苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物及其製備方法和其用途的製作方法

2023-12-08 06:09:56

專利名稱：苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物及其製備方法和其用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及一類新型抗腫瘤藥物，尤其涉及一種苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物 及其製備方法和其用途。
背景技術：
核苷及其類似物有著廣泛的生物學活性，其中，2』 _脫氧_2』，2』 _ 二氟胞苷 (Gemcitabine)等胞嘧啶核苷類似物，具有很強的抗腫瘤活性，為目前臨床防治胰腺癌的首 選藥物。但是，該類藥物的毒性較大，存在著較強的骨髓抑制作用，從而影響了其在臨床上 應用的廣泛性。核糖核苷酸還原酶(RR)作為細胞DNA合成不可缺少的酶，與細胞的正常分裂和異 常分裂均有著密切的關係。研究表明，RR的異常同腫瘤細胞的生成和轉移密切相關，並在 許多腫瘤患者中存在較高表達。而硫氧還蛋白系統為核糖核酸還原酶活性發揮提供所需 要的電子，因此，RR的酶活性與硫氧還蛋白還原酶有著非常重要的關聯，表現為硫氧還蛋白 還原酶活性被抑制時，核糖核酸還原酶的活性降低(Ahmet Koc，Christopher K. Mathews. Thioredoxin is required forDeoxyribonucleotide pool maintenance during S phase. The Journal of BiologicalChemical，2006，281 (22) :15058_15063)，如附圖 9 所示。2，-脫氧_2，，2，- 二氟胞苷(Gemcitabine)作為RR酶的底物類似物抑制劑， 其可能的作用過程是藥物進入人體後，在細胞內代謝成為有活性的二磷酸鹽和三磷酸鹽， 並在細胞內聚積，競爭性摻入DNA雙鏈，從而抑制細胞DNA的合成(Heinemarm V，He攪拌 el Lff, Grindey GB, Plunkett W. Comparison of thecellular pharmacokinetics and toxicity of 2,2-difluorodeoxycytidine andl-beta-d-arabino-furanosyl cytosine. Cancer Res, 1988 ；48 (14) =4024-31) 0其中，代謝產物二磷酸鹽會抑制RR酶活性，使細胞 內DNA合成與修復所必需的原料脫氧三磷酸核苷(dCTP)減少，從而進一步抑制DNA的合 成。2』 -脫氧-2』，2』 - 二氟胞苷的毒性可能與該作用機制相關，因為二磷酸鹽不僅抑制了 腫瘤細胞DNA的合成，同時也會影響快速增值的正常細胞DNA合成。因此，僅僅增強或改善 2』 _脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷對核糖核苷酸還原酶的抑制活性並不能降低其毒性。並且，未 見2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷修飾物明顯降低毒性的報導。另外，前藥原理被廣泛地運用於2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷類似物的改造，通過 製備生成具有良好藥物動力學性質的藥物，減少藥物轉運過程中的失活(2』 -脫氧-2』， 2』 - 二氟胞苷可被血液中的胞苷脫胺酶不可逆脫胺失活)，從而減少給藥劑量以達到減 少毒性作用的目的(Robins, R. K. J. Med. Chem. 1964，7，186，Darby, G. Antiviral Chem. Chemother. 1995,6,54 ；Monnerjahn, C. ；Konrad, Μ. ChemBiochem 2003,4,143 ；Townsend, L. B. Abstracts of Papers,228th NationalMeeting of the American Chemical Society, Philadelphia, PA, USA, August 22-26，2004)。Amidon將化合物改造成胺基酸酯前藥形式 (Han, H. -K. ； Ami don, G. L. AAPS PharmSci 2000,2, E6 ；Denny, W. A. Eur. J. Med. Chem. 2001， 36，577)，Wipf報導了化合物的氨基上引入多肽形成了前藥(Wipf，P. ；Sekhar, V. Bioorg.Med. Chem. Lett. 1991，1，745)。Deyi Zhang等在化合物的氨基上通過引物氨醯基等。
