作為nep抑制劑的3－(1－[3－(1,3－苯並噻唑－6－基)丙基氨基甲醯基]環烷基)丙酸衍生物的製作方法

2023-08-10 12:27:11

專利名稱：作為nep抑制劑的3－(1－[3－(1,3－苯並噻唑－6－基)丙基氨基甲醯基]環烷基)丙酸衍生物的製作方法
技術領域：
本發明涉及中性內肽酶(NEP)的抑制劑及其用途、其製備方法、其製備中所用的中間體和含有所述抑制劑的組合物。這些抑制劑在各種治療領域中具有應用，包括治療男性和女性性功能障礙，特別是女性性功能障礙(FSD)，尤其是其中FSD為女性性喚起障礙(FSAD)。
NEP抑制劑公開在WO 91/07386、WO 91/10644、WO 02/02513、WO 02/079143和EP 1,258,474中。
NEP抑制劑在治療FSD中的應用公開在EP 1,097,719-A1中。NEP抑制劑在治療男性性功能障礙(MSD)中的應用公開在WO 02/03995中。
本發明提供了一類有效的NEP抑制劑，它們具有對NEP的選擇性超過可溶性分泌型內肽酶(SEP)的優點。本發明的化合物對NEP的選擇性也超過了ACE。除選擇性外，本發明的化合物還具有令人意外的良好藥代動力學特性，特別是良好的口服生物利用度和對體內功效而言合適的作用期限。
本發明的第一個方面提供了一般通式(I)的化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑化物或多晶型物 其中R1為H或CH3；
R2為C1-C2烷基；且n為1或2。
本發明的一個優選方面提供了通式(I)的化合物，其中n為1。
在另一個優選實施方案中，R1為甲基。
在又一個優選實施方案中，R2為甲基。
本發明特別優選的實施方案為通式(I)的化合物，其中R1為甲基，R2為甲基且n為1；R1為氫，R2為乙基且n為1；R1為甲基，R2為乙基且n為1；以及R1為氫，R2為乙基且n為2。
本發明的化合物為(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例1)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例2)；(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例4)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基)丙酸(實施例3)；3-(1-([3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基)丙酸(實施例5)；3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例6)；(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基)丙酸；和(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基)丙酸。
本發明優選的化合物為(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例1)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基}丙酸(實施例2)；(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例4)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基}丙酸(實施例3)；3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基}丙酸(實施例5)；和3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例6)。
最優選的化合物為(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例1)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例2)；(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例4)；和3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基)丙酸(實施例3)。
通式(I)化合物的藥物上可接受的鹽包括其酸加成的鹽和鹼式鹽(包括二鹽)。
合適的酸加成的鹽由形成無毒性鹽的酸形成。其實例包括乙酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、羥苯醯苯酸鹽、鹽酸鹽/氯化物、氫溴酸鹽/溴化物、氫碘酸鹽/碘化物、磷酸氫鹽、羥乙基磺酸鹽、D-和L-乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、乳清酸鹽、棕櫚酸鹽、磷酸鹽、糖二酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、D-和L-酒石酸鹽以及甲苯磺酸鹽。
合適的鹼式鹽由形成無毒性鹽的鹼形成。其實例包括鋁、銨、精氨酸、苄星青黴素、鈣、膽鹼、二乙胺、二乙醇胺、甘氨酸、賴氨酸、鎂、葡甲胺、乙醇胺、鉀、鈉、氨丁三醇和鋅鹽。
有關合適的鹽的綜述參見Stahl和Wermuth《藥用鹽手冊特性、選擇和應用》(Handbook of Pharmaceutical SaltsProperties，Selection，and Use)，Wiley-VCH，Weinheim，Germany(2002)。
如果合適，通過將通式(I)的化合物與所需酸或鹼的溶液彼此混合易於製備通式(I)化合物的藥物上可接受的鹽。鹽可以從溶液中沉澱且通過過濾收集或可以通過蒸發溶劑回收。
本發明中的藥物上可接受的溶劑化物包括水合物和溶劑化物，其中結晶的溶劑可以被同位素取代，例如D2O、丙酮-d6、DMSO-d6。
本發明範圍內還包括籠形物，即藥物-主體籠形配合物，其中與上述溶劑化物相反，所述的藥物和主體以非化學計量存在。有關這類配合物的綜述參見Haleblian的《藥物科學雜誌》(J Pharm Sci)，64(8)，1269-1288(1975年8月)。
下文提及通式(I)的化合物時均包括其鹽以及通式(I)化合物的溶劑化物和籠形物以及它們的鹽。
本發明包括如上文定義的通式(I)化合物的所有多晶型物。
本發明範圍內還包括通式(I)化合物的所謂″前體藥物″。因此，自身沒有或幾乎沒有藥理活性的通式(I)化合物的某些衍生物在給藥入體內或身體上而代謝時將產生具有所需活性的通式(I)的化合物。這類衍生物稱作″前體藥物″。
例如，可以通過下列步驟生產本發明的前體藥物用本領域技術人員已知的某些部分取代通式(I)化合物上存在的合適的官能團，作為例如H Bundgaard在《前體藥物設計》(″Design of Prodrugs″)(Elsevier，1985)中所述的″前體部分″。
最後，某些通式(I)的化合物自身可以作為通式(I)的其它化合物的前體藥物起作用。
含有一個或多個不對稱碳原子的通式(I)化合物可以作為兩種或多種旋光異構體存在。如果通式(I)的化合物含有鏈烯基或亞鏈烯基，那麼有可能存在順式/反式(或Z/E)幾何異構體，並且，如果該化合物含有例如酮基或肟基，那麼可以出現互變異構現象(′互變異構′)。這樣，單一化合物可以表現出一種以上類型的異構現象。
本發明範圍內包括通式(I)化合物的所有旋光異構體、幾何異構體和互變形式，包括表現出一種以上類型的異構現象的化合物及其一種或多種的混合物。
可以通過本領域技術人員眾所周知的常規技術分離順式/反式異構體，例如分級結晶和色譜法。
用於製備/分離各立體異構體的常規技術包括轉化合適的旋光純前體、使用例如手性HPLC拆分外消旋物(或者鹽或衍生物的外消旋物)，或者對通過使所述外消旋物與合適的旋光酸或鹼(例如酒石酸反應)而形成的非對映異構體鹽進行分級結晶。
本發明還包括通式(I)化合物的所有藥物上可接受的同位素變化形式。將同位素變化形式定義為至少一個原子被具有相同原子數、而原子量不同於通常在自然界中發現的原子量的原子取代的化合物。
適合於包含在本發明化合物中的同位素實例包括氫的同位素，諸如2H和3H；碳的同位素，諸如13C和14C；氮的同位素，諸如15N；氧的同位素，諸如17O和18O，磷的同位素，諸如32P；硫的同位素，諸如35S；氟的同位素，諸如18F；和氯的同位素，諸如36CI。
用同位素、諸如氘(即2H)取代本發明的化合物可以提供一定的因較大的代謝穩定性(例如體內半衰期增加或劑量需求降低)產生的治療優勢，由此在某些情況中優選。
通式(I)化合物的某些同位素變化形式，例如那些引入了放射性同位素的變化形式，可用於藥物和/或底物組織分布研究。放射性同位素氚(即3H)和碳-14(即14C)因其特別易於引入和便於檢測而特別可用於該目的。
一般可以通過本領域技術人員公知的常規技術或通過與所附實施例和製備中所述相似的方法，使用合適試劑的適宜同位素變化形式製備通式(I)化合物的同位素變化形式。
可以將通式(I)的化合物凍幹、噴霧乾燥或蒸發乾燥而得到結晶固體或無定形物質的固體栓塊、粉末或薄膜。可以將微波或射頻乾燥用於該目的。
可以通過如下文方案(I)中所述的方法製備通式(I)的化合物 可以在工藝步驟(a)的醯胺鍵形成的條件下使通式(II)與(III)的化合物反應而製備通式(IV)的化合物-這類反應可以在本領域技術人員眾所周知的多種條件下進行。
一般來說，可以通過用諸如1，1′-羰基二咪唑(CDI)、氟-N，N，N′，N′-四甲基甲脒鎓(formamidinium)六氟磷酸鹽(TFFH)這類試劑或者諸如氮雜苯並三唑-1-基氧基三(吡咯烷並)鏻六氟磷酸鹽(PyAOP)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(HOAt)這類試劑的組合處理活化羧酸。另一方面，可以通過將肽偶聯試劑加入到酸與胺的混合物中進行該反應，所述的肽偶聯試劑例如是O-(7-氮雜苯並三唑-1-基)-N，N，N′，N′-鈾六氟磷酸鹽(HATU)或O-苯並三唑-1-基-N，N，N′，N′-鈾六氟磷酸鹽(HBTU)或N，N′-二環己基碳化二亞胺(DCC)、1，3-二異丙基碳化二亞胺(DIC)。該反應在合適的溶劑中在0℃-溶劑的沸點之間進行，所述的溶劑諸如CH2Cl2、吡啶、N，N-二甲基甲醯胺(DMF)、N，N-二甲基乙醯胺(DMA)或1-甲基-2-吡咯烷酮。
優選使用CDI、三乙胺和乙酸異丙酯作為溶劑進行轉化。
然後在工藝步驟(b)的條件下處理工藝步驟(a)的產物。除去保護基PG。合適的基團描述在T.W.Greene和P.G.M.Wuts的《有機合成中的保護基》(″Protective Groups in Organic Synthesis″)，John Wiley和Sons Inc，1991中。
除去保護基所需的條件通常對該保護基而言是特定的；用於除去它們的條件可以在參考文獻中找到，諸如Greene T.W.，Wuts，P.G.M.《有機合成中的保護基》(Protective Groups in OrganicSynthesis)，Wiley-Interscience和Kocienski，P.J.《保護基》(Protecting Groups)，Thieme。
優選地，PG為叔丁基，使用合適的溶劑在室溫下進行酸催化的脫保護。優選的條件為在二氯甲烷中用三氟乙酸。

在可選的方法中，可以通過包括芳基-烯丙基偶聯的工藝步驟(a)由通式(X)和(VI)的化合物製備通式(IV)的化合物。合適的條件為本領域技術人員眾所周知。可以通過包括醯胺鍵形成的工藝步驟(b)由通式(II)的化合物和烯丙基胺製備通式(X)的化合物。這類反應可以在本領域技術人員眾所周知的各種條件下進行。
可以按照WO02/079143中所述的方法製備通式(II)和(III)的化合物。
此外，可以如下所述製備通式(III)的化合物
可以通過包括芳基-烯丙基偶聯的工藝步驟(c)由通式(V)和(VI)的化合物製備通式(VII)的化合物。合適的條件為本領域技術人員眾所周知。特別合適的條件為Suzuki-Miyaura偶聯反應中的那些條件[Angew.Chem.Int.Ed.2001，40(24)，4544-4568]，其中使用由適當保護的烯丙基胺衍生物(例如烯丙基亞氨基二碳酸二(叔丁基)酯，《生物有機和藥物化學通訊》(Bioorganic Medicinal ChemistryLetters)，1999，7，1625-1636)和諸如9-BBN這類硼烷衍生物製備的硼氫化中間體。
可以在工藝步驟(b)除去本文所述的保護基PG的條件下由通式(VII)的化合物製備通式(III)的化合物。
另一方面，可以通過包括還原碳-碳和碳-氮多鍵的工藝步驟(a)由通式(VIII)的化合物製備胺(III)。合適的條件為本領域技術人員眾所周知。特別合適的條件包括用Boc2O、NiCl2和NaBH4處理，隨後如上所述對所得叔丁基脫保護。可以通過包括芳基-烯丙基偶聯的工藝步驟(b)由丙烯腈和通式(VI)的化合物製備通式(VIII)的化合物，其中X為滷素，優選碘。合適的條件為本領域技術人員眾所周知。特別合適的條件包括用在DMF中的Pd(OAc)2、P(鄰-甲苯基)3和NaOAc處理。
