一種全成分桑葉提取物的製備工藝的製作方法
2023-10-06 07:35:44 1
一種全成分桑葉提取物的製備工藝的製作方法
【專利摘要】本發明涉及醫藥保健領域，特別是涉及一種全成分桑葉提取物的製備工藝。本發明提供一種全成分桑葉提取物的製備工藝，包括如下步驟：將桑葉顆粒加入超臨界萃取釜中，使用CO2為提取溶媒進行超臨界提取得提取物1；提取殘留物使用CO2為提取溶媒、乙醇為夾帶劑進行超臨界提取得提取物2；將經過兩次超臨界提取的殘渣使用乙醇作為溶媒進行提取，固液分離，液相濃縮得到提取濃縮液A；所得的固相中加水，加熱煎煮提取後固液分離，所得液相濃縮得到提取濃縮液B；合併A和B噴霧乾燥得到桑葉提取物3；將提取物1、2和3混合即得全成分桑葉提取物。通過以上提取工藝，能夠充分地提取桑葉中各種有效成分和營養成分，並獲得全成分的桑葉提取物。
【專利說明】一種全成分桑葉提取物的製備工藝
【技術領域】
[0001]本發明涉及醫藥保健領域，特別是涉及一種全成分桑葉提取物的製備工藝。
【背景技術】
[0002]桑葉是桑科植物桑，為桑樹(Morus alba L)的乾燥葉，又名家桑、荊桑、桑椹樹、黃桑等，全國大部分地區多有生產，具有降血壓、血脂、抗炎等作用，主要功能為疏散風熱，清肺潤燥，清肝明目。用於風熱感冒，肺熱燥咳，頭暈頭痛，目赤昏花。1993年衛生部確定桑葉既是食品又是藥品。
[0003]桑葉的主要化學成分包括:1)黃酮類:桑葉中黃酮類化合物佔桑葉乾重的1%?3%，是植物界中莖葉含量較高的一類植物。韓國和日本學者從桑葉中分離出9種類黃酮，主要是芸香式(rutin),槲皮素(quercetin),異懈皮式(isoquercitrin),桑式(moracetin)即槲皮素-3-三葡萄糖甙，桑黃酮(kuwanon) I等化合物。2)生物鹼:生物鹼是桑葉的主要活性成份，日本學者Asano等(1994)從桑葉中分離出多種多羥基生物鹼，包括DNJ (1-脫氧野尻黴素)、N-甲基-1-DNJ (N-Me-DNJ),2-氧-a -D 半乳吡喃糖苷-1-DNJ、fagomine、I, 4- 二脫氧-1，4-亞胺基-D-阿拉伯糖醇、1，4- 二脫氧-1，4-亞胺基-(2-氧-β -D-吡喃葡萄糖苷)-D-阿拉伯糖醇和1α，2β，3α，4β_四羥基-去甲茛菪烷(去甲茛菪鹼)等7種生物鹼。其中DNJ(1-脫氧野尻黴素)在植物界中，唯桑葉獨有。腺嘌呤(adenine)，膽鹼(choline),胡蘆巴鹼(trigonelline)。3)植物留醇及三職類成分:桑葉中植物留醇含量比一般植物高3?4倍。主要是豆甾醇(Stigmasterol )、菜油甾醇(Camposterol )、β -谷甾醇β -D-葡萄糖苷(β -sitolsterol β -D-glucoside)、蛇麻脂醇(羽扇豆醇，Lupeol)、內消旋肌醇(Myoinositol)、昆蟲變態激素、牛膝留酮(Inokosterone)、脫皮留酮(Ecdysterone)，羽扇豆醇(IuPeol) , β -谷甾醇(β -sitosterol)及其乙醯衍生物和β _香樹脂醇(β-amyrin)等。4) Y -氨基丁酸(Y-aminobutyric acid):桑葉中豐富的 Y -氨基丁酸(平均含量為226mg/100g)引人注目，Y -氨基丁酸由穀氨酸轉化而來，而桑葉中Y _穀氨酸含量最高(2323mg/100g)。5)桑葉多糖:桑葉中富含桑葉多糖，具有顯著的降血糖和抑制血脂升高的作用。