因此，如何通過結構優化，降低2』 -脫氧-2』，2』 - 二氟胞苷類似物的毒性並同時 保留甚至改善和提高其抗癌活性成為人們日益關注的問題。由於核糖核苷酸還原酶活性的發揮與硫氧還蛋白還原酶(TrxR)密切關聯，而 TrxR與腫瘤的發生、發展和凋亡緊密關聯，並在腫瘤中高表達，因而，可通過抑制硫氧還蛋 白還原酶活性內在調節降低核糖核苷酸還原酶的活性，以達到減毒增效的目的。本發明研 究發現，1，2_ 二 [1，2_苯並異硒唑-3(2H)_酮]乙烷(BBSKE)是硫氧還蛋白還原酶靶向型 抗腫瘤藥物，其中，苯並異硒唑酮結構可識別硫氧還蛋白還原酶活性中心的硒代半胱氨酸 殘基，並產生一個可逆地競爭性抑制作用，因此，本發明所提供的苯並異硒唑酮二氟胞苷類 化合物，綜合利用了 2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷的抗腫瘤主體結構和苯並異硒唑酮類化 合物對TrxR的選擇性，以實現對腫瘤細胞的選擇性的殺傷和抑制作用，具有高效低毒的特 點ο本發明的目的在於提供一類新型的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物或其藥學上 可接受的鹽或其酯，所述化合物具有式I-II所述結構 其中，R1選自氫、滷素、腈基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、N(C1-C6 燒基)2、NH(C1-C6 烷基)、C00H、-CORb, CONHRb, CONRcRd, S03R、芳基、雜芳基、環燒基、雜 環基，所述基團可以任選被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、滷素、腈基、芳基、雜芳基取代，優選 為-H、-CH3、滷素、-OAc、-0H,更優選為-H、-CH3、-Cl、-F、-OAc、-0H。R2選自Cch12亞烷基、亞苯基、亞聯苯基、亞三苯基、亞環己烷、環戊烷、-RaSS Ra-、-(Ra 0)η Ra-、-(CH2)(Ra 0)3Ra_、-Ra N (CH3)2Ra_ 或-Ra NHRa-；Ra是C1-6亞烷基；Rb為H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；Re、Rd獨立選自H、C1-C6 烷基或苯基，或Re、Rd與連接的N形成含氮雜環或含氮雜芳環；

發明內容
其中，R1'選自氫、滷素、腈基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、MC1-C6烷 基)2、MKC1-C6烷基)、C00H、-C0R\ C0NHR\ CONRcRd, S03R、芳基、雜芳基、環烷基、雜環基，所 述基團可以任選被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、滷素、腈基、芳基、雜芳基取代，優選為-H、-CH3、 滷素、-OAc、-0H,更優選為-H、-CH3、-Cl、-F、-OAc、-0H。R2，選自Cch12亞烷基、亞苯基、亞聯苯基、亞三苯基、亞環己烷、環戊烷、-Ra SS Ra-、- (RaO) nRa-、- (CH2) (RaO) 3Ra-、-RaN (CH3) 2Ra-或-Ra NH Ra-；Ra是Cp6亞烷基；Rb為H、CfC6烷基、C1-C6烷氧基；Re、Rd獨立選自H、C「C6烷基或 苯基，或R\ Rd與連接的N形成含氮雜環或含氮雜芳環； η 為 0-4。進一步，本發明優選保護表1所述結構的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物1-22 表1化合物1-22的名稱和結構式
9
為了清楚表述本發明的保護範圍，發明人對下列基團作如下定義「C1-C6烷基」包括具有1 6個碳原子的直鏈或支鏈低級烷基，例如甲基、乙基、 丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、叔戊基或己基等。 "C0-C12亞烷基」包括具有0 12個碳原子的直鏈亞烷基，優選為0_6個碳原子 的亞烷基，例如，亞甲基、亞乙基、1，3-亞丙基、1，4-亞丁基、1，5-亞戊基或1，6-亞己基。「亞苯基、亞聯苯基、亞三苯基」、「亞環己烷、亞環戊烷」是指含有兩個連接鍵的取 代基，比如，亞苯基包括1，2_亞苯基、1，3_亞苯基、1，4_亞苯基，亞環己烷包括1，2_亞己 基、1，3-亞己基、1，4-亞己基，亞環戊基包括1，2-環戊基或1，3-環戊基。「芳基」包括苯基、萘基等，並且所述芳基可以具有一個或多個(最好是1 3個) 合適的取代基，例如滷素、腈基、氨基、C1-6烷基、C1-C6烷氧基、單(或二或三)滷代(低 級)烷基等。所述「雜芳基」是指包括1個、2個、3個或4個諸如氮、氧或硫的雜原子的5-元芳 環或6元芳環以及與芳基環、環烷基環、雜芳基環或雜環烷基環稠合的這類環(例如苯並噻 吩基、吲哚基)，並且包括可能的N-氧化物。所述雜芳基可以任選包括1-4個取代基，合適 的取代基選自例如滷素、腈基、氨基、C1-6烷基、C1-C6烷氧基、單(或二或三)滷代(低級) 烷基等取代基；「環烷基」是指4-元、5-元、6-元或7-元飽和或部分不飽和的碳環，所述環可以 被合適的取代基例如滷素、腈基、氨基、C1-6烷基、C1-C6烷氧基、單(或二或三)滷代(低級)烷基等取代。「雜環烷基」或「雜環」是指4-元、5-元、6-元或7-元飽和或部分不飽和的環，包 括1-2個諸如氮、氧和/或硫的雜原子。可以具有一個或多個(最好是1 3個)合適的 取代基，例如，滷素、腈基、氨基、C1-6烷基、C1-C6烷氧基、單(或二或三)滷代(低級)烷
