一種胸腺五肽乙醯甲酯偶合物及其製備方法
2023-11-03 07:15:27
專利名稱：一種胸腺五肽乙醯甲酯偶合物及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種胸腺五肽乙醯甲酯偶合物及其製備方法，尤其是涉及一種精確結構藥物修飾物-胸腺五肽乙醯甲酯偶合物及其製備方法。
背景技術：
胸腺五肽(Thym0petidum，TP5)是內源性多肽胸腺生成素(Thymopoietin)位於活性中心的五肽片段，由5個胺基酸構成，對機體的免疫功能具有雙向調節作用，是臨床上具有重要用途的免疫平衡調節劑。TP5可用於治療惡性腫瘤病人經放化療後免疫功能損傷者、 B型肝炎、重大外科手術及嚴重感染、自身免疫性疾病、II型糖尿病、更年期症候群、年老體衰等免疫功能低下者；也可作為輔助藥，與許多常用藥物，包括幹擾素、消炎藥、抗菌素、激素、鎮痛藥、降壓藥、利尿藥、治療心血管疾病的藥物、中樞神經系統藥物、避孕藥等合用以增強療效。作為多肽藥物，TP5在體內極不穩定，易被蛋白酶和氨肽酶降解，血清半衰期僅為 30秒。此弱點導致TP5在體內維持正常血藥濃度的時間短，失效快，同時也顯著增加了治療成本。
發明內容
為了克服TP5結構中C-端羧基及酚羥基在體內環境中易於離子化，對透過細胞膜形成障礙，以及易酶解、體內代謝半衰期短等弱點，本發明所要解決的技術問題是提供一種通過化學鍵與乙醯甲酯TP5定點連接的方式，設計、合成了功能型精確結構藥物修飾物-胸腺五肽乙醯甲酯偶合物(FPSDM-TPQ及其製備方法。本發明解決上述技術問題的技術方案如下一種胸腺五肽乙醯甲酯偶合物的製備方法，包括以下步驟1)將 Z-FPSDM-Arg (Pbf)-OH 和 1-羥基-1Η_1，2，3_ 三唑 _4_ 羧酸乙酯(HOCT)溶於無水二氯甲烷(DCM)中，邊攪拌邊加入N，N-二異丙基碳二亞胺(DIC)進行反應，得到活性酯A ；2)將所述活性酯A滴加到四肽衍生物的鹼性溶液中，同時加入N- 二異丙基乙胺 (DIEA)，一起攪拌至完全反應，然後再加入二氯甲烷，並依次進行洗滌、乾燥、減壓蒸餾除去溶劑，得到粗產物胸腺五肽乙醯甲酯偶合物；3)向所述粗產物中加入三氟乙酸，一起攪拌，再進行減壓蒸餾抽淨所述三氟乙酸， 得到殘留物，然後將所述殘留物依次進行洗滌、乾燥，即得到所述胸腺五肽乙醯甲酯偶合物 (FPSDM-Arg-Lys-Asp-Val-Tyr(Ac)-OMe)。所述胸腺五肽乙醯甲酯偶合物的具體合成路線如下
權利要求
1.一種胸腺五肽乙醯甲酯偶合物的製備方法，其特徵在於，包括以下步驟1)將Z-FPSDM-Arg(Pbf)-OH和1-羥基-1H-1，2，3-三唑-4-羧酸乙酯溶於無水二氯甲烷中，邊攪拌邊加入N，N- 二異丙基碳二亞胺進行反應，得到活性酯A ；2)將所述活性酯A滴加到四肽衍生物的鹼性溶液中，同時加入N-二異丙基乙胺，一起攪拌至完全反應，然後再加入二氯甲烷，並依次進行洗滌、乾燥、減壓蒸餾，得到粗產物胸腺五肽乙醯甲酯偶合物；3)向所述粗產物中加入三氟乙酸，一起攪拌，再進行減壓蒸餾抽淨三氟乙酸，得到殘留物，然後將所述殘留物依次進行洗滌、乾燥，即得到所述胸腺五肽乙醯甲酯偶合物。
2.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，在步驟1)中所述攪拌的時間為45 75分鐘。
