雜芳基腈衍生物的製作方法

2023-09-21 17:42:30

專利名稱：雜芳基腈衍生物的製作方法
技術領域：
本發明涉及半胱氨酸蛋白酶抑制劑、特別涉及雜芳基腈組織蛋白酶K抑制劑和它們用於治療或預防其中牽涉組織蛋白酶K的疾病或醫學狀況的藥物用途。
組織蛋白酶K是溶酶體半胱氨酸組織蛋白酶、例如組織蛋白酶B、K、L和S家族的成員，這些酶牽涉於各種病症中，包括炎症、類風溼性關節炎、骨關節炎、骨質疏鬆症、腫瘤(特別是腫瘤侵襲和腫瘤轉移)、冠心病(coronary disease)、動脈粥樣硬化(包括動脈粥樣硬化斑塊破裂和去穩定)、自身免疫疾病、呼吸疾病、感染性疾病和免疫學介導的疾病(包括移植物排斥)。
由此，本發明提供了式I化合物或其可藥用鹽或酯， 其中R是H、-R2、-OR2或NR1R2，其中R1是H、低級烷基或C3-C10環烷基，且R2是低級烷基或C3-C10環烷基，且其中R1和R2獨立地任選被滷代(halo)、羥基、低級烷氧基、CN、NO2或任選單-或二-低級烷基取代的氨基取代；X是＝N-或＝C(Z)-，其中Z是H、-R4、-C≡C-CH2-R5、C(P)＝C(Q)-R3，其中P和Q獨立地為H、低級烷基或芳基，R3是芳基、芳基-低級烷基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、雜環基或雜環基-低級烷基，其中R3獨立地任選被一個或多個、例如1-3個選自以下的基團取代滷代、羥基、氧代、低級烷氧基、CN或NO2，或任選取代的以下基團任選單-或二-低級烷基取代的氨基、芳基、芳基-低級烷基、N-雜環基或N-雜環基-低級烷基，其中任選取代包括1至3個選自滷代、羥基、低級烷氧基、CN、NO2或任選單-或二-低級烷基取代的氨基的取代基，R4是H、芳基、芳基-低級烷基、芳基-低級鏈烯基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、雜環基或雜環基-低級烷基，且其中R5是芳基、芳基-低級烷基、芳氧基、芳醯基或如上所定義的N-雜環基，且其中R5任選被R7取代，其代表1至5個選自如下的取代基滷代、羥基、CN、NO2或氧代，或任選取代的以下基團低級烷氧基、低級烷基、芳基、芳氧基、芳醯基、低級-烷基磺醯基、芳基磺醯基、任選單-或二-低級烷基取代的氨基，或N-雜環基，或N-雜環基-低級烷基，其中N-雜環基表示飽和、部分不飽和或芳族含氮雜環部分，該雜環部分通過其氮原子連接，具有3至8個環原子，任選含有另外1、2或3個選自N、NR6、O、S、S(O)或S(O)2的雜原子，其中R6是H或任選取代的以下基團低級烷基、羧基、醯基(包括低級烷基醯基、例如甲醯基、乙醯基或丙醯基，或芳基醯基、例如苯甲醯基)、醯氨基、芳基、S(O)或S(O)2，且其中N-雜環基任選例如與苯或吡啶環稠合為雙環結構，且其中N-雜環基任選與3至8元環烷基或雜環連接形成螺結構，其中所述雜環具有3至10個環成員且含有1至3個選自N、NR6、O、S、S(O)或S(O)2的雜原子，其中R6如上所定義，且其中雜環基表示具有3至10個環成員且含有1至3個選自N、NR6、O、S、S(O)或S(O)2的雜原子的環，其中R6如上所定義，且其中R7任選被1至3個選自如下的取代基取代滷代、羥基、任選單-或二-低級烷基取代的氨基、低級烷基羰基、低級烷氧基或低級-烷基醯氨基；Y是-NR8R9，其中R8是H，或任選取代的以下基團低級烷基、芳基、芳基-低級烷基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、雜環基或雜環基-低級烷基，其中R8任選被R10取代，其代表1至4個選自以下的取代基滷代、羥基、CN、NO2、-O-C(O)-、任選取代的以下基團低級烷基、C3-C10環烷基、低級烷氧基、低級鏈烯基、低級炔基、任選單-或二-低級烷基取代的氫基或N-雜環基(如上所定義)，其中R10任選被R11取代，其代表1至4個選自以下的取代基滷代、羥基、CN、NO2、氧代、任選取代的以下基團任選單-或二-低級烷基取代的氨基、低級烷基、任選-低級烷基取代的COOH、亞磺醯基、磺醯基或N-雜環基(如上所定義)，其中R11任選被R12取代，其代表1至4個選自以下的取代基滷代、羥基、CN、NO2、氧代、羥基低級烷基、C3-C10環烷基、任選低級烷基-取代的羧基、羥亞胺(hydroximine)或如上所定義的N-雜環基，且其中R9獨立地為H，或任選取代的以下基團低級烷基、芳基、芳基-低級烷基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、雜環基或雜環基-低級烷基，且其中R9任選被滷代、羥基、氧代、低級烷氧基、CN、NO2或任選單-或二-低級烷基取代的氨基取代；或Z和Y與它們所連接的碳原子連接在一起形成選自以下的式I化合物， 或 其中R如上所定義；R15是低級烷基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、NR20R21-低級烷基-，其中T是-O-或直接連接的鍵；R16是NR20R21-低級烷基-或R4，均如上所定義，其中R20是H、任選取代的以下基團低級烷基、芳基、C3-C10環烷基、低級烷氧基低級烷基C3-C10環烷基-低級烷基或芳基低級烷基，R21是任選取代的以下基團低級烷基、芳基、C3-C10環烷基、低級烷氧基低級烷基、C3-C10環烷基-低級烷基或芳基-低級烷基，或R20和R21形成如前所定義的N-雜環基環，且其中R20或R21獨立地任選被R23取代，其代表1至3個選自以下的取代基滷代、羥基、CN、NO2、氧代、任選單-或二-低級烷基取代的氨基，或任選取代的以下基團低級烷氧基、低級烷基、低級烷氧基羰基、芳基、芳基-低級烷基、芳基-低級鏈烯基、芳氧基、芳醯基、烷基磺醯基、芳基磺醯基或N-雜環基或N-雜環基-低級烷基，其中N-雜環基如上所定義；且A是-CH＝或-C(O)-，B是-C＝或-N-，D是-CH＝或-C(O)-且E是-CH＝或-N(R1)，其中R1如上所定義。
在本說明書的以上及別處，以下術語具有以下含義。
滷代或滷素表示I、Br、Cl或F。
上下文中分別對有機基團或化合物所提及的術語「低級」定義的例如是具有不超過且包括7個、優選不超過且包括5個且有利地1、2或3個碳原子的支鏈或直鏈。
低級烷基是支鏈或直鏈的且含有1至7個碳原子、優選1-5個碳原子。低級烷基代表例如甲基、乙基、丙基、丁基、異丙基、異丁基、叔丁基或新戊基(2，2-二甲基丙基)。
滷代-取代的低級烷基是被不超過6個滷原子取代的C1-C7低級烷基。
低級烷氧基是支鏈或直鏈的且含有1至7個碳原子、優選1-4個碳原子。低級烷氧基代表例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、異丙氧基、異丁氧基或叔丁氧基。
低級鏈烯、鏈烯基或鏈烯氧基是支鏈或直鏈的且含有2至7個碳原子、優選2-4個碳原子且含有至少一個碳-碳雙鍵。低級鏈烯、低級鏈烯基或低級鏈烯氧基代表例如乙烯基、丙-1-烯基、烯丙基、丁烯基、異丙烯基或異丁烯基和其氧等價物(oxy equivalent)。
低級炔、炔基或炔氧基是支鏈或直鏈的且含有2至7個碳原子、優選2-4個碳原子且含有至少一個碳-碳三鍵。低級炔或炔基代表例如乙炔基、丙-1-炔基、炔丙基、丁炔基、異丙炔基或異丁炔基及其氧等價物。
在本說明書中，含氧取代基例如烷氧基、鏈烯氧基、炔氧基、羰基等包括它們的含硫同系物，例如硫代烷氧基、硫代鏈烯氧基、硫代炔氧基、硫代羰基、碸、亞碸等。
芳基代表碳環或雜環芳基。
碳環芳基代表單環、雙環或三環芳基，例如苯基或被1、2或3個選自以下的基團單、二-或三-取代的苯基低級烷基、低級烷氧基、芳基、羥基、滷素、氰基、三氟甲基、低級亞烷基二氧基和氧基-C2-C3-亞烷基和其它取代基，例如如實施例中所述；或1-或2-萘基；或1-或2-菲基。低級亞烷基二氧基是與苯基的兩個相鄰碳原子連接的二價取代基，例如亞甲二氧基或亞乙二氧基。氧基-C2-C3-亞烷基也是與苯基的兩個相鄰碳原子連接的二價取代基，例如氧基亞乙基或氧基亞丙基。氧基-C2-C3-亞烷基-苯基的一個實例是2，3-二氫苯並呋喃-5-基。
優選的碳環芳基是萘基、苯基或例如如實施例中所述任選被取代、例如被低級烷氧基、苯基、滷素、低級烷基或三氟甲基單-或二取代的苯基。
雜環芳基代表單環或雙環雜芳基，例如吡啶基、吲哚基、喹喔啉基、喹啉基、異喹啉基、苯並噻吩基、苯並呋喃基、苯並吡喃基、苯並噻喃基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩基或如上所定義的取代的、特別是單-或二取代的任何所述基團。
優選地，雜環芳基是吡啶基、吲哚基、喹啉基、吡咯基、噻唑基、異噁唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩基或如上所定義的取代的、特別是單-或二取代的任何所述基團。
環烷基代表任選被低級烷基取代、含有3至10個環碳原子的飽和環狀烴基，且優選為任選被低級烷基取代的環丙基、環戊基、環己基、環庚基或環辛基。
N-雜環基如上所定義。優選的N-雜環取代基為任選取代的吡咯烷、吡咯、二唑、三唑、四唑、咪唑、噁唑、噻唑、吡啶、嘧啶、三嗪、哌啶、哌嗪、嗎啉、苯鄰二甲醯亞胺、乙內醯脲、噁唑烷酮或2，6-二氧代-哌嗪和例如如以下實施例中所述。
在具體的實施方案中，本發明提供了式Ib、Ic、II或IV化合物或其可藥用的鹽或酯， 或
其中R8』是H或任選取代的芳基-低級烷基，其中R8』如以上對R8所定義任選被取代，且其他標記如上所定義。
在進一步優選的實施方案中，本發明提供了式VI化合物或其可藥用的鹽或酯， 其中R2和R15如上所定義。
R2優選為低級烷基，例如直鏈或更優選支鏈C1-C6烷基，例如特別是2-乙基丁基、異丁基或2，2-二甲基丙基；或C3-C6環烷基，特別是環丙基、環戊基或環己基。
R15優選為4-低級烷基哌嗪-1-基-低級烷基、4-低級烷基哌嗪-1-基-低級烷氧基-苯基氨基、C3-C6環烷基、C3-C6環烷基氨基-低級烷基、咪唑基-低級烷基、嗎啉代-低級烷基、低級烷氧基-低級烷基氨基-低級烷基或芳基-低級烷基氨基-低級烷基。例如，R15是環戊基、4-甲基-哌嗪-1-基-乙基、環己基氨基乙基、咪唑-1-基乙基、嗎啉代乙基、甲氧基乙基氨基乙基、2-(3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基)-苯基氨基或苯基乙基氨基乙基。
在仍然更優選的實施方案中，本發明提供了式VII化合物或其可藥用的鹽或酯，
其中R2和R16如上所定義。
圖VII中R2的優選含義如上圖VI所定義。
R16優選為H、芳基-低級烷基、芳基-低級烷氧基、1-低級烷基-哌啶-2-基-低級烷氧基、4-低級烷基-哌嗪-1-基-低級烷基、4-低級烷基-哌嗪-1-基-低級烷氧基、4-低級烷氧基-低級烷基-哌嗪-1-基-低級烷基、4-低級烷氧基-低級烷基-哌嗪-1-基-低級烷氧基、二-低級烷基氨基-低級烷基、二-低級烷基氨基-低級烷氧基或低級烷基-哌啶基-低級烷基。例如，R16是H、2-二甲基氨基-乙氧基、2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙氧基、3-(4-丙基-哌嗪-1-基)-丙氧基、3-(4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基)-丙氧基、3-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-丙氧基、吡啶-4-基甲氧基、吡啶-3-基甲氧基、吡啶-2-基甲氧基、1-甲基-哌啶-2-基甲氧基、吡啶-3-基甲基、吡啶-4-基甲基、4-甲基-哌嗪-1-基乙基、4-乙基-哌嗪-1-基丙基、4-異丙基-哌嗪-1-基丙基、4-正丙基-哌嗪-1-基乙基、4-(2-甲氧基乙基)-哌嗪-1-基丙基、二甲基氨基丙基或1-甲基-哌啶-3-基甲基。
在仍然更優選的實施方案中，本發明提供了式VIII化合物或其可藥用的鹽或酯， 其中R9和R5如上所定義。
R9優選為R9』，其為低級烷基，例如直鏈或更優選支鏈C1-C6烷基，例如特別是2-乙基丁基、異丁基或2，2-二甲基丙基；或C3-C6環烷基，特別是環丙基、環戊基或環己基。
R5優選為任選取代的以下基團芳基-低級-烷基、N-雜環基-芳基、1，2，3，4-四氫異喹啉基、芳基-N-雜環基、低級烷基-羰基-芳基-N-雜環基、芳氧基、N-雜環基、N-雜環基-低級烷基-芳氧基、N-雜環基-芳基羰基、滷代-低級烷基-磺醯基-N-雜環基、低級烷氧基-芳基-磺醯基-N-雜環基、二低級-烷基氨基芳基-羰基-N-雜環基、低級烷基羰基氨基-芳基-磺醯基-N-雜環基、滷代-低級烷基磺醯基-N-雜環基或芳基-低級烷基-N-雜環基，其中N-雜環基如上所定義。
