天然動物香料麝鼠香活性組分、製備工藝及其用途的製作方法

2023-08-05 12:56:51 2

專利名稱：天然動物香料麝鼠香活性組分、製備工藝及其用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及天然動物香料麝鼠香活性組分、製備工藝及其用途，更確切的說，是通過分子修飾加工工藝從麝鼠香囊分泌物中提取麝鼠香活性組分。
背景技術：
麝鼠香是四大名香之後通過多年的研究發現的又一珍貴的天然動物香料新資源。天然動物香料的資源十分匱乏，其數量比例與植物香料和合成香料極不協調，資源極為稀少。天然麝香為林麝和馬麝香腺囊所分泌，生產的國家也很少，每隻產香也僅有15克左右。靈貓香為大、小靈貓的香腺囊的分泌物，靈貓在世界上的數量和香的產量也很少。河狸香更是有名無實。龍涎香為大海中抹香鯨的腸道排出，是一種漂浮不定的資源。可見天然動物香料的資源種類甚少，數量也極為有限。即使在這種情況下，麝鹿、靈貓和河狸這些動物都因瀕臨滅絕而被國內外有關組織列為保護動物，其產品麝香、靈貓香和河狸香也被嚴禁使用。使得本來就十分缺乏的珍貴天然動物香料資源少得不能再少，形成了國內外的諸多以天然動物香料生產各類產品的廠家沒有原料生產其相應產品的特殊歷史階段。而麝鼠香則是由成齡雄麝鼠的香腺囊分泌，每隻年產香量達到2.65±0.76克。麝鼠年產2-3胎，胎產仔6隻左右，是一種繁殖速度快、飼養成本低的產香動物。麝鼠香天然動物香料新資源的利用無疑為世界提供了充足的天然動物香料來源。麝鼠香天然動物香料可以廣泛地應用於日用化工、菸酒和食品及服飾等領域的調香。麝鼠香在醫藥上應用也更為廣泛，有抗炎、促生長、降低心肌耗氧量，有防治腦血栓、脈管炎、冠心病及心臟負擔過重等多方面的活性。
通過分子修飾加工技術，採用酶促熱生產新工藝加工的麝鼠香天然動物香料，其產品為淺黃色油狀液體，含有環十五酮、麝香酮、9-烯環十七酮、9-烯環十七烷醇等31個成分，麝鼠香的相對密度(20/20℃)0.9080~0.9060。折光指數(20℃)1.4800~1.5000。酸值(以mg·KOH/g計)≤4。具有典型的動物氤氳香氣，氣息清靈、留香持久、香氣純正。當麝鼠香稀釋1000倍時仍可嗅辯到，在室溫下可長期放置，質量穩定，改變了由於香腺分泌物容易變質、不穩定和香氣不足不能直接作為香料應用的狀況。廣泛應用於日化、香料工業、醫藥、食品保健和菸酒服飾等行業及領域。
對麝鼠香進行較系統的評價，先後研究了麝鼠香的化學成分和藥理作用，麝鼠人工活體取香及產品利用、麝鼠香治療冠心病的活性組分及機理、麝鼠香主要化合物分泌時期及泌香規律、麝鼠香香料新產品研究、麝鼠香體外細胞分泌及麝鼠種源基地建設及繁殖配套技術。研究發現，麝鼠香含有大環醇類、有機醛類、烯類及酮、脂、酯等成分。麝鼠香的活性成分具有抗炎、促生長、降低心肌耗氧量、有防治腦血栓、脈管炎、冠心病及心臟負擔過重等多方面活性。我國在麝鼠的研究領域居世界領先地位。中國農業科學院特產研究所從1984年從事麝鼠香的研究，先後承擔了吉林省科技廳下達的「麝鼠人工活體取香及利用」、「麝鼠香主要化合物分泌時期的研究」、「麝鼠種源基地建設及繁殖配套技術研究」、「麝鼠香料新產品研究」、「麝鼠香治療冠心病的活性成分研究」、「麝鼠香體細胞分泌麝鼠香的研究」等多項課題。此外，完成了吉林省農委下達的「麝鼠香吉林省地方標準」(標準號為DB 22/T 1015-2003)，已於2003年發布。這些研究為麝鼠香天然動物香料的產業化生產提供了較堅實的基礎。
建立麝鼠香的生產基地，創辦麝鼠香香料的加工廠，發展網絡生產，為振興世界天然動物香料資源做出貢獻。麝鼠香廣泛應用於醫藥、日化、食品及菸酒服飾等行業的調香及其產品的生產，建立麝鼠養殖和麝鼠香天然動物香料的新產業，將推動麝鼠的毛皮加工業、飼料加工廠，為社會提供新的就業門路。

