辣椒素受體促效劑的製作方法

2023-08-13 01:38:46

專利名稱：辣椒素受體促效劑的製作方法
技術領域：
本發明是有關於辣椒素受體促效劑，及關於使用此等化合物來治療與辣椒素受體活化作用相關的狀況。本發明進一步關於使用此等化合物作為檢測與定位辣椒素受體的探針。
背景技術：
痛覺或傷害性刺激，是由稱為「傷害性受體」(nociceptors)的一群特定感覺神經元的周圍末梢所媒介。各式各樣物理及化學刺激誘發哺乳動物此等神經元的活化，導致辨識潛在傷害刺激。但是，不適當或過度活化傷害性受體，會產生引致衰弱的急性或慢性疼痛。
神經病理性疼痛包含缺乏刺激下的疼痛訊息傳遞，典型地是由對神經系統的傷害所引起。多數情形下，此等疼痛的發生，視為是因初始傷害周圍系統(例如，經由直接傷害或全身性疾病)後，引發周圍及中樞神經系統的敏化作用。神經病理性疼痛典型地為灼熱、刺痛且強度不退，有時比誘發疼痛的初始傷害或疾病過程更會引致衰弱。
神經性疼痛的現行療法大多效果不彰。鴉片劑，例如嗎啡，為具效力的止痛劑，但由於例如身體上的成癮與戒斷性質、以及壓抑呼吸、情緒變化、與伴隨便秘的小腸蠕動降低、噁心、嘔吐、及內分泌與自律神經系統失調等不利副作用而使其有效性受限。此外，神經病理性疼痛對習知鴉片劑止痛療法常常無反應或只有部分反應。使用N-甲基-D-天門冬胺酸鹽拮抗劑克他命(ketamine)或α(2)-腎上腺素功能促效劑氯壓啶(clonidine)的療法可降低急性或慢性疼痛，使鴉片劑用量得以減少，但此等製劑由於副作用常令人很難忍受。
使用辣椒素的局部療法已用來治療包括神經病理性疼痛的慢性與急性疼痛。辣椒素為衍生自茄科植物(包括嗆辣紅椒)的辛辣物質，對傳達疼痛的小直徑傳入神經纖維(A-Δ與C纖維)視為似乎具有選擇性作用。辣椒素反應特徵為持續活化周圍組織中的傷害性受體，最終使周圍傷害性受體對一或多個刺激去敏化。從動物研究得知，辣椒素似乎藉由打開鈣與鈉的陽離子選擇通道而觸發C纖維細胞膜的去極化作用。
享有與辣椒素相同類香草醇(vanilloid)基團的結構類似物亦引起類似的反應。一此等類似物為樹膠脂毒素(resiniferatoxin，RTX)，為是大戟屬(Euphorbia)植物的天然產物。類香草醇受體(VR)一詞是用來敘述辣椒素與此等相關刺激化合物在神經元細胞膜的識別部位。辣椒素反應受到另一辣椒素類似物例如，辣椒氮呯(capazepine)的競爭性抑制(因而受到拮抗)，亦受到非選擇性陽離子通道封阻劑釕紅的抑制。此等拮抗劑僅以適度親和力與VR結合(通常Ki值不低於140μM)。
已自背根神經節細胞選殖大鼠及人類之類香草醇受體。經鑑定出的第一種類香草醇受體稱為類香草醇受體類型1(VR1)，本說明書中「VR1」與「辣椒素受體」等詞可交換使用，以指稱具此類型的大鼠及/或人類、以及同系哺乳類受體。利用缺乏此受體的小鼠所表現出的無類香草醇引致的疼痛行為與對熱及發炎傷害的弱反應，已證實VR1於痛覺上的角色。VR1為非選擇性陽離子通道，其開放閾值因高溫、低pH、及辣椒素受體促效劑而降低。例如，該通道通常於高於約45℃的溫度下開放。打開辣椒素受體通道後，通常接著從表現該受體的神經元及其他鄰近神經元釋出發炎性勝，增加疼痛反應。辣椒素受體受到辣椒素初始活化後，即經由cAMP依賴型蛋白激酶的磷酸化，進行快速去敏化作用。
辣椒素受體促效劑具有治療包括神經病理性疼痛的慢性與急性疼痛。本發明已達成該些需求，且進一步提供相關的好處。

發明內容
本發明是提供辣椒素受體促效劑。本說明書提供的某些此類促效劑為非類香草醇化合物。某些實施態樣中，本說明書提供的辣椒素受體促效劑是滿足式Ia或其醫藥上可接受的鹽
式Ia或其醫藥上可接受的鹽，其中A，Z1，Z2，Z3，Z4與Z5獨立地為CH或N；X為CR1或N；R1，R1a與R1b為於每次出現時獨立地選自氫、滷素、氰基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4滷烷基與C1-C4滷烷氧基；R2為氫或式-(CH2)n-L-M的基團，其中L為O或NR4；M為(i)氫；或(ii)C1-C8烷基、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚、C2-C8烯基、4-至10-員碳環或雜環、或連接至R4形成4-至10-員雜環；其中各者為視需要可經取代，且較佳為經0至6個獨立地選自下列的取代基所取代(a)羥基、滷素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、側氧基與-COOH；及(b)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷醯基、C2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷醯基氧基、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺醯基與(4-至7-員雜環)C0-C8烷基；其中各者經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基與氰基的取代基所取代；R4為氫或C1-C6烷基；或R4與M連接形成視需要可經取代的雜環；及n為1，2或3；及R3為C1-C6烷基、C1-C6滷烷基或氰基。
某些具體實例中，式Ia的化合物是滿足下述條件
R1a與R1b二者不皆為C1-C4烷氧基；R1a與R2二者不皆為氫；如果R3為C1-C4烷基，R2不為氫；如果R1、R1a與R1b各自為氫，R2不為氫；及如果R3為CF3，Z1與Z2皆為CH且R1b為溴，R2不為甲氧基甲基或3，5-二甲基嗎啉基。
其它態樣中，本說明書所提供的某些辣椒素受體促效劑是滿足式Ib或其醫藥上可接受的鹽 式Ib其中如所示的各鍵是獨立地為單鍵或雙鍵，其限制條件為不超過各環員上的正常價數；A，Z1與Z2獨立地為CH或N；Z3，Z4，Z5與Z6獨立地為CR1、N、NH、O或S；使Z3、Z4、Z5與Z6中至少三者獨立地選自CR1、N與NH；R1，R1a與R1b為於每次出現時獨立地選自氫、滷素、羥基、氰基、側氧基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4滷烷基與C1-C4滷烷氧基；較佳為R1a與R1b二者不皆為C1-C4烷氧基；R2為氫或式-(CH2)n-L-M的基團，其中L為O或NR4；M為(i)氫；或(ii)C1-C8烷基、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚、C2-C8烯基、4-至10-員碳環或雜環、或連接至R4形成4-至10-員雜環；其中各者為視需要可經取代，且較佳為經0至6個獨立地選自下列的取代基所取代(a)羥基、滷素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、側氧基與-COOH；及(b)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷醯基、C2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷醯基氧基、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺醯基與(4-至7-員雜環)C0-C8烷基；其中各者經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基與氰基的取代基所取代；R4為氫或C1-C6烷基；或R4與M連接形成視需要可經取代的雜環；及n為1，2或3；及R3為C1-C6烷基，C1-C6滷烷基或氰基。
進一步態樣中，本說明書所提供的某些辣椒素受體促效劑是滿足式II或其醫藥上可接受的鹽 其中Ar1為苯基，吡啶基或嘧啶基，其中各者為視需要可經取代，且較佳為經0至3個獨立地選自Ra的取代基所取代；Ar2為萘基、喹啉基或喹唑啉基，其中各者為視需要可經取代，且較佳為經0至6個獨立地選自Ra的取代基所取代；Ar3為苯並咪唑基或吲哚基，其中各者為視需要可經取代，且較佳為經0至4個獨立地選自Ra的取代基所取代；及Ra為每次出現時獨立地選自(i)羥基、滷素、氨基、氰基、硝基、氨基羰基與-COOH；及(ii)C1-C6烷基、C1-C6烯基、C1-C6炔基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷醯基、C2-C6烷氧基羰基、C2-C6烷醯基氧基、C1-C6烷基硫基、C2-C6烷基醚、單-與二-(C1-C6烷基)氨基與C1-C8烷基磺醯基，其中各者為視需要可經取代，且較佳為經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基與氰基的取代基所取代；進一步態樣中，本說明書所提供的某些辣椒素受體促效劑是滿足式III或為其醫藥上可接受的鹽 式III其中R1與R2獨立地為氫、滷素、氰基、氨基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6烯基、C1-C6滷烷基、C1-C6烷氧基、或單-或二-(C1-C6烷基)氨基；或R1與R2相連形成5-或6-員視需要可經取代的碳環或雜環，且較佳為經0至3個獨立地選自Ra的取代基所取代；Y與Z獨立地為CH或N；Ar1與Ar2獨立地為苯基或6-員雜環，其中各者為視需要可經取代，且較佳為經1至3個獨立地選自Ra的取代基所取代；及Ra為每次出現時獨立地選自(i)羥基、滷素、氨基、氰基、硝基、氨基羰基與-COOH；及(ii)C1-C6烷基、C1-C6滷烷基、C1-C6烯基、C1-C6炔基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷醯基、C2-C6烷氧基羰基、C2-C6烷醯基氧基、C1-C6烷基硫基、C2-C6烷基醚、單-與二-(C1-C6烷基)氨基與C1-C8烷基磺醯基，其中各者為視需要可經取代，且較佳為經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基與氰基的取代基所取代。
某些態樣中，如本說明書所述的辣椒素受體促效劑，於辣椒素受體結合試驗中，呈現Ki不大於1微摩爾濃度(micromolar)、100奈摩爾濃度(nanomolar)、10奈摩爾濃度；及/或於測定辣椒素受體拮抗試驗中，具有EC50不大於1微摩爾濃度、100奈摩爾濃度、10奈摩爾濃度。較佳的化合物通常為具有較高效能者(例如，較低的Ki或EC50)。
某些進一步態樣中，如本說明書所述的辣椒素受體促效劑在VR1鈣移動試驗(calcium mobilization assay)中，1μM濃度辣椒素所引發的促效劑反應，為100nM辣椒素所引發反應的至少30％或至少80％。
某些態樣中，如本說明書所述的化合物經以可檢測的標記物(例如，放射性標記或螢光接合)予以標記。
於其他態樣中，本發明進一步提供醫藥組成物，其包含至少一種如本說明書所提供的辣椒素受體拮抗劑，並結合有生理上可接受的載劑或賦形劑。
某些態樣中，本說明書提供增加細胞性辣椒素受體的鈣傳導的方法，該方法包括使表現辣椒素受體的細胞與至少一種如本說明書所述的辣椒素受體拮抗劑接觸。
其它態樣中，本發明提供病患對辣椒素受體調節作用敏感時的治療方法，該方法包括對該病患投予有效治療量之至少一種如本說明書所提供的辣椒素受體促效劑。
相關態樣中，提供治療病患疼痛的方法，該方法包括對該病患投予有效治療量之至少一種如本說明書所提供的辣椒素受體促效劑。
本發明進一步提供病患治療搔癢、尿失禁、咳嗽與/或打嗝的方法，該方法包括對罹患一種或多種前述狀況的病患投予有效治療量之至少一種如本說明書所述的辣椒素受體促效劑。
本發明進一步提供促進肥胖病患減輕體重的方法，該方法包括投對肥胖病患投予有效治療量之患至少一種如本說明書所述的辣椒素受體促效劑。
又一些態樣中，木發明提供病患降低體溫的方法，該方法包括對病患投予有效治療量之至少一種如本說明書所述的辣椒素受體促效劑。
又提供測定試樣中是否有辣椒素受體的方法，該方法包括(a)於容許該化合物與辣椒素受體結合的條件下，使樣品與如本說明書所述的辣椒素受體促效劑接觸；以及(b)檢測與辣椒素受體結合的該化合物含量，因而測定出試樣中是否有辣椒素受體存在。
本發明亦提供經包裝的醫藥製劑，其包括(a)置於容器中的如本說明書所述的醫藥組成物；及(b)使用該組成物治療對辣椒素受體活性的調節作用敏感的一種或多種狀況(例如，疼痛)的說明書。
又一態樣中，本發明提供製備本說明書揭示的化合物(包括中間產物)的方法。
參照下文詳細說明後，將更明白本發明彼等及其他態樣。
實施方式如上文所述，本發明是提供辣椒素受體促效劑。此等化合物得於活體外或活體內使用，以調節各種背景的辣椒素受體活性。
術語本說明書中化合物通常使用標準命名法予以敘述。對於具有不對稱中心的化合物，應了解(除非另行指明)所有光學異構物及其混合物均涵蓋在內。此外，具有碳-碳雙鍵的化合物得呈Z與E型，除非另行指明，否則化合物的所有異構物型均涵蓋於本發明範圍內。當化合物以多種互變異構物型存在時，所述化合物並不限制為任一特定的互變異構物，而是意指涵蓋所有互變異構物型。某些化合物於本說明書中是使用包含變數(例如，R1、Ar、Z)的通式予以敘述。除非另行指明，此一化學式中的每一變數是與任何其他變數獨立地界定；於化學式中出現一次以上的任何變數，每次出現時均各自獨立地界定。
本說明書所採用「辣椒素受體促效劑」或「VR1促效劑」為一種可將VR1活性提高超過受體的基礎活性的化合物(亦即增強VR1活化作用與/或VR1所媒介的訊息傳遞)。辣椒素受體促效劑活性可採用實施例7所提供的代表性分析法判別。一般而言，此等促效劑在實施例7所提供的分析法中，EC50值小於1微摩爾濃度，較佳為小於100奈摩爾濃度，更佳為小於10奈摩爾濃度。本說明書所提供的辣椒素受體促效劑是滿足式Ia、Ib、II、III(可額外地滿足一種或多種次要式)或此類化合物的醫藥上可接受的鹽。其它具體實施例中，本說明書所提供的辣椒素受體促效劑為非類香草醇(例如，不包含具有連接於鄰接環碳上的兩個氧原子的苯基)。
倘若當VR1的Ki小於1微摩爾濃度，較佳的Ki為小於或等於100奈摩爾濃度或10奈摩爾濃度時，辣椒素受體促效劑將以「高親和力」來結合。本說明書用於測定VR1的Ki的代表性分析法如實施例6所提供。
本說明書所述化合物的「醫藥上可接受的鹽」，為適用於與人類或動物組織接觸而無過度毒性或致癌性，且較佳無刺激性、過敏反應、或其他問題或併發症的酸或鹼的鹽。此等鹽包含具有鹼性殘基(如胺類)的無機與有機酸鹽，以及酸性殘基(如羧酸類)的鹼金屬鹽或有機鹽。特定的醫藥上的鹽包括但不限於，例如鹽酸、磷酸、氫溴酸、蘋果酸、乙醇酸、反丁烯二酸、硫酸、胺磺酸、對氨基苯磺酸、甲酸、甲苯磺酸、甲磺酸、苯磺酸、乙二磺酸、2-羥基乙磺酸、硝酸、苯甲酸、2-乙醯氧基苯甲酸、檸檬酸、酒石酸、乳酸、硬脂酸、水楊酸、麩胺酸、抗壞血酸、雙羥萘酸(pamoic)、琥珀酸、反丁烯二酸、順丁烯二酸、丙酸、羥基順丁烯二酸、氫碘酸、苯基乙酸、烷酸例如乙酸、HOOC-(CH2)n-COOH(其中n為0至4)等酸的鹽。同樣地，醫藥上可接受的陽離子包括但不限於，鈉、鉀、鈣、鋁、鋰與銨。在此技術領域具有通常知識者可進一步認知，本說明書所提供化合物的醫藥上可接受的鹽，包括Remington’s Pharmaceutical Sciences，第17版，1418頁(賓州Easton市Mack Publishing Company出版，1985年)所列舉者。一般而言，醫藥上可接受的酸或鹼的鹽能以任何習知的化學方法，從含有鹼性或酸性基團的母化合物予以合成。簡單地說，此等鹽能藉由使此等化合物的游離酸或鹼的形式與適當鹼或酸的化學計量，於水或有機溶劑或二者的混合物中反應予以製備；通常，以使用非水溶液介質，例如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈為佳。
鹹了解，本說明書提供的各式的化合物可以(但不一定要)呈水合物、溶劑合物或非共價複合物。此外，多種結晶型與多晶型均在本發明的範圍內。本說明書亦提供本說明書所提供化合物的前驅藥物。「前驅藥物」為不一定完全符合本說明書所提供化合物結構式要求的化合物，但可在投予至患者後，於活體內經修飾，產生本說明書所提供化學式之一的化合物。例如前驅藥物可為本說明書所提供化合物的醯化衍生物。前驅藥物包括其中羥基、胺或氫硫基鍵結在任何基團的化合物，當投予至哺乳動物個體後，會分別裂解形成游離羥基、氨基或氫硫基。前驅藥物實施例包括但不限於本說明書所提供化合物中醇與胺官能基的乙酸酯、甲酸酯與苯甲酸酯衍生物。本說明書所提供化合物的前驅藥物可藉由修飾化合物中的官能基，使其可於活體內裂解以形成母體化合物而製備。
本說明書所用的「烷基」一詞是指直鏈或分支鏈的飽和脂族烴。烷基包括具1至8個碳原子(C1-C8烷基)、1至6個碳原子(C1-C6烷基)、及1至4個碳原子(C1-C4烷基)的基團，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、第二丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、異戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基、3-甲基戊基、環丙基、環丙基甲基、環戊基、環戊基甲基、環己基、環庚基與降基。「C0-C4烷基」意指單一共價鍵或具有1、2、3或4個碳原子的烷基；「C0-C6烷基」意指單一共價鍵或C1-C6烷基；「C0-C8烷基」意指單一共價鍵或C1-C8烷基。「伸烷基」一詞是指二價烷基，該烷基如上所述。C0-C3伸烷基為單一共價鍵或具有1、2或3個碳原子的伸烷基。