R5優選任選被1-8個選自如下的取代基取代滷代、羥基、硝基、氰基、氨基、氧代、低級烷基、低級鏈烯基、低級炔基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、C3-C10環烷基氨基、低級烷氧基、低級烷氧基-低級烷基、低級烷氧基-低級烷氧基-低級烷基、滷代-低級烷基、低級烷基-羰基、芳基、芳基-低級烷基、滷代-芳基-低級烷基、滷代-芳氧基-低級烷基-羰基、低級烷基-磺醯基、低級烷基-羰基、低級烷氧基-羰基、亞磺醯氨基(sulphonamido)、低級烷基-羰基-芳基、芳基、低級烷基-N-雜環基-低級-烷基、低級烷基氨基、滷代-低級烷基-磺醯基、低級烷氧基-芳基-磺醯基、二低級-烷基氨基-芳基-羰基、低級烷基-醯胺基-芳基-磺醯基或滷代-低級-烷基-磺醯基。
例如，R5是苄基、4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基、3，4-二氫-1H-異喹啉-2-基、4-苯基-哌嗪-1-基、4-(4-甲基羰基苯基)-哌嗪-1-基、4-苯基-4-羥基-哌啶-1-基、異吲哚-2-基、異吲哚-1-基、4-吡啶-2-基-哌嗪-1-基、吡啶-3-基氧基、咪唑-1-基、4，5-二氯-咪唑-1-基、4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-苯氧基、4-[1，2，3]三唑-1-基-苯甲醯基、4-(3-氯-丙烷-1-磺醯基)-哌嗪-1-基、4-(4-甲氧基-苯基-磺醯基)-哌嗪-1-基、4-(4-二甲基氨基苯基-羰基)-哌嗪-1-基、4-(4-甲基羰基氨基苯基-磺醯基)-哌嗪-1-基、4-(3-氯丙基-磺醯基)-哌嗪-1-基和4-苄基-2，6-二氧代-哌嗪-1-基。
在仍然更優選的實施方案中，本發明提供了式IX化合物或其可藥用的鹽或酯，
其中R9如上所定義且R8」為如以上對R8』所定義的任選取代的芳基-低級烷基。
R9優選是R9』，其為低級烷基，例如直鏈或更優選支鏈C1-C6烷基，例如特別是2-乙基丁基、異丁基或2，2-二甲基丙基；或C3-C6環烷基，特別是環丙基、環戊基或環己基。
R8」優選為任選取代的以下基團N-雜環基-低級炔基-芳基-低級烷基、N-雜環基-N-雜環基-低級炔基-芳基-低級烷基、低級烷基磺醯基-N-雜環基-低級炔基-芳基-低級烷基、C3-C10環烷基氨基-低級炔基-芳基-低級烷基、N-雜環基氨基-低級炔基-芳基-低級烷基、N-雜環基-低級炔基-芳基-低級烷基、氨基-低級烷基-N-雜環基-低級炔基-芳基-低級烷基、羧基-N-雜環基-低級炔基-芳基-低級烷基、羥基-低級烷基-N-雜環基-低級炔基-芳基-低級烷基、N-雜環基-低級烷基氨基-低級炔基-芳基-低級烷基、氨基-低級炔基-芳基-低級烷基、N-雜環基-氨基羰基-N-雜環基-低級炔基-芳基-低級烷基、二-低級烷基-氨基羰基-N-雜環基-低級炔基-芳基-低級烷基、羥基-N-雜環基-低級炔基-芳基-低級烷基、N-雜環基-芳基-低級烷基、低級烷基-芳基-低級烷基、低級鏈烯基-芳基-低級烷基、N-雜環基-低級烷基-芳基-低級烷基、低級烷基-羰基-N-雜環基-低級烷基-芳基-低級烷基、低級烷基-磺醯基-N-雜環基-低級烷基-芳基-低級烷基、N-雜環基-低級烷基-芳基-低級烷基、低級烷基-磺醯基-低級烷基-芳基-低級烷基、羥基-N-雜環基-低級烷基-芳基-低級烷基、N-雜環基羰基氧基-低級烷基-芳基-低級烷基、N-雜環基-低級鏈烯基-芳基-低級烷基、低級烷基磺醯基-N-雜環基-低級鏈烯基-芳基-低級烷基、N-雜環基-N-雜環基-低級鏈烯基-芳基-低級烷基或低級鏈烯基-芳基-低級烷基，其中N-雜環基如上所定義。
R8」優選任選被選自以下的1-8個取代基取代滷代、羥基、硝基、氰基、氨基、氧代、低級烷基、低級鏈烯基、低級炔基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、C3-C10環烷基氨基、低級烷氧基、低級烷氧基-低級烷基、低級烷氧基-低級烷氧基-低級烷基、滷代-低級烷基、低級烷基-羰基、芳基、芳基-低級烷基、滷代-芳基-低級烷基、滷代-芳氧基-低級烷基-羰基、低級烷基-磺醯基、低級烷基-羰基、低級烷氧基-羰基、亞磺醯基、低級烷基-羰基-芳基、芳基、低級烷基-N-雜環基-低級烷基、低級烷基氨基、滷代-低級烷基-磺醯基、低級烷氧基-芳基-磺醯基、二低級-烷基氨基-芳基-羰基、低級烷基-醯氨基-芳基-磺醯基或滷代-低級烷基-磺醯基。
例如，R8」是4-(3-(4-乙醯基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-甲醯基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-哌啶-1-基-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-吡咯-1-基-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-哌啶-1-基-哌啶-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-乙基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-正丙基磺醯基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-羥基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-氧代-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(環己基氨基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(哌啶-1-基氨基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-氨基甲基-哌啶-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-羥基羰基-哌啶-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-羥基甲基-哌啶-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(嗎啉代乙基氨基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(哌啶基乙基氨基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(咪唑-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-([1，2，4]-三唑-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-氨基-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-[1，2，4]三唑-4-基醯氨基-哌啶-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-二甲基氨基羰基哌啶-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-哌啶-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-(3-(4-羥基-哌啶-1-基)-丙-1-炔基)-苄基、4-[1，2，4]三唑-1-基-苄基、4-咪唑-1-基-苄基、4-乙烯基-苄基、4-(3-甲基-3H-咪唑-4-基)-苄基、4-噁唑-2-基-苄基、4-[1，2，4]三唑-1-基甲基-苄基、4-咪唑-1-基甲基-苄基、4-乙基-苄基、3-(3-(4-乙醯基-哌嗪-1-基)-丙基)-苄基、3-(3-(4-乙基磺醯基-哌嗪-1-基)-丙基)-苄基、3-(3-(4-氧代-哌啶-1-基)-丙基)-苄基、3-(3-(4-肟基-哌啶-1-基)-丙基)-苄基、4-(3-哌啶-1-基-丙基)-苄基、4-(2-甲基磺醯基-1-甲基-乙基)-苄基、4-(3-哌啶-1-基-丙基)-苄基、4-(3-(4-羥基-哌啶-1-基)-丙基)-苄基、4-(3-(哌啶-4-基-羰基氧基)-丙基)-苄基、4-((E)-3-哌啶-1-基-丙烯基)-苄基、4-((E)-3-(2，6-二氧代-哌啶-1-基)-丙烯基)-苄基、4-((E)-3-(4-羥基-哌啶-1-基)-丙烯基)-苄基、4-((E)-3-(4-羥基羰基-哌啶-1-基)-丙烯基)-苄基、4-((E)-3-吡咯-1-基-丙烯基)-苄基、4-((E)-3-(4-甲基羰基-哌嗪-1-基)-丙烯基)-苄基、4-((E)-3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙烯基)-苄基、4-((E)-3-(4-乙基-哌嗪-1-基)-丙烯基)-苄基、4-((E)-3-(4-乙基磺醯基-哌嗪-1-基)-丙烯基)-苄基、4-((E)-3-(4-哌啶-1-基-哌啶-1-基)-丙烯基)-苄基、4-((E)-2-氰基-乙烯基)-苄基、4-((E)-2-([1，2，4]-三唑-1-基)-乙烯基)-苄基、4-((E)-2-([1，2，3]-三唑-1-基)-乙烯基)-苄基、4-(3-(4-肟基-哌啶-1-基)-丙-1-炔基)-苄基和4-((E)-3-哌啶-1-基-丙烯基)-苄基。
特別優選的本發明化合物是實施例化合物。
其中R2和R15如上所定義式VI化合物或其可藥用鹽或酯可如下製備，例如基本上如實施例所述， 將相應的式XIV的2-滷代前體氰化， 其中R2和R15如上所定義且滷代優選為Cl。
其中R2和R16如上所定義的式VII化合物或其可藥用鹽或酯可如下製備，例如基本上如實施例所述，
將式XV的6-羥基前體與R16-滷代前體偶聯， 其中R2和R16如上所定義且滷代優選為Cl。
其中R2和R5如上所定義的式VIII化合物或其可藥用鹽或酯可如下製備，例如基本上如實施例所述， 將式XVI的5-滷代嘧啶前體與相應的丙炔R5-CH2-C≡CH偶聯， 其中R2和R5如上所定義且滷代優選為Br。
式IX化合物或其可藥用的鹽或酯可如下製備，例如基本上如實施例所述，
其中R2如上所定義且R8」為如以上對R8』所定義的任選取代的芳基-低級烷基，將其中R2如上所定義的式XVII的仲胺前體， 與其中滷代優選為I的相應的R8」-滷代前體偶聯。
以上偶聯、環化和氰化反應可在各種條件下和在所要求的溶劑與其他試劑存在下進行，包括本領域已知的催化劑和輔助因子，例如以下實施例中所述。
使用本領域已知的方法和步驟可以製備起始物質並且可將偶聯或環化的產物轉化為其他式V化合物及其鹽和酯，如以下實施例所述。
由此，本發明進一步提供了製備如上所定義的式I化合物的方法， 其中i)為製備其中R2和R15如上所定義的式VI化合物或其可藥用鹽或酯， 將相應的式XIV的2-滷代前體氰化，
其中R2和R15如上所定義且滷代優選為Cl；ii)為製備其中R2和R16如上所定義的式VII化合物或其可藥用鹽或酯， 將式XV的6-羥基前體與R16-滷代前體偶聯， 其中R2和R16如上所定義且滷代優選為Cl；iii)為製備其中R2和R5如上所定義的式VIII化合物或其可藥用鹽或酯， 將式XVI的5-滷代嘧啶前體與相應的丙炔R5-CH2-C≡CH偶聯， 其中R2和R5如上所定義且滷代優選為Br；iv)為製備式IX化合物或其可藥用鹽或酯，
其中R2如上所定義且R8」為如以上對於R8』所定義的任選取代的芳基-低級烷基，將其中R2如上所定義的式XVII的仲胺前體與相應的其中滷代優選為I的R8」-滷代前體偶聯， v)之後如果需要，將所得產物轉化為其他式I化合物或其鹽或酯。
本發明的化合物可以以游離形式獲得，或如果存在成鹽基團以其鹽形式獲得。
具有鹼性基團的本發明化合物可轉化為酸加成鹽、特別是可藥用鹽。這些鹽與例如以下酸形成無機酸如礦物酸，例如硫酸、磷酸或氫滷酸；或有機羧酸如(C1-C4)鏈烷羧酸，其例如未被取代或被滷素取代，例如乙酸；如飽和或不飽和的二羧酸，例如草酸、琥珀酸、馬來酸或富馬酸；如羥基羧酸，例如乙醇酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸或檸檬酸；如胺基酸，例如天冬氨酸或穀氨酸；或有機磺酸，如未取代或(例如被滷素)取代的芳基磺酸或(C1-C4)-烷基磺酸例如甲磺酸。優選與鹽酸、甲磺酸和馬來酸形成的鹽。
鑑於游離化合物和化合物的鹽形式之間的密切關係，在本文中凡提及化合物時，也涉及相應的鹽，只要在所述情形下是可能或適合的即可。
化合物、包括它們的鹽也可以以其水合物形式獲得，或包括其他用於其結晶的溶劑。
本發明的化合物在哺乳動物中顯示有價值的藥理學特性並特別可用作組織蛋白酶K抑制劑。
本發明化合物的組織蛋白酶K抑制作用可在體外通過測量例如對重組人組織蛋白酶K的抑制作用加以證實。