基等ο所謂「含氮」雜環或雜芳環，指至少含有一個N的環。
本發明所述的本發明所述的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物的藥物上可接受的鹽包括其無機 酸加合鹽、有機酸加合鹽的任一種或其組合，例如，鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硝 酸鹽、對甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、高氯酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙酸鹽、枸 櫞酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、草酸鹽、酒石酸鹽、苯甲酸鹽、鎂鹽或鈣鹽、嗎啉鹽、哌 啶鹽、三烷基胺鹽、吡啶鹽、二甲胺鹽或二乙胺鹽的任一種或其組合。本發明所述的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物的酯選自胺基酸酯、醋酸酯、苯甲 酸酯、二苯甲酸酯、叔丁氧甲酸酯、二叔丁氧甲酸酯、多肽酯或氨醯基酯的任一種或其組合， 優選為胺基酸酯、醋酸酯、苯甲酸酯、二苯甲酸酯、叔丁氧甲酸酯、二叔丁氧甲酸酯的任一種 或其組合。本發明的另一目的在於提供一種苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物的製備方法，包 括步驟1-5，製備工藝如圖1所示其中，R1選自氫、滷素、腈基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、N(C1_C6 燒基)2、NH(C1-C6 烷基)、C00H、-CORb, CONHRb, CONRcRd, S03R、芳基、雜芳基、環燒基、雜 環基，所述基團可以任選被C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、滷素、腈基、芳基、雜芳基取代，優選 為-H、-CH3、滷素、-OAc、-0H,更優選為-H、-CH3、-Cl、-F、-OAc、-OH ；R2選自CQ_12亞烷基、亞苯基、亞聯苯基、亞三苯基、亞環己烷、環戊烷、-RaSS Ra-、-(Ra 0)η Ra-、-(CH2)(Ra 0)3Ra_、-Ra N (CH3)2Ra_ 或-Ra NHRa-；Ra是C1-6亞烷基；Rb為H、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；Re、Rd獨立選自H、C1-C6 烷基或苯基，或Re、Rd與連接的N形成含氮雜環或含氮雜芳環； η 為 0-4 ；步驟1-5的反應條件為步驟1為回流；步驟2 是.加入溴化四丁基胺(TBAP)，20% NaOH, CH2Cl2, _10°C ；
步驟3是在DMF，攪拌；步驟4是Fe在稀CH3COOH溶液中，攪拌；步驟5.是在DMF，攪拌。本發明的另一目的在於提供一種藥物組合物，所述組合物由苯並異硒唑酮二氟胞 苷類化合物或其藥物學上可接受的鹽或其酯與藥學上可接受的載體組成。進一步，組合物中本發明的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物或其藥物學上可接 受的鹽或其酯輔料的重量比為0.001-99 1-99，優選為0.001-90 1_95，更優選為 0. 001-80 1-90，最優選為 0. 001-70 1-85。進一步，組合物中本發明的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物或其藥物學上可接 受的鹽或其酯的重量百分含量為1_99%，優選為5-95%，還優選為10-90%，更優選為 15-85 %，最優選為 20-80 %。本發明的組合物可為本領域熟知的各種劑型。適合於本發明的劑型可以為口服制 劑、外用製劑或注射劑，優選為口服製劑或注射劑。所述口服製劑選自包合製劑、分散劑、口 服液、片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸、丸劑、散劑、糖漿劑、合劑、露劑、懸浮劑、泡騰劑、糊劑、混 懸液、乳劑或茶劑；優選為包合製劑、或分散劑；優選所述懸浮劑選自幹懸劑或懸浮液；所 述外用製劑選自凝膠劑、膏劑、貼膏劑、膏藥、霜劑、軟膏劑、搽劑、洗劑、栓劑、塗抹劑或凝膏 劑；所述注射劑選自針劑(注射液)、輸液或凍乾粉針等。可採用本領域熟知的製劑技術手 段製備得到本發明的組合物。