用於製備三環化合物的中間體以及該中間體的製備方法

2023-08-06 16:20:21 4

專利名稱：用於製備三環化合物的中間體以及該中間體的製備方法
本申請是申請號為97194806.2，申請日為1997年3月20日的發明名稱和本申請的發明名稱相同的發明專利申請的分案申請。
本發明涉及新的三環化合物、它們的製備方法和這種方法的中間體、它們作為藥物的用途以及含有它們的藥物組合物。
本發明的目的是提供通式(I)化合物以及它們的酸和鹼加成鹽和它們的酯 其中R1代表-C≡C-[A]-[B]-COR6，-CH＝CH-[A]-[B]-COR6，-(CH2)2-[A]-[B]-COR6，-O-[A]-[B]-COR6，-CH2CO-[A]-[B]-COR6基團，-[A]-代表-衍生自包含1-12個碳原子和1-6個選自氧、氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈結構的二價烴基，-或衍生自包含1-12個碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無環烴的二價基團，[B]代表苯基，CH[Z]基，或單鍵，Z代表氫原子，下列基團之一(D)0-6-NRaRb，(D)0-6-NH-SO2-Rc，(D)0-6-NH-CO2-Rc，(D)0-6-NH-CO-Rc，(D)0-6-NH-SO2-NH-Rc，(D)0-6-NH-CO-NH-Rc，(D)0-6-CO2-Rc，(D)0-6-SO2-Rc，(D)0-6-CO-Rc或(D)0-6-Rc，其中(D)0-6表示衍生自含有0-6個碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無環烴的二價基團，Ra、Rb和Rc代表氫原子；(CH2)0-3-Ar基，其中Ar代表含6-18個碳原子的碳環芳基；(CH2)0-3-Het基，其中Het代表衍生自含有1-9個碳原子和1-5個選自氧，氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和芳族或非芳族雜環的基團；(CH2)0-3-Alk基，其中Alk代表衍生自含有1-12個碳原子的飽和或不飽和直鏈、支鏈或環狀非芳烴的基團，基團Het、Ar和Alk可以為未取代的或為取代的，或者Ra和Rb還可以與它們所鍵連的氮原子一起表示任選含有1個或多個選自氧，氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和芳族或非芳族含氮雜環，該基團可以是取代的或未取代的。
-R6代表羥基，O-Alk，O-Ar，NH2，NH-Alk，N(Alk)2基團或L或D胺基酸的剩餘部分，Alk和Ar的定義同上，可以為取代的或未取代的。
-R2和R3相同或不同，且代表氫原子，羥基，O-Alk基或O-(CH2)0-3-Ar基，其中Alk和Ar的定義如上，或者R2與R3一起形成-O-(CRdRe)n-O-型環，其中n為整數1-5，Rd和Re各自獨立表示氫原子，含有1-6個碳原子的烷基，或苯基。
-R4代表氫原子，滷原子，下列基團之一羥基、氨基、硝基、氰基、CF3、含有1-12個碳原子的醯基或醯氧基、烷基、鏈烯基、炔基、烷硫基、烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、二烷基氨基烷基、二烷基氨基烷氧基，其中術語烷基含1-6個碳原子。
-R5代表氫原子，羥基，滷原子，O-Alk基團或O-(CH2)0-3-Ar基團，其中的Alk和Ar如上定義，-G代表式G1基團 其中Rh為氫原子或如上所定義的(Alk)基團，且(Het′)代表如下通式的雜環 其中(H)與N＝C-NH-單元一起形成含有1-9個碳原子和2-5個選自氧、氮和硫原子的雜原子的飽和或不飽和的單-或二環芳族或非芳族雜環的剩餘部分，該基團可以是取代的或未取代的，-或NRaRb基團(基團G2)，Ra和Rb的定義同上，-或定義同上的(Het)基團(基團G3)，-或-NRh-C(＝X)-NHRc基團(基團G4)，其中X為硫或氧原子或NH，Rh和Rc的定義同上，-或-NRh-SO2Rc基團(基團G5)，其中Rh和Rc的定義同上，虛線代表任選的第二條鍵，以及R1、R2和R3可以位於三環的8、9或10位上。
式(I)化合物指所有可能的單一幾何異構體和立體異構體以及它們的混合物形式。
表示衍生自含1-12個碳原子和1-6個選自氧、氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈結構的二價基團的-[A]-基團尤指衍生自鏈烷烴的基團，其中該鏈烷烴的一些碳原子被氧或硫原子置換，或者被下列基團置換C＝O，SO，SO2，NH，N(Alk)，NH-CO，N(Alk)-CO，CO-NH，CO-N(Alk)，SO2-NH，SO2-N(Alk)，其中(Alk)的定義同上。因此，上述-[A]-基團可以為下列基團-CH2-CH2-O-CH2-CH2-，-CH2-CH2-N(CH3)-CH2-CH2-，-CH2-CH2-C(O)-CH2-CH2-，-CH2-C(O)-C(Me)2-CH2-。
當-[A]-代表衍生自含1-12個碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無環烴的二價基團時，尤指式-(CH2)n-亞烷基基團(其中n代表1-12的整數)，如-CH2-，-CH2CH2-，-CH2CH2CH2-或-CH2CH2CH2CH2-，或諸如-CH＝CH-CH2-或-C≡C-CH2-之類的亞烯基或亞炔基。
當這些二價基團為支鏈基團時，它們可以是諸如-CH(CH3)-，-C(Me)2，-CH2-C(Me)2-，-CH(Et)-，-CH(C≡CH)-或-C(C≡CH)(Et)-之類的基團。
當[B]代表-Ph-二價基團時，COR6基團可以位於鄰、間或對位上。優選位於對位位置上。
當(D)0-6代表衍生自含有0-6個碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無環烴的二價基團時，(D)0-6選自上文[A]中所述的基團。(D)0是指該基團不存在，即再一次具有共價單鍵。(D)優選為單鍵或(CH2)n基團，其中n為選自1、2或3的整數。
當Ra，Rb和Rc代表(CH2)0-3-Ar，(CH2)0-3-Het，(CH2)0-3-Alk基團時，(CH2)0-3代表單鍵(就(CH2)0而言)，或基團-CH2-，-(CH2)2-或-(CH2)3-。
代表含有6-18個碳原子碳環芳基基團的術語「(Ar)」是指衍生自芳族環烴的基團如苯基，萘基，菲基，或者為衍生自含有苯環的稠合二環或三環烴的基團，如2，3-二氫化茚基，茚基，二氫化萘基，四氫萘基或芴基。聯接點位於苯環部分。優選苯基。
代表衍生自含有1-9個碳原子和1-5個選自氧，氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、芳族或非芳族雜環基團的術語「(Het)」尤指-單環雜環基，例如，下列基團噻吩基，呋喃基，吡喃基，吡咯基，咪唑基，吡唑基，吡啶基，吡嗪基，嘧啶基，噠嗪基，噻唑基，噁唑基，呋咱基，吡咯啉基，咪唑啉基，吡唑啉基，噻唑啉基，三唑基，四唑基，-稠合雜環，例如，苯並呋喃基，苯並噻吩基，苯並咪唑基，苯並噻唑基，萘並[2，3-b]噻吩基，噻蒽基，異苯並呋喃基，苯並吡喃基，呫噸基，吩噁噻基(phenoxathiinyle)，中氮茚基，異吲哚基，3H-吲哚基，吲哚基，吲唑基，嘌呤基，喹嗪基，異喹啉基，喹啉基，2，3-二氮雜萘基，1，5-二氮雜萘基，喹喔啉基，喹唑啉基，噌啉基，喋啶基，咔唑基，β-咔啉基，吖啶基，吩嗪基，吩噻嗪基，吩噁嗪基，二氫吲哚基，異二氫吲哚基，咪唑並吡啶基，咪唑並嘧啶基，或者還可以為上述單環雜環構成的稠合多環體系，例如呋喃並[2，3-b]吡咯或噻吩並[2，3-b]呋喃，-或飽和雜環基，例如吡咯烷，哌啶，嗎啉。
此外，該術語(Het)還包括上述(Het′)中的基團。
代表衍生自飽和或不飽和、直鏈、支鏈或環狀非芳香烴的基團的術語(Alk)在無環烴情況下是指烷基如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，叔丁基，正戊基，正己基，2-甲基戊基，2，3-二甲基丁基，正庚基，2-甲基己基，2，2-二甲基戊基，3，3-二甲基戊基，3-乙基戊基，正-辛基，2，2-二甲基己基，3，3-二甲基己基，3-甲基-3-乙基戊基，壬基，2，4-二甲基庚基或正-癸基，鏈烯基如乙烯基，丙烯基，異丙烯基，烯丙基，2-甲基烯丙基，丁烯基或異丁烯基，或炔基如乙炔基，丙炔基，炔丙基，丁炔基或異丁炔基；在環狀基團情況下是指環烷基，如環丙基，環丁基，環戊基，環己基或金剛烷基。
當Ra和Rb與它們所鍵連的氮原子一起代表含氮雜環時，尤為下列飽和雜環嗎啉，哌啶，哌嗪，吡咯烷，或不飽和雜環如嘧啶，吡啶或吡嗪。
當R2，R3，R4和R5代表含1-12個碳原子的O-(Alk)基團時，優選為甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，丁氧基，烯丙基氧基或炔丙氧基。當R2，R3，R4和R5代表O-(CH2)0-3-Ar基時，優選為苯乙氧基和苯丙氧基。
當R2和R3一起形成-O-(CRdRe)n-O-型環時(n為整數1-5)，尤指-O-CH2-O，O-C(Me2)-O，O-C(Ph2)-O基團。
R2與R3必須相互成鄰位關係。
當R6代表O-Alk或O-Ar基團時(其中Alk和Ar為取代或未取代的)，尤為下列基團之一(C1-C8)烷氧基，(C1-C14)芳基(C1-C8)烷氧基，(C6-C14)芳氧基，(C1-C8)烷基羧基氧基，(C1-C8)二烷基氨基羰基甲氧基，(C6-C14)芳基，(C1-C8)二烷基氨基羰基甲氧基。
當R6代表NH-alk，NH(alk)2或NH-Ar基團時，尤為下列基團之一(C1-C8)烷基氨基，二-(C1-C8)烷基氨基，(C6-C14)芳基(C2-C8)烷基氨基，(C6-C14)芳基氨基。
當R6代表胺基酸的剩餘部分時，它可以為L或D胺基酸。
L或D胺基酸可以為天然或非天然的。它們優選為α-胺基酸。例如，Houben-Weyl，有機化學方法(Methoden der organischen Chemie)，Vol.XV/1和2，Georg Thieme Verlag，Stuttgart，1974中所述的胺基酸Aad，Abu，γAbu，Abz，2ABz，∈Aca，Ach，Acp，Adpd，Anb，Aib，βAib，Ala，βAla，Aala，Alg，All，Ama，Amt，Ape，Apm，Apr，Arg，Asn，Asp，Asu，Aze，Azi，Bai，Bph，Can，Cit，Cys，(Cys)2，Cyta，Daad，Dab，Dadd，Dap，Dapm，Dasu，Djen，Dpa，Dtc，Fel，Gln，Glu，Gly，Guv，hAla，hArg，hCys，hGln，hGlu，His，hlle，bLeu，hLys，hMet，hPhe，hPro，hSer，hThr，hTrp，hTyr，Hyl，Hyp，3Hyp，Ile，Ise，Iva，Kyn，Lant，Lcn，Leu，Lsg，Lys，βLys，Δlys，Met，Mim，Min，nArg，Nle，Nva，Oly，Orn，Pan，Pec，Pen，Phe，Phg，Pic，Pro，Δpro，Pse，Pya，Pyr，Pza，Qin，Ros，Sar，Sec，Sem，Ser，Thi，βThi，Thr，Thy，Thx，Tia，Tle，Tly，Trp，Trta，Tyr，Val，
Tia，Tle，Tly，Trp，Trta，Tyr，Val，叔丁基甘氨酸(Tbg)，新戊基甘氨酸(Npg)，環己基甘氨酸(Chg)，環己基丙氨酸(Cha)，2-噻吩基丙氨酸(Thia)，2，2-二苯基氨基乙酸，2-(對-甲苯基)2-苯基氨基乙酸，2-(對-氯苯基)氨基乙酸，或者還為2-吡咯烷乙酸，1，2，3，4-四氫異喹啉-3-乙酸，十氫異喹啉-3-乙酸，八氫異吲哚-2-乙酸，十氫喹啉-2-乙酸，八氫環戊二烯並[b]吡咯-2-羧酸，2-氮雜二環[2，2，2]辛烷-3-羧酸，2-氮雜二環[2，2，1]庚烷-3-羧酸，2-氮雜二環[3，1，0]己烷-3-羧酸，2-氮雜螺[4，4]壬烷-3-羧酸，2-氮雜螺[4，5]癸烷-3-羧酸，螺(二環[2，2，1]庚烷)-2，3-吡咯烷-5-羧酸，螺(二環[2，2，2]辛烷)-2，3-吡咯烷-5-羧酸，2-氮雜三環[4，3，0，16，9]癸烷-3-羧酸，十氫環庚並[b]吡咯-2-羧酸，十氫環辛並[c]吡咯-2-羧酸，八氫環戊二烯並[c]吡咯-2-羧酸，八氫異吲哚-1-羧酸，2，3，3a，4，6a-六氫環戊二烯並[b]吡咯-2-羧酸，2，3，3a，4，5，7a-六氫吲哚-2-羧酸，四氫噻唑-4-羧酸，異噁唑烷-3-羧酸，吡唑烷-3-羧酸，羥基吡咯烷-2-羧酸，如果合適的話，這些基團可以是取代的(參見下列結構式)
上述雜環剩餘部分是已知的，例如，參見下列專利或專利申請US-A-4.344.949；US-A-4.374.847；US-A-4.350.704；EP-A-29.488；EP-A-31.741；EP-A-46.953；EP-A-49.605；EP-A-49.658；EP-A-50.800；EP-A-51.020；EP-A-52.870；EP-A-79.022；EP-A-84.164；EP-A-89.637；EP-A-90.341；EP-A-90.362；EP-A-105.102；EP-A-109.020；EP-A-111.873；EP-A-271,865和EP-A-344,682。
另外，胺基酸可以為酯或醯胺形式，例如，甲基酯，乙基酯，異丙基酯，異丁基酯，叔丁基酯，苄基酯，乙基醯胺，氨基脲或ω-胺基酸(C2-C8)-烷基醯胺。
最後，這些胺基酸的官能團可以加以保護。合適的保護基如尿烷保護基，羧基保護基或側鏈保護基已記載在Hubbuch，Kontakte(Merck)1979，N°3，p.14-23和Bullesbach，Kontakte(Merck)1980，N°1，p.23-25.中。