體外實驗如下進行對於組織蛋白酶K該實驗在環境溫度下使用重組人組織蛋白酶K在96孔微量滴定板中進行。對組織蛋白酶K抑制的測定在恆定的酶(0.16nM)和底物濃度(54MmZ-Phe-Arg-AMCA-Peptide Institute Inc.Osaka，日本)、於100mM磷酸鈉緩衝液pH7.0中進行，所述緩衝液含有2mM二硫蘇糖醇、20mM土溫80和1mM EDTA。將組織蛋白酶K與抑制劑預溫育30分鐘，通過加入底物引發反應。溫育30分鐘後，加入E-64(2mM)終止反應，並於多孔板讀數儀中讀取螢光強度，激發和發射波長分別為360和460nm。本發明的化合物通常對人組織蛋白酶K的Kis小於約50nM、優選約5nM或更低、例如約1nM。
鑑於本發明化合物作為組織蛋白酶K抑制劑的活性，其特別可在哺乳動物中用作用於治療和預防涉及組織蛋白酶K水平升高的疾病或醫學狀況的活性劑。這些疾病包括涉及生物體如卡氏肺囊蟲(pneumocystiscarinii)、克氏錐蟲(trypsanoma cruzi)、布氏錐蟲(trypsanoma brucei)、crithidia fusiculata感染的疾病，以及寄生蟲疾病如血吸蟲病和瘧疾、腫瘤(腫瘤侵襲和腫瘤轉移)，和其他疾病如異染色性腦白質營養不良、肌營養不良、肌萎縮和類似疾病。
組織蛋白酶K已經牽涉於骨過度喪失的疾病中，因此本發明的化合物可用於治療和預防這樣的疾病，包括骨質疏鬆症、齒肉疾病(gingival disease)如齒齦炎和牙周炎、佩吉特病、惡性高鈣血症，例如腫瘤誘導的高鈣血症和代謝性骨病。本發明的化合物還可用於治療或預防軟骨和基質過度變性疾病，包括骨關節炎和類風溼性關節炎，以及某些涉及高水平蛋白水解酶和基質變性表現的腫瘤性疾病(neoplastic disease)。
本發明的化合物還適用於預防或治療冠心病、動脈粥樣硬化(包括動脈粥樣硬化斑塊破裂和去穩定)、自身免疫疾病、呼吸疾病和免疫學介導的疾病(包括移植物排斥)。
本發明的化合物特別適用於預防或治療各種病因的骨質疏鬆症，例如由老齡或由皮質類固醇治療或由不活動導致的幼年、絕經期、絕經後、創傷後骨質疏鬆症。
有益作用於本領域通常已知和如本文所述的體外和體內藥理學實驗中評價。
在體外和體內實驗中、有利地使用哺乳動物、例如大鼠、小鼠、狗、家兔、猴或分離的器官和組織以及天然或例如通過重組技術製備的哺乳動物酶製劑，可證實以上所述特性。本發明的化合物可以以溶液、例如優選水溶液或混懸劑的形式體外施用，且經腸內或胃腸外、優選口服、例如作為混懸劑或水溶液或作為固體膠囊或片劑製劑體內施用。體外劑量可為約10-5摩爾至10-9摩爾濃度。體內劑量可取決於施用途徑為約0.1至100mg/kg。
本發明化合物治療類風溼性關節炎的抗關節炎功效可使用諸如或類似於佐劑關節炎大鼠模型的模型確定，如此前(R.E.Esser等人，J.Rheumatology，1993，20，1176.)所述。
本發明化合物治療骨關節炎的功效可使用諸如或類似於家兔部分側面半月板切除術模型的模型確定，如此前(Colombo等人，Arth.Rheum.199326，875-886)所述。化合物在該模型中的功效可使用組織學評分法定量，如此前(O』Byrne等人，Inflamm Res 1995，44，S117-S118)所述。
本發明化合物治療骨質疏鬆症的功效可使用動物模型如卵巢切除大鼠或其他類似物種、例如家兔或猴確定，其中將實驗化合物施用於動物，並測量尿或血清中存在的骨重吸收標記物(例如如Osteoporos Int(1997)7539-543所述)。
因此，在其他方面，本發明提供了用作藥物的本發明化合物；包含本發明化合物作為活性成分的藥物組合物；治療患有或易患其中牽涉組織蛋白酶K的疾病或醫學狀況的患者的方法，包括向所述患者施用有效量的本發明化合物；和本發明化合物在製備用於治療性或預防性治療其中牽涉組織蛋白酶K的疾病或醫學狀況的藥物中的用途。
本發明涉及使用本發明化合物及其可藥用鹽或其藥物組合物在哺乳動物中抑制組織蛋白酶K、治療組織蛋白酶K依賴性病症如此處所述的組織蛋白酶K依賴性病症、例如炎症、骨質疏鬆症、類風溼性關節炎和骨關節炎的方法。
特別地，本發明涉及在哺乳動物中選擇性抑制組織蛋白酶K活性的方法，其包括向有需要的哺乳動物施用抑制組織蛋白酶K有效量的本發明化合物。
更具體而言，本發明涉及治療哺乳動物骨質疏鬆症、類風溼性關節炎、骨關節炎和炎症(和其他以上所定義的疾病)的方法，包括向有需要的哺乳動物施用相應有效量的本發明化合物。
以下實施例用於闡釋本發明而不應理解為對本發明的限制。溫度以攝氏度表示。如果沒有另外提及，所有的蒸發均在減壓下進行、優選在約15至100mmHg(＝20-133毫巴)下進行。終產物、中間體和起始物質的結構通過標準分析方法確證，例如微量分析和光譜學表徵(例如MS、IR、NMR)。所用縮寫為本領域常規的縮寫。
實施例實施例10描述了嘌呤-2-腈的合成實施例10-16-環己基氨基-9-環戊基-嘌呤-2-腈的合成A.(2-氯-嘌呤-6-基)-環己基-胺向2，6-二氯-嘌呤(10mmol)在1-戊醇(20ml)中的溶液中加入環己基胺(30mmol)，並將攪拌的混合物在70℃下加熱4小時。除去加熱浴，並在冷卻至室溫後濾出所形成的沉澱並用乙醇、二乙醚洗滌並乾燥(真空)。得到固體粉末，熔點為265℃(分解)，Rf＝0.34(CH2Cl2/MeOH＝9∶1)。
B.(2-氯-9-環戊基-嘌呤-6-基)-環己基-胺將2-氯-6-環己基氨基-嘌呤(10mmol)、溴代環戊烷(20mmol)和碳酸鉀(20mmol，無水)在DMF(70ml)中加熱至50℃並將該混合物在該溫度下攪拌10小時。冷卻至室溫後，將該混合物傾至水中並用乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機相用鹽水洗滌2次，並將萃取液經硫酸鈉乾燥並蒸發。得到淺色油，Rf＝0.36(CH2Cl2/MeOH＝20∶1)。
C.6-環己基氨基-9-環戊基-嘌呤-2-腈將2-氯-6-環己基氨基-9-環戊基-嘌呤(6.3mmol)和氰化鈉(36mmol)在DMF(30ml)中加熱至160℃達70小時。冷卻至室溫後，將該混合物傾至水中並用乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機相用鹽水洗滌3次，並將萃取液經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物通過使用乙酸乙酯作為流動相的矽膠快速色譜法純化。合併含有產物的級分並蒸發。得到淺黃色油，Rf＝0.33(乙酸乙酯)。
1H-NMR(CDCl3)1.2-1.55(m，5H)，1.6-2.1(m，11H)，2.2-2.4(m，2H)，4.05-4.2(m，1H)，4.85-4.95(m，1H)，5.7-5.9(寬信號，1H)，7.9(s，1H)。
實施例10-26-環己基氨基-9-(2-咪唑-1-基-乙基)-嘌呤-2-腈A[2-氯-9-(2-氯-乙基)-嘌呤-6-基]-環己基-胺將2-氯-6-環己基氨基-嘌呤(4mmol)、1-溴-2-氯乙烷(8mmol)和碳酸鉀(8mmol，無水)在DMF(20ml)中加熱至45℃並將該混合物在該溫度下攪拌5小時。冷卻至室溫後，將該混合物傾至水中並用乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機相用鹽水洗滌2次並將萃取崖經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物溶於二乙醚並加入戊烷。將所形成的固體物質濾出並乾燥(真空)。得到白色粉末，熔點為150-152℃，Rf＝0.17(CH2Cl2/MeOH＝20∶1)。
B[2-氯-9-(2-咪唑-1-基-乙基)-9-嘌呤-6-基]-環己基-胺將[2-氯-9-(2-氯-乙基)-嘌呤-6-基]-環己基-胺(1mmol)和咪唑鈉(1.3mmol)溶於DMF(10ml)並加熱至80℃，將該混合物在該溫度下攪拌7小時。蒸發溶劑後，將殘餘物溶於水並用乙酸乙酯萃取3次。將合併的萃取液經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物通過以(CH2Cl2/MeOH＝10∶1)作為流動相的矽膠快速色譜法純化。合併含有產物的級分並蒸發。得到淺色油，Rf＝0.40(CH2Cl2/MeOH＝10∶1)。
C6-環己基氨基-9-(2-咪唑-1-基-乙基)-嘌呤-2-腈將[2-氯-9-(2-咪唑-1-基-乙基)-9-嘌呤-6-基]-環己基-胺(0.6mmol)和氰化鈉(2mmol)在DMA(3ml)中加熱至160℃並將該混合物在該溫度下攪拌20小時。冷卻至室溫後，將該混合物傾至水中並用乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機相用鹽水洗滌，並將萃取液經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物懸浮於CH2Cl2中並濾出固體物質。將濾液濃縮並將得到的殘餘物通過以(CH2Cl2/MeOH＝20∶1)作為流動相的矽膠快速色譜法純化。合併含有產物的級分並蒸發。得到固體粉末，熔點為115-117℃，Rf＝0.59(CH2Cl2/MeOH＝10∶1)。
1H-NMR(CDCl3)0.8-0.9(m，1H)，1.2-1.85(m，11H)，2.0-2.2(m，2H)，4.05-4.2(br.m，1H)，5.2(d，1H)，5.7-5.8(br.m，1H)，5.9(d，1H)，7.2(m，1H)，8.05(s，1H)。
類似於以上所述的實施例、從相應的2，4-二氯嘌呤開始製備以下表10-1所確證的式10-1化合物。
表10-1
實施例10-119-環戊基-6-{2-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯基氨基}-嘌呤-2-腈的合成A1-(3-氯-丙氧基)-2-硝基-苯將2-硝基苯酚(70mmol)、1-溴-3-氯丙烷(360mmol)、碳酸鉀(無水，110mmol)、碘化鉀(2mmol)和四丁基溴化銨(1mmol)懸浮於丙酮(130ml)中並加熱至50℃，然後將該混合物在該溫度下攪拌30小時。冷卻至室溫後，濾出固體物質並將濾液蒸發。將過量的1-溴-3-氯丙烷在真空下蒸餾出(70℃)。得到橙黃色油，Rf＝0.55(己烷/乙酸乙酯＝2∶1)，其不經進一步純化即用於下一步驟。
B2-(3-氯-丙氧基)-苯基胺將1-(3-氯-丙氧基)-2-硝基-苯(～60mmol)溶於乙醇(200ml)並加入二氧化鉑(0.5g)。將攪拌的混合物在常壓下用氫處理直至氫吸收停止。濾出催化劑並蒸發濾液。得到淺黃色油，Rf＝0.3(CH2Cl2)，其不經進一步純化即用於下一步驟。
C[2-(3-氯-丙氧基)-苯基]-(2-氯-9H-嘌呤-6-基)-胺將2，6-二氯嘌呤(10mmol)和2-(3-氯-丙氧基)-苯基胺(～20mmol)溶於1-戊醇中並加熱至70℃，將該混合物在該溫度下攪拌5小時。在冷卻至室溫的同時，產物沉澱。濾出固體物質並用1-戊醇和二乙醚洗滌。得到固體粉末，熔點205℃，Rf＝0.42(CH2Cl2/MeOH＝10∶1)。
D[2-(3-氯-丙氧基)-苯基]-(2-氯-9-環戊基-嘌呤-6-基)-胺將[2-(3-氯-丙氧基)-苯基]-(2-氯-9H-嘌呤-6-基)-胺(3mmol)、溴代環戊烷(4.1mmol)和碳酸鉀(無水，3.6mmol)懸浮於DMF(20ml)中並加熱至50℃，並將該混合物在該溫度下攪拌5小時。冷卻至室溫後，將該混合物傾至水中並用乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機相用鹽水洗滌2次並將萃取液經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物通過以(CH2Cl2/MeOH＝20∶1)作為流動相的矽膠快速色譜法純化。合併含有產物的級分並蒸發。將產物從二乙醚/戊烷中結晶、濾出並乾燥。得到固體粉末，熔點110-112℃，Rf＝0.78(CH2Cl2/MeOH＝20∶1)。
E(2-氯-9-環戊基-嘌呤-6-基)-{2-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯基}-胺將[2-(3-氯-丙氧基)-苯基]-(2-氯-9-環戊基-嘌呤-6-基)-胺(0.4mmol)在室溫下於N-甲基哌嗪(0.3ml)中攪拌12小時。將該混合物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機相用鹽水洗滌並將萃取液用硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物通過以(CH2Cl2/MeOH＝9∶1)作為流動相的矽膠快速色譜法純化。合併含有產物的級分並蒸發。得到淺色油，Rf＝0.25(CH2Cl2/MeOH＝9∶2)。
