芳基鏈烷醯基衍生物、其製備方法、其用途和含有它們的藥物組合物的製作方法

2023-07-29 06:06:31 3

專利名稱：芳基鏈烷醯基衍生物、其製備方法、其用途和含有它們的藥物組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及用於抑制血液凝固蛋白的新化合物，更確切地涉及式I芳基鏈烷醯基衍生物， 其中R(1)、R(2)、R(3)、R(4)、R(5)、R(6a)和R(6b)是如下所定義的。式I化合物是血液凝固酶因子Xa的抑制劑。本發明還涉及式I化合物的製備方法、抑制Xa因子活性和抑制血液凝固的方法、式I化合物在可以通過Xa因子活性的抑制加以治療或預防的疾病如血栓栓塞疾病治療和預防中的用途和式I化合物在用於這類疾病的藥物製備中的用途。本發明進一步涉及含有與惰性載體混合或締合的式I化合物的組合物，確切地是含有式I化合物以及藥學上可接受的載體物質和輔助物質的藥物組合物。
形成血塊的能力對生存極端重要。不過在某些疾病狀態中，血塊在循環系統內的形成本身是發病的根源。雖然如此，在這樣的疾病狀態中完全抑制凝固系統也並非是可取的，因為將繼發對生命具有威脅性的出血。為了減少血管內血塊形成的情況，本領域技術人員已經努力研製有效的Xa因子或凝血酶原酶的抑制劑，這種酶結合到凝血酶原酶複合體中，在凝塊形成期間起到活化凝血酶的作用。適當濃度的這樣一種抑制劑將提高引發凝固所需的凝血酶原酶生成劑的水平，但是一旦已經獲得凝血酶的閾濃度，將不會過分延長凝固過程。
血液凝固是一種複雜的過程，涉及一系列逐漸增強的酶活化反應，其中血漿酶原被有限的蛋白水解作用連續活化。凝血級聯繫統已經被機械地分為內在途徑和外在途徑，二者集中於X因子的活化；隨後通過單一的共同途徑進行凝血酶的生成(見方案1)。 方案1凝血級聯繫統現有的證據提示，內在途徑在纖維蛋白形成的維持和生長中扮演重要角色，而外在途徑在血液凝固初期是關鍵性的。一般認為，血液凝固實際上是在組織因子(TF)/VIIa因子複合體的形成時引發的。一旦形成，這種複合體通過活化IX與X因子迅速引發凝固。新生成的活化因子X、即Xa因子然後與Va因子和磷脂形成一對一的複合體，形成凝血酶原酶複合體，後者通過凝血酶從其前體凝血酶原的活化作用，將可溶性纖維蛋白原轉化為不溶性纖維蛋白。隨著時間的推移，VIIa因子/組織因子複合體的活性(外在途徑)被Kunitz型蛋白酶抑制蛋白TFPI抑制，後者在與Xa因子複合時，能夠直接抑制VIIa因子/組織因子的蛋白水解活性。為了在被抑制的外在系統的存在下維持凝固過程，通過凝血酶介導的內在途徑活性產生了另外的Xa因子。因此，凝血酶扮演雙重的自動催化角色，介導其自身的產生和纖維蛋白原向纖維蛋白的轉化。
凝血酶生成的自動催化性質是對抗失控出血的重要保護措施，一旦存在給定的凝血酶原酶閾水平，它確保血液凝固完成，例如引起出血結束。因此，最可取的是研製抑制凝固而不直接抑制凝血酶的藥物。不過，儘管對這樣一種抑制劑的需求已有長期認識，目前在臨床使用中還沒有有效的特異性Xa抑制劑。
在很多臨床應用中，對血管內血塊的預防或者對抗凝血療法存在巨大的需求。目前在很多特殊的臨床應用中可利用的藥物不是令人滿意的。例如，幾乎50％的已進行全髖部置換術的患者發展為深靜脈血栓形成(DVT)。目前獲得批准的療法是固定劑量的小分子量肝素(LMWH)和可變劑量的肝素。即使採用這些藥物方案，仍有10％至20％患者發展為DVT，5％至10％患者發展為出血併發症。
另一種需要更好的抗凝劑的臨床情形與正在接受腔內冠狀血管成形術的受治療者和面臨心肌梗塞或心絞痛危險的受治療者有關。
最廣泛使用的血液凝固抑制劑是肝素和有關的硫酸化多糖、LMWH和肝素硫酸酯。這些分子通過促進天然的凝固過程調節劑、即抗凝血酶III與凝血酶和Xa因子的結合來發揮它們的抗凝作用。肝素的抑制活性主要針對凝血酶，後者的失活比Xa因子快大約100倍。儘管相對於肝素而言，肝素硫酸酯和LMWH是略微更有效的Xa而不是凝血酶的抑制劑，不過體外差異是適度的(3-30倍)，體內作用可能是不重要的。水蛭素和類水蛭素(hirulog)是另外兩種已經處於臨床試驗的凝血酶特異性抗凝劑。不過，這些抑制凝血酶的抗凝劑也伴有出血併發症。
狒狒和狗的臨床前期研究已經顯示，特異性Xa因子抑制劑預防凝塊形成而不引起用直接凝血酶抑制劑所觀察到的出血副作用。
若干特異性Xa因子抑制劑已經見諸報導。已經鑑定了Xa因子的合成抑制劑和蛋白質抑制劑，它們例如包括antistasin(「ATS」)和壁蝨抗凝肽(「TAP」)。ATS是從水蛭Haementerin officinalis中分離的，含有119個胺基酸，對Xa因子的Ki為0.05nM。TAP是從壁蝨Ornithodoros moubata中分離的，含有60個胺基酸，對Xa因子的Ki約為0.5nM。
已經在大量動物模型系統中研究了用重組方法製備的ATS和TAP的有效性。這兩種抑制劑與其它抗凝劑相比都縮短出血時間，在凝血激酶誘導的深靜脈血栓形成的結紮頸靜脈模型中預防凝固。在該模型中達到的結果與利用目前的藥物選擇、即肝素所得結果有相互關係。
還發現皮下ATS在凝血激酶誘導的瀰漫性血管內凝血(DIC)模型中是有效的治療。TAP有效地預防由聚酯(「DACRON」)移植物的手術放置導致的「高剪切」動脈血栓形成和「血流減少」，其預防水平產生臨床上可接受的活化部分凝血激酶時間(aPTT)的延長作用，即小於約兩倍的延長作用。比較起來，標準肝素即使在導致aPTT延長五倍的劑量下也不預防血栓形成和移植物內血流減少。aPTT是凝血的臨床測定，對凝血酶抑制劑是特別敏感的。
ATS和TAP還沒有得到臨床應用。這兩種抑制劑的一個主要缺點是所需的重複劑量給藥導致中和抗體的生成，於是限制了它們潛在的臨床用途。而且，TAP和ATS的尺寸使得口服給藥不可能，進而限制了能夠從這些藥物獲益的患者數量。
特異性Xa因子抑制劑在醫學實踐中將具有巨大的實用價值。確切地說，在現有藥物的選擇、即肝素和有關的硫酸化多糖是無效或僅為勉強有效的情況下，Xa因子抑制劑將是有效的。因此，對小分子量Xa因子特異性血液凝固抑制劑存在需求，該抑制劑是有效的，但不會導致不需要的副作用。
有效的、但不會導致不需要的副作用的小分子量Xa因子特異性血液凝固抑制劑已有描述(國際申請WO9529189)。歐洲申請97122901.8已經提出吲哚衍生物作為小分子量Xa因子特異性血液凝固抑制劑。不過，除了作為有效的Xa因子特異性血液凝固抑制劑以外，可取的是這樣的抑制劑還將具有有利的藥理學性能，例如在血漿和肝臟中的高穩定性和相對於其它絲氨酸蛋白酶的高選擇性。因此，對新穎的小分子量Xa因子特異性血液凝固抑制劑不斷存在需求，這些抑制劑是有效的，並且還將具有上述優點。
本發明通過提供新穎的抑制Xa因子活性的式I芳基鏈烷醯基衍生物以及提供有關的優點，滿足了這種需求。
本發明提供新的式I芳基鏈烷醯基衍生物，它們抑制Xa因子活性，但基本上不抑制其它蛋白酶的活性，尤其是參與凝血途徑的那些。因此，本發明的一個主題是式I化合物， 其中R(1)是(C1-C10)烷基、(C3-C7)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、雜烷基、(C6-C10)芳基或雜芳基，其中環烷基是未取代的，或者被一個或兩個相同或不同的殘基R(7)取代，或者通過增環反應形成苯環；其中芳基和雜芳基是未取代的或者被1、2或3個相同或不同的殘基R(8)取代，在雜芳基的氮原子上被這些殘基取代形成帶正電的氮原子，具有X-作為抗衡離子；其中雜烷基不含或含有氮原子，它是未取代的或者被一個或兩個殘基R(9)取代；R(2)是氫或(C1-C4)烷基；R(3)是(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，它在芳基或烷基部分被殘基R(11)、雜芳基-(C1-C4)烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基取代；雜芳基-(C1-C4)烷基或(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基，其在雜芳基、環烷基或烷基部分被一個、兩個或三個殘基R(11)取代，或者是雜烷基-(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代；R(4)是氫、(C1-C4)烷基、(C3-C7)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基或(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基；R(5)是氫、(C1-C10)烷基、(C3-C7)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、(C6-C10)芳基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、或天然胺基酸α-C-原子的殘基，其中烷基、環烷基和芳基是未取代的或者被取代基取代，取代基是羥基、苄氧基、羥基羰基或N(R(9))2；或者R(4)和R(5)與它們所鍵合的-N-CH基團一起構成5至6元雜環或式II或III殘基 R(6a)和R(6b)彼此獨立地是氫；(C1-C8)烷基，它是未取代的或者被一個、兩個或三個相同或不同的殘基R(15)取代；(C6-C14)芳基、或雜芳基，其中芳基和雜芳基是未取代的或者彼此獨立地被1、2、3、4或5個相同或不同的殘基R(16)取代，在雜芳基的氮原子上被這些殘基取代形成帶正電的氮原子，具有X-作為抗衡離子；R(7)是(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、或其中一個至全部氫原子已被氟、氯或溴代替的(C1-C6)烷基；R(8)是(C1-C10)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C10)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、SO2-(C1-C4)烷基、氟、氯、溴；或其中在烷基部分或環烷基部分中的一個至全部氫原子已被氟、氯或溴代替的(C1-C10)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C10)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基或SO2-(C1-C4)烷基；或者兩個殘基R(8)構成-O-(CH2)2-O-橋或-(CH2)4-橋；R(9)是R(10)或(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基；R(10)是氫、硝基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基羰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C18)烷基羰基氧基-(C1-C6)烷氧基羰基、可選被取代的(C6-C14)芳基羰基、可選被取代的(C6-C14)芳氧基羰基、或在芳基部分是可選被取代的(C6-C14)芳基-(C1-C6)烷氧基羰基；R(11)是R(12)、(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被殘基R(12)取代，或者是雜芳基，它是未取代的或者被N(R(9))2或(C1-C4)烷基取代；R(12)是N(R(9))2、CON(R(9))2、CN、氯、NR(10)-C(＝NR(13))-NHR(10)、C(＝NR(13))-NHR(10)或S(O)(＝NR(9))-N(R(9))2；R(13)是R(10)、氰基、硝基、氨基、羥基、(C1-C6)烷氧基、或(C6-C14)芳基-(C1-C6)烷氧基，它是未取代的或者在芳基部分例如被(C1-C4)烷氧基、優選甲氧基，氯，或(C1-C4)烷基、優選甲基取代；R(14)是氫、羥基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、氟、氯、溴、N(R(9))2、硝基或氰基；R(15)是(C6-C10)芳基，它是未取代的或者被一個、兩個或三個相同或不同的殘基R(11)或R(21)取代；雜芳基，它是未取代的或者被一個、兩個或三個相同或不同的殘基R(11)或R(22)取代，在雜芳基的氮原子上被這些殘基取代形成帶正電的氮原子，具有X-作為抗衡離子；或者雜芳基被一個殘基N(R(9))2取代；O-雜芳基；S-雜芳基；(C3-C7)環烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代；雜烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代；COOR(17)、CONR(17)R(18)、CON(R(18))2、氧代、OH、NR(19)R(20)、R(12)、或天然胺基酸α-C-原子的殘基；R(16)是(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基、雜芳基、雜烷基、COOR(17)、CON(R(18))2、OH、NR(19)R(20)、R(12)、R(21)、R(22)、或C(O)-(CH2)2-NH2；R(17)是氫、(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、雜芳基、或雜芳基-(C1-C4)烷基；R(18)是氫、(C1-C6)烷基、(C3-C10)環烷基、(C3-C10)環烷基-(C1-C4)烷基、雜烷基、雜烷基-(C1-C4)烷基、(C6-C10)芳基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、雜芳基、或雜芳基-(C1-C4)烷基；其中上述基團中的烷基和/或芳基是未取代的或者被一個、兩個或三個殘基R(24)取代；或者兩個殘基R(18)與它們所鍵合的氮原子一起構成5或6元飽和或不飽和雜環，它不含或含有額外的氮、硫或氧原子，並且是未取代的或者被取代基取代，取代基是(C6-C12)芳基、優選苯基，(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、優選苄基，或在萘基部分被氯取代的萘基-磺醯基，優選7-氯萘-2-磺醯基；R(19)是氫或R(20)；R(20)是(C6-C10)芳基、脒基、乙醯亞氨基、R(25)、或2-吡啶基，它是未取代的或者被殘基R(26)取代；R(21)是(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被殘基R(28)取代；氰基、CON(R(9))2、羥基羰基、(C1-C6)烷氧基羰基、N(R(9))2、S(O)r-(C1-C4)烷基、S(O)r-N(R(9))2、OR(17)、R(11)，或者兩個殘基R(21)構成-O-CH2-O-橋；R(22)是氫、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基羰基；其中烷基是未取代的或者被殘基N(R(9))2取代；(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氟、氯、溴、硝基、N(R(9))2，或者兩個殘基R(22)構成-(CH2)q-橋，其中q是3或4；R(23)是氫、-C(＝NR(9))-R(39)、R(9)、氧代、R(11)、-NH-S(O)(＝NR(9))-(C1-C4)烷基、或-S(O)(＝NR(9))-N(R(9))2；R(24)是(C1-C4)烷基；其中一個至全部氫原子已被氟或氯代替的(C1-C4)烷基；(C6-C10)芳基、OR(17)、N(R(9))2、CON(R(9))2、氟、氯、溴、硝基、氰基、或S(O)r-N(R(9))2；R(25)是氫、(C1-C4)烷氧基羰基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基羰基、(C1-C4)烷基羰基、或SO2R(27)；R(26)是N(R(9))2或硝基；R(27)是(C1-C4)烷基；(C6-C10)芳基，它是未取代的或者被一個、兩個或三個相同或不同的取代基取代，取代基是氟、氯、溴或(C1-C4)烷氧基；R(28)是氟、氯、溴、或NHR(25)；R(39)是氫、(C6-C10)芳基、雜芳基；或(C1-C6)烷基，它是未取代的或者被氰基取代；r是0、1或2；X-是生理學上可接受的陰離子；所有它們的立體異構形式及其任意比例的混合物和它們的生理學上可接受的鹽。
存在於式I化合物中的烷基可以是飽和的或不飽和的、直鏈的或支鏈的。這一點也適用於它們攜帶取代基或者作為取代基出現在其它殘基中的情況，例如在烷氧基、烷基羰基、烷氧基羰基、雜烷基-烷基、環烷基-烷基、芳烷基、雜芳烷基、和芳烷基羰基。烷基的實例是甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基、異丙基、異丁基、異戊基、異己基、異辛基、異壬基、異癸基、新戊基、3-甲基戊基、仲丁基、叔丁基、和叔戊基，鏈烯基的實例是乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基(即烯丙基)、丁烯基、3-甲基-2-丁烯基、戊烯基、己烯基、庚烯基、辛烯基、壬烯基、癸烯基，炔基的實例是乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基(即炔丙基)、丁炔基、戊炔基和己炔基。
存在於式I化合物中的環烷基可以是單、二或三環的，並且連接在環內。這一點也適用於它們攜帶取代基或者作為取代基出現在其它殘基中的情況。環烷基的實例是環丙基、甲基-環丙基、乙基-環丙基、二甲基-環丙基、丙基-環丙基、甲基-乙基-環丙基、丁基-環丙基、甲基-丙基-環丙基、二乙基-環丙基、戊基-環丙基、己基-環丙基、庚基-環丙基、環丁基、甲基-環丁基、乙基-環丁基、環戊基、甲基-環戊基、乙基-環戊基、二甲基-環戊基、丙基-環戊基、丁基-環戊基、甲基-丙基-環戊基、二乙基-環戊基、環己基、甲基-環己基、乙基-環己基、丙基-環己基、環庚基、八氫化茚、二環[4.2.0]辛烷、八氫並環戊二烯、二環[3.3.1]壬烷、十四氫化菲、十二氫化phenalene、八氫-1，4-橋亞乙基茚、十四氫化菲、金剛烷基和甲基-金剛烷基，其中乙基、丙基、丁基、戊基、己基和庚基可以是直鏈或支鏈的，如上所述。
雜烷基的實例是吡咯烷、哌啶、四氫呋喃、全氫吡喃、四氫噻吩、全氫噻喃、吡唑烷、咪唑烷、咪唑烷-2，4-二酮、六氫吡嗪、六氫嘧啶、哌嗪、二氧戊環、全氫二噁烷、噁唑烷、異噁唑烷、噻唑烷、異噻唑烷、全氫-1，2-噁嗪、全氫-1，3-噁嗪、全氫-1，4-噁嗪、全氫-1，3-噻嗪和全氫-1，4-噻嗪。存在於雜烷基中的取代基可以結合在任意位置，另有規定除外。
O-雜芳基的實例是2-、3-或4-吡啶氧基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉氧基。S-雜芳基的實例是2-、3-或4-吡啶硫基、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉硫基。
芳基的實例是苯基、萘基或9-芴基。
存在於式I化合物中的芳烷基可以由含有一至三個芳基部分的烷基組成。芳烷基的實例是苯基-甲基、苯基-乙基、苯基-丙基、苯基-丁基、萘基-甲基、萘基-乙基、萘基-丙基、萘基-丁基、二苯基-甲基、二苯基-乙基、二苯基-丙基、二苯基-丁基、萘基-苯基-甲基、萘基-苯基-丁基、二萘基-丁基、和三苯基-乙基。
雜芳基的實例是吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、呋喃基、吡咯基、咪唑基、1H-吡唑基、噻唑基、噁唑基、噻吩基、1H-苯並咪唑基、苯並噻唑基、苯並呋喃基、吲哚基、噻吩並[3，2-c]吡啶基、噻吩並[2，3-c]吡啶基、呋喃並[3，2-c]吡啶基、呋喃並[2，3-c]吡啶基、3H-咪唑並[4，5-c]吡啶基、[1，2，4]噁二唑基、喹啉基、和異喹啉基。這些殘基可以結合在每一個可能的位置。
吡啶基的實例是2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基。這一點也適用於其中的氮原子被烷基等取代的吡啶基，這種取代產生帶正電的吡啶鎓基。該吡啶鎓基具有X-作為抗衡離子。
在單取代的苯基中，取代基可以位於2-位、3-位或4-位。如果苯基被取代兩次，那麼取代基可以在2，3-位、2，4-位、2，5-位、2，6-位、3，4-位或3，5位。在攜帶三個取代基的苯基中，取代基可以在2，3，4-位、2，3，5-位、2，3，6-位、2，4，5-位、2，4，6-位或3，4，5-位。在攜帶四個取代基的苯基中，取代基可以在2，3，4，5-位、2，3，4，6-位或2，3，5，6-位。
萘基可以是1-萘基和2-萘基。在取代的萘基中，取代基可以在任意位置，也就是說在單取代的1-萘基中，位於2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-位，在單取代的2-萘基中，位於1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-位。
可以由兩個殘基R(18)與它們所鍵合的氮原子一起構成且可以含有N、S或O原子的5或6元飽和或不飽和雜環的實例是咪唑烷、2，3-二氫-1H-咪唑、噻唑烷、2，3-二氫噻唑、噁唑烷、2，3-二氫噁唑、哌嗪、1，2，3，4-四氫吡嗪、六氫嘧啶、1，2，3，4-四氫嘧啶、1，2-二氫嘧啶、六氫噠嗪、1，2，3，4-四氫噠嗪、1，2，3，6-四氫噠嗪。存在於該環中的取代基可以鍵合在任意位置，另有規定除外。
天然胺基酸α-碳-原子的殘基實例是氫、甲基、異丙基、丁基、異丁基、氨基丁基、羥甲基、1-羥基乙基、苄基、4-羥基苄基、吲哚-3-基-甲基、硫代甲基、甲硫基乙基、咪唑-4-基甲基、羥基羰基甲基、羥基羰基乙基、氨基羰基甲基、氨基羰基乙基、和3-胍基丙基。
兩個殘基R(8)或R(21)構成O-CH2-O-橋的式I化合物中，殘基是連位的。
兩個殘基R(8)構成-(CH2)4-橋的式I化合物中，殘基是連位的。
兩個殘基R(22)構成(CH2)q-橋的式I化合物中，殘基是連位的。
可以由R(4)和R(5)與它們所鍵合的-N-CH-基團一起構成的5至6元雜環的實例是吡咯烷基和哌啶基。
式I化合物中優選的(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基是苄基(苯甲基)。
(C1-C4)烷基指具有1、2、3或4個碳原子的烷基。
(C1-C6)烷基指具有1、2、3、4、5或6個碳原子的烷基。
(C1-C8)烷基指具有1、2、3、4、5、6、7或8個碳原子的烷基。
(C1-C10)烷基指具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個碳原子的烷基。
(C1-C12)烷基指具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個碳原子的烷基。
(C6-C10)芳基指具有6、7、8、9或10個碳原子的芳基。
(C6-C14)芳基指具有6、7、8、9、10、11、12、13或14個碳原子的芳基。
(C1-C4)烷氧基指具有1、2、3或4個碳原子的烷氧基。
(C1-C6)烷硫基指具有1、2、3、4、5或6個碳原子的烷硫基。