發明內容
本發明的目的在於提供一種麝鼠香的活性組分，所述的麝鼠香活性組分含有環烷酮類、不飽和脂肪酸及其酯類、環烷醇類、有機醛類及烯類化合物，具有良好的生物活性，而且易於儲存，毒性小，無刺激作用。
本發明另一目的在於提供一種麝鼠香活性組分的製備工藝，所述的工藝簡單易行，產品質量穩定，產率高，適合規模化工業生產。
本發明的再一目的在於提供一種麝鼠香活性組分的用途。
本發明提供一種麝鼠香活性組分，其特徵在於包含七個碳到二十一個碳的環烷酮類、脂肪酸及其酯類、三個碳到三十三個碳的環烷醇類、醛類和烯類成分。
本發明所述的麝鼠香活性組分的含量為C7-C21的環烷酮類成分 0.01％-21％C7-C21的脂肪酸及其脂類 0.01％-16％C3-C33的環烷醇類成分 0.1％-30％C3-C33的醛類成分 0.01％-20％C3-C33的烯類成分 0.01％-20％。
本發明採用人工活體取香採集麝鼠香腺分泌物，採集的麝鼠香分泌物經過如下加工工藝獲得天然動物香料麝鼠香活性組分1)麝鼠香腺囊分泌物加入一倍量的胰蛋白酶在-10℃-120℃溫度下進行反應3-40小時，得混合液；2)加入混合液一倍量的1，3丙二醇或丙酮，充分混合，靜置1-73小時；3)混合液2000轉/分離下層和上層溶液，加入高錳酸鉀1-50mg反應0.5-100小時；4)用0.8-10倍量活性碳靜置1-36小時，除去高錳酸鉀；5)離心後置於-10℃-100℃溫度下，用1，3丙二醇萃取次數為1-8次，每次加入溶液量為3-10倍，再除去溶劑所得麝鼠香活性組分為50-90％。
本發明的麝鼠香活性組分用薄層層析、紫外光譜、紅外光譜、氣相色譜、氣-質譜儀等分析，麝鼠香活性組分主要化學成分見表1。
表1 麝鼠香的主要化學成分

