治療脫髓鞘疾病或情況的方法

2023-06-08 00:23:46 2

專利名稱：治療脫髓鞘疾病或情況的方法
背景技術：
多發性硬化(MS)是一種影響中樞神經系統的變質性和炎性的神經性疾病，並且與神經元斑塊的形成和由於脫髓鞘作用(髓磷脂減少)而產生的神經元傳導受損有關。類似地，據一般報導在脊髓損傷和中風中也有廣泛的脫髓鞘作用(Bunge等人，1993；Blight和DeCrescito，1986；Pendlebury等人，2000)。
對髓鞘纖維中作用電位傳播的生理學進行的基礎研究表明在脫髓鞘纖維中的傳導阻滯部分是由於在髓磷脂減少的區域出現了氨基吡啶敏感的鉀通道(Bever 1996)。
動作電位通過一種salutatory傳導過程沿著正常的有髓鞘的神經纖維進行傳播，其是由在朗飛結處對電壓敏感的鈉通道的開放而產生的鈉流通所導致的。因此，在電刺激開始時，鈉離子(Na+)進入到神經元中，使得該神經元帶有更多正電荷。當該神經元的正電性接近臨界水平時就會發生「去極化」。去極化使得正電離子核沿著軸突流出神經元並流向神經末端。對於該神經元對本身進行的「復位」而言，必須消散過多的正電荷。這是通過鉀離子(在下文中用「K+」表示)通過鉀通道外流來完成的。當髓磷脂被破壞時，在軸膜上出現了在去極化期間開放的電壓敏感的鉀通道。與鈉電流流向相反的鉀電流降低了動作電位的振幅和持續時間，通過降低末梢有效電流密度而導致了傳導失敗。這些傳導不足與無力症狀有關，其中所說的無力症狀包括肌無力。通過阻斷K+通過鉀通道的外流，神經元可以較長時間的維持去極化狀態並且更易於重新興奮。因此，認為鉀通道阻滯劑可用於治療動作電位傳播受損的疾病和情況的治療，其中所說的疾病和情況如MS、外傷性腦損傷(在下文中被稱為「TBI」)和脊髓損傷(在下文中被稱為「SCI」)。
鉀通道阻滯劑，如4-氨基吡啶(在下文中被稱為「4-AP」)，可以增加脫髓鞘纖維中動作電位的持續時間和振幅並可以改善體外動作電位的傳播(Bostock等人，1978；1981；Targ和Kocsis，1985；1986；Shi和Blight，1997)、促進神經遞質的釋放(Bostock等人，1981；Hirsh和Quandt，1993；Sherratt等人，1980)、並且可以增強肌肉的收縮性(Agoston等人，1982；Savage等人，1985)。這些觀測結果暗示鉀離子通道阻滯劑，如4-AP，可以恢復MS患者脫髓鞘纖維中的傳導。隨後的臨床試驗結果為氨基吡啶治療可以改善一些MS患者的症狀的建議提供了進一步的支持(Jones等人1983；Stefoski等人，1987；Davis等人，1990；van Diemen等人，1992；Bever等人，1994；Schwid等人，1997)。
已經公開了4-AP在神經學情況的治療中是有效的，其中所說的神經學情況包括SCI、SCI患者中慢性疼痛和痙攣狀態的減輕、阿耳茨海默氏病、脊髓灰質炎後的症候群、重症肌無力、亨廷頓氏舞蹈病、與年齡有關的記憶障礙、影響記憶力或認識的創傷後、中風後或中毒後的症候群、以及家族性自主神經功能異常(Wurtman RJ和Buyukuysal R，1989；Hansebout RR和BlightA，1996；Hansebout RR和Blight A 1994)。雖然在一般的患者群中圍繞著4-AP的使用還有一些安全性方面的擔心(多發性硬化，Cognos Study #51，Decisions Resources，October，1999；第77-8頁)，但是已經開始對Fampridine-SR在長期脊髓受損傷的患者中的應用進行了臨床研究(Potter等人，1998a，b)。一些研究已經表明當在受到損傷後一年或更長時間後進行給藥時，4-AP的單劑量可以恢復SCI患者的一些功能(Potter等人，1998a，b；Qiao等人，1997；Hayes等人，1993；1994)。也已經報導了在長期給藥後有積極的效果。在給患病2年或更久的SCI患者每天口服30mg/kg 4-AP 3個月後，在16名患者中都觀察到了臨床上有意義的功能性改善。一些之前被鑑定為患有完全性損傷的患者重新被鑑定為不完全性損傷(Segal等人，1999)。在用4-AP每天口服給藥治療3個月後(30mg/天，或約0.5mg/kg)，所有的患者至少在某些類型的神經病學或肺功能方面都表現出一定程度的改善。較低的劑量沒有作用。
正如之前所說明的那樣，4-AP阻斷了鉀通道，有效地延長了動作電位。不幸地是，這些通過鉀離子通道阻滯劑可以改善與動作電位傳播受損的疾病和情況有關的症狀的機理還可以產生癲癇類活動。實際上，對於動物和人而言，4-AP是一種公認的驚厥劑。因此，由於之前的癲癇傾向和其它不需要的副作用，4-AP不能用作MS、TBI以及SCI的治療劑。已經報導了在高於0.8mg/kg的給藥劑量時會出現不安、精神錯亂和全身性強直-陣攣性的癲癇發作(Ball等人，1979；Bever等人，1994)。VanDiemen等人(1993)報導MS患者的改善程度(用尋求獲得的緩解的改善來進行定義)與4-AP的血清水平顯著相關，(在口服給藥後必需有33-75ng/ml的濃度才能獲得顯著改善)。但是，在同樣的劑量水平會觀察到副作用(感覺異常/感覺遲鈍、頭暈/頭部發輕(light-headedness)、並且甚至步態不穩)。在另一些人中，Bever等人(1994)報導在104ng/ml的血清水平會出現癲癇大發作。兩組研究人員都暗示高劑量和高血清水平將可以對這些對較低劑量的4-AP有響應的MS患者產生更大的改善。因此，用4-AP獲得的功效程度是劑量-和副作用限制性的。
對與較高的4-AP血清水平有關的副作用的擔心導致了緩釋製劑的研發(Fampridine-SR)(Masterson JG和Myers M，1994；1996a；1996b)。Fampridine-SR目前處於MS的2期臨床研究。在進行Fampridine-SR的臨床研究前，患者已經表現出各種功能方面的改善。取決於個體情況，這些改善包括膀胱、腸和性功能的增強、各種活動和感覺的增加、以及肌肉痙攣狀態、疲勞和長期疼痛的減少。
另一種消除與4-AP有關的不需要的副作用的方法包括將4-AP與電壓依賴性的鈉離子通道阻滯劑共同進行給藥。鈉(Na+)通道阻滯劑阻斷了Na+離子的內流並且可以降低神經元對於去極化的敏感性。這可以有效地降低神經元的興奮性。實際上，已經報導了電壓依賴性的鈉通道阻滯劑和4-AP共同給藥可以預防小鼠4-AP誘導的驚厥(Yamaguchi和Rogawski，1992)。4-AP沒有鈉通道阻滯的性質。
在這裡所要求保護的臨床方法中所使用的化合物可以通過在US專利號4,970,218中所公開的方法來進行合成。這裡所引用的所有的專利和其它公開物都被引入作為參考。
已知本發明範圍內的某些化合物在體外和體內都可以誘導電壓依賴性的鈉通道的阻塞(Tang等人，1995；1998；Tang和Kongsamut，1996)。在細胞內的去極化情況中，電壓依賴性的鈉通道阻滯劑可更有效地發揮作用。這些化合物對於正常的神經元信號只有很小的影響或沒有影響，但是在癲癇發作、頭部損傷或局部缺血過程中可以關閉鈉通道。這些物質中的許多物質在這些病理學情況的動物模型中具有腦保護性(Madge等人，1998)。
不希望受到理論的束縛，鉀離子通道阻滯劑還是治療神經性疼痛和與細胞因子有關的疼痛的活性物質，其中所說的疼痛包括關節炎性疼痛。Sweitzer等人(1999)已經提出小神經膠質細胞的活化和細胞因子的釋放可能在外周炎症或外周神經損傷後的痛覺過敏中有一定的作用。已經報導了鉀離子通道阻滯劑，如4-AP，可以阻斷大鼠、小鼠和人小神經膠質細胞的活化(Eder，1998)。Pyo等人(1997)已經報導了4-AP可以減少亞硝酸鹽從活化的小神經膠質細胞中的釋放，這表明可以通過這種機理來對疼痛行為進行調節。此外，已經報導4-AP可以減少脂多糖(LPS)-誘導的鼠科動物巨噬細胞NO的產生(Lowry等人，1998)。還已經將LPS給藥於小鼠來作為一種用於對幾種具有不同作用機理的不同物質的抗關節炎功效進行鑑定的模型系統(Mcllay等人，2001)。已經建立了一些涉及坐骨神經和L5或L6脊神經的收縮的一些實驗模型以對神經性疼痛進行研究(Bennett和Xie，1988；Seltzer等人，1990；Kim和Chung，1992)。
發明概述現在已經發現式I的化合物具有鉀離子通道阻滯性。鉀和鈉通道阻滯性質的獨特組合意味著這些化合物可用作治療脫髓鞘疾病或情況的治療劑。例如，它們可用來治療MS、SCI、TBI(外傷性腦損傷)和中風。這些化合物提供了一種比4-AP更安全的治療劑，這是因為可產生不需要的不安、精神錯亂和癲癇發作的副作用的4-AP僅阻斷鉀通道。式I的化合物還可以用於中風的康復、膀胱興奮和功能障礙的治療、內臟的趨化因子-誘導的疼痛(包括關節炎性疼痛)和神經性疼痛的治療。
發明詳述式I的化合物提供了阻斷鉀和鈉通道性質的獨特組合。這些化合物可用於脫髓鞘疾病和情況如多發性硬化、脊髓損傷、外傷性腦損傷和中風的治療。該化合物還可用於中風康復、膀胱興奮和功能性障礙的治療、內臟的趨化因子誘導的疼痛(包括關節炎性疼痛)和神經性疼痛的治療。
