治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑及其製備方法

2023-10-07 01:36:54 1

專利名稱：治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑及其製備方法
技術領域：
本發明涉及中藥技術領域，特別是涉及一種治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑及其製備方法。

背景技術：
更年期症候群(climacteric syndrome，CS)是指更年期婦女因卵巢的功能衰退，引起機體內分泌失調、免疫力低下和植物神經功能紊亂的症候群。臨床上見烘熱盜汗，月經紊亂，精神狀態的變化，心血管與生殖泌尿系統病變及骨質疏鬆等表現，是困擾更年期婦女的主要病症。更年期症候群嚴重影響更年期婦女的生活質量，且隨著老齡化社會的到來，更年期婦女日漸增多，據統計，2000年，美國更年期婦女達4千萬，我國2030年更年期婦女將約達2.8億，對更年期症候群的防治研究已成為社會發展的需要。心腎陰虛是更年期症候群的一種表現。心腎陰虛包括心陰虛和腎陰虛，心陰虛的症狀為心悸怔忡，失眠多夢，兼見心煩熱、潮熱、盜汗、兩顴發紅、舌紅少津、脈細數，此為心陰虛；腎陰虛是腎臟陰液不足表現的證候，表現為腰膝酸痛、眩暈耳鳴、失眠多夢、男子陽強易舉、遺精、婦女經少經閉、或見崩漏、形體消瘦、潮熱盜汗、心煩熱、咽幹顴紅、溲黃便幹、舌紅少津、脈細數。心腎陰虛兼有上述兩種陰虛的共有症狀，其病因為體質虛弱，久病傷陰。
中醫對本病的認識早在《內經》中就有「女子……七七任脈虛，太衝脈衰少，天癸竭，地道不通，故形壞而無子也」的記載，其症狀散見於「年老血崩」、「髒躁」、「百合病」及「鬱證」等多個病證中，統稱為「經斷前後諸症」。
現代醫學多採用激素替代療法(Hormone Replacement Therapy，HRT)治療。HRT可以有效解除或緩解更年期症候群症狀、治療泌尿生殖系統低雌激素症狀及預防骨質疏鬆等，其作用目前是其它藥物無法替代的，但同時存在較多的不良反應和潛在的危險性，2002年美國國立衛生院關於婦女健康啟動(Women’s Health Initiative)臨床試驗的中期報導結果表明連續聯合HRT組與安慰劑組比較，HRT組增加了心臟病事件、腦卒中、乳腺癌、肺栓塞等疾病的危險性，從而提前終止了HRT組的臨床試驗。基於上述研究，越來越多的更年期症候群婦女轉向另類療法(Alternative therapies)，其中包括傳統中醫藥療法。
國內長期的臨床實踐證明，中醫藥能明顯改善更年期綜合症患者的生理和心理症狀，且不良反應少。國外對中醫藥的應用和研究開展了對單味植物藥和複方治療更年期症候群血管舒縮症狀、抑鬱以及失眠等症狀的臨床對照研究，認為有些植物藥有類雌激素樣作用，且無毒副作用，無致癌性，值得長期的臨床使用。基於對中醫藥療效和對HRT弊端新認識的背景下，中醫藥面臨著前所未有的走向世界的新契機。
據國家食品藥品監督管理局(SFDA)審批公布的新藥目錄，截止到2005年底，用於治療更年期症候群的中藥新藥僅有5個。因此治療更年期症候群的藥品尚少，特別是療效滿意的新藥更為缺乏。


發明內容
本發明所要解決的技術問題是提供一種可有效治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑及其製備方法。
為了解決上述技術問題，本發明採用如下的技術方案 按照重量份計算，本發明治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑是由女貞子1000～3000份、太子參500～700份、藍布正300～500份和合歡皮300～500份製備而成。
優選的，上述治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑是由女貞子1500～2500份、太子參550～650份、藍布正350～450份和合歡皮350～450份製備而成。
最佳的，前述治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑是由女貞子2000份、太子參600份、藍布正400份和合歡皮400份製備而成。
