一種治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物及其製備方法和用途的製作方法
2023-10-08 02:41:49 2
專利名稱：一種治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物及其製備方法和用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物，具體地說，是以中藥材為原料製備的藥物組合物及其製備方法和用途，屬中藥領域。
背景技術：
潰瘍性結腸炎是一種原發的，非特異性結腸慢性疾病。結腸鏡下可見僅侵犯結腸的黏膜和黏膜下層，並有糜爛和淺表潰瘍。
目前，西醫治療潰瘍性結腸炎主要有以下幾類藥物磺胺類、抗生素類、滅滴靈、激素治療、口服皮質激素、局部給藥、免疫抑制劑；上述西藥通過長期藥效試驗及臨床試驗均證明具有可靠的治療效果，但是，大多毒性大，副作用多，比如磺胺類口服後常有噁心嘔吐、頭痛、全身不適，或引起白細胞減少、關節痛、皮疹、蛋白尿等；抗生素口服易導致胃腸道刺激症狀；靜脈用藥毒副作用大；免疫抑制劑對骨髓造血功能影響大，在用藥過程中應定期複查骨髓象；外用洗劑用藥的體位限制，患者使用不方便。
中醫理論將潰瘍性結腸炎分屬瀉洩、痢疾、便血、腸風、髒毒等範疇。其致病原因有臟腑虛弱、感受外邪、飲食所傷及情志失調等，其基本病機為脾胃氣虛、溼熱之邪蘊結於大腸，致熱毒痢疾、腹痛裡急後重、下痢膿血。根據病因，治療原則主要以健脾益氣治其本，以清熱燥溼、涼血解毒、活血化瘀等治其標。與西藥相比，中醫藥治療本病具有辨證靈活、治法多樣、療效可觀、毒副作用少等優點，且更能針對潰瘍性結腸炎的病因。
目前，已有中藥材黃芪、苦參單獨使用或分別在組方中使用治療潰瘍性結腸炎的相關報導如陳治水等用健脾靈片(黃芪、黨參、白朮、當歸、白芍、木香、延胡索、烏梅、兒茶、砂仁、甘草)治療潰瘍性結腸炎300例，近期治癒203例，顯效64例，好轉26例，總有效率97.7％(中醫藥治療難治性潰瘍性結腸炎的臨床研究.中國中西醫結合雜誌，1994，14400)；楊森用本發明藥物苦參湯(紫草、苦參、地榆炭、白頭翁、五倍子)灌腸用於潰瘍性結腸炎溼熱蘊結、血瘀腸絡，療效較好(中藥保留灌腸治療潰瘍性結腸炎186例.甘肅中醫，1994，711)。這些藥物原料組方根據中醫理論，針對不同的病因、病機，不同的治法治則，藥效明確，但劑型多為傳統湯劑或外用洗劑，使用有體位限制，不方便。李士玉，丹參和黃芪注射劑在潰瘍性結腸炎中的臨床應用，胃腸病學和肝病學雜誌，2000年6月第9卷第2期報導了黃芪注射劑治療潰瘍性結腸炎的用途，由於中藥注射劑成分複雜，毒副作用大，患者使用亦不方便。陝西中醫2002年第23卷第7期，609-610.報導了治療慢性潰瘍性結腸炎的方法內服方潰瘍結腸湯，基本方藥組成黃芪、白朮各15g，川黃連、甘草各10g，地榆、白芨各20g，罌粟殼、扁豆、白芍、廣木香各12g，三七粉3g(衝服)。外用灌腸方潰結合劑組成苦參、白芨、仙鶴草各30g，黃連、黃柏、五倍子、孩兒茶、枯礬各10g，血竭、冰片各3g(另包)，加水2000ml煎濃縮為600ml裝瓶備用。取上藥液200ml，加入雲南白藥1g，甲硝唑0.4g，利福平0.3g，痢特靈0.2g，654-II 10mg，使溶解，保留灌腸，該治療方法中分別使用黃芪、苦參，且服用途徑不同。
目前也有黃芪、苦參同時使用治療其它疾病的報導，比如陝西中醫，2003年第24卷第3期，231-232.報導了組方苦參100g、黃芪100g、黃連100g、黃柏100g、蛇床子300g，煎水外敷，用於治療尖銳溼疣；中華醫學寫作雜誌，2002年第9卷第16期，1282-1283.報導了組方板藍根15-20g，蒲公英20-30g、苦參15g、當歸15g、白芍15g、五味子15g、黃茵15g、白朮15g、獲芬15g、柴胡15g、青陳皮各15g、丹參15g、桃仁15g、龍膽草15g、生石決明30g(先煎)、砂仁15g、焦三仙各15g、苡仁15g、竹葉15g、甘草15g，煎水內服，用於慢性B肝；陝西中醫2001年第22卷第11期，650.報導了原料組方娛蟻2條，當歸、黃芪各30g，苡仁、海螵蛸各20g、益母草12g，膽草、白朮、柴胡、黃芩各10g，苦參、枸杞、虎杖、白花蛇舌草、半枝蓮各15g，水煎內服，用於治療重度宮頸糜爛；中華醫藥學雜誌，2003年第2卷第9期，65-66.報導了複方苦參注射液苦參鹼50mg，黃芪生藥0.5g(每毫升)用於白細胞減少症，具有明顯的升白作用；中醫藥信息2001年第18卷第4期，19.報導了原料組方黃芪、苦參各30g、麥門冬、五味子、玄參、常山、丹參、炙甘草各15g，白參(先)、桔梗、柴胡、升麻各10g。水煎內服，用於治療心律失常，等等。