「環烷基」為其所有環成員均為碳的飽和或部分飽和的環狀基，例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、環辛基、金剛烷基、十氫萘基、八氫-茚滿基，以及上述任一種的部分飽和變體，例如，環己烯基。某些環烷基為C5-C6環烷基，該環含有5或6個環成員，當中每個均為碳。「(C5-C6環烷基)C0-C2烷基」為經由單一共價鍵或C1-C2伸烷基鍵結的C5-C6環烷基。
本說明書所用「烷氧基」一詞，意指經由氧橋連接至如上所述的烷基。烷氧基包括分別具有1至8個或1至4個碳原子的C1-C8烷氧基及C1-C4烷氧基。特定的烷氧基基團為甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、第二丁氧基、第三丁氧基、正戊氧基、2-戊氧基、3-戊氧基、異戊氧基、新戊氧基、己氧基、2-己氧基、3-己氧基、及3-甲基戊氧基。同樣地，「烷基硫基」為經由硫橋連接如上述的烷基。
「烷基磺醯基」是指具式-(SO2)-烷基的基團。烷基磺醯基包括分別具有1至8個或1至6個碳原子的C1-C8烷基磺醯基及C1-C6烷基磺醯基。甲磺醯基為一代表性的烷磺醯基。
「烷醯基」一詞是指呈線型、分支或環狀排列的醯基(例如，-(C＝O)-烷基)。烷醯基包括分別具有2至6個或2至4個碳原子的C2-C6烷醯基及C2-C4烷醯基。乙醯基為C2烷醯基。
「烷酮」為酮基中的碳原子呈線型、分支或環狀烷基排列者。「C3-C8烷酮」、「C3-C6烷酮」與「C3-C4烷酮」分別是指具有3至8、至6或至4個碳原子的烷酮。舉例而言，C3烷酮基團的構造式為-CH2-(C＝O)-CH3。
同樣地，「烷基醚」是指經由碳-碳鍵結連接的線型或分支鏈醚取代基。烷基醚包括分別具有2至8、至6或至4個碳原子的C2-C8烷基醚、C2-C6烷基醚及C2-C4烷基醚基團。舉例而言，C2烷基醚基團的構造式為-CH2-O-CH3。
術語「烷氧羰基」指利用羰基連結的烷氧基(亦即具有通式結構為-C(＝O)-O-烷基的基團)。烷氧羰基包括C2-C8、C2-C-6與C2-C4烷氧羰基，其分別具有2至8、至6或至4個碳原子。「C1烷氧羰基」指-C(＝O)-OH，其包含在術語「C1-C8烷氧羰基」的範圍內。
「胺羰基」一詞是指醯氨基(亦即，-(C＝O)NH2)。
本說明書所採用術語「側氧基」意指酮基(C＝O)。作為非芳香族碳原子之取代基的側氧基會使-CH2-轉化成-C(＝O)-。作為芳香族碳原子之取代基的側氧基會使-CH-轉化成-C(＝O)-，而失去芳香性。
「烷基氨基」指具有通式結構為-NH-烷基或-N(烷基)(烷基)的二級或三級胺，其中各烷基可為相同或相異。此等基團包括，例如，單-與二-(C1-C6烷基)氨基(其中各烷基可為相同或相異，且可含有1至6個碳原子)，以及單-與二-(C1-C4烷基)氨基。
「滷素」一詞是指氟、氯、溴或碘。
「滷烷基」為經1或多個滷原子取代的分支、直鏈或環狀烷基(例如，「滷C1-C6烷基」具有1至6個碳原子；「滷C1-C4烷基」具有1至4個碳原子)。滷烷基實例包括但不限於，單、二或三氟甲基；單、二或三氯甲基；單、二、三、四或五氟乙基；及單、二、三、四或五氯乙基。典型的滷烷基為三氟甲基及二氟甲基。本說明書所提供的某些化合物中，存在不大於5或3個滷烷基。「滷烷氧基」一詞是指經由氧橋鍵結之如上文所界定的滷烷基。「滷C1-C6烷氧基」具有1至6個碳原子。
非介於兩個字母或符號間的破折號(-)用於指示取代基的連接點。例如，-CONH2是經由碳原子連接。
本說明書所用「雜原子」一詞是指氧、硫或氮。
「雜環烷基」為其飽和環狀基中至少一個環原子為雜原子。雜環烷基包括，例如嗎啉基、硫代嗎啉基與四氫哌喃。
「碳環」或「碳環狀基」包括至少一個全部由碳-碳鍵形成的環(本說明書稱為碳環狀環)，且不含雜環狀環。除非另有指明，否則碳環中的每一碳環狀環得為飽和、部分飽和或芳香族。碳環通常具有1至3個稠合環、側環或螺環，某些具體例的碳環具有一個環或二個稠合的環。典型地，每一環含有3至8個環員(亦即，C3-C8)。某些代表性的碳環為上述的環烷基。其他碳環為芳基(亦即，含有至少一個芳香族的碳環狀環，例如，苯基、苄基、萘基、芴基(fluorenyl)、茚滿基、及1，2，3，4-四氫萘基)。碳環中的碳原子當然可進一步連接於零個、一個或兩個氫原子與/或任何各種的環取代基。某些具體實例中，碳環選自4-至10-員碳環；於其它具體實例中，碳環選自5-與6-員碳環。經由單一共價鍵或C1-C6伸烷基鍵接的苯基，標示為苯基C0-C8烷基(例如，苯甲基、1-苯基-乙基、1-苯基-丙基與2-苯基-乙基)。同樣地，苯基C1-C8烷氧基意指經由C1-C8烷氧部分基團鍵接的苯基(例如，苯基C1烷氧基為苯甲基氧基)。
「雜環」或「雜環狀基」具1至3個稠合環、側環或螺環，其中至少一者為雜環(亦即，一個或多個環原子為雜原子，而其餘的環原子為碳)。典型地，雜環狀環包含1至4個雜原子；某些具體例中，每個雜環狀環的各環具有1或2個雜原子。每個雜環狀環通常含有3至8個環員(某些具體例中，列舉出具有5至7個環員的環)，以及包含稠合環、側環或螺環的雜環通常含有9至14個環員。雜環的氮與/或碳原子可視需要以各種取代基來取代，例如，舉凡上述碳環的取代基。除非另有指明，否則雜環可為雜環烷基(亦即，各環為飽和或部分飽和)或雜芳基(亦即，該基團中至少一個含雜原子的環為芳香性)。雜環基一般可經由任何環或取代基原子來鍵結，其限制條件為導致穩定化合物。鍵結雜環基是經由成分中的氮原子進行鍵結。(4-至7-員雜環)C0-C8烷基為經由單一共價鍵或C1-C8烷基連接的具有4至7環員的雜環狀基。
雜環狀基包括，例如，吖啶基(acridinyl)、氮 基(azepanyl)、氮 基(azocinyl)、苯並咪唑基(benzimidazolyl)、苯並咪唑啉基(benzimidazolinyl)、苯並異噻唑基(benzisothiazolyl)、苯並異噁唑基基(benzisoxazolyl)、苯並呋喃基、苯並硫代呋喃基(benzothiofuranyl)、苯並噻吩基、苯並噁唑基基、苯並噻唑基、苯並三唑基、咔唑基、苯並四唑基(benztetrazolyl)、NH-咔唑基、咔啉基、苯並二氫吡喃基(chromanyl)、苯並二氫吡喃烯基(chromenyl)、 喏啉基(cinnolinyl)、十氫喹啉基(decahydroquinolinyl)、二氫呋喃並[2，3-b]四氫呋喃、二氫異喹啉基、二氫四氫呋喃基、1，4-二氧雜-8-氮雜-螺[4，5]癸-8-基、二噻基(dithiazinyl)、呋喃基、呋呫基(furazanyl)、咪唑啉基、咪唑啶基(imidazolidinyl)、咪唑基、吲唑基(indazolyl)、假吲哚基(indolenyl)、吲哚啉、吲哚嗪基、吲哚基、異苯並呋喃基、異苯並二氫吡喃基、異吲唑基、異吲哚啉基、異吲哚基、異噻唑基、異噁唑基基、異喹啉基、嗎啉基、萘啶基(naphthyridinyl)、八氫異喹啉基、噁二唑基(oxadiazolyl)、噁唑基啶基(oxazolidinyl)、噁唑基基、啡啶基、啡啉基、啡嗪基、啡噻嗪基、啡噁噻基(phenoxathiinyl)、啡嗪基、呔嗪基(phthalazinyl)、六氫吡嗪基(piperazinyl)、六氫吡啶基、吡啶烷酮基(piperidonyl)、喋啶基(pteridinyl)、嘌呤基、哌喃基、吡嗪基、吡唑啶基(pyrazolidinyl)、吡唑啉基、吡唑基、嗒嗪基(pyridazinyl)、吡咯並咪唑基、吡咯並噁唑基基、吡咯並噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯啶基(pyrrolidinyl)、吡咯烷酮基(pyrrolidonyl)、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基(quinazolinyl)、喹啉基、喹噁啉基(quinoxalinyl)、喹嚀啶基(quinuclidinyl)、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、四唑基、噻二嗪基(thiadiazinyl)、噻二唑基(thiadiazolyl)、噻嗯基(thianthrenyl)、噻唑基、噻吩並噻唑基(thienothiazolyl)、噻吩並噁唑基基(thienoxazolyl)、噻吩並咪唑基(thienoimidazolyl)、噻吩基(thienyl)、噻吩基(thiophenyl)、硫代嗎啉基、及其中硫原子經氧化的變體、三嗪基、呫噸基(xanthenyl)，及以如上所述的1至4個取代基所取代的前述任何基團。
本說明書所用「取代基」一詞，是指與所關注分子的原子共價結合的分子部分基團。舉例而言，「環取代基」可為例如滷素、烷基、滷烷基或與環成員之原子(較佳為碳或氮原子)共價結合的其他本說明書論及的部分基團。「取代」一詞是指以如上述的取代基置換分子結構中的氫原子，且未超出該指定原子的價數，且由該取代產生具化學穩定性的化合物(亦即，能進行單離、鑑定、及測試生物活性的化合物)。視需要的取代基包括，例如，羥基、滷素、氰基、硝基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷醯基、氨基、單-或二-(C1-C8烷基)氨基、滷C1-C8烷基、滷C1-C8烷氧基、-COOH、-CONH2與/或SO2NH2。以0至3個獨立選擇的取代基所取代的基團為未經取代或經1至3個取代基所取代。
術語「VR1」與「辣椒素受體」於本說明書中可交換使用，以指稱1型類香草醇受體。除非另行指定，否則此等名詞涵蓋大鼠及人類VR1受體(例如，GenBank存取編號AF327067、AJ277028及NM 018727；特定人類VR1 cDNAs的序列提供於美國專利案6,482,611的SEQ IDNOs1至3，所編碼的胺基酸序列示於SEQ ID NOs4與5)，以及於其他物種中發現的同系物(homolog)。
「類香草醇」為含有苯環的辣椒素或任何辣椒素類似物，其苯環上帶有與相鄰環碳原子結合的兩個氧原子(其中一個碳原子是位於與該苯環結合的第三個部分基團連接點的對位)。類香草醇若以不大於10μM的Ki(以如本說明書所述方式測定)與VR1結合，則為「類香草醇配位體」。類香草醇配位體促效劑包括辣椒素、歐瓦尼(olvanil)、N-花生四烯醯基-多巴胺(N-arachidonoyl-dopamine)及樹膠脂毒素(RTX)。類香草醇配位體拮抗劑包括辣椒氮呯及碘-樹膠脂毒素。
「有效治療劑量(或劑量)」是指投予至病患後，產生可辨識病患獲益(例如，提供可檢測治療後症狀緩和)的量。此等緩和得使用任何適當準則予以檢測，包括一種或多種症狀(例如疼痛)的緩解。有效治療量或劑量通常可使體液(如血液、血漿、血清、CSF、關節液、淋巴液、細胞間質液、淚液或尿液)中化合物濃度足以改變類香草醇配位體與VR1的活體外結合性(採用實例6所提供的分析法)與/或VR1所媒介的訊號傳導(採用實例7所提供的分析法)。
「病患」是以本說明書提供的辣椒素受體促效劑治療的任何個體。病患包括人類，以及其他動物，例如，陪伴動物(例如，狗與貓)及家畜。病患可能歷經對辣椒素受體調節作用(例如，疼痛)敏感狀況的一種或多種症狀，或可能並無此等症狀(亦即，為預防性治療)。
辣椒素受體促效劑如上所述，本發明提供的辣椒素受體促效劑可用於各種背景，包括疼痛(例如，神經病理性疼痛或周圍神經所媒介的疼痛)與呼吸性症狀(例如，氣喘或慢性阻塞性肺疾)的治療。辣椒素受體促效劑亦可於活體外分析(例如，受體活性的分析)中，使用作為檢測與定位VR1的探針，以及配位體結合與VR1-媒介訊號傳導分析的標準品。
本說明書所提供的某些辣椒素受體促效劑不為類香草醇配位體。此等促效劑可進一步為(但不一定必為)滿足式Ia、Ib、II或III。
某些態樣中，本說明書所提供的辣椒素受體促效劑具有通式Ia、Ib、II或III(或上述任一種的次要式)，或為此類化合物之醫藥上可接受的鹽。
式IA 式Ia中，變數如上所述。某些化合物中(意指如式Ia-1的化合物)，R3為三氟甲基。式Ia或Ia-1的某些化合物中，Z1與Z2中至少一者為CH(例如，Z1為N，Z2為N；或Z1與Z2皆為CH)或Z1與Z2皆為N。進一步的此類化合物，A為N。式Ia或Ia-1的再進一步化合物中，X為CR1(例如，CH或經甲基取代的碳)，及Z4與Z5皆為CH。較佳為R1a與R1b其中一者不為C1-C4烷氧基。
式Ia或Ia-1的某些化合物中，R2為氫或 其中 代表4-至7-員經0至3個取代基所取代的雜環烷基環，該取代基較佳為獨立地選自滷素、羥基、氰基、-COOH、C1-C4烷基與C1-C4烷氧基。式Ia的某些化合物是滿足下列式中的一或多者 式Ia-2式Ia-3 式Ia-4
式Ia-5式IB 式Ib中，變數如上所述。式Ib的某些化合物中，Z3為N且Z6為CH及/或Z4為O且Z5為CH。進一步的此類化合物中，Z1與Z2其中至少一者為CH(例如，Z1為N或Z2為N)或Z1與Z2皆為N。再進一步的此類化合物中，A為N。
式Ib的某些化合物中，R2為氫或 其中 代表4-至7-員經0至3個取代基所取代的雜環烷基環，該取代基較佳為獨立地選自滷素、羥基、氰基、-COOH、C1-C4烷基與C1-C4烷氧基。式Ib的某些化合物是滿足下列式中的一或多者 式Ib-1 式Ib-2 式Ib-3 式Ib-4式Ia的某些較佳化合物中，意指如本說明書式Ia-i的化合物，R1a為選自滷素、氰基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4滷烷基與C1-C4滷烷氧基所組成的基團；及R2為氫或式-(CH2)n-L-M的基團，其中L為O或NR4；M為(i)氫；或(ii)C1-C8烷基、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚，C2-C8烯基、4-至10-員碳環或雜環，或連接至R4形成4-至10-員雜環；其中各者為經0至6個獨立地選自下列取代基所取代(a)羥基、滷素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、側氧基與-COOH；及(b)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷醯基、C2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷醯基氧基、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺醯基與(4-至7-員雜環)C0-C8烷基；其中各者為獨立地選自羥基、滷素、氨基與氰基的取代基所取代。
式Ia的某些較佳化合物中，意指如本說明書式Ia-ii的化合物，R1a為選自氫、滷素、氰基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4滷烷基與C1-C4滷烷氧基所組成的基團；及R2為式-(CH2)n-L-M的基團，其中L為O或NR4；M為(i)氫；或(ii)C1-C8烷基、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚、C2-C8烯基、4-至10-員碳環或雜環，或連接至R4形成4-至10-員雜環；其中各者為經0至6個獨立地選自下列取代基所取代(a)羥基、滷素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、側氧基與-COOH；及(b)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷醯基、C2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷醯基氧基、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺醯基與(4-至7-員雜環)C0-C8烷基；其中各者為經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基與氰基的取代基所取代。
式Ia的又其它較佳的化合物中，意指如本說明書式Ia-iii的化合物，R1a為選自氫、滷素、氰基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4滷烷基與C1-C4滷烷氧基所組成的基團；而R2a為選自氫、滷素、氰基、C1-C4烷基、C1-C4滷烷基與C1-C4滷烷氧基所組成的基團。
式Ia的其它較佳化合物中，意指如本說明書式Ia-iv的化合物，其包括式Ia的此等化合物，其中R1a為選自氫、滷素、氰基、C1-C4烷基、C1-C4滷烷基與C1-C4滷烷氧基所組成的基團；而R2a為選自氫、滷素、氰基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4滷烷基與C1-C4滷烷氧基所組成的基團。
式Ia的某些其它較佳化合物中，意指如本說明書式Ia-v的化合物，當R3為C1-C4烷基或當R、R1a與R1b為氫時，R2為式-(CH2)n-L-M的基團，其中L為O或NR4；M為(i)氫；或(ii)C1-C8烷基、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚、C2-C8烯基、 4-至10-員碳環或雜環，或連接至R4形成4-至10-員雜環；其中各者為經0至6個獨立地選自下列取代基所取代(a)羥基、滷素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、側氧基與-COOH；及(b)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷醯基、C2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷醯基氧基、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺醯基與(4-至7-員雜環)C0-C8烷基；其中各者為經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基與氰基的取代基所取代。