F9-環戊基-6-{2-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯基氨基}-嘌呤-2-腈將(2-氯-9-環戊基-嘌呤-6-基)-{2-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯基}-胺(0.1mmol)、氰化鈉(50mg)、碘化鉀(5mg)懸浮於DMA(2ml)並加熱至160℃，將該混合物在該溫度下攪拌24小時。將該混合物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機相用鹽水洗滌並將萃取液經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物溶於二乙醚、經粉狀炭過濾並冷卻至4℃。將所形成的固體物質濾出並乾燥(真空)。得到白色粉末，熔點136-138℃。
1H-NMR(CDCl3)1.7-2.2(m，10H)，2.3(s，3H)，2.3-2.4(m，2H)，2.4-2.7(m，8H)，4.1-4.2(m，2H)，4.9-5.0(m，1H)，6.9-7.0(m，1H)，7.0-7.1(m，2H)，8.0(s，1H)，8.4(寬s，1H)，8.7(m，1H)。
實施例10-119-環戊基-6-{2-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯基氨基}-嘌呤-2-腈的合成A1-(3-氯-丙氧基)-2-硝基-苯將2-硝基苯酚(70mmol)、1-溴-3-氯丙烷(360mmol)、碳酸鉀(無水，110mmol)、碘化鉀(2mmol)和四丁基溴化銨(1mmol)懸浮於丙酮(130ml)中並加熱至50℃，然後將該混合物在該溫度下攪拌30小時。冷卻至室溫後，濾出固體物質並蒸發濾液。將過量的1-溴-3-氯丙烷在真空下蒸餾出(70℃)。得到橙黃色油，Rf＝0.55(己烷/乙酸乙酯＝2∶1)，其不經進一步純化即用於下一步驟。
B2-(3-氯-丙氧基)-苯基胺將1-(3-氯-丙氧基)-2-硝基-苯(～60mmol)溶於乙醇(200ml)並加入二氧化鉑(0.5g)。將攪拌的混合物在常壓下用氫處理，直至氫吸收停止。濾出催化劑並蒸發濾液。得到淺黃色油，Rf＝0.3(CH2Cl2)，其不經進一步純化即用於下一步驟。
C[2-(3-氯-丙氧基)-苯基]-(2-氯-9H-嘌呤-6-基)-胺將2，6-二氯嘌呤(10mmol)和2-(3-氯-丙氧基)-苯基胺(～20mmol)溶於1-戊醇並加熱至70℃，將該混合物在該溫度下攪拌5小時。在冷卻至室溫的同時，產物沉澱。濾出固體物質並用1-戊醇和二乙醚洗滌。得到固體粉末，熔點205℃，Rf＝0.42(CH2Cl2/MeOH＝10∶1)。
D[2-(3-氯-丙氧基)-苯基]-(2-氯-9-環戊基-嘌呤-6-基)-胺將[2-(3-氯-丙氧基)-苯基]-(2-氯-9H-嘌呤-6-基)-胺(3mmol)、溴代環戊烷(4.1mmol)和碳酸鉀(無水，3.6mmol)懸浮於DMF(20ml)並加熱至50℃，並在該溫度下將該混合物攪拌5小時。冷卻至室溫後，將該混合物傾至水中並用乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機相用鹽水洗滌2次並將萃取液經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物通過以(CH2Cl2/MeOH＝20∶1)作為流動相的矽膠快速色譜法純化。合併含有產物的級分並蒸發。將產物從二乙醚/戊烷中結晶、濾出並乾燥。得到固體粉末，熔點110-112℃，Rf＝0.78(CH2Cl2/MeOH＝20∶1)。
E(2-氯-9-環戊基-嘌呤-6-基)-{2-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯基}-胺將[2-(3-氯-丙氧基)-苯基]-(2-氯-9-環戊基-嘌呤-6-基)-胺(0.4mmol)在室溫下於N-甲基哌嗪(0.3ml)中攪拌12小時。將該混合物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機相用鹽水洗滌並將萃取液經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物通過以(CH2Cl2/MeOH＝9∶1)作為流動相的矽膠快速色譜法純化。合併含有產物的級分並蒸發。得到淺色油，Rf＝0.25(CH2Cl2/MeOH＝9∶2)。
F9-環戊基-6-{2-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯基氨基}-嘌呤-2-腈將(2-氯-9-環戊基-嘌呤-6-基)-{2-[3-(4-甲基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-苯基}-胺(0.1mmol)、氰化鈉(50mg)、碘化鉀(5mg)懸浮於DMA(2ml)中並加熱至160℃，並在該溫度下將該混合物攪拌24小時。將該混合物用水稀釋並用乙酸乙酯萃取3次。將合併的有機相用鹽水洗滌並將萃取液經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物溶於二乙醚、經粉狀炭過濾並冷卻至4℃。將所形成的固體物質濾出並乾燥(真空)。得到白色粉末，熔點136-138℃。
1H-NMR(CDCl3)1.7-2.2(m，10H)，2.3(s，3H)，2.3-2.4(m，2H)，2.4-2.7(m，8H)，4.1-4.2(m，2H)，4.9-5.0(m，1H)，6.9-7.0(m，1H)，7.0-7.1(m，2H)，8.0(s，1H)，8.4(寬s，1H)，8.7(m，1H)。
實施例11描述了喹唑啉-腈的製備實施例11-14-環戊基氨基-6-羥基-喹唑啉-2-腈的合成A乙氧基-亞氨基-乙酸乙酯將次氮基乙酸乙酯(83mmol)溶於二乙醚(無水，25ml)並加入乙醇(無水，85mmol)，將攪拌的混合物冷卻至-40℃。在該溫度下，經1小時將HCl(氣體，經濃硫酸乾燥；總消耗18g)鼓入該溶液。移走冷卻浴並在0℃下將反應混合物迅速溫熱(需另外冷卻)，此時產物沉澱。濾出固體物質、用二乙醚洗滌並乾燥。
B4，6-二羥基-喹唑啉-2-甲酸乙酯將2-氨基-5-羥基-苯甲酸(15mmol)懸浮於乙醇(無水，600ml)中，加熱至60℃並攪拌。然後加入三乙胺(30mmol)，形成澄清溶液。在60℃下加入乙氧基-亞氨基-乙酸乙酯(16.5mmol)，並在15分鐘後加入另一份三乙胺(15mmol)並將該混合物攪拌另外30分鐘。將該混合物冷卻至室溫並在室溫下不經攪拌放置過夜。濾出所形成的固體物質、用乙醇/醚洗滌並乾燥(真空)。得到淺棕色粉末，熔點258-260℃(分解)。
C4，6-二羥基-喹唑啉-2-甲酸醯胺將4，6-二羥基-喹唑啉-2-甲酸乙酯(11mmol)溶於含有氨(4N)的甲醇(50ml)。將該混合物攪拌3小時並濾出所形成的固體物質。得到淺色粉末，熔點305℃(分解)。
D乙酸2-氨甲醯基-4-羥基-喹唑啉-6-基酯將4，6-二羥基-喹唑啉-2-甲酸醯胺(12mmol)溶於溫DMF(20ml)中並向攪拌的混合物加入三乙胺(13.2mmol)。冷卻至室溫後，滴加乙酸酐在DMF(10ml)中的溶液並將該混合攪拌過夜。除去溶劑並將所形成的固體物質懸浮於乙醇，濾出固體並乾燥(真空)。得到粉末，熔點250℃。
E乙酸4-氯-2-氰基-喹唑啉-6-基酯向乙酸2-氨甲醯基-4-羥基-喹唑啉-6-基酯(8.1mmol)和N，N-二甲基苯胺(9mmol)的混合物中加入POCl3(72mmol)，並將攪拌的混合物在100℃下加熱45分鐘。將過量的POCl3蒸發，將殘餘物用冰/水處理，並用乙酸乙酯快速萃取。將有機相用稀HCL-水溶液(0.1N)洗滌、經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物溶於乙醇，濾出所形成的固體物質並乾燥(真空)。得到粉末，熔點145-147℃，Rf＝0.26(CH2Cl2)。
F4-環戊基氨基-6-羥基-喹唑啉-2-腈在室溫下向乙酸4-氯-2-氰基-喹唑啉-6-基酯(4.4mmol)在乙醇(40ml)中的攪拌懸液中滴加環戊基胺(3ml)。攪拌30分鐘後，形成澄清溶液，將該混合物攪拌2小時。然後，加入水(10ml)並將該混合物不經攪拌放置過夜。除去溶劑並用2N NaOH(20ml)將水相調為鹼性。用乙酸乙酯萃取該混合物。然後將水相用4N HCl水溶液酸化並用乙酸乙酯萃取。將有機相經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物懸浮於CH2Cl2，濾出固體物質並乾燥(真空)。得到淺棕色無定形粉末，Rf＝0.16(CH2Cl2/MeOH＝15∶1)。
1H-NMR(DMSO)1.5-1.8(m，6H)，1.9-2.1(m，2H)，4.5(m，1H)，7.4(dd，1H)，7.6-7.7(m，2H)，8.2(d，1H)，10.2-10.4(寬s，1H)。
實施例11-24-環戊基氨基-6-(2-二甲基氨基-乙氧基)-喹唑啉-2-腈的合成將4-環戊基氨基-6-羥基-喹唑啉-2-腈(0.4mmol)、(2-氯-乙基)-二甲基-胺鹽酸鹽(0.55mmol)和碳酸銫(3.5mmol)在DMF(3ml)中於室溫下攪拌20小時。將該懸液過濾、用少量DMF洗滌並向濾液中加入水，直至溶液變渾濁。濾出所形成的沉澱並乾燥(真空)。得到白色粉末，熔點158-160℃，Rf＝0.51(CH2Cl2/MeOH＝9∶2)。
1H-NMR(DMSO)1.5-1.8(m，6H)，1.9-2.1(m，2H)，2.2(s，6H)，2.65(m，2H)，4.15(m，2H)，4.55(m，1H)，7.5(dd，1H)，7.7(d，1H)，7.8(m，1H)，8.3(寬d，1H)。
實施例11-34-環戊基氨基-6-[2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-乙氧基]-喹唑啉-2-腈的合成將4-環戊基氨基-6-羥基-喹唑啉-2-腈(0.4mmol)、1-(2-氯-乙基)-4-甲基-哌嗪二鹽酸鹽(0.55mmol)和碳酸銫(4mmol)在DMF(5ml)中於室溫下攪拌20小時。將該懸液過濾、用少量DMF洗滌並向濾液中加入水，直至溶液變渾濁。過濾所形成的沉澱、用水洗滌並乾燥(真空)。得到粉末，熔點110-112℃，Rf＝0.48(CH2Cl2/MeOH＝9∶2)。
1H-NMR(CDCl3)1.5-1.9(m，6H)，2.2(m，2H)，2.35(s，3H)，2.4-2.75(m，8H)，2.9(m，2H)，4.25(m，2H)，4.6(m，1H)，6.85(寬d，1H)，7.05(d，1H)，7.45(dd，1H)，7.8(d，1H)。
實施例11-44-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-[3-(4-丙基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-喹唑啉-2-腈A4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-羥基-喹唑啉-2-腈在室溫下向乙酸4-氯-2-氰基-喹唑啉-6-基酯(4mmol)在乙醇(30ml)中的攪拌懸液中滴加2，2-二甲基-丙基胺(1.4ml)。將該混合物攪拌3小時。然後，加入水(3ml)並蒸發溶劑。將殘餘物溶於水和1N NaOH中，以確保鹼性條件。將該混合物用乙酸乙酯萃取一次。然後將水相用4N HCl水溶液酸化並用乙酸乙酯萃取。將有機相經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物溶於熱乙醇，並將冷卻後所形成的固體物質濾出並乾燥(真空)。得到粉末，Rf＝0.13(CH2Cl2/MeOH＝15∶1)。
B4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-[3-(4-丙基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-喹唑啉-2-腈將4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-羥基-喹唑啉-2-腈(0.31mmol)、1-(3-氯-丙基)-4-丙基-哌嗪(0.62mmol)和碳酸銫(3.1mmol)在DMF(3ml)中於室溫下攪拌20小時。加入水，直至形成澄清溶液。然後加入更多的水，直至溶液變渾濁。濾出所形成的沉澱、用水洗滌並乾燥(真空)。得到粉末，熔點102-104℃，Rf＝0.4(CH2Cl2/MeOH＝9∶2)。
1H-NMR(CDCl3)0.9(t，3H)，1.05(s，9H)，1.4-1.6(m，2H)，2.0-2.1(m，2H)，2.3(m，2H)，2.4-2.6(m，8H)，3.55(m，2H)，4.15(m，2H)，5.85(寬m，1H)，6.95(m，1H)，7.45(dd，1H)，7.8(d，1H).