例如，可提及的保護基包括下列Aloc，Pyoc，Fmoc，Tcboc，Z，Boc，Ddz，Bpoc，Adoc，Msc，Moc，Z(NO2)，Z(Haln)，Bobz，Iboc，Adpoc，Mboc，Acm，叔丁基，Obzl，Onbzl，Ombzl，Bzl，Mob，Pic，Trt。
當G為式G1基團 和(Het′)為下述通式雜環 其中(H)與N＝C-NH-單元一起形成含1-9個碳原子和2-5個選自氧、氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、單-或二環的芳族或非芳族雜環時，這一基團可以是取代的或未取代的，G1尤其代表下列雜環 其中p代表整數1-4。
-當G代表-NRaRb基團(稱作G2)時，Ra和Rb可以為氫原子，(CH2)0-3-Ar，(CH2)0-3-Het或(CH2)0-3-Alk基團。Ar，Het和Alk基團還可以被定義如下的基團取代。
G2尤為NH2，NH-Alk基團如NHMe，NHET，N(Alk)2基團如NMe2，NEt2，NMeEt，NH-(CH2)0-1-Ar基團如NHPh，NHCH2Ph或NHCH2Het基團如NHCH2-吡咯-2-基。
當Ra為氫原子或(Alk)基團以及Rb為(Het′)基團時，重新可見G1基團的有用性。
當Ra和Rb與它們所鍵連的氮原子一起形成含氮雜環時，尤為上文所述的雜環基，這些基團可以為取代的或未取代的。
-當G為(Het)基(基團G3)時，該基團可以為取代的或未取代的，尤為上文所列雜環，特別是上文所述的通式(Het′)雜環。當該雜環通過其氮原子位置連接時，還可見其中Ra和Rb與載有它們的氮原子一起形成雜環的G2基團的有用性。
-當G為-NRh-C(＝X)-NHRc基(基團G4)，或NRhSO2Rc基(基團G5)時(其中X為硫或氧原子或NH，Rh和Rc的定義同上)，具體為下列基團之一-NH-C(＝NH)-NH2，-NH-C(＝O)-NH2或-NH-C(＝S)-NH2，-NH-C(＝NH)-NHCH2-Ar例如-NH-C(＝NH)-NHCH2Ph，-NH-C(＝NH)-NHCH2-Het，-NH-C(＝NH)-NHCH2-Het′，-NH-C(＝NH)-NH-Alk例如-NH-C(＝NH)-NHCH3，或-NH-SO2Ph，其中的Ar，Het，Het′或Alk基團為取代或未取代的。
(Alk)，(Ar)，(Het)，(Het′)或形成雜環的NRaRb基團上的可能取代基優選為下列基團-滷素氟，氯，溴，碘，-含有1-12個碳原子的烷基、鏈烯基、炔基，例如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，叔丁基，乙烯基或烯丙基；這些基團本身任選被一個或多個滷原子(例如氟)取代，例如三氟甲基，-氧代，氰基，硝基，甲醯基，羧基和含有1-6個碳原子的羧基烷基，甲醯氨基，-含有1-12個碳原子的烷氧基如甲氧基，乙氧基，丙氧基，異丙氧基，丁氧基，-含有1-12個碳原子的烷硫基，如甲硫基，乙硫基，丙硫基，異丙硫基，丁硫基，-氨基，含有1-12個碳原子的烷基氨基，例如甲氨基或乙氨基，含有2-24個碳原子的二烷基氨基，例如二甲基氨基，二乙基氨基，甲基乙基氨基，這些二烷基氨基可能呈氧化形式，-含有1-12個碳原子的氨基烷基，例如氨基甲基或氨乙基，-含有3-25個碳原子的二烷基氨基烷基，例如二甲氨基甲基或乙基，-含有3-25個碳原子的二烷基氨基烷氧基，例如二甲氨基乙氧基，-含有1-12個碳原子的可能醯化的羥基，例如乙醯氧基，-含有1-12個碳原子可能被例如氯、碘或氟原子取代的醯基，例如甲醯基、乙醯基、丙醯基、丁醯基、異丁醯基、戊醯基、異戊醯基、琥珀醯基、新戊醯基、苯甲醯基。還可提及氯乙醯基，二氯乙醯基，三氯乙醯基，溴乙醯基或三氟乙醯基。
-碳環或雜環雜芳基例如苯基，呋喃基，噻吩基，吡啶基或芳烷基如苄基，這些基團本身可能被上文所述的滷素、烷基、烷氧基、烷硫基、氨基烷基或二烷基氨基取代。
當然，可以存在一個或多個相同或不同的取代基。就(Het)來講，取代基可以位於NH基團或碳原子的位置上。
這些取代基還說明了R4的定義。
應當理解，當R1，R2，R3，R4，R5，R6，Ra，Rb，Rc中包含如上文所述的烷基、芳基或雜環基時，它們彼此獨立地相同或不同。
本發明自然擴展到式(I)化合物的鹽，例如，當式(I)化合物包含氨基或氨基胍官能團時，與下列酸所成的鹽鹽酸，氫溴酸，硝酸，硫酸，磷酸，乙酸，三氟乙酸，甲酸，丙酸，苯甲酸，馬來酸，富馬酸，琥珀酸，酒石酸，檸檬酸，草酸，二羥乙酸，天冬氨酸，烷烴磺酸如甲烷-或乙烷磺酸，芳烴磺酸例如苯-或對甲苯磺酸以及芳基羧酸，或者，當式(I)化合物含酸官能團時，與鹼金屬或鹼土金屬所成的鹽，或可能取代的銨鹽。
本發明還擴展到式(I)化合物的酯。
在第一優選方面中，本發明主題是上文所定義的相應於通式(I′)的通式(I)化合物及其酸和鹼的加成鹽和它們的酯 其中R′1代表下列基團之一-C≡C-[A′]-B′]-COR′6，-CH＝CH-[A′]-[B′]-COR′6，-(CH2)2-[A′]-[B′]-COR′6，-O-[A′]-[B′]-COR′6，-CH2CO-[A′]-[B]-COR′6，-[A′]-代表包含1-6個碳原子的二價亞烷基、亞烯基或亞炔基，[B′]代表CH(Z′)基團或單鍵，Z′代表氫原子，下列基團之一(CH2)0-6-NRaRb，(CH2)0-6-NH-SO2-Rc，(CH2)0-6-NH-CO2-Rc，(CH2)0-6-NH-CO-Rc，(CH2)0-6-NH-SO2-NH-Rc，(CH2)0-6-NH-CO-NH-Rc，(CH2)0-6-CO2-Rc，(CH2)0-6-SO2-Rc，
(CH2)0-6-CO-Rc或(CH2)0-6-Rc，Ra，Rb和Rc的定義同上，R′6代表OH，氨基或含有1-8個碳原子且可能被一個或多個選自羥基、氨基、苯基、烷基氨基或二烷基氨基的基團取代的烷氧基，R′2和R′3代表氫原子或甲氧基，且G的定義同上，虛線表示任選的第二條鍵。
在第二優選方面中，本發明主題是如上定義的通式(I)化合物及其酸和鹼的加成鹽和它們的酯，其中R6代表下列基團之一-OH，-OCH3，-OCH2CH3，-O-(CH2)2-OH， -O-(CH2)2-N-(CH3)2，-NH2或-O-(CH2)-苯基。
在第三優選方面中，本發明主題是如上定義的通式(I)化合物及其酸和鹼的加成鹽和它們的酯，其中R1代表O-(CH2)0-6CH(Z′)-COOH或-(CH2)0-7-CH(Z′)-COOH基團。
在第四優選方面中，本發明主題是如上定義的通式(I)化合物及其酸和鹼的加成鹽和它們的酯，其中(Z′)為氫原子。
在第五優選方面中，本發明主題是如上定義的通式(I)化合物及其酸和鹼的加成鹽和它們的酯，其中(Z′)為(CH2)0-6-NH-CO2-Rc或(CH2)0-6-NHRb基團，且Rb和Rc的定義同上。
在第六優選方面中，本發明主題是如上定義的通式(I)化合物及其酸和鹼的加成鹽和酯，其中Rb和Rc代表(CH2)0-3-Ar基團，Ar的定義同上且可以為取代的或未取代的。
在第七優選方面中，本發明主題是如上定義的通式(I)化合物及其酸和鹼的加成鹽和它們的酯，其中G為式-NH-C(＝NH)-NHRc的G4基團，且Rc的定義同上。
在第八優選方面中，本發明主題是如上定義的通式(I)化合物及其酸和鹼的加成鹽和它們的酯，其中G為NH-C(＝NH)-NH2的G4基團。
在第九優選方面中，本發明主題是如上定義的通式(I)化合物及其酸和鹼的加成鹽和它們的酯，其中G為如上定義的-NH-Het′基團，特別為 p為整數2，3或4，這些雜環為取代或未取代的。
在第十優選方面中，本發明主題是如上定義的通式(I)化合物及其酸和鹼的加成鹽和它們的酯，其中G為基團 p為整數2，3或4。
在第十一優選方面中，本發明提供了下列如上定義的通式(I)化合物-4-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-丁酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-9-苯並(e)薁基)氧基)-戊酸，-6-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-己酸，-7-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-庚酸，-5-((9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-8-苯並(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-戊酸乙酯鹽酸鹽，-4-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8，9-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-10-苯並(e)薁基)氧基)-丁酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8，9-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-10-苯並(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-(((氨基)羰基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-戊酸，-5-((4-(((氨基)硫代羰基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-戊酸，-4-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-8，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-9-苯並(e)薁基)氧基)-丁酸，-6-((4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-己酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-3，3-二甲基-4-氧代-戊酸，-5-((4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-3，3-二甲基-4-氧代-戊酸，-5-((4-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-戊酸鹽酸鹽，-4-((4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-丁酸，-5-((8-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-6，7，8，9，10，11-六氫-薁並(5，6-d)-1，3-苯並二氧雜環戊烯-4-基)氧基)-戊酸，
-5-((8-((氨基亞氨基甲基)亞肼基)-2，2-二苯基-6，7，8，9，10，11-六氫-薁並(4，5-e)-(1，3)-苯並二氧雜環戊烯-4-基)氧基)-戊酸，-4-((9，10-二甲氧基-4-((1，4，5，6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基)-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-丁酸，-2-((4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-乙酸，-3-((4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-丙酸，-4-((4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-丁酸，-4-((4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-丁酸，-O-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸，-O-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸，-O-[4-[(1，2，3，4-四氫-6-嘧啶基)亞肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並[e]薁基]-N-[(苯甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸，-O-(9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-[(1，4，5，6-四氫2-嘧啶基)亞肼基]]-8-苯並[e]薁基]N-[(苯基甲氧基)羰基]DL-高絲氨酸的(2，3-二羥基丙基)酯，-O-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺醯基]-DL-高絲氨酸，-O-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高絲氨酸的一鹽酸鹽，-5-[[4-[(4，5-二氫4-氧代-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]氧基]戊酸，