本發明還提供了麝鼠香活性組分在製藥、食品、日用化工、菸酒服飾中的用途。
本發明所述的活性組分在製備治療心肌缺血、缺氧、冠心病、脈管炎及抑制血小板聚集和抑制血栓形成的藥物中應用。
本發明所述的活性組分為天然動物香料作為留香劑和定香劑的用途。
本發明所述的麝鼠香活性組分作為藥品、食品，可以製成酊劑、軟膠囊、滴丸、噴劑和片劑等劑型，服用方便。
本發明對所述的麝鼠香活性組分的藥理活性的研究結果發現1、小白鼠ip麝鼠香120mg/kg在促進體重增長的同時，還能促進前列腺促精囊，免疫器官胸腺和脾臟的發育，說明麝鼠香促進動物生長是多方面的。
2、麝鼠香具有明顯的促進肝臟中SOD的活性，提高清除因脂質過氧化產生的超氧負離子的能力，阻止過氧化脂質丙二醛的形成，減慢細胞內的脂質過氧化反應過程，顯示出較強的抗衰老活性，麝鼠香的抗衰老活性呈現明顯的量效關係，即口服120mg/Kg比口服60mg/Kg和30mg/Kg的抗衰老明顯。
3、麝鼠香具有非常明顯的穩定內環境的作用，主要體現在麝鼠香(12mg10ml試管)能對抗在0.4％低滲NaCl和0.8％的高滲NaCl溶液的去纖血溶血。通過腹腔注射麝鼠香12mg 8天，又能對抗紅細胞在0.45％NaCl溶液的體內抗溶血作用。對抗紅細胞膜破裂，穩定紅細胞膜的作用顯著。
4、麝鼠香抗溶血活性研究表明，麝鼠香可對抗0.4％-0.8％梯度的低滲和高滲溶液的溶血作用，在極低滲0.35％和0.30％僅呈現微溶血。麝鼠香具有極明顯的穩定紅細胞的活性。
5、麝鼠香對麻醉犬的藥理活性研究結果表明，麝鼠香能降低心肌耗氧量，減少血氧的利用，降低血壓，減慢心率，增加冠脈血流量，對臨床治療心臟負擔過重有良好的應用前景。
6、麝鼠香具有抗炎、抑菌的藥理活性。
7、麝鼠香通過毒理實驗，麝鼠香毒性小，無刺激作用，使用安全。
通過以上研究可以得出本發明的優點在於1、本發明提供了可代替麝香的天然動物香料麝鼠香活性組分，從而確定麝鼠香的醫藥用途，開拓了一個新的天然動物香料新資源。
2、本發明製備的麝鼠香安全無毒，無刺激，可長期室溫儲存，質量穩定，藥理活性方面強於麝鼠香腺分泌物，預示著其有很好的應用前景。
3、本發明原料來源豐富，製備工藝簡單，可製作成片、丸、噴劑、膠囊等劑型，使用方便。
4、本發明單方配製成藥物具有抗炎、耐缺氧、降低心肌耗氧量、減少血氧的利用、降低血壓、減慢心率、增加冠脈血流量以及抗衰老、抗凝血和溶栓等多種活性，有利於防治冠心病、心臟肥大、心臟負擔過重以及防治腦血栓、脈管炎等危重疾病。
5、臨床試驗表明，本發明製備的天然動物香料麝鼠香口服見效快，無毒副作用。
6、香腺分泌物為乳白色粘稠物，自然存放容易變質和變色，香氣較淡，有尿味，不能直接作為天然動物香料應用。本發明通過香腺分泌物的二次加工即分子修飾的技術工藝研製出麝鼠香活性組分。本品呈淺黃色流狀液體。相對密度(25/25℃)0.9084。折光指數(20℃)1.4851。酸值(以mg·KOH/g計)3.3。具有典型的動物氤氳香氣，香氣清靈、柔和、留香持久、頭香稍帶酯類的果香，香氣較純正。當麝鼠香香料稀釋1000倍時仍可嗅辯到，香氣較強。而且在麝鼠香腺分泌物含麝香酮基礎上將飽和脂肪酸變成不飽和脂肪酸，去掉了無作用的蛋白質，增加了其抗衰老、清除自由基、降低心肌耗氧量、減少血氧的利用、降低血壓、減慢心率、增加冠脈血流量、抑抑因栓形成、增強抗炎作用，縮短戊巴比妥鈉的睡眠時間、促進生長發育等治療作用。
7、利用麝鼠香腺分泌物作為藥物和留香劑，必須通過本發明的製備工藝才能起到其應有的作用和保證日化用品的芳香作用，而且只有通過本發明的製備工藝製備的麝鼠香才能達到麝鼠香標準。
本發明所述的製備工藝簡單易行，產品質量穩定，產率高，適合規模化工業生產。採用本發明製備的麝鼠香活性組分含有大量的不飽和脂肪酸，增加了其生物活性，適合於作為天然藥物藥材及香料，經大量實驗證明麝鼠香活性組分不僅具有抗炎、抗衰老和抑菌等藥理活性，而且在心血管方面也有很好的藥理活性，它能顯著降低心肌耗氧量、減少血氧的利用、降低血壓、減慢心率、增加冠脈血流量以及抗衰老、抗凝血和溶栓等，有利於防治冠心病、心臟肥大、心臟負擔過重以及防治腦血栓、脈管炎等危重疾病。同時麝鼠香作為新的天然動物香料可廣泛應用於日用化工、食品、菸酒服飾的調香。尤其麝鼠香活性組分在化妝品工業中可作為留香劑和定香劑。而且麝鼠香活性組分無毒副作用，無刺激，室溫下可長期保存，質量穩定，易於儲存，可替代麝香、靈貓香、靈涎香及河狸香成為新的天然動物香料及藥物藥材。
具體實施例方式
以下通過試驗例來進一步闡述本發明所述活性組分的有益效果。
試驗例1 本發明所述的天然動物香料麝鼠香活性組分的藥理實驗。
一、麝鼠香的抗衰老活性1、麝鼠香對雄性幼年小鼠生長的影響取雄性小白鼠24隻，體重11.75±2g，分三組，對照組和麝鼠香組各9隻，丙酸睪丸素組6隻。實驗期餵機制飼料塊、葵花籽，飲水隨意攝取。3組小白鼠分別ip麝鼠香120mg/Kg，丙酸睪丸素6.0mg/Kg和生理鹽水5.0ml/Kgo連續給藥13天，於給藥後第3、6、8、10和13天稱體重。結果見表2。
表2 麝鼠香對未成齡小白鼠體重增長的影響(x±SE)

