雙苯並異硒唑乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物及其製備方法和其用途的製作方法
2023-07-08 17:25:16 2
專利名稱：雙苯並異硒唑乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物及其製備方法和其用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種藥物組合物，具體地說，本發明涉及雙苯並異硒唑乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物，以及製備包合物的方法及其包合物的用途。
背景技術：
近年來硒與硒化合物的抗腫瘤活性受到普遍關注。臨床實踐與流行病學研究顯示硒對抑制腫瘤的發展有保護作用，而硒化合物的劑量和形式是抗腫瘤活性的關鍵因素。有機硒化合物比自然界存在的無機硒化合物(如亞硒酸鹽)具有更好的化學防護作用和更低的毒性。因而，人們一直志於精心設計與改造有機硒化合物，以尋找抗腫瘤活性強、抗瘤譜廣、毒副作用低、適用臨床的抗腫瘤有機硒藥物。
CN116665C中公開了R-雙或糖苯並異硒唑取代化合物的製備及其抗炎、抗腫瘤作用，CN1511834A和CN1511835A分別公開了苯並異硒唑衍生物的製備，及其免疫調節、生物治療、抗炎、抗腫瘤和抗血栓形成等作用。這些專利文獻均報導了化合物1，2-[二(1，2-苯並異硒唑酮-3(2H)-酮)]乙烷的製備(又稱雙苯並異硒唑乙烷，以下簡稱Eb乙烷)及其所具有的良好的抗炎、抗腫瘤活性以及多靶點生物應答調節劑的作用。且迄今為止，發明人經動物實驗和體外細胞實驗研究結果均證實Eb乙烷具有良好的抗腫瘤活性和明顯的誘導細胞凋亡作用。但由於Eb乙烷難溶於水，使其推廣到臨床應用成為一種新的抗腫瘤藥物受到很大限制，因此，研究適合Eb乙烷的製劑以解決其水溶性和生物利用度，以擴大其臨床應用前景是本發明所要解決的技術問題。
發明內容
本發明的目的一是提供一種包合物，該包合物含有1，2-[二(1，2-苯並異硒唑酮-3(2H)-酮)]乙烷(又稱雙苯並異硒唑乙烷，以下簡稱Eb乙烷)和環糊精或環糊精衍生物，其中Eb乙烷與環糊精或環糊精衍生物的質量比為24-1∶1-24，優選質量比為5-1∶1-5，更優選質量比為2.5-1∶1-2.5，最優選質量比為1∶1。
Eb乙烷是一種難溶於水的有機硒化合物，經初步溶解度測定實驗證明，Eb於水中的溶解度約為2.5μg/mL，僅在常用的有機溶劑二甲基亞碸(DMSO)中溶解。Eb乙烷的結構如式I所示 式I因此，本發明通過環糊精或環糊精衍生物對Eb乙烷進行包合作用來提高Eb乙烷的水溶性，並將其開發成適用臨床的多種固體劑型和液體劑型，以擴大其臨床應用範圍和大大提高其生物利用度。
所述環糊精包括α-環糊精、β-環糊精和γ-環糊精。
所述的環糊精衍生物包括但不僅限於1、水溶性環糊精及其衍生物1)α-環糊精；2)羥乙基-β-環糊精(HP-β-CYD)，甲基-β-環糊精、碘酸基-β-環糊精；3)羥丙基-β-環糊精，如2-羥丙基-β-環糊精，3-羥丙基-β-環糊精，二羥丙基-β-環糊精或2，3-羥丙基-β-環糊精；4)β-環糊精甲基化衍生物，如甲基-β-環糊精、2，6-二甲基-β-環糊精或2，3，6-二甲基-β-環糊精；5)支鏈環糊精葡糖基-環糊精如葡糖基-β-環糊精、葡糖基-α-環糊精或二葡糖基-β-環糊精；麥芽糖基-環糊精如麥芽糖基-β-環糊精、麥芽糖基-α-環糊精或麥芽糖基-γ-環糊精；麥芽三糖基-環糊精如麥芽三糖基-β-環糊精、麥芽三糖基-α-環糊精或麥芽三糖基-γ-環糊精；6)環糊精聚合物如CDPS、CDPS-H、CDPS-L等，以及羧甲基環糊精或磺烷基環糊精。
2、疏水性環糊精包括乙基化-β-環糊精，如2，6-二乙基-β-環糊精，2，3，6-三乙基化-β-環糊精。