另其它態樣中，式Ia的化合物，其中如本說明書所提供式Ia-vi的化合物，其中R2為氫或式-(CH2)n-L-M的基團，其中L為O或NR4；M為(i)氫；或(ii)C1-C8烷基、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚、C2-C8烯基、4-至10-員碳環或雜環，或連接至R4形成4-至10-員雜環；其中各者為經0至6個獨立地選自下列取代基所取代(a)羥基、滷素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、側氧基與-COOH；及(b)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷醯基、C2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷醯基氧基、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺醯基與(4-至7-員雜環)C0-C8烷基；其中各者為經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基與氰基的取代基所取代；R4為氫或C1-C6烷基；或R4與M連接形成視需要可經取代的雜環；及n為1、2或3；及R3為C1-C6烷基或氰基。
另其它態樣中，式Ia的化合物，其中如本說明書所提供式Ia-vii的化合物，其中R2為氫或式-(CH2)n-L-M的基團，其中L為O或NR4；M為
(i)氫；或(ii)C1-C8烷基、C3-C8烷酮、C3-C8烷基醚、C2-C8烯基、或4-至10-員碳環或連接至R4形成4-至10-員雜環；其中各者為經0至6個選自下列的取代基所取代(a)羥基、滷素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、側氧基與-COOH；及(b)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷醯基、C2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷醯基氧基、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-與二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺醯基與(4-至7-員雜環)C0-C8烷基；其中各者為經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基與氰基的取代基所取代；R4為氫或C1-C6烷基；或R4與M連接形成視需要可經取代的雜環；及n為1、2或3；及R3為C1-C6烷基、C1-C6滷烷基或氰基。
式II 式II中，變數如上所述。式II的某些化合物進一步是滿足式IIa 式IIa其中R1、R2與R3獨立地代表為0至3個獨立地選自滷素、羥基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4滷烷基、C1-C4烷氧基與C1-C4烷氧基的取代基所取代；R4為氫、C1-C6烷基、(C5-C6環烷基)C0-C2烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基或C2-C6烷基醚；及R5為氫、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。某些具體實例中，R5為C1-C6烷基或C1-C6烷氧基(例如，乙氧基)。R2所示的各取代基可位於該萘基其中一個環上的任何合適環原子。
式IIa的某些化合物中，R4為甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、丙基、丁基、戊基、環戊基、丙烯基或甲氧基乙基；與/或R5為乙氧基。進一步此類化合物中，R1代表兩個取代基(例如，該苯基連接點的鄰位與對位)式IIa的再進一步化合物中，R2與R3獨立地代表0個取代基或1個取代基；此類化合物中，R2代表0個取代基。
式III 式III中，變數如上所述。式III的某些化合物進一步滿足式IIIa 式IIIa其中W與X獨立地為N或CH；而R3代表0至3個獨立地選自的Ra取代基。
式IIIa的某些化合物進一步滿足式IIIb 式IIIb其中R4代表1至2個獨立地選自羥基、滷素、氨基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4滷烷基、C1-C4烯基、C1-C4烷氧基、C1-C4滷烷基與C1-C4滷烷氧基的取代基；而R5代表0至2個獨立地選自羥基、滷素、C1-C4烷基、C1-C4滷烷基與C1-C4滷烷氧基的取代基。
本說明書提供的辣椒素受體促效劑通常與VR1結合，此等結合可利用VR1配位體結合試驗來測定。本說明書中有關「VR1配位體結合試驗」，意欲參照例如實施例6所提供的標準活體外受體結合試驗。簡單而言，欲評估對VR1的結合作用，得進行競爭性結合試驗，其中將VR1製劑與經標記(例如，125I或3H)能與VR1(例如，辣椒素受體促效劑如RTX)結合的化合物，以及未標示的測試化合物一起培養。於本說明書提供的試驗中，所用VR1較佳為哺乳類VR1，更佳為人類或大鼠VR1。受體可經重組表現或自然表現。VR1製劑得為，例如，得自重組表現人類VR1的HEK293或CHO細胞的膜製劑。與可檢測出調節類香草醇配位體且與VR1結合的化合物一起培養，造成與VR1製劑結合的標記量相對於化合物不存在下結合的標記量，呈現降低或增加。此降低或增加如本說明書所述，得用於測定VR1的Ki。對某些較佳的辣椒素受體促效劑而言，於此等辣椒素受體配位體結合試驗中，Ki為1微摩爾濃度或1微摩爾濃度以下、100奈摩爾濃度或100奈摩爾濃度以下，或為10奈摩爾濃度或10奈摩爾濃度以下。
辣椒素受體促效劑活性可利用如實施例7所提供的標準活體外VR1-媒介的鈣移動試驗予以測定。或者，或另外，利用如實施例10所提供的經培養背根神經節試驗與/或如實施例11所提供的活體內疼痛舒緩試驗來提高化合物的活性。在一個或多個此等官能性試驗中，本說明書所提供的辣椒素受體促效劑，較佳為對VR1活性具有統計上顯著的專一性效果。本說明書所述的辣椒素受體促效劑在VR1鈣移動試驗中，1μM濃度辣椒素所引發的促效劑反應，較佳為100nM辣椒素所引發反應的至少30％，更佳為100nM辣椒素所引發反應的至少80％。
假若偵測出辣椒素受體促效劑能抑制類香草醇配位體結合至VR1與/或VR1-媒介的訊號傳導(例如，利用實施例7所提供的代表性試驗)，則辣椒素受體促效劑亦為拮抗劑。辣椒素受體促效劑亦可，但非需要，具可檢測VR1拮抗劑活性。某些具體實例中，本說明書所提供的辣椒素受體促效劑無法檢測實施例7試驗中的VR1拮抗劑活性。
較佳的辣椒素受體促效劑為非鎮靜性。換句話說，於測定疼痛舒緩的動物模式(例如，本說明書實施例11所提供的模式)中，足以提供止痛最小劑量兩倍的此等化合物劑量，在動物模式鎮靜試驗中(使用Fitzgerald等人，Toxicology 49(2-3)433-9(1988)敘述的方法)，只引起短暫(例如，持續不超過疼痛舒緩持續的時間的1/2)，或較佳為無統計上顯著的鎮靜作用。較佳地，足以提供止痛最小劑量的五倍劑量不會產生統計上顯著的鎮靜作用。更佳地，本說明書所提供的此等化合物於小於25毫克/公斤(較佳為小於10毫克/公斤)的靜脈內劑量，或小於140毫克/公斤(較佳為小於50毫克/公斤，更佳為小於30毫克/公斤)的口服劑量，不會產生鎮靜作用。
若有需要，得對本說明書所提供的辣椒素受體促效劑進行某些藥理性質評估，包括但不限定於，經口生物利用性(較佳化合物為具經口生物利用性至容許化合物的有效治療濃度達到小於140毫克/公斤，較佳為小於50毫克/公斤，更佳為小於30毫克/公斤，又更佳為小於10毫克/公斤，尚又更佳為小於1毫克/公斤，及最佳為小於0.1毫克/公斤的口服劑量程度)、毒性(當對病患投予有效治療量時，較佳的化合物不具毒性)、副作用(當對病患投予有效治療量時，較佳的化合物產生的副作用與安慰劑相當)、血清蛋白結合作用及活體外與活體內半衰期(較佳的辣椒素受體促效劑具有活體內半衰期，是允許Q.I.D.給藥，較佳為T.I.D.給藥，更佳為B.I.D.給藥，及最佳為一天給藥一次)。此外，血腦障壁的差異滲透性可能符合用於治療經由調節CNS VR1活性的疼痛，使得如上述的口服每日總劑量提供此調節作用至有效治療的程度，而使用辣椒素受體促進劑之低血腦障壁濃度用治療周圍神經媒介的疼痛可能較佳(亦即，此等劑量不會提供足以顯著地調節VR1活性的化合物於腦(例如，腦脊髓液)中的含量)。可使用此項技術中悉知的例行試驗來評估該些性質，及鑑定特別用途的優異化合物。例如，用於預測生物利用性的試驗，包括越過人類單層腸細胞(包括Caco-2單層細胞)的運送。化合物於人體的血腦障壁的滲透性得由投予該化合物(例如，經由靜脈)的實驗室動物中，該化合物於腦中的含量予以預測。血清蛋白結合得藉自蛋白結合試驗進行預測。化合物半衰期與所需劑量頻率成反比。化合物的活體外半衰期得藉本說明書實施例8敘述的微粒體半衰期試驗予以預測。
如上所述，本說明書提供的較佳辣椒素受體促效劑不具毒性。一般而言，應了解本說明書所用的「不具毒性」一詞為相對意義，是意指由美國食品藥物管理局(FDA)認可的投予哺乳動物(較佳為人類)用，或與已建立的準則一致，FDA易認可的投予哺乳動物(較佳為人類)用的任何物質。此外，高度較佳的不具毒性的化合物滿足一或多個下述準則(1)實質上不抑制細胞ATP的產生；(2)不顯著延長心臟QT間隔；(3)實質上不引起肝臟擴大；或(4)不引起肝臟酵素的實質釋放。
如本說明書所用實質上不抑制細胞ATP產生的化合物，是滿足本說明書實施例9所提準則的化合物。換句話說，使用100μM如實施例9所述的此等化合物處理細胞，其檢測出的ATP量為未處理細胞的至少50％。於更高度較佳的具體實例中，此等細胞檢測出的ATP量為未處理細胞的至少80％。
不顯著延長心臟QT間隔的化合物，是於投予產生相當於化合物EC50或IC50之血清濃度的劑量，對天竺鼠、迷你豬或狗不造成統計上顯著的延長心臟QT間隔(如心電圖所測定)的化合物。某些較佳具體實例中，非經腸或經口投予0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、40或50毫克/公斤的劑量不造成統計學上顯著的延長心臟QT間隔。所謂「統計上顯著」意指當使用統計顯著性的標準參數試驗，例如學生T試驗(student’s Ttest)測定時，於p＜0.1或更佳為p＜0.05的顯著性下，與對照組結果不同。
若以產生相當於化合物EC50或IC50之血清濃度的劑量，每日治療實驗室嚙齒類(例如，小鼠或大鼠)5至10天後，造成肝臟對體重比的增加不大於相配對照組的100％，則稱該化合物為實質上不引起肝臟擴大。於更高度較佳的具體實例中，相對於對應的對照組，此等劑量不引起大於75％或50％的肝臟擴大。若用於非嚙齒類哺乳動物(例如，狗)，則此等劑量相對於對應的對照組，必須不造成肝臟對體重比的增加大於50％，較佳為不大於25％，更佳為不大於10％。此等試驗中的較佳劑量包括非經腸或經口投予0.01、0.05、0.1、0.5、1、5、10、40或50毫克/公斤。
同樣地，若投予相等於該化合物EC50或IC50所產生的血清濃度最小劑量的兩倍，與對應的模擬處理對照組比較，不提高實驗室嚙齒類動物的ALT、LDH或AST血清中含量的100％以上，則稱該VR1調節劑不促進肝臟酵素的實質釋放。於更高度較佳的具體實例中，相對於對應的對照組，此等劑量不提高此等血清中含量的75％以上或50％以上。或者，若於活體外肝細胞試驗中，相等於該化合物EC50或IC50的濃度(於活體外與肝細胞接觸及培養的培養基或其他此等溶液中)，無法檢測出任何此等肝臟酵素釋放進入培養基中，達對應的模擬處理對照組細胞培養基中觀察到的基線量以上，則稱該VR1調節劑不促進肝臟酵素的實質釋放。於更高度較佳的具體實例中，此等化合物濃度為該化合物EC50或IC50的五倍，較佳為此等化合物濃度為該化合物EC50或IC50的十倍，仍無法檢測出任何此等肝臟酵素釋放進入培養基中超過基線量。
其他具體實例中，某些較佳的化合物的濃度等於該化合物EC50或IC50時，不抑制或誘發微粒體細胞色素P450酵素活性，例如CYP1A2活性、CYP2A6活性、CYP2C9活性、CYP2C19活性、CYP2D6活性、CYP2E1活性或CYP3A4活性。
某些較佳的化合物的濃度等於該化合物EC50或IC50時，不具基因破壞性(clastogenic)(例如，如使用小鼠紅血球前身細胞(erythrocyteprecursor cell)微核試驗、Ames微核試驗、螺旋微核試驗等所測定)。其他具體實例中，於此等濃度，某些較佳的化合物不會誘發同源染色單體交換(例如，於中國倉鼠卵巢細胞中)。
為了檢測目的，於下文做更具細節的討論，本說明書提供的化合物得進行同位素標記或放射標記。因此，本說明書所提供的辣椒素受體促效劑得有一或多個原子，以原子質量或質量數與一般自然界發現的原子質量或質量數不同的相同元素的原子置換。能出現於本說明書所提供化合物中的同位素實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯的同位素，例如2H、3H、11C、13C、14C、15N、18O、17O、31P、32P、35S、18F及36Cl。此外，以重同位素例如氘(亦即，2H)置換，由於代謝穩定性較高，例如活體內半衰期增加或劑量需求減少，能提供某些治療優點，因此，於一些情形下更宜使用。
辣椒素受體促效劑的製備本說明書所提供的辣椒素受體促效劑通常可使用標準合成方法予以製備。起始物質可自供應商例如Sigma-Aldrich公司(密蘇裡St.Louis市)購得，或可使用已建立的流程由市售的前驅物合成。舉例而言，可使用與下文任何圖式所示的相同合成途徑，以及有機化學合成技藝中習知的合成方法，或於此項技術領域具有通常知識者所熟知的其變異方法。下文圖式中各變數，是參照與本說明書所提供化合物的說明中一致的任何基團。
下列圖示中，術語「降低」意指使硝基官能性降至為氨基官能性。此等轉換可由習知有機合成技藝者所熟知的多種方法來完成，包括但不限於，催化性氫化、以SnCl2還原與以三氧化鈦還原。還原方法概要請參見Hudlicky，M.Reductions in Organic Chemistry，ACS Monograph188，1996。
術語「活化」意指使醯氨基團的羰基轉換成合適離去基(L)的合成性轉換。適於完成此等轉換的試劑為有機合成技藝者所熟知，包括但不限於，SOCl2，POCl3與三氟甲磺酸酐(triflic anhydride)。
式Ia與Ib的化合物通常可如於2003年7月31日公告之PCT國際專利案WO 03/062209主要所述的方法加以製備，且第39至41頁與第68至73頁有關此等化合物合成的教示資料合併於此以資參考。略

圖1a至1c與實施例1與2說明此等合成。式II的化合物可如略圖2與實施例3的說明予以合成。式III的化合物可如略圖3與實施例4的說明予以合成。
略圖1a
略圖1b 略圖1c 略圖2
略圖3 某些實施例中，辣椒素受體促效劑得含有一個或多個不對稱碳原子，使得該化合物能以不同的立體異構物形式存在。此等形式，例如，能為消旋性或具光學活性的形式。如上文所述，所有立體異構物均涵蓋於本發明範圍內。然而，可期望獲得單一鏡像異構物(亦即，具光學活性的形式)。製備單一鏡像異構物的標準方法，包括不對稱合成及消旋性異構物的解析。消旋性異構物的解析例如能藉習知方法，諸如解析分割劑存在下的結晶法，或使用例如手性高效液相(HPLC)管柱的層析法而達成。
化合物的放射性標記得藉使用含有至少一個原子為放射性同位素的前驅物進行其合成。各放射性同位素較佳為碳(例如，14C)、氫(例如，3H)、硫(例如，35S)、或碘(例如，125I)。以氚標記的化合物亦得經由氚化乙酸中的鉑催化交換、氚化三氟乙酸中的酸催化交換、或以該化合物為基質的使用氚氣的異相催化交換予以催化製備。此外，如果適當，則某些前驅物得與氚氣進行氚-滷素交換、不飽和鍵的氚氣還原、或使用硼氚化鈉進行還原。放射性標記化合物的製備，亦可向專精於訂製合成放射性標記探針化合物的放射性同位素供應商訂購而便利地達成。
醫藥組成物本發明亦提供包含一種或多種辣椒素受體促效劑，以及至少一種生理上可接受載劑或賦形劑的醫藥組成物。醫藥組成物得包含，例如一種或多種的水、緩衝劑(例如，中性緩衝鹽液或磷酸鹽緩衝鹽液)、乙醇、礦物油、植物油、二甲亞碸(DMSO)、碳水化合物(例如，葡萄糖、甘露糖、蔗糖或葡聚糖)、甘露糖醇、蛋白質、佐劑、多 或胺基酸(例如甘胺酸)、抗氧化劑、螯合劑(例如EDTA)或麩胱甘(glutathione)、及/或防腐劑。如上所述，本說明書提供的醫藥組成物中得(但並非需要)包含其他活性成分。
醫藥組成物得進行調配，以供任何適當投予方式的用途，包括例如局部、經口、經鼻、經直腸或非經腸投藥。本說明書所用非經腸一詞，包括皮下、皮內、血管(例如，靜脈)、肌內、脊髓、顱內、椎管內、及腹腔內注射，以及任何類似的注射或輸注技術。某些具體例中，以適用於口服用途的形式為佳。此等形式包括，例如錠劑、片劑、菱形錠劑、水性或油性懸浮液、分散性粉劑或粒劑、乳液、硬或軟膠囊、或糖漿或酏劑(elixier)。又其他具體例中，本發明組成物得調配成凍乾物。對某些症狀(例如，於治療皮膚症狀)而言，以供局部投藥的調配物為佳。