6)香豆精及其式類:香柑內酯(bergaten),傘形花內酯(umbelliferone),東莨菪素(scopoletin),東莨菪式(scopolin),輕基香豆精(hydroxycoumarin)。7)揮髮油:酸性部分含乙酸(acetic acid),丙酸(prop1nicacid), 丁酸(butyric acid),異丁酸(isobutyric acid),糹顏草酸(valericacid),異糹顏草酸(isovaleric acid);已酸(caproicacid);酹性部分含水楊酸甲酯(methyl salicylate),愈創木酹(guaiacol),鄰苯甲酹(O — cresol),間苯甲酌■ (m — cresol),對苯甲酌.(p — cresol), 丁香油酌■ (eugenol)等。8)胺基酸及小肽:胺基酸含量1434.77 μ mol/g (乾重)，主要為穀氨酸(glutamic acid),天冬氨酸(aspartic acid),丙氨酸(ala-nine),甘氨酸(glycine)。此外，尚有r_氨基丁酸(Y-aminobutyric acid), 2-哌唳酸(pipecolic acid), 5-輕基-2-哌唳甲酸(5 —hydroxypipecolic acid),月甫氨酸(proline),精氨酸(arginine),肌氨酸(sarcosine),亮氨酸(leucine),異亮氨酸(isoleucine),酪氨酸(tyrosine),糹顏氨酸(valine),色氨酸(tryptophan),天冬醯胺(as-paragine),穀氨醯胺(glutamine),絲胺酸(serine),賴氨酸(lysine),以及穀胱甘肽(glutath1ne),90%以上為氧化型。7)有機酸及其他化合物:綠原酸(chlorogenic acid),延胡索酸(fumaric acid),掠櫚酸(palmitic acid),掠桐酸乙酯(ethylpalmitate),葉酸(folic acid),亞葉酸(folinic acid),維生素 C (90% 以上為還原型)，精氨酸葡萄糖式(arginineglu-coside), C28及C30-C34燒烴(alkanes),內消旋肌醇(my-oinositol)及溶血素(hemolysin)。
[0004]在藥理功效方面，日本、韓國和中國專家對桑葉化學成份及藥理作用進行了深入研究，研究認為，桑葉次生代謝物的藥理活性主要有以下幾個方面:
[0005]I)抗凝血作用:桑葉提取物能明顯延長小鼠體內全血凝固時間和顯著延長家兔血漿的激活部分凝血活酶(APTI)時間,凝血酶原(PT)時間和凝血酶(TT)時間。由於凝血過程啟動環節份外源性和內源性兩個環節，APTI反映內源性凝血途徑的活性，PT反映外源性凝血途徑的活性，而TT反映的是兩者共同途徑即凝血酶活性。說明桑葉對凝血酶一纖維蛋白原反應有直接抑制作用。
[0006]2)降血壓作用:桑葉中的芸香苷、槲皮素、槲皮苷能增加離體及在位蛙心的收縮力與輸出量，並減少心率。芸香苷使蟾蜍下肢及兔耳血管收縮，槲皮素可擴張冠狀血管，改善心肌循環。Y-氨基丁酸、芸香苷、槲皮素有降血壓的作用。Y-氨基丁酸是神經傳達物質，能促進腦組織的新陳代謝和恢復腦細胞功能，同時，能改善腦部血液流動，增強血管緊張素轉換酶I的活性，促使血壓下降。