本發明還提供了一種前述治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑的製備方法取女貞子，加乙醇回流提取，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正、合歡皮加水煎煮，合併煎煮液，濾過，與女貞子濾液合併，濃縮，按常規製劑工藝製成各種劑型。
上述製備方法具體為取女貞子，加8～12倍量85～95％乙醇回流提取2～4次，每次0.5～1.5小時，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正和合歡皮加6～10倍量水煎煮2～4次，每次1.5～2.5小時，合併煎煮液，濾過，與女貞子濾液合併，濃縮，按常規製劑工藝製成各種劑型。
前述製備方法優選為取女貞子，加10倍量85％乙醇回流提取3次，每次1小時，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正和合歡皮加8倍量水煎煮3次，每次2小時，合併煎煮液，濾過，與女貞子濾液合併，濃縮，製成各種製劑。
本發明膠囊劑的製備方法取女貞子，加10倍量85％乙醇回流提取3次，每次1小時，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正和合歡皮加8倍量水煎煮3次，每次2小時，合併煎煮液，濾過，濾液濃縮，乾燥，粉碎，過篩，加入澱粉，混勻，裝膠囊，即得膠囊劑。
本發明中藥製劑的功能主治滋陰降火，寧心安神。用於心腎陰虛症見頭暈目眩，潮熱盜汗，手足心熱，情緒不寧，煩躁易怒，心煩不寐，腰膝酸軟，舌紅少苔，脈細數。
女貞子，木犀科植物女貞(Ligustrum lucidum Ait.)的乾燥成熟果實，無臭，味甘、微苦澀，具有補肝腎陰、烏須明目之功效。太子參(Radix Pesudostellariae)，為石竹科植物異葉假繁縷(Pseudostellaria heterophylla(Miq.)Pax ex Pax et Hoffm.)的塊根，甘，微苦，微溫，具有補益脾肺、益氣生津之功效，治肺虛咳嗽，脾虛食少，心悸，怔忡，水腫，消渴，精神疲乏。藍布正，薔薇科水楊梅屬植物南水楊梅(Geum japonicumThunb.var.chinense Bolle)，辛、苦，平，具有鎮痛，降壓，調經，祛風除溼之功效，用於高血壓病，頭暈頭痛，月經不調，小腹痛，白帶，小兒驚風，風溼腰腿痛等症。合歡皮，豆科植物合歡(Albizia julibrissin Durazz.)的乾燥樹皮，甘，平，歸心、肝、肺經，具有解鬱安神，活血消腫之功效，用於心神不安，憂鬱失眠，肺癰瘡腫，跌扑傷痛等症。
本方證病機為肝腎陰虧，氣血失調。故有腰酸腿軟，頭暈目眩、或失眠、時有煩躁，或乏力倦怠、食少，舌淡苔少，脈細。《素問·上古天真論》「女子……七七，任脈虛，太衝脈衰少，天癸竭」，精血同源使女性在45～50歲時因自然衰老而有以腎陰虛為主，兼有肝血不足的上述症候。治當採用滋養肝腎，益氣健脾以養血安神。方中女貞子滋養腎陰，填精益髓，並養肝明目，為君藥。藍布正平肝養陰，益氣補血，調經，又能治頭暈目眩以助君藥，為臣藥。合歡皮解鬱安神，養心活血，治療心煩、失眠，並助血行通暢；太子參益氣健脾，生津潤燥，既能助「後天之本」使氣血生化充足以補虛，又能補氣、助他藥共調全身氣血陰陽以扶正，共為佐藥。四藥共用，滋補肝腎為主，兼有氣血同補，且健脾活血又防補藥之滋膩，共達滋養肝腎，益氣健脾，養血安神之功。
試驗例一、提取工藝研究 1、儀器與試藥 儀器LC-2010CHT高效液相色譜儀(日本島津公司)；METTLER AE240電子天平(梅特勒脫利多儀器[上海]有限公司)；TCQ500型超聲波清洗器(北京醫療設備廠，功率250W～500W)；減壓乾燥器(上海市實驗儀器廠ZK-82A型)。
試藥齊墩果酸(中國藥品生物製品檢定所，批號110709-200304)；女貞子、太子參、藍布正、合歡皮；更年益膠囊(本發明膠囊劑，貴陽中醫學院藥物製劑實驗室製備)；甲醇(色譜純)、水(超純水)、其他試劑均為分析純。
2、方法與結果 2.1色譜條件色譜柱VP-ODS(50*4.6面貌，5μm)、流動相甲醇-0.5％醋酸銨溶液(85∶15)、柱溫30℃、進樣量5μl、檢測波長210nm。
2.2對照品溶液的製備精密稱取齊墩果酸3.44mg，加甲醇定容至5ml量瓶中，製成每1ml含齊墩果酸0.688mg的溶液。