所述的藥學上可接受的載體為本領域熟知用於製備上述製劑的常用賦形劑或輔 料，口服製劑或外用製劑常用的賦形劑或輔料包括但不僅限於填充劑(又稱稀釋劑)、潤滑 劑(又稱助流劑或抗粘著劑)、分散劑、溼潤劑、粘合劑、調節劑、增溶劑、抗氧劑、抑菌劑、乳 化劑、矯味劑或賦香劑等。粘合劑，例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、黃芪膠、纖維素及其 衍生物、明膠漿、糖漿、澱粉漿或聚乙烯吡咯烷酮，優選的纖維素衍生物為微晶纖維素、羧甲 基纖維素鈉、乙基纖維素或羥丙甲基纖維素；填充劑，例如乳糖、糖粉、糊精、澱粉及其衍生 物、纖維素及其衍生物、無機鈣鹽、山梨醇或甘氨酸，優選無機鈣鹽為硫酸鈣、磷酸鈣、磷酸 氫鈣或沉降碳酸鈣；潤滑劑，例如微粉矽膠、硬脂酸鎂、滑石粉、氫氧化鋁、硼酸、氫化植物油 或聚乙二醇；崩解劑，例如澱粉及其衍生物、聚乙烯吡咯烷酮、交聯聚乙烯吡咯烷酮或微晶 纖維素，優選的澱粉衍生物為羧甲基澱粉鈉、澱粉乙醇酸鈉、預膠化澱粉、改良澱粉、羥丙基 澱粉或玉米澱粉；溼潤劑，例如十二烷基硫酸鈉、水或醇等。所述注射劑常用的賦形劑或輔料包括但不僅限於抗氧劑，例如亞硫酸鈉、亞硫酸 氫鈉和焦亞硫酸鈉；抑菌劑，例如0. 5%苯酚、0. 3%甲酚、0. 5%三氯叔丁醇；酸鹼調節劑， 例如鹽酸、枸櫞酸、氫氧化鉀、氫氧化鈉、枸櫞酸鈉及緩衝劑磷酸鹽及其緩衝液；乳化劑，例 如聚山梨酯-80、沒酸山梨坦、普羅尼克F-68，卵磷酯、豆磷脂；增溶劑，例如吐溫-80、膽汁、 甘油等。另外，還可將活性成分與藥學上可接受的緩控釋載體按其製備要求加以混合，再 按照本領域熟知的緩控釋製劑的製備方法，如加入阻滯劑包衣或將活性成分微囊化後再制 成微丸，如緩釋微丸或控釋微丸；所述的緩控釋載體包括但不僅限於油脂性摻入劑、親水膠 體或包衣阻滯劑等，所述的油脂性摻入劑選自單硬脂酸甘油酯、氫化蓖麻油、礦油、聚矽氧 烷或二甲基矽氧烷的任一種或其組合；所述的親水膠體選自羧甲基纖維素鈉、羥丙基纖維
17素、羥丙基甲基纖維素、PVP、阿拉伯膠、西黃耆膠或卡波普的任一種或其組合；所述的包衣 阻滯劑選自乙基纖維素(EC)、羥丙甲基纖維素(HMPC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、鄰苯二甲酸 醋酸纖維素(CAP)、丙烯酸類樹脂的任一種或其組合。本發明的另一目的在於提供本發明的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物或其藥物 學上可接受的鹽或其酯或其組合物在製備用於抗腫瘤的藥物中的應用。本發明所述的抗腫瘤作用是指用於預防或治療異常細胞生長，所述異常細胞生長 可以表現為腫瘤，所述腫瘤選自肺癌、肝癌、血癌、骨癌、胰腺癌、皮膚癌、黑素瘤、子宮癌、卵 巢癌、直腸癌、胃癌、結腸癌、乳腺癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、宮頸癌、陰道癌、外陰癌、食道 癌、小腸癌、內分泌系統癌、軟組織肉瘤、尿道癌、前列腺癌、淋巴細胞瘤、膀胱癌、腎癌、輸尿 管癌、脊椎腫瘤、腦幹神經膠質瘤、垂體腺瘤的任一種或其組合，優選為胰腺癌和肺癌。本發明的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物或其藥物學上可接受的鹽或其酯用於 防治腫瘤疾病時，其給藥劑量約為0. 05-250mg/Kg體重，優選為0. 5-200mg/Kg體重，更優選 為2-100mg/Kg體重，最優選為5-80mg/Kg體重。


圖1本發明苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物的合成路線；圖2實施例1所製備的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物1-4的合成路線；圖3實施例2所製備的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物5-6的合成路線；圖4實施例3所製備的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物7-10的合成路線；圖5實施例4所製備的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物11-14的合成路線；圖6實施例5所製備的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物15-18的合成路線；圖7實施例6所製備的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物19-22的合成路線；圖8 2』 -脫氧-2』，2』 - 二氟胞苷(Gemcitabine)和本發明化合物1對受試小鼠 體重的影響。圖9是RR與TrxR的關係示意圖。
