因子Ⅶa抑制劑的製作方法

2023-11-30 01:45:56 2

專利名稱：因子Ⅶa抑制劑的製作方法
技術領域：
本發明涉及因子VIIa的新型抑制劑，包含這些抑制劑的藥物組合物以及利用這些抑制劑治療或預防由因子VIIa介導的疾病的方法。本發明還公開了這些抑制劑的製備方法。
背景技術：
血栓形成由被稱為凝固級聯的複雜順序的生物化學事件引起。凝固的觸發事件是在循環中發現的絲氨酸蛋白酶因子VIIa(FVIIa)對在損傷或炎症之後的血管表面上發現的組織因子(TF)的結合。一旦結合於TF，因子VIIa催化絲氨酸蛋白酶因子Xa的形成，其隨後形成級聯中的最終蛋白酶-凝血酶。
血栓形成的臨床表現不等，從在心臟的關鍵血管(冠狀動脈脈管系統)中發生的急性心肌梗塞(AMI或心臟病發作)和不穩定型絞痛(UA)，到在較低末端形成血塊並且經常在臀部和膝部的矯形術、以及一般腹部外科和癱瘓之後形成的深靜脈血栓形成(DVT)。DVT的形成是肺栓塞(PE)形成的危險因素，其中在較低末端形成的血塊的一部分脫落並且行進到肺，在那裡阻斷血液流動。不可預知的PE形成經常導致致命的結果。血栓形成也可系統地形成，在整個血管系統中形成微血塊。這種狀況，被稱為瀰漫性血管內凝血(DIC)，可以是由於某些病毒性疾病如伊波拉病(Ebola)、某些癌症、膿毒病和類風溼性關節炎所引起。嚴重的DIC可以由於凝固應答的過度活化而導致凝血因子的急劇減少，其可引起多個器官衰竭、出血和死亡。
腦的腦血管中血塊的形成或栓塞是引起缺血性卒中的關鍵事件。引起中風的引發因素是心臟的心房纖顫或心房的節奏異常和動脈粥樣硬化之後在從心臟到腦的主要動脈(頸動脈)中的血栓形成。在美國每年有超過600,000人發生中風。這些中風患者的三分之二發生某些殘疾，三分之一發生永久性和嚴重的殘疾。因此，需要用於治療多種血栓形成狀況的抗血栓形成劑。本發明滿足這些和相關的需要。

發明內容
本發明的一個方面的目的是式I的化合物，或其兩性離子；或其藥學可接受的鹽，條件是式I的化合物不是(RS)-2-{2-[5-(5-甲脒基(carbamimidoyl)-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基聯苯-3-基]乙醯氨基}琥珀酸、(RS)-2-{2-[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基聯苯-3-基]-2-甲基丙醯氨基}琥珀酸；和(RS)-2-{2-[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-脲基甲基聯苯-3-基]-2-甲基丙醯氨基}琥珀酸或其藥學可接受的鹽， 其中X1、X2、X3和X4獨立地為-N-或-CR4-，其中R4為氫、烷基或滷素，條件是X1、X2、X3和X4中不超過三個是-N-；R1為氫、烷基、滷素、羧基或氨基羰基；R2為氫、烷基或滷素；R3為二羧基烷基氨基羰基烷基或二羧基烷基氨基羰基環烷基；Rx為氫、烷基、烷基硫基、滷素、羥基、羥基烷基、烷氧基、氨磺醯基、烷基氨磺醯基、二烷基氨磺醯基或硝基；Ry為氫、烷基或滷素；Rz為氫、烷基、滷代烷基、環烷基、烷基硫基、滷素、羥基、羥基烷基、硝基、氰基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷基氧基、羥基烷基氧基、氨基烷基氧基、羧基烷基氧基、氨基羰基烷基氧基、滷代烷氧基、羧基、羧基烷基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、氰基烷基、烷基磺醯基、烷基磺醯基烷基、芳基磺醯基、雜芳基磺醯基、甲脒基、羥基-甲脒基、烷氧基甲脒基、烷基磺醯氨基、烷基磺醯氨基烷基、烷氧基磺醯氨基、烷氧基磺醯氨基烷基、雜環烷基烷基氨基羰基、羥基烷氧基烷基氨基羰基、雜環烷基羰基、雜環烷基羰基烷基、雜環烷基、雜環烷基烷基、氧代雜環烷基、氧代雜環烷基烷基、雜芳基、雜芳烷基、脲基、烷基脲基、二烷基脲基、脲基烷基、烷基脲基烷基、二烷基脲基烷基、硫脲基、硫脲基烷基、-COR12(其中R12為烷基、滷代烷基、羥基烷基、烷氧基烷基或氨基烷基)、-(亞烷基)-COR12(其中R12為烷基、滷代烷基、羥基烷基、烷氧基烷基或氨基烷基)、-CONR14R15(其中R14為氫或烷基並且R15為氫、烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-(亞烷基)-CONR16R17(其中R16為氫、烷基或羥基烷基並且R17為氫、烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-NR18R19(其中R18為氫或烷基並且R19為氫、烷基、醯基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-(亞烷基)-NR20R21(其中R20為氫、烷基或羥基烷基並且R21為氫、烷基、醯基、烷氧基羰基、羥基烷基、烷氧基烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-SO2NR22R23(其中R22為氫或烷基並且R23為氫、烷基、芳基、芳烷基、雜芳基、或雜芳烷基，或者R22和R23與它們所連接的氮原子一起形成雜環氨基)、-(亞烷基)-SO2NR24R25(其中R24為氫或烷基並且R25為氫、烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基，或者R24和R25與它們所連接的氮原子一起形成雜環氨基)、-NR26SO2NR27R28(其中R26和R27獨立地為氫或烷基並且R28為氫、烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基，或者R27和R28與它們所連接的氮原子一起形成雜環氨基)、-(亞烷基)-NR29SO2NR30R31(其中R29和R30獨立地為氫或烷基並且R31為氫、烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基，或者R30和R31與它們所連接的氮原子一起形成雜環氨基)、-CONH-(亞烷基)-NR32R33(其中R32為氫或烷基並且R33為烷基)，或者芳烷基；和R13為氫、羥基、(C1-10)烷氧基、-C(O)R35(其中R35為烷基、芳基、滷代烷基或氰基烷基)或-C(O)OR36(其中R36為烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、烷氧基羰基烷基、醯基、芳基或滷代烷基)。所述化合物的名稱為用AutoNom版本2.2產生的。
在第二個方面，本發明涉及藥物組合物，其包含藥學可接受的載體和治療有效量的式I的化合物或其兩性離子或其藥學可接受的鹽。
在第三個方面，本發明涉及在動物中治療由因子VIIa、IXa、Xa和/或XIa，優選VIIa介導的疾病的方法，該方法包括對所述的動物給用治療有效量的式I的化合物或其兩性離子或其藥學可接受的鹽。優選地，所述疾病為血栓栓塞性疾病或癌症或類風溼性關節炎，更優選為血栓栓塞性疾病，甚至更優選所述疾病為深靜脈血栓形成。優選地，本發明的化合物進行預防性給用。
在第四個方面，本發明涉及在動物中治療血栓栓塞性疾病的方法，該方法包括對所述的動物給用治療有效量的式I的化合物或其兩性離子或其藥學可接受的鹽與另外一種或多種抗凝血劑的組合，所述另外一種或多種抗凝血劑獨立地選自凝血酶抑制劑、因子IXa抑制劑、因子Xa抑制劑、Aspirin和Plavix。
在第五個方面，本發明涉及抑制生物樣品(例如儲存的血液產品和樣品)凝固的方法，其包括給用式I的化合物或其兩性離子或其藥學可接受的鹽。
在第六個方面，本發明涉及式I的化合物或其兩性離子或其藥學可接受的鹽在製備用於在動物中治療血栓栓塞性疾病或癌症或類風溼性關節炎的藥物中的應用。優選地，所述疾病為血栓栓塞性疾病，例如深靜脈血栓形成。
在第七個方面，本發明涉及式(II)的中間體
其中PG1為適當的氧-保護基，並且PG2為適當的氨基-保護基。優選地，PG1為烷基或芳烷基，更優選為苄基。優選地，PG2為烷基，更優選為叔丁基。
在第八個方面，本發明涉及其中R3為二羧基烷基氨基羰基烷基的式I化合物的製備方法，其包括(i)將下式的化合物或其被適當保護的衍生物與二羧基烷基氨基進行反應，其中所述的二羧基烷基氨基中的羧基任選被保護， 其中R1、R2、R13、Rx、Ry、Rz、X1-X4如在本發明的發明內容中所定義的；(ii)任選除去所有的保護基；(iii)任選修飾任意的R1、R2、R13、Rx、Ry和Rz基團；(iii)任選將上述步驟(ii)或(iii)的產物轉化為酸加成鹽；(iv)任選將上述步驟(ii)或(iii)的產物轉化為游離鹼；(v)任選將上述步驟(ii)或(iii)的產物轉化為兩性離子。
在第九個方面，本發明涉及以下式Ib或Ic化合物的製備方法
或Ic所述方法包括(i)將下式的化合物分別與(R)或(S)天冬氨酸反應， 其中所述的(R)或(S)天冬氨酸的羧基任選被保護；(ii)任選使任何被保護的一個或多個羧基脫保護；(ii)任選將上述步驟(i)或(ii)的產物轉化為酸加成鹽；(iii)任選將上述步驟(i)或(ii)的產物轉化為游離鹼；(iv)任選將上述步驟(i)或(ii)的產物轉化為兩性離子；任選使任何被保護的一個和多個羧基脫保護。
優選地，所述羧基用苄基保護並且被製備的化合物為Ib。
在第十個方面，本發明涉及以下式(II)的中間體的製備方法 其中PG1為適當的氧-保護基並且PG2為適當的氨基-保護基，所述的方法包括(i)將以下式(III)的化合物與一當量的式RLi或RMgX1的有機金屬試劑反應以使得-SO2NHPG2基團去質子化，其中所述的式RLi或RMgX1的有機金屬試劑中R為烷基或芳基並且X1為滷素，
其中PG1和PG2如上所定義並且X為滷素；(ii)用一當量的式RLi或RMgX1的有機金屬試劑使在上述步驟(i)中形成的化合物發生金屬轉移，其中所述的式RLi或RMgX1的有機金屬試劑中R為烷基或芳基；(iii)用硼酸三烷基酯處理在上述步驟(ii)中產生的化合物以生成式(II)的化合物。
優選在上述步驟(i)中使用甲基溴化鎂；在上述步驟(ii)中使用異丙基溴化鎂並且所述的硼酸三烷基酯為硼酸三甲酯。優選地，在上述化合物(III)中，PG1為苄基，PG2為叔丁基並且X為碘。
本發明的詳細描述定義用於本說明書和權利要求書中的如下術語意於具有如下所定義的含義，除非另外指明或用於命名化合物。
「烷基」指一到六個碳原子的直鏈飽和單價烴基或者三到六個碳原子的支鏈飽和單價烴基，例如甲基、乙基、丙基、2-丙基、丁基(包括所有的同分異構形式)、戊基(包括所有的同分異構形式)等。
「亞烷基」指一到六個碳原子的直鏈飽和二價烴基或者三到六個碳原子的支鏈飽和二價烴基，例如亞甲基、亞乙基、亞丙基、1-甲基亞丙基、2-甲基亞丙基、亞丁基、亞戊基等。
「烷基硫基」指-SR基，其中R為如上所定義的烷基，例如甲硫基、乙硫基、丙硫基(包括所有的同分異構形式)、丁硫基(包括所有的同分異構形式)等。
「氨基」指-NRR』基團，其中R和R』獨立地為氫、烷基或-CORa，其中Ra為烷基，例如-NH2、甲氨基乙基、1，3-二氨基丙基、乙醯氨基丙基等。
「烷基氨基」指-NHR基，其中R為如上所定義的烷基，例如甲氨基、乙氨基、丙氨基(包括所有的同分異構形式)等。
「醯基」指-COR』基，其中R』為如本文中所定義的烷基、烷氧基、滷代烷基、氨基烷基、羥基烷基或烷氧基烷基，例如乙醯基、三氟乙醯基、羥甲基羰基等。
「氨基磺醯基」或「氨磺醯基」指-SO2NH2基。
「烷基氨基磺醯基」指-SO2NHR基，其中R為如上所定義的烷基，例如甲氨基磺醯基、乙氨基磺醯基等。
「烷基磺醯基」指-SO2R基，其中R為如上所定義的烷基，例如甲磺醯基、乙磺醯基、正丙磺醯基或異丙磺醯基等。
「烷基磺醯基烷基」指-(亞烷基)-SO2R基，其中R為如上所定義的烷基，例如甲磺醯甲基、乙磺醯甲基、正丙磺醯乙基或異丙磺醯乙基等。
「烷基磺醯氨基」指-NHSO2R基，其中R為如上所定義的烷基，例如甲磺醯氨基、乙磺醯氨基、正丙磺醯氨基或異丙磺醯氨基等。
「烷基磺醯氨基烷基」指-(亞烷基)-NHSO2R，其中R為如上所定義的烷基，例如甲磺醯氨基甲基、乙磺醯氨基甲基、正丙磺醯氨基乙基或異丙磺醯氨基乙基等。
「烷氧基磺醯基氨基」指-NHSO2R，其中R為如本文中所定義的烷氧基，例如甲氧基磺醯氨基、乙氧基磺醯氨基等。
「烷氧基磺醯氨基烷基」指-(亞烷基)-NHSO2R，其中R為如本文中所定義的烷氧基，例如甲氧基磺醯氨基甲基、乙氧基磺醯氨基甲基等。
「烷氧基」指-OR基，其中R為如上所定義的烷基，例如甲氧基，乙氧基，丙氧基或2-丙氧基，正、異或叔丁氧基等。
「烷氧基羰基」指-COOR基，其中R為如上所定義的烷基，例如甲氧基羰基、乙氧基羰基等。
「烷氧基羰基烷基」指-(亞烷基)-COOR基，其中R為如上所定義的烷基，例如甲氧基羰基甲基、乙氧基羰基甲基等。
「烷氧基烷基」指用如上所定義的至少一個烷氧基，優選一個或兩個烷氧基取代的一到六個碳原子的直鏈單價烴基或者三到六個碳原子的支鏈單價烴基，例如2-甲氧基乙基，1-、2-或3-甲氧基丙基、2-乙氧基乙基等。
「氨基烷基」指用至少一個，優選一個或兩個-NRR』取代的一到六個碳原子的直鏈單價烴基或者三到六個碳原子的支鏈單價烴基，其中-NRR』中R和R』獨立地為氫、烷基或-CORa(其中Ra為烷基)，例如氨基甲基、甲氨基乙基、1，3-二氨基丙基、乙醯氨基丙基等。
「氨基羰基烷基」指用一個或兩個-CONRR』取代的一到六個碳原子的直鏈單價烴基或者三到六個碳原子的支鏈單價烴基，其中-CONRR』中R和R』獨立地為氫、烷基或-CORa(其中Ra為烷基)，例如氨基羰基甲基、甲氨基羰基甲基、乙醯氨基羰基丙基等。
「烷氧基烷基氧基」指-OR基，其中R為如上所定義的烷氧基烷基，例如2-甲氧基乙基氧基，1-、2-或3-甲氧基丙基氧基，2-乙氧基乙基氧基等。
