-2-酮-5-羰基、哌啶基羰基、哌嗪基羰基、四氫呋喃基羰基等)、芳醯基(例如苯甲醯基)和雜芳醯基(例如噻吩基-2-羰基、噻吩基-3-羰基、呋喃基-2-羰基、呋喃基-3-羰基、1H-吡咯基-2-羰基、1H-吡咯基-3-羰基、苯並[b]噻吩基-2-羰基等)。另外，醯基的烷基、環烷基、雜環、芳基和雜芳基部分可以是上文各自定義所述的任意一個基團。當被指示為「可選被取代」時，醯基可以是未取代的或者可選地被一個或多個取代基取代(通常一至三個取代基)，所述取代基獨立地選自在下文「取代」的定義中所列舉的取代基組，或者醯基的烷基、環烷基、雜環、芳基和雜芳基部分可以如上分別在優選和更優選的取代基列表中所述被取代。
術語「取代」具體涵蓋一個或多個本領域中常見的取代。不過，本領域技術人員一般認為，取代基應當是這樣選擇的，以便不會不利地影響化合物的藥理學特徵或者不利地幹擾藥劑的使用。適合於任意如上所定義的基團的取代基包括(C1-C6)烷基、(C3-C7)環烷基、(C2-C6)鏈烯基、(C1-C6)亞烷基、芳基、雜芳基、3-至6-元雜環、滷素(例如氯、溴、碘和氟)、氰基、羥基、(C1-C6)烷氧基、芳氧基、硫氫基(巰基)、(C1-C6)烷硫基、芳硫基、氨基、單-或二-(C1-C6)烷基氨基、季銨鹽、氨基(C1-C6)烷氧基、氨基羧酸酯(即(C1-C6)烷基-O-C(O)-NH-)、羥基(C2-C6)烷基氨基、氨基(C1-C6)烷硫基、氰基氨基、硝基、(C1-C6)氨甲醯基、酮基(氧基)、醯基、(C1-C6)烷基-CO2-、羥乙醯基(glycolyl)、甘氨醯基、肼基、脒基、氨磺醯基、磺醯基、亞硫醯基、硫代(C1-C6)烷基-C(O)-、硫代(C1-C6)烷基-CO2-和它們的組合。在取代的組合的情況下，例如「取代的芳基(C1-C6)烷基」，芳基或烷基可以、或者芳基和烷基都可以被一個或多個取代基取代(通常一至三個取代基，全滷取代的情況例外)。芳基或雜芳基取代的碳環或雜環基團可以是稠合的環(例如二氫茚基、二氫苯並呋喃基、二氫吲哚基等)。
術語「滷素」表示氯、溴、氟或碘代基團。
術語「溶劑化物」表示由式(I)或(II)代表的化合物(包括其前體藥物和藥學上可接受的鹽)與一個或多個溶劑分子的分子絡合物。這類溶劑分子是藥學領域中常用的那些，已知對接受者無害，例如水、乙醇等。術語「水合物」表示其中溶劑分子是水的配合物。
措辭「藥學上可接受的」表明該物質或組合物必須在化學上和/或毒理學上與構成製劑的其他成分和/或用其治療的哺乳動物是相容的。
術語「保護基團」或「Pg」表示這樣一種取代基，它普遍用於封閉或保護特定的官能度，同時使化合物上的其他官能團反應。例如，「氨基保護基團」是與氨基連接的取代基，它封閉或保護化合物中的氨基官能度。適合的氨基保護基團包括乙醯基、三氟乙醯基、叔丁氧基羰基(BOC)、苄氧基羰基(CBz)和9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)。類似地，「羥基保護基團」表示羥基的取代基，它封閉或保護羥基官能度。適合的保護基團包括乙醯基和甲矽烷基。「羧基保護基團」表示羧基的取代基，它封閉或保護羧基官能團。常見的羧基保護基團包括-CH2CH2SO2Ph、氰基乙基、2-(三甲代甲矽烷基)乙基、2-(三甲代甲矽烷基)乙氧基甲基、2-(對-甲苯磺醯基)乙基、2-(對-硝基苯基亞磺醯基)乙基、2-(二苯膦基)乙基、硝基乙基等。關於保護基團及其使用的一般說明，參見T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley Sons，New York，1991。
措辭「治療上有效量」表示這樣一種本發明化合物的量(i)治療或預防本文所述特定的疾病、病症或障礙，(ii)減輕、改善或消除特定疾病、病症或障礙的一個或多個症狀，或者(iii)防止或延緩特定疾病、病症或障礙的一個或多個症狀的發生。
術語「動物」表示人(男性或女性)、寵物(例如狗、貓和馬)、食物來源動物、動物園動物、海洋動物、鳥類和其他相似的動物種類。「食用動物」表示食物來源動物，例如牛、豬、綿羊和家禽。
術語「治療」涵蓋防止、即預防和緩解性處置。
術語「受大麻素受體調節」或「大麻素受體的調節」表示大麻素受體的活化或去活化作用。例如，配體可以充當激動劑、部分激動劑、反激動劑、拮抗劑或部分拮抗劑。
術語「拮抗劑」包括完全拮抗劑和部分拮抗劑以及反激動劑。
術語「CB-1受體」表示與G蛋白偶聯的1型大麻素受體。
術語「本發明化合物」(除非另有具體認定)表示式(I)與式(II)化合物、其前體藥物、該化合物和/或前體藥物的藥學上可接受的鹽、和該化合物、鹽和/或前體藥物的水合物或溶劑化物、以及所有的立體異構體(包括非對映異構體和對映體)、互變體和同位素標記化合物。除非另有指定，術語「本發明化合物」不包括中間體(1c/d)或(1b)。
詳細說明合成本發明化合物的合成途徑可以包括類似於化學領域熟知過程的那些，特別按照包含在本文中的說明。原料一般可從商業來源獲得，例如Aldrich Chemicals(Milwaukee，WI)，或者容易利用本領域技術人員熟知的方法製備(例如製備方法一般描述在Louis F.Fieser andMary Fieser，Reagents for Organic Synthesis，v.1-19，Wiley，NewYork(1967-1999ed.)或Beilstein Handbuch der organischen Chemie，4，Aufl.ed.Springer-Verlag，Berlin中，包括增刊(也可由Beilstein聯機資料庫獲得))。
出於說明的目的，下述反應流程證明了合成本發明化合物、包括關鍵中間體的潛在途徑。關於各反應步驟的更詳細說明，參見下文實施例一節。本領域技術人員將領會到，其他合成途徑也可以用於合成本發明化合物(包括本發明中間體)。儘管在流程中描繪和在下文中討論了具體的原料和試劑，不過也容易替換為其他原料和試劑，以提供多種衍生物和/或反應條件。另外，很多由下述方法製備的化合物都可以按照本文公開內容利用本領域技術人員熟知的常規化學加以進一步修飾。
在本發明化合物的製備中，中間體的遠端官能度(例如伯胺或仲胺)的保護可能是必要的。對這類保護的需要將因遠端官能度的屬性和製備方法的條件而異。適合的氨基保護基團(NH-Pg)包括乙醯基、三氟乙醯基、叔丁氧基羰基(BOC)、苄氧基羰基(CBz)和9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)。對這類保護的需要容易為本領域技術人員所確定。關於保護基團及其使用的一般說明，參見T.W.Greene，Protective Groups in OrganicSynthesis，JohnWiley Sons，New York，1991。
式(I)和(II)化合物可以利用R.J.Chorvat et al.in J.Med.Chem，42，833-848(1999)中所述一般工藝加以製備，如下流程I所述。
流程I
中間體1(a)可以這樣製備，使所需的氨基化合物(B-NH2，其中B是如上所定義的)與4，6-二氯-5-氨基嘧啶(可從Sigma-Aldrich，St.Louis，MO獲得)在回流的含水鹽酸中反應(A.Miyashita et al.in Chem.Pharm.Bull.，46，390-399(1998))或者與高溫乙氧基乙醇反應。適合的氨基化合物(B-NH2)包括這樣的化合物，其中B是芳基(例如苯胺)或取代的芳基(例如2-氯苯胺、2-氟苯胺、2，4-二氯苯胺、2-氟-4-氯苯胺、2-氯-4-氟苯胺、2，4-二氟苯胺和其他取代的芳基胺)。其他商業上可獲得的4，6-二氯-5-氨基嘧啶衍生物可以用作其中R1不是氫的那些式(I)或(II)化合物的原料(例如2-甲基-4，6-二氯-5-氨基嘧啶和2-乙基-4，6-二氯-5-氨基嘧啶)。關於4，6-二氯-5-氨基嘧啶衍生物的代表性文獻合成法，參見A.Albert et al.in J.Chem.Soc.，3832(1954)和W.E.Hymang in J.Heterocycl.Chem.，13，1141(1976)。
中間體1(a)然後可以利用本領域技術人員熟知的常規化學加以醯化。例如，可以使中間體1(a)與所需的芳醯氯或雜芳醯氯在鹼性溶劑(例如吡啶)中反應，生成中間體1(b)。作為替代選擇，可以使中間體1(a)與所需的芳醯氯或雜芳醯氯在反應惰性溶劑(例如四氫呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基乙醯胺)中反應。加入適合的鹼(例如三乙胺、二異丙基乙胺)可以幫助促進反應進行。適合的芳醯氯包括苯甲醯氯、鄰-氯苯甲醯氯、鄰-氟苯甲醯氯、對-氯苯甲醯氯、對-氟苯甲醯氯、2，4-二氯苯甲醯氯、2，4-二氟苯甲醯氯等。
中間體1(b)然後可以被環化為6-氯嘌呤中間體1(c)，利用美國專利No.4,728,644所述類似操作方法和條件，用縮合劑處理，所述文獻引用在此作為參考。在優選的方法中，可以使中間體1(b)與弱酸(例如乙酸)或硫酸在適當的溶劑(例如異丙醇、甲苯)中回流，得到羥基嘌呤中間體1(d)，繼之以在磷醯氯中、在磷醯氯和三乙胺的存在下在甲苯中或者與2，6-二甲基吡啶在磷醯氯中回流，得到中間體1(c)。在另一種優選的方法中，1(b)可以通過在氯化氧磷中回流直接轉化為1(c)；可以加入適當的助溶劑(例如甲苯)和/或鹼(例如吡啶、三乙胺)，有助於縮合。
最後，通過置換嘌呤環上6位氯，可以引入R4基團。
就其中R4是氨基的式(I)和(II)化合物而言，一般將中間體1(c)與所需的胺(例如取代或未取代的(C1-C4)烷基胺、取代或未取代的2-二氫茚基胺、取代或未取代的環己基胺、取代或未取代的環戊基胺、取代或未取代的降冰片烷基胺、羥基(C1-C6)烷基胺、取代或未取代的雜芳基胺、雜芳基(C1-C3)烷基胺和取代或未取代的5-至6-元雜環胺(也就是如上所定義的式(Ia)胺))一起攪拌。胺可以充當溶劑，或者可以加入溶劑(例如乙醇、二氯甲烷等)，以幫助反應物的增溶和/或提供產生適當回流溫度的媒介，以完成取代。加熱反應可以加速進程。另外，可以採用適合的鹼，例如三乙胺，以猝滅在過程中所生成的酸。適合的氨基化合物可以是在商業上購買的或者容易利用本領域技術人員熟知的標準工藝加以製備。
其中R4是伯胺或仲胺的上式(I)化合物可以利用本領域技術人員熟知的標準工藝加以烷基化、磺化和/或醯化，得到另外的衍生物(例如烷基胺、二烷基胺、磺醯胺、醯胺、氨基甲酸酯、脲等)。
其中R4是胺基酸的上式(I)化合物可以如A.M.Shalaby et al.inJ.Chem.Res.，134-135(1998)所述製備。利用本領域技術人員熟知的標準工藝，這些原料可以被進一步加工成醯胺和酯。
大量式(IA)胺化合物是可從商業來源獲得的或者藉助本領域技術人員容易獲得的已知方法加以製備。式(IA)胺化合物的代表性製備闡述在下列實施例中。式(IA)4-氨基哌啶-4-甲醯胺和式(IA)4-氨基-4-氰基哌啶和它們的苄基保護前體的製備如P.A.J.Janssen的美國專利No.3,161,644、C.van de Westeringh et al.in J.Med.Chem.，7，619-623(1964)和K.A.Metwally et al.in J.Med.Chem.，41，5084-5093(1998)所述，其中上述4-氨基是未取代的、單取代的、二取代的或者是雜環的一部分。相關的雙環衍生物如K.Frohlich et al.in Tetrahedron，54，13115-13128(1998)和其中所包含的參考文獻所述。式(I A)螺環-取代的哌啶如P.A.J.Janssen的美國專利No.3,155,670、K.A.Metwally et al.in J.Med.Chem.，41，5084-5093(1998)、T.Toda et al.in Bull.Chem.Soc.Japan，44，3445-3450(1971)和W.Brandau and S.Samnick in WO 9522544所述。3-氨基氮雜環丁烷-3-甲醯胺的製備如A.P.Kozikowski and A.H.Fauq inSynlett，783-784(1991)所述。優選的式(IA)4-烷基氨基哌啶-4-甲醯胺的製備如下流程II所述。
流程II首先保護4-哌啶酮的氨基，得到中間體2(a)。可用的保護基團是苄基。4-哌啶酮及其衍生物可以在商業上從多種來源購買(例如Interchem Corporation，Paramus，NJ和Sigma-Aldrich Co.，St.Louis，MO)。然後使哌啶酮2(a)與所需的烷基胺和氰化鉀在含水HCl/乙醇溶劑混合物中、在約0-30℃下反應。將氰基用酸和水轉化為對應的醯胺。然後根據所採用的特定保護基團，利用常規方法除去保護基團。例如，在Pd/C的存在下進行氫化，可以除去苄基保護基團。
就其中R4是氨基烷基、烷基氨基烷基或二烷基氨基烷基的式(I)和(II)化合物而言，中間體1(c)中的氯可以首先用氰基置換(例如在1，4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(DABCO)的存在下，在質子惰性溶劑(例如乙腈)中，在室溫下，用四丁基氰化銨處理)。例如參見Hocek，et al.Collect.Czech.Chem.Commun.60，1386(1995)。然後可以利用本領域技術人員熟知的標準還原方法將氰基還原為烷基胺(例如用DIBAL或在Pd/C存在下的氫處理)。氨基然後可以利用標準的還原性烷基化工藝加以烷基化。一般而言，在極性溶劑中，在約10℃至約140℃的溫度下，在3A分子篩的存在下，使胺與所需的酮或醛反應約2至約24小時，生成席夫鹼。通常，向酮或醛加入當量或輕微過量的氨基化合物。適合的極性溶劑包括二氯甲烷、1，2-二氯乙烷、二甲基亞碸、二甲基甲醯胺、醇(例如甲醇或乙醇)或其混合物。優選的溶劑是甲醇。然後在同一反應容器中，在還原劑的存在下，在約0℃至約10℃的溫度下，然後溫熱至約20℃至約40℃的溫度達約30分鐘至約2小時，亞胺可以被還原為仲胺。適合的還原劑包括吡啶-硼烷絡合物和金屬硼氫化物，例如硼氫化鈉、三乙醯氧基硼氫化鈉和氰基硼氫化鈉。適合的醛或酮包括低聚甲醛、乙醛、丙酮、苯甲醛等。
作為替代選擇，可以利用Hocek，et al.in Tetrahedron，53(6)，2291-2302(1997)所述方法引入氨基烷基。6-氯嘌呤中間體1(c)可以這樣轉化為6-乙醯嘌呤化合物，使中間體1(c)與(1-乙氧基)乙烯基三正丁基錫在Pd(PPh3)4催化下反應，繼之以用丙酮與含水HCl的混合物(或DMF/aq.HCl混合物)在回流溫度下水解，得到乙醯化嘌呤。乙醯基然後容易藉助還原性胺化作用轉化為胺或取代的胺，這是本領域技術人員熟知的過程。一種示範性工藝採用所需的胺鹽(例如氯化銨、甲基氯化銨、烯丙基氯化銨、環丙基氯化銨、環己基氯化銨、二甲基氯化銨、苄基氯化銨等)和還原劑(例如NaBH4、NaBH3CN或三乙醯氧基硼氫化鈉)，在極性溶劑中，在室溫下。關於多種可以用在6-氨基嘌呤的還原性烷基化或6-乙醯嘌呤的還原性胺化中的醛、酮和胺，參見Abdel-Magid，etal.，J.Org.Chem.，61，3849-3862(1996)。
就其中R4是未取代或取代的烷氧基的那些式(I)和(II)化合物而言，可以在鹼(例如叔丁醇鉀)和質子惰性溶劑(例如THF)的存在下，將中間體1(c)用所需的醇處理。適合的醇可以是在商業上購買的或者容易利用本領域技術人員熟知的標準工藝加以製備。
作為替代選擇，其中R4是羥基或烷氧基取代的烷基的式(I)或(II)化合物可以這樣製備，利用Sugimoto，et al.，in Tetrahedron Letters，40，2139-2140(1999)所述工藝，將中間體1(c)的氯基團用所需的親電試劑置換。使6-氯嘌呤中間體1(c)與正丁烷碲化鋰(碲與正丁基鋰反應所得)在質子惰性溶劑(例如THF)中、在-78℃下反應，繼之以加入所需的親電試劑(例如乙醛、苯甲醛、丙酮、甲乙酮等)，然後溫熱至室溫，生成所需的羥基烷基衍生物。作為替代選擇，可以利用Leonard，et al，in J.Org.Chem.，44(25)，4612-4616(1979)所述工藝生成羥基衍生物。在-78℃下將6-氯嘌呤中間體1(c)用正丁基鋰處理，生成陰碳離子，繼之以與所需的親電試劑(例如酮或醛)反應，生成羥基烷基衍生物。
在另一種方法中，可以藉助Miyashita，et al，in Chem.Pharm.Bull，46(30)，390-399(1998)所述工藝製備6-芳醯基嘌呤化合物。然後可以用還原劑處理，例如氫化鋁鋰，將芳醯基還原為對應的仲醇。在適合的溶劑(例如四氫呋喃、乙醚)中，用烷基金屬試劑處理，例如烷基格利雅試劑，可以得到叔醇。最後，藉助還原性胺化作用可以引入胺(見上)。
在上述實例中，所得羥基烷基然後可以利用本領域技術人員熟知的標準工藝加以烷基化或醯化，生成所需的烷氧基或醯化產物(例如(烷基-C(O)-O-、(芳基)-C(O)-O-、(雜芳基)-C(O)-O-等)。作為替代選擇，羥基可以與其他部分縮合，得到多種取代基(例如氨磺醯基、磺醯基等)。按照相似方式修飾氨基烷基，可以得到醯胺、磺醯胺等。
R4基團可以在環化為嘌呤之後(如上所述)或之前與嘧啶部分連接。下列流程III闡述在環化為嘌呤之前引入R4基團。

流程III可以將嘧啶中間體1(a)的氯基團用所需的親核試劑(例如氨基化合物、醇等)置換，生成中間體3(a)。中間體3(a)然後可以與芳基或雜芳基羧酸或衍生物(例如醯氯、酯等)縮合，得到嘌呤化合物(I)。環化作用可以利用Young，et al，in J.Med.Chem，33，2073-2080(1990)所述工藝來完成。例如，在多磷酸(PPA)的存在下，將中間體3(a)與苯甲酸加熱至約150℃至約170℃的溫度下達約1小時。作為替代選擇，在脫水劑(例如丙烷膦酸環狀酸酐)的存在下，在適當的溶劑(例如二烷)中，在將二胺和芳基羧酸加熱至約100℃的溫度之後，可以得到所需的嘌呤(I)。
B基團可以直接與嘌呤部分連接，如下流程IV所述。