(C1-C6)烷氧基指具有1、2、3、4、5或6個碳原子的烷氧基。
(C1-C4)烷氧基羰基指在烷氧基部分具有1、2、3或4個碳原子的烷氧基羰基。
(C1-C6)烷氧基羰基指在烷氧基部分具有1、2、3、4、5或6個碳原子的烷氧基羰基。
(C1-C4)烷基羰基指在烷基部分具有1、2、3或4個碳原子的烷基羰基。
(C1-C6)烷基羰基指在烷基部分具有1、2、3、4、5或6個碳原子的烷基羰基。
(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基指彼此獨立地在芳基部分具有6、7、8、9或10個碳原子並且在烷基部分具有1、2、3或4個碳原子的芳基-烷基。
(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基羰基指彼此獨立地在芳基部分具有6、7、8、9或10個碳原子並且在烷基部分具有1、2、3或4個碳原子的芳基-烷基羰基。
(C6-C14)芳基-(C1-C6)烷氧基指彼此獨立地在芳基部分具有6、7、8、9、10、11、12、13或14個碳原子並且在烷氧基部分具有1、2、3、4、5或6個碳原子的芳基-烷氧基。
雜芳基-(C1-C4)烷基指在烷基部分具有1、2、3或4個碳原子的雜芳基-烷基。
(C1-C18)烷基羰基氧基-(C1-C6)烷氧基羰基指彼此獨立地在烷基部分具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18個碳原子並且在烷氧基部分具有1、2、3、4、5或6個碳原子的烷基羰基氧基-烷氧基羰基。
(C6-C14)芳基羰基指在芳基部分具有6、7、8、9、10、11、12、13或14個碳原子的芳基羰基。
(C6-C14)芳氧基羰基指在芳基部分具有6、7、8、9、10、11、12、13或14個碳原子的芳氧基羰基。
(C6-C14)芳基-(C1-C6)烷氧基羰基指彼此獨立地在芳基部分具有6、7、8、9、10、11、12、13或14個碳原子並且在烷氧基部分具有1、2、3、4、5或6個碳原子的芳基-烷氧基羰基。
(C3-C7)環烷基指具有3、4、5、6或7個碳原子的環烷基。
(C3-C10)環烷基指具有3、4、5、6、7、8、9或10個碳原子的環烷基。
(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基指彼此獨立地在環烷基部分具有3、4、5、6或7個碳原子並且在烷基部分具有1、2、3或4個碳原子的環烷基-烷基。
(C3-C10)環烷基-(C1-C4)烷基指彼此獨立地在環烷基部分具有3、4、5、6、7、8、9或10個碳原子並且在烷基部分具有1、2、3或4個碳原子的環烷基-烷基。
不言而喻的是，在式I化合物中出現一次以上的殘基和變量，例如殘基R(7)、R(8)、R(9)、R(10)、R(11)、R(12)、R(13)、R(14)、R(15)、R(16)、R(17)、R(18)、R(19)、R(20)、R(21)、R(22)、R(23)、R(24)、R(25)、R(26)、R(27)、R(28)、R(39)和變量r，是彼此獨立的並且可以是相同或不同的。而且，獨立地取代指各種可能的取代基可以是相同或不同的。
若存在帶正電的基團則存在於式I化合物中的生理學上可接受的陰離子X-可以是從合適的無機酸或有機羧酸或磺酸衍生的陰離子。合適的酸確切地是藥學上可利用的或無毒的鹽。下文給出這樣的酸的實例，作為能夠與含有鹼性基團的式I化合物生成生理學上可接受的鹽的酸的實例。如果式I化合物含有陰離子X-，並且同時以在鹼性基團所生成的酸加成鹽的形式存在，那麼該陰離子X-可以與由成鹽反應所引入的陰離子相同或不同。本發明也涵蓋式I化合物的內鹽(或內銨鹽)。
式I化合物的生理學上可接受的鹽確切地是藥學上可利用的或無毒的鹽。這樣的鹽例如是從含有酸基、例如羧酸基的式I化合物生成的。這樣的鹽例如含有鹼金屬或鹼土金屬、例如鈉、鉀、鎂或鈣的陽離子，或者含有未取代的銨陽離子或有機銨陽離子，後者包括從生理學上可接受的有機胺質子化得到的陽離子，例如甲胺、乙胺、三乙胺、乙醇胺、三(2-羥基乙基)胺或胺基酸，或合適的季銨陽離子，例如四甲銨。
含有鹼性基團、例如氨基、脒基或胍基的式I化合物例如與無機酸、有機羧酸和有機磺酸生成酸加成鹽。這樣的酸的陰離子可以存在於式I化合物的生理學上可接受的鹽中，酸的實例是鹽酸、氫溴酸、硫酸、磷酸、乙酸、苯甲酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、對甲苯磺酸或萘磺酸。
式I化合物的生理學上可接受的鹽可以按照標準操作製備，例如在溶劑或稀釋劑中，將式I化合物與所需的鹼混合，例如鹼金屬的氫氧化物或碳酸鹽或碳酸氫鹽、或胺，或者與所需的酸混合。按照標準操作，式I化合物的生理學上可接受的鹽還可以通過陽離子交換或陰離子交換從另一種鹽製備，例如三氟乙酸鹽。本發明通常還涵蓋式I化合物的鹽，它們例如是在化合物的化學合成過程中得到的且可以作為原料用於隨後製備所需的生理學上可接受的鹽。本發明進一步涵蓋式I化合物的溶劑化物，例如水合物或醇合物。
根據本發明的式I化合物可以含有旋光活性的碳原子，它們可以彼此獨立地具有R或S構型。它們因此可以以單個對映異構體或單個非對映異構體的形式或者以對映異構混合物、包括外消旋物或非對映異構混合物的形式存在。本發明涉及純的對映異構體和任意比例的對映異構體混合物，還涉及純的非對映異構體和任意比例的非對映異構體混合物。本發明涵蓋兩種立體異構體的混合物以及兩種以上式I立體異構體的混合物，和混合物中任意比例的立體異構體。
式I化合物還可以以E異構體或Z異構體的形式存在。本發明涉及純的E與Z異構體和任意比例的E/Z異構體混合物。例如通過色譜法，可以將非對映異構體、包括E/Z異構體分離為單個異構體。按照標準操作，通過手性相色譜法或拆分法，可以將外消旋物分離為兩種對映異構體。純的對映異構體或者也可以通過在合成中採用旋光活性原料而獲得。
根據本發明的式I化合物可以進一步含有活動的氫原子，也就是說它們可以以各種互變異構形式存在。本發明還涉及所有這些互變異構體。
本發明進一步涵蓋式I化合物的衍生物，其中官能團被合適的基團掩蔽或保護起來，例如普通的保護基團，以及式I化合物的其它衍生物和前藥和式I化合物的代謝物。
優選的化合物是這樣的式I化合物，其中R(1)是(C3-C7)環烷基、優選為環己基，(C6-C10)芳基、優選為苯基或2-萘基，雜芳基、優選為吡啶基、最優選為3-吡啶基，1-1，2，3，4-四氫化萘或2-1，2，3，4-四氫化萘，其中芳基是未取代的或者被殘基R(8)取代；R(2)是氫或(C1-C4)烷基、優選為甲基；R(3)是(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、優選為苄基，它在芳基部分被殘基R(11)取代；雜芳基-(C1-C4)烷基、優選為異喹啉甲基，它在雜芳基部分被殘基R(11)、優選為N(R(9))2取代；(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被一個、兩個或三個殘基R(11)取代，或者是雜烷基-(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代；R(4)是氫，(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、優選為環己基甲基，或(C1-C4)烷基、優選為甲基；R(5)是氫，(C3-C7)環烷基、優選為環己基，(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、優選為環己基甲基，(C1-C4)烷基、優選為甲基或丁基，(C6-C10)芳基、優選為苯基，(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、優選為苯甲基、苯乙基或萘甲基，其中烷基是未取代的或者被羥基、苄氧基、羥基羰基或N(R(9))2取代；芳基是未取代的或者被氨基取代；或者R(4)和R(5)與它們所鍵合的-N-CH基團一起構成式II或III殘基
R(6a)和R(6b)彼此獨立地是氫、甲基、乙基或丁基，它被一個或兩個相同或不同的殘基R(15)取代；R(8)是(C1-C6)烷基、優選為甲基，(C1-C4)烷氧基、優選為OCH3，SO2-(C1-C4)烷基、優選為SO2CH3，氟，氯，溴；或其中在烷基部分中的一個至全部氫原子已被氟、氯或溴代替的(C1-C6)烷基或(C1-C4)烷氧基；優選為CF3或OCF3；R(9)是R(10)；R(10)是氫、硝基或苄氧基羰基；R(11)是R(12)；甲基，它被R(12)取代；或雜芳基，它是未取代的或者被N(R(9))2或(C1-C4)烷基取代；R(12)是CN、N(R(9))2、-NR(10)-C(＝NR(13))-NHR(10)、-C(＝NR(13))-NHR(10)、S(O)(＝NR(9))-N(R(9))2或CON(R(9))2；R(13)是R(10)或羥基；R(14)是氫；R(15)是(C6-C10)芳基、優選為苯基，它被一個殘基R(11)取代；COOR(17)，CON(R(18))2，CONR(17)R(18)，R(12)，雜烷基、優選為哌啶或咪唑啉，它是未取代的或者被殘基R(23)取代；(C3-C7)環烷基，它是未取代的或被殘基R(23)取代；或雜芳基，它是未取代的或者被殘基R(22)、優選為N(R(9))2取代；R(17)是氫，(C1-C4)烷基，或(C6-C10)芳基、優選為苯基；R(18)是氫；(C1-C4)烷基、優選為甲基或乙基；(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、優選為苯乙基、苄基或萘甲基；被OR(17)取代的(C1-C4)烷基；(C3-C10)環烷基-(C1-C4)烷基、優選為環己基乙基、環己基甲基或金剛烷基甲基；雜芳基-(C1-C4)烷基、優選為噻吩甲基或吡啶甲基；或(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，其中烷基或芳基被一個、兩個或三個殘基R(24)取代；R(22)是甲基；R(23)是氧代、-C(＝NR(9))-R(39)、-NH-S(O)(＝NR(9))-(C1-C4)烷基、-S(O)(＝NR(9))-N(R(9))2或R(11)；R(24)是CONH2，(C6-C10)芳基、優選為苯基，Cl，CN，OCH3，CF3或OR(17)；和R(39)是氫，(C6-C10)芳基、優選為苯基，雜芳基、優選為吡啶基，或(C1-C6)烷基，它是未取代的或者被氰基取代；所有它們的立體異構形式及其任意比例混合物、和它們生理學上可接受的鹽。
特別優選的化合物是這樣的式I化合物，其中R(1)是環己基，吡啶基、優選為3-吡啶基，萘基、優選為2-萘基、1-1，2，3，4-四氫化萘、2-1，2，3，4-四氫化萘，或苯基，它是未取代的或者被殘基R(8)取代；R(2)是氫或(C1-C4)烷基、優選為甲基；R(3)是苄基，它在芳基部分被殘基R(11)取代；或雜芳基-(C1-C4)烷基、優選為異喹啉甲基，它在雜芳基部分被NH2基取代；R(4)是氫；R(5)是氫、環己基、丁基、環己基甲基、苯基、苯甲基或苯乙基，其中甲基或丁基是未取代的或者被羥基、苄氧基、N(R(9))2或羥基羰基取代；R(6a)是氫；R(6b)是甲基或丁基，它們被一個或兩個相同或不同的殘基R(15)取代；R(8)是甲基、OCH3、SO2CH3、氟、氯、溴、CF3或OCF3；R(9)是R(10)；R(10)是氫或苄氧基羰基；R(11)是R(12)；甲基，它被R(12)取代；或雜芳基，它被(C1-C4)烷基取代；R(12)是N(R(9))2、-NR(10)-C(＝NR(13))-NHR(10)、-C(＝NR(13))-NHR(10)或CON(R(9))2；R(13)是氫或羥基；
R(15)是苯基，它被殘基R(11)取代；哌啶或咪唑啉，它們是未取代的或者被殘基R(23)取代；COOR(17)、CONR(17)R(18)、CON(R(18))2、R(12)；(C3-C7)環烷基、優選為環己基，它被殘基R(23)取代；R(17)是氫、苯基或(C1-C4)烷基；R(18)是氫；(C1-C4)烷基、優選為甲基或乙基；被OR(17)取代的(C1-C4)烷基；(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、優選為苯乙基、苄基或萘甲基；(C3-C10)環烷基-(C1-C4)烷基、優選為環己基乙基、環己基甲基或金剛烷基甲基；雜芳基-(C1-C4)烷基、優選為噻吩甲基或吡啶甲基；或(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，其中烷基或芳基被一個或兩個殘基R(24)取代；R(23)是-C(＝NR(9))-R(39)或R(11)；R(24)是苯基、Cl、CN、OCH3、CF3或OR(17)；R(39)是(C6-C10)芳基、優選為苯基；雜芳基、優選為吡啶基；(C1-C6)烷基；或被氰基取代的(C1-C6)烷基；所有它們的立體異構形式及其任意比例混合物、和它們生理學上可接受的鹽。
尤其優選的化合物是這樣的式I化合物，其中R(1)是環己基，吡啶基、優選為3-吡啶基，萘基、優選為2-萘基，或苯基，它是未取代的或者被殘基R(8)取代；R(2)是氫；R(3)是苄基，它在芳基部分被殘基R(11)取代；R(4)是氫；R(5)是環己基、丁基或苯基；R(6a)是氫；R(6b)是甲基，它被殘基R(15)取代，或丁基，它被兩個相同或不同的殘基R(15)取代；R(8)是甲基、OCH3、SO2CH3、氟、氯、溴或CF3；R(10)是氫；
R(11)是R(12)；R(12)是-NR(10)-C(＝NR(13))-NHR(10)或-C(＝NR(13))-NHR(10)；R(13)是氫；R(15)是苯基，它被殘基R(11)取代；哌啶，它被殘基R(23)取代；COOR(17)、CONR(17)R(18)、CON(R(18))2；(C3-C7)環烷基、優選為環己基，它被殘基R(23)或R(12)取代；R(17)是氫或(C1-C4)烷基；R(18)是氫、苯乙基、吡啶甲基、在烷基部分被苯基取代的苄基、或在芳基部分被OCH3取代的苄基；R(23)是R(11)或-C(＝NH)-R(39)；R(39)是甲基或乙基；所有它們的立體異構形式及其任意比例混合物、和它們生理學上可接受的鹽。
還優選這樣的式I化合物，其中R(3)是苄基，它在芳基部分被脒基取代，其中R(1)、R(2)、R(4)、R(5)、R(6a)和R(6b)的含義如上所述，所有它們的立體異構形式及其任意比例混合物、和它們生理學上可接受的鹽。
進一步優選這樣的式I化合物，其中R(6a)是氫，R(6b)是苯甲基，它在苯基部分被脒基取代；或者R(6b)是下式基團 其中R是氨基、羥基或(C1-C4)烷氧基；或者R(6b)是下式基團 其中IIIb中的氮原子是未取代的或者被脒基、C(＝NH)-CH3或C(＝NH)-C2H5取代，其中R(1)、R(2)、R(3)、R(4)和R(5)的含義如上所述，所有它們的立體異構形式及其任意比例混合物、和它們生理學上可接受的鹽。
還優選這樣的式I化合物，其中R(1)是環己基，吡啶基、優選為3-吡啶基，萘基，優選為2-萘基；或苯基，它是未取代的或者被殘基R(8)取代，取代基是甲基、三氟甲基、甲氧基、甲磺醯基、氟、氯或溴；其中R(2)、R(3)、R(4)、R(5)、R(6a)和R(6b)的含義如上所述，所有它們的立體異構形式及其任意比例混合物、和它們生理學上可接受的鹽。另外特別優選這樣的化合物，其中R(2)和R(4)是氫，R(3)是苄基，它在芳基部分被脒基取代，R(5)是環己基、丁基或苯基；其中R(6a)和R(6b)的含義如上所述。
還優選這樣的式I化合物，其中R(6a)是氫，R(6b)如上所述，所有它們的立體異構形式及其任意比例混合物、和它們生理學上可接受的鹽。
尤其還優選這樣的式I化合物，其中式I中的兩個或多個殘基具有上述優選含義，包含優選含義的所有可能的組合。
可以提到的特別優選的化合物是2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基(carbamimidoyl)-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸苯乙基-醯胺，弱極性非對映異構混合物2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-己酸(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基)-醯胺2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-萘-2-基-丙醯氨基]-己酸(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基)-醯胺2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-甲基-2-苯基-丙醯氨基]-己酸(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基)-醯胺2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-己酸(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基)-醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-4-苯基-丁醯氨基}-5-胍基-戊醯胺3-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-N-(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基)-琥珀醯胺酸2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-3-羥基-丙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-苯基-丙醯氨基]-2-苯基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-2-苯基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-萘-2-基-丙醯氨基]-2-苯基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-甲基-2-苯基-丙醯氨基]-2-苯基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-2-苯基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{3-苄氧基-2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-甲基-2-苯基-丙醯氨基]-丙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{3-苄氧基-2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-丙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺-5-(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基氨基甲醯基)-戊基]-氨基甲酸苄基酯2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-萘-2-基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-3，3-二甲基-丁醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-萘-2-基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-甲基-2-苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-3-環己基-丙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-3-苯基-丙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-環己基-丙醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[2-(4-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-間甲苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，強極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-間甲苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-(3-氯苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-氯苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-(3-氟苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯2-(S)-{2-(S)-[2-(R，S)-(3-溴苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨基甲醯基-苯基)-2-苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-氟苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-氟苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，強極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[2-(3-溴苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[2-(3-溴苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，強極性非對映異構體
2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨基甲基-苯基)-N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-2-(R，S)-環己基-丙醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-鄰甲苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-(1，2，3，4-四氫萘-1-基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-(1，2，3，4-四氫萘-2-基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-氟苯基)-丙醯胺，弱極性非對映異構體2-(3-溴苯基)-N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯胺，強極性非對映異構體2-(3-溴苯基)-N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯胺，弱極性非對映異構體N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-鄰甲苯基-丙醯胺2-(4-溴苯基)-N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯胺，弱極性非對映異構體
