依普西龍衍生物和它們的合成與用途的製作方法

2023-10-19 17:22:22 2

專利名稱：依普西龍衍生物和它們的合成與用途的製作方法
發明概述本發明涉及具有側鏈修飾的依普西龍(epothilone)類似物、用於製備該化合物的方法、它們在疾病治療或用於疾病治療的藥物製劑的製備中的用途、以及用在該類似物的合成中的新穎中間體和新的合成方法。
政府權利本發明是在政府的支持下作出的，由National Institutes of Health授予的授權號為CA46446。美國政府享有本發明中的某些權利。
背景技術：
依普西龍(1-5)是天然物質，它們即使對紫杉醇耐受性腫瘤細胞也表現細胞毒性，其作用機理是促進α-與β-微管蛋白亞單位的聚合作用，並穩定所得的微管裝配。依普西龍將紫杉醇(TAXOLTM的活性成分)從其微管結合部位上替換下來，據報導在微管的穩定作用方面比紫杉醇更有效。 1R=H,R1=Me依普西龍A 4R=H，依普西龍C2R=Me,R1=Me依普西龍B5R=Me，依普西龍D3R=H,R1=CH2OH依普西龍E人們所需要的是表現出卓越的藥理學性質的依普西龍A和B類似物，尤其是一種或多種下列性質提高了的治療指數(例如對增生性疾病具有更大的毒性劑量範圍，而對正常細胞沒有毒性)、更好的藥代動力學性質、更好的藥效學性質、更好的水溶性、對耐受或變為耐受一種或多種其他化療劑治療的腫瘤類型具有更好的功效、更好的有利於製劑製備的性質--例如更好的在極性溶劑、尤其是包含水的那些中的溶解性--提高了的穩定性、化合物本身製備方便、提高了的對細胞增殖的抑制作用、高水平的微管穩定作用、和/或具體的藥理學性質。
發明的詳細說明本發明涉及新穎的化合物，它們驚人地具有上述優點的一種或多種。
本發明的一個主要方面涉及由式Ⅰ代表的依普西龍類似物 其中波形鍵表示鍵「a」是以順式或反式構型存在的；(ⅰ)R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；R3是選自下組的原子團氫；低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是選自下列結構的原子團 和 或者在本發明的更廣義方面，R1是下式原子團 或 其中R和R』是低級烷基，尤其是甲基，或者在本發明的更廣義方面，進而R』是羥甲基或氟甲基，R是氫或甲基；(ⅱ)如果R3是低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3，除R1以外的其他符號具有上文給出的含義，那麼R1也可以是選自下列結構的原子團 和 或者，如果R3具有上述(ⅱ)下R3定義中給出的含義之一，甲基除外，那麼R1也可以是下式原子團 (ⅲ)如果R3是氫；低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3,R2是氧，「b」和「c」各自是單鍵，「a」是單鍵，那麼R1也可以是部分結構式的原子團 或 (ⅳ)如果R3是除甲基以外的低級烷基，尤其是乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；或者優選為-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3，除R1以外的其他符號具有上述(ⅰ)下給出的含義，那麼R1也可以是下式部分
或式Ⅰ化合物的鹽，其中存在成鹽基團。
本發明的進一步方面涉及下式化合物的合成方法 (其中Q是氫或者優選為甲基)和/或下式化合物的合成方法 除非另有表示，上文和下文中用到的通用術語優選地在所公開的範圍內具有下列含義。
術語「低級」指各原子團優選具有至多7個、包括7個碳原子，更優選為至多4個、包括4個碳原子。
低級烷基可以是直鏈的或者具有一個或多個支鏈，優選具有至多7個、包括7個碳原子，更優選為至多4個、包括4個碳原子。優選地，低級烷基是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基或進一步是正戊基或正己基。
保護基團優選為標準的保護基團。如果因為式Ⅰ化合物中一個或多個其他官能團不應當參加反應，而被保護或需要被保護，例如羧基、羥基、氨基或巰基，那麼它們是常用於肽化合物、頭孢菌素與青黴素以及核酸衍生物和糖的合成的保護基團。
保護基團可以已經存在於前體中，應當保護有關官能團不發生所不需要的次級反應，例如醯化、醚化、酯化、氧化、溶劑分解和類似反應。保護基團的一個特徵是它們本身是易於除去的，也就是不經過所不需要的次級反應，通常是通過溶劑分解、還原、光解或酶的活性而被除去，例如在類似於生理條件的條件下，並且它們不存在於終產物中。專業人員知道或者能夠易於確定，哪些保護基團適合於上述和下述反應。
保護基團對官能團的保護、保護基團本身和它們的除去反應例如描述在標準的參考著作中，例如J.F.W.McOmie，《有機化學中的保護基團》，Plenum Press,London and New York 1973；T.W.Greene,《有機合成中的保護基團》，Wiley,New York 1981；《肽》，卷3(編輯E.Gross and J.Meienhofer),Academic Press,London and NewYork 1981；「Metloden der organischen Chemie」(有機化學方法)，Houben Weyl，第4版，卷15/I,Georg Thieme Verlag,Stuttgart 1974；H.-D.Jakubke and H.Jescheit,「Aminosauren,Peptide,Proteine」(胺基酸、肽、蛋白質)，Verlag Chemie,Weinheim,Deerfield Beach,and Basel 1982；Jochen Lehmann,「Chemie der KohlenhydrateMonosaccharide und Derivate」(碳水化合物化學單糖和衍生物)，Georg Thieme Verlag,Stuttgart 1974。尤其優選的保護基團是羥基保護基團，例如叔丁基二甲基甲矽烷基或三苯甲遊基。
R4和R5優選為氫。
開始於攜帶R3的碳原子的波形鍵指鍵「a」是反式構型或者優選為順式構型。
鹽尤其是式Ⅰ化合物的藥學上可接受的鹽。
這樣的鹽例如酸加成鹽，它們是從具有鹼性氮原子的式Ⅰ化合物優選與有機或無機酸形成的、尤其是藥學上可接受的鹽。適合的無機酸例如含滷酸、如氫氯酸，硫酸或磷酸。適合的有機酸例如羧酸、膦酸、磺酸或氨基磺酸，如乙酸、丙酸、辛酸、癸酸、十二烷酸、乙醇酸、乳酸、富馬酸、琥珀酸、己二酸、庚二酸、辛二酸、壬二酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、胺基酸--如穀氨酸或天門冬氨酸--、馬來酸、羥基馬來酸、甲基馬來酸、環己烷羧酸、金剛烷羧酸、苯甲酸、水楊酸、4-氨基水楊酸、鄰苯二甲酸、苯乙酸、苦杏仁酸、肉桂酸、甲磺酸或乙磺酸、2-羥基乙磺酸、乙烷-1,2-二磺酸、苯磺酸、2-萘磺酸、1,5-萘二磺酸、2-、3-或4-甲基苯磺酸、甲基硫酸、乙基硫酸、十二烷基硫酸、N-環己基氨基磺酸、N-甲基-、N-乙基或N-丙基-氨基磺酸，或其他有機質子酸、如抗壞血酸。
為了分離或純化，使用藥學上不可接受的鹽也是可能的，例如苦味酸鹽或高氯酸鹽。對治療用途來說，僅使用藥學上可接受的鹽或游離化合物(在以藥物製劑的形式可用的情況下)，並且因此是優選的。
鑑於游離形式的新化合物與鹽形式的新化合物之間的密切關係，任何對上文和下文中的游離化合物的引用不言而喻也酌情和權宜指相應的鹽，包括可以用作中間體的那些鹽，例如在新化合物的純化或鑑定中。
關於數值的術語「約」、例如「約2倍摩爾過量」等，優選地代表所給出的數值可以偏離所給數字至多±10％，更優選為至多±3％，最優選地，數值是所給出的精確值。
在發明的優選實施方式中，如上(ⅳ)下所述的式Ⅰ化合物(R1= )排除在發明範圍之外。
而且，除了R1是任意下式之一部分的式Ⅰ化合物以外的一組式Ⅰ化合物是優選的 或 (其餘符號具有式Ⅰ化合物所定義的含義)。
尤其優選的是游離的式Ⅰ化合物或其鹽。
生物活性本發明化合物可用於增生性疾病的治療，尤其是癌症，如肺部癌症、尤其是非小細胞肺癌，前列腺癌症，腸部癌症、如結腸直腸癌，表皮樣瘤、如頭和/或頸腫瘤，或乳腺癌，或其他癌症、如膀胱、胰腺或腦部癌症或黑素瘤，尤其可用於多藥耐受性(例如由p-糖蛋白=P-gp的表達引起)和/或紫杉醇(例如TAXOL)治療不應性癌症的治療。
生物學評價下列測定顯示本發明化合物阻滯微管解聚的能力。
微管測定法按下列文獻操作進行，用來評價所合成的化合物形成微管和穩定微管的能力。還進行了細胞毒性研究。
利用純化的微管蛋白，試驗式Ⅰ化合物對微管蛋白裝配的作用，所用測定法擴大了化合物與Taxol之間的活性差異。發現式Ⅰ化合物具有高水平的細胞毒活性和微管蛋白聚合活性，這是與依普西龍A和B相比較而言的(Lin等《癌症化學療法與藥理學》38,136-140(1996)；Rogan等《科學》244,994-996(1984))。
過濾比色測定將微管蛋白(1mg/ml的0.25ml)置於測定試管內，加入2.5μl供試化合物。將樣本混合，在37℃下恆溫30分鐘。將樣本(150μl)轉移至96孔Millipore Multiscreen Durapore親水性0.22μm孔徑濾板的一個小孔內，濾板預先在真空下用200μlMEM緩衝液洗滌。小孔然後用200μlMEM緩衝液洗滌。為了對板上捕集的蛋白質染色，向濾板中加入50μl醯氨基黑溶液(0.1％萘酚藍黑(Sigma)/45％甲醇/10％乙酸)2分鐘；然後再次施加真空。加入兩次200μl醯氨基黑褪色溶液(90％甲醇/2％乙酸)以除去沒有結合的染劑。按照Schaffner與Weissmann等《分析生物化學》56:502-514，1973方法，如下對信號進行定量向小孔中加入200μl洗脫溶液(25mMNaOH-0.05mMEDTA-50％乙醇)，5分鐘後用移液管使溶液混合。在室溫下恆溫10分鐘後，將150μl洗脫溶液轉移至96孔板的下孔中，在MolecularDevices Microplate讀數器上測量吸光度。
利用1A9、1A9PTX10(α-微管蛋白突變體)和1A9PTX22(α-微管蛋白突變體)細胞系所進行的細胞毒性實驗可以揭示式Ⅰ化合物的細胞毒活性。象天然來源的依普西龍1和2一樣，式Ⅰ化合物顯示顯著的抗改變的α-微管蛋白-表達細胞系1A9PTX10和1A9PTX22活性。對式Ⅰ化合物來說，優選的IC50值(與沒有加入式Ⅰ抑制劑的對照相比，發現腫瘤細胞半數最大生長抑制的濃度)可以在1至1000nM範圍內，優選從1至200nM。
利用下列細胞系進行下列測定，可以顯示本發明化合物抑制腫瘤生長的能力。
用於抗癌藥物篩選的比色細胞毒性測定所用比色細胞毒性測定改自Skehan等(《國家癌症研究院雜誌》82:1107-1112,19901)。該操作為在96孔微量滴定板中測量附著和懸浮培養物中的細胞蛋白質含量提供了快速、靈敏和便宜的方法。該方法適合於國家癌症研究院的以疾病為取向的體外抗癌藥物發現篩選。
確切地說，將用三氯乙酸固定的培養物用0.4％(重量/體積)硫氰胺B(SRB)的1％乙酸溶液染色30分鐘。用1％乙酸洗滌四次除去沒有結合的染劑，與蛋白質結合的染劑用10mM沒有緩衝的Tris鹼(三(羥甲基)氨基甲烷)萃取，用於在具有計算機界面的96孔微量滴定板讀數器中測定光密度。SRB測定結果與細胞數和細胞蛋白質值呈線性關係，後兩者是按照Lowry和Bradford測定法在稀疏亞匯合至多層超匯合的密度範圍內測量的。每孔1000個細胞在564nm下的信噪比大約為1.5。
SRB測定提供了一個比色終點，它是無破壞性的、無限穩定的和裸眼可見的。它提供了一種靈敏的藥物誘導的細胞毒性測量方法。SRB受雷射激發而在488nm下發出強烈螢光，能夠在單孔水平上用靜態螢光血細胞計數法(Skehan等《國家癌症研究院雜誌》82:1107-1112,19901)定量測量。
或者，式Ⅰ化合物作為微管解聚抑制劑的功效可以證明如下在DMSO中製備供試化合物的儲備溶液，貯存在-20℃下。從豬腦中得到微管蛋白，方法是如Weingarten等《生物化學》1974,13:5529-37所述，經過兩個依賴於溫度的解聚/聚合循環。將微管蛋白質(指微管蛋白加與微管有關的蛋白質)的儲備溶液貯存在-70℃下。供試化合物誘導微管蛋白質聚合的程度基本上按照文獻所述方法進行測量(參見Lin等癌症化學療法與藥理學》1996,38:136-140)。簡言之，將5μl供試化合物的儲備溶液以20倍於所需的最終濃度與45μl水在室溫下預混合，然後將混合物放置在冰上。將等分試樣的豬腦微管蛋白質的儲備溶液迅速融化，然後用冰冷卻的2xMEM緩衝液(200mlMES,2mMEGTA,2mMMgCl2,pH6.7)(MES=2-嗎啉代乙磺酸,EGTA=乙二醇-雙(2(2-氨基乙基)-四乙酸)稀釋至2mg/ml。然後向供試化合物中加入稀釋後的微管蛋白質，每次50μl，引發聚合反應，然後將樣本在室溫水浴中恆溫。然後將反應混合物放置在Eppendorf微量離心器中，另在室溫下恆溫15分鐘。然後將樣本在室溫下以14000rpm離心20分鐘，以分離聚合與沒有聚合的微管蛋白質。作為微管蛋白聚合作用的間接測量方法，按照Lowry法(DC測定試劑盒，Bio-Rad Laboratories,Hercules,CA)測定上清液(含有剩餘的沒有聚合的、可溶性微管蛋白質)的蛋白質濃度，顏色反應的光密度(OD)在750nm下用分光計(SpectraMax340,Molecular Devices,Sunnyvale,CA)測定。將用供試化合物處理的樣本與用載體處理的對照之間的OD差異與含有25μM依普西龍B的供試恆溫樣本(陽性對照)進行比較。由供試化合物誘導的聚合作用程度以相對於陽性對照(100％)的百分比表示。通過比較若干濃度，可以測定EC50(發現50％最大聚合時的濃度)。對式Ⅰ化合物來說，EC50優選地位於1至200、優選為1至50μM的範圍內。濃度為5μM的式Ⅰ供試化合物對微管蛋白聚合的誘導作用相對於25μM依普西龍B的百分比優選地位於50至100％、尤其是80至100％的範圍內。
也可以以下列方式顯示抗腫瘤細胞功效製備式Ⅰ化合物在DMSO中的儲備溶液(10mM)，貯存在-20℃下。從Roswell Park Memorial Institute(Buffalo,NY,USA)的M.Baker博士得到人KB-31和(多藥耐受性、P-gp 170過度表達的)KB-8511表皮樣癌細胞(其說明參見Akiyama等《軀體細胞分子遺傳學》11,117-126(1985)；Fojo A.等《癌症研究》45,3002-3007(1985)。KB-31和KB-8511都是KB-細胞系(美國典型菌種保藏中心)的衍生物，是人表皮樣癌細胞。利用小牛血清(M.A.Bioproducts)、L-穀氨醯胺(Flow)、青黴素(50單位/ml)和鏈黴素(50μg/ml)(Flow)可以收穫單層KB-31細胞；然後以倍增速度生長約22小時，塗板的相對效率為約60％。KB-8511是來自KB-31細胞系的變體，可通過秋水仙鹼的循環處理得到，與KB-31細胞相比，對秋水仙鹼顯示約40倍的相對耐受性)。在37℃和80％相對大氣溼度下的含有5％v/vCO2的恆溫箱內，將細胞在MEMα-培養基中培養，培養基含有核糖核苷和脫氧核糖核苷(Gibco BRL)、10IU青黴素、10μg/ml鏈黴素和5％胎牛血清。使細胞鋪展在96孔微量滴定板中，每孔1.5×103個，恆溫過夜。在第1天加入供試化合物在培養基中的系列稀釋液。然後將板子另外恆溫四天，然後將細胞用3.3％v/v戊二醛固定，用水洗滌，最後用0.05％w/v亞甲藍染色。再次洗滌後，染劑用3％HCl洗脫，在665nm下用SpectraMax340(Molecular Devices,Sunnyvale,CA)測量光密度。利用SoftPro2.0程序(MolecularDevices,Sunnyvale,CA)和下式對數據曲線進行數學處理，測定IC50值[(處理的OD)-(開始的OD)]/[(對照的OD)-(開始的OD)]×100將IC50定義為與沒有供試化合物的對照相比，供試化合物在培養結束時導致50％細胞數的濃度(細胞生長的半數最大抑制濃度)。式Ⅰ化合物的IC50在0.1×10-9至500×10-9M範圍內，優選在0.1與60nM之間。
也可以利用其他腫瘤細胞系進行對比試驗，例如A459(肺；ATCCCCL185)、NCIH460(肺)、Colo 205(結腸；ATCCCCL222)、HCT-15(結腸；ATCCCCL225)(ATCC=美國典型菌種保藏中心(Rockville,MD,USA))、HCT-116(結腸)、Du145(前列腺；ATCCHTB81；也見於《癌症研究》37,4049-58 )、PC-3M(前列腺-激素-不敏感的衍生物，從I.J.Fidler博士得到(MDAnderson Cancer Center,Houston,TX,USA)，來源於PC-3細胞系，後者可從ATCC得到(ATCC CRL 1435))、MCF-7(乳腺；ATCCHTB22)或MCF-7/ADR(乳腺，多藥耐受性；其說明參見Blobe G.C.等《生物化學雜誌》(1983),658-664；該細胞系與MDR-7「野生型」細胞相比，對阿黴素和長春花屬生物鹼是高度耐受的(360至2400倍))，其中得到與KB-31和KB-8511細胞相似的結果。式Ⅰ化合物的IC50在0.1×10-9至500×10-9M範圍內，優選在0.1與60nM之間。
基於這些性質，式Ⅰ化合物(也指它們的鹽)適用於增生性疾病的治療，尤其例如腫瘤疾病，如果有的話也包括轉移瘤，例如固體腫瘤，如肺腫瘤、乳腺腫瘤、結腸直腸腫瘤、前列腺腫瘤、黑素瘤、腦腫瘤、胰腺腫瘤、頭頸腫瘤、膀胱癌、成神經細胞瘤、咽腫瘤；或者適用於血細胞增殖性疾病，例如白血病；或者進一步適用於其他疾病的治療，這些疾病響應於微管解聚抑制劑的治療，例如牛皮癬。式Ⅰ化合物或其鹽也適用於保護醫學植入物(可用於再狹窄的預防)(參見WO99/16416，優先權日為1997年9月29日)。
利用下列動物模型可以證明本發明化合物的體內活性。
將雌性或雄性BALB/cnu/nu(裸)鼠保持在無菌條件下(每隻Ⅲ型籠子中有10至12隻小鼠)，可自由進食和飲水。植入腫瘤的時候小鼠重20至25克。腫瘤模型的建立方法是將細胞(100μlPBS或培養基中最少2×106個細胞)皮下注射給小鼠(每種細胞系4-8隻小鼠)。在開始治療前，所得腫瘤接連經過至少三次連續的移植。利用13種規格的套針將腫瘤碎片(大約25mg)s.c.植入動物的左脅腹，此時小鼠接受Forene(Abbott,Switzerland)麻醉。
每周監測一次或兩次腫瘤生長和體重。全部治療都是靜脈內(i.v.)給藥的，當平均腫瘤體積達到大約100至250nm3時開始治療，這因腫瘤類型而異。利用下式測定腫瘤體積(L×D×π)/6(參見《癌症化學療法與藥理學》24:148-154,)。式Ⅰ依普西龍的治療採用不同的劑量和給藥頻率。對比試劑是按照預先確定的最佳治療方案進行給藥的。除了腫瘤體積隨著治療進程發生變化以外，抗腫瘤活性以T/C％(受治療動物腫瘤體積的平均增加除以對照動物腫瘤體積的平均增加再乘以100)表示。腫瘤消退(％)代表與治療開始時的平均腫瘤體積相比最小的平均腫瘤體積，按照下式計算消退(％)=(1-V最終/V開始)×100(V最終=最後的平均腫瘤體積，V開始=治療開始時的平均腫瘤體積)。
利用這種模型，可以試驗本發明化合物對來自下列細胞系的腫瘤生長的抑制作用。
人結腸直腸腺癌細胞系HCT-15(ATCCCCL225)來自美國典型菌種保藏中心(Rockville,MD,USA)，細胞是按照供應商的建議進行體外培養的。HCT-15是一種上皮樣細胞系(《癌症研究》39:1020-25)，由於P-糖蛋白的過度表達(P-gp,gp170,MDR-1；《抗癌研究》11:1309-12；《生物化學雜誌》264:18031-40；《國際癌症雜誌》1991,49:696-703)和依賴於穀胱甘肽的耐受性機理(《國際癌症雜誌》1991,49:688-695)而是多藥耐受性的。Colo205細胞系也是一種人結腸癌細胞系(ATCCCCL222；也見於《癌症研究》38:1345-55)，它是從患者的腹水中分離的，顯示上皮樣形態，一般被認為是對藥物敏感的。人依賴於雄性激素的前列腺癌細胞系用於建立小鼠皮下和正位模型。人轉移前列腺癌PC-3M是從I.J.Fidler博士(MD Anderson Cancer Center,Houston,TX,USA)得到的，是在補充有7％v/vFBS的Ham’s F12K培養基中培養的。PC-3M細胞系是從裸鼠中分離肝轉移瘤、隨後脾內注射PC-3細胞[ATCC CRL 1435；美國典型菌種保藏中心(Rockville,MD,USA)]的結果，它們可以生長在Eagle’s MEM培養基中，培養基中補充有10％胎牛血清、丙酮酸鈉、非必要胺基酸、L-穀氨醯胺、兩倍的維生素溶液(Gibco Laboratories,Long Island,N.Y.)和青黴素-鏈黴素(Flow Laboratories,Rockville,Md.)。PC-3M細胞系是對激素不敏感的(也就是說，它在沒有雄性激素的存在下生長)。PC-3細胞系是雄性激素受體陰性的，大概因為被衍生的PC-3M細胞系。PC-3細胞系可從ATCC得到(ATCCCRL1435)，相當於從62歲高加索人男性中分離的Ⅳ級前列腺腺癌；該細胞表現較低的酸性磷酸酶和睪酮-5-a-還原酶活性。該細胞幾乎是三倍體，模型數為62個染色體。用Q帶分析法不能檢測到正常的Y染色體。人肺腺癌A549(ATCCCCL185；從58歲高加索人男性肺癌組織中分離到外植塊培養物)顯示上皮形態，利用胞苷二磷酸膽鹼途徑可以合成具有高百分率去飽和脂肪酸的卵磷脂；在全部中期中發現涉及染色體6和染色體1長臂的亞端著絲粒標記染色體。人乳腺癌ZR-75-1(ATCC CRL 1500；從患有浸潤性導管癌的63歲高加索人女性的惡性腹水積液中分離)是哺乳動物上皮來源的；細胞具有雌性激素和其他甾類激素的受體，具有過多的三倍體染色體數。人表皮(口腔)癌細胞系KB-8511(一種P-gp過度表達的細胞系，從表皮樣(口腔)KB-31癌細胞系衍生而來)是從Roswell Park Memoriallnstitute(Buffalo,NY,USA)的M.Baker博士得到的(其說明參見Akiyama等《軀體細胞分子遺傳學》11,117-126(1985)；Fojo A.等《癌症研究》45,3002-3007(1985))，如前所述進行培養(Meyer,T.等《國際癌症雜誌》43,851-856(1989))。KB-8511細胞象KB-31一樣，是從KB細胞系(ATCC)衍生的，它們是人表皮癌細胞；KB-31細胞能夠以單層方式生長在Dulbecco改性Eagle培養基(D-MEM)中，培養基中補充有10％胎牛血清(M.A.Bioproducts)、L-穀氨醯胺(Flow)、青黴素(50單位/ml)和鏈黴素(50mg/ml)(Flow)；它們生長的倍增時間為22小時，它們的相對塗板效率為大約60％。KB-8511是從KB-31細胞系衍生的細胞系，方法是利用秋水仙鹼處理循環；當與KB-31細胞相比時，它對秋水仙鹼顯示約40倍的相對耐受性；它能夠生長在與KB-31相同的條件下。
溶解度如下測定水溶性，例如將式Ⅰ化合物或其鹽與水在室溫下攪拌，直到化合物不再進一步溶解(約1小時)。所測得的溶解度優選在0.01與1重量％之間。
在下述優選的式Ⅰ化合物中，取代基的定義可以適當使用上述一般定義，例如用更具體的定義或尤其用所優選的定義代替更一般的定義。
本發明優選地涉及這樣的式Ⅰ化合物，其中R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；R3是選自下組的原子團氫；低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是選自下列結構的原子團 和
其中R和R』是低級烷基，尤其是甲基；或其鹽，其中存在成鹽基團。