欲供口服用途的組成物得進一步包含一種或多種成分，例如甜味劑、調味劑、著色劑及/或防腐劑，以提供迎合愛好且美味的製劑。錠劑含有活性成分，並摻合適用於製造錠劑的生理上可接受賦形劑。此等賦形劑包括，例如，惰性稀釋劑(例如，碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉)、造粒劑及崩解劑(例如，玉米澱粉或海藻酸)、粘合劑(例如，澱粉、明膠或阿拉伯膠)及潤滑劑(例如，硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉)。錠劑得未包覆或得利用已知技術包覆以延緩於胃腸道內的崩解與吸收，因而提供較長時間的持續作用。例如，得使用時間延緩物質諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
供口服用途的調配物亦得製成硬明膠膠囊，其中該活性成分是與惰性固體稀釋劑(例如，碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)混合；或製成軟明膠膠囊形式，其中該活性成分是與水或油介質(例如，花生油、液態石蠟或橄欖油)混合。
水性懸浮液含有活性物質，並摻有適用於製造水性懸浮液的賦形劑。此等賦形劑包括懸浮劑(例如，羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃耆膠與阿拉伯膠)；及分散劑或潤溼劑(例如，天然存在的磷脂類例如卵磷脂、環氧化物與脂肪酸的縮合產物例如硬脂酸聚氧伸乙酯、環氧乙烷與長鏈脂族醇的縮合產物例如十七伸乙基氧基鯨蠟醇、環氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇的部分酯的縮合產物例如聚氧伸乙基山梨糖醇單油酸酯、或環氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇酐的部分酯的縮合產物例如聚伸乙基山梨聚糖單油酸酯)。水性懸浮液亦得包含一種或多種防腐劑例如對羥苯甲酸乙酯或對羥苯甲酸正丙酯、一種或多種著色劑、一種或多種調味劑、及一種或多種甜味劑例如蔗糖或糖精。
油性懸浮液得藉於植物油(例如，花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油例如液態石蠟中，懸浮活性成分予以調配。油性懸浮液得含有增稠劑例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。得添加該些如上文所述的甜味劑及/或調味劑，以提供美味的口服製劑。此等懸浮液得藉添加抗氧化劑(例如抗壞血酸)予以保存。
適用於藉添加水製備水性懸浮液的分散性粉劑及粒劑是由活性成分摻合分散劑或潤溼劑、懸浮劑與一種或多種防腐劑所製成。適當的分散劑或潤溼劑及懸浮劑，上文已有例述。亦得存在其他賦形劑，例如甜味劑、調味劑與著色劑。
醫藥組成物亦得調配成水包油型乳液。油相得為植物油(例如，橄欖油或花生油)、礦物油(例如，液態石蠟)、或其混合物。適當的乳化劑包括天然存在的膠類(例如，阿拉伯膠或黃耆膠)、天然存在的磷脂類(例如，黃豆卵磷脂、及衍生自脂肪酸與己糖醇的酯或部分酯類)、酐類(例如山梨聚糖單油酸酯)、及衍生自脂肪酸與己糖醇的部分酯與環氧乙烷的縮合產物(例如，聚氧伸乙基山梨聚糖單油酸酯)。乳液亦得包含一種或多種甜味劑及/或調味劑。
糖漿與酏劑得與甜味劑例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖一起調配。此等調配物亦得包含一種或多種緩和劑、防腐劑、調味劑及/或著色劑。
供局部投藥的調配物典型地包含結合活性劑的局部載劑(vehicle)，含或不含視需要而使用的額外成分。適當的局部載劑及額外成分為此項技術中所悉知，顯見地，載劑的選擇取決於特定的物理形態及傳送方式。局部載劑包括水；有機溶劑例如醇類(例如，乙醇或異丙醇)或甘油；二醇類(例如，丁二醇、異戊二醇或丙二醇)；脂族醇類(例如，羊毛脂)；水與有機溶劑的混合物及有機溶劑(例如醇)與甘油的混合物；脂質為基底的物質例如脂肪酸、醯基甘油類(包括油類例如礦物油，及天然或合成來源的脂肪)、磷酸甘油酯類、神經鞘脂質類及蠟類；蛋白質為基底的物質例如膠原蛋白及明膠；聚矽氧為基底的物質(非揮發性與揮發性二者)；及烴為基底的物質例如微囊海綿及聚合物基質。組成物得進一步包含一種或多種適於改善所用調配物穩定性或有效性的成分，例如穩定劑、懸浮劑、乳化劑、粘度調整劑、膠凝劑、防腐劑、抗氧化劑、皮膚滲透增強劑、保溼劑及持續釋放物質。此等成分的實例如Martindale--The Extra Pharmacopoeia(倫敦Pharmaceutical Press出版，1993年)及Martin編著Remington’s Pharmaceutical Sciences中所述者。調配物得包括微膠囊，例如羥甲基纖維素或明膠-微膠囊、微脂粒、白蛋白微球體、微乳液、奈米粒子或奈米膠囊。
局部調配物得製備成多種物理形態，包括例如固體、糊劑、乳霜、泡沫劑、乳劑、凝膠、粉劑、水溶液、及乳液。此等形態的物理外觀及粘度，是由調配物中乳化劑及粘度調整劑的存在與否及用量所控制。固體通常堅實且不具傾瀉性，通常調配成棒狀或條狀、或微粒狀；固體得為不透明或透明，視需要得含有溶劑、乳化劑、保溼劑、軟化劑、芳香劑、染料/著色劑、防腐劑、及增加或加強最終產物效力的其他活性成分。乳霜及乳劑經常相似，主要為粘度不同；乳劑及乳霜均得為不透明、半透明或透明，並常含有乳化劑、溶劑、粘度調整劑、以及保溼劑、軟化劑、芳香劑、染料/著色劑、防腐劑、及增加或加強最終產物效力的其他活性成分。凝膠能製備成具廣泛粘度，從濃稠或高粘度至稀薄或低粘度。該些調配物，像乳劑與乳霜一樣，亦得含有溶劑、乳化劑、保溼劑、軟化劑、芳香劑、染料/著色劑、防腐劑、及增加或加強最終產物效力的其他活性成分。液體比乳霜、乳液、或膠體稀薄，通常不含乳化劑。液體的局部調配物常含有溶劑、乳化劑、保溼劑、軟化劑、芳香劑、染料/著色劑、防腐劑、及增加或加強最終產物效力的其他活性成分。
適用於局部調配物用的乳化劑，包括但不限定於離子性乳化劑、鯨蠟醇、非離子性乳化劑例如聚氧伸乙基油基醚(polyoxyethylene oleyl醚)、PEG-40硬脂酸酯、鯨蠟基硬脂醇醚(ceteareth)-12、鯨蠟基硬脂醇醚-20、鯨蠟基硬脂醇醚-30、鯨蠟基硬脂醇醚、PEG-100硬脂酸酯、及硬脂酸甘油酯。適當的粘度調整劑，包括但不限定於保護性膠體或非離子性膠類(例如羥乙基纖維素、黃原膠、矽酸鋁鎂、矽石、微晶蠟、蜂蠟、石蠟、及棕櫚酸鯨蠟酯)。凝膠組成物得藉添加膠凝劑例如幾丁聚糖、甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙烯醇、聚季銨鹽類(polyquaterniums)、羥乙基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙甲基纖維素、咔波姆(carbomer)、或胺化的甘草酸而製成。適當的界面活性劑，包括但不限定於非離子、兩性、離子及陰離子界面活性劑。舉例而言，得於局部調配物中使用一種或多種下列界面活性劑二甲基聚矽氧烷共聚醇(dimethicone copolyol)、聚山梨糖醇酯20、聚山梨糖醇酯40、聚山梨糖醇酯60、聚山梨糖醇酯80、月桂醯胺DEA、椰油醯胺DEA與椰油醯胺MEA、油基三甲銨內酯、椰油醯胺丙基磷脂基PG-二硬脂氯(PG-dimonium chloride)、及月桂醇硫酸銨。適當的防腐劑包括但不限定於，抗微生物劑(例如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、山梨酸、苯甲酸、與甲醛)，以及物理穩定劑與抗氧化劑(例如維生素E、抗壞血酸鈉/抗壞血酸及沒食子酸丙酯)。適當的保溼劑包括但不限定於，乳酸與其他羥基酸及其鹽、甘油、丙二醇、與丁二醇。適當的軟化劑包括羊毛脂醇、羊毛脂、羊毛脂衍生物、膽固醇、礦脂、新戊酸異硬脂酯及礦物油。適當的芳香劑與著色劑包括但不限定於，FDC紅色40號、FDC黃色5號。其他得加入局部調配物中的適當額外成分，包括但不限定於磨蝕劑、吸收劑、抗結塊劑、抗起泡劑、抗靜電劑、收斂劑(例如，金縷梅、醇與草本萃取物例如洋甘菊萃取物)、粘合劑/賦形劑、緩衝劑、螯合劑、薄膜形成劑、調理劑、推進劑、遮光劑、pH調整劑及保護劑。
適用於凝膠調配物的局部載劑實例為羥丙基纖維素(2.1％)；70/30異丙醇/水(90.9％)；丙二醇(5.1％)；及聚山梨糖醇酯80(1.9％)。適用於泡沫劑調配物的局部載劑實例為鯨蠟醇(1.1％)；硬脂醇(0.5％)；季銨鹽52(0.1％)；丙二醇(2.0％)；乙醇95 PGF3(61.05％)；去離子水(30.05％)；P75烴推進劑(4.30％)。所有百分比均為重量％。
典型的局部組成物傳送模式，包括使用手指的施敷法；使用物理施敷器(例如布、面紙、紗布、棉棒或刷子)的施敷法；噴霧法(包括水氣、氣溶液或泡沫噴霧法)；點滴器施敷法；淋灑；浸漬；及潤溼法。亦得使用經控制的釋放載劑。
醫藥組成物得製備成無菌注射用水性或油質懸浮液。視所用載劑與濃度，該促效劑能懸浮或溶解於載體中。此一組成物得使用例如該些如上所述的適當分散劑、潤溼劑及/或懸浮劑，根據已知技術予以調配。該些可接受的載劑與溶劑，得為水、1，3-丁二醇、林格氏溶液(Ringer’ssolution)及等張氯化鈉溶液。此外，得使用無菌的固定油類作為溶劑或懸浮介質。欲達此目的，得使用任何溫和的固定油，包括合成的單或二甘油酯。此外，於注射用組成物的製備中得使用脂肪酸例如油酸，以及佐劑例如局部麻醉劑、防腐劑及/或緩衝劑能溶於載劑中。
辣椒素受體促效劑亦得調配成栓劑(例如，供直腸投藥用)。此等組成物得藉混合該藥物與適當的無刺激性賦形劑而製得，該賦形劑於常溫時為固體，於直腸溫度時為液體，因而於直腸中融化而釋出該藥物。適當的賦形劑包括，例如，可可脂及聚乙二醇類。
醫藥組成物得調配成持續釋放型調配物(亦即，投藥後緩慢釋放促效劑的如膠囊的調配物)。此等調配物通常得使用習悉知技術予以製備，並利用例如，口服、直腸或皮下植入，或於所需標的位置的植入法來投予。此等調配物所用的載體(carrier)具生物相容性，亦得具生物降解性；較佳為調配物提供相當固定的促效劑釋放量。持續釋放型調配物的促效劑含量取決於，例如，植入位置、釋放率與預期持續釋放時間、及所治療或預防的症狀性質。
除了上述投予模式外或並用上述投予模式，亦得方便地將辣椒素受體促效劑添加於食物或飲用水(例如，供投予非人類動物包括陪伴動物(例如，狗與貓)及家畜用)中。得調配動物飼料與飲用水，俾使動物隨其膳食一起攝入適量組成物。亦得方便地將組成物製成預混物，供添加於飼料或飲用水中。
辣椒素受體促效劑通常以有效治療量投予。較佳的全身性劑量，每天每公斤體重不高於50毫克(例如，每天每公斤體重約0.001毫克至約50毫克)，其中口服劑量通常比靜脈劑量高約5至20倍(例如，每天每公斤體重0.01至40毫克)。
得與載體物質組合以產生單一劑量單位的活性成分用量，例如視所治療病患及投藥特定模式而不同。劑量單位型式通常含有介於約10微克與約500毫克間的活性成分。最適劑量得使用此項技術中習知的例行測試法及程序予以建立。
醫藥組成物得加以包裝以處理對辣椒素受體促效劑治療敏感的症狀(例如，疼痛、呼吸性症狀，如氣喘)。經包裝的醫藥組成物得包含，容納如本說明書所述的至少一種辣椒素受體促效劑有效量的容器，及指示所含組成物用於治療病患對VR1調節敏感的說明書(例如，標籤)。
使用方法包括本說明書所述的辣椒素受體促效劑，得於活體外及活體內的多種內容下使用。本說明書所特定提供的方法內容中，有至少一種辣椒素受體促效劑不為類香草醇；較佳為至少一種辣椒素受體促效劑為本說明書所提供的一個或多個化學式的範圍內。例如，可使用辣椒素受體促效劑(群)，以調節辣椒素受體的訊號傳導活性。此等調節作用可在適於該等促效劑(群)與受體結合的條件下，使辣椒素受體(於活體外或活體內)與一個或多個辣椒素受體促效劑接觸來獲得。辣椒素受體促效劑(群)通常以足以改變類香草醇配位體與VR1於活體外的結合性(採用實例6的分析法測定)與/或VR1-媒介訊號傳導作用(採用實例7的分析法測定)的濃度存在。此受體得存在於溶液或懸浮液中，在經培養或單離的細胞製劑或病患體內。訊號傳導活性的調節作用可藉由測定鈣離子傳導性(亦稱為鈣泳動或匯流)加以評估。訊號傳導活性的調節作用可藉由檢測接受本說明書所提供的一個或多個辣椒素受體促效劑治療的病患的症狀變化(例如，疼痛或支氣管阻塞)來評估。較佳地，辣椒素受體促效劑(群)的有效治療劑量為經口或局部投予病患(例如，人類)，且當調節VR1訊號傳導活性時，存在於動物至少一種體液中。
本發明進一步提供以辣椒素受體促效劑治療有敏感症狀的處理方法。本發明的內容中，術語「治療」一詞涵蓋改善疾病的治療及症狀的治療，可為預防性(亦即，於症狀發作前，用以預防、延緩或減輕症狀嚴重性)或治療性(亦即，於症狀發作後，用以減輕症狀嚴重性及/或持續性)。若此等治療造成狀況或症狀緩解，則稱該症狀為「對辣椒素受體促效劑治療有敏感作用」。此等症狀包括，例如，如下文所詳述的疼痛、呼吸性疾病(諸如氣喘及慢性阻塞性肺疾)、搔癢、尿失禁、咳嗽、打嗝、及肥胖症，此等症狀得使用此項技術中已建立的準則予以診斷及偵測。病患可包括人類、馴養的陪伴動物及家畜，使用劑量則如上所述。較佳地，投予動物一種或多種辣椒素受體促效劑的量，以使該促效劑在動物至少一種體液中的有效治療濃度為1微摩爾濃度或小於1微摩爾濃度，較佳100奈摩爾濃度或小於100奈摩爾濃度、50奈摩爾濃度或小於50奈摩爾濃度、或為20奈摩爾濃度或小於20奈摩爾濃度。例如，得以小於20毫克/公斤體重，較佳為小於5毫克/公斤體重，一些情形下為小於1毫克/公斤體重的劑量，投予此等化合物。
治療方法得隨所用化合物及欲治療的特定狀況而不同。然而，對大部分疾病的治療，以每天4次或4次以下的投藥頻率為佳。通常，以每天2次劑量的療法更佳，尤以一天用藥一次為佳。治療急性疼痛時，需要有迅速達到有效濃度的單一劑量。然而，對任何特別病患的具體劑量標準及治療方法，是取決於包括所用特定化合物活性、病患年齡、體重、一般健康情形、性別、飲食、投藥時間、投藥途徑、及排洩率、藥物組合及進行治療的特定疾病的嚴重性。通常，以足以提供有效治療的最小劑量為佳。一般可採用適於所治療或預防狀況的醫學或獸醫學準則，偵測病患的治療效果。
可使用本說明書特定提供的一種或多種辣椒素受體促效劑治療的疼痛，可為急性或慢性疼痛，包括但不限定於由周圍神經媒介的疼痛(尤其是神經痛)。辣椒素受體促效劑可用於下述疼痛的治療，例如，乳房切除後疼痛症候群、殘肢痛、幻覺肢體痛、口腔神經痛、牙痛(蛀牙所引起的疼痛)、假牙痛、帶狀皰疹後神經痛、糖尿病神經病變、反射性交感神經失養症、三叉神經痛、骨關節炎、風溼性關節炎、纖維肌痛、吉蘭-拜瑞症候群(GuillaiBarre Syndrome)、感覺異常性股痛、口腔灼熱症候群與/或兩側性周圍神經病變。其他神經痛症狀包括灼熱痛(反射性交感神經失養症-RSD，僅次於周圍神經傷害)、神經炎(包括，例如，坐骨神經炎、周圍神經炎、多神經炎、視神經炎、熱病後神經炎、移動性神經炎、分節性神經炎及宮保氏神經炎(Gombault’s neuritis))、神經細胞炎、神經痛(例如，上文所述者、頸臂神經痛、顱部神經痛、膝狀神經痛、舌咽神經痛、偏頭性神經痛、自發性神經痛、肋間神經痛、乳房神經痛、下頷關節神經痛、摩頓氏神經痛(Morton’s neuralgia)、鼻睫神經痛、枕骨神經痛、紅斑性肢痛症、史路德氏神經痛(Sluder’sneuralgia)、蝶顎神經痛、眶上神經痛及翼管神經痛)、與手術相關的疼痛、肌肉與骨胳疼痛、與愛滋病(AIDS)相關的神經病變、與多發性(MS)相關的神經病變、及與脊柱神經受傷相關的疼痛。頭痛，包括涉及周圍神經活性的頭痛，例如竇性、叢發性(亦即，偏頭性神經痛)及一些壓力性頭痛與偏頭痛，亦得如本說明書所述予以治療。例如，偏頭痛得於病患一感受到偏頭痛前的預兆，即儘速投予辣椒素受體促效劑而加以防止。能如本說明書所述加以治療的進一步疼痛症狀，包括「口腔灼熱症候群」、產痛、恰得氏疼痛症(Charcot’s pains)、腸氣疼痛、經痛、急性與慢性背痛(例如，下背痛)、痔痛、消化不良痛、心絞痛、神經根疼痛、同位性疼痛及異位性疼痛-包括與癌症有關的疼痛(例如，骨癌病患)、與暴露於毒液(例如，由於遭蛇咬、蜘蛛咬、或蟲叮)有關的疼痛(及炎症)、及與外傷有關的疼痛(例如，手術後疼痛、由傷口、瘀傷與骨折引起的疼痛、及灼傷痛)。得如本說明書所述給予治療的其他疼痛，包括與炎性腸疾相關的疼痛、腸激躁症候群與/或炎性腸疾。
某些態樣中，辣椒素受體促效劑得用於治療機械性疼痛。本說明書所用「機械性疼痛」(mechanical pain)一詞，是指頭痛以外的非神經痛或因暴露於熱、冷或外在化學性刺激引起的疼痛。機械性疼痛包括物理創傷(熱或化學性灼燒，或其他暴露於有毒化學品的發癢與/或疼痛除外)諸如手術後疼痛及因傷、挫傷與骨折引起的疼痛；牙痛；假牙痛；神經根疼痛；骨關節炎；風溼性關節炎；肌纖維痛；感覺異常性股痛；背痛；與癌症相關的疼痛；心絞痛；腕隧道症候群；及由骨折、生產、痔瘡、腸氣、消化不良、及月經引起的疼痛。
得加以治療的搔癢症狀，包括牛皮癬搔癢、因血液透析引起的搔癢、過水搔癢症、及與陰道前庭炎、接觸性皮膚炎、蟲咬及皮膚過敏相關的搔癢。如本說明書所述的尿失禁，包括源自脊椎的迫尿肌反射亢進及膀胱過動，兩者皆可如本說明書所述進行治療。某些此等治療方法中，辣椒素受體促效劑是經由導管或類似裝置投予，將辣椒素受體促效劑直接注入膀胱中。辣椒素受體促效劑亦得作為止咳劑(以預防、緩和或壓制咳嗽)、用於治療打嗝、及促進肥胖病患的減輕體重。
其他態樣中，辣椒素受體促效劑可用於治療涉及發炎成分症狀的組合療法。此等症狀包括，例如，習知具發炎成分的自體免疫失調與病理性自體免疫反應，包括但不限定於，關節炎(尤其是風溼性關節炎)、牛皮癬、克隆氏病症(Crohn’s disease)、紅斑狼瘡症、腸激躁症候群、組織移植排斥、及移植器官的超急性排斥。其他此等症狀包括創傷(例如，頭或脊椎神經的傷害)、心血管與腦血管疾病及某些感染病症。
