α的製作方法

2023-06-15 08:00:31

專利名稱：α的製作方法
技術領域：
本發明涉及新的作為α4抑制劑(包括α4β7以及α4β1)的苯基丙氨酸衍生物，可介導粘附而被用以治療如哮喘、糖尿病、風溼性關節炎、炎症性腸病以及其他涉及白細胞浸潤至胃腸道或其他表皮組織的疾病，例如皮膚、泌尿道、呼吸道及關節滑膜。
本發明的抑制劑亦可以用於治療白細胞侵潤至其他組織，包括肺、血管、心臟和神經系統以及移植器官，例如腎臟、肝臟、胰臟、心臟、腸以及血管。
整聯蛋白為由非共價鍵結合亞單位，即α與β亞單位組合而成的異二聚物(參見Hemler，Annu.Rev.Immunol.8365-400(1990)；Hynes，Cell 48549-554(1987)；Shimizu et al.，Immunol.Rev.114109-143(1990)；和Springer，Nature 346425-434(1990))。至今，已有8個整聯蛋白的β亞單位被鑑定出來，其可與16個不同的α亞單位形成23個不同的整聯蛋白。α4β1整聯蛋白，又名VLA-4(Very Late Antigen-4)可以在多種細胞表達，包括淋巴細胞、單核細胞以及嗜酸性粒細胞(參見Hemler et al.，J.Bio.Chem.26211478-11485(1987)；和Bochner etal.，J.Exp.Med.1731553-1556(1991))，且可能在炎症反應時在這些細胞的募集中扮演重要角色。VLA-4為血管細胞粘附分子-1(VCAM-1)(Elices et al.，Cell 60577-584(1990))以及和連接片段1(CS-1)，一種FN的A鏈的交替轉接區域(Wayne et al.，J.Cell Biol 1091321-1330(1989))的受體。
β7整聯蛋白亞單位首次由Erle等人克隆(Erle etal.，J.Biol.Chem.26611009-11016(1991))，其只表達於白細胞且已知與兩個不同的α亞單位，α4(Ruegg et al.，J.Cell Biol.117179-189(1992))和αE(Cerf-Bensussan et al.，Eur.J.Immunol.22273-277(1992)；和Kilshaw et al.Eur.J.Immunol.212591-2597(1991))有關。
α4β7複合物具有三個已知配體(VCAM-1，CS-1，MAdCAM-1)。其中顯示對於α4β7具有獨特特異性的配體為黏膜地址素細胞附著分子-1(MAdCAM-1)(參見Andrew et al.，J.Immunol.1533847-3861(1994)；Briskin et al.，Nature 363461-464(1993)；和Shyjan et al.，J.Immunoul.1562851-2857(1996))。MAdCAM-1在皮爾氏斑高內皮小靜脈、腸繫膜淋巴結以及腸固有層和乳腺小靜脈高度表達(Berg et al.，Immunol.Rev.1055-18(1989))。整聯蛋白α4β7與MAdCAM-1已經顯示了在介導淋巴細胞達到正常小腸中的重要性(Holzman et al.，Cell5637-46(1989))。
α4β7的第二個配體為CS-1(參見Guan et al.，Cell 6053-61(1990)；和Wayner et al.，J.Cell Biol.1091321-1330(1989))。CS-1中的細胞結合位置是由25個胺基酸組成，其中羧基端胺基酸殘基EILDVPST形成鑑別基元(參見Komoriya et al.，J.Biol.Chem.26615075-15079(1991)；和Wayner et al.，J.Cell Biol.116489-497(1992))。
α4β7的第三個配體為血管細胞附著分子-1(VCSM-1)，一種在內皮細胞表達的細胞因子誘發的蛋白(參見Elices et al.，Cell60577-584(1990)；Ruegg et al.，J.Cell Biol.117179-189(1992))。目前還不確定MAdCAM-1、VCAM-1與CS-1是否結合於α4β7的相同位置。採用單克隆抗體檢測，Andrew等人發現與α4β7與其三種配體的反應涉及不同但有重迭的表位(Andrew et al.，J.Immunol.1533847-3862(1994))。VCAM-1與CS-1(參見Elices et al.，Cell60577-584(1990))為α4β7與α4β1共享的配體。此外，也已知α4β1結合於骨橋蛋白，一種在動脈粥樣硬化斑中的上調蛋白(Bayless etal.，J.Cell Science 1111165-1174(1998))。本發明的實用性許多體內實驗顯示α4整聯蛋白(α4β1/α4β7)在許多疾病的致病機理中扮演關鍵性角色。抗α4單克隆抗體已被試驗於多種疾病模型中。抗α4抗體的效力也在試驗自體免疫腦脊髓炎的大鼠和小鼠模型中得到證明(參見Baron et al.，J.Exp.Med.17757-68(1993)；和Yednock et al.，Nature 35663-66(1992))。有大量研究是評估α4在過敏性呼吸道中扮演的角色的(Abraham et al.，J.Clin，Invest.93776-787(1994)；Bochneret al.，J.Exp.Med.1731553-1556(1991)；Walsh et al.，J.Immunol.1463419-3423(1991)；和Weg et al.，J.Exp.Med.177561-566(1993))。例如，抗α4單克隆抗體在幾種肺抗原攻擊模型具有效果(參見Abrahamet al.，J.Clin.Invest.93776-787(1994)；和Weg et al.，J.Exp.Med.177561-566(1993))。當施予抗α4抗體或抗α4β7抗體於具有自發性慢性結腸炎的狨猴時，狨猴會顯示出結腸炎的發生顯著減低(參見Bell etal.，J Immunol.1514790-4802(1993)；Podolsky et al.，J.Clin.Invest.92372-380(1993)；Hesterberg et al.，Gastroenterology1111373-1380(1996))。在以CD45RB高CD4+T細胞重組的免疫不全小鼠(scid mice)中根據組織學研究發現單株抗β7抗體或MAdCAM-1會阻斷淋巴細胞過流至結腸並減低結腸發炎的嚴重程度(參見Picarella et al.，J.Immunol.1582099-2106(1997))。抗α4單克隆抗體抑制胰島炎並可延遲非肥胖型糖尿病(NOD)小鼠的糖尿病的發作(參見Baron et al.，J Clin.Invest.931700-1708(1994)；Burkly et al.，Diabetes43529-534(1994)；和Yang et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA9010494-10498(1993))。其他與α4有關的疾病包括類風溼性關節炎(參見Laffon et al.，J.Clin.Invest.88546-552(1991)；和Morales-Ducret et al.，J Immunol.1491424-1431(1992))、動脈粥狀硬化症(參見Cybulsky et al.，Science 251788-791(1991))、同種異體移植的排斥現象(Isobe et al.，J.Immunol.1535810-5818(1994))以及腎炎(Allen et al.，J.Immunol.1625519-5527(1999))。延遲型過敏反應(Issekutz，J，Immunol.1474178-4184(1991))、接觸性過敏反應(參見Chisholm et al.，Eur.J.Immunol.23682-688(1993))和Ferguson etal.，J.Immunol.1501172-1182(1993))，以及血管內膜增生(Lumsden etal.，J Vasc.Surg.2687-93(1997))也會被抗α4抗體阻斷。(請參考優秀的涉及疾病中α4的體內研究綜述Lobb et al.，J.Clin.Invest.941722-1728(1995))。
白細胞粘附到發炎的滑膜推測是由α4β1/VCAM-1相互作用所支配，然而，在類風溼性關節炎患者的滑液膜也發現有α4β7陽性T細胞增加的情形(McMurray，Semin.Arthritis Rheum.25215-233(1996)。推測這種α4β7表達的增強可能與這種疾病的發展和長期存在有關(參見Lazarovits et al.，J.Immunol.1516482-6489(1993))。在NOD小鼠中，MAdCAM-1會高度表達於發炎胰腺內小島的內皮小靜脈，其提示α4β7在糖尿病扮演的角色(Yang et al.，Diabetes 461542-1547(1997))。在染病的組織中α4β1/α4β7在各種白細胞上的表達以及α4β1/α4β7陽性細胞的存在暗示著這兩種受體可能在細胞募集至多處發炎位置中扮演重要角色。例如，抗α4單克隆抗體在如小鼠、大鼠或豚鼠以卵白蛋白誘發哮喘的幾個肺臟抗原攻擊模型中具有效果(Pretolani et al.，J.Exp.Med.180795-805(1994)，Fryer et al.，J.Clin.Invest.992036-2044；和Henderson et al.，J.Clin.Invest.1003083-3092(1997))。在淋巴細胞和嗜酸性粒細胞上的α4β7與α4β1的表達以及體內試驗研究顯示α4β7/α4β1介導人類嗜酸性粒細胞附著於VCAM-1、CS-1和MAdCAM-1(Walshet al.，Immunology 9112-119(1996))，由此提示α4為治療哮喘的適當治療靶。總而言之，上述實驗數據提示整聯蛋白α4β7與α4β1可能在多種炎症疾病中扮演重要角色。