其中m是0、1或2；n是0、1或2；p是0或1；各R分別獨立地是氫、滷素、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、苄氧基、羥基、硝基或氨基；各R1分別獨立地是氫、C1-C6烷基、C1-C6鏈烯基、C1-C6烷醯基、滷素、氰基、-C(O)C1-C6烷基、-C1-C6亞烷基CN、其中R′和R″各自獨立地的分別是氫或C1-C6烷基的-C1-C6亞烷基NR′R″、-C1-C6亞烷基OC(O)C1-C6烷基、或其中R4是氫或C1-C6烷基的-CH(OH)R4；R2是氫、未被取代或被滷素、羥基或苄氧基所取代的C1-C6烷基、C1-C6鏈烯基、C1-C6炔基、-CO2C1-C6烷基、或其中R5是C1-C6亞烷基、C1-C6亞鏈烯基或C1-C6亞炔基並且R′和R″各自分別獨立地是氫、C1-C6烷基的-R5-NR′R″或者另一種供替代的選擇是-NR′R″作為一個整體是1-吡咯烷基；和R3是氫、硝基、氨基、滷素、C1-C6烷氧基、羥基或C1-C6烷基。
定義1)脫髓鞘疾病正如這裡所用的這樣，所定義的脫髓鞘疾病是指這些以髓磷脂為主要目標的疾病。它們主要分為兩組獲得性疾病和遺傳的代謝疾病。
多發性硬化(MS)屬於獲得性疾病。MS通常在生命的第20和第50年之間顯現出來。MS攻擊神經系統的白質。在其典型的表現形式中(所有情況中的90％)，其特徵在於隨著時間的進行伴有症狀緩解的周期變短的症狀緩解復發/緩解相的交替。其症狀包括痙攣性下肢癱瘓、步態不穩、復視和失禁。
遺傳性代謝病症的種類包括進行了鑑定的八種腦白質病變異染性腦白質病變、雷弗素姆氏病、腦白質腎上腺萎縮症、克臘伯氏病、苯丙酮酸尿症、卡納範病、佩梅二氏病和亞歷山大氏病。前六種是記憶性病症。缺乏酶或酶機能失調會造成化學物質的中毒性累積。另一方面，佩梅二氏病和亞歷山大氏病的病因仍然是未知的。
通常易於在嬰兒或幼兒中發生的遺傳性脫髓鞘病症的臨床過程是很悲慘的。在疾病的快速發展過程中，之前正常的兒童被奪去了視覺、聽覺、語言能力和移動能力。隨後將在幾年中死去。
2)脫髓鞘情況-正如這裡所定義的這樣，脫髓鞘情況是一種可導有缺陷的髓鞘形成的情況。該類脫髓鞘情況非限制性地包括脊髓損傷、外傷性腦損傷和中風。
3)髓損傷(SCI)-正如這裡所用的這樣，SCI被定義為可導致功能減退的脊髓損傷，其中所說的功能如活動性或觸覺。
4)外傷性腦損傷(TBI)-正如這裡所使用的這樣，外傷性腦損傷被定義為可導致產生大腦損害的損傷。在如下兩種情況中的一種中可以發生腦損傷當移動的頭部被快速停止時所發生的封閉性腦損傷，如當撞擊一塊擋風玻璃時或當頭部被一種鈍的物體打擊時造成腦猛擊到顱骨內堅硬的多骨表面。如果腦正經受著快速的向前或向後移動，如當一個人正在反方向猛然扭動時，還可能發生沒有沒有頭部外部損傷的封閉性的腦損傷。
當一種快速移動的物體如子彈刺穿顱骨時，將發生一種刺入性的腦損傷。
封閉性的和刺入性的腦損傷都可以導致局部的和普遍的、或彌散性的腦損傷。所導致的殘疾包括記憶力下降和情感障礙、包括麻痺在內的肌肉運動困難、以及五種知覺方面的損害。此外，有許多病人死於損傷。
現在的治療集中包括在受到損傷後24小時內對儘可能多的損傷進行治療。當某人患有腦損傷時，引起的破壞超過了最初的損害。隨後會發生「第二次損害」的疊加。腦自身的免疫細胞引發了腫脹和液體聚集，並且受損的神經細胞開始分泌被稱為穀氨酸酯的神經遞質，其迅速累積至使周圍神經元中毒的水平。
5)中風康復-正如這裡所用的這樣，中風康復被定義為可以使由於中風而已經喪失了的功能重新恢復的幹預。
6)中風-正如這裡所用的這樣，當血塊阻塞了血管或動脈時，或當血管破裂時，腦部區域的血流供應被中斷，這時就會發生中風。當發生中風時，其殺死了有關區域的腦細胞。醫師們稱這種死細胞區為栓塞。在中風開始後，這些細胞通常在幾分鐘至幾小時內死亡。在中風中，脫髓鞘作用的測定如磁化轉移比例(MTR)與跟肌肉活動不足有關的軸突的損害緊密相關(Pendlebury等人，2000)。
7)烷基或亞烷基-除非特別說明或特別指出，否則「烷基」或「亞烷基」的定義指的是支鏈或直鏈的烷基或亞烷基，正如與用烷基中的碳原子數目所指定的該式相適應的那樣，例如，C1-C6烷基指的是一、二、三、四、五或六個碳的支鏈或直鏈烷基或亞烷基，如其或其任意範圍可以非限制性地例如是C1-2、C1-3、C1-4、C1-5、C2-3、C2-4、C2-5、C2-C6、C3-C4、C3-5、C3-6、C4-5、C4-6、C5-6，等等，。
8)C1-C6烷氧基-除非特別說明或指出，否則C1-C6烷氧基的定義指的是具有1至6個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基。所說基團的實例包括甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基、正-丁氧基、異-丁氧基、仲-丁氧基、叔-丁氧基和直鏈-及支鏈的戊氧基和己氧基。
9)滷素-除非特別說明或指出，否則滷素的定義指的是氟、氯、溴或碘。
10)C1-C6鏈烷酸-除非特別說明或指出，否則C1-C6鏈烷酸的定義指的是其中羧基是連接在氫或一個具有1至5個碳原子的烷基上的羧酸。
11)C1-C6烷醯基-C1-C6烷醯基指的是通過從C1-C6鏈烷酸的羧基上除去一個羥基而獲得的基團，因此其包括例如甲醯基、乙醯基等等。烷醯基、鏈烯醯基和炔醯基的定義指的是通過分別從鏈烷酸、鏈烯酸和炔酸的羧基上除去一個羥基而獲得的基團。因此，例如得自亞油酸的亞油醯基(linoleyl)是一個如上所定義的鏈烯醯基的實例。
12)「可藥用的鹽」指的是可以與患者所需治療相一致的酸加成鹽或鹼加成鹽。
13)「可藥用的酸加成鹽」是由式I所示的化合物或其任何中間體的任何無毒的有機或無機酸加成鹽。可以形成適宜鹽的無機酸的說明性實例包括鹽酸、氫溴酸、硫酸和磷酸以及酸性金屬鹽如正磷酸一氫鈉和硫酸氫鉀。可形式適宜鹽的有機酸的說明性實例包括單-、二-和三-羧酸。該類酸的說明性實例有例如乙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、枸櫞酸、抗壞血酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯甲酸、羥基苯甲酸、苯乙酸、肉桂酸、水楊酸、2-苯氧基苯甲酸、對-甲苯磺酸和磺酸如甲磺酸和2-羥基乙磺酸。可以形成單-或二-酸鹽，並且該類鹽可以以水合物、溶劑化物或基本無水的形式存在。一般而言，與其游離鹼的形式相比，這些化合物的酸加成鹽更易溶於水和各種親水性有機溶劑中，證明其熔點一般更高。
14)「可藥用的鹼加成鹽」指的是式(I)的化合物或其任何中間體的無毒的有機或無機的鹼加成鹽。其實例有鹼金屬或鹼土金屬氫氧化物如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、氫氧化鎂或氫氧化鋇；氨水、以及脂肪族、脂環族、或芳香族的有機胺如甲胺、三乙胺和甲基吡啶。該適宜鹽的選擇標準對於現有技術中的技術人員而言是公知的。
15)「立體異構體」是一種一般性的定義，指的是僅在其原子空間取向上有差異的各分子的所有異構體。其包括鏡像異構體(對映異構體)、幾何(順/反)異構體、以及具有一個以上手性中心的化合物的不是彼此的鏡像的異構體(非對映異構體)。
16)「患者」指的是一種溫血動物，諸如例如大鼠、小鼠、狗、貓、豚鼠和靈長類動物如人。
17)「治療」或「處理」指的是緩解症狀、臨時或永久的消除症狀的起因、或預防或減緩所指定的病症或情況的症狀的出現。
18)「治療有效量」指的是可以有效治療所指定的病症、疾病或情況的化合物的一定數量。
19)「可藥用的載體」指的是為了製成藥物組合物而與活性成分進行混合的無毒的溶劑、分散劑、賦形劑、輔劑或其它物質，其中所說的藥物組合物即是可以給藥予患者的劑型。該類載體的一種實例是一般用於非腸道給藥的可藥用的油。
20)「神經性疼痛」指的是由於神經系統受到損傷而導致的疼痛。該神經系統的損害可以是已經探明的或未探明的損害。神經性疼痛的實例包括皰疹後的神經痛、疼痛的糖尿病性神經病、幻肢痛和中樞神經系統中風後的疼痛。
21)「膀胱興奮和功能障礙」指的是諸如間質性膀胱炎和膀胱活動性過高的情況。活動性過高的膀胱是一種以包括尿頻、尿急、以及小便失禁、偶然在強烈的突然促進排尿後發生小便減少在內的症狀為特徵的特殊的醫學情況。活動性過高的膀胱的診斷是在缺乏局部病理學或與代謝有關的病因學理論的情況下用可歸因於由於逼尿肌的活動性過高而導致的膀胱不自主的收縮的症狀來進行的。間質性膀胱炎(IC)是一種膀胱壁的慢性炎症情況，其常常不能確診。
式I的化合物可以有效的改善急性脊髓損傷和長期性脊髓損傷的恢復速度和程度。它們在體內具有與使用依賴性的鈉通道阻滯劑和電壓依賴性的鉀通道阻滯劑相一致的性質。它們可以提供比4-AP的治療更安全的治療。特別優選的化合物是其中R是氫、滷素、三氟甲基或C1-C6烷基；R1是氫或C1-C6烷基；R2是氫或C1-C6烷基；R3是氫、C1-C6烷基或滷素；並且p是0的化合物。進一步優選的化合物是這些其中在吡啶基的4-位上連有氨基的化合物。