注*p＜0.05**p＜0.01 ***P＜0.001與對照組比較，下同。
表2可見，ip麝鼠香第6天，小白鼠體重較對照組有所增加，第8～13天，體重增長迅速，與對照組比較，差異顯著，P＜0.01。其作用強度與ip丙酸睪丸素6.0mg/Kg相似。
2、麝鼠香對雄性幼年小白鼠前列腺——貯精囊及睪丸重量的影響將試驗1中各組小鼠稱重後，斷頭處死，摘取前列腺——貯精囊、睪丸。胸腺和脾臟稱重，結果見表3。
表3 麝鼠香對未成齡小鼠各器官發育的影響(x±SE)

3、麝鼠香對肝組織中超氧化歧化酶活性及丙二醛含量的影響取各組小白鼠肝組織測定超氧化物歧化酶的活性。實驗結果見表4。
表4 鼠香對肝組織中超氧化歧化酶活性及丙二醛含量的影響(x±SE)

表4可見，麝鼠香三個劑量組對小鼠肝臟超氧化物歧化酶的活性均有不同程度的增強作用，尤以ip麝鼠香120mg最強(P＜0.01)，其它兩組亦顯示出增強的趨勢，顯示出明顯的量效關係。
麝鼠香也有較明顯地降低丙二醛的含量作用，同時也顯示出了量效關係。
二、麝鼠香對小白鼠紅細胞膜的穩定作用
1、麝鼠香對穩定小白鼠紅細胞膜的作用腹腔注射麝鼠香12mg/Kg，連續給藥8天，對照組靜脈注射生理鹽水5.0ml/Kg。於末次給藥後1小時，抽取心臟血0.2ml製備成2％紅細胞懸液，取0.2ml放至0.45％氯化鈉溶液中，倒置2次，2000×g離心2min，取上清液於420nm測OD值，以OD值評價麝鼠香對小白鼠紅細胞膜的保護作用，結果見表5。
表5 麝鼠香對小白鼠紅細胞膜的保護作用組別OD值(x±SE)

表5結果可見，iv麝鼠香0.4mg，可明顯保護小鼠紅細胞膜的作用。
2、麝鼠香的抗溶血活性取10支試管，分別加入0.30％、0.35％、0.40％、0.45％、0.50％、0.55％、0.60％、0.65％、0.70％和0.80％的不同低滲和高滲濃度的氯化鈉溶液，於每支試管內放入0.2％去纖血0.1ml，加入12mg麝鼠香，觀察麝鼠香對抗體外溶血的活性。
結果表明，麝鼠香具有極強的抗溶血活性。它可以對抗0.4％至0.8％的不同梯度的低滲和高滲溶液的溶血作用，在極低滲0.35％和0.30％僅呈現微溶血。可見，麝鼠香具有極明顯的穩定細胞膜的活性。
試驗例2 本發明所述的麝鼠香活性組分的毒理實驗樣品麝鼠香腺分泌物為吉林省特產研究所麝鼠香香料新產品研究課題組提供，採集時間為6-8月份，採用人工活體取香的方法(陳玉山等1996)，採集後放置冰箱(-18℃)貯藏。
麝鼠香香料產品為麝鼠香腺分泌物經過分子修飾(二次加工)製備的產品，由吉林省物產研究所提供。
實驗動物家兔，雌雄兼用，體重(2.5-3.0Kg)。豚鼠，雌雄兼用，體重250-300g。遠交系昆明種小白鼠，雌雄兼用，體重20-24g。由吉林省白求恩醫科大學實驗動物中心提供。
方法與結果1、香腺分泌物及麝鼠香香料產品對小鼠皮膚毒性的影響取小白鼠70隻，雌雄各半，體重20±2.0g，隨機分成7組，每組10隻，動物穩定兩天，第一組為空白對照組，給小白鼠塗抹同體蒸餾水。第2、3、4組分別產香腺分泌物高、中、低濃度組，分別給各組每隻小鼠塗抹香腺分泌物和麝鼠香香料。分組後的動物背部除毛，用日本脫毛劑(協和產業株式會社)脫毛，約2-2.5cm，飼養三天，按各組及不同濃度塗抹，見表6。分別塗抹30天，觀察小白鼠塗抹處皮膚變化及活動情況，並記錄。實驗後，動物繼續穩定5天，對各組小白鼠進行皮膚破皮實驗，將上述分組小鼠，在除毛處中心用手術剪刀剪開5mm直徑切口，造成皮膚破皮模型，酒精(70％)消毒，兩天後，按表中所述劑量及組別塗抹5次/三天，再次觀察皮膚變化活動情況，並記錄。然後將全部雌雄小鼠投入繁殖。觀察香腺分泌物及麝鼠香香料對繁殖性能及胚胎畸變作用。
外觀檢查的結果表明，全部小鼠飲食正常，活動自如，未破皮的小鼠皮膚飽滿、光滑、無異常變化。破皮小鼠組小鼠對照及實驗組皮膚均癒合，未出現任何毒副作用。
投入繁殖的小鼠性活動正常，雌性小鼠均受孕，產仔數、仔幼鼠重量與對照組無明顯差異，見表7。外觀及剖檢均未出現畸變。香腺分泌物及麝鼠香香料沒有致畸作用。
表6 香腺分泌物及麝鼠香香料對小鼠皮膚毒性、破皮皮膚癒合作用