本發明也優選地涉及這樣的式Ⅰ化合物，其中R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；R3是選自下組的原子團氫；低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是選自下列結構的原子團 和 其中R』是羥甲基或氟甲基，R是氫或甲基；或其鹽，其中存在成鹽基團。
本發明也優選地涉及這樣的式Ⅰ化合物，其中R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；R3是選自下組的原子團低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是選自下列結構的原子團 和 或其鹽，其中存在一個或多個成鹽基團。
本發明也優選地涉及這樣的式Ⅰ化合物，其中R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；
R3是選自下組的原子團除甲基以外的低級烷基，尤其是乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是下式原子團 或者，如果存在一個或多個成鹽基團，是它的鹽。
本發明也優選地涉及這樣的式Ⅰ化合物，其中R2是氧，「b」和「c」各自是單鍵，「a」是單鍵；R3是選自下組的原子團低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是選自下列結構的原子團 和 或其鹽，其中存在一個或多個成鹽基團。
本發明也優選地涉及這樣的式Ⅰ化合物，其中R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；R3是選自下組的原子團除甲基以外的低級烷基，尤其是乙基、正丙基、異丙基、正丁基、並丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是下式原子團 或式Ⅰ化合物的鹽，其中存在成鹽基團。
更優選地，本發明涉及式Ⅰa化合物， 其中R部分彼此獨立地是氫或甲基，或其鹽。
更優選地，本發明也涉及式Ⅰb化合物， 其中R部分彼此獨立地是氫或甲基，或其鹽。
本發明具體也涉及式Ⅰc化合物，
其中R*是甲基。
本發明具體也涉及式Ⅰd化合物， 其中A是乙基、氟甲基、甲氧基、甲硫基或乙烯基(-CH=CH2)，D是氫、氟、羥基或甲基，尤其是氫。
本發明具體也涉及式Ⅰe化合物， 其中A是乙基、氟甲基、甲氧基、甲硫基或乙烯基(-CH=CH2)，D是氫、氟、羥基或甲基。
本發明最具體地涉及實施例中給出的式Ⅰ化合物，或其藥學上可接受的鹽，其中存在一個或多個成鹽基團。
最優選地，本發明涉及選自下組的化合物化合物D(實施例1)、實施例2A化合物、實施例2C化合物、化合物18b(見實施例4)、化合物19b(見實施例4)、化合物46(見實施例4)、化合物50(見實施例4)、化合物52(見實施例4)、化合物53(見實施例4)、化合物58(見實施例4)、化合物59(見實施例4)、化合物66(見實施例4)、化合物67(見實施例4)和化合物68(見實施例4)，或者，如果存在一個或多個成鹽基團，是其藥學上可接受的鹽。
本發明化合物可以利用類似於本領域已知方法的方法合成，優選按照以下列步驟為特徵的方法a)使式Ⅱ的碘化物 其中R2、R3、R4、R5、a、b、c和波形鍵具有式Ⅰ下給出的含義，與式Ⅲ的錫化合物反應，R1-Sn(R)3(Ⅲ)其中R1具有式Ⅰ下給出的含義，R是低級烷基，尤其是甲基或正丁基，或者b)使式Ⅳ的錫化合物 其中R2、R3、R4、R5、a、b、c和波形鍵具有式Ⅰ下給出的含義，與式Ⅴ的碘化物反應，R1-I(Ⅴ)其中R1具有式Ⅰ下給出的含義；如果需要的話，將所得式Ⅰ化合物轉化為另一種式Ⅰ化合物，將所得游離的式Ⅰ化合物轉化為式Ⅰ化合物的鹽，和/或將所得式Ⅰ化合物的鹽轉化為游離的式Ⅰ化合物或另一種式Ⅰ化合物的鹽，和/或將式Ⅰ化合物的立體異構體混合物分離為相應的異構體。
優選方法條件的詳細說明在所有原料中，如果需要的話，將不應參與反應的官能團用保護基團加以保護，尤其是標準的保護基團。保護基團、它們的引入和它們的裂解是本領域已知的，例如描述在上述標準參考文獻中。反應a)該反應(一種(優選為改進的)Stille偶合)優選地在標準條件下進行；更優選地，反應條件是(ⅰ)在一種適當的溶劑中，例如甲苯；在高溫下，尤其是約90至約100℃；優選地使用過量的式Ⅲ錫化合物，優選為1.1至3倍、例如1.5至2倍摩爾過量；和催化量的Pd(PPh3)4，優選為約1至30％，更優選為5至10％；或(ⅱ)在一種適當的溶劑中，例如二甲基甲醯胺(DMF)；在10至40℃的溫度下，尤其是在25℃下；優選地使用過量的式Ⅲ錫化合物，優選為1.1至3倍、例如1.5至2.3倍摩爾過量；在催化量的Pd(MeCN)2Cl2的存在下，優選為10至50％，尤其是20至30％。
該偶合反應的替代條件也包括使用下列試劑和/或條件(ⅲ) 2-噻吩羧酸亞銅，N-甲基-2-吡咯烷。
(ⅳ)PdCl2(MeCN)2(催化量)，DMF,50-150℃(加入或不加入叔鹼)。
(ⅴ)Pd(PPh3)4/CuI(催化量)，DMF,50-150℃(加入或不加入叔鹼)。
反應b)該反應(一種改進的Stille偶合)優選地在標準條件下進行；更優選地，反應條件是在一種適當的溶劑中，尤其是DMF；在50至100℃的溫度下，優選為80至85℃；優選地使用過量的式Ⅴ碘化物；在催化量的AsPh3、優選為約0.4當量、CuI、優選為約0.1當量和PdCl2(MeCN)2、優選為約0.2當量的存在下。
尤其優選的是實施例中提到的反應條件。
化合物/鹽的轉化
按照標準方法或新方法，可以將式Ⅰ化合物轉化為另一種式Ⅰ化合物。
例如，R2不存在，b和c不存在，a是雙鍵，其他部分如式Ⅰ化合物所述，這樣的式Ⅰ化合物可以轉化為對應的環氧化物，其中R2是O,b和c存在，a是單鍵。優選地，環氧化反應的條件是在(+)-二乙基-D-酒石酸酯((+)-DET)(優選為約0.5當量)、Ti(i-PrO4)(優選為約0.5當量)、叔丁基過氧化氫(優選為約2.2當量)和分子篩、尤其是4A分子篩的存在下，在一種適當的溶劑中，例如二氯甲烷和可選的一種烷，例如癸烷，在低溫下，優選為-78至0℃，尤其是約-40℃；或者在過氧化氫(優選為約30當量)、乙腈(優選為約60當量)、一種鹼、尤其是KHCO3(優選為約10當量)的存在下，在一種適當的溶劑中，例如一種醇，優選為甲醇，在10與40℃之間的優選溫度下，例如約25℃。
其中R3是羥甲基的式Ⅰ化合物可以轉化為其中R3是氟甲基的式Ⅰ化合物，例如在下列條件下用DAST(優選為1.05至1.4當量)處理在一種適當的溶劑中，例如二氯甲烷，在低溫下，優選為-95至0℃，尤其是約-78℃。DAST是二乙氨基三氟化硫。
其中R3是碘甲基的式Ⅰ化合物可以轉化為其中R3是甲基的式Ⅰ化合物，例如在下列條件下用氰基硼氫化物(優選為約10當量)處理在HMPA(六甲基磷醯三胺)中，在高溫下，例如40至45℃。
其他轉化可以按照已知操作進行，例如PCT申請WO98/25929,引用在此作為參考文獻。
具有成鹽基團的式Ⅰ化合物的鹽可以按本身已知的方式製備。式Ⅰ化合物的酸加成鹽於是可以通過用一種酸或一種適合的陰離子交換劑處理而得到。
鹽通常可以轉化為游離化合物，例如用適合的鹼性試劑處理，例如用鹼金屬碳酸鹽、鹼金屬碳酸氫鹽或鹼金屬氫氧化物，通常為碳酸鉀或氫氧化鈉。
然後，如果需要的話，所得游離化合物可以轉化為不同的鹽，如游離化合物成鹽反應所述。
按照本身已知的方式，利用適合的分離方法，立體異構體混合物、例如非對映異構體混合物可以分離為它們對應的異構體。非對映異構體混合物例如可以分離為它們各自的非對映異構體，方法是分步結晶、色譜、溶劑分布和類似的操作。這種分離既可以對原料化合物進行，也可以對式Ⅰ化合物本身進行。對映異構體可以通過形成非對映異構體的鹽加以分離，例如與對映異構體純的手性酸形成鹽，或者通過色譜的方法，例如HPLC，並使用具有手性配體的色譜反應物。
原料原料和中間體是本領域已知的、商業上可得到的和/或按照本領域的已知方法或相似方法製備。
式Ⅱ和式Ⅲ化合物例如可以如PCT申請WO98/25929所述合成，該文引用在此作為參考文獻，或者如實施例所述方法或相似方法合成。
式Ⅳ化合物可通過式Ⅱ化合物與(R)6Sn2的反應得到，其中R是低級烷基，尤其是甲基或正丁基，反應條件是在一種適當的含氮鹼的存在下，例如Hunig鹼，在催化量(優選為約0.1當量)Pd(PPh3)4的存在下，在一種適當的溶劑中，例如甲苯，在高溫下，例如30至90℃，尤其是80至85℃。
式Ⅴ的碘化物是已知的，可以按照文獻操作獲得，或者它們是商業上可得到的。例如，2-碘-6-甲基吡啶可以按照Klei,E.；Teuben,J.H.《有機金屬化學雜誌》1981,214,53-64的方法獲得；2-碘-5-甲基吡啶按照Talik,T.；Talik,Z.《Rocz.Chem.》1968,42,2061-76；2-碘-4-甲基吡啶按照Talik,T.；Talik,Z.《Rocz.Chem.》1968,42,2061-76、Yamamoto,Y.；Yanagi,A.《雜環》1981,16,1161-4或Katritzky,A.R.；Eweiss,N.F.；Nie,P.-L.《JCS》Perkin Trans I 1979,433-5。對應的羥甲基取代的式Ⅴ化合物例如可通過這樣的方法獲得，用SeO2氧化上述碘化物的甲基，隨後例如用NaBH4或DIBALH還原醛，或者氧化甲基生成酸(例如用KMnO4)，隨後還原酯，例如用DIBAL。
優選地，新穎的或同樣是已知的原料和中間體可以按照或類似於實施例所述方法加以製備，其中各反應的用量、溫度等例如可以在±99％、優選為±25％的範圍內調整，並且可以使用其他適當的溶劑和試劑。
本發明也涉及所有新穎的中間體，尤其是實施例中提到的那些。
本發明也涉及式Ⅵ化合物的合成方法， 其特徵在於將式Ⅶ化合物 其中R3是低級烷基，尤其是甲基或正丁基，與式Ⅷ的碘化物偶合， (可從商業上得到，例如來自TCI,USA)反應尤其是在Stille偶合和類似/改進的條件下進行的；尤其是在一種適當的溶劑中，尤其是一種二低級烷基-低級烷醯胺，優選為二甲基甲醯胺或二甲基乙醯胺；式Ⅷ化合物優選地輕微摩爾過量於式Ⅶ化合物，例如1.1至5倍、尤其是1.5至2.5倍過量，例如2.1倍過量；在催化量的AsPh3(尤其是約0.4當量)、PdCl2(MeCN)2(尤其是約0.2當量)和CuI(尤其是約0.1當量)的存在下；在高溫下，例如在50至90℃、優選為約80至約85℃的範圍內。進一步的反應條件參見上述用於式Ⅰ化合物合成的方法變例(a)(「反應a)」)下的詳細說明。反應條件可以按照本領域技術人員的技術訣竅對特定反應物進行優化。
本發明也涉及相反的方法，其中使用一種類似物代替式Ⅶ化合物，該類似物中存在碘而不是Sn(R)3部分，並且使用一種類似物代替式Ⅷ化合物，該類似物具有Sn(R)3部分而不是碘。反應條件類似於上述式Ⅰ化合物合成方法a)下的那些。
本發明也涉及式Ⅸ的依普西龍E、尤其是F的合成方法， 其中Q是氫(依普西龍E)或甲基(依普西龍F)，其特徵在於使式Ⅹ化合物 在一種過氧化物的存在下環氧化為式Ⅸ化合物，優選使用標準的環氧化反應條件，更優選為在H2O2、一種鹼--尤其是KHCO3、乙腈和一種適當的溶劑--尤其是一種醇、例如甲醇的存在下，在優選為0至50℃範圍內的溫度下，尤其是約25℃(如果是甲基過羧亞氨酸(methylperoxycarboximidic acid)的話，就地生成)；或者在(+)-二乙基-D-酒石酸酯和異丙醇鈦、然後是叔丁基氫氧化物的存在下，在一種適當溶劑中，例如二氯甲烷和可選的癸烷，在低溫下，例如-78至0℃，尤其是約-40℃。
這些反應尤其具有終產物收率高和異構體純度高的優點。
藥物製劑本發明也涉及式Ⅰ化合物在藥物製劑製備中的用途，該藥物製劑用於對抗如上所定義的增生性疾病；或者涉及用於所述增生性疾病治療的藥物製劑，包含本發明化合物和藥學上可接受的載體。
式Ⅰ化合物以下稱為活性成分。
本發明也涉及藥物組合物，包含如上所定義的活性成分，用於尤其是如上所定義的增生性疾病的治療，還涉及用於所述治療的藥物製劑的製備。
本發明也涉及藥物組合物，適合於對溫血動物給藥，尤其是人，用於如上所定義的增生性疾病的治療，該組合物包含所述增生性疾病治療有效量的活性成分以及至少一種藥學上可接受的載體。根據本發明的藥物組合物是對溫血動物(人或動物)腸內給藥--例如鼻、直腸或口--或優選的腸胃外給藥--例如肌內或靜脈內--的那些，該組合物包含單獨的有效劑量的藥學上的活性成分，或者以及顯著量的藥學上可接受的載體。活性成分的劑量取決於溫血動物的種類、體重、年齡和個體條件、個體藥動學數據、所治療的疾病和給藥方式；優選地，劑量是如下所示的優選劑量之一，在用於兒科治療時作適當調整。
藥物組合物包含約0.00002至約95％、尤其(例如在備用輸液稀釋液的情況下)是0.0001至0.02％、或者(例如在輸液濃縮液的情況下)是約0.1％至約95％、優選為約20％至約90％的活性成分(在每種情況下均為重量/重量)。根據本發明的藥物組合物例如可以是單位劑型，例如是安瓿、小瓶、栓劑、錠劑、片劑或膠囊劑的形式。
本發明的藥物組合物是按照本身已知的方式製備的，例如採用常規的溶解、冷凍乾燥、混合、造粒或制膏過程。
優選使用活性成分的溶液以及懸浮液、尤其是等滲的含水溶液或懸浮液，例如在冷凍乾燥組合物的情況下，該組合物包含單獨的活性成分或者以及藥學上可接受的載體，例如甘露糖醇，使用前製備這樣的溶液或懸浮液是可能的。藥物組合物可以是無菌的和/或可以包含賦形劑，例如防腐劑、穩定劑、潤溼劑和/或乳化劑、增溶劑、調節滲透壓的鹽和/或緩衝劑，並且是按照本身已知的方式製備的，例如採用常規的溶解或冷凍乾燥過程。所述溶液或懸浮液可以包含增加粘度的物質，例如羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮或明膠。
油中懸浮液包含常用於注射目的的合成或半合成的植物油作為油組分。尤其可以提到的是液體脂肪酸酯，含有具有8至22個、尤其是12至22個碳原子的長鏈脂肪酸作為酸組分，例如月桂酸、十三烷酸、肉豆蔻酸、十五烷酸、棕櫚酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、二十二烷酸，或相應的不飽和酸，例如油酸、反油酸、順芥子酸、巴西酸或亞油酸，如果需要的話加入抗氧化劑，例如維生素E、β-胡蘿蔔素或3,5-二-叔丁基-4-羥基甲苯。這些脂肪酸酯的醇組分最多具有6個碳原子，是單羥基或多羥基的、例如單、二或三羥基的醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或戊醇，或它們的異構體，尤其是乙二醇和甘油。
注射或輸注組合物是在無菌條件下按常規方式製備的；無菌條件也同樣適用於將組合物裝入安瓿或小瓶內，和密封容器。
優選的是輸液劑，包含活性成分和藥學上可接受的有機溶劑。
用在根據本發明的製劑中的藥學上可接受的有機溶劑可以從本領域已知的任意有機溶劑中選擇。優選地，溶劑選自醇，例如絕對乙醇或乙醇/水混合物，更優選為70％乙醇，以及聚乙二醇300、聚乙二醇400、聚丙二醇或N-甲基吡咯烷酮，最優選為聚丙二醇或70％乙醇或聚乙二醇300。
製劑中含有的活性成分濃度優選地可以是約0.01至約100mg/ml，更優選為約0.1至約100mg/ml，進而更優選為約1至約10mg/ml(尤其在輸液濃縮液中)。
可以使用活性成分的純物質或與另一種活性成分的混合物。當以純品形式使用時，所用活性成分濃度優選為0.01至100、更優選為0.05至50、進而更優選為1至10mg/ml(該數字尤其參照輸液濃縮液而言，治療前相應地稀釋，見下)。
這樣的製劑適宜貯存在小瓶或安瓿內。通常，小瓶或安瓿是由玻璃製成的，例如硼矽酸鹽或鈉鈣玻璃。小瓶或安瓿可以是本領域適宜的任意體積，優選地它們的大小足以容納0.5至5ml製劑。在至少2至8℃下貯存長達12至24個月，製劑仍是穩定的。
製劑必須稀釋在適合於靜脈內給藥的含水介質中，然後活性成分製劑才能對患者給藥。
輸液溶液優選地必須具有與體液相同或基本上相同的滲透壓。因此，含水介質優選地含有一種等滲劑，它具有賦予輸液溶液與體液相同或基本上相同的滲透壓的作用。
等滲劑可以從本領域已知的任意那些中選擇，例如甘露糖醇、右旋糖、葡萄糖和氯化鈉。優選地，等滲劑是葡萄糖或氯化鈉。等滲劑的用量應當賦予輸液溶液與體液相同或基本上相同的滲透壓。所需精確量可以通過常規實驗加以確定，並取決於輸液溶液的組成和等滲劑的性質。特定等滲劑的選擇是根據活性試劑的性質作出的。
等滲劑在含水介質中的濃度將取決於所用特定等滲劑的性質。當使用葡萄糖時，所用濃度優選為1至5％w/v，更確切為5％w/v。當等滲劑是氯化鈉時，其用量優選為高達1％w/v，特別是0.9％w/v。
輸液製劑可以用含水介質稀釋。作為稀釋劑使用的含水介質的量是根據活性成分在輸液溶液中的所需濃度加以選擇的。優選地，輸液溶液的製備方法是將一小瓶或安瓿上述輸液濃縮液與含水介質混合，用含水介質加至體積達20ml與200ml之間，優選為約50與約100ml之間。
輸液溶液可以含有其他常用於靜脈內給藥製劑的賦形劑。賦形劑包括抗氧化劑。輸液溶液可以是這樣製備的，將一安瓿或小瓶製劑與含水介質混合，例如5％w/v葡萄糖在注射用水中的溶液，或者尤其是0.9％氯化鈉溶液，混合在一種適合的容器內，例如輸液袋或瓶。輸液溶液一旦製成，優選立即使用或者在製成後短時間內使用，例如6小時內。容納輸液溶液的容器可以從對輸液溶液沒有反應性的任意常規容器中選擇。由上述玻璃類型製成的玻璃容器是適合的，不過可以優選地使用塑料容器，例如塑料輸液袋。
本發明也涉及在必要時治療溫血動物、尤其是人的方法，尤其是增生性疾病的方法，該方法包括將式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽對所述溫血動物、尤其是人給藥，給藥量對所述治療來說是足夠的，尤其有效對抗所述增生性疾病。
劑型可以適宜為靜脈內給藥，劑量為0.01mg至100mg/m2的活性成分，優選為0.1mg至20mg/m2的活性成分。所需精確劑量和給藥持續時間將取決於條件的嚴重性、患者的條件和給藥的速率。藥劑可以每日給藥，或者優選間隔幾天或幾周，例如每周或每3周。由於藥劑可以靜脈內釋放，所接受的劑量和血液濃度可以根據已知的體內和體外技術加以準確測定。
用於口服給藥的藥物組合物可以是這樣獲得的，將活性成分與固體載體混合，如果需要的話將所得混合物造粒，如果需要或必要的話，在加入適當的賦形劑後將該混合物加工為片劑、錠劑內核或膠囊劑。加入塑性載體也是可能的，它允許活性成分計量擴散或被釋放。
本發明化合物可以單獨使用，或者聯合使用其他藥學上的活性物質，例如其他的化療劑，如經典的細胞抑制劑。在與其他化療劑聯合使用的情況下，如上所述製備兩種或多種組分、或兩種或多種獨立製劑(例如在一套試劑盒中的幾部分)的固定組合，或者在已上市的和本領域技術人員已知的標準製劑中使用其他化療劑，將本發明化合物與任意其他化療劑以一定間隔給藥，產生普通的、額外的或優選為協同的腫瘤治療作用。
下列實施例用於闡述本發明，而不打算限制發明範圍。
實施例1依普西龍B的5-甲基吡啶類似物D流程1B 向B(20mg,0.035mmol)的脫氣二甲基甲醯胺(=DMF；350μl,0.1M)溶液中加入C(17mg,0.077mmol,2.1當量)，然後是AsPh3(4mg,0.4當量)、PdCl2(MeCN)2(2mg,0.2當量)和CuI(1mg,0.1當量)，將所得漿液置於80-85℃油浴中25分鐘。反應混合物然後冷卻至室溫，蒸餾除去DMF。將殘餘物溶於乙酸乙酯，通過小矽石塞過濾，用己烷/乙酸乙酯(1/1,v/v)洗脫。溶液然後在真空中濃縮，用製備型TLC純化(己烷/乙酸乙酯1/2)，得到化合物D:MS(電子噴射)預期(M+H)+=502，實測502.
1H-NMR(600MHz,CDCl3):8.37(s,1 H,吡啶H)；7.50(d,l=7,5Hz,1H，吡啶H)；7.19(d,l=7.5Hz,1H,吡啶H),6.59(s,1H,=CH吡啶)。原料流程1A 向7002(見下流程11)(55mg,0.1mmol)的甲苯(1ml,0.1M)溶液中加入Hunig鹼(4μl,0.2當量)以及Pd(PPh3)4(12mg,0.1當量)和(Me6)Sn2(91μl,5當量)。該溶液然後加熱至80-85℃達15分鐘，然後冷卻至室溫。黃色溶液然後通過小矽石塞過濾，用己烷/乙酸乙酯(1/1,v/v)洗脫。溶液然後在真空中濃縮，殘餘物用快速色譜法純化(己烷/二乙醚1/1至己烷/乙酸乙酯1/1)，得到B(20.2mg,34.4％),為蠟狀固體。B的數據HRMS(FAB Cs)預期M+Cs=703/705/707.1276，實測703/705/707.1402.1H-NMR(600 MHz,CDCl3):5.88(t,JH-Sn=40.6Hz,1H,=CH-SnMe3)和0.18(t,JH-Sn=40.6Hz,9H,SnMe3).
實施例2類似於實施例1，製備下列實施例
實施例3通過Stille偶合類策略的、依普西龍E和有關側鏈修飾類似物的總合成方法第一種依普西龍E(3)的總合成方法是通過這樣一種策略完成的，其中的關鍵步驟是乙烯基碘7與噻唑部分(8h，流程2a)之間的Stille偶合(Stille等《應用化學國際英文版》1986,25,508-524；Farina等《有機反應雜誌》1997,50,1-65)。通過環閉合烯烴的置換作用(RCM)製備的大分子內酯內核片段7隨後用於提供適宜的和可行的各種側鏈修飾的依普西龍類似物(9)，用於生物學評價(流程2b)。用於獲得7的RCM反應也提供了反式大分子內酯(11，流程2b)，它充當Stille偶合過程的可供替代選擇的模板，提供了另外一種排列的類似物10。
流程2a)用於依普西龍E總合成方法的逆合成分析和策略 b)依普西龍C(9)的側鏈類似物和它的Δ12,13-反式異構體(10) 必要的乙烯基碘7和11的化學合成描繪在PCT申請WO98/25929中。
用在Stille反應中的錫烷偶合伴侶如流程3所示。
流程3 8b:X=SMe,R=Me8h:X=OH,R=n-丁基8d:X=OEt,R=n-丁基8j:X=F,R=n-丁基8p:X=OMe,R=Me
Stille偶合操作A2.0當量的8,5-10mol％Pd(PPh3)4，甲苯，90-100℃,15-40分鐘,39-88％；操作B2.0-2.2當量的8,20-30mol％Pd(MeCN)2Cl2,DMF,25℃,12-33小時,49-94％偶合伴侶8b、8d、8h和8j和另外的錫烷8p-r是如流程4和5所述，從易於獲得的2,4-二溴噻唑(20)經由一溴化物21製備的。
流程4 A)錫烷8b、8d和8p的製備試劑和條件(b)3.0當量NaSMe,EtOH,25℃,2h,92％；(d)13當量NaOH,EtOH,25℃,30h,91％；(e)13當量NaOH,MeOH,25℃,16h,82％；(f)5-10當量Me3SnSnMe3,5-10mol％ofPd(PPh3)4,甲苯,80-100℃,0.5-3h,81-100％；(g)1.1當量n-BuLi,1.2當量n-Bu3SnCl,-78to 25℃,30min,98％；-流程5 錫烷8h、8j和8q-s的製備試劑和條件(a)1.05當量n-Bu3SnCH=CH2,甲苯,100℃,21h,83％；(b)1.1-1.2-當量n-BuLi,1.2-1.25當量n-Bu3SnCl,-78to25℃,1h,28-85％；(c)H2,0.15當量PtO2,EtOH,25℃,4h；84％；(d)1.2當量n-BuLi,2.0當量DMF,-78to 25℃,2h；(e)1.9當量NaBH4,MeOH,25℃,30min,63％兩步；(f)1.3當量TBSCl,2.0當量咪唑,CH2Cl2,25℃,0.5h,96％；(h)1.2當量TBAF,THF,25℃,20min,95％；(j)1.1當量DAST,CH2Cl2,-78to25℃,10min,57％.
