結合海帕西啶的核酸的製作方法

2023-06-04 05:42:16 5

專利名稱：結合海帕西啶的核酸的製作方法
結合海帕西啶的核酸本發明涉及結合海帕西啶的核酸及其分別用於製備藥劑(medicament)、診斷劑和檢測劑的用途。海帕西啶(h印cidin)的一級結構(HEPC-HUMAN，SwissProt條目 P81172)於 2000 年得到測定(Krause，2000)。另一個研究抗微生物肽的團隊獨立地發現了海帕西啶(Park， 2001)。該蛋白質的異名為「肝臟表達的抗微生物肽(liver-expressed antimicrobial peptide) 」(縮寫LEAP-1)和「推定的肝臟腫瘤抑制物(Putative liver tumour regressor)，，(縮寫PLTR)。海帕西啶為富含半胱氨酸的陽離子肽，並且由25個胺基酸組成，從而導致2，790道爾頓的分子量。該8個半胱氨酸形成4個二硫鍵，並且賦予該分子以穩定且剛性的結構。通過NMR分析測定了海帕西啶的三級結構(Hunter，2002)。該蛋白質由扭曲的 β -摺疊片組成，其中在髮夾的轉彎處發現有不常見的鄰位二硫橋(Hunter，2002)。來自不同哺乳動物物種的海帕西啶的胺基酸序列在進化過程中通常是非常保守的。人海帕西啶與來自下列物種的海帕西啶共享如下的相同胺基酸的百分比-稱猴(Macacamulatta)(恆河猴)100%-食蟹獼猴(Macacafascularis)(食蟹猴) 100%-歐洲野豬(Susscrofa)(豬)84%-小家鼠(Musmusculus)(小鼠)76%-褐家鼠(Rattus norvegicus)(大鼠)68%。除了由25個胺基酸組成的具有生物活性的海帕西啶(也稱為海帕西啶-25)之夕卜，還鑑定出了兩個具有20和22個胺基酸的截短的無活性變體海帕西啶-20和海帕西啶-22 (Rivera，200 。所有這些肽是基於人和大鼠中的84個胺基酸的前肽原以及小鼠中的83個胺基酸的前肽原而產生的(Pigeon，2001)。所述84個胺基酸的海帕西啶前肽原包含被移除的典型的靶向內質網的24-胺基酸信號肽，以及用於激素原轉變酶弗林蛋白酶的共有切割位點(Valore，2008)。這些加工步驟產生具有活性的25個胺基酸的肽激素，其在血液和尿中被發現。海帕西啶為調節鐵體內穩態的關鍵信號。高水平的人海帕西啶導致降低的血清鐵水平，而低水平導致增加的血清鐵水平，如在海帕西啶缺乏和海帕西啶過表達的小鼠模型中所顯示的(Nicolas，2001 ；Nicolas, 2002 ；Nicolas，2003)。此外，導致海帕西啶活性缺乏的海帕西啶基因中的突變與青少年血色素沉著症(其為一種嚴重的鐵超負荷疾病)有關 (Roetto,2003)。在腹膜內注射海帕西啶後，觀察到劑量依賴性的且長期持續的血清鐵降低 (Rivera,2005)。鐵是所有活的生物體的生長和發育所需的必需元素。哺乳動物中的鐵含量通過控制鐵吸收、鐵再循環和從儲存鐵的細胞中鐵的釋放來進行調節。鐵主要在十二指腸和上段空腸中由腸細胞吸收。反饋機制增強鐵缺乏的個體中的鐵吸收，並且減少具有鐵超負荷的個體中的鐵吸收。該機制的關鍵化合物為鐵轉運蛋白「膜鐵轉運蛋白(ferroportin) 」，其也作為海帕西啶受體(Abboud，2000 ；Donovan, 2000 ；McKie，2000)。膜鐵轉運蛋白為在小鼠、大鼠和人之間具有90%的胺基酸序列同一性的571個胺基酸的蛋白質，其控制鐵的釋放(McKie，2000)。 該主要的鐵輸出蛋白位於胎盤合胞滋養層和腸細胞的基底膜上，以及位於巨噬細胞和肝細胞的細胞表面上。海帕西啶通過與在上面提及的細胞類型上表達的膜鐵轉運蛋白結合而抑制鐵從這些不同細胞類型中釋放，並且引起膜鐵轉運蛋白的磷酸化、內在化、遍在化 (ubiquitylation)和溶酶體降解，由此減少由膜鐵轉運蛋白介導的鐵向血液中的釋放 (Nemeth,2004 ；De Domenico, 2007) 0當血漿鐵持續被消耗以用於血紅蛋白合成時，在健康受試者中血漿鐵水平降低且海帕西啶產生減弱。在急性和慢性全身性炎症的情況下，細胞因子誘導海帕西啶產生。已經觀察到，海帕西啶基因表達在炎症刺激(例如感染)後顯著增加，所述炎症刺激誘導脊椎動物先天免疫系統的急性期應答。在小鼠中，海帕西啶基因表達顯示出被脂多糖(Constante，2006)、 松節油(Nemeth，2004)和弗氏完全佐劑(Frazer，2004)，以及腺病毒感染上調。在人中，海帕西啶表達由炎性細胞因子白介素-6和LPS所誘導(Nemeth，2004)。在具有慢性炎性疾病(包括細菌、真菌和病毒感染)的患者中也發現海帕西啶表達和炎症性貧血之間的強烈的相關性。在所有這些狀況下，增加的海帕西啶濃度抑制鐵從巨噬細胞、肝臟儲存和十二指腸流出到血漿中。在慢性炎症的狀況下，血鐵過少發生，並且紅細胞生成變成鐵限制性的且導致貧血(Weiss, 2005 ；Weiss, 2008 ；Andrews, 2008)。作為本發明的基礎的問題是提供與海帕西啶特異性地相互作用的工具。更特別地，作為本發明的基礎的問題是提供基於核酸的工具，其與海帕西啶特異性地相互作用。作為本發明的基礎的另一個問題是提供用於製備用以治療人或非人疾病的藥物的工具，其中所述疾病的特徵在於海帕西啶直接或間接地參與此類疾病的致病機制。作為本發明的基礎的另外一個問題是提供用於製備用以治療疾病的診斷劑的工具，其中所述疾病的特徵在於海帕西啶直接或間接地參與此類疾病的致病機制。作為本發明的基礎的這些和其他問題通過所附的獨立權利要求的主題而得到解決。優選的實施方案可以從從屬權利要求中獲得。此外，作為本發明的基礎的問題在第一個方面(其也為第一個方面的第一個實施方案)中通過能夠結合海帕西啶的核酸而得到解決。在第一個方面的第二個實施方案(其也為第一個方面的第一個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸為海帕西啶的拮抗劑。在第一個方面的第三個實施方案(其也為第一個方面的第一和第二個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸為海帕西啶-膜鐵轉運蛋白系統的抑制劑。在第一個方面的第四個實施方案(其也為第一個方面的第一、第二和第三個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸以5』 - > 3』方向包含第一末端核苷酸序列段 (stretch)、中央核苷酸序列段和第二末端核苷酸序列段，其中所述中央核苷酸序列段包含 32至40個核苷酸，優選地32至35個核苷酸。在第一個方面的第五個實施方案(其也為第一個方面的第一和第二個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸以5』 - > 3』方向包含第二末端核苷酸序列段、中央核苷酸序列段和第一末端核苷酸序列段，其中所述中央核苷酸序列段包含32至40個核苷酸，優選地32至35個核苷酸。在第一個方面的第六個實施方案(其也為第一個方面的第四和第五個實施方案的一個具體化方案)中，所述中央核苷酸序列段對於結合海帕西啶來說是必需的。在第一個方面的第七個實施方案(其也為第一個方面的第四、第五和第六個實施方案的一個具體化方案)中，所述中央核苷酸序列段包含5』RKAUGGGAKUAAGUAAAUGAGGRGUW GGAGGAAR 3，或 5，RKAUGGGAKAAGUAAAUGAGGRGUffGGAGGAAR 3，的核苷酸序列。在第一個方面的第八個實施方案(其也為第一個方面的第四至第七個實施方案的一個具體化方案)中，所述中央核苷酸序列段包含5』RKAUGGGAKUAAGUAAAUGAGGRGUUGGAG GAAR 3，，優選地 5，GUAUGGGAUUAAGUAAAUGAGGA⑶UGGAGGAAG 3，的核苷酸序列。在第一個方面的第九個實施方案(其也為第一個方面的第七和第八個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段與所述第二末端核苷酸序列段任選地相互雜交，其中在雜交後形成雙鏈結構；所述第一末端核苷酸序列段包含5至8個核苷酸； 並且所述第二末端核苷酸序列段包含5至8個核苷酸。在第一個方面的第十個實施方案(其也為第一個方面的第九個實施方案的一個具體化方案)中，所述雙鏈結構由5至8個鹼基對組成。在第一個方面的第十一個實施方案(其也為第一個方面的第七至第十個實施方案，優選地第一個方面的第八至第十個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 X1X2X3SBSBC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含 5』 GVBVYX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中Xi為k或不存在，&為G或不存在，&為B或不存在，&為S或不存在，&為C或不存在，並且& Su或不存在。在第一個方面的第十二個實施方案(其也為第一個方面的第七至第十一個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 ^C1X2X3SBSBC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GVBVBX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中a) X1為A，&為G，X3為B，&為S，X5為C，並且X6為U，或者幻)(1不存在，)(2為6，)(3為隊)(4為5，)(5為(，並且)(6為仏或者c) X1為A，&為G，X3為B，&為S，X5為C，並且X6不存在。在第一個方面的第13個實施方案(其也為第一個方面的第七個實施方案至第十二個實施方案的一個具體化方案)中，a)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AGCGUGUC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGUGCGCU 3』的核苷酸序列，或者b)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AGCGUGUC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCAUGCU 3』的核苷酸序列，或者c)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AGUGUGUC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GAUGCGCU 3』的核苷酸序列，或者d)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AGUGUGUC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCAUGCU 3』的核苷酸序列，或者
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e)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AGCGUGCC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGUGCGCU 3』的核苷酸序列，或者f)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AGCGCGCC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCGCG⑶3』的核苷酸序列。在第一個方面的第14個實施方案(其也為第一個方面的第七個實施方案至第十個實施方案，優選地第八至第十個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 X1X2X3SBSBC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含 5』 GVBVYX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中a) &不存在，)(2為6，)(3為隊)(4為S，)(5* C，並且&不存在，或者WX1不存在，X2不存在，X3為B，&為S，&為C，並且X6不存在，或者CU1不存在，)(2為6，)(3為隊)(4為Sj5不存在，並且)(6不存在。在第一個方面的第15個實施方案(其也為第一個方面的第七個實施方案至第十二個實施方案以及第14個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 X1X2X3SBSBC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GVBVYX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中X1不存在，\不存在，&為B或不存在，&為S或不存在，X5不存在，並且\不存在。在第一個方面的第16個實施方案(其也為第一個方面的第15個實施方案的一個具體化方案)中，a)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GCGCGC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GCGCGC 3』的核苷酸序列，或者b)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GGUGUC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCAUC 3』的核苷酸序列，或者c)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GGCGUC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCGCC 3』的核苷酸序列，或者d)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GCGCC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCGC 3』的核苷酸序列，或者e)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GGCGC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GCGCC 3』的核苷酸序列。在第一個方面的第17個實施方案(其也為第一個方面的第七個實施方案至第 16個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸包含根據SEQ ID No. 115至119、SEQ ID No. 121、SEQ ID No. 142、SEQ ID No. 144、SEQ ID No. 146、SEQ ID No. 148、SEQ ID No. 151、 SEQ ID No. 152、SEQ ID No. 175 或 SEQ ID No. 176 中任一個的核酸序列。在第一個方面的第18個實施方案(其也為第一個方面的第四至第六個實施方案的一個具體化方案)中，所述中央核苷酸序列段包含5』GRCRGCCGGVGGACACCAUAUACAGACUAC KAUA 3，或 5，GRCRGCCGGARGGACACCAUAUACAGACUACKAUA 3，的核苷酸序列。在第一個方面的第19個實施方案(其也為第一個方面的第四至第六個實施方案以及第18個實施方案的一個具體化方案)中，所述中央核苷酸序列段包含5』GRCRGCCGGGG GACACCAUAUACAGACUACKAUA 3，，優選地 5，GACAGCCGGGGGACACCAUAUACAGACUACGAUA 3'的核苷酸序列。在第一個方面的第20個實施方案(其也為第一個方面的第18和第19個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段與所述第二末端核苷酸序列段任選地相互雜交，其中在雜交後形成雙鏈結構，所述第一末端核苷酸序列段包含4至7個核苷酸，並且所述第二末端核苷酸序列段包含4至7個核苷酸。在第一個方面的第21個實施方案(其也為第一個方面的第20個實施方案的一個具體化方案)中，所述雙鏈結構由4至7個鹼基對組成。在第一個方面的第22個實施方案(其也為第一個方面的第18至第21個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AX2X3SBSN 3』的核苷酸序列， 並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 NSVSX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中&為A或不存在，&為G或不存在，&為R或不存在，&為Y或不存在，X5為 C或不存在，並且&為U或不存在。在第一個方面的第23個實施方案(其也為第一個方面的第18至第22個實施方案，優選地第一個方面的第19至第22個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 X1X2X3SBSN 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含 5』 NSVSX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中 a) X1 % k, X2 為 G，& 為 R，X4 為 Y，& 為 C，並且 X6 為 U，或者b) X1不存在，X2為G，&為R，X4為Y，&為C，並且X6為U，或者c) &為A，&為G，&為R，&為Y，&為C，並且X6不存在。在第一個方面的第M個實施方案(其也為第一個方面的第18至第23個實施方案的一個具體化方案)中，a)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AGG⑶CG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGGGCCU 3』的核苷酸序列，或者b)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AGGCCCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGGGCCU 3』的核苷酸序列，或者c)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AGGCUUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGAGCCU 3』的核苷酸序列，或者d)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AGACUUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGAGU⑶3』的核苷酸序列。在第一個方面的第25個實施方案(其也為第一個方面的第18至第22個實施方案，優選地第一個方面的第19至第22個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 X1X2X3SBSN 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含 5』 NSVSX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中