「氨基烷基氧基」指-OR基，其中R為如上所定義的氨基烷基，例如2-氨基乙基氧基，1-、2-或3-甲氨基丙基氧基等。
「氨基羰基」或「氨基甲醯基」指-CONH2基。
「氨基羰基烷基氧基」指-O-(亞烷基)-CONRR」基，其中R和R』獨立地為如上所定義的氫或烷基，例如2-氨基羰基乙基氧基，氨基羰基甲基氧基等。
「烷基脲基」指-NRCONHR』基，其中R為氫或烷基並且R』為烷基，例如甲基脲基甲基等。
「烷基脲基烷基」指-(亞烷基)-NRCONHR』基，其中R為氫或烷基並且R』為烷基，例如甲基脲基甲基等。
「芳基」指6-12個環原子的單價單環或雙環芳香族烴基，並且任選獨立地由一個或多個取代基，優選一個、兩個或三個取代基取代，所述取代基選自烷基、滷代烷基、烷氧基、烷基硫基、滷素、硝基、-COR(其中R為烷基)、氰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、羥基、羧基或-COOR(其中R為烷基)。典型的例子包括但不限於，苯基、聯苯基、1-萘基和2-萘基及其衍生物。
「芳基磺醯基」指-SO2R基，其中R為如上所定義的芳基，例如苯磺醯基等。
「芳烷基」指-(亞烷基)-R基，其中R為如上所定義的芳基，例如苄基、苯乙基、3-(3-氯苯基)-2-甲基戊基等。
「烷氧基甲脒基」指-C(＝NH)NHOR或-C(＝NOR)NH2基，其中R為如上所定義的烷基，例如甲氧基甲脒基。
「 環烷基」指三至六個碳原子的環狀飽和單價烴基，例如環丙基、環丁基等，優選環丙基。
「 羧基烷基」指-(亞烷基)-COOH基，例如羧甲基、羧基乙基、1-、2-或3-羧丙基等。
「羧基烷基氧基」指-O-(亞烷基)-COOH基，例如羧甲基氧基、羧基乙基氧基等。
「甲脒基」指-C(＝NH)NH2基或其被保護的衍生物。
「氰基烷基」指-(亞烷基)-CN基，例如氰甲基、氰乙基、氰丙基等。
「 二羧基烷基氨基羰基烷基」指-(亞烷基)-CONHR基，其中R為本文中所定義的用兩個羧基取代的烷基，例如-CH2CONHCH(COOH)(CH2COOH)、-CH2CONHCH(CH2COOH)2、-C(CH3)2-CONHCH(COOH)(CH2COOH)、-C(CH3)2-CONHCH(CH2COOH)2等。
「 二羧基烷基氨基」指-NHR基，其中R為如本文中所定義的用兩個羧基取代的烷基。
「二羧基烷基氨基羰基環烷基」指如下式的基團 其中n為1-4並且R為如本文中所定義的用兩個羧基取代的烷基。
「二烷基氨基」指-NRR』基，其中R和R』獨立地為如上所定義的烷基，例如二甲氨基、甲基乙基氨基、甲基丙基氨基(包括所有同分異構形式)等。
「二烷基氨基磺醯基」指-SO2NRR』基，其中R和R』獨立地為如上所定義的烷基，例如二甲氨基磺醯基、甲基乙基氨基磺醯基等。
「二烷基脲基」指-NRCONR』R」基，其中R為氫或烷基，並且R』和R」獨立地為烷基，例如二甲基脲基等。
「二烷基脲基烷基」指-(亞烷基)-NRCONR』R」基，其中R為氫或烷基，並且R』和R」獨立地為烷基，例如二甲基脲基甲基等。
「胍基烷基」指用至少一個，優選一個或兩個-NRC(NRR』)NRR』取代的一到六個碳原子的直鏈單價烴基或者三到六個碳原子的支鏈單價烴基，其中-NRC(NRR』)NRR』中R和R』獨立地為氫、烷基或-CORa，其中Ra為烷基，例如胍基甲基、N』-甲氨基乙基、2-(N』，N』，N」，N」-四甲基-胍基)-乙基等。
「滷」指氟、氯、溴和碘，優選氟或氯。
「滷代烷基」指用一個或多個滷素原子，優選一個至三個滷素原子，優選氟或氯取代的烷基，包括用不同滷素原子取代的那些，例如-CH2C1、-CF3、-CHF2等。
「滷代烷氧基」指-OR基，其中R為如上所定義的滷代烷基，例如-OCH2C1、-OCF3、-OCHF2等。
「羥基烷基」指用一至五個羥基取代的一到六個碳原子的直鏈單價烴基或者三到六個碳原子的支鏈單價烴基，條件是如果存在兩個羥基，它們不在相同的碳原子上。典型的例子包括但不限於，羥基甲基、2-羥基乙基、2-羥基丙基、3-羥基丙基、1-(羥基甲基)-2-甲基丙基、2-羥基丁基、3-羥基丁基、4-羥基丁基、2，3-二羥基丙基、1-(羥基甲基)-2-羥基乙基、2，3-二羥基丁基、3，4-二羥基丁基和2-(羥基甲基)-3-羥基丙基，優選2-羥基乙基、2，3-二羥基丙基和1-(羥基甲基)-2-羥基乙基。
「羥基烷基氧基」指-OR基，其中R為如上所定義的羥基烷基，例如2-羥基乙基氧基、3-羥基丙基氧基等。
「羥基烷氧基烷基氨基羰基」指-CONH-(亞烷基)-O-(亞烷基)OH基，其中亞烷基如上所定義，例如-CONH-(CH2)2-O-(CH2)2OH等。
「雜環烷基」指3-8個環原子的飽和或不飽和單價環狀基團，其中一個或兩個環原子為選自N、O或S(O)n的雜原子，其中n為0-2的整數，剩餘的環原子為C。該雜環烷基環可任選被一個或多個取代基取代，優選一個或兩個取代基取代，所述取代基獨立地選自烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、3，5，6-三羥基-2-羥甲基-四氫吡喃-3-基、4，5-二羥基-2-羥甲基-6-(4，5，6-三羥基-2-羥甲基-四氫吡喃-3-基氧基)-四氫吡喃-3-基、雜芳烷基、滷素、滷代烷基、羥基、羥基烷基、烷氧基、烷氧基烷基、氨基烷基、胍基烷基、滷素、氰基、羧基、-COOR(其中R為如上所定義的烷基)或-CONRaRb(其中Ra和Rb獨立地為氫或烷基)或其被保護的衍生物。更明確地，術語雜環烷基包括但不限於吡咯烷基(pyrrolidino)、哌啶基(piperidino)、嗎啉基、哌嗪基(piperazino)、四氫吡喃基和硫代嗎啉基。
「雜環烷基羰基」指-COR基，其中R為如上所定義的雜環烷基。更明確地，術語雜環烷基羰基包括但不限於1-吡咯烷基羰基、1-哌啶基羰基、4-嗎啉基羰基、1-哌嗪基羰基、2-四氫吡喃基羰基和4-硫代嗎啉基羰基及其衍生物。
「雜環烷基羰基烷基」指-(亞烷基)-COR基，其中R為如上所定義的雜環烷基。更明確地，術語雜環烷基羰基包括但不限於1-吡咯烷基羰基甲基、1-哌啶基羰基甲基、4-嗎啉基羰基乙基、1-哌嗪基羰基甲基及其衍生物。
「雜環烷基烷基」指-(亞烷基)-R基，其中R為如上所定義的雜環烷基。更明確地，術語雜環烷基烷基包括但不限於吡咯烷-1-基甲基、哌啶-1-基甲基、2-嗎啉-1-基乙基、哌嗪-1-基乙基及其衍生物。
「雜環烷基烷基氨基羰基」指-CONH-(亞烷基)-R基，其中R為如上所定義的雜環烷基。更明確地，術語雜環烷基烷基氨基羰基包括但不限於1-吡咯烷基乙基-氨基羰基、1-哌啶基乙基-氨基羰基、4-嗎啉基乙基羰基、1-哌嗪基乙氨基羰基和4-硫代嗎啉基丙基氨基羰基及其衍生物。
「雜芳基」指含5-10個原子的單價單環或雙環芳基，其包含一個或多個，優選一個或兩個選自N、O或S的環雜原子，剩餘的環原子為碳。所述雜芳基環任選地被一個或多個取代基取代，優選一個或兩個取代基取代，所述取代基獨立地選自烷基、滷代烷基、烷氧基、烷基硫基、氨基烷基、胍基烷基、滷素、硝基、氰基、氨基、烷基或二烷基氨基、羥基、羧基或-COOR(其中R為如上所定義的烷基)。更明確地，術語雜芳基包括但不限於吡啶基、吡咯基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、吲哚基、喹啉基、吡嗪、嘧啶、吡二嗪(pyradizine)、唑、異唑基、苯並唑、喹啉、異喹啉、苯並吡喃基和噻唑基。
「雜芳基磺醯基」指-SO2R基，其中R為如上所定義的雜芳基，例如吡啶磺醯基、呋喃磺醯基等。
「雜芳烷基」指-(亞烷基)-R基，其中R為如上所定義的雜芳基，例如吡啶基甲基、呋喃基甲基、吲哚基甲基、嘧啶基甲基等。
「雜環氨基」指3-8環原子的飽和或不飽和的單價環基團，其中一個或兩個環原子為選自N、O或S(O)n的雜原子，其中n為0-2的整數，其餘的環原子為C，條件是至少一個雜原子為氮並且其中一個或兩個碳原子任選被羰基替代。所述的雜環氨基環可以任選被一個或多個取代基取代，優選一個或兩個取代基取代，所述取代基獨立地選自烷基、羥基、羥基烷基、烷氧基、烷氧基烷基、氨基烷基、胍基烷基、滷素、滷代烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、滷代烷基、滷素、氰基、羧基、-CONRaRb(其中Ra和Rb獨立地為氫或烷基)或-COOR(其中R為如上所定義的烷基)。更明確地，術語雜環氨基包括但不限於1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-哌嗪基和硫代嗎啉基及其衍生物。
「羥基甲脒基」指-C(＝NH)NHOH或-C(＝NOH)NH2基。
本發明還包括式I化合物的前體藥物。術語前體藥物意於表示共價結合的載體，當將前體藥物給用到哺乳動物對象時，其能夠釋放式I的活性成分。活性成分的釋放發生在體內。前體藥物可通過本領域技術人員已知的技術製備。這些技術通常在給定的化合物中修飾適當的官能團。然而這些被修飾的官能團通過常規處理或在體內重新生成原始的官能團。式I化合物的前體藥物包括這樣的化合物，其中的羥基、甲脒基、胍基、氨基、羧基或類似的基團被修飾。前體藥物的例子包括但不限於式I化合物中的羥基官能團的酯(例如乙酸酯、甲酸酯和苯甲酸酯衍生物)、氨基甲酸酯(例如，N，N-二甲基氨基羰基)，等。式I化合物的前體藥物也落入本發明的範圍中。
本發明還包括式I化合物的衍生物和被保護的衍生物。例如，當式I化合物包含可氧化的氮原子(例如當式I化合物包含吡啶、氨基、烷基氨基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基或二烷基氨基基團)時，氮原子可以通過本領域公知的方法轉化為N-氧化物。
同樣當式I化合物包含例如羥基、羧基、羰基、硫醇或任何包含一個或多個氮原子的基團時，這些基團可用適當的保護基保護。適當保護基的全面列舉可以在T.W.Greene，Protective Groups in OrganicSynthesis，John WileySons，Inc.1999中找到，其公開內容通過引用其全部內容而併入本發明中。式I化合物的被保護的衍生物可以用本領域公知的方法製備。
化合物的「藥學可接受的鹽」指製藥學上可接受的鹽並且具有所需的母體化合物的藥理學活性。這樣的鹽包括酸加成鹽，與無機酸例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等形成的鹽；或與有機酸例如乙酸、丙酸、己酸、環戊丙酸、羥基乙酸、丙酮酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、蘋果酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、3-(4-羥基苯甲醯基)-苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、1，2-乙二磺酸、2-羥基乙磺酸、苯磺酸、4-氯苯磺酸、2-萘磺酸、4-甲苯磺酸、樟腦磺酸、葡庚糖酸、4，4』-亞甲基雙-(3-羥基-2-烯-1-羧酸)、3-苯基丙酸、三甲基乙酸、叔丁基乙酸、十二烷基磺酸、葡糖酸、穀氨酸、羥基萘酸、水楊酸、硬脂酸、粘康酸等形成的鹽；或當存在於母體化合物中的酸質子被金屬離子例如鹼金屬離子、鹼土金屬離子或鋁離子替代或者與有機鹼例如乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡萄糖胺等配位而形成的鹽。應當理解的是，適當的藥學可接受的鹽為無毒的。關於藥學可接受的鹽的更多的信息可見於Remington’s Pharmaceutical Sciences，第17版，Mack PublishingCompany，Easton，PA，1985中，通過引用併入本發明。
本發明的化合物可以具有不對稱中心。包含不對稱取代原子的本發明的化合物可以以旋光或外消旋形式分離。本領域公知如何製備旋光形式，例如通過物質拆分。許多烯屬烴，C＝C雙鍵等的幾何異構體可以存在於描述於本文中的化合物中，並且所有穩定的異構體預計落入本發明中。本發明化合物的順式和反式幾何異構體被描述並可以作為異構體的混合物或作為分離的異構體形式被分離出來。結構上所有手性的、對映體的、非對映體的、外消旋的形式和所有的幾何同分異構形式(表示式I的化合物)都意於包括在內，除非明確指出的特定的立體化學或異構體形式。
某些式I化合物存在互變異構平衡。以互變異構體形式存在的式I化合物在本申請中以一種可能的互變異構體被命名、說明或另外描述。然而，應當理解的是，所有可能的互變異構體意於包含於這樣的命名、說明和描述中並落入本發明的範圍中。例如，式I的化合物中基團-C(＝NR13)NH2可互變異構為-C(＝NH)NHR13基團。另外，如本文中所用的術語烷基雖然只列舉了一些例子，但其包括所述烷基的所有可能的同分異構形式。另外，當環狀基團，例如芳基、雜芳基、雜環烷基被取代時，雖然只列舉了一些例子，但它們包括所有的位置異構體。
某些化合物包含鹼性基團例如氨基部分和酸性部分例如羧酸部分，根據溶液的pH值而定，其可以游離胺和游離羧酸或以兩性離子形式存在，在兩性離子中，氨基被質子化形成銨離子並且羧酸脫質子形成羧酸根離子。所有這樣的兩性離子都包括在本發明中。
「氧代雜環烷基」指3-8個環原子的飽和或不飽和(條件是它不是芳族的)單價環狀基團，其中一個或兩個環原子為選自N、O或S(O)n的雜原子，其中n為0-2的整數，其餘的環原子為C，其中一個或兩個碳原子用氧代(C＝O)基團替代。所述的氧代雜環烷基環可以任選地被一個或多個取代基取代，優選一個或兩個取代基取代，所述取代基獨立地選自烷基、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、滷代烷基、滷素、羥基、羥基烷基、烷氧基烷基、氨基烷基、胍基烷基、烷氧基、氰基、羧基或-COOR(其中R為如上所定義的烷基)。更明確地，術語氧代雜環烷基包括但不限於，2或3-氧代吡咯烷-1-基，2、3或4-氧代哌啶基，3-氧代嗎啉基，2-氧代-哌嗪基，2-氧代四氫吡喃基，3-氧代硫代嗎啉基，2-咪唑烷酮及其衍生物。