更特別優選的是這些式II[在這裡也被稱為HP184，即N-(3-氟-4-吡啶基)-N-丙基-3-甲基-1H-吲哚-1-胺]和III(在這裡也被稱為「8183」)的化合物。
在以30mg/kg HP 184的劑量對大鼠進行腹腔給藥後1小時，在微摩爾的腦濃度下HP184可以被非常良好的耐受(Smith等人，1996)。
使用依賴性的鈉通道阻滯劑和電壓依賴性的鉀通道阻滯劑的獨特組合也將本發明的化合物與「純」的鈉通道阻滯劑如卡巴咪嗪和苯妥英區分開來。這些物質已經被成功地用於緩解MS的「陽性」症狀(疼痛的強直性癲癇發作和感覺遲鈍)。但是，它們惡化了負性症狀(麻痺和知覺減退)(Sakurai和Kanazawa，1999)。由於它們阻斷鉀通道的事實，所以本發明的化合物可以增強神經元的功能。這有助於功能的恢復。目前，認為鈉通道阻滯劑可用於疼痛症狀的治療和/或用作神經保護劑。但是，沒有預期到它們可以增強康復作用。
在對遭受著上述情況或病症折磨的患者進行治療時，可以將式I的化合物以任何使得該化合物可以以治療有效量被生物利用的形式或方式進行給藥，包括口服給藥、舌下給藥、口腔給藥、皮下給藥、肌肉內給藥、靜脈內給藥、經皮給藥、鼻內給藥、直腸給藥、局部給藥等等。製劑製備現有技術中的技術人員可以根據用於所治療情況或疾病的所選擇化合物的具體性質、疾病的階段、患者的情況和其它相關情況來決定給藥的適宜形式和方式。例如，參見Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，Mack Publishing Co.(1990)，該文獻在這裡被引入作為參考。
式I的化合物可以單獨給藥或可以以與其它可藥用載體相結合的藥物組合物的形式來進行給藥，其比例和性質由所選擇化合物的溶解度和化學性質、所選擇的給藥途徑、標準的藥物操作和其它相關標準來決定。
本發明的化合物可以口服給藥，例如可以以片劑、錠劑、膠囊劑、酏劑、混懸液、溶液、糖漿、糯米紙囊劑、口香糖等形式進行給藥，並且可以包含一種或多種如下的輔劑粘合劑如微晶纖維素、黃蓍膠或明膠；賦形劑如澱粉或乳糖；崩解劑如海藻酸、Primogel、玉米澱粉等等；潤滑劑如硬脂酸鎂或Sterotex；助流劑如膠體二氧化矽；並且可以加入甜味劑如蔗糖或糖精或矯味劑如薄荷、水楊酸甲酯或桔子香精。當該單位劑型是膠囊時，除了上述類型的物質之外，其還可以包含一種液體載體如聚乙二醇或脂肪油。其它單位劑型也可以包含其它各種可以改變該劑量單元的物理形式的物質，例如包衣。因此，可以用糖、蟲膠、或其它腸衣劑對片劑或丸劑進行包衣。除本發明的化合物外，糖漿還可以包含作為甜味劑的蔗糖和某些防腐劑、染料、著色劑和矯味劑。
本發明式(I)的化合物還可以局部給藥，並且當這樣做的時候該載體可以適宜的包含一種溶液、軟膏或凝膠基質。例如，該基質可以包含凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、蜂蠟、礦物油中的一種或多種、稀釋劑如水和醇、以及乳化劑和穩定劑。
溶液或混懸液還可以包含一種或多種如下的輔劑無菌的稀釋劑如注射用水、生理鹽水溶液、不揮發性油、聚乙二醇、甘油、丙二醇或其它合成溶劑；抗菌劑如苯甲醇或尼泊金甲酯；抗氧化劑如抗壞血酸或亞硫酸氫鈉；螯合劑如乙二胺四乙酸；緩衝劑如乙酸鹽、枸櫞酸鹽或磷酸鹽和用於調節張力的物質如氯化鈉或葡萄糖。非腸道的製劑可以被包裝在安瓿、一次性注射器或多劑量小瓶中。
當以儲庫製劑的形式進行配製並給藥時，例如當以在所選擇的適宜的可藥用油中的形式進行注射時，本發明的高親脂性酯、醯胺和氨基甲酸酯在哺乳動物體內在幾天或約一周至四周內可以持續釋放。優選的油有植物來源的油如芝麻油、棉籽油、玉米油、椰子油、豆油、橄欖油等等，或它們是合成的脂肪酸和多官能團醇如甘油或丙二醇的酯。
本發明的儲庫組合物可以通過將本發明高親脂性的酯、醯胺或氨基甲酸酯在無菌的條件下溶解於可藥用的油中來進行製備。選擇油是為了在所需的時間段內可以獲得活性成分的釋放。適宜的油可以通過查閱現有技術容易地作出決定，即現有技術中的技術人員不需要通過不適當的試驗就可以容易的決定所用的油。
式I的化合物表現出其作為治療物質活性的劑量範圍可以隨著所被治療的特定疾病或情況以及其嚴重程度、患者、製劑、患者正在遭受的其它潛在疾病狀態、以及其它可被同時給藥予該患者的藥物來進行變化。一般而言，式I的化合物在約0.001mg/kg患者體重/天至約100mg/kg患者體重/天的劑量下將表現出其治療活性。
下面的實施例僅用於說明的目的，而不是要在任何程度上對本發明的範圍進行限制。
實施例一與電壓依賴性的鈉通道阻滯相一致的體內證據方法該實驗方法是以Bachauβ等人(1992)的方法為基礎的。將重35-40g的雄性CD-1小鼠用水合氯醛(400mg/kg)進行麻醉。在一種手術顯微鏡下，在右眼眶後2mm製備一個3mm的垂直皮膚切口。使顳肌偏轉並進行一個小的開顱術以暴露出硬腦脊膜。將該硬腦脊膜切開並使其偏轉，然後使右中部頸動脈的末梢部分暴露出來。用細鑷子通過雙極electroagulation將該動脈向上至主要的分雙叉處進行封閉。在24小時後用2％氯化三苯基四氮唑溶液對梗死的體積進行測定。在這種實驗模式中，在進行閉塞前一小時將HP 184口服給予未禁食的小鼠(每組10隻)。梗死體積的減少是以與用1％乙酸溶媒對小鼠進行處理所得結果進行比較為基礎的。結果如表1所示。
表1.在小鼠pMCAO中風模型中HP 184的神經保護活性
*＝p＜0.05；**＝p＜0.01在小鼠永久性中部冠狀動脈閉塞模型(pMCAO)中所觀測到的神經保護作用與在這種劑量和時間下體內電壓依賴性的鈉通道阻滯相一致。
實施例二HP 184對大鼠大腦光栓塞(photothrombotic)損害後水腫的影響基本原理/目的在西方世界中，血栓栓塞性的中風是第三大致死原因。其是由在腦循環中產生的或在心臟或大血管中形成並被帶到腦循環中的血塊或碎裂的血栓所引起的。然後血流被中斷，形成伴有水腫、組織的壞死和細胞凋亡的局部缺血性損傷。因為水腫可以壓迫大腦、促進局部缺血並且還可以造成細胞溶解和機械性損傷，所以水腫是有害的。對用一種同時具有Na+/K+通道阻滯劑功能的物質——HP 184進行治療對這種腦水腫的影響進行了研究。
方法將雄性Sprague Dawley大鼠(體重為180-200g)用水合氯醛(400mg/kg，腹腔內給藥)進行麻醉並將其放置於立體定位的裝置中。將皮膚打開以露出頭蓋骨，然後將一種冷光(Bioblock150W)放置到與人字縫尖向前的頭蓋骨的右側相接觸的位置上。將Bengal玫瑰紅染料(10mg/kg，在生理鹽水中iv給藥)靜脈內進行給藥並立即開始對頭蓋骨進行照射並持續照射5分鐘。然後，將頭蓋骨上的皮膚縫合併將該動物放回到它的籠子中。在光栓塞損害後24小時，以0、10或20mg/kg體重的劑量以5ml/kg的體積通過靜脈內給藥給動物使用用1％吐溫水溶液製備的HP184。一小時後，用斷頭術將動物處死，將其腦子取出(方案見附錄)。用一種直徑為6mm的軟木塞鑽孔器在該損傷部位和該損傷的對側獲取核心樣品。通過組織的溼重/組織的乾重來測定水含量，通過將各大鼠的損傷樣品與得自對側半球的樣品進行比較，將水腫表示為過量的水的％。
結果如表2所示。
表2
統計(stats)ANOVA Tukey-Kramer**＝p＜0.001在以20mg/kg的劑量iv給藥後1小時和光栓塞損害後25小時，證明HP 184可顯著減少右側大腦皮層的水腫(22％)。
實施例三HP184對大鼠瞬間病灶性大腦局部缺血後損傷規模和神經功能的影響基本原理/目標在這種研究中，在大鼠瞬間病灶性大腦局部缺血模型中，在局部缺血開始後1小時將HP184進行給藥。所測定的參數為損傷規模和神經功能。
方法將體重約為220-240g的雄性Sprague-Dawley大鼠[Iffa Credo，法國]用在一氧化氮和氧混合物(70∶30)中的氟烷(1.4％)進行麻醉。將兩根普通頸動脈(CCAs)都分離出來。將用暫時的開顱術所暴露出來的左中部的腦動脈(MCA)用一種微型夾閉合，同時將CCAs閉合1小時。將體溫和腦溫都維持在正常的溫度下。在手術後，將動物放回其原來居住的籠子裡，將溫度設置為24-26℃。
在局部缺血開始後1小時，將溶解於(無菌注射用水中的)1％吐溫的HP184以10和20mg/kg的劑量進行iv，對照組的大鼠根據同樣的方案接受用溶媒進行的治療。在局部缺血後24小時，用9點評分等級，用盲法對神經功能進行評分。
用來對神經功能進行評估的評分等級項目正常分缺損放置反應腿懸掛左前爪 10左10
實例1 0抓握反射左前爪1 0左 1 0正位反射頭部傾斜 左側 1 0右側 1 0異常的姿勢 不存在存在胸部扭轉 1 0左前肢彎曲1 0整體的神經等分9其後，將大鼠處死，將腦取出。將腦基質切割成新鮮的切片並將其用2％氯化三苯基四氮唑在37℃下染色5分鐘。然後將該切片在4℃下，在10％福馬林中存儲24小時。用圖像分析儀(Leica Q500)對梗塞區域進行測定。
結果局部缺血在皮層和紋狀體中都可以誘導形成大腦損傷(見說明了HP184在MCA閉合後1小時以10和20mg/kg的劑量iv推注時對腦損傷的影響的