本發明優選空洞大小適中、溶解性適合的羥丙基-β-環糊精(HP-β-CD)作為包合材料以製備Eb乙烷的包合物，改善Eb乙烷的溶解性能和提高其生物利用度，以擴大其臨床使用範圍。
本發明的另-目的是提供-種製備包合物的方法，包括如下步驟將環糊精或環糊精衍生物加入適宜溶媒中，製成濃度範圍在10-70mmol.L-1的溶液，按照Eb乙烷與環糊精或環糊精衍生物的分子質量比24-1∶1-24的範圍，將Eb乙烷加入上述溶液，在25℃-50℃下包合8-48h，即得；優選Eb乙烷與環糊精或環糊精衍生物的質量比5-1∶1-5，更優選質量比為2.5-1∶1-2.5，最優選質量比為1∶1。。
還可將液體Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物於40-80℃的溫度下乾燥，即得固體Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物；或者將液體Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物濃縮至環糊精或環糊精衍生物濃度範圍在10-15％(W/V)的溶液，冷藏12小時，使其析出沉澱，將過濾所得濾液置於40-80℃乾燥，即得固體Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物。
所述環糊精或環糊精衍生物的適宜溶媒可定義為能夠溶解環糊精或環糊精衍生物的常規溶劑，如水、乙醇、甲醇、丙醇、異丙醇、乙二醇、丙二醇、丙三醇或丙酮等，也可以是其混合物，其中優選溶媒為乙醇，更優選溶媒為95％的乙醇。
所述的包合可為本領域熟知的包合方法，如飽和水溶液法(又稱重結晶法或共沉澱法)，超聲波法、研磨法、冷凍乾燥法(可製成粉針劑)、噴霧乾燥法或溶液—攪拌法等，並優選包合時間為24h。
所述的乾燥液體包合物的方法可選自直接乾燥、噴霧乾燥、減壓乾燥、冷凍於燥等。
本發明的另一目的是提供Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物在製備藥物製劑中的應用。
本發明的Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物可直接用於製備注射劑、輸液、水針、粉針(如凍乾粉針、無菌粉針)、口服液、栓劑、噴霧劑、糖漿劑等液體劑型，以及製成片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、滴丸劑、膠囊劑、分散片等固體劑型。
還可將所得的Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物與Eb乙烷粉末、藥學上可接受的載體均勻混合以製成片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、滴丸劑、膠囊劑、分散片等固體劑型。
本發明的有益效果是通過環糊精或環糊精衍生物對Eb乙烷進行包合，使Eb乙烷分子包埋於環糊精或環糊精衍生物分子的管狀結構中，成為Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物的包合物，從而提高Eb乙烷的水溶性和其生物利用度，以擴大臨床使用範圍，使得Eb乙烷可以包合物形式直接製成適用臨床的固體、液體劑型，很好解決了Eb乙烷水溶性低，臨床推廣運用受到限制的問題。
圖1由水和95％乙醇為包合溶劑製得Eb乙烷/HP-β-CD包合物的相溶度圖，其中—◆—表示水(water)；—●—表示95％乙醇(95％alcohol)。
具體實施例方式
以下將結合實施例和試驗例具體說明本發明，本發明的實施例和試驗例僅用於說明本發明的技術方案，並非限定本發明的實質。