在體內試驗中採用抗整聯蛋白的單克隆抗體證明許多整聯蛋白的確是用於炎症、免疫介導的疾病、心血管疾病及器官移植的有效的治療靶。
此外，也有文獻指出，一種可口服生物利用的、非胜肽小分子α4的拮抗物也可以用於治療或預防例如哮喘、炎症性腸病、類風溼性關節炎、多發性硬化症及其他疾病(參見WO99/36393)。
本發明目的即是確定出一種可口服生物利用的且具有強效的α4整聯蛋白的小分子拮抗劑。本發明公開了對於α4介導的與MAdCAM-1、VCAM-1或CS-1的粘附具有強抑制作用的小分子，且這些小分子化合物可用於治療或預防炎症疾病和/或過敏疾病。
其中X1為滷素原子，X2為滷素原子，Q為-CH2-基團或-(CH2)2-基團，Y為C1-6烷基，以及CO2R為可被酯化的羧基；或其藥學上可接受鹽。
本發明還涉及藥物組合物，其包括治療有效劑量的式[I]化合物或其藥學上可接受鹽。
此外，本發明還涉及治療或預防由α4整聯蛋白介導的細胞粘附引起的疾病的方法，其包括施予式[I]化合物或其藥學上可接受鹽。發明詳述本發明的化合物可以基於其中不對稱原子而以光學異構體的形式存在，且本發明包括這些光學異構體及其混合物。
在本發明的一個優選實施例中，可被酯化的羧基包括羧基及酯化的羧基，後者可以在身體內被水解提供羧基。這些酯化的羧基的實例如取代或未取代C2-7烷氧羰基、例如甲氧羰基、苄氧羰基、對-氨基苄氧羰基等等。
在本發明的一個優選實施例中，鍵的R/S構型不需固定。本發明的化合物可以為具有一種構型的化合物或是具有不同構型的混合物。
在本發明的化合物中，優選的化合物是如式[I-1]的化合物 其中的符號定義與前述相同。
在化合物[I-1]更優選的實施例中，X1為氯原子或氟原子，X2為氯原子或氟原子，Y為C1-4的烷基，CO2R為羧基或C2-7烷氧羰基。
在式化合物[I-1]的另一個優選的實施例中，X1為氯原子或氟原子，X2為氯原子或氟原子，Q為-CH2-，Y為甲基，乙基，或正-丙基，CO2R為羧基、甲氧羰基、乙氧羰基、或叔丁氧羰基。
特別優選的式[I-1]化合物為其中X1為氟原子，X2為氯原子或氟原子、Q為-CH2-，Y為甲基或乙基，並且CO2R為羧基或C2-7烷氧羰基如甲氧羰基和乙氧羰基。
本發明最優選的化合物選自以下N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯基丙氨酸[即(2S)-2-[(2，6-二氟苯甲醯基)氨基]-3-[4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)苯基]丙酸]；N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯基丙氨酸[即(2S)-2-[(2-氯-6-氟苯甲醯基)氨基]-3-[4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)苯基]丙酸]；N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)-L-苯基丙氨酸[即(2S)-2-[(2-氯-6-氟苯甲醯基)氨基]-3-[4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)苯基]丙酸]；N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)-L-苯基丙氨酸[即(2S)-2-[(2，6-二氟苯甲醯基)氨基]-3-[4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)苯基]丙酸]；或是其C1-6的烷基酯；或是其藥學上可接受鹽。
本發明的化合物可以以游離形式或是其藥學可接受鹽的形式使用。藥學上可接受鹽包括與有無機鹼、有機鹼或鹼性胺基酸形成的鹽(例如，鹼金屬鹽如鈉鹽及鉀鹽；鹼土金屬鹽，如鎂鹽及鈣鹽；或與胺形成的鹽，如銨鹽、三乙基銨鹽、與賴氨酸形成的鹽等等)以及與有無機酸或有機酸形成的鹽(例如，鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、氫溴酸鹽、甲基磺酸鹽、對-甲苯磺酸鹽、醋酸鹽、馬來酸鹽)。藥學上可接受鹽也包括其分子內鹽，或其溶合物或水合物。
本發明化合物的特徵為於聯苯基核4′位置引進被C1-6烷氧基取代的C1-2烷基，以及二滷取代的苯甲醯基團與2′，6′-二(C1-6烷氧基)-4′-(C1-6烷氧基取代C1-2烷基)聯苯基核的組合，在先前發表的文獻中，沒有特別揭露這些特徵。
本發明的化合物對於α4介導的細胞粘附具有強抑制作用，且口服後顯示良好的生物可利用性，其反映出全面性的改善a)代謝穩定性，b)血漿蛋白的結合，以及C)水溶性。特別是在聯苯基核的4′位置引進被C1-6烷氧基取代的C1-2烷基會降低先前公開中對於一些化合物所觀察到的快速代謝。本發明化合物降低了肝清除率，因而改善生物利用性。
因此，本發明化合物顯示良好針對由α4介導的細胞附著所引起的不利的狀況的體內能力。
本發明化合物可以用於治療或預防在哺乳類，例如人類的α4(包括α4β1與α4β7)附著介導的狀況的方法中。
另一方面，本發明化合物可以用於治療患有與白細胞(例如淋巴細胞，單核細胞)浸潤至表達分子MAdCAM-1和/或VCAM-1的組織(包括組織中白細胞募集和/或蓄積)有關的疾病的個體(例如哺乳類，如人或其他靈長類)。例如，炎症疾病，包括與白細胞浸潤至胃腸道(包括腸相關內皮)、其他黏膜組織或表達分子MAdCAM-1的組織(例如腸相關組織，如小腸與大腸固有層的小靜脈，以及乳腺(例如泌乳時的乳腺))等有關的疾病可以依據本發明方法治療。相似地，由於白細胞結合於表達分子VCAM-1細胞(例如內皮細胞)而導致的患有與白細胞浸潤組織相關疾病的個體也可以依本發明方法治療。
該治療或預防α4(包括α4β1與α4β7)依賴性粘附介導狀況或與白細胞浸潤相關疾病的方法包括施與哺乳類或人類患者有效劑量的本發明化合物以及藥學上可接受的載體或稀釋劑。
因此，本發明的化合物可以用於治療或預防如類風溼性關節炎(RA)，炎症狀況哮喘；如鼻炎等過敏狀況；成人呼吸窘迫；愛滋病痴呆；阿爾海默症；心血管疾病；栓塞或有害性血小板聚集；栓塞溶解後的再閉塞；再灌注的損傷；牛皮癬；如溼疹、接觸性皮膚炎以及異位性皮炎等皮膚炎性狀況；糖尿病(例如胰島素依賴性糖尿病、自體免疫糖尿病)；多發性硬化症；系統性紅斑狼瘡(SLE)；如潰瘍性結腸炎、克隆氏病(局限性迴腸炎)及(例如直腸結腸切除術或迴腸肛門吻合術的後發生的)囊炎等炎症性腸病；如乳糜瀉、非熱帶性口炎性腹瀉、與血清陰性關節病相關的腸病、淋巴細胞性或膠原性結腸炎、以及嗜酸性粒細胞胃腸炎等與白細胞浸潤至胃腸道相關的疾病，與白細胞浸潤至其他如皮膚、泌尿道、呼吸道以及關節滑膜等襯有上皮的組織有關的疾病，胰腺炎，乳腺炎，肝炎，膽囊炎，膽管炎，膽管周炎(膽管與肝臟周圍組織)，支氣管炎，竇炎，等導致間質性纖維化的肺臟炎症性疾病如過敏性肺炎；膠原病(於SLE與RA中)，結節病，骨質疏鬆症，動脈粥樣硬化症，腫瘤性疾病包括腫瘤性或癌性生長轉移，創傷(創傷癒合的增進)，如視網膜脫落，過敏性結膜炎及自身免疫性眼色素層炎等某些眼疾，謝格連氏症候群，移植後的(慢性及急性)排斥現象，宿主抗移植體或移植體抗宿主的病症，血管內膜增生，血管硬化症(包括移植後移植體的血管硬化)，如經皮轉移腔性冠狀血管成造形術(Percutaneous transluminal coronaryangiopathy，PTCA)及經皮轉移腔性動脈再造管腔手術後的再梗塞或再狹窄，腎炎，腫瘤血管生成，惡性腫瘤，多發性骨髓瘤及骨髓瘤誘發的骨質再吸收，以及如休克、創傷性腦損傷和脊髓損傷等中樞神經系統損傷。
本方法優選是用於哮喘、如鼻炎等過敏性症狀，如潰瘍性結腸炎及克隆氏病等炎症性腸病，類風溼性關節炎，異位性皮炎，多發性硬化症及移植後排斥現象等的治療或預防。
適於用於治療的化合物可採用適當的動物模型進行體內評估。適當的炎症動物模型公開出版物中已有披露。例如NOD小鼠提供胰島素依賴性糖尿病的動物模型。CD45RBHiSCID小鼠模型提供類似克隆氏病與潰瘍性結腸炎的模型(Powrie et al.，Immunity1553-562(1994))。白頂狨猴可產生自發性、常為慢性的結腸炎，其在臨床上與組織學上類似於人類的潰瘍性結腸炎(Masara et al.，Gastroenterology 8813-19(1985))。鼠類結腸炎的糊精硫酸鈉(DSS)模型可由DSS加入飲用水中引入。DSS結腸的生理學與組織學變化在文獻中已被充分描述，且令人聯想到人類的潰瘍性結腸炎(Cooper etal.，Laboratory Investig.69238-249(1993))。發生類似人類炎症性腸病的腸損傷的IL-10基因敲除小鼠也曾被報告(Scrober et al.，Cell75203-205(1993))。
雖然本發明化合物可以單獨給予，然而其優選地是以藥學組合物的形式給予，其組合物含有治療有效劑量的通式I化合物以及藥學上可接受載體或稀釋劑。
載體必須可接受的含義是其不能傷害藥物接受者。藥學上可接受載體或稀釋劑可以如粘合劑(例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、黃蓍膠、聚乙烯吡咯烷酮)、賦形劑(如乳糖、蔗糖、玉米澱粉、磷酸鉀、山梨醇、甘氨酸)、潤滑劑(如硬酯酸鎂、滑石、聚乙二醇、二氧化矽)、崩解劑(如馬鈴薯澱粉)、溼潤劑(如月桂基硫酸鈉)等等。
藥學組合物包括適於以口服、經肺給予、經眼給予、直腸給予、注射給予(包括皮下、肌肉、和靜脈注射)、關節內給予、局部給予、鼻腔吸入(例如以氣溶膠)或頰給予等各種形式。這些配方包括本領域內技術人員已知的長效性配方。給予方式中以口服與注射為佳。
藥學組合物可以方便地以單位劑量的形式出現，也可以任何本領域人員熟知的方法製備。一般而言，該配製是均一地和緊密地將活性成分引入相關的液態載體或細分的固態載體中或是兩者皆有，如需要再將產品成形成所需形式。
適於口服的本發明組合物可以為分散單元如膠囊、扁囊劑、片劑或錠劑，每一個含有事先決定劑量的本發明化合物，或是為粉狀或顆粒狀形式，或是為水溶液中的溶劑或懸浮液形式。其他用途的製劑也可以為非水溶液的液體；例如水包油的乳劑或油包水乳劑的形式、氣溶膠形式、或霜劑或軟膏形式或浸漬的透皮貼劑用於經皮施與本發明化合物到需要治療的患者。本發明的化合物也可以大丸劑、幹藥糖錠或糊劑形式施與須治療的患者。