圖1)，以10mg/kg的劑量iv給藥的HP184可以顯著減少腦損傷，可以將其減少41％(p＜0.05)。這種減少在皮層中很顯著(-45％，p＜0.05)。
實施例四鉀通道阻滯的測定方法使PC12細胞(ATCC，Rockville，MD)在另外添加有10％胎牛血清(GIBCO BRL Grand Island，NY)的Dulbecco′s改良的Eagle′s培養基中進行生長。用以前進行了詳細描述的標準的膜片鉗電生理學方案(Rampe等人，1998)對鉀通道電流進行測定。
結果和討論用200毫秒的鉗位脈衝將鉀通道電流從-80mv的支持電位引發至+40mv。這種過程產生了一種持續的直接向外的電流。使用HP184(10μM)可以減少這種電流的振幅並且可以增強電流衰退的速率。當在該脈衝結束時對電流進行測量時，HP184將電流的振幅減少了75±4％(n＝4)。該結果與HP184可通過阻斷一種活化狀態而可以作為電壓依賴性的K+通道的拮抗劑的想法相一致。
實施例五在體內增強肌肉功能的證據目的已經報導了無機染料釕紅(RuR)在包括小鼠感覺神經元(Duchen，1992)、突觸小體和神經肌肉製劑(Hamilton和Lundy，1995；Tapi和Velasco，1997)的各種類型的細胞中都可以阻斷電壓依賴性的Ca+2流通。此外，RuR阻斷了腦突觸小體(Meza-Ruiz和Tapia，1978；Tapia和Meza-Ruiz，1977)和神經肌肉結合點(Alnaes和Rahamimoff，1975；Person和Kuhn，1979)中神經遞質的釋放。在體內，腹腔內給予RuR會造成小鼠弛緩性麻痺(Tapia等人，1976)並且這種作用可以被4-氨基吡啶(4-AP)，一種電壓依賴性的K+通道阻滯劑所拮抗(Tapia，1982)。Tapia和Velasco(1997)已經對RuR在體內和體外的作用進行了綜述，並且提出RuR與位於神經末端膜上的Ca+2部位相互作用。結合研究表明RuR選擇性地阻滯了N-型Ca+2通道，並且這些通道調控神經遞質釋放所必需的Ca+2的流入。這些作者還提出RuR的ip給藥可以作為Eaton-Lambert重症肌無力症候群的實驗模型，所說的症候群是一種以由於與N-型Ca+2通道相結合的抗體而阻斷了Ca+2的內流和ACh的釋放為特徵的自身免疫性疾病。與這種可能性相一致，已經報導了4-AP可以改善肌無力的情況並可以恢復患者體內神經肌肉的傳導(Lundh等人，1977a；1977b；1979；McEvoy等人，1989；Aisen等人，1995)。4-氨基吡啶(4-AP)和胍都可以拮抗RuR誘導的弛緩性麻痺的能力可能是由於其能促進神經遞質的釋放的能力(Lundh，1978；Lundh和Thesleff，1977；Tapia和Stiges，1982)。在任何情況中，Tapia和同事(Tapia和Stiges，1982)已經報導了RuR可以阻斷突觸小體中由4-AP所誘導的釋放。
在體外，HP 184可通過與4-AP給藥不同的機理來增強神經遞質釋放。在高濃度時，4-AP可增強電刺激的和自發性的釋放，但是這種作用是鈣依賴性的。相反地，HP 184僅增強了鈣依賴性的自發性神經遞質釋放(Smith等人，1993)。還假設自發性釋放在體內具有功能性作用(Smith等人，1996)。
下面實驗的目的是要測定在共同進行注射後，HP 184和4-AP是否可以拮抗RuR的麻痺作用。
方法和結果將每組4-5隻小鼠的各組小鼠(CD-1；CharlesRiver；25-35克)分別但同時ip注射釕紅和溶媒(1％冰乙酸)、釕紅和4-AP、或釕紅和HP 184。在這種範例中還對被稱為「8183」的化合物進行了試驗。從注射後15分鐘開始，將小鼠放在一種「旗杆」裝置附近並記錄它們支持它們自身體重(即，支撐旗杆不倒下)的能力。將結果記錄為與所試驗小鼠總數相對的可支持其自身體重的小鼠的數目。試驗結果如表3所示。所有的實驗都是在2PM和430PM之間進行的。
表3
3 將用1、2方法分別製得的粉料及純度為99.9％以上的ZnO按上述比例用球磨法混合均勻，溶劑為去離子水，之後烘乾。
4 在製得的粉料中添加粘結劑並造粒後，壓製成型，壓製成型，粘結劑採用濃度為5％的聚乙烯醇(PVA)溶液，其劑量為粉料總量的10％，最後在1350℃、大氣氣氛中燒結3小時以製備所需的微波介質陶瓷。
樣品No.25-28按以下方法製備1.將純度為99.9％以上的CaCO3、Nd2O3、MgCO3、TiO2按上述m(aCaO.bNd2O3).cMgO.TiO2的比例用球磨法混合均勻，溶劑為去離子水，烘乾後在1150℃、大氣氣氛中預燒2小時，然後再用球磨法混合均勻，之後烘乾。
2.將純度為99.9％以上的Li2CO3、Sm2O3、TiO2按上述1/4Li2O.1/4Sm2O3.TiO2的比例用球磨法混合均勻，溶劑為去離子水，烘乾後在1050℃、大氣氣氛中預燒2小時，然後再用球磨法混合均勻，之後烘乾。
3 將用1、2方法分別製得的粉料及純度為99.9％以上的ZnO按上述比例用球磨法混合均勻，溶劑為去離子水，之後烘乾。
4 在製得的粉料中添加粘結劑並造粒後，壓製成型，壓製成型，粘結劑採用濃度為5％的聚乙烯醇(PVA)溶液，其劑量為粉料總量的10％，最後在1400℃、大氣氣氛中燒結3小時以製備所需的微波介質陶瓷。
表一
是由於體內的鈉通道阻滯作用的解釋提供了進一步的支持。臨床結果表明也是如此。鈉通道阻滯劑通常會惡化MS的負性症狀(運動能力下降)(Sakurai和Kanazawa，1999)。
實施例六脊髓擠壓疾病模型基本原理和目的Gruner Yee(1999)表明在脊髓損傷後25天，4-AP增強了大鼠漸次的脊髓損傷後的mMEP′s。用同樣的方法對功能性行為進行了測定。已經表明這些行為與最小限度的mMEP相關。這些實驗的目的有兩個1)為了測定如果急性給藥，HP 184是否能減少脊髓擠壓誘導的中等程度的運動原損傷並將其效能與琥珀酸甲基強地松龍(MPSS)進行比較，和2)為了測定HP 184是否能改善患有長期(25天)最低程度的脊髓損傷的大鼠的運動原功能，並將其作用與4-氨基吡啶(4-AP)進行比較。
急性治療-i.p.給藥將雌性大鼠的脊髓通過椎板切除術(假性對照(sham)，n＝12)或擠壓暴露出1.4mm的直徑(5組，各自的n＝12)。正常的脊髓直徑約為2.5mm。這種壓縮代表了特徵為在開放領域行走得分中最初的開放領域行走得分為1.5-2.5的中度損傷。開放領域行走得分(OFT)的定義如下0.0無自發性運動0.7輕微的運動1.0在臀部和/或膝蓋(不包括踝)處有運動1.3在臀部和/或膝蓋(不包括踝)處有主動運動1.7在踝處有可疑的運動2.0在所有三個主要關節處的肢的活動
2.3企圖支撐2.7僅支持站立姿態3.0主動支撐，不協調的步態3.3間歇性出現協調的步態3.7對踝或腳缺乏控制，用關節或腳的內側面進行行走4.0在行走時前肢和後肢具有協調性4.3改善了後肢的支撐姿勢，腹部沒有挨到地面4.7一或二個腳趾拖拉，在全速時有略微不穩定的翻轉5.0正常步態和基本支撐，在快速轉彎時沒有失去平衡，沒有腳趾拖拉藥物治療在擠壓的15分鐘內(第1天)，將所選定的用HP184治療的大鼠用在1％冰乙酸溶媒中的20、10、5或0mg/kg的HP184通過ip注射來進行給藥。在第2天和第3天重複進行這種給藥。另一方面，將MPSS在第1天進行擠壓後第15分鐘、2小時、4小時、和6小時以30mg/kg的劑量進行ip給藥。在文獻中已經對作為最佳方案的這種MPSS給藥方案進行了描述，其比較充分的反映了用人進行的給藥。MPSS是目前唯一被批准用於人的脊髓損傷的藥物。圖2表示了在進行治療期間各治療組的行為得分(OFT)。正常的外科手術前的得分為5。在20和5mg/kg的劑量組，改善的比例和程度與用溶媒進行治療的大鼠都有顯著區別。各點代表8-12隻大鼠的均值±標準偏差。
急性治療-經口給藥還是將雌性大鼠的脊髓通過椎板切除術或擠壓暴露出1.4mm的直徑。在HP 184組，在進行擠壓前5-10分鐘通過口服給藥來對大鼠進行治療，然後在第2天和第3天每天給藥一次。用如前所述的方法將MPSS進行給藥。行為得分(OFT)如圖3所示。正常的外科手術前的得分為5。
當與用溶媒進行治療的組進行比較時，對於所有的劑量而言，包括10mg/kg的劑量組，改善的比例和程度都得到了提高。各點用12隻大鼠的均值加標準偏差進行表示。
慢性擠壓實驗將雌性大鼠的脊髓通過椎板切除術或擠壓暴露出1.6mm的直徑。這表示最小程度的損傷，並且在不治療25天後計劃產生4.0的OFT得分。作出這種選擇是為了重新再生出與如Gruner和Yee(1999)所述的運動原損傷相同程度的運動原損傷，所述作者在後肢微型終板電位記錄中證明了4-AP誘導的改善。還已經表明未進行處理的損害的這種過程和長度可以導致脫髓鞘作用。行為得分(OFT)如圖4所示。圖4表示了用此前所描述的用開放領域行走得分的定義對各組所進行的評分的均值和標準偏差。