[0007]3)降血脂、降膽固醇、抗血栓形成和抗動脈粥樣硬化作用:桑葉有抑制脂肪肝的形成、降低血清脂肪和抑制動脈粥樣硬化形成的作用。活性成分包括DNJ、植物留醇、黃酮類等。桑葉中含有強化毛細血管、降低血液黏度的黃酮類成分，另外桑葉茶內含有抗體內LDL-脂蛋白氧化的成分，所以桑葉在減肥、改善高脂血症的同時，又有預防心肌梗死和腦溢血的作用。日本專家土井佳代證實，桑葉提取物對高脂血症血清脂質升高及動脈粥樣硬化有抑制作用。桑葉茶可使高脂血症大鼠血清高密度脂蛋白(HDL-C)、HDL-C/TC明顯升高(p〈0.05)，總膽固醇(TC)、LDL-C、三醯甘油(TG)明顯降低(p〈0.05)，過氧化脂質(LPO)顯著降低(p〈0.001)，說明桑葉茶可降低血脂、軟化血管、清除體內過氧化物，從而對高脂血症血清脂質升高及動脈粥樣硬化有抑制作用(黃代青等，1995)。
[0008]4)降血糖作用:自古以來，中醫就將桑葉作為治療消渴症(即現代醫學的糖尿病)的中藥應用於臨床，日本古書《吃茶養生記》也記載桑葉有改善「飲水病」(即現代醫學的糖尿病)的作用。國內外研究資料證實，生物鹼和多糖是桑葉中主要的降血糖成分。
[0009]桑葉的降血糖作用是通過兩個途徑實現的:一是通過生物鹼DNJ ( 1-脫氧野尻黴素)對二糖類分解酶活性產生抑制作用，從而抑制小腸對雙糖的吸收，降低食後血糖的高峰值(Kimura, 1995) ;二是通過桑葉生物鹼fagomine及桑葉多糖促進β細胞分必胰島素，而胰島素可以促進細胞對糖的利用、肝糖原合成以及改善糖代謝，最終達到降血糖的效果(陳福君等，1996)。
[0010]從桑葉中分離出的多羥基去甲莨菪鹼具有很強的糖苷酶抑制作用(Asano等，1994);N-Me-DNJ、GAL-DNJ和 fagomine 都可顯著地降低血糖水平，其中 GAL-DNJ和 fagomine降血糖作用最強(Kimura等，1995)。
[0011]5)抑菌、抗炎作用:桑葉汁對大多數革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌以及部分酵母菌有良好的抑制生長作用(樊黎生，2001)。而且所需的抑菌濃度低、pH值範圍為寬(4?9)、熱穩定性強。桑中的芸香苷能顯著抑制大鼠創傷性浮腫，並能阻止結膜炎、耳郭炎、肺水腫的發展。桑葉具有較強的抗炎作用，與祛風、清熱功效相符(陳福君等，1995)
[0012]6)抗病毒、抗腫瘤作用:桑葉能預防癌細胞生成，提高人體免疫力，主要功能成分是DNJ、類黃酮、桑素、Y-氨基丁酸及維生素，能抑制染色體突變和基因突變。DNJ有顯著的抗逆轉錄酶病毒活性(Tierney，1995)。其IG30為1.2?2.5 μ g/mL，且隨DNJ劑量的增力口，抑制力增強(歐陽臻，2003)。DNJ對腫瘤轉移的抑制率是80.5%，其抑制機理可能是DNI通過抑制糖苷酶的活性在腫瘤細胞表面產生未成熟的碳水化合物鏈，削弱了腫瘤的轉移能力。
[0013]朝鮮學者Kim (2000)發現桑葉中分離純化的兩種類黃酮槲皮素_3_β -D吡喃葡萄糖苷和槲皮素-3-7- 二氧-β -D-吡喃葡萄糖苷對人早幼粒白血病細胞(HL-60)的生長表現出顯著的抑制效應。桑葉中的桑素具有抗癌活性，桑葉中的維生素具有抑制變異原效應。
[0014]7)抗衰老、抗疲勞作用:浙江大學臨床藥理研究所通過4年的實驗(趙麗君等，
2004)，證實桑葉具有類似於人參的補益和抗衰老作用。人參屬於熱補，而桑葉屬於清補，無忌限，無論老幼均可使用，且四季皆宜。