2.3女貞子中齊墩果酸的含量測定 對照品溶液的配製精密稱取齊墩果酸3.44mg，加甲醇定容至5ml量瓶中，製成每1ml含齊墩果酸0.688mg的溶液。
供試品溶液的製備取女貞子藥材粗粉1克，精密稱定。加乙醇50ml，加熱回流30分鐘，放冷濾過，藥渣加乙醇同上，再重複回流2次，合併濾液蒸乾，殘渣加無水乙醇微熱使溶解，轉移至10ml量瓶中，並加乙醇至刻度，搖勻作為供試品溶液既得。
2.4正交實驗設計法優選女貞子的醇提工藝 明確考察不同因素對齊墩果酸煎出率影響程度的大小，並優選最佳提取工藝，確定考察因素為加醇濃度、加醇量、提取時間、提取次數，分別取三個水平進行考察，考察因素及水平見表1。採用L9(34)正交試驗表設計試驗方案，以齊墩果酸的含量作為測評指標。
表1 L9(34)正交試驗表頭設計
2.4.1方法與結果稱取藥材女貞子200g、太子參60g、藍布正40g、合歡皮40g，照正交試驗設計表安排進行試驗，將試驗所得的藥液濃縮至幹，加無水乙醇溶解並定容至10ml.分別吸取對照品溶液、9次提取液各5μl進樣。測定峰面積，計算齊墩果酸含量，計算結果見表2、表3。
表2 L9(34)正交試驗表及結果

表3 方差分析表
2.4.3直觀分析以表2中的極值R進行分析，各指標因素影響的主次順序是A＞D＞C＞B根據K值進行比較可得最佳的提取方案是95％的乙醇10倍量回流提取3次，每次1小時。
2.4.4方差分析表2結果表明因素對試驗結果無顯著影響，結合直觀分析可以得出最佳的提取工藝是95％的乙醇10倍量回流提取3次，每次1小時。但是由於考慮工業可行性，95％的乙醇濃度過高，現保留其餘條件固定不動，改變乙醇濃度，以齊墩果酸的含量為指標對工藝進行考察。實驗結果如表4 表4、乙醇濃度的篩選

因此選取85％乙醇10倍量回流提取三次，每次一小時。
2.4.5驗證試驗按最佳工藝條件提取三次，進行驗證實驗，三次實驗結果齊墩果酸平均含量為1.4062mg/ml，RSD＝0.21％。表明該工藝條件穩定、可行。
2.5正交實驗設計法優選水提工藝 2.5.1方法與結果稱取藥材女貞子200g、太子參60g、藍布正40g、合歡皮40g，照各試驗號下的要求煎煮，濃縮，乾燥，得幹膏。以加水量，煎煮時間，煎煮次數為考查因素，進行L9(34)正交試驗，並以幹膏量(精密吸取濾液50ml，置已乾燥至恆重的蒸發皿中，揮幹，於105℃乾燥3小時，移至乾燥器中，冷卻30分鐘，迅速精密稱定重量，計算，即得。)為評價指標，篩選出最佳工藝。試驗安排及結果見表5、表6、表7，齊墩果酸含量測定方法如下 表5 實驗因素水平 表6 以幹膏得率為指標優選水提工藝的正交試驗數據

表7 方差分析表 2.5.2直觀分析以幹膏得率考慮，比較各因素不同水平實驗結果的平均值，對因素A，最大水平為1，對因素B，最大水平為3，對因素C，最大水平為3，因素D為空白列。比較各因素極差R值的大小，得出對指標幹膏含量影響因素由大到小順序為C＞B＞A. 2.5.3方差分析因素對試驗結果無顯著影響，結合直觀分析可以得出最佳的提取工藝是加8倍量的水煎煮3次，每次2小時。
2.5.4更年益膠囊的水提工藝驗證實驗 照最優工藝煎煮，濃縮，乾燥，得幹膏。平均幹膏率為10.98％，RSD＝0.15％。表明該工藝條件穩定、可行。
試驗例二、成型工藝研究 1、更年益膠囊內容物的休止角測定 1.1實驗材料與儀器 實驗材料更年益膠囊(本發明膠囊劑，貴陽中醫學院製劑實驗室製備，批號20060601)。
實驗器材玻璃漏鬥，鐵架臺，坐標紙 1.2實驗方法 採用固定漏鬥法(注入法)測定休止角將三個玻璃漏鬥依次串聯在鐵架臺上，最下漏鬥的漏鬥口距水平放置的坐標紙高為1.5cm.小心地將更年益膠囊內容物自最上端漏鬥慢慢加入，直到最下端漏鬥形成的藥粉圓錐體尖端接觸到漏鬥口為止.測定其堆底半徑R.測量三次，按如下公式計算其休止角α，取平均值，結果見表8。

表8 更年益膠囊休止角的測定結果 由上述結果顯示，藥粉顆粒休止角α＝27.90°，小於30°，具有良好的流動性.因此不需加入輔料增加其流動性。
2、更年益膠囊內容物的堆密度測定 2.1實驗材料與儀器 實驗材料更年益膠囊(貴陽中醫學院製劑實驗室製備，批號20060601)。
實驗器材量筒，METTLER AE240電子天平(梅特勒託利多儀器[上海]有限公司) 2.2實驗方法 採用容積重量法測定堆密度取一定量的更年益膠囊內容物，稱其重量m，置於圓形量筒中，測定其體積V。測量三次，按下列公式計算其堆密度ρ，取平均值，結果見表9