3.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，在步驟2)中，所述鹼性溶液為二氯甲烷溶液；所述攪拌的時間為7 9小時；所述洗滌步驟為用HCl溶液、水溶液、NaOH溶液和飽和NaCl溶液依次進行洗滌；所述乾燥所用的乾燥劑為Na2SO4乾燥劑；所述減壓下的溫度為 25 ;35°C。
4.根據權利要求1所述的製備方法，其特徵在於，在步驟3)中，所述攪拌的時間為3 5小時；所述洗滌所用的洗滌液為K2O ；所述減壓下的溫度為25 35°C。
5.根據權利要求1至4任一項所述的製備方法，其特徵在於，所述 Z-FPSDM-Arg (Pbf)-OH通過如下方法製備(1)將Z-FPSDM和1-羥基-1H-1，2，3-三唑-4-羧酸乙酯溶於無水二氯甲烷中，邊攪拌邊加入N，N- 二異丙基碳二亞胺進行反應，得到活性酯B ；(2)將所述活性酯B滴加到H-Arg(I^bf)-OMe的鹼性溶液中，同時加入N-二異丙基乙胺，一起攪拌至完全反應；再加入二氯甲烷，然後再依次進行洗滌、乾燥、減壓蒸餾，得到 Z-FPSM-Arg(Pbf)-OMe ；(3)將所得Z-FPSDM-ArgO^bf)-Ome加入到MeOH中，邊攪拌邊加入LiOH水溶液至完全反應，再進行減壓蒸餾，抽淨溶劑，得到殘物；將所述殘物依次進行洗滌、乾燥、減壓蒸餾、重結晶後，即合成所述Z-FPSDM-Arg(I^bf)-0H。
6.根據權利要求5所述的製備方法，其特徵在於，在步驟(1)中，所述攪拌的時間為 30 60分鐘。
7.根據權利要求5所述的製備方法，其特徵在於，在步驟(2)中，所述鹼性溶液為二氯甲烷溶液；所述攪拌的時間為5 7小時；所述洗滌的步驟為用HCl溶液、水溶液、NaOH溶液和飽和NaCl溶液依次進行洗滌；所述乾燥所用的乾燥劑為Na2SO4乾燥劑；所述減壓下的溫度為25 ;35°C。
8.根據權利要求5所述的製備方法，其特徵在於，在步驟(3)中，所述攪拌的時間為 2 4小時；所述兩次減壓下的溫度均為25 35°C;所述洗滌的步驟為用HCl溶液洗滌後， 再用飽和食鹽水進行洗滌；所述乾燥所用的乾燥劑為N%S04乾燥劑；所述重結晶用的物質為的二氯甲烷、Et2O和正己烷，其中所述二氯甲烷、Et2O和正己烷的重量份數比為1:6:1。
9.一種根據權利要求1至8任一項所述的製備方法製得的胸腺五肽乙醯甲酯偶合物。
全文摘要
本發明涉及一種胸腺五肽乙醯甲酯偶合物(FPSDM-TP5)及其製備方法，具體為將Z-FPSDM-Arg(Pbf)-OH和1-羥基-1H-1,2,3-三唑-4-羧酸乙酯溶於無水二氯甲烷中,邊攪拌邊加入N,N-二異丙基碳二亞胺進行反應，得到活性酯A；再滴加到四肽衍生物的鹼性溶液中，同時加入N-二異丙基乙胺，一起攪拌至完全反應，然後再加入二氯甲烷，得到粗產物胸腺五肽乙醯甲酯偶合物；然後再加入三氟乙酸，一起攪拌，再進行減壓蒸餾抽淨三氟乙酸，得到殘留物，並依次進行洗滌、乾燥，即得到所述胸腺五肽乙醯甲酯偶合物。本發明的FPSDM-TP5在保持TP5生物活性的同時，緩解或避免了TP5在體內的酶解，使其體內代謝半衰期顯著延長。
文檔編號C07K7/06GK102558301SQ201110415149
公開日2012年7月11日 申請日期2011年12月13日 優先權日2011年12月13日
發明者王樸, 高秀巖 申請人:煙臺海安多肽藥物研發技術有限公司