[0015]另外，桑葉中所含的槲皮素、酚類化合物、維生素C等成分能通過抑制或清除自由基來防止氧化損傷。桑葉具有類似人參的補益與抗衰老、穩定神經系統功能的作用，能緩解生理變化弓I起的情緒激動，提高體內超氧化物歧化酶的活性，阻止體內有害物質的產生，減少或消除已經產生並積滯於體內的脂褐質(黃東等，2000)。桑葉能提高小鼠對高溫刺激的耐受能力和防止由於應激刺激引起的腎上腺皮質分布功能低下，而當腎上腺功能低下時，桑葉可使之恢復正常。桑葉能延長小鼠遊泳及轉棒時間，具有增強機體耐力作用，能延長果蠅的壽命。能有效地清除生物氧化產生的超氧陰離子，具有延緩衰老的作用(唐法娣等，2000)。
[0016]8)抗絲蟲病作用:單味桑葉注射液有抗絲蟲病的作用，桑葉片可用於治療絲蟲性象皮腫和乳糜尿(姚連初，1996 ;王培義，1999)，其作用機制可能是桑葉所含芸香苷、槲皮素、異槲皮素、香豆素、氯原酸等成分抗炎、消腫、軟化組織及抗菌等作用的綜合結果。
[0017]9)解痙、抗潰瘍作用:桑葉中的槲皮素能降低腸、支氣管平滑肌的張力，其解痙作用強於芸香苷，芸香苷能降低大鼠的胃運動功能，並能解除氯化鋇引起的小腸平滑肌痙攣，皮下注射芸香苷5?10mg/kg能顯著降低大鼠因結紮幽門引起胃潰瘍的病灶數(徐愛良等，
2005)。
[0018]10)改善腸功能、潤腸通便及減肥作用:DNJ礦物質以及小腸內未被吸收的糖類進入大腸後由腸內菌叢作用引起發酵，產生丁酸、丙酸、乳酸、乙酸等有機酸，使腸內環境變成酸性，腸道內容物酸度增大，能抑制有害細菌的增殖，起到調節腸道、改善便秘、改善腹部脹滿感的作用，具有導瀉通便、減少某些急腹症的發生，保護腸黏膜和減肥等作用。
【發明內容】
[0019]桑葉提取物英文名:Mulberry teaf,拉丁名稱:folium Mori,外觀黃綠色或淺黃棕色。桑葉提取物規格品種繁多，應用廣泛。目前採用的桑葉提取物多數是比例提取物和以多糖、總黃酮或者DNJ為指標的提取物。比例提取物是以多糖為指標的桑葉提取物，其提取方法都是用水煎煮方法為基本工藝進行提取。以DNJ為指標的，需要經過離子交換樹脂或者大孔樹脂分離精製的提取物。但根據成分分析，桑葉中的有效成分和營養成分豐富，有脂溶性的和水溶性的，單靠一種提取工藝，很難得到桑葉中的所有有效成分。
[0020]鑑於以上所述現有技術的缺點，本發明發明人研究了一種可以提取出桑葉中全成分的提取工藝，用於解決現有技術中的問題。
[0021]為實現上述目的及其他相關目的，本發明提供一種全成分桑葉提取物的製備工藝，包括如下步驟:
[0022]I)將乾燥桑葉粉碎，所得桑葉顆粒加入到超臨界萃取釜中，使用CO2為提取溶媒進行超臨界提取，分離釜中獲得桑葉提取物I;
[0023]2)將步驟I的提取殘留物使用CO2為提取溶媒、乙醇為夾帶劑進行超臨界提取，在分離釜I中分離獲得超臨界提取物A，在分離釜2中分離獲得乙醇溶液，減壓回收乙醇，得到超臨界提取物B ;合併超臨界提取物A和B，得到桑葉提取物2 ；
[0024]3)將經過兩次超臨界提取的殘渣投入提取罐中，使用乙醇作為溶媒在加熱條件下進行提取，提取完畢後固液分離，所得液相減壓濃縮，過濾後得到提取濃縮液A ;減壓濃縮過程中所獲得的乙醇可以回收循環利用；
[0025]4)在步驟3所得的固相中加水，加熱煎煮提取後固液分離，所得液相真空減壓濃縮後，過濾後得到提取濃縮液B ；
[0026]5)合併提取濃縮液A和B，噴霧乾燥，得到桑葉提取物3 ;將桑葉提取物1、2和3混合即得全成分桑葉提取物。
[0027]優選的，所述桑葉顆粒的粉碎細度為20-40目。
[0028]更優選的，所述桑葉的含水量< 7wt%。
[0029]優選的，所述步驟I中，超臨界提取的條件為:壓力18_26MPa，溫度35_501:，0)2流量為60-160L/min，提取時間2_3h。