流程IV中間體4(a)可以首先用醯氯醯化。適合的醯氯(A-COCl)包括其中A是芳基(例如苯甲醯氯)、取代的芳基(例如2-氯苯甲醯氯、4-氯苯甲醯氯和其他取代的芳基醯氯)、雜芳基或取代的雜芳基的那些化合物。利用H.C.Koppel in J.Pro.Chem.，23，1457(1958)和J.Chem.Soc.，Perkin Trans.1，879(1984)所述工藝，使用脫水劑，象POCl3，可以將化合物4(b)轉化為中間體4(c)。然後可以這樣引入B基團，其中B是芳基、取代的芳基、雜芳基或取代的雜芳基，使用諸如R1-B(OH)2、R1-Br或R1-I的試劑和Pd催化劑(參見Y.Wan et al.in Synthesis，1597-1600(2002)和其中所包含的參考文獻)或銅(II)催化劑，例如乙酸銅或溴化銅(參見S.Ding et al.in Tetrahedron Lett.，42，8751-8755(2001)，A.Klapars et al.J.Am.Chem.Soc.123，7727-7729(2001)和其中所包含的參考文獻)。SNAr反應也可以用於引入缺電子雜環(參見M.Medebielle in New.J.Chem.，19，349(1995))。
本領域普通技術人員已知的常規分離和純化方法和/或技術可以用於分離本發明化合物及其相關的各種中間體。這類技術將是本領域普通技術人員所熟知的，例如可以包括所有類型的色譜(高效液相色譜(HPLC)，使用常見吸附劑、例如矽膠的柱色譜，和薄層色譜)、重結晶和差示(即液-液)萃取技術。
可以分離和使用本發明化合物本身或者其藥學上可接受的鹽、溶劑化物和/或水合物的形式。術語「鹽」表示本發明化合物的無機和有機鹽，可以經由離子鍵結合到分子中或者結合成絡合物。這些鹽可以是在最終的化合物分離和純化期間就地製備的，或者單獨使化合物或前體藥物與適合的有機或無機酸或鹼反應，再分離所生成的鹽。代表性鹽包括氫溴酸鹽、鹽酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、草酸鹽、苯磺酸鹽、棕櫚酸鹽、撲酸鹽、丙二酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、硼酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、六氟磷酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、甲酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、萘甲酸鹽、甲磺酸鹽、葡庚糖酸鹽、乳糖酸鹽和月桂基磺酸鹽等。優選的本發明化合物的鹽是甲磺酸鹽、besylate和鹽酸鹽。鹽可以包括基於鹼金屬和鹼土金屬的陽離子，例如鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等，以及無毒的銨、季銨和胺陽離子，包括但不限於銨、四甲基銨、四乙基銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、乙胺等。例如參見Berge，et al.，J.Pharm.Sci.，66，1-19(1977)。
術語「前體藥物」表示這樣一種化合物，它體內轉化為式(I)化合物或者該化合物的藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑化物。轉化作用可以藉助多種機理發生，例如在血液中水解。前體藥物使用的討論參見T.Higuchi and W.Stella，″Pro-drugs as Novel Delivery Systems，″Vol.14 of the A.C.S.Symposium Series和Bioreversible CarriersinDrug Design，ed.Edward B.Roche，American PharmaceuticalAssociation and Pergamon Press，1987。
例如，如果本發明化合物含有羧酸官能團，前體藥物可以包含酸基氫原子被一種基團置換所生成的酯，所述基團例如(C1-C8)烷基、(C2-C12)烷醯氧基甲基、具有4至9個碳原子的1-(烷醯氧基)乙基、具有5至10個碳原子的1-甲基-1-(烷醯氧基)乙基、具有3至6個碳原子的烷氧基碳醯氧基甲基、具有4至7個碳原子的1-(烷氧基羰氧基)乙基、具有5至8個碳原子的1-甲基-1-(烷氧基羰氧基)乙基、具有3至9個碳原子的N-(烷氧基羰基)氨基甲基、具有4至10個碳原子的1-(N-(烷氧基羰基)氨基)乙基、3-苯並[c]呋喃酮基、4-巴豆內酯基、γ-丁內酯-4-基、二-N，N-(C1-C2)烷基氨基(C2-C3)烷基(例如β-二甲氨基乙基)、氨甲醯基-(C1-C2)烷基、N，N-二(C1-C2)烷基氨甲醯基-(C1-C2)烷基和哌啶子基-、吡咯烷子基-或嗎啉代(C2-C3)烷基。
類似地，如果本發明化合物含有醇官能團，醇基氫原子被一種基團置換可以生成前體藥物，所述基團例如(C1-C6)烷醯氧基甲基、1-((C1-C6)烷醯氧基)乙基、1-甲基-1-((C1-C6)烷醯氧基)乙基、(C1-C6)烷氧基碳醯氧基甲基、N-(C1-C6)烷氧基碳醯氨基甲基、琥珀醯基、(C1-C6)烷醯基、α-氨基(C1-C4)烷醯基、芳基醯基和α-氨基醯基、或α-氨基醯基-α-氨基醯基，其中每一α-氨基醯基獨立地選自天然存在的L-胺基酸、P(O)(OH)2、P(O)(O(C1-C6)烷基)2或葡糖基(從碳水化合物的半縮醛形式除去羥基所得原子團)。
如果本發明化合物結合有胺官能團，胺基氫原子被一種基團置換可以生成前體藥物，所述基團例如R-羰基、RO-羰基、NRR』-羰基，其中R和R』各自獨立地是(C1-C10)烷基、(C3-C7)環烷基、苄基，或者R-羰基是天然的α-氨基醯基或天然的α-氨基醯基-天然的α-氨基醯基；-C(OH)C(O)OY』，其中Y』是H、(C1-C6)烷基或苄基；-C(OY0)Y1，其中Y0是(C1-C4)烷基，Y1是(C1-C6)烷基、羧基(C1-C6)烷基、氨基(C1-C4)烷基或者單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基烷基；-C(Y2)Y3，其中Y2是H或甲基，Y3是單-N-或二-N，N-(C1-C6)烷基氨基、嗎啉代基、哌啶-1-基或吡咯烷-1-基。
本發明化合物(包括本發明中間體)可以含有不對稱或手性中心；因此，化合物和中間體可以存在不同的立體異構形式(例如對映體和非對映異構體)。本發明的中間體和化合物的所有立體異構形式及其混合物、包括外消旋混合物都構成本發明的一部分。另外，本發明涵蓋所有幾何異構體和位置(positional)異構體。例如，如果本發明的中間體或化合物結合有雙鍵或稠合環，順式和反式以及混合物都涵蓋在本發明範圍內。
在物理化學差異的基礎上，非對映混合物可以分離為它們各自的非對映異構體，分離方法是本領域技術人員熟知的，例如色譜和/或分步結晶。對映體可以這樣分離，藉助與適當的旋光活性化合物(例如手性助劑，例如手性醇或Mosher氏醯氯)反應，將對映混合物轉化為非對映混合物，分離非對映異構體，再將各非對映異構體轉化(例如水解)為對應的純對映體。而且，一些本發明化合物可能是阻轉異構體(例如取代的二芳基)，也被視為本發明的一部分。對映體也可以利用手性HPLC柱加以分離。
本發明化合物可以存在未溶劑化形式以及與藥學上可接受的溶劑的溶劑化形式，所述溶劑例如水、乙醇等，本發明涵蓋溶劑化和未溶劑化形式。
本發明的中間體和化合物也可能存在不同的互變形式，所有這類形式都涵蓋在本發明範圍內。術語「互變異構體」或「互變異構形式」表示不同能量的結構異構體，它們可以經由低能量屏障相互轉化。例如，質子互變體(也稱為質子移變互變異構體)包括經由質子遷移的相互轉化，例如酮-烯醇和亞胺-烯胺異構化。質子互變異構體的具體實例是咪唑部分，其中氫可以在環氮之間遷移。化合價互變異構體包括藉助一些成鍵電子重構化的相互轉化。
本發明也涵蓋同位素標記的本發明化合物(包括中間體)，若非這樣一個事實，它們等同於本文引用的那些，即，一個或多個原子被原子質量或質量數不同於自然界常見的原子質量或質量數的原子所代替。可以結合在本發明中間體或化合物中的同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯的同位素，分別例如2H、3H、13C、14C、15N、15O、17O、18O、31P、32P、35S、18F、123I、125I和36Cl。
某些同位素標記的本發明化合物(例如用3H和14C標記的那些)可用於藥物和/或底物組織分布測定法。氚(即3H)和碳-14(即14C)同位素是特別優選的，因為它們容易製備和檢測。進而，被更重的同位素取代，例如氘(即2H)，由於代謝穩定性更高可以提供某些治療上的益處(例如延長體內半衰期或減少劑量需求)，因而在有些情況下可能是優選的。正電子發射性同位素、例如15O、13N、11C和18F可用於正電子發射斷層掃描(PET)研究，以檢查底物受體佔用性。同位素標記的本發明化合物一般可以這樣製備，採用類似於流程和/或下文實施例所公開的工藝，用同位素標記的試劑代替非同位素標記的試劑。
本發明化合物可用於治療受大麻素受體配體(例如CB-1受體拮抗劑)調節的疾病、病症和障礙；因此，本發明的另一種實施方式是藥物組合物，包含治療有效量的本發明化合物和藥學上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。
典型的製劑是這樣製備的，將本發明化合物與載體、稀釋劑或賦形劑混合。適合的載體、稀釋劑和賦形劑是本領域技術人員熟知的，包括這樣的材料，例如碳水化合物、蠟、水溶性和/或溶脹性聚合物、親水性或疏水性材料、明膠、油、溶劑、水等。確切的所用載體、稀釋劑或賦形劑將依賴於應用本發明化合物的手段和目的。一般選擇這樣的溶劑，被本領域技術人員認為是對哺乳動物給藥安全(GRAS)的。一般而言，安全的溶劑是無毒的水性溶劑，例如水，和其他無毒的溶劑，它們在水中是可溶的或可混溶的。
適合的水性溶劑包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如PEG400、PEG300)等和它們的混合物。製劑還可以包括一種或多種緩衝劑、穩定劑、表面活性劑、溼潤劑、潤滑劑、乳化劑、懸浮劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、助流劑、加工助劑、著色劑、甜味劑、香味劑、矯味劑和其他已知的添加劑，以提供藥物(即本發明化合物或其藥物組合物)的美觀性或者有助於製造藥物產品(即藥劑)。
製劑可以利用常規的溶解和混合工藝加以製備。例如，在一種或多種上述賦形劑的存在下，將大量藥物物質(即本發明化合物或化合物的穩定形式(例如與環糊精衍生物或其他已知配合劑的絡合物))溶於適合的溶劑。本發明化合物通常被配製成藥物劑型，以提供容易控制的藥物劑量，為患者提供美觀和容易服用的產品。
供用藥的藥物組合物(或製劑)可以按照多種方式加以包裝，這依賴於用於給藥的方法。一般而言，供分配的物品包括容器，在其中存放有藥物製劑的適當形式。適合的容器是本領域技術人員熟知的，包括這樣的材料，例如瓶子(塑料和玻璃)、藥囊、安瓿、塑膠袋、金屬筒等。容器還可以包括防損組件，以防止輕易獲取包裝的內容物。另外，容器上有標籤，它描述容器的內容物。標籤還可以包括適當的警示。
本發明進一步提供治療動物受大麻素受體調節的疾病、病症和/或障礙的方法，包括給予需要這類治療的動物治療上有效量的本發明化合物或藥物組合物，所述組合物包含有效量的本發明化合物和藥學上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。該方法特別可用於治療受大麻素受體(特別是CB1受體)拮抗劑調節的疾病、病症和/或障礙。
初步研究已經表明，下列疾病、病症和/或障礙受到大麻素受體拮抗劑的調節進食障礙(例如暴食症、食慾缺乏和食慾過盛)、體重減輕或控制(例如熱量或食物攝取的減少和/或食慾抑制)、肥胖、抑鬱、非典型抑鬱、雙極性精神障礙、精神病、精神分裂症、行為成癮、回報相關行為的抑制(例如條件性場所迴避，例如古柯鹼-與嗎啡-誘發的條件性場所偏愛的抑制)、精神作用物質濫用、成癮性精神障礙、衝動、酗酒(例如酒精濫用、成癮和/或依賴，包括戒酒治療、酒癮減少和復飲的預防)、菸草濫用(例如吸菸成癮、中止和/或依賴，包括菸癮減少的治療和復吸的預防)、痴呆(包括記憶喪失、阿爾茨海默氏病、老年性痴呆、血管性痴呆、輕微認知減退、衰老相關性認知衰退和輕微神經認知障礙)、男性性功能障礙(例如勃起困難)、癲癇發作、癲癇、胃腸障礙(例如胃腸運動或腸推進功能障礙)、注意渙散多動症(ADHD)、帕金森氏病和II型糖尿病。
因此，本文所述本發明化合物可用於治療受大麻素受體拮抗劑調節的疾病、病症或障礙。所以，本發明化合物(包括其中所用的組合物和過程)可以用於製造供本文所述治療應用的藥劑。
大麻素受體拮抗劑可能對其有效的其他疾病、病症和/或障礙包括經前期症候群或晚黃體期症候群、偏頭痛、恐慌症、焦慮、創傷後症候群、社會恐怖、非痴呆個體的認知減退、非遺忘性輕微認知減退、術後認知衰退、與衝動行為有關的障礙(例如破壞性行為障礙(例如焦慮/抑鬱、執行功能提高、抽搐症、行為障礙和/或對抗挑釁性障礙)、成人人格障礙(例如邊緣人格障礙和反社會人格障礙)、與衝動行為有關的疾病(例如精神作用物質濫用、性慾倒錯和自殘)和衝動控制障礙(例如間歇性暴發性障礙、盜竊癖、縱火癖、病理性賭博和拔毛髮癖))、強迫觀念與行為障礙、慢性疲勞症候群、男性性功能障礙(例如早洩)、女性性功能障礙、睡眠障礙(例如睡眠呼吸暫停)、孤獨症、緘默症、神經變性性運動障礙、脊髓損傷、中樞神經系統損害(例如創傷)、中風、神經變性疾病或者中毒性或感染性CNS疾病(例如腦炎或腦膜炎)、心血管障礙(例如血栓形成)和糖尿病。
本發明化合物對患者給藥的劑量水平可以在約0.7mg至約7,000mg每天的範圍內。就體重約70kg的成年人而言，劑量在約0.01mg至約100mg每千克體重的範圍內通常是足夠的。不過，一般劑量範圍可能需要一些變化，這依賴於受治療者的年齡與體重、給藥的途徑、所給藥的特定化合物等。受益於本文的公開，就特定患者而言的劑量範圍和最佳劑量的確定完全在本領域普通技術人員的能力範圍內。本發明化合物也可以用在持續釋放、控制釋放和延遲釋放的製劑中，這些形式也是本領域普通技術人員熟知的。
本發明化合物也可以與其他藥用成分結合使用，用於治療本文所述疾病、病症和/或障礙。因此，也提供了包括本發明化合物與其他藥用成分聯合給藥的治療方法。適合與本發明化合物聯合使用的藥用成分包括抗肥胖藥，例如載脂蛋白-B分泌/微粒體甘油三酯轉移蛋白(apo-B/MTP)抑制劑、MCR-4激動劑、膽囊收縮素-A(CCK-A)激動劑、單胺再攝取抑制劑(例如西布曲明)、擬交感神經藥、β3腎上腺素能受體激動劑、多巴胺受體激動劑(例如溴隱亭)、黑素細胞-刺激激素受體類似物、5HT2c受體激動劑、黑素富集激素拮抗劑、來普汀(OB蛋白)、來普汀類似物、來普汀受體激動劑、促生長激素神經肽拮抗劑、脂酶抑制劑(例如四氫脂抑制素(tetrahydrolipstatin)，即奧利司他)、減食慾藥(例如蛙皮素激動劑)、神經肽-Y受體拮抗劑、擬甲狀腺藥、脫氫表雄甾酮或其類似物、糖皮質激素受體激動劑或拮抗劑、阿立新受體拮抗劑、高血糖素樣肽-1受體激動劑、睫狀神經營養因子(例如AxokineTM，可從Regeneron Pharmaceuticals，Inc.，Tarrytown，NY andProcter Gamble Company，Cincinnati，OH獲得)、人刺鼠相關蛋白(AGRP)抑制劑、ghrelin受體拮抗劑、組胺3受體拮抗劑或反激動劑、神經介素u受體激動劑等。其他抗肥胖藥、包括下文所述優選的藥物，是熟知的，或者鑑於本文公開將為本領域普通技術人員所顯而易見。
尤其優選的治肥胖藥選自奧利司他、西布曲明、溴隱亭、麻黃鹼、來普汀和偽麻黃鹼。優選地，本發明化合物和聯合療法是與鍛鍊和敏感飲食結合給予的。
用在本發明組合、藥物組合物和方法中的代表性抗肥胖藥可以利用本領域普通技術人員已知的方法加以製備，例如西布曲明可以如美國專利No.4,929,629所述製備；溴隱亭可以如美國專利No.3,752,814和3,752,888所述製備；奧利司他可以如美國專利5,274,143、5,420,305、5,540,917和5,643,874所述製備。所有上述引用的美國專利都結合在此作為參考。
其他適合與本發明化合物聯合給藥的藥用成分包括被設計用於治療菸草濫用的藥物(例如菸鹼受體部分激動劑、鹽酸安非他酮(也已知商品名為ZybanTM)和菸鹼替代療法)、治療勃起功能障礙的藥物(例如多巴胺能藥，例如阿樸嗎啡)、ADHD藥(例如RitalinTM、StratteraTM、ConceraTM和AdderallTM)和治療酗酒的藥物(例如類阿片拮抗劑(例如納曲酮(也已知商品名為ReViaTM)和納美芬)、雙硫侖(也已知商品名為AntabuseTM)和阿坎酸(也已知商品名為CampralTM))。另外，減少酒精戒斷症狀的藥物也可以共同給藥，例如苯並二氮雜、β-阻滯劑、可樂定、卡馬西平、普加巴林和加巴噴丁(NeurontinTM)。酗酒的治療優選地是與行為療法聯合給予的，包括這樣的內容，例如動機強化療法、認知行為療法和參照自助組，包括酒精匿名法(AA)。
