一種從紫錐菊中提取高純度菊苣酸的方法

2023-10-26 05:07:42

專利名稱：一種從紫錐菊中提取高純度菊苣酸的方法
技術領域：
本發明涉及一種中藥製劑及其製備方法，具體地說是一種以紫錐菊為原料制 備髙純度菊苣酸的方法。2、 背景技術紫錐菊是國際上受到普遍重視的一種免疫促進劑和免疫調節劑，其主要生理 活性成分為菊苣酸。現代藥理研究表明菊苣酸具有增強免疫功能、抗炎作用，能抑制透明質酸酶，保護膠原蛋白m免受可導致降解的自由基的影響，具有抑制hiv-i和hiv-1整合酶的作用。從紫錐菊中提取分離菊苣酸的方法已有文獻報導，如吳啟林等[應用大孔吸附樹脂吸附分離技術製備菊苣酸的研究；北京化工大學學報，2004年05期]考察 了 9種大孔吸附樹脂對紫錐菊中菊苣酸的吸附分離性能,確定大孔吸附樹脂吸附 分離菊苣酸的工藝條件，目前產品純度達僅達到20.2 %。曾棟等[大孔吸附樹脂對紫錐菊提取物中菊苣酸分離純化的研究，天然產物研 究與開發，2004年02期]採用大孔吸附樹脂分離純化紫錐菊提取物中免疫活性成分 菊苣酸，7W(v/v)的甲醇-水溶液洗脫，產品中菊苣酸含量達到35%。陳波等[高效液相色譜法製備菊苣酸標準對照品的研究，實用預防醫學，2001 年01期]對高效液相色譜(hplc)方法製備菊苣酸標準對照品進行了研究，建立了 "原料製成水溶液一靜態模分離一醇沉一hplc分離製備一真空濃縮結晶一純度檢 測一產品"的工藝方法，所得產品純度大於99%，製備收得率80%。近年來也出現了與製備菊苣酸有關的專利文獻。 《一種利用菊苣製備菊苣酸的工藝》(中國專利，申請號200410073388.4) 採用"水提一醇沉一中空纖維無機超濾膜過濾一大孔吸附樹脂分離一反相c-18矽 膠層析"的方法，製備了純度為90%的菊苣酸產品。《從紫錐菊製備菊苣酸的方法》(中國專利，申請號200410069076.6)以紫 錐菊為原料，採用包括有機溶劑提取、酸化、溶劑萃取、樹脂分離、溶劑結晶等 的工藝過程，得到純度在96%的菊苣酸產品。上述方法目前存在的不足是所得產品純度較低，或收率較低，或操作比較麻 煩。還不能實現大規模的工業生產。3、發明內容本發明的目的在於克服現有技術的不足，提供一種操作簡便、快速製備高純 度菊苣酸的方法。本發明的目的是提供一種從紫錐菊中提取高純度菊苣酸的方法，其工藝步驟如下1)提取液的製備①取粉碎好的幹紫錐菊根，加3-15倍量的10-95%的乙醇， 常溫浸泡0-24小時，加熱回流0. 5-3小時，分離出提取液備用；②加入藥渣量1-10 倍的IO-95%的乙醇，加熱回流0.5-2小時，分離提取液備用；③合併兩次提取液 備用；2)提取液的大孔吸附樹脂預提純將上述得到的乙醇提取物上AB-8大孔吸 附樹脂柱，先以水衝冼至流出液無色，再以10倍柱體積的5%乙醇洗脫，收集70% 乙醇洗脫液，減壓蒸餾回收溶劑，得到菊苣酸提取物。3)粗提取物的純化採用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-醋酸水為高速逆流色譜兩相 溶劑系統分離純化菊苣酸粗提取物，得到高純度菊苣酸，純度在99%。本發明的方法與現有製備菊苣酸的方法相比，具有如下優勢1、 本發明以大孔吸附樹脂為載體、以乙醇為洗脫溶劑進行預分離，以高速逆 流色譜進行進一步純化，工藝過程綠色環保，對環境無嚴重危害。2、 本發明操作簡單快速，所製備菊苣酸的純度可達99%以上，得率可達90% 以上，純度高，得率高。