「氧代雜環烷基烷基」指-(亞烷基)-R基，其中R為如上所定義的氧代雜環烷基烷基。更明確地，術語氧代雜環烷基烷基包括但不限於2或3-氧代吡咯烷-1-基-(甲基、乙基或丙基)，2、3或4-氧代哌啶-1-基-(甲基、乙基或丙基)，3-氧代嗎啉-4-基-(甲基、乙基或丙基)，2-氧代哌嗪-1-基-(甲基、乙基或丙基)，2-氧代四氫吡喃-3-基-(甲基、乙基或丙基)，3-氧代硫代嗎啉-4-基-(甲基、乙基或丙基)，2-咪唑烷酮-1-基-(甲基、乙基或丙基)及其衍生物。
「任選的」或「任選地」指隨後描述的事件或情況可以但不必發生，並且所描述的內容包括所述事件或情況發生的例子以及其不發生的例子。例如「任選地用烷基單取代或二取代的雜環烷基」中所述的烷基可以但不必存在，並且所描述的內容包括所述的雜環烷基用烷基單取代或二取代的情況和所述的雜環烷基不用烷基取代的情況。
「藥學可接受的載體或賦形劑」指用於製備藥物組合物的載體或賦形劑，其通常是安全、無毒的並且即沒有生物活性也沒有其它不希望有的活性，並且包括獸醫應用以及人用藥物應用的可接受的載體或賦形劑。本說明書和權利要求書中所用的「藥學可接受的載體/賦形劑」既包括一種也包括多於一種的這樣的賦形劑。
疾病的「治療(treating)」或「治療(treatment)」包括(1)預防疾病，即，在哺乳動物中使疾病的臨床症狀不發展，其中所述的哺乳動物可以遭受或易患有疾病但尚未經歷或表現出所述疾病的症狀；(2)抑制疾病，即，阻止或減少疾病或其臨床症狀的發展；或(3)消除疾病，即，使疾病或其臨床症狀的消退。
「治療有效的量」指式I化合物的量，當給用到哺乳動物用於治療疾病時，該量足以實現用於所述疾病的治療。所述」治療有效的量」將根據所用化合物、所患疾病及其嚴重性以及待治療哺乳動物的年齡、體重等的不同而變化。
「硫脲基」指-NRC(S)NR』R」基，其中R、R』和R」獨立地為氫或烷基。
「硫脲基烷基」指-(亞烷基)-NRC(S)NR』R」基，其中亞烷基如上所定義，典型的例子包括但不限於硫脲基甲基、硫脲基乙基等。
「脲基」指-NHCONH2基。
「脲基烷基」指-(亞烷基)-NHCONH2基，其中亞烷基如上所定義，典型的例子包括但不限於脲基甲基、脲基乙基等。
本發明典型的化合物公開於下表I中，其中R1、R2和Ry為氫；X1為-N-，X2、X3和X4為碳。
表I

優選的實施方案儘管在本發明的發明內容部分中闡明了本發明最寬範圍的定義，但優選式I的一些化合物。例如(I)優選的一組化合物由以下式Ia表示

其中R3、R13和Rz為如在本發明的發明內容部分中的定義。
在上述的Ia組化合物中，優選的化合物組為這樣的化合物，其中R3為二羧基烷基氨基羰基烷基，優選-CH2CONHR或-C(CH3)2CONHR，其中R為二羧基烷基，更優選1，2-二羧基烷基或1，3-二羧基丙-2-基，甚至更優選(R)-1，2-二羧基乙基或(S)-1，2-二羧基乙基。
在上述優選的組和更優選的組中，包含於其中的甚至更優選的化合物的組為這樣的化合物或者其兩性離子或藥學可接受的鹽，其中Rz為滷素、羥基烷基、烷基磺醯基氨基、烷基磺醯基氨基烷基、烷基磺醯基、氨磺醯基、雜環烷基羰基烷基、氧代雜環烷基、羧基烷基、氧代雜環烷基烷基、雜芳烷基、脲基、烷基脲基、二烷基脲基、脲基烷基、烷基脲基烷基、二烷基脲基烷基、硫脲基、硫脲基烷基、-COR12(其中R12為烷基、羥基烷基或滷代烷基)、-(亞烷基)-COR12(其中R12為烷基或滷代烷基)、-CONR14R15(其中R14為氫或烷基並且R15為氫、烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-(亞烷基)-CONR16R17(其中R16為氫或烷基並且R17為氫、烷基、羥基烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-NR18R19(其中R18為氫或烷基並且R19為氫、烷基、醯基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-(亞烷u基)-NR20R21(其中R20為氫或烷基並且R21為氫、烷基、羥基烷基、醯基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-SO2NR22R23(其中R22和R23獨立地為烷基)、-NR26SO2NR27R28(其中R26和R27獨立地為氫或烷基，並且R28為氫、烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基，或者R27和R28與它們所連接的氮原子一起形成雜環氨基)或-(亞烷基)-NR29SO2NR30R31(其中R29和R30獨立地為氫或烷基，並且R31為氫、烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基，或者R30和R31與它們所連接的氮原子一起形成雜環氨基)。
優選地，Rz為氨基磺醯基、烷基磺醯基氨基烷基、滷素、羧基烷基、羥基烷基、雜環烷基羰基烷基、脲基、脲基烷基、烷基脲基烷基、二烷基脲基烷基、-CONR14R15(其中R14為氫或烷基並且R15為氫或烷基)、-(亞烷基)-CONR16R17(其中R16為氫或烷基並且R17為氫、烷基或羥基烷基)或者-(亞烷基)-NR20R21(其中R20為氫或烷基並且R21為氫、烷基、羥基烷基或醯基)。
更優選地，Rz為氟、氨磺醯基、脲基甲基、叔丁基脲基甲基、3，3-二甲基脲基甲基、氨甲基、哌嗪-1-基羰基-甲基、羧甲基、羥甲基羰基氨甲基、氨基羰基、乙醯氨基甲基、氨基羰基甲基、甲氨基羰基甲基、二甲氨基羰基甲基、2-羥乙基氨基羰基甲基、嗎啉-4-基-羰基甲基、甲氧基羰基氨基甲基、R或S或RS-1-羥乙基羰基-氨基甲基、羥甲基，或甲磺醯基氨基甲基。
在上述優選的組和更優選的組和甚至更優選的組中，包含於其中的特別優選的化合物的組為這樣的化合物，其中R13為氫、羥基、甲氧基或乙氧基羰基，更優選為氫。
更優選地，所述式I的化合物有以下式Ib或Ic或其兩性離子或藥學可接受的鹽表示 或 (II)式I化合物的另一優選的組為這樣的化合物，其中以下結構部分 為3』-乙醯基苯基、3』-羥基苯基、2』-羥基苯基、3』-氨基羰基苯基、3』-氰基苯基、5』-氟-2』-羥基苯基、5』-氯-2』-羥基苯基、2』-羥基-甲基苯基、2』-羥基苯基、5』-羧基-2』-羥基苯基、2』，5』-二羥基苯基、5』-氰基-2』-甲氧基苯基、5』-氨基羰基-2』-甲氧基苯基、2』，6』-二羥基苯基、2』-羥基-5』-硝基苯基、2』-氰基苯基、3』-羥基甲基苯基、5』-氰基-2』-羥基-苯基、5』-氨基羰基-2』-羥基苯基、2』，6』-二羥基苯基、5』-氨基甲基-2』-羥基苯基、2』-羥基-5』-脲基甲基苯基、2』-羥基-5』-咪唑-2-基苯基、5』-氨基-2』-羥基苯基、2』-羥基-5』-脲基苯基、2』-羥基-5』-(2-嗎啉-4-基乙基)氨基羰基-苯基、3』-溴-2』-羥基-5』-羥基甲基苯基、5』-(2-氰基乙基)-2』-羥基苯基、3』-溴-5』-羧甲基-2』-羥基苯基、5』-(2-羧基乙基)-2』-羥基苯基、5』-氨基羰基甲基-2』-羥基苯基、3』，5』-二氯-2』-羥基苯基、2』-羥基-5』-[2-(2-羥基乙氧基)乙氨基羰基]苯基、5』-二甲氨基磺醯基氨基-2』-羥基-苯基、3』-溴-5』-氯-2』-羥基-苯基、2』-羥基-5』-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)苯基、2』-羥基-5』-(4-甲基哌嗪-1-基甲基(emthyl))苯基、5』-甲脒基-2』-羥基苯基、5』-(2-二甲氨基乙氨基羰基)-2』-羥基苯基或5』-氨基羰基-2』-羥基苯基。優選2』-羥基苯基、5』-氟-2』-羥基苯基、5』-氯-2』-羥基苯基、2』-羥甲基苯基、2』-羥基苯基、5』-羧基-2』-羥基-苯基、2』，5』-二羥基苯基、2』，6』-二羥基-苯基、2』-羥基-5』-硝基苯基、5』-氰基-2』-羥基苯基、5』-氨基羰基-2』-羥基苯基、2』，6』-二羥基苯基、5』-氨基甲基-2』-羥基苯基、2』-羥基-5』-脲基甲基苯基、2』-羥基-5』-咪唑-2-基苯基、5』-氨基-2』-羥基苯基、2』-羥基-5』-脲基苯基、2』-羥基-5』-(2-嗎啉-4-基乙基)氨基羰基-苯基、3』-溴-2』-羥基-5』-羥基甲基苯基、5』-(2-氰基乙基)-2』-羥基苯基、3』-溴-5』-羧甲基-2』-羥基苯基、5』-(2-羧基乙基)-2』-羥基苯基、5』-氨基羰基甲基-2』-羥基苯基、3』，5』-二氯-2』-羥基苯基、2』-羥基-5』-[2-(2-羥基乙氧基)乙氨基羰基]苯基、5』-二甲氨基磺醯基氨基-2』-羥基-苯基、3』-溴-5』-氯-2』-羥基苯基、2』-羥基-5』-(4-甲基哌嗪-1-基羰基)苯基、2』-羥基-5』-(4-甲基哌嗪-1-基甲基)苯基、5』-甲脒基-2』-羥基苯基、5』-甲氨基羰基甲基-2』-羥基苯基、5』-(2-二甲氨基乙氨基羰基)-2』-羥基苯基或5』-氨基羰基-2』-羥基苯基。更優選2』，6』-二羥基苯基、5』-氟-2』-羥基苯基、3』-氨磺醯基苯基、5』-氨基羰基-2』-羥基苯基、5』-氨基羰基甲基-2』-羥基苯基、5』-甲氨基羰基甲基-2』-羥基苯基、5』-羥甲基-2』-羥基苯基、5』-乙醯氨基甲基-2』-羥基苯基、2』-羥基-5』-脲基苯基、2』-羥基-5』-脲基甲基苯基、2』-羥基-5』-N-甲基脲基甲基-苯基、2』-羥基-5』-N，N-二甲基脲基甲基苯基或5』-甲磺醯基氨基-2』-羥基苯基。
在這組中，優選的化合物組為這樣的化合物，其中R1和R2為氫，X1為氮，X2-X4為碳並且R3為二羧基氨基羰基烷基，優選-CH2CONHR或-C(CH3)2CONHR，其中R為1，2-二羧基乙基或1，3-二羧基丙-2-基，甚至更優選(R)-1，2-二羧基乙基。
(III)式I化合物的另一優選的組為這樣的化合物，其中以下的結構部分 為如下式的組 其中Rz為氟、氨磺醯基、脲基甲基、-CH2NHCONCH3、-CH2NHCONHC(CH3)3、N，N-二甲基脲基甲基、氨基甲基、哌嗪-1-基羰基甲基、羧甲基、-CH2NHCOCH2OH、氨基羰基、乙醯氨基甲基、氨基羰基甲基、甲氨基羰基甲基、二甲氨基羰基甲基、2-羥乙氨基羰基甲基、嗎啉-4-基羰基甲基、甲氧基羰基氨基甲基、羥甲基或甲磺醯基氨基甲基。
參照如上闡明的優選的實施方案意於包括所有的具體的和優選的組的組合，除非另外說明。
一般合成設計本發明化合物可通過描述於如下所示的反應設計的方法而製備。
用於製備這些化合物的起始原料和試劑商購於例如AldrichChemical Co.，(Milwaukee，Wis.)、Bachem(Torrance，Calif.)或Sigma(St.Louis，Mo.)的供應商，或者用本領域技術人員已知的方法根據闡述於參考文獻中的規程製備，所述參考文獻例如Fieser and Fieser’sReagents for Organic Synthesis，第1-17卷(John Wiley and Sons，1991)；Rodd’s Chemistry of Carbon Compounds，第1-5卷和增補本(ElsevierScience Publishers，1989)；Organic Reactions，第1-40卷(John Wiley andSons，1991)；March’s Advanced Organic Chemistry，(John Wiley andSons，第4版)和Larock’s Comprehensive Organic Transformations，(VCHPublishers Inc.，1989)。這些設計僅僅例舉了一些方法，通過這些方法可以合成本發明的化合物，並且參考這些公開內容，將對本領域技術人員產生啟示，可以對這些設計進行各種改變。
如果需要可以使用常規技術分離和純化所述的起始原料和反應中間體，所述常規技術包括但不限於過濾、蒸餾、結晶、色譜分離等。這些物質可用常規手段(包括物理常數和光譜數據)表徵。
除非指明不同的情況，本文中所述的反應在常壓下，在溫度範圍從約-78℃至約150℃，優選從約0℃至約125℃並且最優選在約室溫(或環境溫度)，例如約20℃下進行。
式I的化合物，其中X1為-N-，R13為氫，R3為二羧基烷基氨基羰基烷基，並且X2、X3、X4、R1、R2、Rx、Ry和Rz為在本發明的發明內容部分中所定義的，其可如在如下的示意圖I中所述的那樣製備。
示意圖I
將式1的酚衍生物(其中R為氫或羥基的保護基，優選羥基，並且R』為烷基)甲醯化得到式2的化合物。所述甲醯化反應在氯化鎂和有機鹼例如三乙胺等的存在下，並在合適的例如乙腈等的有機溶劑中進行。用合適的滷化試劑例如N-溴代琥珀醯亞胺、N-碘代琥珀醯亞胺等，在合適的例如二甲基甲醯胺等的有機溶劑中進行式2的滷化給出式3的化合物(其中X為滷素)。
式1的化合物或者可以商購或者可以通過本領域中公知的方法製備它們。例如4-羥基苯基乙酸甲酯是可以商購的。
用合適的羥基保護基例如烷基、甲氧基乙氧基甲基、苄基等對在式3(其中R為氫)中的羥基的保護給出式4的化合物。其它合適的羥基保護基的全面的列舉可在T.W.Greene，Protective Groups in OrganicSynthesis，John WileySons，Inc.1999中找到，其公開的內容通過引用其全部內容而併入本發明中。優選的羥基保護基為2-甲氧基乙氧基甲基和苄基。反應通常在鹼例如二異丙基乙胺等的存在下，並且在例如二氯甲烷、四氯化碳、氯仿等的滷代有機溶劑中進行。