由於中醫藥獨特的用藥體系，不同藥物配伍，藥物選擇不同，用法和用量不同，產生的藥效不相同。雖然已有中藥材黃芪、苦參同時使用治療其它疾病，或分別使用治療潰瘍性結腸炎的報導，但目前尚無兩味原料藥物合用治療潰瘍性結腸炎的相關報導。
發明內容
本發明的技術方案是提供了一種新的治療結腸炎的藥物組合物，具體地說，是以黃芪、苦參為原料製備的藥物組合物，本發明的另一技術方案是提供了藥物組合物的製備方法和用途。
本發明提供了一種含有由下述重量配比的原料製備而成的藥物組合物在製備治療潰瘍性結腸炎的藥物中的用途黃芪2～6份、苦參3～7份。
本發明還提供了一種由含有重量配比為黃芪2～6份、苦參3～7份的原料製備而成的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物。
其中，黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.的乾燥根。
苦參為豆科植物苦參Sophora flavescens Ait.的乾燥根。
進一步地，它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑黃芪2～4份、苦參4～6份。
更進一步地，它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑黃芪4份、苦參4份。
本發明藥物組合物是由黃芪的原粉或水提取物或醇提取物與苦參的原粉或水提取物或醇提取物混合為活性成分，加上藥學上可接受的輔料或輔助性成分製備而成的藥劑。
其中，所述的藥劑是口服製劑和外用製劑。
進一步地，所述的口服製劑是顆粒劑、丸劑、散劑、片劑、膠囊劑、口服液、結腸靶向製劑；所述的外用製劑是直腸用栓劑、洗液。
其中，每製劑單位含有黃芪皂苷提取物10～45份、黃芪多糖提取物5～30份、苦參鹼5～18份、氧化苦參鹼15～52份。
所述的每製劑單位指片劑中的每片、顆粒劑中的每10g、膠囊劑中的每粒、丸劑中的每丸，散劑中的每10g，液體製劑(口服液、洗劑、合劑)中的每ml，栓劑中的每粒。
其中，所述的結腸靶向製劑每製劑單位是由下述重量配比的原料製備而成取黃芪2～6份，苦參3～7份中提取的相應量的黃芪皂苷提取物10～45份、黃芪多糖提取物5～30份、苦參鹼5～18份、氧化苦參鹼15～52份、澱粉47～93份、丙烯酸樹脂II型或丙烯酸樹脂S100型4～15份、鄰苯二甲酸二乙酯0.5～1.5份、吐溫-80 0.5～1份。
進一步地，所述的結腸靶向製劑每製劑單位是由下述重量配比的原料製備而成黃芪4份，苦參4份中提取的相應量的黃芪多糖提取物19份、黃芪皂苷提取物27.5份、苦參鹼11.5份、氧化苦參鹼35份、加入澱粉50份、丙烯酸樹脂III型或丙烯酸樹脂S100型11份、鄰苯二甲酸二乙酯1份、吐溫-800.5份。
該結腸靶向製劑輔料選擇的配伍依據如下上述結腸靶向製劑製備成片劑，原料中黃芪多糖提取物、黃芪皂苷提取物粘性較大，難以制粒壓片，加入適量澱粉，既能降低物料的粘性，又能調整藥物劑量，便於製劑成型，通過試驗確定了處方中澱粉的最佳用量；以pH依賴型的包衣材料丙烯酸樹脂III型或丙烯酸樹脂S100型為成膜材料，鄰苯二甲酸二乙酯為增塑劑，吐溫-80為增溶劑，配製成包衣液，以包衣後的藥物的體內外釋放度為指標，篩選出了最佳的包衣配方，達到理想的結腸靶向的目的。該靶向製劑的靶向釋藥是利用了胃液、小腸液、結腸液的pH值依次增大的生理特點，採用在胃和小腸液pH環境下不溶解，而在結腸液pH環境下溶解的材料丙烯酸樹脂III型或丙烯酸樹脂S100型作為主要的包衣材料，使藥物在丙烯酸樹脂的保護下在胃和小腸基本不溶解釋藥而在結腸中溶解從而達到結腸定位給藥的目的。
本發明還提供了該藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、稱取各重量配比的原料黃芪2～6份，苦參3～7份；b、取黃芪的原粉或水提取物或醇提取物與苦參的原粉或水提取物或醇提取物混合，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分製備成藥學上常用的藥劑。