-O-[9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-[(4，5，6，7-四氫-1H-1，3-二氮雜-2-基)亞肼基]-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]DL-高絲氨酸，-O-[9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-[(3a，4，5，6，7，7a-六氫-1H-苯並咪唑-2-基)亞肼基]-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]DL-高絲氨酸，本發明主題同樣是通式(I)化合物的製備方法，其特徵在於使式(II)化合物 其中R2，R3，R4和R5如上所述，但不為羥基，在鹼存在下與式(F1)化合物反應Hal-[A]-[B]-COR6(F1)或在膦和偶氮二羧酸二乙酯存在下與式(F′1)化合物反應HO-[A]-[B]-COR6(F′1)其中Hal為滷原子，[A]，[B]和R6定義同上，[B]還可以代表基 其中P為胺官能團保護基，以得到式(IIIa)化合物 或者先與活化劑反應，然後在催化劑存在下與式(F2)化合物反應 以得到式(IIIb)化合物 隨後使式(IIIa)或(IIIb)化合物與式(F3)化合物反應H2N-G (F3)其中G定義同上，以得到相應於某些式(I)產物的式(IVa)和(IVb)化合物 隨後，如果合適的話，以合適的次序使這些化合物進行下列反應-與鹼或酸反應以斷裂酯，獲得相應的酸，-與適合於部分或完全還原R1基團中不飽和鍵的還原劑反應，-與三鍵水化劑反應，-與脫烷基化劑反應，-當[B]代表CH-NHP基團時，與CO-R6的β位置上的NH-P官能團的脫保護劑反應，-由CO-R6的β位置上的相應胺形成NH-SO2RC，NH-CO2RC，NHCORC，NH-SO2-NH-RC，NH-CO-NHRC基團，以得到相應的式(I)化合物，如果合適的話，這些化合物可與酸或鹼作用以得到相應的鹽，或者與酯化劑作用以得到相應的酯。
與式Hal-[A]-[B]-COR6(F1)化合物的反應優選在有無機鹼如碳酸鉀或碳酸鈉存在下在諸如二甲基甲醯胺之類的非質子偶極溶劑中進行。Hal優選為氯或溴原子。
與式HO-[A]-[B]-COR6(F′1)化合物的反應在諸如三苯膦之類的膦和反應劑如偶氮二羧酸二乙酯(DEAD)存在下於對質子溶劑如二氯甲烷中進行。
與式H-C≡C-[A]-[B]-COR6(F2)化合物的反應首先在鹼如吡啶存在下與活化劑如式(CF3SO2)2O三氟甲磺酸酐反應，以得到相應的式(OSO2CF3)三氟甲磺酸酯，然後在鈀衍生物(Pd0)如Pd(PPh3)4存在下進行。
與NH2-G(F3)的反應可以在無溶劑條件下或者在醇類溶劑如乙醇或丁醇中進行。合成子(Synthon)NH2-G任選以鹽形式使用，如鹽酸鹽或氫溴酸鹽。
酯官能團的皂化反應通過例如與鹼金屬鹼如蘇打或碳酸鉀在四氫呋喃或低級醇如甲醇或乙醇中進行。酯的裂解也可以根據本領域技術人員已知的方法在酸性介質中進行。
不飽和鍵的還原可以通過在催化劑如鈀-炭或銠催化劑如Wilkinson試劑存在下與氫氣作用完全還原，或者還可以通過與中毒催化劑如被吡啶或三乙胺毒化的鈀或硫酸鋇作用部分還原(亞炔基還原成亞烯基)。
由-C≡C-[A]-[B]-COR6得到-CH2CO-[A]-[B]-COR6基團的水合反應優選通過在硫酸汞存在下與水作用來進行。
得到其中R2，R3，R4或R5代表羥基的式(I)化合物的脫烷基化反應在氯化鋁或三溴化硼存在下進行。
COR6的α位上的NH2([B]代表CH-NH2或CH-NH2，HCl)的官能化反應按照有機化學中已知的標準方法進行。
由相應的胺形成NHSO2RC的反應優選通過在鹼例如三乙胺存在下與RCSO2Hal作用來進行。
由相應的胺形成NHCO2RC的反應優選按下所述進行首先在碳酸氫鈉存在下與三光氣反應以得到中間體異氰酸酯，然後按照有機化學雜誌(J.Org.Chem)，61，3929-3934中記載的方法與RCOH反應。
成鹽反應可以在常規條件下進行。例如，為成鹽R1的末端CO2H基團，在鈉鹽如碳酸鈉或碳酸氫鈉或碳酸氫鉀存在下進行操作。
同樣，可以用G表示的胺或氨基胍與酸的成鹽反應也在常規條件下進行。例如，用氫氯酸(例如其醚溶液)進行操作。
產物的任選酯化反應在本領域技術人員已知的標準條件下進行。
操作通常通過使式(I)酸或其官能衍生物與能夠導入酯基的試劑反應來進行，其中所述酯基的非窮舉實例見上文R6的定義中所述。
通式(F1)，(F′1)，(F2)，(F3)化合物是已知的或者按照本領域技術人員已知的方法製備。
不同反應試劑的連接次序還可以改變。也就是說，可以將式(II)化合物先與式F3化合物反應，以得到中間體式(IIIc)產物 然後再將所得式(IIIc)化合物與式(F1)，(F′1)或(F2)反應以得到相應的式(IVa)和(IVb)產物。
在這種情形下，有必要對式(IIIc)產物中的G基團加以保護，然後在加入(F1)，(F′1)或(F2)之後再按照本領域技術人員公知的方法脫保護(T.W.Greene有機合成中的保護基(Protective Group inOrganic Synthesis)，John，Wiley and Sons Inc.1991)。
CO-R6的β位上的NH-P([B]代表CH-NHP基團)的脫保護反應還可以按照本領域技術人員公知的方法進行，特別是當P代表CO2tBu基團時，可以通過脫羧反應例如與鹽酸作用來進行。
骨不斷進行著包括骨吸收和骨形成在內的動力學過程。這些過程通過特定細胞介導。骨形成是成骨細胞引起礦質基質沉積的結果，而骨的吸收則是破骨細胞溶解這種骨基質的結果。骨指疏鬆症的特徵在於這種骨基質乾性脫失。活化成熟的破骨細胞在粘連於骨基質後通過在粘連區內分泌蛋白水解酶和質子而吸收骨質，結果當破骨細胞脫離骨後，在骨的表面形成凹陷或洞穴。
式(I)化合物及其可藥用加成鹽具有有用的藥理性質。這些化合物抑制通過破骨細胞介導的骨吸收。
因此，本發明化合物可用於治療骨基質脫失所致的疾病，特別是骨質疏鬆症，噁性血鈣過多症，起因於骨轉移的骨質減少，牙周炎，甲狀旁腺機能亢進，風溼關節炎關節周圍侵蝕，佩吉特病，由於靜止不動、糖皮質激素治療或者雄性或雌性性激素缺乏誘發的骨質減少。
它們還可用於治療炎症，癌症和包括動脈粥樣硬化，再狹窄復發在內的心血管病。
最後，本發明化合物還可用作血管生成抑制劑，因而可用於治療腫瘤(通過抑制它們的新血管生成作用)，糖尿病性視網膜病和腎病。
近年來的研究已經表明，破骨細胞在骨上的固定由受體整聯蛋白介導。
整聯蛋白是受體介導細胞/細胞，尤其是為細胞/基質粘連過程的超家族受體，特別包括作為血小板受體(血纖維蛋白原)的α2bβ3和作為玻連蛋白受體的ανβ3，以及骨涎蛋白如骨橋蛋白和血小板反應蛋白。
這些由兩種亞單位α和β組成的異二聚體蛋白受體對二價離子如特別是Ca2+具有固定位點，並對由其亞單位性質預先確定的配體具有識別位點。
ανβ3受體是一種在許多細胞，包括內皮細胞，平滑肌細胞，破骨細胞和癌細胞在內的細胞中都有表達的跨膜糖蛋白，因此本發明化合物具有多種潛在用途。
ανβ3受體在破骨細胞膜上的表達是粘連/吸收過程的基礎，有助於細胞骨架的組構，並與骨質疏鬆有關(Ross等，生物化學雜誌(J.Biol.Chem.)，1987，262，7703)。
ανβ3受體在動脈平滑肌細胞中的表達能夠刺激它們朝新內膜方向遷移，進而導致形成動脈粥樣硬化和血管成形術後再狹窄(Brown等，心血管研究(Cardiovascular Res.)(1994)，28，1815)。
內皮細胞分泌生長因子，它們促使內皮進行有絲分裂，有助於形成新血管(血管生成)。血管原刺激引起新血管形成。因此，整聯蛋白ανβ3的拮抗劑通過誘導血管原血管編程性細胞死亡能引起癌症腫瘤消退。(Brook等，細胞(Cell)(1994)79，1157)。
整聯蛋白ανβ3的天然配體全都包含有RGD單元(Arg-Gly-Asp)。包含這種RGD單元的肽以及抗ανβ3抗體以其抑制牙齒吸收、防止破骨細胞粘連在礦化基質上的能力而為人所知(Horton等，實驗細胞研究(Exp.Cell.Res.)(1991)，195，368)。
分離自蛇毒的鋸鱗血抑肽也含有RGD單元，這種肽據說為破骨細胞粘連於骨的抑制劑，因此是體外組織培養(Sato等，細胞生物學雜誌(J.Cell.Biol.)(1990)，111，1713)和大鼠活體(Fisher等，內分泌學(Endocrionlogy)(1993)，132，1441)骨吸收的強效抑制劑。
特別是，式(I)化合物及其可藥用加成鹽和它們的酯通過抑制與它們的天然配體的結合而對玻連蛋白受體ανβ3或含有玻連蛋白作為配體(ανβ1，ανβ5，α2bβ3)的其它整聯蛋白具有親和性。
因此，這種性質使得本發明化合物可用於預防或治療一些疾病，這些疾病的病理基礎是由能夠與玻連蛋白受體相互作用的配體或細胞所致。
這些化合物還對能夠通過RGD三肽序列與其配體相互作用的其它整聯蛋白具有活性。這樣使得本發明化合物具有可用於治療與這些受體有關的病理學病症的藥理性質。
因此，這種對整聯蛋白的活性使得本發明化合物適於治療多種疾病，例如上文或雜誌Dermot Cox DNP 8(4)1995年5月，197-205中所述的病症(該文章的內容納入本申請中)。
因此，本發明主題是提供用作藥物的式(I)化合物及其可藥用加成鹽和其酯。
在本發明的藥物中，特別值得提及的是實驗部分所述的化合物。
在這些產物中，本發明主題特別是作為藥物，上文所列的式(I)化合物。
劑量根據受治療的病症，給藥途徑而變化例如，對成人來說口服途徑給藥劑量可以為1mg-1000mg/天。
本發明還擴展到作為活性成分，至少含有一種上文所述藥物的藥物組合物。
式(I)化合物可通過消化，胃腸外或局部途徑(例如經皮途徑)使用。它們可以配製成簡單的或糖包衣片劑，膠囊劑，顆粒劑，栓劑，陰道栓，注射劑，軟膏劑，霜劑，凝膠劑，微球劑，納球劑，移植劑，斑貼劑，它們均按照常規復發製備。
一種或多種活性成分可以與這些藥物組合物中通常使用的賦形劑一同摻合，所述賦形劑如滑石，阿拉伯膠，乳糖，澱粉，硬脂酸鎂，椰子油，含水或元水賦形劑，動物或植物源脂肪物質，石蠟衍生物，甘醇，各種溼潤劑，分散劑或乳化劑，防腐劑。
式(II)中羥基位於位置10上，且位於位置8上的R2和位於位置9上的R3代表O-(Alk)或O-(CH2)0-3-Ar基團，R4與R5均為氫原子的化合物按照歐洲專利申請N°0729933和下文實驗部分(製備例2)中所述方法製備。
兩種其它位置異構體可按照下述方式製備使式(IIA)化合物 與脫烷基化劑反應，以得到式(IIB)化合物 隨後使式(IIB)化合物或者在鹼性介質中與二醇保護劑反應，以便選擇性得到式(IIC)化合物
其中P表示二醇保護劑的剩餘部分，接著使該化合物依次與酚保護劑、二醇的脫保護劑、烷基化劑以及酚的脫保護劑反應，以得到式(IID)化合物，即OH位於8位上的三取代式(II)化合物 或者依次與酚保護劑、烷基化劑和脫保護劑反應，以得到式(IIE)化合物，即OH位於9位上的三取代式(II)化合物 脫烷基化劑優選指諸如三溴化硼或氯化鋁之類的試劑。
與式(IIB)產物反應的二醇保護劑可以是硼衍生物如硼酸，硼酸三烷基酯(例如硼酸三甲酯或三乙酯)，或者還可以為硼砂。
酚保護劑具體指滷化物，如甲磺醯氯或溴或甲苯磺醯氯或溴，或者還指苄化衍生物如甲苯磺酸苄酯或甲磺酸苄酯。
二醇脫保護劑具體指強酸如鹽酸，硫酸或對甲苯磺酸，用硼衍生物保護的情況下，或者還有氧化劑，例如過氧化氫。
烷基化劑是指用於烷基化酚類化合物的本領域技術人員已知的任何標準試劑。例如，可提及的包括烷基滷如甲基或乙基氯，硫酸烷基酯如硫酸甲基或乙基酯，或重氮甲烷。
脫保護劑是指諸如蘇打，碳酸鉀或碳酸鈉或碳酸鉀之類的鹼。
式(II)中R2、R3、R4和R5代表氫原子的單取代產物按照歐洲專利申請N°0729933中所述的類似方法製備(i)使式(a)化合物 其中O-(Alk)位於烷基羧基的間或對位，(Alk)的定義同上，與滷化劑反應，以得到相應的醯基滷，(ii)將所得醯基滷與式(b)試劑反應 其中R(I)和R(II)相同或不同且代表含1-6個碳原子的烷基，或者R(I)和R(II)與它們所鍵連的氮原子一起表示任選含有另一個選自O和N雜原子的5或6元飽和或不飽和雜環，以得到式(c)化合物 (iii)使所得式(c)化合物與滷化劑反應，得到式(d)化合物 其中Hal1代表滷原子，(iv)將所得式(d)化合物與路易斯酸反應，得到式(e)化合物 (v)將所得式(e)化合物與脫烷基化劑反應，以得到式(IIF)產物，即預期的式(II)單取代產物 其中R2代表O-(Alk)或O-(CH2)0-3-Ar，R3，R4和R5為氫原子和OH，且R2位於8，9或10位上的式(II)雙取代產物可按照上文所述方法以式(a′)化合物為起始物質製備 其中O-(Alk)和R2位於烷基羧基的間或對位上，R2為O-(Alk)或-(CH2)0-3-Ar基團。將上述起始物質依次進行反應(i)，(ii)，(iii)，(iv)和(v)，最終得到式(IIG)產物，即預期的式(II)雙取代產物 與式(a)或(a′)化合物反應的滷化劑為例如亞硫醯氯，草醯氯或為製備醯基滷用的本領域技術人員熟知的任何其它試劑。
式(b)試劑由環戊酮和仲胺(例如二乙胺，哌啶，哌嗪或者且優選嗎啉)製備。操作在強酸催化劑(例如對甲苯磺酸)存在下進行。
式(b)烯胺與醯基滷的反應優選在叔胺如三乙胺或吡啶存在下進行。
與式(c)化合物或其式(c′)二取代等同物反應的滷化劑可以為例如亞硫醯氯，光氣，磷醯氯或(優選)草醯氯。
用於環化式(d)化合物或其式(d′)二取代等同物的路易斯酸為例如氯化鋁，四氯化鈦，或優選氯化鐵，或四氯化錫。如同前述反應一樣，該反應也可以在例如有滷化溶劑(例如二氯甲烷，氯仿或二氯乙烷)存在下進行。
用於脫烷基化式(e)化合物或其式(e′)二取代等同物以得到相應酚類化合物的試劑優選為氯化鋁或三溴化硼。
其中R4不為氫原子的式(II)產物按照本領域技術人員公知的芳香親電和親核取代標準方法製備。
其中R5不為氫原子的式(II)產物按照本領域技術人員已知的方法，特別是歐洲專利申請N°0729933中所述的方法製備，即先進行滷化反應，隨後與水和合適的醇反應。
其中R5為氫原子且位置1-2間存在雙鍵的式(II)產物按照本領域技術人員公知的方法，特別是歐洲專利申請N°0729933中所述的方法製備，即通過在無水酸性介質中進行脫水或脫烷氧基化作用來製備。
其中位置5處的環與位置7處的環之間的連接處為飽和的式(II)產物可按照標準氫化方法特別是在鈀-炭存在下氫化相應的雙鍵而製備。