另一方面，可以通過工藝步驟(a)的縮合由氰基乙酸和通式(IX)的化合物製備通式(VIII)的化合物。合適的條件為本領域技術人員眾所周知。合適的條件描述在Jerry March的《高級有機化學》(″AdvancedOrganic Chemistry″)第4版，Wiley-Interscience，945頁中。通式(IX)的化合物在文獻中已知(例如Zhurnal Obshchei Khimii(1964)，34(11)，3801-6)。
所有上述反應和用於上述方法的新原料的製備均是常規的。合適的試劑及其進行反應或製備的條件以及分離所需產物的步驟為本領域技術人員參照文獻條件以及下文實施例和製備而眾所周知。
本發明的化合物為一類對NEP的選擇性超過SEP的NEP抑制劑。
一般來說，對藥物而言重要的是儘可能對其所需的靶酶具有選擇性；其它活性具有產生副作用的可能性。近來相對鑑定了SEP，其確切的生理作用仍然必須得到完整確定。然而，無論SEP可能起還是不起何種作用，它均是可能的醫藥化學方案，以確保任何藥物具有優於未知生理功能的極為相關的機制靶的選擇性。
不受任何理論束縛，逐步明確的是NEP和SEP能夠水解許多生物學上同等重要的肽類，諸如腦啡肽(enkaphalin)、內皮素(ET)、big-內皮素(Big ET)、緩激肽、P物質、血管緊張肽1、心房鈉尿肽(ANP)和促性腺素釋放激素(GnRH)。
如果用抑制NEP和SEP的藥物治療患者，那麼可以減少這些肽類中許多的水解(其中大部分不涉及與NEP抑制相關的性功能改善)，這些肽類的水平由此得到增加。可以斷定與這些肽類水平升高相關的許多副作用血壓在ANP水平增加時降低；腦啡肽水平增加可以導致疼痛感覺改變；內皮素-1是降低Big ET轉化成ET的水平的有效血管收縮藥；或ET-1水解可以導致血壓改變。
因此，如果對患者給予NEP選擇性抑制劑，那麼這些底物肽類的水平的增加就會減少，因為活性SEP酶仍然存在。與這些肽類水平改變相關的任何副作用由此也會減少。
此外，在其它組織中可以發現可變水平的SEP的mRNA，包括在睪丸、心臟、腦、腎、唾液腺、甲狀腺、胎盤、小腸和卵巢中(內部數據和Bonvouloir等)。就小鼠而言，已經在脾和腎上腺中檢測到了SEPRNA。不抑制SEP的NEP抑制劑由此很可能具有引起更明確的生理特性的更大潛能的優勢。
令人意外的是在鑑定一類對NEP的選擇性超過SEP的NEP抑制劑的過程中，已經發現這些化合物具有用於口服給藥的有利藥代動力學特性。
口服給予的藥物應具有良好的生物利用度，即易於通過胃腸(GI)道的能力和具有一定的代謝速率，使得它在從GI道進入全身循環時不被廣泛代謝。快速代謝的分子具有較低的生物利用度，因為將有更多的化合物在進入全身循環時因代謝而被除去。一旦藥物進入全身循環，則代謝速率在確定藥物在體內的停留時間方面也是重要的-藥物快速代謝會導致它具有較短的作用持續時間。
因此，對藥物分子而言，顯然有利的是具有能夠易於通過GI道且在體內僅緩慢代謝的特性。
CACO-2試驗是用於預測指定分子通過GI道的能力的廣泛接受的模型。本發明的分子具有良好的CACO-2流量。
大部分藥物分子的代謝一般發生在肝中。因此，人肝微粒體(HLM)的應用是測定指定分子對肝內代謝的敏感性的廣泛接受的方法。本發明的化合物對HLM穩定。
預計具有良好的CACO-2流量且對HLM穩定的化合物具有良好的口服生物利用度(通過GI道吸收良好且在通過肝時化合物的浸出最少)，並且在體內有較長的停留時間-足以使藥物有效。
另外，本發明的化合物為游離酸形式的結晶，不依賴於鹽形成，由此特別易於處理。
本發明的化合物為鋅依賴性中性內肽酶EC.3.4.24.11.的抑制劑，推測本發明的化合物可用於治療下列疾病情況。這種酶參與幾種生物活性寡肽類的分解，在疏水性胺基酸殘基的氨基側切割肽鍵。所代謝的肽類包括心房鈉尿肽類(ANP)、鈴蟾肽、緩激肽、降鈣素基因相關肽、內皮素、腦啡肽類、神經降壓肽、P物質和血管活性腸肽。這些肽類中的某些具有有效的血管舒張和神經激素功能、利尿和鈉尿活性或介導行為作用。
因此，本發明的化合物通過抑制中性內肽酶EC.3.4.24.11可以加強活性肽類的生物作用。因此，這些化合物特別具有治療許多疾病的應用，包括高血壓、肺動脈高壓、周圍血管疾病、心力衰竭、心絞痛、腎機能不全、急性腎功能衰竭、周期性水腫、美尼爾症、高醛固酮血症(hyperaldosteroneism)(原發性和繼發性)和多鈣尿。術語高血壓包括所有特徵在於超常血壓的疾病，諸如原發性高血壓、肺動脈高壓、繼發性高血壓、單純收縮期高血壓、與糖尿病相關的高血壓、與動脈粥樣硬化相關的高血壓和腎血管性高血壓，並進一步擴展至血壓升高為已知危險因素的疾病。因此，術語″治療高血壓″包括治療或預防因高血壓引起的併發症和其它相關並存病，包括充血性心力衰竭；心絞痛；中風；青光眼；腎功能受損，包括腎衰竭；肥胖；和代謝病(包括代謝症候群)。代謝病特別包括糖尿病和葡萄糖耐量降低，包括其併發症，諸如糖尿病性視網膜病和糖尿病性神經病。
此外，由於所述化合物具有加強ANF的作用的能力，所以它們可用於治療青光眼。抑制中性內肽酶E.C.3.4.24.11的能力的另一個結果是，本發明的化合物可以在其它治療領域具有活性，包括例如治療月經紊亂、未足月產、先兆子癇、子宮內膜異位和生殖性疾病(尤其是男性和女性不孕症、多囊性卵巢症候群、著床失敗(implantationfailure))。本發明的化合物還可用於治療哮喘、炎症、白血病、疼痛、癌痛、抑鬱症、藥物濫用、肝硬化、癲癇、情感障礙、痴呆和老年性意識錯亂、肥胖和胃腸道病症(尤其是腹瀉和過敏性腸症候群)、創傷癒合(尤其是糖尿病性和靜脈曲張性潰瘍和褥瘡)、膿毒性休克；調節胃酸分泌；治療血內血管緊張肽原酶過多、囊性纖維化、再狹窄、糖尿病併發症和動脈粥樣硬化。
在優選的實施方案中，本發明的化合物可用於治療男性和女性性功能障礙。本發明的化合物特別有益於治療FSD(尤其是FSAD)和男性性功能障礙(尤其是男性勃起機能障礙(MED))。
按照本發明，可以將FSD定義為女性有困難或不能在性表達中得到滿足。FSD是幾種不同女性性功能障礙的總稱(Leiblum，S.R.(1998)「女性性功能障礙的定義和分類」(Definition and classificationof female sexualdisorders)-《國際陽痿研究雜誌》(Int.J.Impotence Res.)，10，S104-S106；Berman，J.R.，Berman，L.Goldstein，I.(1999)「女性性功能障礙發病率、病理生理學、評價和治療選擇」(Female sexual dysfunctionIncidence，pathophysiology，evaluations and treatment options.)-《泌尿科學》(Urology)，54，385-391)。女性可能存在缺乏性慾、性喚醒或性慾高潮困難、性交疼痛或這些問題的組合。幾種類型的疾病、藥物、損傷或心理問題均可以導致FSD。研發中的治療手段的目的在於治療具體亞型的FSD，主要是性慾和性喚醒障礙。
通過與正常女性性反應期進行對比可以最好地定義FSD的類別性慾、性喚醒和性慾高潮(Leiblum，S.R.(1998)「女性性功能障礙的定義和分類」(Definition and classification of female sexualdisorders)-《國際陽痿研究雜誌》(Int.J.Impotence Res.)，10，S104-S06)。欲望或性慾是性表達方式的推動力。其表現通常包括在與感興趣的伴侶交際或當接觸其它性慾刺激時的性思維。性喚醒是對性刺激的血管反應，其重要組成是生殖器充血，包括陰道潤滑增加、陰道伸長和生殖器感覺/敏感性增加。性慾高潮是在性喚醒過程中達到高潮的性壓力的釋放。
因此，FSD在女性在通常為性慾、性喚醒或性慾高潮中的任意階段中具有不足或令人不滿意的反應時發生。FSD類別包括機能減退的性慾障礙、性喚起障礙、性慾高潮障礙和性交疼痛疾病。儘管本發明的化合物會改善生殖器對性刺激的反應(如在女性性喚起障礙中)，但是在這種情況中還可以改善相關的疼痛、與性交相關的痛苦和不適，由此可治療其它女性性功能障礙。
如果女性沒有或幾乎沒有性交欲望，並且沒有或幾乎沒有性思維或幻想，那麼就存在機能減退的性慾障礙。這種類型的FSD可以因低睪酮水平所致，原因可以是天然絕經或手術絕經。其它原因包括疾病、藥物、疲勞、抑鬱症和焦慮。
女性性喚起障礙(FSAD)的特徵在於生殖器對性刺激的反應不充分。外生殖器不發生正常性喚醒中特徵性的充血。陰道壁潤滑很差，從而發生性交疼痛。性慾高潮受阻。性喚醒障礙可能因絕經時或分娩後和哺乳期中雌激素減少所致，也可以由帶有諸如糖尿病和動脈粥樣硬化這類血管因素的疾病所致。其它原因可以是因使用利尿藥、抗組胺藥、抗抑鬱藥(例如SSRIs)或抗高血壓藥所致。
性交疼痛障礙(例如交媾困難和陰道痙攣)的特徵在於因插入所致的疼痛，可以因減少潤滑的藥物、子宮內膜異位、盆腔炎症性疾病、炎性腸疾病或尿道問題所導致。
FSD的患病率難以估計，因為該術語覆蓋了數種類型的問題，它們中的某些難以度量，並且還因為在近來才相對關注治療FSD。許多女性的性問題或者直接與女性衰老過程或者與諸如糖尿病和高血壓這類慢性病相關。
因為FSD由在性反應周期的各階段中表現症狀的幾種亞類組成，故沒有單一的療法。目前對FSD的治療主要集中在心理或關係問題。FSD的治療正在逐步發展，因為更多的臨床和基礎科學研究正致力於研究這一醫學難題。在病理生理學中，女性性不適並非均是心理上的，尤其是對那些可能存在導致女性所有性不適的血管發生機能障礙因素的個體而言(例如FSAD)。目前還沒有被批准用於治療FSD的藥物。經驗藥物療法包括雌激素給藥(局部或作為激素代替療法)、雄激素或改變情緒的藥物，諸如丁螺環酮或曲唑酮。這些治療方案通常因低功效或不可接受的副作用而不令人滿意。
由於在藥理學上治療FSD的研究只是相對比較近期的事，所以療法組成如下心理諮詢；非處方藥的性交潤滑劑；和研究中的候選物，包括批准用於其它疾病的藥物。這些藥物由已經證實可有效用於男性勃起機能障礙的激素藥，可以是睪酮或雌激素與睪酮的組合，以及更近來的血管藥物。尚未證實這些活性劑中的任何一種可極為有效地治療FSD。
美國精神病協會的診斷和統計指南(DSM)IV中將女性性喚起障礙(FSAD)定義為″持久或復發性地不能獲得或維持足夠潤滑-性衝動的腫脹反應直至活動結束。這種障礙必定導致明顯的苦惱或人際之間關係緊張。″性喚起反應由盆腔充血、陰道潤滑以及外生殖器的膨大和隆起所組成。這種障礙會導致明顯的苦惱或人際關係緊張。
FSAD是影響絕經前、近絕經和絕經後(HRT)女性的高發生率的性功能障礙。它與伴隨的疾病有關，諸如抑鬱症、心血管疾病、糖尿病和UG病症。
FSAD的原發性後果在於缺乏充血/隆起、缺乏潤滑和缺乏令人愉快的生殖器感覺。FSAD的繼發性後果在於性慾減少、性交過程中疼痛和難以達到性慾高潮。
近來已經推定至少一定比例的具有FSAD症狀的患者存在血管基礎(Goldstein等，《國際陽痿研究雜誌》(Int.J.Impot.Res.)，10，S84-S90，1998)，有關動物的數據支持了這一觀點(Park等，《國際陽痿研究雜誌》(Int.J.Impot.Res.)，9，27-37，1997)。
處於功效研究中的、用於治療FSAD的藥物候選物主要為促進對男性外生殖器循環的勃起機能障礙療法。它們由兩類製劑組成，即口服或舌下藥物(阿撲嗎啡、酚妥拉明、5型磷酸二酯酶(PDE5)抑制劑，例如西地那非)和經注射或經尿道給藥到男性以及局部對女性外生殖器給藥的前列腺素(PGE1)。
本發明的化合物可以有利地提供恢復正常性喚醒反應的方式-即增加生殖器血流，使陰道、陰蒂和陰唇充血。這使得通過血漿滲出增加陰道潤滑、增加陰道順應性和增加生殖器敏感性。因此，本發明的化合物提供了恢復或增強正常性喚醒反應的方式。
不受理論束縛，我們認為神經肽類，諸如腸道血管活性肽(VIP)是控制女性性喚醒反應、尤其是控制生殖器血流的神經遞質候選物。VIP和其它神經肽類被NEP EC3.4.24.11降解/代謝。因此，NEP抑制劑可增強喚醒過程中釋放的VIP的內源性血管舒張作用。這可以導致諸如通過強化生殖器血流以及生殖器充血而治療FSAD。我們已經證實NEP EC 3.4.24.11的選擇性抑制劑可以增強骨盆神經刺激和VIP-誘導的陰道和陰蒂血流增加。此外，選擇性NEP抑制劑可增強VIP和神經介導的分離的陰道壁的鬆弛。
因此，本發明是有利的，因為它有助於提供恢復正常性喚醒反應的方式-即增加生殖器血流，使陰道、陰蒂和陰唇充血。這使得通過血漿滲出增加了陰道潤滑、增加了陰道順應性以及增加了生殖器敏感性。因此，本發明提供了恢復或增強正常性喚醒反應的方式。
男性性功能障礙包括男性勃起機能障礙；射精障礙，諸如早洩(PE)；性快感缺失(不能獲得性慾高潮)；和性慾障礙，諸如機能減退的性慾障礙(缺乏性趣)。
應理解本文涉及的所有治療包括治癒、緩解和預防性治療。
本發明的化合物可應用於下列患有FSD的患者亞群年輕人、老年人、使用或未使用激素代替療法的絕經前、絕經左右、絕經後女性。
本發明的化合物可應用於患有因如下情況導致的FSD的患者i)血管發生性病因，例如心血管或動脈粥樣硬化疾病、高膽固醇血症、吸菸、糖尿病、高血壓、放射和會陰創傷、髂腹下陰部血管系統的挫傷。
ii)神經性病因，諸如脊髓損傷或中樞神經系統疾病，包括多發性硬化、糖尿病、帕金森症候群、腦血管意外、周圍神經病、創傷或根本的盆腔手術。
iii)激素/內分泌病因，諸如下丘腦/垂體/生殖腺軸機能障礙或卵巢機能障礙；胰腺機能障礙；手術或醫學閹割；雄激素缺乏；高循環水平的催乳素，例如高催乳素血症；天然絕經；卵巢功能早衰；甲狀腺功能亢進和甲狀腺功能減退。