本發明化合物也可以足夠劑量施與須治療患者而減緩或預防α4-介導的細胞粘附。另一方面，本發明化合物可以足夠劑量施與患者以達到所需治療及/或預防效果，或以足以降低或預防MAdCAM-1/VCAM-1介導的結合至MAdCAM-1/VCAM-1配體的劑量，從而抑制白細胞附著以及浸潤和相關的細胞反應。
本發明的化合物與組合物可以以有效地至完全或部分減緩不希望的症狀的量施與患有前述病症的患者。這些症狀可能系因白細胞附著或細胞活化而造成，而這些一般被期待由於內皮細胞表面增加的VCAM-1及/或MAdCAM-1表達的結果而發生。增加VCAM-1、MAdCAM-1和/或CS-1的表達增加可能由於正常炎症反應或異常炎症狀態所致。不論是何者，有效劑量的本發明化合物皆可以減低由於內皮細胞增加的VCAM-1及/或MAdCAM-1表達而增加的細胞附著現象。減少病程中觀察到的附著達到50％時可被視為附著症狀的有效減低。優選地，可以達到活體外附著減低至90％。最優選地，由VCAM-1、MAdCAM-1和/或CS-1介導的附著現象可被有效劑量完全消除。臨床上，某些情況顯示，化合物的效果可以由白細胞減少浸潤到組織或受創處或發炎處而被觀察到。為達到治療效果，可施與本發明的化合物或組合物以提供有效減緩或消除白細胞附著或細胞活化以減輕不期望症狀的劑量。
要達到治療效果的化合物[I]劑量依特定化合物、施與途徑、治療對象的年齡、性別、體重及當時狀況、以及治療的特定不適或疾病而變化。對於發病或可能發病的哺乳對象而言，化合物[I]適當的每日劑量或其藥學上可接受鹽的劑量為每公斤哺乳動物體重從0.1至100毫克，優選每公斤哺乳動物體重0.3至30mg。當由非腸道途經施與時，其劑量範圍可以為每公斤體重0.1至10毫克，以每公斤哺乳動物體重0.3至3毫克為佳。當經口給予時，適當的每日劑量為每公斤體重施與該化合物1至100毫克的範圍，但以每公斤體重施與該化合物2至30毫克為佳，最優選的是每公斤體重施與該化合物1至10毫克、一日二到三次。當局部施與時，例如給予皮膚或眼睛，式[I]的化合物或其藥學上可接受鹽的適當劑量為每公斤體重施予0.1至100ug的範圍。
式[I]化合物或其藥學上可接受鹽可以由下述步驟獲得(1)轉化式[II]化合物 其中CO2R1為酯化羧基，且其他符號與前述定義相同，使之成為式(Ia)化合物 其中的符號與前述定義相同，(2)需要時，可轉化式[Ia]化合物的酯化羧基成為羧基，(3)若有進一步的需要，可將生成的化合物轉化為其藥學上可接受鹽。
步驟1轉化化合物[II]成為化合物[Ia]時可以用下述方法A至方法D中的一種來進行。
步驟2轉化酯化羧基CO2R1成為羧基時可以由常規方法進行，其根據其要轉化的酯化羧基類型而選擇，例如採用鹼(即氫氧化鹼金屬，如LiOH與NaOH)、或酸(如HCL)的水解、用酸(例如TFA)的處理。
步驟3將生成的化合物[I]轉化為其藥學上可接受鹽可以由常規方法進行，採用鹼(例如無機鹼如NaOH，有機鹼如三乙基胺或鹼性胺基酸如賴氨酸)或酸(如無機酸如HCl、HNO3和H2SO4，有機酸如醋酸及馬來酸，或酸性胺基酸如天門冬酸與穀氨酸)。
化合物[II]轉化成為化合物[Ia]可以由下述方法實現(方法A-D)方法A化合物[Ia]其中Q為一-CH2-，可以由下列步驟獲得(1)氧化化合物[II]以提供化合物[III] 其中各符號於前述定義相同，以及(2)使化合物[III]與式[IV]化合物進行還原縮合Y-OH [IV]其中Y與前述相同。
步驟1氧化還原反應可以由常規方法在合適的溶劑中採用氧化劑帶有或不帶鹼而進行。
氧化劑可以擇自常規的氧化劑，例如MnO2、SO3·吡啶、KMnO4、PCC、PDC等。
鹼可以擇自常規有機鹼，例如三烷基胺(如Et3N、DIEA)。
溶劑可以擇自任何不影響氧化反應的溶劑，例如滷代甲烷(如CH2Cl2、CHCl3)、芳香碳氫化合物(例如苯、甲苯)、DMSO、水或其混合物。
反應可以在溫度範圍介於-50℃至50℃進行，優選地是在室溫進行。
步驟2化合物[III]與[IV]的縮合反應可以在溶劑中或無溶劑下的在還原劑和脫水劑存在下進行。
還原劑可以擇自常規還原劑，例如三烷基矽烷(如三乙基矽烷)等。
脫水劑包括硫酸、三氟乙酸等。
溶劑可以由任何不會影響反應的溶劑中選出，例如醚(如二噁烷、THF)、芳香碳氫化合物(如苯、甲苯)、滷代甲烷(如CH2Cl2與CHCl3)或其混合物。
反應可以在溫度範圍介於-50℃至50℃進行，優選地是在0℃至室溫進行。
方法B化合物[Ia]可以由下述方法製得(1)將化合物[II]轉化成為式[V]化合物 其中Z為一離去基團，且其他符號於前述相同。
(2)化合物[V]與化合物[IV]反應。
作為離去基團的Z優選為滷素原子(如氯原子、溴原子及碘原子)、烷烴磺醯氧基團(如甲烷磺醯基)或芳基磺醯氧基團(如苯磺醯基及對甲苯磺醯基)。
步驟1化合物[II]轉化成為化合物[V]可以通過滷素化或磺醯化化合物[II]而進行。
滷素化反應可以由常規方法採用在合適的溶劑中滷化劑加入或不加入鹼而進行。
滷素化劑可以擇自常規滷化劑，例如三滷化磷(如三溴化磷、三氯化磷)、以及四滷甲烷(如CBr4)和三苯基磷的組合。
鹼可以擇自常規無機鹼，例如鹼金屬碳酸鹽(如Na2CO3、K2CO3)、鹼金屬碳酸氫鹽(如NaHCO3、KHCO3)等。
溶劑可以擇自任何不影響縮合反應的溶劑，例如滷代甲烷(如CH2Cl2與CHCl3)、醚(如二噁烷、乙醚、THF)、DMF、DMSO或其混合物。
反應可以在溫度範圍介於-50℃至50℃進行，優選地是在0℃至室溫進行。
磺醯化反應可以由常規方法在適當溶劑中採用磺醯化劑和鹼而進行。
磺醯化劑擇自烷烴磺醯滷化物和芳基磺醯滷化物，如甲烷磺醯氯、苯磺醯氯、對甲苯磺醯氯等。
鹼擇自有機鹼(如三烷基胺，如Et3N、DIEA、DBU與4-甲基嗎啉，以及吡啶)、鹼金屬碳酸鹽(如Na2CO3、K2CO3)、鹼金屬碳酸氫鹽(如NaHCO3、KHCO3)、鹼金屬氫氧化物(如NaOH、KOH)、鹼土金屬氫氧化物(如Ba(OH)2)等。
溶劑可以擇自任何不影響反應的溶劑，例如滷代甲烷(如CH2Cl2與CHCl3)、醚(如二噁烷、乙醚、THF)、DMF、DMSO或其混合物。
反應可以在溫度範圍介於-50℃至50℃進行，優選地是在-20℃至0℃至0℃進行。
步驟2化合物[V]與化合物[IV]的反應可以在合適的溶劑或無溶劑下於鹼和/或去滷化劑如銀化合物(如氧化銀(I)(Ag2O)與氧化銀(AgO))(Ortiz et al.，Synth.Commun.23749-756(1993))存在或不存在下進行。
優選地是，反應可以在適當溶劑中在銀化合物存在並無鹼下進行。
鹼可以擇自常規無機鹼和有機鹼，如鹼金屬碳酸鹽(如Na2CO3、K2CO3)、鹼金屬碳酸氫鹽(如NaHCO3、KHCO3)，三甲基胺(如Et3N)、吡啶等。
溶劑可以擇自任何不影響縮合反應的溶劑，例如芳香碳氫化合物(苯、甲苯)、滷代甲烷(如CH2Cl2與CHCl3)、醚(如二噁烷、乙醚、THF)、DMF、DMSO或其混合物。
反應可以在溫度範圍介於室溫至100℃進行，方法C用式[VI]化合物烷基化化合物[II]而製得化合物[Ia]Y-Z[VI]其中符號與前述相同。
烷化反應可以於存在有或沒有鹼和/或去滷化劑如銀化合物(如氧化銀(I)(Ag2O)與氧化銀(AgO))(Choi et al.，J.Med.Chem.391907-1916(1996))的情況下於溶劑中或無溶劑下進行。反應的進行與方法B的步驟2相似。
方法D化合物[Ia]可以由化合物[II]與化合物[IV]縮合製得。
縮合反應可以在合適的溶劑或無溶劑下於脫水劑存在下進行。脫水劑系擇自常規脫水劑如硫酸、對甲苯磺酸等。
溶劑可以擇自任何不影響縮合反應者，例如芳香碳氫化合物(苯、甲苯)、滷代甲烷(如CH2Cl2與CHCl3)、醚(如二噁烷、乙醚、THF)、DMF、DMSO、MeCN或其混合物。
反應可以在溫度範圍介於室溫至100℃進行，起始化合物[II]可以由下述方法(方法E-G)之一製得。
方法E
(上述圖示中的符號與前述相同。)化合物[II]可以由式[VII]化合物、其鹽或其反應性衍生物與式[VIII]化合物或其鹽縮合而製得。
化合物[VII]與[VIII]的鹽包括例如與無機或有機酸形成的鹽(如三氟乙酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽)、與無機鹼形成的鹽(例如鹼金屬鹽如鈉鹽或鉀鹽、鹼土金屬鹽如鋇鹽或鈣鹽)。
縮合反應可以通過用於通常的肽合成的常規方法進行。
化合物[VII]或其鹽與化合物[VIII]或其鹽的縮合反應可以在縮合劑的存在下帶有或不帶鹼在合適的溶劑中進行。
縮合劑擇自任何可以用於常規肽合成者，例如BOP-C1、BOP劑、DCC、EDC或CDI。縮合劑可與活化劑並用(如HOBt)。
鹼擇自有機鹼(例如DIEA、DMAP、DBU、Et3N、4-甲基嗎啉)、鹼金屬碳酸鹽(如Na2CO3、K2CO3)、鹼金屬碳酸氫鹽(如NaHCO3、KHCO3)、鹼金屬氫氧化物(如NaOH、KOH)等。
溶劑擇自任何不會影響縮合反應者，例如AcOEt、CHCl3、CH2Cl2、THF、DMF、水或其混合物。反應可以在溫度範圍介於-50℃至50℃進行，優選地是在0℃至室溫進行。
化合物[VIII]或其鹽與化合物[VII]的活性衍生物的縮合反應於溶劑中並在鹼的存在或不存在下進行。
化合物[VII]的活性衍生物的實例如醯滷化物(如醯氯化物)、反應性酯(如與對硝基酚形成的酯)、其酐、帶有其他羧酸的混合酐(例如帶有醋酸的混合酐)等。
鹼擇自有機鹼(DIEA、DMAP、DBU、Et3N)、鹼金屬碳酸鹽(如Na2CO3、K2CO3)、鹼金屬碳酸氫鹽(如NaHCO3、KHCO3)等。
溶劑擇自不會影響縮合反應者，例如AcOEt、水、CHCl3、CH2Cl2、C2H4Cl2、Et2O、THF、DMF、CH3CN、DMSO、苯、甲苯或其混合物。反應可以在溫度範圍介於-30℃至室溫進行。方法F (上圖中，L為一離去基團且其他符號同前述。)可以由式[IX]化合物與式[X]化合物的反應製得化合物[II]。