a) X1不存在，X2為G，&為R，X4為Y，&為C，並且X6不存在，或者WX1不存在，X2不存在，X3為R，&為Y，X5為C，並且X6不存在，或者CU1不存在，X2為G，&為R，X4為Y，X5不存在，並且X6不存在。在第一個方面的第沈個實施方案(其也為第一個方面的第18至第22個以及第 25個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GGCUCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGGGCC 3』的核苷酸序列。在第一個方面的第27個實施方案(其也為第一個方面的第18至第22個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AX2X3SBSN 3』的核苷酸序列， 並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 NSVSX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中X1不存在，\不存在，&為R或不存在，&為Y或不存在，X5不存在，並且\不存在。在第一個方面的第觀個實施方案(其也為第一個方面的第18至第22個以及第 27個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』GGCCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGGCC 3』的核苷酸序列，或者所述第一末端核苷酸序列段包含5』GCGCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGCGC 3』的核苷酸序列。在第一個方面的第四個實施方案(其也為第一個方面的第一至第六個以及第18 至第28個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸包含根據SEQ ID No. 122至126、SEQ ID No. 154、SEQ ID No. 159、SEQ ID No. 163 或 SEQ ID No. 174 中任一個的核酸序列。在第一個方面的第30個實施方案(其也為第一個方面的第四至第六個實施方案的一個具體化方案)中，所述中央核苷酸序列段以5』 -> 3』方向包含下列核苷酸序列段盒(Box)A、連接性核苷酸序列段和盒B;備選地，所述中央核苷酸序列段以5』 -> 3』方向包含下列核苷酸序列段盒B、連接性核苷酸序列段和盒A，其中所述盒A包含 5』 WAAAGUWGAR3』的核苷酸序列，所述連接性核苷酸序列段包含10至18個核苷酸，並且所述盒B包含5』 RGMGUGffKAGUKC 3』的核苷酸序列。在第一個方面的第31個實施方案(其也為第一個方面的第30個實施方案的一個具體化方案)中，所述盒 A 包含選自 5，UAAAGUAGAG 3，、5，AAAAGUAGAA 3，、5，AAAAGUUGAA 3，禾Π 5，GGGAUAUAGUGC 3，的核苷酸序列；優選地所述盒A包含5，UAAAGUAGAG 3，。在第一個方面的第32個實施方案(其也為第一個方面的第30至第31個實施方案的一個具體化方案)中，所述盒B包含選自5，GGOiUGAUAGUGC 3，、5，GGA⑶⑶UAGUUC 3，、 5，GGC⑶GAGAGUGC 3，、5，AGC⑶GAUAGUGC 3，和 5，GGC⑶⑶UAGUGC 3，的核苷酸序列，優選地所述盒B包含5』 GGC⑶GAUAGUGC 3，。在第一個方面的第33個實施方案(其也為第一個方面的第30至第32個實施方案的一個具體化方案)中，所述連接性核苷酸序列段以5』- > 3』方向包含第一連接性核苷酸子序列段(substretch)、第二連接性核苷酸子序列段和第三連接性核苷酸子序列段，其中優選地，所述第一連接性核苷酸子序列段與所述第三連接性核苷酸子序列段任選地相互雜交，其中在雜交後形成雙鏈結構。
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在第一個方面的第34個實施方案(其也為第一個方面的第33個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一連接性核苷酸子序列段和所述第三連接性核苷酸子序列段各自且彼此獨立地包含3至6個核苷酸。在第一個方面的第35個實施方案(其也為第一個方面的第32至第34個實施方案的一個具體化方案)中，所述雙鏈結構由3至6個鹼基對組成。在第一個方面的第36個實施方案(其也為第一個方面的第32至第35個實施方案的一個具體化方案)中，a)所述第一連接性核苷酸子序列段包含選自5』 GGAC 3』、5』 GGAU3』和5』 GGA 3， 的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』 GUCC 3』的核苷酸序列，或者b)所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』 GCAG 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』 CUGC 3』的核苷酸序列，或者C)所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』 GGGC 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』 GCCC 3』的核苷酸序列，或者d)所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』 GAC 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』 GUC 3』的核苷酸序列，或者e)所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』 ACUUGU 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含選自5』 GCAAGU 3』和5』 GCAAGC 3』的核苷酸序列，或者f)所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』 UCCAG 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』 CUGGA 3』的核苷酸序列，優選地，所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』 GAC 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』⑶C 3』的核苷酸序列。在第一個方面的第37個實施方案(其也為第一個方面的第33至第36個實施方案的一個具體化方案)中，所述第二連接性核苷酸子序列段包含3至5個核苷酸。在第一個方面的第38個實施方案(其也為第一個方面的第33至第37個實施方案的一個具體化方案)中，所述第二連接性核苷酸子序列段包含選自5』 VBAAff 3』、5』 AAUff 3』和5』 NBW 3』的核苷酸序列。在第一個方面的第39個實施方案(其也為第一個方面的第38個實施方案的一個具體化方案)中，所述第二連接性核苷酸子序列段包含5』 VBAAW 3』的核苷酸序列，優選地選自 5，CGAAA 3』、5』 GCAAU 3』、5』 GUAAU 3，禾口 5，AUAAU 3，的核苷酸序列。在第一個方面的第40個實施方案(其也為第一個方面的第38個實施方案的一個具體化方案)中，所述第二連接性核苷酸子序列段包含5』 AAUW 3』的核苷酸序列，優選地 5』 AAUU 3』或5』 AAUA 3』的核苷酸序列，更優選地5』 AAUA 3』的核苷酸序列。在第一個方面的第41個實施方案(其也為第38個實施方案的一個具體化方案) 中，所述第二連接性核苷酸子序列段包含5』 NBff 3』的核苷酸序列，優選地選自5』 CCA 3』、 5，CUA 3，、5，UCA 3，、5，ACA3，、5，GUU 3，、5，UGA 3，禾口 5，GUA 3，的核苷酸序列，更優選地選自 5』 CCA 3』、5』 CUA 3』、5』 UCA 3』、5』 ACA 3』 和 5』 GUU 3』 的核苷酸序列。在第一個方面的第42個實施方案(其也為第一個方面的第30至第41個實施方案的一個具體化方案)中，所述連接性核苷酸序列段包含選自5』GGACBYAGUCC 3』、 5，GGAUACAGUCC 3，、5，GCAGGYAAUCUGC 3，、5，GACAAUWGUC 3，、5，ACUUGUCGAAAGCAAGYU 3，、5，UCCAG⑶UCUGGA 3，、5，GGGCUGAGCCC 3，、5，GCAGAUAAUCUGC 3，和 5，GGACCAGUCC 3，的核苷酸序列，優選地選自 5，GGACCCAGUCC 3，、5，GGACCUAGUCC 3，、5，GGACUCAGUCC 3，、 5，GCAGGUAAUCUGC 3，、5，GCAGGCAAUCUGC 3，、5，GACAAUUGUC 3，和 5，GACAAUAGUC 3，的核苷酸序列。在第一個方面的第43個實施方案(其也為第一個方面的第30至第42個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段與所述第二末端核苷酸序列段任選地相互雜交，其中在雜交後形成雙鏈結構，所述第一末端核苷酸序列段包含4至7個核苷酸，並且所述第二末端核苷酸序列段包含4至7個核苷酸。在第一個方面的第44個實施方案(其也為第一個方面的第43個實施方案的一個具體化方案)中，所述雙鏈結構由4至7個鹼基對組成。在第一個方面的第45個實施方案(其也為第一個方面的第30至第44個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AX2X3BKBK 3』的核苷酸序列， 並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 MVVVX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中&為G或不存在，X2為S或不存在，&為V或不存在，&為B或不存在，X5為 S或不存在，並且&為C或不存在。在第一個方面的第46個實施方案(其也為第一個方面的第30至第44個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AX2X3BKBK 3』的核苷酸序列， 並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 MVVVX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中a) X1為G，&為S，X3為V，&為B，X5為S，並且X6為C，或者WX1不存在，X2為S，&為V，X4為B，&為S，並且X6為C，或者c)X1為G，&為S，X3為V，&為B，X5為S，並且X6不存在。在第一個方面的第47個實施方案(其也為第一個方面的第30至第46個實施方案，優選地第一個方面的第46個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GCA⑶CG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGAGUGC 3』的核苷酸序列。在第一個方面的第48個實施方案(其也為第一個方面的第30至第45個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AX2X3BKBK 3』的核苷酸序列， 並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 MVVVX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中a) X1不存在，X2為S，&為V，&為B，&為S，並且X6不存在，或者b) &不存在， 不存在，)(3為Vj4SBj5為S，並且&不存在，或者CU1不存在，)(2為S，)(3* V，)(4* Bj5不存在，並且)(6不存在。在第一個方面的第49個實施方案(其也為第一個方面的第30至第45個以及第 48個實施方案的一個具體化方案)中，a)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GCUGUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CACAGC 3』的核苷酸序列，或者
b)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 CGUGUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CACACG 3』的核苷酸序列，或者c)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 CGUG⑶3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 AGCACG 3』的核苷酸序列，或者d)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 CGCGCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGCGCG 3』的核苷酸序列，或者e)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GCCGUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CACGCG 3』的核苷酸序列，或者f)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GCGGUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CACCGC 3』的核苷酸序列，或者g)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GCUGCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGCAGC 3』的核苷酸序列，或者h)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GCUGGG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CCCAGC 3』的核苷酸序列，或者i)所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GCGGCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGCCGC 3』的核苷酸序列。在第一個方面的第50個實施方案(其也為第一個方面的第30至第45個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 AX2X3BKBK 3』的核苷酸序列， 並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 MVVVX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中X1不存在，\不存在，&為V或不存在，&為B或不存在，&不存在，並且&不存在。在第一個方面的第51個實施方案(其也為第一個方面的第30至第45個以及第 50個實施方案的一個具體化方案)中，所述第一末端核苷酸序列段包含5』 CGUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CACG 3』的核苷酸序列。