DAST=二乙氨基三氟化硫利用硫甲醇鈉(EtOH,25℃)的硫甲基部分替換20的2-溴取代基，得到硫化物21b，收率92％。將二溴化物20用NaOH分別在乙醇和甲醇中處理，製備乙氧基和甲氧基噻唑21d和21p。然後在鈀催化條件[Pd(PPh3)4，甲苯，80-100℃ ]下，用六甲基二錫將溴化物(21b、21d和21p)轉化為所需的三甲基錫烷(8b,p)；通過滷素-金屬置換(n-BuLi,Et2O,-78℃)，隨後用三正丁基氯化錫捕俘，從乙氧基溴21d得到三正丁基錫烷8d，收率98％。
錫烷(8h、8j和8q-r)的合成也是從普通的前體20實現的(流程5)。於是，2,4-二溴噻唑20經過鈀催化的烯基化作用[n-Bu3SnCH=CH2,Pd(PPh3)4，甲苯，100℃]得到一溴化物21q，後者經過滷素-金屬置換(n-BuLi,Et2O,-78℃)，隨後用三正丁基氯化錫終止，提供所需的錫烷8q。中間體乙烯基溴21q的還原(H2,PtO2,EtOH,25℃)得到乙基噻唑21r，後者以與8q所述相同方式轉化為錫烷8r。錫烷8h和8j的合成是通過關鍵的羥甲基噻唑21h來實現的。
如流程5所示，該醇本身是從二溴化物20得到的，經過涉及鋰化作用(n-BuLi,Et2O,-78℃)的兩步法，隨後用DMF終止，得到中間體醛22，後者然後被還原(NaBH4,MeOH,25℃)，提供所需的醇21h，總收率63％。21h向錫烷8h的轉化要求三步順序，涉及羥基的保護(TBSCl，咪唑，CH2Cl2,96％)、甲錫烷基化(ⅰ.n-BuLi,Et2O,-78℃；ⅱ.n-Bu3SnCl,85％)和隨後的去保護(TBAF,THF,25℃,95％)。所得錫烷8h的氟化(DAST,CH2Cl2,-78℃)直接得到錫烷8j,收率57％。
利用所處理的必要組分，對起決定性作用的Stille偶合進行了研究。可供替換的兩套反應條件被證實是適當的(流程3)。操作A涉及在催化量Pd(PPh3)4的存在下，在80-100℃下加熱所需乙烯基碘(7或11)和適當錫烷8的甲苯溶液15至40分鐘。使用這種方案偶合錫烷8b和8h。其餘的錫烷8d和8j是用另一種較溫和的方法操作B進行偶合的，其中在25℃下用PdCl2(MeCN)2處理乙烯基碘(7或11)與錫烷8在DMF中的混合物。
乙烯基碘7與錫烷8h的偶合提供大分子內酯18h，後者充當天然依普西龍E(3)的前體(流程6a)。流程6a
環氧化物3的製備試劑和條件(a)30當量H2O2，60當量CH3CN,10當量KHCO3,MeOH,25℃,6小時，66％(基於50％轉化率)總合成方法是通過就地生成的甲基過羧亞氨酸的環氧化作用(H2O2,KHCO3,MeCN,MeOH,25℃；Chaudhuri等《有機化學雜誌》1982,47,5196-5198)來完成的，反應提供了依普西龍E(3)(66％，基於50％轉化率)，後者顯示出與文獻公開等同的物理特徵(1HNMR,[α]D)。
Stille偶合方法可擴展到用以輕鬆提供依普西龍B(2)的各種側鏈修飾類似物，修飾既包括C-26，也包括側鏈。具有這些雙重修飾的依普西龍類似物的逆合成分析如流程6b所示，要求製備具有決定意義的乙烯基碘內核片段24。被認為最適合於這項任務的是大分子內酯化策略，類似於依普西龍B和各種依普西龍類似物的合成方法。
流程6b 具有修飾過的C26和側鏈部分的依普西龍類似物的逆合成分析說明合成開始於用在依普西龍E和有關類似物製備(流程3)中的乙烯基碘13(流程7)。
流程7
醛35的立體選擇合成反應和試劑(a)1.7當量TBSCl,2.8當量咪唑，DMF,0至25℃，7小時，84％；(b)ⅰ.1.0mol％OsO4,1.1當量NMO,THF:t-BuOH∶H2O(5∶5∶1),0至25℃,13小時，89％；ⅱ.6.0當量NaIO4,MeOH∶H2O(2∶1),0℃,30分鐘，92％；(c)2.4當量27，苯，回流，1.2小時，98％；(d)3.0當量DIBAL,THF,-78℃,2.5小時，100％；(e)1.4當量TrCl,1.7當量4-DMAP,DMF,80℃,21小時，95％；(f)1.4當量9-BBN,THF,0℃,9小時；然後3N含水NaOH和30％H2O2,0℃,1小時，95％；(g)2.6當量I2,5.0當量咪唑，2.5當量Ph3P,Et2O∶MeCN(3∶1),0℃,45分鐘，97％；(h)1.3當量丙醛的SAMP腙，1.4當量LDA,THF,0℃,16小時；然後-100℃，加入1.0當量32的THF溶液，-100至-20℃,20小時，71％；(i)2.5當量MMPP,MeOH∶磷酸鹽緩衝液pH7(1∶1),0℃,3.5小時，89％；(j)3.0當量DIBAL，甲苯，-78℃,1小時，88％。9-BBN=9-硼二環並[3.3.1]壬烷；DIBAL=二異丁基氫化鋁；4-DMAP=4-二甲氨基吡啶；LDA=二異丙氨基化鋰；NMO=4-甲基嗎啉N-氧化物；SAMP=(S)-(-)-1-氨基-2-(甲氧基甲基)吡咯烷；MMPP=一過鄰苯二甲酸鎂鹽。
烯丙型羥基的保護作用(TBSCl，咪唑，DMF,0至25℃)得到甲矽烷基醚25(84％)，後者通過二羥基化-二醇裂解的兩步順序轉化為醛26(OsO4,NMO,THF/t-BuOH/H2O,0至25℃；然後NaIO4,MeOH/H2O,0℃，兩步收率82％)。利用穩定化內鎓鹽27進行的立體調節的Wittig反應(苯，回流；Marshall等《有機化學雜誌》1986,51,1735-1741；Bestmann等《應用化學國際英文版》1965,4,645-660)得到酯28，為單一的幾何異構體，收率98％。後者化合物的還原(DIBAL,THF,-78℃)得到醇29，經過保護得到三苯基甲基(三苯甲遊基)衍生物30(TrCl,4-DMAP,DMF,70℃,95％)。
然後確立末端烯烴，方法是通過選擇性氫硼化-氧化，得到醇31(9-BBN,THF,0℃；然後NaOH,H2O2,0℃)，後者進一步轉化為二碘化物32(I2，咪唑，Ph3P,0℃)，總產率92％。然後利用Enders烷基化方案引入C8立體中心(丙醛的SAMP腙，LDA,THF,0℃；然後-100℃，加入32的THF溶液；Enders等《不對稱合成》1984；Morrison,J.D.,Ed.,Academic Press,Orlando,Vol 3,p.275-339；我們感謝Enders教授的慷慨禮物SAMP)，生成SAMP腙33，收率71％。轉化為腈34(MMPP,MeOH/磷酸鹽緩衝液pH7,0℃,89％)繼而還原(DIBAL,甲苯，-78℃)，得到所需的醛35，收率88％。
醛35向所需的依普西龍大環內核24的轉化作用總結在流程8中。
流程8
乙烯基碘24的立體選擇合成試劑和條件(a)1.45當量LDA,THF,-78℃，然後1.4當量36的THF溶液，-78℃,1.5小時，然後-40℃,0.5小時；然後1.0當量35的THF溶液，-78℃(66％混合收率，約1.5∶1的37∶38)；(b)3.2當量TBSOTf,4.3當量2,6-二甲基吡啶，CH2Cl2,-20至0℃,2.5小時，90％；(c)HF-pyr.的吡啶溶液，THF,0℃,3小時，84％；(d)2.0當量(COCl)2,4.0當量DMSO,6.0當量Et3N,CH2Cl2,-78至0℃,1.5小時，98％；(e)5.0當量NaClO2,75當量2-甲基-2-丁烯，2.5當量NaH2PO4,t-BuOH∶H2O(4.5∶1),25℃40分鐘，100％；(f)6.0當量TBAF,THF,0至25℃,19小時，95％；(g)6.0當量Et3N,2.4當量2,4,6-三氯苯甲醯氯，THF,0℃,1.5小時；然後加入到2.2當量4-DMAP的甲苯溶液(0.005M，基於43而言)，75℃,2.5小時，84％；(h)25％v/v HF-pyr.的THF溶液，0至25℃,15小時，86％。TBAF=四正丁基氟化銨。
以前用在依普西龍B和有關類似物中的酮36與醛35的醛醇縮合反應(LDA,THF,-78至-40℃)得到醇37和38，總收率66％，對所需6R,7S-非對映異構體(37)具有適當的選擇性。正確的醛醇產物37的分離和矽烷化作用(TBSOTf,2,6-二甲基吡啶，CH2Cl2,-20至0℃)得到三甲矽烷基醚39，收率90％。選擇性除去最初的甲矽烷基醚保護基團(HF-pyr.的吡啶/THF溶液，0℃)得到醇40(84％)，後者經過兩步程序經醛41氧化為酸42(SWern；然後NaClO2,2-甲基-2-丁烯，NaH2PO4,t-BuOH/H2O,25℃，兩步收率98％)。除去C15矽保護基團(TBAF,THF,0至25℃)得到羥基酸43(95％)，後者是大分子內酯化過程的基礎。這個關鍵步驟是在Yamaguchi條件(2,4,6-三氯苯甲醯氯，Et3N,THF；然後加入到4-DMAP的甲苯溶液中，0.005M,75℃；Inanaga等《日本化學會公報》1979,52,1989；Mulzer等《合成》1992,215-228；Nicolaou等《歐洲化學雜誌》1996,2,847-868)下實現的，得到被保護的依普西龍內核44，收率84％。綜合去保護作用(HF-pyr.,THF,0至25℃,86％)完成了關鍵的乙烯基碘中間體24的合成。
利用所處理的中間體24，然後使用Stille偶合方案來附加上所需的雜環部分。使用PdCl2(MeCN)2的溫和操作B最初被認為是最實用和有效的方法，用於從乙烯基碘24和適當的錫烷8(見流程4和5)製備C26羥基依普西龍45-48(流程9)。
流程9
依普西龍類似物54-56和58-59以及脫氧依普西龍45-49和50-53的合成試劑和條件(a)操作A1.7當量8,13mol％Pd(PPh3)4,甲苯，100℃,2小時，15％；操作B1.5-2.0當量8,10-20mol％Pd(MeCN2)Cl2,DMF,25℃,15-33小時,41-56％；(b)1.05-1.4當量DAST,CH2Cl2,-78℃,10分鐘,26-58％；(c)0.5當量(+)-DET,0.5當量，Ti(i-PrO4),2.2當量t-BuOOH,-40℃,CH2Cl2,4A分子篩，1-2小時，52-89％。DET=酒石酸二乙酯。
不幸的是，這些條件不適合於24與乙烯基錫烷8q的偶合(見流程5)。儘管收率低，也只好求助於可供替代選擇的操作A，得到所需的依普西龍49。
C26羥基官能度的存在提供了進一步加工依普西龍產物的適宜操作。例如，將C26醇45-47和49用DAST處理(CH2Cl2,-78℃)，提供氟化依普西龍類似物50-53，收率適中，如流程9所示。或者，反應物45和46在Katsuki-Sharpless條件下的不對稱環氧化[(+)-DET,Ti(i-PrO)4,t-BuOOH,4A分子篩，CH2Cl2,-40℃；Katsuki,T.,Sharpless,K.B.《美國化學會會志》1980,102,5976-5978]分別得到依普西龍54和55。隨後用DAST處理(CH2Cl2,-78℃)，另外得到類似物58和59，收率仍適中。在這方面所面對的獲得54和55等環氧化物更有效的方法是進行乙烯基碘24的不對稱環氧化，得到一普通的中間體，後者充當Stille偶合反應物。儘管關於環氧化物官能度與Stille條件的相容性最初存在保留意見，該方法所需的環氧化物57還是從烯烴24製備的，收率81％，如45和46的合成所述。令我們驚喜的是，使用錫烷8r進行標準偶合操作B，成功地製備了依普西龍類似物56(收率73％，基於70％轉化率)。
Stille偶合策略在具有環氧化物部分的反應物上所取得的成功說明，依普西龍66-68可以從普通的中間體65製備，如流程10所述。
流程10 C26-取代的依普西龍66-68的合成試劑和條件(a)15當量Et3N，8.0當量TMSCl,DMF,25℃,12小時；(b)矽膠，CH2Cl2,25℃,12小時，兩步收率98％；(c)3.0當量NMO,10mol％TPAP,CH2Cl2,25℃,40分鐘，90％；(d)9.7當量Ph3P＋CH3Br-與NaNH2的混合物，THF,-5℃,65％；(e)25當量H2NNH2,16當量H2O2,EtOH,0℃,3小時；(f)HF-pyr.吡啶的THF溶液，0至25℃，2小時，兩步收率75％；(g)1.7-2.3當量8,0.2-0.3mol％Pd(MeCN)2Cl2,DMF,25℃,15-23小時，52-79％。TPAP=過釕酸四丙基銨。
所需模板65的製備是按照五步順序進行的，開始於三醇57的綜合保護作用(TMSCl,Et3N,DMF,25℃)。利用矽膠進行選擇性去保護(CH2Cl2,25℃，兩步收率98％)，得到C26伯羥基官能度，然後氧化(TPAP,NMO,4A分子篩，CH2Cl2,25℃)得到醛62，收率90％。利用溴化甲基三苯膦進行的亞甲基化作用(Schlosser的「即時內鎓鹽」混合物，THF,-5℃；Schlosser,M.,Schaub,B.《Chimia》1982,36,3965)得到烯烴63(65％)，後者與就地生成的二亞胺反應(H2NNH2,H2O2,EtOH,0℃)，得到中間體64。其餘甲矽烷基醚的去保護(HF-吡啶(=pyr.)的吡啶/THF溶液，0℃)得到所需的乙烯基碘65，兩步收率75％。上述Stille偶合操作B然後用於獲得依普西龍66-68，收率適中(流程10)。
本實施例中所描述的化學方法依賴於用來構造一系列依普西龍類似物的Stille偶合方法，與普通的大環中間體相比，側鏈或側鏈與C26位都具有了多樣性。
實施例4根據本發明的化合物結構式表根據本發明的化合物結構式
實施例5生物學結果按照上述方法(利用豬腦微管蛋白測量式Ⅰ化合物對微管蛋白解聚的抑制作用，並與25μM依普西龍B比較；細胞測定類似於上述KB-31細胞的那些)，得到下表給出的所述式Ⅰ化合物的結果
a)5μM供試化合物與25μM依普西龍B對微管蛋白聚合作用的誘導(％)b)表皮樣瘤c)表皮樣瘤(P-gp過度表達)d)肺e)結腸
f)前列腺g)乳腺h)乳腺(多藥耐受性)實施例6進一步的式Ⅰ化合物類似上述和下述方法，製備了具有下式的式Ⅰ化合物實施例6(ⅰ) 實施例6(ⅱ)
實施例6(ⅲ) 實施例6(ⅳ) 實施例6(ⅴ) 實施例6(ⅵ)
實施例6(ⅶ) 實施例6(ⅷ) 實施例6(ⅸ) 實施例6(ⅹ) 和實施例6(ⅹⅰ 實施例6藥物製劑將依普西龍類似物D(實施例1)或實施例2C的依普西龍類似物(15mg)溶於98-100％丙二醇(1.0ml)。溶液通過0.22微米孔徑濾紙進行無菌過濾，裝入1ml安瓿內。灌裝後的安瓿用於貯存和運輸。靜脈內給藥前，將安瓿內容物加入到250至1000ml5％葡萄糖的注射用水溶液中。
實施例7其他錫烷在合成側鏈修飾的依普西龍類似物中的用途，如流程11和12所述 或 R=H、MeR*=H、Me或保護基團，優選為H或Me合成具有吡啶和咪唑變體的各種側鏈修飾的依普西龍B類似物的一般途徑a如前文所述(參見Nicolaou等《四面體》54,7127-7166(1998))；b,d,e條件如前文所述(見上，或Nicolaou等《四面體》54,7127-7166 (1998))；
cNaBH3CN,HMPA,40-45℃保護基團是本領域已知的，尤其是描述在上述標準參考文獻中的那些，以及在所述標準參考文獻中提到的引入和除去方法。
優選地，在7006中，R*是H或甲基。在7004中，R優選為甲基。
流程11和12描述了利用Stille偶合操作從普通的前體57和8h、8x、8y和8z製備多種側鏈修飾的依普西龍類似物。乙烯基碘7002的合成是從前文報導的C26-羥基化合物開始的，涉及57向二碘化物7001的轉化，隨後用NaBH3CN還原將二碘化物7001(1當量；來自57)和氰基硼氫化鈉(10當量)溶於無水HMPA(0.2M)，所得混合物在45-50℃下加熱48小時。冷卻至室溫後，加入水，含水相用乙酸乙酯萃取四次。合併後的有機部分乾燥(Na2SO4)，通過短矽膠塞以除去痕量HMPA(用50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)。蒸發溶劑後，殘餘物用製備型薄層色譜法純化(用50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)，得到純的乙烯基碘7002(84％)。進行向依普西龍E側鏈上的偶合，通過大量其他側鏈與芳族錫烷的偶合完成多種吡啶和咪唑的偶合，如流程11和12所示，其中使用本文概述的標準方法。
流程12 利用所述芳基錫烷(ArSnR3)通過置換作用或大分子內酯化方法獲得某些側鏈修飾的依普西龍類似物的說明，其中R是正丁基或甲基。錫烷是利用本領域已知的標準條件合成的。X是選自下組的原子團低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R是甲基或正丁基。
合成方案一般方法除非另有說明，所有反應都是在氬氣氛下進行的，使用無水、新鮮蒸餾的溶劑，在無水條件下。四氫呋喃(THF)和二乙醚(乙醚)是從鈉-二苯酮中蒸餾的，二氯甲烷(CH2Cl2)、苯(PhH)和甲苯是從氫化鈣中蒸餾的。無水溶劑也是這樣得到的，使它們通過商業上可得到的活性氧化鋁柱。除非另有所述，產物指的是色譜與光譜(1HNMR)一致的物質。除非另有說明，所有在操作中使用的溶劑都是飽和的。除非另有所述，所有試劑都是購買商品質量最好的，使用時無需進一步純化。所有反應都用薄層色譜法監測，在0.25mmE.Merck矽膠板(60F-254)上進行，使用UV光作為觀察劑，使用加熱的7％乙醇磷鉬酸或對甲氧基苯甲醛溶液作為展開劑。E.Merck矽膠(60，粒徑0.040-0.063mm)用於快速柱色譜法。製備型薄層色譜分離是在0.25、0.50或1mm E.Merck矽膠板(60F-254)上進行的。NMR光譜是在Bruker DRX-600、AMX-500、AMX-400或AC-250儀器上記錄的，使用剩餘的未氘化溶劑作為內標進行校準。下列縮寫用來解釋多重性s單峰，d雙峰，t三峰，q四重峰，m多重峰，帶指若干重疊信號，b寬峰。IR光譜是在Perkin-Elmer1600系列FT-IR光譜計上記錄的。旋光度是在Perkin-Elmer241旋光計上記錄的。高分辨質譜(HRMS)是在VG ZAB-ZSE質譜儀上記錄的，在快速原子轟擊(FAB)條件下。
如流程3所述的順式大分子內酯二醇7在25℃下，向碘化物16(305mg,0.491mmol)的THF溶液(8.2ml,0.06M)中加入HF-pyr.(2.7ml)，所得溶液在同一溫度下攪拌27小時。然後小心地加入飽和含水NaHCO3(100ml)與EtOAc(100ml)混合物，終止反應，所得兩相混合物在25℃下攪拌2小時。然後分離萃取液，有機層用飽和含水NaHCO3(100ml)和鹽水(100ml)洗滌，然後乾燥(MgSO4)。用快速柱色譜法純化(矽膠，20至50％EtOAc的己烷溶液)，得到二醇7(208mg,84％)。Rf=0.21(矽膠，25％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-53.1(c 1.37,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3499(br),2930,1732,1688,1469,1379,1259,1149,1093,1048,1006,732cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.43(s,1H,1CH=C(CH3)),5.44(ddd,J=10.5,10.5,4.5Hz,1H,CH=CHCH2),5.34(dd,J= 9.5,2.0Hz,1H,CHOCO),5.32(ddd,J=10.5,10.5,5.5Hz,1H,CH=CHCH2),4.07(ddd,J=11.0,6.0,3.0Hz,1H,(CH3)2CCH(OH)),3.73(ddd,J=2.5,2.5,2.5Hz,1H,CHOH(CHCH3)),3.10(qd,J=7.0,2.5Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.84(d,J=2.5Hz,1H,CH(CH3)CHOHCH(CH3)),2.66(ddd,J=15.0,9.5,9.5Hz,1H,=CHCH2CHO),2.51(dd,J=15.5,11.0Hz,1H,CH2COO),2.42(dd,J=15.5,3.0Hz,1H,CH2COO),2.35(d,J=6.0Hz,1H,(CH3)2CHOH),2.21-2.12(m,2H),2.05-1.97(m,1H),1.88(s,3H,1CH=CCH3),1.76-1.70(m,1H),1.70-1.62(m,1H),1.32(s,3H,C(CH3)2),1.18(d,J=7.0Hz,3H,CH3CH(C=O)),1.10(s,3H,C(CH3)2),1.35-1.05(m,3H),0.99(d,J=7.0Hz,3H,CH3CHCH2)；HRMS(FAB)，計算C22H35IO5(M+Cs+)639.0584，實測639.0557.如流程3所述的反式大分子內酯二醇11按照如二醇7製備所述操作，將碘化物17(194mg,0.313mmol)的THF溶液(5.2ml,0.06M)用HF-pyr.(1.7ml)處理，在快速柱色譜法(矽膠，20至50％EtOAc的己烷溶液)後得到二醇11(134mg，85％)。Rf=0.16(矽膠，25％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-20.0(c1.37,CHCl3)；IR(膜)vmax3478,2930,1732,1693cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.37(d,J=1.5Hz,1H,1CH=CCH3),5.35(ddd,J=14.5,7.0,7.0Hz,1H,CH=CHCH2),5.24(ddd,J=14.5,7.0,7.0Hz,1H,CH=CHCH2),5.17(dd,J=6.5,3.5Hz,1H,CHOCO),4.41(dd,J=8.0,3.5Hz,1H,(CH3)2CCH(OTBS)),3.85(bs,1H,CHOH(CHCH3)),3.38(bs,1H,CHOH(CHCH3)),3.18(qd,J=7.0,6.5Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.68-2.34(m,4H),2.44(s,3H,CH3Ar),2.19-2.11(m,1H),1.96(s,3H,CH3C=CH),1.99-1.93(m,1H),1.67-1.52(m,2H),1.48-1.42(m,1H),1.31-0.99(m,2H),1.22(d,J=7.0Hz,3H,CH3CH(C=O)),1.14(s,3H,C(CH3)2),1.09(s,3H,C(CH3)2),1.02(d,J=7.0Hz,3H,CH3CHCH2),0.84(s,9H,SiC(CH3)3(CH3)2),0.08(s,3H,SiC(CH3)3(CH3)2),-0.01(s,3H,SiC(CH3)3(CH3)2)；HRMS(FAB),計算C22H35IO5(M+Cs+)639.0584,實測639.0606。
如流程4所述的2-硫甲基-4-溴噻唑21b將2,4-二溴噻唑20(82mg,0.34mmol,1.0當量)溶於乙醇(2.3ml,0.15M)，用硫甲醇鈉(75mg,1.02mmol,3.0當量)處理。反應混合物在25℃下攪拌2小時，此時用1HNMR確認反應完全。將混合物倒入水(5ml)中，用乙醚萃取(2×5ml)。合併後的有機部分乾燥(MgSO4)，蒸發溶劑，殘餘物用快速色譜法純化(矽膠，5％EtOAc的己烷溶液)，得到2-硫甲基-4-溴噻唑21b(77mg,92％)。Rf=0.58(矽膠，10％EtOAc的己烷溶液)；IR(膜)vmax3118,2926,1459,1430,1388,1242,1040,966,876,818cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.07(s,1H,ArH),2.69(s,3H,SCH3)；GC/MS(E1),計算C4H4BrNS2(M+)209/211，實測209/211。
如流程4所述的2-乙氧基-4-溴噻唑21d向2,4-二溴噻唑20(58mg,0.239mmol,1.0當量)的EtOH溶液(2.4ml,0.1M)中加入NaOH(122mg,3.05mmol,12.8當量)，所得溶液在25℃下攪拌，直到TLC顯示二溴化物消失(約30小時)。然後使所得黃色溶液在乙醚(10ml)與飽和含水NH4Cl(10ml)之間分布，分層。含水層用乙醚(10ml)萃取，合併後的有機萃取液用鹽水(20ml)洗滌，乾燥(MgSO4)，小心地在減壓下濃縮。快速色譜法(矽膠，17％乙醚的己烷溶液)得到2-乙氧基-4-溴噻唑21d，為揮發性油(45mg,91％)。Rf=0.58(矽膠，17％乙醚的己烷溶液)；IR(膜)
vmax3125,2983,2936,2740,1514,1480,1392,1360,1277,1234,1080,1018,897,823cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.57(s,1H,ArH),4.48(q,J=7.0Hz,2H,CH3CH2),1.43(t,J=7.0Hz,3H,CH3CH2)；GC/MS(E1),計算C4H4BrNSO(M+)193/195，實測193/195.