此等組合療法中，至少一種辣椒素受體促效劑是與至少一種抗炎劑一起投予病患。辣椒素受體促效劑與抗炎劑得存在於相同的醫藥組成物中，或得以任一順序分開投予。抗炎劑包括，例如，非類固醇抗炎性藥物(NSAIDs)、非專一性及環氧酶-2(COX-2)專一性環氧酶酵素抑制劑、金化合物、皮質類固醇類、胺甲喋呤、癌症細胞壞死因子(TNF)受體拮抗劑、抗-TNFα抗體、抗-C5抗體、及介白素-1(IL-1)受體拮抗劑。NSAIDs的實例包括但不限定於異丁苯丙酸(例如，ADVILTM、MOTRINTM)、氟聯苯丙酸(ANSAIDTM)、甲氧萘基丙酸或甲氧萘基丙酸鈉(例如，NAPROSYN、ANAPROX、ALEVETM)、雙氯芬酸(diclofenac)(例如，CATAFLAMTM、VOLTARENTM)、雙氯芬酸鈉與米索前列醇(misoprostol)(例如，ARTHROTECTM)的組合、舒林酸(sulindac)(CLINORILTM)、二苯噁唑基基丙酸(oxaprozin)(DAYPROTM)、二氟苯水楊酸(DOLOBIDTM)、匹若西咔(piroxicam)(FELDENETM)、吲哚美沙辛(indomethacin)(INDOCINTM)、伊託多雷(etodolac)(LODINETM)、菲喏洛芬鈣(fenoprofen calcium)(NALFONTM)、酮布洛芬(ketoprofen)(例如，ORUDISTM、ORUVAILTM)、甲氧萘基丁酮鈉(sodiumnabumetone)(RELAFENTM)、柳酸磺胺吡啶(sulfasalazine)(AZULFIDINETM)、託美丁鈉(tolmetin sodium)(TOLECTINTM)、與羥基氯啉(hydroxychloroquine)(PLAQUENILTM)。特定的NSAIDs類別由抑制環氧酶(COX)酵素的化合物組成，例如塞利昔布(celecoxib)(CELEBREXTM)與羅非昔布(rofecoxib)(VIOXXTM)。NSAIDs進一步包含水楊酸鹽例如乙醯基水楊酸或阿司匹靈、水楊酸鈉、膽鹼與水楊酸鎂類(TRILISATETM)、與雙水楊酯(salsalate)(DISALCIDTM)、以及皮質類固醇類例如可體松(cortisone)(CORTONETM乙酸鹽)、地塞米松(dexamethasone)(例如，DECADRONTM)、甲基氫化潑尼松(methylprednisolone)(MEDROLTM)、氫化潑尼松(PRELONETM)、氫化潑尼松磷酸鈉(PEDIAPREDTM)、與潑尼松(prednisone)(例如，PREDNICEN-MTM、DELTASONETM、STERAPREDTM)。
於此組合療法中，辣椒素受體促效劑的適當劑量通常如上所述。抗炎劑投予劑量及方法見述於，例如，Physician’s Desk Reference中製造商的說明書。某些具體實例中，辣椒素受體促效劑與抗炎劑的組合投予，導致產生治療效果所需抗炎劑劑量的減少。因此，較佳地，於本發明的組合或組合治療方法中，抗炎劑的劑量小於製造商建議的未與辣椒素受體促效劑組合一起投予的抗炎劑最大劑量。更佳為，該劑量小於製造商建議的未與辣椒素受體促效劑組合一起投予的抗炎劑最大劑量的3/4，又更佳為小於1/2，及高度更佳為小於1/4，最佳為小於製造商建議的未與辣椒素受體促效劑組合一起投予的抗炎劑最大劑量的10％。顯見地，達到期望效果的所需組合中，辣椒素受體促效劑成分的劑量可同樣地受該組合中抗炎劑成分的劑量與效力所影響。
某些較佳具體實例中，辣椒素受體促效劑與抗炎劑的組合投予，藉由將一種或多種辣椒素受體促效劑與一種或多種抗炎劑包裝於相同包裝盒物的分別容器中，或者以一種或多種辣椒素受體促效劑與一種或多種抗炎劑之混合物包裝於相同容器中。較佳的混合物是調配成供口服用(例如，呈丸劑、膠囊、錠劑等)。某些具體實例中，該包裝物包括印有標記的標籤，指示該一種或多種辣椒素受體促效劑及一種或多種抗炎劑是一起用於治療炎性疼痛症狀。高度較佳的組合為，其中抗炎劑包含至少一種COX-2專一性環氧酶酵素抑制劑，例如瓦第昔布(valdecoxib)(BEXTRA)、蘭拉昔布(lumiracoxib)(PREXIGETM)、依託昔布(etoricoxib)(ARCOXIA)、塞利昔布(celecoxib)(CELEBREX)及/或羅非昔布(rofecoxib)(VIOXX)。
進一步態樣中，本說明書提供的辣椒素受體促效劑得與一種或多種其它疼痛緩解藥物組合使用。某些此等藥物亦為如上所列舉的抗炎劑。其他此等藥物為麻醉止痛劑，其典型地作用於一種或多種類鴉片劑受體亞型(例如，μ、κ及/或δ)，較佳是作為促效劑或部分促效劑。此等止痛劑包括鴉片劑、鴉片劑衍生物及類鴉片劑，以及其醫藥上可接受的鹽與水合物。較佳具體實例中，麻醉止痛劑的詳細實例包括阿芬旦尼(alfentanyl)、阿法普魯汀(alphaprodine)、安尼勒立汀(anileridine)、培集屈密特(bezitramide)、丁基原啡因(buprenorphine)、可待因(codeine)、二乙醯基二氫嗎啡、二乙醯基嗎啡、二氫可待因、氰二苯丙基苯基吡啶羧酸乙酯(diphenoxylate)、乙基嗎啡、芬太尼(fentanyl)、海洛因、二氫可待因酮(hydrocodone)、二氫嗎啡酮(hydromorphone)、異美沙冬(isomethadone)、左旋甲基嗎泛(levomethorphan)、羥甲左嗎南(levorphane)、左旋碼泛(levorphane)、麥啶(meperidine)、美他唑新(metazocine)、美沙酮(methadone)、美索芬(methorphan)、美託酮(metopon)、嗎啡、鴉片萃取物、鴉片流體萃取物、鴉片粉劑、鴉片粒劑、粗鴉片、鴉片酊、羥氫可待因酮(oxycodone)、羥二氫嗎啡酮(oxymorphone)、複方樟腦酊(paregoric)、潘他唑新(pentazocine)、配西汀(pethidine)、吩那唑新(phenazocine)、匹密喏汀(piminodine)、丙氧吩(propoxyphene)、消旋甲基嗎泛(recemethorphan)、消旋嗎泛(racemorphan)、蒂巴因(thebaine)、及前述製劑醫藥上可接受的鹽與水合物。
麻醉止痛劑的其他實例，包括乙醯託啡因(acetorphine)、乙醯基二氫可待因、乙醯美沙多(acetylmethadol)、丙烯普魯汀(allylprodine)、阿法乙醯美沙多、阿法美普魯汀(alphameprodine)、阿法美沙多、苯才西汀(benzethidine)、苄基嗎啡、貝他乙醯美沙多(betacetylmethadol)、貝他美普魯汀(betameprodine)、貝他美沙多、貝他普魯汀、布妥芬喏(butorphonol)、克羅尼他淨(clonitazene)、甲基溴可待因、N-氧化可待因、噻普喏啡(cyprenorphine)、二氫去氧嗎啡(desomorphine)、右旋嗎拉密特(dextromoramide)、狄安普魯密特(diampromide)、二乙基二噻吩基丁烯胺(diethylthiambutene)、二氫嗎啡、狄門喏沙多(dimenoxadol)、狄美菲坦喏(dimepheptanol)、二甲基二噻吩丁烯胺、嗎二噁苯基丁酸酯(dioxaphetyl butyrate)、狄匹潘濃(dipipanone)、託蒂巴醇(drotebanol)、乙醇、甲基乙基二噻吩丁烯胺、愛託失立汀(etonitazene)、愛託芬(etorphine)、愛託失立汀(etoxeridine)、佛萊西汀(furethidine)、羥二氫嗎啡(hydromorphinol)、羥基配西汀(hydroxypethidine)、羥苯基六氫吡啶丙酮(ketobemidone)、左旋嗎拉密特(levomoramide)、左旋吩納西嗎泛(levophenacylmorphan)、甲基去氧嗎啡、甲基二氫嗎啡、嗎啡裡汀(morpheridine)、嗎啡甲基溴化物、甲基磺胺嗎啡、N-氧化嗎啡、密羅啡因(myrophin)、那喏松(naloxone)、那拜芬(nalbuyphine)、那提喝松(naltyhexone)、菸鹼醯可待因(nicocodeine)、菸鹼醯嗎啡、去甲基乙醯美沙多(noracymethadol)、左旋原嗎泛(norlevorphanol)、原美沙多(normethadone)、原嗎啡(normorphine)、原匹潘濃(norpipanone)、戊唑凱因(pentazocaine)、芬那多松(phenadoxone)、吩喃普魯密特(phenampromide)、吩喏嗎泛(phenomorphan)、吩喏配立汀(phenoperidine)、匹立屈密特(piritramide)、福得汀(pholcodine)、普魯庚唑英(proheptazoine)、普魯配立汀(properidine)、普魯匹蘭(propiran)、外消旋嗎密特(racemoramide)、蒂巴康(thebacon)、屈美配立汀(trimeperidine)、及其醫藥上可接受的鹽與水合物。
進一步詳細的代表性麻醉止痛劑包括，例如TALWINNx與DEMEROL(二者均可購自紐約市Sanofi Winthrop Pharmaceuticals公司)；LEVO-DROMORAN；BUPRENEX(維吉尼亞州Richmond，Reckitt Coleman Pharmaceuticals公司)；MSIR(康乃狄克州Norwalk，Purdue Pharma L.P.公司)；DILAUDID(紐澤西州MountOlive，Knoll Pharmaceutical公司)；SUBLIMAZE；SUFENTA(紐澤西州Titusville，Janssen Pharmaceutica公司)；PERCOCET、NUBAIN與NUMORPHAN(均可購自賓州Chadds Ford，Endo Pharmaceuticals公司)；HYDROSTATIR、MS/S與MS/L(均可購自肯塔基州Florence，Richwood Pharmaceutical公司)、ORAMORPHSR與ROXICODONE(二者均可購自俄亥俄州Columbus，RoxanneLaboratories)及STADOL(紐約市Bristol-Myers Squibb公司)。又進一步的麻醉止痛劑包括CB-2受體促效劑，例如AM1241，及與α2δ次單元結合的化合物，例如紐若丁(Neurontin)(加巴噴丁(Gabapentin))與普瑞加巴林(pregabalin)。
又進一步態樣中，本文所提供的辣椒素受體促效劑可與一種或多種白三烯受體拮抗劑(例如抑制半胱胺醯基白三烯受體CysLT1的藥劑，例如，蒙特利克(Montelukast)(SINGULAIR；Merck Co.，Inc.))組合使用。此等組合可用於治療肺部疾病，如氣喘。
此等組合療法中，辣椒素受體促效劑的合適劑量通常如上述。其他緩解疼痛的醫藥劑量與投藥方法可見述於，例如，Physician’s DeskReference中製造商的說明書。某些具體實例中，辣椒素受體促效劑與一種或多種其他緩解疼痛醫藥的組合投予結果，導致產生治療效果時所需各治療藥劑的劑量(例如其中一種或兩種藥劑的劑量可小於上述或製造商所建議的最高劑量的3/4、小於1/2、小於1/4、或小於10％)。某些較佳具體實例中，辣椒素受體促效劑與一種或多種另外的的組合投予，藉由在相同包裝物中包裝一種或多種辣椒素受體促效劑與一種或多種其他緩解疼痛醫藥的組合投予而達成。
本說明書所提供的辣椒素受體促效劑亦可用於體溫的調節作用。舉例而言，此等化合物可投予至需要減輕發燒的病患，或其它期望降低體溫的情況(例如，低溫外科手術)。此等化合物亦可用於宿醉的治療。
本說明書所提供的辣椒素受體促效劑得進一步用於，例如，群眾控制(作為催淚瓦斯的代用品)、私人保護(例如，噴霧調配劑)，或經由辣椒素受體去敏化作用作為治療疼痛、搔癢或尿失禁的醫藥劑。一般而言，用於群眾控制或私人保護的化合物，是根據習知催淚瓦斯或辣椒噴霧劑技術加以調配及使用。
於分別態樣中，本發明為本說明書提供的辣椒素受體促效劑提供多種非醫藥上的活體外及活體內用途。例如，此等化合物得予以標記，作為辣椒素受體(於例如細胞製品或組織切片、製劑、或其片段的試樣中)檢測與定位用的探針。本說明書提供的化合物得於受體活性試驗中作為陽性對照組用、作為測定候選劑與辣椒素受體結合能力的標準、或者作為正子射出斷層掃描術(PET)成像用或單光子發射電腦斷層掃描術(SPET)用的放射性追蹤劑。此等方法能用於鑑定活體中的辣椒素受體。例如，辣椒素受體促效得使用任何各種習悉知技術予以標記(例如，以放射性核種例如氚進行放射性標記，如本說明書所述)，及以適當的培養時間(例如，由首先進行結合時間試驗而加以決定)與試樣一起培養。培養後，去除未結合的化合物(例如，利用洗滌)，使用適用於所用標記的任何方法檢測已結合化合物(例如，進行放射性標記化合物的自動放射照相術或閃爍計數；得使用光譜分析法檢測發光基團及螢光基團)。針對含有標記化合物及較大量(例如，10倍量)未標記化合物的相配試樣，得以相同方法進行，作為對照組。與對照組相較下，較大量的可檢出標記殘留於測試試樣中，表示試樣中有辣椒素受體。檢測試驗包括於培養細胞或組織試樣中，辣椒素受體的受體自動放射照相術(受體製圖)，得如Kuhar於Current Protocols in Pharmacology(紐約John Wiley Sons出版，1998)中8.1.1至8.1.9章節所述方式進行。
本說明書所提供的辣椒素受體促效劑亦得於用於各種習知的細胞分離方法中。例如，辣椒素受體促效劑得連結至組織培養盤或其他支撐體的內側表面，作為供固定的親和性配位體，藉而單離活體外的辣椒素受體(例如，單離受體表現細胞)。一較佳實施例中，是使連結於螢光標記(例如，螢光素(fluorescein))的辣椒素受體促效劑與細胞接觸，然後利用螢光激發細胞分選儀(FACS，亦稱流式細胞儀)進行分析(或單離)。
以下提供的實施例意在說明而非用以限制本發明。除非另行指出，否則所有試劑與溶劑均為標準商用級，使用時未進一步純化。
實施例質譜分析標明「MS」欄位中的質譜數據，為電噴灑質譜(Electospray MS)，是於15或30伏特(V)圓錐形電壓的正離子模式中，使用配備有Waters600型馬達、Waters 996型光電二極體陣列檢測器、Gilson 215自動採樣器及Gilson 841微注射器的微質量飛行時間式LCT(MicromassTime-of-Flight LCT)。用MassLynx(加拿大多倫多，Advanced ChemistryDevelopment公司)4.0版軟體進行數據收集與分析。將1微升體積的試樣注射至50×4.6毫米的Chromolit SpeedROD C18管柱，然後以6毫升/分鐘流動速率用兩相的線性梯度衝提液。於220至340奈米(nm)紫外光範圍，用全吸收計數(total absorbance count)檢測試樣。衝提條件為移動相A-95/5/0.05水/甲醇/三氟乙酸(TFA)；移動相B-5/95/0.025水/甲醇/TFA。
梯度時間(分鐘)％B0 10
0.51001.21001.21 10注射與注射間的周期為2分鐘。數據以質量+1(M+1)表示；遲滯時間以分鐘來表示。
實施例1製備式Ia與Ib的代表性辣椒素受體促效劑A.(7-溴-喹唑啉-4-基)-(5-三氟甲基-吡啶-2-基)-胺(化合物1)1.7-溴-4-氯-喹唑啉 將7-溴-3H-喹唑啉-4-酮(1.24克，0.0055摩爾)的POCl3溶液回流3.5小時。於減壓下去除多餘的POCl3，並將殘餘物分溶於EtOAc與飽和NaHCO3溶液間。乾燥EtOAc層，並於減壓下去除溶劑，以獲得呈黃色固體的7-溴-4-氯-喹唑啉。
2.(7-溴-喹唑啉-4-基)-(5-三氟甲基-吡啶-2-基)-胺 將7-溴-4-氯-喹唑啉(200毫升，0.821毫摩爾)與2-氨基-5-三氟甲基-吡啶(239毫克，1.48毫摩爾)的混合物於230℃加熱2分鐘。冷卻並將該固體殘餘物分溶於乙酸乙酯(EtOAc)與10％NaOH間。乾燥EtOAc層(Na2SO4)，於減壓下去除多餘溶劑，並經由驟速層析法來純化，以產生呈黃色固體的(7溴-喹唑啉-4-基)-(5-三氟甲基-吡啶-2-基)-胺。質譜數據(M+1)369.0(遲滯時間為1.21分鐘)。當如實施例7所述的測試辣椒素受體促效劑活性時，該化合物具有小於1微摩爾濃度的EC50。
B.(7-溴-吡啶並[3，2-D]嘧啶-4-基)-(4-叔丁基-異噁唑基)-胺(化合物2)1.5-溴-3-硝基吡啶-2-甲腈 將2，5-二溴-3-硝基吡啶(1.77克，6.3毫摩爾；Malinowski(1988)Bull.Soc.Chim.Belg.9751；亦請參見US5,801,183)與氰化亞銅(0.60克，6.69毫摩爾)的N，N-二甲基乙醯胺(25毫升)溶液於100℃加熱72小時。冷卻後，以水(25mL)稀釋該混合物，並以EtOAc萃取兩次(每次25毫升)，後以水(每次25毫升)洗滌兩次。以Na2SO4乾燥該經合併的EOAc萃取物，蒸發，並藉由驟速層析法(50％EtOAc-己烷)來純化，以獲得呈灰白色固體的5-溴-3-硝基吡啶-2-甲腈。
2.3-氨基-5-溴吡啶-2-甲腈 於濃鹽酸將5-溴-3-硝基吡啶-2-甲腈(1.5克，5.3毫摩爾)與SnCl2-二水合物(5.00克，26.3毫摩爾)混合，並於室溫下攪拌一夜。進行加冰，並小心地添加10M NaOH直到溶液呈鹼性。以Et2O(200毫升)萃取兩次，以Na2SO4乾燥，並蒸發。藉由矽膠層析法(75％己烷-EtOAc)來純化，以提供呈灰白色固體的3-氨基-5-溴吡啶-2-甲腈。
3.7-溴吡啶並[3，2-d]嘧啶-4-醇 將3-氨基-5-溴吡啶-2-甲腈(504毫克，2.00毫摩爾)與醋酸鈉(312mg，3.81mmol)的混合物於甲酸(20毫升)中回流16小時。進行蒸發成白色固體，並添加3N NaOH(50毫升)。過濾掉任何未溶的物質，再藉由添加濃HCl至pH3使游離的嘧啶醇再成形。收集7-溴吡啶並[3，2-d]嘧啶-4-醇，並使其乾燥一夜。