N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-(3-氯-苯基)-丙醯胺3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-間甲苯基-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(3-氟-苯基)-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(S)-鄰甲苯基-丙醯胺，強極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(R)-鄰甲苯基-丙醯胺，弱極性非對映異構體2-(3-溴苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-間甲苯基-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-萘-2-基-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-對甲苯基-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(3-氯-苯基)-丙醯胺鹽酸鹽，弱極性非對映異構體
2-(4-溴苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-丙醯胺鹽酸鹽，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-2-(S)-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸異丙酯鹽酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸苄基-甲基-醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(R，S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-(S)-環已基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸苯乙基-醯胺三氟乙酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-(S)-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸丁酯三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-(S)-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸丙酯三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸(噻吩-2-基甲基)-醯胺三氟乙酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸(吡啶-4-基甲基)-醯胺三氟乙酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸二苯甲基-醯胺三氟乙酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸苄基醯胺三氟乙酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸4-氯-苄基醯胺三氟乙酸鹽
2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸4-甲氧基-苄基醯胺三氟乙酸鹽3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(2-氟-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(4-氯-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體2-(3-溴-苯基)-N-{(S)-[(4-氨甲醯亞氨醯基-環己基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-苯基-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體2-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(2-氯-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(4-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體和/或生理學上可接受的鹽。
式I化合物可以利用本領域普通技術人員所熟知和領會的操作和工藝加以製備。可以用於式I化合物製備的一般合成操作中所用原料或結構單元對本領域普通技術人員來說是易於獲得的。在很多情況下，它們是商業上可得到的，或者已經描述在文獻中。不然的話，按照類似於本申請所述操作，它們可以從易於獲得的前體化合物製備。
式I化合物例如可以通過如方案2所述方法A加以製備，其中殘基R(1)、R(2)、R(3)、R(4)、R(5)、R(6a)和R(6b)是如上所定義的。
方案2
按照標準條件，利用鹼和烷基化劑V或V與VI，各種烷基化的乙酸IV可以在羧基官能被可易於裂解的保護基團保護之後烷基化一次(在R(2)是氫的情況下)或兩次(在R(2)是烷基的情況下)，其中R(3a)是(C6-C10)芳基-(C1-C3)烷基，它在芳基或烷基部分被殘基R(29)取代；雜芳基-(C1-C4)烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基；在雜芳基、環烷基或烷基部分被一個、兩個或三個殘基R(29)取代的雜芳基-(C1-C4)烷基或(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基，或者是雜烷基-(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代，其中R(23)是如上所定義的；R(29)是R(30)或(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被R(30)取代；R(30)是N(R(31))2、CON(R9))2、NO2、氯或CN，其中殘基(30)如果在分子中存在一個以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(31)是(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、(C1-C6)烷基羰基或(C1-C6)烷氧基羰基，其中殘基(31)如果在分子中存在一個以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；其中LG是離去基團，例如滷素或取代的羥基，例如甲苯磺醯氧基或甲磺醯氧基；從而生成式VII化合物。
三取代的乙酸VII可以按照標準方法去保護，得到式VIII化合物。
第一種烷基化作用的另一種可能性是在合適的溶劑如乙酸酐中縮合IV與相應的醛Vb 其中R(3b)是(C6-C10)芳基或(C6-C10)芳基-(C1-C3)烷基，其中芳基部分被R(30)取代；雜芳基-(C1-C3)烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C3)烷基；在雜芳基、環烷基或烷基部分被一個、兩個或三個殘基R(29)取代的雜芳基-(C1-C3)烷基或(C3-C7)環烷基-(C1-C3)烷基；或雜烷基-(C1-C3)烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代(《四面體快報》1990，31，5307-10)，然後按照標準方法氫化雙鍵。
式V、Vb或VI化合物是商業上可得到的，或者可以按照本領域技術人員已知的標準操作製備。
VIII與IX的偶聯中，PG是易於裂解的羧基官能保護基團(例如(C1-C4)烷基、苄基或4-甲氧基苄基)，反應得到X，這可以採用肽合成中常用的偶聯試劑進行。這樣的偶聯試劑是例如碳二亞胺類、例如二環己基碳二亞胺(DCCI)或二異丙基碳二亞胺(DICI)，羰基二唑類、例如羰基二咪唑與類似的試劑，丙基膦酸酐，O-((氰基-(乙氧羰基)-亞甲基)氨基)-N，N，N』，N』-四甲基脲鎓(uronium)四氟硼酸鹽(TOTU)，N-[(二甲氨基)-1H-1，2，3-三唑並[4，5-b]吡啶-1-基亞甲基]-N-甲基甲銨六氟磷酸鹽N-氧化物(HATU)以及其它。式IX化合物是商業上可得到的或者可以按照本領域技術人員已知的標準操作製備。
如果必要的話，R(3a)向R(3)的轉化(X→XI或XXV→I)可以如下所述進行，引入胍基或脒基，或通過氫化作用還原硝基、例如在氫的存在下採用阮內鎳、鈀/炭或其它催化劑，通過含有氯異喹啉部分的化合物與乙酸銨在苯酚中的反應或者文獻已知的其它方法用氨基取代氯原子，通過羥基脒部分與氯甲酸烷基酯反應並且用鹼、例如碳酸鈉水溶液進行脫氫作用得到4H-[1，2，4]噁二唑-5-酮殘基，通過羥基脒部分與丙酮在酸性條件下的反應得到5，5-二甲基-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑部分，或者通過脒部分與氯甲酸烷基酯的反應得到被烷氧基羰基保護的脒基。
利用下列試劑轉化氨基官能，能夠引入胍基官能，其中氨基官能可以通過硝基官能或氰基官能的還原而得到1、O-甲基異脲(S.Weiss和H.Krommer，《Chemiker-Zeitung》98(1974)，617-618)2、S-甲基異硫脲(R.F.Borne，M.L.Forrester和I.W.Waters，《醫藥化學雜誌》20(1977)，771-776)3、硝基-S-甲基異硫脲(L.S.Hafner和R.E.Evans，《有機化學雜誌》24(1959)1157)4、甲脒基磺酸(K.Kim，Y.-T.Lin和H.S.Mosher，《四面體快報》29(1988)，3183-3186)5、3，5-二甲基-1-吡唑基甲脒鎓硝酸鹽(F.L.Scott，D.G.O』Donovan和J.Reilly，《美國化學會會志》75(1953)，4053-4054)6、N，N』-二叔丁氧基羰基-S-甲基異硫脲(R.J.Bergeron和J.S.McManis《有機化學雜誌》52(1987)，1700-1703)7、N-烷氧基羰基-、N，N』-二烷氧基羰基-、N-烷基羰基-和N，N』-二烷基羰基-S-甲基異硫脲(H.Wollweber，H.Klling，E.Niemers，A.Widdig，P.Andrews，H.-P.Schulz和H.Thomas，《Arzneim.Forsch./藥物研究》34(1984)，531-542)。
脒可以這樣製備，在酸性無水介質中，例如二噁烷、甲醇或乙醇，向相應的氰基化合物加入醇，例如甲醇或乙醇，隨後經過氨解作用，例如在醇如異丙醇、甲醇或乙醇中用氨處理(G.Wagner，P.Richter和Ch.Garbe《Pharmazie》29(1974)，12-55)。製備脒的進一步方法是向氰基加入硫化氫，所得硫醯胺然後烷基化，例如甲基化，隨後與氨反應(GDR專利No.235866)，和向氰基加入羥胺，後者可以從羥基銨鹽與鹼的反應得到，所得偕胺肟然後轉化為脒，例如通過催化氫化作用。
可以按照標準方法進行式XI酯化合物的皂化，得到式XII化合物。利用上述偶聯試劑可以進行XII與XIII的偶聯，得到式I化合物。式XIII化合物是商業上可得到的或者可以按照本領域技術人員已知的標準操作加以製備。
另一種獲得式I化合物的方法是式X化合物的酯基按照標準方法皂化，得到式XXIV化合物。利用上述操作可以進行XXIV與XX的偶聯，得到式XXV化合物，再轉化殘基R(3a)為R(3)。
式I化合物還可以按照如方案3和4所述方法B而獲得。
方案3 將羧基官能用易於裂解的保護基團(例如(C1-C4)烷基、苄基或4-甲氧基苄基)按照標準方法保護起來後，可以轉化式VII化合物中的殘基R(3a)為殘基R(3)，再如上述去保護，得到式XIV化合物。
方案4 被保護的胺基酸XV(其中PG是合適的氨基保護基團，例如Fmoc、苄氧基羰基(Z)或Boc，優選為Fmoc)可以按照上述標準方法與式XIII化合物偶聯，得到式XVI化合物。式XVI化合物可以按照標準方法去保護，例如標準的Fmoc-去保護方法(L.A.Carpino等《有機化學雜誌》1988，53，6139-44)，得到式XVII化合物。式XVII化合物可以按照標準方法與式XIV化合物偶聯，得到式I化合物。
式XV化合物是商業上可得到的或者可以按照本領域技術人員已知的標準方法加以製備。
式I化合物還可以按照如方案5所述的固相肽合成法(方法C)而獲得。這樣的方法例如Steward和Young(《固相肽合成法》，Freeman and Co.，San Francisco，1969)，引用在此作為參考文獻。
流程5 ＝與酸可裂解的樹脂鍵合如果採用固相合成方法，那麼可以在新生肽連接在樹脂上的同時或者在肽已經從樹脂上裂解例如得到N-末端衍生物之後對化合物的化學組成加以控制。也可以對化合物的羧基進行類似的改性，包括C-末端羧基，該羧基例如可以被醯胺化。本領域技術人員還可以利用溶液相有機化學合成本發明化合物。
利用該方法(C)(方案5)，式XVIII化合物可以用標準工藝與Fmoc-保護的胺基酸XIX偶聯，式XVIII中，胺基酸偶聯到合適的載體上，載體例如Wang、Trityl或Rink樹脂或其它酸可裂解的樹脂，它們是本領域技術人員已知的，且其中R(32)是氫或(C1-C8)烷基；它可以被R(33)取代一或兩次；(C6-C14)芳基、或雜芳基，二者是未取代的或者被相同或不同的殘基R(34)取代1、2、3、4或5次；R(33)是(C6-C10)芳基、雜芳基、O-雜芳基、S-雜芳基、(C3-C7)環烷基、雜烷基、COOR(17)、CON(R(18))2、氧代、OR(17)、R(35)、或天然胺基酸α-C-原子的殘基，其中殘基R(33)如果在分子內出現一次以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(35)是N(R(36))2、NR(38)-C(＝NR(37))-NHR(38)或C(＝NR(37))-NHR(38)；R(36)是R(38)或(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，其中殘基R(36)如果在分子內出現一次以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(37)是R(38)、氰基、羥基、(C1-C6)烷氧基、也可以在芳基部分被取代的(C6-C14)芳基-(C1-C6)烷氧基、或氨基，其中殘基R(37)如果在分子內出現一次以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(38)是氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基羰基或(C1-C6)烷氧基羰基；R(34)是(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基、雜芳基、雜烷基、COOR(17)、CON(R(18))2、OH或R(35)。
式XVIII和XIX化合物是商業上可得到的或者可以按照本領域技術人員已知的標準操作加以製備。所得二肽XX可以用鹼去保護，例如20-50％哌啶的二甲基甲醯胺溶液，得到具有伯或仲氨基的式XXI化合物，它可以偶聯到用方法A或B製備的結構單元VIII或XIV上。可以如上所述進行所得化合物XXII的殘基R(3a)向殘基R(3)的轉化。在酸性條件下，例如不同濃度的三氟乙酸/水，這取決於所用的樹脂，從1％至95％三氟乙酸不等，通過裂解式XXIII化合物可以得到式I化合物。
這些所合成的化合物可以利用熟知的方法純化，例如反相高效液相色譜法(RP-HPLC)或其它分離方法，例如基於化合物的尺寸、電荷或疏水性的方法。類似地，熟知的方法可以用於表徵本發明化合物的結構(見實施例9)，例如胺基酸序列分析或質譜法(MS或HPLC/ESMS)。
因此，本發明也涵蓋製備式I化合物的方法，該方法包括i)a1)保護式IV化合物的羧基官能 使這樣一種被保護的式IVa化合物 與式V化合物反應R(3a)-LG(V)其中R(3a)是(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，它在芳基或烷基部分被殘基R(29)取代；雜芳基-(C1-C4)烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基；在雜芳基、環烷基或烷基部分被一個、兩個或三個殘基R(29)取代的雜芳基-(C1-C4)烷基或(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基，或者是雜烷基-(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代，其中R(23)是如上所定義的；R(29)是R(30)或(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被R(30)取代；R(30)是N(R(31))2、CON(R9))2、NO2、氯或CN，其中殘基(30)如果在分子中存在一個以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(31)是(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、(C1-C6)烷基羰基或(C1-C6)烷氧基羰基，其中殘基(31)如果在分子中存在一個以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；其中LG是離去基團，例如滷素或取代的羥基，例如甲苯磺醯氧基或甲磺醯氧基；或者在鹼的存在下，另外與式VI化合物反應R(2)-LG(VI)其中R(2)是(C1-C4)烷基，LG是如上所定義的，得到式VII化合物 去保護式VII化合物，得到式VIII化合物 或者在適當的溶劑例如乙酸酐中，偶聯式IV或IVa化合物與式Vb化合物 其中R(3b)是如上所定義的，然後按照標準方法氫化雙鍵，得到是VIII化合物，其中R(2)是氫，R(3a)是如上所定義的-CH2-R(3b)；a2)在合適的偶聯試劑存在下，偶聯式VIII化合物與式IX化合物
其中PG是易於裂解的保護基團，得到式X化合物 a3)可選地轉化式X化合物為式XI化合物，或者轉化式XXV化合物為式I化合物 其中R(3)是如上所定義的；例如通過引入脒基或胍基，通過還原硝基，通過用氨基取代氯原子，通過含有氯異喹啉部分的化合物與乙酸銨在苯酚中的反應，通過羥基脒部分與氯甲酸烷基酯的反應並且用鹼、例如碳酸鈉水溶液進行脫氫作用得到4H-[1，2，4]噁二唑-5-酮殘基，通過羥基脒部分與丙酮在酸性條件下的反應得到5，5-二甲基-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑部分，或者通過脒部分與氯甲酸烷基酯的反應得到被烷氧基羰基保護的脒基；a4)皂化式XI或X化合物，按照偶聯步驟a2)偶聯所得化合物與式XIII化合物HNR(6a)R(6b)XIII其中R(6a)和R(6b)是如上所述的，得到式I或XXV化合物，或者b)從式VII化合物開始b1)可選地按照a3)所述操作，轉化式VII化合物為式VIIa化合物
去保護式VIIa化合物，得到式XIV化合物 b2)按照偶聯步驟a2)偶聯式XIV化合物與式XVII化合物 得到式I化合物；或者ii)a)偶聯式XVIII化合物 它與合適的載體，例如酸可裂解的樹脂結合，其中R(32)是氫或(C1-C8)烷基；它可以被R(33)取代一或兩次；(C6-C14)芳基、或雜芳基，二者是未取代的或者被相同或不同的殘基R(34)取代1、2、3、4或5次；R(33)是(C6-C10)芳基、雜芳基、O-雜芳基、S-雜芳基、(C3-C7)環烷基、雜烷基、COOR(17)、CON(R(18))2、氧代、OR(17)、R(35)、或天然胺基酸α-C-原子的殘基，其中殘基R(33)如果在分子內出現一次以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(35)是N(R(36))2、NR(38)-C(＝NR(37))-NHR(38)或C(＝NR(37))-NHR(38)；R(36)是R(38)或(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，其中殘基R(36)如果在分子內出現一次以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(37)是R(38)、氰基、羥基、(C1-C6)烷氧基、也可以在芳基部分被取代的(C6-C14)芳基-(C1-C6)烷氧基、或氨基，其中殘基R(37)如果在分子內出現一次以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(38)是氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基羰基或(C1-C6)烷氧基羰基；R(34)是(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基、雜芳基、雜烷基、COOR(17)、CON(R(18))2、OH或R(35)；與式XIX化合物 其中R(4)和R(5)是如上所定義的，得到式XX化合物 b)用鹼去保護式XX化合物後，偶聯去保護的化合物XX與式VIII化合物，得到式XXII化合物 或者偶聯去保護的化合物XX與式XIV化合物，得到式XXIII化合物 c)可選地轉化式XXII化合物為式XXIII化合物(也就是說，通過引入脒基或胍基，或者通過硝基的還原，轉化殘基R(3a)為殘基R(3))；和d)裂解樹脂上的式XXII(或XXIII)化合物，得到式I化合物。