在第一個方面的第52個實施方案(其也為第一個方面的第一至第六以及第30至第11個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸包含根據SEQ ID No. 29,SEQ ID No. 33、 SEQ ID No. 34、SEQ ID No. 39 至 41、SEQ ID No. 43、SEQ ID No. 46、SEQ ID No.137 至 141 或SEQ ID No. 173中任一個的核酸序列。在第一個方面的第53個實施方案(其也為第一個方面的第一至第六個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸包含根據SEQ ID No. 127至131中任一個的核酸序列。在第一個方面的第M個實施方案(其也為第一個方面的第一至第53個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸能夠結合海帕西啶，其中海帕西啶為人海帕西啶-25、人海帕西啶-22、人海帕西啶-20、猴海帕西啶-25、猴海帕西啶-22、猴海帕西啶-20，優選地人海帕西啶-25。在第一個方面的第55個實施方案(其也為第一個方面的第一至第M個實施方案，優選地第一個方面的第M個實施方案的一個具體化方案)中，所述海帕西啶具有根據 SEQ ID No. 1的胺基酸序列。在第一個方面的第56個實施方案(其也為第一個方面的第一至第55個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸包含修飾基團，其中包含所述修飾基團的核酸分子從生物體中排洩的速率相比於不含所述修飾基團的核酸而言降低。在第一個方面的第57個實施方案(其也為第一個方面的第一至第55個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸包含修飾基團，其中包含所述修飾基團的核酸分子具有相比於不含所述修飾基團的核酸而言增加的在生物體中的滯留時間。在第一個方面的第58個實施方案(其也為第一個方面的第56和第57個實施方案的一個具體化方案)中，所述修飾基團選自包括生物可降解的和生物不可降解的修飾的組，優選地所述修飾基團選自包括線性聚乙二醇、支化聚乙二醇、羥乙基澱粉、肽、蛋白質、 多糖、固醇、聚氧丙烯、聚氧醯胺化物(polyoxyamidate)、聚(2-羥乙基)-L-穀氨醯胺和聚乙二醇的組。在第一個方面的第59個實施方案(其也為第一個方面的第58個實施方案的一個具體化方案)中，所述修飾基團為由直鏈或支化的PEG組成的PEG部分，其中所述PEG 部分的分子量優選地為大約20，000至大約120，OOODa,更優選地為大約30，000至大約 80，OOODa，和最優選地為大約40，OOODa0在第一個方面的第60個實施方案(其也為第一個方面的第58個實施方案的一個具體化方案)中，所述修飾基團為HES部分，其中所述HES部分的分子量優選地為大約10,000至200，OOODa，更優選地為大約30,000至170，OOODa，和最優選地為大約 150，OOODa。在第一個方面的第61個實施方案(其也為第一個方面的第56至第60個實施方案的一個具體化方案)中，所述修飾基團經由連接體偶聯至所述核酸，其中所述連接體優選地為生物可降解的連接體。在第一個方面的第62個實施方案(其也為第一個方面的第56至第61個實施方案的一個具體化方案)中，所述修飾基團偶聯至所述核酸的5』 -末端核苷酸和/或3』 -末端核苷酸，和/或偶聯至在所述核酸的5』 -末端核苷酸和所述核酸的3』 -末端核苷酸之間的所述核酸的核苷酸。在第一個方面的第63個實施方案(其也為第一個方面的第56至第62個實施方案的一個具體化方案)中，所述生物體為動物體或人體，優選地人體。在第一個方面的第64個實施方案(其也為第一個方面的第一至第63個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸的核苷酸或形成所述核酸的核苷酸為L-核苷酸。在第一個方面的第65個實施方案(其也為第一個方面的第1至第64個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸為L-核酸。在第一個方面的第66個實施方案(其也為第一個方面的第一至第65個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸包含至少一個能夠結合海帕西啶的結合部分，其中此類結合部分由L-核苷酸組成。在第一個方面的第67個實施方案(其也為第一個方面的第一至第66個實施方案的一個具體化方案)中，所述核酸用於在治療和/或預防疾病的方法中使用，或者適合用於在治療和/或預防疾病的方法中使用。作為本發明的基礎的問題在第二個方面(其也為第二個方面的第一個實施方案) 中通過藥物組合物而得到解決，所述藥物組合物包含根據第一個方面的任一個實施方案的核酸和任選地另外的組分，其中所述另外的組分選自包括藥學上可接受的賦形劑、藥學上可接受的載體和藥學活性試劑的組。在第二個方面的第二個實施方案(其也為第二個方面的第一個實施方案的一個具體化方案)中，所述藥物組合物包含根據第一個方面的任一個實施方案的核酸和藥學上可接受的載體。作為本發明的基礎的問題在第三個方面(其也為第三個方面的第一個實施方案) 中通過根據第一個方面的任一個實施方案的核酸在製備藥劑中的用途而得到解決。在第三個方面的第二個實施方案(其也為第三個方面的第一個實施方案的一個具體化方案)中，所述藥劑用於在人醫學中使用或用於在獸醫醫學中使用。作為本發明的基礎的問題在第四個方面(其也為第四個方面的第一個實施方案) 中通過根據第一個方面的任一個實施方案的核酸在製備診斷工具中的用途而得到解決。在第三個方面的第三個實施方案(其也為第三個方面的第一和第二個實施方案的一個具體化方案)中，所述藥劑用於治療和/或預防貧血、血鐵過少、異食癖、具有升高的海帕西啶水平的病狀、具有升高的鐵水平的病狀、或具有鐵超負荷的病狀。在第三個方面的第四個實施方案(其也為第三個方面的第三個實施方案的一個具體化方案)中，所述貧血選自鐵粒幼細胞貧血、低色素小紅細胞性貧血、由慢性疾病和/ 或病症引起的貧血、由炎症引起的貧血、由遺傳病症引起的貧血、由急性感染引起的貧血、 由鐵代謝和/或體內穩態的基因中的突變引起的貧血、和由癌症治療引起的貧血。在第三個方面的第五個實施方案(其也為第三個方面的第四個實施方案的一個具體化方案)中，所述慢性疾病和/或病症選自慢性炎症、癌症、自身免疫疾病和/或病症、 慢性感染、動脈硬化、動脈粥樣硬化和肝硬化。在第三個方面的第六個實施方案(其也為第三個方面的第五個實施方案的一個具體化方案)中，慢性炎症選自慢性腎疾病、慢性阻塞性肺部疾病、多發性硬化、骨關節炎、 糖尿病、肥胖症、腦血管疾病、充血性心臟病、充血性心力衰竭、心肌梗死、冠狀動脈疾病、周圍閉塞性動脈疾病、胰腺炎和脈管炎，其中慢性腎疾病優選地選自腎臟病、慢性腎功能衰竭和慢性腎衰竭，和其中慢性腎疾病由腎臟透析或腎臟移植引起。在第三個方面的第七個實施方案(其也為第三個方面的第五個實施方案的一個具體化方案)中，自身免疫疾病和/或病症選自類風溼性關節炎、腸易激惹症候群、系統性紅斑狼瘡和克羅恩病。在第三個方面的第八個實施方案(其也為第三個方面的第五個實施方案的一個具體化方案)中，慢性感染選自病毒感染、病毒性疾病、細菌感染和真菌感染，其中優選地， 所述病毒感染包括肝炎和HIV感染，和所述細菌感染包括幽門螺桿菌感染。在第三個方面的第九個實施方案(其也為第三個方面的第一至第四個實施方案的一個具體化方案)中，由炎症引起的貧血為正常紅細胞性的至小紅細胞性的，和/或其特徵在於低的網織紅細胞生成指數和/或增加的炎症標誌物。在第三個方面的第十個實施方案(其也為第三個方面的第四個實施方案的一個具體化方案)中，所述遺傳病症為卡斯爾曼病、施尼茨勒(Schnitzler』 s syndrome)症候群、鐵難治性缺鐵性貧血(matriptase-2 (TMPRSS6)突變)、缺轉鐵蛋白血症、先天性紅細胞生成不良性貧血或血紅蛋白病
在第三個方面的第十一個實施方案(其也為第三個方面的第四個實施方案的一個具體化方案)中，所述急性感染選自病毒感染、細菌感染和真菌感染，優選地為膿毒症。在第三個方面的第十二個實施方案(其也為第三個方面的第五個實施方案的一個具體化方案)中，所述癌症選自肝細胞癌、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、頭與頸癌、乳腺癌、結腸直腸癌、非骨髓性癌、腎細胞癌、非小細胞肺癌、腫瘤和腦瘤。在第三個方面的第13個實施方案(其也為第三個方面的第三個實施方案的一個具體化方案)中，所述病狀選自共濟失調、弗裡德賴希共濟失調、年齡相關性黃斑變性、年齡相關性白內障、年齡相關性視網膜疾病和神經變性疾病，其中此類神經變性疾病優選地選自包括阿爾茨海默病、帕金森病、泛酸激酶相關的神經變性、腿多動症候群和亨廷頓舞蹈病的組。在第三個方面的第14個實施方案(其也為第三個方面的第三個實施方案的一個具體化方案)中，所述藥劑用於治療鐵超負荷，其中海帕西啶血漿水平未升高。在第三個方面的第15個實施方案(其也為第三個方面的第14個實施方案的一個具體化方案)中，鐵超負荷選自輸血性鐵超負荷、鐵中毒、肺含鐵血黃素沉著症、骨質減少、 胰島素抵抗、非洲人鐵超負荷、哈-施病、高鐵蛋白血症、血漿銅藍蛋白缺乏症、新生兒血色素沉著症和紅細胞病症，所述紅細胞病症包括地中海貧血、α地中海貧血、中間型地中海貧血、鐮狀細胞病和骨髓增生異常症候群。在第三個方面的第16個實施方案(其也為第三個方面的第十二至第15個實施方案的一個具體化方案)中，所述藥劑與鐵螯合化合物聯合使用。在第三個方面的第17個實施方案(其也為第三個方面的第16個實施方案的一個具體化方案)中，所述鐵螯合化合物選自薑黃素、去鐵胺、地拉羅司和去鐵酮。在第三個方面的第18個實施方案(其也為第三個方面的第一個實施方案的一個具體化方案)中，所述藥劑用於與另外的藥劑或治療方法相聯合或者用於與另外的藥劑或治療方法相聯合地使用，其中此類藥劑或治療方法包括另外的藥學活性化合物或者施用此類另外的藥學活性化合物，其中此類另外的藥學活性化合物選自鐵補充劑、維生素補充劑、 紅細胞生成刺激劑、抗生素、抗炎生物製劑、免疫系統的抑制劑、抗血栓溶解劑、他汀類、血管加壓藥和影響肌肉收縮的化合物。作為本發明的基礎的問題在第五個方面(其也為第五個方面的第一個實施方案) 中通過包含根據第一個方面的任一個實施方案的核酸和海帕西啶的複合物而得到解決，其中所述複合物優選地為晶體複合物。在第五個方面的第二個實施方案(其也為第五個方面的第一個實施方案的一個具體化方案)中，海帕西啶選自包括人海帕西啶、猴海帕西啶的組，更優選地海帕西啶為人海帕西啶。作為本發明的基礎的問題在第六個方面(其也為第六個方面的第一個實施方案) 中通過根據第一個方面的任一個實施方案的核酸用於檢測海帕西啶的用途而得到解決。在第六個方面的第二個實施方案(其也為第六個方面的第一個實施方案的一個具體化方案)中，海帕西啶選自包括人海帕西啶、猴海帕西啶的組，更優選地海帕西啶為人海帕西啶。作為本發明的基礎的問題在第七個方面(其也為第七個方面的第一個實施方案)中通過用於篩選海帕西啶的拮抗劑或激動劑的方法而得到解決，所述方法包括下列步驟-提供海帕西啶的候選拮抗劑和/或候選激動劑，-提供根據第一個方面的任一個實施方案的核酸，-提供測試系統，其在存在海帕西啶的拮抗劑和/或激動劑時提供信號，和-測定所述候選拮抗劑是否為海帕西啶的拮抗劑和/或所述候選激動劑是否為海帕西啶的激動劑。在第七個方面的第二個實施方案(其也為第七個方面的第一個實施方案的一個具體化方案)中，海帕西啶選自包括人海帕西啶、猴海帕西啶的組，更優選地海帕西啶為人海帕西啶。作為本發明的基礎的問題在第八個方面(其也為第八個方面的第一個實施方案) 中通過用於檢測海帕西啶的試劑盒而得到解決，所述試劑盒包含根據第一個方面的任一個實施方案的核酸，其中所述海帕西啶優選地為人海帕西啶。作為本發明的基礎的問題在第九個方面(其也為第九個方面的第一個實施方案) 中通過用於檢測樣品中的根據第一個方面的任一個實施方案的核酸的方法而得到解決，其中所述方法包括下列步驟a)提供含有根據本發明的核酸的樣品；b)提供捕獲探針和檢測探針，其中所述捕獲探針與根據第一個方面的任一個實施方案的核酸的第一部分至少部分地互補，和所述檢測探針與根據第一個方面的任一個實施方案的核酸的第二部分至少部分地互補，或者備選地，所述捕獲探針與根據第一個方面的任一個實施方案的核酸的第二部分至少部分地互補，和所述檢測探針與根據第一個方面的任一個實施方案的核酸的第一部分至少部分地互補；c)允許所述捕獲探針和所述檢測探針同時地或者以任何順序依次地與根據第一個方面的任一個實施方案的核酸或其部分反應；d)任選地，檢測所述捕獲探針是否與在步驟a)中提供的根據第一個方面的任一個實施方案的核酸雜交；和e)檢測在步驟C)中形成的複合物，其由根據第一個方面的任一個實施方案的核酸以及所述捕獲探針和所述檢測探針組成。在第九個方面的第二個實施方案(其也為第九個方面的第一個實施方案的一個具體化方案)中，所述檢測探針包含檢測工具，和/或其中所述捕獲探針可以固定至支持物，優選地固體支持物。在第九個方面的第三個實施方案(其也為第九個方面的第一和第二個實施方案的一個具體化方案)中，將不作為所述複合物的一部分的任何檢測探針從所述反應體系中去除，從而在步驟e)中僅檢測作為所述複合物的一部分的檢測探針。在第九個方面的第四個實施方案(其也為第九個方面的第一、第二和第三個實施方案的一個具體化方案)中，步驟e)包括下列步驟比較當所述捕獲探針和所述檢測探針在根據第一個方面的任一個實施方案的核酸或其部分存在的情況下和所述核酸或其部分不存在的情況下進行雜交時由所述檢測工具所產生的信號。本文所描述的根據本發明的核酸的特徵可以在本發明的任一方面中實現，其中單獨地或者以任意的組合使用所述核酸。
關於本發明，優選地，術語「提供樣品」不同於人體或動物體的治療或診斷方法，並且不包括人體或動物體的治療或診斷方法。人海帕西啶-25為鹼性蛋白質，其具有根據SEQ ID No. 1的胺基酸序列和8. 2的 pL·本發明基於令人驚訝的發現，即可以產生特異性地且以高親和力結合海帕西啶的核酸。此類核酸優選地在本文中也被稱為根據本發明的核酸分子、根據本發明的核酸、本發明的核酸或本發明的核酸分子。可以鑑定出對於人海帕西啶的短的且高親和力結合性的核酸這一發現在這種情況下是令人驚訝的，這是因為feton等人(1997)觀察到針對鹼性蛋白質的適體(aptamer) (即結合靶分子的D-核酸)的產生通常是非常困難的，因為這種類型的靶標產生了高的但非特異性的信噪比。這種高的信噪比是由於由核酸所顯示的對鹼性靶標(例如人海帕西啶)的高的非特異性親和力而引起的。如在權利要求書和實施例1中更詳細概述的，本發明人能夠更令人驚訝地鑑定出許多不同的結合人海帕西啶的核酸分子，其中大多數核酸可以根據核苷酸序列段(其在本文中也稱為盒)來表徵。基於所述盒和某些另外的結構特徵及元件，可以將各種結合人海帕西啶的核酸分子分別地分類為A型、B型和C型結合海帕西啶的核酸。不同類型的結合海帕西啶的核酸包含不同的核苷酸序列段。因此，不同類型的結合海帕西啶的核酸對於不同的海帕西啶肽顯示出不同的結合行為。如實施例中所證明的， 根據本發明的結合海帕西啶的核酸與人海帕西啶-25、人海帕西啶-22、人海帕西啶-20、食蟹猴海帕西啶-25和狨海帕西啶-25結合。應當理解，每當在本文中提及海帕西啶時，此類海帕西啶為海帕西啶-25，如果沒有指明與此相反的話。在本發明範圍內的是，根據本發明的核酸包含兩個或更多個原則上可以相互雜交的序列段或其部分。在這樣的雜交後，形成雙鏈結構。本領域技術人員將會理解，這樣的雜交可能發生或可能不發生，特別是在體外和/或體內條件下。此外，在這樣的雜交的情況下，並不必然的情形是所述雜交發生在所述兩個序列段的全長上，其中至少基於鹼基配對規則，原則上可能發生這樣的雜交和因此雙鏈結構的形成。如本文中優選地使用的，雙鏈結構是核酸分子的一部分，或者由兩條或更多條分開的鏈或者核酸分子的單鏈的兩個在空間上分開的序列段所形成的結構，由此存在有至少一個，優選地兩個或更多個鹼基對，它們優選地根據Watson-Crick鹼基配對規則進行鹼基配對。本領域技術人員還將會理解，其他鹼基配對例如Hoogsten鹼基配對可以存在於此類雙鏈結構中或者形成此類雙鏈結構。還應當承認的是，兩個序列段雜交這一特徵優選地表明，由於這兩個序列段的鹼基互補性而假定發生此類雜交。在優選地的實施方案中，本文中所使用的術語「排列」表示與在本文中所公開的核酸相關的在本文中所描述的結構或功能特徵或元件的次序或順序。本領域技術人員將會理解，根據本發明的核酸能夠結合海帕西啶。不希望受任何理論的束縛，本發明人假設所述海帕西啶結合是由於所要求保護的核酸分子的三維結構特性或元件的組合而引起的，所述三維結構特性或元件由形成此類特性或元件的核苷酸的一級序列的方向和摺疊模式造成。明顯的是，獨個特性或元件可由各種不同的獨個序列(其