R4、R5的導入以及氫化反應優選在式(IIA)，(IID)，(IIE)，(IIF)或(IIG)化合物上進行。
其中相互成鄰位關係的R2和R3形成如上所述-O-(CRdRe)n-O型環的式(II)產物也可以按照本領域技術人員公知的方法，特別是下文實驗部分所述的方法製備。
本發明主題還涉及作為中間產物的式(IIIa)，(IIIb)，(IIIc)和(II)產物，當然，式(IIc)化合物和下列化合物是排除在外的-2，3，5，6-四氫-9，10-二甲氧基-8-羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮，和2，3，5，6-四氫-8，9-二甲氧基-10-羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮。
這兩個化合物的製備見下文實驗部分。
下列實施例用於說明本發明，但本發明並不局限於此。
製備例12，3，5，6-四氫-8，9，10-三羥基-苯並[e]-薁-4(1H)-酮步驟A3，4，5-三甲氧基-苯丙酸取6.8g碳酸鉀加到21.44g 3，4，5-三甲氧基苯基丙烯酸和45ml水的溶液中，然後在1.8g含10％鈀的活性炭存在下在1200-1300毫巴壓力下氫化1小時，吸收2.1l氫氣。過濾反應介質，繼之用水洗滌，並用50ml鹽酸(2N)酸化。分離後，將殘留物用水洗滌，然後在室溫下減壓乾燥。這樣得到19.8g預期產物(M.P.＝102-103℃)。
IR光譜(CHCl3)
羰基{1712cm-1(max)芳香骨架{1592cm-1{1740cm-1(sh) {1510cm-1NMR光譜(CDCl3)‖2,69(t)}＝C-CH2-CH2-CO 3,83(s)}3H3CO-C-2,91(t)}3,85(s)}6.43(s) 芳香質子2H10.50(m)活動性的質子1H步驟B3，4，5-三甲氧基-苯丙醯氯將6g步驟A所得產物在21ml二氯甲烷中的溶液用1.5g硫酸鎂乾燥，過濾後，冷卻反應混合物至5℃，加入2.2ml亞硫醯氯，然後在室溫下攪拌所得溶液20小時。減壓蒸發至幹，繼續用環己烷夾帶兩次，這樣收集到6.46g預期產物。(M.P.＝60℃)。
步驟C2-[3-(3，4，5-三甲氧基苯基)-1-氧代丙基]-環戊酮在+5℃下，於1小時30分鐘內向冷卻到5℃的包含2.4ml 1-(N-嗎啉基)環戊烯(其製備見下文所述)，2.31ml三乙胺和15ml二氯甲烷的溶液內加入4.27g步驟B所得產物在15ml二氯甲烷中的溶液。在+5℃下攪拌反應介質1小時，然後在升溫反應介質的同時加入10ml 2N鹽酸，接著在環境溫度下攪拌1小時，潷析，用水和碳酸氫鈉飽和溶液依次洗滌，乾燥，過濾並減壓蒸發至幹，得到5g預期產物。該粗產物按下所述方式純化溶於10體積乙酸乙酯，用N蘇打溶液提取，鹼相用乙酸乙酯洗滌，然後用濃鹽酸酸化至pH1，繼之用二氯甲烷提取，乾燥並減壓蒸發至幹。收集到2.75g純化產物。
IR光譜(CHCl3)羰基{1741cm-1芳族骨架{1592cm-1{1709cm-1{1509cm-1羰基{1658cm-1+C＝C {～1610cm-1包含螯合形式的OHNMR光譜(CDCl3)6.41(s)芳香質子，2H(積分基線)3.81(s)3.82(s)}共9H
3.83(s)3.85(s)}4種類型CH3O-C＝1.86(m)CH2-CH2-CH2～1.5H1.95-2,95(m)共～7.5H，包括數種類型的＝C-CH23.26(t)～0.40 CO-CH-CH2|CO11.2(m寬)活動性的H步驟C中所用的1-(N-嗎啉基)-環戊烯的製備將100ml環己烷、20ml環戊酮、50ml嗎啉以及100mg對-甲苯磺酸構成的溶液在回流狀態下攪拌4小時30分鐘，同時除去所形成的水。減壓蒸發溶劑後，在12-13毫巴壓力下進行蒸餾，收集到27.44g所需產物(B.P.＝83℃)。
步驟D1-(2-氯-1-環戊烯-1-基)-3-(3，4，5-三甲氧基苯基)丙-1-酮室溫下，在23g步驟C所得產物和230ml氯仿形成的溶液內加入13ml草醯氯。反應混合物在室溫下攪拌3小時，然後減壓濃縮，並繼續用環己烷夾帶兩次。得到28g粗產物。然後在50ml環己烷和50ml二異丙基醚混合物中經部分濃縮後重結晶上述粗產物。析出結晶，用二異丙醚洗滌，減壓乾燥後得到16.24g預期產物。(M.P.＝93℃)。
IR光譜(CHCl3)1659cm-1羰基1599cm-11586cm-1C＝C+芳香骨架1508cm-1NMR光譜CDCl31.93(m)中心CH22.69(m)-2.81(m)環戊烯的C-CH2-C＝質子2.85(t，J＝7.5)-3.08(t，J＝7.5)其餘＝C-CH2-C質子2.44CH3-C＝3.68-3.81所有OCH3質子6.59-6.68(d，j＝2)間位偶合的芳香CH＝7.31-7.80(d，j＝8)芳香質子步驟E2，3，5，6-四氫-8，9，10-三甲氧基-苯並[e]薁-4(1H)-酮將900mg步驟D所得產物、9ml 1，2-二氯乙烷和0.9ml氯化錫在室溫下一同攪拌20小時。然後加入9ml冰水，潷析混合物，並用水洗滌，然後再用二氯甲烷提取一次，繼之用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發至幹，得到1g預期(粗製)產物。通過矽膠色譜純化所得粗產物，依次採用含10％和25％乙酸乙酯的環己烷洗脫。濃縮後，收集到700mg產物，在5ml正己烷中結晶，接著冷卻到0℃，分離，用少量正己烷洗滌，然後在室溫下減壓乾燥，得到630mg預期產物。
(M.P.＝101-102℃)。
NMR光譜(CDCl3)1.86(m)中心CH22.65(dd)2H}3.84}2.72(t)2H}其餘CH2質子 3.86}OMe質子2.84(dd)2H}3.90}3.06 2H}6.59(s)芳香H步驟F2，3，5，6-四氫-8，9，10-三羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮如製備例1a的步驟B所述進行操作，得到預期的脫甲基產物。
製備例1a2，3，5，6-四氫-8，9，10-三羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮步驟A2，3，5，6-四氫-8，9，10-三甲氧基-苯並[e]薁-4(1H)-酮將60g製備例2所得的產物，600ml 1，2-二氯乙烷，342ml 2N蘇打，1.2g四丁基溴化銨和33ml硫酸二甲酯在20℃下一起攪拌2小時30分鐘。然後加入39ml三乙胺以分解過量的硫酸二甲酯，並在20℃±2℃下攪拌1小時。隨後加入342ml軟化水，再在20℃+2℃下攪拌15分鐘，然後潷析，將水相用1，2-二氯乙烷(2×120ml)提取。合併1，2-二氯乙烷相，依次用4×240ml軟化水、1×300ml N鹽酸、3×240ml軟化水洗滌(直至為中性為止)。合併的有機相用硫酸鈉乾燥，過濾並在83℃下常壓濃縮至480ml殘留體積。
步驟B2，3，5，6-四氫-8，9，10-三羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮將步驟(A)中所得的480ml溶液與102.3g無水氯化鋁一起加熱回流1小時。冷卻介質到0℃±2℃，然後在2小時內加入預先冷卻到大約0℃的600ml軟化水和192ml純硫酸(濃)混合物，期間保持反應介質溫度低於20℃。在20℃±2℃下於5分鐘內加入300ml軟化水，並在20℃±2℃下攪拌16小時，繼之分離，用1，2-二氯乙烷洗滌兩次，每次60ml，然後用軟化水洗滌，減壓乾燥，得到52.2g預期產物。
製備例28，9-二甲氧基-10-羥基-2，3，5，6-四氫-苯並[e]薁-4(1H)-酮步驟A3，4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)-磺醯基]氧基]-苯丙酸如製備例1步驟A所述，採用29.76g 3，4-二甲氧基-5-[[[(4-甲基苯基)-磺醯基]氧基]苯基]-肉桂酸(其製備見下文所述)，43.5g碳酸鉀，60ml甲醇和1.48g活性炭(含10％鈀)進行操作。得到28.33g預期產物，為無色結晶(M.P.＝48-149℃)。
UV光譜(EtOH)對於M＝380.4max 226nm ε＝22100infl 263nmε＝2000infl 269nmε＝2400max 274nm ε＝2800infl 279nmε＝2500infl 307nmε＝450NMR光譜(CDCl3)2,45(s)CH3-2,61(m)＝C-CH2-CH2-C＝ 3,68(s)2CH3O-C＝2,86(m) 3,81(s)6,61(d，j＝2)7,32(dl)H3H56,65(d，j＝2)H4H67,80(dl)H2H6步驟B3，4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)-磺醯基]氧基]-苯丙醯滷如製備例1步驟B所述，用1.9g步驟A所得產物，9.5ml二氯甲烷和0.7ml亞硫醯氯進行操作。得到2.2.4g預期產物，該產物直接用於下一步驟中。
步驟C2-[3-[3，4-二甲氧基-5-[[(4-甲氧基苯基)磺醯基]氧基]苯基]-1-氧代丙基]-環戊酮如製備例1步驟C所述，以2.24g步驟B所得的醯氯為起始原料，並使用770mg 1-(N-嗎啉基)-環戊烯(製備例1步驟C中所制)，6ml二氯甲烷和0.77ml三乙胺進行操作。經用二異丙醚重結晶後，得到1.27g預期產物(M.p.＝84℃)。
IR光譜(CHCl3)羰基{1742cm-1O-SO3{1374cm-1{1709cm-11178cm-11658cm-1C＝C+芳香骨架{1608cm-11599cm-11586cm-11508cm-1NMR光譜(CDCl3)2.44(s) CH3-O3.67(s) }2OCH33.79(s) 3.81(s)}6.59-6.65(m)芳香2H(O的鄰位)7.32(wd) H3H57.89(wd) H2H613.58(寬m)烯醇形式OH1.8-3.4(m)10-11H其它質子UV光譜1-EtOH(+二噁烷)對於M＝446.52max 225nmε＝23000max 282nmε＝7900infl 270，277，290，300，313nm2-EtOH(0.1N NaOH)mzx 310nmε＝21600infl268，272，276nm
步驟D1-(2-氯-1-環戊烯-1-基)-3-[3，4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基]-苯基]-丙-1-酮如製備例1步驟D所述，採用8.7g步驟C所得產物，70ml氯仿和3.5ml草醯氯進行操作。用二異丙醚結晶後，得到7.75g預期產物(M.P.＝73℃)。該產物直接用於下一步驟中。
通過用2.5體積二氯甲烷和5體積二異丙醚重結晶，繼之濃縮到3體積，分離，用二異丙醚洗滌並在室溫下減壓乾燥得到分析樣品(M.P.＝77-78℃)。
IR光譜(CHCl3)羰基{1659cm-1芳香C＝C{1599cm-1-1586cm-1-1508cm-1UV光譜(EtOH)max 227nm ε＝26100infl 248nm ε＝12800infl 272nm ε＝5300infl 280nm ε＝3200infl 320nmNMR光譜(CDCl3)1.93(m)中心-C-CH2-C-}2.69(m)}C-CH2-C＝ }2.81(m)}}2.85(t，J＝7.5)} 其餘的＝C-CH2-C質子3.08(t，J＝7.5)}2.44 CH3-C＝3.68}OCH3質子3.81}6.59(d，J＝2)芳香CH6.68(d，J＝2)間位偶合7.31(d，J＝8)}7.80(d，J＝8)}步驟E8，9-二甲氧基-10-[[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基]-2，3，5，6-四氫-苯並[e]薁-4(1H)-酮室溫下，在2.32g步驟C所得產物的50ml 1，2-二氯乙烷溶液內加入1.65g 98％氯化鐵。混合物在室溫下攪拌48小時，然後傾入冰水混合物內，劇烈攪拌15分鐘，然後用二氯甲烷提取。提取液用水和氯化鈉飽和水溶液依次洗滌。乾燥及減壓蒸發至幹後，得到2.15g粗產物，矽膠層析，用含50％乙酸乙酯的環己烷洗脫，收集到1.8g產物，將它們再次層析並用氯仿/二異丙醚混合物重結晶，得到720mg預期產物(M.P.＝138℃)。
IR光譜(CHCl3)羰基 {1650cm-1{1599cm-1C＝C+ {1556cm-1芳香骨架{1512cm-1-1498cm-1UV光譜(EtOH)max 230nm ε＝25300infl 254nmε＝9400max 323nm ε＝10300NMR光譜(CDCl3)～1.61(m) (2H)中心CH2～2.41 Ph-CH3～2.50-2.80CH2-C＝|3.88(s)}OCH3質子3.90(s)}6.74 H47.21(d)}C-Ph-SO27.64(d)}步驟F8，9-二甲氧基-10-羥基-2，3，5，6-四氫-苯並[e]薁-4(1H)-酮將350g上面步驟E所得產物，1750ml甲醇，350ml軟化水和350ml純淨苛性蘇打鹼水(濃縮)的混合物加熱回流2小時。冷卻反應介質到大約2℃±2℃，然後在45分鐘內加入467ml濃鹽酸，期間保持溫度為2℃±2℃。隨後在10分鐘內加入1645ml軟化水，並維持溫度為2℃±2℃。析出所形成的結晶，在20℃下每次用700ml軟化水進行澄清洗滌5次，然後在40℃下減壓乾燥，以得到199.1g預期產物。