表9 更年益膠囊堆密度的測定 由上表可得，膠囊內容物的堆密度為0.87g/cm3。
3、臨界相對溼度的測定 3.1實驗材料與儀器 實驗材料更年益膠囊(貴陽中醫學院製劑實驗室製備，批號20060601)。
實驗儀器恆溫恆溼箱，乾燥器，扁形稱量瓶，METTLER AE240電子天平(梅特勒脫利多儀器[上海]有限公司) 3.2實驗方法 採用溼度加速試驗法測定臨界相對溼度取7個玻璃乾燥器，配置一系列不同相對溼度的飽和鹽溶液，密閉後置於25℃恆溫箱中經24小時即得相應的恆溫恆溼環境。取14個帶蓋的扁形稱量瓶，經恆重後，分為兩組，先稱其重量，然後稱取更年益膠囊內容物1g平鋪於各稱量瓶中，精密稱定後，分別置於7個乾燥器中，在不同時間段內連續測定其樣品重量，直至樣品平衡吸溼量不再變化，達到吸溼平衡。結果見表10。
表10 更年益膠囊吸溼平衡表
結果表明，更年益膠囊的臨界相對溼度為79％，提示當環境溼度高於79％時，製劑的吸溼量會顯著增加，導致顆粒的穩定性下降。因此，應在環境溼度小於79.3％的條件下貯存。
試驗例三、更年益膠囊的質量檢查 1、更年益膠囊內容物的水分檢查 1.1實驗材料與儀器 實驗材料更年益膠囊(貴陽中醫學院製劑實驗室製備)。
實驗儀器扁形稱量瓶，乾燥器，METTLER AE240電子天平(梅特勒-脫利多儀器[上海]有限公司)，遠紅外乾燥箱 1.2實驗方法 測定方法按《中國藥典》2005年版一部附錄IX H規定的第一法(烘乾法)執行取三個批次的更年益膠囊內容物各3g，平鋪於乾燥至恆重的扁形稱量瓶中，厚度約為3mm，精密稱定，打開瓶蓋在100～105℃的溫度下乾燥5小時後，將瓶蓋蓋好，移置於乾燥器中，冷卻30分鐘後，精密稱定，再在上述溫度下乾燥1小時，依法冷卻，精密稱重，至連續兩次稱重的差異不超過5mg為止，根據減失的重量，計算三批供試品中的含水量(％)，水分不得超過9.0％。其結果見表11 表11 更年益膠囊內容物的水分含量測定 由上表結果可知，3批更年益膠囊內容物的水分含量均小於9.0％，符合藥典項下規定。
2、更年益膠囊的裝量差異檢查 2.1實驗材料與儀器 實驗材料更年益膠囊(貴陽中醫學院製劑實驗室製備) 實驗器材METTLER AE240電子天平(梅特勒-脫利多儀器[上海]有限公司) 2.2實驗方法 檢查方法按《中國藥典》2005年版一部附錄I L規定的檢查方法執行取更年益膠囊10粒，分別稱定其重量，傾出內容物(不得損失囊殼)，用小刷拭淨，分別精密稱定囊殼重量，求出每粒內容物的裝量。每粒裝量與平均裝量相比較，裝量差異限度應在平均裝量的+10％以內，超出裝量差異限度的膠囊不得多於2粒，並不得有1粒超出限度的1倍。其結果見表12 表12 更年益膠囊的裝量差異檢查 由上表計算得，平均裝量為0.4562g，裝量差異限度均在±10％以內，符合藥典規定。
2.3更年益膠囊崩解時限的檢查 2.3.1實驗材料與儀器 實驗材料更年益膠囊(貴陽中醫學院藥物製劑實驗室製備) 實驗儀器ZB-1C智能崩解儀(天津大學精密儀器廠) 3.2實驗方法 檢查方法按《中國藥典》2005年版一部附錄VII A規定的檢查方法執行取裝量差異下的更年益膠囊6粒，分別置於智能崩解儀吊籃的玻璃管中，加擋板，啟動崩解儀進行檢查，膠囊各粒均應在30分鐘內全部崩解並通過篩網。如有1粒不能全部通過篩網，應另取6粒複試，均應符合規定。測定3批，結果見表13 表13 更年益膠囊崩解時限檢查

由上述結果顯示，三個批號的各粒膠囊崩解時限均小於30min，符合藥典規定。
試驗例四、藥效學實驗 摘要動物實驗結果表明(1)更年益膠囊能顯著增加去卵巢大鼠子宮的重量，對血清雌二醇水平有一定的提高作用，並能顯著增加老年雌性小鼠卵巢和腎上腺的重量。(2)更年益膠囊對老年雌性小鼠具有明顯的鎮靜作用，對去卵巢小鼠的活動增加也有顯著的抑制作用，並可延長戊巴比妥鈉睡眠時間，縮短催眠潛伏期。表明更年益膠囊有明顯的鎮靜催眠作用。(3)更年益膠囊對「陰虛」小鼠體重下降有明顯的提高作用，對「陰虛」小鼠自主活動的增加有明顯的降低作用。對正常大鼠的出汗量有明顯抑制作用。
試驗目的更年益膠囊的功能主治為滋養肝腎，益氣健脾，寧心安神。用於心腎陰虛症見頭暈目眩，潮熱盜汗，手足心熱，情緒不寧，煩躁易怒，心煩不寐，腰膝酸軟，舌紅少苔，脈細數。根據其功能主治，本實驗觀察其治本作用、鎮靜催眠、抗驚厥作用及對陰虛動物表現的影響。為其臨床應用提供實驗依據。