在這種實驗中，OFT得分較高(4.3-4.5)，僅剩下較少的待改善窗口。用各大鼠作為其自身的對照，在第26、27和28天將HP184進行了每天一次的口服給藥後，觀察到了一致的改善。在將4-AP以0.6mg/kg的劑量進行一天一次的ip給藥後也觀察到了相一致的改善。用Mann-Whitney U-檢驗在各個大鼠(各大鼠是其自身的對照)改變的基礎上對統計學差異進行分析。在第1天、第2天和第3天進行的所有行為試驗都是在管飼法後3小時時進行的。在第3天不進行給藥(開始給藥的第1天是0天)。統計學分析如下20mg/kg-與溶媒對照相比，在3小時至第3天獲得了顯著改善(p＝.002)10mg/kg-與溶媒對照相比，在30分鐘和3小時至12小時獲得了顯著改善(p＝.014)3mg/kg-與溶媒對照相比，在30分鐘至6小時至第1天獲得了顯著改善(p＝.0027)4-AP-與溶媒對照相比，在90分鐘至3小時和12小時至第2天獲得了顯著改善(p＝.0027)表4說明了從給藥前至第三次連續每天給藥後3小時時各組得分的變化。
表4
圖5表示了各大鼠的標準化得分的變化。該圖表示了在連續三天以0.6mg/kg(i.p.)、20或10或3mg/kg(p.o.)的劑量進行給藥後(從給藥前至連續三天給藥後3小時)所觀測到的變化。椎板切除術指假性對照(sham)組。各組的均值±標準偏差(n＝12)如圖5所示。
在長期脊髓損傷中的效能在中等程度的脊髓損傷後35天，在單次給藥後，3mg/kg的HP 184的口服給藥(po)可以改善運動原的恢復情況，並且連續4天或4天以上的每天給藥在此前所述的開放領域行走試驗定義的基礎上可以獲得連續和持續的改善。以0.6mg/kg(ip)的劑量進行給藥的4-AP具有類似的效能。得自兩種慢性脊髓損傷研究(在輕度脊髓擠壓後25天和中度脊髓擠壓後35天第一次進行給藥)的結果的表格形式的表示如表5所示。
表5
如上所示，在中度擠壓後35至41天通過管飼法以3mg/kg/天的劑量口服HP184可以獲得顯著的改善。在這種研究中注意到在使用了HP184的大鼠受損脊髓中的損傷部位處有更多的髓磷脂。這種數據提供了與HP184可以增強髓鞘的重新形成或可以降低正在進行的脫髓鞘作用過程的論斷相一致的證據。
還用雙盲安慰劑和陽性對照方案進行了進一步的研究以測定在中度長期(損傷後35天)擠壓範例中HP184的最低有效劑量。通過使用作為陽性對照的4AP(0.6mg/kg，ip)而證實了之前以3mg/kg的劑量口服時所觀測到的HP184的作用。此外，對所有治療對髓磷脂染色的影響進行了組織學檢查。
(1)行為的評估將150隻得自Charles River的250-300g重的成年雌性Wistar大鼠在McMaster University Health SciencesCentre(HSC)Central Animal Facilities(CAF)飼養至少一周。在此期間，使其出接觸如下所述的行為試驗以確保其熟悉這些試驗。在進行手術前2星期，每天都對大鼠進行處理。
在CAF中，將大鼠用異氟烷(3-5％)O2(1L/min)在適當配備的手術裝置中進行麻醉。在手術前將泰米傑斯克藥片(temgesic)(0.03mg/kg體重，皮下給藥(SQ))進行給藥以緩解疼痛。用3.5mm寬的進行了修改的蓋片鑷對脊髓進行擠壓(壓迫)(Blight 1991，由Rathbone laboratory對該方法進行了修改)。將鑷子閉合成1.4mm並維持15秒，這樣將產生等於Gruner(1996)得分的中等水平(中度)損傷的損傷水平。或者可以根據Blight(1991)所描述的方法來完成該壓迫性損傷。
在出現尿道感染或尿瀦留的情況下對動物進行觀測以測定其疼痛行為。用Tynenol(0.8mg/10gm體重，口服)來對疼痛進行治療。
為了防止尿道感染，在手術前1天和手術後5天給其口服增效磺胺甲基異噁唑(甲氧苄胺吡啶-新諾明)，並且通過手動的膀胱壓縮來進行處理。在感染的情況，即通過混濁尿或血尿所顯示出來的任何尿道感染中，以一天兩次的頻率皮下注射(SQ)拜有利(恩諾沙星，7mg/kg體重)。
損傷後高至5周的時間對運動行為和分節反射的變化進行評估。用開放領域行走任務、後肢放置和腳定位來對動物進行試驗。在手術後第2、7、14、21、28和38天對動物進行評估。到手術後35天時，幾乎不會發生自發性的恢復。因此，在第35天時開始進行治療。
將HP184溶解於用冰乙酸進行了酸化的無菌(高壓滅菌的)的去離子反滲透水中(每10ml水使用0.1ml酸)。將4-AP(Sigma，分子量為94.12；Jankowska E.等人，1982；Gruner等人，1999)溶解於生理鹽水中(0.6mg/kg體重)並通過i.p.注射來進行給藥。一組大鼠通過管飼法口服使用溶媒(溶媒對照-1)。在進行管飼法之前和進行管飼法之後3小時立即進行行為試驗。然後，在第35天給大鼠放血。在手術後第35天至42天，每天一次地給所有其它大鼠通過管飼法口服HP184(各組分別為0.3、1或3mg/kg體重)或4-AP(0.6mg/kg，i.p.)或溶媒(溶媒對照-2)。在這些天中，在管飼法之前和給藥之後第3和24小時立即進行行為試驗。然後，在最後一次行為試驗之後第43天將大鼠進行灌注。
在手術後第35至43天用Hi-8來完成行為試驗的圖像記錄。
在Macintosh計算機上用GB-Stat ppc 6.5.2來進行統計學分析。用Kruskal-Wallis非參數的方差分析(ANOVA)對行為得分進行分析。用Mann Whitney U檢驗進行此後的比較。
用平均OFT得分對各組開放領域運動能力的全面恢復情況進行評估，其如圖6a和6b所示。這些結果表明，用HP184或4-AP進行治療的動物的行為顯著不同於用溶媒進行治療的對照動物。重複測定的ANOVA表明第35-42天的治療效果(p＜0.01)。
結果表明4-AP和HP184都具有有益的作用，在中度長期脊柱壓縮後都可以改善行為試驗。雖然HP184的三種濃度都具有有益作用，但3mg/kg的HP184對運動功能的恢復性最好，從而證實了此前在該劑量時所觀測到的HP184的作用。這些結果還表明HP184的最低濃度(0.3mg/kg)可能不是該實施例中HP184的最低有效劑量。
脊髓的組織學研究當在脊髓損傷很長時間後進行給藥時，進行了一項研究以對用HP184進行治療是否能影響患有中度長期脊髓擠壓的大鼠體內髓磷脂的數量進行試驗。
用得自如上所述評估試驗中的大鼠的脊髓來進行這項研究。
在手術後第21天，將實驗個體用戊巴比妥鈉進行麻醉(50-60mg/kg體重，i.p.)，然後首先用100mL 0.05M包含1％肝素的磷酸鹽生理鹽水緩衝液(PBS)進行經心灌注，隨後用300-500mL 4％多聚甲醛(PFA)進行灌注。將脊髓的T9至L1段取出，然後在30％蔗糖溶液中低溫進行保護並在-70℃下在10.24％聚乙烯醇和4.26％聚乙二醇中進行冷凍。
將包括損傷部位加上10mm與損傷部位相連的頭部(rostral)和尾部在內的各索狀組織的片段植入到Tissue Tek介質中。在低溫恆溫器中以20μm的間距將這一系片段縱向切開。將每三分之一片段用luxol堅牢藍對髓磷脂進行染色。通過在進行了編碼的玻片上用盲法來對進行治療的情況進行觀察來進行評估。在光顯微鏡下對這些片段的脫髓鞘作用(沒有被luxol堅牢藍染色的區域)進行檢測。
對於該索狀組織的最大脫髓鞘區域的測定而言，用Zeiss顯微鏡對整個片進行數碼攝影。用電腦化的BioquantBQ-TCW98圖像分析程序由對治療組一無所知的研究員對損傷中心的脫髓鞘作用的程度進行測定。
在Macintosh計算機上用GB-Stat ppc 6.5.2來完成統計學分析。用Kruskal-Wallis非參數的方差分析(ANOVA)來對組織學結果進行分析。此後，用Mann-Whitney U檢驗來進行比較。
六個實驗組(各組為0.3、1或3mg/kg體重或4-AP 0.6mg/kg或溶媒對照1和2)脫髓鞘作用的程度如圖7所示。條形表示在擠壓中心處脫髓鞘區域的像素的數目。(**P＜0.001，*P＜0.05，Kruskal-Wallis非參數的方差分析(ANOVA))該定量的結果表明得自用HP184或4-AP進行治療的動物的索狀組織的有髓鞘區域遠遠高於生理鹽水對照組動物相同組織的有髓鞘區域。即，得自進行了溶媒注射的動物的索狀組織的脫髓鞘區域顯著高於用HP184或4-AP進行治療的動物。
組織學分析表明HP184(在全部的三種濃度下)和4-AP都對髓鞘形成具有有益的影響，這與行為試驗的結果相一致。在這些組中，用3mg/kg HP 184進行治療的動物表現出最低程度的脫髓鞘作用。因此，在脊髓長期損傷後的一個階段，4-AP或HP184似乎能增強髓鞘的重新形成。因為在實驗開始和結束時在兩個對照組——對照組1和對照組2——間的脫髓鞘程度都沒有差異，所以該數據不可能僅代表髓磷脂減少速率的降低。
實施例7HP-184靜脈內給藥對大鼠膀胱興奮作用的影響本實驗表明了在Fraser等人(2001)所概述的KCl模型中靜脈內給予HP184的影響。Fraser等人聯合使用了硫酸魚精蛋白進行治療，認為其可以破壞泌尿道上皮傘狀細胞的屏障功能、以及KCl的生理學尿濃度(500mM)。在用尿烷麻醉的患有急性膀胱興奮的大鼠獲得累積的劑量-響應研究中，將靜脈給藥的HP184的作用與只使用溶媒所得的結果(n＝4/組)進行了比較。使膀胱內的測壓儀一直處於打開狀態，其可以測定連續灌注期間膀胱的填充和排空，用其來測定藥物對膀胱興奮的作用。當膀胱受到刺激時，由於C-纖維傳入神經的敏化作用，在相同的填充速率期間其收縮更頻繁。圖8說明了與只使用溶媒的作用進行比較的得自給藥前刺激值的膀胱收縮頻率的劑量依賴性的下降。對重複測定進行的方差分析表明雖然只使用溶媒沒有影響，但是HP-184以劑量依賴的方式顯著降低了受刺激的膀胱的膀胱收縮頻率(P＝0.0019)。