離去基團L可以為例如滷素原子與三氟甲磺醯氧基團。
偶聯反應可以由常規芳香偶聯反應進行，例如Suzuki偶聯反應方法(請參考Suzuki et al.，Synth.Commun.11513(1981)；Suzuki，Pureand Appl.Chem.571749-1758(1985)；Suzuki et al.，Chem.Rev.952457-2483(1995)；Shieh et al.，J.Org.Chem.57379-381(1992)；以及Martin et al.，Acta Chemica Scandinayica 47221-230(1993))。
偶聯反應可以在溫度範圍介於室溫至150℃進行，優選以溫度範圍介於80℃至150℃，並在鈀催化劑(例如四(三苯基磷)-鈀、醋酸鈀(II)、氯化鈀(II))，以及膦配體(例如三苯基膦、亞磷三乙酯、亞磷酸三甲酯、亞磷酸三異丙酯)以及鹼(例如K2CO3、Et3N、DIEA、Dabco，二異丙胺、嗎啉)的存在下在溶劑中進行。溶劑可以擇自任何不影響偶聯反應者，例如甲苯、THF、DME、DMF、DMA、NMP、水或其混合物。方法G (上圖中的標示與前述相同。)式[II]化合物亦可以由下述步驟製得(1)將化合物[X]轉化成為相應的有機錫化合物例如式[XI]化合物)，以及(2)將生成的化合物與式[XII]化合物反應 其中標示與前述相同。
步驟1化合物[IX]轉化成對應的有機錫化合物可以由，例如將化合物[IX]與六烷基二錫(如六甲基二錫)於溫度範圍介於室溫至150℃、優選溫度範圍介於80℃至110℃，並同時在四(三苯基膦)鈀與添加劑(如氯化鋰)的存在下進行。溶劑可以擇自任何不影響偶聯反應者，例如二噁烷、甲苯、DME、DMF、水或其混合物。
步驟2偶聯反應可以由常規芳基偶聯反應而製得，例如Stille偶聯反應(請參考Stille et al.Angew.Chem.Int.Ed.Engl.25508-524(1986))。
偶聯反應可以在，例如溫度範圍介於室溫至150℃、優選溫度範圍介於80℃至120℃，並同時在適當溶劑中在四(三苯基膦)鈀的存在下進行。溶劑可以擇自任何不影響偶聯反應者，例如甲苯、DME、DMF、水或其混合物。
化合物[IX]可以由下述步驟製得(1)將式[XIII]化合物 其中Z1為滷素原子且其他標示與前述相同，與式[XIV]化合物 其中CO2R1定義與前述相同，或其鹽進行縮合反應，採用與方法E相似的常規方法，以及(2)用常規方法轉化生成的化合物的氫氧基團成為離去基團。例如轉化氫氧基成為三氟甲烷磺醯氧基可以採用三氟甲磺酸酐，於-30℃至0℃。並在適當溶劑(CH2Cl2、CHCl3、THF或其混合物)中在鹼(如吡啶、NEt3、DIEA)的存在下進行。
化合物[VIII]可以由下述方法製得(1)將式[XV]化合物 其中P為氨基基團的保護基且其標示與前述相同，與化合物[X]通過常規芳基偶聯方法進行縮合反應，以及(2)由生成的化合物的氨基基團移除該保護基。
氨基基團的保護基擇自常規氨基基團的保護基，例如取代或未取代芳基-C2-7烷氧羰基(如苄氧基羰基、對硝基苄氧基羰基)、C2-7烷氧基羰基(如叔-丁氧基羰基)等。
偶聯反應與方法F中化合物[IX]與化合物[X]的反應相似。
由氨基移除保護基可以由常規方法進行，其根據何種保護基將移除而選擇，例如，催化還原反應採用催化劑(鈀或活性炭)，並用酸(如TFA、HCL)處理等。
可以通過將式[XVI]化合物 其中的標示均與前述相同，與三氟甲磺酸酐按照與化合物[IX]的製備步驟(2)相似的步驟進行而製得化合物[XV]，其中L為三氟甲烷磺醯氧基，。
化合物[X]可以由常規方法(請參考Kuivila et al.，J.Am.Chem.Soc.832159(1961)；Gerrard，The Chemistry of Boron，Academic Press，New Yoork(1961)；Muetterties，The Chemistry ofBoron and its Compounds，Wiley，New York(1967)；以及Alamansa etal.，J.Am Chem.Soc.11611723-11736(1994))製得。例如化合物[X]可以由(1)將式[XVII]化合物 其中Q與前述定義相同，與烷基鋰(如n-BuLi)，於溫度範圍介於-100℃至室溫，並溶於適當有機溶劑(例如乙醚、THF或其混合物)中進行反應，(2)使生成的化合物與硼酸三甲酯，於溫度範圍介於-100℃至室溫，並溶於適當有機溶劑(例如乙醚、THF或其混合物)中進行反應，以及(3)用常規方法水解生成的化合物。
水解可以於溫度範圍介於0℃至室溫，並溶於適當溶劑(例如乙醚、THF、二噁烷、水或其混合物)，且在酸(如醋酸或檸檬酸)和水的存在下進行。
貫穿本發明說明書和權利要求書，滷素原子指氯原子、氟原子、溴原子或碘原子。並且C1-6烷基代表具有碳原子數1到6優選1到4的直鏈、支鏈或環烷基團，例如甲基、乙基、正丙基、正丁基、異丙基、環丙基、叔-丁基等。C2-7烷氧羰基代表具有碳原子數2至7、優選地是碳原子數2-5，的直鏈、支鏈或環烷氧羰基團，例如甲氧羰基、乙氧羰基、正丙氧羰基、正丁氧羰基、異丙氧羰基、環丙氧羰基、叔-丁氧羰基等。
簡稱的說明BOP-C1雙(2-氧代-3-噁唑烷基)次磷醯氯BOP劑苯並三唑-1基氧基-三(二甲基氨基)-膦鎓六氟磷酸鹽DCC1，3-二環己烷碳二亞胺EDC1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺THF四氫呋喃DMFN，N-二甲基甲醯胺DMSO二甲基亞碸DMAN，N-二甲基乙醯胺NMP1-甲基-2-吡咯烷酮DIEA二異丙基乙胺DMAP4-(N，N-二甲基氨基)吡啶DBU1，8-二氮雜雙環[5.4.0]十一-7-烯Dabco1，4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷CDI羰基二咪唑HOBT1-氫氧基苯並三唑TFA三氟乙酸DME1，2-二甲氧基乙烷PCC吡啶鎓氯鉻酸鹽
PDC吡啶鎓二鉻酸鹽Ac乙醯基Me甲基Et乙基Pr丙基Bu丁基Ph苯基EtOAc乙酸乙酯
(2)將吡啶(48ml)於氬氣環境下加入到上述所得產物(61.63g)的二氯甲烷(1800ml)溶液中。溶液降溫至-35至-30℃並於攪拌中滴入三氟甲磺酸酐(35ml)。加入後，混合物於-30至-20℃攪拌2小時。將冰水加入混合物以分離有機層，以5％檸檬酸水溶液、水以及鹽水清洗。生成的二氯甲烷溶液以Na2SO4乾燥並蒸發。殘留物以柱層析純化(矽膠，洗脫液正己烷/乙酸乙酯4∶1)，產生N-(叔-丁氧基羰基)-O-(三氟甲磺醯基)-L-酪氨酸乙酯(87.94g)。熔點47-49℃；IR(Nujol)3390，1737，1691cm-1；MS(APCI)m/z(M+NH4)。
(3)將Et3N(41g)加入溶於DMF(350ml)的前述產物(76.51g)與2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯硼酸(62.27g)混合物中，並用氬脫氣體。加入Pd(PPh3)4(19.5g)至混合物中並於80-90℃與氬氣環境下攪拌1小時。冷卻該混合物，並用乙酸乙酯與水稀釋，以硅藻土(Celite)過濾並以乙酸乙酯清洗。過濾物以水稀釋並分離。有機層以水與鹽水清洗，以Na2SO4乾燥，經活性炭處理並蒸發。殘留物以柱層析(矽膠，洗脫液正己烷/乙酸乙酯3∶2至2∶3)純化並由異丙醇重結晶，以得到N-(叔-丁氧基羰基)-4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(69.4g)。熔點142-143℃；IR(Nujol)3507，3323，1731，1689，1606-1；MS(APCI)m/z 477(M+NH4)。
(4)將4N HCl-二噁烷(50ml)於0℃加入前述產物(10.0g)溶於二噁烷(50ml)的溶液中，並於室溫攪拌該混合物2小時。混合物以乙醚稀釋。生成的沉澱物用過濾收集，並以乙醚清洗而得到4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽(8.26g)。IR(Nujol)3321，1735cm-1；MS(APCI+QIMS)m/z 360(M+H)。
(5)將2，6-二氯苯甲醯氯(0.6ml)於0℃加入溶於含NaHCO3(955ml)的乙酸乙酯/水(60ml/60ml)的前述產物(1.5g)的混合物中，再於0℃將混合物攪拌0.5小時。混合物以乙酸乙酯、水以及少量二氯甲烷稀釋。有機層以鹽水清洗，以Na2SO4乾燥並蒸發。殘留物重結晶得到N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(1.93g)。熔點121℃；IR(Nujol)3249，1725，1641cm-1；MS(APCI+QIMS)m/z 532(M+H)。
(6)將二氧化錳(976mg)加入溶於二氯甲烷(10ml)的前述產物(508mg)中。於室溫將混合物攪拌2.5小時後再回流14小時。冷卻混合物，經硅藻土過濾並以二氯甲烷清洗。濾液蒸發得到N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲醯基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(352mg)。IR(Nujol)1734，1691，1655cm-1；MS(APCI)m/z 530(M+H)。
(7)將濃硫酸(0.5ml)加入溶於含有Et3SiH(226mg)的乙醇(4ml)的前述產物(345mg)中。於室溫攪拌18小時後，混合物用乙酸乙酯與水的混合物處理。有機層依次以水與鹽水清洗，以MgSO4乾燥並蒸發。殘留物再以柱層析(矽膠，洗脫液正己烷/乙酸乙酯2∶1)純化，並由二異丙醚與異丙醇的混合物重結晶得到標題化合物(254mg)。熔點91-94℃；IR(Nujol)3290，1729，1652，1463，1123cm-1；MS(APCI+Q1MS)m/z 560(M+H)。