如流程4所述的2-甲氧基-4-溴噻唑21p向2,4-二溴噻唑20(253mg,1.04mmol,1.0當量)的MeOH溶液(10.5ml,0.1M)中加入NaOH(555mg,13.9mmol,13.3當量)，所得溶液在25℃下攪拌，直到TLC顯示二溴化物消失(約16小時)。然後使所得黃色溶液在乙醚(10ml)與飽和含水NH4Cl(10ml)之間分布，分層。含水層用乙醚(10ml)萃取，合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，小心地在減壓下濃縮。快速柱色譜法(矽膠，10％乙醚的己烷溶液)得到2-甲氧基-4-溴噻唑21p，為揮發性油(138mg,82％)。Rf=0.56(矽膠，17％乙醚的己烷溶液)；IR(膜)vmax3125,2952,2752,1524,1520,1481,1417,1277,1238,1081,982,884,819cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.58(s,1H,ArH),4.09(q,3H,CH3)；GC/MS(El),計算C5H6BrNSO(M+)207/209，實測207/209。
如流程4所述的2-羥甲基-4-溴噻唑21h在-78℃下，向2,4-二溴噻唑20(50mg,0.206mmol,1.0當量)的無水乙醚溶液(2.0ml,0.1M)中加入n-BuLi(154μl,1.6M己烷溶液，0.247mmol,1.2當量)，所得溶液在同一溫度下攪拌30分鐘。然後在-78℃下加入DMF(32μl,0.412mmol,2.0當量)，在-78℃下攪拌30分鐘後，歷經2小時緩慢地將反應混合物加熱至25℃。加入己烷(2.0ml)，使所得混合物通過短矽膠餅，用30％EtOAc的己烷溶液洗脫。蒸發溶劑，得到粗的醛22(50mg)，直接用在下面的步驟中。
在25℃下，向醛22(50mg)的甲醇(2.0ml)溶液中加入硼氫化鈉(15mg,0.397mmol,1.9當量)，所得混合物在同一溫度下攪拌30分鐘。加入EtOAc(1.0ml)和己烷(2.0ml)，使混合物通過短矽膠餅，用EtOAc洗脫。然後蒸發溶劑，粗產物用快速柱色譜法純化(矽膠，20至50％EtOAc的己烷溶液)，得到2-羥甲基-4-溴噻唑21h (25mg，兩步收率63％)。Rf=0.16(矽膠，18％EtOAc的己烷溶液)；IR(膜)vmax3288,3122,2922,2855,1486,1447,1345,1250,1183,1085,1059,967,893cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.20(s,1H,ArH),4.93(s,2H,CH2)；HRMS(FAB)，計算C4H4BrNOS(M+H+)193.9275，實測193.9283.
如流程5所述的2-(叔丁基二甲基甲矽烷氧基甲基)-4-溴噻唑21s在25℃下，向醇21h(59mg,0.304mmol,1.0當量)的CH2Cl2溶液(1.0ml,0.3M)中加入咪唑(62mg,0.608mmol,2.0當量)，然後是叔丁基二甲基氯矽烷(69mg,0.456mmol,1.3當量)。在25℃下30分鐘後，用甲醇(100ml)終止反應，然後通過矽膠，用CH2Cl2洗脫。蒸發溶劑，得到所需的甲矽烷基醚21s(90mg,96％)。Rf=0.60(矽膠，10％EtOAc的己烷溶液)；IR(膜)vmax2943,2858,1489,1465,1355,1254,1193,1108,887,841,780 cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.16(s,1H,ArH),4.93(s,2H,CH2),0,94(s,9H,SiC(CH3)3(CH3)2),0.12(s,6H,SiC(CH3)3(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C10H18BrNOSSi(M+H+)308.0140，實測308.0151。
如流程5所述的2-乙烯基-4-溴噻唑21q向2,4-二溴噻唑20(437mg,1.80mmol,1.0當量)的甲苯溶液中加入三正丁基(乙烯基)錫(552μl,1.89mmol,1.05當量)，然後是Pd(PPh3)4(208mg,0.180mmol,0.1當量)，反應混合物在100℃下加熱。21小時後，混合物冷卻，直接用快速柱色譜法純化(矽膠，0至9％乙醚的己烷溶液)，得到2-乙烯基-4-溴噻唑21q，為一種油(285mg,83％)。Rf=0.50(矽膠，17％乙醚的己烷溶液)；IR(膜)vmax3121,1470,1259,1226,1124,1082,975,926,887,833 cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.13(s,1H,ArH),6.86(dd,J=17.5,11.0Hz,1H,CH=CH2),6.09(d,J=17.5Hz,1H,CHCH2),5.59(d,J=10.5Hz,1H,CHCH2)；GC/MS(E1)，計算C5H4BrNS(M+)189/191，實測189/191.
如流程5所述的2-乙基-4-溴噻唑21r向2-乙烯基-4-溴噻唑21q(279mg,1.47mmol,1.0當量)的乙醇溶液(15ml,0.1M)中加入PtO2(50mg,0.220mmol,0.15當量)，所得混合物在25℃氫氣氛下攪拌4小時。隨後通過短矽膠塞過濾，用EtOAc洗脫，小心地在減壓下濃縮，得到2-乙基-4-溴噻唑21r(238mg,84％)。Rf=0.63(矽膠，CH2Cl2)；IR(膜)vmax3122,2974,2932,1483,1456,1245,1181,1090,1040,956,884,831cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.08(s,1H,ArH),3.03(q,J=7.5Hz,2H,CH2CH3),1.37(t,J=7.5Hz,2H,CH2CH3)；GC/MS(E1),計算C5H6BrNS(M+)191/193，實測191/193.
如流程3所述的2-硫甲基-4-三甲基甲錫烷基噻唑8b向溴噻唑21b(51mg,0.24mmol,1.0當量)的脫氣甲苯溶液(4.9ml,0.1M)中加入六甲基二錫(498μl,2.4mmol,10當量)和Pd(PPh3)4(14mg,0.012mmol,0.05當量)，反應混合物在80℃下加熱3小時。然後將反應混合物冷卻至25℃，快速柱色譜法(矽膠，5％Et3N的己烷溶液)後得到錫烷8b(71mg,100％)。Rf=0.67(矽膠，用Et3N預處理；10％EtOAc)；IR(膜)vmax2981,2924,1382,1030,772 cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.25(s,1H,ArH),2.70(s,3H,SCH3),0.32(s,9H,Sn(CH3)3)；HRMS(FAB)，計算C7H13NS2Sn(M+H+)295.9588，實測295.9576。
如流程4所述的2-甲氧基-4-三甲基甲錫烷基噻唑8p向溴噻唑21p(147mg,0.758mmol,1.0當量)的脫氣甲苯溶液(7.6ml,0.1M)中加入六甲基二錫(785μl,3.79mmol,5.0當量)和Pd(PPh3)4(88mg,0.076mmol,0.1當量)，反應混合物在100℃下加熱30分鐘，按照如錫烷8b合成所述操作，快速柱色譜法(矽膠，5％Et3N的己烷溶液)後得到錫烷8p(170mg,81％)。Rf=0.49(矽膠，用Et3N預處理；17％乙醚的己烷溶液)；IR(膜)vmax2985,2948,2915,1512,1414,1259,1234,1219,1087,988 cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.72(s,1H,ArH),4.07(s,3H,OCH3),0.32(s,9H,Sn(CH3)3)；HRMS(FAB)，計算C7H13NOSSn(M+H+)279.9818，實測279.9810。
如流程5所述的2-(叔丁基二甲基甲矽烷氧基甲基)-4-三正丁基甲錫烷基噻唑8s在-78℃下，向溴噻唑21s(20mg,0.065mmol,1.0當量)的乙醚溶液(1.0ml,0.07M)中加入n-BuLi(49μl,1.6M己烷溶液，0.078mmol,1.2當量)，所得混合物在-78℃下攪拌10分鐘。然後加入三正丁基氯化錫(23μl,0.078mmol,1.2當量)，溶液在-78℃下攪拌10分鐘，然後歷經1小時緩慢加熱至25℃。反應混合物用己烷(2.0ml)稀釋，通過矽膠，用20％EtOAc的己烷溶液洗脫。快速柱色譜法(矽膠，用Et3N預處理；5％乙醚的己烷溶液)得到所需的錫烷8s(35mg,85％)。Rf=0.36(矽膠，5％EtOAc的己烷溶液)；IR(膜)vmax2955,2928,2856,1464,1353,1255,1185,1103,1081,1006,841cm-1；1HNMR(500MHz,C6D6)δ7.08(s,1H,ArH),4.98(s,2H,CH2),1.75-1.57(m,6H,CH3CH2),1.44-1.31(m,6H,CH3CH2CH2),1.26-1.09(m,6H,CH3CH2CH2CH2),0.94(s,9H,SiC(CH3)3(CH3)2),0.91(t,J=7.0Hz,9H,CH3),-0.02(s,6H,SiC(CH3)3(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C22H45NOSSiSn(M+H+)520.2093，實測520.2074。
如流程5所述的2-羥甲基-4-三正丁基甲錫烷基噻唑8h向甲矽烷基醚8s(20mg,0.039mmol,1.0當量)的THF溶液(1.0ml,0.04M)中加入TBAF(46μl,1.0MTHF溶液，0.046mmol,1.2當量)，反應混合物在25℃下攪拌20分鐘。加入己烷(2.0ml)，使混合物通過矽膠，用EtOAc洗脫。蒸發溶劑，得到所需的醇8h(15mg,95％)。Rf=0.09(矽膠，20％乙醚的己烷溶液)；IR(膜)vmax3209,2956,2923,2855,1461,1342,1253,1174,1064,962cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.30(m,1H,ArH),4.99(s,2H,CH2),3.64(bs,1H,OH),1.62-1.45(m,6H,CH3CH2),1.38-1.27(m,6H,CH3CH2CH2),1.19-1.02(m,6H,CH3CH2CH2CH2),0.88(t,J=7.0Hz,9H,CH3)；HRMS(FAB)，計算C16H31NOSSn(M+H+)406.1228，實測406.1237。
如流程5所述的2-氟甲基-4-三正丁基甲錫烷基噻唑8j在-78℃下，向醇8h(90mg,0.223mmol,1.0當量)的CH2Cl2溶液(2.2ml,0.1M)中加入DAST(32μl,0.242mmol,1.1當量)，將溶液在該溫度下攪拌10分鐘。用飽和含水NaHCO3(2ml)終止反應後，混合物加熱至25℃，然後在CH2Cl2(15ml)與飽和含水NaHCO3(15ml)之間分布。分層，含水相用CH2Cl2萃取(2×15ml)。合併後的有機萃取液用鹽水(40ml)洗滌，乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，用Et3N預處理；17％乙醚的己烷溶液)得到錫烷8j(52mg,57％)。Rf=0.59(矽膠，17％乙醚的己烷溶液)；IR(膜)
vmax2956,2925,2870,2863,1464,1376,1358,1184,1084,1023,874,807cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.41(s,1H,ArH),5.69(d,J=47.5Hz,2H,CH2F),1.58-1.52(m,6H,(CH3CH2(CH2)2)3Sn),1.36-1.29(m,6H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn),1.14-1.07(m,6H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn),0.88(t,J=7.5Hz,9H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn)；HRMS(FAB)，計算C16H30FNSSn(M+H+)408.1183，實測408.1169。
如流程4所述的2-乙氧基-4-三正丁基甲錫烷基噻唑8d按照如錫烷8s合成所述操作，將溴噻唑21d(82mg,0.394mmol,1.0當量)的乙醚溶液(3.9ml,0.1M)用n-BuLi(289μl,1.5M己烷溶液，0.433mmol,1.1當量)和三正丁基氯化錫(128μl,0.473mmol,1.2當量)處理，柱色譜法(矽膠，用Et3N預處理；己烷)得到錫烷8d(161mg,98％)。IR(膜)vmax2956,2927,2870,2851,1504,1472,1258,1257,1232,1211,1082,1023,960,894,872cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.65(s,1H,ArH),4.43(q,J=7.0Hz,2H,CH3CH2O),1.61-1.53(m,6H,(CH3CH2(CH2)2)3Sn),1.43(t,J=7.0Hz,3H,CH3CH2),1.37-1.30(m,6H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn),1.08-1.04(m,6H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn),0.89(t,J=7.5Hz,9H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn)；HRMS(FAB),計算C17H33NOSSn(M+H+)418.1380,實測418.1396。
如流程5所述的2-乙烯基-4-三正丁基甲錫烷基噻唑8q按照如錫烷8s合成所述操作，將溴噻唑21q(191mg,1.00mmol,1.0當量)的乙醚溶液(14.0ml,0.07M)用n-BuLi(804μl,1.5M己烷溶液，1.20mmol,1.2當量)和三正丁基氯化錫(341μl,1.26mmol,1.25當量)處理，柱色譜法(矽膠，用Et3N預處理；己烷)得到錫烷8q(112mg,28％)。Rf=0.63(矽膠，17％乙醚的己烷溶液)；IR(膜)vmax2956,2925,2870,2850,1459,1377,1205,1080,981,913,868cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.21(s,1H,ArH),7.02(dd,J=17.5,11.0Hz,1H,CH=CH2),6.00(d,J=17.5Hz,1H,CHCH2),5.52(d,J=11.0Hz,1H,CH=CH2),1.61-1.53(m,6H,(CH3CH2(CH2)2)3Sn),1.37-1.27(m,6H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn),1.13-1.10(m,6H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn),0.88(t,J=7.5Hz,9H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn)；HRMS(FAB),計算C17H31NSSn(M+H+)402.1279,實測402.1290。如流程5所述的2-乙基-4-三正丁基甲錫烷基噻唑8r按照如錫烷8s合成所述操作，將溴噻唑21r(238mg,1.24mmol,1.0當量)的乙醚溶液(12.0ml,0.1M)在-78℃下用n-BuLi(909μl,1.5M己烷溶液，1.36mmol,1.1當量)和三正丁基氯化錫(403μl,1.49mmol,1.2當量)處理，柱色譜法(矽膠，用Et3N預處理；己烷)得到錫烷8r(357mg,72％)。Rf=0.64(矽膠，CH2Cl2)；IR(膜)vmax2956,2925,2870,2852,1464,1376,1292,1174,1072,1033,953,875cm-1；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.18(s,1H,ArH),3.10(q,J=7.6Hz,2H,CH3CH2Ar),1.60-1.50(m,6H,(CH3CH2(CH2)2)3Sn),1.39(t,J=7.6Hz,3H,CH3CH2Ar),1.36-1.30(m,6H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn),1.13-1.08(m,6H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn),0.88(t,J=7.3Hz,9H,(CH3CH2CH2CH2)3Sn)；HRMS(FAB)，計算C17H33NSSn(M+H+)404.1434，實測404.1416。
如流程3所述的順式大分子內酯18h將乙烯基碘7(10.0mg,0.020mmol,1.0當量)、錫烷8h(16.0mg,0.040mmol,2.0當量)與Pd(PPh3)4(2.1mg,0.002mmol,0.1當量)的脫氣甲苯溶液(200μl,0.1M)在100℃下加熱20分鐘。將反應混合物倒入飽和含水NaHCO3-NaCl(5ml)，用EtOAc萃取(2×5ml)。乾燥合併後的有機部分(Na2SO4)後，蒸發溶劑，用製備型薄層色譜法純化(500mm矽膠板，50％EtOAc的己烷溶液)，得到大分子內酯18h(7.5mg,76％)。Rf=0.29(矽膠，50％EtOAc的己烷溶液)；[c]22D-44.2(c0.60,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3387(br),2925,2859,1730,1688,1508,1461,1256,1183,1150,1061,980,755cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.12(s,1H,ArH),6.61(s,1H,CH=C(CH3)),5.45(ddd,J=10.5,10.5,4.5Hz,1H,CH=CHCH2),5.38(ddd,J=10.5,10.5,5.0Hz,1H,CH=CHCH2),5.31(d,J =8.5Hz,1H,CHOCO),4.92(d,J=4.0Hz,2H,CH2OH),4.23(ddd,J=11.5,5.5,2.5Hz,1H,(CH3)2CCH(OH)),3.75-3.71(m,1H,CHOH(CHCH3)),3.32(d,J=5.5Hz,1H,C(CH3)2CHOH),3.25(t,J=4.0Hz,1H,CH2OH),3.13(qd,J=7.0,2.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.03(d,J=2.0Hz,1H,CH3CHCH(OH)CHCH3),2.68(ddd,J=15.0,9.5,9.5Hz,1H,=CHCH2CHO),2.50(dd,J=15.0,11.5Hz,1H,CH2COO),2.35(dd,J=15.0,2.5Hz,1H,CH2COO),2.31-2.24(m,1H,=CHCH2CHO),2.24-2.16(m,1H),2.09(s,3H,CH=CCH3),2.06-1.98(m,1H),1.82-1.73(m,1H),1.72-1.62(m,1H),1.39-1.17(m,3H),1.33(s,3H,C(CH3)2),1.19(d,J=7.0Hz,3H,CH3CH(C=O)),1.08(s,3H,C(CH3)2),1.00(d,J=7.0Hz,3H,CH3CHCH2)；HRMS(FAB)，計算C26H39NO6S(M+Cs+)626.1552,實測626.1530。
如流程2和3所述的依普西龍E(3)向內酯18h(10.0mg,0.020mmol,1.0當量)的甲醇溶液(600μl,0.03M)中加入乙腈(32μl,0.606mmol,30當量)、KHCO3(10mg,0.102mmol,5當量)和過氧化氫(27μl,35％w/w水溶液，0.303mmol,15當量)，反應混合物在25℃下攪拌3小時。然後另加入乙腈(32μl,0.606mmol,30當量)、KHCO3(10mg,0.102mmol,5當量)和過氧化氫(27μl,35％w/w水溶液，0.303mmol,15當量)，繼續攪拌3小時。然後使反應混合物直接通過短矽膠塞，用乙醚洗脫，濾液在減壓下濃縮。製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，50％EtOAc的己烷溶液)得到未反應的原料18h(5.0mg,50％)和依普西龍E(3)(3.4mg,33％)。Rf=0.56(矽膠，66％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-27.5(c0.20,CHCl3)；IR(膜)vmax3413,2928,2867,1731,1689,1462,1375,1257,1152,1061,978,756cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.13(s,1H,ArH),6.61(s,1H,CH=CCH3),5.46(dd,J=8.1,2.4Hz,1H,CHOCO),4.94(d,J=5.2Hz,2H,CH2OH),4.16-4.12(m,1H,(CH3)2CCH(OH)),3.82-3.78(m,1H,CHOH(CHCH3)),3.66(bs,1H,OH),3.23(qd,J= 6.8,5.2Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.04(ddd,J=8.1,4.5,4.5Hz,1H,CH2CH(O)CHCH2),2.91(ddd,J=7.3,4.5,4.1Hz,1H,CH2CH(O)CHCH2),2.61(t,J=5.2Hz,1H,CH2OH),2.55(dd,J=14.7,10.4Hz,1H,CH2COO),2.48(bs,1H,OH),2.45(dd,J=14.7,3.2Hz,1H,CH2COO),2.14-2.07(m,1H,CH2CH(O)CHCH2),2.11(s,3H,CH=CCH3),1.91(ddd,J=15.1,8.1,8.1Hz,1H,CH2CH(O)CHCH2),1.78-1.66(m,2H,CH2CH(O)CHCH2),1.52-1.38(m,5H),1.36(s,3H,C(CH3)2),1.18(d,3H,J=6.8Hz,CH3CH(C=O)),1.10(s,3H,C(CH3)2),1.01(d,J=7.0Hz,3H,CH3CHCH2)；HRMS(FAB)，計算C26H39NO7S(M+H+)510.2525，實測510.2539。如流程3所述的順式大分子內酯18b按照如內酯18h合成所述操作，將乙烯基碘7(9.2mg，0.018mmol,1.0當量)、錫烷8b(10.7mg,0.036mmol,2.0當量)與Pd(PPh3)4(2.1mg,0.0018mmol,0.1當量)的脫氣甲苯溶液(180μl,0.1M)在100℃下加熱40分鐘，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，75％乙醚的己烷溶液)後得到大分子內酯18b(4.1mg,44％)。Rf=0.50(矽膠，50％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-38.6(c0.21,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3444,2925,1732,1682,1259,1037,756cm-1；1H-NMR(500MHz,CDCl3)δ6.99(s,1H,CH=C(CH3)),6.52(bs,1H,ArH),5.45(ddd,J=10.5,10.5,4.0Hz,2H,CH=CHCH2),5.39(ddd,J=10.5,10.5,4.0Hz,1H,CH=CHCH2),5.29(d,J=8.0Hz,1H,CHOCO),4.20(ddd,J=11.0,5.5,2.5Hz,1H,(CH3)2CCH(OH)),3.75-3.73(m,1H,CHOH(CHCH3)),3.13(qd,J=6.5,2.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.98(d,J=2.0Hz,1H,CHOH(CHCH3)),2.93(d,J=5.5Hz,1H,(CH3)2CCH(OH)),2.71(ddd,J=15.0,10.0,10.0Hz,1H,CH=CHCH2),2.70(s,3H,SCH3),2.51(dd,J=15.5,11.5Hz,1H,CH2COO),2.30(dd,J=15.0,2.5Hz,1H,CH2COO),2.28-2.16(m,2H),2.13(d,J=1.0Hz,3H,CH=CCH3),2.06-1.98(m,1H),1.79-1.60(m,2H),1.40-1.06(m,3H),1.33(s,3H,C(CH3)2),1.19(d,J=7.0Hz,Hz,CH3CH(C=O)),1.09(s,3H,C(CH3)2),1.00(d,J=7.0Hz,3H,CH3CHCH2)；HRMS(FAB)，計算C26H39NO5S2(M+Cs+)642.1324，實測642,1345。
如流程3所述的反式大分子內酯19b按照如內酯18h合成所述操作，將乙烯基碘11(6.9mg,0.014mmol,1.0當量)、錫烷8b(8.2mg,0.028mmol,2.0當量)與Pd(PPh3)4(1.6mg,0.0014mmol,0.1當量)的脫氣甲苯溶液(140μl,0.1M)在100℃下加熱40分鐘，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，75％乙醚的己烷溶液)後得到大分子內酯19b(5.0mg,72％)。Rf=0.47(矽膠，50％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-32.9(c0.35,CHCl3)；IR(薄膜) vmax3488,2928,1728,1692,1259,1036,800,757cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.00(s,1H,ArH),6.48(s,1H,CH=CCH3),5.53(ddd,J=15.0,7.5,7.5Hz,1H,CH=CHCH2),5.40(d,J=8.0Hz,1H,CHOCO),5.39(ddd,J=15.0,7.5,7.5Hz,1H,CH=CHCH2),4.12(ddd,J=11.0,2.5,2.5Hz,1H,(CH3)2CCHOH),3.77-3.74(m,1H,CHOH(CHCH3)),3.24(m,1H,CH=CHCH2),3.07(m,1H,CH3CH(C=O)),2.70(s,3H,SCH3),2.61(d,J=3.5Hz,1H,CHOH(CHCH3)),2.59-2.44(m,5H),2.19-2.12(m,1H),2.13(s,3H,CH=CCH3),2.02-1.94(m,1H),1.70-1.55(m,2H),1.48-1.41(m,1H),1.29(s,3H,C(CH3)2),1.18(d,J=7.0Hz,3H,CH3CH(C=O)),1.08(s,3H,C(CH3)2),0.99(d,J=7.0Hz,3H,CH3CHCH2)；HRMS(FAB)，計算C26H39NO5S2(M+Cs+)642.1324，實測642.1298。
如流程3所述的順式大分子內酯18d將乙烯基碘7(14mg,0.028mmol,1.0當量)、錫烷8d(14mg,0.055mmol,2.0當量)與PdCl2(MeCN)2(2.0mg,0.008mmol,0.3當量)的脫氣DMF溶液(280μl,0.1M)在25℃下攪拌20小時。所得混合物然後減壓濃縮，通過二氧化矽過濾，用EtOAc洗脫，用製備型薄層色譜法純化(250mm矽膠板，50％乙醚的己烷溶液)，得到大分子內酯18d(12.5mg,89％)。Rf=0.30(矽膠，66％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-70.2(c 0.63,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3501(br),2934,1732,1688,1526,1472,1386,1232,1150,1091,1007cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.47(s,1H,ArH),6.33(s,1H,CH=C(CH3)),5.43(ddd,J=10.5,10.5,3.5Hz,1H,CH=CHCH2),5.37(ddd,J=10.5,10.5,4.5Hz,1H,CH=CHCH2),5.26(dd,J=9.5,1.5Hz,1H,CHOCO),4.44(q,J=7.0Hz,2H,CH3CH2O),4.18(ddd,J=11.0,5.5,2.5Hz,1H,(CH3)2CCH(OH)),3.73(m,1H,CHOH(CHCH3)),3.12(qd,J=7.0,2.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.98(d,J=1.5Hz,1H,OH),2.95(d,J=5.5Hz,1H,OH),2.69(ddd,J=15.0,10.0,10.0Hz,1H,CH=CHCH2CHO),2.49(dd,J=15.5,11.5Hz,1H,CH2COO),2.36(dd,J=15.5,2.5Hz,1H,CH2COO),2.23-2.16(m,3H),2.11(s,3H,CH=C(CH3)),2.04-1.98(m,1H),1.77-1.71(m,1H),1.70-1.61(m,1H),1.42(t,J=7.0Hz,3H,CH3CH2O),1.38-1.16(m,2H),1.31(s,3H,C(CH3)2),1.17(d,J=7.0Hz,3H,CH3CH(C=O)),1.08(s,3H,C(CH3)2),0.99(d,J=7.0Hz,3H,CH3CHCH2)；HRMS(FAB),計算C27H41NO6S(M+Cs+)640.1709，實測640.1732。如流程3所述的反式大分子內酯19d按照如內酯18d合成所述操作，將乙烯基碘11(14mg,0,028mmol,1.0當量)、錫烷8d(23mg,0.055mmol,2.0當量)與PdCl2(MeCN)2(2.0mg,0.008mmol,0.3當量)的脫氣DMF溶液(280μl,0.1M)在25℃下攪拌20小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，50％EtOAc的己烷溶液)後得到大分子內酯19d(12mg,86％)。Rf=0.27(矽膠，66％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-28.0(c0.48,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3495(br),2930,1732,1690,1526,1472,1233,1017,976cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.50(s,1H,ArH),6.30(s,1H,CH=C(CH3)),5.57-5.51(m,1H,C-H=CHCH2),5.42-5.36(m,1H,CH=CHCH2),5.37(dd,J=9.0,2.5Hz,1H,CHOCO),4.46(q,J=7.0Hz,2H,CH3CH2O),4.10(ddd,J=10.5,3.5,3.0Hz,1H,(CH3)2CCH(OH)),3.76-3.73(m,1H,CHOH(CHCH3)),3.23(qd,J=7.0,4.5Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.07(d,J=3.5Hz,1H,OH),2.57-2.38(m,3H),2.56(dd,J=15.5,10.5Hz,1H,CH2COO),2.47(dd,J=15.5,2.5Hz,1H,CH2COO),2.18-2.16(m,1H),2.13(s,3H,CH=C(CH3)),2.03-1.94(m,1H),1.70-1.55(m,2H),1.48-1.41(m,1H),1.44(t,J=7.0Hz,3H,CH3CH2O),1.29(s,3H,C(CH3)2),1.27-1.16(m,1H),1.18(d,J=7.0Hz,3H,CH3CH(C=O)),1.08(s,3H,C(CH3)2),0.98(d,J=7.0Hz,3H,CH3CHCH2)；HRMS(FAB),計算C27H41NO6S(M+Cs+)640.1709，實測640.1731。