實施例8HP184對小鼠NO產生的影響在給予LPS(3mg/kg，ip)前，給小鼠注射30mg/kg HP184(ip)。在進行LPS注射後5小時將小鼠處死，收集血漿。通過Griess分析來測定硝酸鹽的水平。每組由9-10隻小鼠組成。正如圖9所示的那樣，HP184抑制了NO的產生。在單側ANOVA後，僅發現LPS治療組與溶媒治療組有顯著差異(p＜.01)。
實施例9在一種神經性疼痛模型中的HP 184將成年雄性Sprague-Dawley大鼠的L6神經進行單側結紮以產生一種慢性神經損傷。在從手術中恢復過來之後(手術後3-7天)，對動物的爪對於應用到受影響爪上的機械刺激的收縮閾值進行試驗。這是通過將進行了校準的von Frey單絲應用到各後爪的腳底表面上來進行測定的。在研究中僅使用進行了結紮的爪的收縮閾值降低50％的動物，將其隨機分為6組三組接受三種HP184劑量(0.3、3和20mg/kg，po)中的一種，第四組使用單劑量的被稱為MDL的另一種化合物(10mg/kg，ip)，第五組使用加巴噴丁(90mg/kg，sc)，第六組僅使用溶媒。在使用加巴噴丁(90mg/kg，sc)後45分鐘，在使用HP1847、MDL和溶媒後3小時開始進行行為試驗。計算各動物進行了結紮和未進行結紮的爪的收縮閾值之間的差值，對各組間作為主要因素的這些差異進行ANONA。結果如圖10所示。該圖表示了在第一次給藥前和給藥後(研究的急性階段)左爪(進行了結紮的爪)的收縮閾值減去右爪(正常的爪)的收縮閾值的均值(+/-SEM)。統計學分析顯示了一種由HP 184 20mg/kg所引起的L5結紮機械痛覺過敏的劑量響應減弱和明顯相反的由加巴噴丁90mg/kg所引起的痛覺過敏。分析是在重複測定的ANOVA之間或之內進行的。然後在組與時間相互作用意義上進行隨後的比較(LSD)以檢測給藥之前和之後的收縮閾值。
組F(5，43)＝8.18，p＜0.001時間F(1，43)＝47.34，p＜0.001組X時間F(5，43)＝9.25，p＜0.001在用溶媒進行治療的動物中，在兩個爪子的機械收縮閾值之間有很大的差異。
參考資料Agoston S，Bowman WC，Houwertjes MC，Rodger IW，Savage AO.4-氨基吡啶對貓快速收縮肌肉的收縮性的直接作用.Clin Exp Pharm Physiol 1982；921-34。
Aisen ML，Sevilla D，Gibson G，Kutt H，Blau A，EdelsteinL，Hatch J和Blass J(1995)用作肌萎縮性側索硬化治療劑的3，4-二氨基吡啶.J Neurol Sci.12921-24。
Alnaes E和Rahaminoff R(1975)線粒體在遞質從運動原神經末端釋放中的作用.J.Physiol(Lond)248285-306。
Backhauβ C，Karkoutly C，Welsch M，和KrieglsteinJ(1992)一種用於對神經保護的藥物作用進行篩選的局部腦缺血的小鼠模型.J Pharmacological Meth.2727-32。
Ball AP，Hpokinson RB，Farrell ID(1979)由E型肉毒梭狀芽孢桿菌所引起的人肉毒中毒伯明罕爆發Q.J.Med.48-473-491。
Behrmann DL，Bresnahan JC，Beattie MS，Shah BR.由索狀組織的固有機械移位所造成的大鼠脊髓損傷行為和組織學分析.J.Neurotrama，9197-217，1992。
Bennett GJ和Xie YK(1998)大鼠外周單神經病產生與在人類中所觀測到的這些病症相似的疼痛感覺的症狀.Pain.3387-107。
Bever CT(1996)多發性硬化手冊中的氨基吡啶類物質，由SD Lick編輯，Marcel Dekker，第429-42頁。
Bever CT，Jr.，Young D，Anderson PA，Krumholz A，Conway K，Leslie J，Eddington N，Plaisance Kl，Panitch HS，Dhib-Jalbut S.4-氨基吡啶在多發性硬化患者中的作用隨機、安慰劑對照、雙盲的濃度控制交叉試驗的結果.Neurol 1994；441054-1059。
Blight AR和DeCrescito V.實驗性貓脊髓損傷的形態測定分析有髓鞘的軸突的損傷強度與存活之間的關係。Neuroscience198619321-41。
Blight AR.貓慢性脊髓損傷的形態學用一系列樣品進行的有髓鞘軸突的分析.Neuroscience，10521-543，1983。
Blight AR.伴有延遲的繼發性病理學行為跡象的豚鼠脊髓損傷模型中的形態學分析.J Neurol Sci，103156-171，1991。
Bostock H，Sherratt RM，Sears TA.通過延長動作電位來克服脫髓鞘神經纖維中的傳導失敗.Nature 1978；274385-387。
Bostock H，Sears TA，Sherratt RM.4-氨基吡啶和四乙銨離子對正常和脫髓鞘的哺乳動物神經纖維的影響.J Physiol(Lond)1981；313301-315。
Bunge RP，Puckett WR，Bercerra JL，Marcillo A，QuencerRM.對人脊髓損傷病理學的觀測.22例具有詳細資料的得自伴有廣泛的病灶性脫髓鞘作用的慢性索狀組織壓縮的新病例的綜述和分類.InSeil FJ，ed.Advances in neurology，第59卷，紐約Raven Press，199375-89。
Davis FA，Stefoski D，Rush J.4-AP氨基吡啶的口服給藥對臨床多發性硬化症狀的改善.Ann Neurol 1990；27186-192。
Duchen，MR(1992)在單側小鼠感覺神經元線粒體能量中Ca+2-依賴性的改變.Biochem J.28341-50。
Eder C(1998)在小神經角質細胞(腦巨噬細胞)中的離子通道Am.J.Physio.275(Cell Physiol.44)C327-C342。
Fraser MO，Chuang Y，Lavelle JP，Yoshimura N，de GroatWC，Chancellor MB(2001)用於間質性膀胱炎的可靠的非破壞性的動物模型與生理學濃度氯化鉀結合的低劑量的硫酸魚精蛋白的膀胱內給藥.Urology 57(增刊1)112。
Gruner JA和Yee AK(1999)4-氨基吡啶對大鼠逐次脊髓壓縮損傷後運動原引起的電勢的增強作用.Brain Res.816446-56。
Gruner JA，Wade CK，Menna G和Stokes BT.慢性脊髓損傷大鼠與運動器官恢復相對的肌電喚醒的電勢.J.neurotrauma，10327-347，1993。
Gruner JA，Yee AK，Blight AR.實驗性脊髓損傷的組織學和功能性評估對於逐次壓縮的逐步響應證據.Brain Res.，72990-101，1996。
Gruner JA，Yee AK.在大鼠逐次的脊髓壓縮損傷後4-氨基吡啶對運動原喚醒的電位的增強作用.Brain Res.Jan 23；816(2)446-56，1999。
Hamilton，MG和Lundy PM(1995)釕紅對電壓敏感的Ca+2通道的作用.JPET 273940-947。
Hayes KC，Blight AR，Potter PJ，Allatt RD，Hsieh JT，Wolfe DL，Lam S，Hamilton JT.用患有慢性脊髓損傷的患者進行的4-氨基吡啶的臨床前試驗.Paraplegia 1993；31216-224。
Hayes KC，Potter PJ，Wolfe DL，Hsieh JT，Delaney GA，Blight AR.患有脊髓損傷的患者的4-氨基吡啶敏感的神經缺陷.JNeurotrauma 1994；11433-446。
Hirsh JK，Quandt FN.氨基吡啶對小鼠成神經細胞瘤細胞中鉀通道的阻斷作用.J Pharmacol Exp Ther 1993；267604-611。
Hockfield S.Carolson S，Evans C，等人.所選擇的用於抗體和核苷酸(nuceic acid)探針的方法.USACold Sprint HarbourLaboratory Press，第125-130頁，1993。
Jankowska.E，Lundberg A.，Rudomin P.和Sykova E.4-氨基吡啶對貓脊髓中突觸傳遞的影響.Brain Research，240117-129，1982。