用式5(其中Rx、Ry和Rz為如在本發明發明內容部分所定義的)的硼酸化合物或其被保護的衍生物處理式4給出式6的聯苯化合物。該反應在鈀催化劑例如四(三苯基膦)鈀的存在下，和在合適的例如甲苯或二甲氧基乙烷的有機溶劑，和鹼例如碳酸鈉、碳酸鉀等中進行。或者，該反應在PdCl2(dppf)·CH2Cl2複合物的存在下，在二異丙基胺的存在下，在合適的例如四氫呋喃等的有機溶劑中進行。式5的化合物或者可以商購或者可以通過本領域中公知的方法製備它們。例如5-氟-2-甲氧基硼酸是可以商購的。其它的可以通過如下方式製備用有機金屬試劑例如正丁基鋰處理式Ph-(Rx，Ry，Rz)X的滷代苯，其中X為滷素並且Rx、Ry和Rz如在本發明發明內容部分所定義的，以生成有機金屬物質，該物質當用硼酸三甲酯處理時給出相應的硼酸。式Ph-(Rx，Ry，Rz)X的滷代苯可以商購或者可以通過本領域中公知的方法製備它。例如2-溴-4-氟苯酚是可以商購的。1-(3-溴-4-甲氧基乙氧基甲氧基苄基)-3-叔丁基脲可以通過如下方法製備用甲氧基乙氧基甲基氯在鹼例如二異丙基胺等的存在下處理3-溴-4-羥基苄腈，隨後將形成的3-溴-4-甲基乙氧基甲氧基苄腈用適當的還原劑例如乙硼烷還原成3-溴-4-甲基乙氧基甲氧基苄胺。然後，用異氰酸叔丁酯處理3-溴-4-甲基乙氧基苄胺給出所需的化合物。1-(3-溴-4-甲氧基乙氧基甲氧基苄基)-3-叔丁基脲可通過在酸性水解反應條件下除去叔丁基而轉化為1-(3-溴-4-甲氧基乙氧基甲氧基苄基)脲。
在合適的氧化劑例如苯醌、空氣氧化或FeCl3和O2的存在下，在合適的例如甲醇、乙醇等的有機溶劑中，用式7的1，2-二氨基化合物與式6縮合給出式8的化合物，其在鹼性水解條件下除去R』基團給出式9的化合物。或者，該反應利用偏亞硫酸氫鈉水溶液，在醇溶劑例如異丙醇中，並在氧氣的存在下進行。
用二羧基被保護的二羧基烷基氨基與9反應給出二羧基被保護的式I的化合物，其在脫去二羧基保護基的情況下給出式I的化合物(其中X1為-N-)。胺化反應在適當的偶合試劑存在下，任選地在1-羥基苯並三唑(HOBT)以及鹼例如N，N-二異丙基乙基胺、三乙胺、N-甲基嗎啉等的存在下進行，所述偶合試劑為例如苯並三唑-1-基氧基三-吡咯烷基鏻六氟磷酸鹽(PyBOP)、O-苯並三唑-1-基-N，N，N』，N』-四甲基-脲六氟磷酸鹽(HBTU)、O-(7-氮雜苯並三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)或1，3-二環己基碳二亞胺(DCC)。通常該反應在20-30℃下，優選約25℃下進行，並需要2-24小時以進行完全。合適的反應溶劑為惰性有機溶劑，例如N，N-二甲基甲醯胺等。
式(I)化合物的其他製備方法公開於Hu，Huiyong等人的美國專利申請中，公開號為20030114457A1，於2003年6月19日出版，其所公開的內容通過引用其全部內容而併入本發明中。
式I的化合物，其中X1為-CH-，R13為氫，R3為二羧基烷基氨基羰基烷基，並且X2、X3、X4、R1、R2、Rx、Ry和Rz為在本發明的發明內容部分中所定義的，其可如在如下的示意圖II中所述的那樣製備。
示意圖II
在式7化合物中的羥基用適當的羥基保護基保護，給出式11的化合物。合適的羥基保護基的全面的列舉可在T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，John WileySons，Inc.1999中找到，其所公開的內容通過引用其全部內容而併入本發明中。優選的羥基保護基為2-甲氧基乙氧基甲基。通常反應在鹼例如N，N-二異丙基乙胺等的存在下，並且在例如二氯甲烷、四氯化碳、氯仿等的滷代的有機溶劑中進行。
利用描述於Muller，S.；Liepold，B.；Roth G.J.；Bestmann H.J.Synlett 1996，6,521-522中所述的修飾過程進行乙炔化反應，以給出式12的乙炔基聯苯化合物。
式13的氰基化合物(其中PG1為適當的氮保護基例如甲磺醯基、叔丁氧基羰基、三氟乙醯基等，並且X為滷素)與式12的化合物的反應，利用描述於Sakamoto，T；Kondo，Y.；Iwashita，S.；Nagano，T.；Yamanaka，H.Chem.Pharm.Bull.1988，36，1305中的反應條件給出式14的化合物5-氰基-2-聯苯-3-基吲哚(其中X1、X2、X3和X4為碳並且PG1不為氫)。在式14中氨基的脫保護給出式15的化合物5-氰基-2-(聯苯-3-基)-1H-吲哚。在脫保護步驟中所用的反應條件依賴於所用氮原子保護基的性質而定。例如，如果所述的保護基為甲磺醯基，它在鹼水解反應條件下脫去。適當的鹼為氫氧化鈉、氫氧化鉀的水溶液等。該反應在醇溶液例如甲醇、乙醇等中進行。如果所述的保護基為叔丁氧基羰基，它在酸水解反應條件下脫去。式13化合物可以是商購的，或者它們也可以通過本領域公知的方法製備。
然後將在式15中的羥基保護基脫去給出式16的化合物5-氰基-2-(2-羥基聯苯-3-基)-1H-吲哚。用於脫保護反應的反應條件依賴於該羥基保護基的性質而定。例如如果所述的保護基為2-甲氧基乙氧基甲基，它通過用酸在合適的醇溶劑的非水反應條件下處理式16而脫去。
然後將化合物16中的氰基通過如下步驟轉化為甲脒基首先用氯化氫氣體在無水醇溶劑例如甲醇、乙醇等中處理式16，然後用無機鹼例如碳酸銨等，或者過量的氨在醇溶劑例如甲醇、乙醇中處理所形成的(5-甲氧基甲脒基)-2-(2-羥基聯苯-3-基)-1H-吲哚17給出形成的式18的(5-甲脒基)-2-(2-羥基聯苯-3-基)-1H-吲哚，然後將其轉化為在上面示意圖I中所述的式I的化合物。
式I化合物可以被轉化為其它的式I的化合物。例如式I的化合物(其中Rx為烷氧基)，可以通過用適當的脫烷基化試劑例如氫溴酸等使烷氧基水解而轉化為相應的式I的化合物(其中Rx為羥基)。式I的化合物(其中Rz為氰基)可以在水解反應條件下轉化為相應的式I的化合物(其中Rz為氨基羰基)。所述的氰基還可以被還原以給出氨基甲基，其可以用異氰酸酯或硫氰酸酯處理給出相應的式I的化合物(其中Rz分別為脲基甲基或硫脲基甲基)。式I的化合物(其中R13為氫)可以通過將其與羥胺或烷氧基胺在本領域公知的條件下轉化為相應的式I的化合物(其中R13為羥基或烷氧基)。
應用本發明的化合物抑制因子VIIa、IXa、Xa和XIa，特別是因子VIIa，並且因此用作用於治療或預防哺乳動物中的血栓栓塞性疾病的抗凝血劑。
可以提及的具體的疾病狀況包括治療和預防靜脈血栓形成(如DVT)和肺栓塞、動脈血栓形成(如在心肌梗塞、不穩定型心絞痛、基於血栓形成的中風和外周動脈血栓形成中)，和通常由心房纖顫過程中的心房或由在透壁性心肌梗塞之後的左心室或由充血性心力衰竭引起的系統性栓塞；預防血栓溶解、經皮腔內血管成形術(PTA)和冠脈架橋手術之後的再閉塞(即，血栓形成)；預防通常在顯微術和血管術之後的再栓塞。
另外的適應症包括治療和預防由細菌、多發傷、中毒或任何其它機制引起的瀰漫性血管內凝血；在血液接觸體內外來物表面如血管移植物、血管支架、血管導管、機械和生物假體閥或任何其它醫療裝置時的抗凝血治療；和在血液接觸體外醫療裝置時的抗凝血治療，如在心血管手術過程中使用心肺機或在血液透析中；治療和/或預防特發性成人呼吸窘迫症候群、輻射或化療處理後的肺纖維化、膿毒性休克、敗血病、炎症性反應，其包括但不限於浮腫、急性或慢性動脈粥樣硬化如冠狀動脈疾病和動脈粥樣硬化性斑塊形成、腦動脈疾病、腦梗塞、腦血栓形成、腦栓塞、外周動脈疾病、缺血、心絞痛(包括不穩定型心絞痛)、再灌注損傷、經皮經腔血管成形術(PTA)和冠狀動脈旁路手術之後的再狹窄。
式I的化合物還可以用於癌症或類風溼性關節炎的治療。
測試本發明的化合物抑制因子VIIa和Xa的能力可以在以下生物試驗實施例1和2中所述的體外和體內試驗中進行試驗。
給藥和藥用組合物通常，本發明的化合物以用於給用具有類似應用的藥物的任何接受的給用方式以治療有效量給用。本發明的化合物，即活性成分的實際用量根據多種因素如被治療的疾病的嚴重程度、主體的年齡和相對健康狀態，使用的化合物的效力、給藥途徑和形式和其它因素而定。
本發明的化合物的治療有效量可為每天每千克接受者體重約0.01-50mg；優選約0.1-20mg/kg/天，更優選約0.25mg/kg/天到10mg/kg/天。因此，為了對70kg的人給用，最優選劑量範圍為每天約7mg到1.4g。
通常，本發明的化合物作為藥用組合物通過以下途徑的任一種給用口服給用，系統給用(如，透皮、鼻內或通過栓劑給用)，或非腸道給用(如，肌肉內、靜脈內或皮下給用)。優選的給用方式是使用方便的日劑量方案的口服或非腸道給用，其可以根據痛苦程度進行調整。口服組合物可為片劑、丸劑、膠囊、半固體劑、粉末劑、持續釋放製劑、溶液劑、懸浮劑、酏劑、氣霧劑或任何其它適當的組合物形式。
製劑的選擇根據多種因素而定，如藥物的給用方式(如，對於口服給用優選片劑、丸劑或膠囊形式)和藥用物質的生物利用度。最近，已經根據通過提高表面積(即減小粒徑)可增加生物利用度的原理開發了特別適合生物利用度差的藥物的藥物製劑。例如，美國專利4,107,288描述了其中活性物質被支持在交聯高分子基質上的具有粒度為10到1,000nm的粒子的藥物製劑。美國專利5,145,684描述了藥物製劑的生產，其中在表面改性劑的存在下將藥物粉碎為納米粒子(平均粒度400nm)、然後分散在液體基質中，以得到表現出顯著高的生物利用度的藥物製劑。
所述的組合物通常由式I化合物與至少一種藥學可接受的賦形劑的組合組成。可藥用的賦形劑是無毒的、有助於給用、並且不會不利地影響本發明的化合物的治療學益處。這種賦形劑可以為本領域技術人員通常可得的所有固體，液體，半固體，或者在氣霧劑組合物的情況下為氣態賦形劑。
固體藥用賦形劑包括澱粉、纖維素、滑石、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明膠、麥芽、米、麵粉、白堊、矽膠、硬脂酸鎂、硬脂酸鈉、單硬脂酸甘油酯、氯化鈉、脫脂奶粉等。液體和半固體賦形劑可選自甘油、丙二醇、水、乙醇和多種油類，包括得自石油、動物、植物或合成來源的那些，如花生油、大豆油、礦物油、芝麻油等。優選的液體載體，特別是用於可注射溶液的液體載體，包括水、鹽水、右旋糖水溶液和二醇類。
壓縮氣體可用於將本發明的化合物分散為氣霧劑形式。適合用於這個目的的惰性氣體為氮氣、二氧化碳等。
其它適當的藥用賦形劑和它們的製劑描述於Remington’sPharmaceutical Sciences，由E.W.Martin編輯(Mack PublishingCompany，第18版，1990)。
製劑中化合物的量可以在本領域技術人員採用的整個範圍內變化。通常，製劑包含基於全部製劑為約0.01-99.99重量％的本發明的化合物，餘量為一種或多種適當的藥用賦形劑。優選地，化合物以約1-80重量％的水平存在。包含本發明的化合物的代表性的藥物製劑描述如下。
式I化合物可單獨給用，或與其它的式I化合物或與一種或多種其它活性成分組合給用。例如，式I的化合物可與獨立地選自凝血酶抑制劑、因子IXa和因子Xa抑制劑的其它一種或多種抗凝血劑組合使用。優選地，凝血酶抑制劑為在PCT申請公開WO94/29336和WO97/23499中公開的Inogatran、Melagatran或其前藥，所述專利公開的每一個被全文併入本文作為參考。可用於本發明的組合產品中的因子Xa抑制劑包括在Current Opinion in Therapeutic Patents，1993，1173-1179和國際專利申請WO00/20416、WO00/12479、WO00/09480、WO00/08005、WO99/64392、WO99/62904、WO99/57096、WO99/52895、WO99/50263、WO99/50257、WO99/50255、WO99/50254、WO99/48870、WO99/47503、WO99/42462、WO99/42439、WO99/40075、WO99/37304、WO99/36428、WO99/33805、WO99/33800、WO99/32477、WO99/32454、WO99/31092、WID99/26941、WO99/26933、WO99/26932、WO99/26919、WO99/26918、WO99/25720、WO99/16751、WO99/16747、WO99/12935、WO99/12903、WO99/11658、WO99/11617、WO99/10316、WO99/07732、WO9/07731、WO99/05124、WO99/00356、WO99/00128、WO99/00127、WO99/00126、WO9/00121、WO98/57951、WO98/57937、WO98/57934、WO98/54164、WO98/46591、WO98/31661、WO98/28282、WO98/28269、WO98/25611、WO98/24784、WO98/22483、WO98/16547、WO98/16525、WO98/16524、WO98/16523、WO98/15547、WO98/11094、WO98/07725、WO98/06694、WO98/01428、WO7/48706、WO97/46576、WO97/46523、WO97/38984、WO97/30971、WO97/30073、WO97/29067、WO97/24118、WO97/23212、WO97/21437、WO97/08165、WO97/05161、WO96/40744、WO96/40743、WO96/40679、WO96/40100、WO96/38421、WO96/28427、WO96/19493、WO96/16940、WO95/28420、WO94/13693、WO00/24718、WO99/55355、WO99/51571、WO99/40072、WO99/26926、WO98/51684、WO97/48706、WO97/24135、WO97