正如下述藥理試驗所證明的，式I化合物抑制Xa因子的活性。它們因此能夠有利地用作藥物，尤其在需要減少系統內Xa因子活性或產生能夠通過抑制Xa因子活性所達到的效果的時候，例如影響凝血或抑制血液凝固。因此，本發明也涉及用作藥物以及用於藥物製備的式I化合物，尤其是用於下文和上文提到的疾患和疾病治療或預防的藥物。進而，本發明提供通過使Xa因子與式I化合物接觸而特異性抑制Xa因子活性的方法。更具體地說，有效量的本發明化合物抑制Xa因子的催化活性，抑制方式是直接地在凝血酶原酶複合體內或作為可溶性亞單位，或者間接地抑制Xa因子組合成為凝血酶原酶複合體。本發明優選的實施方式包含這樣的式I化合物，它能夠抑制Xa因子的活性，所具有的Ki≤100μM，優選地Ki≤1μM。
本文所用的術語「Xa因子活性」指Xa因子單獨或者在已知為凝血酶原酶複合體的亞單位組合中催化凝血酶原向凝血酶轉化的能力。有關Xa因子活性所用的術語「抑制」包括Xa因子活性的直接和間接抑制。Xa因子活性的直接抑制例如可以通過式I化合物與Xa因子或凝血酶原酶的結合而實現，以防止凝血酶原與凝血酶原酶複合體活性位點的結合。Xa因子活性的間接抑制例如可以通過本發明化合物與可溶性Xa因子結合而實現，以防止它組合成為凝血酶原酶複合體。本文所用的術語「特異性」用在有關Xa因子活性的抑制時，指式I化合物能夠抑制Xa因子的活性，而基本上不抑制其它指定蛋白酶的活性，包括凝血酶(使用相同濃度的抑制劑)。這樣的蛋白酶參與凝血和纖維蛋白溶解級聯。
Xa因子活性的抑制或通過這樣的抑制所產生的效果可以發生在體內，即在個體內。本文所用的術語「個體」指脊椎動物，包括哺乳動物，例如小鼠、大鼠、兔、狗、豬、猴、尤其是人，在這些動物內Xa因子參與凝血級聯。它也可以發生在個體體外，例如在體外循環中或者在個體血樣的處理中，一般是在體外。式I化合物的體外用途例如用作科學或分析研究中的生物化學工具，或者用於體外診斷。式I化合物可以有利地用作抗凝劑，能夠通過與血樣接觸而防止凝固。例如，有效量的式I化合物能夠通過與新鮮抽取的血樣接觸而防止血樣凝固。
本文所用的術語「有效量」在這一點上指在所需程度上抑制Xa因子活性的式I化合物的量。技術人員將認識到，本發明化合物的有效量可以利用本文所公開的方法或本領域已知的其它方法加以測定。
鑑於所公開的式I化合物的應用，技術人員還將認識到，諸如肝素等試劑可以用本發明化合物代替。式I化合物的這樣一種用途例如可以比其它抗凝劑節約成本。
在進一步的實施方式中，本發明提供抑制需要接受治療的患者Xa因子的方法，包括將有效Xa因子抑制量的式I化合物對所述患者給藥。本文所用的術語「患者」尤其指溫血動物，包括哺乳動物，特別是人。當患者患有通過抑制Xa因子活性能夠受到有益影響或者根據臨床醫師的預期通過抑制Xa因子活性而受到有益影響的疾病狀態時，為抑制Xa因子而需要接受治療。
鑑定為抑制Xa因子而需要接受治療的患者在本領域技術人員的能力和知識範圍內。本領域的臨床醫師利用臨床試驗，體格檢查和病歷/家族史，能容易地鑑定需要接受這樣的治療的患者。
由於式I化合物能夠抑制Xa因子的活性，因此這樣的化合物能夠用於減少或抑制個體內血液凝固。因此，本發明進一步提供減少或抑制個體、尤其是需要接受治療的患者體內血塊形成的方法，該方法將治療學上有效量的式I化合物給藥。
涉及個體內類似於抑制或減少血液凝固的效果的產生的治療學上的有效量或式I化合物的有效Xa因子抑制量是指，為了達到或維持所需效果或在所需程度上抑制個體內Xa因子活性而對個體給藥的式I化合物的量或劑量。這樣一種待給藥的有效量或劑量必須根據個體的具體情況加以調整。利用常規工藝，使用本文所公開的方法或本領域已知的其它方法，並觀察在相似情況下所得到的結果，這是可易於確定。在確定有效劑量時，要考慮大量因素，包括但不限於患者的種類；其體重、年齡和一般健康狀況；所牽涉的具體疾病；疾病的程度或深淺或嚴重性；各患者的反應；所給藥的特定化合物；給藥方式；所給藥的藥物製劑的生物利用度特徵；所選擇的給藥方案；和並行藥物治療的使用。利用醫學領域熟知的臨床方法可以確立適當的劑量。
一般來說，鑑於上述因素，顯然，式I化合物的有效Xa因子抑制量或治療學上的有效量將各不相同，並且可以在廣泛的範圍內變化。通常，有效量將從約0.01毫克/千克體重/天(mg/kg/天)至約20mg/kg/天不等。優選的每日劑量從約0.1mg/kg至約10mg/kg。這些數據涉及體重約75kg的人。特別是當以相對大量給藥時，可取的是將每日劑量分成若干次，例如2、3或4次小劑量給藥。
式I化合物可以對個體給藥，用於各種臨床疾患的治療，例如包括心血管疾病或例如與感染或手術有關的併發症的治療和預防。心血管疾病的實例包括再狹窄，例如血管成形術後再狹窄，再閉塞的預防，冠狀動脈搭橋手術後疾患，動脈、靜脈與微循環的疾病狀態，心肌梗塞，心絞痛，血栓栓塞疾病，血栓形成，栓塞，成人呼吸窘迫症候群，多器官衰竭，中風或播散性血管內凝血疾病。與手術有關的併發症實例例如包括深靜脈與近側靜脈血栓形成，它們可能發生在手術之後。因此，本發明化合物可用作藥劑，用於減少或抑制所不需要的個體凝血或血液凝固。
在上述方法中可以採用式I化合物、它們的生理學上可接受的鹽和其它合適的衍生物作為藥劑或藥物，單獨地或者彼此混合或者以藥物組合物的形式，該組合物包含有效量的至少一種式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽和/或另一種合適的衍生物作為活性成分，它與一種或多種藥學上可接受的載體物質和輔助物質混合或締合。
在對患者進行治療時，單獨的式I化合物或包含它們的藥物組合物可以以任意形式或方式給藥，使式I化合物在有效量下是生物可利用的，包括口服和腸胃外途徑。例如，它們可以口服、皮下、肌內、靜脈內、透皮、鼻內、直腸給藥等。口服給藥一般是優選的，但是根據具體情況，其它給藥方式也可能是可取的，例如在疾病的急性階段，藉助注射或輸注的靜脈內給藥。製劑領域技術人員能夠易於選擇適當的給藥形式和方式，這取決於所治療的疾病狀態、疾病的階段和其它相關的環境。
包含式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽和/或另一種合適的衍生物的藥物組合物或藥劑可以這樣製備，將式I化合物和/或它們的生理學上可接受的鹽和/或其它合適的衍生物與藥學上可接受的載體物質和輔助物質混合，其比例和本性通過所選擇的給藥途徑和標準藥學實踐加以確定。藥物組合物或藥劑是按照藥學領域熟知的方式製備的。藥物組合物一般將含有有效量的式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽和/或另一種合適的衍生物，以及適量載體，以便包含適合於對個體給藥的劑量。藥物組合物可以適合於口服或腸胃外用途，對患者給藥的劑型例如片劑、膠囊劑、栓劑、溶液、懸浮液、軟膏劑、酊劑、鼻用噴霧劑、氣霧劑混合物、植入物、藥棒、微囊劑等。因此，連同所要求保護的化合物，本發明提供有用的藥物組合物或藥劑，它們用於抑制個體的Xa因子活性和血液凝固。
本發明進一步涵蓋包含至少一種式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽和/或另一種合適的衍生物的藥物組合物或藥劑的製備方法，以及式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽和/或另一種合適的衍生物在藥劑製備中的用途，尤其是用於上述疾病治療或預防的藥劑。
藥學上可接受的載體和輔助物質指的是這樣的物質或組合物，按照有關管理機構的測定，它們對個體是無毒的或者具有可接受的毒性。載體物質或賦形劑可以是固體、半固體或液體原料，它能夠充當活性成分的載體或介質。本文所用的術語「藥學上可接受的載體」涵蓋任意標準藥物載體，例如液體載體，例如磷酸鹽緩衝鹽水、水，乳劑，例如油/水或水/油乳劑，或固體或半固體載體，例如乳糖、玉米澱粉、脂肪、蠟等。合適的藥物載體及其製劑是本領域熟知的，例如描述在Martin的《Remington藥物科學》第15版(MackPublishing Co.，Easton1975)中，引用在此作為參考文獻，其中還涉及其它方面的成分和藥物組合物的製備。
輔助物質的實例是填充劑、崩解劑、粘合劑、滑動劑、溼潤劑、穩定劑、乳化劑、防腐劑、甜味劑、染劑、矯味劑、芳香劑、增稠劑、稀釋劑、緩衝物質、增溶劑、達到緩釋效果的試劑、改變滲透壓的鹽、包衣劑、抗氧化劑等。
出於口服給藥的目的，式I化合物可以與賦形劑或惰性稀釋劑或食用載體結合，所用劑型例如片劑、膜衣片、包衣片、丸劑、錠劑、膠囊劑、顆粒劑、溶液、懸浮液、乳劑、酏劑、糖漿劑、糯米紙囊劑、口香糖劑等，或者它們可以包封在明膠膠囊內。用於口服給藥的藥物組合物可以因特定劑型而異。通常，它們含有至少1％的式I活性成分，可以適宜含有高達約90％的重量單位。優選地，式I化合物和/或它們的生理學上可接受的鹽和/或其它合適的衍生物的含量為約4至約70重量％。組合物中的活性成分含量應能得到適合於給藥的單位劑型。
片劑、丸劑、膠囊劑、錠劑等例如還可以含有一種或多種下列載體和輔助物質粘合劑，例如微晶纖維素、黃蓍膠或明膠；賦形劑，例如澱粉或乳糖；崩解劑，例如藻酸、Primogel、玉米澱粉等；潤滑劑，例如硬脂酸鎂或Sterotex；滑動劑，例如膠體二氧化矽；和甜味劑，例如蔗糖或糖精；或矯味劑，例如薄荷、水楊酸甲酯或橙味劑。當劑型是膠囊時，除了上述類型原料以外，還可以含有液體載體，例如聚乙二醇或脂肪油。其它劑型可以含有其它各種改變劑型物理形狀的原料，例如包衣。因此，片劑或丸劑可以用糖、蟲膠或其它腸衣劑包衣。糖漿劑除了活性成分以外例如還可以含有蔗糖作為甜味劑，和某些防腐劑、染料、著色劑和矯味劑。
出於腸胃外給藥的目的，式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽和/或其它合適的衍生物可以結合在溶液或懸浮液中。溶液或懸浮液例如還可以包括一種或多種下列載體和輔助物質無菌稀釋劑，例如注射用水、鹽水溶液、不揮髮油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑，例如苯甲醇或對羥基苯甲酸甲酯；抗氧化劑，例如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑，例如乙二胺四乙酸；緩衝劑，例如乙酸鹽、檸檬酸鹽或磷酸鹽；毒性調節劑，例如氯化鈉或葡萄糖。式I化合物在腸胃外給藥製劑中的含量可以是各不相同的。通常，它們含有至少0.1重量％的式I化合物。優選地，式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽和/或其它合適的衍生物的含量從約O.1％至50％。腸胃外製劑可以封裝在安瓿、一次性注射器、由玻璃或塑料製成的多劑小瓶或輸液瓶內。適合於微囊劑、植入物和藥棒的賦形劑例如乙醇酸和乳酸的混合聚合物。
用於製備各種藥物組合物的原料應當是藥學純的，並且在所用量下是無毒的。
除了一種或多種式I化合物和/或其一種或多種生理學上可接受的鹽和/或其一種或多種其它合適的衍生物作為活性化合物以外，根據本發明的藥物組合物還可以含有一種或多種其它藥理學上的活性化合物。
在另一種更一般化的實施方式中，本發明提供組合物，包含至少一種式I化合物和/或其鹽和/或其另一種合適的衍生物，與一種或多種惰性載體混合或締合。這些組合物例如可用作測定標準、進行散裝裝運的適宜手段或藥物組合物。式I化合物的可測定量是易被本領域技術人員熟知和領會的標準測定操作和工藝所測量的量。式I化合物的可測定量一般將從約O.001％至約90％不等，以組合物重量計。惰性載體可以是任何不會降解式I化合物或者與之共價反應的原料。合適的惰性載體實例是水；含水懸浮液，例如一般用在高效液相色譜(HPLC)分析中的那些；有機溶劑，例如乙腈、乙酸乙酯、己烷等；和藥學上可接受的載體和輔助物質。
式I化合物還可以在其它化合物的製備中用作原料或化學中間體，尤其是在其它藥理學上的活性化合物的製備中。下面給出本發明化合物向其它本發明化合物轉化的實例。關於這種用途，除了式I化合物和它們的生理學上可接受的鹽以外，不適合或不太適合用作藥物的式I化合物的其它鹽也可以是有用的。因此，本發明也涉及一般作為化學中間體的式I化合物和它們的鹽，尤其是在藥理學上的活性化合物的製備中作為中間體。
下列試驗能夠用於研究本發明化合物作為Xa因子抑制劑的藥理學活性，並闡述其應用。
試驗1所選擇的純化凝血酶和其它絲氨酸蛋白酶的體外抑制作用式I化合物抑制Xa因子、凝血酶、纖溶酶、彈性蛋白酶和胰蛋白酶的能力可以通過測定抑制50％酶活性的式I化合物濃度(IC50)加以評估。在顯色測定中使用純化酶。為了測定抑制常數，利用下式校正與底物競爭的IC50值Ki＝IC50×(1/{1＋((底物濃度)/底物Km)})其中Km是Michaeli s-Menten常數(Y.-C.Chen和W.H.Prusoff《生物化學與藥理學》223099-3018(1973)，引用在此作為參考文獻)。
a、Xa因子測定該測定採用TBS-PEG緩衝液(50mM Tris-Cl，pH7.8，200mMNaCl，0.05％(w/v)PEG-8000，0.02％(w/v)NaN3)。IC50是這樣測定的，在Costar半區微量滴定板的適當小孔內加入25μl人Xa因子(Enzyme Research Laboratories，Inc.；South Bend，IN)的TBS-PEG溶液；40μl 10％(v/v)DMSO的TBS-PEG溶液(不受抑制的對照)或用10％(v/v)DMSO稀釋的不同濃度供試化合物的TBS-PEG溶液；和底物S-2765(N-苄氧基羰基-D-Arg-Gly-L-Arg-對硝基醯苯胺；Kabi Pharmacia，Inc.；Franklin OH)的TBS-PEG溶液。
測定是這樣進行的，預培養式I化合物加酶10分鐘，然後加入底物開始測定，最終體積為100μl。顯色底物水解的最初速率是這樣測量的，在時程的直線部分(通常為加入底物後1.5分鐘)，在25℃下利用Bio-tek Instruments動力平板讀數器(CeresUV900HDi)測量405nm下的吸光度變化。相對水解速率(相對於不受抑制的對照而言)對式I化合物濃度的對數作圖後，由線性回歸預測導致底物水解速率降低50％的抑制劑濃度。酶的濃度為0.5nM，底物濃度為140μM。
b、凝血酶測定該測定採用TBS-PEG緩衝液。IC50的測定方法同上Xa因子測定，但是底物是S-2366(L-PyroGlu-L-Pro-L-Arg-對硝基醯苯胺；Kabi)，酶是人凝血酶(Enzyme Research Laboratories，Inc.；South Bend IN)。酶的濃度為175μM。
c、纖溶酶測定該測定採用TBS-PEG緩衝液。IC50的測定方法同上Xa因子測定，但是底物是S-2251((D)-Val-L-Leu-L-Lys-對硝基醯苯胺；Kabi)，酶是人纖溶酶(Kabi)。酶的濃度為5nM，底物濃度為300μM。
d、胰蛋白酶測定該測定採用含有10mM CaCl2的TBS-PEG緩衝液。IC50的測定方法同上Xa因子測定，但是底物是BAPNA(苯甲醯基-L-Arg-對硝基醯苯胺；Sigma Chemical Co.；St.Louis MO)，酶是牛胰蛋白酶(XIII型，用TPCK處理過，Sigma)。酶的濃度為50nM，底物濃度為300μM。
e、彈性蛋白酶測定該測定採用Tris-Cl，pH7.4，300mM NaCl，2％(v/v)N-甲基-吡咯烷酮，0.01％(w/v)NaN3緩衝液。IC50的測定方法同上Xa因子測定，但是底物是琥珀醯-Ala-Ala-Ala-對硝基醯苯胺(Calbiochem-Nova Biochem Corp.；San Diego CA)，酶是人嗜中性白細胞彈性蛋白酶(Athens Research and Technology，Inc.；Athens GA)。酶的濃度為75nM，底物濃度為600μM。對照化合物是「TENSTOP」(N-α-甲苯磺醯-Gly-對脒基苯丙氨酸甲酯；AmericanDiagnostica Inc.；Greenwish CT)，它是可逆性Xa因子抑制劑(Stuerzebecher等《血栓形成研究》54245-252(1989)；Hauptmann等《血栓形成與止血(Thromb.Haem.)》63220-223(1990)，各引用在此作為參考文獻)。
試驗2測定對凝血的抑制作用式I化合物的有效性可以通過採用所收集的人供體血漿的體外凝血酶原時間(PT)測定加以評估。還可以使用來自體內的測定，其中在式I化合物對大鼠或兔靜脈內(iv)給藥或者對大鼠十二指腸內(id)給藥後不同時間收集血漿，利用PT測定進行分析，以測定血漿半衰期。PT測定是由凝血激酶的稀釋引發的，選擇一定的稀釋比例以獲得延長的和高度可再現的凝血終點，如下所述稱為「稀釋PT測定」。不同化合物的有效性還可以利用血栓形成的體內大鼠動靜脈旁路模型加以測定。
a、體外稀釋凝血酶原時間測定將100μl預溫熱(37℃)的所收集的人血小板貧乏血漿(PPP)加入到fibrometer杯(Baxter Diagnostics.，Inc.；McGaw Park IL)內。加入50μl不同濃度的式I化合物的含鈣TBS-BSA(50mM Tris-Cl，100mM NaCl，0.1％(w/v)牛血清白蛋白，20mM CaCl2)溶液。在對照實驗中，加入含鈣但不含式I供試化合物的TBS-BSA，用於測量不受抑制的凝血時間。將150μl稀釋過的預溫熱的含鈣兔凝血激酶(Baxter)加入到fibrometer杯內，開始fibrometer計時。在處理化合物之前得到兔凝血激酶稀釋曲線，用於選擇凝血激酶稀釋比，使不受抑制的對照的PT時間大約為30秒。從稀釋曲線時間計算用供試化合物產生50％凝血抑制的實驗濃度(EC50)。
或者，稀釋凝血酶原時間測定是在InstrumentationLaboratories(IL)ACL3000-plus自動凝血儀(IL，Milan，義大利)上利用「研究」模式進行。稀釋凝血激酶，直到凝固時間達到30-35秒為止。該凝固時間取作100％活性。通過稀釋過的凝血激酶試劑(兔腦IL-牌凝血激酶)的系列2-倍稀釋建立標準用校準曲線。在測定期間，將50μl樣本(通過離心分離的血漿)與100μl凝血激酶試劑混合，經過169秒讀取濁度。利用儀器計算光散射的最大改變率，由此測定凝血時間。抑制作用表示為與校準曲線對比測定的活性百分率。
b、來自體內的稀釋凝血酶原時間測定按照經過批准的方案，將式I供試化合物通過尾靜脈(大鼠)或耳靜脈(兔)進行iv給藥。在式I供試化合物給藥後按一定間隔從插套管的頸動脈(大鼠)或耳動脈(兔)取0.5ml血樣。離心得到PPP後，立即在冰冷或冷凍條件下保存血漿。
關於稀釋凝血酶原時間測定，將血漿預溫熱，如上所述進行測定。從適用每一系列樣本的凝血激酶稀釋曲線計算抑制百分率，用於測定血漿中剩餘最初抗凝活性的大約50％時的時間(T1/2)。
還可以採用十二指腸內給藥方案將式I供試化合物對大鼠給藥。按照經過批准的方案，將重約300g的雄性Sprague-Dawley大鼠皮下用氯胺酮/甲苯噻嗪的組合麻醉。向右頸動脈插套管，用於取血樣。進行剖腹術，向十二指腸插球頂針，系好，以確保縫合處遠離插入點。在鄰近插入點處另系一條帶子，以防止胃容物漏出。縫合對防止化合物到達插入部位的有效性通過在每次實驗結束時的壓力試驗加以測試。插入點距離十二指腸-胃接合處大約4cm。將化合物溶於1ml生理鹽水給藥。在式I供試化合物給藥之前和給藥後15、30、60、90和120分鐘時抽取0.7ml血樣。離心分離血漿，利用稀釋凝血酶原時間測定法測定對凝血的抑制作用。
表1.以重量計30％a.e.草甘膦一價鹽溶液的比重(20/18.6℃)
因此20℃下1升30％重量a.e.草甘膦鉀鹽溶液含有約376克草甘膦a.e./l，而20℃下1升30％重量a.e.草甘膦IPA鹽溶液含有約347克草甘膦a.e./l。換句話說，在相同的a.e.重量濃度情況下，每升鉀鹽溶液多提供約8％草甘膦a.e.。
類似的，20℃下1升30％重量a.e.草甘膦MEA鹽溶液含有約371克草甘膦a.e./l。因此在相同的a.e.重量濃度情況下，每升MEA鹽溶液比IPA鹽溶液多提供約7％的草甘膦a.e.。
不管使用鉀鹽還是MEA鹽，水溶液中最小使用濃度約為30％重量a.e.並優選約40％重量a.e.。
20℃下根據溶解度範圍確定的最大濃度，當使用鉀鹽時約為44％重量a.e.；當使用MEA鹽時約為47％重量a.e.。
當溶液不額外含有表面活性劑和/或溶液沒有被指定用於製備濃縮的含表面活性劑的製劑時，草甘膦鉀鹽溶液的儲藏和運輸系統特別實用。因為發現很少的農學上適用量的表面活性劑類型可與草甘膦鉀鹽的高濃縮液相容。
然而，用MEA鹽的草甘膦除草劑的儲藏和運輸系統對沒有表面活性劑和含表面活性劑溶液都非常適用。含表面活性劑溶液中，草甘膦的最
實施例下列實施例介紹式I化合物的典型合成法。這些實施例不言而喻的是僅供舉例說明，無論如何也無意於限制本發明的範圍。實施例化合物通過質譜(MS)和/或NMR光譜和/或熔點加以表徵。
實施例12-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸苯乙基-醯胺乙酸鹽，弱極性非對映異構混合物，和2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸苯乙基-醯胺乙酸鹽，強極性非對映異構混合物a)環己基-乙醯氯將環己基-乙酸(288ml，2.04mol)和亞硫醯氯(306ml，4.19mol)在1000ml燒瓶內攪拌，燒瓶裝有回流冷凝器、CaCl2乾燥管、溫度計、加熱套和磁力攪拌器。反應溶液在攪拌下加熱至50℃(有氣體放出)。在50℃下14.5小時後，反應混合物進一步加熱至輕微回流90分鐘，然後冷卻至室溫。在減壓下除去過量亞硫醯氯。殘餘液體經過真空蒸餾，得到環己基-乙醯氯(250.92g，77％)，為淡黃色液體。bp60℃/5mmHg；MS m/z161(M＋H)+b)環己基-乙酸叔丁酯向5℃的二甲基苯胺(320ml，2.54mol)的叔丁醇(480ml)溶液中歷時30分鐘滴加環己基-乙醯氯(250.9g，1.56mol)的二氯甲烷(320ml)溶液。加入結束時，加料漏鬥用二氯甲烷(80ml)清洗。反應混合物在5℃下攪拌90分鐘，然後溫熱至室溫。在室溫下15小時後，反應溶液加熱至回流6小時，然後冷卻至5℃。冷的反應混合物用6N氯化氫(640ml)酸化，用乙酸乙酯萃取。有機層用1N氯化氫(860ml)、水(2×860ml)、飽和碳酸氫鈉水溶液(2×860ml)和鹽水(860ml)洗滌。有機溶液乾燥(硫酸鎂)，過濾，濃縮(室溫/20mmHg)。剩餘液體蒸餾，得到所需產物，為黃色的油(259.32g，84％)。bp70-75℃/0.6mmHg；MS m/z199(M＋H)+