25變異程度可依據此類元件或特性必須形成的三維結構而變化)形成。所要求保護的核酸的總體結合特徵分別起因於各種元件和特性的相互影響，這最終導致所要求保護的核酸與其靶標(即海帕西啶)的相互作用。再次不希望受任何理論的束縛，對於B型和C型結合海帕西啶的核酸而言特徵性的中央序列段以及對於A型結合海帕西啶的核酸而言特徵性的第一序列段盒A和第二序列段盒B，似乎對於介導所要求保護的核酸與海帕西啶的結合來說是重要的。因此，根據本發明的核酸適合於與海帕西啶相互作用和檢測海帕西啶。此外， 本領域技術人員將會理解，根據本發明的核酸為海帕西啶的拮抗劑。因此，根據本發明的核酸適合於分別治療和預防與海帕西啶相關或由海帕西啶引起的任何疾病或病狀。此類疾病和病狀可以從現有技術中獲得，所述現有技術確定海帕西啶分別參與所述疾病和病狀或者與所述疾病和病狀相關，並且通過提及而將所述現有技術引入本文以提供根據本發明的核酸的治療和診斷用途的科學原理。在本發明範圍內的是，根據本發明的核酸為核酸分子。如此，術語「核酸」和「核酸分子」在本文中以同義的方式進行使用，如果沒有指明與此相反的話。在本申請的一個實施方案中，所述核酸和因此所述核酸分子包含這樣的核酸分子，其特徵在於所有形成該核酸分子的連續核苷酸通過一個或超過一個的共價鍵彼此相連接或連結。更具體地，每個此類核苷酸優選地通過磷酸二酯鍵或其他鍵與其他兩個核苷酸相連接或連結，從而形成連續核苷酸的序列段。然而，在這樣的排列中，兩個末端核苷酸(即優選地，在5』末端處和在 3』末端處的核苷酸)各自僅與單個核苷酸相連接，條件是此類排列是線性的而非環狀的排列，並因此為線性的而非環狀的分子。在本申請的另一個實施方案中，所述核酸和因此所述核酸分子包含至少兩組連續核苷酸，其中在每組連續核苷酸內，每個核苷酸優選地通過磷酸二酯鍵或其他鍵與其他兩個核苷酸相連接或連結，從而形成連續核苷酸的序列段。然而，在這樣的排列中，所述至少兩組連續核苷酸的每個組的兩個末端核苷酸(即優選地，在5』末端處和在3』末端處的核苷酸)各自僅與單個核苷酸相連接。但是，在這樣的實施方案中，所述兩組連續核苷酸不通過共價鍵相互連接或連結，所述共價鍵連接一個組的一個核苷酸與另一個或另外一個組的一個核苷酸，這通過共價鍵，優選地在所述兩個核苷酸中一個核苷酸的糖部分與所述兩個核苷酸或核苷中另一個核苷酸或核苷的磷酸部分之間形成的共價鍵來進行。但是，在備選的實施方案中，所述兩組連續核苷酸通過共價鍵相互連接或連結，所述共價鍵連接一個組的一個核苷酸與另一個或另外一個組的一個核苷酸，這通過共價鍵，優選地在所述兩個核苷酸中一個核苷酸的糖部分與所述兩個核苷酸或核苷中另一個核苷酸或核苷的磷酸部分之間形成的共價鍵來進行。優選地，所述至少兩組連續核苷酸不通過任何共價鍵相連接。在另一個優選地的實施方案中，所述至少兩組通過與磷酸二酯鍵不同的共價鍵相連接。在另外一個實施方案中，所述至少兩組通過為磷酸二酯鍵的共價鍵相連接。進一步地，優選地， 所述兩組連續核苷酸通過共價鍵互相連接或連結，其中所述共價鍵在所述兩組連續核苷酸的第一組的3』末端處的核苷酸與所述兩組連續核苷酸的第二組的5』末端處的核苷酸之間形成，或者所述共價鍵在所述兩組連續核苷酸的第一組的5』末端處的核苷酸與所述兩組連續核苷酸的第二組的3』末端處的核苷酸之間形成。根據本發明的核酸還應該包括與本文所公開的特定序列基本同源的核酸。術語 「基本同源」應該優選地理解為，同源性為至少75 %，優選地85 %，更優選地90 %，和最優選地大於 95%、96%、97%、98%或 99%。兩個核酸分子之間的同源性可以如本領域技術人員已知的方式來測定。更具體而言，基於所指定的程序參數，可以將序列比較算法用於計算測試序列相對於參考序列的序列同源性百分比。測試序列優選是這樣的序列或核酸分子，即所述序列或核酸分子據稱與不同的核酸分子同源或者待測試它是否與不同的核酸分子同源(如果同源的話，同源到什麼程度)，其中這種不同的核酸分子也稱為參考序列。在一個實施方案中，參考序列是本文所描述的核酸分子，更優選地為具有根據SEQ ID No.四至43、SEQ ID N0.45至48、SEQ ID No. 110至156、SEQ ID No. 158至176或SEQ ID No. 179至181中任一個的序列的核酸分子。用於比較的最佳序列比對可以例如通過下列方法來進行Smith & Waterman的局部同源性算法(Smith & Waterman (1981)) ,Needleman & 1Wunsch 的同源性比對算法(Needleman & Wunsch，1970) ,Pearson & Lipman 的相似性搜索方法(Pearson & Lipman，1988)，這些算法的計算機化實施(Wisconsin Genetics Software Package,Genetics Computer Group, 575 Science Dr. , Madison, Wis.中的 GAP、BESTFIT、FASTA 和 TFASTA)，或目測檢查。適合於測定序列同一性百分比的算法的一個實例是在基本局部比對搜索工具 (basic local alignment search tool，在下文中稱為「BLAST」)中使用的算法，參見，例如 Altschul等人(Altschul等人，1990 ；和Altschul等人，1997)。用於進行BLAST分析的軟體是通過國家生物技術信息中心(National Center for Biotechnology Information，在下文中稱為「NCBI」)可公開獲得的。在使用從NCBI可獲得的軟體(例如BLASTN(用於核苷酸序列)和BLASTP(用於胺基酸序列))進行的序列同一性測定中所採用的默認參數描述在 McGinnis 等人(McGinnis 等人，2004)中。術語「本發明的核酸」或「根據本發明的核酸」(其中這兩個術語可互換地進行使用)還應該包括包含本文所公開的核酸序列或其部分的那些核酸，優選地至這樣的程度， 即所述核酸或所述部分參與結合人海帕西啶。在一個實施方案中，此類核酸是本文所描述的核酸分子之一，或者其衍生物和/或代謝產物，其中此類衍生物和/或代謝產物優選地為相比於本文所描述的核酸分子而言截短的核酸。截短可以涉及本文所公開的核酸的任一個末端或兩個末端。此外，截短可以涉及所述核酸的內部核苷酸序列，即其可以分別涉及在5， 和3』末端核苷酸之間的核苷酸。此外，截短應該包括從本文所公開的核酸序列中刪除少至單個核苷酸。截短還可以涉及本發明的核酸的超過一個的序列段，其中該序列段可以僅為一個核苷酸長。本領域技術人員可以通過用常規試驗或者通過使用或採用本文所描述的方法(優選地在本文中於實施例部分中所描述的方法)來測定根據本發明的核酸的結合。根據本發明的核酸可以是D-核酸或L-核酸。優選地，本發明的核酸是L-核酸。 另外，還可能的是，所述核酸的一個或幾個部分作為D-核酸存在或者所述核酸的至少一個或幾個部分是L-核酸。術語核酸的「部分」應該表示少至一個核苷酸。因此，在一個特別優選的實施方案中，根據本發明的核酸由L-核苷酸組成並包含至少一個D-核苷酸。此類 D-核苷酸優選附著至與定義根據本發明的核酸的序列段不同的部分，優選為其中涉及與該核酸的其他部分或與靶標(即海帕西啶)相互作用的該核酸的那些部分。優選地，此類 D-核苷酸分別附著在根據本發明的任意序列段的末端處或附著在根據本發明的任意核酸的末端處。在進一步優選的實施方案中，此類D-核苷酸可以用作間隔物或連接體，其優選地將修飾物或修飾基團例如PEG和HES附著至根據本發明的核酸。
同樣也在本發明的實施方案的範圍內的是，每個和任意的在本文中在它們的核酸序列方面以其整體描述的核酸分子局限於特定的核苷酸序列。換而言之，術語「包含」或「包括」在這樣的實施方案中應該理解為「容納」或「由...組成」。同樣也在本發明範圍內的是，根據本發明的核酸是更長的核酸的部分，其中該更長的核酸包含幾個部分，其中至少一個此類部分是根據本發明的核酸或其部分。這些更長的核酸的其他部分可以是一個或幾個D-核酸或者一個或幾個L-核酸。任何組合都可以用於本發明。更長的核酸的這些其他部分，單獨地或合在一起，以其整體或以特定組合，可以表現出不同於結合(優選地，結合海帕西啶)的功能。一種可能的功能是允許與其他分子(其中此類其他分子優選地與海帕西啶不同)相互作用，例如，用於固定、交聯、檢測或擴增。在本發明的另外的實施方案中，根據本發明的核酸包含幾個本發明核酸，作為獨個或組合的部分。包含幾個本發明核酸的此類核酸也由術語「更長的核酸」所涵蓋。本文中所使用的「L-核酸」或「L-核酸分子」是由L-核苷酸組成的核酸或核酸分子，優選地完全由L-核苷酸組成的核酸或核酸分子。本文中所使用的「D-核酸」或「D-核酸分子」是由D-核苷酸組成的核酸或核酸分子，優選地完全由D-核苷酸組成的核酸或核酸分子。此外，如果沒有指明與此相反，則任何核苷酸序列在本文中以5』 - > 3』的方向示
出ο如本文中優選地使用的，相對於序列、序列段或子序列段的5』末端來確定或指稱任何核苷酸位置。因此，第二個核苷酸為分別從序列、序列段或子序列段的5』末端起進行計數的第二個核苷酸。同樣地，根據該原則，倒數第二個核苷酸為分別從序列、序列段或子序列段的3』末端起進行計數的第二個核苷酸。無論本發明的核酸由D-核苷酸組成、由L-核苷酸組成還是由兩者的組合(該組合是例如隨機的組合，或者是由至少一個L-核苷酸和至少一個D-核酸組成的序列段的限定序列)組成，所述核酸可以由脫氧核糖核苷酸、核糖核苷酸或其組合組成。因為幾種原因，將本發明的核酸設計成L-核酸是有利的。L-核酸是天然存在的核酸的對映體。然而，由於核酸酶的廣泛存在，D-核酸在含水溶液中並且特別是在生物系統或生物樣品中不是非常穩定的。天然存在的核酸酶，特別是來自動物細胞的核酸酶不能降解L-核酸。因此，L-核酸的生物學半衰期在此類系統(包括動物體和人體)中顯著增加。 由於缺乏L-核酸的可降解性，因此沒有產生核酸酶降解產物並因而沒有觀察到從中產生的副作用。該方面界定了事實上所有其他化合物(其用於治療涉及海帕西啶的存在的疾病和/或病症)的L-核酸。通過不同於Watson-Crick鹼基配對的機制特異性地結合靶分子的L-核酸，或者部分或完全由L-核苷酸組成的適體(尤其是該適體的那些部分參與該適體與靶分子的結合)也稱為鏡像異構適體(Spiegelmer)。如所指的，適體(aptamer)是本領域技術人員已知的，並且尤其描述在「!"he Aptamer Handbook」(編者Klussmann，2006) 中。同樣也在本發明範圍內的是，根據本發明的核酸可以作為單鏈或雙鏈核酸存在， 不論它們作為D-核酸、L-核酸或D，L-核酸存在或者它們是DNA或RNA。通常，本發明的核酸是表現出由一級序列限定的二級結構並因而也可以形成三級結構的單鏈核酸。然而，本發明的核酸也可以是雙鏈的，這意味著彼此互補或部分互補的兩條鏈相互雜交，不論它們CN 102459587 A說明書18/64 頁
是否是兩條分開的鏈或者它們是否相互結合(優選地，共價結合)。可以修飾本發明的核酸。此類修飾物可以涉及所述核酸的單個核苷酸並且是本領域熟知的。此類修飾物的實例尤其描述在Venkatesan^)03) ；Kusser (2000)； Aurup(1994) ；Cummins(1995) ；Eaton(1995) ；Green(1995) ；Kawasaki(1993)； Lesnik(1993)；和Miller(199 中。此類修飾物可以是在作為本發明核酸的一部分的獨個核苷酸的2』位置處的H原子、F原子或者O-CH3基團或NH2-基團。此外，根據本發明的核酸可以包含至少一個LNA核苷酸。在一個實施方案中，根據本發明的核酸由LNA核苷酸組成。在一個實施方案中，根據本發明的核酸可以是多分體(multipartite)核酸。本文中所使用的「多分體核酸」是由至少兩條分開的核酸鏈組成的核酸。這些至少兩條核酸鏈形成功能單元，其中該功能單元是靶分子的配體。所述至少兩條核酸鏈可以衍生自任何本發明的核酸，其中通過切割核酸分子以產生兩條鏈而衍生，或者通過合成與本發明的(即整體)核酸的第一個部分相對應的一條核酸和與整體核酸的第二個部分相對應的另一條核酸而衍生。應當理解，切割和合成兩者均可用於產生其中存在超過兩條的如上所例示的鏈的多分體核酸。換而言之，所述至少兩條分開的核酸鏈通常不同於互補且相互雜交的兩條鏈，儘管在所述至少兩條核酸鏈之間可能存在一定程度的互補性，其中此類互補性可能導致所述分開的鏈雜交。最後，也在本發明範圍內的是，實現了根據本發明的核酸的完全閉合(即環狀的) 結構，也就是說，根據本發明的核酸在一個實施方案中是閉合的，優選地通過共價連接閉合，其中更優選地，此類共價連接在本文所公開的核酸序列或其任何衍生物的5』末端和3』 末端之間發生。測定根據本發明的核酸分子的結合常數的一種可能性是利用實施例4中所描述的表面等離子共振，所述實施例4證實了上述發現，即根據本發明的核酸表現出有利的Kd 值範圍。為了表示獨個核酸分子和靶標(在本情況下為海帕西啶)之間的結合強度的合適量度是所謂的Kd值，其中Kd值本身以及其測定方法是本領域技術人員已知的。優選地，根據本發明的核酸所顯示的Kd值低於1 μ M。大約ΙμΜ的Kd值被認為是核酸與靶標非特異性結合的特徵。如本領域技術人員將會理解的，一組化合物(例如根據本發明的核酸)的Kd值在某個範圍內。上述的大約ΙμΜ的Kd是優選的Kd值上限。結合靶標的核酸的Kd的下限可以小至大約IOpM或者可以更高。在本發明範圍內的是，結合海帕西啶的獨個核酸的Kd值優選地在這一範圍內。優選的範圍可以通過選擇該範圍內的任意第一個數字和該範圍內的任意第二個數字來限定。優選的上限Kd值為250ηΜ和ΙΟΟηΜ， 優選的下限Kd值為50nM、IOnM, InM、IOOpM和ΙΟρΜ。更優選的上限Kd值為2. 5nM，更優選的下限Kd值為400pM。根據本發明的核酸分子可以具有任意的長度，只要它們仍然能夠結合靶分子。本領域技術人員將會理解，存在有根據本發明的核酸的優選長度。通常，長度在15和120個核苷酸之間。本領域技術人員將會理解，在15和120之間的任何整數是根據本發明的核酸的可能長度。根據本發明核酸的長度的更優選的範圍是大約20至100個核苷酸、大約20 至80個核苷酸、大約20至60個核苷酸、大約20至50個核苷酸和大約30至50個核苷酸的長度。
在本發明範圍內的是，本文所公開的核酸包含這樣的部分，所述部分優選地為高分子量部分和/或優選地使得能夠改變所述核酸尤其是在動物體內(優選在人體內)的停留時間方面的特徵。此類修飾的特別優選的實施方案是根據本發明的核酸的PEG化和HES 化。如本文中所使用的，PEG表示聚乙二醇，而HES表示羥乙基澱粉。如本文中優選地使用的，PEG化是根據本發明的核酸的修飾，其中此類修飾由附著至根據本發明的核酸的PEG部分組成。如本文中優選地使用的，HES化是根據本發明的核酸的修飾，其中此類修飾由附著至根據本發明的核酸的HES部分組成。這些修飾物例如線性聚乙二醇、支化聚乙二醇、羥乙基澱粉、肽、蛋白質、多糖、固醇、聚氧丙烯、聚氧醯胺化物、聚(2-羥乙基)-L-穀氨醯胺和聚乙二醇，以及用此類修飾物來修飾核酸的方法，描述在歐洲專利申請EP 1 306 382中，該專利申請的公開內容在此通過提及而整體合併入本文中。優選地，由高分子量部分組成或包含高分子量部分的修飾物的分子量為大約 2，000至250，OOODa,優選地20，000至200，OOODa0在PEG為此類高分子量部分的情況下， 分子量優選地為20，000至120，OOODa,更優選地40，000至80，OOODa0在HES為此類高分子量部分的情況下，分子量優選地為20，000至200，OOODa,更優選地40，000至150，OOODa0 HES修飾方法(例如)描述在德國專利申請DE 1 2004 006249. 8中，該專利申請的公開內容在此通過提及而整體合併入本文中。在本發明範圍內的是，PEG和HES中的任一者可以以線性或支化的形式使用，如在專利申請W02005/074993、W02003/035665和EP1496076中進一步描述的。原則上，此類修飾可以在本發明核酸分子的任何位置處進行。優選地，此類修飾在根據本發明的核酸分子的5』 -末端核苷酸上、在根據本發明的核酸分子的3』 -末端核苷酸上和/或在根據本發明的核酸分子的5』核苷酸和3』核苷酸之間的任意核苷酸上進行。該修飾物，優選地PEG和/或HES部分，可以直接地或間接地(優選地通過連接體)附著至本發明核酸分子。同樣也在本發明範圍內的是，根據本發明的核酸分子包含一個或多個修飾物，優選地一個或多個PEG和/或HES部分。在一個實施方案中，獨個連接體分子將超過一個的PEG部分或HES部分附著至根據本發明的核酸分子。在本發明中使用的連接體可以本身是線性的或支化的。這種類型的連接體是本領域技術人員已知的並且在專利申請 W02005/074993、W02003/035665 和 EP1496076 中進一步描述。在優選的實施方案中，所述連接體為生物可降解的連接體。由於從根據本發明的核酸上釋放出該修飾物，因而生物可降解的連接體使得能夠改變根據本發明的核酸尤其是在動物體內(優選在人體內)的停留時間方面的特徵。使用生物可降解的連接體可能使得能夠更好地控制根據本發明的核酸的停留時間。此類生物可降解的連接體的優選的實施方案為在國際專利申請 W02006/052790、W02008/0;34122、W02004/092191 和 W02005/099768 中所描述的生物可降解的連接體，但不限於此。在本發明範圍內的是，所述修飾物或修飾基團為生物可降解的修飾物，其中所述生物可降解的修飾物可以直接地或間接地(優選地通過連接體)附著至本發明核酸分子。 由於從根據本發明的核酸上釋放出或降解下該修飾物，因而生物可降解的修飾物使得能夠改變根據本發明的核酸尤其是在動物體內(優選在人體內)的停留時間方面的特徵。使用生物可降解的修飾物可能使得能夠更好地控制根據本發明的核酸的停留時間。此類生物可降解的修飾物的優選的實施方案為在國際專利申請案W02002/065963、W02003/070823、