/11693、WO00/01704、WO00/71493、WO00/71507、WO00/71508、WO00/71509、WO00/71511、WO00/71512、WO00/71515、WO00/71516、WO00/13707、WO00/31068、WO00/32590、WO00/33844、WO00/35859、WO00/35886、WO00/38683、WO00/39087、WO00/39092、WO00/39102、WO00/39108、WO00/39111、WO00/39117、WO00/39118、WO00/39131、WO00/40548、WO00/40571、WO00/40583、WO00/40601、WO00/47207、WO00/47553、WO00/47554、WO00/47563、WO00/47578、WO00/51989、WO00/53264、WO00/59876、WO00/59902、WO00/71510、WO00/76970、WO00/76971、WO00/78747、WO01/02356、WO01/02397、WO01/05784、WO01/09093、WO01/12600、WO01/19788、WO01/19795、WO01/19798、WO93/15756、WO94/17817、WO95/29189、WO96/18644、WO96/20689、WO96/39380、WO97/22712、WO97/36580、WO97/36865、WO97/48687、WO98/09987、WO98/46626、WO98/46627、WO98/46628、WO98/54132、WO99/07730、WO99/33458、WO99/37643和WO99/64446；在美國專利6,034,093、6,020,357、5,994,375、5,886,191、5,849,519、5,783,421、5,731,315、5,721,214、5,693,641、5,633,381、5,612,378、6,034,127、5,670,479、5,658,939、5,658,930、5,656,645、5,656,600、5,639,739、5,741,819、6,057,342、6,060,491、6,080,767、6,087,487、6,140,351、6,395,731和5,646,165；在日本專利申請JP99152269、JP10017549、JP10001467、JP98017549、JP00178243、JP11140040、JP12143623、JP12204081、JP12302765、JP6327488和JP98001467；在歐洲專利申請EP937723、EP937711、EP874629、EP842941、EP728758、EP540051、EP419099、EP686642、EP1016663和EP529715；和在德國專利申請DE19845153、DE19835950、DE19743435、DE19829964、DE19834751、DE19839499、DE19900355、DE19900471和DE19530996中描述的那些，所有上述參考文獻的具體和一般的公開被併入本文作為參考。
因子Xa抑制劑包括在國際專利申請WO96/10022、WO97/28129、WO97/29104、WO98/211 88、WO99/06371、WO99/57099、WO99/57112、WO00/47573、WO00/78749、WO99/09027和WO99/57113中公開的那些，所有參考文獻的具體和一般的公開都被併入本文作為參考，以及4-{4-[4-(5-氯吲哚-2-基磺醯基)哌嗪-1-羰基]苯基}-吡啶-1-氧化物及其可藥用衍生物。優選的因子Xa抑制劑包括antistatin；蜱源抗凝血蛋白；和已知為SQ-311和SQ-315(參見國際專利申請WO98/57951)，SN-292(參見國際專利申請WO98/28282)，SN-429和SN116(參見國際專利申請WO98/28269)，RPR-208707(參見國際專利申請WO98/25611，實施例48)，XU-817(參見國際專利申請WO98/01428)，SF-324和SF-303(參見國際專利申請WO97/23212)，YM60828(參見國際專利申請WO96/16940，實施例75)，FACTOREX(參見US專利5,783,421)，SF-324(參見歐洲專利申請EP874629)，DX9065A(參見歐洲專利申請EP540051，實施例39)，1-(4-甲脒基苄基)-4-(6-氯萘-2-基磺醯基)-哌嗪-2-酮(參見JP12204081，實施例2)，M55555(參見國際專利申請WO99/33805，實施例39)，DPC423(1-(3-甲脒基苯基)-2-(2′-氨基磺醯基[1，1′-聯苯]-4-基氨基羰基)-4-溴吡咯(參見國際專利申請WO98/28269)，3-(3，5-二氟-6-[3-(4，5-二氫-1-甲基-咪唑-2-基)-苯氧基]-4-[2，3-二羥基-丙氧基]-吡啶-2-基氧基)-4-羥基-苄脒(參見國際專利申請WO00/31068)，ZK-807834(參見國際專利申請WO7/29067)，1，4-二氮雜-4-(6-氯萘-2-基磺醯基)-6-(甲氧基甲基)-7-氧雜-1』-(吡啶-4-基)-螺[雙環-[4-3.0]-壬烷-8，4′-哌啶]-2-酮(參見國際專利申請WO01/02397)，(S)-1-(4-氨基喹唑啉-7-基甲基)-4-[2-(5-氯噻吩-2-基氧基)-乙醯基]-3-甲氧基-甲基哌嗪-2-酮(參見國際專利申請WO00/32590)，3-(2-[4-(2-氨基磺醯基-苯基)苯甲醯基苯氧基)-苄脒(參見國際專利申請WO01/19788)，和4-(2-[4-(5-氯吲哚-2-基-磺醯基)-2-(吡咯烷-1-基-羰基甲基)哌嗪-1-基-羰基]-噻唑-5-基)吡啶N-氧化物(參見日本專利申請JP12143623)的那些；以及國際專利申請WO98/21188的實施例7的化合物，WO99/57113的實施例3和6的化合物，國際專利申請WO00/78747的實施例6的化合物，US專利6,080,767的實施例188、211和167的化合物，國際專利申請WO99/33805的實施例40、54和55的化合物，國際專利申請WO01/05784的實施例5、6、8、9、10、11、12、13、15、16和17的化合物，國際專利申請WO01/12600的實施例6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、22、23、25、26、28、29、30、31、32、33、34、38、39、40、41、42和43的化合物，和國際專利申請WO00/35886的實施例802和877的化合物。可用於組合治療的其它抗凝血劑為在美國治療申請20020065303、20020061842、20020058677、20020058657、20020055522、20020055469、20020052368、20020040144、20020035109、20020032223、20020028820、20020025963、20020019395、20020019394、20020016326、20020013314、20020002183、20010046974、20010044537、20010044536、20010025108、20010023292、20010023291、20010021775、20010020020033、20010018423、20010018414和20010000179中公開的那些，其都被全文併入本文作為參考。
用於給用美拉加群及其衍生物(包括前藥)的適當的製劑在文獻中有所描述，如特別在WO94/29336、WO96/14084、WO96/16671、WO97/23499、WO97/39770、WO97/45138、WO98/16252、WO99/27912、WO99/27913、WO00/12043和WO00/13671中所述的，每個文獻的公開都被併入本文作為參考。
同樣地，用於給用因子Xa抑制劑及其衍生物(包括前藥)的適當的製劑在文獻中有所描述，例如在上述的與因子Xa抑制劑有關的現有技術文獻中描述，每種文獻的公開都被併入本文作為參考。另外，適當的製劑(特別是包括美拉加群/衍生物和因子Xa抑制劑/衍生物的組合製劑)的製備可以通過本領域技術人員使用常規技術無需付出創造性的勞動而實現。美拉加群、因子Xa抑制劑或二者中任一種的衍生物在各自製劑中的量根據狀況的嚴重程度和被治療的患者及採用的化合物而定，但是可由本領域技術人員無需付出創造性的勞動而確定。
美拉加群、因子Xa抑制劑和二者中任一種的衍生物在用於哺乳動物(特別是人類患者)的治療性和/或預防性治療時適當的劑量通常可由職業醫師或其它技術人員決定，並且包括在涉及美拉加群(或其衍生物(包括前藥))、涉及上述的因子Xa抑制劑的現有技術文獻中討論的各自的劑量，每個文獻的公開都被併入本文作為參考。
實施例除非另有說明，所有的溶劑和試劑購自Aldrich並且直接使用。所有的反應和產物都使用HPLC分析，採用裝備有二極體陣列檢測器和Phenomenex Prodigy 5μODS-3100A柱、150mm×3.0mm ID[Phenomenex商品目錄#00D4096-Y0]的Agilent HPl 100系統。色譜分離在40℃的柱溫下進行，化合物檢測同時在214和254nm進行。採用梯度洗脫，使用乙腈-水流動相系統，TFA作為酸緩衝劑，通常為5-10分鐘的梯度。反應產物和試劑的含水量分析用EM-Science型號V-200 AQUASTAR容量Karl Fischer滴定器測量。用Robertson MicrolitLaboratories，Inc.，Madison，NJ進行燃燒分析。
參考A(3-溴-5-甲醯基-4-羥基苯基)乙酸甲酯的合成 方法A步驟1向裝備有懸臂式攪拌器、冷凝管、熱電偶和加熱套的12L圓底燒瓶中加入4-羥基苯基乙酸甲酯(302g，1.82mol)和乙腈(3L)。將反應混合物攪拌直至固體溶解，然後加入三乙胺(1015mL，737g，7.28mol)。然後在5分鐘內分批加入無水氯化鎂(346g，3.63mol)，這導致內部溫度增加至～55℃。將反應混合物加熱至回流(內部溫度68℃)持續1h，形成具有一些懸浮白色固體的褐色溶液。加入多聚甲醛(382g，12.7mol，Aldrich目錄編號44，124-4)並持續加熱16-24小時，直到HPLC-UV分析表明＞95％的4-羥基苯基乙酸甲酯被消耗。反應混合物用乙醚(3L)稀釋，並加入1N的HCl水溶液(3L)，使鎂鹽溶解。分層並且將有機相用1N的HCl水溶液和隨後用飽和氯化鈉水溶液洗滌。將有機相干燥(Na2SO4)並濃縮給出(3-甲醯基-4-羥基苯基)乙酸甲酯(308g；87.3％)，為琥珀色油狀物。
步驟2向裝備有磁力攪拌器、熱電偶和冰水浴的2L圓底燒瓶中加入(3-甲醯基-4-羥基苯基)乙酸甲酯(308g，1.59mol)和N，N-二甲基甲醯胺(1L)。攪拌反應混合物並冷卻至-5至5℃。以可保持內部溫度5-10℃的速度滴加N-溴代琥珀醯亞胺(311g，1.75mol)的DMF溶液(1.5至2L)。一旦滴加完成，將反應混合物溫熱至室溫並通過HPLC分析監控反應完成。反應時間為約4h。反應混合物用乙酸異丙酯(3L)稀釋，形成的溶液用水提取以除去DMF。濃縮有機相給出微紅色固體，將其溶解於熱異丙醇(400mL)並使其在攪拌下冷卻。將得到的灰白色結晶產物過濾並用冷的IPA(-20℃；400mL)洗滌，得到(3-溴-5-甲醯基-4-羥基苯基)乙酸甲酯(368 g，84.7％)，為灰白色結晶。
方法B(3-溴-5-甲醯基-4-羥基苯基)乙酸甲酯的替代合成方法步驟1向配備有懸臂式攪拌器、溫度計、回流冷凝管和N2管的3L三頸圓底燒瓶加入(4-羥基苯基)乙酸甲酯(Aldrich；166.2g，1.00mol)和乙腈(1000mL)。向攪拌中的溶液一次性加入三乙胺(121.4g，1.20mol，1.2當量)，然後在15分鐘內分批加入氯化鎂(98％w/w；115.2g，1.10mol，1.1當量)。將反應混合物攪拌20分鐘，然後加熱至75℃持續1h，這期間鎂鹽溶解。在30min內分批加入多聚甲醛(95％w/w的顆粒；Aldrich#44，124-4；63.2g，2.00mol，2.00當量)。加熱至80℃持續2h後，發現反應不完全並因此分批加入更多的多聚甲醛(6.00g，0.20mol，0.2當量)。2h後，原位濃縮反應混合物(T內≤70℃，約30-40託)至其原始體積的約1/3，然後冷卻至室溫。在幾分鐘內加入水(500mL)並形成粘稠黃色漿狀物。恢復至～30℃，分批加入濃磷酸(85％w/w；230.7g，2.00mol)並劇烈攪拌混合物。大部分固體溶解，在冷卻後(T內～20℃)，一次性加入乙酸異丙酯(500mL)。劇烈攪拌化合物直至所有的固體溶解並清晰分層。將溶液轉移至分液漏鬥中將水層分出。有機層用水和濃磷酸(115g，1.00mol)的混合物洗滌，分離出含有3-甲醯基-4-羥基苯基乙酸甲酯和4-羥基苯基乙酸甲酯的有機層並應用於下步中。
步驟2將含有3-甲醯基-4-羥基苯基乙酸甲酯和4-羥基苯基乙酸甲酯的混合物的溶液(總體積～900mL，包含500mL乙酸異丙酯與～300mL乙腈)轉移回原來的反應容器中並加入乙腈(900mL)。將反應物攪拌並加熱至60℃，向攪拌的反應物中一次性加入溶解於水(175mL)的亞硫酸氫鈉(NaHSO3；Aldrich#24，397-3，58.5％SO2；109.4g，1.00mol)混合物並繼續加熱。在5分鐘內，形成白色沉澱。16小時後將反應混合物逐漸冷卻至T內～5℃。收集沉澱並將濾餅用冷的1∶1乙腈-乙酸異丙酯洗滌，乾燥給出4-羥基-3-(羥基磺醯甲基)苯基]乙酸甲酯的鈉鹽(208g，70％)。