如流程3所述的反式大分子內酯19h按照如內酯18h合成所述操作，將乙烯基碘11(5.1mg,0.010mmol,1.0當量)、錫烷8h(8.0mg,0.020mmol,2.0當量)與Pd(PPh3)4(1.1mg,0.001mmol,0.1當量)的脫氣甲苯溶液(100μl,0.1M)在100℃下加熱20小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，50％EtOAc的己烷溶液)後得到大分子內酯19h(4.3mg,88％)。Rf=0.20(矽膠，50％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-31.5(c 0.60,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3410(br),2930,1726,1692,1463,1374,1255,1180,1064,973cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.13(s,1H,ArH),6.60(s,1H,CH=C(CH3)),5.48(ddd,J=15.0,7.5,7.5Hz,1H,CH=CHCH2),5.40(dd,J=5.5,5.5Hz,1H,CHOCO),5.35(ddd,J=15.0,7.5,7.5Hz,1H,CH=CHCH2),4.91(d,J=7.0Hz,2H,CH2OH),4.23(ddd,J=9.5,3.5,3.0Hz,1H,(CH3)2CCH(OH)),3.74(ddd,J=7.0,5.0,2.5Hz,1H,CHOH(CHCH3)),3.34(t,J=7.0Hz,1H,CH2OH),3.26(qd,J=7.0,7.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.05(d,J=3.5Hz,1H,C(CH3)2CHOH),,3.00(d,J=5.0Hz,1H,CH3CHCH(OH)CHCH3),2.56(dd,J=15.5,9.5Hz,1H,CH2COO),2.47(dd,J=15.5,3.0Hz,1H,CH2COO),2.58-2.45(m,1H,=CHCH2CH),2.24-2.16(m,1H,=CHCH2CH),2.08(s,3H,CH=CCH3),1.98-1.90(m,1H),1.63-1.56(m,2H),1.54-1.46(m,1H),1.41-1.30(m,1H),1.27(s,3H,C(CH3)2),1.20(d,J=7.0Hz,3H,CH3CH(C=O)),1.07(s,3H,C(CH3)2),0.99(d,J=7.0Hz,3H,CH3CHCH2)；HRMS(FAB)，計算C26H39NO6S(M+Cs+)626.1552，實測626.1536。
如流程3所述的順式大分子內酯18j按照如內酯18d合成所述操作，將乙烯基碘7(12.5mg,0.025mmol,1.0當量)、錫烷8j(20mg,0.049mmol,2.0當量)與PdCl2(MeCN)2(1.5mg,0.006mmol,0.2當量)的脫氣DMF溶液(250μl,0.1M)在25℃下攪拌20小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，67％乙醚的己烷溶液)後得到大分子內酯18j(9mg,74％)。Rf=0.32(矽膠，50％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-65.3(c0.45,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3406(br),2924,2852,1732,1682,1455,1366,1263,1192,1148,1096,1043,983,881cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.21(s,1H,ArH),6.62(s,1H,CH=C(CH3)),5.60(d,J=47.0Hz,2H,CH2F),5.45(ddd,J=10.5,10.5,4.0Hz,1H,CH=CHCH2),5.38(ddd,J=10.0,10.0,5.0Hz,1H,CH=CHCH2),5.31(dd,J=10.0,1.5Hz,1H,CHOCO),4.19(ddd,1H,J=11.0,5.0,2.5Hz,1H,(CH3)2CCH(OH)),3.73(m,1H,CHOH(CHCH3)),3.13(qd,J=7.0,2.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.97(d,J=2.0Hz,1H,OH),2.93(d,J=5.5Hz,1H,OH),2.71(ddd,J=15.0,10.0,10.0Hz,1H,CH=CHCH2CHO),2.51(dd,J=15.5,11.5Hz,1H,CH2COO),2.39(dd,J=15.5,2.0Hz,1H,CH2COO),2.29-2.22(m,1H),2.22-2.16(m,1H),2.11(d,J=1.0Hz,3H,CH=C(CH3)),2.06-1.99(m,1H),1.77-1.71(m,1H),1.69-1.62(m,1H),1.35-1.16(m,3H),1.32(s,3H,C(CH3)2),1.18(d,J=7.0Hz,3H,CH3CH(C=O)),1.08(s,3H,C(CH3)2),1.00(d,J=7.0Hz,3H,CH3CHCH2)；HRMS(FAB)，計算C26H38FNO5S(M+Cs+)628.1509，實測628.1530。
如流程3所述的反式大分子內酯19j按照如內酯18d合成所述操作，將乙烯基碘11(15mg,0.030mmol,1.0當量)、錫烷8j(27mg,0.066mmol,2.2當量)與PdCl2(MeCN)2(1.5mg,0.006mmol,0.2當量)的脫氣DMF溶液(300μl,0.1M)在25℃下攪拌20小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，50％EtOAc的己烷溶液)後得到大分子內酯19j(11mg,75％)。Rf=0.17(矽膠，33％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-37.1(c0.55,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3508(br),2934,1730,1690,1505,1461,1428,1366,1251,1196,1150,1041,977cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.22(s,1H,ArH),6.58(s,1H,CH=C(CH3)),5.61(d,J=47.0Hz,2H,CH2F),5.55-5.50(m,1H,CH=CHCH2),5.41-5.35(m,2H,CH=CHCH2and CHOCO),4.15(ddd,J=10.0,3.5,3.0Hz,1H,(CH3)2CCH(OH)),3.75-3.73(m,1H,CHOH(CHCH3)),3.24(qd,J=7.0,4.5Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.05(d,J=4.0Hz,1H,OH),2.62(d,J=4.0Hz,1H,OH),2.56(dd,J=15.0,10.5Hz,1H,CH2COO),2.49(dd,J=15.5,2.5Hz,1H,CH2COO),2.49-2.44(m,2H),2.20-2.13(m,1H),2.10(s,3H,CH=C(CH3)),2.01-1.93(m,1H),1.67-1.56(m,2H),1.49-1.43(m,1H),1.31-1.17(m,2H),1.28(s,3H,C(CH3)2),1.18(d,J=6.5Hz,3H,CH3CH(C=O)),1.07(s,3H,C(CH3)2),0.98(d,J=7.0Hz,3H,CH3CHCH2)；HRMS(FAB),計算C26H38FNO5S(M+Cs+)628.1509，實測628.1487。
如流程7所述的甲矽烷基醚25在0℃下，向醇13(12.96g,54.4mmol,1.0當量)的DMF溶液(180ml,0.3M)中加入咪唑(10.2g,150.0mmol,2.8當量)，然後是叔丁基二甲基氯矽烷(13.5g,89.8mmol,1.7當量)。歷經7小時加熱至25℃後，在減壓下除去溶劑，使所得的油在乙醚(200ml)與飽和含水NH4Cl(200ml)之間分布。含水層用乙醚(200ml)萃取，合併後的有機萃取液用鹽水(550ml)洗滌，乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，0至5％EtOAc的己烷溶液)得到甲矽烷基醚25，為一種油(16.03g,84％)。Rf=0.48(己烷)；[α]22D-17.5(c 1.65,CHCl3)；IR(薄膜) vmax2954,2928,2857,1472,1361,1278,1252,1082,914,836,776,677cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.15(s,1H,CH=CCH3),5.74-5.66(m,1H,CH=CH2),5.03(bm,1H,CH=CH2),5.01(s,1H,CH=CH2),4.16(dd,J=6.5,6.5Hz,1H,CHOH),2.25(m,1H,CH2=CHCH2),1.77(s,3H,CH=CCH3),0.88(s,9H,SiC(CH3)3),0.04(s,3H,Si(CH3)2),-0.01(s,3H,Si(CH3)2)；
如流程7所述的醛26在0℃下，向烯烴25(16.0g,45.3mmol,1.0當量)的THF(206ml)、t-BuOH(206ml)與H2O(41ml)溶液中加入4-甲基嗎啉N-氧化物(NMO)(5.84g,49.8mmol,1.1當量)，然後是OsO4(5.2ml,2.5％w/vt-BuOH溶液，0.453mmol,0.01當量)。混合物在25℃下劇烈攪拌13小時，然後用飽和含水Na2SO3(125ml)終止反應。所得溶液攪拌2小時，然後在EtOAc(150ml)與水(150ml)之間分布。分離有機相，含水相用EtOAc萃取(2×200ml)。合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，過濾，在減壓下除去溶劑。快速柱色譜法(矽膠，50至90％乙醚的己烷溶液)得到未反應的原料(1.0g,6％)和所需的二醇，為大約1∶1的非對映異構體混合物(15.5g,89％)。Rf=0.44(矽膠，50％EtOAc的己烷溶液)；IR(薄膜)vmax3387,2952,2928,1252,1080,837,777cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.28and6.26(singlets,1Htotal,CH=CCH3),4.47-4.42(m,1H,CHOSi),3.86-3.76(m,1H,CHOH),3.61-3.55and3.49-3.39(m,2Htotal,CH2OH),3.33and3.15(2doublets,J=2.0和3.5Hz,1Htotal,CHOH),2.46and2.45(triplets,J=5.5and5.5Hz,CH2OH),1.78和1.76(singlets,3Htotal),1.63-1.60and1.58-1.53(m,2Htotal,CH2),0.88and0.87(singlets,9Htotal,SiC(CH3)3),0.08and0.07(singlets,3Htotal,Si(CH3)2),0.01and0.00(singlets,3Htotal,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C13H27IO3Si(M+Na+)409.0672實測409.0662。
將二醇(如上所述得到)(23.3g,60.2mmol,1.0當量)溶於MeOH(400ml)與水(200ml)的混合物，溶液冷卻至0℃。然後歷經5分鐘分批加入NaIO4(77.2g,361.1mmol,6.0當量)，所得漿液在25℃下劇烈攪拌30分鐘。反應完全後，使混合物在CH2Cl2(500ml)與水(500ml)之間分布，分離有機相。含水層用CH2Cl2(500ml)萃取，合併後的有機萃取液用鹽水(1L)洗滌，乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，17至50％乙醚的己烷溶液)得到醛26，為一種油(19.6g,92％)。Rf=0.35(矽膠，20％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-34.1(c2.8,CHCl3)；IR(薄膜)vmax2954,2928,2885,2856,1728,1471,1279,1254,1091,838,777,677cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ9.73(dd,J=2.5,2.5Hz,1H,CHO),6.34(s,1H,CH=CCH3),4.70(dd,J=8.0,4.0Hz,1H,CHOSi),2.68(ddd,J=16.0,8.3,2.5Hz,1H,(CHO)CH2),2.44(ddd,J=16.0,4.0,2.5Hz,1H,(CHO)CH2),1.80(s,3H,CH=CCH3),0.85(s,9H,SiC(CH3)3),0.05(s,3H,Si(CH3)2),0.01(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C12H23IO2Si(M+Na+)377.0410實測377.0402。
如流程7所述的甲基酯28將醛26(19.6g,55.2mmol,1.0當量)與穩定化的內鎓鹽27(50.2g,134.0mmol,2.4當量)(從4-溴-1-丁烯製備，通過(ⅰ)形成磷鹽；(ⅱ)與KHMDS形成陰離子；和(ⅲ)用MeOC(O)Cl終止)(見Marshall,J.A.等《有機化學雜誌》51,1735-1741(1986)和Bestmann,H.J.《應用化學國際英文版》1965,645-60)的苯溶液(550ml,0.1M)在回流下加熱1.5小時。冷卻至25℃後，混合物過濾，在減壓下除去溶劑。快速柱色譜法(矽膠，9至17％乙醚的己烷溶液)得到甲基酯28(24.5g,98％)。Rf=0.37(矽膠，20％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-7.25(c1.6,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3078,2952,2920,2856,1720,1462,1434,1276,1253,1208,1084,836,776,672cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ6.81(dd,J=7.4,7.4Hz,1H,CH=CCOOCH3),6.22(s,1H,CH=CCH3),5.83-5.75(m,1H,CH=CH2),4.99-4.98(m,1H,CH=CH2),4.96(m,1H,CH=CH2),4.22(dd,J=7.5,5.1Hz,1H,CHOSi),3.72(s,3H,COOCH3),3.05(d,J=6.0Hz,2H,CH2C(CO2Me)),2.40(ddd,J=15.0,7.5,7.5Hz,1H,CH2CHOSi),2.33(ddd,J=15.0,7.5,5.1Hz,1H,CH2CHOSi),1.77(s,3H,CH=CCH3),0.85(s,9H,SiC(CH3)3),0.02(s,3H,Si(CH3)2),-0.02(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB),計算C18H31lO3Si(M+CS+),583.0142實測583.0159。
如流程7所述的烯丙醇29將甲基酯28(24.5g,54.3mmol,1.0當量)溶於THF(280ml)，溶液冷卻至-78℃。在-78℃下，歷經50分鐘滴加DIBAL(163.0ml,1MCH2Cl2溶液，163.0mmol,3.0當量)，反應混合物進一步攪拌80分鐘。用飽和含水酒石酸鉀鈉(150ml)終止反應，所得混合物歷經16小時加熱至25℃。分離有機層，含水相用乙醚萃取(3×250ml)。合併後的有機萃取液用鹽水(650ml)洗滌，乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，17至50％乙醚的己烷溶液)得到醇29(22.9g,100％)。Rf=0.11(矽膠，20％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-7.25(c1.6,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3346,3078,2954,2928,2857,1637,1471,1361,1276,1252,1078,1005,836,775,674,558cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.16(s,1H,CH=CCH3),5.81-5.73(m,1H,CH=CH2),5.45(dd,J=6.5,6.5Hz,1H,CH=CCH2OH),5.03(m,2H,CH=CH2),4.16(dd,J=6.5,6.5Hz,1H,CHOSi),4.02(d,J=4.5Hz,2H,CH2OH),2.85(dd,J=15.0,5.1Hz,1H,CH2CH=CH2),2.84(dd,J=15.0,5.0Hz,1H,CH2CH=CH2),2.27(ddd,J=15.0,6.5,6.5Hz,1H,CH2CHOSi),2.25(ddd,J=15.0,6.5,6.5Hz,1H,CH2CHOSi),1.78(s,3H,CH=CCH3),0.88(s,9H,SiC(CH3)3),0.02(s,3H,Si(CH3)2),-0.02(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算.C17H31IO2Si(M+Cs+),555.0192實測555.0177。
如流程7所述的三苯基甲基醚30將醇29(23.5g,55.7mmol,1.0當量)溶於DMF(300ml,0.15M),加入4-DMAP(11.3g,92.5mmol,1.7當量)和三苯甲遊基氯(22.1g,79.3mmol,1.4當量)。反應混合物在80℃下攪拌21小時，冷卻至室溫，在減壓下除去溶劑。所得殘餘物用快速柱色譜法純化，得到所需的醚30，為一種油(35.3g,95％)。Rf=0.88(矽膠，20％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-0.74(c 0.3,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3058,2927,2854,1488,1470,1448,1250,1082,836,702,632cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.45-7.43(m,5H,Ph),7.32-7.21(m,10H,Ph),6.19(s,1H,CH=CCH3),5.61(m,2H,CH=CH2,CH=CH2),4.87(m,2H,CH=CH2,CH(C)CH2OTr),4.19(dd,J=6.8,6.8Hz,1H,CHOSi),3.46(s,2H,CH2OTr),2.78(dd,J=15.4,6.7Hz,1H,CH2CH=CH2),2.73(dd,J=15.4,6.3Hz,1H,CH2CH=CH2),2.33(ddd,J=14.5,6.8,6.8Hz,1H,CH2CHOSi),2.31(ddd,J=14.5,6.8,6.8Hz,1H,CH2CHOSi),1.80(s,3H,CH=CCH3),0.87(s,9H,SiC(CH3)3),0.04(s,3H,Si(CH3)2),0.00(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C36H45IO2Si(M+Cs+),797.1288實測797.1309。
如流程7所述的醇31將烯烴30(35.3g,53.1mmol,1.0當量)溶於THF(53ml,1.0M),溶液冷卻至0℃。歷經1.5小時滴加9-BBN(149ml,0.5M THF溶液，74.5mmol,1.4當量)，所得混合物在0℃下攪拌9小時。加入含水NaOH (106ml的3N溶液，319.0mmol,6.0當量)，然後是含水H2O2(32ml,30％w/w水溶液，319.0mmol,6.0當量)。在0℃下繼續攪拌1小時，此後反應混合物用乙醚(500ml)和水(500ml)稀釋。分離有機層，含水相用乙醚萃取(2×500ml)。合併後的有機萃取液用鹽水(1L)洗滌，乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，9至50％乙醚的己烷溶液)得到伯醇31(34.6g,95％)。Rf=0.54(矽膠，60％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-3.5(c0.2,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3380,3058,3032,2926,2855,1489,1449,1278,1251,1078,835,706,632cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.47-7.45(m,5H,Ph),7.32-7.22(m,10H,Ph),6.22(s,1H,CH=CCH3),5.58(dd,J=7.1,7.1Hz,1H,C=CHCH2),4.22(dd,J=6.8,6.0Hz,1H,CHOSi),3.52(bm,2H,CH2OH),3.50(s,2H,CH2OTr),2.33(dd,J=14.5,6.8,6.8Hz,1H,CH2CHOSi),2.28 (ddd,J=14.5,6.8,6.8Hz,1H,CH2CHOSi),2.14(m,2H,CH2CH2CH2OH),1.82(s,3H,CH=CCH3),1.46(m,2H,CH2CH2OH),0.90(s,9H,SiC(CH3)3),0.06(s,3H,Si(CH3)2),0.02(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C36H47IO3Si(M+Cs+),815.1394實測815.1430。
如流程7所述的碘化物32將醇31(34.6g,50.73mmol,1.0當量)的乙醚(380ml)與MeCN(127ml)溶液冷卻至0℃。然後加入咪唑(17.3g,253.7mmol,5.0當量)和PPh3(33.3g,126.8mmol,2.5當量)，混合物攪拌至所有固體都溶解。加入碘(33.5g,131.9mmol,2.6當量)，混合物在0℃下攪拌45分鐘。加入飽和含水Na2S2O3(150ml)終止反應，分層。含水相然後用乙醚萃取(2×250ml)，合併後的有機萃取液用鹽水(750ml)洗滌，乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，5至9％乙醚的己烷溶液)得到碘化物32(39.2g,97％)。Rf=0.88(矽膠，60％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-2.9(c2.6,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3057,2926,2855,1481,1448,1251,1083,939,836,774,706,632cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.49-7.45(m,5H,Ph),7.33-7.23(m,10H,Ph),6.23(s,1H,CH=CCH3),5.67(dd,J=7.2,7.1Hz,1H,CH2C=CH),4.22(dd,J=6.8,6.8Hz,1H,CHOSi),3.51(s,2H,CH2OTr),3.07(dd,J=7.1,7.0Hz,2H,CH2I),2.34(ddd,J=14.5,6.8,6.8Hz,1H,CH2CHOSi),2.25(ddd,J=14.5,6.8,6.8Hz,CH2CHOSi),2.13(m,2H,CH2CH2CH2l),1.84(s,3H,CH=CCH3),1.75(m,2H,CH2CH2CH2l),0.90(s,9H,SiC(CH3)3),0.07(s,3H,Si(CH3)2),0.02(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C36H46I2O2Si(M+Cs+),925.0411實測925.0450。
如流程7所述的腙33在0℃下，向n-BuLi(22.0ml,1.6M己烷溶液，35.28mmol,1.4當量)在32mlTHF中的溶液中加入二異丙胺(5.0ml,35.28mmol,1.4當量)，攪拌1小時。在0℃下，向該新鮮製備的LDA溶液中加入丙醛的SAMP腙(5.6g,32.76mmol,1.3當量)的THF(16ml)溶液。在該溫度下攪拌16小時後，將所得黃色溶液冷卻至-100℃，歷經2小時滴加碘化物32 (20.0g,25.23mmol,1.0當量)的THF(32ml)溶液。混合物經過20小時加熱至-20℃，然後倒在飽和含水NH4Cl(50ml)中，用乙醚萃取(3×100ml)。合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，過濾，蒸發。矽膠快速柱色譜法純化(5至50％乙醚的己烷溶液)，得到腙33(15.0g,71％)，為黃色的油。Rf=0.63(矽膠，40％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-22.7(c0.2,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3057,2927,2854,1489,1448,1251,1078,940,836,775,706,668,632cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.46-7.44(m,5H,Ph),7.31-7.21(m,10H,Ph),6.40(d,J=6.5Hz,1H,N=CH),6.21(s,1H,CH=CCH3),5.50(dd,J=7.0,7.0Hz,1H,CH2C=CH),4.20(dd,J=6.0,6.0Hz,1H,CHOSi),3.54(dd,J=9.2,3.5Hz,1H,CH2OCH3),3.45(s,2H,CH2OTr),3.41(dd,J=9.5,7.0Hz,1H,CH2OCH3),3.37(s,3H,CH2OCH3),3.32-3.30(m,2H,CH2N),2.60-2.55(m,1H),2.34-2.20(m,3H), 2.04-1.95(m,1H),1.98-1.73(m,5H),1.82(s,3H,CH=CCH3),1.38-1.21(m,4H),0.96(d,J=6.9Hz,3H,CHCH3),0.89(s,9H,SiC(CH3)3),0.06(s,3H,Si(CH3)2),0.01(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C45H63IN2O3Si(M+Cs+),967.2707實測967.2740。
如流程7所述的腈34在0℃下，歷經10分鐘，向快速攪拌著的腙33(28.3g,33.9mmol,1.0當量)的MeOH(283ml)、THF(100ml)與pH 7磷酸鹽緩衝液(283ml)溶液中分批加入一過鄰苯二甲酸鎂鹽(MMPP·6H2O,80％,52.4g,84.8mmol,2.5當量)。混合物在0℃下攪拌1.5小時，然後歷經30分鐘分兩批再加入THF(120ml)，以幫助原料溶解。進一步攪拌1.5小時後，將反應混合物倒在飽和NaHCO3水溶液(750ml)中，產物用乙醚(750ml)、然後用EtOAc(2×750ml)萃取。合併後的有機萃取液用鹽水(1L)洗滌，乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，9至20％乙醚的己烷溶液)得到腈34，為無色的油(21.8g,89％)。Rf=0.44(矽膠，20％乙醚的己烷溶液)；[α]22D+2.9(c1.2,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3057,2928,2855,2238,1490,1448,1252,1081,836,775,707,632cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.47-7.45(m,5H,Ph),7.33-7.23(m,10H,Ph),6.22(s,1H,CH=CCH3),5.56(dd,J=6.8,6.8Hz,1H,CH2C=CH),4.21(dd,J=6.8,6.8Hz,1H,CHOSi),3.49(s,2H,CH2OTr),2.48(m,1H,CH(CH3)),2.29(ddd,J=14.5,6.8,6.8Hz,1H,CH2CHOSi),2.24(ddd,J=14.5,6.8,6.8Hz,1H,CH2CHOSi),2.07(m,2H,CH2(C)CH2OTr)),1.82(s,3H,CH=CCH3),1.58-1.23(m,4H),1.24(d,J=7.0Hz,3H,CHCH3),0.90(s,9H,SiC(CH3)3),0.07(s,3H,Si(CH3)2),0.0(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C39H50INO2Si(M+Cs+),852.1710實測852.1738。