具體實施例方式以下將結合實施例具體說明本發明，本發明的實施例僅用於說明本發明的技術方 案，並非限定本發明的實質。實施例1化合物1-4的製備化合物1-4的合成路線如圖2所示，其中，Rl選自-H、-Cl、-F、-CH3，製備工藝為1)取4謹ol 2-R14-硝基苯甲酸(Rl選自-H、-Cl、-F、-CH3)置於25ml氯化亞碸 中回流3h，旋幹過量的氯化亞碸，剩餘油狀液體；加入適量二氯甲烷，溶解，旋幹，得到淡黃 色固體，即得2-R1-4-硝基苯基甲醯氯(Rl選自-H、-Cl、-F、-CH3)，將其溶於20ml 二氯甲 烷中，備用；2)稱取0. 132g (0. 4mmol)溴化四丁基胺(TBAP)溶於IOml 二氯甲烷中，並 緩慢滴加5ml濃度為20 %的NaOH溶液，冷卻到-10°C，攪拌；再緩慢滴加1)步製得的 2-R1-4-硝基苯基甲醯氯二氯甲烷溶液，反應體系保持-10°C，繼續攪拌2h ；加入30ml水， 混合液轉移到分液漏鬥中，分離取有機相，並依次用飽和碳酸鈉水溶液、水、飽和氯化鈉水溶液洗滌後，再用無水硫酸鈉乾燥，旋幹，即得2，2』 _二隊4，4』 - 二硝基苯甲酸酐(Rl選 自-H、-C1、-F、-CH3)；3)取Immol 2)步製得的2，2』-二 Rf4，4』-二硝基苯甲酸酐和等摩爾量的2』-脫 氧-2』，2』_ 二氟胞苷，將其溶解於5ml的無水DMF中，常溫攪拌24h ；旋幹溶劑，加入30ml乙 醚，攪拌至大量白色固體析出，收集固體，水洗，再以氯仿為流動相，經柱層析，得N-(4-硝 基-2-禮苯基醯)-2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷純品(Rl選自-H、-C1、-F、-CH3)；4)鐵粉在醋酸稀溶液中煮沸，冷卻到室溫作還原劑；取Immol 3)步製得的 N-(4-硝基-2-隊苯基醯)-2』 -脫氧-2』，2』 - 二氟胞苷純品溶解於5ml無水DMF中，再 將其緩慢滴加到鐵粉稀醋酸溶液中，常溫攪拌20分鐘；抽濾除去鐵粉，靜置過夜，收集析 出的白色固體，水洗，烘乾得粗品，再以氯仿為流動相，經柱層析，得N- (4-氨基-2-R1苯基 醯)_2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷純品；5)稱取4)步製得的N-(4-氨基H1苯基醯)-2』-脫氧-2』，2』-二氟胞苷純品 (Rl選自-H、-Cl、-F、-CH3)與硒氯，將其置於DMF溶液中，攪拌，反應24h，除去溶劑，以氯 仿甲醇為流動相，柱層析，得化合物1-4。實施例2化合物5-6的製備化合物5-6的合成路線如圖3所示，化合物5的製備條件同實施例1，再取化合物 5置於氫化儀中，再加入催化量的Ni，反應20min，即得化合物6。實施例3化合物7-10的製備化合物7-10的合成路線如圖4所示，其中，R1，選自-H、-C1、-F、_CH3，2-R1-5-硝 基苯基醯氯(Rl選自-H、-Cl、-F、-CH3)、2，2，-二 R1-5，5，- 二硝基苯甲酸酐、N-(5-硝 基-2-R1苯基醯)-2 』 -脫氧-2 』，2 』 - 二氟胞苷、N- (5-氨基-2-R1苯基醯)-2 』 -脫氧-2 』， 2』 - 二氟胞苷和化合物7-10的製備條件同實施例1。實施例4化合物11-14的製備化合物11-14的合成路線如圖5所示，其中，R1，選自-H、-C1、-F、_CH3，2-R1-4-硝 基苯基乙醯氯(Rl選自-H、-C1、-F、-CH3)、2，2，-二 R1-5，5，- 二硝基苯乙酸酐、N-(4-硝 基-2-R1苯基乙醯)_2，-脫氧-2，，2，- 二氟胞苷、N- (4-氨基-2-R1苯基醯)-2，-脫氧-2，， 2』 - 二氟胞苷和化合物11-14的製備條件同實施例1。實施例5化合物15-18的製備化合物15-18的合成路線如圖6所示，其中，R1，選自-H、-C1、-F、_CH3，2-R1-4-硝 基苯基醯氯(Rl選自-H、-Cl、-F、-CH3)、2，2』 - 二 Rl-5，5』 - 二硝基苯甲酸酐合成路線同 實施例1-2)、0，0，- 二叔丁氧甲醯基N-(4-硝基-2-R1苯基乙醯)_2，-脫氧_2，，2，- 二 氟胞苷、0，0，- 二叔丁氧甲醯基N-(4-氨基-2-R1苯基乙醯)-2，-脫氧-2，，2，- 二氟胞苷 和化合物15-18的製備條件同實施例1。實施例6化合物19-22的製備化合物19-22的合成路線如圖6所示，其中，R1，選自-H、-C1、-F、_CH3，2-R1-4-硝 基苯基醯氯(Rl選自-H、-C1、-F、-CH3)、2，2』 -二 Rl_5，5』 -二硝基苯甲酸酐、0，0』 -二叔 丁氧甲醯基N-(4-硝基-2-R1苯基乙醯)-2』 -脫氧-2』，2』 - 二氟胞苷、0，0』 - 二叔丁氧甲 醯基N-(4-氨基-2-R1苯基乙醯)_2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷和化合物19-22的製備條 件同實施例1。
19
表2化合物1-22的核磁數據(1H-NMR) 細胞存活率(加藥細胞OD-空白組OD)/(對照細胞OD-空白組0D) XlOO ；細胞殺傷率％= 1-細胞存活率％ ；