步驟3將4-羥基-3-(羥基磺醯甲基)苯基]乙酸甲酯的鈉鹽(205.2g，0.688mol)在室溫下溶解於水(2L)中並攪拌。一次性加入濃磷酸(400mL)，混合物在數分鐘內變混濁。將反應混合物用二氯甲烷提取並且將合併的提取液濃縮，產生(3-甲醯基-4-羥基苯基)乙酸甲酯(112g，58％)，如描述於上的方法A，步驟2那樣將其轉化為目標化合物。
參考B3，4-二氨基苄脒單鹽酸鹽的合成
步驟1將在1，4-二氧雜環己烷(600mL)中的4-氨基-3-硝基苄腈(63.3g，388mmol)和無水乙醇的混合物在冰水浴中冷卻至0-5℃並用HCl氣體處理1.5h。將反應混合物嚴密密封並使其溫熱至室溫並同時攪拌18h。然後將燒瓶小心地解除密封並將反應混合物用無水乙醚(約2.4L)稀釋直至獲得混濁溶液。然後加入可以使溶液澄清的最小量的絕對乙醇，攪拌形成的溶液直至觀察到4-氨基-3-硝基-亞氨代苯甲酸(benzimidic)乙酯。然後小心地加入乙醚以使結晶過程完全，並將懸浮液靜置約30分鐘。將結晶過濾並用無水乙醚洗滌，然後在真空抽氣下乾燥。在真空下乾燥結晶，給出4-氨基-3-硝基-亞氨代苯甲酸乙酯的鹽酸鹽(84.6g)，為灰白色結晶。
步驟2將4-氨基-3-硝基-亞氨代苯甲酸乙酯的鹽酸鹽(84.5g，344mmol)懸浮於絕對乙醇(750mL)中然後冷卻至0℃。然後向溶液通氨氣2h。將燒瓶嚴密密封並在攪拌下溫熱至室溫18h。用乙醚結晶產物並將形成的固體過濾，洗滌並乾燥，給出4-氨基-3硝基苄脒單鹽酸鹽(70.7g)，為灰白色粉末。
步驟3將4-氨基-3硝基苄脒單鹽酸鹽(15g，69mmol)和Pearlman’s催化劑(Pd(OH)2，1.0g，7.12mmol)的甲醇懸浮液(200mL)在50psi的氫氣氛下振搖1.5h，將懸浮液經硅藻土過濾並將濾液滴加至無水乙醚(400mL)中以沉澱出3，4-二氨基苄脒單鹽酸鹽，為棕褐色固體。
參考CN-叔丁基-4-甲氧基-5-(苯磺醯氨基)-3-硼酸的合成
步驟1將2-碘苯甲醚(221.2g，966mmol)的二氯甲烷(2.3L)溶液冷卻至0℃，並在攪拌下於15分鐘內滴加氯磺酸(64.5mL，112.6g，966mmol)。將反應混合物經過3h溫熱至10℃。將氮氣通過溶液並將氣體出口鼓泡通過氫氧化鈉水溶液以洗滌反應產生的氣態氯化氫。小份的反應物用HPLC分析，其顯示出2-碘苯甲醚已經消耗。將反應混合物用五氯化磷(217.8g，1.045mol)處理並在室溫下攪拌2h。在真空下將反應混合物濃縮以除去大部分揮發性組分，然後在浴溫100℃下進一步濃縮以除去反應中產生的POCl3。將所形成的油狀殘餘物溶解於CH2Cl2(2.8L)中，並將該溶液與水(3L)攪拌，同時加入固體碳酸氫鈉以保持pH約為7。分層並將有機層冷卻至0℃，以保持內部溫度≤10℃的速度加入叔丁基胺(230mL，160g)。將反應混合物溫熱至室溫過夜，然後用5％氫氧化鈉洗滌。在真空下濃縮有機相給出N-叔丁基-3-碘-4-甲氧基苯磺醯胺(340g)，為灰白色固體。
步驟2將N-叔丁基-3-碘-4-甲氧基苯磺醯胺(335g，907mmol)溶解於二氯甲烷(3L)中並將形成的溶液冷卻至內部溫度為-20℃。用3.0M的甲基溴化鎂的乙醚溶液(308mL，925mmol)在0.5h內滴加處理該溶液以保持燒瓶內部溫度為-20±5℃。將該反應混合物在-20±5℃下攪拌2.5h，然後在約-35℃下加入2.13M的異丙基溴化鎂的乙醚溶液(511mL，1.09mol)。在-35±5℃下攪拌所形成的溶液1.5h。將反應混合物溫熱至0℃並加入另外的異丙基溴化鎂的乙醚溶液(86.0mL，183mmol)。在0℃下攪拌反應混合物2h，然後加入另外一份異丙基溴化鎂的乙醚溶液(25.0mL；53.3mmol)。用含硼酸三甲酯(320mL；2.90mol)的THF(175mL)一次性處理該反應混合物，導致溫度上升至27℃。將反應混合物在該溫度下攪拌4h，然後傾倒入水(1.3L)中，並加入85％磷酸直至溶液pH為2。分層並將有機相用1.5N的NaOH水溶液(2L)，隨後用1％的NaOH水溶液(2L)洗滌。合併的水相用磷酸酸化至pH為2並將得到的酸性溶液用9∶1的二氯甲烷/THF溶液(2L隨後用1L)提取。乾燥有機相(Na2SO4)，過濾並在真空下濃縮給出250g白色固體，其被溶解於乙醇(1L)中。用水稀釋該溶液給出總體積為4L，將形成的溶液在室溫下攪拌過夜。將形成的結晶固體過濾並在真空下乾燥過夜給出N-叔丁基-4-甲氧基-5-(苯磺醯氨基)-3-硼酸(221g)，為白色固體，其為二水合物(近似)。濾液用9∶1的二氯甲烷/THF溶液提取並將提取物濃縮。將粗固體(23g)從3∶1的水/乙醇溶液(500mL)中重結晶給出另外19g產物，為白色固體。
參考D(5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-甲醯基-2』-甲氧基-6-甲氧基乙氧基甲氧基聯苯-3-基)乙酸甲酯的合成 步驟1向5L圓底燒瓶中加入(3-溴-5-甲醯基-4-羥基-苯基)乙酸甲酯(210g，769mmol，在上述參考A中製備)、二氯甲烷(2L)和N，N-二異丙基乙胺(161mL，119g，923mmol)。經過加料漏鬥在2h內滴加2-甲氧基乙氧基甲基氯(氯化MEM，得自TCI America；106mL；923mmol)的二氯甲烷溶液(500mL)。將反應物在室溫下攪拌過夜，之後HPLC分析表明反應完全。反應混合物用0.5N的HCl水溶液(1L)稀釋並將該溶液在室溫下攪拌0.25h，然後分層。有機層用另外的0.5N的HCl水溶液，和隨後用飽和氯化鈉水溶液(1L)洗滌。真空下濃縮有機層給出油狀物，放置後固化。該固體可以從乙酸乙酯和己烷中結晶，得到[3-溴-5-甲醯基-4-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)苯基]乙酸甲酯(237g)，為無色固體。
步驟2向裝備有機械攪拌器、加熱套和回流冷凝管的12L圓底燒瓶中加入[3-溴-5-甲醯基-4-(2-甲氧基乙氧基甲氧基)-苯基]乙酸甲酯(215g，595mmol)、N-叔丁基-4-甲氧基-5-(苯磺醯氨基)-3-硼酸(184.5g，643mmol)、N，N-二異丙基胺(275mL，1.79mol)和THF(4L)。攪拌該溶液，真空下脫氣並放置於氮氣氛中。然後一次性加入PdCl2(dppf)·二氯甲烷複合物(4.86g，5.95mmol)並將該溶液加熱至70℃持續16h。將反應混合物冷卻至室溫然後濃縮以除去大部分THF(3.5L)。殘餘物用乙酸乙酯(4L)稀釋並用5％碳酸鉀的水溶液(3.0L)洗滌，隨後用鹽水(2.0L)洗滌。將DARCO-60活性炭(8g)加入到有機相中並在室溫下將形成的懸浮液攪拌4h。溶液經硫酸鈉(200g)乾燥後，然後該有機層通過覆蓋有硅藻土(300g)、矽膠(300g)和硅藻土(300g)層的燒結過濾器過濾。濾餅用95∶5的二氯甲烷/甲醇(1L)洗滌並將得到的溶液在真空下濃縮，給出包含甲醇的粗(5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-甲醯基-2』-甲氧基-6-甲氧基乙氧基甲氧基聯苯-3-基)乙酸甲酯(～12g)，為油狀物，其不用進一步純化而直接用於下步中。
參考E4-苄氧基-N-叔丁基-3-硼酸-苯磺醯氨基的合成 方法A步驟1向1L的圓底燒瓶中加入2-碘苯酚(50g)和硝基甲烷(250mL)並將反應混合物冷卻至0℃。滴加發煙硫酸(42mL，30％SO3)並將反應混合物溫熱至室溫。2h後，反應完成並將其傾倒入水(400mL)中並用乙酸乙酯(200mL)洗滌。然後將有機層用水(300mL)反提取並濃縮成油狀物並與原來的水層合併。然後水層用5M氫氧化鈉水溶液中和(300mL)並轉移至2L圓底燒瓶中。然後加入氫氧化鈉粒(11g)、乙醇(150mL)和溴苄(50mL)並將反應混合物加熱至油浴溫度82℃並攪拌16h。反應完全後，通過真空蒸餾除去乙醇，導致產物從溶液中沉澱出來。然後將產物過濾並於高真空下乾燥給出4-苄氧基-3-碘-苯磺酸(61g，70％產率)。
步驟2向2L的圓底燒瓶中加入4-苄氧基-3-碘-苯磺酸(49.87g)和二氯甲烷(1000mL)。攪拌該懸浮液並加入五氯化磷(53g)，導致反應物變成溶液。將反應混合物在40℃下加熱1h，然後緩慢加入氫氧化鈉水溶液(400mL，20％)並攪拌直至水溶液pH為7。分離有機層並與50％飽和碳酸氫鈉水溶液(125mL)攪拌30分鐘(pH10)。分離有機層，用無水硫酸鈉乾燥，倒入2L圓底燒瓶中並加入叔丁基胺(34mL)，16h後，將反應混合物用5％氫氧化鈉水溶液鹼化至pH13-14。分兩批分離有機層並將其濃縮成固體，然後將該固體在50℃下在乙酸異丙酯中成淤漿，冷卻，過濾給出4-苄氧基-N-叔丁基-3-碘-苯磺醯胺(46g，80％產率)。
步驟3向1L圓底燒瓶中加入4-苄氧基-N-叔丁基-3-碘-苯磺醯胺(32g)和二氯甲烷(320mL)，將反應混合物攪拌並冷卻至-20至-25℃。滴加甲基溴化鎂(24.4mL，3M，在乙醚中)。將反應混合物攪拌2h然後冷卻至-35至-40℃。滴加異丙基溴化鎂(54mL，2.13M，在乙醚中)。然後加入四氫呋喃(17mL)和硼酸三甲酯(6mL)，導致白色固體沉澱，升高反應混合物的內部溫度至0℃。將反應混合物溫熱至室溫並在12h後加入磷酸(250mL，1M，在500mL水中)。分離有機層並用2.5％的氫氧化鈉水溶液(500mL)鹼化導致一些產品沉澱。仍保留一些沉澱固體的水層然後用濃磷酸酸化至pH為2並用10％的四氫呋喃的二氯甲烷溶液提取。固體保持於有機相中，然後將有機相濃縮以給出白色固體，然後將該固體在1L水中成淤漿30分鐘。將該固體過濾並在高真空下乾燥給出4-苄氧基-N-叔丁基-3-硼酸-苯磺醯胺(23g，88％產率)。
方法B目標化合物的替代合成方法步驟13L三頸圓底燒瓶配備有懸臂式攪拌器、溫度計、N2管線、250mL恆壓滴液漏鬥和通到NaOH溶液的出氣洗滌器。用N2充滿燒瓶並裝入2-碘苯酚(Alfa Aesar；201.95，0.918mol)和無水二氯甲烷(920mL)。建立柔和的N2流通過反應頂部空間，然後將反應容器浸入冰鹽浴中並冷卻至-5℃。向滴液漏鬥中加入無水二氯甲烷(175mL)，然後加入氯磺酸(Aldrich；106.96g，0.918mol，1.00當量)，形成的混合物用聚四氟乙烯棒攪拌。然後將稀釋的氯磺酸溶液在約90min內滴加到反應混合物中。粘稠的粉色漿液隨著滴加而形成。全部加入後30分鐘，移去冰浴並將反應混合物在室溫下攪拌。2h後將反應混合物浸入冷水浴中並向該反應混合物中在幾分鐘內加入水(500mL)。將得到的反應混合物劇烈攪拌直至在沉降時形成兩相/均質物。將該混合物與水一起轉移到分液漏鬥中並用二氯甲烷提取。包含4-羥基-3-碘苯磺酸的水層轉移回原來的反應容器中用於下一步。
步驟2向劇烈攪拌中的4-羥基-3-碘-苯磺酸的水溶液中分批加入氫氧化鈉(小球，110g，2.75mol，3.00當量)。全部加入後10-15分鐘，加入異丙醇(150mL)形成白色懸浮液。向滴液漏鬥中加入溴苄(Aldrich；164.9g，0.964mol，1.05當量)並在約5分鐘內加入到反應混合物中，將反應混合物加熱至80℃≤T內≤84℃。約25分鐘後，確定反應沒有進一步進行並因此向反應混合物中加入另外的氫氧化鈉(3.67g，91.8mmol，0.1當量)和隨後加入溴苄(15.7g，91.8mmol，0.1當量)以給出均勻的溶液。70分鐘後，隨著原始的溴苄的加入，停止加熱並使反應在油浴中攪拌下緩慢冷卻。在7.5h，反應混合物顯示出細的反光沉澱物在棕色液體中的懸浮液。用3∶1的水-硫酸將反應混合物從pH13酸化至pH7.5和8之間(約需70mL)。然後將反應混合物逐漸冷卻至約5℃並在此溫度下攪拌～1h。通過過濾收集蠟狀白色小塊，用二氯甲烷洗滌並在高真空下乾燥(冷凍乾燥機，100-200毫託)約24h，給出4-苄氧基-3-碘苯磺酸鈉，為閃光的白色結晶固體(267.7g，71％)。
步驟33L三頸圓底燒瓶配備有懸臂式攪拌器、回流冷凝管(裝備有通向NaOH淨化溶液的氣體出口)和裝備有N2管線的恆壓滴液漏鬥。將燒瓶用N2充滿，加入4-苄氧基-3-碘苯磺酸鈉(234g，0.568mol)、二氯甲烷(1.15L)和催化量的二甲基甲醯胺(910mg，11.7mmol，2.1mol％)。在柔和的氮氣流下攪拌該白色懸浮液並在油浴裝置中加熱至40-45℃之間。然後在3-5min內加入草醯氯(90.1g，0.710mol，1.25當量)。2.5h後將反應在冷水浴中冷卻至25℃然後通過在約5min內滴加水(60mL)淬滅。一次性加入另一部分水(450mL)並劇烈攪拌反應混合物5-10min。分離有機相併用水洗滌直至水層的pH上升至pH為4-5。得到的4-苄氧基-3-碘-苯磺酸鈉的二氯甲烷溶液用於下步中。
步驟43L三頸圓底燒瓶配備有懸臂式攪拌器、溫度計和恆壓滴液漏鬥，恆壓滴液漏鬥中加有4-苄氧基-3-碘-苯磺醯氯的溶液。將燒瓶浸於冷水浴中(T內＝22℃)並滴加叔丁基胺(90.1g，0.710mol，2.1當量)(T內不變)。得到的反應混合物在環境水浴溫度下攪拌過夜。17h後，處理反應混合物，分離有機相併濃縮至其初始體積的約1/3(～500mL)，這時產物開始沉澱。將反應混合物在常壓下溫熱至35-40℃直至固體重新溶解。然後使溶液在小心地攪拌下冷卻至室溫。2天內形成白色沉澱。劇烈攪拌懸浮液同時緩慢加入己烷(1.5L)，攪拌過夜，然後在冰浴中冷卻1-2h。過濾收集沉澱物並用己烷洗滌，乾燥，首先在抽氣泵下給出4-苄氧基-N-叔丁基-3-碘-苯磺醯胺(238，94％)。