其中本發明藥物結腸靶向片具體製備方法為取黃芪中提取的黃芪多糖提取物、黃芪皂苷提取物以及苦參中提取的苦參鹼、氧化苦參鹼混合，加入54％(w/w)藥粉量澱粉混勻，按片劑一般工藝制粒壓片，得本發明藥物素片；配製含丙烯酸樹脂III或丙烯酸樹脂S1006％、鄰苯二甲酸二乙酯0.56％、吐溫-800.32％的85％(重量比)乙醇包衣液；以11ml/min的速度噴入包衣液，包衣鍋轉速為18r/min，使藥片增重8.6％，即得本發明藥物結腸靶向片劑。
本發明還提供了該藥物組合物在製備治療潰瘍性結腸炎的藥物中的用途。
本發明藥物組合物原料是在中醫藥理論的指導下，精心篩選擬定。由健脾益氣藥物和清熱燥溼止血藥物兩部分組成，能達到標本兼治之效。同時，根據現代中醫藥的研究結果表明，健脾益氣藥物中含有免疫活性較強的成分，能增強機體免疫功能，促進巨噬細胞吞噬和細胞免疫，具有雙向免疫調節作用；而清熱燥溼止血藥物中含有抗菌、抗炎作用的活性成分，據文獻報導，該類成分對多種致炎劑引起的炎症反應都有明顯的抑制作用，其抗炎強度與氫化可的松相似，且體內外均有抗菌作用，體內強度與氯黴素相當；同時，該類成分可降低過敏介質的釋放，抑制潰瘍性結腸炎發作時免疫功能的亢進。從現代醫學對潰瘍性結腸炎病因病機的認識，這些成分相關藥理活性的存在，進一步證實了該處方組方的科學合理。
本發明藥物組合物的活性物質主要來源於黃芪、苦參兩味原料藥，是從多個大複方中經篩選確定的最佳原料藥及最佳配比，當藥味少時，比大複方更容易確定中藥裡的有效物質，藥效成分清楚是現代製藥中對藥物的基本要求；同時，藥效成分清楚還便於製劑工藝及藥品質量控制，符合現代中藥製劑的要求；並且，由於原料用量小，成本較大複方節約。
本發明藥物組合物原料組方精煉、藥物服用劑量小、物質基礎明確、療效確切、毒副作用小的優點；本發明結腸靶向製劑具有劑型新穎、藥物直接定位於靶區(結腸)，使靶區藥物濃度高於其它正常組織，降低全身副作用，且服用方便、服用量更小、物質基礎明確、療效更為顯著。
顯然，根據本發明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。
以下通過實施例形式的具體實施方式
，對本發明的上述內容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發明上述主題的範圍僅限於以下的實例。凡基於本發明上述內容所實現的技術均屬於本發明的範圍。
具體實施例方式
實施例1 本發明藥物顆粒劑的製備取黃芪1333g加12倍量水，浸泡0.5小時，煎煮三次，每次2小時，所得提取液減壓濃縮至相對密度1.15g/ml，得黃芪濃縮液。另取苦參1556g加6倍量60％乙醇回流提取3次，每次2h，所得提取液減壓回收乙醇，濃縮至相對密度1.15g/ml，得苦參濃縮液。將黃芪濃縮液和苦參濃縮液按處方量混合均勻，加適量蔗糖、糊精製軟材，過一號篩制粒，所得溼顆粒50℃乾燥，過一號篩整粒，分裝即得成品1000g。
規格15g/袋，每袋相當於黃芪生藥20g、苦參生藥23.3g。
實施例2 本發明藥物丸劑的製備取黃芪200g、苦參200加12倍量水，浸泡0.5小時，煎煮三次，每次2小時，所得提取液減壓濃縮至相對密度1.12g/ml，得黃芪濃縮液。苦參100g飲片60℃乾燥，粉碎過五號篩，得苦參細粉。苦參細粉用黃芪清膏泛製成丸，50℃乾燥得本發明藥物丸劑1000丸。
規格0.16g/丸，每丸相當於黃芪生藥0.2g、苦參生藥0.3g。
實施例3 本發明藥物片劑的製備取黃芪200g、苦參300g按實施例1項下方法，製備黃芪、苦參稠浸膏，加入適量澱粉，沸騰制粒，得幹顆粒，加入適量滑石粉，混勻，壓片，包薄膜衣得本發明藥物片劑1000片。壓片工藝參數為轉速25轉/分，壓片壓力12N；包衣工藝參數為進風溫度為70℃，出風溫度為30～35℃，片床溫度為35～40℃，包衣鍋轉速為6轉/分，以114ml/min的速度噴入18％～22％的歐巴代水溶液，用量為素片總重的3％。
規格0.5g/片，每片相當於黃芪生藥1.25g、苦參生藥1.92g。
實施例4 本發明藥物膠囊劑的製備取黃芪15g、苦參20g按實施例1項下方法製備提取濃縮液，加適量澱粉，混勻，50℃乾燥，所得幹浸膏粉碎，過六號篩，加硬脂酸鎂適量，裝膠囊得成品12粒。
規格0.4g/粒，每粒相當於黃芪生藥1.25g、苦參生藥1.67g。
實施例5 本發明藥物散劑的製備取苦參10g、黃芪15g分別淨選、淋洗去雜質，60℃乾燥，粉碎，過7號篩，得苦參、黃芪藥粉。按處方劑量混合，分裝，得本發明藥物散劑25g。