表7 麝鼠香和麝鼠香香料對小鼠繁殖及胎仔致畸作用

2、香腺分泌物及麝鼠香香料對家兔皮膚刺激性的影響取家兔50隻，雌雄不拘，體重2.5-3.0Kg，分成七組，第一組為空白對照組給同體積水(蒸餾水)、第2、3、4組分別香腺分泌物1、2、3，第5、6、7組分別為麝鼠香香料組，每隻實驗家兔塗抹香腺分泌物及麝鼠香香料劑量見表8。分別將各組家兔固定，分別將背部兩片10×6cm面部皮膚除毛，用酒精和碘消毒除毛處皮膚，各組家兔分別按劑量塗抹香腺分泌物及麝鼠香香料30天，觀察受試家兔用藥部位有無變化，反應強度判定標準見表9。
表8 香腺分泌物及麝鼠香香料對家兔皮膚刺激的影響

表9 皮膚刺激實驗反應強度判定標準

觀察結果表明，給藥後48小時觀察家兔用藥部位皮膚，各組家兔均未見充血、水泡形成、褶爛、表皮脫落、變性壞死，香腺分泌物及麝鼠香香料各不同劑量組對家兔皮膚均無任何異常現象，對皮膚無任何毒性刺激，用樣30天後，其活動、採食正常。使用安全。30天後，將家兔處死，取用藥部位皮膚，進行病現場切片檢查，塗抹部位皮膚無任何異常改變。更無誘發癌變。高劑量組香腺分泌物及麝鼠香料外用無任何刺激及致癌作用。
3、香腺分泌物及麝鼠香香料對豚鼠過敏反應的影響取豚鼠35隻，雌雄不拘，體重250-300g，隨機分成7組。分別對各組豚鼠背部脫兩塊6×4cm面積的皮膚，進行除毛，同時用酒精及碘酒消毒。經處理的豚鼠，第1組為對照組給同體積的蒸餾水，第2、3、4組塗抹香腺分泌物0.2、0.5、0.8克，第5、6、7組分別塗抹麝鼠香香料0.2、0.5、0.8克，各組動物連續塗抹5天，觀察受試豚鼠用藥部位有無變化。判定標準如下-無異常反應±蜷縮、豎毛、其它無異常+抓鼻、豎毛、不安、呼吸急迫、輕度紫紺++豎毛、呼吸明顯困難、紫紺、四肢無力、腹部貼地爬行。
+++死亡經用藥後觀察，香腺分泌物及麝鼠香香料皆無任何異常表現。
停止塗抹香腺分泌物及麝鼠香香料後7天，再度用香腺分泌物及麝鼠香香料進行攻擊3天(相同劑量和相同刺激方法)，以便觀察香腺分泌物及麝鼠香香料產品對豚鼠也無任何過敏反應。進一步證明，香腺分泌物及麝鼠香香料使用安全，無過敏等不良反應。
4、香腺分泌物及麝鼠香香料對小白鼠靜脈一次性注射的急性毒性觀察取小白鼠20隻分兩組，每組10隻，體重31±2.6克，逐只給小白鼠靜脈注射(尾靜脈)香腺分泌物及麝鼠香香料0.8克(最大注射劑量)，觀察香腺分泌物及麝鼠香香料的毒性反應。
結果表明，兩組小鼠注射香腺分泌物及麝鼠香香料0.8克後，均未出現死亡，所不同的是，注射後小鼠表現不安後，均不同表現活動減少。次日後，活動正常，觀察七天後，無一隻出現死亡。
試驗例3 中國農業科學院特產研究所麝鼠課題組研製的麝鼠香雪花膏1號、2號、3號、4號和麝鼠香香水抗衰老、抗炎及抑菌等方面的活性研究。
一、麝鼠香醫用化妝品對小鼠皮膚SOD活性的影響將132隻小鼠腹部毛剪淨至3cm的橢圓形，分兩批實驗。兩批小鼠各66隻，每批均分6組。1～5組分別為麝鼠香香水、麝鼠香雪花膏1、2、3和4號，6組為對照組。首批小鼠按表中所示劑量每天上午8.30開始一次塗膏和香水，對照組塗水。連續兩周。末批小鼠於2周內每天上午9.00和下午3.00塗膏和香水二次。末次塗膏和香水1h後，斷頭處死動物，取下塗膏和香水處皮膚剪成碎塊，按Geller方法分離SOD，按藍開蔚等方法進行測定。結果見表10。
表10 麝鼠香化妝品對小鼠SOD(μg/g皮膚)的影響