iv)心理性病因，諸如抑鬱症、強迫症、焦慮障礙、產後抑鬱症/″青紫嬰兒(Baby Blue)″、情緒和關係問題、表現焦慮、婚姻不協調、機能障礙性體態、性恐怖症、宗教性壓抑或經歷外傷。
v)因使用選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRis)和其它抗抑鬱藥療法(三環類和強安定劑)、抗高血壓療法、抗交感神經藥物、長期口服避孕丸療法導致的藥物誘發的性功能障礙。
患有輕度到中度MED的患者應當可以在用本發明化合物進行的治療中受益並且患有重度MED的患者也可以有反應。然而，早期研究提示患有輕度、中度和重度MED的患者在與PDE5抑制劑的聯合療法中的反應率更高。輕度、中度和重度MED為本領域技術人員公知的術語，有關指導可以參見《泌尿學雜誌》(The Journal of Urology)，151卷，54-61(19941月)。
本發明的化合物可應用於下列患有MED的患者亞群精神性、內分泌性、神經性、動脈性、藥物誘發的性功能障礙(催乳性)和與肺空洞因素(cavernosal factor)，特別是靜脈原因相關的性功能障礙。在《臨床男性學》(Clinical Andrology)23卷，4期，773-782頁和Mosby-Wolfe出版的I.Eardley和K.Sethia的著作《勃起機能障礙-最新研究和控制》(″Erectile Dysfunction-Current Investigationand Management)第3章中更具體地描述了這些患者群。
試驗條件天然NEP酶的生產按照Kenny和Booth的方法從腎中分離NEP(Booth，A.G. Kenny，A.J.(1974)《生物化學雜誌》(Biochem.J.)142，575-581)。
使用兩種可選方法之一生產重組SEP酶方法1用NCIMB保藏號為41110的質粒，採用lipofectamine試劑方案(Invitrogen Ltd，Paisley，UK)中所述的lipofectamine法轉染中國倉鼠卵巢(CHO)細胞培養物。在轉染後24或48小時時收集細胞培養基，並通過以3000g離心5min清除細胞碎片。然後在4℃下使用來自Pierce和Warner，Chester UK的″載物片細胞溶解器(slide a lyser)″將培養基對50mM HEPES pH7.4/10％甘油透析。然後以等分部分冷凍經過透析的樣品，並儲存在液氮中。
方法2按照標準分子和細胞生物學方法在室內製備了產生重組SEP的穩定人胚腎(HEK)細胞系。按照用於HEK細胞的標準方案在燒瓶或滾瓶內補充了潮黴素B的培養基中培養這種HEK-SEP細胞系。收集培養基，並在室溫下以3000g離心15分鐘以除去細胞碎片，然後使用來自Pierce和Warner，Chester UK的″載物片細胞溶解器(slide alyser)，應用透析緩衝液(50mM HEPES pH7.4/10％甘油)透析至少6小時，在這6小時過程中至少改變一次透析緩衝液。
SEP或NEP肽酶活性的測定通過監測其對合成肽底物若丹明綠-Gly-Gly-dPhe-Leu-Arg-Arg-Val-Cys(QSY7)-βAla-NH2進行蛋白水解的能力測定SEP或NEP的肽酶活性
首先如下製備用於測定的試劑通過在50mM pH7.4的HEPES緩衝液(Sigma，UK)中將2mM/100％DMSO若丹明綠-Gly-Gly-dPhe-Leu-Arg-Arg-Val-Cys(QSY7)-βAla-NH2儲備溶液稀釋成2μM濃度而製成底物溶液。
融化上述SEP或NEP酶的等分部分，然後在含有1片無EDTA的蛋白酶抑制劑混合物(Roche Diagnostics，Ut)/25ml的50mM HEPES(pH7.4)中稀釋。稀釋度依每一酶批量具體的預定因素而定，使得在本試驗中15μl含有足以將約30％底物轉化成產物的酶。
製備由4ml DMSO+96ml 50mM HEPES(pH7.4)組成的4％DMSO溶液。
通過將500μl底物溶液加入到250μl酶溶液+250μl 4％DMSO溶液中並在37℃下溫育16小時來製備產物溶液。
如下設定試驗在黑色384孔微量滴定板中，將15μl酶溶液加入到15μl的4％DMSO溶液中。還設定了類似的非特異性本底空白，其中該15μl 4％DMSO溶液中還含有40uM磷酸阿米酮。然後將30ul底物溶液加入到測定和空白孔中，將平板在37℃下溫育1小時。溫育後，取螢光測定值(Ex485/Em538)。BMG豪華(galaxy)螢光讀出器(BMG Labtechnologies，Offenberg，Germany)。
酶的蛋白水解活性相當於樣品螢光減去非特異性本底空白的螢光。
可以取從相同微量滴定板上的孔內60μl產物中獲得的螢光測定值。如果需要，那麼使用該值以及來自SEP測定中的螢光單位，以便計算1小時溫育期中發生蛋白水解的底物％或將測定的螢光增加值轉化成其它有用的單位，諸如發生蛋白水解的底物ng數/min/ml酶。
使用該試驗測定NEP和SEP抑制劑的IC50′s為了測定SEP或NEP抑制劑(例如磷酸阿米酮)的IC50，如上所述使用一定測試濃度範圍的包括在15μl DMSO溶液中的抑制劑進行多次試驗。(通過使用4％DMSO/50mM HEPES pH7.4適當稀釋抑制劑的10mM100％DMSO儲備溶液製成。)使用合適的標準圖擬合電腦程式，將S形劑量反應曲線擬合成log抑制劑濃度對抑制％或活性％的圖。將IC50計算為產生50％最大抑制的抑制劑濃度。一般來說，對指定的IC50測定而言，使用以半對數單位遞增的至少10種所用抑制劑濃度的劑量範圍。
就IC50結果低於約2nM的抑制劑而言，在改變的試驗條件下重複本試驗，其中將所用酶的量減少至約1/10-1/20；底物濃度增加至5μM；且溫育時間增加至3小時。這一條件將本試驗的功效極限(緊密結合極限)降至Ki為～0.2-2nM的化合物的IC50估計值不受酶濃度限制的水平。
已經在上述試驗中測試了本發明的化合物。所有化合物均為有效的NEP抑制劑，其中IC50＜20nM，並且對NEP的選擇性超過SEP至少1000倍。
(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例1)對NEP具有活性，表示為IC50為1nm，並且對NEP的選擇性超過SEP 1900倍。
可以使用WO02/079143中所述的技術進一步測定本發明化合物在治療FSD和MED中的應用。
可以通過使用CaCO-2試驗證實本發明化合物的有利藥代動力學特性。CACO-2試驗是用於預測指定分子通過GI道能力的廣泛接受的模型。本發明的化合物具有如下定義的良好CACO-2流量。將在CACO-2細胞中的表觀滲透性(Papp)值＞5×10-6cm/s(在pH7.4下)和＞15×10-6cm/s(在pH6.5下)的化合物看作具有良好滲透性，預計可通過GI道充分吸收。
如下所述進行試驗細胞培養物以4.0×104細胞/孔將Caco-2細胞接種在24-孔FalconMultiwell平板上。使細胞生長在由極限必需培養基(Gibco21090-022)組成的培養基中，所述的極限必需培養基(Gibco21090-022)中補充了20％胎牛血清、1％非必需胺基酸、2mM L-穀氨醯胺和2mM丙酮酸鈉。每周更換培養基三次，並將細胞維持在37℃，5％CO2和90％相對溼度下。當單層為15-18日齡時，進行滲透性研究。使用23-40代的細胞。
滲透性研究將每種測試化合物製成10mM DMSO溶液，然後將62.5μl的該溶液加入到25mL轉運緩衝液中。將納多洛爾(25μM)加入到每一孔中作為膜完整性的標記。然後將這些溶液與轉運緩衝液溫至37℃。轉運緩衝液為在pH7.4或pH6.5下的HBSS(Hank′s平衡鹽溶液)。在開始每次研究前，用HBSS將每一單層洗滌三次。將未加入化合物的轉運緩衝液置於各接受孔中，其中將250μl置於頂面上，1mL置於底外側孔。通過將藥物溶液添加到各供體孔中開始本研究，其中將250μl加入頂部孔中，將1mL加入底外側孔中。在37℃下溫育2小時後，從所有孔中取出樣品用於LC-MS-MS分析。
本發明的化合物具有的CACO-2 A-B流量＞5。
人肝臟微粒體是用於預測藥物分子對肝內代謝的代謝穩定性的廣泛接受的模型。本發明的化合物對HLM的代謝穩定。在HLM中具有的半衰期＜90mins的化合物代謝過快，預計與代謝穩定的化合物相比表現出在體內不可接受的短停留時間和降低的生物利用度。本發明的化合物在HLM中具有的半衰期＞110mins。
試驗如下進行微粒體的溫育所有溫育均在37℃下恆溫振動的水浴中進行。各溫育物中含有0.5μM CYP。加入輔因子作為NADPH再生系統。它由1.2mM NADP、5mM MgCl2×6H2O、5mM DL-異檸檬酸和1個單位/ml高度純化的異檸檬酸脫氫酶組成。將全部試劑溶於磷酸鹽緩衝液(50mM；pH7.4)。底物濃度為1M。將底物溶於乙腈，使溫育混合物中乙腈的最終濃度低於0.1％(v/v)。從對照溫育中除去NADP。在所有實驗中，在37℃下將樣品與微粒體、底物和再生系統在沒有NADP存在下一起預溫育5min。通過添加NADP啟動反應。溫育時間為1h。在0、3、5、10、15、20、30、45 60min後取出100μl等分部分。用400μl 1M-乙酸和2.0ml乙酸乙酯萃取所述的等分部分，並通過LC-MS-MS進行分析。
可以將本發明的化合物與一種或多種其它活性組分組合，所述的活性組分選自下組1)一種或多種天然存在或合成的前列腺素或其酯類。本文所用的合適的前列腺素包括如下化合物，諸如前列地爾、前列腺素E1、前列腺素E0、13，14-二氫前列腺素E1、前列腺素E2；eprostinol；天然合成和半合成的前列腺素及其衍生物，包括WO-00033825和/或2000年3月14日授權的US 6,037,346中公開的化合物，將所有這些文獻引入本文作為參考；PGE0、PGE1、PGA1、PGB1、PGF1α、19-羥基PGA1、19-羥基-PGB1、PGE2、PGB2、19-羥基-PGA2、19-羥基-PGB2、PGE3α、卡前列氨丁三醇、地諾前列素、氨丁三醇、地諾前列酮、lipo prost、吉美前列素、甲烯前列素(metenoprost)、硫前列酮(sulprostune)、噻前列素和莫西賽利(moxisylate)。
2)如下一種或多種α-腎上腺素能受體拮抗劑化合物，也稱作α-腎上腺素受體或α-受體或α-阻滯劑。本文所用的合適的化合物包括:如1998年6月14日公開的PCT申請WO99/30697中所述的α-腎上腺素能受體阻滯劑(將該文獻中涉及α-腎上腺素能受體的公開內容引入本文作為參考)，包括選擇性α1-腎上腺素受體或α2-腎上腺素受體阻滯劑和非選擇性腎上腺素受體阻滯劑，合適的α1-腎上腺素受體阻滯劑包括酚妥拉明、甲磺酸酚妥拉明、曲唑酮、阿夫唑嗪、吲哚拉明、萘哌地爾、坦索洛新、達哌唑、酚苄明、咪唑克生、依法克生(efaraxan)、育亨賓、羅芙木生物鹼(rauwolfa alkaloids)、Recordati 15/2739、SNAP 1069、SNAP 5089、RS17053、SL89.0591、多沙唑嗪、特拉唑嗪、阿巴諾喹和哌唑嗪；來自US 6,037,346[2000年3月14日]的α2-阻滯劑二苄明(dibenarnine)、妥拉唑林、曲馬唑嗪和二苄明(dibenarnine)；如下列美國專利中所述的α2-腎上腺素能受體US4,188,390；US 4,026,894；US 3,511,836；US 4,315,007；US 3,527,761；US 3,997,666；US 2,503,059；US 4,703,063；US 3,381,009；US 4,252,721和US 2,599,000，將它們各自引入本文作為參考；α2-腎上腺素受體阻滯劑包括任選在有諸如pirxamine這類cariotonic agent存在下的可樂定、罌粟鹼、鹽酸罌粟鹼。
3)一種或多種NO-供體(NO-激動劑)化合物。本文所用的合適NO-供體化合物包括有機硝酸鹽，諸如一-、二或三-硝酸鹽或有機硝酸酯類，包括glyceryl brinitrate(也稱作硝酸甘油)、5-單硝酸異山梨酯、硝酸異山梨酯、戊四硝酯、丁四硝酯、硝普鈉(SNP)、3-嗎啉代斯德酮亞胺嗎多明、S-亞硝基-N-乙醯基青黴胺(SNAP)、S-亞硝基-N-穀胱甘肽(SNO-GLU)、N-羥基-L-精氨酸、亞硝酸異戊酯、林西多明、鹽酸林西多明、(SIN-1)S-亞硝基-N-半胱氨酸、二醇二氮烯鎓(diazenium diolates)、(NO Nates)、1，5-戊二硝酸酯、L-精氨酸(L-arginene)、人參、zizphi fructus、嗎多明、Re-2047、nitrosylatedmaxisylyte衍生物，諸如公開的PCT申請WO 0012075中所述的NMI-678-11和NMI-937。
4)一種或多種鉀通道開放劑或調節劑。本文可用的合適的鉀通道開放劑/調節劑包括尼可地爾、cromokalim、左色滿卡林、來馬卡林、吡那地爾、cliazoxide、米諾地爾、北非蠍毒素(charybdotoxin)、格列本脲、4-氨基吡啶(4-amini pyridine)、BaCl2。
5)一種或多種多巴胺能藥，優選阿撲嗎啡；或選擇性D2、D3或D2/D3激動劑，諸如普拉克索和ropirinol(如WO-0023056中所述的)、PNU95666(如WO-0040226中所述的)。