1、材料 1.1受試藥及提供單位 更年益膠囊，受試物為藥粉。每粒膠囊裝0.4克乾粉。口服，一次3～4粒，一日3次，每粒含原生藥總量34g。臨床一個療程為1個月。臨床每日擬用量相當於306～408g原生藥材/60kg(即相當於3.6～4.8g藥粉/60kg)。由貴州省中藥製劑研究開發中心提供，批號20051201。
1.2其它藥品和試劑 (1)更年安膠囊，功能主治滋陰潛陽，除煩安神。用於更年期潮熱汗出，眩暈耳鳴，煩燥失眠，血壓增高。用法用量口服，一次3粒，一日3次，每粒裝0.3克。吉林省東豐藥業股份有限公司，批號20050108。
(2)乙烯雌酚片，0.5mg/片，合肥久聯製藥有限公司，批號20051001。
(3)甲狀腺片，40mg/片，濟南維爾康生化製藥有限公司，批號0505501。
(4)乙醚，500ml/瓶，廣東省化學試劑工程技術研究開發中心，批號050810。
(5)戊巴比妥鈉，25g/瓶，中國醫藥(集團)上海化學試劑公司，批號F20021216。
(6)地西泮注射液，10mg/2ml，上海旭東海普藥業有限公司，批號010201。
(7)硫酸阿託品注射液，0.5mg/ml，無錫市第七製藥有限公司，批號04061613。
(8)E2(雌二醇)、LH(促黃體生成激素)、FSH(促卵泡成熟激素)發光法測定試劑盒均為美國貝克曼庫爾特有限公司生產，批號分別為612724、517606、517607。
1.3動物 (1)Wistar大鼠，體重200～250g，清潔級。
(2)昆明種小鼠，成年小鼠體重18～22g，老年小鼠體重30～40g，清潔級。
動物均為雌性。廣西醫科大學醫學實驗動物中心提供。實驗動物生產許可證號SCXK桂2003-0003。實驗動物使用許可證號SYXK桂2003-0005；動物室溫度25±2℃， 相對溼度60±2％。飼以廣西醫科大學醫學實驗動物中心配製的飼料，自由飲水。
2、方法選擇 2.1根據受試藥的功能主治，進行以下項目的藥效學研究 對去卵巢大鼠的影響、對老年雌性小鼠的影響、對去卵巢小鼠自發活動的影響、對閾下劑量戊巴比妥鈉協同作用、對戊巴比妥鈉催眠作用的影響、對「陰虛」小鼠自主活動、體重和體溫的影響。
2.2試驗對照 正常對照組給予生理鹽水； 陽性對照藥中藥對照組(更年安膠囊)和西藥對照組(乙烯雌酚、地西泮、阿託品)； 2.3給藥途徑、給藥體積及配藥方法 給藥途徑更年益膠囊、更年安膠囊、乙烯雌酚均為灌胃(i.g)給藥，地西泮、阿託品為腹腔注射給藥。
灌胃給藥體積大鼠10ml/kg，小鼠20ml/kg。
配藥方法 更年益稱取適量藥粉，以適量蒸餾水溶解配製至所需濃度(保證給藥體積不變)。
更年安膠囊取膠囊內藥粉，以適量蒸餾水溶解配製至所需濃度(保證給藥體積不變)。
2.4其他對照藥 乙烯雌酚取其片劑，以適量蒸餾水溶解配製至所需濃度(保證給藥體積不變)。
地西泮原液以注射用生理鹽水稀釋4倍，給予小鼠腹腔注射20ml/kg(25mg/kg)。
阿託品給予大鼠皮下注射原液10ml/kg(5mg/kg)。
2.5數據處理 採用華西醫科大學衛生統計學教研室的《中國醫學百科全書醫學統計學》統計軟體包(第二版)進行有關檢驗。計量數據以x±s表示。
3、實驗方法和結果 3.1對去卵巢大鼠的雌二醇、促黃體生成激素、促卵泡成熟激素和子宮、腎上腺的影響 取成年雌性大鼠乙醚麻醉後摘除雙側卵巢，手術後抗感染。手術後第5天進行陰道塗片檢查，連續5天。取合格動物(不出現動情變化)分為(1)模型對照組(空白對照組)、(2)西藥陽性對照組、(3)中藥陽性對照組、(4)更年益膠囊高劑量組、(5)更年益膠囊中劑量組、(6)更年益膠囊低劑量組。另對10隻大鼠進行假手術，作為假手術組。各組給藥劑量及途徑模型對照組和假手術組給等體積蒸餾水，西藥陽性對照組給乙烯雌酚0.5mg/kg，中藥陽性對照組給更年安膠囊0.6g/kg，更年益膠囊高、中、低劑量組分別為85.0、42.5、21.25g生藥/kg。於手術後第9天開始灌胃給藥，每天1次，連續30天，末次給藥24小時後，(1)腹主動脈採血分離血清，放免法測定E2(雌二醇)、LH(促黃體生成激素)、FSH(促卵泡成熟激素)；(2)摘取子宮和腎上腺稱重計算臟器係數；(3)並對子宮、腎上腺進行組織學觀察。
結果表明 (1)更年益膠囊高劑量組能顯著增加大鼠子宮的重量，對血清E2水平有一定的提高作用，見表14。