製備例2開頭使用的3，4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基]-肉桂酸的製備步驟A3，4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基]苯甲酸甲酯在室溫及攪拌下，於10分鐘內在200g五倍子酸甲酯和2升二氯甲烷的混合物中加入303ml三乙胺。溶解後，冷卻反應介質到0-5℃，然後在此溫度下於1小時內加入130ml二氯二甲基矽烷，接著在此溫度下進一步攪拌30分鐘。在保持0-5℃下，於25分鐘內加入303.2ml三乙胺，然後在15分鐘內加入227.6g甲苯磺醯氯。在0-5℃下繼續攪拌1小時，然後在攪拌下於10分鐘內先加入200ml乙酸，然後加入500ml軟化水，期間溫度升至20-22℃，並在20℃下續攪拌15分鐘。減壓下以恆定體積(3.3l)蒸除二氯甲烷，並用軟化水替代它們，在20℃下攪拌2小時，然後分離，用軟化水洗滌，得到523g(溫重)3，4-二羥基-5[[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基]苯甲酸甲酯(3-甲苯磺醯基倍酸甲酯)。將所得潮溼產物溶於2.17l蘇打(2N)和2.17l二氯甲烷中。在20℃攪拌至溶解，然後在20℃下加入18g四丁基溴化銨，隨後再在20℃下於15分鐘內加入237ml硫酸二甲酯。反應介質在20-22℃下攪拌1.5小時。在20-22℃下加入78ml三乙胺並在20-22℃下攪拌過夜，繼之潷析並用400ml軟化水洗滌。往有機相中加入20ml純淨乙酸，繼之攪拌15分鐘，加入400ml軟化水，爾後潷析。首先在常壓下濃縮，然後在60℃外部溫度下於40mmHg下減壓濃縮合併的有機相至於。用400ml甲醇進行夾帶，然後將所得的無水提取物溶於600ml甲醇，加熱回流至產物完全溶解，繼之冷卻到0-5℃，在這一溫度下攪拌1小時。分離後，用200ml甲醇在-10℃下洗滌兩次，然後在40℃下減壓乾燥，得到330.4g 3，4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基]苯甲酸甲酯。將此粗產物用330ml甲苯重結晶。在-10℃下攪拌2小時後，進行分離，繼之用82ml甲苯洗滌兩次，冷卻到-15℃，然後在40℃下減壓乾燥，得到230.3g純淨預期產物。
步驟B3，4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基]肉桂酸a)將600ml甲苯冷卻到0℃，然後在0℃下加入202ml70％Vitride的甲苯溶液，並在0-2℃下於1小時內加入67.6ml嗎啉，溫度升至18℃。將如此得到的溶液立刻用於下一步驟中。
b)將200g步驟A中所得的3，4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基]苯甲酸甲酯和1400ml甲苯在20-22℃一起攪拌10分鐘至完全溶解為止。在10℃下於1小時內加入上面所得的試劑溶液。續攪拌1小時，溫度升至18℃。在10℃下於1小內加入預冷卻到10℃的200ml濃硫酸和1000ml軟化水的溶液。在20℃攪拌16小時，然後潷析有機相，用5×200ml軟化水洗滌，乾燥，過濾並用3×100ml二氯甲烷洗滌。如此得到的中間體醛溶液直接用於下一步驟中。
c)將上面得到的中間體醛溶液，200ml 2-甲基吡啶，120g丙二酸和20ml哌啶在70℃±2℃下一起加熱16小時(同時在常壓下除去二氯甲烷)。冷卻反應介質到20-22℃，在保持這一溫度下，於15分鐘內加入200ml濃鹽酸和400ml軟化水溶液。在20-22℃攪拌2小時後，冷卻到0℃，析出所形成的結晶，用軟化水洗滌，並在40℃下減壓乾燥，得到171.7g預期產物3，4-二甲氧基-5-[[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基]-肉桂酸。
製備例39，10-二甲氧基-8-羥基-2，3，5，6-四氫-苯並[e]薁-4(1H)-酮步驟A9，10-二羥基-8-[[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基]-2，3，5，6-四氫-苯並[e]薁-4(1H)-酮將30g按照製備例1或1a製得的2，3，5，6-四氫-8，9，10-三羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮，300ml四氫呋喃，60ml三乙胺和12.9ml硼酸三甲酯一起在20℃±2℃下攪拌1小時30分鐘。加入30g甲苯磺醯氯並在20℃±2℃下攪拌16小時，然後在20℃±2℃攪拌10分鐘，將反應介質傾入到攪拌著的900ml軟化水和159ml濃鹽酸的混合物中，然後加入90ml四氫呋喃和60ml二氯甲烷。在20℃攪拌所得溶液1小時，然後加入150ml二氯甲烷，並繼續攪拌15分鐘，繼之潷析，用2×75ml二氯甲烷再提取。合併的有機相用4×150ml軟化水洗滌，潷析並用75ml二氯甲烷再提取，在20毫巴壓力下減壓濃縮至蒸餾至50℃時停止，得到47.6g預期產物。
步驟B9，10-二甲氧基-8-[[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基]-2，3，5，6-四氫-苯並[e]薁-4(1H)-酮將47.6g上步所得產物，300ml二氯甲烷，300ml蘇打(2N)，0.6g四丁基溴化銨和30ml硫酸二甲酯在20℃下一起攪拌16小時。然後加入30ml三乙胺以分解過量的硫酸二甲酯，在20℃±2℃下進一步攪拌反應介質1小時，然後加入150ml軟化水，繼續攪拌15分鐘，隨後潷析。水相用2×75ml二氯甲烷再提取，合併的有機相依次用3×120ml軟化水和120ml N鹽酸以及3×120ml軟化水洗滌，合併有機相併用硫酸鈉乾燥，然後在20℃±2℃及攪拌下於1小時內加入120g矽膠(60目)，並在20℃下進一步攪拌1小時，接著過濾，用二氯甲烷洗滌並在50℃減壓濃縮至幹，得到47.4g預期產物。該粗產物通過用390ml乙醇重結晶純化，蒸餾出90ml乙醇後，在0℃±2℃下攪拌3小時。使之乾燥，用30ml乙醇在0℃下洗滌，然後在40℃減壓乾燥，得到41.1g預期產物(M.P.＝129℃)。
步驟C9，10-二甲氧基-8-羥基-2，3，5，6-四氫苯並[e]薁-4(1H)-酮向含10g步驟B所得的9，10-二甲氧基-8-(((4-甲基苯基)磺醯基)氧基)-2，3，5，6-四氫-苯並[e]薁-4(1H)-酮和100ml甲醇的懸浮液中依次加入4.5g碳酸鉀和10ml三乙胺。加熱回流反應介質1小時，加20ml乙酸酸化，然後加入20ml水。用二氯甲烷進行提取，水洗提取液，在40℃下減壓蒸除溶劑，得到5.7g預期產物。
製備例42，3，5，6-四氫-8-羥基-9-甲氧基-苯並[e]薁-4(1H)-酮和2，3，5，6-四氫-9-羥基-8-甲氧基-苯並[e]薁-4(1H)-酮以與製備例2步驟B、C、D、E和F等同的方式進行操作，但採用3-(3，4-二甲氧基-苯基)丙酸為起始原料，得到1.08g包含單羥基化產物混合物(8-OH/9-OMe和9-OH/8-OMe)的粗產物，將其通過矽膠色譜分離，使用環己烷/乙酸乙酯混合物(7/3)為洗脫劑。從而得到下述兩種位置異構體8-OH/9-OMe 0.494g Rf(環己烷/乙酸乙酯6/4)＝0.428-OMe/9-OH 0.041g Rg(環己烷/乙酸乙酯6/4)＝0.33製備例52，3，5，6-四氫-8-羥基-10-甲氧基-苯並[e]薁-4(1H)-酮和2，3，5，6-四氫-10-羥基-8-甲氧基-苯並[e]薁-4(1H)-酮以與製備例2步驟B、C、D、E和F等同的方式進行操作，但採用3-(3，5-二甲氧基苯基)丙酸為起始原料，得到1.428g包含單羥基化產物(8-OH/10-OMe和10-OH/8-OMe)和二羥基化產物(8-OH/10-OH)的混合物，然後通過矽膠色譜進行分離，使用環己烷/乙酸乙酯混合物(7/3)洗脫。
製備例62，3，5，6-四氫-9-羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮以與製備例2步驟B、C、D、E和F等同的方式進行操作，但採用3-(4-甲氧基苯基)丙酸為起始原料，得到0.448g預期產物。隨後採用三溴化硼進行脫甲基反應。
(Rf＝0.15環己烷/乙酸乙酯7/3)。
製備例72，3，5，6-四氫-8-羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮以與製備例2步驟B、C、D、E和F等同的方式進行操作，但採用10.0g 3-(3-甲氧基苯基)丙酸為起始原料。得到2.9g預期產物。隨後採用三溴化硼進行脫甲基反應。
(Rf＝0.15二氯甲烷/乙酸乙酯95/5)。
製備例8(DL)-4-溴-2-(苯基甲氧羰基氨基)丁酸甲酯將25g 2-氨基-4-丁內醯胺氫溴酸鹽的200ml乙酸溶液與24％氣態氫溴酸在密封容器中於120℃下一起攪拌18小時。冷卻反應介質到室溫，並恢復到大氣壓環境，然後減壓濃縮。將殘留物溶於200ml甲醇，然後通氫氯酸氣流2小時，期間保持溫度低於35℃。減壓蒸除溶劑，並將得到的2-氨基-4-溴丁酸甲酯再溶於250ml丙酮和100ml水中，隨後將此溶液用2N蘇打中和，然後緩慢加入35ml氯甲酸苄酯。攪拌48小時，繼之過濾，用乙酸乙酯提取，並減壓蒸除溶劑，殘留物通過矽膠層析(洗脫劑環己烷-乙酸乙酯7-3)，回收27.9g預期產物。M.P.＝90℃。
製備例94-溴-2-(叔丁氧基羰基氨基)丁酸甲酯取5.7g製備例8製備的2-氨基-4-溴丁酸甲酯在120ml甲醇中與24ml三乙胺和9g二碳酸二叔丁酯一起室溫下攪拌48小時。蒸除溶劑，將殘留物溶於水和二氯甲烷，繼之過濾，用二氯甲烷提取，再次蒸除溶劑，並矽膠層析所得殘留物(洗脫劑環己酮-ACOEt-TEA 7-3-0.5)，得到1.575g預期產物，Rf＝0.52。
製備例104-(3-嘧啶基)-1H-咪唑-1-丙醇將505mg乙醇鈉於12.5ml二甲基甲醯胺中混合，然後依次加入1g3-(1H-咪唑-4-基)嘧啶和0.64ml氯丙醇，並在55℃下攪拌16小時。隨後減壓蒸除溶劑，並層析所得殘留物(洗脫劑CH2Cl2-MeOH 98-2)，回收1.015g預期產物。
IR光譜(CHCl3)OH 3626cm-1+締合峰雜環1601，1578，1551，1499cm-1製備例11六氫-2H-1，3-二氮雜-2-酮腙將包含3.3g硝基胍，7ml水，3.47g碳酸鉀和5g二胺二鹽酸鹽的懸浮液在65-70℃下加熱1小時；加入10.5g鋅，然後在室溫下攪拌30分鐘，隨後加入2ml乙酸，再於40℃加熱全部反應物1小時，繼之過濾，然後依次加入3g氯化銨和4g碳酸氫鈉。用二氯甲烷進行提取，減壓蒸除溶劑，並通過矽膠層析所得殘留物(洗脫劑CH2Cl2-MeOH-NH4OH 8-4-2)，回收1.650g預期產物。
製備例123a，4，5，6，7，7a-六氫-2-(丙硫基)-1H-苯並咪唑一氫溴酸鹽將1g八氫-2H-苯並咪唑-2-硫酮和1.3ml溴丙烷在20ml乙醇中加熱回流至完全溶解。減壓蒸除溶劑，並將殘留物溶於少量二氯甲烷。然後加入異丙醚，再次減壓蒸除溶劑，並在異丙醚中重結晶，使脫水，並加以乾燥(收率95％)。
M.P.＝136℃。
實施例17-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫苯並(e)薁-8-基)氧基)-庚酸步驟A；7-(4-氧代)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫苯並(e)薁-8-基)氧基)-庚酸甲酯將含0.684g 2，，3，5，6-四氫-8-羥基-9，10-二甲氧基-苯並[e]薁-4(1H)-酮(製備例3)，12ml二甲基甲醯胺(DMF)，12ml四氫呋喃(THF)，0.7g碳酸鉀和0.835g 7-溴庚酸甲酯的懸浮液在40℃下攪拌4小時。減壓蒸發之後，通過矽膠層析所得粗產物，使用二氯甲烷(CH2Cl2)/丙酮混合物(95/5)洗脫。得到1.000g精製產物，為黃色油狀物。
Rf CH2Cl2/丙酮95/50.5IR(CHCl3)C＝O 1732cm-10Me 1438cm-1共軛酮 1641cm-1C＝C 1592cm-1，1557cm-1，1492cm-1+芳香骨架步驟B7-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-苯並(e)薁-8-基)氧基)-庚酸甲酯將含0.5g上一步驟A產物、5ml乙醇和0.330g氨基胍鹽酸鹽的懸浮液在室溫下攪拌48小時，減壓蒸除溶劑，將所得粗產物通過矽膠色譜純化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。從而得到0.466g純化產物，為白色泡沫形式。
Rf CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨80/20/40.8IR(Nujol)NH/NH23495cm-1，3155cm-1+締合峰C＝O 1731cm-1C＝N 1674cm-1C＝C 1625cm-1芳香骨架1595cm-1(F)NH/NH21534cm-1，1491cm-1步驟C7-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫苯並(e)薁-8-基)氧基)-庚酸將含0.44g上一步所得產物、5ml乙醇和2ml 1N蘇打的溶液在室溫下攪拌3小時，然後用2ml 1N鹽酸中和。減壓蒸發後，將所得粗產物通過矽膠色譜純化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。得到0.192g精製用甲醇重結晶的產物。
Rf CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨80/20/40.17NMR(D2O+1滴1N蘇打)3.92wt 2H CH2-O2.17t 2HCH2-COOH134m 4H