實施例6 本發明藥物栓劑的製備取黃芪30g、苦參30g按實施例1項下方法製備提取濃縮液，所得提取濃縮液按處方混合均勻，噴霧乾燥得黃芪、苦參混合藥粉。另取96％聚乙二醇1000、4％聚乙二醇4000，50℃加熱使基質熔融，加入藥粉，攪拌均勻，迅速注入模具中，冷藏，出模，分裝得成品4粒。
規格2.5g/粒，每粒相當於黃芪生藥7.5g、苦參7.5g。
實施例7 本發明藥物合劑的製備苦參飲片45g、乾燥，粉碎，過二號篩，得苦參粗粉，0.1％HCl溶液，浸泡，滲漉，得苦參滲漉液，加氫氧化鈉，調節pH7.0，加熱濃縮至相對密度1.05～1.15，50℃加入3/萬甲殼素，除雜，得苦參純化液，加熱濃縮至適量，得苦參濃縮液。黃芪30g加水煎煮三次，每次1小時，得黃芪水提液，加熱濃縮至相對密度1.15～1.18，加乙醇沉澱除雜，靜置，離心，棄去沉澱，上清液回收乙醇，濃縮至適量，得黃芪濃縮液。苦參濃縮液、黃芪濃縮液按處方混合，加蜂蜜、山梨酸適量混勻，加無菌水配液，粗濾、精濾得澄清藥液，灌裝，滅菌得成品45ml。
規格每毫升相當於黃芪0.67g、苦參1g。
本發明除了以藥材黃芪、苦參為原料製備本發明藥物，還可以用藥材半成品黃芪多糖提取物、黃芪皂苷提取物總量與苦參鹼、氧化苦參鹼總量的配比，可通過優選確定最佳半成品的配方。
實施例8 本發明藥物灌腸劑的製備方法a、稱取原料蒲公英30克、黃芪30克、苦參30克、桂枝10克、石榴皮10克、草寇10克；用法水煎煮兩次，煎液濃縮至100ml，每晚保留灌腸一次，保持6小時以上，半月為一療程，一般治療兩個療程，中間休息4～5d。
療效有效率為87.9％，表現為臨床症狀改善或消失，大便常規化檢查正常或好轉，內鏡檢查腸黏膜基本正常或炎症消退。
b、稱取原料黃芪30克、黨參10克、苦參20克、黃連3克、黃芩3克、黃柏3克、丹參10克、三七3克；用法水煎煮兩次，煎液內服，一日三次。
實施例9 本發明藥物結腸靶向製劑的製備取黃芪中提取的黃芪多糖提取物78克、黃芪皂苷提取物117克以及苦參中提取的苦參鹼46.8克、氧化苦參鹼135.2克混合，加入120克澱粉混勻，按片劑一般工藝制粒壓片，得本發明藥物素片1000片；取39克丙烯酸樹脂III或丙烯酸樹脂S100、3.9克鄰苯二甲酸二乙酯、2.6克吐溫-80加入85％乙醇配製成濃度為6.88％(w/v)的包衣液661ml；將包衣液以11ml/min的速度噴入，包衣鍋轉速為18r/min，進風溫度為70℃，出風溫度為30～35℃，片床溫度為35～40℃，使藥片增重9.2％，即得本發明藥物結腸靶向片。
規格0.54g/片。
實施例10 本發明藥物結腸靶向製劑的製備取黃芪中提取的黃芪多糖提取物49.4克、黃芪皂苷提取物71.5克以及苦參中提取的苦參鹼29.9克、氧化苦參鹼91克混合，加入130克澱粉混勻，按片劑一般工藝制粒壓片，得本發明藥物素片1000片；取28.6克丙烯酸樹脂III或丙烯酸樹脂S100、2.6克鄰苯二甲酸二乙酯、1.3克吐溫一80加入85％乙醇配製成濃度為6.88％(w/v)的包衣液390ml；將包衣液以11ml/min的速度噴入，包衣鍋轉速為18r/min，進風溫度為70℃，出風溫度為30～35℃，片床溫度為35～40℃，使藥片增重8.6％，即得本發明藥物結腸靶向片。
規格0.40g/片。
實施例11 本發明藥物結腸靶向製劑的製備取黃芪中提取的黃芪多糖提取物13克、黃芪皂苷提取物26克以及苦參中提取的苦參鹼13克、氧化苦參鹼39克混合，加入242克澱粉混勻，按片劑一般工藝制粒壓片，得本發明藥物素片1000片；取10.4克丙烯酸樹脂III或丙烯酸樹脂S100、1.3克鄰苯二甲酸二乙酯、1.3克吐溫-80加入85％乙醇配製成濃度為6.88％(w/v)的包衣液189ml；將包衣液以11ml/min的速度噴入，包衣鍋轉速為18r/min，進風溫度為70℃，出風溫度為30～35℃，片床溫度為35～40℃，使藥片增重4.0％即得本發明藥物結腸靶向片。
規格0.34g/片。
實施例12 本發明藥物質量控制方法1.黃芪皂苷的定性鑑別取本品粉末0.5g，加甲醇20ml，超聲提取15min，濾過，濾液加於已處理好的中性氧化鋁柱(100～120目，5g，內徑10～15mm)上，用40％甲醇100ml洗脫，收集洗脫液，置水浴上蒸乾。殘渣加水30ml使溶解，用水飽和的正丁醇提取2次，每次20ml，合併正丁醇液；用水洗滌2次，每次20ml；棄去水液，正丁醇液置水浴上蒸乾，殘渣加甲醇0.5ml使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇製成每m1含1mg的溶液，作為對照品溶液。吸取上述兩種溶液各2μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以氯仿-甲醇-水(體積比13∶7∶2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾乾，噴以硫酸乙醇溶液，在105℃烘約5分鐘。供試品色譜中，在與對照品色譜相應的位置上，日光下顯相同的棕褐色斑點，紫外光燈下(365nm)顯相同的橙黃色螢光斑點。