(2)子宮、腎上腺病理組織學觀察表明，更年益膠囊對雌性大鼠去卵巢後子宮和腎上腺出現的萎縮、腔直徑變小，子宮內膜下腺體較少及肌層較薄等病理改變有改善作用，表現在子宮、腎上腺體積增大，腔直徑擴大(3-4mm)，子宮內膜腺體增多。乙烯雌酚組子宮和腎上腺較大，腔直徑5mm。子宮內膜層、肌層細胞較豐富；更年安膠囊組子宮、腎上腺稍大，直徑2-3mm，子宮內膜層、肌層細胞稍多。
表14 更年益膠囊對去卵巢大鼠E2、LH、FSH水平和子宮、腎上腺臟器係數的影響(x±s) 與假手術組比較*P＜0.05，**P＜0.01，與模型對照組比較△P＜0.05，△△P＜0.01 3.2對老年雌性小鼠自發活動及子宮、卵巢和腎上腺的影響 取1年齡雌性小鼠(種鼠，休產)60隻，隨機分為(1)空白對照組、(2)陽性對照組、(3)更年益膠囊高劑量組、(4)更年益膠囊中劑量組、(5)更年益膠囊低劑量組。各組給藥劑量及途徑空白對照組給等體積蒸餾水，陽性對照組給更年安膠囊1.2g/kg，更年益膠囊高、中、低劑量組分別為170.0、85.0、42.5g生藥/kg，分組後隨即給藥，各組每天灌胃給藥1次，連續20天，末次給藥1小時後，測定小鼠3分鐘內舉前肢次數和活動時間。實驗結束後處死小鼠，取子宮、卵巢和腎上腺稱重，計算髒體系數。
結果表明，更年益膠囊高、中劑量組對老年雌性小鼠有明顯的中樞抑制作用，可明顯減少老年小鼠的自發活動。更年益膠囊高劑量也能顯著增加老年小鼠卵巢和腎上腺的重量，見表15、表16。
表15 更年益膠囊對老年雌性小鼠自發活動的影響(x±s) 與空白對照組比較*P＜0.05。
表16 更年益膠囊對老年雌性小鼠子宮、卵巢和腎上腺髒體系數的影響(x±s) 與空白對照組比較*P＜0.05。
3.3對去卵巢小鼠自發活動的影響 將成年雌性小鼠乙醚麻醉後摘除雙側卵巢，手術後抗感染。摘除卵巢第5天進行陰道塗片檢查，連續5天。取合格動物(卵巢摘除完全無動情變化)分為(1)模型對照組(空白對照組)、(2)西藥陽性對照組、(3)中藥陽性對照組、(4)更年益膠囊高劑量組、(5)更年益膠囊中劑量組、(6)更年益膠囊低劑量組。另對12隻小鼠進行假手術，作為假手術組。各組給藥劑量及途徑模型組和假手術組給等體積蒸餾水，西藥陽性對照組給乙烯雌酚1mg/kg，中藥陽性對照組給更年安膠囊1.2g/kg，更年益膠囊高、中、低劑量組分別為170.0、85.0、42.5g生藥/kg。於手術後第9天開始灌胃給藥，每天1次，連續20天，末次給藥1小時後，測定小鼠3分鐘內舉前肢次數和活動時間。
結果表明，小鼠去卵巢自發活動明顯增加，更年益膠囊可減少去卵巢小鼠的自發活動，其中高劑量組具有明顯的差異，提示其對去卵巢小鼠有顯著的鎮靜作用，見表17。
表17 更年益膠囊對去卵巢小鼠自發活動的影響(x±s)
與假手術組比較*P＜0.05，與模型對照組比較△P＜0.05 3.4對去卵巢小鼠的閾下劑量戊巴比妥鈉協同作用 將成年雌性小鼠乙醚麻醉後摘除雙側卵巢，手術後抗感染。摘除卵巢第5天進行陰道塗片檢查，連續5天。取合格動物(卵巢摘除完全無動情變化)隨機分組，分組、給藥方法及給藥劑量同實驗14.3項下。於手術後第9天開始給藥，每天1次，連續16天，末次給藥1小時後，各組小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉30mg/kg，觀察15分鐘內翻正反射消失達1分鐘的動物數，並計算小鼠出現翻正反射消失的百分率。
結果表明，小鼠去卵巢後對閾下劑量戊巴比妥鈉的協同作用下降，更年益膠囊高劑量組對閾下劑量戊巴比妥鈉協同作用有明顯的提高作用，見表18。
表18 更年蓋膠囊對去卵巢小鼠閾下劑量戊巴比妥鈉的協同作用(x±s)
與假手術組比較**P＜0.01，與模型對照組比較△P＜0.05，△△P＜0.01 3.5對去卵巢小鼠戊巴比妥鈉催眠作用的影響 將成年雌性小鼠乙醚麻醉後摘除雙側卵巢，手術後抗感染。摘除卵巢第5天進行陰道塗片檢查，連續5天。取合格動物(卵巢摘除完全無動情變化)隨機分組，分組、給藥方法及給藥劑量實驗14.3項下。於手術後第9天開始給藥，每天1次，連續18天，末次給藥1小時後，各組小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉50mg/kg，記錄小鼠入睡時間(潛伏期)和睡眠時間。
結果表明，小鼠去卵巢後，給予催眠劑量的戊巴比妥鈉，入睡時間(潛伏期)延長，睡眠時間縮短。更年益膠囊高劑量組可延長去卵巢小鼠的戊巴比妥鈉睡眠時間、縮短催眠潛伏期，見表19。