如流程7所述的醛35將腈34(7.01g,9.74mmol,1.0當量)溶於甲苯(195ml,0.05M),冷卻至-78℃。在-78℃下，歷經10分鐘滴加DIBAL(29.2ml,1.0M甲苯溶液，29.2mmol,3.0當量)。反應混合物在-78℃下攪拌至TLC證實反應完全(1小時)。按順序加入甲醇(10ml)和HCl(10ml,1.0N水溶液)，所得混合物經過1小時加熱至0℃。加入乙醚(250ml)和水(250ml)，分層。含水層用乙醚萃取(2×250ml)，合併後的有機萃取液用鹽水(500ml)洗滌，乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，17至33％乙醚的己烷溶液)得到醛35，為一種油(6.18g,88％)。Rf=0.51(矽膠，20％乙醚的己烷溶液)；[α]22D+2.0(c0.3,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3057,2927,2855,1726,1490,1448,1251,1081,836,775,707,632cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ9.51(d,J=1.9Hz,1H,CHO),7.46-7.45(m,5H,Ph),7.32-7.22(m,10H,Ph),6.20(s,1H,CH=CCH3),5.54(dd,J=7.0,7.0Hz,1H,CH2C=CH),4.20(dd,J=6.5,6.0Hz,1H,CHOSi),3.47(s,2H,CH2OTr),2.34-2.20(m,3H,CH2CHOSi and CH(CH3)),2.04(m,2H,CH2(C)CH2OTr),1.82(s,3H,CH=CCH3),1.66(m,1H),1.30-1.19(m,3H),1.02(d,J=7.0Hz,3H,CHCH3),0.89(s,9H,SiC(CH3)3),0.06(s,3H,Si(CH3)2),0.00(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C39H51IO3Si(M+Cs+),855.1707實測855.1672。
如流程8所述的三(甲矽烷基醚)37和38在-78℃下，歷經5分鐘向新鮮製備的LDA溶液(在0℃下向n-BuLi(2.00ml,1.52M己烷溶液，3.04mmol,1.45當量)中加入二異丙胺(424μl,3.03mmol,1.45當量)，5分鐘後加入THF (4.3ml))中滴加酮36(見Nicolaou,K.C.等《美國化學會會志》119,7978-91(1997)(1.20g,2.99mmol,1.4當量)的THF(4.3ml)溶液。在-78℃下攪拌1.5小時後，溶液歷經30分鐘加熱至-40℃。反應混合物然後冷卻至-78℃，歷經15分鐘滴加醛35(1.51g,2.09mmol,1.0當量)的THF(12.5ml)溶液。所得混合物在-78℃下攪拌1小時，然後滴加飽和含水AcOH(3.1ml的1M THF溶液，3.10mmol,1.5當量)終止反應。混合物然後加熱至25℃，在乙醚(25ml)與飽和含水NH4Cl(25ml)之間分布。含水相用乙醚萃取(3×25ml)，合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，4至20％乙醚的己烷溶液)得到未反應的酮(502mg,42％)、所不需要的醛醇產物38(705mg,27％)和所需醛醇產物37與未反應的醛35的混合物(1.136g,1H NMR確認37∶35約為9∶1)(即37的收率為39％)。該混合物直接用在下面的步驟中。37(主要產物)(通過快速矽膠柱色譜法(10至17％EtOAc的己烷溶液)從含有35的混合物中得到無色的油)Rf=0.22(矽膠，10％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-20.0(c0.3,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3486,2954,2928,2856,1682,1472,1448,1253,1090,994,836,775,706,668,632cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.45-7.43(m,5H,Ph),7.30-7.19(m,10H,Ph),6.19(s,1H,CH=CCH3),5.51(dd,J=7.0,6.9Hz,1H,C=CHCH2),4.18(dd,J=6.3,6.2Hz,1H,CHOSi),3.88(dd,J=7.5,2.6Hz,1H,CHOSi),3.65(m,1H,CH2OSi),3.59(m,1H,CH2OSi),3.46(d,J=11.2Hz,1H,CH2OTr),3.43(d,J=11.2Hz,1H,CH2OTr),3.27(m,1H,CH3CH(C=O)),3.22(d,J=9.3Hz,1H,CHOH),2.32-2.18(m,2H,C=CHCH2CHOSi)2.00(m,2H,CH2(C)CH2OTr),1.80(s,3H,CH=C(CH3)),1.66(m,2H),1.46(m,2H),1.27(m,1H,CH(CH3),1.19(s,3H,C(CH3)2),1.07(s,3H,C(CH3)2),0.99(d,J=6.8Hz,3H,CH(CH3)),0.89(s,9H,SiC(CH3)3),0.87(s,9H,SiC(CH3)3),0.86(s,9H,SiC(CH3)3),0.71(d,J=6.7Hz,3H,CH(CH3)),0.10(s,3H,Si(CH3)2),0.07(s,3H,Si(CH3)2),0.04(s,3H,Si(CH3)2),0.03(s,6H,Si(CH3)2),-0.01(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C60H97IO6Si3(M+Cs+),1 257.4692實測1257.4639。
38(次要產物)無色的油；Rf=0.38(矽膠，20％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-11.9(c2.9,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3501,2954,2930,2856,1682,1469,1254,1088,836,776,705,670cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.46-7.44(m,5H,Ph),7.31-7.21(m,10H,Ph),6.21(s,1H,CH=CCH3),5.52(dd,J=7.0,6.9Hz,1H,C=CHCH2),4.20(dl,J=6.5,6.5Hz,1H,CHOSi),3.88(dd,J=7.5,2.5Hz,1H,CHOSi),3.67(m,1H,CH2OSi),3.60(m,1H,CH2OSi),3.46(s,2H,CH2OTr),3.30-3.21(m,2H,CHOH,CH3CH(C=O)),2.30-2.25(m,2H,C=CHCH2CHOSi),2.05-1.93(m,2H,CH2C(CH2OTr)=CH),1.81(s,3H,CH=C(CH3)),1.63(m,1H,CH(CH3),1.45(m,2H),1.24(m,2H),(s,3H,C(CH3)2),1.05(s,3H,C(CH3)2),1.01(d,J=6.9Hz,3H,CH(CH3)),0.92(s,18H,SiC(CH3)3),0.89(s,9H,SiC(CH3)3),0.88(obscured d,3H,CH(CH3)),0.88(s,18H,SiC(CH3)3),0.11(s,3H,Si(CH3)2),0.07(s,3H, Si(CH3)2),0.06(s,3H,Si(CH3)2),0.04(s,6H,Si(CH3)2),0.01(s,3H,Sj(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C60H97IO6Si3(M+Cs+),1257.4692實測1257.4749。
如流程8所述的四(甲矽烷基醚)39將醇37(1.136g的與醛35的9∶1混合物，0.933mmol,1.0當量)溶於CH2Cl2(5.0ml)，冷卻至-20℃，用2,6-二甲基吡啶(470μl,4.04mmol,4.3當量)和叔丁基二甲基甲矽烷基三氟甲磺酸酯(695μl,3.03mmol,3.2當量)處理。混合物然後攪拌2.5小時，同時緩慢加熱至0℃。然後用飽和含水NaHCO3(25ml)終止反應，含水相用乙醚萃取(3×25ml)。合併後的有機萃取液用鹽水(250ml)洗滌，乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，4至9％乙醚的己烷溶液)得到四(甲矽烷基醚)39，為無色的油(1.04g,90％)。Rf=0.91(矽膠，20％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-16.8(c0.7,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3058,2951,2856,1693,1471,1253,1079,1004,836,706cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.46-7.43(m,5H,Ph),7.29-7.19(m,10H,Ph),6.19(s,1H,CH=CCH3),5.49(dd,J=7.0,7.0Hz,1H,C=CHCH2),4.18(dd,J=6.3,6.1Hz,1H,CHOSi),3.85(dd,J=7.6,2.5Hz,1H,CHOSi),3.70(dd,J=6.7,2.0Hz,1H,CHOSi),3.67(ddd,J=9.6,4.8,4.8Hz,1H,CH2OSi),3.59(ddd,J=9.7,7.9,7.9Hz,1H,CH2OSi),3.45(d,J=11.2Hz,1H,CH2OTr),3.42(d,J=11.2Hz,1H,CH2OTr),3.08(qd,J=6.8,6.8Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.27(ddd,J=14.4,7.2,7.2Hz,1H,C=CHCH2CHOSi), 2.23(ddd,J=14.5,6.2,6.2Hz,1H,C=CHCH2CHOSi),1.97(m,2H,CH2C(CH2OTr)=CH),1.79(s,3H,CH=C(CH3)),1.57(m,1H),1.46(m,1H),1.25(m,3H),1.17(s,3H,C(CH3)2),1.01(d,J=6.8Hz,3H,CH(CH3)),0.95(s,3H,C(CH3)2),0.87(s,18H,SiC(CH3)3),0.86(s,18H,SiC(CH3)3),0.09-0.03(m,24H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB),計算C66H111IO6Si4(M+Cs+),1371.5557實測1371.5523。
如流程8所述的醇40在0℃下,向四甲矽烷基醚39(180mg,0.145mmol)的THF(1.5ml)溶液中加入HF-pyr.的吡啶/THF溶液(從含有420μlHF-吡啶、1.14ml吡啶與2.00mlTHF的儲備溶液製備)(1.5ml)，所得溶液在0℃下攪拌2小時。然後再加入HF-pyr.的吡啶/THF溶液(0.5ml)，在0℃下繼續攪拌1小時。小心地加入飽和含水NaHCO3以終止反應，產物用EtOAc萃取(3×25ml)。合併後的有機萃取液然後乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速色譜法(矽膠，30％乙醚的己烷溶液)得到醇40，為淡黃色油(137mg,84％)。Rf=0.36(矽膠，40％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-26.0(c0.3,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3422,2928,2855,1690,1490。1471,1448,1360,1252,1086,1004,986,836,774,706cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.44-7.42(m,5H,Ph),7.29-7.20(m,10H,Ph),6.19(s,1H,CH=CCH3),5.49(dd,J=7.1,7.1Hz,1H,C=CHCH2),4.17(dd,J=6.2,6.0Hz,1H,CHOSi),4.03(dd,J=6.6,3.7Hz,1H,CHOSi),3.73(dd,J=7.2,1.7Hz,1H,CHOSi),3.65m,2H,CH2OH),3.45(d,J=11.7Hz,1H,CH2OTr),3.42(d,J=11.7Hz,1H,CH2OTr),3.06(qd,J=6.9,6.9Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.28(ddd,J=14.7,7.3,7.3Hz,1H,C=CHCH2CHOSi),2.22(ddd,J=14.7,6.3,6.3Hz,1H,C=CHCH2CHOSi),1.98(m,2H,CH2C(CH2OTr)=CH),1.79(s,3H,CH=C(CH3)),1.56(m,2H),1.24(m,3H),1.18(s,3H,C(CH3)2),1.03(d,J=6.9Hz,3H,CH(CH3)),0.97(s,3H,C(CH3)2),0.87(3singlets,27H,SiC(CH3)3),0.81(d,J=6.7Hz,3H,CH(CH3)),0.10(s,3H,Si(CH3)2),0.04(s,9H,Si(CH3)2),0.03(s,3H,Si(CH3)2),0.00(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C60H97IO65i3(M+Cs+),1257.4692實測1257.4780。
如流程8所述的醛41在-78℃下，向草醯氯(150μl,1.72mmol,2.0當量)的CH2Cl2(10ml)溶液中滴加DMSO(247μl,3.48mmol,4.0當量)。在-78℃下攪拌10分鐘後，滴加醇40(960mg,0.853mmol,1.0當量)的CH2Cl2(10ml)溶液。所得溶液在-78℃下攪拌1 小時，然後加入Et3N(714μl,5.12mmol,6.0當量)，反應混合物歷經30分鐘加熱至25℃。加入水(30ml)，產物用乙醚萃取(3×40ml)。合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，然後減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，17至50％乙醚的己烷溶液)得到醛41，為無色的油(943mg,98％)。Rf=0.74(矽膠，40％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-10.8(c0.1,CHCl3)；IR(薄膜)vmax2928,2855,1728,1690,1471,1448,1260,1252,1085,987,836,774,706cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ9.74(dd,J=2.4,1.5Hz,1H,CHO),7.44-7.42(m,5H,Ph),7.29-7.20(m,10H,Ph),6.19(s,1H,CH=CCH3),5.49(dd,J=7.0,6.8Hz,1H,C=CHCH2),4.44(dd,J=6.3,5.0Hz,1H,CHOSi),4.18(dd,J=6.9,6.4Hz,1H,CHOSi),3.70(dd,J= 7.2,1.8Hz,1H,CHOSi),3.45(d,J=11.4Hz,1H,CH2OTr),3.42(d,J=11.4Hz,1H,CH2OTr),3.05(qd,J=7.0,7.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.49(ddd,J=17.0,4.5,1.4Hz,CH2CHO),2.38(ddd,J=17.0,5.4,2.8Hz,1H,CH2CHO),2.27(ddd,J=14.0,7.1,7.1Hz,1H,C=CHCH2CHOSi),2.23(ddd,J=14.5,6.5,6.5Hz,1H,C=CHCH2CHOSi),1.98(m,2H,CH2C(CH2OTr)=CH),1.79(s,3H,CH=C(CH3)),1.27(m,4H),1.19(s,3H,C(CH3)2),1.12(m,1H),1.00(d,J=6.8Hz,3H,CH(CH3)),0.98(s,3H,C(CH3)2),0.87(s,27H,Si(CH3)3),0.80(d,J=6.7Hz,3H,CH(CH3)),0.07(s,3H,Si(CH3)2),0.04(s,3H,Si(CH3)2),0.03(s,3H,Si(CH3)2),0.03(s,3H,Si(CH3)2),0.02(s,3H,Si(CH3)2),0.00(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C60H95IO6Si3(M+Cs+),1255.4536實測1255.4561。
如流程8所述的羧酸42向醛41(943mg,0.839mmol,1.0當量)的t-BuOH(38.5ml)與H2O(8.4ml)溶液中加入2-甲基-2-丁烯(31.5ml,2M THF溶液，63.0mmol,75當量)和NaH2PO4(250mg,2.08mmol,2.5當量)，然後是NaClO2(380mg,4.20mmol,5.0當量)，所得混合物在25℃下攪拌40分鐘。然後在減壓下除去揮發物，使殘餘物在EtOAc(40ml)與鹽水(40ml)之間分布，分層。含水相然後用EtOAc萃取(3×40ml)，合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，然後減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，60％乙醚的己烷溶液)得到羧酸42，為一種油(956mg,100％)。Rf=0.47(矽膠，40％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-19.6(c0.2,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3389,2930,2856,1711,1469,1254,1085,988,835,775,705cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.44-7.43(m,5H,Ph),7.29-7.20(m,10H,Ph),6.19(s,1H,CH=CCH3),5.49(dd,J=7.3,7.1Hz,1H,C=CHCH2),4.34(dd,J=6.4,3.3Hz,1H,CHOSi),4.18(dd,J=6.2,6.2Hz,1H,CHOSi),3.72(dd,J=7.2,1.7Hz,1H,CHOSi),3.45(d,J=11.4Hz,1H,CH2OTr),3.41(d,J=11.4Hz,1H,CH2OTr),3.07(qd,J=7.0,7.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.46(dd,J=16.3,3.1Hz,1H,CH2CO2H),2.32-2.18(m,3H,CH2CO2Hand C=CHCH2CHOSi),1.97(m,2H,CH2C(CH2OTr)=CH),1.80(s,3H,CH=C(CH3)),1.31-1.19(m,5H),1.19(s,3H,C(CH3)2),1.02(d,J=6.9Hz,3H,CH(CH3)),0.99(s,3H,C(CH3)2),0.87(s,27H,Si(CH3)3),0.80(d,J=6.8Hz,3H,CH(CH3)),0.07,(s,3H,Si(CH3)2),0.04(s,3H,Si(CH3)2),0.04(s,3H,Si(CH3)2),0.03(s,3H, Si(CH3)2),0.02(s,3H,Si(CH3)2),0.00(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C60H95IO7Si3(M+Cs+),1271.4485實測1271.4550。
如流程8所述的羥基酸43將羧酸42(956mg,0.839mmol,1.0當量)的THF(17ml)溶液在0℃下用TBAF(5.0ml,1.0MTHF溶液，5.00mmol,6.0當量)處理，混合物歷經19小時加熱至25℃。然後加入飽和含水NH4Cl(40ml)以終止反應，產物用EtOAc萃取(3×40ml)。合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，5％MeOH的CH2Cl2溶液)得到羥基酸43，為黃色的油(817mg,95％)。Rf=0.27(矽膠，5％MeOH的CH2Cl2溶液)；[α]22D-11.4(c0.2,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3364,3057,2938,2856,1712,1694,1469,1254,1086,1053,988,836,776,734,705cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.43-7.42(m,5H,Ph),7.30-7.21(m,10H,Ph),6.32(s,1H,CH=CCH3),5.46(dd,J=7.2,7.2Hz,1H,C=CHCH2),4.35(dd,J=6.3,3.2Hz,1H,CHOH),4.21(dd,J=6.4,6.3Hz,1H,CHOSi),3.73(dd,J=7.3,1.2Hz,1H,CHOSi),3.52(d,J=12.1Hz,1H,CH2OTr),3.48(d,J=12.1Hz,1H,CH2OTr),3.06(m,2H,CH3CH(C=O)andOH),2.45(dd,J=16.4,3.0Hz,1H,CH2CO2H),2.35(m,2H,C=CHCH2CHOH),2.29(dd,J=16.4,6.5Hz,1H,CH2CO2H),2.07-1.94(m,2H,CH2C(CH2OTr)=CH),1.85(s,3H,CH=C(CH3)),1.71(m,1H),1.39(m,1H,CH(CH3)),1.27(m,3H),1.18(s,3H,C(CH3)2),1.02(obscured d,3H,CH(CH3)),1.02(s,3H,C(CH3)2),0.87(s,18H,Si(CH3)3),0.81(d,J=6.8Hz,3H,CH(CH3)),0.09(s,3H,Si(CH3)2),0.07(s,3H,Si(CH3)2),0.04(s,3H,Si(CH3)2),0.02(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB),計算C54H81IO7Si2(M+Cs+),1157.3620實測1157.3669。
如流程8所述的大分子內酯44向羥基酸43(1.06g,1.04mmol,1.0當量)的THF(15ml,0.07M)溶液中加入Et3N(870μl,0.24mmol,6.0當量)和2,4,6-三氯苯甲醯氯(390μl,2.50mmol,2.4當量)。反應混合物在0℃下攪拌1.5小時，然後在75℃下，歷經2小時通過注射泵緩慢加入到4-DMAP(280mg,2.29mmol,2.2當量)的甲苯(208ml,0.005M，基於43)溶液中。混合物在該溫度下再攪拌0.5小時，然後在減壓下濃縮。所得殘餘物通過矽膠塞過濾，用50％乙醚的己烷溶液洗脫。快速柱色譜法(矽膠，17％乙醚的己烷溶液)得到大分子內酯44，為無色泡沫(877mg,84％)。Rf=0.19(10％乙醚的己烷溶液)；[α]22D-7.4(c 0.2,CHCl3)；IR(薄膜)vmax2929,2855,1742,1695,1468,1381,1253,1156,1065,985,834,774,733,706cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.44-7.42(m,5H,Ph),7.29-7.20(m,10H,Ph),6.39(s,1H,CH=CCH3),5.51(dd,J=9.5,6.8Hz,1H,C=CHCH2),5.07(d,J=9.3Hz,1H,CHOCO),4.02(d,J=9.2Hz,1H,CHOSi),3.82(d,J=8.9Hz,1H,CHOSi),3.46(d,J=11.5Hz,1H,CH2OTr),3.42(d,J=11.5Hz,1H,CH2OTr),2.95(dq,J=8.7,7.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.72(m,2H,C=CHCH2CHO and CH2COO),2.54(dd,J=16.2,9.7Hz,1H,CH2COO),2.29(m,1H,C=CHCH2CHO),2.12(dd,J=14.3,5.1Hz,1H,CH2C(CH2OTr)=CH),1.98(m,CH2C(CH2OTr)=CH),1.88(s,3H,CH=C(CH3)),1.44-1.23(m,5H),1.18(s,3H,C(CH3)2),1.10(s,3H,C(CH3)2),1.07(d,J=6.8Hz,3H,CH(CH3)),0.92((s,9H,Si(CH3)3),0.82(d,J=6.9Hz,3H,CH(CH3)),0.72(s,9H,Si(CH3)3),0.08(s,3H,Si(CH3)2),0.05(s,3H,Si(CH3)2),0.05(s,3H,Si(CH3)2),-0.32(s,3H,Si(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C54H79IO6Si2(M+Cs+),1139.3514實測1139.3459。
如流程8所述的三醇24在0℃下,向大分子內酯44(608mg,0.604mmol,1.0當量)的THF(45ml)溶液中加入HF-pyr.(15ml)。所得混合物歷經15小時加熱至25℃，然後冷卻至0℃，小心地加入飽和含水NaHCO3(50ml)以終止反應。產物然後用EtOAc萃取(3×50ml)，合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，然後減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，60％EtOAc的己烷溶液)得到三醇24，為無色泡沫(280mg,86％)。Rf=0.32(矽膠，60％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-32.1(c0.2,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3413,2923,2857,1731,1686,1461,1379,1259,1148,1046,737cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ6.43(s,1H,CH=CCH3),5.38(dd,J=9.7,5.4Hz,1H,C=CHCH2),5.29(dd,J=8.8,1.9Hz,1H,CHOCO),4.08(m,1H,CHOH),4.06(d,J=13.0Hz,1H,CH2OH),4.00(d,J=13.0Hz,1H,CH2OH),3.69(dd,J=3.5.3.4Hz,1H,CHOH),3.12(qd,J=6.9,3.1Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.76(bs,1H,OH),2.67(ddd,J=15.0,9.7,9.7Hz,1H,C=CHCH2CHO),2.45(dd,J=15.4,10.6Hz,1H,CH2COO),2.38(bs,1H,OH),2.33(dd,J=15.4,3.0Hz,1H,CH2COO),2.21(m,2H,CH2C(CH2OH)=CH),2.06(m,1H,C=CHCH2CHO),1.87(s,3H,CH=C(CH3)),1.71(m,1H),1.66(m,1H),1.32(s,3H,C(CH3)2),1.29-1.24(m,3H),1.17(d,J=6.9Hz,3H,CH(CH3)),1.08(s,3H,C(CH3)2),0.99(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3))；HRMS(FAB)，計算C23H37IO6(M+Cs+),669.0689實測669.0711。
如流程9所述的大分子內酯45按照如大分子內酯18d合成所述操作，將乙烯基碘24(55mg,0.103mmol,1.0當量)、錫烷8j(84mg,0.207mmol,2.0當量)與PdCl2(MeCN)2(4mg,0.015mmol,0.15當量)的脫氣DMF溶液(1ml,0.1M)在25℃下攪拌33小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，80％EtOAc的己烷溶液)後得到原料乙烯基碘24(21mg,39％)和大分子內酯45(30mg,56％)。Rf=0.48(矽膠，80％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-48.3(c 0.2,CHCl3)；IR(薄膜) vmax3372,2924,2860,1731,1682,1454,1384,1252,1148,1040,979,735cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.21(s,1H,ArH),6.61(s,1H,CH=CCH3),5.58(d,J=47.0Hz,2H,CH2F),5.45(dd,J=9.8,5.3Hz,1H,C=CHCH2),5.26(dd,J=9.4,2.0Hz,1H,CHOCO),4.23(dd,J=10.9,2.4Hz,1H,CHOH),4.08(d,J=13.1Hz,1H,CH2OH),4.01(d,J=13.1Hz,1H,CH2OH),3.70(dd,J=4.2,2.7Hz,1H,CHOH),3.16(qd,J=6.8,2.6Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.94(bs,1H,OH),2.69(ddd,J=15.2,9.6,9.6Hz,1H,C=CHCH2CHO),2.46(dd,J=14.8,10.9Hz,1H,CH2COO),2.36-2.24(m,2H,CH2C(CH2OH)=CH),2.30(dd,J=14.8,2.6Hz,1H,CH2COO),2.09(s,3H,CH=C(CH3)),2.07(m,1H,C=CHCH2CHO),1.77-1.58(m,5H),1.33(s,3H,C(CH3)2),1.17(d,J=6.9Hz,3H,CH(CH3)),1.06(s,3H,C(CH3)2),1.00(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3))；HRMS(FAB)，計算C22H40FNO6S(M+Cs+),658.1615實測658.1 644。