1.55m 2H中心CH2+CH2-C＝1.70m 4H2.50-2.90m 8H6.62s 1H芳香H73.64s，3H OCH33.73s 3H OCH3微量分析％計算值 C 62.86 H 7.47 N 12.21％實測值 C 62.9 H 7.5N 12.1以與實施例1步驟A、B和C等同的方式，採用2，3，5，6-四氫-8-羥基-9，10-二甲氧基苯並[e]薁-4(1H)-酮(製備例3)和不同的烷基化劑和G-NH2為起始原料進行操作，製備下列式(I)產物實施例24-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫苯並(e)薁-8-基)氧基)丁酸實施例34-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫苯並(e)薁-8-基)氧基)戊酸實施例45-((4-(((氨基)羰基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)戊酸實施例56-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)己酸實施例65-(9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-8-苯並(e)薁基)氧基)-戊酸實施例75-((4-(((氨基)硫代羰基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)戊酸實施例86-(4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-己酸實施例95-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-3，3-二甲基-4-氧代戊酸實施例105-(4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-3，3-二甲基-4-氧代戊酸實施例114-(4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-丁酸實施例124-((9，10-二甲氧基-4-((1，4，5，6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基)-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-丁酸實施例132-(4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-乙酸實施例143-(4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-丙酸 (1)二氯甲烷/甲醇/氨80/20/4
實施例155-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫苯並(e)薁-8-基)氧基)戊酸鹽酸鹽取86mg實施例3產物與2ml水和4l 0.1N鹽酸混合，數分鐘後，凍幹介質，得到91mg預期鹽。
實施例164-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-8，9-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-10-苯並(e)薁基)氧基)丁酸實施例175-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-8，9-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-10-苯並(e)薁基)氧基)戊酸如實施例1步驟A，B和C所述進行操作，但以2，3，5，6-四氫-10-羥基-8，9-二甲氧基-苯並[e]薁-4-(1H)-酮(製備例2)為起始物料。
實施例184-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-8，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-9-苯並(e)薁基)氧基)丁酸實施例195-((4-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-8，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-9-苯並(e)薁基)氧基)戊酸如實施例1步驟A，B和C所述進行操作，但以2，3，5，6-四氫-9-羥基-8，10-二甲氧基-苯並[e]薁-4-(1H)-酮為起始物料。
實施例204-((4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1，2，3，4，5，6-六氫-9-苯並(e)薁基)氧基)-丁酸步驟A4-(4-氧代)-1，2，3，4，5，6-六氫苯並(e)薁-9-基)氧基)-丁酸將含0.6g 2，3，5，6-四氫-9-羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮(製備例6)，12ml二甲基甲醯胺(DMF)，12ml四氫呋喃(THF)，0.7g碳酸鉀和0.7ml溴丁酸乙酯的懸浮液在室溫下攪拌過夜。減壓蒸發後，矽膠層析所得粗產物，使用二氯甲烷混合物(二氯甲烷/丙酮95/5)洗脫。這樣得到0.608mg純化產物，為黃色油狀物形式。
IR(CHCl3)C＝O 1728cm-1共軛酮 1641cm-1芳香C＝C 1610cm-1，1590cm-1，1569cm-1，1449cm-1步驟B4-((4-((4，5-二氫-1H-咪唑啉-2-基)亞肼基)-1，2，3，4，5，6-六氫苯並(e)薁-9-基)氧基)-丁酸乙酯將608mg上述步驟A的產物，10ml丁醇和600mg下述環狀氨基胍氫溴酸鹽(4，5-二氫-1H-咪唑啉-2-基)-肼，一同攪拌回流24小時，減壓蒸除溶劑，並將所得粗產物通過矽膠色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。得到0.604g預期產物。
IR(CHCl3)＝C-NH-3451cm-1C＝O 1728cm-1(酯)C＝N+C＝C+芳香基1627cm-1(F)，1568cm-1，1548cm-1，1497cm-1，1488cm-1步驟C7-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1，2，3，4，5，6-六氫苯並(e)薁-9-基)氧基)-丁酸將含0.604g前一步產物，8ml乙醇，5ml四氫呋喃和2ml 2N蘇打的溶液在室溫下攪拌4小時，然後加2ml鹽酸中和。減壓蒸發後，將粗產物通過矽膠色譜純化，用二氯甲烷(CH2Cl2)/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。得到0.298g用甲醇重結晶的純化產物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨80/20/4)0.2NMR(D2O+1滴1N蘇打)1.71(w)2H O-CH2-CH2-CH2-CO1.96(m)2H 位置2(環戊烯)的CH22.30(t)2H CH2-CO2.50-2.75 8H CH2-C＝3.45(ws)4H CH2-N＝
3.89(wt)2H Ph-O-CH2-C6.70(m)2HH10和H87.00(d，J＝8)H7實施例214-(4-((4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基)氧基)-丁酸操作如實施例20所述進行，但以0.856g 2，3，5，6-四氫-8-羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮(製備例7)為起始原料，得到0.299g預期產物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨80/20/4)0.27實施例225-((8-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-6，7，8，9，10，11-六氫-薁並(5，6-d)-1，3-苯並二氧雜環戊烯-4-基)氧基)-戊酸步驟A5-(((4-氧代)-9，10-二羥基-1，2，3，4，5，6-六氫-苯並(e)薁-9-基)氧基)戊酸乙酯1)保護惰性氣氛下，在10g 2，3，5，6-四氫-8，9，10-三羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮(製備例1)的100ml四氫呋喃溶液內加入4.42ml三甲氧基硼酸酯和20.4ml三乙胺，期間保持溫度在37-39℃之間，然後在室溫下攪拌反應混合物3小時。
2)烷基化和脫保護接著，加入9.7ml 5-溴戊酸乙酯，100ml二甲基甲醯胺和8.4g碳酸鉀，並在60℃下攪拌2天。然後加120ml水和50ml 36N濃鹽酸處理反應混合物，再攪拌1小時，然後加入乙酸乙酯，分離有機相和水相。隨後洗滌有機相，乾燥並減壓蒸發。所得粗產物通過矽膠色譜純化，用環己烷/乙酸乙酯混合物(70/30)洗脫。得到5.2g預期純淨產物。
Rf(二氯甲烷/甲醇95/5)＝0.82Rf(環己烷/乙酸乙酯70/30)＝0.23步驟B5-(((8-氧代)-6，7，8，9，10，11-六氫薁並(5，6-d)-1，3-苯並二氧雜環戊烯-4-基)氧基))-戊酸乙酯60℃下，將2.5g上一步產物，17ml二甲基甲醯胺，3.6g CsF和1.4ml二溴甲烷在惰性氣氛下一同混合1小時。過濾和甲醇衝洗後，進行減壓蒸發，並將所得粗產物通過矽膠色譜純化，用環己烷/乙酸乙酯混合物(85/15)洗脫。得到1.73g預期純淨產物。
(M.P.＝118℃)Rf(環己烷/乙酸乙酯80/20)＝0.25步驟C5-((8-((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-6，7，8，9，10，11-六氫-薁並(5，6-d)-1，3-苯並二氧雜環戊烯-4-基)氧基)-戊酸乙酯將551mg上步所得產物和467mg氨基胍鹽酸鹽在120℃一同混合過夜，然後進行色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。得到174mg預期產物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨80/20/4)0.98步驟D5-((8-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-6，7，8，9，10，11-六氫-薁並(5，6-d)-1，3-苯並二氧雜環戊烯-4-基)氧基)戊酸將274mg上步所得產物和1.86ml 1N蘇打溶液在室溫下一同混合1小時30分鐘，然後用1N鹽酸溶液中和混合物，並減壓蒸發。粗產物通過色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。得到141mg預期產物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨80/20/4)0.23NMR(DMSO)1.55-1.9(m) 4H O-CH2-CH2-CH2-CH2-CO1.55-1.9(m) 2H 位置2(環戊烯)的CH22.26(t) 2H CH2-CO2.65-3.00(m) 8H CH2-C＝4.07(t) 2H O-CH2-CH2-5.95(s) 2H -O-CH2-O6.61(m) 1H H8活動的H(m，寬) NH-C(＝NH)-NH2實施例235-((8-(((氨基)亞氨基甲基)亞肼基)-2，2-二苯基-6，7，8，9，10，11-六氫-薁並(4，5-e)-1，3-苯並二氧雜環戊烯-4-基)氧基)-戊酸如上一實施例所述進行操作，但以374mg上一實施例步驟A所得產物和0.19ml二苯基二氯甲烷為起始原料。得到198mg預期產物。
Rf(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨80/20/4)＝0.17實施例24O-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸步驟AO-[(4-氧代)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸甲酯室溫下，將0.6g 2，3，5，6-四氫-8-羥基-9，10-二甲氧基-苯並[e]薁-4(1H)-酮(製備例3)，10ml二甲基甲醯胺(DMF)，10ml四氫呋喃，1g碳酸鉀和0.867g如製備例8所述製得的(DL)-4-溴-2-(苯基甲氧基羰基氨基)丁酸甲酯一起攪拌過夜。減壓蒸發之後，矽膠層析粗產物，用二氯甲烷(CH2Cl2)/丙酮混合物(95/5)洗脫。由此得到1.166g精製產物，為黃色油狀物。
IR(CHCl3)C＝O 1740cm-1(sh.)，1721cm-1共軛酮1642cm-1芳香C＝C 1593cm-1，1559cm-1，1508cm-1，1493cm-1步驟BO-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)--9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸甲酯將539mg步驟A產物，15ml丁醇和600mg下述環狀氨基胍氫溴酸鹽(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)-肼，在120℃下一起攪拌24小時，然後減壓蒸除溶劑，並將粗產物通過矽膠色譜純化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。由此得到0.641g預期產物。
IR(CHCl3)＝C-NH- 3451cm-1+締合峰C＝O 1740cm-1(sh.)，1720cm-1(max)C＝N+C＝C+芳香骨架+醯胺II1667cm-1(F)，1606cm-1，1508cm-1，1490cm-1.