6)一種或多種血管舒張藥。本文所用的合適的血管舒張藥包括尼莫地平、吡那地爾、環扁桃酯、異克舒令、chloroprumazine、氟哌啶醇、Rec 15/2739、曲唑酮。
7)一種或多種血栓烷A2激動劑。
8)一種或多種CNS活性劑。
9)一種或多種麥角生物鹼(ergot alkoloids)。合適的麥角生物鹼描述在2000年3月14日授權的美國專利US 6,037,346中，包括乙醯二氫麥角胺、溴麥角林、溴麥角脲、氰麥角林、delorgotrile、地舒勒近、馬來酸麥角新鹼、酒石酸麥角胺、乙舒麥角、麥角腈、麥角二乙胺、美舒麥角、甲麥角林、甲麥角胺、麥角溴煙酯、培高利特、普羅麥角、丙麥角脲、特麥角脲。
10)一種或多種調節利鈉因子，特別是心房利鈉因子(也稱作心房利鈉肽)、B型和C型利鈉因子、諸如抑制劑或中性內肽酶的作用的化合物。
11)一種或多種抑制血管緊張肽轉化酶的化合物，諸如enapril；以及血管緊張肽轉化酶和中性內肽酶的合併抑制劑，諸如奧馬曲拉。
12)一種或多種血管緊張肽受體拮抗劑，諸如氯沙坦。
13)一種或多種NO-合酶底物，諸如L-精氨酸。
14)一種或多種鈣通道阻滯劑，諸如氨氯地平。
15)一種或多種內皮素受體拮抗劑和抑制劑或內皮素轉化酶。
16)一種或多種降膽固醇藥，諸如他汀類藥物(例如阿託伐他汀/Lipitor-商標)和fibrates。
17)一種或多種抗血小板和抗血栓形成藥，例如tPA、uPA、華法林、水蛭素和其它凝血酶抑制劑、肝素、促凝血酶原激酶活化因子抑制劑。
18)一種或多種胰島素致敏劑，諸如曲格列酮片劑；和降血糖藥，諸如格列吡嗪。
19)L-DOPA或卡比多巴。
20)一種或多種乙醯膽鹼酯酶抑制劑，諸如donezipil。
21)一種或多種類固醇或非類固醇抗炎藥。
22)一種或多種雌激素受體調節劑和/和雌激素激動劑和/或雌激素拮抗劑，優選雷洛昔芬、替勃龍或拉索昔芬、(-)-順式-6-苯基-5-[4-(2-吡咯烷-1-基-乙氧基)-苯基]-5，6，7，8-四氫萘-2-醇及其藥物上可接受的鹽，它們的製備方法具體描述在WO 96/21656中。
23)一種或多種大麻素受體調節劑。
24)一種或多種NPY(神經肽Y)抑制劑，更具體地NPY1或NPY5抑制劑，優選NPY1抑制劑，優選所述的NPY抑制劑(包括NPY Y1和NPY Y5)具有的IC50低於100nM，更優選低於50nM。WO-A-98/52890中提供了鑑定NPY抑制劑的試驗(參見96頁2-28行)。
25)一種或多種血管活性腸蛋白(VIP)；VIP模擬物；VIP類似物；更具體地被一種或多種VIP受體亞型VPAC1、VPAC或PACAP(垂體腺苷酸環化酶活化肽)介導；一種或多種VIP受體激動劑或VIP類似物(例如Ro-125-1553)或VIP片段；一種或多種α-腎上腺素受體拮抗劑與VIP(例如Invicorp，Aviptadil)的組合。
26)一種或多種黑皮質素受體激動劑或調節劑或黑皮質素促進劑，諸如melanotan II、PT-14、PT-141或WO-09964002、WO-00074679、WO-09955679、WO-00105401、WO-00058361、WO-00114879、WO-00113112、WO-09954358中所述的化合物。
27)一種或多種5-羥色胺受體激動劑、拮抗劑或調節劑，更具體地說為5HT1A(包括VML 670)、5HT2A、5HT2C、5HT3和/或5HT6受體激動劑、拮抗劑或調節劑，包括WO-09902159、WO-00002550和/或WO-00028993中所述的那些。
28)一種或多種雄激素，諸如雄酮、脫氫雄酮、睪酮、雄烷二酮和合成雄激素。
29)一種或多種雌激素，諸如雌二醇、雌酮、雌三醇和合成雌激素，諸如雌二醇苯甲酸鹽。
30)一種或多種用於去甲腎上腺素、多巴胺和/或5-羥色胺的轉運蛋白的調節劑，諸如丁氨苯丙酮、GW-320659。
31)一種或多種嘌呤能受體激動劑和/或調節劑。
32)一種或多種神經激肽(NK)受體拮抗劑，包括WO-09964008中所述的那些。
33)一種或多種阿片樣受體激動劑、拮抗劑或調節劑，優選ORL-1受體的激動劑。
34)一種或多種催產素/加壓素受體激動劑或調節劑，優選選擇性催產素激動劑或調節劑。
35)一種或多種PDE抑制劑，更具體地說為PDE 2、3、4、5、7或8抑制劑，優選PDE2或PDE5抑制劑，最優選PDE5抑制劑(參見下文)，所述的抑制劑優選地對相應酶的IC50低於100nM。用於本發明的合適的cGMP PDE5抑制劑包括EP-A-0463756中公開的吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮；EP-A-0526004中公開的吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮；公布的國際專利申請WO 93/06104中公開的吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮類；公布的國際專利申請WO93/07149中公開的異構體吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-酮類；公布的國際專利申請WO 93/12095中公開的喹唑啉-4-酮類；公布的國際專利申請WO 94/05661中公開的吡啶並[3，2-d]嘧啶-4-酮類；公布的國際專利申請WO 94/00453公開的嘌呤-6-酮類；公布的國際專利申請WO98/49166中公開的吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮類；公布的國際專利申請WO 99/54333中公開的吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮類；EP-A-0995751中公開的吡唑並[4，3-d]嘧啶-4-酮類；公布的國際專利申請WO00/24745中公開的吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮類；EP-A-0995750中公開的吡唑並[4，3-d]嘧啶-4-酮類；公布的國際申請WO95/19978中公開的化合物；公布的國際申請WO 99/24433公開的化合物和公布的國際申請WO 93/07124中公開的化合物。公布的國際申請WO 01/27112中公開的吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮類；公布的國際申請WO 01/27113中公開的吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮類；EP-A-1092718中公開的化合物和EP-A-1092719中公開的化合物。
用於本發明的其它合適的PDE5抑制劑包括5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺醯基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)，也稱作1-[[3-(6，7-二氫-1-甲基-7-氧代-3-丙基-1H吡唑並[4，3-d]嘧啶-5-基)-4-乙氧基苯基]磺醯基]-4-甲基哌嗪(參見EP-A-0463756)；5-(2-乙氧基-5-嗎啉代乙醯基苯基)-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(參見EP-A-0526004)；3-乙基-5-[5-(4-乙基哌嗪-1-基磺醯基)-2-正丙氧基苯基]-2-(吡啶-2-基)甲基-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(參見WO98/49166)；3-乙基-5-[5-(4-乙基哌嗪-1-基磺醯基)-2-(2-甲氧基乙氧基)吡啶-3-基]-2-(吡啶-2-基)甲基-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(參見WO99/54333)；(+)-3-乙基-5-[5-(4-乙基哌嗪-1-基磺醯基)-2-(2-甲氧基-1(R)-甲基乙氧基)吡啶-3-基]-2-甲基-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮，也稱作3-乙基-5-{5-[4-乙基哌嗪-1-基磺醯基]-2-([(1R)-2-甲氧基-1-甲基乙基]氧基)吡啶-3-基}-2-甲基-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(參見WO99/54333)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺醯基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮，也稱作1-{6-乙氧基-5-[3-乙基-6，7-二氫-2-(2-甲氧基乙基)-7-氧代-2H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-5-基]-3-吡啶基磺醯基}-4-乙基哌嗪(參見WO 01/27113，實施例8)；5-[2-異-丁氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺醯基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-(1-甲基哌啶-4-基)-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(參見WO 01/27113，實施例15)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺醯基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-苯基-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(參見WO 01/27113，實施例66)；5-(5-乙醯基-2-丙氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-異丙基-3-氮雜環丁烷基)-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(參見WO01/27112，實施例124)；5-(5-乙醯基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮雜環丁烷基)-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(參見WO 01/27112，實施例132)；(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氫-2-甲基-6-(3，4-亞甲二氧基苯基)吡嗪並[2′，1′6，1]吡啶並[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351)，即公開的國際申請WO95/19978中實施例78和95的化合物以及實施例1、3、7和8的化合物；2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺醯基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑並[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)，也稱作1-[[3-(3，4二氫-5-甲基-4-氧代-7-丙基咪唑並[5，1-f]-as-三嗪-2-基)-4-乙氧基苯基]磺醯基]-4-乙基哌嗪，即公開的國際申請WO99/24433中實施例20、19、337和336的化合物；以及公開的國際申請WO93/07124(EISAI)中實施例11的化合物；和來自Rotella DP《藥物化學雜誌》(J.Med.Chem.)，2000，43，1257的化合物3和14。
其它合適的PDE5抑制劑包括4-溴-5-(吡啶基甲氨基)-6-[3-(4-氯苯基)-丙氧基]-3(2H)噠嗪酮；1-[4-[(1，3-苯並間二氧雜環戊烯-5-基甲基)氨基]-6-氯-2-喹唑啉基(quinozolinyl)]-4-哌啶-4-甲酸一鈉鹽；(+)-順式-5，6a，7，9，9，9a-六氫-2-[4-(三氟甲基)-苯基甲基-5-甲基-環戊-4，5]咪唑並[2，1b]嘌呤-4(3H)酮；furazlocillin；順式-2-己基-5-甲基-3，4，5，6a，7，8，9，9a-八氫環戊[4，5]-咪唑並[2，1-b]嘌呤-4-酮；3-乙醯基-1-(2-氯苄基)-2-丙基吲哚-5-甲酸酯；3-乙醯基-1-(2-氯苄基)-2-丙基吲哚-6-甲酸酯；4-溴-5-(3-吡啶基甲氨基)-6-(3-(4-氯苯基)丙氧基)-3-(2H)噠嗪酮；1-甲基-5(5-嗎啉代乙醯基-2-正丙氧基苯基)-3-正丙基-1，6-二氫-7H-吡唑並(4，3-d)嘧啶-7-酮；1-[4-[(1，3-苯並間二氧雜環戊烯-5-基甲基)氨基]-6-氯-2-喹唑啉基]-4-哌啶甲酸一鈉鹽；Pharmaprojects No.4516(GlaxoWellcome)；Pharmaprojects No.5051(Bayer)；PharmaprojectsNo.5064(Kyowa Hakko；參見WO 96/26940)；Pharmaprojects No.5069(Schering Plough)；GF-196960(Glaxo Wellcome)；E-8010和E-4010(Eisai)；Bay-38-3045 38-9456(Bayer)和Sch-51866。