實施例1Eb乙烷羥丙基-β-環糊精衍生物包合物的製備(1)稱取32g羥丙基-β-環糊精，加入35ml95％乙醇溶液溶解，製得濃度為60mmol.L-1的羥丙基-β-環糊精乙醇溶液；(2)另稱取Eb乙烷12.8g加入上述羥丙基-β-環糊精溶液中；(3)密塞，置於恆溫振蕩器中分別在25℃-50℃下振蕩包合24h，過濾即得液體Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物。
還可將所得的液體Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物通過常用的乾燥方法製得其固體包合物，所述的乾燥方法選自直接乾燥、噴霧乾燥、減壓乾燥、冷凍於燥等。還可按本領域熟知的製劑方法製備其片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、滴丸劑、膠囊劑以及分散片等劑型。
還可以用本領域熟知的包合方法來製備本發明包合物，如飽和水溶液法(又稱重結晶法或共沉澱法)，超聲波法、研磨法、冷凍乾燥法、噴霧乾燥法或溶液—攪拌法等。
實施例2Eb乙烷羥丙基-β-環糊精衍生物包合物的製備(1)稱取32g羥丙基-β-環糊精，加入35ml95％乙醇溶液溶解，製得濃度為60mmol.L-1的羥丙基-β-環糊精乙醇溶液；(2)另稱取Eb乙烷32g加入上述羥丙基-β-環糊精溶液中；(3)密塞，置於恆溫振蕩器中分別在25℃-50℃下振蕩包合24h，過濾即得液體Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物。
實施例3Eb乙烷羥丙基-β-環糊精衍生物包合物的製備(1)稱取32g羥丙基-β-環糊精，加入35ml95％乙醇溶液溶解，製得濃度為60mmol.L-1的羥丙基-β-環糊精乙醇溶液；(2)另稱取Eb乙烷6.4g加入上述羥丙基-β-環糊精溶液中；(3)密塞，置於恆溫振蕩器中分別在25℃-50℃下振蕩包合24h，過濾即得液體Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物。
實施例4Eb乙烷羥丙基-β-環糊精衍生物包合物的製備(1)稱取32g羥丙基-β-環糊精，加入35ml95％乙醇溶液溶解，製得濃度為60mmol.L-1的羥丙基-β-環糊精乙醇溶液；(2)另稱取Eb乙烷3.2g的加入上述羥丙基-β-環糊精溶液中；(3)密塞，置於恆溫振蕩器中分別在25℃-50℃下振蕩包合24h，過濾即得液體Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物。
實施例5Eb乙烷羥丙基-β-環糊精衍生物包合物的製備(1)稱取32g羥丙基-β-環糊精，加入35ml水溶解，製得濃度為60mmol.L-1的羥丙基-β-環糊精水溶液；(2)另稱取Eb乙烷12.8g的加入上述羥丙基-β-環糊精溶液中；(3)密塞，置於恆溫振蕩器中分別在25℃-50℃下振蕩包合24h，過濾即得液體Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物。
實施例6Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物凍乾粉針的製備(1)稱取32g羥丙基-β-環糊精，加入35ml95％乙醇溶液溶解，製得濃度為60mmol.L-1的羥丙基-β-環糊精乙醇溶液；(2)另稱取Eb乙烷12.8g加入上述羥丙基-β-環糊精溶液中；(3)密塞，置於恆溫振蕩器中分別在25℃-50℃下振蕩包合24h，得液體Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物；(4)將3)所得的Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物置於凍幹機中，冷凍乾燥，壓蓋即得其凍乾粉針。