步驟52L三頸圓底燒瓶配備有懸臂式攪拌器、溫度計、恆壓滴液漏鬥和N2管線。用N2充滿燒瓶然後加入4-苄氧基-N-叔丁基-3-碘-苯磺醯胺(198.6g，0.446mol)和二氧甲烷(600mL)。在柔和的氮氣流下攪拌該白色懸浮液並在冰水浴中冷卻(0℃≤T內≤5℃)。將甲基溴化鎂(Aldrich；3.0M，在乙醚中，167g，～171mL，0.513mol，1.15當量)加入滴液漏鬥中，將其以可保持T內＜5℃(必要時向冰浴中加入鹽)的速度滴加至懸浮液中，在加入～1/3時得到無色均勻混合物。滴加完畢後，將異丙基溴化鎂(Boulder Scientific；2.13M，在乙醚中；250mL，0.533mol，1.2當量)加入到滴液漏鬥中，將其以可保持T內＜5℃的速度滴加至反應混合物中。滴加完畢後，反應混合物攪拌15-20min。移去滴液漏鬥並換上隔膜和插管，將反應混合物在2小時內轉移到3L三頸圓底燒中，該燒瓶中裝有硼酸三甲酯(106.6g，1.03mol，2.30當量)和四氫呋喃(600mL)的溶液並保持在氮氣氛中，利用冰水浴保持在T內＜5℃。加料完成後，將溶液在＜5℃下攪拌30分鐘。然後轉移到分液漏鬥中並用等體積量的2∶1(水∶磷酸)溶液洗滌。有機層經硫酸鈉乾燥。向該溶液中加入乙酸乙酯並將合併的有機相濃縮，給出4-苄氧基-N-叔丁基-3-硼酸-苯磺醯胺(129g，80％)。
參考F(4-苄氧基-3-溴-5-甲醯基-苯基)乙酸甲酯的合成 向裝備有聚四氟乙烯攪拌棒和回流冷凝管的250mL的圓底燒瓶中加入(3-溴-5-甲醯基-4-羥基苯基)乙酸甲酯(23.3g，85.3mmol，如上述參考A中所述的那樣製備)、二氯甲烷(100mL)、溴苄(15.32g，10.64mL，89.59mmol)和N-乙基二異丙基胺(11.6g，15.6mL，89.5mmol)。將反應混合物加熱至回流14h，然後冷卻至室溫。加入二氯甲烷(100mL)並分離有機層，用3％的NaOH水溶液(200mL)洗滌有機層。濃縮有機層，給出(4-苄氧基-3-溴-5-甲醯基-苯基)乙酸甲酯(30.65g)，為油狀物。
實施例1(S)-2-{2-[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基聯苯-3-基]乙醯氨基}琥珀酸的合成 方法A步驟1向裝備有攪拌棒的12L圓底燒瓶中加入(5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-甲醯基-2』-甲氧基-6-甲氧基乙氧基甲氧基聯苯-3-基)乙酸甲酯(324.3g)、甲醇(5.2L)，隨後滴加濃HCl水溶液(0.29L)以保持燒瓶的內部溫度低於25℃。室溫下攪拌反應混合物過夜，其間產物從溶液中沉澱出來。將反應混合物冷卻至-20℃，過濾並且然後用另一份已經預先冷卻至-25℃的甲醇(750mL)洗滌。將得到的灰白色固體在真空下乾燥，給出[(5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-甲醯基-6-羥基-2』-甲氧基)聯苯-3-基]乙酸甲酯(205g)。
步驟2向裝備有機械攪拌器和加熱套的12L圓底燒瓶中加入[(5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-甲醯基-6-羥基-2』-甲氧基)聯苯-3-基]乙酸甲酯(200.8g，461mmol)、異丙醇(2.3L)和溶解於水(0.21L)中的偏亞硫酸氫鈉(106.4g，553mmol)。將形成的懸浮液加熱至60℃持續2.5h。加入3，4-二氨基苄脒單鹽酸鹽(115.2g，617mmol)並然後使空氣流循環通過燒瓶。0.25h後溶液變為橙色並變均勻。1h後，通過HPLC分析顯示反應完成70％，但需要約18h的反應時間以導致沉澱產品完全。將反應混合物冷卻至室溫並過濾。用異丙醇(1L)洗滌固體並在真空室中乾燥以給出[(5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6-羥基-2』-甲氧基聯苯-3-基]乙酸甲酯(264g)，為芥末色固體。
步驟3向3L圓底燒瓶中加入[5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6-羥基-2』-甲氧基聯苯-3-基]乙酸甲酯(49.9g，82.9mmol)和三氟乙酸(770mL)。將反應混合物在室溫下攪拌1.5h，然後在真空下濃縮。向凝膠狀殘餘物中加入甲醇(1L)並將溶液再次濃縮，然後高真空下乾燥過夜。將乾燥的固體產物轉移到裝備有Dean-Stark分水器、攪拌軸和氮氣入口的3L三頸圓底燒瓶中。將燒瓶用氮氣充滿，然後加入吡啶鹽酸鹽(412g，3.57mol)和甲苯(100mL)。在回流下加熱反應混合物以從吡啶鹽和溶劑中除去殘餘的水。將溶液加熱至150℃以熔化吡啶鹽酸鹽，之後在0.5h內將溫度上升至180℃。1.5h後將溶液在氮氣正壓下冷卻直至其固化並達到室溫。加入水(3L)並將溶液在室溫下攪拌過夜。將反應混合物過濾並用水(200mL)和異丙醇(100mL)洗滌固體。在真空室中乾燥固體過夜，形成[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基-聯苯-3-基]乙酸(38.15g)，其被約4％的硫酸汙染。
-乙酸的替代合成在無水乙醚(200mL)中的吡啶(69.0g，70.4mL，0.87mol)用在二氧雜環己烷(250mL，1.0mol)中的4M HCl處理直至鹽沉澱完全。通過蒸發除去過量溶劑並加入甲苯(500mL)。用Dean-Stark分水器回流該反應混合物2-3h。冷卻後，儘可能使甲苯蒸發完全並將包含固體吡啶鹽酸鹽的燒瓶浸入到油浴中在180-185℃下加熱並使其熔融。熔融的吡啶鹽酸鹽在180-185℃下加熱30-60分鐘，同時接上乾燥管。接著，將熔融的鹽一次性在適中的攪拌下用[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6-羥基-2』-甲氧基-5』-氨磺醯基-聯苯-3-基]乙酸甲酯(25.0g，29.4mmol)(得自TFA處理[5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6-羥基-2』-甲氧基聯苯-3-基]乙酸甲酯)處理。將熱溶液伴隨著攪拌加熱60-90分鐘直至通過HPLC分析反應完全。冷卻後，將固體混合物溶於水(800mL)中並攪拌過夜。將形成的固體過濾並在真空下乾燥，給出[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基-聯苯-3-基]乙酸(13-14g)，包含～1-2％的磺酸雜質。
步驟4向磁力攪拌的[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基-聯苯-3-基]乙酸(14.0g，27.1mmol)的N，N-二甲基乙醯胺的溶液(125mL)中在0℃下加入N-甲基嗎啉(5.95mL，54.2mmol)、EDC(5.71g，29.8mmol)和HOBt(4.00g，29.8mmol)。將反應混合物在0℃下攪拌0.5h。向反應混合物中加入H-Asp-(OBn)-Obn·HCl(10.4g，29.8 mmol)的DMA溶液(25mL)並將形成的溶液在室溫下攪拌12h。將溶液在高真空下濃縮，保持水浴溫度低於50℃以除去大部分DMA。將殘存的油狀物懸浮於乙腈(150mL)中並將反應混合物在室溫下攪拌0.5h，之後產物從溶液中沉澱出來。將固體通過過濾除去並用乙腈洗滌。將固體懸浮於飽和碳酸氫鈉水溶液(150mL)中，在室溫下攪拌0.5h，然後過濾。然後將形成的固體懸浮於10mM的HCl水溶液(150mL)中並在室溫下攪拌0.5h。將懸浮液過濾並乾燥給出(S)-2-{2-[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基聯苯-3-基]乙醯氨基}琥珀酸二苄酯(18g)，通過HPLC分析其純度為80-90％。將該粗(S)-2-{2-[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基聯苯-3-基]乙醯氨基}琥珀酸二苄酯直接用於下步而不必進一步純化。
步驟5將粗(S)-2-{2-[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基聯苯-3-基]乙醯氨基}琥珀酸二苄酯(18g)在超聲幫助下溶於1∶1的乙酸和水的混合物(800mL)中。向該溶液中加入碳載氫氧化鈀(Pearlman’s催化劑，基於乾重為20wt％的Pd，包含50重量％水；7.0g)。反應混合物用氫加壓至30psi並將該懸浮液在Parr裝置上振搖10h。通過過濾除去催化劑並在真空下除去溶劑。粗(S)-2-{2-[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基聯苯-3-基]乙醯氨基}琥珀酸通過製備反相HPLC純化，以給出(S)-2-{2-[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基聯苯-3-基]乙醯氨基}琥珀酸(7.2g)。
方法B[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基-聯苯-3-基]-乙酸的替代合成步驟1向裝備有磁力攪拌棒和氮氣回流冷凝管的1L圓底燒瓶中加入粗(4-苄氧基-3-溴-5-甲醯基-苯基)乙酸甲酯(19.36g，53.31mmol)、四氫呋喃(400mL)、二異丙基胺(16.7g，23.2mL，165.1mmol)和4-苄氧基-N-叔丁基-3-硼酸-苯磺醯胺(21.74g，59.7mmol)。將該反應混合物置於氮氣氛下並加入二氯[1，1』-雙(二苯基膦)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物(0.68g，0.832mmol)。將反應混合物加熱至回流16h，其間通過HPLC監控反應完全。將溶液濃縮成固體並加入甲基叔丁基醚(500mL)以溶解該固體。將溶液用3％的冷氫氧化鈉水溶液(500mL)洗滌兩次。有機層通過硅藻土(200g)和矽膠(100g)的短柱過濾。將硅藻土用1∶1的甲基叔丁基醚和乙酸乙酯的混合物(400mL)洗滌。將濾液濃縮，給出(6，2』-雙苄氧基-5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-甲醯基-聯苯-3-基)-乙酸甲酯(32g)，為油狀物，其直接用於下步而不必進一步純化。
步驟2向裝備有攪拌棒的250mL圓底燒瓶中加入粗(6，2』-雙苄氧基-5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-甲醯基-聯苯-3-基)-乙酸甲酯(5.00g，8.31mmol)、甲醇(50mL)和水(5mL)。將反應混合物溫熱至60℃並加入偏亞硫酸氫鈉(1.58g，8.31mmol)，並將該反應混合物在60℃下攪拌2.5h。一次性加入3，4-二氨基苄脒鹽酸鹽(1.80g，9.64mmol)並將反應混合物在60℃加熱過夜。將反應混合物冷卻至室溫並加入250mL的(3∶1)乙酸異丙酯∶異丙醇溶液，隨後加入水(50mL)。分離有機層，通過硅藻土過濾，經硫酸鈉乾燥，濃縮以給出[6，2』-雙苄氧基-5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-聯苯-3-基]-乙酸甲酯鹽酸鹽(5.8g，91％)，為淡褐色固體。
步驟2的替代方法向裝備有攪拌棒和回流冷凝管的500mL圓底燒瓶中加入粗(6，2』-雙苄氧基-5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-甲醯基-聯苯-3-基)-乙酸甲酯(20g，33.23mmol)和3，4-二氨基苄脒(7.44g，39.88mmol)、PdCl2(MeCN)2(100mg，Strem Chemicals)，然後加入9∶1的異丙醇∶水的混合物(200mL)和偏亞硫酸氫鈉(6.3g，33.2mmol)的水溶液(30mL)。將反應混合物用油浴加熱回流並且回流冷凝管的頂部直接與大氣相通。將溶液加熱回流過夜，其間通過HPLC監控完成反應。向該溶液中加入Darco(5g)並將該溶液通過硅藻土(100g)熱過濾。將硅藻土用異丙醇(100mL)洗滌並將形成的溶液用乙酸乙酯(300mL)和鹽水(70mL)提取。將有機層濃縮，給出[6，2』-雙苄氧基-5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)聯苯-3-基]-乙酸甲酯鹽酸鹽，為無定形固體，其直接用於下步而沒有進一步純化。
步驟3向50mL圓底燒瓶中加入[6，2』-雙苄氧基-5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-聯苯-3-基]-乙酸甲酯鹽酸鹽(0.500g，0.651mmol)和冰醋酸(2.5mL)。加入12N HCl(水溶液)(2.5mL)然後將反應混合物加熱至50℃。14h後將反應混合物加到水中(100mL)並將該溶液真空下濃縮至5mL給出沉澱。通過過濾移出沉澱，給出[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基-聯苯-3-基]-乙酸(365mg)，其包含水和2.8當量的HCl(93％)，然後將其如上所述地轉化為目標化合物。
步驟3的替代方法向1L圓底燒瓶中加入粗[6，2』-雙苄氧基-5』-N-叔丁基氨磺醯基-5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-聯苯-3-基]-乙酸甲酯鹽酸鹽(22.0g，28.65mmol)和冰醋酸(400mL)。向該溶液中加入12N HCl(水溶液)(400mL)並將反應混合物加熱至55℃，在14h後通過HPLC監控該反應完成＞95％。向該溶液中加入Darco(2g)。將該溶液在55℃下攪拌另外一小時，將該溶液通過硅藻土過濾除去炭。減壓下濃縮該溶液給出固體，將其用1N HCl(600mL)和乙腈(200mL)處理。在加熱時固體溶解，此時加入Darco(6g)。將溶液在70℃下攪拌1h並通過硅藻土進行熱過濾。將溶液冷卻至室溫並將沉澱過濾，給出[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基-聯苯-3-基]-乙酸(9.85g，66％)。