為了治療FSD，可以優選將本發明的化合物與一種或多種活性組分組合，所述的活性組分選自下組a)PDE5抑制劑，更優選5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺醯基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)；(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氫-2-甲基-6-(3，4-亞甲二氧基苯基)-吡嗪並[2′，1′6，1]吡啶並[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351)；2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺醯基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑並[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺醯基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮；和5-(5-乙醯基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮雜環丁烷基)-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮；及其藥物上可接受的鹽；b)NPY Y1抑制劑；c)多巴胺激動劑，諸如阿撲嗎啡；或選擇性D2、D3或D2/D3激動劑，諸如普拉克索和ropirinol；d)黑皮質素受體激動劑或調節劑或黑皮質素促進劑，優選melanotan II、PT-14、PT-141；e)5HT2C激動劑、拮抗劑或調節劑；f)雌激素受體調節劑、雌激素激動劑和/或雌激素拮抗劑，優選雷洛昔芬、替勃龍或拉索昔芬；g)雄激素，諸如雄酮，脫氫雄酮、睪酮、雄甾烷二酮和合成雄激素；和h)雌激素，諸如雌二醇，雌酮、雌三醇和合成雌激素，諸如雌激素苯甲酸鹽。
為了治療MED，可以優選將本發明的化合物與一種或多種活性組分組合，所述的活性組分選自下組a)PDE5抑制劑，更優選5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺醯基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)；(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氫-2-甲基-6-(3，4-亞甲二氧基苯基)-吡嗪並[2′，1′6，1]吡啶並[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351)；2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺醯基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑並[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺醯基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮；和5-(5-乙醯基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮雜環丁烷基)-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-dJ嘧啶-7-酮；及其藥物上可接受的鹽；b)NPY Y1抑制劑；
c)多巴胺激動劑(優選阿撲嗎啡)或選擇性D2、D3或D2/D3激動劑，諸如普拉克索和ropirinol；d)黑皮質素受體激動劑或調節劑或黑皮質素促進劑，優選melanotan II、PT-14、PT-141；和e)5HT2C激動劑、拮抗劑或調節劑；用於治療FSD的特別優選的組合為本發明的化合物與一種或多種選自下組的活性組分5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺醯基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)；(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氫-2-甲基-6-(3，4-亞甲二氧基苯基)-吡嗪並[2′，1′6，1]吡啶並[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351)；2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺醯基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑並[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺醯基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮；5-(5-乙醯基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮雜環丁烷基)-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮；阿撲嗎啡；melanotan II；PT-141；拉索昔芬；雷洛昔芬；替勃龍；雄激素，諸如雄酮，脫氫雄酮、睪酮、雄甾烷二酮和合成雄激素；以及雌激素，諸如雌二醇，雌酮、雌三醇和合成雌激素，諸如雌激素苯甲酸鹽。
用於治療MED的特別優選的組合為本發明的化合物與一種或多種選自下組的活性組分5-[2-乙氧基-5-(4-甲基-1-哌嗪基磺醯基)苯基]-1-甲基-3-正丙基-1，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮(西地那非)；(6R，12aR)-2，3，6，7，12，12a-六氫-2-甲基-6-(3，4-亞甲二氧基苯基)-吡嗪並[2′，1′6，1]吡啶並[3，4-b]吲哚-1，4-二酮(IC-351)；2-[2-乙氧基-5-(4-乙基-哌嗪-1-基-1-磺醯基)-苯基]-5-甲基-7-丙基-3H-咪唑並[5，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(伐地那非)；5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺醯基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮；5-(5-乙醯基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮雜環丁烷基)-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮；阿撲嗎啡；melanotan II；和PT-141。
為了治療心血管疾病，特別是高血壓，可以優選將本發明的化合物與一種或多種活性組分組合，所述的活性組分選自下組a)血管緊張肽受體阻斷劑(ARB)，諸如氯沙坦、纈沙坦、替米沙坦、坎地沙坦、厄貝沙坦、依普羅沙坦和奧美沙坦；b)鈣通道阻滯劑(CCB)，諸如氨氯地平；c)他汀類藥物，諸如阿託伐他汀；d)PDE5抑制劑，諸如西地那非、tadalafil、伐地那非、5-[2-乙氧基-5-(4-乙基哌嗪-1-基磺醯基)吡啶-3-基]-3-乙基-2-[2-甲氧基乙基]-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮；5-(5-乙醯基-2-丁氧基-3-吡啶基)-3-乙基-2-(1-乙基-3-氮雜環丁烷基)-2，6-二氫-7H-吡唑並[4，3-d]嘧啶-7-酮；和公開在WO00/27848中的吡唑並[4，3-d]嘧啶-4-酮類，特別是N-[[3-(4，7-二氫-1-甲基-7-氧代-3-丙基-1H-吡唑並[4，3-d]-嘧啶-5-基)-4-丙氧基苯基]磺醯基]-1-甲基2-吡咯烷丙醯胺[DA-8159(WO00/27848的實施例68)]；e)β-阻滯劑，諸如阿替洛爾或卡維地洛；f)ACE抑制劑，諸如喹那普利、依那普利和賴諾普利；g)α-阻滯劑，諸如多沙唑嗪；h)選擇性醛固酮受體拮抗劑(SARA)，諸如依普利酮或螺內酯；和
i)咪唑啉I1激動劑，諸如利美尼定和莫索尼定。
如果給予活性劑的組合，那麼可以同時、分別或依次給予它們。
可以單獨給予本發明的化合物，但是在人體療法中，一般將本發明的化合物以與合適的藥物賦形劑、稀釋劑或載體的混合物形式給藥，所述的藥物賦形劑、稀釋劑或載體根據所用給藥途徑和標準製藥實踐選擇。
本發明提供了藥物組合物，其中包含通式(I)的化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑化物或多晶型物以及藥物上可接受的稀釋劑或載體。
口服給藥可以通過口服給予本發明的化合物。口服給藥可以包括吞咽，使得化合物進入胃腸道；或可以使用口含或舌下給藥，通過這種方式化合物從口腔中直接進入血流。
適合於口服給藥的製劑包括固體製劑，諸如片劑、含有顆粒、液體或粉末的膠囊、錠劑(包括液體-填充的)、咀嚼劑、多顆粒和納米顆粒、凝膠、薄膜(包括黏膜粘著劑)、陰道栓(ovule)、噴霧劑；和液體製劑。
液體製劑包括混懸液、溶液、糖漿劑和酏劑。可以將這類製劑用作軟膠囊或硬膠囊的填充物，其中一般包括載體，例如水、乙醇、丙二醇、甲基纖維素或合適的油以及一種或多種乳化劑和/或懸浮劑。還可以通過例如再溶解來自小藥囊中的固體製備液體製劑。
本發明的化合物還可以用於速溶、快速崩解劑型，諸如那些描述在Liang和Chen的《治療專利中的成熟觀點》(Expert Opinion inTherapeutic Patents)，11(6)，981-986(2001)中的劑型。
可以使用藥劑師公知的標準方法，例如通過直接壓制、制粒(幹、溼或熔化)、熔化凝結或擠壓製備典型片劑。片劑可以包含一層或多層，並且可以對其包衣或不包衣。
適合於口服給藥的賦形劑實例包括載體，例如纖維素、碳酸鈣、磷酸二氫鈣、甘露糖醇和檸檬酸鈉；制粒粘合劑，例如聚乙烯吡咯烷酮、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素和明膠；崩解劑，例如羥基乙酸澱粉鈉和矽酸鹽；潤滑劑，例如硬脂酸鎂和硬脂酸；溼潤劑，例如十二烷基硫酸鈉；防腐劑；抗氧化劑；矯味劑；和著色劑。
可以配製用於即刻和/或改進釋放的口服給藥用固體製劑。改進釋放製劑包括延遲釋放、緩釋、脈動釋放、受控雙向釋放、靶向釋放和按程序釋放。在Verma等《在線製藥技術》(PharmaceuticalTechnology On-line)25(2)，1-14(2001)中可以找到合適的改進釋放技術的詳細內容，諸如高能分散、滲透和包衣顆粒。其它改進釋放製劑描述在美國專利US 6,106,864中。
胃腸道外給藥還可以將本發明的化合物直接給藥到血流內、肌肉內或內臟器官內。適於胃腸道外給藥的合適方式包括靜脈內、動脈內、腹膜內、鞘內、心室內、尿道內、胸骨內、顱內、肌內和皮下。用於胃腸道外給藥的合適的裝置包括針頭(包括顯微針)注射器、無針頭注射器和輸注技術。
胃腸道外製劑一般為水溶液，它們可以含有賦形劑，諸如鹽、碳水化合物和緩衝劑(優選至pH 3-9)，而在某些應用中，更適合於將它們配製成無菌的非水溶液或乾燥形式，以便與合適的媒介物(諸如無菌的不含致熱原的水)結合使用。
使用本領域技術人員眾所周知的標準製藥技術可以容易地在無菌條件下，(例如通過凍幹)製備胃腸道外製劑。
可以通過適當加工，例如使用高能噴霧乾燥分散(參見WO01/47495)和/或通過使用合適的製劑技術，諸如使用增加溶解度的試劑，增加用於製備胃腸道外溶液中所用的通式(I)化合物的溶解度。
可以將胃腸道外給藥用製劑配製成即刻和/或改進釋放劑型。改進釋放製劑包括延遲釋放、緩釋、脈動釋放、受控雙向釋放、靶向釋放和按程序釋放。
局部給藥還可以通過局部途徑，即通過皮膚或透皮對皮膚(優選對外生殖器)或黏膜給予本發明的化合物。用於該目的的典型製劑包括凝膠、水凝膠、洗劑、溶液、霜劑、軟膏劑、撒粉、敷料、泡沫、薄膜、皮膚貼劑、糯米紙囊劑(wafer)、植入物、海綿、纖維、繃帶和微乳劑。還可以使用脂質體。典型載體包括醇、水、礦物油、液體石蠟、白凡士林、甘油和丙二醇。可以混入滲透促進劑，參見例如Finnin和Morgan，《藥物科學雜誌》(J Pharm Sci)，88(10)，955-958(1999年10月).