c)3-(4-氰基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙酸叔丁酯在氮氣、攪拌下，將正丁基鋰(1.6M己烷溶液；40.6ml，64.9mmol)和二異丙胺(9.1ml，64.9mmol)按順序加入到-78℃的四氫呋喃(90ml)中。二異丙基氨化鋰溶液在-78℃下攪拌15分鐘，然後溫熱至0℃。二異丙基氨化鋰溶液冷卻至-78℃，在攪拌下，將環己基-乙酸叔丁酯(12.8g，64.5mmol)歷時10分鐘滴加到-70℃的二異丙基氨化鋰溶液中。經過15分鐘生成烯醇鹽。所生成的酯烯醇鹽用4-氰基苄基溴(12.5g，64mmol)的四氫呋喃(60ml)溶液和1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(15.9ml，132mmol)處理。反應混合物在-70℃下攪拌2小時，然後歷時20.5小時溫熱至室溫。蒸發溶劑(30℃/20mmHg)得到油，使其在乙酸乙酯與水的混合物之間分配。含水層用乙酸乙酯萃取，合併後的有機相用飽和含水氯化銨、水、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水(200ml)洗滌，乾燥(硫酸鎂)，過濾，在旋轉蒸發器上濃縮(30℃/20mmHg)。殘餘物的真空蒸餾得到所需產物(13.69g，68％)，為黃色的油。bp160℃/0.60mmHg；MS m/z314(M＋H)+d)3-(4-氰基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙酸在室溫、攪拌下，向3-(4-氰基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙酸叔丁酯(8.2g，26.2mmol)的二氯甲烷(70ml)溶液中加入三氟乙酸(14.1ml，183.0mmol)。注意到繼發有輕微的氣體放出。69小時後，在減壓下蒸發溶劑和過量三氟乙酸。將固體溶於乙酸乙酯，用水和鹽水洗滌，然後乾燥(硫酸鎂)，過濾，蒸發至幹。將粗產物溶於甲醇，用脫色碳處理，通過硅藻土過濾，濃縮。所得固體從甲苯中重結晶，得到所需產物，為灰白色粉末(6.83g，58％)。mp115-117℃；MS m/z258(M＋H)+e)[3-(4-氰基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-(S)-環己基-乙酸甲酯將3-(4-氰基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙酸(8.8g，34.2mmol，如實施例1d所述製備)、(S)-氨基-環己基-乙酸甲酯(6.27g，36.6mmol)、二異丙基乙胺(6.8ml，40.0mmol)、3-羥基-3H-苯並[d][1，2，3]三嗪-4-酮(1.40g，8.6mmol)和二甲基甲醯胺(200ml)的溶液冷卻至10℃。歷時3小時滴加二環己基-碳二亞胺(8.26g，40.0mmol)的甲苯(8ml)溶液，反應混合物攪拌36小時。吸出所沉澱的脲，濾液在真空中蒸發。從正庚烷/異丙醇中結晶，得到10.68g所需產物，含有1，3-二環己基-脲。粗物質在使用時無需進一步純化。MS m/z411(M＋H)+f)(S)-環己基-{2-(R，S)-環己基-3-[4-(N-羥基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-丙醯氨基}-乙酸甲酯將[3-(4-氰基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-(S)-環己基-乙酸甲酯(10.68g)與羥胺(4.3g，0.13mol)的乙醇(150ml)懸浮液加熱至回流4小時。反應混合物冷卻至室溫，在真空中蒸發，溶於乙醇，倒入冰水中。吸濾收集沉澱，在50℃真空中乾燥，得到4.74g粗產物，在用於下面的步驟時無需進一步純化。MS m/z444(M＋H)+g)[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-(S)-環己基-乙酸甲酯乙酸鹽將(S)-環己基-{2-(R，S)-環己基-3-[4-(N-羥基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-丙醯氨基}-乙酸甲酯(5.52g，含有1.5g 1，3-二環己基-脲，9.06mmol)溶於乙酸(50ml)。加入鈀/炭(10％，100mg)後，向反應混合物中通入氫，在室溫下達2小時，在50℃下達15小時。濾出催化劑，用水洗滌。向濾液中加入水，導致沉澱產生，濾出，乾燥，得到1.5g 1，3-二環己基-脲。濾液蒸發，得到所需產物，在用於下面的步驟時無需進一步純化。MS m/z428.3(M＋H)+h)[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-(S)-環己基-乙酸鹽酸鹽在1小時內，將[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-(S)-環己基-乙酸甲酯乙酸鹽溶於鹽酸(100ml)、水(100ml)與乙酸(50ml)的混合物。在室溫下攪拌15小時、在50℃下攪拌8小時後，混合物蒸發，加入水後冷凍乾燥，得到所需產物的非對映異構混合物(2.7g，步驟g和h收率72％)。MS m/z414.3(M＋H)+使用正丁醇(17)∶冰乙酸(1)∶水(2)作為洗脫劑，經過SephadexLH20純化，可以得到純的(強與弱極性)非對映異構體。
i)2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸苯乙基-醯胺乙酸鹽在4℃下，將TOTU(48mg，0.14mmol)加入到[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-(S)-環己基-乙酸鹽酸鹽(60mg，0.14mmol)、(S)-2-氨基-5-胍基-戊酸苯乙基-醯胺二鹽酸鹽(5lmg，0.14mmol)與N-乙基嗎啉(56μl，0.42mmol)的二甲基甲醯胺(10ml)溶液中。混合物在22℃下攪拌15小時。蒸發溶劑，殘餘物經過柱色譜純化(Sephadex LH20，正丁醇/乙酸/水17∶1∶2)，得到兩種立體異構產物的混合物。
強極性非對映異構混合物41mg MS m/z673.6(M＋H)+弱極性非對映異構混合物21mg MS m/z673.6(M＋H)+總收率57％實施例22-(S)-(2-{[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯基]-環己基甲基-氨基}-乙醯氨基)-5-胍基-戊醯胺乙酸鹽鹽酸鹽a){[3-(4-氰基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯基]-環己基甲基-氨基}-乙酸叔丁酯在-15℃下，向3-(4-氰基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙酸(5g，19.43mmol)與(環己基甲基-氨基)-乙酸叔丁酯(4.42g，19.43mmol)的二甲基甲醯胺(50ml)溶液中加入TOTU(7.01g，21.37mmol)和二異丙基乙胺(2.51g，19.43mmol)。混合物攪拌1小時，然後溫熱至室溫。蒸發後，殘餘物用碳酸氫鈉溶液處理，用乙酸乙酯萃取。有機層蒸發，得到10g粗產物，在用於下面的步驟時無需進一步純化。MS m/z467.4(M＋H)+
b)({2-(R，S)-環己基-3-[4-(N-羥基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-丙醯基}-環己基甲基-氨基)-乙酸在室溫下，將{[3-(4-氰基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯基]-環己基甲基-氨基}-乙酸叔丁酯(2.0g，4.29mmol)、鹽酸羥胺(0.89g，12.87mmol)和三乙胺(1.3g，12.87mmol)在異丙醇(80ml)中攪拌24小時。蒸發後，殘餘物用硫酸氫鉀溶液處理，用二氯甲烷萃取。有機層乾燥，蒸發。收率1.52g(80％)，MS m/z444.3(M＋H)+c){[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯基]-環己基甲基-氨基}-乙酸將({2-(R，S)-環己基-3-[4-(N-羥基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-丙醯基}-環己基甲基-氨基)-乙酸(1.5g，3.38mmol)溶於乙酸(40ml)。加入鈀/炭(10％，100mg)後，在50℃下向反應混合物中通入氫達8小時。濾出催化劑，用乙酸洗滌。蒸發濾液，將殘餘物溶於水，冷凍乾燥，經過Sephadex LH20色譜純化，採用正丁醇(17)∶冰乙酸(1)∶水(2)作為洗脫劑。合併純的級分。蒸發溶劑，將殘餘物溶於水，水溶液冷凍乾燥。收率190mg(13％)，MS m/z428.4(M＋H)+d)2-(S)-(2-{[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯基]-環己基甲基-氨基}-乙醯氨基)-5-胍基-戊醯胺乙酸鹽鹽酸鹽在-15℃下，向{[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯基]-環己基甲基-氨基}-乙酸(50mg，0.12mmol)與2-(S)-氨基-5-胍基-戊醯胺二鹽酸鹽(30mg，0.12mmol)的二甲基甲醯胺(5ml)溶液中加入TOTU(44mg，0.13mmol)和N-乙基嗎啉(40μl，0.32mmol)。混合物攪拌1小時，然後溫熱至室溫。蒸發後，殘餘物用碳酸氫鈉溶液處理，用乙酸乙酯萃取。含水層蒸發，經過SephadexLH20色譜純化，採用正丁醇(17)∶冰乙酸(1)∶水(2)作為洗脫劑。合併純的級分。蒸發溶劑，將殘餘物溶於水，水溶液冷凍乾燥。收率12mg(15％)，MS m/z292.4(M＋2H)2+
實施例32-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺乙酸鹽，強極性非對映異構體在0℃下，向[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-(S)-環己基-乙酸(41mg，0.1mmol，弱極性非對映異構體，實施例1h)與2-(S)-氨基-5-胍基-戊醯胺二鹽酸鹽(24.6mg，0.1mmol)的二甲基甲醯胺(5ml)溶液中加入HATU(39mg，0.1mmol)和可力丁(24.2mg，0.2mmol)。混合物攪拌1小時，然後溫熱至室溫。蒸發後，殘餘物經過Sephadex LH20色譜純化，採用正丁醇(17)∶冰乙酸(1)∶水(2)作為洗脫劑。合併純的級分。蒸發溶劑，將殘餘物溶於水，水溶液冷凍乾燥。收率50mg(74％)，MS m/z569.5(M＋H)+，285.4(M＋2H)2+實施例42-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺乙酸鹽，弱極性非對映異構體如實施例3所述，從(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-環己基-乙酸(弱極性非對映異構體，實施例1h)、2-(S)-氨基-5-胍基-戊醯胺二鹽酸鹽、HATU和可力丁的二甲基甲醯胺溶液製備2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺乙酸鹽，弱極性非對映異構體，得到46％所需產物。MS m/z569.5(M＋H)+，285.4(M＋2H)2+實施例52-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯，弱極性非對映異構體如實施例3所述，從(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-環己基-乙酸(弱極性非對映異構體，實施例1h)、2-(S)-氨基-5-胍基-戊酸乙酯二鹽酸鹽、HATU和可力丁的二甲基甲醯胺溶液製備2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯，弱極性非對映異構體，得到60％所需產物。MS m/z598.5((M＋H)+，2％)，299.9((M＋2H)2+，100％)實施例62-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸鹽酸鹽，弱極性非對映異構體將2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯鹽酸鹽(6mg，8.07μmol，弱極性非對映異構體，實施例5)溶於4N鹽酸(1ml)，在室溫下攪拌4小時。加入水，反應混合物冷凍乾燥，得到5mg(定量收率)所需產物。MS m/z570.5((M＋H)+，1％)，285.9((M＋2H)2+，100％)實施例73-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-N-{(S)-環己基-[2-(2，5-二氧代-咪唑烷-1-基)-乙基氨基甲醯基]-甲基}-丙醯胺鹽酸鹽，弱極性非對映異構體如實施例3所述，從(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-環己基-乙酸(弱極性非對映異構體，實施例1h)、3-(2-氨基-乙基)-咪唑烷-2，4-二酮鹽酸鹽、HATU和丁力丁的二甲基甲醯胺溶液製備3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-N-{(S)-環己基-[2-(2，5-二氧代-咪唑烷-1-基)-乙基氨基甲醯基]-甲基}-丙醯胺鹽酸鹽，弱極性非對映異構體，得到4％所需產物。MSm/z539.5(M＋H)+實施例83-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-N-{(S)-環己基-[(哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-甲基}-丙醯胺乙酸鹽，弱極性非對映異構體在0℃下，向(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-環己基-乙酸(50mg，0.12mmol，弱極性非對映異構體，實施例1h)與4-氨基甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(26mg，0.12mmol)的二甲基甲醯胺(5ml)溶液中加入HATU(50mg，0.13mmol)和可力丁(16mg，0.13mmol)。混合物攪拌1小時，然後溫熱至室溫。混合物蒸發，用2ml三氟乙酸(含有10％水)處理2小時。蒸發後，殘餘物經過Sephadex LH20色譜純化，採用正丁醇(17)∶冰乙酸(1)∶水(2)作為洗脫劑。合併純的級分。蒸發溶劑，將殘餘物溶於水，水溶液冷凍乾燥。收率45mg(59％)，MS m/z510.5(M＋H)+，255.8(M＋2H)2+實施例9在固相上合成芳基鏈烷醯基基衍生物的通用方法通用的固相肽合成法用於製備很多本發明化合物。這樣的方法例如由Steward和Young所述(《固相肽合成》Freeman and Co.，SanFrancisco，1969，引用在此作為參考文獻)。
除非另有指示，化合物是在用1％二乙烯基苯交聯的聚苯乙烯樹脂上合成的。將酸敏感性連接劑(Rink連接劑)偶聯到固體載體上(Rink《四面體快報》283787(1987)；Sieber《四面體快報》282107(1987)，各自引用在此作為參考)。所有化合物都是在建在房間內的半自動肽合成儀上合成的。Boc與Fmoc保護的L-與D-胺基酸衍生物來自不同商業來源，象Advanced ChemTech(Louisville，KY 40228-9973，USA)、Bachem(King of Prussia，PA 19406，USA)和PerSeptive Biosystems(Framingham，MA 01701，USA)。
式I化合物的合成按照經典的Fmoc法進行(E.Atherton和R.C.Sheppard《固相肽合成實踐方法》IRL Press，Oxford，England，1989)，使用DICI和HOBt作為活化試劑。所有偶聯反應都是在室溫下、在二甲基甲醯胺或二甲基甲醯胺∶二氯甲烷(1∶1混合物)中進行40分鐘。偶聯的完成通過茚三酮試驗監測，如Kaiser所述(Kaiser等《生物化學年鑑》34595(1970))，引用在此作為參考文獻。當第一次偶聯不完全時，進行第二次(雙重)偶聯。
在樹脂上完成肽的裝配之後，最後進行Fmoc去保護，然後是正常的洗滌循環，在302nm下測定由去保護所釋放的Fmoc基團的量。然後，通過DICI/HOBt操作類似地偶聯乙酸衍生物。反應結束後的樹脂連續用二氯甲烷、二甲基甲醯胺和二氯甲烷洗滌，然後在真空下乾燥，用於下面的步驟。
偕胺肟的固相合成通用操作是，在三乙胺、吡啶與二甲基甲醯胺的1∶1∶1(體積)混合物的存在下，將含有腈的物質的(來自上面步驟的)樹脂與20-40當量鹽酸羥胺混合。懸浮液通常用超聲處理約30秒，在室溫下搖動12-24小時。腈到偕胺肟的轉化完成通過FT-IR(KBr盤)監測，尋找在2225cm-1下-CN吸收的消失，或者通過裂解少量樹脂樣本監測，採用三氟乙酸∶H2O(95∶5)或K試劑(見下)，並用HPLC/ESMS測定分子量。反應結束後的樹脂用二甲基甲醯胺、含10％H2O的二甲基甲醯胺、乙醇、二氯甲烷洗滌，在真空中乾燥，然後用於下面的步驟。
脒的固相合成據報導有若干方法用於含脒化合物的合成(參見P.J.Dunn(1995)《綜合有機官能團轉化脒和N-取代的脒》Vol.5，741-782(edts.Alan R.Katritzky，Otto Meth-CohenCharles W.Rees)，Pergamon，N.Y.，1995)。這些方法都不適合固相有機合成。這裡，我們開發了適當的脒合成操作，即在可溶性催化劑DCRu的存在下，使用過量三乙基矽烷還原偕胺肟前體。發現在乙酸的存在下，加入三苯膦可促進還原，提高脒化合物收率。因此，本發明還涉及在固相上還原偕胺肟基為脒基的方法，即在溶劑中如二甲基甲醯胺中，在可溶性催化劑二氯四(三苯膦)釕(II)的存在下，可選地進一步在三苯膦和乙酸的存在下，使用過量三乙基矽烷。
在典型實驗中，在塞住的反應容器內將乾燥後的樹脂加入到還原混合物中，後者由DCRu、三苯膦、乙酸、二甲基甲醯胺和三乙基矽烷組成。還原通常將在室溫下進行12-24小時。在還原不完全的情況下再用一些三乙基矽烷，反應時間再延長4-8小時。反應結束後的擬肽樹脂用二甲基甲醯胺、乙醇、二氯甲烷洗滌，懸浮在K試劑(King等《Int.J.Pept.Prot.Res.》36255-266(1990))混合物(5ml/g肽樹脂)中，在室溫下達180分鐘。然後在無水二乙醚中過濾裂解混合物，離心分離固體沉澱，在真空中經固體KOH顆粒乾燥，將固體物質溶於0.1％三氟乙酸水溶液與乙腈的1∶1混合物，冷凍乾燥。
關於擬肽純化，將冷凍乾燥後的粗化合物樣本溶於含有10％至50％乙腈的0.1％含水三氟乙酸混合物。化合物溶液通常經過與0.45μm尼龍「ACRODISC」13(Gelman Sciences；Ann Arbor MI)濾器連接的注射器過濾。將適當體積的經過過濾的擬肽溶液注射到半製備型C18柱中(Vydac Protein and Peptide C18，218TP1010；The Separation Group；Hesperia CA)。0.1％三氟乙酸緩衝液與乙腈(HPLC級)的梯度或等度混合物作為洗脫劑，其流速利用Beckman「SYSTEM GOLD」HPLC保持。通過230nm下的UV檢測來監測擬肽的洗脫(Beckman，System Gold，可編程的溶劑模塊126和可編程的檢測模塊166，受「SYSTEM GOLD」軟體控制)。利用MS鑑別對應於每種非對映異構體的峰之後，收集化合物，冷凍乾燥，進行生物學試驗。MS是利用SCIEX API III＋儀器進行的。另外，NMR是利用General Electric儀器(300MHz)或Bruker Avance DPX300(300MHz)進行的。關於NMR，樣本通常是在DMSO-d6或CDCl3(Aldrich)中測量的。
各化合物的典型合成總結在方案5中，下列實施例闡述實驗細節。
實施例10
2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺三氟乙酸鹽a)3-(4-氰基-苯基)-N-[(S)-環己基-(1-(S)-{羰基氨基-(Rink-樹脂)}-4-胍基-丁基氨基甲醯基)-甲基]-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯胺如實施例9所述，使用HOBt和DICI(各2eq.)，將Fmoc-去保護的Rink樹脂偶聯到2-(S)-(Fmoc-氨基)-4-(N，N』-雙叔丁氧羰基-胍基)-丁酸(2eq.)上。Fmoc-去保護後，使用相同的偶聯條件，將樹脂與(S)-環己基-(Fmoc-氨基)-乙酸(2eq.)偶聯。Fmoc-去保護後，在室溫下，使用DICI/HOBt(各1.1eq.)，將乾燥後的樹脂(100mg，subs.0.65mmol/g)與3-(4-氰基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙酸(1.5eq.)在二甲基甲醯胺中偶聯4小時。反應完成得到茚三酮試驗的確認。樹脂用二甲基甲醯胺、甲醇和二氯甲烷洗滌，在真空中乾燥2-3小時。
b)N-[(S)-環己基-(1-(S)-{羰基氨基-(Rink-樹脂)}-4-胍基-丁基氨基甲醯基)-甲基]-3-[4-(N-羥基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯胺將來自步驟a的乾燥樹脂轉移到帶螺帽的20ml小瓶內，與鹽酸羥胺(25eq.)混合。向反應小瓶內加入三乙胺、吡啶與二甲基甲醯胺(1∶1∶1)的混合物，小瓶密封，超聲處理30秒。反應在室溫下搖動過夜。如實施例9所述檢查反應完成與否。反應結束後的樹脂用於下面的步驟。
c)2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺三氟乙酸鹽將DCRu與三苯膦的二甲基甲醯胺與冰乙酸溶液在50℃下加熱10-15分鐘，得到澄清的棕色溶液。反應小瓶冷卻至室溫，加入第二部分來自上步的乾燥樹脂，然後加入三乙基矽烷。小瓶在N2下密封，在室溫下搖動12小時。裂解少量樹脂，用HPLC/ESMS試驗產物，以監測還原為脒完成與否。反應結束後的樹脂用二甲基甲醯胺、甲醇、二氯甲烷洗滌，如實施例9所述進行處理。最終的化合物經過MS分析，得到分子量為563.3(計算值563.7)。
利用上述操作合成下列化合物
實施例164和1652-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-丙醯胺鹽酸鹽，強極性非對映異構體(164)，和2-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-丙醯胺鹽酸鹽，弱極性非對映異構體(165)a)2-(3-溴-苯基)-3-(4-氰基-苯基)-丙酸在0℃氮氣、攪拌下，將正丁基鋰(40.33g，15％己烷溶液，94.4mmol)加入到四氫呋喃(140ml)中，然後加入2，2，6，6-四甲基哌啶(16ml，94.6mmol)。溶液冷卻至-78℃，攪拌60分鐘。在攪拌下，將(3-溴-苯基)-乙酸(9.68g，45mmol)的四氫呋喃(50ml)溶液滴加到該溶液中。攪拌60分鐘後，加入4-氰基-苄基溴(8.83g，45mmol)的四氫呋喃(50ml)溶液。反應混合物在-78℃下攪拌2小時，然後歷時20小時溫熱至室溫。加入飽和氯化銨水溶液(200ml)、鹽酸(6N，40ml)和乙酸乙酯(200ml)，分離有機層，用氯化銨溶液(3×200ml)和飽和氯化鈉溶液(200ml)洗滌，乾燥(硫酸鎂)，蒸發。將殘餘物溶於乙酸乙酯(200ml)，用飽和碳酸鈉水溶液萃取(2×200ml)。水溶液用硫酸氫鉀酸化至pH3，固體過濾，用水洗滌，乾燥。收率5.85g(39％)，MS m/z330(M＋H)+b)2-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙酸鹽酸鹽在-20℃至-40℃下，將2-(3-溴-苯基)-3-(4-氰基-苯基)-丙酸(4.5g，13.6mmol)的乙醇(100ml)溶液用乾燥氯化氫飽和2小時。混合物溫熱至室溫，攪拌20小時。向溶液中通入氮氣達3小時，溶液在20℃下蒸發。將殘餘物溶於二甲基甲醯胺(50ml)，用無水氨飽和2小時。溶液蒸發，20小時後用乙酸乙酯和乙醇處理。固體氯化銨過濾，溶液蒸發，再次用乙酸乙酯處理。分離油性殘餘物，得到2-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙酸乙酯鹽酸鹽。將該酯溶於鹽酸(6N，20ml)與乙酸(20ml)，在室溫下攪拌20小時，在50℃下攪拌48小時。溶液蒸發，冷凍乾燥，得到3.7g(75％)所需產物。MS m/z347(M＋H)+c){[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-(S)-環己基-甲基}-氨基甲酸叔丁酯鹽酸鹽在0℃下，向(S)-叔丁氧羰基氨基-環己基-乙酸(1.8g，7mmol)的二甲基甲醯胺(100ml)溶液中加入HATU(2.9g，7.7mmol)和可力丁(0.93ml，7mmol)。混合物攪拌20分鐘，加入4-氨基甲基-哌啶-1-甲脒鹽酸鹽(1.6g，7mmol)和可力丁(1.85ml，14mmol)。混合物攪拌1小時，然後溫熱至室溫。蒸發後，殘餘物用乙酸乙酯和硫酸氫鈉溶液處理，分離有機層，乾燥，蒸發，得到3.65g產物，仍含有可力丁鹽。