[0030]優選的，所述步驟2中，超臨界提取的條件為:壓力18_26MPa，溫度35_501:，0)2流量為60-160L/min，提取時間2_3h。
[0031]優選的，所述步驟2中，所使用乙醇為95-100%乙醇，乙醇的使用量為所述桑葉顆粒重量的0.5-2倍。
[0032]優選的，所述步驟3中，所使用的乙醇為55-65%乙醇，乙醇的使用量為所述桑葉顆粒重量的7.5-8.5倍。
[0033]所述95-100%、55_65%乙醇具體指含95-100wt%、55_65wt%乙醇，餘量均為水。
[0034]優選的，所述步驟3中，提取溫度為回流條件下，提取時間為1.9-2.lh。
[0035]優選的，所述步驟3中，液相減壓濃縮時，濃縮到比重1.05-1.10，過濾的條件為80
目過濾。
[0036]優選的，所述步驟4中，水的使用量為所述桑葉顆粒重量的9.9-10.1倍。
[0037]優選的，所述步驟4中，加熱煎煮的溫度為95_100°C，時間為1.4-1.6h。
[0038]優選的，所述步驟4中，真空減壓濃縮的條件為:壓力0.09-0.lOMPa，溫度為60-75。。。
[0039]優選的，所述步驟4中，真空減壓濃縮時，濃縮到比重1.05-1.10，過濾的條件為100目過濾。
[0040]優選的，所述步驟5中，噴霧乾燥的條件為:進風溫度172-178?，出風溫度72-78。。。
[0041]本發明第二方面提供所述全成分桑葉提取物的製備工藝在桑葉提取物製備領域的應用。
[0042]本發明第三方面提供一種桑葉提取物，由所述全成分桑葉提取物的製備工藝所製備。
[0043]本發明發明人在第一梯度使用超臨界二氧化碳的目的是提取桑葉揮髮油、三萜類和生物鹼等有效成分，如果直接用第二梯度直接提取，夾帶劑需要回收，在回收乙醇時會使揮髮油類成分揮發損失，還有一些脂溶性維生素會受熱破壞，因此直接用二氧化碳提取。第二梯度因為加入乙醇為夾帶劑，增加了二氧化碳的極性，使生物鹼類(dnj)和黃酮苷元類成分更容易溶解出來，同時減少了受熱破壞的可能性。第三梯度用60%乙醇提取，是黃酮苷類成分更容易被提取出來，還有一些極性沒有水溶性強的成分提取更完全。第四梯度使用水加熱提取，主要提取桑葉多糖，胺基酸類、多肽等水溶性成分。通過以上提取工藝，能夠充分地提取桑葉中各種有效成分和營養成分，並獲得全成分的桑葉提取物。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0044]圖1顯示為本發明工藝流程圖。
【具體實施方式】
[0045]以下通過特定的具體實例說明本發明的實施方式，本領域技術人員可由本說明書所揭露的內容輕易地了解本發明的其他優點與功效。本發明還可以通過另外不同的【具體實施方式】加以實施或應用，本說明書中的各項細節也可以基於不同觀點與應用，在沒有背離本發明的精神下進行各種修飾或改變。
[0046]須知，下列實施例中未具體註明的工藝設備或裝置均採用本領域內的常規設備或裝置；所有壓力值和範圍都是指絕對壓力。
[0047]此外應理解，本發明中提到的一個或多個方法步驟並不排斥在所述組合步驟前後還可以存在其他方法步驟或在這些明確提到的步驟之間還可以插入其他方法步驟，除非另有說明；還應理解，本發明中提到的一個或多個設備/裝置之間的組合連接關係並不排斥在所述組合設備/裝置前後還可以存在其他設備/裝置或在這些明確提到的兩個設備/裝置之間還可以插入其他設備/裝置，除非另有說明。而且，除非另有說明，各方法步驟的編號僅為鑑別各方法步驟的便利工具，而非為限制各方法步驟的排列次序或限定本發明可實施的範圍，其相對關係的改變或調整，在無實質變更技術內容的情況下，當亦視為本發明可實施的範疇。