局部給藥的其它方式包括通過電離子透入療法、電穿孔、超聲藥物透入療法、超聲促滲法和無針頭或顯微針注射遞送藥物。
可以將局部給藥用製劑配製成即刻和/或改進釋放劑型。改進釋放製劑包括延遲釋放、緩釋、脈動釋放、受控雙向釋放、靶向釋放和按程序釋放。因此，可以將本發明的化合物配製成更為固體化的形式，從而作為可植入的長效製劑給藥，提供活性化合物的長期釋放。
吸入/鼻內給藥還可以通過鼻內或通過吸入給予本發明的化合物，一般以來自乾粉吸入器的乾粉(單獨地，作為例如與乳糖的乾燥摻合物的混合物形式，或作為混合的成分顆粒，例如混有磷脂類)或作為來自加壓容器、泵、噴霧器、霧化器(優選使用電流體動力學產生細霧的霧化器)或噴灑器的氣溶膠噴霧劑形式，其中使用或不使用合適的推進劑，諸如二氯氟甲烷。
加壓容器、泵、噴霧器、霧化器或噴灑器中含有活性化合物的溶液或混懸液，例如包括乙醇(任選乙醇水溶液)或用於分散、溶解或延長活性成分釋放的合適的可選試劑、作為溶劑的推進劑和可選的表面活性劑，諸如脫水山梨糖醇三油酸酯或低聚乳酸。
在用於乾粉或混懸液製劑前，將藥物產品微粉化至適合於通過吸入遞送的大小(一般低於5微米)。可以通過任意合適的粉碎方法獲得這一尺寸，諸如螺旋氣流粉碎、流化床氣流粉碎、超臨界流體加工成納米粒、高壓勻漿或噴霧乾燥。
用於使用電流體動力學產生細霧的霧化器的合適的溶液製劑可以含有1μg-10mg本發明化合物/撳，每撳體積可以在1ul-100μl之間變動。典型製劑可以包括通式(I)的化合物、丙二醇、無菌水、乙醇和氯化鈉。可以代替丙二醇使用的可選溶劑包括甘油和聚乙二醇。
可以配製含有本發明化合物、諸如乳糖或澱粉這類合適的粉末基質和諸如/-亮氨酸、甘露糖醇或硬脂酸鎂這類性能改進劑的粉末混合物的膠囊、泡罩包和藥筒(例如由明膠或HPMC製成)，以便用作吸入劑或吹入劑。
就乾粉吸入器和氣溶膠而言，通過遞送計量量的閥門測定劑量單位。一般將本發明的單位安排成給予計量劑量或含有1μg-50mg通式(I)化合物的″泡罩包″。每日總劑量一般在1μg-50mg範圍，諸如1mg-50mg，可以將其以單劑量或更通常的情況是作為全天內的分次劑量給藥。
可以將吸入/鼻內給藥用製劑配製成即刻和/或改進釋放劑型。改進釋放製劑包括延遲釋放、緩釋、脈動釋放、受控雙向釋放、靶向釋放和按程序釋放。
直腸/陰道內給藥可以通過直腸或陰道給予本發明的化合物，例如以栓劑、陰道栓或灌腸劑形式。可可脂是傳統的栓劑基質，而如果合適，也可以使用各種選擇。可以將直腸/陰道內給藥用製劑配製成即刻和/或改進釋放劑型。改進釋放製劑包括延遲釋放、緩釋、脈動釋放、受控雙向釋放、靶向釋放和按程序釋放。
眼部/Andial給藥還可以對眼或耳直接給予本發明的化合物，一般以在調節過pH的等滲無菌鹽水中的微粒化混懸液或溶液的滴劑形式。適合於眼部和andial給藥的其它製劑包括軟膏劑、生物可降解(例如可吸收的凝膠海綿狀物、膠原蛋白)和不可生物降解的(例如矽氧烷)植入物、糯米紙囊劑、鏡片和顆粒或囊泡系統，諸如niosomes或脂質體。可以混入聚合物與防腐劑，所述的聚合物諸如為交聯聚丙烯酸；聚乙烯醇；透明質酸；纖維素聚合物，例如羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素或甲基纖維素；或雜多糖聚合物，例如瓊脂糖樹膠；所述的防腐劑諸如為苯扎氯銨。還可以通過離子透入療法遞送這類製劑。
可以將眼部/andial給藥用製劑配製成即刻和/或改進釋放劑型。改進釋放製劑包括延遲釋放、緩釋、脈動釋放、受控雙向釋放、靶向釋放和按程序釋放。
可能使用的技術可以將本發明的化合物與可溶性大分子諸如環糊精或含有聚乙二醇的聚合物實體合併，以改善其溶解性、溶出率、味道掩蔽、生物利用度和/或穩定性。
已發現藥物-環糊精複合物普遍可用於大部分劑型和給藥途徑。可以使用籠形複合物和非籠形複合物。作為直接與藥物籠形的選擇，可以將環糊精用作輔助添加劑，即作為載體、稀釋劑或增溶劑。最常用於這些目的的是α-、β-和γ-環糊精，其實例可以在國際專利申請WO91/11172、WO 94/02518和WO 98/55148中找到。
劑量就對人體患者給藥而言，本發明化合物的每日總劑量一般為0.1mg-1000mg，當然，這取決於給藥方式。例如，口服給藥可能需要的每日總劑量為5mg-1000mg，諸如5-500mg，而靜脈內給藥可能僅需要0.01-30mg/kg體重，諸如0.1-10mg/kg，更優選0.1-1mg/kg體重。可以將每日總劑量作為單劑量或分次劑量給藥。
這些劑量基於的是具有約65-70kg體重的普通人體受試者。臨床醫師能夠確定對於體重超出該範圍的受試者，諸如嬰兒和中老年人的使用劑量。
本領域技術人員還可以理解在治療某些疾病(包括FSD和MED)的過程中，可以基於″需要″(即根據需要或要求)以單劑量形式給予本發明化合物。
在優選的實施方案中，可以通過全身遞送本發明的化合物(諸如口服、經頰和舌下)，更優選口服。優選採用這類全身(最優選口服)給藥方式治療女性性功能障礙，優選FSAD。
因此，在特別優選的實施方案中，提供了本發明化合物在製備用於治療或預防FSD，更優選FSAD的經全身遞送(優選口服遞送)的藥物中的應用。
優選的口服製劑使用即刻釋放片劑；或者快速分散或溶解的劑型(FDDFs)。
在另一個優選的實施方案中，通過局部，優選對女性外生殖器，尤其是陰道直接給予本發明的化合物。
由於NEP在整個體內存在，所以極為令人意外的是可以通過全身給予本發明的化合物而在女性外生殖器上獲得了治療反應，並且沒有誘發不能忍受的(不良)副作用。在EP 1097719-A1和下文的動物模型中，我們已經證實對家兔模型經全身給予的NEP抑制劑(體內)在性喚醒(通過骨盆神經刺激模擬)時增加了生殖器血流，並且沒有對心血管參數產生不良影響，諸如導致明顯的低血壓或高血壓。
優選給予本發明的化合物以治療性刺激(所謂性刺激，我們指的是包括視覺、聽覺或觸覺刺激)患者中的FSD。可以在該給藥之前、之後或過程中進行刺激。
因此，本發明的化合物強化了以恢復或改善對性刺激的性喚醒反應的女性外生殖器中性喚醒為基礎的途經/機制。
因此，優選實施方案提供了本發明化合物在製備用於治療或預防受刺激患者中FSD的藥物中的應用。
就獸藥應用而言，將本發明的化合物作為合適的可接受製劑按照一般的獸藥實踐進行給藥，獸醫會確定最適合於特定動物的給藥方案和給藥途徑。
下列製劑實施例僅是解釋性的，並且旨在限定本發明的範圍。″活性組分″指的是本發明的化合物。
製劑1使用下列組分製備片劑重量/mg活性組分 250微晶纖維素 400火成二氧化矽 10硬脂酸 5總計 665摻合所述成分並壓製成片劑。
製劑2如下製備靜脈內製劑活性組分 100mg等滲鹽水 1,000ml用於將本發明化合物經局部對外生殖器給藥的典型製劑如下製劑3活性組分(1.0％)在異丙醇(30％)和水中的噴霧劑。
製劑4泡沫活性組分、冰醋酸、苯甲酸、鯨蠟醇、對羥基苯甲酸甲酯、磷酸、聚乙烯醇、丙二醇、羧甲基纖維素鈉、硬脂酸、二乙基硬脂醯胺、vanDyke香料No.6301、純化水和異丁烷。
製劑5凝膠活性組分、多庫酯鈉(docusate sodium)BP、異丙醇BP、丙二醇、氫氧化鈉、卡波姆934P、苯甲酸和純化水。
製劑6霜劑活性組分、苯甲酸、鯨蠟醇、薰衣草、化合物13091、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、丙二醇、羧甲基纖維素鈉、十二烷基硫酸鈉、硬脂酸、三乙醇胺、冰醋酸、蓖麻油、氫氧化鉀、山梨酸和純化水。
製劑7陰道栓活性組分、西土馬哥1000BP(cetomacrogol 100BP)、檸檬酸、PEG 1500和1000以及純化水。
本發明還包括(i)包含本發明化合物與藥物上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體的藥物組合物。
(ii)本發明的化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑化物或多晶型物，用作藥物。
(iii)本發明的化合物作為治療或預防疾病的藥物的應用，所述的疾病可以通過抑制中性內肽酶得到有益的治療反應。
(iv)本發明的化合物作為治療或預防下列疾病的藥物的應用機能減退的性慾障礙；性喚起障礙；性慾高潮障礙或性交疼痛障礙，優選性喚起障礙、性慾高潮障礙或性交疼痛障礙，更優選性喚起障礙。
(v)治療哺乳動物FSD或MED的方法，包括用有效量的本發明化合物治療所述的哺乳動物。
(vi)治療FSD或MED的藥物組合物，其中包含本發明的化合物與藥物上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。
(vii)本發明化合物在治療FSD或MED中的應用。
(viii)本發明化合物在製備用於治療或預防FSD或MED的藥物中的應用。
通過下列非限制性實施例進一步闡明本發明，其中使用如下的縮寫和定義Arbocel 過濾劑br寬峰brm 寬多重峰Boc 叔丁氧羰基CDI 1，1′-羰基二咪唑
δ 化學位移d 雙峰Δ 加熱DCCI 二環己基碳化二亞胺DCM 二氯甲烷DMA 二甲基乙醯胺DMF N，N-二甲基甲醯胺DMSO 二甲亞碸ES+電噴射離子化陽性掃描ES-電噴射離子化陰性掃描Ex實施例h 小時HOBt 1-羥基苯並三唑HPLC 高壓液相色譜法m 多重峰m/z 質譜峰min 分鐘m.p. 熔點MiBK 甲基異-丁基酮MS質譜NMR 核磁共振Prec 前體Prep 製備(製劑)q 四重峰quin 五重峰s 單峰t 三重峰t-BMA 叔丁基甲基醚Tf三氟甲磺醯基
TFA三氟乙酸THF四氫呋喃TLC薄層色譜法TS+熱噴霧電離陽性掃描WSCDI 1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽。
1H核磁共振(NMR)光譜在所有情況中均與所提出的結構一致。以來自四甲基矽烷的低場的ppm給出特徵性化學位移(δ)，其中使用常用縮寫命名主峰例如s單峰；d雙峰；t三重峰；q四重峰；m多重峰；br寬峰。已經將下列縮寫用於常用溶劑CDCl3，氘氯仿；DMSO，二甲亞碸。縮寫psi指的是每平方英寸的磅數，LRMS指的是低解析度質譜法。如果使用薄層色譜法(TLC)，那麼它指的是使用矽膠60F254板的矽膠TLC，Rf為化合物在TLC板上移動的距離除以在TLC板上前部溶劑移動的距離。使用Perkin Elmer DSC7以20℃/分鐘的加熱速率測定熔點。
實施例1(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸 將(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]-氨基}羰基)環戊基]丙酸叔丁酯(製備7和製備8)(7.4g，16.7mmol)溶於二氯甲烷(10mL)，加入三氟乙酸(10mL)，將該混合物在室溫下攪拌5小時。通過添加碳酸鉀(10％水溶液)將pH調節至約3使反應停止(需要約120mL)。用二氯甲烷(3×100mL)提取所得混合物，合併有機層，並用MgSO4乾燥，蒸發。通過快速色譜法純化殘餘物[SiO2；在二氯甲烷中的甲醇1％-2％]而得到所需酸，為澄清油狀物(5.66g，87％)。將該批量與1.4g來自上述試驗過程的物質合併，並在戊烷(100mL)中攪拌3小時。除去戊烷層，刮取殘餘物以使樹膠狀殘餘物鬆散，再與另一部分戊烷(100mL)一起攪拌2小時。用燒結漏鬥收集所得白色粉末，在45℃的真空中乾燥，得到標題化合物，為自由流動的白色粉末(m.p.105-106℃)(6.52g)。測定值；C，64.93；H，7.29；N，7.18。
C21H28N2O3S理論值C，64.92；H，7.26；N，7.21.1H NMR(CDCl3，500MHz)δH7.85(1H，d)，7.61(1H，d)，7.23(1H，dd)，5.89(1H，brm)，3.25-3.35(2H，m)，2.81(3H，s)，2.74(2H，m)，2.45(1H，m)，2.10(1H，m)，1.98(1H，m)，1.89(1H，m)，1.88(2H，m)，1.55-1.68(5H，m)，1.49(2H，m)1.17(3H，d).13C NMR(CDCl3，125MHz)δC180.5，177.4，166.7，151.7，138.5，135.9，126.7，122.1，120.7，54.5，42.7，39.6，37.4，36.6，36.1，33.4，31.3，24.0，24.3，19.9，19.3m/z(電霧化陰離子)387(M-H+)在甲醇溶液中測定旋光度值(5.7mg，在5mL中)，得到如下結果
使用5種不同的反相柱，通過HPLC分析估計純度為＞99％
HPLC條件 分析型溫度 環境溫度檢測 225，254nm移動相 A水∶MeCN∶TFA95∶5∶0.1％(v/v)BMeCN線性梯度洗脫(參見下文)流速 1ml/min溶劑梯度條件時間 ％B0.000.205.0957.1958.00
使用下述條件，通過與經類似途徑製備的相對的對映體真實樣品比較，由毛細管電泳將手性純度估計為98％
用於生產標題化合物的可選步驟如下將(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]-氨基}羰基)環戊基]丙酸叔丁酯(製備7和製備8)(2.4g，5.4mmol)溶於甲苯(7ml)，加入三氟乙酸(4.1ml)，將該混合物在17℃下攪拌6小時。通過添加碳酸鈉(9％水溶液)將pH調節至3使反應停止(需要30ml)。加入MiBK(15ml)。分離有機相併將產物萃取入碳酸鈉(9％水溶液，2×5ml)中。通過在1小時內用5M HCl將pH調節至pH4.5而將產物萃取入乙酸異丙酯(35ml)。通過常壓蒸餾將有機相濃縮至相當於原料為5ml/g。將該油狀物冷卻至環境溫度、結晶並在0-5℃下粒化1小時。使用真空過濾收集固體、用乙酸異丙酯(5ml)洗滌，並在40℃下真空中乾燥過夜，得到標題化合物，為自由流動的白色粉末(m.p.105-106℃)[1.3g，3.3mmol，(62％)]。
實施例23-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸
使用與實施例1中所述類似的步驟，以來自製備9的3-[1-({[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基}羰基)-環戊基]丙酸叔丁酯為原料製備該化合物。
m.p.127.5-129.5℃；1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δH7.89(1H，d)，7.63(1H，s)，7.25(1H，d)，5.69(1H，brm)，3.37(2H，m)，3.15(2H，q)，2.76(2H，m)，2.31(2H，m)，1.96-1.87(6H，m)，1.70-1.55(4H，m)，1.47(3H，t)；m/z(ES+)411(MNa+)，389(MH+)；m/z(ES-)387(M-H+).