實施例7Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物氯化鈉輸液的製備(1)按照實施例1所述方法製備得到Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物；(2)包合物溶液補水至800ml，加入注射用7-8g氯化鈉，測PH，並用0.05N的鹽酸和0.05N的氫氧化鈉調PH＝3.5-7，補水至1000ml，加入0.1g注射用活性炭，攪拌20分鐘；(3)溶液脫炭灌裝(100ml/瓶)，115℃、30分鐘熱壓滅菌即得。
實施例8Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物葡萄糖輸液的製備(1)按照實施例1所述方法製備得到Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物；(2)稱取注射用葡萄糖50g，加水攪拌溶解使體積達100ml，加入0.1g活性炭，加熱微沸15分鐘，脫炭。
(3)葡萄糖液倒入包合物溶液中，補水至800ml，用0.05N的鹽酸和0.05N氫氧化鈉調PH＝4，補水至1000ml，加入0.1g注射用活性炭，攪拌20分鐘。
(4)溶液分別用過濾器或砂濾棒(孔徑1.0μm、0.45μm、0.22μm)進行粗濾、精濾，然後灌裝，115℃、30分鐘熱壓滅菌即得。
發明人為了進一步研究和選擇包合條件，還進行了如下試驗例研究。應當說明以下試驗例用於具體說明本發明，並非限定本發明的實質。
試驗例1包合因素的選擇研究發明人以包合時間、HP-β-CD與藥物的質量比、HP-β-CD的濃度為主要因素，選擇L9(34)正交表進行正交試驗設計，實驗中以包合率(被包合的Eb乙烷質量與Eb乙烷投料質量的比值)和載藥量(被包合的Eb乙烷質量與所用包合材料的比值)為評價指標。試驗安排、結果與分析見表1和表2。
實施例6改善粉底霜乳液為酸性pH的說明在pH為5的情況下用乳化劑A、G和H製備的具有實施例5中所示組成的乳液。
結果列於表5。
表5
在被測試的乳化劑中，本發明的那個提供了在酸性介質中調節pH的最大的靈活性。對於其他乳化劑，酸化pH產生了整體上不能接受的顏料和填料的不穩定性。
以水為溶劑的不同濃度的HP-β-CD試樣包合結束後用0.45μm微孔濾膜過濾，濾液減壓乾燥(＜70℃)，於殘渣中精密加入10mL的DMSO溶解，溶液於320nm處測定吸光度，並計算Eb乙烷含量。
以95％乙醇為溶劑的不同濃度的HP-β-CD試樣包合結束後減壓乾燥，乾燥物加水5mL溶解，渦旋1min，0.45μm微孔濾膜過濾，濾液減壓旋轉乾燥(＜70℃)，殘渣中精密加入10mL的DMSO溶解，溶液於320nm處測定吸光度，計算Eb乙烷含量。
結果以Eb乙烷濃度(mmol·L-1)為縱坐標，HP-β-CD濃度(mmol·L-1)為橫坐標，分別繪製Eb乙烷/HP-β-CD在水中和95％乙醇中的相溶度圖。可見Eb乙烷乙烷在以95％乙醇為包合溶劑可以獲得更好的包封率和載藥量。試驗結果參見附圖1。
試驗例3Eb乙烷羥丙基-β-環糊精包合物的血管刺激性試驗取家兔8隻分為試驗組和對照組兩組。試驗組由兔耳緣靜脈緩慢滴注該包合物，每日一次，劑量2.45g/kg，加5％葡萄糖注射液40ml，滴速1.5ml/分鐘，連續給藥3天；對照組給予10％冰醋酸，在對側兔耳滴注5％葡萄糖注射液為陰性對照，連續給藥3天。結果表明試驗組連續給藥3天，局部未見異常，與對側注射5％葡萄糖注射液一樣，而注射10％冰醋酸後可見局部充血、變厚、滲出。
可見，滴注本發明的包合物對動物的血管刺激小，適合於將該包合物製備成注射劑型。
此外，發明人還經大鼠體內實驗結果證明口服Eb乙烷包合物與Eb乙烷原料相比較，生物利用度提高了近16倍，並且避免了DMSO對胃腸道的刺激性，達到了預期的實驗結果。