30W02004/113394 和 W02000/41647 (優選地，W02000/41647 的第 18 頁第 4 至 24 行)中所描述的生物可降解的修飾物，但不限於此。除了上面描述的修飾物之外，其他修飾物也可以用於改變根據本發明的核酸的特徵，其中此類其他修飾物可選自蛋白質、脂質(例如膽固醇)和糖鏈(例如澱粉酶、右旋糖酐等)。不希望受任何理論的束縛，看起來通過用高分子量部分例如聚合物，更特別地一種或幾種本文所公開的聚合物(其優選地為生理學上可接受的)來修飾根據本發明的核酸，改變了排洩動力學。更具體而言，看起來由於這種經修飾的本發明的核酸的分子量增加並且由於本發明核酸不經歷代謝(特別是在L形式時)，減少了從動物體內，優選地從哺乳動物體內，和更優選地從人體內的排洩。由於排洩通常通過腎臟發生，因此本發明人推測經如此修飾的核酸的腎小球濾過率相比於不具有這種類型的高分子量修飾的核酸而言顯著減小，這導致在動物體內的停留時間增加。就此而言，特別值得注意的是，儘管具有這種高分子量修飾，但是根據本發明的核酸的特異性沒有受到有害的影響。在這種情況下，根據本發明的核酸尤其具有令人驚訝的特徵(該特徵通常不能從藥學活性化合物中預期)， 從而使得不必需要具有持續釋放性質的藥物製劑以提供根據本發明的核酸的持續釋放。而是，以它們包含高分子量部分的修飾形式，根據本發明的核酸本身就可用作持續釋放製劑， 因為由於它們的修飾，它們已經就好像從持續釋放製劑中釋放那樣行動。在這種情況下，本文所公開的根據本發明的核酸分子的修飾和經如此修飾的根據本發明的核酸分子以及任何包含其的組合物可以提供不同的，優選地受控的藥物動力學及其生物分布。這還包括在循環中的停留時間和分配到組織中。此類修飾在專利申請W02003/035665中有進一步的描述。然而，同樣也在本發明範圍內的是，根據本發明的核酸不包含任何修飾，並且特別是不包含高分子量修飾例如PEG化或HES化。當根據本發明的核酸顯示出優先分配到體內的任何靶器官或組織時或者當希望在施用後從體內快速清除根據本發明的核酸時，此類實施方案是特別優選的。具有對體內任何靶器官或組織的優先分布特性的本文所公開的根據本發明的核酸將使得能夠在靶組織中建立有效的局部濃度，同時保持低的全身的核酸濃度。這將使得能夠使用低劑量，這不但從經濟學觀點來說是有利的，而且還減少了其他組織對於該核酸試劑的非必需的暴露，從而降低了潛在的副作用風險。在施用後從體內快速清除根據本發明的核酸可能是所希望的，尤其是在使用根據本發明的核酸或包含其的藥劑的體內成象或特別的治療性按劑量給藥要求的情況下。根據本發明的核酸和/或根據本發明的拮抗劑可用於產生或製備藥劑或藥物組合物，或者在產生或製備藥劑或藥物組合物中使用。根據本發明的此類藥劑或藥物組合物包含至少一種本發明的核酸，任選地與至少一種其他藥學活性化合物一起，其中本發明的核酸優選地本身用作藥學活性化合物。在優選的實施方案中，此類藥劑或藥物組合物至少包含藥學上可接受的載體。此類載體可以是例如水、緩衝液、PBS、葡萄糖溶液(優選地，5% 葡萄糖的鹽平衡溶液)、澱粉、糖、明膠或任何其他可接受的載體物質。此類載體通常是本領域技術人員已知的。本領域技術人員將會理解，本發明藥劑的任何實施方案、用途和方面或者與之相關的任何實施方案、用途和方面也可應用於本發明的藥物組合物，反之亦然。使用或意圖使用各自根據本發明的或根據本發明製備的核酸、藥物組合物和藥劑來進行治療和/或預防的適應症、疾病和病症是由於海帕西啶直接或間接參與各自的致病機理所致。如引言部分中所提及的，海帕西啶為調節鐵體內穩態的關鍵信號，其中高水平的人海帕西啶導致降低的血清鐵水平，而低水平導致增加的血清鐵水平，如在海帕西啶缺乏和海帕西啶過表達的小鼠模型中所顯示的(Nicolas，2001 ；Nicolas, 2002 ；Nicolas, 2003)。如在本文中也提及的，海帕西啶與膜鐵轉運蛋白的結合導致膜鐵轉運蛋白的立即內在化以及隨後的長期持續的血清鐵降低(Rivera，2005)，其中血鐵清的降低是貧血的原因。貧血被定義為循環血液中血紅蛋白的量的絕對減少，並且常常是表現為低血紅蛋白的疾病的症狀，和不是本身孤立的診斷。貧血是由於負面地損害紅細胞的產生和/或壽命的醫學狀況而引起的。另外，貧血可以為失血的結果。因此為了了解貧血的發展，基於作為基礎的機制，將貧血分成三種病因學類別a)減少的紅細胞產生，b)增加的紅細胞破壞，和c)失血。但是，這三種類別(減少的紅細胞產生、增加的紅細胞破壞和失血)相互間並無嚴格區分，而是可以相伴地或相互獨立地發生。在許多疾病中，所述機制的組合可以導致貧血。因此，海帕西啶的中和在許多貧血的病狀中可能是有益的。由於根據本發明的結合海帕西啶的核酸與人海帕西啶相互作用或結合人海帕西啶，因此技術人員將會了解，根據本發明的結合海帕西啶的核酸可以用於治療、預防和/或診斷本文所描述的人和動物的任何疾病。就此而言，應當理解，根據本發明的核酸分子可以用於治療和預防任何本文所描述的疾病、病症或疾狀。在下文中並且不希望受任何理論的束縛，提供了關於各種疾病、病症和疾狀而言使用根據本發明的核酸分子的原理，因而使得根據本發明的核酸分子的所要求保護的治療、預防和診斷可應用性看起來是可信的。為了避免任何不必要的重複，應當理解，由於涉及本領域技術人員已知且也在本文中概述的海帕西啶-膜鐵轉運蛋白相互作用，因而所述相互作用可由根據本發明的核酸分子來進行，從而達到所要求保護的治療和/或預防效應。因此，可使用根據本發明的藥劑來治療和/或預防的疾病和/或病症和/或患病狀況包括但不限於貧血、血鐵過少、異食癖、具有升高的海帕西啶水平的病狀、具有升高的鐵水平的病狀和/或具有鐵超負荷的病狀。優選地，貧血選自鐵粒幼細胞貧血、低色素小紅細胞性貧血、由慢性疾病和/或病症引起的貧血、由炎症引起的貧血、由遺傳病症引起的貧血、由急性感染引起的貧血、和/ 或由鐵代謝和/或體內穩態的基因中的突變引起的貧血。可引起貧血的各種慢性疾病和/或病症選自慢性炎症、癌症、自身免疫疾病和/或自身免疫病症、慢性感染、動脈硬化、動脈粥樣硬化和肝硬化。在這種情況下，可通過本發明核酸進行治療的貧血為由所述各種慢性疾病和/或病症中的任一種引起或與之相關的貧血。另外，貧血可以為由癌症治療(優選地，化學療法)引起的貧血。
慢性炎症的亞群為慢性腎疾病、慢性阻塞性肺部疾病、多發性硬化、骨關節炎、糖尿病、肥胖症、腦血管疾病、充血性心臟病、充血性心力衰竭、心肌梗死、冠狀動脈疾病、周圍閉塞性動脈疾病、胰腺炎、脈管炎，其中此類慢性腎疾病包括腎臟病、慢性腎功能衰竭、慢性腎衰竭，和/或由腎臟透析或腎臟移植引起。癌症的亞群為肝細胞癌、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、頭與頸癌、乳腺癌、結腸直腸癌、 非骨髓性癌、腎細胞癌、非小細胞肺癌、腫瘤和腦瘤。自體免疫疾病和/或病症的亞群為類風溼性關節炎、腸易激惹症候群、系統性紅斑狼瘡和克羅恩病。慢性感染的亞群為病毒感染、病毒性疾病、細菌感染和真菌感染，其中所述病毒感染包括但不限於肝炎和HIV感染，和所述細菌感染包括但不限於幽門螺桿菌感染。由炎症引起的貧血為正常紅細胞性的至小紅細胞性的，其特徵在於低的網織紅細胞生成指數，總鐵結合能力(TIBC)低或正常。在由炎症引起貧血的情況下，海帕西啶、急性期蛋白和其他炎症標誌物(例如C反應蛋白)增加。由炎症引起的貧血也稱為炎症性貧血。可引起貧血的各種遺傳病症選自卡斯爾曼病、施尼茨勒症候群、鐵難治性缺鐵性貧血(matriptase-2 (TMPRSS6)突變)、缺轉鐵蛋白血症、先天性紅細胞生成不良性貧血和血紅蛋白病。可引起貧血的各種急性感染選自病毒感染、細菌感染和真菌感染，其中病毒感染、 細菌感染和真菌感染獨個地或相互組合地可以導致膿毒症。術語「具有升高的海帕西啶水平的病狀」是指在哺乳動物(優選地，人)中的病狀，其中機體內的海帕西啶水平相比於此類哺乳動物的正常的海帕西啶水平而言升高，例如相比於該哺乳動物的正常海帕西啶血清水平(在人類的情況下，大約120ng/mL)而言升高的海帕西啶血清水平。升高的血清海帕西啶水平尤其可以通過酶聯免疫測定法(DRG Diagonstics, Marburg, Germany 白勺flJ^gi式齊[Ji ) ^5iiJt。因此，可優選地將根據本發明的藥劑用於其的患者包括但不限於用促紅細胞生成素和其他紅細胞刺激療法進行治療並且優選地顯示出對於促紅細胞生成素的低反應性的患者，其中更優選地，所述患者具有慢性腎疾病或患有癌症，其中癌症選自肝細胞癌、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、頭與頸癌、乳腺癌、結腸直腸癌、非骨髓性癌、腎細胞癌、非小細胞肺癌、 腫瘤和腦瘤。在進一步的實施方案中，根據本發明的藥劑包含另外的藥學活性化合物。此類另外的藥學活性化合物優選地為可以調節海帕西啶或膜鐵轉運蛋白的活性、濃度或表達的化合物。此類化合物優選地為切割海帕西啶原的蛋白酶的抑制劑、海帕西啶原的抗體、膜鐵轉運蛋白的拮抗劑例如膜鐵轉運蛋白的抗體、JAK2抑制劑、GDF15、BMP調節劑、可溶性血幼素或TGF-β抑制劑。可與包含根據本發明的核酸的藥劑一起使用或者包含在包含根據本發明的核酸的藥劑中的其他另外的藥學活性化合物為已知的和/或用於治療貧血和/或炎性病狀的那些化合物，其中所述炎性病狀的治療對貧血有正面影響。此類藥學活性化合物選自包括鐵補充劑、維生素補充劑、紅細胞生成刺激劑、抗生素、抗炎生物製劑、免疫系統的抑制劑、抗血栓溶解劑、他汀類、血管加壓藥和影響肌肉收縮的化合物的組。鐵補充劑的非限制性實例為硫酸亞鐵、葡糖酸亞鐵、右旋糖酐鐵、葡糖酸鐵鈉、羧基麥芽糖鐵、聚麥芽糖氫氧化鐵、富馬酸鐵、蔗糖鐵和蔗糖氫氧化鐵。維生素補充劑的非限制性實例為維生素C、葉酸、維生素B12、維生素B6和維生素 D0紅細胞生成刺激劑的非限制性實例為促紅細胞生成素、依泊汀、達貝泊汀、CERA、 HI F脯氨醯基羥化酶抑制劑(例如re-2216和!^-459 以及其他刺激紅細胞生成的試劑。抗生素的非限制性實例為氨基糖苷類、β -內醯胺抗生素、肽類抗生素、旋轉酶抑制劑、林可醯胺類、大環內酯抗生素、硝基咪唑衍生物、多肽抗生素、磺胺類、四環素和甲氧苄啶。抗炎生物製劑的非限制性實例為a) IL-6受體拮抗劑，例如託珠單抗或阿特利珠單抗(Atlizumab)b)TNF拮抗劑，例如依那西普、英利昔單抗、阿達木單抗、賽妥珠單抗 (Certolizumab)c) IL-I受體拮抗劑，例如阿那白滯素，和d)⑶20結合分子，例如利妥昔單抗和伊貝莫單抗(Ibritumab)。免疫系統的抑制劑的非限制性實例為硫唑嘌呤、布喹那、鈣調神經磷酸酶抑制劑、 苯丁酸氮芥、環孢菌素A、脫氧精胍菌素、來氟米特、氨甲蝶呤、咪唑立賓、嗎替麥考酚酯、雷帕黴素、他克莫司和沙利度胺。抗炎劑的非限制性實例為PDE4抑制劑例如羅氟司特，和皮質類固醇例如潑尼松龍、甲潑尼龍、氫化可的松、地塞米松、曲安西龍、倍他米松、泡騰劑(effervescent)、布地奈德、環索奈德和氟替卡松。抗血栓溶解劑的非限制性實例為激活的人C蛋白，例如屈曲克凝α。他汀類的非限制性實例為阿託伐他汀、西立伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、美伐他汀、匹伐他汀、普伐他汀、羅蘇伐他汀和辛伐他汀。血管加壓藥和/或影響肌肉收縮的化合物(inotropic compound)的非限制性實例為去甲腎上腺素、加壓素和多巴酚丁胺。除了具有升高的海帕西啶血漿水平的情形之外，根據本發明的核酸分子也可以用於在具有升高的鐵水平的患者和/或具有鐵超負荷和未升高的海帕西啶血漿水平的病狀中拮抗海帕西啶。優選地進行用根據本發明的核酸分子對此類患者的治療以降低細胞鐵濃度，其中所述治療優選地與鐵螯合化合物相聯合。通過根據本發明的核酸對生理性海帕西啶的中和保護了膜鐵轉運蛋白的表達，並由此支持了進一步的從細胞內儲備中的鐵釋放。 與鐵螯合化合物相聯合的膜鐵轉運蛋白保護經由尿液來去除鐵，並且降低全身鐵含量。在醫學領域中，鐵超負荷表示由於任何原因而引起的體內鐵積累。在人的情況下， 鐵超負荷的特徵為> 5mg的全身鐵含量。鐵超負荷也稱為血色素沉著症。術語「具有鐵超負荷的病狀」是指在哺乳動物(優選地，人)中的病狀，其中所述哺乳動物體內的鐵水平相比於此類哺乳動物的正常的鐵水平而言升高，例如相比於該哺乳動物的正常的鐵血清水平(在人類的情況下，大約20ymOl/L)而言升高的鐵血清水平，或者相比於該哺乳動物的肝臟中正常的鐵水平而言增加的在該哺乳動物的肝臟中的鐵水平。 通過直接測量血清鐵(其中尤其使用比色測定法)，通過標準運鐵蛋白飽和測定法(其揭示有多少鐵結合至在血液中攜帶鐵的蛋白質)，或者通過標準血清鐵蛋白測定法(例如Calbiotech，USA的ferritin Blood Test ELISA試劑盒)來測定升高的血清鐵水平。例如， 45%或更高的運鐵蛋白飽和水平常常表明血清中異常高水平的鐵。尤其可以通過從經肝臟活組織檢查而獲得的組織中測量肝臟的鐵含量，或者通過成象技術例如MRI和/或SQUID 來測定肝臟中的升高的鐵水平。在其他組織(例如腦、心臟)中的鐵水平的程度也可以通過使用這些和其他成象技術來評估。鐵超負荷的亞群為輸血性鐵超負荷、鐵中毒、肺含鐵血黃素沉著症、骨質減少、胰島素抵抗、非洲人鐵超負荷、哈-施病、高鐵蛋白血症、血漿銅藍蛋白缺乏症、新生兒血色素沉著症和紅細胞病症，所述紅細胞病症包括地中海貧血、α地中海貧血、中間型地中海貧血、鐮狀細胞病和骨髓增生異常症候群。患有其他與升高的鐵水平相關的病症/疾病的患者應當也可從用根據本發明的核酸分子的療法(優選地與鐵螯合化合物相聯合)中獲益。因此，可使用根據本發明的藥劑來進行治療和/或預防的疾病和/或病症和/或患病狀況包括但不限於具有升高的鐵水平的疾病，其包括共濟失調、弗裡德賴希共濟失調、年齡相關性黃斑變性、年齡相關性白內障、年齡相關性視網膜疾病和神經變性疾病，其中此類神經變性疾病包括阿爾茨海默病、帕金森病、泛酸激酶相關的神經變性、腿多動症候群和亨廷頓舞蹈病。在進一步的實施方案中，根據本發明的藥劑包含另外的藥學活性化合物，所述藥學活性化合物優選地為可以結合鐵並從哺乳動物體(特別是人體)的組織中或從循環中去除鐵的化合物。此類藥學活性化合物優選地選自鐵螯合化合物。此類化合物與根據本發明的核酸分子的組合將會進一步降低生理性海帕西啶濃度，並由此降低細胞鐵負擔。鐵螯合化合物的非限制性實例為薑黃素、去鐵胺、地拉羅司和去鐵酮。最後，所述另外的藥學活性試劑可為鐵代謝和/或鐵體內穩態的調節劑。備選地或另外地，此類另外的藥學活性試劑為另外的，優選地第二種種類的根據本發明的核酸。備選地，所述藥劑包含至少另一種核酸，所述核酸結合不同於海帕西啶的靶分子或者表現出與根據本發明的核酸之一不同的功能。優選地，此類至少另一種核酸表現出與本文所公開的所述一種或幾種另外的藥學活性化合物之一類似或相同的功能。在本發明範圍內的是，原則上將包含根據本發明的核酸的藥劑(在本文中也稱為 (本)發明的藥劑)備選地或另外地用於預防任何在所述藥劑用於治療所述疾病的用途方面所公開的疾病。因此，各自的標誌物，即各自疾病的各自標誌物，是本領域技術人員已知的。優選地，各自的標誌物為海帕西啶。在本發明的藥劑的一個實施方案中，將此類藥劑與用於任何本文所公開的疾病 (特別是，將使用本發明的藥劑進行治療的那些疾病)的其他治療聯合使用。本文中優選地使用的「聯合療法(combination therapy) 」或「綜合療法 (co-therapy) 」包括施用本發明的藥劑和至少第二種試劑作為治療方案的一部分，以期望從這些治療劑即本發明的藥劑和所述第二種試劑的共同作用中提供有益效應。這些治療劑的作為聯合或以聯合方式的施用通常在限定的時間期間內進行(通常為數分鐘、數小時、 數天或數周，這取決於所選擇的組合)。「聯合療法」可能(但通常不)意在包括施用兩種或更多種治療劑作為分開的單一療法方案的一部分，所述單一療法方案偶然地和不定地導致本發明的聯合。「聯合療法」意在包括以順次的方式施用這些治療劑，也就是說，其中每種治療劑在不同的時間施用，以及以基本上同時的方式施用這些治療劑或所述治療劑中的至少兩種。基本上同時施用可以例如通過下列方式來完成將具有固定比例的每種治療劑的單個膠囊或者將多個關於每種治療劑的單膠囊施用給受試者。治療劑的順次施用或基本上同時施用可以通過任何合適的途徑來實現，包括但不限於局部途徑、口服途徑、靜脈內途徑、肌內途徑和經過黏膜組織的直接吸收。治療劑可以通過相同的途徑或通過不同的途徑來進行施用。例如，治療有效試劑的特定聯合的第一種治療劑可以通過注射施用，而該聯合中的另一或其他治療劑可以局部施用。備選地，例如，所有治療劑可以局部施用或者所有治療劑可以通過注射施用。治療劑的施用順序不是重要的，除非另外說明。如果聯合療法還包括非藥物治療，則該非藥物治療可以在任何合適的時間進行，只要能實現從治療劑和非藥物治療的聯合中獲得有益效應。例如，在適當的情況下，當非藥物治療在時間上延緩可能幾天或甚至幾周，而仍施用治療劑時，仍然可能達到有益效應。如在上述通用術語中所論述的，根據本發明的藥劑原則上可以以本領域技術人員已知的任何形式施用。優選的施用途徑是全身性施用，更優選地，其通過腸胃外施用，優選通過注射來進行。備選地，所述藥劑可以局部施用。其他施用途徑包括肌內、腹膜內、皮下、 經口、鼻內、氣管內和肺部施用，優先選擇侵入性最低並同時確保效力的施用途徑。腸胃外施用通常用於皮下、肌內或靜脈內注射和輸注。另外，一種用於腸胃外施用的方法採用了緩釋或持續釋放系統的植入，其確保維持恆定的劑量水平，並且是本領域技術人員熟知的。此外，本發明的優選藥劑可以通過局部使用合適的鼻內媒介物(vehicle)、吸入劑來通過鼻內途徑進行施用，或者可以採用那些本領域技術人員所熟知的透皮貼劑的形式通過透皮途徑進行施用。為了以透皮遞送系統的形式施用，在整個給藥方案過程中，劑量的施用將通常是連續的而不是間歇性的。其他優選的局部製劑包括乳膏劑、軟膏劑、洗劑、氣霧噴霧劑和凝膠劑，其中活性成分的濃度的範圍通常將是0.01%至15% (w/w或w/v)。本發明的藥劑將會通常包含對於所述療法來說有效的量的活性組分，包括但不限於本發明的核酸分子，其優選地溶解或分散於藥學上可接受的介質中。藥學上可接受的介質或載體包括任何和所有的溶劑、分散介質、包衣、抗細菌和抗真菌劑、等滲劑和吸收延遲劑等。對於藥學活性物質使用此類介質和試劑是本領域熟知的。補充的活性成分也可以摻入到本發明的藥劑中。在進一步的方面，本發明涉及藥物組合物。此類藥物組合物包含至少一種根據本發明的核酸，和優選地包含藥學上可接受的媒介物。此類媒介物可以是本領域使用的和/ 或已知的任何媒介物或任何粘合劑。更特別地，此類粘合劑或媒介物是任何在關於本文所公開的藥劑的製備時所論述的粘合劑或媒介物。在進一步的實施方案中，所述藥物組合物包含另外的藥物學活性試劑。根據本公開內容，藥劑和藥物組合物的製備分別是本領域技術人員已知的。通常， 此類組合物可以製備成注射劑(作為液體溶液或懸浮液)；製備成適合於在注射前溶解或懸浮於液體中的固體形式；製備成用於口服施用的片劑或其他固體劑；製備成定時釋放膠囊；或製備成當前使用的任何其他形式，包括滴眼劑、乳膏劑、洗劑、油膏劑、吸入劑等。由外科醫生、內科醫生或衛生保健工作者使用無菌製劑(例如基於鹽水的洗液)來處理手術區中的特殊區域也可以是特別有用的。組合物也可以通過微型裝置、微顆粒或海綿進行遞送。在該情形中，待施用的活性成分的量和組合物的體積取決於待治療的個體或受試者。對於施用而言所必需的活性化合物的具體量取決於從業者的判斷，並且對於每個個體是特殊的。通常利用對於分散活性化合物而言所必需的最小體積的藥劑。合適的施用方案也是可變的，但是典型的是最初施用所述化合物並監測結果，然後以進一步的時間間隔提供進一步的受控劑量。例如，對於以片劑或膠囊(例如明膠膠囊)形式的口服施用，活性藥物組分即根據本發明的核酸分子和/或任何另外的藥學活性試劑(在本文中也將其統稱為治療劑或活性化合物)可以與口服的、無毒的、藥學上可接受的和優選地惰性的載體例如乙醇、甘油、水等相組合。而且，當期望或需要時，也可以將合適的粘合劑、潤滑劑、崩解劑和著色劑摻入到混合物中。