其他可能有用的藥用成分包括抗高血壓藥；抗抑鬱藥，例如鹽酸氟西汀(ProzacTM)；認知改善劑，例如鹽酸多奈佩齊(AirceptTM)和其他乙醯膽鹼酯酶抑制劑)；神經保護劑，例如美金剛；抗精神病藥，例如齊拉西酮(GeodonTM)、利培酮(RisperdalTM)和奧氮平(ZyprexaTM))；胰島素與胰島素類似物，例如LysPro胰島素；GLP-1(7-37)(促胰島素)與GLP-1(7-36)-NH2；磺醯脲及其類似物氯磺丙脲、格列本脲、甲苯磺丁脲、妥拉磺脲、醋磺己脲、Glypizide、格列美脲、瑞格列奈、美格列奈；雙胍類甲福明、苯乙福明、丁福明；α2-拮抗劑與咪唑啉咪格列唑、伊格列哚、德格列哚、咪唑克生、依法克生、氟洛克生；其他胰島素促分泌劑利諾格列、A-4166；格列酮西格列酮、Actos(吡格列酮)、恩格列酮、曲格列酮、達格列酮、Avandia(BRL 49653)；脂肪酸氧化抑制劑氯莫克舍、乙莫克舍；α-糖苷酶抑制劑阿卡波糖、米格列醇、乙格列酯、伏格列波糖、MDL-25,637、卡格列波糖、MDL-73,945；α-激動劑BRL 35135、BRL 37344、RO 16-8714、ICI D7114、CL 316,243；磷酸二酯酶抑制劑L-386,398；降脂藥苯氟雷司、芬氟拉明；釩酸鹽與釩絡合物(例如Naglivan)和過氧釩絡合物；糊精拮抗劑；高血糖素拮抗劑；糖異生抑制劑；促生長素抑制素類似物；抗脂肪分解劑煙酸、阿昔莫司、WAG 994、普蘭林肽(SymlinTM)、AC 2993、納格列奈、醛糖還原酶抑制劑(例如唑泊司他)、糖原磷酸化酶抑制劑、山梨糖醇脫氫酶抑制劑、鈉-氫交換1型(NHE-1)抑制劑和/或膽固醇生物合成抑制劑或膽固醇吸收抑制劑，尤其是HMG-CoA還原酶抑制劑或HMG-CoA合成酶抑制劑或HMG-CoA還原酶或合成酶基因表達抑制劑，CETP抑制劑、膽汁酸螯合劑、貝特類、ACAT抑制劑、角鯊烯合成酶抑制劑、抗氧化劑或煙酸。本發明化合物也可以與天然存在的降低血漿膽固醇水平的化合物聯合給藥。這類天然存在的化合物普遍被稱為天然藥物，例如包括大蒜提取物、Hoodia植物提取物和煙酸。
附加藥用成分的劑量一般依賴於多種因素，包括受治療者的健康狀況、所需治療的程度、並行療法(如果有的話)的屬性與種類、治療的頻率和所需效果的屬性。一般而言，附加藥用成分的劑量範圍為約0.001mg至約100mg每千克個體體重每天，優選約0.1mg至約10mg每千克個體體重每天。不過，一般劑量範圍也可能有一些變化，這依賴於受治療者的年齡與體重、給藥的途徑、所給予的特定治肥胖藥等。受益於本文的公開，就特定患者而言的劑量範圍和最佳劑量的確定完全在本領域普通技術人員的能力範圍內。
按照本發明的方法，本發明化合物或者本發明化合物與至少一種附加藥用成分的組合對需要這類治療的受治療者給藥，優選為藥物組合物的形式。在本發明的組合方面，本發明化合物和至少一種其他藥用成分(例如抗肥胖藥、菸鹼受體部分激動劑、ADHD藥、多巴胺能藥或阿片樣物質拮抗劑)可以單獨給藥或者在包含它們的藥物組合物中給藥。一般優選的是，這類給藥是口服的。不過，如果受治療者不能吞咽，或者口服給藥是被削弱的或不可取的，腸胃外或透皮給藥也可以是適當的。
按照本發明的方法，當本發明化合物與至少一種其他藥用成分的組合一起給藥時，這類給藥可以是在時間上先後的或同時的，同時的方法一般是優選的。就先後給藥而言，本發明化合物和附加藥用成分可以按任意順序給藥。一般優選的是，這類給藥是口服的。尤其優選的是，這類給藥是口服的和同時的。當本發明化合物和附加藥用成分先後給藥時，每一給藥可以按照相同或不同的方法。
按照本發明的方法，本發明化合物或者本發明化合物與至少一種附加藥用成分的組合(本文稱之為「組合」)優選地是以藥物組合物的形式給藥的。因此，本發明化合物或組合可以單獨或一起對患者給藥，劑型是任意常規的口服、直腸、透皮、腸胃外(例如靜脈內、肌內或皮下)、腦池內、陰道內、腹膜內、膀胱內、局部(例如粉劑、軟膏劑或滴劑)、頰用或鼻用劑型。
適合於腸胃外注射的組合物一般包括藥學上可接受的無菌水性或非水性溶液、分散體、懸液或乳液，和供再生為無菌可注射溶液或分散體的無菌粉劑。適合的水性與非水性載體或稀釋劑(包括溶劑和載體)的實例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇、甘油等)、其適合的混合物、植物油(例如橄欖油)和可注射的有機酯，例如油酸乙酯。恰當的流動性可以這樣維持，例如使用包衣，例如卵磷脂；在分散體的情況下維持所需的粒徑；和使用表面活性劑。
這些組合物還可以含有賦形劑，例如防腐劑、溼潤劑、乳化劑和分散劑。組合物被微生物汙染的防止可以用多種抗細菌劑和抗真菌劑來實現，例如對羥基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸等。還可能需要包括等滲劑，例如糖、氯化鈉等。延長可注射藥物組合物的吸收可以利用能夠延遲吸收的試劑來實現，例如單硬脂酸鋁和明膠。
口服給藥用固體劑型包括膠囊劑、片劑、粉劑和顆粒劑。在這類固體劑型中，將本發明化合物或組合與至少一種惰性慣用藥物賦形劑(或載體)混合，例如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，或者(a)填充劑或補充劑，例如澱粉、乳糖、蔗糖、甘露糖醇、矽酸等；(b)粘合劑，例如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、阿拉伯膠等；(c)潤溼劑，例如甘油等；(d)崩解劑，例如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、藻酸、某些複合矽酸鹽、碳酸鈉等；(e)溶解遲延劑，例如石蠟等；(f)吸收加速劑，例如季銨化合物等；(g)溼潤劑，例如鯨蠟醇、甘油單硬脂酸酯等；(h)吸附劑，例如高嶺土、膨潤土等；和/或(i)潤滑劑，例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉等。在膠囊劑和片劑的情況下，劑型還可以包含緩衝劑。
還可以採用相似類型的固體組合物作為軟或硬填充的明膠膠囊劑中的填充劑，所用賦形劑例如乳糖或奶糖以及高分子聚乙二醇等。
固體劑型、例如片劑、錠劑、膠囊劑和顆粒劑，可以帶有包衣和外殼，例如本領域熟知的腸溶衣和其他。它們還可以含有不透明劑，這類組合物還可以以延遲方式釋放本發明化合物和/或附加藥用成分。可以使用的包埋組合物的實例有聚合物質和蠟。藥物還可以是微囊包封的形式，如果適當的話，還有一種或多種上面提到的賦形劑。
口服給藥用液體劑型包括藥學上可接受的乳液、溶液、懸浮液、糖漿劑和酏劑。除了本發明化合物或組合以外，液體劑型還可以含有本領域常用的惰性稀釋劑，例如水或其他溶劑，增溶劑和乳化劑，例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄基酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲醯胺、油(例如棉籽油、花生油、玉米胚油、橄欖油、蓖麻油、芝麻油等)、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇和脫水山梨醇的脂肪酸酯，或者這些物質的混合物等。
除了這類惰性稀釋劑以外，組合物還可以包括賦形劑，例如溼潤劑、乳化與懸浮劑、甜味劑、矯味劑和香味劑。
除了本發明化合物或組合以外，懸液可以進一步包含懸浮劑，例如乙氧基化異硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇與脫水山梨醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁、膨潤土、瓊脂和黃蓍膠，或者這些物質的混合物等。
直腸或陰道給藥用組合物優選地包含栓劑，它們可以這樣製備，將本發明化合物或組合與適合的無刺激性賦形劑或載體混合，例如可可脂、聚乙二醇或栓劑用蠟，它們在常溫下是固體，但是在體溫下是液體，因此在直腸或陰道腔內熔化，由此釋放活性組分。
本發明化合物和本發明化合物與抗肥胖藥的組合的局部給藥用劑型可以包含軟膏劑、粉劑、噴霧劑和吸入劑。將藥物在無菌條件下與藥學上可接受的載體和可能需要的任意防腐劑、緩衝劑或推進劑混合。眼科製劑、眼用軟膏劑、粉劑和溶液也包括在本發明的範圍內。
下列段落描述可用於非人類動物的示範性製劑、劑量等。本發明化合物和本發明化合物與治肥胖藥的組合的給藥可以是口服或非口服(例如注射)方式進行的。
本發明化合物或者本發明化合物與抗肥胖藥的組合的給藥量是這樣的，以便接受有效的劑量。一般而言，對動物口服給藥的每日劑量在約0.01與約1,000mg/kg體重之間，優選在約0.01與約300mg/kg體重之間。
適宜地，本發明化合物(或組合)可以被攜帶在飲用水中，以便利用每日水供應來攝入治療劑量的化合物。化合物可以直接被計量到飲用水中，優選為液體水溶性濃縮物的形式(例如水溶性鹽的水溶液)。
適宜地，本發明化合物(或組合)還可以被直接加入到飼料中或者以動物飼料添加劑的形式加入，也稱為預混物或濃縮物。化合物在載體中的預混物或濃縮物被更普遍地用於在飼料中包括藥物。適合的載體是液體或固體，視需要而定，例如水，各種粗粉(meal)，例如苜蓿粉、大豆粉、棉籽油粉、亞麻籽油粉、玉米芯粉和玉米粉，糖蜜、尿素、骨粉和礦質混合物，例如普遍用在家禽飼料中。特別有效的載體是各自的動物飼料本身；即一小部分這樣的飼料。載體有利於化合物均勻分布在最終的與預混物摻合的飼料中。優選地，將化合物充分摻合到預混物中，隨後摻合到飼料中。在這方面，可以將化合物分散或者溶解在適合的油性載體中，例如大豆油、玉米油、棉籽油等，或者揮發性有機溶劑，然後與載體摻合。將被領會到的是，化合物在濃縮物中的比例能夠有廣泛的差異，因為可以通過摻合適當比例的預混物與飼料來調節化合物在最終飼料中的量，以獲得所需的化合物水平。
可以由飼料廠商摻合高效力濃縮物與蛋白質類載體，例如大豆油粉和其他粗粉，如上所述，以生產濃縮的添加劑，它們適合於直接飼餵動物。在這類情形中，允許動物消耗普通的膳食。作為替代選擇，這類濃縮添加劑可以直接加入到飼料中，以生產營養均衡的最終飼料，其中含有治療上有效水平的本發明化合物。按照標準工藝充分摻合混合物，例如在雙殼摻合機中，以確保均勻性。
如果添加劑用作飼料的頂肥，這同樣有助於確保化合物在追加飼料頂部中分布的均勻性。
有效增加瘦肉沉積和提高瘦肉-脂肪比的飲用水和飼料一般是這樣製備的，將本發明化合物與足量動物飼料混合，以提供在飼料或水中含有約10-3至約500ppm的化合物。
優選的含藥豬、牛、綿羊和山羊飼料一般含有約1至約400克本發明化合物(或組合)每噸飼料，這些動物的最佳用量通常為約50至約300克每噸飼料。
優選的家禽和寵物飼料通常含有約1至約400克、優選約10至約400克的本發明化合物(或組合)每噸飼料。
就動物腸胃外給藥而言，本發明化合物(或組合)可以被製成糊劑或藥丸的形式，以植入物方式給藥，通常在動物頭部或耳朵皮膚下，在其中增加瘦肉沉積和提高瘦肉-脂肪比。
一般而言，腸胃外給藥涉及注射足量本發明化合物(或組合)，以為動物提供約0.01至約20mg/kg體重/天的藥物。就家禽、豬、牛、綿羊、山羊和寵物而言優選的劑量在約0.05至約10mg/kg體重/天的藥物範圍內。
糊劑可以這樣製備，將藥物分散在藥學上可接受的油中，例如花生油、芝麻油、玉米油等。
含有有效量本發明化合物、藥物組合物或組合的藥丸可以這樣製備，將本發明化合物或組合與稀釋劑混合，例如碳蠟、巴西棕櫚蠟等，並且可以加入潤滑劑，例如鎂或鈣的硬脂酸鹽，以改善藥丸的加工。
當然，可以對動物給予一粒以上藥丸，以達到所需的劑量水平，這將增加所需的瘦肉沉積和提高瘦肉-脂肪比。而且，還可以在動物治療期間定期進行植入，目的是維持動物體內的恰當藥物水平。
本發明具有若干有利的獸醫學特徵。就希望增加寵物瘦肉和/或削減贅肉的寵物所有者或獸醫而言，本發明提供可以實現這一點的手段。就家禽、牛和豬飼養者而言，利用本發明方法可以產出更瘦的動物，可以從肉類企業獲取更高的銷售價格。
下列實施例闡述本發明的實施方式。不過可以理解的是，發明的實施方式不限於這些實施例的具體細節，鑑於本文的公開，其他變化將為本領域普通技術人員所知或者顯而易見。
實施例除非另有指定，原料一般是從商業來源獲得的，例如AldrichChemicals Co.(Milwaukee，WI)、Lancaster Synthesis，Inc.(Windham，NH)、Acros Organics(Fairlawn，NJ)、Maybridge Chemical Company，Ltd.(Cornwall，England)、Tyger Scientific(Princeton，NJ)和Astra Zeneca Pharmaceuticals(London，England)。
一般實驗工藝NMR光譜是在Varian UnityTM400或500(可從Varian Inc.，PaloAlto，CA獲得)上記錄的，溫度為室溫，頻率分別為400和500MHz1H。化學漂移以百萬分之份數(δ)表示，相對於作為內部參照的殘留溶劑而言。峰形表示如下s，單峰；d，雙峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；br s，寬的單峰；v br s，非常寬的單峰；br m，寬的多重峰；2s，兩個單峰。在有些情況下，僅給出代表性1H NMR峰。
質譜是這樣記錄的，藉助直接流量分析，使用正負大氣壓化學電離(APCI)掃描模式。利用裝有Gilson 215液體處理系統的Waters APCI/MSZMD型質譜儀進行實驗。
質譜分析也可藉助RP-HPLC梯度色譜分離法獲得的。分子量鑑定是藉助正負電子噴霧電離(ESI)掃描模式記錄的。利用裝有Gilson 215液體處理系統和HP 1100 DAD的Waters/Micromass ESI/MS ZMD或LCZ型質譜儀進行實驗。
在描述含氯或溴離子的強度時，觀測預期強度比(含有35Cl/37Cl的離子為大約3∶1，含有79Br/81Br的離子為大約1∶1)，僅給出較低質量的離子。報告了全部實施例的MS峰。
旋光性是在Perkin EimerTM241偏振計(可從Perkin Elmer Inc.，Wellesley，MA獲得)上測定的，在所示溫度下使用鈉D線(λ＝589nm)，按如下格式報告[α]Dtemp，濃度(c＝g/100ml)和溶劑。
柱色譜是利用BakerTM矽膠(40μm；J.T.Baker，Phillipsburg，NJ)或矽膠50(EM Sciences，Gibbstown，NJ)進行的，柱子為低氮壓玻璃柱或BiotageTM柱(ISC，Inc.，Shelton，CT)。徑向色譜法是利用ChromatotronTM(Harrison Research)進行的。
關鍵中間體的製備中間體6-氯-N4-(4-氯苯基)-嘧啶-4，5-二胺(I-(1A-1)a)的製備 將5-氨基-4，6-二氯嘧啶(5.00g，29mmol)和4-氯苯胺(4.71g，36mmol)懸浮在80ml H2O和12ml乙醇中。在室溫下加入濃HCl(1.2ml，14.5mmol)，繼之以溫熱至82℃。攪拌19小時後，將反應物冷卻至室溫，攪拌60小時。在燒結玻璃漏鬥上收集沉澱，用水、繼之以己烷衝洗。在真空下乾燥後，得到I-(1A-1)a，為灰白色固體(7.38g，98％)+ESI MS(M+1)255.3；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.87(s，1H)，7.66(d，J＝8.7Hz，2H)，7.30(d，J＝8.7Hz，2H).
中間體2，4-二氯-N-[4-氯-6-(4-氯苯基氨基)-嘧啶-5-基]-苯甲醯胺(I-(1A-1)b)的製備 將6-氯-N4-(4-氯苯基)-嘧啶-4，5-二胺I-(1A-1)a(34g，134mmol)的吡啶(150ml)溶液冷卻至0℃，向其中加入2，4-二氯苯甲醯氯(25ml，178mmol)。將反應物溫熱至環境溫度過夜。藉助真空過濾收集固體沉澱，在高真空下乾燥，得到標題化合物I-(1A-1)b，為無色固體(14g，25％)。在減壓下濃縮吡啶溶液，然後用甲醇(500ml)研製，得到額外的產物(35g，60％)
+ESI MS(M+1)427.4；1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.08(s，1H)，9.16(s，1H)，8.38(s，1H)，7.97(d，J＝8.7Hz，1H)，7.75(d，J＝2.0Hz，2H)，7.64-7.60(m，3H)，7.40(d，J＝8.7Hz，2H).
中間體9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-醇(I-(1A-1)c)的製備 將2，4-二氯-N-[4-氯-6-(4-氯苯基氨基)-嘧啶-5-基]-苯甲醯胺I-(1A-1)b(48g，0.11mol)的乙酸(1L)懸液加熱至回流達7小時。將反應混合物冷卻至0℃，藉助真空過濾收集產物(無色針晶)，將固體用額外的乙酸、乙酸乙酯、再用乙醚洗滌。將產物在高真空下乾燥過夜，得到標題化合物I-(1A-1)c(32g，73％)，為無色絨毛狀固體。在減壓下濃縮母液，從甲醇中結晶出固體，得到額外的產物(16g)，為無色固體 mp 314-315℃；+ESI MS(M+1)391.3；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.06(s，1H)，7.61(d，J＝8.3Hz，1H)，7.52(d，J＝2.1Hz，1H)，7.48-7.41(m，3H)，7.31(d，J＝8.7Hz，2H).
中間體6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯-苯基)-9H-嘌呤(I-(1A-1)d)的製備 將9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-醇I-(1A-1)c(6.5g，17mmol)在POCl3(3ml)中加熱至回流過夜。在減壓下濃縮反應混合物，將殘餘物溶於氯仿，倒在冰上。分離有機層，用飽和含水NaHCO3洗滌；合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，在減壓下濃縮。將殘餘物溶於1∶1二氯甲烷/乙醚(200ml)，然後過濾除去殘留的原料。濃縮有機層，得到標題化合物I-(1A-1)d，為黃色泡沫(5.8g，85％)+ESI MS(M+1)411.4；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.83(s，1H)，7.79-7.75(m，2H)，7.63-7.58(m，1H)，7.56(d，J＝8.7Hz，2H)，7.42(d，J＝6.7Hz，2H).