IC50 腫瘤細胞生長抑制率為50%時的藥物濃度。現計算不同藥物濃度時腫瘤細 胞的生長抑制率，再以藥品濃度為橫坐標，腫瘤細胞的生長抑制率為縱坐標作圖，即得IC5tl， 結果見表3。表3化合物1-10對人胰腺癌細胞(Mia-paca-2)的生長抑制作用 實施例8化合物和吉西他賓(Gemcitabine)對受試小鼠體重的影響1、試驗方法體重為22 士 3g的昆明小鼠192隻，雌雄各半(北京大學醫學部動物部提供)，隨機 分為24組，即空白對照組、吉西他濱連續給藥組和化合物連續給藥組，即空白對照組、吉西 他濱間隔三天給藥組和化合物間隔三天給藥組。小鼠給藥前禁食12h。吉西他濱腹腔注射(12. 5mg/kg)，本發明的化合物(20mg/ Kg)灌胃給藥。給藥後分籠觀察，餵食餵水並記錄飲食飲水量。同時，每天觀察受試小鼠的 體重變化。1)對受試小鼠腹腔注射吉西他濱(12.5mg/kg)，每日一次，第三天開始，受試小鼠 全部死亡；而對受試小鼠給予本發明的化合物1-化合物10(20mg/kg)，每日一次，連續給藥 7天，無死亡；2)對受試小鼠腹腔注射吉西他濱(12.5mg/kg)，每隔3天給藥1次，受試小鼠的體 重變化參見圖1 ；而對受試小鼠給予本發明的化合物1-化合物10(20mg/kg)，每隔3天一 次，連續給藥9天，受試小鼠的體重變化參見圖1。2、結論1)對受試小鼠給予本發明的化合物(20mg/kg)，每日一次，連續7天無死亡；而對 受試小鼠給予吉西他濱(12. 5mg/kg)，每日一次，第三天開始，受試小鼠全部死亡；2)對受試小鼠給予本發明的化合物1-化合物10(20mg/kg)，每隔3天1次，對受 試小鼠的體重無影響。
2權利要求
一種苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物或其藥學上可接受的鹽或其酯，所述化合物的結構如下其中，R1選自氫、滷素、腈基、C1 C6烷基、C1 C6烷氧基、C1 C6烷硫基、N(C1 C6烷基)2、NH(C1 C6烷基)、COOH、 CORb、CONHRb、CONRcRd、SO3R、芳基、雜芳基、環烷基、雜環基，所述基團可以任選被C1 C6烷基、C1 C6烷氧基、滷素、腈基、芳基、雜芳基取代，優選為 H、 CH3、滷素、 OAc、 OH，更優選為 H、 CH3、 Cl、 F、 OAc、 OH。R2選自CO 12亞烷基、亞苯基、亞聯苯基、亞三苯基、亞環己烷、環戊烷、 Ra SS Ra 、 (Ra O)n Ra 、 (CH2)(Ra O)3Ra 、 Ra N(CH3)2Ra 或 Ra NH Ra ；Ra是C1 6亞烷基；Rb為H、C1 C6烷基、C1 C6烷氧基；Rc、Rd獨立選自H、C1 C6烷基或苯基，或Rc、Rd與連接的N形成含氮雜環或含氮雜芳環；R3選自 H、n為0 4；其中，R1』選自氫、滷素、腈基、C1 C6烷基、C1 C6烷氧基、C1 C6烷硫基、N(C1 C6烷基)2、NH(C1 C6烷基)、COOH、 CORb、CONHRb、CONRcRd、SO3R、芳基、雜芳基、環烷基、雜環基，所述基團可以任選被C1 C6烷基、C1 C6烷氧基、滷素、腈基、芳基、雜芳基取代，優選為 H、 CH3、滷素、 OAc、 OH，更優選為 H、 CH3、 Cl、 F、 OAc、 OH。R2』選自C0 12亞烷基、亞苯基、亞聯苯基、亞三苯基、亞環己烷、環戊烷、 Ra SS Ra 、 (Ra O)n Ra 、 (CH2)(Ra O)3Ra 、 Ra N(CH3)2Ra 或 Ra NH Ra ；Ra是C1 6亞烷基；Rb為H、C1 C6烷基、C1 C6烷氧基；Rc、Rd獨立選自H、C1 C6烷基或苯基，或Rc、Rd與連接的N形成含氮雜環或含氮雜芳環；R3』選自 H、n為0 4。F200910086559XC0000011.tif,F200910086559XC0000012.tif,F200910086559XC0000021.tif,F200910086559XC0000022.tif
2.根據權利要求1所述的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物，所述化合物選自表1所述 結構的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物1-22 化合物1 :Ν-{4-[1，2-苯並異硒唑-3(2Η)_酮]苯甲醯} _2』 -脫氧-2』，2』 - 二氟胞苷； 化合物2 :Ν-{2-甲基-4-[1，2-苯並異硒唑-3(2Η)_酮]苯甲醯}-2』_脫氧-2』，2』_ 二 氟胞苷；化合物3 :Ν- {2-氯-4- [ 1，2-苯並異硒唑-3 (2Η)-酮]苯甲醯} _2 』 -脫氧-2 』，2 』 - 二 氟胞苷；化合物4 :Ν- {2-氟-4- [ 1，2-苯並異硒唑-3 (2Η)-酮]苯甲醯} _2 』 -脫氧-2 』，2 』 - 二 氟胞苷；化合物5 :Ν-{3-乙醯氧基-4-[1，2-苯並異硒唑-3 (2Η)-酮]苯甲醯}_2』_脫氧-2』， 2』 _ 二氟胞苷；化合物6 :Ν-{3-羥基-4-[1，2-苯並異硒唑-3(2Η)_酮]苯甲醯}-2』-脫氧-2』，2』-二 