合適的粘合劑包括澱粉，矽酸鎂鋁，澱粉漿，明膠，甲基纖維素，羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮，天然糖類例如葡萄糖或β -乳糖，玉米增甜劑，天然和合成的樹膠例如阿拉伯膠、黃蓍膠或藻酸鈉，聚乙二醇，蠟等。在這些劑型中使用的潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、苯甲酸鈉、乙酸鈉、氯化鈉、二氧化矽、滑石、硬脂酸、它的鎂鹽或鈣鹽和/或聚乙二醇等。崩解劑包括但不限於，澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、黃原膠澱粉、 瓊脂、藻酸或其鈉鹽、或泡騰混合物等。稀釋劑包括例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨糖醇、纖維素和/或甘氨酸。根據本發明的藥劑還可以以諸如定時釋放和持續釋放片劑或膠囊、丸劑、粉劑、顆粒劑、酏劑、酊劑、混懸劑、糖漿劑和乳劑的口服劑型來進行施用。有利地，由脂肪乳濁液或懸浮液來製備栓劑。根據本發明的藥物組合物或藥劑可以是經滅菌的和/或含有輔助劑，例如防腐齊IJ、穩定劑、潤溼劑或乳化劑、溶液促進劑(solution promoter)、用於調節滲透壓的鹽和/ 或緩衝劑。另外，它們還可以包含其他在治療上有價值的物質。所述組合物根據傳統的混合、粒化或包覆方法來製備，並且通常含有大約0. 至75%，優選地大約至50%的活性成分。液體的(特別是可注射的)組合物可以例如通過溶解、分散等來製備。將活性化合物溶解在藥學上純的溶劑(例如水、鹽水、含水右旋糖、甘油、乙醇等)中或與之混合從而形成可注射的溶液或懸浮液。另外，可以配製適合於在注射前溶解於液體中的固體形式。對於固體組合物，賦形劑包括藥物級的甘露醇、乳糖、澱粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石、纖維素、葡萄糖、蔗糖、碳酸鎂等。還可以用例如聚亞烷基二醇如丙二醇作為載體將上文限定的活性化合物配製成栓劑。在一些實施方案中，栓劑有利地由脂肪乳濁液或懸浮液製備。各自地，本發明的藥劑和核酸分子也可以以脂質體遞送系統例如小單層囊泡、大單層囊泡和多層囊泡的形式進行施用。脂質體可以由各種磷脂(包含膽固醇、硬脂胺或磷脂醯膽鹼)形成。在一些實施方案中，將脂質組分的薄膜與藥物水溶液水合以形成包囊該藥物的脂質層，這是本領域技術人員熟知的。例如，可以作為用本領域已知方法構建的與親脂化合物或非免疫原性高分子量化合物的複合物來提供根據本發明的核酸分子。另外，月旨質體可以在它們的表面上攜帶此類核酸分子，以便用於靶向和在內部攜帶細胞毒性試劑來介導細胞殺死。核酸相關的複合物的實例在美國專利號6，011，020中提供。各自地，本發明的藥劑和核酸分子也可以與作為可靶向的藥物載體的可溶性聚合物相偶聯。此類聚合物可以包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羥丙基-甲基丙烯醯胺-苯酚、聚羥乙基天冬醯胺苯酚(polyhydroxyethylaspanamid印henol)或聚環氧乙烷聚賴氨酸，其用棕櫚醯殘基取代。此外，各自地，本發明的藥劑和核酸分子可以偶聯至一類可用於實現藥物的受控釋放的生物可降解的聚合物，例如聚乳酸、聚ε -己內酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛類、聚二氫吡喃類、聚氰基丙烯酸酯類以及水凝膠的交聯或兩親性的嵌段共聚物。如果需要，各自地，待施用的藥物組合物和藥劑還可以含有一些量，通常較少量的非毒性輔助物質，例如潤溼劑或乳化劑、PH緩衝劑以及其他物質例如乙酸鈉和三乙醇胺油酸酯。各自使用本發明的核酸分子和藥劑的給藥方案可以根據多種因素進行選擇，包括患者的類型、物種、年齡、體重、性別和醫學狀況；待治療的病狀的嚴重度；施用途徑；患者的腎臟和肝臟的功能；以及所採用的特定的根據本發明的核酸或其鹽。普通醫師或獸醫能夠容易地確定和規定對於預防、對抗或阻止病狀進展而言所需的藥物的有效量。在治療本文所公開的任何疾病中，根據本發明的核酸的有效血漿水平的範圍優選地為 500fM 至 500 μ M0各自地，本發明的核酸分子和藥劑可優選地以單次日劑量、每兩天或每三天、每周、每兩周、以單次月劑量或者每三個月進行施用。在本發明範圍內的是，本文所描述的藥劑組成了本文所公開的藥物組合物。在進一步的方面，本發明涉及用於治療需要這種治療的受試者的方法，其中該方法包括施用藥學有效量的至少一種根據本發明的核酸。在一個實施方案中，受試者患有疾病或處於發展出此類疾病的風險中，其中所述疾病是本文所公開的那些疾病中的任何一種，特別是在關於任何根據本發明的核酸用於製備藥劑的用途時所公開的那些疾病中的任何一種。應當理解，根據本發明的核酸以及拮抗劑不僅可用作藥劑或用於製備藥劑，而且還可用於美容目的，特別是與海帕西啶參與發炎的區域性皮膚損害有關的美容目的。因此， 可使用根據本發明的核酸、藥劑和/或藥物組合物來治療或預防的其他病狀或疾病是發炎的區域性皮膚損害。如本文中優選地使用的，診斷或診斷劑或診斷工具適合於直接或間接地檢測海帕西啶，優選地本文所描述的海帕西啶，和更優選地本文中在關於本文所描述的各種病症和疾病時所描述的海帕西啶。該診斷適合於檢測和/或隨訪任何各自在本文中所描述的病症和疾病。此類檢測通過根據本發明的核酸與海帕西啶的結合而成為可能。可以直接或間接地檢測這種結合。相應的方法和工具是本領域技術人員已知的。尤其是，根據本發明的核酸可以包含標記，所述標記使得能夠檢測根據本發明的核酸，優選地結合至海帕西啶的核酸。此類標記優選地選自包括放射性標記、酶標記和螢光標記的組。原則上，所有已知的對於抗體而開發的測定法都可採用並進行調整以用於根據本發明的核酸，其中將靶結合性抗體替換成本發明的靶結合性核酸。在使用未標記的靶結合性抗體的抗體-測定法中，所述檢測優選地通過二抗來進行，所述二抗用放射性標記、酶標記和螢光標記進行修飾並且在所述靶結合性抗體的Fc-片段處結合所述靶結合性抗體。在核酸，優選地根據本發明的核酸的情形下，所述核酸用這樣的標記進行修飾，其中優選地，此類標記選自包括生物素、 Cy-3和Cy-5的組，並且此類標記通過針對此類標記的抗體例如抗生物素抗體、抗_Cy3抗體或抗_Cy5抗體來進行檢測，或者在所述標記是生物素的情況下，該標記通過天然結合生物素的鏈黴抗生物素蛋白或抗生物素蛋白來進行檢測。繼而，將此類抗體、鏈黴抗生物素蛋白或抗生物素蛋白優選地用相應的標記例如放射性標記、酶標記或螢光標記進行修飾，如同允許進行其檢測的二抗一樣。在進一步的實施方案中，根據本發明的核酸分子通過第二種檢測工具進行檢測或分析，其中所述第二種檢測工具是分子信標。分子信標的方法學是本領域技術人員已知的。簡而言之，核酸探針(其也稱為分子信標)是待檢測的核酸的反向互補序列並因而與待檢測的核酸的部分或整體雜交。在結合至待檢測的核酸後，分子信標的螢光基團分開，這導致螢光信號的變化，優選地為強度的變化。這種變化與待檢測的核酸的量相關。將會理解，用根據本發明的核酸來檢測海帕西啶將特別使得能夠檢測本文所定義的海帕西啶。關於海帕西啶的檢測，優選的方法包括下列步驟(a)提供樣品，其待就海帕西啶的存在進行檢測，(b)提供根據本發明的核酸，(c)讓所述樣品與所述核酸反應，優選地在反應容器中進行反應，其中步驟(a)可以在步驟(b)之前進行，或者步驟(b)可以在步驟(a)之前進行。在一個優選的實施方案中，提供了另外的步驟d)，其在於檢測所述核酸是否已經與海帕西啶反應。優選地，將步驟b)的核酸固定至表面。該表面可以是反應容器例如反應管、平板上的孔的表面，或者可以是包含於此類反應容器中的裝置(例如珠)的表面。將核酸固定至表面可以通過任何本領域技術人員已知的手段來完成，包括但不限於非共價或共價連接。優選地，通過在表面和核酸之間的共價化學鍵來建立連接。然而，同樣也在本發明範圍內的是，將核酸間接地固定至表面，其中此類間接固定涉及使用另外的組分或一對相互作用夥伴(interaction partners)。此類另外的組分優選地為與待固定的核酸特異性地相互作用的化合物(其也稱為相互作用夥伴)，並因而介導核酸附著至該表面。相互作用夥伴優選地選自包括核酸、多肽、蛋白質和抗體的組。優選地，相互作用夥伴為抗體，更優選地為單克隆抗體。備選地，相互作用夥伴為核酸，優選地為功能性核酸。更優選地，此類功能性核酸選自適體、鏡像異構適體和至少與該核酸部分互補的核酸。在進一步的備選的實施方案中，核酸與表面的結合由多分體相互作用夥伴(multi-partite interaction partner) 介導。此類多分體相互作用夥伴優選地為由第一個成員和第二個成員組成的一對相互作用夥伴或一個相互作用夥伴，其中第一個成員包含在該核酸中或與其相附著，而第二個成員附著至該表面或包含在該表面內。多分體相互作用夥伴優選地選自包括生物素和抗生物素蛋白、生物素和鏈黴抗生物素蛋白、以及生物素和中性鏈黴抗生物素蛋白(neutravidin) 的相互作用夥伴對。優選地，所述相互作用夥伴對的第一個成員是生物素。此類用於檢測海帕西啶的方法的優選的結果是形成了海帕西啶和所述核酸的經固定的複合物，其中更優選地，檢測到所述複合物。在實施方案範圍內的是，檢測出包含於該複合物中或從該複合物中釋放出的海帕西啶。
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適合於檢測所述海帕西啶的相應的檢測工具是任何對於海帕西啶特異的檢測工具。特別優選的檢測工具是選自包括核酸、多肽、蛋白質和抗體的組的檢測工具。根據本發明的用於檢測海帕西啶的方法還包括將樣品從已經優選地用於實施步驟c)的反應容器中移除。在進一步的實施方案中，本發明的方法還包括將海帕西啶的相互作用夥伴固定在表面(優選地，如上定義的表面)上的步驟，其中該相互作用夥伴是如本文中定義的，和優選地如上面在關於相應的方法時所定義的，並且更優選地在它們的各種實施方案中包括核酸、多肽、蛋白質和抗體。在這個實施方案中，特別優選的檢測工具是根據本發明的核酸，其中此類核酸可為經標記的或未標記的。在此類核酸為經標記的情況下，所述核酸包含檢測標記。此類檢測標記可以直接或間接地被檢測。在本文所描述的各種實施方案中，此類檢測也可以涉及第二種檢測工具的使用，所述第二種檢測工具也優選地選自包括核酸、多肽、 蛋白質和抗體的組。此類第二種檢測工具優選地為對於根據本發明的核酸是特異性的，並且在根據本發明的核酸包含檢測標記的情況下，此類第二種檢測工具為對於所述檢測標記是特異性的。在更優選的實施方案中，第二種檢測工具是分子信標。同樣也在本發明範圍內的是，第二種檢測工具在優選的實施方案中包含檢測標記。不論其是否被根據本發明的核酸或第二種檢測工具所包含，所述檢測標記優選地選自包括生物素、溴脫氧尿苷標記、洋地黃毒苷標記、螢光標記、UV-標記、放射性標記和螯合劑分子的組。特別優選的組合如下附著至根據本發明的核酸的檢測標記是生物素而第二種檢測工具是針對生物素的抗體，或其中附著至根據本發明的核酸的檢測標記是生物素而第二種檢測工具是抗生物素蛋白或攜帶抗生物素蛋白的分子，或其中附著至根據本發明的核酸的檢測標記是生物素而第二種檢測工具是鏈黴抗生物素蛋白或攜帶鏈黴抗生物素蛋白的分子，或其中附著至根據本發明的核酸的檢測標記是生物素而第二種檢測工具是中性鏈黴抗生物素蛋白或攜帶中性鏈黴抗生物素蛋白的分子，或其中附著至根據本發明的核酸的檢測標記是溴脫氧尿苷而第二種檢測工具是針對溴脫氧尿苷的抗體，或其中附著至根據本發明的核酸的檢測標記是洋地黃毒苷而第二種檢測工具是針對洋地黃毒苷的抗體，或其中附著至根據本發明的核酸的檢測標記是螯合劑而第二種檢測工具是放射性核素，其中優選的是，所述檢測標記附著至根據本發明的核酸。應當理解，這些類型的組合也可應用於其中根據本發明的核酸附著至表面的實施方案。在此類實施方案中，優選的是，檢測標記附著至第二種檢測工具，即優選地相互作用夥伴。最後，同樣也在本發明範圍內的是，用第三種檢測工具檢測第二種檢測工具，優選地，第三種檢測工具是酶，更優選地在與第二種檢測工具反應後顯示出酶促反應的酶。備選地，第三種檢測工具是用於檢測輻射(更優選地，由附著至根據本發明的核酸或第二種檢測工具(優選地，第二種檢測工具)的放射性核素髮射的輻射)的工具。優選地，第三種檢測工具特異性地檢測第二種檢測工具和/或與第二種檢測工具相互作用。
此外，在將海帕西啶的相互作用夥伴固定在表面上並將根據本發明的核酸優選地加入至在所述相互作用夥伴和所述海帕西啶之間形成的複合物中的實施方案之中，可以將樣品從反應體系中移除，更優選地從在其中進行步驟C)和/或d)的反應容器中移除。在一個實施方案中，根據本發明的核酸包含螢光部分，並且其中該螢光部分的螢光在一方面在所述核酸與海帕西啶之間形成複合物時和在另一方面在所述核酸和游離的海帕西啶的情況下是不同的。在進一步的實施方案中，在根據本發明的用於檢測海帕西啶的方法中所使用的核酸是根據本發明的核酸的衍生物，其中所述核酸的衍生物包含至少一種腺苷的螢光衍生物以替換腺苷。在優選的實施方案中，所述腺苷的螢光衍生物是亞乙烯基腺苷。在進一步的實施方案中，利用螢光來檢測由根據本發明的核酸的衍生物和海帕西啶組成的複合物。在所述方法的一個實施方案中，信號在步驟(C)或步驟(d)中產生，並且優選地， 所述信號與樣品中海帕西啶的濃度相關。在一個優選的實施方案中，所述方法可以在96孔平板中進行，其中將組分固定在如上描述的反應容器中並且將孔用作反應容器。本發明的核酸可以進一步用作用於藥物設計的起始材料。主要存在兩種可能的方法。一種方法是篩選化合物文庫，其中此類化合物文庫優選地為低分子量化合物文庫。在一個實施方案中，所述篩選是高通量篩選。優選地，高通量篩選是在基於靶標的測定法中對化合物進行快速且有效的試錯法(trial-and-error)評估。在最好的情況下，基於靶標的測定法的測定法形式基於比色測量法。與之相關地使用的文庫是本領域技術人員已知的。備選地，根據本發明的核酸可用於藥物的合理設計。優選地，合理藥物設計是設計藥物學先導結構。從靶標的三維結構開始，用電腦程式把包含許多不同化合物的結構的資料庫搜索一遍，所述三維結構通常通過諸如X射線晶體學或核磁共振光譜學之類的方法來確定。該選擇通過計算機來完成，隨後可在實驗室中測試所確定的化合物。合理藥物設計可以從任何根據本發明的核酸開始，並涉及與本發明的核酸的結構相似的或者與本發明的核酸的結構中的介導所述核酸與靶標(即海帕西啶)結合的那部分相同的結構，優選地三維結構。在合理藥物設計中的進一步的步驟中或作為備選的步驟，用不同於核苷酸和核酸的化學基團來模擬結合至海帕西啶的所述核酸的那些部分的(優選地)三維結構。通過這種模擬，可以設計出不同於根據本發明的核酸的化合物。此類化合物優選地為小分子或肽。在例如通過使用本領域技術人員已知的競爭性測定法來篩選化合物文庫的情況下，可發現合適的海帕西啶類似物、海帕西啶激動劑或海帕西啶拮抗劑。這種競爭性測定法可以如下建立。將本發明的核酸(優選地，作為結合靶標的L-核酸的鏡像異構適體)偶聯至固相。為了鑑定海帕西啶類似物，可以將經標記的海帕西啶加入至該測定法。潛在的類似物將與海帕西啶分子競爭結合該鏡像異構適體，這將伴隨有通過相應標記獲得的信號的減少。篩選激動劑或拮抗劑可以涉及使用本領域技術人員已知的細胞培養測定法。根據本發明的試劑盒可以包含至少一種或幾種本發明的核酸。另外，所述試劑盒可以包含至少一種或幾種陽性或陰性對照。陽性對照可以例如是海帕西啶，特別是被本發明的核酸結合的海帕西啶，其中優選地，陽性對照以液體或凍幹的形式存在。陰性對照可以例如是根據類似於海帕西啶的生物物理學性質而限定的肽，但是其不會被本發明的核酸所識別。此外，所述試劑盒可以進一步包含一種或幾種緩衝液。各種成分可以以乾燥或凍幹的形式包含在該試劑盒中，或者可以溶解或分散在液體中。所述試劑盒還可以進一步包括一個或幾個容器，所述容器繼而可以包含一種或幾種該試劑盒的成分。在更進一步的實施方案中，所述試劑盒進一步包括說明書或說明書散頁，其將有關如何使用試劑盒及其各種成分的信息提供給使用者。對在人體或非人體的數種體液、組織和器官中的根據本發明的核酸進行定量對於評估根據本發明的核酸的藥物動力學和藥效動力學特性來說是必需的。為此目的，可以採用使用根據本發明的核酸的任何本文所公開的或本領域技術人員已知的檢測方法。在本發明的進一步的方面，提供了用於檢測根據本發明的核酸的夾心雜交測定法。關於此類夾心雜交測定法，使用捕獲探針和檢測探針。所述捕獲探針與根據本發明的核酸的第一部分基本上互補，而所述檢測探針與根據本發明的核酸的第二部分基本上互補。捕獲探針和檢測探針均可以由DNA核苷酸、經修飾的DNA核苷酸、經修飾的RNA核苷酸、RNA核苷酸、LNA核苷酸和/或PNA核苷酸形成。因此，捕獲探針包含與根據本發明的核酸的5』 -末端基本上互補的核苷酸序列段，而檢測探針包含與根據本發明的核酸的3』 -末端基本上互補的核苷酸序列段。在該情況下，將捕獲探針經由其5』 -末端固定至表面或基質，其中該捕獲探針可以在其5』 -末端處直接固定，或者經由在其5』 -末端和表面或基質之間的連接體進行固定。然而，原則上， 所述連接體可以連接至捕獲探針的每個核苷酸。所述連接體可以由親水性連接體形成，或者由D-DNA核苷酸、經修飾的D-DNA核苷酸、D-RNA核苷酸、經修飾的D-RNA核苷酸、D-LNA 核苷酸、PNA核苷酸、L-RNA核苷酸、L-DNA核苷酸、經修飾的L-RNA核苷酸、經修飾的L-DNA 核苷酸和/或L-LNA核苷酸形成，正如本領域技術人員所已知的。備選地，捕獲探針可以包含與根據本發明的核酸的3』 -末端基本上互補的核苷酸序列段，而檢測探針包含與根據本發明的核酸的5』 -末端基本上互補的核苷酸序列段。在該情況下，將捕獲探針經由其3』-末端固定至表面或基質，其中該捕獲探針可以在其3』-末端處直接固定，或者經由在其3』 -末端和表面或基質之間的連接體進行固定。然而，原則上，所述連接體可以連接至與根據本發明的核酸基本上互補的核苷酸序列段的每個核苷酸。所述連接體可以由親水性連接體形成，或者由D-DNA核苷酸、經修飾的D-DNA核苷酸、 D-RNA核苷酸、經修飾的D-RNA核苷酸、D-LNA核苷酸、PNA核苷酸、L-RNA核苷酸、L-DNA核苷酸、經修飾的L-RNA核苷酸、經修飾的L-DNA核苷酸和/或L-LNA核苷酸形成，正如本領域技術人員所已知的。各自地可以與根據本發明的核酸雜交的捕獲探針和檢測探針的核苷酸數目是可變的並且可依賴於捕獲探針和/或檢測探針和/或根據本發明的核酸自身的核苷酸數目。 可與根據本發明的核酸雜交的捕獲探針和檢測探針的核苷酸總數目的最大值應該是根據本發明的核酸所包含的核苷酸數目。檢測探針和捕獲探針的各自獨立的核苷酸的最小數目 (通常為2至10個核苷酸)應該使得能夠分別與根據本發明的核酸的5』 -末端或3』 -末端雜交。此外，檢測探針優選地攜帶有本文先前所描述的可檢測的標誌物分子或標記。原則上，所述標記或標誌物分子可以連接至檢測探針的每個核苷酸或檢測探針的每個部分。優選地，所述標記或標誌物位於檢測探針的5』-末端或3』-末端，其中在與根據本發明的核酸互補的檢測探針內的核苷酸和所述標記之間可以插入連接體。所述連接體可以由親水性連接體形成，或者由D-DNA核苷酸、經修飾的D-DNA核苷酸、D-RNA核苷酸、經修飾的D-RNA 核苷酸、D-LNA核苷酸、PNA核苷酸、L-RNA核苷酸、L-DNA核苷酸、經修飾的L-RNA核苷酸、 經修飾的L-DNA核苷酸和/或L-LNA核苷酸形成，正如本領域技術人員所已知的。在用於檢測海帕西啶的方法的一個實施方案中，根據本發明的核酸的檢測可以如下進行將根據本發明的核酸以其一端與捕獲探針雜交，並且以其另一端與檢測探針雜交。然後，通過例如一個或多個洗滌步驟來去除未結合的檢測探針，即未與根據本發明的核酸結合的檢測探針。隨後，例如如在W0/2008/052774(其通過提及而合併入本文)中更詳細地概括的，可以測量結合的檢測探針的量，所述檢測探針優選地攜帶有標記或標記物分子。如本文中優選地使用的，術語「治療」在一個優選的實施方案中另外地或備選地包括預防和/或隨訪。如本文中優選地使用的，如果沒有指出與此相反，術語「疾病」和「病症」應當可互換地進行使用。如本文中所使用的，術語「包含」優選地無意於限制該術語前面的主題或由該術語所描述的主題。然而，在一個備選的實施方案中，術語「包含」應當以容納的含義理解，並因而理解為限制了該術語前面的主題或由該術語所描述的主題。本文所使用的根據本發明的核酸分子和靶分子海帕西啶的各個SEQ ID No.、化學性質，其實際序列，以及內部參考號概括在下表中。