測定值C，64.74；H，7.28；N，7.14.
C21H28N2O3S理論值C，64.92；H，7.26；N，7.21。
使用3種不同的反相柱，通過HPLC分析估計純度為＞98％
HPLC條件 分析型溫度 環境溫度檢測 225，254nm移動相A水∶MeCN∶TFA95∶5∶0.1％(v/v)BMeCN梯度洗脫(參見下文)流速 1ml/min溶劑梯度條件時間(分鐘)％B0.2-150-10015-18 10018-18.2 100-018.2-20 0實施例33-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)-丙基]氨基甲醯基}環己基)丙酸 使用與實施例1中所述類似的步驟，以來自製備12的3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基)-丙酸叔丁酯為原料製備該化合物。
1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δH7.86(1H，d)，7.64(1H，d)，7.24(1H，dd)，5.72(1H，brs)，3.32(2H，m)，3.13(2H，q)，2.75(2H，m)，2.27(2H，m)，1.88(2H，quin)，1.85-1.73(4H，m)，1.60-1.23(8H，m)，1.46(3H，t)；m/z(ES+) 425(MNa+)，403(MH+)；m/z(ES-)401(M-H+)實施例4(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸 使用實施例1中所述的步驟，以來自製備10的(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基}羰基)環戊基]丙酸叔丁酯為原料製備標題化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.86(1H，d)，7.62(1H，d)，7.24(1H，dd)，5.81(1H，brm)，3.27(2H，m)，3.12(2H，q)，2.74(2H，m)，2.43(1H，m)，2.11-2.05(1H，m)，1.98-1.81(4H，m)，1.69-1.40(7H，m)，1.45(3H，t)，1.16(3H，d)；m/z(ES+)425(MNa+)，403(MH+)；m/z(ES-)401(M-H+)實施例53-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基)丙酸 使用與實施例1中所述類似的步驟，以來自製備13的3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基)-丙酸叔丁酯為原料製備標題化合物。
1H NMR(CD3OD，400MHz)δH7.78(1H，d)，7.71(1H，brm)，7.34(1H，d)，3.29-3.23(掩敝)(2H，m)，2.80(3H，s)，2.77(2H，m)，2.22-2.17(2H，m)，2.05-1.98(2H，m)，1.92-1.85(2H，m)，1.78-1.74(2H，m)，1.63-1.51(3H，m)，1.44-1.22(5H，m)；m/z(APCI+)389(MH+).
測定值C，64.05；H，7.39；N，8.82。
C21H28N2O3S.0.25H2O理論值C，64.18；H，7.31；N，7.13。
實施例63-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸 使用與實施例1中所述類似的步驟，以來自製備14的3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸叔丁酯為原料製備標題化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.85(1H，d)，7.61(1H，d)，7.24(1H，dd)，5.70(1H，brs)，3.30(1H，m)，2.81(3H，s)，2.74(2H，m)，2.30(2H，m)，1.97-1.84(6H，m)，1.69-1.56(4H，m)，1.50-1.41(2H，m)；m/z(APCI+)375(MH+)；(APCI-)373(MH+)製備13-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基亞氨基二碳酸二(叔丁基)酯
在0℃下用9-BBN[Aldrich](136mL，0.5M在四氫呋喃中的溶液，2當量，68mmol)處理烯丙基亞氨基二碳酸二(叔丁基)酯[《生物有機和藥物化學通訊》(Bioorganic Medicinal Chemistry Letters)，1999，7，(1625-1636)(8.75g，34mmol)，並將該溶液在室溫下攪拌45min。謹慎加入磷酸鉀(23mL，3M水溶液，2.0當量，69mmol)，然後用鋁箔覆蓋反應燒瓶。加入6-溴-2-甲基苯並噻唑[《化學協會雜誌》(J.Chem.Soc.)1936，1225；DE3528032A1](7.80g，34mmol，1當量)在二甲基甲醯胺(50mL)中的溶液，隨後加入1，1′-雙(二丙基膦基)二茂鐵鈀(II)二氯化物-二氯甲烷[1∶1複合物](2.77g，3.4mmol，0.1當量)，並將該反應混合物在室溫下攪拌18小時。在真空中濃縮該反應混合物，並通過柱色譜法純化殘餘物[SiO2，戊烷∶乙酸乙酯，5∶1，然後3∶1]，得到所需產物，為澄清油狀物(11.2g，84％)。1HNMR分析顯示該物質中輕度汙染有痕量的溶劑和9-BBN殘餘物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.81(1H，d)，7.60(1H，s)，7.23(1H，d)，3.60(2H，t)，2.77(3H，s)，2.71(2H，t)，1.97-1.88(2H，m)，1.45(18H，s)m/z(APCI+)407(MH+)，307(MH+-Boc)製備23-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基亞氨基二碳酸二(叔丁基)酯 按照與製備1中類似的方式，使用6-溴-2-乙基苯並噻唑[《法國化學協會簡報》(Bull.Soc.Chim.Fr.)1967，2812-23]作為芳基溴成分製備這種2-乙基噻唑中間體。1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δH7.84(1H，d)，7.64(1H，s)，7.26(1H，d)，3.60(2H，m)，3.12(2H，q)，2.73(2H，t)，1.07-1.86(2H，m)，1.47(9H，s)，1.45(3H，t)m/z(APCI+)421(MH+)，321(MH+-Boc)
製備33-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽 將N，N-二叔丁氧羰基-3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺(11.2g，27.5mmol)溶於1，4-二噁烷(30mL)，並用氯化氫(25mL，4M在1，4-二噁烷中的溶液，100mmol)處理，將該溶液在室溫下攪拌18小時。將該反應混合物蒸發至白色固體，與戊烷和乙醚的混合物(3∶1)研磨，得到所需胺雙-HCl鹽，為白色固體(6.05g，78％)。1H NMR(d6-DMSO，400MHz)δH7.98(3H，brs)，7.85(1H，s)，7.81(1H，d)，7.31(1H，d)，2.78-2.73(4H，m)，2.75(3H，s)，1.94-1.85(2H，m)m/z(APCI+) 207.
下文的製備4和5中給出了標題化合物的可選生產步驟。
製備43-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽(變通方案)步驟(1)3-(2-甲基-苯並噻唑-6-基)-丙烯腈 向在室溫下處於N2環境中的6-碘-2-甲基-苯並噻唑[WO2002090443A1](13.1g，47.64mmol)在DMF(500mL)中的攪拌溶液中加入丙烯腈(6.27mL，95.28mmol)，然後加入NaOAc(2.86g，47.04mmol)，然後加入Pd(OAc)2(1.07g，4.76mol)，再加入P(鄰-甲苯基)3(2.90g，9.53mmol)。將所得混合物在130℃下在N2環境中攪拌～24hrs，然後在室溫下攪拌2天。用水使反應停止(750mL)，然後萃取(Et2O，3×200mL)。乾燥合併的有機層(MgSO4)、過濾並在真空中濃縮。通過閃蒸塔色譜法純化所得殘餘物，用10∶1戊烷∶EtOAc、然後用3∶1戊烷∶EtoAc洗脫，得到標題化合物，為油狀物(9.00g，94％)，～3∶1的反式∶順式異構體混合物。
1H NMR(δH)2.85(3H，m)，5.45和5.90(1H，m)，7.50(2H，m)，7.90(2H，m)；APCI-MS 201(100％)[MH+].
步驟(2)[3-(2-甲基-苯並噻唑-6-基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯 向在室溫下處於N2環境中的3-(2-甲基-苯並噻唑-6-基)-丙烯腈(9.00g，45.00mmol)在MeOH(1L)中的攪拌溶液中加入Boc2O(19.64mL，90.00mmol)，然後加入NiCl2(5.84g，45.00mmol)。在～20mins內向所得混合物中謹慎地分批加入NaBH4(13.62g，300.00mmol)。將所得混合物在室溫下N2環境中攪拌～1.5hrs，通過Arbocel過濾，並在真空中濃縮。通過閃蒸塔色譜法純化所得殘餘物，用3∶1戊烷∶EtOAc、然後用1∶1戊烷∶EtoAc洗脫，得到標題化合物，為油狀物(5.00g，36％).1H NMR(δH)1.40(9H，s)，1.85(1H，m)，2.65(1H，m)，2.75(1H，m)，2.90(3H，m)，3.05(1H，m)，3.15(1H，m)，3.50(2H，m)，7.30(1H，m)，7.65(1H，m)，7.90(1H，m)；APCI-MS 307(75％)[MH+]，251(50％)，203(100％).
步驟(3)3-(2-甲基-苯並噻唑-6-基)-丙基胺二鹽酸鹽
向在室溫下處於N2環境中的[3-(2-甲基-苯並噻唑-6-基)-丙基]-氨基甲酸叔丁酯(248mg，0.78mmol)在DCM(10mL)中的攪拌溶液中加入4N在二噁烷中的HCl(5mL)，並將所得混合物在室溫下N2環境中攪拌4hrs。在真空中除去溶劑，並將殘餘物與Et2O(3×10mL)一起研磨。在真空中濃縮濾液而得到標題化合物，為無色泡沫(195mg，99％)，通過1H NMR判定其純度足以不經進一步純化即用於下一步。
製備53-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽(變通方案)步驟(1)2-[3-(2-甲基-苯並噻唑-5-基)-丙基]-異吲哚-1，3-二酮 在45分鐘內向2-(2-丙烯基)-1H-異吲哚-1，3(2H)-二酮(18.7g，0.1mol)(烯丙基鄰苯二甲醯亞胺《有機化學雜誌》(Journal ofOrganic Chemistry)(1952)，1768-76)在THF(38ml，2ml/g)中的淤漿中加入9-BBN在THF(240ml，1.2eq)中的溶液(0.5M)，同時保持溫度在0℃-5℃。然後在1小時內將該溶液溫至環境溫度並再攪拌1小時。在15分鐘內加入K2CO3(27.6g，0.20mol，2eq)在50ml水中的溶液，隨後加入溶於DMF(120ml)的2-甲基-6-溴-苯並噻唑(20.5g，0.09mol，0.9eq.)和二氯[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物(2.4g，0.03eq)。將該反應體系在1小時內溫至50℃，然後立即冷卻至環境溫度。加入水(260ml，19ml/g)和t-BME(560ml，30ml/g)並攪拌該溶液。通過濾器過濾反應物，以除去任何顆粒。進行相分離，並保留上部的有機相。通過真空過濾濃縮有機相至相當於理論產物約3ml/g。使深色淤漿在0℃--5℃下沉澱30分鐘，在真空中過濾，然後用冷t-BME(0.4L，4.5ml/g)洗滌。在55℃真空中乾燥所得固體，得到2-[3-(2-甲基-苯並噻唑-5-基)-丙基]-異吲哚-1，3-二酮(20.5g，0.061mol，68％)。
m.p.126℃；1H-NMR(d6-DMSO，300MHz)，δ1.95-1.98(m，2H)，2.72-2.77(m，5H)，3.63(t，2H)，7.32(d，1H)，7.75(d，1H)，7.74-7.83(m，5H).