實施例2N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L苯丙氨酸甲酯(1)如實施例1-(1)所述方法由L-酪氨酸甲酯鹽酸鹽(2.69g)獲得N-(叔-丁氧基羰基)-L-酪氨酸甲酯(2.69g)。熔點105-106℃；IR(Nujol)3415，3321，1761，1691cm-1；MS(APCI+QIMS)m/z 313(M+NH4)，296(M+H)。
(2)如實施例1-(2)所述方法將上述產物(3.3g)轉化為N-(叔-丁氧基羰基)-O-(三氟甲磺醯基)-L-酪氨酸甲酯(4.62g)。IR(Neat)3366，1747，1715cm-1；MS(APCI+QIMS)m/z 445(M+NH4)。
(3)如實施例1-(3)所述方法將上述產物(4.56g)轉化為N-(叔-丁氧基羰基)-4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸甲酯(3.21g)。熔點100℃；IR(Nujol)3360，1739，1683，1661cm-1；MS(APCI)m/z 463(M+NH4)。
(4)如實施例1-(4)所述方法將上述產物(3.19g)轉化為4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽(2.45g)。熔點211-213℃(dec.)；IR(Nujol)3301，1739cm-1；MS(APCI+Q1MS)m/z346(M+H)。
(5)如實施例1-(5)所述方法將上述產物(1.08g)轉化為N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸甲酯(874mg)。熔點116-120℃；IR(Nujol)3230，3069，1749，1732，1641cm-1；MS(APCI+Q1MS)m/z 518(M+H)。
(6)將PBr3(680mg)的二噁烷(2ml)溶液於室溫以小部份分次加入溶於含有NaHCO3(304mg)的二噁烷(10ml)的前述產物(937mg)中。攪拌20分鐘後，混合物以冰冷卻，再以乙酸乙酯萃取。有機層依次以水與鹽水清洗，以MgSO4乾燥與蒸發。殘留物再以柱層析(矽膠，洗脫液乙酸乙酯/氯仿1∶10)純化得到N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(4-溴甲基-2，6-二甲氧基苯基)-L-苯丙氨酸甲酯(598mg)。MS(APCI+QIMS)m/z 584，582，580(M+H)。
(7)將前述產物(571mg)的含有AgO(659mg)的乙醇(20ml)混合物於室溫以超聲波振蕩處理7小時。混合物經硅藻土過濾並以乙醇清洗。濾液蒸發後的殘留物以柱層析(矽膠，洗脫液乙酸乙酯/CHCl31∶20)純化得到標題化合物(318mg)。MS(APCI+Q1MS)m/z 546(M+H)。
實施例3N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸將氫氧化鋰(30mg)於5℃加入實施例1化合物(207mg)的THF/水(8ml/2ml)溶液中。混合物於5℃攪拌20小時，以6N鹽酸(1ml)冷卻並以乙酸乙酯萃取。有機層以水與鹽水清洗，以MgSO4乾燥並蒸發。殘留物由甲醇、乙醚及己烷的混合物中重結晶得到標題化合物(147mg)。實施例2的化合物(301mg)亦以相同方法水解得到標題化合物(238mg)。熔點196-198℃；IR(Nujol)3300，3270，1705，1651，1462，1126cm-1；MS(ESI-Q1MS)m/z 530(M-H)。
實施例4N-(2，6-二氯化苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯將碘甲烷(871mg)加入實施例1-(5)化合物或參考實施例3-(3)化合物(304mg)的含有Ag2O(868mg)的CH3CN(30ml)溶液中。混合物於室溫攪拌18.5小時，再於50℃以超聲波振蕩5小時。混合物以硅藻土過濾，並將濾液蒸發。殘留物以柱層析(矽膠，洗脫液乙酸乙酯/正己烷1∶2)純化得到標題化合物(222mg)。IR(Neat+CHCl3)3285，1736，1663cm-1；MS(APCI+QIMS)m/z 546(M+H)。
實施例5N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸如實施例3的方法將實施例4的化合物(210mg)轉化為標題化合物(139mg)。熔點232-235℃；IR(Nujol)3336，1717，1685cm-1；MS(ESI-QIMS)m/z 516(M-H)。
實施例6N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-正丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(1)將四溴化碳(CBr4，2.8g)於0℃加入實施例1-(5)或參考實施例3-(3)所得化合物(3.0g)溶於含有PPh3(1.77g)的二氯甲烷(80ml)溶液中。混合物於室溫攪拌3小時並蒸發。殘留物以柱層析(矽膠，洗脫液乙酸乙酯/正己烷1∶1)純化得到N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-溴甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(3.15mg)。IR(Nujol)1731，1654cm-1；MS(APCI)m/z 596(M+H)。
(2)將前述產物(304mg)溶於含有AgO(515mg)的正丙醇(12ml)混合物於45℃以超聲波振蕩28小時。混合物以硅藻土過濾，並將濾液蒸發。殘留物以柱層析(矽膠，洗脫液；正己烷/乙酸乙酯3∶1)純化得到標題化合物(258mg)。IR(Nujol)1733，1655cm-1；MS(APCI)m/z574(M+H)。
實施例7N-(2，6-二氯化苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-正丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸如實施例3方法將實施例6的化合物(150mg)轉化為標題化合物(142mg)。熔點183-186℃；IR(Nujol)1719，1684cm-1；MS(APCI)m/z544(M-H)。
實施例8N-(2，6-二氯化苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-異丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯如實施例6-(2)所述的方法，除了改用異丙醇取代正丙醇，將實施例6-(1)化合物(231mg)轉化為標題化合物(179mg)。IR(Nujol)3270，1731，1658cm-1；MS(APCI)m/z 574(M+H)。
實施例9N-(2，6-二氯化苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-異丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸如實施例3所述的方法將實施例8化合物(122mg)水解為標題化合物(117mg)。IR(Nujol)3341，3070，1718，1681cm-1；MS(ESI)m/z544(M-H)。
實施例10N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(1)如實施例1-(5)所述方法將實施例1-(4)所得產物(2.1g)用2，6-二氟苯甲醯氯醯化，得到N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(2.75g)。熔點70-72℃；IR(Nujol)3400，3263，1735，1654，1624cm-1；MS(APCI)m/z 500(M+H)。
(2)將Et3N(4.8ml)與SO3·吡啶(5.6g)依次於室溫加入前述產物(1.72g)的DMSO(20ml)溶液中。整個混合物於室溫攪拌25分鐘。反應混合物注入冰水，接著混合物以乙酸乙酯萃取。有機層依次以5％鹽酸水溶液、水以及鹽水清洗，以Na2SO4乾燥的然後再蒸發。殘留物以柱層析(矽膠，洗脫液正己烷/乙酸乙酯5∶1至1∶1)純化得到N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲醯基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(1.54g)。熔點114-116℃；IR(Nujol)3332，1735，1695，1657，1644，1623cm-1；MS(APCI)m/z 498(M+H)。
(3)如實施例1-(7)所述的方法，將前述產物(716mg)轉化為標題化合物(428mg)。熔點87-89℃；IR(Neat+CHCl3)3300，1739，1668cm-1；MS(APCI)m/z 528(M+H)。
實施例11N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸甲酯(1)如實施例1-(5)所述方法，將實施例2-(4)所得產物(1.00g)用2，6-二氟苯甲醯基氯化物醯化，得到N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸甲酯(873mg)。IR(Nujol)3257，1743，1655，1624cm-1；MS(APCI+Q1MS)m/z 503(M+NH4)，486(M+H)。
(2)如實施例2-(6)與(7)所述的方法，將前述產物(860mg)轉化為標題化合物(220mg)。