中間體2-氯-N-[4-氯-6-(4-氯苯基氨基)-嘧啶-5-基]-苯甲醯胺(I-(4A-7)a)的製備 將6-氯-N4-(4-氯苯基)-嘧啶-4，5-二胺I-(1A-1)a(1.00g，3.92mmol)溶於6ml N，N-二甲基乙醯胺，得到澄清的褐色溶液。冷卻至5℃後，歷經1分鐘加入淨2-氯苯甲醯氯(0.80g，4.34mmol)。將溶液溫熱至室溫，攪拌4小時。加入水(15ml)，導致溶液產生白色沉澱。將混合物在室溫下攪拌另外30分鐘，然後藉助真空過濾收集沉澱，用H2O、再用己烷衝洗。進一步在真空下乾燥固體，得到I-(4A-7)a，為無色固體(1.27g，82％)+APCI MS(M+1)393.1；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.02(s，1H)，9.11(s，1H)，8.40(s，1H)，7.93(dd，J＝7.4，1.6Hz，1H)，7.66-7.40(m，7H).
中間體9-(4-氯苯基-2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-醇(I-(4A-7)b)的製備
在室溫下，向2-氯-N-[4-氯-6-(4-氯苯基氨基)-嘧啶-5-基]-苯甲醯胺I-(4A-7)a(1.00g，2.54mmol)的異丙醇(20ml)懸浮液加入淨H2SO4(410μl，7.4mmol)。將反應物回流8小時，繼之以冷卻至室溫，攪拌16小時。向不均勻溶液加入20ml水，以促進進一步的產物沉澱。在室溫下攪拌另外1小時後，在燒結玻璃漏鬥上收集固體，用水、繼之以己烷衝洗。進一步在減壓下乾燥產物，得到I-(4A-7)b，為無色固體(0.72g，80％)1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.57(s，1H)，8.08(d，J＝4.1Hz，1H)，7.66(dd，J＝7.4，1.2Hz，1H)，7.51-7.41(m，5H)，7.33-7.29(m，2H).
中間體6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤(I-(4A-7)c)的製備 將9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-醇I-(4A-7)b(2.49g，6.97mmol)懸浮在50ml甲苯中。在室溫下加入三乙胺(1.07ml，7.68mmol)，繼之以加入POCl3(720μl，7.72mmol)。將反應物溫熱至回流，攪拌23小時，得到澄清的橙色溶液。冷卻反應物至室溫後，在減壓下濃縮，用異丙醇(50ml)稀釋，然後進一步在減壓下濃縮，直至溶液產生大量沉澱。將經過濃縮的懸浮液在冰浴中冷卻，攪拌2小時。在燒結玻璃漏鬥上收集沉澱，用冷異丙醇衝洗，在真空中乾燥後得到I-(4A-7)c，為灰白色固體(2.13g，82％)+ESI MS(M+1)375.1；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.84(s，1H)，7.76(dd，J＝7.46，1.2Hz，1H)，7.58-7.40(m，7H).
中間體6-氯-N4-(4-氯苯基)-2-甲基-嘧啶-4，5-二胺(I-(7A-80)a)的製備 將4，6-二氯-2-甲基嘧啶-5-基胺(100mg，0.56mmol)和4-氯苯基胺(86mg，0.68mmol)合併在H2O(1.5ml)和10∶1乙醇/HCl(0.24ml)中，加熱至回流達6小時。將反應混合物冷卻，向其中加入H2O。過濾收集產物，在高真空下乾燥，得到所需化合物I-(7A-80)a，為黃褐色固體(173mg)，為粗品+ESI MS(M+1)269.2.
中間體N-[4-氯-6-(4-氯苯基氨基)-2-甲基嘧啶-5-基]-2-氟苯甲醯胺(I-(7A-80)b)的製備 將2-氟苯甲醯氯(93μl，0.78mmol)加入到6-氯-N4-(4-氯苯基)-2-甲基嘧啶-4，5-二胺I-(7A-80)a(173mg)和吡啶(1ml)中，在室溫下攪拌7小時。反應在此時是不完全的，因此向反應混合物加入另外1.5當量的2-氟-苯甲醯氯，繼續在室溫下攪拌過夜。將反應物從飽和NaHCO3溶液中萃取到乙酸乙酯中。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，濃縮至幹，得到所需粗產物I-(7A-80)b(0.25g)+ESI MS(M+1)391.2.
中間體6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-2-甲基-9H-嘌呤(I-(7A-80)c)的製備 將N-[4-氯-6-(4-氯苯基氨基)-2-甲基嘧啶-5-基]-2-氟苯甲醯胺I-(7A-80)b(0.25g)的二烷(6ml)溶液用50％丙烷磷酸環狀酸酐(PPAA)的乙酸乙酯溶液(0.6ml)處理，加熱至回流過夜。經過測定，產物是所需產物與羥基化合物(氯原子的置換)的混合物。因此在減壓下濃縮反應物，在回流的POCl3(6ml)中加熱過夜。將反應混合物濃縮至幹，用乙酸乙酯稀釋，倒在冰上。然後加入飽和NaHCO3溶液，攪拌混合物。分離有機層，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾，濃縮至幹。粗產物經由TLC製備型平板純化，使用5％甲醇/二氯甲烷作為溶劑，得到所需化合物I-(7A-80)c(88mg，42％，從4，6-二氯-2-異丙基-嘧啶-5-基胺計)，為固體+ESI MS(M+1)373.2；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.80-6.90(m，8H)，2.76(s，3H).
中間體1-苄基-4-乙基氨基哌啶-4-甲腈(I-(7A-80)d)的製備 向在冰浴中冷卻的4-N-苄基哌啶酮(5.69g，29.5mmol)的乙醇(4.2ml)溶液加入鹽酸乙胺(2.69g，32.3mmol)的水(3ml)溶液，保持反應物的內部溫度低於10℃。歷經10分鐘向反應溶液加入KCN(2.04g，31.3mmol)的水(7ml)溶液，保持內部溫度低於10℃。然後將反應物溫熱至室溫，攪拌18小時。向反應混合物加入異丙醇(10ml)，得到兩個不同的層下部無色水層和橙色有機上層。分離有機層，與水(30ml)攪拌30分鐘。分離有機層(橙色有機層現為底層)，將橙色的油稀釋在CH2Cl2(30ml)中。將有機層用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮，得到I-(7A-80)d，為橙色的油(6.05g，84％)+APCI MS(M+1)244.2；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.32(d，J＝4.1Hz，4H)，7.29-7.23(m，1H)，3.54(s，2H)，2.81-2.76(m，2H)，2.75(q，J＝7.1Hz，2H)，2.35-2.29(m，2H)，2.01-1.98(m，2H)，1.74-1.68(m，2H)，1.14(t，J＝7.1Hz，3H).
中間體1-苄基-4-乙基氨基哌啶-4-羧酸醯胺(I-(7A-80)e)的製備 將在冰浴中冷卻的1-苄基-4-乙基氨基哌啶-4-甲腈I-(7A-80)d(0.58g，2.38mmol)的二氯甲烷(2ml)溶液用H2SO4(1.8ml，33mmol)逐滴處理，同時保持內部溫度低於20℃。然後將反應物溫熱至室溫，攪拌19小時。停止攪拌後，分離濃稠的淡橙色H2SO4底層，在冰浴中冷卻，然後小心地用濃NH4OH猝滅，保持內部溫度低於55℃。水層用二氯甲烷萃取(2×10ml)，合併有機層，用鹽水(20ml)洗滌，乾燥(Na2SO4)，然後在真空中濃縮，得到I-(7A-80)e，為淡橙色油，放置後固化為桃色固體(0.54g，87％)+APCI MS(M+1)262.2；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.34-7.30(m，4H)，7.29-7.21(m，1H)，7.16(br s，1H)，3.48(s，2H)，2.71-2.68(m，2H)，2.47(q，J＝7.0Hz，2H)，2.17-2.02(m，4H)，1.62-1.58(m，2H)，1.41(brs，1H)，1.09(t，J＝7.0Hz，3H).
中間體4-乙基氨基哌啶-4-羧酸醯胺(I-(7A-80)f)的製備
向1-苄基-4-乙基氨基哌啶-4-羧酸醯胺I-(7A-80)e(7.39g，28.3mmol)的甲醇(100ml)溶液加入20％披Pd(OH)2碳(50％水；1.48g)。將混合物置於Parr振蕩器上，在室溫下還原(50psi H2)過夜。將混合物通過Celite墊過濾，然後濃縮至無色固體(4.84g，定量)+APCI MS(M+1)172.2；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ2.89(ddd，J＝12.9，8.7，3.3Hz，2H)，2.75(ddd，J＝12.9，6.6，3.7Hz，2H)，2.45(q，J＝7.2Hz，2H)，1.95(ddd，J＝13.7，8.3，3.7Hz，2H)，1.55(ddd，J＝13.7，6.6，3.3Hz，2h)，1.08(t，J＝7.1Hz，3H).
中間體4-氯-N-[4-氯-6-(4-氯苯基氨基)-嘧啶-5-基]-2-氟苯甲醯胺(I-(7A-91)a)的製備 將6-氯-N4-(4-氯苯基)-嘧啶-4，5-二胺I-(1A-1)a(6.6g，26mmol)的吡啶(30ml)溶液冷卻至0℃，向其中加入4-氯-2-氟苯甲醯氯(5g，26mmol)。然後使反應物溫熱至環境溫度過夜。將不均勻反應物用乙醇(50ml)稀釋，過濾收集所得固體。將固體懸浮在甲苯中，然後在減壓下除去殘留的乙醇。將固體在乙醚中製漿，然後過濾收集，得到I-(7A-91)a(8.3g，78％)+APCI MS(M+1)409.0；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ10.60(s，1H)，10.10(s，1H)，9.19(s，1H)，8.74(t，J＝8.1Hz，1H)，8.46-8.40(m，3H)，8.28(dd，J＝8.7，2.1Hz，1H)，8.20(d，J＝8.7Hz，2H).
中間體6-氯-8-(4-氯-2-氟苯基)-9-(4-氯-苯基)-9H-嘌呤(I-(7A-91)b)的製備 將4-氯-N-[4-氯-6-(4-氯苯基氨基)-嘧啶-5-基]-2-氟苯甲醯胺I-(7A-91)a(8.3g，20mmol)的POCl3(100ml)懸浮液加熱至回流。淺褐色反應物歷經2小時變為均勻。回流3小時後，將反應混合物冷卻，在減壓下濃縮，得到粘性的油。將殘餘物用乙酸乙酯稀釋，倒在冰/含水碳酸氫鈉上。分離有機層，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，濃縮。從乙醚中結晶，得到產物I-(7A-91)b(5.8g，73％)，為灰白色固體+ESI MS(M+1)393.0；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ8.81(s，1H)，7.72(t，J＝8.1Hz，1H)，7.60-7.55(m，3H)，7.50-7.42(m，3H).
中間體1-二苯甲基-3-異丙基氨基氮雜環丁烷-3-甲腈(I-(7A-106)a)的製備 向在冰浴中冷卻的1-二苯甲基氮雜環丁烷-3-酮(3.20g，13.5mmol)的乙醇(100ml)溶液加入異丙胺(1.26ml，14.8mmol)，繼之以滴加濃的含水HCl(1.23ml，14.8mmol)。攪拌15分鐘後，歷經7分鐘向反應混合物加入NaCN(0.727g，14.8mmol)的水(30ml)溶液。然後將反應物溫熱至室溫，攪拌過夜。在真空中濃縮反應物至一半體積後，用乙酸乙酯從飽和含水碳酸氫鈉中萃取。合併有機層，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮，得到油(3.17g)，由1H NMR和LC-MS判斷為2∶1羥腈與酮。在室溫下將殘餘物的甲醇(17ml)溶液用異丙胺(2.3ml，27mmol)、再用乙酸(1.6ml，27mmol)處理。攪拌30分鐘後，加入固體NaCN(330mg，6.7mmol)，將混合物加熱至回流過夜。將反應物在真空中濃縮，然後用乙酸乙酯從飽和含水碳酸氫鈉中萃取。合併有機層，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾，在真空中濃縮，得到I-(7A-106)a，為深色泡沫(3.41g，83％)+APCI MS(M+1)306.4；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.45-7.42(m，4H)，7.31-7.18(m，6H)，4.42(s，1H)，3.68(d，J＝8.3Hz，2H)，3.11(七重峰，J＝6.2Hz，1H)，3.07(d，J＝8.3Hz，2H)，1.01(d，J＝6.2Hz，6H).
中間體1-二苯甲基-3-異丙基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺(I-(7A-106)b)的製備 將在冰浴中冷卻的1-二苯甲基-3-異丙基氨基氮雜環丁烷-3-甲腈(I-(7A-106)a；3.40g，11.1mmol)的二氯甲烷(25ml)溶液用H2SO4(5.95ml，111mmol)滴加處理。使反應混合物溫熱至室溫和攪拌過夜後，將其在冰浴中冷卻，然後小心地用濃NH4OH猝滅至pH11。混合物用二氯甲烷萃取，合併有機層，乾燥(Na2SO4)，然後在真空中濃縮，得到粗的泡沫(3.3g)，然後在BiotageTMFlash 40M柱上純化，使用含0-2％甲醇的二氯甲烷作為洗脫劑，得到標題化合物I-(7A-106)b(2.32g，64％)，為褐色固體+ESI MS(M+1)324.4；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.40(d，J＝7.5Hz，4H)，7.24(t，J＝7.5Hz，4H)，7.15(t，J＝7.1Hz，2H)，4.46(s，1H)，3.53(d，J＝8.7Hz，2H)，3.06(d，J＝8.7Hz，2H)，2.90(七重峰，J＝6.4Hz，1H)，0.97(d，J＝6.6Hz，6H).
中間體3-異丙基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺鹽酸鹽(I-(7A-106)c)的製備 向1-二苯甲基-3-異丙基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺(I-(7A-106)b；2.28g，7.05mmol)的甲醇(100ml)溶液加入1M HCl的乙醚溶液(14.8ml，14.8mmol)，然後加入水(10ml)。加入20％披Pd(OH)2碳(60％水；1.43g)後，將混合物置於Parr振蕩器上，然後在室溫下還原(50psi H2)過夜。將混合物通過Celite墊過濾，然後在真空中濃縮。然後將殘餘物在真空中從甲苯(2x)、乙腈(2x)和甲醇中濃縮，得到I-(7A-106)c(1.59g，98％)，為黃褐色固體+APCI MS(M+1)158.1；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ4.71(d，J＝13.3Hz，2H)，4.60(d，J＝13.3Hz，2H)，3.49(七量峰，J＝6.6Hz，1H)，1.34(d，J＝6.6Hz，6H).
中間體1-二苯甲基-3-苄基氨基氮雜環丁烷-3-甲腈(I-(13A-9)a)的製備
在室溫下，向1-二苯甲基氮雜環丁烷-3-酮(3.3g，14mmol)的甲醇(35ml)溶液加入苄胺(1.6ml，15mmol)，然後加入乙酸(0.88ml，15mmol)。攪拌45分鐘後，歷經2分鐘分批加入固體NaCN(0.76g，15mmol)，將混合物加熱至回流過夜。將現含有沉澱的反應物冷卻，然後在室溫下攪拌。藉助真空過濾收集固體，用小體積冷甲醇衝洗，然後在真空中乾燥，得到I-(13A-9)a，為固體(3.56g，72％)+APCIMS(M+1)354.4；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.40(d，J＝7.5Hz，4H)，7.35(d，J＝7.5Hz，2H)，7.31-7.20(m，7H)，7.16(t，J＝7.3Hz，2H)，4.44(s，1H)，3.76(s，2H)，3.48(d，J＝8.3Hz，2H)，3.05(d，J＝8.3Hz，2H).
中間體1-二苯甲基-3-苄基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺(I-(13A-9)b)的製備 將在冰浴中冷卻的1-二苯甲基-3-苄基氨基氮雜環丁烷-3-甲腈I-(13A-9)a(3.45g，9.76mmol)的二氯甲烷(55ml)溶液用H2SO4(8.1ml，0.15mol)滴加處理。使反應混合物溫熱至室溫和攪拌過夜後，將其在冰浴中冷卻，然後小心地用濃NH4OH猝滅至pH 10。混合物用二氯甲烷萃取，然後合併有機層，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，在真空中濃縮，得到褐色固體。將該產物從己烷/乙醚中研製，得到淺黃褐色固體，藉助真空過濾收集之，用另外的己烷洗滌，在真空中乾燥，得到I-(13A-9)b(3.34g，92％)+ESI MS(M+1)372.4；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.41(d，J＝7.5Hz，4H)，7.35(d，J＝7.5Hz，2H)，7.31-7.22(m，7H)，7.16(t，J＝7.7Hz，2H)，4.50(s，1H)，3.60(s，2H)，3.48(d，J＝8.3Hz，2H)，3.16(d，J＝8.3Hz，2H).
中間體9-二苯甲基-3-(苄基乙基氨基)-氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺鹽酸鹽(I-(13A-9)c)的製備 將在冰浴中冷卻的1-二苯甲基-3-苄基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺I-(13A-9)b(3.06g，8.24mmol)的甲醇(80ml)懸浮液用乙酸(2.4ml，41mmol)、乙酸鈉(6.8g，82mmol)和乙醛(1.8ml，41mmol)處理。攪拌10分鐘後，分批加入NaCNBH3(6.24mg，9.9mmol)。攪拌45分鐘後，使混合物溫熱至室溫，攪拌過夜。將反應物在真空中濃縮，然後用乙酸乙酯從飽和含水碳酸氫鈉中萃取殘餘物，合併有機層，用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，然後在真空中濃縮，得到粗產物(3.8g)+APCI MS(M+1)400.5；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.41-7.37(m，6H)，7.29-7.22(m，6H)，7.20-7.12(m，3H)，4.44(s，1H)，3.74(s，2H)，3.47(d，J＝8.3Hz，2H)，3.12(d，J＝8.3Hz，2H)，2.56(q，J＝7.2Hz，2H)，0.85(t，J＝7.1Hz，3H).
為了純化，將游離鹼的甲醇溶液(75ml)用1M HCl的乙醚溶液(21ml)歷經5分鐘滴加處理。攪拌20分鐘後，在減壓下濃縮混合物，繼之以從另外的甲醇(2x)、然後是乙醇中濃縮。然後將殘餘物懸浮在異丙醇(3ml)中並攪拌，同時緩慢加入乙醚(50ml)。攪拌45分鐘後，藉助真空過濾分離固體，用乙醚洗滌，在真空中乾燥，得到I-(13A-9)c(4.4g，定量)+APCI MS(M+1)400.5；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.55-7.25(br m，15H)，5.76(br s，1H)，4.21(br s，4H)，3.93(v br s，2H)，1.02(br s，3H).
中間體1-二苯甲基-3-乙基氨基氮雜環丁烷-3-甲腈(I-(13A-9)d)的製備 在室溫下，向1-二苯甲基氮雜環丁烷-3-酮(9.5g，40mmol)在甲醇(30ml)中的混合物加入鹽酸乙胺(4.2g，52mmol)，然後加入乙酸(3.0ml，52mmol)。攪拌15分鐘後，加入固體KCN(3.4g，52mmol)，將均勻混合物在60℃下加熱過夜。將反應物冷卻，然後在真空中濃縮。然後用乙酸乙酯從飽和含水碳酸氫鈉中萃取殘餘物，合併有機層，用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，然後在真空中濃縮，得到I-(13A-9)d，為無色固體(11.7g，定量)+ES MS(M+1)292.2；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.42(d，J＝7.5Hz，4H)，7.26(t，J＝7.5Hz，4H)，7.17(t，J＝7.3Hz，2H)，4.47(s，1H)，3.54(d，J＝8.3Hz，2H)，3.25(d，J＝8.3Hz，2H)，2.61(s，J＝7.2Hz，2H)，1.11(t，J＝7.3Hz，3H).