[0048]實施例1
[0049]I)第一次超臨界提取:稱量50kg乾燥桑葉，粉碎細度達到30目顆粒，過30目篩的桑葉顆粒加入到超臨界萃取釜中，在壓力22MPa，溫度42°C，CO2流量為110L/min的條件下，萃取2.5h，在分離釜中分離得到桑葉提取物I——1.1 lkg，提取結束，進行第二次超臨界提取。
[0050]2)第二次超臨界提取:超臨界萃取釜中，在壓力22MPa，溫度42°C，CO2流量為110L/min的條件下，用桑葉投料乾粉質量1.2倍的無水乙醇為夾帶劑，萃取2.5h，在分離釜I中分離得到超臨界提取物A，分離釜2中得到乙醇溶液，回收乙醇達到沒乙醇味道後，得到超臨界提取物B，合併超臨界提取物A和B，得到桑葉提取物2—4.17kg。將超臨界提取殘渣從萃取反應釜中取出，轉提取崗位。
[0051]3)將超臨界提取後的桑葉殘渣投入提取罐中，加桑葉重量8倍量的60%乙醇，回流提取2h，過濾提取液，減壓回收乙醇，濃縮到比重為1.05-1.10，80目過濾備用。得提取濃縮液A。
[0052]4)將步驟3所得的桑葉60%乙醇提取殘渣，加水10倍量，加熱煎煮提取1.5h，離心分離提取液，提取液真空減壓濃縮，真空乾燥的真空壓力為0.09-0.lOMpa，溫度為70度，比重為1.05-1.1左右，100目過濾得到提取濃縮液B。
[0053]5)合併提取濃縮液A和B，噴霧乾燥，進風溫度控制在172_178°C，出風溫度控制在72-78°C。得到桑葉提取物3——7.21kg。
[0054]6)將超臨界提取得到的桑葉提取物I和超臨界提取的桑葉提取物2，加入到桑葉提取物3中混合粉碎均勻，就得到成分全面的桑葉提取物一12.43kg。
[0055]桑葉提取物的提取收率為25%左右。經檢測桑葉提取物中多糖含量30%，桑葉多糖的提取率為95.5%。
[0056]桑葉多糖檢測方法
[0057]對照品溶液的製備:精密稱取105°C乾燥至恆重的葡萄糖對照適量，加水製成每Iml含0.1mg的溶液，即得。
[0058]標準曲線的製備:分別精密吸取對照品溶液0.2ml,0.4ml,0.6ml,0.8ml、1.0ml、1.2ml，置1ml具塞試管中，加水至2.0ml，精密加入硫酸蒽酮溶液(精密稱取蒽酮0.lg，力口80%的硫酸溶液10ml使溶解，搖勻)6ml，搖勻，置水浴中加熱15分鐘，取出，放入冰水浴中冷卻15分鐘，以相應的試劑為空白，照紫外一可見分光光度法(附錄VA)，在625nm波長處測定吸光度，以吸光度為縱坐標，濃度為橫坐標，繪製標準曲線。
[0059]供試品溶液的製備:取樣品粉末0.3g，精密稱定，置園底燒瓶中，加80%乙醇10ml回流提取lh，趁熱過濾，殘渣用80%乙醇洗滌(10mlX3)。殘渣連同濾紙置於燒杯中，加蒸餾水100ml，加熱提取lh，趁熱過濾，殘渣用熱水洗滌(10ml X 3)，洗液併入濾液，放冷後移入250ml量瓶中，稀釋至刻度。
[0060]測定法:精密量取供試品溶液2.0ml，置1ml具塞試管中，照標準曲線製備項下的方法，自「精密加入硫酸蒽酮溶液6ml」起，依法測定吸光度，從標準曲線上讀出供試品溶液中含葡萄糖的重量(mg)，計算，即得。
[0061]實施例2
[0062]I)第一次超臨界提取:稱量50kg乾燥桑葉，粉碎細度達到20目顆粒，過20目篩的桑葉顆粒加入到超臨界萃取釜中，在壓力26MPa，溫度35°C，CO2流量為60L/min的條件下，萃取3h，在分離釜中分離得到桑葉提取物I——1.0lkg,提取結束，進行第二次超臨界提取。