4.溴-4-氯吡啶並[3-2-d]嘧啶
將7-溴吡啶並[3，2-d]嘧啶-4-醇(35毫克，0.15毫升)與POCL3(10毫升)的混合物，於90℃加熱16小時。使POCl3蒸發並添加冰(100克)，接著小心地加入飽和的NaHCO3。以EtOAc萃取兩次，以Na2SO4乾燥，並蒸發以提供呈白色固體的溴-4-氯吡啶並[3-2-d]嘧啶。
5.(7-溴-吡啶並[3，2-d]嘧啶-4-基-4-叔丁基-異噁唑基)-胺 於N，N-二甲基乙醯胺(4毫升)中，將溴-4-氯吡啶並[3-2-d]嘧啶(200毫克，0.82毫摩爾)與4-(叔丁基)異噁唑基胺(200毫克，1.43毫摩爾)的混合物於120℃加熱2小時。使其冷卻至室溫，添加1M NaOH(10毫升)，以EtOAc萃取兩次(每次10毫升)，以Na2SO4乾燥，並蒸發以提供粗產物。藉由矽膠層析法來純化，以75％己烷-EtOAc來衝堤，以提供呈白色固體的(7-溴-吡啶並[3，2-d]嘧啶-4-基-4-叔丁基-異噁唑基)-胺。質譜時間(M+1)348.1(遲滯時間為1.24分鐘)。當如實施例7所述的測試辣椒素受體促效劑活性時，該化合物具有小於1微摩爾濃度的EC50。
C.(4-叔丁基-苯基)-[2-(順式-2，6-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-7-三氟甲基-喹唑啉-4-基]-胺(化合物3)1.2-硝基-4-三氟甲基-苯甲腈 於DNA中，將1-氯-2-硝基-4-三氟甲基-苯(10克，44毫摩爾)與CuCN(6克，66.5毫摩爾)的混合物，於110℃攪拌5小時。冷卻至室溫，以EtOAc稀釋，透過硅藻土(celite)過濾，以鹽水洗滌有機層，以Na2SO4乾燥，於真空下濃縮。藉由驟速層析法來純化殘餘物(5∶1己烷/EtOAc)，以獲得2-硝基-4-三氟甲基-苯甲腈。
2.2-硝基-4-三氟甲基-苯甲醯胺 將於75％H2SO4(50毫升)之2-硝基-4-三氟甲基-苯甲腈(5.8克，27毫摩爾)的懸浮液於90℃加熱1小時。冷卻至室溫，以H2O稀釋，並收集沉澱物，以獲得2-硝基-4-三氟甲基-苯甲醯胺。
3.2-氨基-4-三氟甲基-苯甲醯胺 將2-氨基-4-三氟甲基-苯甲醯胺(5.8克，25毫摩爾)的EtOAc-EtOH(1∶1，100毫升)溶液以10％Pd-C於室溫下氫化4小時。透過硅藻土過濾，並於減壓下移除溶劑，以獲得2-氨基-4-三氟甲基-苯甲醯胺。
4.2-氯甲基-7-三氟甲基-喹唑啉-4-酮 將2-氨基-4-三氟甲基-苯甲醯胺(800毫克，3.9毫摩爾)的2-氯-1，1，1-三甲氧基乙烷(5毫升)溶液於135℃加熱5小時。於減壓下濃縮該混合物，以50毫升醚稀釋，並收集該沉澱物，以獲得2-氯甲基-7-三氟甲基-喹唑啉-4-酮。
5.4-氯-2-氯甲基-7-三氟甲基-喹唑啉 將2-氯甲基-7-三氟甲基-喹唑啉-4-酮(2.4克，9.1毫摩爾)、POCl3(2.6毫升，27毫摩爾)與2，6-二甲基吡啶(3.2毫升，27毫摩爾)的混合物於CHCl3(200毫升)中回流16小時。使該混合物冷卻，並於減壓下濃縮。將殘餘物分溶於EtOAc與飽和NaHCO3溶液間。以另外的NaHCO3洗滌該EtOAc部分，然後以Na2SO4乾燥，並於減壓下濃縮。透過矽膠(衝提液為1∶1 EtOAc/己烷)過濾該棕色殘餘物，並於減壓下濃縮，以獲得4-氯-2-氯甲基-7-三氟甲基-喹唑啉6.(4-叔丁基-苯基)-(2-氯甲基-7-三氟-甲基-喹唑啉-4-基)-胺 將4-氯-2-氯甲基-7-三氟甲基-喹唑啉(100毫克，0.36毫摩爾)與於CH3CN(4毫升)的混合物4-叔丁基-苯胺(53毫克，0.36毫摩爾)，於80℃加熱4小時。冷卻該混合物，並依序以CH3CN、醚類洗滌該沉澱物，以獲得呈單-HCl鹽類的(4-叔丁基-苯基)-(2-氯甲基-7-三氟-甲基-喹唑啉-4-基)-胺。
7.(4-叔丁基-苯基)-[2-(順式-2，6-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-7-三氟甲基-喹唑啉-4-基]-胺 將(4-叔丁基-苯基)-(2-氯甲基-7-三氟甲基-喹唑啉-4-基)-胺HCl(100毫克，0.23毫摩爾)的順式-2，6-二甲基-嗎啉(1毫升)溶液於80℃加熱3小時。於減壓下除去多餘的順式-2，6-二甲基-嗎啉，並將殘餘物分溶於EtOAc與飽和NaHCO3溶液間。以Na2SO4乾燥EtOAc層，並於減壓下濃縮，以獲得(4-叔丁基-苯基)-[2-(順式-2，6-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-7-三氟甲基-喹唑啉-4-基]-胺。質譜數據(M+1)473.3(遲滯時間為1.16分鐘)。當如實施例7所述的測試辣椒素受體促效劑活性時，該化合物具有小於1微摩爾濃度的EC50。
實施例2製備式Ia與Ib另外的代表性辣椒素受體促效劑可利用常規的修改來改變起始材料，並使用另外的步驟來製造本說明書所提供的其它化合物，包括下表中的Ia與Ib者。表Ia中，當如實施例7所述的測試辣椒素受體促效劑活性時，該化合物具有小於1微摩爾濃度的EC50。
表Ia代表性的辣椒素受體促效劑

表Ib代表性的辣椒素受體促效劑





實施例3製備式II的代表性辣椒素受體促效劑A.5-氟-1-丙基-1H-苯並咪唑-2-基甲基-(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-胺(化合物55)1.(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-胺 將2，4-二氯苯甲基胺(500毫克，2.81毫升)溶解於2-乙氧基-1-萘甲醛(569毫克，2.84毫升)、醋酸(6滴)與四氫呋喃(THF)(25毫升)的溶液中。以分成部分方式加入三乙醯氧基硼氫化鈉(sodiumtriacetoxyborohydride)(903毫升，4.26毫摩爾)，並於50℃加熱該混合物一夜。於減壓下去除溶劑，並將剩餘的殘餘物溶解於EtOAc(25毫升)與1N NaOH(25毫升)中。去除有機層，並以另外的25毫升EtOAc來萃取該水溶液。將此兩個有機萃取物合併，並以鹽水(50毫升)洗滌。以Na2SO4乾燥該經合併的萃取物，並於減壓下去餘溶劑。藉由矽膠管柱層析法來純化該粗混合物，依序以CH2Cl2、CH2Cl2/MeOH(95∶5)來衝堤，以產生標題化合物。MS360.02(M+1)2.5-氟-1-丙基-1H-苯並咪唑-2-基甲基-(2，4-二氯-苯甲基)-(2乙氧基-萘-1-基甲基)-胺 將1-正丙基-2-(氯甲基)-5-氟苯並咪唑溴化氫(21.2毫克，0.069毫摩爾)與(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-胺(25毫克，0.069毫摩爾)溶解於10％N，N-二異丙基乙基胺的乙腈混合物中。於50℃加熱該反應混合物一夜。添加N，N-二乙二胺(10微升(μl))並於50℃攪拌1小時。於減壓下去除溶劑，使剩餘的殘餘物溶解於CH2Cl2(1毫升)與1N NaOH(1毫升)。去除有機層，並將其放置在SPE矽膠管柱。依序以CH2Cl2、CH2Cl2/MeOH(95∶5)衝堤該管柱，以產生標題化合物。MS550.4(M+1)；遲滯時間為1.33分鐘。當如實施例7所述的測試辣椒素受體促效劑活性時，該化合物具有小於1微摩爾濃度的EC50。
B.另外的辣椒素受體促效劑可利用常規的修改來改變起始材料，並使用另外的步驟來製造本說明書所提供的其它化合物。使用該方法來製備表II所列的化合物。當如實施例7所述的測試辣椒素受體促效劑活性時，表II所有化合物都具有小於1微摩爾濃度的EC50。
表II式II代表性的辣椒素受體促效劑

實施例4式III代表性的辣椒素受體促效劑A.2-(3-氯-苯基)-[1，6]-萘啶-4-羧酸苯甲基醯胺(化合物65)1.2-(3-氯-苯基)-[1，6]-萘啶-4-羧酸 混合乙基(4-N-三甲基乙醯基氨基嘧啶-3-基)乙醛酸(Rivalle andBisagni(1997)Journal of Heterocyclic Chemistry 34441-444)(1.25克，5毫摩爾)與氫氧化鉀(1.12克，20毫摩爾)於乙醇-水(1∶4，20毫升)，並加熱回流2小時。添加3』-氯苯丙酮(1.54克，10毫摩爾)並加熱回流24小時。於減壓下蒸發，加水並以二氯甲烷萃取。以醋酸來酸化水溶液層，並過濾收集固體。風乾獲得標題化合物。
2.2-(3-氯-苯基)-[1，6]-萘啶-4-羧酸苯甲基醯胺 添加草醯氯(252毫克，2.0毫摩爾)於2-(3-氯-苯基)-[1，6]-萘啶-4-羧酸(568毫克，2.0毫摩爾)的二氯甲烷(10毫升)中。攪拌該溶液1小時，然後加入苯甲基醯胺(214毫克，2.0毫摩爾)與三乙基胺(202毫克，2.0毫升)。攪拌該溶液1小時，並分溶於乙酸乙酯與飽和碳酸氫鈉(sodium bicarbonate)水溶液。以水洗滌有機層，以MgSO4乾燥，並於減壓下減縮。藉由驟速層析法在矽膠(乙酸乙酯)純化該殘餘物，以獲得標題化合物。質譜數據(M+1)374.0(遲滯時間為1.21分鐘)。當如實施例7所述的測試辣椒素受體促效劑活性時，該化合物具有小於1微摩爾濃度的EC50。
B.另外的辣椒素受體促效劑可利用常規的修改來改變起始材料，並使用另外的步驟來製造本說明書所提供的其它化合物。使用該方法來製備表III所列的化合物。當如實施例7所述的測試辣椒素受體促效劑活性時，表III所有化合物都具有小於1微摩爾濃度的EC50。
表III代表性的辣椒素受體促效劑

實施例5VR1-轉染細胞與膜製劑此實施例說明用於結合性分析法(實施例6)與官能性分析法(實施例7)的VR1-轉染細胞與膜製劑的製法。
取人類辣椒素受體全長的cDNA序列(美國專利案號6,482,611的SEQ ID N01、2或3)次選殖至質體pBK-CMV(加州La Jolla，Stratagene公司)，供於哺乳動物細胞中重組表現。
採用標準方法，使人類胚胎腎臟(HEK293)細胞經編碼全長度人類辣椒素受體的pBK-CMV表現構築體進行轉染。在含G418(400微克/毫升)的培養基中篩選轉染的細胞兩周，以得到一群安定的轉染細胞。經由限制稀釋法，自此群細胞中單離出獨立的選殖株，以得到可安定的選殖細胞株，供下一個試驗使用。
進行放射性配位體結合性試驗時，先將細胞接種至T175細胞培養瓶之不含抗生素的培養基中，生長至約90％融合度(confluency)。培養瓶隨後經PBS(磷酸鹽緩衝液)洗滌，並於含5mM EDTA的PBS中收集細胞。細胞經溫和離心集結成塊，然後保存在-80℃，直到進行試驗為止。
取先前冷凍的細胞，利用組織均質器助勻於冰冷的(HEPES)均質緩衝液中(5mM KCl5、5.8mM NaCl、0.75mM CaCl2、2mM MgCl2、320mM蔗糖與10mM HEPES pH7.4)。組織均質液先於1000×g(4℃)離心10分鐘，藉以除去核部分及細胞碎片，然後取第一次離心的上澄液再於35,000×g(4℃)離心30分鐘，得到部份純化的膜部份。先將膜再懸浮於HEPES均質緩衝液中後才進行試驗。取一份膜均質液，利用Bradford方法(BIO-RAD蛋白質試驗套組，#500-0001，加州Hercules，BIO-RAD公司)測定蛋白質濃度。
實施例6辣椒素受體結合性試驗本實施例說明辣椒素受體結合性的代表性試驗，此試驗得用於測定化合物對辣椒素(VR1)受體的結合親和性。
與[3H]樹膠脂毒素(RTX)的結合性試驗，基本上是依Szallasi與Blumberg(1992)J.Pharmacol.Exp.Ter.262883-888中說明的方法進行。此方法中，當結合反應結束後，非專一性的RTX結合會因添加牛α1酸醣蛋白(每支試管100微克)而降低。
RTX(37Ci/毫摩爾)是由馬裡蘭州費得利克 國家癌症研究所-費得利克癌症研究與發展中心(National Cancer Institute-FrederickCancer Research and Development Center)的化學合成與分析實驗室合成得到。[3H]RTX亦可商業上購得(例如，紐澤西州Piscataway，AmershamPharmacia Biotech公司)。
取實施例5的膜均質液依以上所述離心，並再懸浮於均質緩衝液中，達蛋白質濃度333微克/毫升。於冰上製備結合性試驗的混合物，其中包含[3H]RTX(比活性2200毫Ci/毫升)、2微升非放射活性試驗化合物、0.25毫克/毫升牛血清白蛋白(Cohn部份V)、與5×104至1×105VR1-轉感染細胞。使用上述冰冷的HEPES均質緩衝液(pH7.4)調整最終體積至500微升(用於競爭結合性試驗法)或1,000微升(用於飽和結合性試驗法)。非專一性結合的定義為在1μM非放射活性RTX(加州SanDiego，Alexis公司)存在下的結合性。分析飽和結合性時，[3H]RTX的添加濃度範圍為7至1,000pM，稀釋1至2次。典型操作法為每條飽和結合性曲線收集11個濃度點。
競爭結合性試驗法是於60 pM[3H]RTX及不同濃度測試化合物存在下進行。將試驗混合物移至37℃水浴中，開始進行結合反應，培養60分鐘後，使試管於冰上冷卻，中止反應。以WALLA玻璃纖維濾紙(馬裡蘭州Gaithersburg，PERKIN-ELMER公司)(使用前先浸泡1.0％聚伸乙基亞胺(PEI)2小時)過濾分離與膜結合的RTX及游離的RTX，及任何與α1酸醣蛋白結合的RTX。將濾紙乾燥過夜後，添加WALLAC BETASCINT閃爍計數液，於WALLAC1205 BETA PLATE計數器上計數。
平衡結合性參數的決定是藉由代入變構性希爾公式(allosteric Hillequation)，以電腦程式FIT P(密蘇裡州Ferguson，Biosoft公司)輔助計算數據(如Szallasi等人(1993)J.Pharmacol.Exp.Ther.266678-683中所說明)。本說明書所提供化合物於此試驗法中，對辣椒素受體的Ki值小於1μM、100nM、50nM、25nM、10nM、1nM、0.5nM、0.25nM或0.1nM。
實施例7鈣離子移動試驗本實施例說明用於評估測試化合物的促效劑與拮抗劑活性的代表性鈣離子移動試驗。
經表現質體轉染(如實施例5所述)藉以表現人類辣椒素受體的細胞系經接種至FALCON黑邊、透明底板的96孔板中(#3904，紐澤西州Franklin Lakes，ECTON-DICKINSON公司)，生長至融合度70至90％。然後排空96孔板中的培養基，於每一孔中加入FLUO-3AM鈣敏感性染料(奧勒岡州Eugene，Molecular Probes公司)(染料液1毫克FLUO-3AM、440微升DMSO與440微升20％普羅尼克酸(pluronic acid)的DMSO溶液，於克氏-林格氏(Krebs-Ringer)HEPES(KRH)緩衝液(25mMHEPES、5mM KCl、0.96mM NaH2PO4、1mM MgSO4、2mM CaCl2、5mM葡萄糖、1mM羧苯磺胺(probenecid)，pH7.4)中稀釋成1∶250，每孔中有50微升稀釋溶液)。以鋁箔覆蓋該96孔板，於37℃含5％CO2環境下培養1至2小時。培養後，排空該96孔板中的染料，以KRH緩衝液洗滌細胞一次，再懸浮於KRH緩衝液中。
測定辣椒素EC50為了測定試驗化合物對表現辣椒素受體對辣椒素或其他類香草醇促效劑的細胞之促效或拮抗鈣離子移動反應的能力，因此先測定促效劑辣椒素的EC50。於如上述所製備的每一孔細胞中，另外加入20微升KRH緩衝液與1微升DMSO。藉FLIPR儀器自動取出100微升含辣椒素的KRH緩衝液加至各孔中。藉FLUOROSKANASCENT(麻塞諸塞州Franklin，Labsystems公司)或FLIPR(螢光顯影板讀取系統，加州Sunnyvale，Molecular Devices公司)儀器以偵測辣椒素所誘發的鈣離子移動。以施用促效劑後30至60秒間得到的數據，用最終辣椒素濃度為1nM至3μM繪製8點濃度反應曲線。用KALEIDAGRAPH軟體(賓州Reading，Synergy Software公司)將數據代入公式y＝a*(1/(1+(b/x)c))以決定對反應有誘發作用的50％濃度(EC50)。此公式中，y為最高螢光訊號，x為促效劑或拮抗劑(本案例中為辣椒素)濃度，a為Emax；b相當於EC50值，c為希爾是數(Hill coefficient)。
促效劑活性的測定將試驗化合物溶於DMSO，以KRH緩衝液稀釋，然後即刻加至如上述製備的細胞中。100nM辣椒素(約EC90濃度)亦加至相同的96孔板內細胞中，作為陽性對照組。測試孔中的試驗化合物最終濃度介於0.1nM至5μM間。
藉由測定由該化合物所誘發之表現辣椒素受體的細胞的螢光反應作為化合物濃度的函數，決定試驗化合物作為辣椒素受體促效劑的能力。如上所述將此數據代入公式中得到EC50，該EC50通常小於1μM，較佳為小於100nM，更佳為小於10nM。每一試驗化合物的效力程度，亦藉計算由試驗化合物的濃度(典型為1μM)所誘發的反應，相對於由100nM辣椒素所誘發的反應而獲得。此數值稱為訊號百分比(POS)，是由下列公式計算而得POS＝100×試驗化合物反應/100nM辣椒素反應。
此分析提供試驗化合物作為人類辣椒素受體促效劑的能力與功效二者的定量評估。人類辣椒素受體促效劑通常以小於100μM的濃度，或者較佳為小於1μM的濃度，或者最佳為小於10nM的濃度誘發出可測得的反應。對人類辣椒素受體的功效程度於1μM濃度時，較佳為大於30POS，更佳為大於80POS。某些促效劑本質上無拮抗劑活性，是由如下所述的試驗中，於低於4nM的化合物濃度，更佳為低於10μM的濃度，最佳為低於或等於100μM的濃度時，無可檢出的拮抗劑活性所證實。