步驟(2)3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽 在10分鐘內向2-[3-(2-甲基-苯並噻唑-5-基)-丙基]-異吲哚-1，3-二酮(20g，0.06mol)在水(130ml，6.5ml/g)和乙醇(200ml，10ml/g)中的淤漿中加入甲胺水溶液(40％w/w溶液，117g，1.54mol，26eq)以形成溶液。將該溶液在25℃下攪拌18小時。加入二氯甲烷(300ml，15ml/g)，並將該反應體系攪拌15分鐘。進行相分離並保留有機產物相。用二氯甲烷從水相中萃取殘餘產物(100ml，5ml/g)。用1M K2CO3洗滌合併的有機相(300ml，15ml/g)。進行相分離並用水洗滌有機相(300ml，15ml/g)。在真空中反萃取有機相至小體積，並用異丙醇交換，得到相當於10ml/g 2-[3-(2-甲基-苯並噻唑-5-基)-丙基]-異吲哚-1，3-二酮的最終反應體積。將該異丙醇溶液溫至70℃並濃縮，在10分鐘內加入濃HCl(12.5ml，0.125mol，2.1eq)。通過在大氣壓下蒸餾除去IPA(90ml，4.5ml/g)。將淤漿冷卻，使反應溶液達到25℃，在0--5℃下制粒1小時，在真空中過濾，並用冷IPA洗滌(40ml，2ml/g)。在55℃真空中將產物乾燥過夜，得到3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽[12.0g，0.058mol(72％)]；m.p.215℃。
製備63-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽 按照與製備3類似的方式製備這種2-乙基噻唑中間體，但將二氯甲烷代替二噁烷用作起始溶劑。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH8.04(1H，s)，7.95(1H，d)，7.62(1H，d)，3.36(2H，q)，3.02-2.88(4H，m)，2.10-2.02(2H，m)，1.53(3H，t)m/z 221(MH+)製備7(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]-氨基}羰基)環戊基]丙酸叔丁酯 將1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]環戊烷羧酸[WO0279143A1](6.8g，26.5mmol)在乙酸異丙酯(30mL)中的溶液中加入1，1′-羰基二咪唑(4.76g，29.3mmol，1.1當量)在乙酸異丙酯(60mL)中的溶液，將該混合物在60℃下加熱3小時，然後在室溫下加熱過夜。取出等分部分並蒸發至幹，通過1H NMR光譜法檢測。結果顯示反應進行至約90％轉化(起始酸的Me雙峰δ1.15，acylimidazolide的Me雙峰δ1.05)。再加入一份1，1′-羰基二咪唑(645mg，4mmol，0.15當量)，並將該混合物在60℃下再攪拌1小時。將該反應混合物冷卻至40℃，並加入三乙胺(4.3mL，31mmol，1.1當量)和來自製備3、4或5的3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽(7.1g，25.4mmol，0.96當量)，將該混合物在60℃下加熱過夜。薄層色譜顯示反應不完全，因此再加入一份胺二鹽酸鹽(650mg，2.3mmol，0.09當量)與三乙胺(330μl，2.3mmol，0.09當量)，將該混合物在60℃下加熱過夜。將該反應混合物冷卻至室溫，然後用水(120mL)和2M鹽酸(120mL)稀釋。用乙醚(2×400mL)萃取該混合物，並用2M NaOH(2×100mL)洗滌合併的萃取物，乾燥(MgSO4)並蒸發。通過快速色譜法純化獲得的油狀殘餘物[SiO2，在二氯甲烷中的甲醇0.5％-1.5％]，得到標題化合物，為澄清油狀物(11.5g，98％)。
1H NMR(CDCl3，500MHz)δH7.85(1H，d)，7.63(1H，d)，7.27(1H，dd)，5.77(1H，brs)，3.35-3.25(2H，m)，2.82(3H，s)，2.77(2H，m)，2.33(1H，m)，2.03-2.03(2H，m)，1.89(3H，m)，1.68-1.55(5H，m)，1.45-1.44(2H，s)，1.42(9H，s)1.10(3H，d).13C NMR(CDCl3，125MHz)δC176.6，176.6，166.5，151.5，135.8，126.9，122.1，120.8，80.2，54.6，42.4，39.3，38.4，37.3，35.0，33.4，31.6，28.0，24.3，23.8，20.0，19.6.m/z(ES+)467MNa+.
如下的製備8中給出了用於標題化合物的變通方案製備8(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]-氨基}羰基)環戊基]丙酸叔丁酯(變通方案) 在2小時內，在氮氣層下向維持在60℃的1，1′-羰基二咪唑(154.6g，1.02mols)在乙酸異丙酯(2.5ml/g)中的淤漿中加入1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]環戊烷羧酸[WO0279143A1](238.4g，0.93mol)在乙酸異丙酯(2.2ml/g)中的溶液。用乙酸異丙酯洗滌殘餘的1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]環戊烷羧酸溶液(0.3ml/g)。攪拌該溶液，並再在60℃下維持5小時，然後冷卻至室溫。向該溶液中加入來自製備3、4或5的3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽(259.8g，0.93mols)。在30分鐘內加入三乙胺(188.3g，1.86mols)。在10分鐘內將該混合物加熱至回流，然後維持在回流狀態下4小時，再冷卻至室溫。過濾該混合物以除去不溶性物質，用乙酸異丙酯洗滌(2.0ml/g)。將洗滌液與濾液合併。加入水(2.0ml/g)，並通過添加5M鹽酸(375ml)而將該混合物酸化至pH5.0。過濾該混合物以除去不溶性物質。進行相分離，保留上部有機相。然後用0.5M碳酸鉀水溶液(238ml)洗滌，進行相分離，保留上部有機相。將其用飽和鹽水溶液洗滌至pH低於9.0。用乙酸異丙酯將該溶液稀釋至5ml/g，然後蒸餾，並在大氣壓下用甲苯取代，維持恆定體積。為分析目的，可以將樣品蒸發至幹以得到產物，為油狀物(389g，0.87mol，產率94％)。
製備93-[1-({[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基}羰基)環戊基]丙酸叔丁酯 將1-(3-叔丁氧基-3-氧代丙基)環戊烷羧酸[WO0279143A1](180mg，0.7mmol)與來自製備6的3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽(180mg，0.65mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(135mg，0.7mmol)、1-羥基苯並三唑(95mg，0.7mmol)和三乙胺(400μl，2.8mmol)在二甲基甲醯胺(7mL)中混合。將該反應混合物在60℃下攪拌過夜。在冷卻至室溫後，在真空中蒸發該混合物，並用水(50mL)稀釋殘餘物。用乙醚(3×50mL)萃取該混合物，並用MgSO4乾燥合併的有機級分，然後蒸發。通過快速色譜法純化[SiO2；在戊烷中的乙酸乙酯(15％-20％)]而得到所需化合物，為淡棕色油狀物。1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.87(1H，d)，7.65(1H，d)，7.26(1H，dd)，5.63(1H，brs)，3.30(2H，q)，3.12(2H，q)，2.75(2H，t)，2.20-2.14(2H，m)，1.98-1.80(6H，m)，1.68-1.58(5H，m)，1.45(3H，t)，1.42(9H，s)m/z(ES+)467(MNa+)，445(MH+).
或者，使用與製備7中所述類似的方法製備標題化合物。
製備10(2R)-2-甲基-3-[1-({[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基}羰基)環戊基]丙酸叔丁酯 使用與製備9中類似的方法，通過使來自製備6的3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽與1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]環戊烷羧酸[WO0279143A1]相偶聯而製備標題化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.87(1H，d)，7.66(1H，s)，7.27(1H，m)，5.77(1H，brm)，3.29(2H，m)，3.13(2H，q)，2.77(2H，m)，2.31(1H，m)，2.08-1.96(2H，m)，1.70-1.43(10H，m)，1.45(3H，t)，1.43(9H，s)，1.10(3H，d)m/z(ES+)481(MNa+)，459(MH+)製備111-(2-叔丁氧羰基-乙基)-環己烷羧酸 將環己烷羧酸(2.89g，22.6mmol)溶於THF(30mL)，將該溶液加入到冷卻至-15℃的二異丙基醯胺鋰溶液(在THF/正庚烷/乙基苯中2M，Aldrich)24.3mL(48.6mmol)中，加入速率能夠保持溫度低於0℃。然後將該反應混合物在0℃下攪拌2.5小時，此後再冷卻至-15℃，添加在THF(50mL)中的3-溴丙酸叔丁酯(5g，23.9mmol)，加入速率應可以保持溫度低於0℃。使該反應混合物達到室溫並攪拌過夜，此後通過添加2M HCl使該反應混合物猝滅，用乙酸乙酯2×200mL萃取。乾燥合併的有機層(MgSO4)，然後蒸發，得到橙色油狀物。通過快速色譜法純化[SiO2；二氯甲烷/甲醇/.880NH3(97∶3∶0.5)]而得到標題化合物，為樹膠狀油狀物(800mg，14％)。1HNMR(CDCl3，400MHz)δH2.22(2H，m)，2.07-2.00(2H，m)，1.86(2H，m)，1.45-1.16(8H，m)，1.41(9H，s)m/z(ES+)279(MNa+)；m/z(ES-)255M-H+)製備123-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基)丙酸叔丁酯 通過與製備9中類似的方法，使用來自製備6的3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽與來自製備11的1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]環己烷羧酸製備標題化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.88(1H，d)，7.65(1H，s)，7.27(1H，m)，5.65(1H，brm)，3.34(2H，m)，3.14(2H，q)，2.77(2H，m)，2.15(1H，m)，1.95-1.27(14H，m)，1.45(3H，t)，1.41(9H，s)m/z(ES+)481(MNa+)，459(MH+)製備13(3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基)丙酸叔丁酯
通過與製備9中類似的方法，使用來自製備3、4或5的3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽與來自製備11的1-[(2R)-3-叔丁氧基-2-甲基-3-氧代丙基]環己烷羧酸製備標題化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.85(1H，d)，7.64(1H，d)，7.27(掩敝)(1H，dd)，5.65(1H，brm)，3.33(2H，m)，2.81(3H，s)，2.77(2H，m)，2.18-2.13(2H，m)，1.93-1.79(4H，m)，1.74-1.68(2H，m)，1.60-1.23(7H，m)，1.40(9H，s)m/z(ES+)467(MNa+)，445(MH+)製備143-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸叔丁酯 使用與製備9中類似的方法，通過使來自製備3、4或5的3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基胺二鹽酸鹽與叔丁基-3-1-羧基環戊基)丙酸酯[WO0279143A1]偶聯製備標題化合物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δH7.85(1H，d)，7.62(1H，d)，7.25(1H，m)，5.63(1H，brm)，3.29(2H，m)，2.81(3H，s)，2.75(2H，m)，2.19-2.15(2H，m)，2.00-1.36(11H，m)，1.42(9H，s)；m/z(APCI+)431(MH+).
權利要求
1.通式(I)的化合物、其互變體或所述化合物或互變體的藥物上可接受的鹽、溶劑化物或多晶型物 其中R1為H或CH3；R2為C1-C2烷基；且n為1或2。
2.權利要求1的化合物，其中n為1。
3.權利要求1或2的化合物，其中R1為氫。
4.權利要求1或2的化合物，其中R1為甲基。
5.權利要求1-4中任意一項的化合物，其中R2為甲基。
6.權利要求1-4中任意一項的化合物，其中R2為乙基。
7.權利要求1的化合物，其選自(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-甲基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例1)；3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例2)；(R)-2-甲基-3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環戊基)丙酸(實施例4)；和3-(1-{[3-(2-乙基-1，3-苯並噻唑-6-基)丙基]氨基甲醯基}環己基)丙酸(實施例3)。
8.藥物組合物，其中包含如權利要求1-7中任意一項所述的通式(I)的化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑化物或多晶型物，以及藥物上可接受的稀釋劑或載體。
9.如權利要求1-7中任意一項所述的通式(I)的化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑化物或多晶型物，用作藥物。
10.治療障礙或疾病的方法，其中已知或可以證實抑制NEP在哺乳動物中將產生有益作用，該方法包括對所述的哺乳動物給予治療有效量的如權利要求1-7中任意一項所述的通式(I)化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑化物或多晶型物。
11.如權利要求1-7中任意一項所述的通式(I)的化合物或其藥物上可接受的鹽、溶劑化物或多晶型物在製備用於治療障礙或疾病的藥物中的應用，在所述的障礙或疾病中，已知或可以證實抑制NEP將產生有益作用。
12.權利要求9的化合物、權利要求10的方法或權利要求11的應用，其中所述的障礙或疾病選自高血壓、原發性高血壓、肺動脈高壓、繼發性高血壓、單純收縮期高血壓、與糖尿病相關的高血壓、與動脈粥樣硬化相關的高血壓和腎血管性高血壓、周圍血管疾病、心力衰竭、心絞痛、腎機能不全、急性腎功能衰竭、周期性水腫、美尼爾病、高醛固酮血症(hyperaldosteroneism)(原發性和繼發性)、多鈣尿、中風、青光眼、肥胖、代謝病、代謝症候群、糖尿病、葡萄糖耐量降低、糖尿病性視網膜病、糖尿病性神經病、月經紊亂、未足月產、先兆子癇、子宮內膜異位和生殖性疾病、男性和女性不孕症、多囊性卵巢症候群、著床失敗(implantationfailure)、哮喘、炎症、白血病、疼痛、癌痛、抑鬱症、藥物濫用、肝硬化、癲癇、情感障礙、痴呆和老年性意識錯亂、胃腸道病症、腹瀉、過敏性腸症候群、創傷癒合、糖尿病性和靜脈曲張性潰瘍和褥瘡、膿毒性休克、胃酸分泌、血內血管緊張肽原酶過多、囊性纖維化、再狹窄、動脈粥樣硬化、女性性功能障礙(FSD)、性喚起障礙、女性性喚起障礙(FSAD)、男性性功能障礙(MSD)、男性勃起機能障礙(MED)、機能減退的性慾障礙、性慾高潮障礙和性交痛障礙。
13.權利要求12的化合物、方法或應用，其中所述的障礙或疾病選自女性性功能障礙(FSD)、性喚起障礙、女性性喚起障礙(FSAD)、男性性功能障礙(MSD)、男性勃起機能障礙(MED)、機能減退的性慾障礙、性慾高潮障礙和性交痛障礙。
14.權利要求13的化合物、方法或應用，其中所述的障礙或疾病選自女性性功能障礙(FSD)、女性性喚起障礙(FSAD)、男性性功能障礙(MSD)和男性勃起機能障礙(MED)。
全文摘要
本發明涉及通式(I)的中性內肽酶(NEP)抑制劑及其用途、其製備方法、其製備中所用的中間體和含有所述抑制劑的組合物。這些抑制劑在多種治療領域中具有應用，包括治療男性和女性性功能障礙，特別是女性性功能障礙(FSD)，尤其是其中FSD為女性性喚起障礙(FSAD)。
文檔編號A61P15/00GK1761656SQ200480006939
公開日2006年4月19日 申請日期2004年3月9日 優先權日2003年3月14日
發明者D·赫普沃斯 申請人:輝瑞大藥廠