中間體1-二苯甲基-3-乙基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺(I-(13A-9)e)的製備
將在冰浴中冷卻的、劇烈攪拌的1-二苯甲基-3-乙基氨基氮雜環丁烷-3-甲腈(I-(13A-9)d；11.7g，40mmol)的二氯甲烷(150ml)溶液用H2SO4(22ml，0.4mol)滴加處理。使反應混合物溫熱至室溫和攪拌過夜後，將其在冰浴中冷卻，然後小心地用濃NH4OH猝滅至pH11。藉助真空過濾收集在猝滅期間所生成的灰白色固體。含水混合物然後用二氯甲烷萃取，合併有機層，用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，然後在真空中濃縮，得到另外的固體。合併固體，在乙酸乙酯(150ml)中攪拌1小時，然後藉助真空過濾收集之，得到I-(13A-9)e(9.2g，74％)，為固體+ES MS(M+1)310.2；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.41(d，J＝7.1Hz，4H)，7.25(t，J＝7.5Hz，4H)，7.16(t，J＝7.5Hz，2H)，4.49(s，1H)，3.44(d，J＝8.3Hz，2H)，3.11(d，J＝8.3Hz，2H)，2.47(q，J＝7.1Hz，2H)，1.10(t，J＝7.3Hz，3H).
中間體3-乙基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺鹽酸鹽(I-(13A-9)f)的製備 向1-二苯甲基-3-(苄基乙基氨基)-氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺鹽酸鹽(I-(13A-9)c；0.66g，1.4mmol)的甲醇(25ml)溶液加入20％披Pd(OH)2碳(30％水；0.13g)。將混合物置於Parr振蕩器上，然後在室溫下還原(45psi H2)過夜。將混合物用甲醇(200ml)稀釋，通過0.45μm濾盤過濾，然後濃縮為固體。將殘餘物用乙醚研製，藉助真空過濾收集之，用乙醚洗滌，然後在真空中乾燥，得到I-(13A-9)f(298mg，98％)+APCI MS(M+1)144.1；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ4.56(s，4H)，3.00(q，J＝7.2Hz，2H)，1.36(t，J＝7.1Hz，3H).
作為替代選擇，在0℃下向1-二苯甲基-3-乙基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺(I-2A-1g；9.2g，30mmol)的甲醇(150ml)溶液加入1M HCl的乙醚溶液(75ml，75mmol)。將混合物在真空中濃縮至2/3體積以除去乙醚，然後加入甲醇至反應物體積達150ml。重複第二次。加入20％披Pd(OH)2碳(50％水；2.3g)後，將混合物置於Parr振蕩器上，然後在室溫下還原(45psi H2)過夜。將混合物用甲醇(350ml)稀釋，通過Celite過濾，用額外的甲醇衝洗。將甲醇部分通過0.45μm濾盤過濾，然後在減壓下濃縮，得到固體殘餘物，用乙醚研製，藉助真空過濾收集之，用乙醚洗滌，然後在真空中乾燥，得到I-(13A-9)f(6.3g，91％)，為黃褐色固體。
中間體1-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-乙酮(I-(15A-1)a)的製備 將6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤(1A-1)d(202mg，0.49mmol)與四(三苯膦)鈀(0)(60mg，0.049mmol)的二甲基甲醯胺(1.5ml)溶液脫氣，向其中加入三丁基-(1-乙氧基乙烯基)-甲錫烷(250μl，0.74mmol)。將反應混合物加熱至100℃，直至TLC顯示反應完成。向反應混合物加入2∶1 H2O/濃HCl(1.5ml)溶液，繼續加熱1小時。將反應物用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，濃縮至幹。粗產物經由TLC製備型平板純化，使用30％乙酸乙酯/己烷作為溶劑，得到所需產物I-(15A-1)a(50mg，25％)+ESI MS(M+1)417.3；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.11(s，1H)，7.589(d，J＝8.7Hz，1H)，7.43-7.30(m，4H)，7.21(d，J＝8.7Hz，2H)，2.92(s，3H).
中間體9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-甲腈(I-(16A-1)a)的製備 將6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤I-(1A-1)d(200mg，0.49mmol)溶於乙腈(5ml)，在0℃下攪拌。向反應混合物加入四丁基氰化銨(236mg，0.98mmol)和1，4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(173mg，1.5mmol)，繼續在0℃下攪拌3小時。在減壓下濃縮反應混合物，然後經過快速色譜純化，使用30％乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑，得到所需產物I-(16A-1)a(215mg，定量)+ESI MS(M+1)400.2；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.09(s，1H)，7.57(d，J＝8.7Hz，1H)，7.45-7.39(m，4H)，7.21(d，J＝8.7Hz，2H).
中間體C-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-甲基胺(I-(16A-1)b)的製備 將9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-甲腈I-(16A-1)a(110mg，0.27mmol)溶於二氯甲烷(0.9ml)，將該溶液冷卻至-78℃。向反應混合物滴加二異丁基氫化鋁(1M二氯甲烷溶液；590μl，0.59mmol)，繼續在-78℃下攪拌，直至TLC指示原料已被消耗。向混合物加入甲醇(100μl)，以猝滅反應，除去冷卻浴。用乙酸乙酯從1M HCl中萃取反應混合物。有機層用1M HCl反萃取，合併水層。然後將水層用氫氧化鈉調至鹼性pH，用乙酸乙酯萃取。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，蒸發至幹，得到所需化合物I-(16A-1)b+ESI MS(M+1)404.4；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.92(s，1H)，7.69(d，J＝8.3Hz，1H)，7.57(d，J＝1.7Hz，1H)，7.53-7.43(m，3H)，7.36(d，J＝8.3Hz，2H)，4.40(s，2H).
中間體N4-(4-氯苯基)-6-吡咯烷-1-基-嘧啶-4，5-二胺(I-(17A-1)a)的製備 合併6-氯-N4-(4-氯苯基)-嘧啶-4，5-二胺I-(1A-1)a(114mg，0.45mmol)和吡咯烷(1ml，過量)，在100℃下加熱攪拌2小時。將反應混合物用飽和NaHCO3溶液稀釋，用乙酸乙酯萃取。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，蒸發至幹，得到所需化合物I-(17A-1)a(131mg，定量)，為橙色-褐色固體+ESI MS(M+1)290.3；1H NMR(500MHz，CD3OD)δ7.85(s，1H)，7.45(d，J＝8.8Hz，2H)，7.26(d，J＝8.8Hz，2H)，3.63(m，4H)，1.96(m，4H).
中間體2-二苯甲基-5-苄基-2，5，7-三氮雜螺[3.4]辛-6-烯-8-酮(I-(29A-6)a)的製備
合併N，N-二甲基甲醯胺二甲基乙縮醛(16ml，121mmol)與1-二苯甲基-3-苄基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺(I-(13A-9)b；3.03g，8.16mmol)，加熱至回流。4小時後，將懸液冷卻，用乙酸乙酯從飽和含水NaHCO3中萃取。合併萃取液，乾燥(Na2SO4)，在真空中濃縮至粗固體(3.50g)。在BiotageTMFlash 40M柱上純化殘餘物，使用含0-3％甲醇的二氯甲烷作為洗脫劑，得到I-(29A-6)a，為微黃色固體(1.92g，62％)+ES MS(M+1)382.3；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.66(s，1H)，7.59(d，J＝7.1Hz，2H)，7.49-7.11(m，13H)，5.12(s，2H)，4.44(s，1H)，3.31(d，J＝9.6Hz，2H)，3.20(d，J＝9.6Hz，2H).
中間體2，5，7-三氮雜螺[3.4]辛烷-8-酮鹽酸鹽(I-(29A-6)b)的製備 向2-二苯甲基-5-苄基-2，5，7-三氮雜螺[3.4]辛-6-烯-8-酮(I-(29A-6)a；1.83g，4.80mmol)的甲醇/二氯甲烷溶液加入過量1M HCl的乙醚溶液(10ml)。攪拌10分鐘後，在真空中除去溶劑，將所得鹽酸鹽溶於甲醇(50ml)。加入20％披Pd(OH)2碳(50％水；1.1g)後，將混合物置於Parr振蕩器上，然後在室溫下還原(50psi H2)22小時。將反應物通過0.45μm盤過濾，然後在真空中濃縮，得到膠狀固體。將該產物用甲醇研製，得到I-(29A-6)b(450mg，47％)，為黃褐色固體+APCI MS(M+1)127.9；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ4.51(s，2H)，4.41-4.33(m，4H).
中間體1-二苯甲基-3-甲基氨基氮雜環丁烷-3-甲腈(I-(29A-7)a)的製備 在室溫下，向1-二苯甲基氮雜環丁烷-3-酮(2.13g，8.98mmol)的甲醇(17ml)溶液加入鹽酸甲胺(1.21g，18.0mmol)，然後加入乙酸(1.03ml，18.0mmol)。攪拌5分鐘後，加入固體KCN(1.17g，18.0mmol)，將混合物加熱至60℃達19小時。將反應物冷卻；藉助真空過濾收集固體產物，用甲醇衝洗，然後在真空中乾燥，得到I-(29A-7)a，為無色固體(2.50g，定量)+ESMS(M+1)278.3；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ7.43(d，J＝7.5Hz，4H)，7.29(t，J＝7.5Hz，4H)，7.23(t，J＝7.3Hz，2H)，4.45(s，1H)，3.55(d，J＝7.5Hz，2H)，3.15(d，J＝7.1Hz，2H)，2.40(s，3H).
中間體1-二苯甲基-3-甲基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺(I-(29A-7)b)的製備 將在冰浴中冷卻的、劇烈攪拌的1-二苯甲基-3-甲基氨基氮雜環丁烷-3-甲腈(I-(29A-7)a；2.10g，7.57mmol)的二氯甲烷(25ml)溶液用H2SO4(4.0ml，76mol)逐滴處理。使反應混合物溫熱至室溫和攪拌過夜後，將其在冰浴中冷卻，然後小心地用濃NH4OH猝滅至pH 11。將混合物用二氯甲烷萃取，合併有機層，乾燥(Na2SO4)，然後在真空中濃縮，得到I-(29A-7)b(1.2g，54％)，為灰白色固體+ES MS(M+1)296.3；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.41(d，J＝7.5Hz，4H)，7.25(t，J＝7.5Hz，4H)，7.16(t，J＝7.1Hz，2H)，4.48(s，1H)，3.41(d，J＝8.7Hz，2H)，3.09(d，J＝8.7Hz，2H)，2.24(s，3H).
中間體2-二苯甲基-5-甲基-2，5，7-三氮雜螺[3.4]辛-6-烯-8-酮(I-(29A-7)c)的製備 合併N，N-二甲基甲醯胺二甲基乙縮醛(1.1ml，8.3mmol)與1-二苯甲基-3-甲基氨基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺(I-(29A-7)b；153mg，0.52mmol)，加熱至回流。3小時後，將懸浮液冷卻，用乙酸乙酯從飽和含水NaHCO3中萃取。合併萃取液，乾燥(Na2SO4)，在真空中濃縮，得到I-(29A-7)c，為固體(152mg，96％)+ESMS(M+1)306.3；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.42(s，1H)，7.47(d，J＝7.5Hz，4H)，7.27(t，J＝7.5Hz，4H)，7.17(t，J＝7.5Hz，2H)，4.57(s，1H)，3.58(s，3H)，3.55(d，J＝10.0Hz，2H)，3.34(d，J＝10.0Hz，2H).
中間體5-甲基-2，5，7-三氮雜螺[3.4]辛烷-8-酮鹽酸鹽(I-(29A-7)d)的製備 向2-二苯甲基-5-甲基-2，5，7-三氮雜螺[3.4]辛-6-烯-8-酮(I-(29A-7)c；189mg，0.619mmol)的甲醇(30ml)溶液加入1M HCl的乙醚溶液(1.3ml)。加入20％披Pd(OH)2碳(50％水；95mg)後，將混合物置於Parr振蕩器上，然後在室溫下還原(50psi H2)5小時。將反應物通過0.45μm盤過濾，然後在真空中濃縮，得到固體。用二乙醚研製，得到I-(29A-7)d(124mg，94％)，為灰白色固體+APCI MS(M+1)142.0；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ4.38(d，J＝12.0Hz，2H)，4.17(s，2H)，4.13(d，J＝12.5Hz，2H)，2.71(s，3H).
實施例19-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-6-異丙氧基-9H-嘌呤(1A-1)的製備 將鈉(7mg，0.3mmol)溶於異丙醇(1ml)，向其中加入6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤I-(1A-1)d(30mg，0.07mmol)。在室溫下攪拌過夜後，將反應混合物蒸發至幹，從飽和NaHCO3水溶液中萃取到乙酸乙酯中。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，濃縮至幹。粗殘餘物經過TLC製備型平板純化，使用4％甲醇/二氯甲烷作為溶劑，得到標題化合物1A-1。將產物的二氯甲烷溶液用過量1N HCl的乙醚溶液處理，攪拌，蒸發至幹，然後在乙醚中研製，得到化合物1A-1的鹽酸鹽(8mg，26％)+ESIMS(M+1)433.4；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.50(s，1H)，7.64(d，J＝8.3Hz，1H)，7.55(d，J＝1.7Hz，1H)，7.49-7.45(3H)，7.34(d，J＝9.1Hz，2H)，5.73(七重峰，J＝6.2Hz，1H)，1.48(d，J＝6.2Hz，6H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物1A-1合成所述的操作步驟製備下表1所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表1
實施例26-叔丁氧基-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤(2A-1)的製備
合併6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤I-(1A-1)d、叔丁醇鉀(20mg，0.15mmol)和四氫呋喃(1ml)，在環境溫度下攪拌過夜。將反應混合物濃縮至幹，將殘餘物飽和NaHCO3水溶液中萃取到乙酸乙酯中。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，蒸發至幹。粗產物經過製備型TLC平板色譜純化，使用4％甲醇/二氯甲烷作為溶劑，得到標題化合物2A-1，為黃色的油+ESI MS(M+1)447.5；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.48(s，1H)，7.64(d，J＝8.3Hz，1H)，7.55(d，J＝2.1Hz，1H)，7.49-7.44(m，3H)，7.34(d，J＝9.1Hz，2H)，1.77(s，9H).
實施例36-(1-二苯甲基氮雜環丁烷-3-基氧基)-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤(3A-1)的製備 向6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤I-(1A-1)d(30mg，0.073mmol)與1-二苯甲基氮雜環丁烷-3-醇(53mg，0.22mmol)的四氫呋喃(1ml)溶液加入叔丁醇鉀(24mg，0.22mmol)。將合併後的試劑在環境溫度下攪拌過夜。將反應混合物濃縮至幹，將殘餘物從飽和NaHCO3溶液中萃取到乙酸乙酯中。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，蒸發至幹。粗產物經過製備型TLC平板色譜純化，使用4％甲醇/二氯甲烷作為溶劑，得到標題化合物3A-1，為黃色的油。將產物的二氯甲烷溶液用過量1N HCl的乙醚溶液處理，攪拌，蒸發至幹，然後在乙醚中研製，得到化合物3A-1的鹽酸鹽(14mg，31％)+ESI MS(M+1)612.21H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.51(s，1H)，7.65-7.30(m，17H)，5.85-5.77(br m，2H)，4.75-4.60(br m，2H)，4.55-4.30(br m，2H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物3A-1合成所述的操作步驟製備下表2所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表2

實施例49-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-6-(四氫呋喃-2-基甲氧基)-9H-嘌呤(4A-1)的製備 將9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-醇I-(1A-1)c(100mg，0.255mmol)、2-溴甲基-四氫呋喃(42mg，0.255mmol)和碳酸銫(83mg，0.26mmol)合併在二甲基甲醯胺(5ml)中，加熱至100℃過夜。將反應混合物用乙酸乙酯稀釋，用鹽水洗滌。將有機層乾燥(Na2SO4)，過濾，蒸發至幹。粗產物經過製備型TLC平板純化，使用75％乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑，得到標題化合物4A-1(20mg，16％)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.52(s，1H)，7.64(d，J＝8.3Hz，1H)，7.49(d，J＝2.1Hz，1H)，7.50-7.44(m，3H)，7.34(d，J＝8.7Hz，2H)，4.68(d，J＝5.0Hz，2H)，4.39(m，1H)，3.91(m，1H)，3.79(m，1H)，2.20-1.83(m，4H)。將產物的二氯甲烷溶液用4M HCl/二烷處理，蒸發至幹，然後進一步用高真空乾燥，得到化合物4A-1的鹽酸鹽+APCI MS(M+1)475.2.
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物4A-1合成所述的操作步驟製備下表3所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表3
實施例59-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-6-(2，2，2-三氟乙氧基)-9H-嘌呤(5A-1)的製備 將叔丁醇鉀(1M THF溶液；0.73ml，0.73mmol)和2，2，2-三氟乙醇(2ml)在室溫下攪拌，向該混合物加入6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤I-(1A-1)d(100mg，0.24mmol)。將反應混合物在室溫下攪拌3天，然後用H2O猝滅，用氯仿稀釋。將有機層用鹽水洗滌，乾燥(Na2SO4)，過濾，在減壓下濃縮。粗產物經過製備型TLC純化，使用20％乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑，得到標題化合物5A-1(20mg，17％)+APCI MS(M+1)473.1；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.58(s，1H)，7.64(d，1H)，7.57(d，1H)，7.50-7.41(m，3H)，7.36(d，2H)，5.23(q，2H).