拮抗劑活性的測定將試驗化合物溶於DMSO後，以20微升KRH緩衝液稀釋至試驗化合物於試驗孔中的最終濃度介於1μM與5μM間，然後加至以如上所述製備的細胞中。將含製備細胞及試驗化合物的96孔板，於室溫下暗室培養0.5至6小時。注意不能連續培養超過6小時。在即將測定螢光反應前，用FLIPR儀器自動添加100微升含辣椒素的KRH緩衝液(辣椒素濃度為如上所述測得EC50濃度的2倍)至96孔板的每一孔中，使最終試樣體積為200微升，最終辣椒素濃度等於EC50。測驗孔中試驗化合物的最終濃度為介於1μM與5μM間。與相對應的控制組(亦即，無試驗化合物存在時，以兩倍於EC50濃度的辣椒素處理細胞)比較，辣椒素受體拮抗劑於10微摩爾濃度或更低的濃度，較佳為1微摩爾濃度或更低的濃度時，使此反應下降至少約20％、至少約50％，或至少約80％。相對於辣椒素存在下且無拮抗劑時觀察到的反應，造成下降50％時所需拮抗劑濃度為該拮抗劑的IC50。
實施例8活體外微粒體半衰期此實施例說明採用代表性肝微粒體半衰期分析法，評估化合物半衰期值(t1/2值)。
叢聚的人類肝微粒體是得自XenoTech公司(堪薩斯州KansasCity)。此等肝微粒體亦得自In Vitro Technologies公司(馬裡蘭州Baltimore)或Tissue Transformation Technologies公司(紐澤西州Edison)獲得。製備6個試驗反應，每一反應含25微升微粒體、5微升100μM試驗化合物溶液與399微升0.1M磷酸鹽緩衝液(19毫升0.1MNaH2PO4、81毫升0.1M Na2HPO4，以H3PO4調至pH7.4)。製備第7個反應作為陽性對照組，其含有25微升微粒體、399微升0.1M磷酸鹽緩衝液與5微升100μM已知代謝性質的化合物溶液(例如，戴阿瑞盼(DIAZEPAM)或克羅拉平(CLOZAPINE))。反應於39℃預培養10分鐘。
輔因子混合物的製備為取16.2毫克NADP與45.4毫克葡萄糖-6-磷酸鹽於4毫升100mM MgCl2中稀釋。葡萄糖-6-磷酸鹽脫氫酶溶液由214.3微升葡萄糖-6-磷酸鹽脫氫酶懸浮液(印第安那州Indianapolis，Roche Molecular Biochemicals公司)於1285.7微升蒸餾水中稀釋而製得。將71微升起始反應混合物(3毫升輔因子混合物、1.2毫升葡萄糖-6-磷酸鹽脫氫酶溶液)加至6個試驗反應中的5個以及陽性對照組中。將71微升100mM MgCl2加至第6個試驗反應中，作為陰性對照組。在各時間點(0、1、3、5、與10分鐘)，取75微升各反應混合物滴加至96孔含有75微升冰冷乙腈的深孔板中。將試樣振蕩混合，以轉速3500rpm離心10分鐘(Sorval T 6000D離心機，H1000B轉子)。自各反應中取出75微升上澄液移至96孔板中，各孔含有150微升0.5μM已知液相層析質譜(LCMS)圖形(內標準)的化合物溶液。每一試樣進行LCMS分析以AUC測定，未代謝的試驗化合物的量，化合物濃度相對於時間作圖，外插得到試驗化合物的t1/2值。
較佳的辣椒素受體促效劑，於人類肝微粒體活體外表現大於10分鐘至小於4小時的t1/2值，較佳為介於30分鐘與1小時間。
實施例9MDCK毒性分析此實施例說明採用Madin Darby犬腎臟(MDCK)細胞的細胞毒性分析法評估化合物毒性。
於具透明底板的96孔板(康乃狄克州Meriden，PACKARD公司)的各孔中，加入1微升試驗化合物，使分析法中化合物最終濃度為10微摩爾濃度、100微摩爾濃度或200微摩爾濃度。對照組孔中則加入無試驗化合物的溶劑。
MDCK細胞，ATCC no.CCL-34(維吉尼亞州Manassas，美國菌種培養收集處(American Type Culture Collection))，依ATCC生產資料頁的指示，維持在無菌狀況。取融合的MDCK細胞經胰蛋白酶處理，收集後，使用溫熱(37℃)培養基(VITACELL伊格氏最低必需培養基(minimum Essential Medium Eagle)，ATCC目錄#30-2003)稀釋至濃度0.1×106個細胞/毫升。將100微升已稀釋細胞加至各孔中，但其中5個標準曲線對照組孔中，改加入100微升無細胞的溫熱培養基。96孔板隨後於37℃，95％O2、5％CO2中，恆定振蕩培養2小時。培養後，每孔中加入50微升哺乳動物細胞溶胞液(使用康乃狄克州Meriden，PACKARD公司的ATP-LITE-M發光ATP檢測劑套組)，孔上覆蓋PACKARD TOPSEAL貼紙，然後於適合的振蕩器上，以轉速約700rpm振蕩2分鐘。
相對於未處理的細胞，引起毒性的化合物將降低ATP生成。ATP-LITE-M發光ATP檢測套組通常依據製造商的指示使用，以測定處理與未處理MDCK細胞中ATP的生成。使PACKARD ATP-LITE-M試劑平衡至室溫。一旦平衡後，即取冷凍乾燥的受質溶液於5.5毫升受質緩衝液(來自檢測套組)中再組成。冷凍乾燥的ATP標準溶液於去離子水中再組成，形成10mM母液。關於5個對照組孔，將10微升經系列稀釋的PACKARD標準物，加至每一標準曲線對照組孔中，使各連續孔的最終濃度為200nM、100nM、50nM、25nM與12.5nM。於所有孔中均添加PACKARD受質溶液(50微升)，然後加蓋，使孔板於合適的振蕩器上，以轉速約700rpm振蕩2分鐘。將白色PACKARD貼紙粘在各孔板底部，用金屬箔包裹孔板，使試樣保持於黑暗中10分鐘。然後於22℃以發光計數器(例如，PACKARD TOPCOUNT微板閃爍與發光計數器或TECAN SPECTRAFLUOR PLUS)測定發光度，並由標準曲線計算ATP含量。比較經試驗化合物處理的細胞中的ATP含量與未經處理細胞中所測得的ATP含量。經10μM辣椒素受體促效劑處理的細胞，ATP含量為未處理細胞的至少80％，較佳為至少90％。當試驗化合物使用100μM濃度時，經較佳試驗化合物處理的細胞中，檢測出的ATP含量為未處理細胞的至少50％，較佳為至少80％。
實施例10背根神經節(DRG)細胞試驗此實施例說明用於評估化合物的VR1拮抗劑或促效劑活性的代表性背根神經節細胞試驗法。
依標準方法(Aguayo與White(1992)Brain Research 57061-61)，自新生老鼠切下DRG，解離及培養。培養48小時後，洗滌細胞一次，然後與鈣敏感性染料Fluo-4 AM(2.5至10微克/毫升；購自德州Austin，TefLabs)培養30至60分鐘，接著再洗滌細胞一次。用螢光計測定Fluo-4螢光的變化，以偵測細胞外鈣濃度因添加辣椒素至細胞中，而導致與VR1有關的增加。收集60至180秒的數據，以決定最高螢光訊號。
關於拮抗劑分析，將化合物以各種不同濃度加至細胞中。然後將螢光訊號相對於化合物濃度函數作圖，以判別達到抑制50％辣椒素活化反應時所需的濃度，或IC50。然辣椒素受體拮抗劑的IC50，較佳為小於1微摩爾濃度、100奈摩爾濃度、10奈摩爾濃度或1奈摩爾濃度。
關於促效劑分析，將化合物以各種不同濃度加至細胞中且未加入辣椒素。用螢光計測定Fluo-4螢光的變化，以偵測細胞外鈣濃度因化合物為辣椒素受體促效劑，而導致與VR1有關的增加。EC50或達到辣椒素活化反應最大訊號50％時所需的濃度，較佳為小於1微摩爾濃度、小於100奈摩爾濃度或小於10奈摩爾濃度。
實施例11測定疼痛緩解的動物模式此實施例說明評估辣椒素受體促效劑所提供緩解疼痛程度的代表性方法。
A.疼痛緩解試驗下列方法得用於評估疼痛緩解。
機械性異常疼痛基本上是依Chaplan等人J.Neurosci.Methods 5355-63(1994年)及Tal與Eliav Pain 64(3)511-518(1998年)中說明的方法評估機械性異常疼痛(對無害刺激產生的異常反應)。取一系列不同剛度的凡弗瑞(yonFrey)絲線(典型為一系列8至14絲線)，施加在後腳足底表面，其力量恰足使絲線彎曲。絲線保持此位置不超過3秒鐘，或直到大鼠出現陽性異常疼痛反應為止。陽性異常疼痛反應，包括舉起經處理的後腳後，立即舔或搖動該腳足。採用狄克森上下分析法(Dixon up-down method)決定各絲線的施加順序與頻率。使用此系列中的中等絲線開始試驗，隨後依向上或向下順序連續施用，分別依開始時所使用絲線是否出現陰性或陽性反應而定。
若接受此等化合物處理的大老鼠，相較於未處理對照組或媒劑處理組大鼠，需要使用較高剛度的凡弗瑞絲線方得引起陽性異常疼痛反應時，表示該化合物得有效逆轉或預防類似機械性異常疼痛的症狀。或者，或此外，得在投予化合物之前及之後測試動物的慢性疼痛。此試驗法中，相較於處理前誘發反應時所需絲線，或未經處理或經媒劑處理且亦具慢性疼痛的動物所需絲線，有效化合物使處理後誘發反應所需絲線剛度提高。試驗化合物是於疼痛發作之前或之後投予。當試驗化合物在疼痛發作後投予時，則在投予後10分鐘至3小時進行試驗。
機械性痛覺過敏基本上是依Koch等人Analgesia 2(3)157-164(1996年)說明的方法測定機械性痛覺過敏(對疼痛刺激的反應過度)。將大鼠置於有溫熱多孔金屬地板的個別籠內。在任一隻後腳足底表面溫和針刺後，測定後腳抽回的時間期(亦即，動物將其後腳放回地板前保持後腳舉起的時間)若化合物使後腳抽回的時間期縮短達統計顯著性時，則該化合物會降低機械性痛覺過敏。試驗化合物得於疼痛發作之前或之後投予。當試驗化合物在疼痛發作後投予時，則在投予後10分鐘至3小時進行試驗。
熱痛覺過敏基本上是依Hargreaves等人說明於Pain.32(1)77-88(1988年)中的方法測定熱痛覺過敏(對有害熱刺激的反應過度)。簡單地說，在動物任一隻後腳的足底表面施加恆定的輻射熱源。抽回後腳的時間(亦即，動物移動後腳之前的加熱時間期)，或稱為熱閾值或潛伏期，即決定動物後腳對熱的敏感性。
若化合物使後腳抽回的時間增加達統計顯著性時(亦即，出現反應的熱閾值或潛伏期加長)，則該化合物降低熱痛覺過敏。試驗化合物得於疼痛發作之前或之後投予。當試驗化合物在疼痛發作後投予時，則在投予後10分鐘至3小時進行試驗。
B.疼痛模式得採用下列任一種方法誘發疼痛，以測定化合物的止痛效力。一般而言，採用雄性SD大鼠及下列至少一種模式時，本說明書所提供化合物以上述至少一種試驗法測定，使疼痛於統計上產生顯著的減少。
急性發炎疼痛模式急性發炎疼痛基本上是依Field等人說明於Br.J.Pharmacol.121(8)1513-1522(1997年)中的角叉菜膠(carrageenan)模式所誘發。取100至200微升的1至2％角叉菜膠溶液注射至大鼠後腳。注射後3至4小時，依以上所述方法測定動物對熱及機械性刺激的敏感性。試驗前或注射角叉菜膠前，對動物投予試驗化合物(0.01至50微克/公斤)。化合物能以口服或以任何非經腸途徑、或局部投藥至腳部的方式投予。此模式中緩解疼痛的化合物，於機械性異常疼痛及/或熱痛覺過敏，產生統計上顯著的減少。
慢性發炎疼痛模式採用下列一種方法誘發慢性發炎疼痛1.基本上是依Bertorelli等人說明於Br.J.Pharmacol.128(6)1252-1258(1999年)的方法，及Stein等人說明於Pharmacol.Biochem.Behav.31(2)455-51(1998年)的方法，將200微升完全弗洛伊德氏輔劑(Complete Freund′s Adjuvant，CFA)(0.1毫克熱殺死並乾燥的結核菌(M.Tuberculosis))注射至大鼠後腳100微升注入足背，100微升注入足底表面。
2.基本上是依Abbadie等人說明於J Neurosci.14(10)5865-5871(1994年)的方法，在大鼠的脛骨-跗骨關節注射150微升CFA(1.5毫克)。
採取以上任一方法注射CFA前，先取得各試驗動物後腳對機械及熱刺激的個別敏感度基線。
注射CFA後，以如上所述方法測試大鼠的熱痛覺過敏、機械性異常疼痛與機械性痛覺過敏。為了確使症狀發展出來，注射CFA後第5、6與7天時才開始進行大鼠試驗。第7天時，以試驗化合物、嗎啡或媒劑處理動物。以口服劑量為1至5毫克/公斤的嗎啡作為合適的陽性對照組。典型採用的試驗化合物劑量為0.01至50毫克/公斤。化合物能於試驗前以單一劑量投予，或於試驗前每天投藥1、2或3次，進行數天。藥物以口服或以任何非經腸途徑、或局部投藥方式投予動物。
所得結果以最高可能效力百分比(MPE)表示。0％MPE定義成媒劑的止痛效力，100％MPE定義成動物恢復至注射CFA前的基線敏感度。此模式中緩解疼痛的化合物產生的MPE至少為30％。
慢性神經病變性疼痛模式慢性神經病變性疼痛基本上是依Bennett與Xie說明於Pain3387-107(1988年)中的方法，採用慢性收縮傷害(CCI)處理大鼠坐骨神經而誘發。麻醉大鼠(例如，經腹膜內使用劑量50至65毫克/公斤的戊巴比妥(pentobarbital)及依需要增加的其他劑量)。將各後腳側面刮乾淨及消毒。採用無菌技術，切開後腳側面中股。將股二頭肌切成鈍端，曝露出坐骨神經。在每隻動物的其中一隻後腳上，依約1至2毫米的間隔，將四條結紮線鬆弛地結紮於坐骨神經周圍。另一隻腳的坐骨神經則沒有結紮且不處理。隨後蓋上肌肉，使用傷口夾或縫合線縫合皮膚。如以上所述評估大鼠的機械性異常疼痛、機械性痛覺過敏與熱痛覺過敏。
當投藥方式(0.01至50毫克/公斤，口服、非經腸方式或局部投藥)為，在即將試驗前投予單一劑量，或試驗前每天投藥1、2或3次，進行數天時，此模式中緩解疼痛的化合物，對機械性異常疼痛、機械性痛覺過敏及/或熱痛覺過敏產生統計上顯著的減少。
權利要求
1.一種如下式的化合物或其醫藥上可接受的鹽類 其中A、Z1、Z2、Z3、Z4與Z5獨立地為CH或N；X為CR1或N；R1、R1a與R1b在每次出現時獨立地選自氫、滷素、氰基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4滷代烷基或C1-C4滷代烷氧基；R2為氫或通式為(CH2)n-L-M的基團，其中L為O或NR4；M為(i)氫；或(ii)C1-C8烷基、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚、C2-C8烯基、4-至10-員碳環或雜環、或與R4連接形成4-至10-員雜環；其每一個視需要經0至6個獨立地選自下列的取代基所取代(a)羥基、滷素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、酮基或-COOH；或(b)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷醯基、C2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷醯基氧基、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺醯基或(4-至7-員雜環)C0-C8烷基；其中每一個經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基或氰基的取代基所取代；R4為氫或C1-C6烷基；或R4與M連接形成視需要經取代的雜環；及n為1、2或3；及R3為C1-C6烷基、C1-C6滷代烷基或氰基；從而使得R1a與R1b二者不都為C1-C4烷氧基；R1a與R2二者不都為氫；如果R3為C1-C4烷基，則R2不為氫；如果R1、R1a與R1b各自為氫，則R2不為氫；及如果R3為CF3，Z1與Z2皆為CH，且R1b為溴，則R2不為甲氧基甲基或3，5-二甲基嗎啉基。
2.如權利要求1所述的化合物或鹽類，其中R3為三氟甲基。
3.如權利要求1或2所述的化合物或鹽類，其中Z1與Z2中至少一個為CH。
4.如權利要求3所述的化合物或鹽類，其中Z1為N。
5.如權利要求3所述的化合物或鹽類，其中Z2為N。
6.如權利要求1或2所述的化合物或鹽類，其中Z1及Z2為N。
7.如權利要求1-6中任一所述的化合物或鹽類，其中A為N。
8.如權利要求1或2所述的化合物或鹽類，其中X為CR1，且Z4與Z5為CH。
9.如權利要求8所述的化合物或鹽類，其中X為CH。
10.如權利要求1-9中任一所述的化合物或鹽類，其中R2為氫。
11.如權利要求1-9中任一所述的化合物或鹽類，其中R2為 其中 代表4-至7-員經0至3個取代基所取代的雜環烷基環，所述取代基獨立地選自滷素、羥基、氰基、-COOH、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基。
12.如權利要求1所述的化合物或鹽類，其中所述化合物為(4-叔丁基-苯基)-[2-(順式-2，6-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-7-三氟甲基-喹唑啉-4-基]-胺；(4-叔丁基-苯基)-(7-氯-喹唑啉-4-基)-胺；(4-叔丁基-苯基)-喹唑啉-4-基-胺；(4-三氟甲基-苯基)-(7-三氟甲基-喹唑啉-4-基)-胺；(6-碘-喹唑啉-4-基)-(4-三氟甲基-苯基)-胺；(7-溴-吡啶並[3，2-d]嘧啶-4-基)-(4-異丙基-3-甲基-苯基)-胺；(7-溴-吡啶並[3，2-d]嘧啶-4-基)-(4-三氟甲基-苯基)-胺；(7-溴-吡啶並[3，2-d]嘧啶-4-基-4-叔丁基-異噁唑)-胺；(7-溴-喹唑啉-4-基)-(4-三氟甲基-苯基)-胺；(7-溴-喹唑啉-4-基)-(5-三氟甲基-吡啶-2-基)-胺；(7-溴-喹唑啉-4-基)-[4-(1，2，2，2-四氟-1-三氟甲基-乙基)-苯基]-胺；(7-氯-喹唑啉-4-基)-(4-三氟甲基-苯基)-胺；[2-(順式-2，6-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-7-三氟甲基-喹唑啉-4-基]-(6-三氟甲基-吡啶-3-基)-胺；[2-(順式-2，6-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-7-三氟甲基-喹唑啉-4-基]-(4-三氟甲基-苯基)-胺；[7-溴-2-(順式-2，6-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-喹唑啉-4-基]-(4-叔丁基-苯基)-胺；或4-(4-三氟甲基-苯基氨基)-喹唑啉-7-腈。