2、含量測定黃芪多糖的含量測定1.1 儀器與試藥UV2401 PC紫外分光光度計(日本島津)；
(+)葡萄糖(AR)105℃乾燥恆重；苯酚(AR)，硫酸(AR)；1.2 色譜條件採用苯酚-硫酸比色法，精確量取葡萄糖標準溶液或樣品溶液置於燥試管中，分別加水使成1.0ml，再分別加入5％苯酚溶液1.6ml，搖勻，然後加濃H2SO47.0ml，充分搖勻，室溫放置25min，在400～600nm處測定其最大吸光度，同時做一空白。
1.3 樣品製備方法及對照品液的配製對照品溶液的配製精確稱取乾燥恆重的葡萄糖25.2mg，加適量水溶解，轉移至250ml容量瓶中，加水至刻度，搖勻，配成濃度為100.8μg/ml標準葡萄糖溶液備用。
樣品溶液的製備精確稱取60℃乾燥恆重的藥粉0.1g，加甲醇25ml超聲提取15min，提取兩次，提取液棄去。剩餘殘渣加水溶解後定容到100ml容量瓶中，搖勻，作為多糖儲備液。
1.4 測定方法精確吸取樣品液1ml，加入5％苯酚溶液1.6ml，搖勻，然後加濃H2SO47.0ml，充分搖勻，室溫放置25min，在400～600nm處測定其最大吸光度，同時做一空白作校正，按下式計算多糖含量多糖含量％＝CDf/W×100式中C為樣品溶液的葡萄糖的重量(ug)，D為樣品溶液的稀釋倍數，f為換算因素，W為樣品的重量(μg)，測得結果見下表1表1 三批樣品中黃芪多糖含量測定結果
2.苦參鹼、氧化苦參鹼的含量測定2.1 儀器與試藥島津LC-10ATvp二元液相色譜儀，浙大N2000色譜工作站；苦參鹼對照品，中國藥品生物製品檢定所，批號110805-200306；氧化苦參鹼對照品，中國藥品生物製品檢定所，批號0780-20004；2.2 色譜條件採用HPLC法，具體色譜條件如下
固定相250×0.46mm，Chromasil C18分析柱；流動相乙腈∶pH＝3.0的磷酸緩衝液＝5∶95；流速1ml/min、柱溫40℃、檢測波長210nm；線性範圍苦參鹼為0.071ug～0.994ug，氧化苦參鹼為0.216ug～3.024ug。
2.3 樣品製備方法及標準品溶液配製方法樣品液製備方法將藥物研磨細，稱取約15mg藥粉，加水50ml超聲5min，過0.46μm微孔濾膜，即得。
苦參鹼對照品溶液的製備方法樣品液製備，氧化苦參鹼對照品溶液的製備方法樣品液製備。
2.4 樣品中苦參鹼、氧化苦參鹼含量測定在上述色譜條件下，進樣品溶液及對照品溶液各10μl，測定峰面積，計算得藥物中苦參鹼、氧化苦參鹼含量，測定得三批樣品中苦參鹼、氧化苦參鹼含量結果見表2表2 三批樣品中苦參鹼含量
表3 三批樣品中氧化苦參鹼含量
以下通過藥效學實驗證明本發明的有益效果。
實驗例1 本發明藥物口服治療潰瘍性結腸炎的藥效實驗1、實驗動物SD大鼠，雌雄各半，體重200～250g；2、潰瘍性結腸炎的動物模型的造模方法將實驗動物禁食24小時後，排淨大便，用乙醚麻醉動物，採用內徑為3mm的輸液管將濃度為33.33mg/ml三硝基苯磺酸的30％乙醇溶液0.6ml導入距肛門8cm處，使動物保持平躺，自然清醒。
3、實驗方案灌胃給予初步擬訂的處方三天，第四天造模，再連續給藥七天，第八天處死動物，取自肛門以上8cm結腸，縱剖開，用冰生理鹽水洗去腸內糞便等內容物，用10％甲醛固定，石蠟包埋，切片4μm，HE染色，光鏡下觀察結腸潰瘍、炎症情況、病變深度及纖維化程度等病理變化，以表示結腸病變及藥物對其影響作用；
4、分組情況分為模型組、陽性對照組、受試藥物低、中、高劑量組，每組動物各10隻。
模型組除造模外，每天給予相同量的生理鹽水；陽性對照組除造模外，每天給予0.3g柳氮磺吡啶/kg(柳氮磺吡啶片，海南紅惠製藥有限公司，批號030101)；受試藥物低劑量組除造模外，每天給予本發明藥物水煎液，劑量為1.5g黃芪/kg、0.5g苦參/kg；受試藥物中劑量組除造模外，每天給予本發明藥物水煎液，劑量為3g黃芪/kg、1g苦參/kg；受試藥物高劑量組除造模外，每天給予本發明藥物水煎液，劑量為6g黃芪/kg、2g苦參/kg；實驗結果見表4表4 藥效實驗結果