實施例69-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-環己基胺(6A-1)的製備 將6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤I-(1A-1)d(30mg，0.07mmol)和環己胺(0.3ml)合併在乙醇(0.5ml)中，在60℃下加熱30分鐘。將反應混合物在N2氣流下濃縮，然後從飽和NaHCO3溶液中萃取到乙酸乙酯中。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，蒸發至幹，然後經過製備型TLC純化，使用25％乙酸乙酯/己烷作為洗脫劑，得到標題化合物6A-1。將產物的二氯甲烷溶液用過量1N HCl的乙醚溶液處理，攪拌，蒸發至幹，然後在乙醚中研製，得到化合物6A-1的鹽酸鹽(9.8mg，57％)，為固體+ESI MS(M+1)472.6；1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.40(s，1H)，7.66-7.60(m，2H)，7.38-7.35(m，3H)，7.53-7.50(d，J＝8.8Hz，2H)，3.90(br m，1H)，2.12(br d，J＝11.9Hz，2H)，1.94(br d，J＝13.0Hz，2H)，1.78(brd，J＝14.5Hz，1H)，1.62-1.23(m，5H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物6A-1合成所述的操作步驟製備下表4所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表4 實施例71-[9-(4-氯-苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌啶-4-羧酸乙基酯(7A-1)的製備
將6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤I-(1A-1)d(30mg，0.07mmol)、哌啶-4-羧酸乙基酯(34mg，0.22mmol)和三乙胺(20μl，0.29mmol)合併在乙醇(1ml)中，在70℃下加熱2小時。將反應混合物在N2氣流下濃縮，然後從飽和NaHCO3溶液中萃取到乙酸乙酯中。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，蒸發至幹，然後經過製備型TLC純化，使用含4％甲醇的二氯甲烷作為洗脫劑，得到標題化合物7A-1。將產物的二氯甲烷溶液用過量1N HCl的乙醚溶液處理，攪拌，蒸發至幹，得到化合物7A-1的鹽酸鹽(24mg，65％)，為固體+ESI MS(M+1)530.1；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.35(s，2H)，7.60(d，J＝8.3Hz，1H)，7.56(d，J＝2.1Hz，1H)，7.50-7.45(m，3H)，7.34(d，J＝8.7Hz，2H)，4.15(q，J＝7.1Hz，2H)，3.68(v br s，2H)，2.85(m，1H)，2.16(m，2H)，1.89(m，2H)，1.25(t，J＝7.1Hz，3H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物7A-1合成所述的操作步驟製備下表5所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表5














實施例8中間體4-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌嗪-1，3-二羧酸1-叔丁基酯3-乙基酯(I-(8A-1)a的製備將6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤I-(4A-7)c(103mg，0.27mmol)、哌嗪-1，3-二羧酸1-叔丁基酯3-乙基酯(Chiu，C.K.-F.andGriffith，D.A.，EP 1004583 A2；156mg，0.60mmol)和三乙胺(95μl，0.68mmol)合併在乙醇(1.5ml)中，在60℃下加熱，直至TLC判斷反應完全(3天)。在減壓下濃縮反應混合物，然後在BiotageTMFlash 12M柱上純化，使用含20至30％乙酸乙酯的己烷溶液作為洗脫劑，得到標題化合物I-(8A-1)a(78mg，48％)+ESI MS(M+1)597.3；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.298(br s，1H)，7.57(br s，1H)，7.48-7.25(m，7H)，5.60(v br s，1H)，4.67(d，J＝13.7Hz，1H)，4.23-4.05(br m，3H)，3.43-3.00(br m，2H)，1.46(s，9H)，1.22(t，J＝7.1Hz，3H).
1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]哌嗪-2-羧酸乙基酯鹽酸鹽(8A-1)的製備 將4-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌嗪-1，3-二羧酸叔丁基酯I-(8A-1)a溶於4M HCl的二烷溶液(0.5ml)。30分鐘後，在減壓下濃縮現為不均勻的反應物，然後從乙醚中研製，得到標題化合物8A-1(38mg，定量) +ESI MS(M+1)497.2；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.43(s，1H)，7.58(d，J＝7.5Hz，1H)，7.51-7.30(m，7H)，4.35-4.15(m，2H)，4.06(d，J＝13.3Hz，1H)，3.73-3.47(m，5H)，3.40-3.30(m，1H)，1.23(t，J＝7.1Hz，3H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物8A-1合成所述的操作步驟製備下表6所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表6
實施例9{3-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-(1α，5α，6α)-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基}-二甲基胺(9A-1)的製備 合併3-[9-(4-氯-苯基)-8-(2，4-二氯-苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-(1α，5α，6α)-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基胺鹽酸鹽14A-5(20mg，0.039mmol)、低聚甲醛(40mg)、甲醇(0.75ml)和乙酸(13μl，0.22mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。此時加入氰基硼氫化鈉(5mg，0.074mmol)，將反應混合物在室溫下攪拌4天。將反應混合物用飽和NaHCO3溶液稀釋，用乙酸乙酯萃取。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，蒸發至幹。粗產物經由TLC製備型平板純化，使用7∶3∶0.1己烷/二乙胺/甲醇作為溶劑，得到標題化合物9A-1。將產物的二氯甲烷溶液用過量1N HCl的乙醚溶液處理，攪拌，蒸發至幹，然後在乙醚中研製，得到化合物9A-1的鹽酸鹽+ESI MS(M+1)499.2.
{3-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-(1α，5α，6β)-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基}-二甲基胺(9A-2)的製備
利用類似於上文關於化合物9A-1合成所述的操作步驟製備{3-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-(1α，5α，6β)-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基}-二甲基胺。將該化合物轉化為對應的鹽酸鹽供試驗+ESI MS(M+1)＝499.2.
實施例101-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-異丙基氨基哌啶-4-羧酸醯胺(10A-1)的製備 將6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤I-(1A-1)d(300mg，0.58mmol)和4-異丙基氨基-哌啶-4-羧酸醯胺(101mg，0.548mmol)懸浮在乙醇/二氯甲烷(3ml/1ml)中。向該懸液加入三乙胺(0.16ml，1.1mmol)，將混合物加熱至60℃，直至TLC確定反應完全(3h)。使反應混合物在飽和NaHCO3溶液與二氯甲烷之間分配。將有機層乾燥(Na2SO4)，過濾，濃縮至幹。藉助矽膠色譜分離純的游離鹼，使用2-4％甲醇/二氯甲烷作為梯度洗脫劑，得到標題化合物10A-1。將產物的二氯甲烷溶液用過量1N HCl的乙醚溶液處理，攪拌，蒸發至幹，然後在乙醚中研製，得到化合物10A-1的鹽酸鹽，為黃褐色固體(115mg，38％)+ESI MS(M+1)558.2；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.40(s，1H)，7.60(d，J＝8.3Hz，1H)，7.56(d，J＝2.1Hz，1H)，7.51-7.44(m，3H)，7.33(d，J＝8.7Hz，2H)，5.20(v br m，2H)，3.87(br m，2H)，3.59(七重峰，J＝6.6Hz，1H)，2.68(br d，J＝13.7Hz，2H)，2.16(ddd，J＝14.5，10.4，4.1Hz，2H)，1.39(d，J＝6.6Hz，6H).
實施例119-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-2-甲基-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-9H-嘌呤(11A-1)的製備
將1-甲基哌嗪(200μl)的乙醇(0.8ml)溶液加入到6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-2-甲基-9H-嘌呤I-(11A-1)c(24mg，0.06mmol)中，置於60℃振蕩設備上達30分鐘。將反應物直接裝上TLC製備平板，供純化，使用10％甲醇/乙酸乙酯作為溶劑，得到所需標題化合物11A-1+ESI MS(M+1)465。將產物的二氯甲烷/甲醇溶液用過量1N HCl的乙醚溶液處理，攪拌，蒸發至幹，然後在乙醚中研製，得到化合物11A-1的鹽酸鹽(35mg，定量)+ESIMS(M+1)437.2；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.70-7.25(br m，7H)，7.09(t，J＝9.1Hz，1H)，5.80(br s，2H)，3.74(br s，4H)，3.36(br s，2H)，2.99(s，3H)，2.64(s，3H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物11A-1合成所述的操作步驟製備下表8所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通過轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表8 實施例129-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)-9H-嘌呤(12A-1)的製備
將6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-9H-嘌呤(類似於I-(7A-80)c製備；25mg，0.07mmol)與1-甲基-哌嗪(200μl)在乙醇(1ml)中的混合物在室溫下攪拌過夜。過濾收集所沉澱的標題化合物12A-1，用乙醚衝洗(15mg，51％)+ESI MS(M+1)410；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ8.27(s，1H)，7.63(td，J＝7.3，1.7Hz，1H)，7.45(m，1H)，7.38(d，J＝8.7Hz，2H)，7.26(t，J＝7.5Hz，1H)，7.22(d，J＝8.7Hz，2H)，7.01(t，J＝8.9Hz，1H)，4.34(br m，4H)，2.52(t，J＝5.0Hz，4H)，2.30(s，3H)。將產物的二氯甲烷/甲醇溶液用過量1N HCl的乙醚溶液處理，攪拌，蒸發至幹，然後在乙醚中研製，得到化合物12A-1的鹽酸鹽。
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物12A-1合成所述的操作步驟製備下表9所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表9
實施例138-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-1-異丙基-1，3，8-三氮雜螺[4.5]癸烷-4-酮(13A-1)的製備 將6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤I-(4A-7)c(19mg，0.052mmol)、1-異丙基-1，3，8-三氮雜螺[4.5]癸烷-4-酮(Janssen，P.A.J.，US 3238216；20mg，0.10mmol)與三乙胺(11μl)在乙醇(1ml)中的混合物在室溫下攪拌過夜。在減壓下濃縮反應混合物，然後在BiotageTMFlash 12S柱上純化，使用含3％甲醇的二氯甲烷作為洗脫劑，得到標題化合物13A-1(25mg)+ESI MS(M+1)536.3；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.22(s，1H)，7.59(d，J＝7.5Hz，1H)，7.46-7.35(m，5H)，7.29(d，J＝8.7Hz，2H)，4.27(s，2H)，4.25(v br s，4H)，3.15(七重峰，J＝6.6Hz，1H)，2.00-1.83(m，4H)，1.07(d，J＝6.6Hz，6H)。將產物的二氯甲烷/甲醇溶液用過量1N HCl的乙醚溶液處理，攪拌，蒸發至幹，然後在乙醚中研製，得到化合物13A-1的鹽酸鹽(23mg，77％)1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.43(s，1H)，7.61(d，J＝7.5Hz，1H)，7.53-7.40(m，5H)，7.35(d，J＝8.7Hz，2H)，4.20(v br s)，3.94(七重峰，J＝6.6Hz，1H)，2.45(m，4H)，1.41(d，J＝6.6Hz，6H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物13A-1合成所述的操作步驟製備下表10所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表10

實施例14中間體{3-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-(1α，5α，6α)-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基}-氨基甲酸叔丁基酯(I-(14A-1)a)的製備將6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-9H-嘌呤I-(4A-7)c(83mg，0.22mmol)、(3-(1α，5α，6β)-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-氨基甲酸叔丁基酯(利用Brighty，Katherine E.，美國專利No.5,164,402所述方法製備；87mg，0.44mmol)和三乙胺(46μl，0.33mmol)合併在乙醇(1ml)中，攪拌過夜。在減壓下濃縮反應混合物，然後在BiotageTMFlash 12S柱上純化，使用含3％甲醇的二氯甲烷作為洗脫劑，得到標題化合物I-(14A-1)a(117mg，99％)+APCI MS(M+1)537.4；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.19(s，1H)，7.59(d，J＝7.5Hz，1H)，7.50-7.35(m，5H)，7.27(d，J＝8.7Hz，2H)，4.75(brs，1H)，4.20(brs，1H)，4.03(brs，1H)，3.75(brs，1H)，2.24(s，1H)，1.89(brs，2H)，1.42(s，9H).
3-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-(1α，5α，6α)-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基胺鹽酸鹽(14A-1)的製備 將{3-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-(1α，5α，6α)-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基}-氨基甲酸叔丁基酯I-(14A-1)a溶於甲醇(1ml)，向該混合物加入4M HCl的二烷溶液(1ml)。將反應混合物攪拌5小時，然後濃縮，在乙醚中研製，得到標題化合物14A-1(112mg，定量)
+ESI MS(M+1)437.1；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.39(s，1H)，7.60(d，J＝7.5Hz，1H)，7.55-7.40(m，5H)，7.32(d，J＝8.7Hz，2H)，2.66(s，1H)，2.37(br s，2H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物14A-1合成所述的操作步驟製備下表11所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表11
實施例15{1-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-乙基}-異丙基胺(15A-1)的製備 將1-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]乙酮I-(15A-1)a(16mg，0.038mmol)與異丙胺(6.5μl，0.076mmol)的二氯甲烷(0.3ml)溶液在室溫下攪拌，向其中加入異丙醇鈦(IV)(34μl，0.114mmol)。將反應混合物攪拌3小時，然後加入甲醇(0.5ml)，繼之以硼氫化鈉(5mg)。當LC/MS顯示反應完全時，經過TLC製備型平板純化，使用含有1％氫氧化銨的10％甲醇/二氯甲烷作為溶劑，得到標題化合物15A-1。將產物的二氯甲烷溶液用過量1N HCl的乙醚溶液處理，攪拌，蒸發至幹，然後在乙醚中研製，得到化合物15A-1的鹽酸鹽(5.9mg)+ESI MS(M+1)460.5；1HNMR(500MHz，CD3OD)δ9.08(s，1H)，7.77(d，J＝8.3Hz，1H)，7.64(s，1H)，7.59-7.48(m，3H)，7.41(d，J＝8.8Hz，2H)，5.38(q，J＝6.2Hz，1H)，3.45(七重峰，J＝6.5Hz，1H)，1.84(d，J＝6.7Hz，3H)，1.43(d，J＝6.7Hz，3H)，1.41，(d，J＝6.2Hz，3H).
9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-6-(1-哌啶-1-基-乙基)-9H-嘌呤(15A-2)的製備
利用類似於上文關於化合物15A-1合成所述的操作步驟製備9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-6-(1-哌啶-1-基-乙基)-9H-嘌呤。將化合物轉化為對應的鹽酸鹽供試驗+ESI MS(M+1)＝486.5.
實施例16[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基甲基]-環己基胺(16A-1)的製備 將C-[9-(4-氯苯基)-8-(2，4-二氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-甲基胺I-(16A-1)b(19mg，0.047mmol)溶於甲醇(1ml)，向其中加入環己酮(1滴)和乙酸(1滴)。將反應混合物在室溫下攪拌0.5小時，然後加入氰基硼氫化鈉(5mg)，繼續攪拌直至反應完全(2h)。將反應混合物濃縮，殘餘物用飽和NaHCO3溶液稀釋，萃取到乙酸乙酯中。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，以含5％甲醇的乙酸乙酯作為溶劑，得到標題化合物16A-1。將殘餘物溶於二氯甲烷，用2M HCl/乙醚處理，生成所需的HCl鹽。向反應混合物加入乙醚，使產物沉澱出來。潷析過量乙醚，將結晶在高真空下泵幹，得到化合物16A-1的鹽酸鹽(6.8mg，30％)+ESI MS(M+1)486.6；1H NMR(500MHz，CD3OD)δ9.07(s，1H)，7.71(d，J＝8.8Hz，1H)，7.64(d，J＝2.1Hz，1H)，7.56(dd，J＝8.8，2.1Hz，1H)，7.52(d，J＝8.8Hz，2H)，7.40(d，J＝8.8Hz，2H)，4.94(s，2H)，3.35(m 1H)，2.28(br d，J＝12.4Hz，2H)，1.96(br d，J＝13.5Hz，2H)，1.78(br d，J＝13.0Hz，1H)，1.60-1.20(m，5H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物16A-1合成所述的操作步驟製備下表13所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表13
實施例179-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-6-吡咯烷-1-基-9H-嘌呤(17A-1)的製備 將N-4-(4-氯苯基)-6-吡咯烷-1-基-嘧啶-4，5-二胺I-(17A-1)a(25mg，0.086mmol)和2-氯苯甲酸乙基酯(31mg，0.17mmol)合併在多磷酸(1ml)中，加熱至150℃直至反應完成(2h)。將反應混合物用水稀釋，用6M NaOH溶液調至鹼性，然後用二氯甲烷萃取。合併有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾，濃縮至幹。粗產物經過製備型TLC純化，使用2次含20％乙酸乙酯的二氯甲烷作為溶劑，得到標題化合物17A-1(11mg，32％)+ESI MS(M+1)410.5；1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.44(s，1H)，7.51(dd，J＝7.8，2.1Hz，1H)，7.42-7.33(m，5H)，7.21(d，J＝8.8Hz，2H)，4.30(br s，2H)，3.88(br s，2H)，2.15-2.00(br m，4H)。將產物的二氯甲烷溶液用過量1N HCl的乙醚溶液處理，攪拌，蒸發至幹，然後在乙醚中研製，得到化合物17A-1的鹽酸鹽(12mg，定量)+ESIMS(M+1)410.5.
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物17A-1合成所述的操作步驟製備下表14所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表14
實施例189-(4-氯苯基)-8-(2-氟苯基)-6-吡咯烷-1-基-9H-嘌呤(18A-1)的製備
將2-氟苯甲酸(22mg，0.15mmol)和N4-(4-氯苯基)-6-吡咯烷-1-基-嘧啶-4，5-二胺I-(17A-1)a(30mg，0.10mmol)溶於二烷(0.7ml)和50％丙烷磷酸環狀酸酐的乙酸乙酯溶液(0.3ml)。將所得混合物在95℃下振蕩48小時。將反應物冷卻，用水稀釋至1.8ml，供純化。粗混合物的純化是藉助反相製備型Gilson 215HPLC實現的，使用HewlettPackard Series 1100MSD、G1315A DAD和Luna 5微米C8(2)250*21.2mmPhenomenex柱。所用梯度洗脫劑是含0.1％甲酸的水(A)和乙腈(B)，以三氟乙酸作為緩衝劑0.04min.-80％A，20％ B；20min.-20％ A，80％B；25min.-100％ B。合併含有所需化合物的部分，蒸發至幹，得到標題化合物18A-1。將殘餘物溶於甲醇(1.5ml)，用4M HCl/二烷(0.2ml)處理。將所得混合物在40℃下振蕩1小時，然後在30℃氮氣流中乾燥18小時，得到化合物18A-1的鹽酸鹽，為固體(4.2mg，10％)
+ESI MS(M+1)394.3；1H NMR(500MHz，CD3OD)δ8.36(s，1H)，7.72(t，J＝7.8Hz，1H)，7.59(m，1H)，7.51(d，J＝8.8Hz，2H)，7.40-7.33(m，3H)，7.14(t，J＝9.3Hz，1H)，4.49(br s，2H)，3.84(br s，2H)，2.24(br s，4H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物18A-1合成所述的操作步驟製備下表15所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通常轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表15


實施例191-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基氨基]-環戊烷羧酸鉀鹽(19A-1)的製備 將1-氨基環戊烷羧酸(36mg，0.28mmol)和Na2SO4(15mg，0.14mmol)合併在水(1ml)中。向反應混合物加入6-氯-9-(4-氯-苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤I-(4A-7)c(57.5mg，0.137mmol)，加熱至回流過夜。將反應混合物用1M HCl稀釋，過濾收集所得固體，在高真空下乾燥，得到2∶1的產物和原料嘌呤(49mg)。將殘餘物溶於二氯甲烷(1.5ml)，用三甲基甲矽烷醇鉀(potassium trimethylsilanolate)(21mg)處理。向緩慢攪拌的反應混合物加入乙醚，有沉澱生成。過濾分離固體，用1∶1二氯甲烷/乙醚洗滌，在高真空下乾燥，得到標題化合物19A-1(28mg，44％)+ESIMS(M+1)468.1；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.21(s，1H)，7.60(dd，J＝7.5，1.7Hz，1H)，7.50-7.35(m，5H)，7.29(d，J＝8.7Hz，2H)，2.42-2.33(br m，2H)，2.26-2.17(br m，2H)，1.87(br s，4H).
4-氨基-1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]哌啶-4-羧酸鉀鹽(19A-2)的製備
利用類似於上文關於化合物19A-1合成所述的操作步驟製備4-氨基-1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌啶-4-羧酸+ESI MS(M+1)＝483.1.