實施例12N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸如實施例3所述的方法，將實施例10的化合物(200mg)水解為標題化合物(160mg)。如實施例3所述的方法，亦將實施例11的化合物(220mg)水解為標題化合物(167mg)。熔點156-158℃；IR(Nujol)1735，1655cm-1；MS(ESI)m/z 498(M-H)。
實施例13N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(1)如實施例6-(1)所述方法，將實施例10-(1)或參考實施例4-(3)所得產物(1.41g)轉化為N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-溴甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(1.22g)。IR(Nujol)3317，1740，1653，1623cm-1；MS(APCI)m/z 564(M+H)。
(2)如實施例6-(2)所述的方法，改用甲醇代替正丙醇，將前述產物(231mg)轉化為標題化合物(96mg)。IR(Nujol)3347，1754，1655，1626cm-1；MS(APCI+QIMS)m/z 514(M+H)。
實施例14N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸如實施例3所述的方法，將實施例13的化合物(96mg)水解為標題化合物(62mg)。IR(Nujol)3303，3275，1724，1709，1655，1626cm-1；MS(ESI-QIMS)m/z 484(M-H)。
實施例15N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-正丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯如實施例6-(2)所述方法，將實施例13-(1)所得產物轉化為標題化合物。IR(Neat)3302，1739，1674，1624cm-1；MS(APCI)m/z 542(M+H)。
實施例16N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-異丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯如實施例6-(2)所述的方法，改用異丙醇代替正丙醇，將實施例13-(1)產物轉化為標題化合物。IR(Nujol)3332，1756，1653，1625cm-1；MS(APCI+QIMS)m/z 542(M+H)。
實施例17N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-正丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸如實施例3所述的方法，將實施例15的化合物水解為標題化合物。IR(Nujol)1735，1660，1624cm-1；MS(ESI)m/z 512(M-H)。
實施例18N-(2，6-二氯化苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-異丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸如實施例3所述的方法，將實施例16的化合物水解為標題化合物。IR(Nujol)1735，1655，1624cm-1；MS(ESI-QIMS)m/z 512(M-H)。
實施例19N-(2-氯化-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(1)將ECD·HCl(549mg)、HOBt(383mg)以及4-甲基嗎啉(0.48ml)於室溫依次加入實施例1-(4)所得化合物(863mg)與2-氯-6-氟苯甲酸(456mg)溶於DMF(15ml)的溶液中。混合物於室溫攪拌14小時並以水稀釋。混合物以乙酸乙酯萃取，其有機層依次以飽和碳酸氫鈉、水以及鹽水清洗。生成的有機層再以Na2SO4乾燥並蒸發。殘留物以柱層析(矽膠，洗脫液正己烷/乙酸乙酯1∶1純化得到N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(950mg)。熔點101-104℃；IR(Nujol)2921，2853，1733，1652，1605cm-1；MS(APCI)m/z 516(M+H)。
(2)如實施例1-(6)所述的方法，將前述產物(630mg)氧化得到N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲醯基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(466mg)。IR(Nujol)3279，1735，1691，1657cm-1；MS(APCI+QIMS)m/z 514(M+H)。
(3)如實施例1-(7)所述的方法，將前述產物(466mg)轉化得到標題化合(454mg)。IR(Nujol)3289，1735，1663，1605cm-1；MS(APCI+QIMS)m/z 544(M+H)。
實施例20N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸將0.5N氫氧化鋰(1.54ml)與3％過氧化氫(65ul)於5℃加入實施例19所得化合物(210mg)溶於THF(5ml)的溶液中。混合物於5℃攪拌14小時並以1N鹽酸酸化。混合物濃縮、再以水稀釋，並將結果沉澱物收集過濾，以水清洗而得到標題化合物(171mg)。熔點182-184℃；IR(Nujol)3295，1729，1711，1653cm-1；MS(ESI)m/z 514(M-H)。
實施例21N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸甲酯(1)如實施例19-(1)所述方法，將實施例2-(4)所得產物(49g)用2-氯-6-氟苯甲酸醯化，得到N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸甲酯(58g)。IR(Nujol)1735，1651cm-1；MS(APCI)m/z 519(M+NH4)。
(2)如實施例1-(6)所述的方法，將前述產物(58g)氧化為N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲醯基苯基)-L-苯丙氨酸甲酯(45.8g)。IR(Nujol)3275，1743，1691cm-1；MS(APCI+QIMS)m/z 500(M+H)。
(3)實施例1-(7)所述的方法，除採用甲醇代替乙醇，將前述產物(2.0g)轉化為標題化合物(1.4g)。IR(Neat+CHCl3)3285，1745，1665，1605cm-1；MS(APCI+QIMS)m/z 533(M+NH4)，516(M+H)。
實施例22N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(1)如實施例6-(1)所述方法，將實施例19-(1)或參考實施例5-(3)所得產物(3.29g)轉化得到N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-溴甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(2.91g)。IR(Nujol)3315，1735，1662，1603cm-1；MS(APCI)m/z 582，580，578(M+H)。
(2)如實施例2-(7)所述的方法，除改採甲醇代替乙醇，將前述產物(250mg)轉化為標題化合物(190mg)。IR(Nujol)1736，1659cm-1；MS(APCI)m/z 530(M+H)。
實施例23；N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸如實施例3所述的方法，將實施例22的化合物(130mg)水解為標題化合物(100mg)。熔點170-175℃；IR(Nujol)1720，1680cm-1；MS(ESI)m/z 500(M-H)。
如上述方法，也將實施例21的化合物(27.9g)轉化為標題化合物(25.3g)。
實施例24N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-正丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯如實施例2-(7)所述的方法，除改採用正丙醇代替乙醇，將實施例22-(1)的化合物轉化為標題化合物。IR(Neat+CHCl3)，1737，1667cm-1；MS(APCI)m/z 558(M+H)。
實施例25N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-異丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯如實施例2-(7)所述的方法，除改採用異丙醇代替乙醇，將實施例22-(1)的化合物轉化為標題化合物。IR(Neat+CHCl3)3305，1737，1665，1605cm-1；MS(APCI)m/z 558(M+H)。
實施例26N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-正丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸如實施例3所述的方法，將實施例24的化合物水解為標題化合物。IR(Nujol)1713，1654cm-1；MS(APCI)m/z 528(M-H)。