Jones RE，Heron JR，Foster DH，Snelgar RS，Mason RJ.4-氨基吡啶對患有多發性硬化的患者的影響.J Neurol Sci 1983；60353-362。
Kerasidis H，Wrathall JR和Gale K.患有挫傷性骨髓損傷的大鼠體內功能缺陷的行為評估.J.Neurosci.Methods，20167-179，1987。
Lowry MAR，Goldbert JI和Belosevic M(1998)需要鉀通道活化來誘導在小鼠巨噬細胞中一氧化氮(NO)的合成.Clin ExpImmunol 111597-603。
Lundh H(1978)4-氨基吡啶對神經肌肉傳導的作用.BrainRes.153307-318。
Lundh H和Thesleff S(1977)4-氨基吡啶和胍對起源於運動神經末梢的傳導的作用方式.Eur.J.Pharmacol.42411-12。
Lundh H，Nilsson O，Rosen 1.4-氨基吡啶—一種在Eaton-Lambert症候群的治療中進行試驗的新型藥物.J NeurolNeurosurg Psychiat 1977；401109-1112。
Lundh H，Leander S，ThesleffS(1977)在大鼠體內由肉毒桿菌毒素所產生的對麻痺的拮抗作用.J.Neurol.Sci.3229-43。
Kim SH ans Chung JM(1992)一種用於由大鼠部分脊神經結紮所導致的周邊神經病的實驗模型.Pain 50355-363。
Madge DJ(1998)鈉通道最近的研究進展和治療可能，InAnnual Reports in Medicinal Chemistry，第33卷(Bristol JAEditor in chief，Academic Press，San Diego)，第51-60頁。
McEvoy KM，Windebank AJ，Daube JR和Low P(1989)用於Lambert-Eaton肌無力症候群的治療的3，4-二氨基吡啶(N.Engl.J.Med.3211567-71。
Mcllay LM，Halley F，Souness JE McKenna J，Benning V，Birrell M，Burton B，Belvisi M，Collis A，Constan A，Foster M，Hele D，Jayyosi Z，Kelley M，Maslen C，Miller G，OuldelhkimMC，Page K，Phipps S，Pollock K，Porter B，Ratcliffe AJ，Redford EJ，Webber S，Slater B，Thybaud V，Wilsher N(2001)一種表現出良好的口服抗關節炎功效的p38 MAP激酶抑制劑——RPR 200765A的發現.Bioorg Med Chem 9537-54。
Meza-Ruiz G和Tapia R(1978)[3H]在將釕紅進行顱骨內給藥後在突觸小體部分中GABA的釋放.Brain Res.154163-166。
O′Neill MJ，Bath CP，Dell CP，Hicks CA，Gilmore J，Ambler SJ，Ward MA，Bleakman D(1997)Ca2+和Na+通道抑制劑在體外和體內對整個大腦局部缺血的作用.Eur J Pharmacol332(2)121-31 RIL 10mg/kg的參考量Pendlebury ST，Lee MA，Blamire AM，Styles P，andMatthews PM(2000)在中風和多發性硬化後繼發的運動原損傷中的軸突損傷和脫髓鞘作用的相關核磁共振成像標記物.Magn.Reson.Imaging 18369-78。
Person RJ和Kuhn JA(1979)對神經肌肉結合點自發的和由釕紅所誘導的遞質釋放的抑制作用.Brain Res.Bull 4669-674。
Potter PJ，Hayes KC，Hsieh JT，Delaney GA，Segal JL.通過口服4-氨基吡啶進行治療的脊髓損傷患者體內神經功能的持續改善三個病例.Spinal Cord 1998a；36147-155。
Potter PJ，Hayes KC，Segal JL Hsieh JT，BrunnemannSR，Delaney GA，Tierney DS和Mason D(1998b)用患有不完全的脊髓損傷患者進行的fampridine-SR(緩釋的4-氨基吡啶)的隨機雙盲交叉試驗.J.Neurotrauma 15837-49。
Pyo H，Chung S，Jou I，Gwag B和Joe EH(1997)在小神經膠質細胞中由脂多糖所誘導的向外的K+通道的表達和功能.Mol Cells 7610-614。
Qiao J，Hayes KC，Hsieh JT，Potter PJ，and DelaneyGA(1997)4-氨基吡啶對伴有脊髓損傷的運動原喚醒的電勢的作用.J Neurotrauma 14135-49。
Rampe，D.，Murawsky，M.K.，Grah，J.和Lewis，E.W.對人心肌鉀通道具有高親和力的拮抗劑——一種安定藥，舍吲哚HERG.J.Pharmacol.Exp.Ther.286788-793，1998。
Rataud J，Bebarnot F，Mary V，Pratt J和StutzmannJM(1994)齧齒動物的病灶性局部缺血和電驚厥中電壓敏感的鈉通道阻滯劑的比較研究.Neuro Sci Lett.17219-23。
Sakurai M和Kanazawa I(1999)在多發性硬化中的陽性症狀用鈉通道阻滯劑——利多卡因和美西律進行的治療.JNeurol.Sci.162162-168。
Saruhashi Y和Young W.在大鼠胸脊髓一半切除後米安舍林對運動功能的影響.Expl Neurol.，129207-216，1994。
Savage AO.4-二甲基氨基吡啶和4-氨基吡啶對分離出來的心臟和骨骼肌製劑作用的比較.Arch Internat PharmacodynamTherapie 1985；273262-276。
Schwid SR，Petrie MD，McDermott MP，Tierney DSMason DH和Goodman AD(1997)用於多發性硬化症狀緩解的緩釋的4-氨基吡啶的定量評估.Neurology 48817-21。
Segal JL，Pathak MS，Hernandez JP，Himber PL，Brunnemann SR和Charter RS(1999)4-氨基吡啶對患有脊髓損傷的患者的安全性和功效長期對照試驗.Pharmacotherapy19713-723。
Seltzer Z，Dubner R和Shir Y(1990)大鼠由局部坐骨神經損傷所導致的神經性疼痛病症的新型行為模型.Pain 43205-218。
Sherratt RM，Bostock H，Sears TA.4-氨基吡啶對正常的和脫髓鞘的哺乳動物神經纖維的作用.Nature 1980；283570-572。
Shi R，Blight AR.低濃度和高濃度的4-氨基吡啶對正常和受損脊髓中的軸突傳導的不同影響.Neurosci 1997；77553-562。
Smith，C.P.，A.T.Woods，Corbett，R.，S.M.Chesson，G.M.Bores，W.W.Petko，J.E.Roehr和S.Kongsamut.HP 184的血清素能活性自發性釋放是否的確起作用？Neurochemical Research 21573-583，1996。
Smith，C.P.，L.R.Brougham，F.P.Huger，L.Davis，J.T.Klein和R.C.Effland.HP 184[N-(正-丙基)-N-(3-氟-4-吡啶基)-1H-3-甲基吲哚-1-胺鹽酸鹽]乙醯膽鹼(ACh)和去甲腎上腺素(NE)的體外自發性釋放.Drug Dev.Res.30203-212，1993。
Stefoski D，Davis FA，Faut M，Schauf CL.4-氨基吡啶對多發性硬化臨床症狀的改善作用.Ann Neurol 1987；2171-77。
Sweitzer SM，Colburn RW，Rutkowski M和DeLeoJA(1999)急性外周炎症誘導的與大鼠的疼痛行為有關的中度神經膠質活化和脊髓IL-1β表達.Brain Res.829209-221。
Tang L和Kongsamut S(1996)貝西吡啶和HP 184對神經遞質釋放的頻率依賴性抑制作用.Eur J Pharmacol 30071-74。
Tang，L.，Huger，F.P.，Klein，J.T.，Davis，L.，Martin，L.，Shimshock，S.，Effland，R.C.，Smith，C.P.和Kongsamut，S.(1998)4-氨基吡啶衍生物一類新型的電壓依賴性鈉通道調節劑.Drug Dev.Res.，448-13。