d)2-氨基-N-(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-2-(S)-環己基-乙醯胺鹽酸鹽將{[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-(S)-環己基-甲基}-氨基甲酸叔丁酯鹽酸鹽(3.64g粗物質)與含水三氟乙酸(90％)在室溫下攪拌20小時，蒸發，溶於含水鹽酸，冷凍乾燥，得到2.69g(89％)所需產物，MS m/z296(M＋H)+，148(M＋2H)2+e)2-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-(S)-環己基-甲基}-丙醯胺鹽酸鹽在0℃下，向2-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙酸鹽酸鹽(188mg，0.49mmol)的二甲基甲醯胺(30ml)溶液中加入TOTU(164mg，0.5mmol)和N-乙基嗎啉(127μl，1mmol)。混合物在0℃下攪拌30分鐘，加入2-氨基-N-(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-2-(S)-環己基-乙醯胺鹽酸鹽(180mg，0.49mmol)，混合物然後溫熱至室溫。蒸發後，殘餘物經過Sephadex LH20色譜純化，採用正丁醇(17)∶冰乙酸(1)∶水(2)作為洗脫劑。合併純的級分。蒸發溶劑，將殘餘物溶於水和鹽酸，冷凍乾燥。收率82mg強極性非對映異構體和71mg弱極性非對映異構體，MS(FAB)m/z624(M＋H)+利用實施例1至10和164與165所述操作合成下列化合物
實施例2232-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體a)4-[(2-(S)-苄氧基羰基氨基-2-環己基-乙醯氨基)-甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯在0℃下，向(S)-苄氧基羰基氨基-環己基-乙酸(5.4g，18.66mmol)與4-氨基甲基-哌啶-1-羧酸叔丁酯(4.0g，18.66mmol)的二甲基甲醯胺溶液中加入HATU(7.09g，18.66mmol)和可力丁(2.46ml，18.66mmol)。混合物攪拌1小時，然後溫熱至室溫。混合物蒸發，在乙酸乙酯與碳酸氫鈉溶液之間分離。有機層用水溶液(pH4)洗滌，乾燥，蒸發。將所得殘餘物溶於乙酸乙酯，用硫酸氫鉀溶液洗滌，乾燥，蒸發，得到所需產物。收率8.29g(91％)，MS m/z488.3(M＋H)+b)4-[(2-(S)-氨基-2-環己基-乙醯氨基)-甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯乙酸鹽將4-[(2-(S)-苄氧基羰基氨基-2-環己基-乙醯氨基)-甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(5.0g，10.25mmol)在乙醇(200ml)與乙酸(2ml)中氫化，使用鈀/炭(10％)作為催化劑。除去溶劑，在水與乙酸乙酯之間分配。含水層蒸發，冷凍乾燥，以定量收率得到所需產物。MS m/z354.3(M＋H)+c)2-(3-溴-苯基)-3-(4-氰基-苯基)-丙酸在-78℃下，向正丁基鋰(95ml，15％己烷溶液，147mmol)與2，2，6，6-四甲基哌啶(24.9ml，147mmol)的四氫呋喃(220ml)溶液中加入(3-溴-苯基)-乙酸(15.05g，70mmol)的四氫呋喃(80ml)溶液。反應混合物在該溫度下攪拌60分鐘。然後加入4-溴甲基-苯甲腈(13.72g，70mmol)的四氫呋喃(160ml)溶液。反應混合物在-78℃下攪拌2小時，然後溫熱至室溫，用氯化銨溶液(240ml)、3N鹽酸(50ml)和乙酸乙酯(300ml)終止反應。有機層用氯化銨溶液和鹽水洗滌，乾燥，在真空中蒸發。將殘餘物溶於乙酸乙酯，與甲基-叔丁基醚攪拌。吸出沉澱，在真空中乾燥，得到19.0g所需產物(收率82％)。
d)4-({2-[2-(3-溴-苯基)-3-(4-氰基-苯基)-丙醯氨基]-2-(S)-環己基-乙醯氨基}-甲基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯在4℃下，將TOTU(1.59g，4.84mmol)加入到2-(3-溴-苯基)-3-(4-氰基-苯基)-丙酸(1.6g，4.84mmol)、4-[(2-(S)-氨基-2-環己基-乙醯氨基)-甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯乙酸鹽(2.0g，4.84mmol)與N-乙基嗎啉(1.2ml，9.68mmol)的二甲基甲醯胺(80ml)溶液中。混合物在22℃下攪拌15小時，然後在真空中蒸發，與碳酸氫鈉溶液攪拌。吸出所得沉澱，用水洗滌，在40℃真空中乾燥，得到所需產物，在使用時無需進一步純化。MS m/z665.2(M＋H)+e)2-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-環己基-[(哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-甲基}-丙醯胺三氟乙酸鹽在-10℃下，向4-({2-[2-(3-溴-苯基)-3-(4-氰基-苯基)-丙醯氨基]-2-(S)-環己基-乙醯氨基}-甲基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(3.7g，5.56mmol)的無水乙醇(100ml)溶液中通入乾燥氯化氫氣體達1小時。溶液在室溫下攪拌12小時，蒸發，用氨的無水二甲基甲醯胺(80ml)溶液處理。蒸發後，殘餘物經過Sephadex LH20純化，採用正丁醇(17)∶冰乙酸(1)∶水(2)作為洗脫劑，再經過製備型HPLC純化(HPLC條件Purospher(R)Star HP-18e(10μM)，乙腈/水＋1％TFA，10％至100％乙腈)。合併純的級分，冷凍乾燥，得到1.06g(24％)所需產物的弱極性非對映異構體。MS m/z582.3(M＋H)+f)2-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體將2-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-環己基-[(哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-甲基}-丙醯胺三氟乙酸鹽(100mg，0.13mmol，弱極性非對映異構體)、乙醯亞胺酸乙酯(ethylacetimidate)鹽酸鹽(32mg，0.26mmol)與三乙胺(138μl，1.04mmol)的甲醇(40ml)溶液攪拌5天。在這五天期間，兩次加入等量的三乙胺和乙醯亞胺酸乙酯鹽酸鹽。反應混合物在真空中蒸發，經過製備型HPLC純化(HPLC條件Purospher(R)Star HP-18e(10μM)，乙腈/水＋1％TFA，10％至100％乙腈)，得到70mg所需產物(收率63％)。MS m/z623.3(M＋H)+實施例224和2253-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，強極性非對映異構體，和3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體a)3-(4-氰基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸類似於實施例223c)的方法，用(3-三氟甲基-苯基)-乙酸代替(3-溴-苯基)-乙酸，製備標題化合物。收率64％，MS m/z320.1(M＋H)+b)(S)-{[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-氨基甲酸叔丁酯鹽酸鹽如實施例223a)所述，使用(S)-叔丁氧羰基氨基-環己基-乙酸(10.1g，39.28mmol)、4-氨基甲基-哌啶-1-甲脒二鹽酸鹽(9.0g，39.28mmol)、HATU(14.9g，39.28mmol)和可力定(15.6ml，117.8mmol)的二甲基甲醯胺溶液製備標題化合物。
c)(S)-2-氨基-N-(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-2-環己基-乙醯胺三氟乙酸鹽將(S)-{[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-氨基甲酸叔丁酯鹽酸鹽(20.0g，46.3mmol)的三氟乙酸(100ml)溶液在室溫下攪拌12小時。反應混合物蒸發，殘餘物經過Sephadex LH20純化，採用正丁醇(17)∶冰乙酸(1)∶水(2)作為洗脫劑。合併純的級分，得到所需產物。MS m/z296.2(M＋H)+d)N-(S)-{[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-3-(4-氰基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽類似於實施例223d)所述操作，使用(S)-2-氨基-N-(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-2-環己基-乙醯胺三氟乙酸鹽(214mg，0.4mmol)、3-(4-氰基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸(128mg，0.4mmol)、TOTU(132mg，0.4mmol)和N-乙基嗎啉(152μl，1.2mmol)的二甲基甲醯胺(10ml)溶液合成標題化合物，得到240mg(84％)所需產物。MS m/z597.4(M＋H)+e)3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽在-10℃下，向N-(S)-{[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-3-(4-氰基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽(235mg，0.33mmol)的無水乙醇(50ml)溶液中通入乾燥氯化氫氣體達1小時。溶液在室溫下攪拌12小時，蒸發，用氨的無水二甲基甲醯胺溶液處理3天。蒸發後，殘餘物經過製備型HPLC純化(HPLC條件Purospher(R)Star HP-18e(10μM)，乙腈/水＋1％TFA，10％至100％乙腈)。合併純的級分。蒸發溶劑，將殘餘物溶於水，水溶液冷凍乾燥，得到68mg(22％)所需產物的強極性非對映異構體和82mg(26％)所需產物的弱極性非對映異構體。兩種非對映異構體的MS顯示m/z614.4(M＋H)+，307.8(M＋2H)2+利用實施例1-10和223-225所述操作合成下列化合物
實施例258和2593-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體，和3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，強極性非對映異構體a)2-氨基-2-(S)-環己基-N-[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-乙醯胺三氟乙酸鹽a1)(S)-{環己基-[(哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-甲基}-氨基甲酸苄基酯三氟乙酸鹽將4-[(2-(S)-苄氧基羰基氨基-2-環己基-乙醯氨基)-甲基]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(7.15g，14.66mmol，實施例223a))溶於三氟乙酸(90％水溶液，100ml)。反應混合物攪拌15小時，在真空中蒸發，得到7.1g所需產物(97％)。MS m/z388.4(M＋H)+a2)(S)-(環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-氨基甲酸苄基酯三氟乙酸鹽如實施例223f)所述，使用(S)-{環己基-[(哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-甲基}-氨基甲酸苄基酯三氟乙酸鹽(2.0g，3.98mmol)、乙醯亞胺酸乙酯(1.98g，16mmol，分兩部分)與三乙胺(9ml，分兩部分)的甲醇溶液合成標題化合物。粗物質經過製備型HPLC純化(HPLC條件Purospher(R)Star HP-18e(10μM)，乙腈/水＋1％TFA，10％至100％乙腈)，得到所需產物。MS m/z429.4(M＋H)+a3)2-氨基-2-(S)-環己基-N-[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-乙醯胺三氟乙酸鹽將(S)-(環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-氨基甲酸苄基酯三氟乙酸鹽(340mg，0.62mmol)在甲醇(50ml)與乙酸(3ml)中氫化，使用鈀/炭(10％)作為催化劑。蒸發溶劑，將殘餘物溶於水，冷凍乾燥，得到287mg所需產物(88％)。MS m/z295.4(M＋H)+b)3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸乙酸鹽b1)3-[4-(N-羥基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸將3-(4-氰基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸(3.05g，9.6mmol，實施例224/225a)、鹽酸羥胺(4.0g，57.6mmol)與三乙胺(9.3ml，67.2mmol)的2-丙醇(100ml)溶液攪拌15小時。吸出反應混合物，在真空中蒸發。使殘餘物在水與乙酸乙酯之間分配。含水層用乙酸乙酯萃取，用碳酸氫鉀溶液酸化，用乙酸乙酯萃取。有機層乾燥，蒸發，得到2.3g所需產物(68％)。MS m/z353.2(M＋H)+b2)3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸乙酸鹽將3-[4-(N-羥基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸(680mg，1.93mmol)在乙酸(50ml)中氫化，使用鈀/炭(10％)作為催化劑。兩天後，濾出催化劑，在真空中蒸發溶劑，得到500mg所需產物(65％)。MS m/z337.2(M＋H)+c)3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體，和3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，強極性非對映異構體類似於實施例223d)所述操作，使用2-氨基-2-(S)-環己基-N-[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-乙醯胺三氟乙酸鹽(100mg，0.2mmol)、3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸乙酸鹽(80mg，0.2mmol)、TOTU(65mg，0.2mmol)與N-乙基嗎啉(76μl，0.6mmol)的二甲基甲醯胺溶液合成標題化合物。粗物質經過製備型HPLC純化(HPLC條件Purospher(R)Star HP-18e(10μM)，乙腈/水＋1％TFA，10％至100％乙腈)，得到兩種非對映異構體。兩種非對映異構體的MS顯示m/z613.4(M＋H)+，307.4(M＋2H)2+利用實施例1-10、223-225和258-259所述操作合成下列化合物
實施例273
N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-3-[4-(5-氧代-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽a)3-[4-(N-羥基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸甲酯將3-[4-(N-羥基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸(300mg，0.85mmol，實施例258/259b1))與草醯二氯(119mg，0.95mmol)的甲醇(10ml)溶液攪拌1.5天。蒸發溶劑，將殘餘物溶於水，冷凍乾燥，得到320mg所需產物(定量)。MS m/z367.2(M＋H)+b)3-[4-(N-乙氧羰基氧基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸甲酯向3-[4-(N-羥基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸甲酯(310mg，0.85mmol)的二甲基甲醯胺(20ml)溶液中加入三乙胺(475μl，3.4mmol)和氯甲酸乙酯(81μl，0.85mmol)。三天後，反應混合物在真空中蒸發，將殘餘物溶於乙酸乙酯/硫酸氫鉀溶液。有機層乾燥，在真空中蒸發，得到265mg所需產物(71％)。MSm/z439.2(M＋H)+c)3-[4-(5-氧代-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸甲酯將3-[4-(N-乙氧羰基氧基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸甲酯(30mg，68μmol)、碳酸鈉(2.0g)、二甲基甲醯胺(10ml)與水(10ml)的混合物在室溫下攪拌2天。反應混合物蒸發，將殘餘物溶於硫酸氫鉀溶液與乙酸乙酯。有機層蒸發，冷凍乾燥後得到22mg所需產物(收率85％)。MS m/z379.1(M＋H)+d)N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-3-[4-(5-氧代-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽如實施例258/259c)所述，從3-[4-(5-氧代-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸甲酯製備標題化合物，為非對映異構體混合物，得到所需產物。MS m/z655.3(M＋H)+實施例274N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-3-(4-磺醯亞氨醯基(sulfimidamoyl)-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽a)3-(4-硝基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙烯酸將(3-三氟甲基-苯基)-乙酸(7.5g，36.7mmol)、4-硝基-苯甲醛(5.55g，36.7mmol)、三乙胺(4.8g，47.8mmol)與乙酸酐(14.3g，140mmol)的溶液回流6小時。反應混合物倒入酸化的水(硫酸，pH1)中，用乙酸乙酯萃取。有機層蒸發，殘餘物與碳酸氫鈉溶液攪拌。吸出沉澱，濾液用乙酸乙酯萃取。水用鹽酸酸化，所得的油用乙酸乙酯萃取，得到9.9g所需產物(收率80％)。
b)3-(4-氨基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸將3-(4-硝基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙烯酸(9.9g，29mmol)在甲醇中氫化13小時，使用鈀/炭(10％)作為催化劑。濾出催化劑，濾液蒸發，得到8.9g所需產物(收率98％)。MS m/z310.2(M＋H)+c)3-(4-巰基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸在0-5℃下，向3-(4-氨基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸(4.0g，12.9mmol)的水(50ml)與鹽酸(2.8ml，32.3mmol)懸浮液中加入亞硝酸鈉(0.89g，12.9mmol)的水(20ml)溶液。反應混合物溫熱至室溫，倒入二硫代碳酸0-乙酯鈉鹽(4.14g，25.8mmol)的水(20ml)溶液中。反應混合物在60℃下攪拌2小時，沉澱(樹脂)用乙酸乙酯溶解。有機層用水洗滌，乾燥，在真空中蒸發。將所得暗棕色油溶於乙醇(50ml)。在回流溫度下，加入氫氧化鈉(3.6g，64.5mmol)。在該溫度下三小時後，除去乙醇，將殘餘物溶於水，含水層用二氯甲烷洗滌。向含水層中加入硫酸氫鉀(10g)。所得的油用二氯甲烷萃取，乾燥，在真空中蒸發，得到3.05g(72％)所需產物。MS m/z327.2(M＋H)+d)3-[4-(N，N-雙叔丁基-磺醯亞氨醯基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸在-35℃下，向叔丁胺(29ml)中加入溴(1.05ml，20.43mmol)。將懸浮液機械攪拌，溫熱至-5℃。然後加入3-(4-巰基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸(2.0g，6.13mmol)的二氯甲烷溶液，反應混合物在0℃下攪拌1天，在室溫下放置3天。除去叔丁胺，將殘餘物溶於Na2SO3-NaH2PO4-溶液與二氯甲烷．有機層乾燥，在真空中蒸發，得到2.82g所需產物(95％)，在使用時無需進一步純化。