注※P＜0.05 ※※P＜0.01 ※※※P＜0.001與對照組比較，下同。
麝鼠香雪花膏1號和3號無論每日1次或兩次塗沫，均可明顯增強小鼠皮膚SOD的活性，但每日兩次塗沫SOD的活性更明顯。2號和4號一次塗沫SOD的活性不明顯，但增加到每日兩次塗膏顯示出較強的SOD活性，麝鼠香1～4號膏均顯示出明顯的量效關係。麝鼠香香水無明顯提高小鼠皮膚SOD的活性。
二、麝鼠香醫用化妝品對小鼠脂褐質的影響取前述實驗動物肝臟按藍開蔚方法用甲醇∶氯仿(2∶1)抽取液5ml在玻璃勻漿器中製備組織勻漿，勻漿液40℃溫育5min後，1500g離心10min，上清液在RF-510螢光分光光度計上測定脂褐質含量。測定時以0.1μg/ml(0.05M硫酸配製)喹寧為螢光基準物質，激發光波長365nm，發射光波長435nm，狹縫10nm，增益2/9。結果見表11。
表11 麝鼠香化妝品對小鼠脂褐質(μg/g肝)的影響

結果表明，除麝鼠香香水外，其餘4種麝鼠香膏霜無論每日一次或兩次塗擦皆有非常明顯地降低小鼠肝臟中脂褐質的含量，作用強度也相似。麝鼠香香水每日一次塗擦降低小鼠肝脂褐質含量的作用不明顯，但每日增加到兩次有較明顯地降低脂褐質的效果。
三、麝鼠香醫用化妝品對小鼠血清過氧化脂質(LPO)含量的影響前述實驗動物斷頭取血製備血清，按硫代巴比妥酸(TBA)顯色法測定血清LPO含量。取血清0.3ml加入20％三氯醋酸2.5ml混勻後加入0.61％TBA 1ml，沸水煮沸30min後取出，流水冷卻至室溫，加正丁醇4ml振蕩混勻抽提TBA與丙二醛縮合產生的色素，1500×g離心10min，取上清液用751一型分光光度計測定含量。測定時以同樣操作的TEP為標準，正丁醇調零，波長為535nm。結果見表12。
表12 麝鼠香化妝品對小鼠血清中丙二醛的含量影響

結果表明，5種麝鼠香化妝品除香水外，其餘4種膏霜皆有較明顯的降低小鼠血清中LPO含量的作用，每日兩次較一次效果更明顯，呈明顯的量效關係。
四、麝鼠香醫用化妝品對小鼠肝單胺氧化酶(MAO-B)的影響前述小鼠斷頭處死取肝組織按五本樣方法制厲勻漿，經分級離心製備單胺氧化酶源，以苄胺作為MAO的底物，比色測定MAO-B活性。結果見表13。
表13 麝鼠香化妝品對小鼠肝單胺氧化酶的影響