權利要求
1.能夠結合海帕西啶的核酸。
2.根據權利要求1的核酸，其中所述核酸為海帕西啶的拮抗劑。
3.根據權利要求1和2中任一項的核酸，其中所述核酸為海帕西啶-膜鐵轉運蛋白系統的抑制劑。
4.根據權利要求1至3中任一項的核酸，其中所述核酸以5』- > 3』方向包含第一末端核苷酸序列段、中央核苷酸序列段和第二末端核苷酸序列段，其中所述中央核苷酸序列段包含32至40個核苷酸，優選地32至35個核苷酸。
5.根據權利要求1至3中任一項的核酸，其中所述核酸以5』- > 3』方向包含第二末端核苷酸序列段、中央核苷酸序列段和第一末端核苷酸序列段，其中所述中央核苷酸序列段包含32至40個核苷酸，優選地32至35個核苷酸。
6.根據權利要求4至5中任一項的核酸，其中所述中央核苷酸序列段對於結合海帕西啶來說是必需的。
7.根據權利要求4至6中任一項的核酸，其中所述中央核苷酸序列段包含5』RKAUGGG AKUAAGUAAAUGAGGRGUffGGAGGAAR 3』 或 5』 RKAUGGGAKAAGUAAAUGAGGRGUffGGAGGAAR 3』 的核苷酸序列。
8.根據權利要求4至7中任一項的核酸，其中所述中央核苷酸序列段包含5』RKAUGGG AKUAAGUAAAUGAGGRGUUGGAGGAAR 3』，優選地 5』 GUAUGGGAUUAAGUAAAUGAGGA⑶UGGAGGAAG 3' 的核苷酸序列。
9.根據權利要求7至8中任一項的核酸，其中所述第一末端核苷酸序列段與所述第二末端核苷酸序列段任選地相互雜交，其中在雜交後形成雙鏈結構，所述第一末端核苷酸序列段包含5至8個核苷酸，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5至8個核苷酸。
10.根據權利要求9的核酸，其中所述雙鏈結構由5至8個鹼基對組成。
11.根據權利要求7至10中任一項，優選地權利要求8至10中任一項的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸序列段包含5』 ^C1X2X3SBSBC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GVBVYX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中\為k或不存在，&為G或不存在，&為B或不存在，X4為S或不存在，&為C或不存在，並且& SU或不存在。
12.根據權利要求7至11中任一項的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸序列段包含 5' X1X2X3SBSBC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GVBVBX4X5X6 3』 的核苷酸序列，其中a)X1為A，&為G，X3為B，&為S，X5為C，並且X6為U，或者b)X1不存在，X2為G，&為B, X4為S，&為C，並且X6為U,或者CU1為A，&為G，X3為B，&為S，X5為C，並且X6不存在。
13.根據權利要求7至12中任一項的核酸，其中a)所述第一末端核苷酸序列段包含5』AGCGUGUC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGUGCG⑶3』的核苷酸序列，或者b)所述第一末端核苷酸序列段包含5』AGCGUGUC3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCAUG⑶3』的核苷酸序列，或者c)所述第一末端核苷酸序列段包含5』AGUGUGUC3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GAUGCG⑶3』的核苷酸序列，或者d)所述第一末端核苷酸序列段包含5』AGUGUGUC3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCAUG⑶3』的核苷酸序列，或者e)所述第一末端核苷酸序列段包含5』AGCGUGCC3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGUGCG⑶3』的核苷酸序列，或者f)所述第一末端核苷酸序列段包含5』AGCGCGCC3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCGCG⑶3』的核苷酸序列。
14.根據權利要求7至10中任一項，優選地權利要求8至10中任一項的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸序列段包含5』 ^C1X2X3SBSBC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GVBVYX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中a) X1不存在，X2為G，&為B，X4為S，&為C，並且\不存在，或者WX1不存在，X2不存在，X3為B，&為S，X5為C，並且X6不存在，或者CU1不存在，X2為G，&為B, X4為S，X5不存在，並且X6不存在。
15.根據權利要求7至11和14中任一項的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸序列段包含5』 X1X2X3SBSBC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GVBVYX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中X1不存在，\不存在，&為B或不存在，&為S或不存在，X5不存在，並且\不存在。
16.根據權利要求15的核酸，其中a)所述第一末端核苷酸序列段包含5』GCGCGC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GCGCGC 3』的核苷酸序列，或者b)所述第一末端核苷酸序列段包含5』GGUGUC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCAUC 3』的核苷酸序列，或者c)所述第一末端核苷酸序列段包含5』GGCGUC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCGCC 3』的核苷酸序列，或者d)所述第一末端核苷酸序列段包含5』GCGCC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GGCGC 3』的核苷酸序列，或者e)所述第一末端核苷酸序列段包含5』GGCGC 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 GCGCC 3』的核苷酸序列。
17.根據權利要求7至16中任一項的核酸，其中所述核酸包含根據SEQID No. 115至 119、SEQ ID No. 121、SEQ ID No. 142、SEQ ID No. 144、SEQ ID No. 146、SEQ ID No. 148、SEQ ID No. 151、SEQ ID No. 152、SEQ ID No. 175 或 SEQ ID No. 176 中任一個的核酸序列。
18.根據權利要求4至6中任一項的核酸，其中所述中央核苷酸序列段包含5』GRCRGCC GGVGGACACCAUAUACAGACUACKAUA 3'或 5' GRCRGCCGGARGGACACCAUAUACAGACUACKAUA 3'的核苷酸序列。
19.根據權利要求4至6和18中任一項的核酸，其中所述中央核苷酸序列段包含5』GR CRGCCGGGGGACACCAUAUACAGACUACKAUA 3 』，優選地 5 』 GACAGCCGGGGGACACCAUAUACAGACUACGAU A 3』的核苷酸序列。
20.根據權利要求18至19中任一項的核酸，其中所述第一末端核苷酸序列段與所述第二末端核苷酸序列段任選地相互雜交，其中在雜交後形成雙鏈結構，所述第一末端核苷酸序列段包含4至7個核苷酸，並且所述第二末端核苷酸序列段包含4至7個核苷酸。
21.根據權利要求20的核酸，其中所述雙鏈結構由4至7個鹼基對組成。
22.根據權利要求18至21中任一項的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸序列段包含 5』 X1X2X3SBSN 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 NSVSX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中&為A或不存在，&為G或不存在，&為R或不存在，&為Y或不存在，&為C或不存在，並且& SU或不存在。
23.根據權利要求18至22中任一項，優選地權利要求19至22中任一項的核酸分子， 其中所述第一末端核苷酸序列段包含SI1X2X3SBSN 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 NSVSX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中a)X1為A，&為G，X3為R，X4為Y，X5為C，並且X6為U，或者b)X1不存在，X2為G，&為R，X4為Y，&為C，並且X6為U,或者CU1為A，&為G，X3為R，X4為Y，X5為C，並且X6不存在。
24.根據權利要求18至23中任一項的核酸，其中a)所述第一末端核苷酸序列段包含5』AGGCUCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGGGCCU 3』的核苷酸序列，或者b)所述第一末端核苷酸序列段包含5』AGGCCCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGGGCCU 3』的核苷酸序列，或者c)所述第一末端核苷酸序列段包含5』AGGCUUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGAGCCU 3』的核苷酸序列，或者d)所述第一末端核苷酸序列段包含5』AGACUUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGAGU⑶3』的核苷酸序列。
25.根據權利要求18至22中任一項，優選地權利要求19至22中任一項的核酸分子， 其中所述第一末端核苷酸序列段包含SI1X2X3SBSN 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 NSVSX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中a) X1不存在，X2為G，&為R，X4為Y，&為C，並且\不存在，或者WX1不存在，X2不存在，X3為R，X4為Y, X5為C，並且X6不存在，或者CU1不存在，X2為G，&為R，X4為Y，X5不存在，並且X6不存在。
26.根據權利要求18至22和25中任一項的核酸，其中所述第一末端核苷酸序列段包含5』 GGCUCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGGGCC 3』的核苷酸序列。
27.根據權利要求18至22中任一項的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸序列段包含 5' X1X2X3SBSN 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 NSVSX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中X1不存在，\不存在，&為R或不存在，&為Y或不存在，X5不存在，並且\不存在。
28.根據權利要求18至22和27中任一項的核酸，其中所述第一末端核苷酸序列段包含5』GGCCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGGCC 3』的核苷酸序列，或者所述第一末端核苷酸序列段包含5』GCGCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGCGC 3』的核苷酸序列。
29.根據權利要求1至6和18至洲中任一項的核酸，其中所述核酸包含根據SEQID No. 122 至 126、SEQ ID No. 154、SEQ ID No. 159、SEQ ID No. 163 或 SEQ ID No. 174 中任一個的核酸序列。
30.根據權利要求4至6中任一項的核酸，其中所述中央核苷酸序列段以5』- > 3』方向包含下列核苷酸序列段盒A、連接性核苷酸序列段和盒B ；或者盒B、連接性核苷酸序列段和盒A，其中所述盒A包含5』 WAAAGUWGAR 3』的核苷酸序列，所述連接性核苷酸序列段包含10至18個核苷酸，並且所述盒B包含5』 RGMGUGffKAGUKC 3』的核苷酸序列。
31.根據權利要求30的核酸，其中所述盒A包含選自5』UAAAGUAGAG3』、5』AAAAGUAGAA 3，、5，AAAAGUUGAA 3，和 5，GGGAUAUA⑶GC3，的核苷酸序列，優選地 5，UAAAGUAGAG 3，的核苷酸序列。
32.根據權利要求30和31中任一項的核酸，其中所述盒B包含選自5』GGCGUGAUAGUGC 3，、5，GGA⑶⑶UAGUUC 3，、5，GGC⑶GAGAGUGC3，、5，AGOiUGAUAGUGC 3』 和 5』 GGC⑶⑶UAGUGC 3』的核苷酸序列，優選地5』 GGCGUGAUAGUGC 3』的核苷酸序列。
33.根據權利要求30至32中任一項的核酸，其中所述連接性核苷酸序列段以5』- > 3』方向包含第一連接性核苷酸子序列段、第二連接性核苷酸子序列段和第三連接性核苷酸子序列段，其中優選地，所述第一連接性核苷酸子序列段與所述第三連接性核苷酸子序列段任選地相互雜交，其中在雜交後形成雙鏈結構。
34.根據權利要求33的核酸，其中所述第一連接性核苷酸子序列段和所述第三連接性核苷酸子序列段各自且彼此獨立地包含3至6個核苷酸。
35.根據權利要求33至34中任一項的核酸，其中所述雙鏈結構由3至6個鹼基對組成。
36.根據權利要求33至35中任一項的核酸，其中a)所述第一連接性核苷酸子序列段包含選自5』GGAC 3』、5』 GGAU3』和5』 GGA 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』 GUCC 3』的核苷酸序列，或者b)所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』GCAG 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』 CUGC 3』的核苷酸序列，或者c)所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』GGGC 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』 GCCC 3』的核苷酸序列，或者d)所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』GAC 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』 GUC 3』的核苷酸序列，或者e)所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』ACUUGU 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含選自5』 GCAAGU 3』和5』 GCAAGC 3』的核苷酸序列，或者f)所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』UCCAG 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』 CUGGA 3』的核苷酸序列，優選地，所述第一連接性核苷酸子序列段包含5』 GAC 3』的核苷酸序列，並且所述第三連接性核苷酸子序列段包含5』⑶C 3』的核苷酸序列。