步驟CO-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸將含0.6g上一步所得產物、10ml乙醇和2ml 2N蘇打的溶液在室溫下攪拌2小時，然後用2ml鹽酸中和。減壓蒸發之後，將粗產物通過矽膠色譜純化，用CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨混合物(80/20/4)洗脫。這樣在用甲醇重結晶後得到0.349g精製產物。
Rf CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨80/20/40.37實施例25O-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基)-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸按與實施例24等同的方法進行操作，但其中使用0.428g 2，3，5，6-四氫-9-羥基-苯並[e]薁-4(1H)-酮(製備例7)為起始原料。得到245mg預期產物。
Rf CH2Cl2/甲醇(MeOH)/氫氧化銨80/20/40.5實施例26O-[4-[(1，2，3，4-四氫-6-嘧啶基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸步驟AO-[9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-[(1，4，5，6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基]-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸甲酯的一氫溴酸鹽如實施例24步驟B所述，以200mg如實施例24步驟A所述得到的產物在2ml丁醇中的溶液和74.5mg四氫-2(1H)-嘧啶酮腙一氫溴酸鹽為原料進行操作，並加熱回流16小時。隨後使反應介質恢復到室溫，用二氯甲烷進行提取，乾燥提取液，然後減壓蒸除溶劑，得到152mg預期產物。
步驟BO-[4-[(1，2，3，4-四氫-6-嘧啶基)亞肼基)-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸如實施例24步驟C所述，採用131mg上面步驟A所得產物在1.3ml乙醇和0.43ml N蘇打中的溶液進行操作。加入N鹽酸中和反應介質，然後蒸除溶劑。經過濾和乾燥後，得到78mg預期產物。M.P.＝172℃。
NMR光譜(CDCl3)1.90(m)(2H) 位置9的CH22.03(m) 中心CH22.36(m)(2H)2.60-3.00(8H) ＝C-CH2質子3.48(wm)(4H)＝N-CH2質子3.77(s)3.78(s)(9H) ＝C-OMe質子4.01(m)(1H)4.17 Φ-O-CH2
4.67(p) -C-CH-N-C＝514(ws) COO-CH2-Φ6.13(d) ＝C-NH-CH6.49(ws) H4≈7.36(m)(5H) Φ-C實施例27O-(9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-[(1，4，5，6-四氫-2-嘧啶基]亞肼基]-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸(2，3-二羥基丙基)酯步驟AO-[9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-[(1，4，5，6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基]-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸[(2，2-二甲基-1，3-二氧戊環-4-基)甲基]酯將0.3g如實施例26所述製得的產物在1ml二甲基甲醯胺和1ml二氯甲烷中的溶液、96mg 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽和68mg 1-羥基苯並三唑水合物冷卻到0℃。室溫下攪拌混合物30分鐘，加入0.06ml solketal，並繼續攪拌3小時30分鐘。加水稀釋反應介質，用二氯甲烷進行提取，將所得的0.6g粗產物進行矽膠色譜純化(洗脫劑CHCl2-MeOH 90-10)回收。得到0.352g預期產物。
IR光譜(CHCl3)NH 3400cm-1C＝O1745(sh)，1719cm-1C＝N，C＝C }芳香骨架，醯胺II} 1672(F)，1645，1597，1565(f)，1507，1492cm-1步驟BO-(9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-[(1，4，5，6-四氫-2-嘧啶基)亞肼基]-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸(2，3-二羥基丙基)酯將0.320g步驟A所得產物在3ml乙醇和1ml 2N鹽酸中於室溫下攪拌6小時。蒸發溶劑後，進行矽膠層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH-NH4OH80-20-4)，得到0.112g預期產物。
NMR光譜(CDCl3)1.88(m)(2H) }1.98 }中心CH2和位置9的CH2
2.36 }2.60-3.10(8H) ＝C-CH23.43(m)(4H) ＝N-N-CH23.79(s) }3.81 }Φ-OMe3.60-3.90 O-CH2-CH-O≈4.00-4.30 }COO-CH2-CH}Φ-O-CH2-CH24.64(m)(1H) ＝C-CH-N-C＝5.13(s) COO-CH2-Φ6.53(s) H47.20-7.38 Φ-C質子實施例28O-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺醯基]-DL-高絲氨酸步驟AO-(9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-氧代-8-苯並(e)薁基)-N-[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]-DL-高絲氨酸甲酯將4.1g按製備例3所述製得的產物和5g按製備例9所述製得的產物在50ml二甲基甲醯胺和50ml四氫呋喃中，於5g碳酸鉀和二甲氨基吡啶存在下，在室溫下攪拌65小時。然後減壓蒸除溶劑，殘留物通過矽膠色譜純化(洗脫劑CH2Cl2-丙酮95-5)，得到7.3g預期產物。
IR光譜(CDCl3)＝C-NH 3430cm-1C＝O 1744cm-1(甲酯)1710cm-1(NH-BOC)1648cm-1(共軛酮)芳香骨架+醯胺II 1593，1559，1493cm-1步驟BO-(9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-四氫-4-氧代-8-苯並(e)薁基)-DL-高絲氨酸甲酯的一鹽酸鹽將10ml氫氯酸的乙酸乙酯溶液分三批加到6g步驟A所制產物的10ml乙酸乙酯溶液中，然後在室溫下攪拌16小時。減壓蒸除溶劑，得到0.656g預期產物，該產物直接用於下一步驟中。
步驟CO-(9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-氧代-8-苯並(e)薁基)-N-[(8-喹啉基)磺醯基]-DL-高絲氨酸將上步所得的0.656g產物溶於5ml二氯甲烷，加入1ml三乙胺和0.638g 8-氯磺醯基喹啉，並在室溫下攪拌2小時。減壓蒸發溶劑後，進行矽膠層析(洗脫劑CHCl2-MeOH 95-5)，得到0.956g預期產物。
步驟DO-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺醯基]-DL-高絲氨酸甲酯將0.9g前一步驟A的產物，5ml丁醇和0.6g下述環狀氨基胍氫溴酸鹽(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)肼，一起在120℃攪拌16小時，然後減壓蒸除溶劑，得到0.786g預期產物，該產物直接用於下一步驟中。
步驟EO-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[(8-喹啉基)磺醯基]-DL-高絲氨酸將含0.786g上一步驟所得產物，5ml甲醇與2ml 2N蘇打的溶液在室溫下攪拌2小時，然後加2ml 2N鹽酸中和，並繼續攪拌10分鐘。減壓蒸發後，將所得粗產物通過矽膠色譜純化，使用CH2Cl2-甲醇-氫氧化銨混合物(80-20-4)洗脫。在經甲醇重結晶後得到0.438g預期產物。
Rf＝0.40(CH2Cl2-MeOH-NH4OH 80-20-4)。
NMR光譜(DMSO)1.81(ws) 位置9的CH22.40-3.20 ＝C-CH2質子3.35(w) ＝N-CH2質子，3.55(ws) ＝C-OMe質子6.63(ws) H47.58(dd) H′37.67(t) H′68.19(d)，8.29(d) H′5和H′78.45(d) H48.90(d) H2
7.31(ws) }7.97 } 活動的H10.40(f) }12.62}實施例29O-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高絲氨酸的一鹽酸鹽步驟A4-[[9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-氧代-8-苯並(e)薁基]氧基]-2-異氰酸基丁酸甲酯0℃下，將450mg實施例28步驟B所得的胺在10.2ml碳酸氫鈉飽和溶液和10.2ml二氯甲烷中攪拌10分鐘。然後在反應介質的有機相中加入204mg三光氣的2ml二氯甲烷溶液，攪拌10分鐘，然後用二氯甲烷提取，乾燥提取液，減壓蒸除溶劑，得到430mg預期產物，該產物直接用於下一步驟中。
步驟BO-[9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-氧代-8-苯並(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高絲氨酸將430mg步驟A所得產物的20ml二氯甲烷溶液冷卻到0℃，加入414mg如製備例10所制醇的10ml二氯甲烷溶液。使反應介質溫度恢復到室溫，攪拌48小時，然後減壓蒸除溶劑，殘留物通過氧化鋁層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH)，回收298mg預期產物。
步驟CO-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高絲氨酸的一氫溴酸鹽如實施例24步驟B所述，以277mg上面步驟B所得產物和164mg環狀氨基胍氫溴酸鹽的13ml丁醇的溶液為起始原料進行操作。經氧化鋁層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH 95-5)後，得到289mg預期產物。
IR光譜(CHCl3)C＝O 1746(sh) 1723(max)cm-1共軛體系}+芳香骨架 }1668，1625(F)，1599(sh)，1551，1509，1489cm-1+醯胺II }
OH 3618cm-1步驟DO-[4-[(4，5-二氫-1H-咪唑-2-基)肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]-N-[[3-[4-(3-吡啶基)-1H-咪唑-1-基]丙氧基]羰基]-DL-高絲氨酸的一鹽酸鹽在277mg上面步驟C所得產物的10ml乙醇中的溶液內加入0.3ml N蘇打溶液，攪拌30分鐘，再加入10ml水，然後使用N鹽酸酸化反應介質到pH2.5，減壓蒸除溶劑，殘留物通過矽膠層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH-NH4OH 40-10-2)，減壓蒸發濾液，將殘留物溶於異丙醚，濾出沉澱，乾燥後得到126mg預期產物。
NMR光譜(DMSO)1.78(m)(2H) }1.90-2.30(m)(2H)}3-CH21.60-2.90(m)(8H) CH2-C＝3.53(ws)(≈4H) N-CH2-CH2-N3.69(s)，3.71(s) CH3O-C＝3.90-4.20(m)(7-8H) CH2和CH6.73(s) H47.20(d，寬) CO-NH-CH-7.35(dd) H′58.04(d) H′48.37(wd) H′68.94(ws) H′27.72(s)，7.80(s) CH＝咪唑實施例305-[[4-[(4，5-二氫-4-氧代-1H-咪唑-2-基)亞肼基]-9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-8-苯並(e)薁基]氧基]戊酸室溫下，將300mg實施例3步驟A所得產物的6ml乙醇的溶液與61mg碳酸氫鈉和0.7ml溴乙酸乙酯混合。蒸除溶劑，矽膠層析殘留物(洗脫劑CH2Cl2-MeOH 95-5)，得到139mg中間體乙基酯。取110mg該酯與1ml乙醇在0.5ml 2N蘇打存在下室溫混合2小時。採用2N鹽酸中和反應介質後，濾出所形成的沉澱物，乾燥，回收44mg預期產物。
NMR光譜(DMSO)
≈1.73(m)(6H) 中心CH2和位置9的CH22.30(t)(2H) ＝C-CH2(鏈)2.30-3.20 ＝C-CH23.73(s)，3.75(s)Φ-OMe3.83(ws)＝C-N-CH2-C＝4.02(t) Φ-O-CH26.76(s) H47.20(ws)(1H)}8.28(ws)(1H)}活動的H12.04(1H) }實施例31O-[9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-[(4，5，6，7-四氫-1H-1，3-二氮雜-2-基)亞肼基]-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-D-高絲氨酸將1g實施例24步驟A所制產物的5ml丁醇溶液與0.9g製備例11所制的環狀氨基胍在130℃下一同混合16小時。減壓蒸發溶劑，殘留物通過矽膠層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH 90-10)，得到0.8g中間體酯。然後將該產物在3ml甲醇中與2ml 2N蘇打在室溫下一起攪拌1小時30分鐘。採用2N鹽酸中和反應介質後，減壓蒸發溶劑，殘留物再通過矽膠層析(洗脫劑CH2Cl2-MeOH-NH4OH 90-15-2)，回收0.22g預期產物。
實施例32O-[9，10-二甲氧基-1，2，3，4，5，6-六氫-4-[(3a，4，5，6，7，7a-六氫-1H-苯並咪唑-2-基)亞肼基]-8-苯並(e)薁基]-N-[(苯基甲氧基)羰基]-DL-高絲氨酸如實施例24步驟B和C所述，以200mg實施例24步驟A所制產物和176mg如製備例12所制的環狀氨基胍為原料進行操作。回收102mg中間體酯，其中取100mg該中間體進行皂化反應，得到59mg預期產物。
Rf＝0.24(CH2Cl2-MeOH-NH4OH 85-15-3)。
藥物組合物製備相應含下列組分的片劑-實施例1產物 50mg-片劑用賦型劑(滑石，澱粉，硬脂酸鎂)SQ補加至120mg
本發明產物的藥理學研究1-研究本發明產物對玻連蛋白/玻連蛋白受體(ανβ3)結合的抑制作用方案用100μl人玻連蛋白溶液(2μg/ml)(參見Yatohgo等，Cell.，Structure and fraction 13281-292(1988))(用塗布緩衝液稀釋)在4℃下塗布MaxiSorp 96-孔板過夜。
第二天，吸去孔內物，然後在溫和攪拌下室溫固定配體(玻連蛋白)1小時(參見固定緩衝液)。
洗滌孔內物六次(參見洗滌緩衝液)，然後依次向各孔中加入-40μl培養緩衝液，-10μl受試產物稀釋液，(產物用50/50 DMSO-H2O稀釋)-50μl人ανβ3受體(參見Pyteal等酶方法(Methods Enzymol)(1987)144475)(用培養緩衝液稀釋，稀釋度根據受體組以及配體調整)。
在溫和攪拌下，將配體，人ανβ3受體和受試產物在室溫下培養3小時。
再次洗滌孔六次，然後在100μl抗體4B12-HRP，偶聯於過氧化物酶的抗體存在下於室溫溫和攪拌培養2小時(其中的4B12-HRP抗體用培養緩衝液稀釋，稀釋度根據受體組加以調整)。
洗滌孔六次，然後藉助過氧化物酶展示藥盒(TMB MicrowellPeroxidase Substrate System KirkegaardRef.Cat.50-76-00)測試配體-受體結合。
這種藥盒包含一瓶底物(3，3′，5，5＇-四甲基聯苯胺，0.4g/l)和一瓶B(0.02％H2O2的檸檬酸鹽/檸檬酸緩衝液溶液)。臨用時將一體積A液與一體積B液混合，然後以100μl/孔量分配反應混合物。對於玻連蛋白/ανβ3進行12小時酶促反應，然後加入100μl 1M磷酸終止培養。在450nm處測量光密度。
緩衝液-塗布緩衝液碳酸鹽0.05M，NaOH pH9.6-固定緩衝液含0.5％BSA的PBS(pH7.4)
-洗滌緩衝液含0.05％吐溫20的PBS(pH7.4)-培養緩衝液·50mM TRIS pH7.4·0.5％BSA0.05％吐溫20·1mM MnCl2·50μM CaCl2·50μM MgCl2·100mM NaCl.