注I為模型組，II為陽性對照組，III為本發明藥物低劑量組，IV為本發明藥物中劑量組，V為本發明藥物高劑量組，與模型組比較★P＜0.05★★P＜0.01。
結果表明，受試藥物中、高劑量組、陽性組與模型組比較，均能顯著減小結腸潰瘍、減輕其炎症、降低其病變深度和纖維化程度的趨勢。表明，本發明藥物治療潰瘍性結腸炎具有較好的療效。
實驗例2 本發明藥物原料最佳配比篩選試驗分組情況模型組、陽性對照組、黃芪∶苦參(重量比1∶3)組、黃芪∶苦參(重量比1∶1)組、黃芪∶苦參(重量比3∶1)組，每組動物各10隻。
實驗方案同實驗例1。
模型組除造模外，每天給予相同量的生理鹽水；陽性對照組除造模外，每天給予0.3g柳氮磺吡啶/kg(柳氮磺吡啶片，海南紅惠製藥有限公司，批號030101)；
黃芪∶苦參(重量比1∶3)組除造模外，每天給予本發明藥物水煎液，劑量為2g黃芪/kg、6g苦參/kg；黃芪∶苦參(重量比1∶1)組除造模外，每天給予本發明藥物水煎液，劑量為4g黃芪/kg、4g苦參/kg；黃芪∶苦參(重量比3∶1)組除造模外，每天給予本發明藥物水煎液，劑量為6g黃芪/kg、2g苦參/kg；實驗結果見表5表5 最佳配比的篩選實驗結果
注I為模型組，II為陽性對照組，III為黃芪∶苦參(1∶3)組，IV黃芪∶苦參(1∶1)組V為黃芪∶苦參(3∶1)組，與模型組比較★P＜0.05★★P＜0.01。
結果表明本發明藥物各配比組、陽性組與模型組比較，均具有能減小結腸潰瘍、減輕其炎症、降低其病變深度和纖維化程度的趨勢。且陽性組、黃芪∶苦參(重量比1∶1)組、黃芪∶苦參(重量比3∶1)組與模型組比較各項指標具有顯著性差異，其中黃芪∶苦參(重量比1∶1)組各項指標與模型組比較有極顯著性差異，表明本發明藥物配比療效最佳，為最佳配比。
實驗例3 本發明藥物原料協同增效作用對比試驗分組情況模型組、陽性對照組、黃芪∶苦參(1∶1)組、單用黃芪組、單用苦參組，每組動物各10隻。
實驗方案同實驗例1。
模型組除造模外，每天給予相同量的生理鹽水；陽性對照組除造模外，每天給予0.3g柳氮磺吡啶/kg(柳氮磺吡啶片，海南紅惠製藥有限公司，批號030101)；黃芪∶苦參(重量比1∶1)組除造模外，每天給予本發明藥物水煎液，劑量為4g黃芪/kg、4g苦參/kg；單用黃芪組除造模外，每天給予黃芪水溶液，劑量為4g黃芪/kg；
單用苦參組除造模外，每天給予苦參水溶液，劑量為4g苦參/kg；實驗結果見表6表6 協同增效作用對比試驗結果
注I為模型組，II為陽性對照組，III為黃芪∶苦參(1∶1)組，IV單用黃芪組，V為單用苦參組，與模型組比較★P＜0.05★★P＜0.01。
對上表的結果分析，得出如下結論1.陽性組、黃芪∶苦參(1∶1)組與模型組比較各項指標均具有顯著性差異，其中黃芪∶苦參(1∶1)組各項指標與模型組比較有極顯著性差異；2.單用苦參組僅在炎症、潰瘍情況兩方面顯示出一定療效，而單用黃芪組僅在改善腸壁組織纖維化方面有較好的療效；3.黃芪、苦參合用組與單用苦參組、單用黃芪組比較，合用後各項指標都得到了明顯的提高，說明合用不僅是黃芪、苦參藥效的單獨相加，而是兩者合用後起到了彼此作用互補、協同增效的目的，使合用後對潰瘍性結腸炎的整體治療效果略優於陽性藥物。
實驗例4 本發明藥物不同給藥方式的藥效學對比試驗1、實驗動物、潰瘍性結腸炎動物模型的造模方法同實驗例1；2、分組情況分為模型組、陽性對照組、灌胃給藥組、灌腸給藥組，每組動物各10隻；3、實驗方案除灌腸給藥組採用灌腸給藥外，其餘同實驗例1；4、給藥方案模型組除造模外，每天給予相同量的生理鹽水；陽性對照組除造模外，每天給予0.3g柳氮磺吡啶/kg(柳氮磺吡啶片，海南紅惠製藥有限公司，批號030101)；灌胃給藥組，每天灌胃給予本發明藥物水溶液，劑量為4g黃芪/kg、4g苦參/kg；灌腸給藥組，每天灌腸給予本發明藥物水溶液，劑量為4g黃芪/kg、4g苦參/kg；實驗結果見表7
表7 不同給藥方式實驗結果
注I為模型組，II為陽性對照組，III為灌胃給藥組，IV為灌腸給藥組，與模型組比較★P＜0.05★★P＜0.01。
結果表明，灌胃、灌腸給藥治療效果均較好，灌腸給藥效果略優於灌胃給藥。