實施例11-54-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-{3-[4-(2-甲氧基-乙基)-哌嗪-1-基]-丙氧基}-喹唑啉-2-腈將4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-羥基-喹唑啉-2-腈(0.31mmol)、1-(3-氯-丙基)-4-丙基-哌嗪(0.62mmol)和碳酸銫(3.1mmol)在DMF(3ml)中於室溫下攪拌20小時。加入水，直至形成澄清溶液。然後加入更多的水，直至溶液變渾濁。濾出所形成的沉澱、用水洗滌並乾燥(真空)。得到粉末，熔點92-94℃，Rf＝0.45(CH2Cl2/MeOH＝9∶2)。
1H-NMR(CDCl3)1.05(s，9H)，2.0-2.1(m，2H)，2.3(m，2H)，2.4-2.6(m，12H)，3.35(s，3H)，3.45-3.6(m，4H)，4.15(m，2H)，5.75(寬m，1H)，6.95(m，1H)，7.45(dd，1H)，7.8(d，1H)。
實施例11-64-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-[3-(4-異丙基-哌嗪-1-基)-丙氧基]-喹唑啉-2-腈將4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-羥基-喹唑啉-2-腈(0.31mmol)、1-(3-氯-丙基)-4-丙基-哌嗪(0.62mmol)和碳酸銫(3.1mmol)在DMF(3ml)中於室溫下攪拌20小時。加入水，直至形成澄清溶液。然後加入更多的水，直至溶液變渾濁。濾出所形成的沉澱、用水洗滌並乾燥(真空)。得到粉末，熔點103-105℃，Rf＝0.4(CH2Cl2/MeOH＝9∶2)。
1H-NMR(CDCl3)1.0-1.1(m，15H)，2.0-2.1(m，2H)，2.4-2.7(m，11H)，3.55(m，2H)，4.15(m，2H)，5.85(寬m，1H)，6.95(m，1H)，7.45(dd，1H)，7.8(d，1H)。
實施例11-74-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-(吡啶-4-基甲氧基)-喹唑啉-2-腈將4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-羥基-喹唑啉-2-腈(0.23mmol)、4-氯甲基-吡啶鹽酸鹽(0.35mmol)和碳酸銫(2.3mmol)在DMF(3ml)中於室溫下攪拌20小時。加入水，直至形成澄清溶液。然後加入更多的水，直至溶液變渾濁。濾出所形成的沉澱、用水洗滌並乾燥(真空)。得到粉末，熔點203-205℃，Rf＝0.2(CH2Cl2/MeOH＝15∶1)。
1H-NMR(CDCl3)1.0(m，9H)，3.55(m，2H)，5.2(m，2H)，5.8(寬m，1H)，7.05(m，1H)，7.4(m，2H)，7.55(d，1H)，7.85(d，1H)，8.65(m，2H)。
實施例11-84-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-(吡啶-3-基甲氧基)-喹唑啉-2-腈將4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-羥基-喹唑啉-2-腈(0.25mmol)、3-氯甲基-吡啶鹽酸鹽(0.38mmol)和碳酸銫(2.5mmol)在DMF(3ml)中於室溫下攪拌20小時。加入水，直至形成澄清溶液。然後加入更多的水，直至溶液變渾濁。濾出所形成的沉澱、用水洗滌並乾燥(真空)。得到粉末，熔點156-158℃，Rf＝0.35(CH2Cl2/MeOH＝15∶1)。
1H-NMR(CDCl3)1.0(m，9H)，3.55(m，2H)，5.2(m，2H)，5.8(寬m，1H)，7.05(m，1H)，7.35(m，1H)，7.55(m，1H)，7.8-7.9(m，2H).8.65(m，1H)，8.75(m，1H)。
實施例11-94-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-(吡啶-2-基甲氧基)-喹唑啉-2-腈將4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-羥基-喹唑啉-2-腈(0.23mmol)、2-氯甲基-吡啶鹽酸鹽(0.35mmol)和碳酸銫(2.3mmol)在DMF(3ml)中於室溫下攪拌20小時。加入水，直至形成澄清溶液。然後加入更多的水，直至溶液變渾濁。濾出所形成的沉澱、用水洗滌並乾燥(真空)。得到粉末，熔點160℃，Rf＝0.4(CH2Cl2/MeOH＝15∶1)。
1H-NMR(CDCl3)1.0(m，9H)，3.55(m，2H)，5.35(m，2H)，6.05(寬m，1H)，7.2-7.3(m，2H)，7.45-7.6(m，2H)，7.7-7.85(m，2H)，8.6(m，1H)。
實施例11-104-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-(1-甲基-哌啶-2-基甲氧基)-喹唑啉-2-腈將4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-6-羥基-喹唑啉-2-腈(0.31mmol)、1-甲基-2-氯甲基-哌啶鹽酸鹽(0.41mmol)和碳酸鉀(7.2mmol)在DMF(3ml)中於80℃下攪拌8小時。蒸發溶劑，將殘餘物溶於水並用乙酸乙酯萃取。將有機相經硫酸鈉乾燥並蒸發。將殘餘物通過以(CH2Cl2/MeOH＝9∶1)作為流動相的矽膠快速色譜法純化。合併含有產物的級分並蒸發。得到淺色油，Rf＝0.54(CH2Cl2/MeOH＝10∶1)。
1H-NMR(CDCl3)1.05(m，9H)，1.3-1.45(m，1H)，1.6-1.9(m，5H)，2.2(m，1H)，2.35(m，1H)，2.4(s，3H)，2.9-3.0(m，1H)，3.55(m，2H)，4.1-4.25(m，2H)，5.8(寬m，1H)，7.05(m，1H)，7.5(dd，1H)，7.85(d，1H)。
類似於以上實施例、從相應的取代的4-氨基-6-羥基-喹唑啉-2-腈開始製備如以下表11-1所確證的以下式11-1化合物。
表11-1
實施例12描述了5-取代的嘧啶-2-腈的製備實施例12-1.
4-環戊基氨基-5-(4-苯基-丁-1-炔基)-嘧啶-2-腈
在75℃下將在DMF(5ml)中的三乙胺(2.1mmol)、5-溴-4-環戊基氨基-嘧啶-2-腈(0.69mmol)、4-苯基-1-丁炔(1.66mmol)、二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(0.035mmol)和碘化銅(I)(0.07mmol)攪拌2.5小時。將該反應混合物用飽和氯化銨處理並用AcOEt萃取。將有機層用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並蒸發。對粗產物應用矽膠柱色譜法，用以下溶劑洗脫正己烷∶AcOEt＝12∶1(v/v)和正己烷∶AcOEt＝10∶1(v/v)。蒸發除去在後流出液的溶劑並真空乾燥，得到標題化合物。產率89.9％，Rf＝0.65(正己烷∶AcOEt＝2∶1)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.26-1.33(m，2H)，1.64-1.71(m，4H)，2.05-2.09(m，3H)，2.79-2.86(m，2H)，2.94-3.00(m，2H)，4.30-4.38(m，2H)，5.36-5.34(m，1H)，7.35-7.21(m，5H)，8.10(s，1H)。
12-2.
4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-5-{3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-丙-1-炔基}-嘧啶-2-腈 A.1-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-丙-2-炔-1-醇 在-78℃下向4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯甲醛(28.9mmol)在THF(100ml)中的溶液中加入乙炔基溴化鎂(0.5M THF溶液)(43.4mmol)。然後將該溶液在室溫下攪拌18小時。將該反應混合物用飽和氯化銨處理並用乙酸乙酯萃取。用鹽水洗滌有機相、經硫酸鎂乾燥並蒸發。向殘餘物加入CH2Cl2，得到沉澱，並過濾收集。產率84.2％，Rf＝0.23(CH2Cl2∶MeOH＝9∶1)。
B.1-甲基-4-(4-丙-2-炔基-苯基)-哌嗪 於-15℃、氮氣下向冰醋酸(72ml)和三氟乙酸(8ml)的攪拌混合物中緩慢加入NaBH4(79.1mmol)。在0.5小時內滴加1-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-丙-2-炔-1-醇(11.3mmol)在CH2Cl2(80ml)中的溶液，並將該混合物在室溫下攪拌1小時。減壓下除去溶劑並將殘餘物加入飽和碳酸氫鈉。將該水溶液用CH2Cl2萃取。用鹽水洗滌有機層、經硫酸鎂乾燥並蒸發。對粗產物應用矽膠柱色譜法，用以下溶劑洗脫CH2Cl2和5％MeOH/CH2Cl2。通過蒸發除去在後流出液的溶劑並真空乾燥，得到標題化合物。產率86.8％，Rf＝0.52(CH2Cl2∶MeOH＝9∶1)。
C.4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-5-{3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯基]-丙-1-炔基}-嘧啶-2-腈 向1-甲基-4-(4-丙-2-炔基-苯基)-哌嗪(0.75mmol)和5-溴-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-2-腈(0.5mmol)在THF(7ml)中的溶液中，加入三乙胺(1.5mmol)、二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(0.025mmol)和碘化銅(I)(0.05mmol)。將該反應混合物在60℃ca.下加熱3小時。向該反應混合物中加入飽和氯化銨水溶液，然後用兩份50ml AcOEt萃取水層。合併萃取液、用鹽水洗滌、經硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮，得到粗產物，其通過反相HPLC純化。產率25％。Rf＝0.5(MeOH∶CH2Cl2＝5∶95)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.91(s，9H)，2.38(s，3H)，2.61(m，4H)，3.21(t，4H)，3.32(d，2H)，3.83(s，2H)，5.75(s，1H)，6.91(d，2H)，7.24(d，2H)，8.19(s，1H)。
起始物質的製備2-丙-2-炔基-1，2，3，4-四氫異喹啉 在0℃下向1，2，3，4-四氫-異喹啉(9.4mmol)在DMF(10ml)中的溶液中加入3-溴-丙炔(4.5mmol)並在室溫下攪拌18小時。用飽和氯化銨處理反應混合物後，將該混合物用AcOEt萃取。用鹽水洗滌有機層、經硫酸鎂乾燥並蒸發。對粗產物應用矽膠柱色譜法，用以下溶劑洗脫正己烷和正己烷∶AcOEt＝1∶1(v/v)。通過蒸發除去在後流出液的溶劑並在真空下乾燥，得到標題化合物。產率91.2％，Rf＝0.67(正己烷∶AcOEt＝1∶5)。
通過重複以上所述操作、採用適合的起始物質和條件，得到以下表12-1所確證的以下式12-1化合物。
表12-1
12-3.
5-[3-(3，4-二氫-1H-異喹啉-2-基)-丙-1-炔基]-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-2-腈 在室溫下將二噁烷(4ml)中的二異丙基胺(0.86mmol)、2-丙-2-炔基-1，2，3，4-四氫-異喹啉(0.72mmol)、5-溴-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-2-腈(0.86mmol)、二(苄腈)-氯化鈀(II)(0.02mmol)、碘化銅(I)(0.015mmol)和三叔丁基膦(0.04mmol)攪拌2.5小時。過濾後，用飽和氯化銨處理該反應混合物。用AcOEt萃取該混合物。將有機層用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並蒸發。將粗產物施加於矽膠柱，用以下溶劑洗脫正己烷∶AcOEt＝1∶1(v/v)和正己烷∶AcOEt＝1∶5(v/v)。通過蒸發除去在後流出液的溶劑並在真空下乾燥，得到標題化合物。產率46.5％，Rf＝0.31(正己烷∶AcOEt＝1∶1)。
通過重複以上所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表12-2所確證的以下式12-2化合物。
表12-2
12-8.