實施例201-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-乙基氨基哌啶-4-羧酸醯胺(20A-1)的製備 在室溫下，向淡橙色的6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2-氯-苯基)-9H-嘌呤I-(4A-7)c(1.00g，2.66mmol)的丙酮(13ml)溶液加入三乙胺(410μl，2.94mmol)。然後加入4-乙基氨基-哌啶-4-羧酸醯胺I-(7A-80)f的水溶液(1.5ml)，得到澄清的黃色反應溶液。在室溫下攪拌3天後，將渾濁的白色反應混合物用水(11ml)稀釋。在室溫下攪拌1小時，繼之以在0℃下攪拌1小時，在燒結玻璃漏鬥上收集沉澱，用冷的1∶1丙酮∶H2O衝洗。將固體在真空中乾燥，得到標題化合物20A-1，為無色固體(1.22g，90％)+ESI MS(M+1)510.2；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.19(s，1H)，7.57(d，J＝7.0Hz，1H)，7.45-7.35(m，5H)，7.26(d，J＝8.7Hz，2H)，4.54(br s，2H)，4.24(br s，2H)，2.51(q，J＝7.0Hz，2H)，2.12-2.06(m，2H)，1.76-1.72(m，2H)1.10(t，J＝7.0Hz，3H).
將上述固體(1.00g，1.96mmol)懸浮在異丙醇(16ml)中，繼之以加入THF(6ml)，得到澄清的溶液。在室溫下，歷經1分鐘加入含水2M HCl(1.3ml，2.6mmol)，然後在室溫下攪拌1小時，繼之以加熱至回流，攪拌16小時。冷卻後，將混合物在冰浴中攪拌2小時。在燒結玻璃漏鬥上收集無色沉澱，用冷的95∶5異丙醇∶H2O衝洗，進一步在真空中乾燥，得到20A-1，為無色固體(0.86g，79％)。將一部分此物質(0.81g，1.48mmol)懸浮在15ml 95∶5異丙醇∶H2O中，然後加熱至回流，攪拌17小時。將懸液冷卻至室溫，攪拌2小時，然後收集在中級燒結玻璃漏鬥上，用室溫的95∶5異丙醇∶H2O衝洗。進一步在真空中乾燥後，得到化合物20A-1的鹽酸鹽，為無色固體(0.72g，89％)+ESI MS(M+1)510.2；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.31(s，1H)，7.60(d，J＝7.4Hz，1H)，7.51-7.40(m，5H)，7.29(d，J＝8.7Hz，2H)，4.78(br s，2H)，4.22(br s，2H)，3.07(q，J＝7.0Hz，2H)，2.56-2.52(m，2H)，2.09-2.03(m，2H)，1.36(t，J＝7.0Hz，3H)。按照類似的方式製備20A-1的苯磺酸鹽和甲磺酸鹽。
實施例211-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-甲基氨基哌啶-4-羧酸甲基酯(21A-1)的製備 將1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-甲基-氨基哌啶-4-羧酸醯胺7A-87(實施例164；53mg，0.093mmol)與Amberlyst15(0.8g)在甲醇(5ml)中的混合物密封在試管中，然後加熱至60℃達20小時。過濾除去樹脂，用2∶1甲醇/三乙胺、再用含10％NH4OH的甲醇洗滌。合併有機層，濃縮，然後在BiotageTMFlash 12S柱上純化，使用含0-2-4％甲醇的二氯甲烷作為洗脫劑，得到化合物21A-1，為淺褐色固體(26mg，55％)+ESI MS(M+1)511.1；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ8.28(s，1H)，7.52(d，J＝8.3Hz，1H)，7.44-7.32(m，5H)，7.21(d，J＝8.7Hz，2H)，5.55(v br s，1H)，4.65(v br s，2H)，4.13(v br s，2H)，3.71(s，3H)，2.28(s，3H)，2.07(ddd，J＝13.7，9.6，3.7Hz，2H)，1.79(dt，J＝13.7，3.9Hz，2H).
1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-乙基氨基哌啶-4-羧酸甲基酯(21A-2)的製備 利用類似於上文關於化合物21A-1合成所述的操作步驟製備1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-乙基氨基-哌啶-4-羧酸甲基酯。+APCI MS(M+1)＝525.3.
實施例221-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-異丙基氨基哌啶-4-甲腈(22A-1)的製備 將1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌啶-4-酮7A-96(48mg，0.11mmol)的甲醇(0.4ml)懸浮液冷卻至0℃，然後用2-丙基胺(15μl，0.15mmol)、再用濃含水HCl處理。攪拌5分鐘後，加入氰化鈉(8.1mg，0.16mmol)的水(0.4ml)溶液；將不均勻的反應物溫熱至室溫，然後攪拌過夜。然後加入四氫呋喃(0.4ml)，以增溶全部反應劑。加入另外的氰化鈉(8mg，0.16mmol)和2-丙基胺(3滴)，攪拌過夜。將反應物過濾，然後在減壓下濃縮，得到標題化合物22A-1(27mg，48％)，為無色固體
+ESI MS(M+1)506.1；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ8.32(s，1H)，7.52(d，J＝7.9Hz，1H)，7.45-7.33(m，5H)，7.21(d，J＝8.7Hz，2H)，5.50(v br s，2H)，3.88(v br s，2H)，3.18(七重峰，J＝6.0Hz，1H)，2.16(m，2H)，1.82(ddd，J＝13.3，10.4，3.7Hz，2H)，1.16(d，J＝6.2Hz，6H).
1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-乙基氨基哌啶-4-甲腈(22A-2)的製備 利用類似於上文關於化合物22A-1合成所述的操作步驟製備1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-乙基氨基-哌啶-4-甲腈+ESI MS(M+1)＝492.1.
實施例231-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-羥基哌啶-4-羧酸甲基酯(23A-1)的製備 使氯-9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤I-(4A-7)c(59mg，0.16mmol)與4-羥基-哌啶-4-羧酸(22mg，0.14mmol)藉助實施例19的一般方法偶聯。將粗產物(ESI MS(M+1)484)溶於1∶1甲醇/苯(0.6ml)，然後用三甲代甲矽烷基重氮甲烷(2M己烷溶液，0.17ml，0.34mmol)處理。攪拌1小時後，將反應物在氮氣流下濃縮，然後經過製備型TLC純化，用含4％甲醇的二氯甲烷洗脫，得到標題化合物23A-1(31mg，44％)。將產物的乙醚/二氯甲烷溶液用過量1M HCl的乙醚溶液處理，在氮氣流下濃縮，然後從乙醚中研製，得到化合物23A-1的鹽酸鹽(27mg，36％總收率)，為淺黃褐色固體+ESI MS(M+1)498.1；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.38(s，1H)，7.62-7.59(m，1H)，7.51-7.40(m，5H)，7.34(d，J＝8.7Hz，2H)，3.90(v br s，2H)，3.75(s，3H)，2.25(td，J＝13.1，4.1Hz，2H)，1.97(br d，J＝12.4Hz，2H).
實施例24{1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-甲基氨基哌啶-4-基}-甲醇(24A-1)的製備 在0℃下，將1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-甲基氨基哌啶-4-羧酸甲基酯21A-1(91mg，0.18mmol)的四氫呋喃(1.5ml)溶液用二異丁基氫化鋁(1M四氫呋喃溶液，0.94ml)處理，然後溫熱至室溫，攪拌過夜。將混合物用0.6M NaOH(25ml)猝滅，用乙酸乙酯萃取，乾燥(Na2SO4)，濃縮(80mg)，然後在BiotageTMFlash 12M柱上純化，使用含5-10％甲醇和0.5％NH4OH的二氯甲烷作為洗脫劑，得到標題化合物24A-1(48mg，55％)+ESI MS(M+1)483.1；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ8.28(s，1H)，7.52(d，J＝8.3Hz，1H)，7.44-7.32(m，5H)，7.21(d，J＝8.7Hz，2H)，4.67(v br s，2H)，3.98(br s，2H)，3.40(s，2H)，2.31(s，3H)，1.72(dt，J＝14.1，4.6Hz，2H)，1.62(ddd，J＝14.1，9.6，4.2Hz，2H).
實施例258-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-1-異丙基-3-甲基-1，3，8-三氮雜螺[4.5]癸烷-4-酮鹽酸鹽(25A-1)的製備 將8-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-1-異丙基-1，3，8-三氮雜螺[4.5]癸烷-4-酮13A-1(86mg，0.16mmol)與甲基碘(2MMTBE溶液，16μl)的1∶1四氫呋喃/二甲基甲醯胺(2ml)溶液用氫化鈉(60％油分散體，12mg，0.3mmol)處理。攪拌2小時後，將混合物用乙酸乙酯從飽和含水碳酸氫鈉中萃取，乾燥(Na2SO4)，濃縮(123mg)，然後經過快速色譜純化，用4％甲醇洗脫，得到標題化合物25A-1，為油(87mg，定量)。將產物的二氯甲烷溶液用過量1M HCl的乙醚溶液處理，在氮氣流下濃縮，然後從乙醚中研製，得到化合物25A-1的鹽酸鹽(82mg，82％總收率)，為無色固體 +ESI MS(M+1)550.2；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.34(s，1H)，7.60(d，J＝7.9Hz，1H)，7.51-7.39(m，5H)，7.31(d，J＝8.3Hz，2H)，4.76(s，2H)，4.14(br s，2H)，3.78(br s，1H)，2.96(s，3H)，2.28(brs，4H)，1.32(d，J＝6.2Hz，6H).
實施例264-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌嗪-2-羧酸醯胺(26A-1)的製備
向0℃的4-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌嗪-2-羧酸乙基酯13A-9(32mg，0.064mmol)的甲醇(4ml)溶液以中等速率通入NH3達15分鐘。將容器密封，溫熱至室溫，攪拌4天。將混合物在減壓下濃縮(123mg)，然後在BiotageTM12S柱上純化，使用含3-6％甲醇的二氯甲烷作為洗脫劑，得到標題化合物26A-1(30mg，定量)。將產物的二氯甲烷溶液用過量1M HCl的乙醚溶液處理，在氮氣流下濃縮，然後從乙醚中研製，得到化合物26A-1的鹽酸鹽，為灰白色固體+ESI MS(M+1)468.3；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.47(s，1H)，7.64-7.61(m，1H)，7.53-7.36(m，5H)，7.35(d，J＝8.7Hz，2H)，5.52(br d，J＝14.5Hz，2H)，4.28(dd，J＝10.0，3.7Hz，1H)，3.95-3.88(m，2H)，3.63(dt，J＝12.9，3.3Hz，1H)，3.44-3.39(m，1H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物26A-1合成所述的操作步驟製備下表18所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通用轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表18
實施例279-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-1-甲基-4-氧雜-1，9-二氮雜螺[5.5]十一烷-2-酮(27A-1)的製備 向0℃的{1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-甲基氨基哌啶-4-基}-甲醇24A-1(44mg，0.091mmol)與三乙胺的二氯甲烷(1ml)溶液滴加2-氯乙醯氯，使反應物溫熱至室溫，攪拌過夜。然後將混合物用二氯甲烷稀釋至3ml，加入50％含水NaOH(0.6ml)，繼續攪拌過夜。將反應物用二氯甲烷從飽和含水碳酸氫鈉中萃取，乾燥(Na2SO4)，濃縮(123mg)，在減壓下濃縮(123mg)，然後在BiotageTM12S柱上純化，使用含有0.5％NH4OH的含2.5-10％甲醇的二氯甲烷作為洗脫劑，得到標題化合物27A-1(15mg，32％)。將產物的二氯甲烷溶液用過量1M HCl的乙醚溶液處理，在氮氣流下乾燥，然後從乙醚中研製，得到化合物27A-1的鹽酸鹽，為灰白色固體+ESI MS(M+1)523.3；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ8.32(s，1H)，7.53(d，J＝7.9Hz，1H)，7.45-7.33(m，5H)，7.22(d，J＝8.7Hz，2H)，5.55(v br s，2H)，4.18(s，2H)，4.01(s，2H)，3.19(br m，2H)，2.85(s，3H)，2.14(td，J＝13.3，5.4Hz，2H)，1.88(brd，J＝14.5Hz，2H).
實施例281-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-羥基氮雜環丁烷-3-羧酸甲基酯(28A-1)的製備
向0℃的1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-3-羥基氮雜環丁烷-3-羧酸醯胺13A-10(83mg，0.18mmol)的甲醇(2ml)溶液加入HCl(1M乙醚溶液，0.27ml)。15分鐘後，在減壓下濃縮反應物。粗產物經過Chromatotron純化，使用30∶1∶0.05至20∶1∶0.1二氯甲烷/甲醇/NH4OH作為洗脫劑(14mg，17％)+ESI MS(M+1)470.2；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.25(s，1H)，7.61(d，J＝7.5Hz，1H)，7.48-7.39(m，5H)，7.30(d，J＝8.7Hz，2H)，3.83(s，3H).
實施例291-{1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-4-苯基哌啶-4-基}-3-乙酮(29A-1)的製備 向6-氯-9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤I-(4A-7)c(68mg，0.18mmol)的1∶1二氯甲烷/乙醇(2ml)溶液加入1-(4-苯基哌啶-4-基)-乙酮(48mg，0.2mmol)和三乙胺(70μl，0.5mmol)。將混合物攪拌過夜，在減壓下濃縮，然後在BiotageTMFlash 12S柱上純化，使用含5-10％甲醇的二氯甲烷作為洗脫劑，得到標題化合物29A-1(77mg，78％)。
將產物的1∶1甲醇/二氯甲烷溶液用過量1M HCl的乙醚溶液處理，在氮氣流下濃縮，然後從乙醚中研製，得到化合物29A-1的鹽酸鹽(77mg)+ESI MS(M+1)542.5；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.35(s，1h)，7.60(d，J＝8.7Hz，1H)，7.51(t，J＝7.8Hz，1H)，7.46-7.40(m，9H)，7.34-7.29(m，3H)，2.70(br m，2H)，1.98(br m，2H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物29A-1合成所述的操作步驟製備下表19所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。首先分離到下列化合物的游離鹼，然後通用轉化為它們對應的鹽酸鹽供試驗。
表19
實施例303-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-6-嗎啉-4-基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-羧酸醯胺(30A-1)的製備 將3-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-6-嗎啉-4-基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-甲腈29A-8(28mg，0.052mmol)在濃H2SO4(0.6ml)中的混合物在200℃下加熱2小時。使反應混合物冷卻至室溫和攪拌過夜後，將其在冰浴中冷卻，然後小心地用5M含水NaOH猝滅至pH 11。混合物用乙酸乙酯萃取，然後合併有機層，用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，在真空中濃縮。在BiotageTMFlash 12S柱上純化殘餘物，使用含0-6％甲醇的二氯甲烷作為洗脫劑，從二氯甲烷/己烷中研製後得到標題化合物30A-1(24mg，83％)+ESI MS(M+1)550.4；1H NMR(400MHz，CD2Cl2)δ8.27(s，1H)，7.52-7.49(m，1H)，7.44-7.32(m，5H)，7.20(d，J＝8.7Hz，2H)，5.54(s，1H)，5.47(s，1H)，5.03(d，J＝12.0Hz，1H)，4.37(d，J＝12.0Hz，1H)，3.97(br d，J＝9.1Hz，1H)，3.68-3.55(m，5H)，2.73-2.63(m，4H)，2.01(br s，1H)，1.96(br s，1H).
實施例319-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-6-異丙氧基-9H-嘌呤(31A-1)的製備 將9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-醇(I-(4A-7)b；50mg，0.14mmol)、2-碘丙烷(26mg，0.15mmol)和碳酸銫(50mg，0.15mmol)合併在二甲基甲醯胺(0.7ml)中，攪拌過夜。加入另外的2-碘丙烷(13mg，0.76mmol)和碳酸銫(25mg，0.76mmol)，攪拌另外1天。將反應混合物用乙醚稀釋，然後用飽和含水碳酸氫鈉和鹽水洗滌。將有機層乾燥(Na2SO4)，蒸發至幹，然後在BiotageTMFlash 12S柱上純化，使用含0-70％乙酸乙酯的己烷作為洗脫劑，得到標題化合物31A-1(34mg，56％)1H NMR+ESI MS(M+1)399.4；(400MHz，CD2Cl2)δ8.51(s，1H)，7.56(dd，J＝7.5，1.7Hz，1H)，7.47-7.34(m，5H)，7.23(d，J＝9.1Hz，2H)，5.71(七重峰，J＝6.2Hz，1H)，1.50(d，J＝6.2Hz，6H).
使用適當的原料，利用類似於上文關於化合物31A-1合成所述的操作步驟製備下表20所列舉的化合物，所述原料是商業上可獲得的、利用本領域技術人員熟知的製備法製備的或者按照類似於上文關於其他中間體所述途徑的方式製備的。
表20
實施例321-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌啶-4-酮肟(32A-1)的製備
將1-[9-(4-氯苯基)-8-(2-氯苯基)-9H-嘌呤-6-基]-哌啶-4-酮7A-96(75mg，0.17mmol)與鹽酸羥胺(11.9mg，0.17mmol)在甲醇(0.3ml)中的混合物在室溫下攪拌過夜。然後從飽和含水碳酸氫鈉中萃取反應物，合併有機層，乾燥(Na2SO4)，濃縮，得到標題化合物32A-1(75mg，97％)，為固體+ESIMS(M+1)453.4；1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.49(s，1H)，8.28(s，1H)，7.70(dd，J＝7.7，1.5Hz，1H)，7.53-7.41(m，5H)，7.31(d，J＝8.7Hz，2H)，4.45-4.18(v br s，4H)，2.61(t，J＝6.0Hz，2H)，2.39(t，J＝5.8Hz，2H).