實驗例5 本發明藥物結腸靶向製劑與普通口服製劑的藥效學對比實驗1、實驗動物、潰瘍性結腸炎動物模型的造模方法同實驗例1；2、分組情況分為模型組、陽性對照組、普通製劑給藥組、結腸靶向給藥組，每組動物各10隻；3、實驗方案除給藥方式採用直接將小片藥物塞入大鼠胃部外，其餘同實驗例1；4、給藥方案模型組除造模外，每天給予相同量的生理鹽水；陽性對照組除造模外，每天給予0.3g柳氮磺吡啶/kg(柳氮磺吡啶片，海南紅惠製藥有限公司，批號030101)；普通製劑給藥組，每天自胃部給予普通藥物製劑，劑量按藥材計為4g黃芪/kg、4g苦參/kg；結腸靶向製劑給藥組，按實施例9方法製備，每天自胃部給予結腸靶向製劑，劑量按藥材計為4g黃芪/kg、4g苦參/kg；實驗結果見表8表8 普通製劑與結腸靶向製劑藥效對比實驗結果
注I為模型組，II為陽性對照組，III為普通製劑給藥組，IV為結腸靶向給藥組，與模型組比較★P＜0.05★★P＜0.01。
結果表明本發明藥物普通製劑、結腸靶向製劑給藥治療後，各項指標與模型組比較均得到明顯改善，其中結腸靶向製劑效果更好，各項指標與模型組比較有極顯著性差異。
以下說明本發明結腸靶向製劑的優越性。
實驗例6 結腸靶向製劑靶向性的體內外釋放度評價1、本發明結腸靶向製劑體外釋放度試驗1.1 體外釋放度測定條件採用藥典附錄XC溶出度測定法中第二法，即槳法；溶出介質人工胃液(0.1mol/l鹽酸溶液)750ml、人工腸液(pH6.8的磷酸鹽緩衝液)1000ml、人工結腸液(pH.7.8～8.0的磷酸鹽緩衝液)900ml；攪拌槳轉速150rpm；溫度37±0.5℃。
體外釋放度含量測定方法選用苦參鹼、氧化苦參鹼為指標，採用HPLC法，固定相250×0.46mm，ChromasilC18分析柱；流動相乙腈∶pH＝3.0的磷酸緩衝液＝5∶95；流速1ml/min；柱溫40℃；檢測波長210nm；線性範圍苦參鹼為0.07lug～0.994ug，氧化苦參鹼為0.216ug～3.024ug。
體外釋放度測定方法採用將包衣工藝研究製備的包衣片投入杯中，分別放入人工胃液中，2小時後取樣5ml(同時補加等量的溶出介質)，過0.46μm微濾膜，進樣測定。加入0.2mol/L磷酸鈉溶液250ml，調節pH＝6.8，4小時後取樣5ml(同時補加等量的溶出介質)，過0.46μm微濾膜，進樣測定。傾去溶出液，加入900ml人工結腸液，分別於1、2小時後取樣5ml(同時補加等量的溶出介質)，過0.46μm微濾膜，進樣測定。
測定結果具體測定結果見下表9表9 結腸靶向片中苦參鹼體外累計釋放百分率(％)
表10 結腸靶向片中氧化苦參鹼體外累計釋放百分率(％)
結果表明本發明藥物結腸靶向片劑，經過人工胃液、人工腸液後苦參鹼僅釋放總量的2.5％，氧化苦參鹼釋放總量的4.0％；當藥片在人工結腸液中1小時後，苦參鹼、氧化苦參鹼的釋放量分別達76.8％、78.1％，在結腸液中2小時後，兩成分基本釋放完全。
1.5 結論通過上述實驗結果表明，該製劑在體外能達到良好的結腸靶向釋藥的目的。
2.體內釋放度研究2.1 受試藥物包相同衣層的醫用硫酸鋇片。
2.2 試驗方法試驗前12小時服用3g番瀉葉煎液，等腹瀉排空腸道後，服用硫酸鋇片10片，每隔0.5～1小時，在X光機上觀察硫酸鋇片在腸道中的位置及崩解情況。
2.3 試驗對象胃腸功能正常的成年男女志願者受試者各四人。
2.4 試驗結果具體實驗結果見表11表 11本發明藥物結腸靶向片體內釋放結果
從上表可以看出各受試者的胃排空時間0.5～2.0h、小腸轉運時間2.7～4.0h、到達回盲部時間3.0～5.7h，存在較大個體差異；藥物的釋藥部位不受胃腸道轉運時間差異的影響，除有一例達到升結腸後開始釋藥外，都集中在回盲部崩解釋藥；受試藥物的崩解時間在不同個體間較穩定，集中在2.0～2.5h。
2.5 結論從體內試驗結果可以得出結論該藥物製劑能克服個體間差異，穩定地達到結腸結腸靶向給藥的目的。
通過上述藥效實驗說明，本發明藥物以黃芪、苦參為原料製備治療潰瘍性結腸炎，能顯著減小結腸潰瘍、減輕其炎症、降低其病變深度和纖維化程度的趨勢，具有較好的療效。且實驗證明原料黃芪、苦參重量配比為1∶1時，具有顯著效果，療效最佳，為最佳配比；本發明藥物適用各種不同的用藥途徑，灌胃、灌腸給藥治療效果均較好，灌腸給藥效果略優於灌胃給藥；為了滿足藥物的最佳功效，解決灌腸給藥的使用體位限制劑的缺陷，選擇本發明藥物結腸靶向製劑給藥，效果更好，通過靶向製劑輔料的選擇、使用，達到了靶向功效，且服用方便、服用量小、物質基礎明確、療效確切。
權利要求
1.一種由含有下述重量配比的原料製備而成的藥物組合物在製備治療潰瘍性結腸炎的藥物中的用途黃芪2～6份、苦參3～7份。