氟胞苷；化合物7:Ν-{3-[1，2-苯並異硒唑-3(2Η)_酮]苯甲醯} _2』 -脫氧-2』，2』 - 二氟胞苷；化合物8 :Ν-{2-甲基-5-[1，2-苯並異硒唑-3(2Η)_酮]苯甲醯}-2』_脫氧-2』，2』_ 二 氟胞苷；化合物9 :Ν- {2-氯-5- [ 1，2-苯並異硒唑-3 (2Η)-酮]苯甲醯} _2 』 -脫氧-2 』，2 』 - 二 氟胞苷；化合物10 :Ν- {2-氟-5- [ 1，2-苯並異硒唑-3 (2Η)-酮]苯甲醯} _2』 -脫氧-2』，2』 - 二 氟胞苷；化合物11 :Ν-{4-[1，2-苯並異硒唑-3(2Η)_酮]苯乙醯}_2』 -脫氧-2』，2』 - 二氟胞苷；化合物12:Ν-{3-甲基-4-[1，2-苯並異硒唑-3(2Η)_酮]苯乙醯}_2，-脫氧-2，， 2』 _ 二氟胞苷；化合物13 =N- {3-氯-4- [ 1，2-苯並異硒唑-3 (2H)-酮]苯乙醯} _2，-脫氧-2，，2，- 二 氟胞苷；化合物14 :N- {3-氟-4- [ 1，2-苯並異硒唑-3 (2H)-酮]苯乙醯} _2，-脫氧-2，，2，- 二 氟胞苷；化合物15 :0，0』 - 二叔丁氧甲醯基-Ν-{4-[1，2-苯並異硒唑-3(2H)_酮]苯甲 醯}_2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷；化合物16 :0，0』-二叔丁氧甲醯基4-{2-甲基-4-[1，2-苯並異硒唑-3 (2H)-酮]苯 甲醯}_2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷；化合物17 :0，0』-二叔丁氧甲醯基4-{2-氯-4-[1，2-苯並異硒唑-3(2!1)-酮]苯甲 醯}_2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷；化合物18 :0，0』-二叔丁氧甲醯基4-{2-氟-4-[1，2-苯並異硒唑-3(2!1)-酮]苯甲 醯}_2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷；化合物19 :0，0』_ 二苯甲醯基-Ν-{4-[1，2-苯並異硒唑-3(2H)_酮]苯甲醯}_2』_脫 氧-2』，2』 - 二氟胞苷；化合物20 :0，0』 -二苯甲醯基-N-{2-甲基-4-[l，2-苯並異硒唑-3(2H)_酮]苯甲 醯}_2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷；化合物21 :0，0』 -二苯甲醯基-N-{2-氯-4-[l，2-苯並異硒唑-3(2H)_酮]苯甲 醯}_2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷；化合物22 :0，0』 -二苯甲醯基-N-{2-氟-4-[l，2-苯並異硒唑-3(2H)_酮]苯甲 醯}_2』 -脫氧_2』，2』 - 二氟胞苷。
3.根據權利要求1所述的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物，所述的藥物上可接受的鹽 選自其無機酸加合鹽、有機酸加合鹽的任一種或其組合，優選所述的藥物上可接受的鹽選 自鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、對甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、磷酸鹽、硫酸鹽、 高氯酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、丙酸鹽、枸櫞酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、草酸鹽、酒 石酸鹽、苯甲酸鹽、鎂鹽或鈣鹽、嗎啉鹽、哌啶鹽、三烷基胺鹽、吡啶鹽、二甲胺鹽或二乙胺鹽 的任一種或其組合。
4.根據權利要求1所述的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物，所述的酯選自胺基酸酯、 醋酸酯、苯甲酸酯、二苯甲酸酯、叔丁氧甲酸酯、二叔丁氧甲酸酯、多肽酯或氨醯基酯的任一 種或其組合，優選為胺基酸酯、醋酸酯、苯甲酸酯、二苯甲酸酯、叔丁氧甲酸酯、二叔丁氧甲 酸酯的任一種或其組合。
5.一種製備權利要求1-4任一項所述的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物的方法，製備 工藝見圖1。
6.一種藥物組合物，所述組合物由權利要求1-4任一項所述的苯並異硒唑酮二氟胞苷 類化合物或其藥物學上可接受的鹽或其酯與藥學上可接受的載體組成。
7.根據權利要求6所述的藥物組合物，藥物組合物中苯並異硒唑酮二氟胞苷類 化合物或其藥物學上可接受的鹽或其酯輔料的重量比為0.001-99 1-99，優選為 0.001-90 1-95，更優選為 0. 001-80 1-90，最優選為 0. 001-70 1-85。藥物組合物中的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物或其藥物學上可接受的鹽或其酯的 重量百分含量為1_99%，優選為5-95%，還優選為10-90%，更優選為15-85 %，最優選為420-80%。