37.根據權利要求33至36中任一項的核酸，其中所述第二連接性核苷酸子序列段包含 3至5個核苷酸。
38.根據權利要求33至37中任一項的核酸，其中所述第二連接性核苷酸子序列段包含選自5，VBAAff 3，、5，AAUff 3，和5，NBff 3，的核苷酸序列。
39.根據權利要求38的核酸，其中所述第二連接性核苷酸子序列段包含5』VBAAW 3』 的核苷酸序列，優選地選自5』 CGAAA 3』、5』 GCAAU3』、5』 GUAAU 3』和5』 AUAAU 3，的核苷酸序列。
40.根據權利要求38的核酸，其中所述第二連接性核苷酸子序列段包含5』AAUW 3』的核苷酸序列，優選地5』 AAUU 3』或5』 AAUA 3』的核苷酸序列，更優選地5』 AAUA 3』的核苷酸序列。
41.根據權利要求38的核酸，其中所述第二連接性核苷酸子序列段包含5』NBW 3』的核苷酸序列，優選地選自 5，CCA 3，、5，CUA 3，、5，UCA 3，、5，ACA 3，、5，GUU 3，、5，UGA 3， 禾口 5』 GUA 3，的核苷酸序列，更優選地選自5，CCA 3，、5，CUA 3，、5，UCA 3，、5，ACA 3，禾口 5』 GUU 3』的核苷酸序列。
42.根據權利要求30至41中任一項的核酸，其中所述連接性核苷酸序列段包含選自 5' GGACBYAGUCC 3\5' GGAUACAGUCC 3\5' GCAGGYAAUCUGC 3\5' GACAAUffGUC 3'、 5』 ACUUGUCGAAAGCAAGYU 3，、5，UCCAG⑶UCUGGA 3，、5，GGGCUGAGCCC 3，、5，GCAGAUAAUCUGC 3，和 5，GGACCAGUCC 3，的核苷酸序列，優選地選自 5，GGACCCAGUCC 3，、5，GGACCUAGUCC 3，、5，GGACUCAGUCC 3，、5，GCAGGUAAUCUGC 3，、5，GCAGGCAAUCUGC 3，、5，GACAAUUGUC 3，禾口 5，GACAAUA⑶C 3，的核苷酸序列。
43.根據權利要求30至42中任一項的核酸，其中所述第一末端核苷酸序列段與所述第二末端核苷酸序列段任選地相互雜交，其中在雜交後形成雙鏈結構，所述第一末端核苷酸序列段包含4至7個核苷酸，並且所述第二末端核苷酸序列段包含4至7個核苷酸。
44.根據權利要求43的核酸，其中所述雙鏈結構由4至7個鹼基對組成。
45.根據權利要求30至44中任一項的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸序列段包含 5' X1X2X3BKBK 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 MVVVX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中&為G或不存在，X2為S或不存在，&為V或不存在，&為B或不存在，&為S或不存在，並且)(6為C或不存在。
46.根據權利要求30至45中任一項的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸序列段包含 5' X1X2X3BKBK 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 MVVVX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中a)X1為G，&為S，X3為V，&為B, X5為S，並且X6為C，或者b)X1不存在，X2為S，&為V，X4為B，&為S，並且X6為C，或者CU1為G，&為S，X3為V，&為B, X5為S，並且X6不存在。
47.根據權利要求30至46中任一項，優選地權利要求46的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸序列段包含5』GCACUCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含 5』 CGAGUGC 3』的核苷酸序列。
48.根據權利要求30至45中任一項的核酸分子，其中所述第一末端核苷酸序列段包含 5' X1X2X3BKBK 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 MVVVX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中a) X1不存在，X2為S，&為V，X4為B，&為S，並且\不存在，或者WX1不存在，X2不存在，X3為V，&為B, X5為S，並且X6不存在，或者CU1不存在，X2為S，&為V，X4為B, X5不存在，並且X6不存在。
49.根據權利要求30至45和48中任一項的核酸，其中a)所述第一末端核苷酸序列段包含5』GCUGUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CACAGC 3』的核苷酸序列，或者b)所述第一末端核苷酸序列段包含5』CGUGUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CACACG 3』的核苷酸序列，或者c)所述第一末端核苷酸序列段包含5』CGUGCU 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 AGCACG 3』的核苷酸序列，或者d)所述第一末端核苷酸序列段包含5』CGCGCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGCGCG 3』的核苷酸序列，或者e)所述第一末端核苷酸序列段包含5』GCCGUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CACGCG 3』的核苷酸序列，或者f)所述第一末端核苷酸序列段包含5』GCGGUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CACCGC 3』的核苷酸序列，或者g)所述第一末端核苷酸序列段包含5』GCUGCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGCAGC 3』的核苷酸序列，或者h)所述第一末端核苷酸序列段包含5』GCUGGG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CCCAGC 3』的核苷酸序列，或者i)所述第一末端核苷酸序列段包含5』GCGGCG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CGCCGC 3』的核苷酸序列。
50.根據權利要求30至45中任一項的核酸，其中所述第一末端核苷酸序列段包含 5' X1X2X3BKBK 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 MVVVX4X5X6 3』的核苷酸序列，其中X1不存在，\不存在，&為V或不存在，&為B或不存在，X5不存在，並且\不存在。
51.根據權利要求30至45和50中任一項的核酸，其中所述第一末端核苷酸序列段包含5』 CGUG 3』的核苷酸序列，並且所述第二末端核苷酸序列段包含5』 CACG 3』的核苷酸序列。
52.根據權利要求1至6和30至51中任一項的核酸，其中所述核酸包含根據SEQID No. 29、SEQ ID No. 33、SEQ ID No. 34、SEQ ID No. 39 至 41、SEQ ID No. 43、SEQ ID No. 46、 SEQ ID No. 137至141或SEQ ID No. 173中任一個的核酸序列。
53.根據權利要求1至6中任一項的核酸，其中所述核酸包含根據SEQID No. 127至 131中任一個的核酸序列。
54.根據權利要求1至53中任一項的核酸，其中所述核酸能夠結合海帕西啶，其中海帕西啶為人海帕西啶-25、人海帕西啶-22、人海帕西啶-20、猴海帕西啶-25、猴海帕西啶-22、 猴海帕西啶-20，優選地人海帕西啶-25。
55.根據權利要求1至M中任一項，優選地權利要求M的核酸，其中所述海帕西啶具有根據SEQ ID No. 1的胺基酸序列。
56.根據權利要求1至55中任一項的核酸，其中所述核酸包含修飾基團，其中包含所述修飾基團的核酸分子從生物體中排洩的速率相比於不含所述修飾基團的核酸而言降低。
57.根據權利要求1至55中任一項的核酸，其中所述核酸包含修飾基團，其中包含所述修飾基團的核酸分子具有相比於不含所述修飾基團的核酸而言增加的在生物體中的滯留時間。
58.根據權利要求56和57的核酸，其中所述修飾基團選自包括生物可降解的和生物不可降解的修飾的組，優選地所述修飾基團選自包括線性聚乙二醇、支化聚乙二醇、羥乙基澱粉、肽、蛋白質、多糖、固醇、聚氧丙烯、聚氧醯胺化物、聚(2-羥乙基)-L-穀氨醯胺和聚乙二醇的組。
59.根據權利要求58的核酸，其中所述修飾基團為由直鏈或支化的PEG組成的PEG部分，其中所述PEG部分的分子量優選地為大約20，000至大約120，000Da，更優選地為大約 30，000至大約80，OOODa，和最優選地為大約40，OOODa0
60.根據權利要求58的核酸，其中所述修飾基團為HES部分，其中所述HES部分的分子量優選地為大約10，000至大約200，OOODa,更優選地為大約30，000至大約170，OOODa，和最優選地為大約150，OOODa0
61.根據權利要求56至60中任一項的核酸，其中所述修飾基團經由連接體偶聯至所述核酸，其中所述連接體優選地為生物可降解的連接體。
62.根據權利要求56至61中任一項的核酸，其中所述修飾基團偶聯至所述核酸的 5』 -末端核苷酸和/或3』 -末端核苷酸，和/或偶聯至在所述核酸的5』 -末端核苷酸和所述核酸的3』 -末端核苷酸之間的所述核酸的核苷酸。
63.根據權利要求56至62中任一項的核酸，其中所述生物體為動物體或人體，優選地人體。
64.根據權利要求1至63中任一項的核酸，其中所述核酸的核苷酸或形成所述核酸的核苷酸為L-核苷酸。
65.根據權利要求1至64中任一項的核酸，其中所述核酸為L-核酸。
66.根據權利要求1至65中任一項的核酸，其中所述核酸包含至少一個能夠結合海帕西啶的結合部分，其中此類結合部分由L-核苷酸組成。
67.根據權利要求1至66中任一項的核酸，其用於在治療和/或預防疾病的方法中使用。
68.藥物組合物，其包含根據權利要求1至67中任一項的核酸和任選地另外的組分，其中所述另外的組分選自包括藥學上可接受的賦形劑、藥學上可接受的載體和藥學活性試劑的組。
69.根據權利要求68的藥物組合物，其中所述藥物組合物包含根據權利要求1至67中任一項的核酸和藥學上可接受的載體。
70.根據權利要求1至67中任一項的核酸在製備藥劑中的用途。
71.根據權利要求70的用途，其中所述藥劑用於在人醫學中使用或用於在獸醫醫學中使用。
72.根據權利要求1至67中任一項的核酸在製備診斷工具中的用途。
73.根據權利要求70的用途，其中所述藥劑用於治療和/或預防貧血、血鐵過少、異食癖、具有升高的海帕西啶水平的病狀、具有升高的鐵水平的病狀、或具有鐵超負荷的病狀。
74.根據權利要求73的用途，其中所述貧血選自鐵粒幼細胞貧血、低色素小紅細胞性貧血、由慢性疾病和/或病症引起的貧血、由炎症引起的貧血、由遺傳病症引起的貧血、由急性感染引起的貧血、由鐵代謝和/或體內穩態的基因中的突變引起的貧血、和由癌症治療引起的貧血。
75.根據權利要求74的用途，其中所述慢性疾病和/或病症選自慢性炎症、癌症、自身免疫疾病和/或病症、慢性感染、動脈硬化、動脈粥樣硬化和肝硬化。
76.根據權利要求75的用途，其中慢性炎症選自慢性腎疾病、慢性阻塞性肺部疾病、多發性硬化、骨關節炎、糖尿病、肥胖症、腦血管疾病、充血性心臟病、充血性心力衰竭、心肌梗死、冠狀動脈疾病、周圍閉塞性動脈疾病、胰腺炎和脈管炎，其中慢性腎疾病優選地選自腎臟病、慢性腎功能衰竭、慢性腎衰竭，和/或其中慢性腎疾病由腎臟透析或腎臟移植引起。
77.根據權利要求75的用途，其中自身免疫疾病和/或病症選自類風溼性關節炎、腸易激惹症候群、系統性紅斑狼瘡和克羅恩病。
78.根據權利要求75的用途，其中慢性感染選自病毒感染、病毒性疾病、細菌感染和真菌感染，其中優選地，所述病毒感染包括肝炎和H IV感染，和所述細菌感染包括幽門螺桿菌感染。
79.根據權利要求74的用途，其中由炎症引起的貧血為正常紅細胞性的至小紅細胞性的，和/或其特徵在於低的網織紅細胞生成指數和/或增加的炎症標誌物。
80.根據權利要求74的用途，其中所述遺傳病症為卡斯爾曼病、施尼茨勒症候群、鐵難治性缺鐵性貧血(matriptase-2 (TMPRSS6)突變)、缺轉鐵蛋白血症、先天性紅細胞生成不良性貧血或血紅蛋白病。
81.根據權利要求74的用途，其中所述急性感染選自病毒感染、細菌感染和真菌感染， 優選地為膿毒症。
82.根據權利要求75的用途，其中所述癌症選自肝細胞癌、淋巴瘤、多發性骨髓瘤、頭與頸癌、乳腺癌、結腸直腸癌、非骨髓性癌、腎細胞癌、非小細胞肺癌、腫瘤和腦瘤。
83.根據權利要求73的用途，其中所述藥劑用於治療具有升高的鐵水平的病狀，其中所述病狀選自共濟失調、弗裡德賴希共濟失調、年齡相關性黃斑變性、年齡相關性白內障、 年齡相關性視網膜疾病和神經變性疾病，所述神經變性疾病包括阿爾茨海默病、帕金森病、 泛酸激酶相關的神經變性、腿多動症候群和亨廷頓舞蹈病。
84.根據權利要求73的用途，其中所述藥劑用於治療鐵超負荷，其中海帕西啶血漿水平未升高。
85.根據權利要求84的用途，其中鐵超負荷選自輸血性鐵超負荷、鐵中毒、肺含鐵血黃素沉著症、骨質減少、胰島素抵抗、非洲人鐵超負荷、哈-施病、高鐵蛋白血症、血漿銅藍蛋白缺乏症、新生兒血色素沉著症和紅細胞病症，所述紅細胞病症包括地中海貧血、α地中海貧血、中間型地中海貧血、鐮狀細胞病和骨髓增生異常症候群。
86.根據權利要求82至85中任一項的用途，其中所述藥劑與鐵螯合化合物聯合使用。
87.根據權利要求86的用途，其中所述鐵螯合化合物選自薑黃素、去鐵胺、地拉羅司和去鐵酮。
88.根據權利要求70的用途，其中所述藥劑用於與另外的藥劑或治療方法相聯合或者用於與另外的藥劑或治療方法相聯合地使用，其中此類藥劑或治療方法包括另外的藥學活性化合物或者施用此類另外的藥學活性化合物，其中此類另外的藥學活性化合物選自鐵補充劑、維生素補充劑、紅細胞生成刺激劑、抗生素、抗炎生物製劑、免疫系統的抑制劑、抗血栓溶解劑、他汀類、血管加壓藥和影響肌肉收縮的化合物。
89.包含根據權利要求1至67中任一項的核酸和海帕西啶的複合物，其中所述複合物優選地為晶體複合物。
90.根據權利要求89的複合物，其中海帕西啶選自包括人海帕西啶、猴海帕西啶的組， 更優選地海帕西啶為人海帕西啶。
91.根據權利要求1至67中任一項的核酸用於檢測海帕西啶的用途。
92.根據權利要求91的用途，其中海帕西啶選自包括人海帕西啶、猴海帕西啶的組，更優選地海帕西啶為人海帕西啶。
93.用於篩選海帕西啶的拮抗劑或激動劑的方法，所述方法包括下列步驟-提供海帕西啶的候選拮抗劑和/或候選激動劑，-提供根據權利要求1至67中任一項的核酸，-提供測試系統，其在存在海帕西啶的拮抗劑和/或激動劑時提供信號，和-測定所述候選拮抗劑是否為海帕西啶的拮抗劑和/或所述候選激動劑是否為海帕西啶的激動劑。
94.根據權利要求93的方法，其中海帕西啶選自包括人海帕西啶、猴海帕西啶的組，更優選地海帕西啶為人海帕西啶。
95.用於檢測海帕西啶的試劑盒，其包含根據權利要求1至67中任一項的核酸，其中所述海帕西啶優選地為人海帕西啶。
96.用於檢測樣品中的根據權利要求1至67中任一項的核酸的方法，其中所述方法包括下列步驟a)提供含有根據本發明的核酸的樣品；b)提供捕獲探針和檢測探針，其中所述捕獲探針與根據權利要求1至67中任一項的核酸的第一部分至少部分地互補，和所述檢測探針與根據權利要求1至67中任一項的核酸的第二部分至少部分地互補，或者備選地，所述捕獲探針與根據權利要求1至67中任一項的核酸的第二部分至少部分地互補，和所述檢測探針與根據權利要求1至67中任一項的核酸的第一部分至少部分地互補；c)允許所述捕獲探針和所述檢測探針同時地或者以任何順序依次地與根據權利要求 1至67中任一項的核酸或其部分反應；d)任選地，檢測所述捕獲探針是否與在步驟a)中提供的根據權利要求1至67中任一項的核酸雜交；和e)檢測在步驟c)中形成的複合物，其由根據權利要求1至67中任一項的核酸以及所述捕獲探針和所述檢測探針組成。
97.根據權利要求96的方法，其中所述檢測探針包含檢測工具，和/或其中所述捕獲探針可以固定至支持物，優選地固體支持物。
98.根據權利要求96或97的方法，其中將不作為所述複合物的一部分的任何檢測探針從所述反應體系中去除，從而在步驟e)中僅檢測作為所述複合物的一部分的檢測探針。
99.根據權利要求96至98中任一項的方法，其中步驟e)包括下列步驟比較當所述捕獲探針和所述檢測探針在根據權利要求1至67中任一項的核酸或其部分存在的情況下和所述核酸或其部分不存在的情況下進行雜交時由所述檢測工具所產生的信號。
全文摘要
本發明涉及能夠結合海帕西啶(hepcidin)的核酸。
文檔編號A61K31/00GK102459587SQ201080025093
公開日2012年5月16日 申請日期2010年4月30日 優先權日2009年4月30日
發明者C·馬什, F·施沃布爾, F·莫裡希, K·布赫納, N·丁斯, S·克盧斯曼, S·塞爾 申請人:諾松製藥股份公司