綜上所述，環糊精或環糊精衍生物是一種毒性較小的水溶性藥用輔料，用其製備的Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物適合於製成多種液體製劑和固體製劑。Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物，具有水溶性好、血管刺激性小的特點。並且由於提高了水溶性，用其製備的固體製劑具有崩解快、溶出好、生物利用度高的特點，更利於臨床應用。
權利要求
1.一種Eb乙烷的環糊精或環糊精衍生物的包合物，其特徵在於該包合物含有Eb乙烷和環糊精或環糊精衍生物，其中Eb乙烷與環糊精或環糊精衍生物的質量比為24-1∶1-24，優選質量比為5-1∶1-5，更優選質量比為2.5-1∶1-2.5，最優選質量比為1∶1。
2.根據權利要求1所述的包合物，所述的環糊精選自α-環糊精、β-環糊精或γ-環糊精。
3.根據權利要求1所述的包合物，所述的環糊精衍生物選自水溶性環糊精及其衍生物或疏水性環糊精及其衍生物。
4.根據權利要求3所述的包合物，所述的水溶性環糊精及其衍生物選自α-環糊精、羥乙基-β-環糊精、甲基-β-環糊精、碘酸基-β-環糊精、羥丙基-β-環糊精、β-環糊精甲基化衍生物、支鏈環糊精或環糊精聚合物。
5.根據權利要求4所述的包合物，所述的羥丙基-β-環糊精選自2-羥丙基-β-環糊精、3-羥丙基-β-環糊精、 二羥丙基-β-環糊精或2，3-羥丙基-β-環糊精。
6.根據權利要求4所述的包合物，所述的支鏈環糊精選自葡糖基—環糊精、麥芽糖基—環糊精或麥芽三糖基—環糊精。
7.一種製備包合物的方法，包括如下步驟將環糊精或環糊精衍生物加入適宜溶媒中，製成濃度範圍為10-70mmol.L-1的環糊精溶液，按照Eb乙烷與環糊精或環糊精衍生物的質量比24-1∶1-24的範圍，將Eb乙烷加入上述溶液，在25℃-50℃下包合8-48h即得，優選Eb乙烷與環糊精或環糊精衍生物的質量比5-1∶1-5，更優選質量比為2.5-1∶1-2.5，最優選質量比為1∶1。
8.根據權利要求8所述的方法，所述的適宜溶媒選自水、乙醇、甲醇、丙醇、異丙醇、乙二醇、丙二醇、丙三醇、丙酮或其混合物；優選溶媒為乙醇，更優為95％的乙醇。
9.根據權利要求7所述的方法，所述的包合選自飽和水溶液法、超聲波法、研磨法、冷凍乾燥法、噴霧乾燥法或溶液—攪拌法的包合方法，並優選包合時間為24h。
10.權利要求1-6任一所述的包合物用於製備藥物製劑中的應用。
11.根據權利要求10所述的應用，可將Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物直接用於製備注射劑、輸液、水針、粉針、口服液、栓劑、噴霧劑、糖漿劑、片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、滴丸劑、膠囊劑或分散片。
12.根據權利要求11所述的應用，可將Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物與Eb乙烷粉末(1∶1-1∶10)、藥學上可接受的載體均勻混合以製得其片劑、顆粒劑、丸劑、合劑、滴丸劑、膠囊劑或分散片。
全文摘要
本發明涉及Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物，以及製備包合物的方法和其用途。本發明通過環糊精對Eb乙烷進行包合處理，大大提高Eb乙烷的水溶性和生物利用度，以便更好地發揮Eb乙烷的治療作用。本發明還將Eb乙烷環糊精或環糊精衍生物包合物製成適用臨床的固體劑型或液體劑型，如輸液、水針、粉針、口服液、糖漿劑、片劑、膠囊、顆粒劑或分散片等。
文檔編號A61K9/00GK1853627SQ200510066219
公開日2006年11月1日 申請日期2005年4月25日 優先權日2005年4月25日
發明者曾慧慧, 武鳳蘭 申請人:曾慧慧