[0063]2)第二次超臨界提取:超臨界萃取釜中，在壓力26MPa，溫度35°C，C02流量為60L/min的條件下，用桑葉投料乾粉質量2倍的無水乙醇為夾帶劑，萃取2h，在分離釜I中分離得到超臨界提取物A，分離釜2中得到乙醇溶液，回收乙醇達到沒乙醇味道後，得到超臨界提取物B，合併超臨界提取物A和B，得到桑葉提取物2— 3.97kg。將超臨界提取殘渣從萃取反應釜中取出，轉提取崗位。
[0064]3)將超臨界提取後的桑葉殘渣投入提取罐中，加桑葉重量7.5倍量的60%乙醇，回流提取2.lh，過濾提取液，減壓回收乙醇，濃縮到比重為1.05-1.10，80目過濾備用。得提取濃縮液A。
[0065]4)將步驟3所得的桑葉60%乙醇提取殘渣，加水10.1倍量，加熱煎煮提取1.4h，離心分離提取液，提取液真空減壓濃縮，真空乾燥的真空壓力為0.09-0.lOMpa，溫度為60度，比重為1.05-1.1左右，100目過濾得到提取濃縮液B。
[0066]5)合併提取濃縮液A和B，噴霧乾燥，進風溫度控制在172_178°C，出風溫度控制在72-780C。得到桑葉提取物3——6.99kg。
[0067]6)將超臨界提取得到的桑葉提取物I和超臨界提取的桑葉提取物2，加入到桑葉提取物3中混合粉碎均勻，就得到成分全面的桑葉提取物——11.95kg。
[0068]桑葉提取物的提取收率為24%左右。經檢測桑葉提取物中多糖含量31%，桑葉多糖的提取率為94.8%。
[0069]實施例3
[0070]I)第一次超臨界提取:稱量50kg乾燥桑葉，粉碎細度達到40目顆粒，過40目篩的桑葉顆粒加入到超臨界萃取釜中，在壓力18MPa，溫度50°C，CO2流量為160L/min的條件下，萃取2h，在分離釜中分離得到桑葉提取物I——0.97kg，提取結束，進行第二次超臨界提取。
[0071]2)第二次超臨界提取:超臨界萃取釜中，在壓力18MPa，溫度50°C，CO2流量為160L/min的條件下，用桑葉投料乾粉質量0.5倍的無水乙醇為夾帶劑，萃取3h，在分離釜I中分離得到超臨界提取物A，分離釜2中得到乙醇溶液，回收乙醇達到沒乙醇味道後，得到超臨界提取物B，合併超臨界提取物A和B，得到桑葉提取物2—4.05kg。將超臨界提取殘渣從萃取反應釜中取出，轉提取崗位。
[0072]3)將超臨界提取後的桑葉殘渣投入提取罐中，加桑葉重量8.5倍量的60%乙醇，回流提取1.9h，過濾提取液，減壓回收乙醇，濃縮到比重為1.05-1.10，80目過濾備用。得提取濃縮液A。
[0073]4)將步驟3所得的桑葉60%乙醇提取殘渣，加水9.9倍量，加熱煎煮提取1.6h，離心分離提取液，提取液真空減壓濃縮，真空乾燥的真空壓力為0.09-0.lOMpa，溫度為75度，比重為1.05-1.1左右，100目過濾得到提取濃縮液B。
[0074]5)合併提取濃縮液A和B，噴霧乾燥，進風溫度控制在172_178°C，出風溫度控制在72-78°C。得到桑葉提取物3——7.31kg。
[0075]6)將超臨界提取得到的桑葉提取物I和超臨界提取的桑葉提取物2，加入到桑葉提取物3中混合粉碎均勻，就得到成分全面的桑葉提取物一12.33kg。
[0076]桑葉提取物的提取收率為25%左右。經檢測桑葉提取物中多糖含量30%，桑葉多糖的提取率為94.7%。
[0077]綜上所述，本發明有效克服了現有技術中的種種缺點而具高度產業利用價值。