8.根據權利要求6-7任一項所述的藥物組合物，所述藥物組合物的劑型選自口服制 劑、外用製劑或注射劑，優選為口服製劑或注射劑。所述口服製劑選自包合製劑、分散劑、口服液、片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸、丸劑、散劑、 糖漿劑、合劑、露劑、懸浮劑、泡騰劑、糊劑、混懸液、乳劑或茶劑，優選為包合製劑或分散劑。所述懸浮劑選自幹懸劑或懸浮液。所述外用製劑選自凝膠劑、膏齊 、貼膏劑、膏藥、霜齊 、軟膏齊 、搽齊 、洗齊 、栓齊 、塗抹劑 或凝膏劑。所述注射劑選自針劑、輸液或凍乾粉針。
9.權利要求1-4任一項所述的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物或其藥物學上可接受 的鹽或其酯或權利要求6-8任一項所述的藥物組合物在製備用於抗腫瘤的藥物中的應用。
10.根據權利要求14所述的應用，所述的抗腫瘤作用是指用於預防或治療異常細胞生 長，所述異常細胞生長可以表現為腫瘤，所述腫瘤選自肺癌、肝癌、血癌、骨癌、胰腺癌、皮膚 癌、黑素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、胃癌、結腸癌、乳腺癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、宮頸癌、 陰道癌、外陰癌、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、軟組織肉瘤、尿道癌、前列腺癌、淋巴細胞 瘤、膀胱癌、腎癌、輸尿管癌、脊椎腫瘤、腦幹神經膠質瘤、垂體腺瘤的任一種或其組合，優選 為胰腺癌和肺癌。6、一種藥物組合物，所述組合物由權利要求1-4任一項所述的苯並異硒唑酮二氟胞苷 類化合物或其藥物學上可接受的鹽或其酯與藥學上可接受的載體組成。7、根據權利要求6所述的藥物組合物，藥物組合物中苯並異硒唑酮二氟胞苷類 化合物或其藥物學上可接受的鹽或其酯輔料的重量比為0.001-99 1-99，優選為 0.001-90 1-95，更優選為 0. 001-80 1-90，最優選為 0. 001-70 1-85。藥物組合物中的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物或其藥物學上可接受的鹽或其酯的 重量百分含量為1_99%，優選為5-95%，還優選為10-90%，更優選為15-85 %，最優選為 20-80%。8、根據權利要求6-7任一項所述的藥物組合物，所述藥物組合物的劑型選自口服制 劑、外用製劑或注射劑，優選為口服製劑或注射劑。所述口服製劑選自包合製劑、分散劑、口服液、片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸、丸劑、散劑、 糖漿劑、合劑、露劑、懸浮劑、泡騰劑、糊劑、混懸液、乳劑或茶劑，優選為包合製劑或分散劑。所述懸浮劑選自幹懸劑或懸浮液。所述外用製劑選自凝膠齊 、膏齊 、貼膏劑、膏藥、霜齊 、軟膏齊 、搽齊 、洗齊 、栓齊 、塗抹劑 或凝膏劑。所述注射劑選自針劑、輸液或凍乾粉針。9、權利要求1-4任一項所述的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物或其藥物學上可接受 的鹽或其酯或權利要求6-8任一項所述的藥物組合物在製備用於抗腫瘤的藥物中的應用。10、根據權利要求14所述的應用，所述的抗腫瘤作用是指用於預防或治療異常細胞生 長，所述異常細胞生長可以表現為腫瘤，所述腫瘤選自肺癌、肝癌、血癌、骨癌、胰腺癌、皮膚 癌、黑素瘤、子宮癌、卵巢癌、直腸癌、胃癌、結腸癌、乳腺癌、輸卵管癌、子宮內膜癌、宮頸癌、 陰道癌、外陰癌、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、軟組織肉瘤、尿道癌、前列腺癌、淋巴細胞瘤、膀胱癌、腎癌、輸尿管癌、脊椎腫瘤、腦幹神經膠質瘤、垂體腺瘤的任一種或其組合，優選 為胰腺癌和肺癌。
全文摘要
本發明公開了一類新型的抗腫瘤藥物，即苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物或其藥學上可接受的鹽或其酯及其製備方法和其用途，其中，苯並異硒唑酮結構可識別硫氧還蛋白還原酶活性中心的硒代半胱氨酸殘基，產生一個可逆地競爭性抑制作用，且保留2』-脫氧-2』，2』-二氟胞苷的活性結構，因此，本發明的苯並異硒唑酮二氟胞苷類化合物可選擇性的殺傷腫瘤細胞和抑制腫瘤細胞的生長，具有高效低毒的特點。
文檔編號C07H1/00GK101921303SQ200910086559
公開日2010年12月22日 申請日期2009年6月9日 優先權日2009年6月9日
發明者曾慧慧, 李葉桓 申請人:曾慧慧