藥理學試驗在至少一種下文所述方案中的活性能夠證明本發明化合物在本發明實施中的實用性。在下述方案中使用下列首字母組合詞。
BSA-牛血清白蛋白DMSO-二甲基亞碸EDTA-乙二胺四乙酸PBS-磷酸鹽緩衝鹽水EGTA-乙二醇-雙(β-氨基乙醚)N，N，N』，N』-四乙酸GDP-鳥苷二磷酸sc-皮下po-經口ip-腹膜內icv-腦室內iv-靜脈內[3H]SR141716A-放射性標記的N-(哌啶-1-基)-5-(4-氯苯基)-1-(2，4-二氯苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-甲醯胺鹽酸鹽，可從Amersham Biosciences，Piscataway，NJ獲得。CP-55940-放射性標記的5-(1，1-二甲基庚基)-2-[5-羥基-2-(3-羥基丙基)-環己基]-苯酚，可從NEN Life Science Products，Boston，MA獲得。
AM251-N-(哌啶-1-基)-1-(2，4-二氯苯基)-5-(4-碘苯基)-4-甲基-1H-吡唑-3-甲醯胺，可從TrisTM，Ellisville，MO獲得。
在下列CB-1受體結合測定法中測試上文實施例一節所列舉的全部化合物。這些化合物提供從0.17nM至1μM的結合活性範圍，實施例19A-1和實施例19A-2除外，前者的結合活性為2.8nM，後者的結合活性為1.2nM。然後在下文生物學結合測定法一節所述CB-1 GTPγ[35S]結合測定法和CB-2結合測定法中測試活性＜20nM的那些化合物。然後利用下文生物學功能測定法一節所述功能測定法體內測試所選擇的化合物。
體外生物學測定法用於測定大麻素受體配體的CB-1與CB-2結合性質和藥理學活性的生物測定系統如Roger G.Pertwee in″Pharmacology of CannabinoidReceptor Ligands″Current Medicinal Chemistry，6，635-664(1999)和WO 92/02640(1990年8月8日提交的美國申請No.07/564,075，引用在此作為參考)所述。
下列測定法被設計用來檢測抑制[3H]SR141716A(選擇性放射性標記的CB-1配體)和[3H]5-(1，1-二甲基庚基)-2-[5-羥基-2-(3-羥基丙基)-環己基]-苯酚([3H]CP-55940，放射性標記的CB-1/CB-2配體)與其各受體結合的化合物。
大鼠CB-1受體結合方案切開Pel Freeze腦(可從Pel Freeze Biologicals，Rogers，Arkansas獲得)，置於組織製備緩衝液(5mM Tris-HCl，pH＝7.4，2mMEDTA)中，在高速下polytron，在冰上保持15分鐘。然後在4℃下，使均質化物在1,000Xg下旋轉5分鐘。回收上清液，在4℃下、在100,000Xg下離心1小時。將沉澱重新懸浮在25ml TME(25nM Tris，pH＝7.4，5mM MgCl2，1mM EDTA)每份所用腦組織中。進行蛋白質測定，向其中加入200μl組織，總計20μg。
將供試化合物稀釋在藥物緩衝液(0.5％BSA，10％ DMSO，TME)中，然後將25μl加入到深孔聚丙烯平板中。將[3H]SR141716A稀釋在配體緩衝液(0.5％BSA，TME)中，將25μl加入到平板中。利用BCA蛋白質測定法來測定適當的組織濃度，然後向平板加入適當濃度的200μl大鼠腦組織。將平板蓋好，置於20℃恆溫箱中達60分鐘。在培育期結束時，向反應平板加入250μl終止緩衝液(5％BSA，TME)。然後在預浸泡在BSA(5mg/ml)加TME中的GF/B濾墊上，藉助Skatron收穫平板。每一濾器洗滌兩次。將濾器乾燥過夜。次日早上，在Wallac BetaplateTM計數器(可從Perkin Elmer Life SciencesTM，Boston，MA獲得)上計數濾器。
人CB-1受體結合方案將用CB-1受體cDNA轉染的人胚胎腎293(HEK 293)細胞(可從Dr.Debra Kendall，University of Connecticut獲得)收穫在均質化緩衝液(10mM EDTA，10mM EGTA，10mM碳酸氫鈉，蛋白酶抑制劑；pH＝7.4)中，利用Dounce Homogenizer均質化。然後在4℃下，使均質化產物在1,000Xg下旋轉5分鐘。回收上清液，在4℃下、在25,000Xg下離心20分鐘。然後將沉澱重新懸浮在10ml均質化緩衝液中，在4℃下、在25,000Xg下再旋轉20分鐘。將最終的沉澱重新懸浮在1ml TME(25mM Tris緩衝液(pH＝7.4)，含有5mM MgCl2和1mM EDTA)中。進行蛋白質測定，向其中加入200μl組織，總計20μg。
將供試化合物稀釋在藥物緩衝液(0.5％ BSA，10％ DMSO，TME)中，然後將25μl加入到深孔聚丙烯平板中。將[3H]SR141716A稀釋在配體緩衝液(0.5％BSA，TME)中，將25μl加入到平板中。將平板蓋好，置於30℃恆溫箱中達60分鐘。在培育期結束時，向反應平板加入250μl終止緩衝液(5％BSA，TME)。然後在預浸泡在BSA(5mg/ml)加TME中的GF/B濾墊上，藉助Skatron收穫平板。每一濾器洗滌兩次。將濾器乾燥過夜。次日早上，在Wallac BetaplateTM計數器(可從Perkin Elmer LifeSciencesTM，Boston，MA獲得)上計數濾器。
CB-2受體結合方案將用CB-2 cDNA轉染的中國倉鼠卵巢-K1(CHO-K1)細胞(可從Dr.Debra Kendall，University of Connecticut獲得)收穫在組織製備緩衝液(5mM Tris-HCl，pH＝7.4，2mM EDTA)中，在高速下polytron，在冰上保持15分鐘。然後在4℃下，使均質化物在1,000Xg下旋轉5分鐘。回收上清液，在4℃下、在100,000Xg下離心1小時。將沉澱重新懸浮在25ml TME(25mM Tris，pH＝7.4，5mM MgCl2，1mM EDTA)每份所用腦組織中。進行蛋白質測定，向其中加入200μl組織，總計10μg。
將供試化合物稀釋在藥物緩衝液(0.5％ BSA，10％ DMSO，80.5％ TME)中，然後將25μl加入到深孔聚丙烯平板中。將[3H]CP-55940稀釋在配體緩衝液(0.5％ BSA，99.5％ TME)中，然後向每孔加入25μl，濃度1nM。利用BCA蛋白質測定法來測定適當的組織濃度，然後向平板加入適當濃度的200μl腦組織。將平板蓋好，置於30℃恆溫箱中達60分鐘。在培育期結束時，向反應平板加入250μl終止緩衝液(5％BSA，TME)。然後在預浸泡在BSA(5mg/ml)加TME中的GF/B濾墊上，藉助Skatron收穫平板。每一濾器洗滌兩次。將濾器乾燥過夜。然後在Wallac BetaplateTM計數器上計數濾器。
CB-1 GTPγ[35S]結合測定法從用人CB-1受體cDNA穩定轉染的CHO-K1細胞製備膜。從細胞製備膜如Bass et al，in″Identification and characterization ofnovel somatostatin antagonists，″Molecular Pharmacology，50，709-715(1996)所述。GTPγ[35S]結合測定法是這樣進行的，在96孔FlashPlateTM中，一式兩份，使用100pM GTPγ[35S]和10μg膜每孔，測定緩衝液由50mM Tris-HCl，pH 7.4，3mM MgCl2，pH 7.4，10mM MgCl2，20mM EGTA，100mM NaCl，30μM GDP，0.1％牛血清白蛋白和下列蛋白酶抑制劑組成100μg/ml桿菌肽，100μg/ml苄脒，5μg/ml抑酶肽，5μg/ml亮抑酶肽。然後將測定混合物與遞增濃度的拮抗劑(10-10M至10-5M)培育10分鐘，用大麻素激動劑CP-55940(10μM)攻擊。在30℃下進行測定達1小時。然後將FlashPlateTM在2000Xg下離心10分鐘。然後利用Wallac Microbeta量化對GTPγ[35S]結合的刺激作用。利用Graphpad的PrismTM進行EC50計算。
反激動作用是在沒有激動劑的存在下測量的。
CB-1基於FLIPR的功能測定方案本測定法使用用人CB-1受體cDNA(可從Dr.Debra Kendall，University of Connecticut獲得)和混棲G-蛋白G16共同轉染的CHO-K1細胞。將細胞提前48小時平板接種在塗有膠原的384孔黑色透明的測定平板中，每孔12500個細胞。將細胞與4μM Fluo-4 AM(MolecularProbes)在DMEM(Gibco)中培育1小時，培養基含有2.5mM丙磺舒(probenicid)和pluronic酸(0.04％)。然後將平板用HEPES緩衝鹽水(含有丙磺舒；2.5mM)洗滌3次，以除去過量染劑。20分鐘後，將平板逐一加入到FLIPR中，歷經80秒鐘連續監測螢光水平。20秒基線期之後向全部384孔同時加入化合物。一式三份進行測定，生成6點濃度-響應曲線。隨後用3μM WIN 55，212-2(激動劑)攻擊拮抗劑化合物。利用Graph Pad Prusm分析數據。
反激動劑的檢測使用完整的細胞，利用下列環AMP測定方案來測定反激動劑活性。
將細胞平板接種在96孔平板中，接種密度為10,000-14,000細胞每孔，濃度為100μl每孔。將平板在37℃恆溫箱中培育24小時。除去培養基，加入無血清培養基(100μl)。然後將平板在37℃下培育18小時。
向每孔加入含有1mM IBMX的無血清培養基，繼之以10μl供試化合物(在50％DMSO/PBS中的1∶10儲備溶液(含25mM化合物的DMSO))，用含有0.1％BSA的PBS稀釋10倍。在37℃下培育20分鐘後，加入2μMForskolin，然後在37℃下培育另外20分鐘。除去培養基，加入100μl0.01N HCl，然後在室溫下培育20分鐘。向Flashplate加入溶胞產物(75μl)以及25μl測定緩衝液(由FlashPlateTMcAMP測定試劑盒提供，可從NEN Life Science Products Boston，MA獲得)。按照試劑盒的方案加入cAMP標準品和cAMP示蹤劑。然後將Flashplate在4℃下培育18小時。抽吸小孔內容物，在閃爍計數器中計數。
體內生物學測定法已經顯示大麻素激動劑、例如Δ9-四氫大麻酚(Δ9-THC)和CP-55940，可影響小鼠的四種特有行為，總稱為四聯症。關於這些行為的說明，參見Smith，P.B.，et al.in」The pharmacological activity ofanandamide，a putative endogenous cannabinoid，in mice.」J.Pharmacol.Exp.Ther.，270(1)，219-227(1994)和Wiley，J.，etal.in″Discriminative stimulus effects of anandamide in rats，″Eur.J.Pharmacol.，276(1-2)，49-54(1995)。這些活性在下述運動活動、僵住、低溫和熱板測定法中的逆轉提供了CB-1拮抗劑體內活性的篩選手段。
全部數據均以從單獨激動劑逆轉的％表示，利用下式計算(CP/激動劑-載體/激動劑)/(載體/載體-載體/激動劑)。負數表示激動劑活性的加強或者無拮抗劑活性。正數表示對該特定試驗的活性的逆轉。
運動活動將雄性ICR小鼠(n＝6；17-19g，Charles River Laboratories，Inc.，Wilmington，MA)用供試化合物預處理(sc，po，ip或icv)。15分鐘後，用CP-55940(sc)攻擊小鼠。激動劑注射後25分鐘，將小鼠置於透明的丙烯酸籠子(431.8cm×20.9cm×20.3cm)中，籠子中含有清潔的木屑。使受試動物探察周圍環境達總計約5分鐘，藉助置於籠子頂部的紅外運動檢測儀(可從Coulbourn InstrumentsTM，Allentown，PA獲得)記錄活動。用計算機收集數據，以「動作單元」表示。
僵住將雄性ICR小鼠(n＝6；17-19g抵達體重)用供試化合物預處理(sc，po，ip或icv)。15分鐘後，用CP-55940(sc)攻擊小鼠。注射後90分鐘，將小鼠置於6.5cm鋼環上，鋼環與環支架連接，高約12英寸。將環固定在水平方向，使小鼠懸掛在鋼環缺口中，前後爪抓住邊緣。歷經3分鐘記錄小鼠保持完全不動的持續時間(呼吸動作除外)。
數據以不動性評分百分比表示。評分是這樣計算的，小鼠保持不動的秒數除以觀測期的總時間，結果再乘以100。然後計算從激動劑逆轉的百分比。
低溫將雄性ICR小鼠(n＝5；17-19g抵達體重)用供試化合物預處理(sc，po，ip或icv)。15分鐘後，用大麻素激動劑CP-55940(sc)攻擊小鼠。激動劑注射後65分鐘，採集直腸體溫如下，將小的溫度探針插入直腸內大約2-2.5cm。記錄溫度，精確至十分之一度。
熱板將雄性ICR小鼠(n＝7；17-19g抵達體重)用供試化合物預處理(sc，po，ip或iv)。15分鐘後，用大麻素激動劑CP-55940(sc)攻擊小鼠。45分鐘後，利用標準熱板計(Columbus Instruments)測試每一小鼠痛覺缺失的逆轉。熱板尺寸為10″×10″×0.75″，周圍為透明的丙烯酸壁。記錄踢、舔或輕彈後爪或者從平臺跳躍的潛伏期，精確至十分之一秒。計時器是由實驗者操控的，每一試驗具有40秒的中斷期。數據以激動劑誘發痛覺缺失逆轉的百分比表示。
食物攝取下列篩選法用於評價供試化合物抑制禁食過夜Sprague-Dawley大鼠食物攝取的功效。
雄性Sprague-Dawley大鼠是從Charles River Laboratories，Inc.(Wilmington，MA)獲得的。向大鼠單獨餵養粉碎的飼料。它們接受12-小時的晝夜周期，可自由進食飲水。在進行試驗之前，使動物適應環境達一周。試驗是在晝夜周期的白晝期間完成的。
為了進行食物攝取功效篩選，在試驗之前的下午將大鼠轉移至沒有食物的單獨試驗籠中，使大鼠禁食過夜。禁食過夜後，次日早上給大鼠服用載體或供試化合物。服用已知拮抗劑(3mg/kg)作為陽性對照，對照組接受單獨的載體(沒有化合物)。供試化合物的服用範圍在0.1與100mg/kg之間，因化合物而異。標準載體是0.5％(w/v)甲基纖維素的水溶液，標準給藥途徑是口服。不過，在需要時利用不同的載體和給藥途徑以適應各種化合物。在給藥後30分鐘向大鼠提供食物，啟動Oxymax自動食物攝取系統(Columbus Instruments，Columbus，Ohio)。每隔10分鐘記錄各大鼠的食物攝取，連續記錄2小時。在需要時利用電子天平手動記錄食物攝取；在提供食物後每30分鐘稱重食物，直至提供食物後4小時。通過比較經過化合物處置的大鼠的食物攝取方式與載體和標準陽性對照，確定化合物的功效。
酒精攝取下列方案評價對具有長期飲酒史的酒精偏愛(P)雌性大鼠(餵養在Indiana University)酒精攝取的效果。下列參考文獻提供P大鼠的詳細說明Li，T.-K.，et al.，″Indiana selection studies on alcoholrelated behaviors″in Development of Animal Models asPharmacogenetic Tools(eds McClearn C.E.，Deitrich R.A.andErwin V.G.)，Research Monograph 6，171-192(1981)NIAAA，ADAMHA，Rockville，MD；Lumeng，L，et al.，″New strains of rats withalcohol preference and nonpreference″Alcohol And AldehydeMetabolizing Systems，3，Academic Press，New York，537-544(1977)；and Lumeng，L，et al.，″Different sensitivities to ethanol inalcohol-preferring and-nonpreferring rats，″Pharmacol，BiochemBehav.，16，125-130(1982)。
每天在黑夜周期開始時，雌性大鼠有2小時可以飲酒(10％v/v和水，2瓶選擇)。顛倒大鼠的周期，以促進實驗者的交互作用。先將動物分為四組，酒精攝取量相等第1組-載體(n＝8)；第2組-陽性對照(例如5.6mg/kg AM251；n＝8)；第3組-低劑量供試化合物(n＝8)；第4組-高劑量供試化合物(n＝8)。一般將供試化合物混合在含30％(w/v)β-環糊精的蒸餾水載體中，體積為1-2ml/kg。在實驗的前兩天對全部組給以載體注射。這之後是兩天的藥物注射(給予適當的組)和最後一天的載體注射。在藥物注射的日子，在2小時飲酒期之前30分鐘s c給以藥物。在試驗期間測量全部動物的酒精攝取量，在經過藥物與載體處置的動物之間進行對比，以確定化合物對飲酒行為的影響。
利用雌性C57BI/6小鼠(Charles River)進行另外的飲酒研究。若干研究已經顯示，這種品種的小鼠將容易消耗酒精，不需要處理或者僅需很少處理(Middaugh et al.，″Ethanol Consumption by C57BL/6MiceInfluence of Gender and Procedural Variables″Alcohol，17(3)，175-183，1999；Le et al.，″Alcohol Consumption by C57BL/6，BALA/c，and DBA/2 Mice in a Limited Access Paradigm″PharmacologyBiochemisrty and Behavior，47，375-378，1994)。
出於我們的目的，在抵達後(17-19g)，將小鼠單獨圈養並無限制地攝取粉碎大鼠飼料、水和10％(w/v)酒精溶液。無限制飲酒2-3周後，每天限制供水20小時，酒精僅限2小時。這麼做的方式是，飲酒期是白晝周期的黑夜部分的後2個小時。
一旦飲酒行為穩定後，開始試驗。當3天的平均酒精消耗量是全部3天平均值的20％時，小鼠被認為是穩定的。試驗的第1天，全部小鼠接受載體注射(sc或ip)。注射後30至120分鐘，可以獲取酒精和水。計算當天的酒精消耗量(g/kg)，分組(n＝7-10)，以便全部組的酒精攝取量不確定。在第2天和第3天，對小鼠注射載體或供試化合物，遵照與前一天相同的方案。第4天是洗刷期，沒有給予注射。利用重複量度ANOVA分析數據。與載體組比較試驗每一天的水或酒精消耗量變化。陽性結果將被解釋為化合物能夠顯著減少酒精消耗量，同時對水消耗量沒有影響。
耗氧量方法利用一種間接熱量計(Oxymax，Columbus Instruments，Columbus，OH)測量雄性Sprague Dawley大鼠(如果使用另一大鼠品種或雌性大鼠，將指明)的全身耗氧量。將大鼠(體重300-380g)置於熱量計室中，將測量室置於活動監測儀中。這些研究是在白晝周期期間進行的。在耗氧量的測量之前，大鼠可自由進食標準飼料。在耗氧量的測量期間，沒有食物供應。每10分鐘測量基礎性給藥前耗氧量和走動活動達2.5至3小時。在基礎性給藥前期結束時，打開測量室，通過口服管飼法(或其他所指定的給藥途徑，即s.c.，i.p.，i.v.)對動物給以單劑化合物(常用劑量範圍為0.001至10mg/kg)。製備藥物在甲基纖維素、水或其他指定載體(實例包括PEG400、30％β-環糊精和丙二醇)中的溶液。每10分鐘測量耗氧量和走動活動達給藥後另外1-6小時。
基於流經測量室內的空氣流速和入口與出口處氧含量的差異，利用Oxymax熱量計軟體計算耗氧量(ml/kg/h)。活動監測儀具有15支紅外光束，在每一軸上間隔1英寸，當連續兩支光束被中斷時記錄為走動活動，結果以次數表示。
在給藥前後期間的靜息耗氧量是這樣計算的，將10分鐘內的耗氧值取平均，排除走動活動高(走動活動次數＞100)的期間，也排除給藥前期的前5個數值和給藥後期的第一個數值。耗氧量的變化以百分比表示，它是給藥後靜息耗氧量除以給藥前耗氧量乘以100。實驗通常將用4-6隻大鼠進行，所報告的結果是平均+/-SEM。
解釋耗氧量增加＞10％被認為是陽性結果。從時間上看，經過載體處置的大鼠的耗氧量與給藥前基礎值相比沒有變化。
權利要求
1.式(1b)化合物 其中A和B各自獨立地是被1至3個取代基取代的苯基，所述取代基獨立地選自滷素、(C1-C4)烷氧基、(C1-C4)烷基、滷素取代的(C1-C4)烷基和氰基；並且R1是氫、(C1-C4)烷基、滷素取代的(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基。
全文摘要
本文描述了用作大麻素受體配體的式(I)化合物和它們用於治療動物與大麻素受體介導作用有關的疾病的用途。
文檔編號C07D473/40GK1955182SQ200610162579
公開日2007年5月2日 申請日期2003年10月21日 優先權日2002年10月28日
發明者D·A·戈裡菲斯 申請人:輝瑞產品公司