表19 更年益膠囊對去卵巢小鼠戊巴比妥鈉催眠作用的影響(x±s)
與假手術組比較*P＜0.05，與模型對照組比較△P＜0.05，△△P＜0.01 3.6對「陰虛」小鼠自主活動、體重和體溫的影響 取雌性小鼠72隻，隨機分為(1)模型對照組、(2)正常對照組、(3)陽性對照組、(4)更年益膠囊高劑量組、(5)更年益膠囊中劑量組、(6)更年益膠囊低劑量組。各組給藥劑量及途徑模型對照組和正常對照組給等體積蒸餾水，陽性對照組給更年安膠囊1.2g/kg，更年益膠囊高、中、低劑量組分別為170.0、85.0、42.5g生藥/kg，分組後隨即給藥，各組每天灌胃給藥1次，連續15天，給藥同時除正常對照組外，各組每天灌胃給甲狀腺片5mg/只。末次給藥1小時後，測定小鼠3分鐘內舉前肢次數和活動時間，同時記錄小鼠的體重及體溫。
結果表明，更年益膠囊高劑量組對「陰虛」小鼠體重下降有明顯的提高作用，對「陰虛」小鼠自主活動的增加也有明顯的抑制作用，但對陰虛小鼠體溫的無明顯影響，見表20。
表20 更年益膠囊對「陰虛」小鼠自主活動、體重、體溫的影響(x±s) 與正常對照組比較*P＜0.05，與模型對照組比較△P＜0.05。
4、結論 (1)治本作用試驗結果表明，更年益膠囊能顯著增加去卵巢大鼠子宮的重量，對血清LH、FSH水平有一定的降低作用，對血清E2水平有一定的提高作用，並能顯著增加老年雌性小鼠卵巢和腎上腺的重量。
(2)鎮靜催眠、抗驚厥作用試驗結果表明，更年益膠囊對去卵巢小鼠有顯著的鎮靜催眠、抗驚厥作用，對老年雌性小鼠自發性活動增加也有明顯的抑制作用。
(3)對「陰虛」動物表現的影響試驗結果表明，更年益膠囊能明顯提高「陰虛」小鼠的體重，對「陰虛」小鼠自發性活動的增加有明顯的明顯降低作用。並對正常動物出汗量有明顯的抑制作用。
與現有技術相比，本發明中藥製劑具有顯著的治本、鎮靜、抗驚厥作用，是一種用於心腎陰虛的更年期症候群治療的中藥新藥，對心腎陰虛症見頭暈目眩、潮熱盜汗、手足心熱、情緒不寧、煩躁易怒、心煩不寐、腰膝酸軟、舌紅少苔、脈細數等具有很好治療作用，為廣大患者提供了一種新的用藥選擇，其原料種類少，產品質量易於控制，處方組成中，除藍布正外，均為《中國藥典》所載的常用藥，資源豐富。藍布正是貴州省常用的苗藥，收載於《貴州省中藥民族藥質量標準》2003版，資源相當豐富，藍布正具有補虛益氣、鎮定安神的功用，與女貞子、太子參、合歡皮三味藥配合使用，對更年期症候群的療效明顯，而且製備工藝簡單，其成本相對較低，具有較大的市場潛力。

具體實施例方式 實施例1膠囊劑的製備 原料女貞子2000g、太子參600g、藍布正400g、合歡皮400g 製備方法取女貞子，加10倍量85％乙醇回流提取3次，每次1小時，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正和合歡皮加8倍量水煎煮3次，每次2小時，合併煎煮液，濾過，濾液濃縮，乾燥，粉碎，過篩，加入澱粉，混勻，裝膠囊，製成膠囊1000粒，每粒裝0.4g。
用法用量口服，一日3次，一次3～4粒。
實施例2片劑的製備 原料女貞子1000g、太子參630g、藍布正500g、合歡皮480g 製備方法取女貞子，加8倍量95％乙醇回流提取3次，每次1小時，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正和合歡皮加10倍量水煎煮4次，每次2小時，合併煎煮液，濾過，濾液濃縮，乾燥，粉碎，過篩，加入輔料，混勻，壓片，製成片劑1000片。
用法用量口服，一日3次，一次3～4片。
實施例3滴丸劑的製備 原料女貞子1200g、太子參700g、藍布正470g、合歡皮300g 製備方法取女貞子，加10倍量90％乙醇回流提取2次，每次1.5小時，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正和合歡皮加6倍量水煎煮4次，每次1.5小時，合併煎煮液，濾過，濾液濃縮，按常規工藝製成滴丸1000粒。
用法用量口服，一日3次，一次3～4丸。
實施例4膠囊劑的製備 原料女貞子2800g、太子參500g、藍布正300g、合歡皮500g 製備方法取女貞子，加12倍量85％乙醇回流提取4次，每次0.5小時，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正和合歡皮加10倍量水煎煮2次，每次2.5小時，合併煎煮液，濾過，濾液濃縮，乾燥，粉碎，過篩，加入澱粉，混勻，裝膠囊，製成膠囊1000粒。