實施例27N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-異丙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸如實施例3所述的方法，將實施例25的化合物水解為標題化合物。IR(Neat+CHCl3)3400，3280，1737，1660，1605cm-1；MS(ESI)m/z528(M-H)。
實施例28N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-(2-乙氧基乙基)苯基)-L-苯丙氨酸叔丁酯(1)如實施例1-(5)所述方法，L-酪酸叔丁酯(2.5g)醯化，得到N-(2，6-二氯苯甲醯基)-L-酪氨酸叔丁酯(4.3g)。熔點177-178℃；IR(Nujol)1721，1652cm-1；MS(APCI)m/z 427(M+NH4)，410(M+H)。
(2)如實施例1(2)所述方法，將前述產物(4.3g)轉化得到N-(2，6-二氯苯甲醯基)-O-(三氟甲磺醯基)-L-酪氨酸叔丁酯(5.6g)。烷點92-93℃；IR(Nujol)1716，1643cm-1；MS(APCI)m/z 559(M+NH4)。
(3)將Pd(PPh3)4(866mg)加入脫除氣體的前述產物(4.07g)、2，6-二甲氧基-4-(2-羥基乙基)苯硼酸(2.71g，粗品)以及Et3N(2.27g)溶於DMF(100ml)的懸浮液中。混合物於氬氣環境下，加熱至80-90℃維持2小時。生成的混合物以乙酸乙酯稀釋，以水清洗，並以硅藻土過濾。有機層分離，以Na2SO4乾燥並蒸發。殘留物以柱層析(基本矽膠(Chromatorex-NH，Fuji Silysia Chem.LTD)；洗脫液乙酸乙酯，然後再以矽膠；洗脫液乙酸乙酯/正己烷3∶2至2∶1)純化，並由乙醚重結晶得到N-(2，6-二氯化苯甲醯基)-4-[2，6-二甲氧基-4-(2-羥基乙基)苯基]-L-苯丙氨酸叔丁酯(2.5g)。熔點96-98℃；IR(Nujol)1727，1645cm-1；MS(APCI)m/z 591(M+NH4)。
(4)如實施例4所述的方法，將前述產物(254mg)烷基化為標題化合物(116mg)。IR(Neat+CHCl3)3301，1730，1669cm-1；MS(APCI)m/z 619(M+NH4)。
實施例29N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-[2，6-二甲氧基-4-(2-乙氧基乙基)苯基]-L-苯丙氨酸將4N鹽酸-二噁烷(3ml)於室溫加入實施例28所得化合物(109mg)溶於二氯甲烷(2ml)的溶液中。混合物於室溫攪拌3天並蒸乾。殘留物以柱層析(矽膠，洗脫液正己烷/乙酸乙酯1∶1)純化得到標題化合物(88mg)。IR(Nujol)3320，3067，1736，1715，1683cm-1；MS(ESI)m/z 544(M-H)。
實施例30N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-[2，6-二甲氧基-4-(2-乙氧基乙基)苯基]-L-苯丙氨酸叔丁酯(1)如實施例1-(5)所述方法，用2，6-二氟苯甲醯基氯化物醯化L-酪氨酸叔丁酯(10.0g)，得到N-(2，6-二氟苯甲醯基)-L-酪氨酸叔丁酯(15.9g)。熔點145-148℃；IR(Nujol)1728，1638cm-1；MS(APCI)m/z 395(M+NH4)，378(M+H)。
(2)如實施例1-(2)所述方法，將前述產物(15.9g)轉化得到N-(2，6-二氟苯甲醯基)-O-(三氟化甲磺醯基)-L-酪氨酸叔丁酯(21.04g)。IR(Neat+CHCl3)1732，1658cm-1；MS(APCI)m/z 527(M+NH4)。
(3)如實施例28-(3)所述方法，將前述產物(5.61g)轉化得到N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-[2，6-二甲氧基-4-(2-羥基乙基)苯基]-L-苯丙氨酸叔丁酯(3.54g)。IR(Neat+CHCl3)3307，1731，1660cm-1；MS(APCI)m/z 559(M+NH4)，542(M+H)。
(4)如實施例4所述的方法，將前述產物(250mg)烷基化為標題化合物(230mg)。IR(Neat+CHCl3)1731，1675cm-1；MS(APCI)m/z588(M+NH4)，570(M+H)。
實施例31N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-[2，6-二甲氧基-4-(2-乙氧基乙基)苯基]-L-苯丙氨酸如實施例29所述的方法，將實施例30的化合物(200mg)水解為標題化合物(161mg)。熔點63-70℃；IR(Nujol)1737，1660，1624，cm-1；MS(APCI)m/z 512(M-H)。
實施例32N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-[2，6-二甲氧基-4-(2-甲氧基乙基)苯基]-L-苯丙氨酸乙酯(1)如實施例28-(3)所述方法，將實施例1-(2)所得產物(43.83g)轉化得到N-(叔-丁氧基羰基)-4-[2，6-二甲氧基-4-(2-羥基乙基)苯基]-L-苯丙氨酸乙酯(38.03g)。熔點112-114℃；IR(Nujol)3487，3327，1729，1688，1607cm-1；MS(APCI)m/z 491(M+NH4)。
(2)如實施例1-(4)所述方法，將前述產物(3.04g)轉化得到4-[2，6-二甲氧基-4-(2-羥基乙基)苯基]-L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽(2.57g)。IR(Nujol)3400，1730cm-1；MS(APCI)m/z 374(M+H)。
(3)如實施例1-(5)所述方法，用2，6-二氟苯甲醯氯醯化前述產物(2.57g)，得到N-(2，6-二氟苯甲醯)-4-[2，6-二甲氧基-4-(2-羥基乙基)苯基]-L-苯丙氨酸乙酯(2.35g)。熔點115-117℃；IR(Nujol)3568，3355，1753，1655，1627cm-1；MS(APCI)m/z 514(M+H)。
(4)如實施例4所述的方法，將前述產物(329mg)烷基化為標題化合物(294mg)。IR(Nujol)3341，1755，1655，1625cm-1；MS(APCI)m/z 528(M+H)。
實施例33N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-[2，6-二甲氧基-4-(2-甲氧基乙基)苯基]-L-苯丙氨酸如實施例3所述的方法，將實施例32的化合物(187mg)水解為標題化合物(143mg)。IR(Neat+CHCl3)1739，1667cm-1；MS(APCI)m/z 498(M-H)。
實施例34N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯實施例1的標題化合物亦可由下述另一途徑獲得。
(1)將甲磺醯基氯(0.523ml)與Et3N(1.02ml)於5℃加入實施例1-(5)或參考實施例3-(3)所得化合物(3.00g)溶於二氯甲烷(50ml)的溶液中。混合物於-10℃至0℃攪拌1小時，以水稀釋並以二氯甲烷萃取兩次。有機層以鹽水洗滌、以Na2SO4乾燥並蒸發。殘留物用乙酸乙酯-己烷研製並過濾收集後得到N-(2，6-二氯苯甲醯基(2，6-二甲氧基-4-甲磺醯氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(3.34g)。熔點109℃；IR(Nujol)3273，2923，2854，1733，1655，1583，1463cm-1；MS(APCI)m/z 610(M+H)。
(2)將前述產物(101mg)溶於乙醇(2ml)的懸浮液於90℃攪拌45分鐘。混合物冷卻、以水稀釋並以乙酸乙酯萃取。有機層以鹽水清洗、以Na2SO4乾燥並蒸發。殘留物以柱層析(矽膠，洗脫液正己烷/乙酸乙酯2∶1)純化得到標題化合物(89mg)。
實施例35N-(2，6-二氯苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯實施例1的標題化合物亦可由下述方法的另一途徑獲得。
將硫酸(1ml)加入實施例1-(5)或參考實施例3-(3)所得化合物(532mg)溶於乙醇(10ml)的懸浮液中。混合物於回流下攪拌24小時。生成的混合物冷卻、以水稀釋並以乙酸乙酯萃取。有機層以水、鹽水清洗，以Na2SO4乾燥並蒸發。殘留物以柱層析(矽膠，洗脫液正己烷/乙酸乙酯2∶1)純化得到標題化合物(476mg)。
實施例36N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯實施例10的標題化合物亦可由下述方法的另一途徑獲得。
(1)如實施例34-(1)所述方法，將實施例10-(1)或參考實施例4-(3)所得產物(73.4g)磺醯化得到N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲磺醯基氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(77.7g)。熔點125-126℃；IR(Nujol)3335，2922，2853，1756，1753，1653，1583，1525，1464cm-1；MS(APCI)m/z595(M+NH4)。
(2)如實施例34-(2)所述方法，將前述產物(77.7g)轉化得到標題化合物(70.5g)。
實施例37N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯實施例19的標題化合物亦可由下述方法的另一途徑獲得。
(1)如實施例34-(1)所述方法，將實施例19-(1)或參考實施例5-(3)所得產物(12.4g)磺醯化得到N-(2氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲磺胺基氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯(14.0g)。熔點104-107℃；IR(Nujol)3286，1734，1655，1605，1583，1541，1460cm-1；MS。(APCI)m/z 611(M+NH4)。