如流程9所述的大分子內酯46按照如大分子內酯18d合成所述操作，將乙烯基碘24(32mg,0.060mmol,1.0當量)、錫烷8p(28mg,0.101mmol,1.7當量)與PdCl2(MeCN)2(1.7mg,0.07mmol,0.1當量)的脫氣DMF溶液(650μl,0.1M)在25℃下攪拌20小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，80％EtOAc的己烷溶液)後得到原料乙烯基碘24(6mg,19％)和大分子內酯46(17mg,54％)。Rf=0.37(矽膠，80％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-48.7(c0.15,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3402,2931,2874,1731,1686,1533,1458,1420,1383,1242,1150,1048,1007,979cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.50(s,1H,ArH),6.36(s,1H,CH=CCH3),5.45(dd,J=10.0,5.0Hz,1H,C=CHCH2),5.23(dd,J=9.5,1.5Hz,1H,CHOCO),4.24(bd,J=11.0Hz,1H,CHOH),4.11-3.68(m,1H,CH2OH),4.07(s,3H,OCH3),4.01(d,J=13.0Hz,1H,CH2OH),3.71(dd,J=4.0,2.5Hz,1H,CHOH),3.30(bs,1H,OH),3.16(qd,J=7.0,2.5Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.00(bs,1H,OH),2.68(ddd,J=15.0,10.0,9.5Hz,1H,C=CHCH2CHO),2.46(dd,J=15.0,11.0Hz,1H,CH2COO),2.30-2.20(m,2H,CH2C(CH2OH)=CH),2.29(dd,J=15.0,3.0Hz,1H,CH2COO),2.11-2.04(m,1H,C=CHCH2CHO),2.11(s,3H,CH=C(CH3)),1.83-1.61(m,4H),1.41-1.25(m,1H),1.33(s,3H,C(CH3)2),1.18(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),1.07(s,3H,C(CH3)2),1.01(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3))；HRMS(FAB),計算C27H41NO7S(M+Cs+),656.1658實測656.1675。如流程9所述的大分子內酯47按照如大分子內酯18d合成所述操作，將乙烯基碘24(41mg,0.076mmol,1.0當量)、錫烷8r(61mg,0.151mmol,2.0當量)與PdCl2(MeCN)2(4mg,0.015mmol,0.2當量)的脫氣DMF溶液(760μl,0.1M)在25℃下攪拌21小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，80％EtOAc的己烷溶液)後得到原料乙烯基碘24(6mg,15％)和大分子內酯47(20.5mg,51％)。Rf=0.41(矽膠，80％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-86.0(c0.25,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3387,2968,2936,2874,1733,1685,1458,1381,1253,1149,1050,1003,912 cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.97(s,1H,ArH),6.63(s,1H,CH=CCH3),5.43(dd,J=9.0,5.5Hz,1H,C=CHCH2),5.25(dd,J=8.5,2.0Hz,1H,CHOCO),4.32(ddd,J=11.0,5.5,2.5Hz,1H,CHOH),4.12-4.07(m,2H,CH2OH and OH),4.02(d,J=11.0Hz,1H,CH2OH),3.69(dd,J=2.0,2.0Hz,1H,CHOH),3.16(qd,J=7.0,2.5Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.08(bs,1H,OH),2.98(q,J=7.0Hz,2H,CH2CH3),2.61(ddd,J=15.0,9.0,9.0Hz,1H,C=CHCH2CHO),2.46(dd,J=14.5,11.0Hz,1H,CH2COO),2.38(dd,J=15.0,4.0Hz,1H,CH2C(CH2OH)=CH),2.31-2.25(m,1H,CH2C(CH2OH)=CH),2.23(dd,J=14.5,2.5Hz,1H,CH2COO),2.17-2.07(m,1H,C=CHCH2CHO),2.04(s,3H,CH=C(CH3)),1.97(bs,1H,OH),1.78-1.61(m,3H),1.38-1.23(m,2H),1.37(q,J=7.0Hz,3H,CH2CH3),1.35(s,3H,C(CH3)2),1.18(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),1.05(s,3H,C(CH3)2),1.01(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3))；HRMS(FAB),計算C28H43NO6S(M+Na+),544.2709實測544.2724。
如流程9所述的大分子內酯48按照如大分子內酯18d合成所述操作，將乙烯基碘24(26mg,0.048mmol,1.0當量)、錫烷8h(29mg,0.072mmol,1.5當量)與PdCl2(MeCN)2(1.5mg,0.006mmol,0.1當量)的脫氣DMF溶液(480μl,0.1M)在25℃下攪拌15小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，EtOAc)後得到原料乙烯基碘24(10.5mg,40％)和大分子內酯48(10.5mg,41％)。Rf=0.27(矽膠，EtOAc)；[α]22D-43.0(c0.14,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3388,2924,2851,1732,1682,1462,1384,1251,1185,1150,1067cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.13(s,1H,ArH),6.63(s,1H,CH=CCH3),5.45(dd,J=9.0,6.0Hz,1H,C=CHCH2),5.27(bd,J=7.0Hz,1H,CHOCO),4.29(dd,J=11.0,2.5Hz,1H,CHOH),4.09(d,J=13.0Hz,1H,CH2OH),4.00(d,J=13.0Hz,1H,CH2OH),3.68(dd,J=4.0,2.5Hz,1H,CHOH),3.15(qd,J=6.5,2.5Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.99(bs,1H,OH),2.65(ddd,J=15.0,9.0,9.0Hz,1H,C=CHCH2CHO),2.46(dd,J=14.5,11.0Hz,1H,CH2COO),2.39-2.33(m,1H,CH2C(CH2OH)=CH),2.26(dd,J=14.5,2.5Hz,1H,CH2COO),2.26-2.20(m,1H,CH2C(CH2OH)=CH),2.14-2.10(m,1H,C=CHCH2CHO),2.07(s,3H,CH=C(CH3)),1.99-1.61(m,4H),1.42-1.24(m,2H),1.33(s,3H,C(CH3)2),1.16(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),1.04(s,3H,C(CH3)2),1.00(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3))；HRMS(FAB)，計算C27H41NO7S(M+Cs+),656.1658實測656.1 677。
如流程9所述的大分子內酯49按照如大分子內酯18h合成所述操作，將乙烯基碘24(37mg,0.069mmol,1.0當量)、錫烷8q(47mg,0.117mmol,1.7當量)與Pd(PPh3)4(10mg,0.009mmol,0.13當量)的脫氣甲苯溶液(780μl,0.1M)在100℃下加熱2小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，80％EtOAc的己烷溶液)後得到大分子內酯49(5.5mg,15％)。Rf=0.35(矽膠，80％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-48.1(c0.27,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3403,2930,2873,1732,1686,1462,1381,1291,1266,1250,1149,1004,980,937cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.04(s,1H,ArH),6.85 (dd,J=17.5,11.0Hz,1H,CH=CH2),6.61(s,1H,CH=CCH3),6.05(d,J=17.5Hz,1H,CH=CH2),5.56(d,J=11.0Hz,1H,CH=CH2),5.45(dd,J=10.0,5.5Hz,1H,C=CHCH2),5.26(dd,J=9.5,2.0Hz,1H,CHOCO),4.29(ddd,J=11.0,6.0,2.5Hz,1H,CHOH),4.09(dd,J=13.0,6.5Hz,1H,CH2OH),4.02(dd,J=13.0,6.0Hz,1H,CH2OH),3.71(ddd,J=4.5,2.5,2.5Hz,1H,CHOH),3.54(d,J=6.0Hz,1H,OH),3.17(qd,J=7.5,2.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.02(d,J=2.0Hz,1H,OH),2.68(ddd,J=15.0,10.0,9.0Hz,1H,C=CHCH2CHO),2.45(dd,J=14.5,11.0Hz,1H,3H,CH2COO),2.37-2.31(m,1H,CH2C(CH2OH)=CH),2.30-2.24(m,1H,CH2C(CH2OH)=CH),2.28(dd,J=15.0,3.5Hz,1H,CH2COO),2.14-2.07(m,1H,C=CHCH2CHO),2.09(d,J=1.0Hz,1H,CH=C(CH3)),1.79-1.60(m,4H),1.39-1.25(m,2H),1.35(s,3H,C(CH3)2),1.18(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),1.07(s,3H,C(CH3)2),1.02(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3))；HRMS(FAB)，計算C28H41NO6S(M+Cs+),652.1709實測652.1693。
如流程9所述的氟化物50將三醇45(3.6mg,0.007mmol,1.0當量)的CH2C12溶液(0.1ml,0.07M)在-78℃下用DAST(11μl的0.7M CH2Cl2溶液，0.008mmol,1.1當量)處理，混合物在-78℃下攪拌10分鐘。然後加入飽和含水NaHCO3(500μl)以終止反應，混合物加熱至25℃。然後使產物在飽和含水NaHCO3(5ml)與CH2Cl2(5ml)之間分布，分層。含水相用CH2Cl2萃取(2×5ml)，合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，然後減壓濃縮。製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，40％EtOAc的己烷溶液)後得到氟化物50(2.1mg,58％)。Rf=0.39(矽膠，50％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-34.4(c0.09,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3413,2919,2849,1725,1684,1465,1381,1290,1250,1150,1041,979,872cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.22(s,1H,ArH),6.62(s,1H,CH=CCH3),5.60(d,J=47.0Hz,2H,ArCH2F),5.56-5.52(m,1H,C=CHCH2),5.27(dd,J=9.5,2.0Hz,1H,CHOCO),4.79(dd,J=82.2,10.8Hz,1H,CH=CCH2F),4.71(dd,J=81.8,10.8Hz,1H,CH=CCH2F),4.24(dd,J=10.9,2.6Hz,1H,CHOH),3.70(dd,J=4.3,2.5Hz,1H,CHOH),3.15(qd,J=6.8,2.5Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.00-2.85(m,1H,OH),2.71(m,1H,C=CHCH2CHO),2.46(dd,J=14.9,11.0Hz,1H,CH2COO),2.38-2.29(m,2H,CH2C(CH2OH)=CH),2.30(dd,J=14.9,2.8Hz,1H,CH2COO),2.15-2.09(m,1H,C=CHCH2CHO),2.11(d,J=1.0Hz,CH=C(CH3)),1.80-1.50(m,4H),1.37-1.29(m,2H),1.33(s,3H,C(CH3)2),1.18(d,J=6.8Hz,3H,CH(CH3)),1.06(s,3H,C(CH3)2),1.01(d,J=7.1Hz,3H,CH(CH3))；HRMS(FAB),計算C27H39F2NO5S(M+H+),528.2595實測528.2610。
如流程9所述的氟化物51按照如氟化物50合成所述操作，將三醇46(8.2mg,0.016mmol,1.0當量)的CH2Cl2(200μl,0.08M)溶液在-78℃下用DAST(0.025ml,0.019mmol,1.2當量)處理，所得混合物在-78℃下攪拌10分鐘，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，30％EtOAc的己烷溶液)後得到氟化物51(3.5mg,43％)。Rf=0.57(矽膠，60％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-41.7(c0.11,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3418,2925,2852,1734,1686,1535,1461,1415,1383,1334,1241,1150,1045,976cm-1；1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.51(s,1H,ArH),6.37(s,1H,CH=CCH3),5.55-5.51(m,1H,C=CHCH2),5.22(dd,J=10.0,2.0Hz,1H,CHOCO),4.81(dd,J=74.0,11.0Hz,1H,CH=CCH2F),4.71(dd,J=73.0,11.0Hz,1H,CH=CCH2F),4.26(dd,J=11.0,2.5Hz,1H,CHOH),4.09(s,3H,CH3O),3.71(dd,J=4.5,2.0Hz,1H,CHOH),3.17(qd,J=7.0,2.5Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.01-2.95(m,1H,OH),2.76-2.68(m,1H,C=CHCH2CHO),2.47(dd,J=14.5,11.0Hz,1H,CH2COO),2.37-2.27(m,2H,CH2C(CH2OH)=CH),2.29(dd,J=14.5,2.5Hz,1H,CH2COO),2.17-2.11(m,1H,C=CHCH2CHO),2.14(s,3H,CH=C(CH3)),1.80-1.50(m,4H),1.40-1.22(m,2H),1.34(s,3H,C(CH3)2),1.19(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),1.08(s,3H,C(CH3)2),1.03(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3))；HRMS(FAB)，計算C27H40FNO6S(M+H+),526.2639實測526.2625。
如流程9所述的氟化物52按照如氟化物50合成所述操作，將三醇47(12.5mg,0.024mmol,1.0當量)的CH2Cl2(500μl,0.05M)溶液在-78℃下用DAST(250μl,0.1MCH2Cl2溶液，0.025mmol,1.05當量)處理，所得混合物在-78℃下攪拌10分鐘，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，60％EtOAc的己烷溶液)後得到氟化物52(5.1mg,41％)。Rf=0.19(矽膠，50％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-68.6(c0.22,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3504,2969,2935,2877,1736,1687,1461,1369,1290,1250,1148,1068,1044,1008,976cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.98(s,1H,ArH),6.60(s,1H,CH=CCH3),5.56-5.52(m,1H,C=CHCH2),5.23(dd,J=10.0,2.0Hz,1H,CHOCO),4.80(dd,J=73.0,10.5Hz,1H,CH=CCH2F),4.71(dd,J=72.5,10.5Hz,1H,CH=CCH2F),4.33(ddd,J=11.0,5.5,2.5Hz,1H,CHOH),3.71(ddd,J=5.0,2.5,2.0Hz,1H,CHOH),3.71(d,J=6.0Hz,1H,CHOH),3.17(qd,J=7.0,2.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.07(m,1H,OH),4.51(q,J=7.5Hz,2H,CH2CH3),2.70(ddd,J=15.0,10.0,2.0Hz,1H,C=CHCH2CHO),2.45(dd,J=14.5,11.0Hz,1H,CH2COO),2.39-2.28(m,2H,CH2C(CH2OH)=CH),2.26(dd,J=14.5,2.5Hz,1H,CH2COO),2.17-2.10(m,1H,C=CHCH2CHO),2.08(d,J=1.5Hz,3H,CH=C(CH3)),1.80-1.67(m,3H),1.39(t,J=7.5Hz,3H,CH2CH3),1.39-1.24(m,2H),1.35(s,3H,C(CH3)2),1.19(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),1.07(s,3H,C(CH3)2),1.03(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3))；HRMS(FAB)，計算C28H42FNO5S(M+Cs+),656.1822實測656.1843。
如流程9所述的氟化物53按照如氟化物50合成所述操作，將三醇49(6.0mg,0.0151mmol,1.0當量)的CH2Cl2(1.5ml,0.01M)溶液在-78℃下用DAST(0.20ml,0.08M CH2Cl2溶液，0.016mmol,1.1當量)處理，所得混合物在-78℃下攪拌10分鐘，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，50％EtOAc的己烷溶液)後得到氟化物53(3.0mg,50％)。Rf=0.50(矽膠，50％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-12.4(c0.2,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3408,2926,2851,1732,1682,1462,1384,1292,1250,1150,1068,974cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.04(s,1H,ArH),6.86(dd,J=17.4,10.8Hz,1H,CH=CH2),6.59(s,1H,CH=CCH3),6.05(d,J=17.5Hz,1H,CH=CH2),5.55(d,J=11.0Hz,1H,CH=CH2)5.57-5.51(m,1H,C=CHCH2),5.25(d,J=10.0Hz,1H,CHOCO),4.79(dd,J=83.8,10.7Hz,1H,CH=CCH2F),4.71(dd,J=83.6,10.7Hz,1H,CH=CCH2F),4.28(dd,J=10.6,1.6Hz,1H,CHOH),3.70(m,1H,CHOH),3.33-3.25(m,1H,CHOH),3.16(qd,J=7.0,2.1Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.98(m,1H,OH),2.75-2.66(m,1H,C=CHCH2CHO),2.46(dd,J=14.6,11.0Hz,1H,CH2COO),2.37-2.27(m,2H,CH2C(CH2OH)=CH),2.28(dd,J=14.6,2.6Hz,1H,CH2COO),2.15-2.08(m,1H,C=CHCH2CHO),2.11(s,3H,CH=C(CH3)),1.80-1.64(m,3H),1.43-1.27(m,2H),1.34(s,3H,C(CH3)2),1.18(d,J=6.8Hz,3H,CH(CH3)),1.07(s,3H,C(CH3)2),1.03(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3))；HRMS(FAB),計算C28H40FNO5S(M+H+),522.2689實測522.2704。
如流程9所述的環氧化物54在-40℃下，向烯丙醇45(25.4mg,0.049mmol,1.0當量)與4A分子篩的CH2Cl2(0.50ml)溶液中滴加(+)-二乙基-D-酒石酸酯(41μl,0.59M CH2Cl2溶液，0.024mmol,0.5當量)，然後是異丙醇鈦(55μl,0.35M CH2Cl2溶液，0.019mmol,0.4當量)。在該溫度下1小時後，加入叔丁基過氧化氫(22μl的5M癸烷溶液，0.110mmol,2.2當量)，反應混合物在-30℃下攪拌2小時。反應混合物然後通過硅藻土過濾到飽和含水Na2SO4(10ml)中，用EtOAc(10ml)洗脫。所得兩相混合物然後攪拌1小時，分層。含水相用EtOAc萃取(3×10ml)，合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，80％EtOAc的己烷溶液)後得到環氧化物54(13.5mg,52％)。Rf=0.23(矽膠，80％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-55.4(c0.06,CHCl3)；IR (薄膜)vmax3425,2929,2862,1732,1688,1456,1367,1292,1258,1195,1149,1040,980cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ7.22(s,1H,ArH),6.62(s,1H,CH=CCH3),5.59(d,J=47.0Hz,2H,ArCH2F),5.46(dd,J=6.7,3.4Hz,1H,CHOCO),4.14-4.09(m,1H,CHOH),3.89(d,J=6.4Hz,1H,OH),3.76(bs,1H,CHOH),3.72(d,J=12.1Hz,1H,CH2OH),3.56(dd,J=12.1,7.5Hz,1H,CH2OH),3.33(qd,J=6.8,5.3Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.16(dd,J=6.3,6.1Hz,1H,C(O)CHCH2CHO),2.55(dd,J=14.1,10.2Hz,1H,CH2COO),2.50(bs,1H,OH),2.41(dd,J=14.1,3.1Hz,1H,CH2COO),2.11(s,3H,CH=C(CH3)),2.10-1.97(m,2H,C(O)CHCH2CHO),1.91-1.81(m,2H,CH2C(CH2OH)),1.74-1.60(m,3H),1.50-1.30(m,2H),1.34(s,3H,C(CH3)2),1.18(d,J=6.8Hz,3H,CH(CH3)),1.06(s,3H,C(CH3)2),0.99(d,J=7.0Hz,3H,C(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C27H40FNO7S(M+H+),542.2588實測542.2575。
如流程9所述的環氧化物55按照如環氧化物54合成所述操作，在-40℃下，向烯丙醇46(22mg,0.042mmol,1.0當量)與4A分子篩的CH2Cl2(420μl)溶液中滴加(+)-二乙基-D-酒石酸酯(4μl,0.021mmol,0.5當量)，然後是異丙醇鈦(5μl,0.016mmol,0.4當量)，在該溫度下1小時後，加入叔丁基過氧化氫(18μl的5M癸烷溶液，0.092mmol,2.2當量)，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，80％EtOAc的己烷溶液)後得到環氧化物55(16mg,70％)。Rf=0.25(矽膠，80％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-44.8(c 1.4,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3435,2959,2935,2877,1732,1689,1534,1459,1421,1371,1338,1241,1174,1039,980 cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.51(s,1H,ArH),6.35(s,1H,CH=CCH3),5.40(dd,J=7.0,3.0Hz,1H,CHOCO),4.11(ddd,J=10.0,6.5,3.0Hz,1H,CHOH),4.07(s,3H,CH3O),3.88(d,J=6.0 Hz,1H,OH),3.77-3.74(m,1H,CHOH),3.73(dd,J=12.5,4.0Hz,1H,CH2OH),3.57(dd,J=12.5,8.0Hz,1H,CH2OH),3.32(qd,J=7.0,5.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.16(dd,J=7.0,5.5Hz,1H,C(O)CHCH2CHO),2.54(dd,J=14.5,10.0Hz,1H,CH2COO),2.50(bs,1H,OH),2.40(dd,J=14.5,3.5Hz,1H,CH2COO),2.13(s,3H,CH=C(CH3)),2.12-2.05(m,1 H,C(O)CHCH2CHO),2.03-1.95(m,2H),1.90-1.82(m,1H,CH2C(CH2OH)),1.75-1.60(m,2H),1.50-1.20(m,3H),1.35(s,3H,C(CH3)2),1.16(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),1.07(s,3H,C(CH3)2),0.99(d,J=7.0Hz,3H)；HRMS(FAB)，計算C27H41NO8S(M+Cs+),672.1607實測672.1584。
如流程9所述的氟化物58按照如氟化物50合成所述操作，將三醇54(5.0mg,0.009mmol,1.0當量)的CH2Cl2(1ml,0.01M)溶液在-78℃下用DAST(0.25ml的0.1M CH2Cl2溶液，0.025mmol,1.05當量)處理，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，60％EtOAc的己烷溶液)後得到氟化物58(2.0mg,41％)。Rf=0.22(矽膠，50％EtOAc的己烷溶液)；IR(薄膜)vmax3402,2954,2923,2853,1732,1688,1462,1378,1262,1185,1149,1082,1031,980cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.23(s,1H,ArH),6.63(s,1H,CH=CCH3),5.60(d,J=47Hz,2H,ArCH2F),5.47(dd,J=7.0,3.0Hz,1H,CHOCO),4.39(dd,J=97.0,10.5Hz,1H,C(O)CH2F),4.30(dd,J=97.0,10.5Hz,1H,C(O)CH2F),4.13(ddd,J=9.5,6.5,3.0Hz,1H,CHOH),3.75(dd,J=5.0,5.0Hz,1H,CHOH),3.74(d,J=7.0Hz,1H,OH),3.31(qd,J=7.0,6.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.02(dd,J=6.0,6.0Hz,1H,CH(O)CH2CHO),2.56(dd,J=14.0,10.0Hz,1H,CH2COO),2.46(brs,1H,OH),2.42(dd,J=14.0,4.0Hz,1H,CH2COO),2.13(s,3H,CH=C(CH3)),2.10-1.97(m,3H),1.95-1.87(m,1H),1.90-1.82(m,1H),1.75-1.63(m,2H),1.50-1.20(m,2H),1.36(s,3H,C(CH3)2),1.16(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),1.08(s,3H,C(CH3)2),1.01(d,J=7.0Hz,3H,C(CH3)2)；MS(electrospray)，計算C27H39F2NO6S(M+H+)544，實測544。
如流程9所述的氟化物59按照如氟化物50合成所述操作，將三醇55(15mg,0.028mmol,1.0當量)的CH2C12(280μl,0.1M)溶液在-78℃下用DAST(5μl,0.038mmol,1.4當量)處理，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，50％EtOAc的己烷溶液)後得到氟化物59(4.0mg,26％)。Rf=0.42(矽膠，80％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-29.4(c0.33,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3492,2960,2928,2874,2865,1738,1732,1693,1682,1537,1462,1455,1422,1384,1241,1144,980cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.52(s,1H,ArH),6.35(s,1H,CH=CCH3),5.41(dd,J=7.0,3.5Hz,1H,CHOCO),4.40(dd,J=111.5,10.5Hz,1H,CH2F),4.30(dd,J=111.5,10.5Hz,1H,CH2F),4.14(ddd,J=10.0,7.0,3.5Hz,1H,CHOH),4.08(s,3H,CH3O),3.80(d,J=7.0Hz,1H,OH),3.78(dd,J=3.5,3.5Hz,1H,CHOH),3.31(qd,J=7.0,5.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.01(dd,J=7.0,5.5Hz,1H,C(O)CHCH2CHO),2.55(dd,J=14.5,10.0Hz,1H,CH2COO),2.53(bs,1H,OH),2.40(dd,J=14.5,3.5Hz,1H,CH2COO),2.14(s,3H,CH=C(CH3)),2.12-2.15-1,90(m,3H),1.73-1.70(m,1H),1.55-1.24(m,5H),1.36(s,3H,C(CH3)2),1.17(d,J=6.5Hz,3H,CH(CH3)),1.09(s,3H,C(CH3)2),1.00(d,J=7.0Hz,3H,C(CH3)2)；HRMS(FAB),計算C27H40FNO7S(M+Cs+),674.1564實測674.1594。