Tang L.，C.P.Smith和S.Kongsamut.貝西吡啶抑制了藜蘆定(veratridine)對電壓依賴性鈉通道的作用.Br J.Pharmacol1162468-2472，1995。
Tapia R和Velasco I(1997)作為研究鈣通道、神經元死亡和神經通道功能的工具的釕紅.Neurochem Int 30137-147。
Tapia R和Meza-Ruiz G(1977)釕紅對在突觸小體部分中[3H]GABA的鈣依賴性釋放的抑制作用.Brain Res.126160-166。
Tapia R，Meza-Ruiz G，Duran L和Drucker-ColinRD(1976)依賴於給藥途徑的由釕紅所誘導的驚厥或弛緩性麻痺.Brain Res.116101-109。
Tapia R和Stiges M(1982)4-氨基吡啶對突出小體中遞質釋放的影響.Brain Res.250291-9。
Tapia R(1982)4-氨基吡啶、胍和鑭對釕紅所誘導的小鼠麻痺的拮抗作用.Neurosci Lett 35615-623。
Targ EF，Kocsis JD.4-氨基吡啶導致了脫髓鞘的大鼠坐骨神經中傳導的恢復.Brain Res 1985；328358-361。
Targ EF，Kocsis JD.在使用4-氨基吡啶後脫髓鞘的大鼠坐骨神經的動作電位特性.Brain Res 1986；3631-9。
van Diemen HA，Polman CH，van Dongen TM，van LoenenAC，Nauta JJ，van Walbeek HK，Koetsier JC.4-氨基吡啶對多發性硬化的臨床症狀的影響一種隨機的、安慰劑對照的、雙盲的交叉研究.Ann Neurol 1992；32123-130。
van Diemen HA，Polman CH，van Dongen MM，Nauta JJ，Strijers RL，van LoenenAC，Bertelsmann FW，Koetsier JC.4-氨基吡啶誘發的多發性硬化患者的功能改善一項神經生理學研究.J Neurol Sci1993；116220-226。
Yamaguchi S和Rogawski MA(1992)抗驚厥藥對4-氨基吡啶所誘發的小鼠癲癇發作的影響.Epilepsy Res.119-16。
專利Effland RC，Klein JT，Davis KL Olsen GE；題目為「N-(吡啶基)-1H-吲哚-1-胺」的US 4,970,218。
Hansebout RR和Blight AR；題目為「4-氨基吡啶在脊髓損傷患者中用來降低慢性疼痛和痙攣狀態的應用」的US 5,545648。
Hansebout RR和Blight AR；題目為「4-氨基吡啶在神經情況的治療中的應用」的WO 94/14439。
Huger，F.P.，Kongsamut，S.，C.P.Smith L.Tang.題目為「未被取代的和被取代的N-(吡咯-1-基)吡啶胺作為抗驚厥劑的應用」的US 5,776,955。
Kongsamut，S.，C.P.Smith A.T.Woods；題目為「N-(吡啶基)-1H-吲哚-1-胺用於治療強迫性強迫病症的應用」的US 5,356,910。
Kongsamut，S.，C.P.Smith A.T.Woods；題目為「N-(吡啶基)-1H-吲哚-1-胺用於製備治療強迫性強迫病症的藥物的應用」的US 5,356,910。
Masterson JG和Myers M；題目為「在治療神經性疾病中的製劑及其應用」的US 5,370,879。
Masterson JG和Myer.s M；題目為「在治療神經性疾病中的製劑及其應用」的US 5,580,580。
Masterson JG和Myers M；題目為「在治療神經性疾病中的製劑及其應用」的US 5,540,938。
Wurtman RJ和Buyukysal R；題目為「用於治療神經病症的方法和組合物」的WO 89/09600。
權利要求
1.一種治療脫髓鞘疾病的方法，所說的方法包括給需要其的患者使用治療有效量的式I的化合物或其可藥用的鹽 其中m是0、1或2；n是0、1或2；p是0或1；各R獨立地是氫、滷素、三氟甲基、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、苄氧基、羥基、硝基或氨基；各R1獨立地是氫、C1-C6烷基、C1-C6鏈烯基、C-C6烷醯基、滷素、氰基、-C(O)C1-C6烷基、-C1-C6亞烷基CN、其中R′和R″各自獨立地是氫或C1-C6烷基的-C1-C6亞烷基NR′R″、-C1-C6亞烷基OC(O)C1-C6烷基、或其中R4是氫或C1-C6烷基的-CH(OH)R4；R2是氫、未被取代或被滷素、羥基或苄氧基所取代的C1-C6烷基、C1-C6鏈烯基、C1-C6炔基、-CO2C1-C6烷基、或其中R5是C1-C6亞烷基、C1-C6亞鏈烯基或C1-C6亞炔基並且R′和R″各自分別獨立地是氫、C1-C6烷基的-R5-NR′R″或者另一種供替代的選擇是-NR′R″作為一個整體是1-吡咯烷基；和R3是氫、硝基、氨基、滷素、C1-C6烷氧基、羥基或C1-C6烷基。
2.如權利要求1所述的方法，其中R是氫、滷素、三氟甲基或C1-C6烷基；R1是氫或C1-C6烷基；R2是氫或C1-C6烷基；R3是氫、C1-C6烷基或滷素；並且p是0。
3.如權利要求1所述的方法，其中所說的脫髓鞘疾病是多發性硬化。
4.如權利要求2所述的方法，其中所說的化合物具有如下式所示的結構
5.如權利要求4所述的方法，其中所說的脫髓鞘疾病是多發性硬化。
6.一種治療脫髓鞘情況的方法，所說的方法包括給需要其的患者使用治療有效量的如權利要求1所述的化合物。
7.如權利要求6所述的方法，其中R是氫、滷素、三氟甲基或C1-C6烷基；R1是氫或C1-C6烷基；R2是氫或C1-C6烷基；R3是氫、C1-C6烷基或滷素；並且p是0。
8.如權利要求6所述的方法，其中所說的脫髓鞘情況是脊髓損傷。
9.如權利要求6所述的方法，其中所說的脫髓鞘情況是外傷性腦損傷。
10.如權利要求6所述的方法，其中所說的脫髓鞘情況是中風。
11.如權利要求7所述的方法，其中所說的化合物具有如下式所示的結構
12.如權利要求11所述的方法，其中所說的脫髓鞘情況是脊髓損傷。
13.如權利要求11所述的方法，其中所說的脫髓鞘情況是外傷性腦損傷。
14.如權利要求11所述的方法，其中所說的脫髓鞘情況中風。
15.一種中風康復的方法，其中所說的方法包括給需要其的患者使用治療有效量的如權利要求1所述的化合物。
16.如權利要求14所述的方法，其中所說的R是氫、滷素、三氟甲基或C1-C6烷基；R1是氫或C1-C6烷基；R2是氫或C1-C6烷基；R3是氫、C1-C6烷基或滷素；和p是0。
17.如權利要求16所述的方法，其中所說的化合物具有如下式所示的結構
18.一種阻斷需要進行這種治療的患者的鉀通道的方法，該方法包括給需要進行治療的患者使用治療有效量的如權利要求1所述的化合物。
19.如權利要求18所述的方法，其中R是氫、滷素、三氟甲基或C1-C6烷基；R1是氫或C1-C6烷基；R2是氫或C1-C6烷基；R3是氫、C1-C6烷基或滷素；並且p是0。
20.如權利要求19所述的方法，其中所說的化合物具有如下式所示的結構
21.如權利要求2所述的方法，其中所說的化合物具有如下式所示的結構
22.如權利要求7所述的方法，其中所說的化合物具有如下式所示的結構
23.如權利要求22所述的方法，其中所說的脫髓鞘情況是脊髓損傷。
24.如權利要求22所述的方法，其中所說的脫髓鞘情況是外傷性腦損傷。
25.如權利要求22所述的方法，其中所說的脫髓鞘情況是中風。
26.一種治療神經性疼痛的方法，其中所說的方法包括給需要其的患者使用治療有效量的如權利要求1所述的化合物。
27.如權利要求26所述的方法，其中所說的化合物具有如下式所示的結構
28.一種治療膀胱興奮的方法，所說的方法包括給需要其的患者使用治療有效量的如權利要求1所述的化合物。
29.如權利要求28所述的方法，其中所說的化合物具有如下式所示的結構
30.一種治療膀胱活動性過高的方法，所說的方法包括給需要其的患者使用治療有效量的如權利要求1所述的化合物。
31.如權利要求30所述的方法，其中所說的化合物具有如下式所示的結構
32.一種治療趨化因子誘導的疼痛的方法，所說的方法包括給需要其的患者使用治療有效量的如權利要求1所述的化合物。
33.如權利要求32所述的方法，其中所說的化合物具有如下式所示的結構
全文摘要
式I的N－(吡啶基)－1H－吲哚－1－胺提供了對鉀和鈉通道都具有阻斷性的獨特組合。這些化合物可用於治療脫髓鞘疾病和情況，如多發性硬化、脊髓損傷、外傷性腦損傷和中風。這些化合物還可用於中風恢復、膀胱興奮和功能障礙的治療、以及神經性疼痛和趨化因子誘導的疼痛的治療。
文檔編號A61P13/00GK1529598SQ02804864
公開日2004年9月15日 申請日期2002年2月14日 優先權日2001年2月15日
發明者C·P·史密斯, C P 史密斯, M·P·拉思伯恩, 拉思伯恩, M·佩蒂, D·蘭普 申請人:安萬特藥物公司