4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-5-[3-(4-吡啶-2-基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基]-嘧啶-2-腈 在室溫、氮氣氛下將1-(2-丙炔基)-4-(2-吡啶基)-哌嗪(由1-(2-吡啶基)-哌嗪和炔丙基溴製備)(1.5mmol)溶於DMF。向該溶液中，連續加入5-溴-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-2-腈(1mmol)、三乙胺(3mmol)、碘化銅(I)(0.1mmol)和二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(0.05mmol)。將該混合物在80℃、氮氣氛下加熱3小時。在室溫下冷卻後，將該混合物用H2O稀釋並用AcOEt萃取。將有機層經硫酸鎂乾燥並在真空中蒸發。將殘餘物通過矽膠柱色譜法(正己烷∶AcOEt＝1∶5)純化，得到4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-5-[3-(4-吡啶-2-基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基]-嘧啶-2-腈。產率97％。Rf＝0.30(正己烷∶AcOEt＝1∶5)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.95(s，9H)，2.75-2.73(m，4H)，3.36(d，2H)，3.63-3.60(m，4H)，3.69(s，2H)，5.78(brs，1H)，6.63-6.67(m，2H)，7.47-7.52(m，1H)，8.19-8.21(m，2H)。
通過重複以上所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表12-3所確證的以下式12-3化合物。

表12-3 12-14.
4-環己基氨基-5-{3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-苯氧基]-丙-1-炔基}-嘧啶-2-腈 A.5-[3-(4-氯甲基-苯氧基)-丙-1-炔基]-4-環己基氨基-嘧啶-2-腈 在室溫下將5-溴-4-環己基氫基-嘧啶-2-腈(0.19mmol)和氯甲基-4-丙-2-炔基氧基-苯(0.22mmol)在DMF(5ml)中用三乙胺(0.56mmol)、碘化銅(I)(0.019mmol)和二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(0.0093mmol)處理。將該混合物在65℃下攪拌2小時、傾至冰水中、用AcOEt萃取。將有機層用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到產物，產率21％。Rf＝0.75(正己烷s∶AcOEt＝1∶2)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.02-1.48(m，5H)，1.57-1.78(m，3H)，1.80-1.98(m.2H)，3.94-4.04(m，1H)，4.61(s，2H)，5.03(s，2H)，5.38(d，1H)，7.04(d，2H)，7.41(d，2H)，8.21(s，1H)。
B.4-環己基氨基-5-{3-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-苯氧基]-丙-1-炔基}-嘧啶-2-腈 將5-[3-(4-氯甲基-苯氧基)-丙-1-炔基]-4-環己基氨基-嘧啶-2-腈(0.050mmol)溶於CH2Cl2(2ml)並在室溫下加入1-甲基-哌嗪(0.10mmol)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。加入水並將有機層用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到產物，產率40％。
通過重複以上實施例所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表12-4確證的以下式12-4化合物。
表12-4
12-18.
4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-5-[3-氧代-3-(4-[1，2，3]三唑-1-基-苯基)-丙-1-炔基]-嘧啶-2-腈 A.4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-5-乙炔基-嘧啶-2-腈 在室溫下將5-溴-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-2-腈(7.58mmol)和乙炔基-三甲基-矽烷(22.74mmol)在DMF(20ml)中用三乙胺(38.0mmol)、碘化銅(I)(0.76mmol)和二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(0.38mmol)處理。將該混合物在室溫下攪拌1.5小時、傾至冰水中並用AcOEt萃取。將有機層用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物溶於甲醇(60ml)-水(10ml)並在室溫下加入氟化銫(4.2mmol)。將該混合物在室溫下攪拌5分鐘。將反應混合物蒸發，然後加入水和CH2Cl2。用鹽水洗滌有機層、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到產物，產率76％。Rf＝0.67(正己烷∶AcOEt＝2∶1)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.00(s，9H)，3.50(d，2H)，3.57(s，1H)，5.79(brt，1H)，8.25(s，1H)。
B.4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-5-[3-氧代-3-(4-[1，2，3]三唑-1-基-苯基)-丙-1-炔基]-嘧啶-2-腈
將4-[1，2，3]三唑-1-基-苯甲酸(5.0mmol)溶於CH2Cl2(20ml)。在室溫下加入草醯氯(3.5mmol)和DMF(1滴)並將反應混合物在室溫下攪拌3小時，然後蒸發。將殘餘物溶於CH2Cl2(20ml)並在室溫下將混合物加入4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-5-乙炔基-嘧啶-2-腈、碘化銅(I)(0.13mmol)和三乙胺(13.0mmol)。將該反應混合物在室溫下攪拌過夜。用鹽水洗滌有機層、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到產物，產率31％。Rf＝0.02(正己烷∶AcOEt＝2∶1)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ1.03(s，9H)，3.40(d，2H)，6.09(brt，1H)，7.92(d，1H)，8.01(d，2H)，8.16(d，1H)，8.33(d，2H)，8.49(s，1H)。
12-19.
5-{3-[4-(3-氯-丙烷-1-磺醯基)-哌嗪-1-基]-丙-1-炔基}-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-2-腈 A.4-{3-[2-氰基-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-5-基]-丙-2-炔基}-哌嗪-1-甲酸叔丁基酯 向4-丙-2-炔基-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.5mmol)和5-溴-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-2-腈(1mmol)在DMF(6ml)中的溶液中加入三乙胺(3.0mmol)、二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(0.1mmol)和碘化銅(I)(0.2mmol)。將該反應混合物在85℃ca.下加熱1天。用氯化銨淬滅該混合物並用AcOEt萃取。合併萃取液、用鹽水洗滌、經硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮，得到402mg粗產物，通過矽膠柱色譜法純化，得到標題化合物。產率85％。Rf＝0.3(僅AcOEt)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.98(s，9H)，1.46(s，9H)，2.56(t，4H)，3.37(d，2H)，3.49(t，4H)，3.64(s，2H)，5.74-5.84(m，1H)，8.20(s，1H)。
B.4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-5-(3-哌嗪-1-基-丙-1-炔基)-嘧啶-2-腈 在0℃下向4-{3-[2-氰基-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-5-基]-丙-2-炔基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯(2.9mmol)在二噁烷(5ml)中的溶液中加入二噁烷(15ml)中的4N氯化氫。將該反應混合物在室溫下攪拌1天，然後在減壓下蒸發。在室溫下向殘餘固體的溶液中加入CH2Cl2，用三乙胺將pH調至9.0。將該混合物用氯化銨淬滅並用CH2Cl2萃取。合併萃取液、用鹽水洗滌、經硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮。將該殘餘物通過矽膠柱色譜法純化，得到標題化合物，產率72％。Rf＝0.11(MeOH∶CH2Cl2＝1∶9)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.98(s，9H)，2.6-2.7(m，4H)，2.9-3.0(m，4H)，3.38(d，2H)，3.62(s，2H)，5.75-5.82(m，1H)，8.22(s，1H)。
C5-{3-[4-(3-氯-丙烷-1-磺醯基)-哌嗪-1-基]-丙-1-炔基}-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-2-腈 在0℃下向4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-5-(3-哌嗪-1-基-丙-1-炔基)-嘧啶-2-腈(0.16mmol)在CH2Cl2(5ml)中的溶液中加入3-氯丙磺醯氯(0.192mmol)和三乙胺(0.192mmol)。將該反應混合物在室溫下攪拌14小時，然後向該反應混合物中加入飽和氯化銨水溶液。將該混合物用兩份50mlAcOEt萃取。合併萃取液、用鹽水洗滌、經硫酸鈉乾燥並在真空下濃縮。通過矽膠柱色譜法純化該殘餘物，得到37mg標題化合物，產率51％。Rf＝0.33(僅AcOEt)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.98(s，9H)，2.25-2.35(m，2H)，2.71(t，4H)，3.10(t，3H)，3.35-3.42(m，4H)，3.38(d，2H)，3.68(s，2H)，3.69(t，3H)，5.75(m，1H)，8.22(s，1H)。
通過重複以上實施例所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表12-5所確證的以下式12-5化合物。
表12-5
12-23.
5-[3-(4-苄基-2，6-二氧代-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基]-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-2-腈 A.4-苄基-1-丙-2-炔基-哌嗪-2，6-二酮 在攪拌下向N-苄基亞氨基二乙酸(10mmol)在THF(30ml)中的懸液中加入1，1』-羰基二咪唑(22mmol)。將該反應混合物在攪拌下回流15分鐘。加入炔丙基胺(10mmol)，然後將反應混合物在90℃下攪拌1天。蒸發有機溶劑，然後將殘餘物溶於AcOEt。將有機層用2×100ml 0.1N HCl洗滌，然後經硫酸鈉乾燥。在真空下濃縮溶劑，通過矽膠柱色譜法純化殘餘物，得到1.5g標題化合物，產率62％。Rf＝0.24(正己烷∶AcOEt＝3∶1)。
B.5-[3-(4-苄基-2，6-二氧代-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基]-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-2-腈 向4-苄基-1-丙-2-炔基-哌嗪-2，6-二酮(1.5mmol)和5-溴-4-(2，2-二甲基-丙基氨基)-嘧啶-2-腈(1mmol)在DMF(5ml)中的溶液中加入三乙胺(3.0mmol)、二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(0.1mmol)和碘化銅(I)(0.2mmol)。將該反應混合物在85℃ca下加熱1天。向該反應混合物中加入飽和氯化銨水溶液，然後用兩份50ml AcOEt萃取水層。合併萃取液、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並在真空下濃縮，得到粗產物，通過矽膠柱色譜法純化。產率93％。Rf＝0.3(僅AcOEt)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.96(s，9H)，3.36(d，2H)，3.46(s，4H)，3.65(s，2H)，4.77(s，2H)，6.02-6.04(m，1H)，7.27(d，2H)，7.34(t，3H)，8.16(s，1H)。
實施例13描述取代的4-氨基-嘧啶-2-腈的製備實施例13-1.
4-[{4-[3-(4-乙醯基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基]-苄基}-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-嘧啶-2-腈 A)(2-氯-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-胺 將2，4-二氯嘧啶(25g，0.16mole)和2，2-二甲基-丙基胺(25ml，0.21mole)溶於250ml THF並在室溫下加入K2CO3(33.1g，0.24mmole)。將該混合物在室溫下回流8小時。加入水並將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到22g所需(2-氯-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-胺，產率67％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ0.98(s，9H)，3.02(brs，2H)，5.15(brs，1H)，6.25(d，1H)，8.03(brs，2H)。Rf＝0.32(正己烷∶AcOEt＝1∶1)。
B)(2-氯-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-(4-碘-苄基)-胺
將13-1A(4.8g，24.0mmole)和1-溴甲基-4-碘-苯(8.6g，28.5mmole)溶於25ml DMF並在0℃下加入NaH(1.6g，40.9mmole，60％油懸液)。將該混合物在室溫下攪拌4小時。加入水並將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到10.1g所需(2-氯-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-(4-碘-苄基)-胺，產率100％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.01(s，9H)，3.44(brs，2H)，4.77(brs，2H)，6.30(brs，1H)，6.88(d，2H)，7.65(d，2H)，7.97(d，2H)。Rf＝0.50(正己烷∶AcOEt＝1∶1)。
C)4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-碘-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈 將(2-氯-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-(4-碘-苄基)-胺(10.0g，24.0mmole)和氰化鈉(5.6g，0.12moles)溶於40ml DMSO並在室溫下加入1，4-二氮雜雙環[2，2，2]辛烷(0.27g，2.4mmole)。將該混合物在75℃下攪拌21小時。加入水並將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到8.4g所需4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-碘-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈，產率86％。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.01(s，9H)，3.32(brs，2H)，4.75(brs，2H)，6.46(brs，1H)，6.99(d，2H)，7.69(d，2H)，8.27(brs，2H)。Rf＝0.50(正己烷∶AcOEt)＝1∶1。
D)4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-羥基-丙-1-炔基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈 將13-1C(8.4g，20.7mmole)、丙-2-炔-1-醇(3.6ml，62.0mmole)、CuI(0.4g，2.1mmol)和乙基二異丙基-胺(17.8ml，1.1mole)溶於100ml DMF並在室溫下加入Pd(PPh3)2Cl2(0.7g，1.1mmole)。將該混合物在室溫下攪拌1小時。加入水並將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到6.1g所需4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-羥基-丙-1-炔基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈，產率82％。lH NMR(400MHz，CDCl3)δ1.03(s，9H)，1.69(t，1H)，3.65(brs，2H)，4.43(d，2H)，4.79(brs，2H)，6.48(brs，1H)，7.18(d，2H)，7.43(d，2H)，8.11(brs，2H)。Rf＝0.29(正己烷∶AcOEt＝1∶1)。
E)4-[[4-(3-氯-丙-1-炔基)-苄基]-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-嘧啶-2-腈 將13-1D(6.0g，18.1mmole)和乙基-二異丙基-胺(15.7ml，90.7mmole)溶於120ml二氯甲烷並在0℃下加入甲磺醯氯(3.5ml，45.3mmole)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。加入水並將有機層用二氯甲烷萃取、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到5.4g所需4-[[4-(3-氯-丙-1-炔基)-苄基]-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-嘧啶-2-腈，產率85％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.02(s，9H)，3.65(brs，2H)，4.36(s，2H)，4.81(brs，2H)，6.45(brs，1H)，7.06(d，2H)，7.40(d，2H)，8.11(brs，2H)。Rf＝0.65(正己烷∶AcOEt＝1∶1)。
F)4-[{4-[3-(4-乙醯基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基]-苄基}-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-嘧啶-2-腈 將13-1E(70mg，0.20mmole)溶於3ml DMF並在室溫下加入l-哌嗪-1-基-乙酮(50.1mg，0.40mmole)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。加入水並將有機層用AcOEt萃取、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到67mg所需4-[{4-[3-(4-乙醯基-哌嗪-1-基)-丙-1-炔基]-苄基}-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-嘧啶-2-腈，產率75％。
通過重複以上所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表13-1所確證的以下式13-1化合物。
表13-1



13-25.