表13可見，5種麝鼠香醫用化妝產品對小鼠肝組織中單胺氧化酶(MAO-B)具有不同地抑制作用。尤其以膏霜2、3和4號明顯。膏霜1號和香水只有達到每日兩次抹擦才顯示出抑制單胺氧化酶的活性。
五、麝鼠香醫用化妝品對上鼠抗炎作用的影響取小鼠60隻，均分6組，1～5組分別為麝鼠香香水、麝鼠香膏霜1、2、3和4號，6組為對照組。連續在小鼠腹部(剪淨腹毛)塗擦麝鼠香膏霜或香水(0.1g或0.05ml/只)，每日一次，末次塗擦1h後，逐只用二甲苯0.05ml塗在兩隻耳部致炎之後剪下小鼠兩側耳朵，按徐淑雲方法用膠塞打孔器打下同一部位固定大小的耳圈組織稱重，以左右耳重量差評定腫脹度。
結果表明，對照組腫脹度為9.59±2.81mg，麝鼠香香水為5.51±2.27(P＜0.01)，麝鼠香膏霜1號為5.47±2.89mg(P＜0.05)，2號為5.13±1.25mg(P＜0.001)，3號為6.31±1.6(P＜0.05)，4號為6.43±2.19(P＜0.05)。表明5種麝鼠香化妝品均具有較強的抗炎作用。但尤其以膏霜2號和香水抗炎效果更明顯。
六、麝鼠香醫用化妝品對小鼠腹部皮膚真皮組織形態結構的影響取36隻小鼠，雌雄不拘，分六組，每組6隻，於兩周內每天塗擦麝鼠香化妝品一次，末次塗擦1h後，細心剪下皮膚，常規製做組織切片，行HE染色。觀察各組小鼠皮下真皮組織的形態變化。
結果表明，五種麝鼠香膏霜組小鼠皮下(香水除外)真皮中毛細血管豐富，腺體發達，結締組織中的網狀纖維、膠原纖維和彈性纖維等均較對照增加。顯示出較好的潤膚保健皮膚的基礎。麝鼠香香水無此作用。
七、麝鼠香醫用化妝品對抑菌作用的影響選用標準的金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、大腸桿菌和綠膿桿菌，用營養瓊脂(上海醫學化驗所試劑廠產品)製成平板，將1.5×108ml/菌液分別塗於平板內，然後在平板上打洞，每洞直徑為6mm，每洞加麝鼠香膏霜劑0.1g，香水0.05ml 37℃培養24h，測定抑菌環大小。結果見表14。
表14 麝鼠香醫用化妝品對抑菌作用的影響 結果表明，5種化妝品對金葡、白區和大腸三種菌株皆有不同程度地抑菌活性，其中麝鼠香香水活性最強，膏1、3號有中度抑菌作用，膏霜2號抑菌作用較弱。
八、麝鼠香EM霜對脂溢性皮火和脂溢性角化病的治療觀察應用麝鼠香EM霜治療脂溢性皮炎和脂溢性角化病取得了較好的療效。在20例脂溢性角化病中，顯效3例，有效15例，總有效率達90％，用藥2個月即能看到效果。另外，在30例脂溢性面部皮炎病中，治癒9例，有效20例，總有效率達96.7％，效果明顯，在用藥後3～5日內炎症即開始消退，癢感減輕。
以下通過實施例進一步闡述本發明活性組分的製備方法實施例1麝鼠由中國農業科學院特產研究所提供，非麻醉方法人工活體取香採集天然麝鼠香，加入一倍量的胰蛋白酶，在-10℃溫度下進行反應3小時，得混合液，加入混合液一倍量的1，3丙二醇，充分混合，靜置1小時，混合液2000轉/分離下層和上層溶液，加入高錳酸鉀1mg反應0.5小時，用0.8倍量活性碳靜置1小時，除去高錳酸鉀，離心後置於-10℃溫度下，用1，3丙二醇萃取次數為1次，每次加入溶液量為3倍，再除去溶劑所得麝鼠香活性組分為50％。
實施例2麝鼠由中國農業科學院特產研究所提供，非麻醉方法人工活體取香採集天然麝鼠香，加入一倍量的胰蛋白酶，在20℃溫度下進行反應12小時，得混合液；加入混合液一倍量的丙酮，充分攪拌混合，靜置5小時；將混合液2000轉/分離下層和上層溶液，加入高錳酸鉀10mg反應5小時；用2倍量活性碳靜置10小時，除去高錳酸鉀；離心後置於20℃溫度下，用1，3丙二醇萃取次數為2次，每次加入溶液量為5倍，再除去溶劑所得麝鼠香活性組分為54.6％。
實施例3麝鼠由中國農業科學院特產研究所提供，非麻醉方法人工活體取香採集天然麝鼠香，加入一倍量的胰蛋白酶，在30℃溫度下進行反應24小時，得混合液；加入混合液一倍量的1，3丙二醇，充分攪拌混合，靜置24小時；將混合液2000轉/分離下層和上層溶液，加入高錳酸鉀20mg反應40小時；用6倍量活性碳靜置24小時，除去高錳酸鉀；離心後置於30℃溫度下，用1，3丙二醇萃取次數為4次，每次加入溶液量為6倍，再除去溶劑所得麝鼠香活性組分為72.9％。