13.一種如下式的化合物或其醫藥上可接受的鹽類 其中A、Z1與Z2獨立地為CH或N；Z3、Z4、Z5與Z6獨立地為CR1、N、NH、O或S；從而使得Z3、Z4、Z5與Z6中至少三個獨立地選自CR1、N或NH；R1，R1a與R1b在每次出現時獨立地選自氫、滷素、羥基、氰基、酮基、C1-C4烷基、C1-C4烷氧基、C1-C4滷代烷基或C1-C4滷代烷氧基；從而使得R1a與R1b二者不都為C1-C4烷氧基；R2為氫或通式為-(CH2)n-L-M的基團，其中L為O或NR4；M為(i)氫；或(ii)C1-C8烷基、C3-C8烷酮、C2-C8烷基醚，C2-C8烯基、4-至10-員碳環或雜環，或與R4連接形成4-至10-員雜環；其中每一個經0至6個獨立地選自下列的取代基所取代(a)羥基、滷素、氨基、氨基羰基、氰基、硝基、酮基或-COOH；或(b)C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C8烷醯基、C2-C8烷氧基羰基、C2-C8烷醯基氧基、C1-C8烷基硫基、C2-C8烷基醚、苯基C0-C8烷基、苯基C1-C8烷氧基、單-或二-(C1-C6烷基)氨基、C1-C8烷基磺醯基或(4-至7-員雜環)C0-C8烷基；其中每一個經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基或氰基的取代基所取代；R4為氫或C1-C6烷基；或R4與M連接形成視需要可經取代的雜環；及n為1、2或3；及R3為C1-C6烷基、C1-C6滷代烷基或氰基。
14.如權利要求13所述的化合物或鹽類，其中Z3為N，且Z6為CH。
15.如權利要求14所述的化合物或鹽類，其中Z4為O，且Z5為CH。
16.如權利要求13、14或15所述的化合物或鹽類，其中Z1與Z2中至少一個為CH。
17.如權利要求16所述的化合物或鹽類，其中Z1為N。
18.如權利要求16所述的化合物或鹽類，其中Z2為N。
19.如權利要求13、14或15所述的化合物或鹽類，其中Z1與Z2為N。
20.如權利要求13-19中任一所述的化合物或鹽類，其中A為N。
21.如權利要求13-20中任一所述的化合物或鹽類，其中R2為氫。
22.如權利要求13-20中任一所述的化合物或鹽類，其中R2為 其中 代表4-至7-員經0至3個取代基所取代的雜環烷基環，所述取代基獨立地選自滷素、羥基、氰基、-COOH、C1-C4烷基或C1-C4烷氧基。
23.如權利要求13所述的化合物或鹽類，其中所述化合物為(2-甲基-7-三氟甲基-喹唑啉-4-基)-(2-三氟甲基-噻唑-5-基)-胺；(3-氯-6-甲基-吡啶並[2，3-b]吡嗪-8-基)-(2-三氟甲基-噻唑-5-基)-胺；(3-氯-6-甲基-吡啶並[2，3-b]吡嗪-8-基)-(5-三氟甲基-噻吩-2-基)-胺；(3-氯-吡啶並[2，3-b]吡嗪-8-基)-(5-三氟甲基-噻吩-2-基)-胺；(3-氟-吡啶並[2，3-b]吡嗪-8-基)-(5-三氟甲基-噻吩-2-基)-胺；(7-溴-吡啶並[3，2-d]嘧啶-4-基)-(5-叔丁基-異噁唑-3-基)-胺；(7-氯-[1，8]萘啶-4-基)-(2-甲基-噻唑-5-基)-胺；(7-氯-[1，8]萘啶-4-基)-(5-三氟甲基-噻吩-2-基)-胺；(7-氯-2-甲氧基甲基-蝶啶-4-基)-(2-三氟甲基-噻唑-5-基)-胺；(7-氯-2-甲氧基甲基-吡啶並[2，3-d]嘧啶-4-基)-(2-三氟甲基-噻唑-5-基)-胺；(7-氯-2-甲氧基甲基-吡啶並[2，3-d]嘧啶-4-基)-(5-三氟甲基-噻吩-2-基)-胺；(7-氯-2-甲氧基甲基-吡啶並[3，2-d]嘧啶-4-基)-(2-三氟甲基-噻唑-5-基)-胺；(7-氯-2-甲基-[1，8]萘啶-4-基)-(2-三氟甲基-噻唑-5-基)-胺；(7-氯-2-甲基-[1，8]萘啶-4-基)-N-(5-三氟甲基-噻吩-2-基)-胺；(7-氯-吡啶並[2，3-d]嘧啶-4-基)-N-(5-三氟甲基-[1，3，4]噻二唑-2-基)-胺；(7-氯-喹唑啉-4-基)-(5-三氟甲基-異噻唑-3-基)-胺；(7-氯-喹唑啉-4-基)-(5-三氟甲基-噻吩-2-基)-胺；(7-氟-2-嗎啉-4-基甲基-喹啉-4-基)-(2-三氟甲基-噻唑-5-基)-胺；(7-氟-吡啶並[2，3-d]嘧啶-4-基)-(2-三氟甲基-噻唑-5-基)-胺；(7-三氟甲基-[1，8]萘啶-4-基)-(2-三氟甲基-噻唑-5-基)-胺；(7-三氟甲基-喹唑啉-4-基)-(5-三氟甲基-異噻唑-3-基)-胺；[2-(2，6-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-7-氟-喹唑啉-4-基]-(5-三氟甲基-噻吩-2-基)-胺；或[2-(2，6-二甲基-嗎啉-4-基甲基)-7-氟-喹唑啉-4-基]-(2-三氟甲基-噻唑-5-基)-胺。
24.一種如下式的化合物或其醫藥上可接受的鹽類 其中Ar1為苯基，吡啶基或嘧啶基，其中每一個經0至3個獨立地選自Ra的取代基所取代；Ar2為萘基、喹啉基或喹唑啉基，其中每一個經0至6個獨立地選自Ra的取代基所取代；Ar3為苯並咪唑基或吲哚基，其中每一個經0至4個獨立地選自Ra的取代基所取代；及Ra在每次出現時為獨立地選自(i)羥基、滷素、氨基、氰基、硝基、氨基羰基或-COOH；或(ii)C1-C6烷基、C1-C6烯基、C1-C6炔基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷醯基、C2-C6烷氧基羰基、C2-C6烷醯基氧基、C1-C6烷基硫基、C2-C6烷基醚、單-或二-(C1-C6烷基)氨基或C1-C8烷基磺醯基，其中每一個經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基或氰基的取代基所取代。
25.如權利要求24所述的化合物或鹽類，其中該化合物的通式為 其中R1、R2與R3獨立地代表經0至3個獨立地選自滷素、羥基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4滷代烷基、C1-C4烷氧基或C1-C4滷代烷氧基的取代基所取代；R4為氫、C1-C6烷基、(C5-C6環烷基)C0-C2烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C1-C6烷氧基或C2-C6烷基醚；及R5為氫、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。
26.如權利要求25所述的化合物或鹽類，其中R5為C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。
27.如權利要求26所述的化合物或鹽類，其中R5為乙氧基。
28.如權利要求25-27中任一所述的化合物或鹽類，其中R4為甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、丙基、丁基、戊基、環戊基、丙烯基或甲氧基乙基。
29.如權利要求25所述的化合物或鹽類，其中所述化合物為(1-烯丙基-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-胺；(1-環戊基-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-胺；(1-環戊基-5-氟-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-胺；(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)N-(1-乙基-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-胺；(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-(1-戊基-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-胺；(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-(5-氟-1-丙基-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-胺；(2，4-二氯-苯甲基)-N-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-(6-氟-1-丙基-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-胺；(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-[1-(2-甲氧基-乙基)-1H-苯並咪唑-2-基甲基]-胺；(6-氯-1-丙基-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-N-(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-胺；或(7-氯-1-丙基-1H-苯並咪唑-2-基甲基)-(2，4-二氯-苯甲基)-(2-乙氧基-萘-1-基甲基)-胺。
30.一種如下式的化合物或其醫藥上可接受的鹽類 其中R1與R2獨立地為氫、滷素、氰基、氨基、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6烯基、C1-C6滷代烷基、C1-C6烷氧基、或單-或二-(C1-C6烷基)氨基；或R1與R2相連形成經0至3個獨立地選自Ra的取代基所取代的5-或6-員碳環或雜環；Y與Z獨立地為CH或N；Ar1與Ar2獨立地為苯基或6-員雜芳基，其中每一個經1至3個獨立地選自Ra的取代基所取代；及Ra在每次出現時是獨立地選自(i)羥基、滷素、氨基、氰基、硝基、氨基羰基或-COOH；或(ii)C1-C6烷基、C1-C6滷代烷基、C1-C6烯基、C1-C6炔基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷醯基、C2-C6烷氧基羰基、C2-C6烷醯基氧基、C1-C6烷基硫基、C2-C6烷基醚、單-或二-(C1-C6烷基)氨基或C1-C8烷基磺醯基，其中每一個經0至3個獨立地選自羥基、滷素、氨基或氰基的取代基所取代。
31.如權利要求30所述的化合物或鹽類，其中該化合物具有通式 其中W與X獨立地為N或CH；及R3代表0至3個獨立地選自Ra的取代基。
32.如權利要求31所述的化合物或鹽類，其中該化合物具有通式 其中R4代表獨立地選自羥基、滷素、氨基、氰基、C1-C4烷基、C1-C4滷代烷基、C1-C4烯基、C1-C4烷氧基、C1-C4滷代烷基或C1-C4滷代烷氧基中的1至2個取代基；及R5代表獨立地選自羥基、滷素、C1-C4烷基、C1-C4滷代烷基或C1-C4滷代烷氧基中的0至2個取代基。
33.如權利要求32所述的化合物或鹽類，其中該化合物選自2-(2-氟-5-三氟甲基-苯基)-[1，6]萘啶-4-羧酸3-甲氧基-苯甲基醯胺；2-(3-氯-苯基)-[1，6]萘啶-4-羧酸3-二氟甲氧基-苯甲基醯胺；2-(3-氯-苯基)-[1，6]萘啶-4-羧酸3-甲氧基-苯甲基醯胺；2-(3-氯-苯基)-[1，6]萘啶-4-羧酸3-三氟甲基-苯甲基醯胺；2-(3-氯-苯基)-[1，6]萘啶-4-羧酸苯甲基醯胺；2-(3-氯-苯基)-N-(3-甲氧基-苯甲基)-異菸鹼醯胺；2-(3-三氟甲基-苯基)-[1，6]萘啶-4-羧酸3-氟-苯甲基醯胺；2-(4-氯-苯基)-[1，6]萘啶-4-羧酸3-甲氧基-苯甲基醯胺；或2-(4-氟-3-三氟甲基-苯基)-[1，6]萘啶-4-羧酸3-甲氧基-苯甲基醯胺。
34.如權利要求1-33中任一所述的化合物或鹽類，其中所述化合物在辣椒素受體配位體結合試驗中具有1微摩爾或小於1微摩爾的Ki。
35.如權利要求1-33中任一所述的化合物或鹽類，其中所述化合物在辣椒素受體配位體結合試驗中具有100納摩爾或小於100納摩爾的Ki。
36.如權利要求1-33中任一所述的化合物或鹽類，其中所述化合物在辣椒素受體配位體結合試驗中具有10納摩爾或小於10納摩爾的Ki。
37.如權利要求1-33中任一所述的化合物或鹽類，其中1μM濃度的所述化合物在VR1媒介的鈣移動試驗中能引發促效劑反應，該反應為100nM辣椒素所引發反應的至少30％。
38.如權利要求1-33中任一所述的化合物或鹽類，其中1μM濃度的所述化合物在VR1媒介的鈣移動試驗中能引發促效劑反應，該反應為100nM辣椒素所引發反應的至少80％。
39.一種醫藥組合物，所述組合物如權利要求1-33中任一所述的至少一種化合物或鹽類，與生理上可接受的載體或賦形劑。
40.一種用於增強細胞辣椒素受體鈣傳導的方法，所述方法包括使表達辣椒素受體的細胞與如權利要求1-33中任一所述的至少一種化合物或鹽類接觸，從而增強該辣椒素受體的鈣傳導。
41.如權利要求40所述的方法，其中所述細胞為在動物體內接觸的神經細胞。
42.如權利要求41所述的方法，其中所述動物為人類。
43.如權利要求41所述的方法，其中所述化合物為經口給藥。
44.一種在患者體內治療對辣椒素受體調節作用有反應的病症的方法，所述方法包括對所述患者給藥有效治療量的如權利要求1至33中任一所述的至少一種化合物或鹽類，從而緩解所述患者的病症。
45.如權利要求44所述的方法，其中所述病症為氣喘或慢性阻塞性肺疾。
46.一種在患者體內治療疼痛的方法，所述方法包括對患有疼痛的病患給藥有效治療量的如權利要求1至33中任一所述的至少一種化合物或鹽類，從而緩解該病患的疼痛。
47.如權利要求46所述的方法，其中所述患者患有神經病理性疼痛。
48.如權利要求46所述的方法，其中所述疼痛為與選自下列病症相關的疼痛乳房切除後疼痛症候群、殘肢痛、幻覺肢體痛、口腔神經痛、牙痛、帶狀皰疹後神經痛、糖尿病神經病變、反射性交感神經失養症、三叉神經痛、骨關節炎、風溼性關節炎、纖維肌痛、吉蘭-拜瑞症候群(Guillain-Barre Syndrome)、感覺異常性股痛、口腔灼熱症候群、兩側性末梢神經病變、灼熱痛、神經炎、神經細胞炎、神經痛、與愛滋病(AIDS)相關的神經病變、與多發性(MS)相關的神經病變、與脊柱神經受傷相關的疼痛、與手術相關的疼痛、肌肉與骨骼疼痛、背痛、頭痛、偏頭痛、心絞痛、產痛、同位性疼痛、消化不良痛、恰得氏疼痛症(Charcot’s pains)、腸氣疼痛、經痛、與癌症有關的疼痛、或暴露於毒液有關的疼痛、腸激躁症候群、炎性腸疾或創傷。
49.如權利要求46所述的方法，其中所述患者為人類。
50.如權利要求46所述的方法，其中所述化合物或鹽類為經口給藥。
51.如權利要求1-33中任一所述的化合物或鹽類，其中所述化合物或鹽類為經放射性標記的。
52.一種測定試樣中有無辣椒素受體存在的方法，所述方法包括的步驟為(a)使試樣與如權利要求1-33中任一所述的化合物或鹽類在能使該化合物與辣椒素受體結合的條件下接觸；及(b)檢測結合到所述辣椒素受體的化合物的量，從而測定所述試樣中是否存在辣椒素受體。
53.如權利要求52所述的方法，其中，所述化合物為經放射性標記的，且其中的所述的測定步驟包括(i)將未結合的化合物與已結合的化合物分離；以及(ii)檢測所述試樣中是否存在已結合的化合物。
54.一種經包裝的醫藥製劑，所述製劑包括(a)裝在容器中的如權利要求39所述的醫藥組合物；以及(b)使用所述組合物治療疼痛的說明書。
55.一種如權利要求1-33中任一所述化合物或鹽類的在製備治療對辣椒素受體調節作用有反應的病症的藥物中的用途。
56.如權利要求55所述的用途，其中所述病症為疼痛、氣喘、慢性阻塞性肺疾、咳嗽、打嗝、肥胖、尿失禁或膀胱過動、暴露於辣椒素、因暴露於熱而引起灼傷或刺激、因暴露於光而引起灼傷或刺激、因暴露於催淚氣體、空氣汙染物或辣椒噴霧而引起灼傷、氣管收縮或刺激、或因暴露於酸而引起灼傷或刺激。
57.一種非類香草醇的辣椒素受體促效劑，其中所述促效劑在辣椒素受體配位體結合試驗中具有1微摩爾或小於1微摩爾的Ki。
58.一種醫藥組合物，所述組合物包含如權利要求57所述的至少一種化合物或鹽類，及生理上可接受的載體或賦形劑。
59.一種在患者體內治療疼痛的方法，所述方法包括對患有疼痛的患者給藥有效治療量的如權利要求57所述的至少一種化合物或鹽類，從而緩解所述患者的疼痛。
60.如權利要求57所述的化合物或鹽類在製備治療對辣椒素受體調節作用有反應的病症的藥物中的用途。
61.如權利要求60所述的用途，其中所述病症為疼痛、氣喘、慢性阻塞性肺疾、咳嗽、打嗝、肥胖、尿失禁或膀胱過動、暴露於辣椒素、因暴露於熱而引起灼傷或刺激、因暴露於光而引起灼傷或刺激、因暴露於催淚氣體、空氣汙染物或辣椒噴霧而引起灼傷、氣管收縮或刺激、或因暴露於酸而引起灼傷或刺激。
全文摘要
本發明提供辣椒素受體促效劑，此等化合物為用於調節體內或體外VR1活性的配位體，特別用於治療人類、經馴化的陪伴動物及家畜對辣椒素受體活化作用敏感時的狀況。本發明亦提供使用此等化合物的醫藥組成物及方法以治療此等病症，及使用此等配位體供受體定位研究的方法。
文檔編號C07D471/04GK1890223SQ200480036709
公開日2007年1月3日 申請日期2004年10月28日 優先權日2003年10月31日
發明者R·鮑克他瓦特沙拉姆, C·A·布盧姆, H·布裡爾曼, T·M·考德威爾, D·N·科特賴特, K·J·霍傑茨, J·M·彼得松, X·鄭 申請人:神經能質公司