1-[3-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙-2-炔基]-哌啶-4-甲酸[1，2，4]三唑-4-基醯胺 將13-18(56mg，0.13mmole)和4-氨基-1，2，4-三唑(21mg，0.25mmole)溶於3ml DMF並在0℃下加入HOBT(36mg，0.26mmole)和WSCD(34mg，0.18mmole)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。加入水並將有機層用AcOEt萃取、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到56mg所需1-[3-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙-2-炔基]-哌啶-4-甲酸[1，2，4]三唑-4-基醯胺，產率56％。
通過重複以上所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表13-2所確證的式13-2化合物。
表13-2
13-27.
4-{(2，2-二甲基-丙基)-[2-氟-4-(3-哌啶-1-基-丙-1-炔基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈 通過重複實施例11-1所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表13-3所確證的以下式13-3化合物。
表13-3
13-29.
4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-[1，2，4]三唑-1-基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈 通過重複實施例13-1-B和13-1-C所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表13-4所確證的以下式13-4化合物。
表13-4
13-324-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-甲基-3H-咪唑-4-基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈 將4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-碘-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈(200mg，0.5mmole)、1-甲基咪唑(0.2ml，2.5mmoles)、三苯基膦(26mg，0.10mmoles)和CsCO3(160mg，0.5mmoles)溶於3ml DMF中並在室溫下加入Pd(OAc)2(10mg，0.05mmole)。將該混合物在120℃下攪拌18小時。加入水並將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到104mg所需的4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-甲基-3H-咪唑-4-基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈，產率59％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.02(s，9H)，3.47(brs，2H)，3.66(s，3H)，4.87(brs，2H)，6.49(brs，1H)，6.97(brs，1H)，7.18(d，2H)，7.35(d，2H)，7.52(s，1H)，8.14(brs，2H)。Rf＝0.07(AcOEt)。
13-334-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-噁唑-2-基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈 向噁唑(0.5ml，7.2mmole)在10ml THF中的-78℃溶液中加入BuLi(5.23ml，8.0mmole，1.6M己烷溶液)。30分鐘後，加入ZnCl2(3.0g，21.7mmole)，然後加入4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-碘-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈(2.9g，7.2mmole)在10ml THF中的溶液。將該反應混合物溫至0℃達1小時。將該反應混合物加入Pd(PPh3)4(0.9g，0.8mmole)並加熱至回流。加入水並通過硅藻土墊過濾，將硅藻土墊用AcOEt洗滌。將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到104mg所需的4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-噁唑-2-基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈，產率16％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.04(s，9H)，3.64(brs，2H)，4.87(brs，2H)，6.54(brs，1H)，7.20(d，2H)，7.23 8s，1H)，7.78(s，1H)，8.00(d，2H)，8.12(brs，1H)。Rf＝0.12(AcOEt∶己烷＝1∶2)。
13-34.
4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-[1，2，4]三唑-1-基甲基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈 A)(4-溴甲基-苄基)(2-氯-嘧啶-4-基)(2，2-二甲基-丙基)-胺 將(2-氯-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-胺(2.0g，10.0mmole)和1，4-二-溴甲基-苯(4.0g，15.0mmole)溶於50ml DMF並在0℃下加入NaH(0.8g，21.0mmole，60％油懸液)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。加入水並將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到0.9g所需(4-溴甲基-苄基)(2-氯-嘧啶-4-基)(2，2-二甲基-丙基)-胺，產率24％。Rf＝0.76(正己烷∶AcOEt＝1∶1)。
B)(2-氯-嘧啶-4-基)(2，2-二甲基-丙基)(4-[1，2，4]三唑-1-基甲基-苄基)-胺 將以上得到的(4-溴甲基-苄基)-(2-氯-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-胺(0.2g，0.5mmole)和1，2，4-三唑(72mg，1.1mmole)溶於5ml DMF並在0℃下加入NaH(44mg，1.1mmole，60％油懸液)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。加入水並將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到160mg所需的(2-氯-嘧啶-4-基)(2，2-二甲基-丙基)(4-[1，2，4]三唑-1-基甲基-苄基)-胺，產率100％。Rf＝0.92，(CH2Cl2∶MeOH＝1∶9)C)4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-[1，2，4]三唑-1-基甲基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈 將(2-氯-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-(4-[1，2，4]三唑-1-基甲基-苄基)-胺(160mg，0.43mmole)和氰化鈉(0.1g，2.2mmole)溶於5ml DMSO並在室溫下加入1，4-二氮雜雙環[2，2，2]辛烷(23mg，0.2mmole)。在室溫下將該混合物於70℃攪拌5小時。加入水並將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到50g所需的4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-[1，2，4]三唑-1-基甲基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈，產率32％。
通過重複實施例13-34-B和13-34-C所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到如以下表13-5所確證的以下式13-5化合物。
表13-5
13-36.
4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-乙基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈 A)4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-乙炔基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈 在室溫下，將4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-碘-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈(2g，4.9mmole)和乙炔基-三甲基-矽烷(3.47ml，24.7mmole)在20ml DMF中的溶液用三乙胺(2.6ml，14.8mmole)、CuI(93mg，0.5mmole)和(Ph3P)2PdCl2(0.2g，0.2mmole)處理。將該混合物在室溫下攪拌過夜。加入水並將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到6.1g所需的4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-三甲基矽烷基乙炔基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈，產率82％。Rf＝0.52(己烷∶AcOEt＝1∶1)。
將粗產物溶於30ml MeOH和10ml水，在室溫下加入CsF(0.5g，3.0mmole)，並將該混合物在室溫下攪拌2小時。將該反應混合物蒸發，然後加入水和二氯甲烷。將有機層用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-乙炔基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈，產率97％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.02(s，9H)，3.07(s，1H)，3.64(brs，2H)，4.81(brs，2H)，6.46(brs，1H)，7.06(d，2H)，7.44(d，2H)， 8.12(s，1H)。Rf＝0.36(己烷∶AcOEt＝2∶1)。
B 4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-乙基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈 將4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-乙炔基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈(47mg，0.11mmole)溶於5ml EtOH並在室溫下加入10％Pd-C(5mg)。將該混合物在室溫、氫氣下攪拌過夜並通過硅藻土墊過濾，將該硅藻土墊用EtOH洗滌。濃縮濾液並將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到38mg所需的4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-乙基-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈，產率77％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.02(s，9H)，1.21(t，3H)，2.62(q，2H)，3.67(brs，2H)，4.73(brs，2H)，6.43(brs，1H)，7.01(d，2H)，7.14(d，2H)，8.08(brs，1H)。Rf＝0.80(己烷∶AcOEt＝1∶1)。
13-36.
4-[{4-[3-(4-乙醯基-哌嗪-1-基)-丙基]-苄基}-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-嘧啶-2-腈 將13-1(47mg，0.11mmole)溶於5ml EtOH並在室溫下加入10％Pd-C(5mg)。將該混合物在室溫、氫氣下攪拌過夜並通過硅藻土墊過濾，將該硅藻土墊用EtOH洗滌。濃縮濾液並將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到38mg所需的4-[{4-[3-(4-乙醯基-哌嗪-1-基)-丙基]-苄基}-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-嘧啶-2-腈，產率80％。
通過重複實施例13-1-F和13-37所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表13-6所確證的以下式13-6化合物。

表13-6 13-40.
4-((2，2-二甲基-丙基)-{4-[3-(4-羥基亞氨基-哌啶-1-基)-丙-1-炔基]-苄基}-氨基)-嘧啶-2-腈 將13-39(130mg，0.3mmole)和吡啶(0.05ml，0.6mmole)溶於5ml二氯甲烷並在室溫下加入鹽酸羥胺(52mg，0.8mmole)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。加入水並將有機層用AcOEt萃取、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到67mg 4-((2，2-二甲基-丙基)-{4-[3-(4-羥基亞氨基-哌啶-1-基)-丙-1-炔基]-苄基)-氨基)-嘧啶-2-腈，產率52％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.02(s，9H)，1.81(pent，2H)，2.33(t，2H)，2.37(t，2H)，2.51(t，2H)，2.54(t，2H)，2.61-2.65(m，4H)，3.89(brs，2H)，4.74(brs，2H)，6.42(brs，1H)，6.82(brs，1H)，7.00(d，2H)，7.13(d，2H)，8.08(s，1H)。Rf＝0.33(AcOEt∶MeOH＝9∶1)。
13-41.
4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-哌啶-1-基-丙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈甲磺酸2-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙基酯 A)4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-氧代-丙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈B)4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(1-甲基-2-氧代-乙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈 將4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-碘-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈(1.6g，3.8mmole)、烯丙醇(0.3ml，4.8mmole)和三乙胺(0.7ml，4.8mmole)溶於30ml乙腈並在室溫下加入Pd(OAc)2(43mg，0.19mmole)。將該混合物在100℃下攪拌19小時。將反應混合物濃縮並將粗殘餘物用水稀釋。將有機層用二氯甲烷萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到672mg不可分離的混合物，為比例為3∶1的4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-氧代-丙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈和4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(1-甲基-2-氧代-乙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈，產率52％。Rf＝0.60(正己烷∶AcOEt＝1∶1)。
C)4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-羥基-丙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈D)4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(2-羥基-1-甲基-乙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈 將4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-氧代-丙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈和4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(1-甲基-2-氧代-乙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈(比例為3∶1)的混合物(672mg，2.0mmole)溶於15ml MeOH並在0℃下加入NaBH4(76mg，2.0mmole)。將該混合物在0℃下攪拌5分鐘。向反應混合物加入5ml丙酮並濃縮。將粗殘餘物用水稀釋並將有機層用二氯甲烷萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到432mg不可分離的混合物，為比例為3∶1的4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-羥基-丙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈和4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(2-羥基-1-甲基-乙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈，產率64％。Rf＝0.38(正己烷∶AcOEt∶＝1∶1)。
E)甲磺酸3-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙基酯F)甲磺酸2-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙基酯
將4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-羥基-丙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈和4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(2-羥基-1-甲基-乙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈(比例為3∶1)的混合物(430mg，1.3mmole)和乙基-二異丙基-胺(0.53ml，3.1mmole)溶於10ml二氯甲烷並在0℃下加入甲磺醯氯(0.12ml，1.5mmole)。將該混合物在室溫下攪拌2小時。加入水並將有機層用二氯甲烷萃取、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到493mg不可分離的混合物，為比例為3∶1的甲磺酸3-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙基酯和甲磺酸2-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙基酯，產率93％。Rf＝0.75(正己烷∶AcOEt＝1∶1)。
G)4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-哌啶-1-基-丙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈H)甲磺酸2-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙基酯 將甲磺酸3-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙基酯和甲磺酸2-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙基酯(比例為3∶1)的混合物(130mg，0.31mmole)溶於3ml DMF並在室溫下加入1-哌嗪(0.06ml，0.64mmole)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。加入水並將有機層用AcOEt萃取、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到56mg所需的4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-(3-哌啶-1-基-丙基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈(A)，產率56％，和24mg所需的甲磺酸2-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙基酯(B)，產率18％。
甲磺酸2-(4-{[(2-氰基-嘧啶-4-基)-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-甲基}-苯基)-丙基酯(B)1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.02(s，9H)，1.34(d，3H)，2.87(s，3H)，3.18，(hex，1H)，3.64(brs，2H)，4.22(dd，1H)，4.27(dd，1H)，4.76(bsr，2H)，6.44(brs，1H)，6.46(d，1H)，7.07(d，2H)，7.19(d，2H)，8.10(s，1H)。Rf＝0.75(正己烷∶AcOEt＝1∶1)。
通過重複實施例13-41-G、H所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表13-7所確證的以下式13-7化合物。
表13-7
13-44.