結果表示繪製人玻連蛋白結合的百分數作為每一受試產物濃度對數的函數曲線。
對於每一產物，按下式求出其IC50IC50＝(BO+Bmin)/2BO＝無任何產物存在下的最大結合Bmin＝在最高濃度產物存在下的最小結合。
2.-小鼠顱蓋試驗原理對妊娠雌性小鼠注射示蹤物劑量45Ca(CaCl2)，以便通過測量新生小鼠顱骨蓋釋放的45C來研究骨吸收。
目的體外研究分子對骨吸收的活性。
產物1)受試產物賦型劑DMSO，H2O/BSA(0.1％)劑量可變(篩選10μM)2)對比產物鋸鱗血抑肽(參見.H-9010-BACHEM)賦型劑H2O/BSA劑量10μM3)放射性示蹤物CaCl2水溶液形式45Ca-參見CES3 AMWESHAM或NEZ-013 NEN.
賦型劑生理血清劑量25μCi/小鼠/0.4ml培養基補加有0.1％BSA和盤尼西林/鏈黴素的含酚紅(參見041-01535M/GIBCO)CMRL 1066。
方法1)對妊娠小鼠(OF1，品系瑞士)注射45Caa)製備標記溶液將190μl鈣母液(2mci/ml)加到6ml生理血清中。
b)注射在如妊娠的第17天，通過靜脈途徑對小鼠注射400μl上述溶液，即25μCi/小鼠。
2)去除組織(顱骨蓋)新生小鼠出生後第6天，斷頭處死，然後取頭顱，沿著後頸到前額切開皮膚。用剪刀剪切出顱骨蓋，並利用鑿沿頂骨將顱骨切成兩個完全等同的半顱蓋(一個位於左面，另一個位於右面)。將其中的一個用作對照，而另一個則用於測試受研究產物。
3)「衝洗」相將每一半顱蓋置於24孔板(其中孔內含有1ml培養基)的孔內100μm聚乙烯和nylex支持體上，以避免與孔底部完全接觸。24小時後，將載有顱蓋的聚乙烯支持體移入到含1ml新鮮培養基和受試產物或它們的溶劑的新24-孔板中。從第一塊板的各孔中取出200μl培養基，進行第一次放射性計數(A值)。
這種培養基變化使得與移出有關的機械應力消除。
4)再「吸收」相將組織與研究產物接觸48小時後，從每孔中取出200μl培養基進行計數(B值)，以測定在所謂的再吸收相期間從培養基中釋出的45Ca量。
然後將顱蓋在1ml 5％三氯乙酸中完全脫去礦物質。消化後再移出200μl進行計數以測定骨中剩餘的鈣量(C值)。
結果表示按照下式方程，計算每半顱蓋的骨吸收百分數
％骨吸收＝dpm B/dpm(A+B+C)×100dpm A+B+C的總和表示移出當天每塊骨部分中45Ca的摻入量。
為測量產物的效果，對於每一點，計算處理孔與相應的對照孔的骨吸收百分數之比。如果產物抑制骨吸收，則會發現稱作吸收指數的數值在0到1之間，反之，如果產物加強骨吸收，則上述數值＞1。然後計算每種產物的6個指數的平均值(因每組6個點)，得到每種產物的一個指數。如果用1減去此指數值，便得到產物的抑制率，也可以表示成百分率形式。
此外，通過比較點/點再吸收指數，進行統計學處理(Student T-檢驗)。
結果
權利要求
1.下述通式(II)的化合物的製備方法， 其中R2、R3、R4和R5為氫原子且OH位於8、9或10位上，其特徵在於，(i)使式(a)的化合物 其中O-(Alk)位於烷基羧基的間或對位，且Alk代表衍生自含有1-12個碳原子的飽和或不飽和、直鏈、支鏈或環狀非芳烴的基團，Alk基團可以是取代或未取代的，與滷化劑反應，得到相應的醯基滷，(ii)將所得到的醯基滷與式(b)試劑反應 其中R(I)和R(II)相同或不同且代表含1-6個碳原子的烷基，或者R(I)和R(II)與它們所鍵鏈的氮原子一起表示任選含有另一個選自O和N雜原子的5或6元飽和或不飽和雜環，得到式(c)化合物 (iii)使所得式(c)化合物與滷化劑反應，得到式(d)化合物 其中Hal1代表滷原子，(iv)使所得的式(d)化合物與路易斯酸反應，得到式(e)化合物 (v)將所得式(e)化合物與脫烷基化試劑反應，得到式(IIF)產物，即預期的式(II)單取代產物
2.下述通式(II)的化合物的製備方法， 其中R2代表OAlk基團或O-(CH2)0-3-Ar基團，其中Alk的定義同權利要求1，Ar代表含有6-18碳原子的碳環芳基，Ar可以為取代或未取代的，R3、R4和R5為氫原子和OH，且R2位於8、9或10位上，其特徵在於，將式(a』)化合物 其中R2和O-Alk位於烷基羧基的間或對位上，依次進行權利要求1中的反應(i)、(ii)、(iii)、(iv)和(v)，得到式(IIG)產物，即預期的式(II)雙取代產物
3.下述通式(II)的化合物的製備方法， 其中R2和R3代表O-(Alk)或O-(CH2)0-3-(Ar)基團，其中Alk和Ar的定義同權利要求1，R4和R5為氫原子，OH位於9位上，其特徵在於，使式(IIA)化合物 與脫烷基化劑反應，以得到式(IIB)化合物 隨後使式(IIB)化合物或者在鹼性介質中與二醇保護劑反應，以便選擇性得到式(IIC)化合物 其中P表示二醇保護劑的剩餘部分，接著使該化合物依次與酚保護劑、二醇的脫保護劑、烷基化劑以及酚的脫保護劑反應，以得到式(IID)化合物，即OH位於8位上的三取代的式(II)化合物 或者依次與酚保護劑、烷基化劑和脫保護反應，以得到式(IIE)化合物，即OH位於9位上的三取代的式(II)化合物
4.下述通式(II)、(IIIa)、(IIIb)和(IIIc)的化合物 其中R1代表-C≡C-[A]-[B]-COR6，-CH＝CH-[A]-[B]-COR6，-(CH2)2-[A]-[B]-COR6，-O-[A]-[B]-COR6，-CH2CO-[A]-[B]-COR6基團，-[A]-代表-衍生自含1-12個碳原子和1-6個選自氧、氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈結構的二價烴基，-或衍生自含1-12個碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無環烴的二價基團，[B]代表苯基，CH[Z]基團，或單鍵，Z代表氫原子，下列基團之一(D)0-6-NRaRb，(D)0-6-NH-SO2-Rc，(D)0-6-NH-CO2-Rc，(D)0-6-NH-CO-Rc，(D)0-6-NH-SO2-NH-Rc，(D)0-6-NH-CO-NH-Rc，(D)0-6-CO2-Rc，(D)0-6-SO2-Rc，(D)0-6-CO-Rc或(D)0-6-Rc，其中(D)0-6表示衍生自含有0-6個碳原子的飽和或不飽和、直鏈或支鏈無環烴的二價基團，Ra、Rb和Rc代表氫原子；(CH2)0-3-Ar基，其中Ar代表含有6-18個碳原子的碳環芳基；(CH2)0-3-Het基，其中Het代表衍生自含有1-9個碳原子和1-5個選自氧，氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和、芳族或非芳族雜環的基團；(CH2)0-3-Alk基，其中Alk代表衍生自含有1-12個碳原子的飽和或不飽和、直鏈、支鏈或環狀非芳烴的基團，基團Het、Ar和Alk可以為未取代的或為取代的，或者Ra和Rb還可以與它們所連接的氮原子一起表示任選含有1個或多個選自氧，氮或硫原子的雜原子的飽和或不飽和芳族或非芳族含氮雜環，該基團可以是取代的或未取代的，-R6代表羥基，O-Alk，O-Ar，NH2，NH-Alk，N(Alk)2基團或L或D胺基酸的剩餘部分，Alk和Ar的定義同上，且為取代或未取代的，-R2和R3相同或不同，或者代表氫原子，O-Alk基或O-(CH2)0-3-Ar基，其中Alk和Ar的定義同上，或者R2與R3一起形成-O-(CRdRe)n-O-型環，其中n為整數1-5，Rd和Re各自獨立表示氫原子，含有1-6個碳原子的烷基，或苯基，-R4代表氫原子，滷原子，下列基團之一氨基、硝基、氰基、CF3、含有1-12個碳原子的醯基或醯氧基、烷基、鏈烯基、炔基、烷硫基、烷氧基、烷基氨基、二烷基氨基、二烷基氨基烷基、二烷基氨基烷氧基，其中術語烷基包含1-6個碳原子，-R5代表氫原子，滷原子，O-Alk基團或O-(CH2)0-3-Ar基團，其中的Alk和Ar如上定義，但不包括下式(IIc)的化合物 其中P表示二醇保護劑的剩餘部分，也不包括下述的化合物-2，3，5，6-四氫-9，10-二甲氧基-8-羥基-苯並[e]奧-4(1H)-酮，-2，3，5，6-四氫-8，9-二甲氧基-8-羥基-苯並[e]奧-4(1H)-酮。
全文摘要
本發明公開了式(I)化合物及其酸和鹼加成鹽和它們的酯，其中R
文檔編號C07B61/00GK1401621SQ0214126
公開日2003年3月12日 申請日期2002年6月27日 優先權日1996年3月20日
發明者S·貝爾納德, D·卡尼爾託, J·F·古爾維斯特, J·G·託伊施, J·克諾勒, H·U·斯蒂爾茲, V·維納, S·C·伯達賴, T·R·加德克, R·S·麥多維爾, R·M·皮蒂 申請人:赫斯特·馬裡恩·魯索公司, 吉寧特有限公司