e)3-(4-磺醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸將3-[4-(N，N-雙叔丁基-磺醯亞氨醯基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸(200mg，0.41mmol)溶於乙酸/氫溴酸(5ml)，攪拌16小時。向反應混合物中加入水(50ml)，調至pH5(碳酸氫鈉溶液)。含水層用二氯甲烷萃取，有機層乾燥，蒸發，經過製備型HPLC純化(HPLC條件Purospher(R)Star HP-18e(10μM)，乙腈/水＋1％TFA，10％至100％乙腈)，得到10mg所需產物。
f)N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-3-(4-磺醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽將3-(4-磺醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸(30mg，80μmol，類似於上述操作製備)、2-氨基-2-(S)-環己基-N-[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-乙醯胺三氟乙酸鹽(44mg，80μmol，類似於實施例258/259a)所述操作製備)、TOTU(29mg，88μmol)與N-乙基嗎啉(30μl，240μmol)的二甲基甲醯胺(10ml)溶液在0℃下攪拌2小時。反應混合物溫熱至室溫，蒸發。殘餘物經過製備型HPLC純化(HPLC條件Purospher(R)Star HP-18e(10μM)，乙腈/水＋1％TFA，10％至100％乙腈)，得到11mg所需產物，為非對映異構體混合物(收率18％)。MS m/z649.2(M＋H)+
實施例275和276N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-3-[4-(5，5-二甲基-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體，和N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-3-[4-(5，5-二甲基-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，強極性非對映異構體a)3-[4-(5，5-二甲基-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸將3-[4-(N-羥基氨甲醯亞氨醯基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸(200mg，0.57mmol，實施例258/259b1))的丙酮(50ml)溶液回流五天，每天8小時。反應混合物在真空中蒸發，殘餘物經過製備型HPLC純化(HPLC條件Purospher(R)Star HP-18e(10μM)，乙腈/水＋1％TFA，10％至100％乙腈)，得到90mg所需產物(40％)。MS m/z393.1(M＋H)+b)N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-3-[4-(5，5-二甲基-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體，和N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-3-[4-(5，5-二甲基-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，強極性非對映異構體如實施例258/259c)所述，從3-[4-(5，5-二甲基-4，5-二氫-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯基]-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙酸製備標題化合物，得到所需產物。MS m/z669.3(M＋H)+利用實施例1-10、223-225、258-259和273-276所述操作合成下列化合物
本文使用下列縮寫APTT活化的部分凝血激酶時間ATS antistasinAV 動靜脈的Boc 苄氧基羰基bp. 沸點℃ 攝氏度CDCl3氘代氯仿Class.syn. 經典合成Cm 釐米Dc 分解DCCI二環己基碳二亞胺DCRu二氯四(三苯膦)釕(II)DIC 播散性血管內凝血DICI二異丙基碳二亞胺DMSO二甲基亞碸DVT 深靜脈血栓形成
eq. 當量Fmoc 9-芴基甲氧羰基FT-IR傅立葉變換紅外G克H小時HATU N-[(二甲氨基)-1H-1，2，3-三唑並[4，5-b]吡啶-1-基亞甲基]-N-甲基甲銨六氟磷酸鹽N-氧化物HOBt 1-羥基苯並三唑HPLC 高效液相色譜HPLC/ESMS高效液相色譜/電噴射質譜Id 十二指腸內的Iv 靜脈內的Kg 千克LMWH 小分子量肝素Mg 毫克MHz 兆赫Min 分鐘Ml 毫升MmHg 毫米汞柱(1mmHg相當於1.3332毫巴或133.32帕斯卡)MM 毫摩爾Mmol 毫摩MS 質譜Mp. 熔點μl 微升μm 微米μM 微摩爾濃度μmol微摩爾Nm 納米
NM 納摩爾NMR 核磁共振PE 聚乙烯PEG 聚乙二醇PG 保護基團PPP 血小板貧乏的血液PT 凝血酶原時間Sec 秒Solid Ph.固相合成TAP 壁蝨抗凝肽TBS-BSA Tris緩衝鹽水-牛血清白蛋白TBS-PEG Tris緩衝鹽水-聚乙二醇TFPI 組織因子途徑抑制劑TOTU O-((氰基-(乙氧羰基)-亞甲基)氨基)-N，N，N』，N』-四甲基脲鎓四氟硼酸鹽TPCK 甲苯磺醯苯基氯甲基酮UV 紫外
權利要求
1.式I化合物， 其中R(1)是(C1-C10)烷基、(C3-C7)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、雜烷基、(C6-C10)芳基或雜芳基，其中環烷基是未取代的，或者被一個或兩個相同或不同的殘基R(7)取代，或者通過增環反應形成苯環；其中芳基和雜芳基是未取代的或者被1、2或3個相同或不同的殘基R(8)取代，在雜芳基的氮原子上被這些殘基取代形成帶正電的氮原子，具有X-作為抗衡離子；其中雜烷基不含或含有氮原子，它是未取代的或者被一個或兩個殘基R(9)取代；R(2)是氫或(C1-C4)烷基；R(3)是(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，它在芳基或烷基部分被殘基R(11)、雜芳基-(C1-C4)烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基取代；雜芳基-(C1-C4)烷基或(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基，其在雜芳基、環烷基或烷基部分被一個、兩個或三個殘基R(11)取代，或者是雜烷基-(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代；R(4)是氫、(C1-C4)烷基、(C3-C7)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基或(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基；R(5)是氫、(C1-C10)烷基、(C3-C7)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、(C6-C10)芳基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、或天然胺基酸α-C-原子的殘基，其中烷基、環烷基和芳基是未取代的或者被取代基取代，取代基是羥基、苄氧基、羥基羰基或N(R(9))2；或者R(4)和R(5)與它們所鍵合的-N-CH基團一起構成5至6元雜環或式II或III殘基 R(6a)和R(6b)彼此獨立地是氫；(C1-C8)烷基，它是未取代的或者被一個、兩個或三個相同或不同的殘基R(15)取代；(C6-C14)芳基、或雜芳基，其中芳基和雜芳基是未取代的或者彼此獨立地被1、2、3、4或5個相同或不同的殘基R(16)取代，在雜芳基的氮原子上被這些殘基取代形成帶正電的氮原子，具有X-作為抗衡離子；R(7)是(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、或其中一個至全部氫原子已被氟、氯或溴代替的(C1-C6)烷基；R(8)是(C1-C10)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C10)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、SO2-(C1-C4)烷基、氟、氯、溴；或其中在烷基部分或環烷基部分中的一個至全部氫原子已被氟、氯或溴代替的(C1-C10)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C10)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基或SO2-(C1-C4)烷基；或者兩個殘基R(8)構成-O-(CH2)2-O-橋或-(CH2)4-橋；R(9)是R(10)或(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基；R(10)是氫、硝基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基羰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C18)烷基羰基氧基-(C1-C6)烷氧基羰基、可選被取代的(C6-C14)芳基羰基、可選被取代的(C6-C14)芳氧基羰基、或在芳基部分是可選被取代的(C6-C14)芳基-(C1-C6)烷氧基羰基；R(11)是R(12)、(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被殘基R(12)取代，或者是雜芳基，它是未取代的或者被N(R(9))2或(C1-C4)烷基取代；R(12)是N(R(9))2、CON(R(9))2、CN、氯、NR(10)-C(＝NR(13))-NHR(10)、C(＝NR(13))-NHR(10)或S(O)(-NR(9))-N(R(9))2；R(13)是R(10)、氰基、硝基、氨基、羥基、(C1-C6)烷氧基、或(C6-C14)芳基-(C1-C6)烷氧基，它是未取代的或者在芳基部分例如被(C1-C4)烷氧基、氯或(C1-C4)烷基取代；R(14)是氫、羥基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、氟、氯、溴、N(R(9))2、硝基或氰基；R(15)是(C6-C10)芳基，它是未取代的或者被一個、兩個或三個相同或不同的殘基R(11)或R(21)取代；雜芳基，它是未取代的或者被一個、兩個或三個相同或不同的殘基R(11)或R(22)取代，在雜芳基的氮原子上被這些殘基取代形成帶正電的氮原子，具有X-作為抗衡離子；或者雜芳基被一個殘基N(R(9))2取代；O-雜芳基；S-雜芳基；(C3-C7)環烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代；雜烷基，它是未取代的或被殘基R(23)取代；COOR(17)、CONR(17)R(18)、CON(R(18))2、氧代、OH、NR(19)R(20)、R(12)、或天然胺基酸α-C-原子的殘基；R(16)是(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基、雜芳基、雜烷基、COOR(17)、CON(R(18))2、OH、NR(19)R(20)、R(12)、R(21)、R(22)、或C(O)-(CH2)2-NH2；R(17)是氫、(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、雜芳基、或雜芳基-(C1-C4)烷基；R(18)是氫、(C1-C6)烷基、(C3-C10)環烷基、(C3-C10)環烷基-(C1-C4)烷基、雜烷基、雜烷基-(C1-C4)烷基、(C6-C10)芳基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、雜芳基、或雜芳基-(C1-C4)烷基；其中上述基團中的烷基和/或芳基是未取代的或者被一個、兩個或三個殘基R(24)取代；或者兩個殘基R(18)與它們所鍵合的氮原子一起構成5或6元飽和或不飽和雜環，它不含或含有額外的氮、硫或氧原子，並且是未取代的或者被取代基取代，取代基是(C6-C12)芳基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基或在萘基部分被氯取代的萘基-磺醯基；R(19)是氫或R(20)；R(20)是(C6-C10)芳基、脒基、乙醯亞氨基、R(25)、或2-吡啶基，它是未取代的或者被殘基R(26)取代；R(21)是(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被殘基R(28)取代；氰基、CON(R(9))2、羥基羰基、(C1-C6)烷氧基羰基、N(R(9))2、S(O)r-(C1-C4)烷基、S(O)r-N(R(9))2、OR(17)、R(11)，或者兩個殘基R(21)構成-O-CH2-O-橋；R(22)是氫、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基羰基；其中烷基是未取代的或者被殘基N(R(9))2取代；(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷硫基、氟、氯、溴、硝基、N(R(9))2，或者兩個殘基R(22)構成-(CH2)q-橋，其中q是3或4；R(23)是氫、-C(＝NR(9))-R(39)、R(9)、氧代、R(11)、-NH-S(O)(＝NR(9))-(C1-C4)烷基、或-S(O)(＝NR(9))-N(R(9))2；R(24)是(C1-C4)烷基；其中一個至全部氫原子已被氟或氯代替的(C1-C4)烷基；(C6-C10)芳基、OR(17)、N(R(9))2、CON(R(9))2、氟、氯、溴、硝基、氰基、或S(O)r-N(R(9))2；R(25)是氫、(C1-C4)烷氧基羰基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基羰基、(C1-C4)烷基羰基、或SO2R(27)；R(26)是N(R(9))2或硝基；R(27)是(C1-C4)烷基；(C6-C10)芳基，它是未取代的或者被一個、兩個或三個相同或不同的取代基取代，取代基是氟、氯、溴或(C1-C4)烷氧基；R(28)是氟、氯、溴、或NHR(25)；R(39)是氫、(C6-C10)芳基、雜芳基；或(C1-C6)烷基，它是未取代的或者被氰基取代；r是0、1或2；X-是生理學上可接受的陰離子；所有它們的立體異構形式及其任意比例的混合物和它們的生理學上可接受的鹽。
2.如權利要求1所要求保護的式I化合物，其中R(1)是(C3-C7)環烷基、(C6-C10)芳基、雜芳基、1-1，2，3，4-四氫化萘或2-1，2，3，4-四氫化萘，其中芳基是未取代的或者被殘基R(8)取代；R(2)是氫或(C1-C4)烷基；R(3)是(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，它在芳基部分被殘基R(11)取代；雜芳基-(C1-C4)烷基，它在雜芳基部分被殘基R(11)取代；(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被一個、兩個或三個殘基R(11)取代，或者是雜烷基-(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代；R(4)是氫、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、或(C1-C4)烷基；R(5)是氫、(C3-C7)環烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷基、(C6-C10)芳基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，其中烷基是未取代的或者被羥基、苄氧基、羥基羰基或N(R(9))2取代；芳基是未取代的或者被氨基取代；或者R(4)和R(5)與它們所鍵合的-N-CH基團一起構成式II或III殘基 R(6a)和R(6b)彼此獨立地是氫、甲基、乙基或丁基，它被一個或兩個相同或不同的殘基R(15)取代；R(8)是(C1-C6)烷基、(C1-C4)烷氧基、SO2-(C1-C4)烷基、氟、氯、溴；或其中在烷基部分中的一個至全部氫原子已被氟、氯或溴代替的(C1-C6)烷基或(C1-C4)烷氧基；R(9)是R(10)；R(10)是氫、硝基或苄氧基羰基；R(11)是R(12)；甲基，它被R(12)取代；或雜芳基，它是未取代的或者被N(R(9))2或(C1-C4)烷基取代；R(12)是CN、N(R(9))2、-NR(10)-C(＝NR(13))-NHR(10)、-C(＝NR(13))-NHR(10)、S(O)(＝NR(9))-N(R(9))2或CON(R(9))2；R(13)是R(10)或羥基；R(14)是氫；R(15)是(C6-C10)芳基，它被一個殘基R(11)取代；COOR(17)，CON(R(18))2，CONR(17)R(18)，R(12)，雜烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代；(C3-C7)環烷基，它是未取代的或被殘基R(23)取代；或雜芳基，它是未取代的或者被殘基R(22)取代；R(17)是氫、(C1-C4)烷基、或(C6-C10)芳基；R(18)是氫；(C1-C4)烷基；(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基；被OR(17)取代的(C1-C4)烷基；(C3-C10)環烷基-(C1-C4)烷基；雜芳基-(C1-C4)烷基；或(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，其中烷基或芳基被一個、兩個或三個殘基R(24)取代；R(22)是甲基；R(23)是氧代、-C(＝NR(9))-R(39)、-NH-S(O)(＝NR(9))-(C1-C4)烷基、-S(O)(＝NR(9))-N(R(9))2或R(11)；R(24)是CONH2、(C6-C10)芳基、Cl、CN、OCH3、CF3或OR(17)；和R(39)是氫、(C6-C10)芳基、雜芳基、或(C1-C6)烷基，它是未取代的或者被氰基取代；所有它們的立體異構形式及其任意比例的混合物和它們的生理學上可接受的鹽。
3.如權利要求1和/或權利要求2所要求保護的式I化合物，其中R(1)是環己基、吡啶基、萘基、1-1，2，3，4-四氫化萘、2-1，2，3，4-四氫化萘、或苯基，它是未取代的或者被殘基R(8)取代；R(2)是氫或(C1-C4)烷基；R(3)是苄基，它在芳基部分被殘基R(11)取代；或雜芳基-(C1-C4)烷基，它在雜芳基部分被NH2基取代；R(4)是氫；R(5)是氫、環己基、丁基、環己基甲基、苯基、苯甲基或苯乙基，其中甲基或丁基是未取代的或者被羥基、苄氧基、N(R(9))2或羥基羰基取代；R(6a)是氫；R(6b)是甲基或丁基，它們被一個或兩個相同或不同的殘基R(15)取代；R(8)是甲基、OCH3、SO2CH3、氟、氯、溴、CF3或OCF3；R(9)是R(10)；R(10)是氫或苄氧基羰基；R(11)是R(12)；甲基，它被R(12)取代；或雜芳基，它被(C1-C4)烷基取代；R(12)是N(R(9))2、-NR(10)-C(＝NR(13))-NHR(10)、-C(＝NR(13))-NHR(10)或CON(R(9))2；R(13)是氫或羥基；R(15)是苯基，它被殘基R(11)取代；哌啶或咪唑啉，它們是未取代的或者被殘基R(23)取代；COOR(17)、CONR(17)R(18)、CON(R(18))2、R(12)；(C3-C7)環烷基，它被殘基R(23)取代；R(17)是氫、苯基或(C1-C4)烷基；R(18)是氫；(C1-C4)烷基；被OR(17)取代的(C1-C4)烷基；(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基；(C3-C10)環烷基-(C1-C4)烷基；雜芳基-(C1-C4)烷基；或(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，其中烷基或芳基被一個或兩個殘基R(24)取代；R(23)是-C(＝NR(9))-R(39)或R(11)；R(24)是苯基、Cl、CN、OCH3、CF3或OR(17)；R(39)是(C6-C10)芳基、雜芳基、(C1-C6)烷基、或被氰基取代的(C1-C6)烷基；所有它們的立體異構形式及其任意比例的混合物和它們的生理學上可接受的鹽。
4.如權利要求1至3一項或多項所要求保護的式I化合物，其中R(1)是環己基，吡啶基、萘基、或苯基，它是未取代的或者被殘基R(8)取代；R(2)是氫；R(3)是苄基，它在芳基部分被殘基R(11)取代；R(4)是氫；R(5)是環己基、丁基或苯基；R(6a)是氫；R(6b)是甲基，它被殘基R(15)取代，或丁基，它被兩個相同或不同的殘基R(15)取代；R(8)是甲基、OCH3、SO2CH3、氟、氯、溴或CF3；R(10)是氫；R(11)是R(12)；R(12)是-NR(10)-C(＝NR(13))-NHR(10)或-C(＝NR(13))-NHR(10)；R(13)是氫；R(15)是苯基，它被殘基R(11)取代；哌啶，它被殘基R(23)取代；COOR(17)、CONR(17)R(18)、CON(R(18))2；(C3-C7)環烷基，它被殘基R(23)或R(12)取代；R(17)是氫或(C1-C4)烷基；R(18)是氫、苯乙基、吡啶甲基、在烷基部分被苯基取代的苄基、或在芳基部分被OCH3取代的苄基；R(23)是R(11)或-C(＝NH)-R(39)；R(39)是甲基或乙基；所有它們的立體異構形式及其任意比例的混合物和它們的生理學上可接受的鹽。
5.如權利要求1至4一項或多項所要求保護的式I化合物，其中R(3)是苄基，它在芳基部分被脒基取代，所有它們的立體異構形式及其任意比例的混合物和它們的生理學上可接受的鹽。
6.如權利要求1至5一項或多項所要求保護的式I化合物，其中R(6a)是氫，所有它們的立體異構形式及其任意比例的混合物和它們的生理學上可接受的鹽。