(2)如實施例34-(2)所述方法，將前述產物(14.0g)轉化得到標題化合物(13.0g)。
參考實施例12，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯硼酸於0.5小時內將正丁基鋰(1.6M於正己烷中，750ml)於-50℃於氬氣環境下，分次加入3，5-二甲氧基苄醇(80g)的THF(1900ml)溶液中。混合物升溫至室溫2小時，再冷卻至-60℃。再將(MeO)3B(200ml)加入混合物。生成的混合物升溫至室溫並攪拌過夜。將檸檬酸(300g)的水(1200ml)溶液於0℃分次加入反應混合物。分離水層，以氯化鈉飽和並以乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取液以MgSO4乾燥並蒸發。結晶的殘留物用乙酸乙酯研製並過濾收集，得到標題化合物(75.1g)。溶點92-98℃；IR(Nujol)3460，3408，3218，1613，1578，1288，1231，1123，1055，960，779cm-1；MS(APCI)m/z 230(M+NH4)。
參考實施例22，6-二甲氧基-4-(2-羥基乙基)苯硼酸(1)將3，5-二甲氧基苯基醋酸(5.32g)的二噁烷(20ml)溶液於0℃分次加入LiAlH4(1.05g)的二噁烷(100ml)溶液中。混合物於室溫攪拌0.5小時，於50℃攪拌2小時。混合物以濃縮的氫氧化銨冷卻，以硅藻土過濾。濾液蒸發得到3，5-二甲氧基苯乙醇(5.1g)。IR(Neat)3400，1600cm-1；MS(GC-EI)182(M+)，151(M-MeO)。
(2)如參考實施例1所述的方法，將前述產物(27.16g)轉化為標題化合物(39.1g)。
參考實施例3N-(2，6-二氯化苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯實施例1-(5)的化合物也可通過下列途徑獲得(1)如實施例1-(5)所述的方法，從L-酪氨酸乙酯鹽酸鹽(110.0g)得到N-(2，6-二氯苯甲醯基)-L-酪氨酸乙酯(171.4g)。熔點141-142℃；IR(Nujol)3381，3329，1718，1659cm-1；MS(APCI)m/z 382(M+H)。
(2)如實施例1-(2)所述的方法，將前述產物(130g)轉化為N-(2，6-二氯苯甲醯基)-O-(三氟甲磺醯基)-L-酪氨酸乙酯(174.9g)。IR(Neat)1737，1651cm-1；MS(APCI)m/z514(M+H)。
(3)如實施例1-(3)所述的方法，將前述產物(174.9g)轉化為標題化合物(119.7g)。
參考實施例4N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯實施例10-(1)化合物也可通過以下途徑獲得。
(1)如實施例1-(5)所述的方法，用2，6-二氟苯甲醯基氯化物醯化L-酪氨酸乙酯鹽酸鹽(10.0g)得到N-(2，6-二氟苯甲醯基)-L-酪氨酸乙酯(13.2g)。熔點149-150℃；IR(Nujol)3424，3277，1721，1660，1624cm-1；MS(APCI)m/z350(M+H)。
(2)如實施例1-(2)所述的方法，將前述產物(12.18g)轉化為N-(2，6-二氟苯甲醯基)-O-(三氟甲磺醯基)-L-酪氨乙酯(16.0g)。熔點76-78℃；IR(Nujol)3290，1739，1657，1625，1539，1502，1467，1423，1249，1214，1140，1009，891，793cm-1；MS(APCI)m/z482(M+H)。
(3)如實施例1-(3)所述的方法，將前述產物(7.7g)與2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯硼酸反應得到標題化合物(7.6g)。
參考實施例5N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-羥基甲基苯基)-L-苯丙氨酸乙酯實施例19-(1)的標題化合物也可以通過以下途徑獲得。
(1)如實施例19-(1)所述的方法，將L-酪氨酸乙酯鹽酸鹽(102g)醯化得到N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-L-酪氨酸乙酯(137.2g)，熔點144-145℃；IR(Nujol)3425，3260，1720，1659，1615cm-1；MS(APCI)m/z366(M+H)。
(2)如實施例1-(2)所述的方法，將前述產物(136.2g)轉化為N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-O-(三氟甲磺醯基)-L-酪氨酸乙酯(189.8g)。IR(Neat)3283，1738，1657，1605cm-1；MS(APCI)m/z 498(M+H)。
(3)如實施例1-(3)所述的方法，將前述產物(189.8g)轉化得到標題化合物(142.3g)。
權利要求
1.如式(I) 的苯丙氨酸衍生物，其中，X1為滷素原子；X2為滷素原子；Q為-CH2-基團或一-(CH2)2-基團；Y為-C1-6的烷基；CO2R為一可酯化的羧基；或其藥學上可接受的鹽。
2.權利要求1所述的化合物，其中化學結構為下列式[I-1] 其中，符號如權利要求1所定義。
3.權利要求2所述的化合物，其中X1為氯原子或氟原子；X2為氯原子或氟原子；Y為C1-4的烷基；以及CO2R為羧基或C2-7烷氧羰基。
4.權利要求3所述化合物，其中X1為氯原子或氟原子；X2為氯原子或氟原子；Q為-CH2-基團；Y為甲基、乙基、或正-丙基；以及CO2R為羧基、甲氧羰基、乙氧羰基或叔丁氧羰基。
5.權利要求3所述的化合物，其中X1為氟原子；X2為氯原子或氟原子；Q為-CH2-基團；Y為甲基或乙基；以及CO2R為羧基或C2-7的烷氧羰基。
6.N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸；N-(2，6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-乙氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸；N-(2-氯-6-氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸；N-(2，6-二氟苯甲醯基)-4-(2，6-二甲氧基-4-甲氧基甲基苯基)-L-苯丙氨酸；或是其C1-6的烷基酯；或是其藥學上可接受鹽。
7.藥學組合物，其包含治療有效劑量的權利要求1-6任一項的化合物以及藥學上可接受載體或稀釋劑。
8.用作活性治療物質的權利要求1-6任一項的化合物。
9.權利要求1-6任一項的化合物用於製備治療由α4介導細胞粘附所介導的疾病的藥物的用途。
10.治療或預防由α4介導細胞粘附引起的疾病的方法，其包含施予患者有效劑量的權利要求1-6任一項的化合物。
11.權利要求10所述的方法，其中所述的病症選自風溼性關節炎；哮喘；過敏症狀；成人呼吸窘迫症候群；愛滋病痴呆；阿爾海默症；心血管疾病；栓塞或有害性血小板聚集；栓塞溶解後的再閉塞；再灌注損傷；牛皮癬；皮膚炎症；糖尿病；多發性硬化症；系統性紅斑狼瘡；炎症性腸病；與白細胞浸潤至胃腸道有關的疾病；與白細胞浸潤至襯有上皮的組織有關的疾病；胰腺炎；乳腺炎；髒炎；膽囊炎；膽管炎或膽管周炎；支氣管炎，竇炎；肺臟炎症性疾病；膠原病；結節病；骨質松症；骨關節炎；動脈粥樣硬化症；腫瘤性疾病；創傷；眼疾；謝格連氏症候群；移植後的排拆現象；宿主抗移植體或移植體抗宿主的病症；血管內膜增生；血管硬化症；手術後的再梗塞或再狹窄；腎炎；腫瘤血管生成；惡性腫瘤；多發性肌瘤及肌瘤誘發骨質再吸收；以及中樞神經系統損傷。
12.權利要求11所述的方法，其中所述病症為哮喘；過敏症狀；炎症性腸病；類風溼性關節炎；異位性皮炎；多發性硬化症或移植後排斥現象。
13.一種製備如式[I] 的苯丙氨酸衍生物的方法，其中X1為滷素原子，X2為滷素原子，Q為-CH2-基團或-(CH2)2-基團，Y為C1-6的烷基以及CO2R為可酯化的羧基，或其藥學上可接受的鹽，其包含轉化式[II]化合物 其中CO2R1為酯化羧基，且其他符號與前述定義相同，使之成為式[Ia]化合物 其中的符號與前述定義相同，必要時，接著將生成的式[Ia]化合物的酯化羧基轉化成為羧基，以及必要時，接著將生成化合物轉化成為其藥學上可接受的鹽。
14.權利要求13所述的方法，其中轉化化合物(II)成為化合物[Ia]包含氧化化合物[II]，接著用式[IV]化合物Y-OH [IV]還原縮合生成的化合物，其中Y為C1-6的烷基。
15.權利要求13所述的方法，其中轉化化合物(II)成為化合物(Ia)的步聚包含轉化化合物(II)成為式[V]化合物 其中X1為滷素原子，X2為滷素原子，Q為-CH2-基團或-(CH2)2-基團，Z為離去基團，以及CO2R1為酯化羧基，接著使化合物[V]與式[IV]化合物Y-OH [IV]反應，其中Y為C1-6的烷基。
16.權利要求13所述的方法，其中轉化化合物(II)成為化合物[Ia]的步驟包含用式[VI]化合物Y-Z [VI]烷基化化合物[II]，其中Y為C1-6的烷基。
17.權利要求13所述的方法，其中轉化化合物[II]成為化合物[Ia]的步驟包含使式[II]化合物與式[IV]化合物Y-OH [IV]縮合，其中Y為C1-6烷基。
全文摘要
本發明涉及如式[I]的苯丙氨酸衍生物，其中X
文檔編號C07C233/87GK1449377SQ01814987
公開日2003年10月15日 申請日期2001年8月27日 優先權日2000年8月31日
發明者築本美喜子, 野村純宏, 川口隆行, 久米俊行, I·瑟卡 申請人:田邊製藥株式會社