實施例2(S)-2-{2-[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基聯苯-3-基]乙醯氨基}琥珀酸兩性離子的合成。
將純化的凍幹(S)-2-{2-[5-(5-甲脒基-1H-苯並咪唑-2-基)-6，2』-二羥基-5』-氨磺醯基聯苯-3-基]乙醯氨基}琥珀酸(11g)粉末懸浮於130mL的2M HCl(水溶液)中並溫熱至60℃。將THF(80mL)加入至該懸浮液中並在此溫度下攪拌直至化合物完全溶解(溶液的pH保持在約2.0)。將該溶液熱過濾並在加入晶種後於室溫下緩慢攪拌24h。在室溫下過濾結晶物質(5.2g)，用水洗滌該結晶物質直至洗滌液呈中性(pH為7)。元素分析和氯化物含量分析說明沒有任何氯化物抗衡離子的存在，這說明該物質為兩性離子。
1H NMR(DMSO-d6)9.21(2H，brs)，8.87(2H，brs)，8.21(1H，d，J＝7.8Hz)，8.0(2H，d，J＝7.2Hz)，7.79(1H，d，J＝7.8Hz)，7.73(J＝1.5Hz，1H，d)，7.6(J＝8.6，1.5Hz，dd，1H)，7.5(1H，dd，J＝8.5和2.5Hz)，7.2(1H，d，J＝2.3Hz)，4.3(1H，J＝2.3，5.3Hz，dd)，3.5(2H，s)，2.6(1H，dd，J＝16和7.3Hz)，2.44(1H，dd，J＝5.3Hz)。
生物學實施例實施例1因子VIIa抑制劑的體內試驗將人類因子VIIa(通常以7nM供應)和試驗化合物(作為不同濃度存在)在試驗介質(包括NaCl，150mM(pH7.4)；CaCl2，5mM；吐溫20，0.05％；Dade Innovin組織因子[Dade Behring，Newark，DE，USA]；EDTA，1.5mM；和二甲基亞碸，10％)中的混合物在室溫下培養30分鐘。然後加入底物[500μM的CH3SO2-D-Cha-But-Arg-pNA(得自Centerchem，Norwalk，CT，USA)]引發反應。通過在405nm下用分光光度法跟蹤發色底物的水解五分鐘。使用通過動力學分析程序(Batch Ki；BioKin，Ltd.，Pullman，WA)從進展曲線計算的初速度測量值測定表觀抑制常數(表觀Ki)。
通過上述試驗測定本發明的化合物表現出對因子VIIa的抑制。
實施例2因子Xa抑制劑的體外試驗將人類因子Xa(通常以3 nM供應，得自HaematologicTechnologies，Essex Junction，VT，USA)和試驗化合物(不同濃度)在試驗介質(包括Tris，50mM(pH7.4)；NaCl，50mM；CaCl2，5mM；吐溫20，0.05％；EDTA，1mM，和二甲基亞碸，10％)中的混合物在室溫下培養30分鐘。然後加入底物[500μM的CH3CO2-D-Cha-Gly-Arg-pNA(得自Centerchem，Norwalk，CT，USA)]引發反應。通過在405nm下用分光光度法測定跟蹤發色底物的水解五分鐘。使用標準數學模型從酶進展曲線計算表觀抑制常數(表觀Ki)。
通過上述試驗測定本發明的化合物表現出對因子Xa的抑制。
實施例3
藥代動力學試驗從Charles River購得具有預植入的頸靜脈導管(在運輸之前為其充滿肝素/鹽水/PVP封閉)的大鼠。每項研究選擇三隻大鼠，稱重，並通過尾靜脈注射給用試驗化合物。保留任何剩餘的試驗化合物並且在-70℃儲存，用於隨後的分析。
在120小時內在給定時間從留置導管收集血樣(每次0.25mL)。在每次收集之後立即將導管用生理鹽水衝洗並在每次8、24和48小時收集之後充滿肝素化鹽水。在導管無效的情況中，在異氟烷麻醉下在適當的時間通過後眼窩竇收集血樣。
將血樣置於0.5mL Microtainer管(肝素鋰)中，溫和地搖動並且儲存在溼冰上。將樣品在冷凍離心機中在2400rpm下離心10分鐘。將每個管的血漿樣品(0.1mL)轉移到0.5mL Unison聚丙烯小瓶(Sun-500210)中並在-70℃儲存，用於隨後通過LC/MS-MS分析。
實施例4體外凝固試驗......aPTT和PT根據Hougie，C.Hematology(Williams，W.J.，Beutler，B.，Erslev，A.J.和Lichtman，M.A.，Eds.)，pp.1766-1770(1990)，McGraw-Hill，NewYork中所述的方法進行凝固試驗，活化部分凝血活酶時間(aPTT)和前凝血酶時間(PT)。
簡而言之，試驗使用正常的人枸櫞酸鈉處理(citrated)血漿並且根據生產商的說明書(Medical Laboratory Automation-Pleasantville，NewYork)在37℃下在血凝度測量器(Electra 800)上進行。在即將收集具有抑制劑的樣品的凝固時間之前將儀器校準。通過將抑制劑劑量反應曲線擬合於Hill方程的改進形式計算aPTT和PT的雙重濃度。
藥物組合物實施例以下是包含本發明的化合物的代表性的藥物製劑。
片劑將以下成分密切混合併壓縮為單獨的刻痕片。
成分 每片的量，mg本發明的化合物400玉米澱粉 50交聯羧甲纖維素鈉 25乳糖 120硬脂酸鎂 5膠囊劑將以下成分密切混合併裝入硬明膠殼膠囊中。
成分 每粒膠囊的量，mg本發明的化合物200乳糖(噴霧乾燥的) 148硬脂酸鎂 2懸浮劑將以下成分混合以形成口服懸浮液。
成分 量本發明的化合物1g富馬酸0.5g氯化鈉2.0g對羥基苯甲酸甲酯 0.15g對羥基苯甲酸丙酯 0.05g砂糖 25.5g山梨醇(70％溶液) 12.85gVeegum K(Vanderbilt Co.) 1.0g調味劑0.035mL
著色劑 0.5mg蒸餾水 定量到100mL注射劑將以下成分混合以形成注射劑。
成分量本發明的化合物 1.2g乙酸鈉緩衝溶液 0.4M，2.0mLHCl(1N)或NaOH(1N) 定量到適當的pH水(蒸餾的，無菌的) 定量到20mL將除水之外的所有上述成分混合併在攪拌下加熱到60-70℃。然後在劇烈攪拌下加入足夠量的60℃的水，以將所述成分乳化，然後加入水，定量到100g。
栓劑通過將本發明的化合物與WitepsolH-15(飽和植物脂肪酸的甘油三酯；Riches-Nelson，Inc.，New York)混合製備總重量為2.5g的栓劑，並且其具有以下組成本發明的化合物500mgWitepsolH-15餘量非腸道製劑本發明的化合物40mg/mL羥丙基-β-環糊精 200mg/mL用1.0N氫氧化鈉調節pH到7.4為了清楚和理解目的，已經通過說明和實施例相當詳細地描述了前述的本發明。對於本領域技術人員來說，顯而易見，可在權利要求的範圍內進行改變和改進。因此，應該理解，上述說明是說明性的而非限制性的。因此，本發明的範圍不參考上述說明確定，而是參考權利要求以及與這種權利要求要求的同等意義的完整範圍而確定。
權利要求
1.由下式I表示的化合物、或其兩性離子或其藥學可接受的鹽 其中X1、X2、X3和X4獨立地為-N-或-CR4-，其中R4為氫、烷基或滷素，條件是X1、X2、X3和X4中不超過三個是-N-；R1為氫、烷基、滷素、羧基或氨基羰基；R2為氫、烷基或滷素；R3為二羧基烷基氨基羰基烷基或二羧基烷基氨基羰基-環烷基；Rx為氫、烷基、烷基硫基、滷素、羥基、羥基烷基、烷氧基、氨磺醯基、烷基氨磺醯基、二烷基氨磺醯基或硝基；Ry為氫、烷基或滷素；Rz為氫、烷基、滷代烷基、環烷基、烷基硫基、滷素、羥基、羥基烷基、硝基、氰基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基烷基氧基、羥基烷基氧基、氨基烷基氧基、羧基烷基氧基、氨基羰基烷基氧基、滷代烷氧基、羧基、羧基烷基、烷氧基羰基、烷氧基羰基烷基、氰基烷基、烷基磺醯基、烷基磺醯基烷基、芳基磺醯基、雜芳基磺醯基、甲脒基、羥基-甲脒基、烷氧基甲脒基、烷基磺醯氨基、烷基磺醯氨基烷基、烷氧基磺醯氨基、烷氧基磺醯氨基烷基、雜環烷基烷基氨基羰基、羥基烷氧基烷基氨基羰基、雜環烷基羰基、雜環烷基羰基烷基、雜環烷基、雜環烷基烷基、氧代雜環烷基、氧代雜環烷基烷基、雜芳基、雜芳烷基、脲基、烷基脲基、二烷基脲基、脲基烷基、烷基脲基烷基、二烷基脲基烷基、硫脲基、硫脲基烷基、-COR12(其中R12為烷基、滷代烷基、羥基烷基、烷氧基烷基或氨基烷基)、-(亞烷基)-COR12(其中R12為烷基、滷代烷基、羥基烷基、烷氧基烷基或氨基烷基)、-CONR14R15(其中R14為氫或烷基並且R15為氫、烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-(亞烷基)-CONR16R17(其中R16為氫、烷基或羥基烷基並且R17為氫、烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-NR18R19(其中R18為氫或烷基並且R19為氫、烷基、醯基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-(亞烷基)-NR20R21(其中R20為氫、烷基或羥基烷基並且R21為氫、烷基、醯基、烷氧基羰基、羥基烷基、烷氧基烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基)、-SO2NR22R23(其中R22為氫或烷基並且R23為氫、烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基，或者R22和R23與它們所連接的氮原子一起形成雜環氨基)、-(亞烷基)-SO2NR24R25(其中R24為氫或烷基並且R25為氫、烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基，或者R24和R25與它們所連接的氮原子一起形成雜環氨基)、-NR26SO2NR27R28(其中R26和R27獨立地為氫或烷基並且R28為氫、烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基，或者R27和R28與它們所連接的氮原子一起形成雜環氨基)、-(亞烷基)-NR29SO2NR30R31(其中R29和R30獨立地為氫或烷基並且R31為氫、烷基、芳基、芳烷基、雜芳基或雜芳烷基，或者R30和R31與它們所連接的氮原子一起形成雜環氨基)、-CONH-(亞烷基)-NR32R33(其中R32為氫或烷基並且R33為烷基)，或者芳烷基；和R13為氫、羥基、(C1-10)烷氧基、-C(O)R35(其中R35為烷基、芳基、滷代烷基或氰基烷基)或-C(O)OR36(其中R36為烷基、羥基烷基、烷氧基烷基、烷氧基羰基烷基、醯基、芳基或滷代烷基)。
2.由下式Ib表示的化合物、或其兩性離子或其藥學可接受的鹽
3.由下式Ic表示的化合物、或其兩性離子或其藥學可接受的鹽
4.由下式(II)表示的中間體 其中，PG1為適當的氧保護基並且PG2為適當的氨基保護基。
5.式I化合物的製備方法，其中式I中R3為二羧基烷基氨基羰基烷基，所述方法包括(i)將下式所示的化合物或其被適當保護的衍生物與二羧基烷基氨基進行反應，其中所述的二羧基烷基氨基中的羧基被任選地保護， 其中R1、R2、R13、Rx、Ry、Rz、X1-X4如在本發明的發明內容中所定義的；(ii)任選使任何被保護的一個或多個羧基脫保護；(iii)任選修飾任意的R1、R2、R13、Rx、Ry和Rz基團；(iii)任選將上述步驟(ii)或(iii)的產物轉化為酸加成鹽；(iv)任選將上述步驟(ii)或(iii)的產物轉化為游離鹼；(v)任選將上述步驟(ii)或(iii)的產物轉化為兩性離子；和(vi)任選使任何被保護的一個或多個羧基脫保護。
6.製備式Ib或Ic化合物的方法，所述方法包括(i)將下式所示的化合物分別與(R)或(S)天冬氨酸反應，其中(R)或(S)天冬氨酸的羧基為任選被保護的； (ii)任選使任何被保護的一個或多個羧基脫保護；(iii)任選將上述步驟(i)或(ii)的產物轉化為酸加成鹽；(iii)任選將上述步驟(i)或(ii)的產物轉化為游離鹼；(iv)任選將上述步驟(i)或(ii)的產物轉化為兩性離子；(v)任選使任何被保護的一個或多個羧基脫保護。
7.式(II)的中間體的製備方法 其中PG1為適當的氧-保護基並且PG2為適當的氨基-保護基，所述的方法包括(i)將下式(III)所示的化合物與一當量的式RLi或RMgX1的有機金屬試劑反應以使-SO2NHPG2基團去質子化，其中所述的式RLi或RMgX1的有機金屬試劑中R為烷基或芳基並且X1為滷素， 其中PG1和PG2如上所定義並且X為滷素；(ii)用一當量的式RLi或RMgX1的有機金屬試劑使在上述步驟(i)中形成的化合物發生金屬轉移，其中所述的式RLi或RMgX1的有機金屬試劑中R為烷基或芳基；(iii)用硼酸三烷基酯處理在上述步驟(ii)中產生的化合物以生成式(II)的化合物。
全文摘要
本發明涉及因子VIIa、IXa、Xa、XIa的，特別是VIIa的新型抑制劑，包含這些抑制劑的藥物組合物，以及利用這些抑制劑治療或預防血栓栓塞性疾病、癌症或類風溼性關節炎的方法。本發明還公開了製備這些抑制劑的方法。
文檔編號C07F5/02GK1964951SQ200580017896
公開日2007年5月16日 申請日期2005年6月2日 優先權日2004年6月2日
發明者丹尼爾·A·迪克曼, 丹吉·維賈伊·庫馬爾, 科林·歐布賴恩, 魯帕·拉伊, 威廉·德沃夏克·施雷德, 基龍·韋森 申請人:法莫西克立克斯公司