7.如權利要求1至6一項或多項所要求保護的式I化合物，其中R(6a)是氫，R(6b)是苯甲基，它在苯基部分被脒基取代；或者R(6b)是下式基團 其中R是氨基、羥基或(C1-C4)烷氧基；或者R(6b)是下式基團 其中IIIb中的氮原子是未取代的或者被脒基、C(＝NH)-CH3或C(＝NH)-C2H5取代，所有它們的立體異構形式及其任意比例的混合物和它們的生理學上可接受的鹽。
8.如權利要求1至7一項或多項所要求保護的式I化合物，其中R(1)是環己基、吡啶基、萘基；或苯基，它是未取代的或者被殘基R(8)取代，取代基是甲基、三氟甲基、甲氧基、甲磺醯基、氟、氯或溴；所有它們的立體異構形式及其任意比例的混合物和它們的生理學上可接受的鹽。
9.如權利要求1至8一項或多項所要求保護的式I化合物，其中R(2)和R(4)是氫，R(3)是苄基，它在芳基部分被脒基取代，R(5)是環己基、丁基或苯基；所有它們的立體異構形式及其任意比例的混合物和它們的生理學上可接受的鹽。
10.如權利要求1至9一項或多項所要求保護的式I化合物，它們是2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸苯乙基-醯胺，弱極性非對映異構混合物2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-己酸(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基)-醯胺2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-萘-2-基-丙醯氨基]-己酸(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基)-醯胺2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-甲基-2-苯基-丙醯氨基]-己酸(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基)-醯胺2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-己酸(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基)-醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-4-苯基-丁醯氨基}-5-胍基-戊醯胺3-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-N-(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基)-琥珀醯胺酸2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-3-羥基-丙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-苯基-丙醯氨基]-2-苯基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-2-苯基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-萘-2-基-丙醯氨基]-2-苯基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-甲基-2-苯基-丙醯氨基]-2-苯基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-2-苯基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{3-苄氧基-2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-甲基-2-苯基-丙醯氨基]-丙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{3-苄氧基-2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-丙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺[5-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-5-(1-(S)-氨基甲醯基-4-胍基-丁基氨基甲醯基)-戊基]-氨基甲酸苄基酯2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-萘-2-基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-3，3-二甲基-丁醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-萘-2-基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-甲基-2-苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-3-環己基-丙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-吡啶-3-基-丙醯氨基]-3-苯基-丙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-環己基-丙醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[2-(4-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-間甲苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，強極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-間甲苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-(3-氯苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-氯苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-(3-氟苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯2-(S)-{2-(S)-[2-(R，S)-(3-溴苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨基甲醯基-苯基)-2-苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸乙酯，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-氟苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-氟苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，強極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[2-(3-溴苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[2-(3-溴苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺，強極性非對映異構體2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨基甲基-苯基)-N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-2-(R，S)-環己基-丙醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-鄰甲苯基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-(1，2，3，4-四氫萘-1-基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺2-(S)-{2-(S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-(1，2，3，4-四氫萘-2-基)-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊醯胺N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(3-氟苯基)-丙醯胺，弱極性非對映異構體2-(3-溴苯基)-N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯胺，強極性非對映異構體2-(3-溴苯基)-N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯胺，弱極性非對映異構體N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-鄰甲苯基-丙醯胺2-(4-溴苯基)-N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯胺，弱極性非對映異構體N-[(S)-(4-氨甲醯亞氨醯基-苄基-氨基甲醯基)-環己基-甲基]-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-(3-氯-苯基)-丙醯胺3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-間甲苯基-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(3-氟-苯基)-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(S)-鄰甲苯基-丙醯胺，強極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(R)-鄰甲苯基-丙醯胺，弱極性非對映異構體2-(3-溴苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-間甲苯基-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-萘-2-基-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-對甲苯基-丙醯胺，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(3-氯-苯基)-丙醯胺鹽酸鹽，弱極性非對映異構體2-(4-溴苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-丙醯胺鹽酸鹽，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-(R，S)-環己基-丙醯氨基]-2-(S)-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸異丙酯鹽酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸苄基-甲基-醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-(R，S)-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-(S)-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸苯乙基-醯胺三氟乙酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-(S)-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸丁酯三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-(S)-環己基-乙醯氨基}5-胍基-戊酸丙酯三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸(噻吩-2-基甲基)-醯胺三氟乙酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸(吡啶-4-基甲基)-醯胺三氟乙酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸二苯甲基-醯胺三氟乙酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸苄基醯胺三氟乙酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸4-氯-苄基醯胺三氟乙酸鹽2-(S)-{2-[3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-2-環己基-丙醯氨基]-2-環己基-乙醯氨基}-5-胍基-戊酸4-甲氧基-苄基醯胺三氟乙酸鹽3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(2-氟-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(4-氯-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體2-(3-溴-苯基)-N-{(S)-[(4-氨甲醯亞氨醯基-環己基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-苯基-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體2-(3-溴-苯基)-3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-((S)-環己基-{[1-(1-亞氨基-乙基)-哌啶-4-基甲基]-氨基甲醯基}-甲基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(3-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(2-氯-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體3-(4-氨甲醯亞氨醯基-苯基)-N-{(S)-[(1-氨甲醯亞氨醯基-哌啶-4-基甲基)-氨基甲醯基]-環己基-甲基}-2-(4-三氟甲基-苯基)-丙醯胺三氟乙酸鹽，弱極性非對映異構體和/或生理學上可接受的鹽。
11.製備如權利要求1至10一項或多項所要求保護的式I化合物的方法，該方法包括i)a1)保護式IV化合物的羧基官能 使這樣一種被保護的式IVa化合物 與式V化合物反應R(3a)-LG(V)其中R(3a)是(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，它在芳基或烷基部分被殘基R(29)取代；雜芳基-(C1-C4)烷基、(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基；在雜芳基、環烷基或烷基部分被一個、兩個或三個殘基R(29)取代的雜芳基-(C1-C4)烷基或(C3-C7)環烷基-(C1-C4)烷基，或者是雜烷基-(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被殘基R(23)取代，其中R(23)是如權利要求1-10一項或多種所定義的；R(29)是R(30)或(C1-C4)烷基，它是未取代的或者被R(30)取代；R(30)是N(R(31))2、CON(R9))2、NO2、氯或CN，其中殘基(30)如果在分子中存在一個以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(31)是(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基、(C1-C6)烷基羰基或(C1-C6)烷氧基羰基，其中殘基(31)如果在分子中存在一個以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；其中LG是離去基團；或者在鹼的存在下，另外與式VI化合物反應R(2)-LG(VI)其中R(2)是(C1-C4)烷基，LG是如上所定義的，得到式VII化合物 去保護式VII化合物，得到式VIII化合物 或者在適當的溶劑中，偶聯式IV或IVa化合物與式Vb化合物 其中R(3b)是(C6-C10)芳基或(C6-C10)芳基-(C1-C3)烷基，其中芳基部分被R(30)取代，然後按照標準方法氫化雙鍵，得到是VIII化合物，其中R(2)是氫，R(3a)是-CH2-R(3b)；a2)在合適的偶聯試劑存在下，偶聯式VIII化合物與式IX化合物 其中PG是易於裂解的保護基團，得到式X化合物 a3)可選地轉化式X化合物為式XI化合物，或者轉化式XXV化合物為式I化合物 其中R(3)是如權利要求1-10一項或多項所定義的；a4)皂化式XI或X化合物，按照偶聯步驟a2)偶聯所得化合物與式XIII化合物HNR(6a)R(6b)XIII其中R(6a)和R(6b)是如上所述的，得到式I或XXV化合物，或者b)從式VII化合物開始b1)可選地按照a3)所述操作，轉化式VII化合物為式VIIa化合物 去保護式VIIa化合物，得到式XIV化合物 b2)按照偶聯步驟a2)偶聯式XIV化合物與式XVII化合物 得到式I化合物；或者ii)a)偶聯式XVIII化合物 它與合適的載體結合，其中R(32)是氫或(C1-C8)烷基；它可以被R(33)取代一或兩次；(C6-C14)芳基、或雜芳基，二者是未取代的或者被相同或不同的殘基R(34)取代1、2、3、4或5次；R(33)是(C6-C10)芳基、雜芳基、O-雜芳基、S-雜芳基、(C3-C7)環烷基、雜烷基、COOR(17)、CON(R(18))2、氧代、OR(17)、R(35)、或天然胺基酸α-C-原子的殘基，其中殘基R(33)如果在分子內出現一次以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(35)是N(R(36))2、NR(38)-C(＝NR(37))-NHR(38)或C(＝NR(37))-NHR(38)；R(36)是R(38)或(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，其中殘基R(36)如果在分子內出現一次以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(37)是R(38)、氰基、羥基、(C1-C6)烷氧基、也可以在芳基部分被取代的(C6-C14)芳基-(C1-C6)烷氧基、或氨基，其中殘基R(37)如果在分子內出現一次以上，那麼是彼此獨立的且可以是相同或不同的；R(38)是氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基羰基或(C1-C6)烷氧基羰基；R(34)是(C1-C6)烷基、(C6-C10)芳基、雜芳基、雜烷基、COOR(17)、CON(R(18))2、OH或R(35)；與式XIX化合物 其中R(4)和R(5)是如權利要求1-10一項或多項所定義的，得到式XX化合物 b)用鹼去保護式XX化合物後，偶聯去保護的化合物XX與式VIII化合物，得到式XXII化合物 或者偶聯去保護的化合物XX與式XIV化合物，得到式XXIII化合物 c)可選地轉化式XXII化合物為式XXIII化合物(也就是說，通過引入脒基或胍基，或者通過硝基的還原，轉化殘基R(3a)為殘基R(3))；和d)裂解樹脂上的式XXII(或XXIII)化合物，得到式I化合物。
12.藥物組合物，包含一種或多種如權利要求1至10一項或多項所要求保護的式I化合物和/或它們的生理學上可接受的鹽以及藥學上可接受的載體和/或輔助物質。
13.如權利要求1至10一項或多項所要求保護的式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽，用作藥物。
14.如權利要求1至10一項或多項所要求保護的式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽，用作Xa因子抑制劑。
15.如權利要求1至10一項或多項所要求保護的式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽，用作血液凝固抑制劑。
16.如權利要求1至10一項或多項所要求保護的式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽，用於心血管疾病或血栓栓塞疾患的治療或預防。
17.如權利要求1至10一項或多項所要求保護的式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽，用於與感染或手術有關的併發症的治療或預防。
18.如權利要求1至10一項或多項所要求保護的式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽，用於如權利要求16所要求保護的用途，其中心血管疾病是再狹窄、血管成形術後再狹窄、再閉塞的預防、冠狀動脈搭橋手術後疾患、動脈、靜脈與微循環的疾病狀態、心肌梗塞、心絞痛、血栓栓塞疾病、血栓形成、栓塞、成人呼吸窘迫症候群、多器官衰竭、中風或播散性血管內凝血疾病。
19.如權利要求1至10一項或多項所要求保護的式I化合物和/或其生理學上可接受的鹽，用於如權利要求17所要求保護的用途，其中與手術有關的併發症是深靜脈與近側靜脈血栓形成，它們可能發生在手術之後。
全文摘要
本發明涉及用於抑制血液凝固蛋白的新化合物,更確切地涉及式(Ⅰ)芳基鏈烷醯基衍生物,其中R(1)、R(2)、R(3)、R(4)、R(5)、R(6a)和R(6b)具有如權利要求書所示含義。式(Ⅰ)化合物是血液凝固酶因子Xa的抑制劑。本發明還涉及式(Ⅰ)化合物的製備方法、抑制Xa因子活性和抑制血液凝固的方法、式(Ⅰ)化合物在疾病如血栓栓塞疾病治療和預防中的用途和式(Ⅰ)化合物在用於這類疾病的藥物製備中的用途,這些疾病可以通過Xa因子活性的抑制加以治療或預防。本發明進一步涉及含有與惰性載體混合或締合的式(Ⅰ)化合物的組合物,確切地是含有式(Ⅰ)化合物以及藥學上可接受的載體物質和輔助物質的藥物組合物。
文檔編號C07D233/74GK1332723SQ99815252
公開日2002年1月23日 申請日期1999年12月23日 優先權日1999年1月2日
發明者E·德弗薩, U·海內爾特, O·克林勒, G·佐勒, H·馬特, F·D·阿爾－奧貝迪, A·沃爾瑟, P·威爾德古斯 申請人:阿文蒂斯藥物德國有限公司