如流程10的環氧化物57在-40℃下，向烯丙醇24(81mg,0.151mmol,1.0當量)與4A分子篩的CH2Cl2(1.25ml)溶液中滴加(+)-二乙基-D-酒石酸酯(13μl,0.076mmol,0.5當量)，然後是異丙醇鈦(18μl,0.060mmol,0.4當量)。在該溫度下1小時後，加入叔丁基過氧化氫(66μl的5M癸烷溶液，0.330mmol,2.2當量)，按照如環氧化物54合成所述操作進行反應，快速柱色譜法(矽膠，80％EtOAc的己烷溶液)後得到環氧化物57(74mg,89％)。Rf=0.34(矽膠，80％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-32.5(c0.3,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3455,2959,2931,2877,1733,1689,1465,1377,1289,1257,1147,1040,979,912cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ6.46(s,1H,CH=CCH3),5.48(dd,J=4.9,4.7Hz,1H,CHOCO),4.00(bm,1H,CHOH),3.75(dd,J=5.6,3.4Hz,1H,CHOH),3.71(d,J=12.5Hz,1H,CH2OH),3.64(bs,1H,OH),3.56(d,J=12.5Hz,1H,CH2OH),3.32(qd,J=6.7,6.7Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.09(dd,J=6.3,6.2Hz,1H,C(O)CHCH2CHO),2.52(dd,J=14.3,9.8Hz,1H,CH2COO),2.43(dd,J=14.3,3.4Hz,1H,CH2COO),2.28(bs,1H,OH),1.95(m,2H,C(O)CHCH2CHO),1.86(s,3H,CH=C(CH3)),1.79(m,1H,CH2C(CH2OH)),1.67(m,1H),1.61(m,1H),1.46(m,2H),1.33(s,3H,C(CH3)2),1.24(m,2H),1.15(d,J=6.8Hz,3H,CH(CH3)),1.06(s,3H,C(CH3)2),0.98(d,J=7.0Hz,3H,C(CH3)2)；HRMS(FAB)，計算C23H37IO7(M+Na+),575.1483實測575.1462。
如流程9所述的環氧化物56按照如內酯18d合成所述操作，將乙烯基碘57(20mg,0.036mmol,1.0當量)、錫烷8r(29mg,0.072mmol,1.5當量)與PdCl2(MeCN)2(2.0mg,0.004mmol,0.1當量)的脫氣DMF溶液(360μl,0.1M)在25℃下攪拌20小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，EtOAc)後得到原料乙烯基碘57(6mg,30％)和大分子內酯56(10mg,51％)。Rf=0.23(矽膠，80％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-60.0(c0.14,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3414,2969,2933,2872,1736,1687,1458,1373,1293,1258,1150,980,914cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.99(s,1H,ArH),6.61(s,1H,CH=CCH3),5.43(dd,J=8.0,3.0Hz,1H,CHOCO),4.20(ddd,J=9.5,6.5,3.0Hz,1H,CHOH),4.04(d,J=6.5Hz,1H,OH),3.77(dd,J=4.0,4.0Hz,1H,CHOH),3.74(dd,J=12.5,4.0Hz,1H,CH2OH),3.57(dd,J=12.5,8.0Hz,1H,CH2OH),3.32(qd,J=7.0,4.5Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.16(dd,J=7.5,5.0Hz,1H,C(O)CHCH2CHO),3.01(q,J=7.5Hz,2H,CH2CH3),2.56(brs,1H,OH),2.54(dd,J=14.0,10.0Hz,1H,CH2COO),2.38(dd,J=14.0,3.0Hz,1H,CH2COO),2.14(ddd,J=15.0,4.5,3.0Hz,1H,C(O)CHCH2CHO)2.11(s,3 H,CH=C(CH3)),2.02-1.96(m,1H,C(O)CHCH2CHO),1.93-1.84(m,1H),1.74-1.71(m,1H),1.55-1.25(m,5H),1.40(t,J=8.0Hz,3H,CH3CH2),1.37(s,3H,C(CH3)2),1.17(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),1.08(s,3H,C(CH3)2),1.01(d,J=7.0Hz,3H C(CH3)2)；HRMS(FAB),計算C28H43NO7S(M+Na+),560.2658實測560.2640。
如流程10所述的雙甲矽烷基醚61向三醇57(83mg,0.150mmol,1.0當量)的DMF溶液(1.5ml,0.1M)溶液中加入Et3N(315μl,2.26mmol,15當量)，然後是TMSCl(152μl,1.20mmol,8當量)，混合物在25℃下攪拌12小時。混合物然後在減壓下濃縮，使所得的油在乙醚(10ml)與水(10ml)之間分布，分層。含水層用乙醚萃取(3×10ml)，合併後的萃取液乾燥(MgSO4)，減壓濃縮，然後通過短矽膠塞過濾。所得濾液濃縮，溶於CH2Cl2(5ml)，加入矽膠(1g)。所得漿液在25℃下攪拌12小時，過濾，濃縮，最後通過短矽膠塞，得到雙甲矽烷基醚61，為泡沫(103mg,98％)。Rf=0.48(矽膠，60％Et2O的己烷溶液)；[α]22D-19.1(c0.23,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3408,2956,1746,1698,1454,1383,1250,1156,1113,1060,1021,985,898,841,752cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.44(s,1H,ArH),5.37(dd,J=9.0Hz,1H,CHOCO),4.01(dd,J=10.5,2.5Hz,1H,CHOH),3.86(d,J=10.0Hz,1H,CHOSi),3.79(dd,J=12.5,4.5Hz,1H,CH2OH),3.49(ddd,J=12.5,10.5,8.5Hz,1H,CH2OH),3.39(m,1H,OH),3.09(dd,J=10.5,3.5Hz,1H,CH(O)CH2CO),2.97(qd,J=6.5,4.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.74(dd,J=16.5,10.5Hz,1H,CH2COO),2.67(dd,J=16.0,2.5Hz,1H,CH2COO),2.18-2.15(m,1H,CH(O)CH2CHO),1.95-1.82(m,2H),1.82(s,3H,CH3C=C),1.68-1.40(m,4H),1.24(m,2H),1.18(s,3H,C(CH3)2),1.11(s,3H,C(CH3)2),1.06(d,J=6.5Hz,3H,CH(CH3)),0.95(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),0.14(s,9H,(CH3)3Si),0.06(s,9H,(CH3)3Si)；HRMS(FAB)，計算C29H53IO7Si2(M+Cs+),829.1429實測829.1459。
如流程10所述的醛62向醇61(20mg,0.029mmol,1.0當量)與4A分子篩的CH2Cl2(0.25ml)懸浮液中加入NMO(10mg,0.085mmol,3.0當量)，然後是TPAP(1mg,0.003mmol,0.1當量)。所得漿液在25℃下攪拌40分鐘，然後通過短矽膠塞過濾，得到醛62(18mg,90％)。Rf=0.66(矽膠，60％Et2O的己烷溶液)；IR(薄膜)vmax2956,2913,2851,1732,1698,1454,1383,1250,1156,1113,1021,987,895,841,750cm-1；1HNMR(600MHz,CDCl3)δ8.84(s,1H,CH=O),6.51(s,1H,ArH),5.46(dd,J=7.9,3.4Hz,1H,CHOCO),3.81(d,J=8.3Hz,1H,CHOSi),3.32(dd,J=8.5,4.2Hz,1H,CHOSi),3.04(qd,J=7.1,7.1Hz,1H CH3CH(C=O)),2.65(dd,J=15.6,8.3Hz,1H,CH2COO),2.59(dd,J=15.6,4.1Hz,1H,CH2COO),2.21(ddd,J=15.2,3.8,3.8Hz,1H,CH(O)CH2CHO),2.06-1.97(m,2H),1.87(s,3H,CH3C=CH),1.87-1.80(m,1H),1.62-1.56(m,1H),1.51-1.41(m,2H),1.27-1.21(obscured m,2H),1.15(s,3H,C(CH3)2),1.08(s,3H,C(CH3)2),1.08(d,J=6.2Hz,3H,CH(CH3)),0.96(d,J=6.9Hz,3H,CH(CH3)),0.13(s,9H,(CH3)3Si),0.05(s,9H,(CH3)3Si)；HRMS(FAB),計算C29H51IO7Si2(M+Cs+),827.1272實測827.1304。
如流程10所述的烯烴63在-5℃下，向醛62(18.0mg,0.026mmol,1.0當量)的THF(0.5ml)溶液中分批加入溴化甲基三苯膦(104mg，與氨基化鈉(Aldrich)的混合物，0.250mmol,9.7當量)的THF(2.0ml)溶液，直到TLC確認反應完全。加入飽和含水NH4Cl(1ml)，產物用乙醚萃取(3×2ml)，乾燥(MgSO4)，然後減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，15％乙醚的己烷溶液)得到烯烴63(11.7mg,65％)。Rf=0.50(矽膠，20％Et2O的己烷溶液)；[α]22D-17.9(c 0.2,CHCl3)；IR(薄膜)vmax2954,2923,1747,1698,1456,1382,1250,1156,1113,1021,986,889,841,750cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.44(s,1H,ArH),6.00(dd,J=17.0,10.0Hz,1H,CH=CH2),5.36(dd,J=9.0,2.0Hz,1H,CHOCO),5.29(dd,J=17.5,1.5Hz,1H,CH2=CH),5.14(dd,J=10.5,1.5Hz,1H,CH2=CH),4.12(dd,J=9.0,5.0Hz,1H,CHOSi),3.85(d,J=9.5Hz,1H,CHOSi),3.04(qd,J=9.0,7.0Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.85(dd,J=9.5,4.0Hz,1H,CH(O)CCH=CH2),2.73(dd,J=16.0,10.0Hz,1H,CH2COO),2.65(dd,J=16.0,2.5Hz,1H,CH2COO),2.12(ddd,J=15.0,4.0,2.0Hz,1H,CH2CH(O),1.93-1.78(3H,m).1.84(s,3H,CH=CCH3),1.65-1.20(m,5H),1.19(s,3H,C(CH3)2),1.11(s,3H,C(CH3)2),1.08(d,J=6.5Hz,3H,CH(CH3)),0.95(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),0.14(s,9H,(CH3)3Si),0.07(9H,s,(CH3)3Si),HRMS(FAB)，計算C30H53IO6Si2(M+Cs+),825.1480實測825.1450。
如流程10所述的大分子內酯65將烯烴63(15mg,0.022mmol,1.0當量)的EtOH(1.0ml)溶液用肼(17μl,0.500mmol,25.0當量)和H2O2(25μl,30％w/w水溶液，0.370mmol,16.0當量)處理，所得混合物在0℃下攪拌3小時。然後使混合物在乙醚(4ml)與水(2ml)之間分布，分層。含水層用乙醚萃取(3×4ml)，合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，減壓濃縮，得到泡沫(15.0mg)，將其溶於THF(1.5ml)，用HF-pyr.的吡啶/THF溶液(600ml)處理，混合物在0℃下攪拌2小時。然後用飽和含水NaHCO3(5ml)終止反應，用EtOAc萃取(3×3ml)。合併後的有機萃取液乾燥(MgSO4)，減壓濃縮。快速柱色譜法(矽膠，80％乙醚的己烷溶液)得到大分子內酯65(9.4mg,75％)。Rf=0.06(矽膠，60％Et2O的己烷溶液)；[α]22D-19.3(c0.33,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3416,2954,2926,2872,1734,1689,1456,1384,1287,1256,1149,1084,978,892cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.46(s,1H,CH=CCH3),5.48(dd,J=5.0,5.0Hz,1H,CHOCO),4.03(brm,1H,CHOH),3.76(brm,2H,CHOH and OH),3.34(qd,J=6.5,6.5Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.73(dd,J=6.5,6.5Hz,1H,CH(O)CCH2CH3),2.54(dd,J=14.5,10.0Hz,1H,CH2COO),2.44(dd,J=14.5,8.5Hz,1H,CH2COO),2.29(brs,1H,OH),1.96-1.85(m,2H),1.89(s,3H,CH3C=CH),1.70-1.40(m,5H),1.31-1.24(m,4H),1.35(s,3H,C(CH3)2),1.19(d,J=6.5Hz,3H,CH(CH3)),1.07(s,3H,C(CH3)2),0.99(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),0.91(t,J=7.5Hz,3H,CH3CH2)；HRMS(FAB)，計算C24H39IO6(M+Cs+).683.0846實測683.0870。
如流程10所述的大分子內酯66按照如大分子內酯18d合成所述操作，將乙烯基碘65(9.4mg,0.017mmol,1.0當量)、錫烷8j(10mg,0.036mmol,2.1當量)與PdCl2(MeCN)2(1.0mg,0.004mmol,0.2當量)的脫氣DMF溶液(250μl,0.07M)在25℃下攪拌15小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，EtOAc)後得到大分子內酯66(4.6mg,52％)。Rf=0.40(矽膠，80％EtOAc的己烷溶液)；[α]22D-30.0(c0.17,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3432,2967,2933,2872,1736,1689,1458,1384,1256,1151,1067,1038,979,905,733cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.23(s,1H,ArH),6.62(s,1H,CH=CCH3),5.59(d,J=47.1Hz,2H,CH2F),5.46(dd,J=6.3,3.7Hz,1H,CHOCO),4.15(d,J=8.8Hz,1H,CHOH),3.98(brs,1H,OH),3.77(brs,1H,CHOH),3.35(qd,J=6.6,4.8Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.82(dd,J=6.1,6.1Hz,1H,CH(O)CCH2CH3),2.56(dd,J=14.0.9.9Hz,1H,CH2COO),2.48(brs,1H,OH),2.41(dd,J=14.0,3.0Hz,1H,CH2COO),2.13(s,3H,CH=C(CH3)),2.04(ddd,J=15.1,5.9,4.0Hz,1H,CH2CH(O)CHCH2),2.00-1.94(m,1H,CH2CH(O)CHCH2),1.78-1.24(m,7H),1.36(s,3H,C(CH3)2),1.17(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),1.07(s,3H,C(CH3)2),1.00(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3))；HRMS(FAB),計算C28H42FNO6S(M+Cs+),672.1771實測672.1793。
如流程10所述的大分子內酯67按照如大分子內酯18d合成所述操作，將乙烯基碘65(11mg,0.020mmol,1.0當量)、錫烷8p(14mg,0.034mmol,1.7當量)與PdCl2(MeCN)2(1.0mg,0.004mmol,0.2當量)的脫氣DMF溶液(250μl,0.08M)在25℃下攪拌20小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，EtOAc)後得到大分子內酯67(8.5mg,79％)。Rf=0.68(矽膠，Et2O)；[α]22D-44.7(c0.08,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3442,2964,2934,1732,1683,1536,1461,1422,1384,1241,150,1070,979,906,732cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.52(s,1H,ArH),6.36(s,1H,CH=CCH3),5.41(dd,J=7.0,3.3Hz,1H,CHOCO),4.15(ddd,J=10.3,7.0,3.7Hz,1H,CHOH),4.08(s,3H,OCH3),3.99(brd,J=6.3Hz,1H,OH),3.77(bm,1H,CHOH),3.34(qd,J=6.6,4.8Hz,1H,CH3CH(C=O)),2.81(dd,J=6.6,5.9Hz,1H,CH(O)CCH2CH3),2.55(dd,J=14.2,10.1Hz,1H,CH2COO),2.52(brs,1H,OH),2.39(dd,J=14.0,2.9Hz,1H,CH2COO),2.14(s,3H,CH=C(CH3)),2.05(ddd,J=15.1,5.5,4.0Hz,1H,CH2CH(O)CHCH2),1.98-1.92(m,1H,CH2CH(O)CHCH2),1.80-1.70(m,2H),1.58-1.39(m,5H),1.30-1.24(m,2H),1.17(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),1.08(s,3H,C(CH3)2),1.00(d,J=7.0Hz,3H,CH(CH3)),0.91(t,J=7.4Hz,3H,CH3CH2)；HRMS(FAB),計算C28H43NO7S(M+Cs+),670.1815實測670.1837。
如流程10所述的大分子內酯68按照如大分子內酯18d合成所述操作，將乙烯基碘65(5.8mg,0.011mmol,1.0當量)、錫烷8r(10mg,0.025mmol,2.3當量)與PdCl2(MeCN)2(1.0mg,0.004mmol,0.3當量)的脫氣DMF溶液(100μl,0.1M)在25℃下攪拌23小時，製備型薄層色譜法(250mm矽膠板，EtOAc)後得到大分子內酯68(3.7mg,65％)。Rf=0.45(矽膠，Et2O)；[α]22D-33.3(c0.09,CHCl3)；IR(薄膜)vmax3406,2954,2924,2872,1736,1692,1454,1384,1254,1150,1071,979cm-1；1HNMR(500MHz,CDCl3)δ6.99(s,1H,ArH),6.60(s,1H,CH=CCH3),5.42(dd,J=7.9,3.1Hz,1H,CHOCO),4.33(brs,1H,CHOH),4.24(brd,J=9.6Hz,1H,OH),3.76(brm,1H,CHOH),3.32(qd,J=6.8,4.3Hz,1H,CH3CH(C=O)),3.01(q,J=7.6Hz,2H,ArCH2CH3),2.82(dd,J=7.4,4.8Hz,1H,CH(O)CH2),2.60(brs,1H,OH),2.54(dd,J=13.6,10.3Hz,1H,CH2COO),2.35(dd,J=14.0,2.9Hz,1H,CH2COO),2.10-2.05(obscured m,1H,CH2CH(O)),2.09(s,3H,CH=C(CH3)),1.96-1.90(m,1H,CH2CH(O)CHCH2),1.80-1.67(m,2H),1.66-1.25(m,7H),1.38(s,3H,C(CH3)2),1.16(d,J=7.0Hz,3H CH(CH3)),1.07(s,3H,C(CH3)2),1.00(d,J=7.0Hz,3H CH(CH3)),0.92(t,J=7.4Hz,3H,CH3CH2),0.91(t,J=7.5Hz,3H,CH3CH2)；HRMS(FAB)，計算C29H45NO6S(M+Cs+),668.2022實測668.2042。
微管蛋白聚合作用和細胞毒性測定微管蛋白的聚合作用是通過過濾-比色方法測定的，見Bollag等《癌症研究》1995,55,2325-2333。在各化合物(20mM)的存在下，將純化微管蛋白(1mg/ml)在37℃MEM緩衝液[(100mM2-(N-嗎啉代)乙磺酸，pH6.75,1mM乙二醇雙(β-氨基乙基醚)，N,N,N』,N』-四乙酸，1mM MgCl2]中培養30分鐘；然後使用96孔Millipore MultiscreenDurapore親水性0.22μm孔徑濾板過濾混合物，以除去未聚合的微管蛋白；收集聚合了的微管蛋白，用醯氨基黑溶液染色，在MolecularDevices Microplate讀數器上定量測量染色溶液的吸光度。如前所述定量測定96孔板中的蛋白質，以評價所有細胞系的生長。簡單地說，在板子的每個孔內接種500個細胞，用不同濃度的依普西龍在37℃溼化5％CO2氣氛中培養四天。細胞用50％三氯乙酸固定後，在25mM NaOH溶液(50％甲醇∶50％水)中測量564nm下的光密度，相當於蛋白質的量。IC50的定義是抑制50％細胞生長所需的藥物劑量。
流程11利用如Nicolaou等《美國化學會會志》1997,119,7974-7991所述條件，以及如上關於流程11說明中所述的那些。
如流程11所述的乙烯基碘7002將二碘化物7001(1當量，來自57)和氰基硼氫化鈉(10當量)溶於無水HMPA(0.2M)，所得混合物在45-50℃下加熱48小時。冷卻至室溫後，加入水，含水相用乙酸乙酯萃取四次。合併後的有機部分乾燥(Na2SO4)，通過短矽膠塞除去痕量HMPA(用50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)。蒸發溶劑後，殘餘物用製備型薄層色譜法純化(用50％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫)，得到純的乙烯基碘7002(84％)。
權利要求
1.由式Ⅰ代表的化合物， 其中波形鍵表示鍵「a」是以順式或反式構型存在的；(ⅰ)R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；R3是選自下組的原子團氫；低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是選自下列結構的原子團 其中R和R』是低級烷基，或者R』是羥甲基或氟甲基，R是氫或甲基；(ⅱ)如果R3是低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3，除R1以外的其他符號具有上文給出的含義，那麼R1也可以是選自下列結構的原子團 或者，如果R3具有上述(ⅱ)下R3定義中給出的含義之一，甲基除外，那麼R1也可以是下式原子團 (ⅲ)如果R3是氫；低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3，R2是氧，「b」和「c」各自是單鍵，「a」是單鍵，那麼R1也可以是部分結構式的原子團 或 (ⅳ)如果R3是除甲基以外的低級烷基，尤其是乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；或者優選為-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3，除R1以外的其他符號具有上述(ⅰ)下給出的含義，那麼R1也可以是下式部分 或式Ⅰ化合物的鹽，其中存在成鹽基團。
2.根據權利要求1的式Ⅰ化合物，其中R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；R3是選自下組的原子團氫；低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是選自下列結構的原子團 其中R和R』是低級烷基，尤其是甲基；或其鹽，其中存在成鹽基團。
3.根據權利要求1的式Ⅰ化合物，其中R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；R3是選自下組的原子團氫；低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是選自下列結構的原子團 和 其中R』是羥甲基或氟甲基，R是氫或甲基；或其鹽，其中存在成鹽基團。
4.根據權利要求1的式Ⅰ化合物，其中R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；R3是選自下組的原子團低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是選自下列結構的原子團 和 或其鹽，其中存在一個或多個成鹽基團。
5.根據權利要求1的式Ⅰ化合物，其中R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；R3是選自下組的原子團除甲基以外的低級烷基，尤其是乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是下式原子團 或者，如果存在一個或多個成鹽基團，是它的鹽。
6.根據權利要求1的式Ⅰ化合物，其中R2是氧，「b」和「c」各自是單鍵，「a」是單鍵；R3是選自下組的原子團低級烷基，尤其是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是選自下列結構的原子團 和 或其鹽，其中存在一個或多個成鹽基團。
7.根據權利要求1的式Ⅰ化合物，其中R2不存在或者是氧；「a」既可以是單鍵，也可以是雙鍵；「b」既可以不存在，也可以是單鍵；「c」既可以不存在，也可以是單鍵，其條件是如果R2是氧，那麼「b」和「c」都是單鍵，「a」是單鍵；如果R2不存在，那麼「b」和「c」不存在，「a」是雙鍵；如果「a」是雙鍵，那麼R2、「b」和「c」不存在；R3是選自下組的原子團除甲基以外的低級烷基，尤其是乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基；-CH=CH2；-C≡CH；-CH2F；-CH2Cl；-CH2-OH；-CH2-O-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-O-CH3；-CH2-S-(C1-C6烷基)，尤其是-CH2-S-CH3；R4和R5獨立地選自氫、甲基或保護基團，優選為氫；R1是下式原子團
8.根據權利要求1的式Ⅰa化合物， 其中R部分彼此獨立地是氫或甲基，或其鹽。
9.根據權利要求1的式Ⅰb化合物， 其中R部分彼此獨立地是氫或甲基，或其鹽。
10.式Ⅰc化合物， 其中R*是甲基。或其鹽。
11.根據權利要求1的式Id化合物， 其中A是乙基、氟甲基、甲氧基、甲硫基或乙烯基(-CH=CH2)，D是氫、氟、羥基或甲基。
12.式Ⅰe化 其中A是乙基、氟甲基、甲氧基、甲硫基或乙烯基(-CH=CH2)，D是氫、氟、羥基或甲基。
13.根據權利要求1的化合物，選自由下式化合物組成的組 和 或其藥學上可接受的鹽，其中存在成鹽基團。
14.藥物製劑，包含根據權利要求1至12任意一項的化合物和藥學上可接受的載體。
15.根據權利要求1至12任意一項的化合物，用於增生性疾病的治療。
16.根據權利要求1至12任意一項的式Ⅰ化合物在藥物製備中的用途，該藥物用於增生性疾病的治療。
17.溫血動物的治療方法，該動物患有增生性疾病，並需要接受該治療，該方法包括將根據權利要求1的式Ⅰ化合物或其藥學上可接受的鹽對所述溫血動物給藥，給藥量對所述治療來說是充分的。
18.藥物組合物，適合於對溫血動物給藥用於增生性疾病的治療，該組合物包含對所述增生性疾病治療有效量的根據權利要求1的式Ⅰ活性成分，以及至少一種藥學上可接受的載體。
19.式Ⅰ化合物的合成方法，包括a)使式Ⅱ的碘化物 其中R2、R3、R4、R5、a、b、c和波形鍵具有權利要求1中式Ⅰ下給出的含義，與式Ⅲ的錫化合物偶合，R1-Sn(R)3(Ⅲ)其中R1具有式Ⅰ下給出的含義，R是低級烷基，尤其是甲基或正丁基，或者b)使式Ⅳ的錫化合物 其中R2、R3、R4、R5、a、b、c和波形鍵具有式Ⅰ下給出的含義，與式Ⅴ的碘化物偶合，R1-I(Ⅴ)其中R1具有式Ⅰ下給出的含義；如果需要的話，將所得式Ⅰ化合物轉化為另一種式Ⅰ化合物，將所得游離的式Ⅰ化合物轉化為式Ⅰ化合物的鹽，和/或將所得式Ⅰ化合物的鹽轉化為游離的式Ⅰ化合物或另一種式Ⅰ化合物的鹽，和/或將式Ⅰ化合物的立體異構體混合物分離為相應的異構體。
20.式Ⅵ化合物的合成方法， 其特徵在於使式Ⅶ化合物 其中R3是低級烷基，尤其是甲基或正丁基，與式Ⅷ的碘化物偶合。
21.式Ⅸ的依普西龍E或F的合成方法， 其中Q是氫或甲基，其特徵在於使式Ⅹ化合物 其中Q是氫或甲基，在一種環氧化物的存在下環氧化為式Ⅸ化合物。
全文摘要
本發明涉及由式Ⅰ代表的依普西龍類似物,其中(i)R
文檔編號A61P43/00GK1306531SQ99807769
公開日2001年8月1日 申請日期1999年6月21日 優先權日1998年6月22日
發明者K·C·尼古拉奧, N·P·金, M·R·V·芬雷, Y·何, F·羅施安格, D·沃爾－路密斯, H·瓦爾博格, A·比高特 申請人:諾瓦提斯公司, 斯克裡普思研究院