圖1是經大孔吸附樹脂預分離後得到的提取物的高效液相色譜圖。 圖2是採用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-醋酸水為高速逆流色譜兩相溶劑系統分離 純化菊苣酸粗提取物的高速逆流色譜圖。 具體實施例方式
實施例11、乙醇提取取粉碎好的幹紫錐菊根100g，加3-15倍量的95%的乙醇溶劑， 常溫浸泡24小時，加熱回流3小時，分離出藥液。加入藥渣量10倍的95%的乙醇， 加熱回流2小時，分離出藥液。合併提取的藥液，採用過濾、離心等方法除去提 取液中的雜質。採用蒸餾或減壓蒸餾的方法回收提取溶劑，得到紫錐菊的乙醇提 取物。大孔吸附樹脂柱預分離將上述得到的乙醇提取物上AB-8大孔吸附樹脂柱， 先以水衝冼至流出液無色，再以10倍柱體積的5%乙醇洗脫，收集70%乙醇洗脫液，
減壓蒸餾回收溶劑，得到菊苣酸提取物。高速逆流色譜純化採用以下方法實現，即①採用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-醋 酸水(正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸水)為高速逆流色譜兩相溶劑系統分離純化菊 苣酸粗提取物，②收集相應組分，回收溶劑後得到高純度菊苣酸。實施例2:取粉碎好的紫錐菊根100g，加1.5L40y。的乙醇，常溫浸泡4小時，加熱回流3 小時，分離出藥液。加入lL95y。乙醇，加熱回流2小時，分離出藥液。合併提取的 藥液，採用過濾的方法除去提取液中的雜質。採用減壓蒸餾的方法回收提取溶劑， 得到紫錐菊的乙醇提取物。將上述得到的乙醇提取物上AB-8大孔吸附樹脂柱，先以水衝冼至流出液無色， 再以10倍柱體積的30%乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液，減壓蒸餾回收溶劑，得 到菊苣酸提取物。採用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-醋酸水為高速逆流色譜兩相溶劑系統分離純化 菊苣酸粗提取物，以溶劑系統的上相為固定相，以下相為流動相，對菊苣酸提取 物進行分離純化，得到高純度菊苣酸。所製備菊苣酸的純度可達99%以上，得率 可達90%以上。實施樹2:取粉碎好的紫錐菊根100g，加lL40y。的乙醇，常溫浸泡10小時，超聲波處理 40min，分離出藥液。加入化40%乙醇，超聲處理30min。合併提取的藥液，過濾 除去提取液中的雜質。採用減壓蒸餾的方法回收提取溶劑，得到紫錐菊的乙醇提 取物。將上述得到的乙醇提取物上AB-8大孔吸附樹脂柱，先以水衝冼至流出液無色， 再以10倍柱體積的30%乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液，減壓蒸餾回收溶劑，得 到提取物。採用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-醋酸水為高速逆流色譜兩相溶劑系統分離纏化 菊苣酸粗提取物，以溶劑系統的上相為固定相，以下相為流動相，對菊苣酸提取 物進行分離純化，得到高純度菊苣酸。所製備菊苣酸的純度可達99%以上，得率 可達90%以上。 -實施例3:取粉碎好的紫錐菊根100g，加1.5L4(m的乙醇，常溫浸泡4小時，加熱回流3 小時，分離出藥液。加入比95%乙醇，加熱回流2小時，分離出藥液。合併提取的 藥液，釆用過濾的方法除去提取液中的雜質。採用減壓蒸餾的方法回收提取溶劑，
得到紫錐菊的乙醇提取物。將上述得到的乙醇提取物上AB-8大孔吸附樹脂柱，先以水衝冼至流出液無色， 再以10倍柱體積的30%乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液，減壓蒸餾回收溶劑，得 到菊苣酸提取物。所製備菊苣酸的純度可達99%以上，得率可達90%以上。
權利要求
1、一種從紫錐菊中提取高純度菊苣酸的方法，其特徵在於工藝步驟為1)提取液的製備①取粉碎好的幹紫錐菊根，加3-15倍量的10-95％的乙醇水溶液，常溫浸泡0-24小時，加熱回流0.5-3小時，過濾出提取液備用；②加入藥渣量1-10倍的10-70％的乙醇水溶液，加熱回流0.5-2小時，過濾出提取液備用；③合併兩次提取液備用；2)提取液的預提純①將上述得到的乙醇提取物上AB-8大孔吸附樹脂柱，先以水衝冼至流出液無色；②再以10倍柱體積的0-5％乙醇洗脫，洗脫液棄去；③第二次使用5-70％的乙醇洗脫，收集洗脫液，回收乙醇，得菊苣酸粗提取物備用；3)粗提取物的純化採用石油醚-乙酸乙酯-甲醇-醋酸水為高速逆流色譜兩相溶劑系統分離純化菊苣酸粗提取物，得到高純度菊苣酸，純度在99％以上。
2、 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於步驟1)中的醇提取還包括了超 聲波提取法。
3、 根據權利要求1所述的方法，其特徵在於步驟3)中的粗提取物的純化還 包括了以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-醋酸水作為髙速逆流色譜的兩相溶劑系統的分 離純化。
全文摘要
本發明涉及一種從紫錐菊中提取高純度菊苣酸的方法，其中包括下述三個步驟一、乙醇提取將粉碎好的紫錐菊根，採用浸泡法或超聲提取等方法用乙醇提取，分離提取液和藥渣；將藥渣再用乙醇提取，所得提取液與第一次提取液合併，分離除去其中的固體雜質，備用；二、大孔吸附樹脂柱預分離將上述乙醇提取法所得提取物回收乙醇後加至大孔吸附樹脂柱上，分別用不同濃度的乙醇洗脫，乙醇洗脫液回收溶劑後得到提取物；三、高速逆流色譜法純化將上述得到的提取物用高速逆流色譜法進行純化，即得到99％以上高純度的菊苣酸。
文檔編號C07C69/732GK101148410SQ20071016520
公開日2008年3月26日 申請日期2007年10月30日 優先權日2007年10月30日
發明者孫愛玲, 柳仁民 申請人:聊城大學