[0078]上述實施例僅例示性說明本發明的原理及其功效，而非用於限制本發明。任何熟悉此技術的人士皆可在不違背本發明的精神及範疇下，對上述實施例進行修飾或改變。因此，舉凡所屬【技術領域】中具有通常知識者在未脫離本發明所揭示的精神與技術思想下所完成的一切等效修飾或改變，仍應由本發明的權利要求所涵蓋。
【權利要求】
1.一種全成分桑葉提取物的製備工藝，包括如下步驟: 1)將乾燥桑葉粉碎，所得桑葉顆粒加入到超臨界萃取釜中，使用CO2為提取溶媒進行超臨界提取，分離釜中獲得桑葉提取物I; 2)將步驟I的提取殘留物使用CO2為提取溶媒、乙醇為夾帶劑進行超臨界提取，在分離釜I中分離獲得超臨界提取物A，在分離釜2中分離獲得乙醇溶液，減壓回收乙醇，得到超臨界提取物B ;合併超臨界提取物A和B，得到桑葉提取物2 ； 3)將經過兩次超臨界提取的殘渣投入提取罐中，使用乙醇作為溶媒在加熱條件下進行提取，提取完畢後固液分離，所得液相減壓濃縮，過濾後得到提取濃縮液A ; 4)在步驟3所得的固相中加水，加熱煎煮提取後固液分離，所得液相真空減壓濃縮後，過濾後得到提取濃縮液B; 5)合併提取濃縮液A和B，噴霧乾燥，得到桑葉提取物3;將桑葉提取物1、2和3混合即得全成分桑葉提取物。
2.如權利要求1所述的一種全成分桑葉提取物的製備工藝，其特徵在於，所述桑葉顆粒的粉碎細度為20-40目，所述桑葉的含水量< 7wt%。
3.如權利要求1所述的一種全成分桑葉提取物的製備工藝，其特徵在於，所述步驟I中，超臨界提取的條件為:壓力18-26MPa，溫度35_50°C，CO2流量為60_160L/min，提取時間2-3h。
4.如權利要求1所述的一種全成分桑葉提取物的製備工藝，其特徵在於，所述步驟2中，超臨界提取的條件為:壓力18-26MPa，溫度35-50°C，C02流量為60-160L/min，提取時間2-3h。
5.如權利要求1所述的一種全成分桑葉提取物的製備工藝，其特徵在於，所述步驟2中，所使用乙醇為95-100%乙醇，乙醇的使用量為所述桑葉顆粒重量的0.5-2倍。
6.如權利要求1所述的一種全成分桑葉提取物的製備工藝，其特徵在於，所述步驟3中，所使用的乙醇為55-65%乙醇，乙醇的使用量為所述桑葉顆粒重量的7.5-8.5倍。
7.如權利要求1所述的一種全成分桑葉提取物的製備工藝，其特徵在於，所述步驟3中，提取溫度為回流條件下，提取時間為1.9-2.lh。
8.如權利要求1所述的一種全成分桑葉提取物的製備工藝，其特徵在於，所述步驟4中，水的使用量為所述桑葉顆粒重量的9.9-10.1倍。
9.如權利要求1所述的一種全成分桑葉提取物的製備工藝，其特徵在於，所述步驟4中，加熱煎煮的溫度為95-100°C，時間為1.4-1.6h。
10.如權利要求1所述的一種全成分桑葉提取物的製備工藝，其特徵在於，所述步驟4中，真空減壓濃縮的條件為:壓力0.09-0.lOMPa，溫度為60_75°C。
11.如權利要求1所述的一種全成分桑葉提取物的製備工藝，其特徵在於，所述步驟5中，噴霧乾燥的條件為:進風溫度172-178°C，出風溫度72-78°C。
12.如權利要求1-11任一權利要求所述的全成分桑葉提取物的製備工藝在桑葉提取物製備領域的應用。
13.一種桑葉提取物，由如權利要求1-11任一權利要求所述的全成分桑葉提取物的製備工藝所製備。
【文檔編號】A61K36/605GK104274534SQ201310277482
【公開日】2015年1月14日 申請日期:2013年7月3日 優先權日:2013年7月3日
【發明者】周伯揚 申請人:周伯揚