4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-((E)-3-哌啶-1-基-丙烯基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈 A)4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-((E)-3-氧代-丙烯基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈 將4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-碘-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈(1.3g，2.5mmole)、丙烯醛(0.5ml，7.4mmole)和三乙胺(0.4ml，3.1 mmole)溶於25ml乙腈並在室溫下加入Pd(OAc)2(27mg，0.12mmole)。將該混合物在80℃下攪拌18小時。加入水並將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到423mg所需的4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-((E)-3-氧代-丙烯基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈，產率39％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.02(s，9H)，3.52(brs，2H)，4.79(brs，2H)，6.69(dd，1H)，7.18(d，2H)，7.45(d，2H)，7.45(d，2H)，7.53(d，2H)，8.14(brs，2H)，9.70(d，2H)。Rf＝0.60，(正己烷∶AcOEt)＝1∶1。
B)4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-((E)-3-羥基-丙烯基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈 將13-44A(423mg，1.3mmole)溶於5ml MeOH並在0℃下加入NaBH4(48mg，1.3mmole)。將該混合物在0℃下攪拌10分鐘。向反應混合物加入5ml丙酮並濃縮。將粗產物用水稀釋並將有機層用二氯甲烷萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到342mg所需的4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-((E)-3-羥基-丙烯基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈，產率80％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.02(s，9H)，1.44(t，1H)，3.47(brs，2H)，4.32(t，2H)，4.78(bsr，2H)，6.35(dt，1H)，6.52(brs，1H)，6.59(d，1H)，7.07(d，2H)，7.34(d，2H)，8.09(s，1H)。Rf＝0.38(AcOEt∶己烷＝1∶1)。
C)4-[[4-((E)-3-氯-丙烯基)-苄基]-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-嘧啶-2-腈 將13-44B(342mg，1.1mmole)和乙基-二異丙基-胺(0.42ml，2.4mmole)溶於10ml二氯甲烷並在0℃下加入甲磺醯氯(0.09ml，1.2mmole)。將該混合物在室溫下攪拌16小時。加入水並將有機層用二氯甲烷萃取、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到298mg所需的4-[[4-(3-氯-丙-1-烯)-苄基]-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-嘧啶-2-腈，產率83％。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δ1.02(s，9H)，3.47(brs，2H)，4.22(d，2H)，4.80(bsr，2H)，6.30(dt，1H)，6.54(brs，1H)，6.62(d，1H)，7.07(d，2H)，7.34(d，2H)，8.10(s，1H)。Rf＝0.84(AcOEt∶己烷＝1∶1)。
D)4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-((E)-3-哌啶-1-基-丙烯基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈
將13-44C(88mg，0.25mmole)溶於3ml DMF並在室溫下加入1-哌嗪(0.05ml，0.50mmole)。將該混合物在室溫下攪拌過夜。加入水並將有機層用AcOEt萃取、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到61mg所需的4-{(2，2-二甲基-丙基)-[4-((E)-3-哌啶-1-基-丙烯基)-苄基]-氨基}-嘧啶-2-腈，產率61％。
通過重複以上所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表13-8所確證的以下式13-8化合物。
表13-8

13-54.
4-[[4-((E)-2-氰基-乙烯基)-苄基]-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-嘧啶-2-腈 將4-[(2，2-二甲基-丙基)-(4-碘-苄基)-氨基]-嘧啶-2-腈(0.1g，0.2mmole)、丙烯醛(0.02ml，0.3mmole)和三乙胺(0.04ml，0.3mmole)溶於5ml乙腈並在室溫下加入Pd(OAc)2(2.6mg，0.012mmole)。將該混合物在100℃下攪拌過夜。加入水並將有機層用AcOEt萃取、用鹽水洗滌、經硫酸鎂乾燥並濃縮。將粗產物通過矽膠柱色譜法純化，得到423mg所需的4-[[4-((E)-2-氰基-乙烯基)-苄基]-(2，2-二甲基-丙基)-氨基]-嘧啶-2-腈，產率45％。
通過重複以上所述步驟、採用適合的起始物質和條件，得到以下表13-9所確證的以下式13-9化合物。

表13-9
權利要求
1.式I化合物或其可藥用鹽或酯， 其中R是H、-R2、-OR2或NR1R2，其中R1是H、低級烷基或C3至C10環烷基，且R2是低級烷基或C3至C10環烷基，且其中R1和R2獨立地任選被滷代、羥基、低級烷氧基、CN、NO2或任選單-或二-低級烷基取代的氨基取代；X是＝N-或＝C(Z)-，其中Z是H、-R4、-C≡C-CH2-R5、C(P)＝C(Q)-R3，其中P和Q獨立地為H、低級烷基或芳基，R3是芳基、芳基-低級烷基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、雜環基或雜環基-低級烷基，其中R3獨立地任選被一個或多個、例如1-3個選自以下的基團取代滷代、羥基、氧代、低級烷氧基、CN或NO2，或任選取代的以下基團任選單-或二-低級烷基取代的氨基、芳基、芳基-低級烷基、N-雜環基或N-雜環基-低級烷基，其中任選取代包括1至3個選自滷代、羥基、低級烷氧基、CN、NO2或任選單-或二-低級烷基取代的氨基的取代基，R4是H、芳基、芳基-低級烷基、芳基-低級鏈烯基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、雜環基或雜環基-低級烷基，且其中R5是芳基、芳基-低級烷基、芳氧基、芳醯基或如上所定義的N-雜環基，且其中R5任選被R7取代，其代表1至5個選自如下的取代基滷代、羥基、CN、NO2或氧代，或任選取代的以下基團低級烷氧基、低級烷基、芳基、芳氧基、芳醯基、低級烷基磺醯基、芳基磺醯基、任選單-或二-低級烷基取代的氨基，或N-雜環基，或N-雜環基-低級烷基，其中N-雜環基表示飽和、部分不飽和或芳族含氮雜環部分，該雜環部分通過其氮原子連接，具有3至8個環原子，任選含有另外1、2或3個選自N、NR6、O、S、S(O)或S(O)2的雜原子，其中R6是H或任選取代的以下基團低級烷基、羧基、醯基(包括低級烷基醯基、例如甲醯基、乙醯基或丙醯基，或芳基醯基、例如苯甲醯基)、醯氨基、芳基、S(O)或S(O)2，且其中N-雜環基任選例如與苯或吡啶環稠合為雙環結構，且其中N-雜環基任選與3至8元環烷基或雜環連接形成螺結構，其中所述雜環具有3至10個環成員且含有1至3個選自N、NR6、O、S、S(O)或S(O)2的雜原子，其中R6如上所定義，且其中雜環基表示具有3至10個環成員且含有1至3個選自N、NR6、O、S、S(O)或S(O)2的雜原子的環，其中R6如上所定義，且其中R7任選被1至3個選自如下的取代基取代滷代、羥基、任選單-或二-低級烷基取代的氨基、低級烷基羰基、低級烷氧基或低級-烷基醯氨基；Y是-NR8R9，其中R8是H，或任選取代的以下基團低級烷基、芳基、芳基-低級烷基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、雜環基或雜環基-低級烷基，其中R8任選被R10取代，其代表1至4個選自以下的取代基滷代、羥基、CN、NO2、-O-C(O)-、任選取代的以下基團低級烷基、C3-C10環烷基、低級烷氧基、低級鏈烯基、低級炔基、任選單-或二-低級烷基取代的氨基或N-雜環基(如上所定義)，其中R10任選被R11取代，其代表1至4個選自以下的取代基滷代、羥基、CN、NO2、氧代、任選取代的以下基團任選單-或二-低級烷基取代的氨基、低級烷基、任選-低級烷基取代的COOH、亞磺醯基、磺醯基，或N-雜環基(如上所定義)，其中R11任選被R12取代，其代表1至4個選自以下的取代基滷代、羥基、CN、NO2、氧代、羥基低級烷基、C3-C10環烷基、任選低級烷基-取代的羧基、羥亞胺或如上所定義的N-雜環基，且其中R9獨立地為H，或任選取代的以下基團低級烷基、芳基、芳基-低級烷基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、雜環基或雜環基-低級烷基，且其中R9任選被滷代、羥基、氧代、低級烷氧基、CN、NO2或任選單-或二-低級烷基取代的氨基取代；或Z和Y與它們所連接的碳原子連接在一起形成選自以下的式I化合物， 或 其中R如上所定義；R15是低級烷基、C3-C10環烷基、C3-C10環烷基-低級烷基、NR20R21-低級烷基-，其中T是-O-或直接連接的鍵；R16是NR20R21-低級烷基-或R4，均如上所定義，R20是H、任選取代的以下基團低級烷基、芳基、C3-C10環烷基、低級烷氧基低級烷基C3-C10環烷基-低級烷基或芳基低級烷基，R21是任選取代的以下基團低級烷基、芳基、C3-C10環烷基、低級烷氧基低級烷基、C3-C10環烷基-低級烷基或芳基-低級烷基，或R20和R21形成如前所定義的N-雜環基環，且其中R20或R21獨立地任選被R23取代，其代表1至3個選自以下的取代基滷代、羥基、CN、NO2、氧代、任選單-或二-低級烷基取代的氨基，或任選取代的以下基團低級烷氧基、低級烷基、低級烷氧基羰基、芳基、芳基-低級烷基、芳基-低級鏈烯基、芳氧基、芳醯基、烷基磺醯基、芳基磺醯基或N-雜環基或N-雜環基-低級烷基，其中N-雜環基如上所定義；A是-CH＝或-C(O)-，B是-C＝或-N-，D是-CH＝或-C(O)-且E是-CH＝或-N(R1)，其中R1如上所定義。
2.式Ib、Ic、II或IV的根據權利要求1的化合物或其可藥用鹽或酯， 或 其中R8』是H或任選取代的芳基-低級烷基，其中R8』如以上關於R8所定義任選被取代，且其他標記如上所定義。
3.根據權利要求1的化合物或其可藥用鹽或酯，其選自式VI、VII、VIII或IX化合物， 或 其中的標記如上所定義。
4.根據權利要求1的化合物或其可藥用鹽或酯，選自實施例1、11、12、13的任何一種化合物。
5.根據權利要求1的化合物，其用作藥物。
6.包含根據權利要求1的化合物作為活性成分的藥物組合物。
7.治療患有或易患其中牽涉組織蛋白酶K的疾病或醫學狀況的患者的方法，包括向所述患者施用有效量的根據權利要求1的化合物。
8.根據權利要求1的化合物在製備用於治療性或預防性治療其中牽涉組織蛋白酶K的疾病或醫學狀況的藥物中的用途。
9.製備式I化合物或其鹽或酯的方法，其包括i)為製備其中R2和R15如上所定義的式VI化合物或其可藥用鹽或酯， 將相應的式XIV的2-滷代前體氰化， 其中R2和R15如上所定義且滷代優選為Cl；ii)為製備其中R2和R16如上所定義的式VII化合物或其可藥用鹽或酯， 將式XV的6-羥基前體與R16-滷代前體偶聯， 其中R2和R16如上所定義且滷代優選為Cl；iii)為製備其中R2和R5如上所定義的式VIII化合物或其可藥用鹽或酯， 將式XVI的5-滷代嘧啶前體與相應的丙炔R5-CH2-C≡CH偶聯， 其中R2和R5如上所定義且滷代優選為Br；iv)為製備式IX化合物或其可藥用鹽或酯， 其中R2如上所定義且R8」為如以上對於R8』所定義的任選取代的芳基-低級烷基，將其中R2如上所定義的式XVII的仲胺前體 與相應的R8」-滷代前體偶聯，其中滷代優選為I；v)之後如果需要，將所得產物轉化為其他式I化合物或其鹽或酯。
10.基本上如此處具體參考實施例所述的所有新產物、方法和用途。
全文摘要
本發明提供了式I化合物或其可藥用鹽或酯，其中的標記具有所定義的含義，其為組織蛋白酶K抑制劑並且在藥學上可用於治療其中牽涉組織蛋白酶K的疾病或醫學狀況，例如各種病症，包括炎症、類風溼性關節炎、骨關節炎、骨質疏鬆症或腫瘤。
文檔編號C07D403/12GK1678613SQ03820604
公開日2005年10月5日 申請日期2003年8月29日 優先權日2002年8月30日
發明者E·阿爾特曼, C·貝特斯查爾特, 早川謙二, 入江統, 榊潤一, 巖崎源司, R·拉特曼, M·米斯巴赫, 手納直規 申請人:諾瓦提斯公司