實施例4麝鼠由中國農業科學院特產研究所提供，非麻醉方法人工活體取香採集天然麝鼠香，加入一倍量的胰蛋白酶，在60℃溫度下進行反應30小時，得混合液；加入混合液一倍量的丙酮，充分混合，靜置60小時，混合液2000轉/分離下層和上層溶液，加入高錳酸鉀40mg反應80小時，用8倍量活性碳靜置30小時，除去高錳酸鉀，離心後置於60℃溫度下，用1，3丙二醇萃取次數為6次，每次加入溶液量為8倍，再除去溶劑所得麝鼠香活性組分為86.5％。
實施例5麝鼠由中國農業科學院特產研究所提供，非麻醉方法人工活體取香採集天然麝鼠香，加入一倍量的胰蛋白酶，在120℃溫度下進行反應40小時，得混合液；加入混合液一倍量的1，3丙二醇，充分攪拌混合，靜置73小時；將混合液2000轉/分離下層和上層溶液，加入高錳酸鉀50mg反應100小時；用10倍量活性碳靜置36小時，除去高錳酸鉀；離心後置於100℃溫度下，用1，3丙二醇萃取次數為8次，每次加入溶液量為10倍，再除去溶劑所得麝鼠香活性組分為90.0％。
權利要求
1.一種天然動物香料麝鼠香活性組分，其特徵在於包含七個碳到二十一個碳的環烷酮類、脂肪酸及其酯類、三個碳到三十三個碳的環烷醇類、醛類和烯類成分，是通過如下工藝製備的1)麝鼠香腺囊分泌物加入一倍量的胰蛋白酶在-10℃-120℃溫度下進行反應3-40小時，得混合液；2)加入混合液一倍量的1，3丙二醇或丙酮，充分混合，靜置1-73小時；3)混合液2000轉/分離下層和上層溶液，加入高錳酸鉀1-50mg反應0.5-100小時；4)用0.8-10倍量活性碳靜置1-36小時，除去高錳酸鉀；5)離心後置於-10℃-100℃溫度下，用1，3丙二醇萃取次數為1-8次，每次加入溶液量為3-10倍，再除去溶劑所得麝鼠香活性組分為50-90％。
2.根據權利要求1所述的天然動物香料麝鼠香活性組分，其特徵在於所述的麝鼠香活性組分的含量為C7-C21的環烷酮類成分0.01％-21％C7-C21的脂肪酸及其脂類 0.01％-16％C3-C33的環烷醇類成分0.1％-30％C3-C33的醛類成分0.01％-20％C3-C33的烯類成分0.01％-20％。
3.一種天然動物香料麝鼠香活性組分的製備工藝，其特徵在於該工藝包括下列步驟1)麝鼠香腺囊分泌物加入一倍量的胰蛋白酶在-10℃-120℃溫度下進行反應3-40小時，得混合液；2)加入混合液一倍量的1，3丙二醇或丙酮，充分混合，靜置1-73小時；3)混合液2000轉/分離下層和上層溶液，加入高錳酸鉀1-50mg反應0.5-100小時；4)用0.8-10倍量活性碳靜置1-36小時，除去高錳酸鉀；5)離心後置於-10℃-100℃溫度下，用1，3丙二醇萃取次數為1-8次，每次加入溶液量為3-10倍，再除去溶劑所得麝鼠香活性組分為50-90％。
4.根據權利要求1所述的天然動物香料麝鼠香活性組分在製藥、食品、日用化工、菸酒服飾中的應用。
5.根據權利要求1所述的天然動物香料麝鼠香活性組分在製備治療心肌缺血、缺氧、冠心病、脈管炎及抑制血小板聚集和抑制血栓形成的藥物中的應用。
6.根據權利要求1所述的天然動物香料麝鼠香活性組分作為留香劑和定香劑的用途。
全文摘要
一種天然動物香料麝鼠香活性組分，包含七個碳到二十一個碳的環烷酮類、脂肪酸及其酯類、三個碳到三十三個碳的環烷醇類、醛類和烯類成分，其製備工藝是加入胰蛋白酶反應後，加入1，3丙二醇或丙酮，靜置，分離，加入高錳酸鉀，用活性炭靜置再除去高錳酸鉀，離心，用1，3丙二醇萃取，再除去溶劑。製備工藝簡單易行，產品質量穩定，產率高，適合規模化工業生產。而且麝鼠香活性組分無毒副作用，無刺激，質量穩定，易於儲存，可替代麝香、靈貓香、靈涎香及河狸香成為新的天然動物香料及藥物藥材。
文檔編號C12N9/76GK1904009SQ200610017080
公開日2007年1月31日 申請日期2006年8月8日 優先權日2006年8月8日
發明者陳玉山, 趙偉剛, 趙景輝, 魏海軍 申請人:陳玉山