2.根據權利要求1所述的用途，其特徵在於所述的藥物組合物是由下述重量配比的原料製備而成黃芪2～6份、苦參3～7份。
3.根據權利要求2所述的用途，其特徵在於所述的藥物組合物是由下述重量配比的原料製備而成黃芪4份、苦參4份。
4.一種由含有重量配比為黃芪2～6份、苦參3～7份的原料製備而成的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物。
5.根據權利要求4所述的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物，其特徵在於它由下述重量配比的原料製備而成的藥劑黃芪2～6份、苦參3～7份。
6.根據權利要求5所述的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物，其特徵在於它是由下述重量配比的原料製備而成的藥劑黃芪4份、苦參4份。
7.根據權利要求5或6所述的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物，其特徵在於它是由黃芪的原粉或水提取物或醇提取物，與苦參的原粉或水提取物或醇提取物混合為活性成分，加上藥學上可接受的輔料或輔助性成分製備而成的藥劑。
8.根據權利要求7所述的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物，其特徵在於所述的藥劑是口服製劑或外用製劑。
9.根據權利要求8所述的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物，其特徵在於所述的藥劑每製劑單位含有黃芪皂苷提取物、黃芪多糖提取物、苦參鹼、氧化苦參鹼，其重量配比為黃芪皂苷提取物10～43份、黃芪多糖提取物5份～30份、苦參鹼5～18份、氧化苦參鹼15～52份。
10.根據權利要求8或9所述的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物，其特徵在於所述的外用製劑是直腸用栓劑、洗液。
11.根據權利要求8或9所述的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物，其特徵在於所述的口服製劑是顆粒劑、丸劑、散劑、片劑、膠囊劑、合劑、結腸靶向製劑。
12.根據權利要求11所述的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物，其特徵在於所述的結腸靶向製劑每製劑單位是由下述重量配比的原料製備而成黃芪皂苷提取物10～43份、黃芪多糖提取物5～30份、苦參鹼5～18份、氧化苦參鹼15～52份、澱粉47～93份、丙烯酸樹脂II型或丙烯酸樹脂S100型4～15份、鄰苯二甲酸二乙酯0.5～1.5份、吐溫-80 0.5～1份。
13.根據權利要求12所述的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物，其特徵在於所述的結腸靶向製劑每製劑單位是由下述重量配比的原料製備而成黃芪多糖提取物19份、黃芪皂苷提取物27.5份、苦參鹼11.5份、氧化苦參鹼35份、澱粉50份、丙烯酸樹脂III型或丙烯酸樹脂S100型11份、鄰苯二甲酸二乙酯1份、吐溫-80 0.5份。
14.一種製備權利要求4～13中任一項所述的治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物的方法，它包括如下步驟a、稱取各重量配比的原料黃芪2～6份，苦參3～7份；b、取黃芪的原粉或水提取物或醇提取物與苦參的原粉或水提取物或醇提取物混合，加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分製備成藥學上常用的藥劑。
全文摘要
本發明提供了一種治療潰瘍性結腸炎的藥物組合物，它是含有由黃芪、苦參為原料製備而成的藥劑，本發明還提供了該藥物組合物的製備方法和用途。本發明藥物組合物原料組方精煉、藥物服用劑量小、物質基礎明確、療效確切、毒副作用小；本發明結腸靶向製劑具有劑型新穎、藥物直接定位於靶區(結腸)，使靶區藥物濃度高於其它正常組織，降低全身副作用，且服用方便、服用量小、物質基礎明確、療效更為顯著。
文檔編號A61P1/00GK1768780SQ200410040960
公開日2006年5月10日 申請日期2004年11月4日 優先權日2004年11月4日
發明者楊明, 謝興亮, 邱雪蘭, 肖禾 申請人:楊明