用法用量口服，一日3次，一次3～4粒。
實施例5顆粒劑的製備 原料女貞子3000g、太子參530g、藍布正320g、合歡皮380g 製備方法取女貞子，加12倍量85％乙醇回流提取4次，每次1.5小時，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正和合歡皮加8倍量水煎煮4次，每次2小時，合併煎煮液，濾過，濾液濃縮，乾燥，粉碎，過篩，加入澱粉，混勻，制粒，包裝，製成顆粒劑1000袋。
用法用量口服，一日3次，一次3～4袋。
權利要求
1.一種治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑，其特徵在於按照重量份計算，該中藥製劑是由女貞子1000～3000份、太子參500～700份、藍布正300～500份和合歡皮300～500份製備而成。
2.按照權利要求1所述治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑，其特徵在於按照重量份計算，該中藥製劑是由女貞子1500～2500份、太子參550～650份、藍布正350～450份和合歡皮350～450份製備而成。
3.按照權利要求2所述治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑，其特徵在於按照重量份計算，該中藥製劑是由女貞子2000份、太子參600份、藍布正400份和合歡皮400份製備而成。
4.權利要求1-3所述治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑的製備方法，其特徵在於取女貞子，加乙醇回流提取，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正、合歡皮加水煎煮，合併煎煮液，濾過，與女貞子濾液合併，濃縮，按常規製劑工藝製成各種劑型。
5.按照權利要求4所述治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑的製備方法，其特徵在於取女貞子，加8～12倍量85～95％乙醇回流提取2～4次，每次0.5～1.5小時，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正和合歡皮加6～10倍量水煎煮2～4次，每次1.5～2.5小時，合併煎煮液，濾過，與女貞子濾液合併，濃縮，按常規製劑工藝製成各種劑型。
6.按照權利要求5所述治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑的製備方法，其特徵在於取女貞子，加10倍量85％乙醇回流提取3次，每次1小時，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正和合歡皮加8倍量水煎煮3次，每次2小時，合併煎煮液，濾過，與女貞子濾液合併，濃縮，按常規製劑工藝製成各種劑型。
7.按照權利要求6所述治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑的製備方法，其特徵在於取女貞子，加10倍量85％乙醇回流提取3次，每次1小時，濾過，濾液備用，藥渣與太子參、藍布正和合歡皮加8倍量水煎煮3次，每次2小時，合併煎煮液，濾過，濾液濃縮，乾燥，粉碎，過篩，加入澱粉，混勻，裝膠囊，即得膠囊劑。
全文摘要
本發明公開了一種治療心腎陰虛的更年期症候群的中藥製劑及其製備方法，它是由女貞子、太子參、藍布正和合歡皮經醇提和水提製備而成，具有顯著的治本、鎮靜、抗驚厥作用，是一種用於心腎陰虛症的中藥新藥，對心腎陰虛症見頭暈目眩、潮熱盜汗、手足心熱、情緒不寧、煩躁易怒、心煩不寐、腰膝酸軟、舌紅少苔、脈細數等具有很好治療作用，為廣大患者提供了一種新的用藥選擇，其原料種類少，產品質量易於控制，而且製備工藝簡單，其成本相對較低，具有較大的市場潛力。
文檔編號A61K36/73GK101647879SQ200810303708
公開日2010年2月17日 申請日期2008年8月13日 優先權日2008年8月13日
發明者孔德明, 張永萍, 劍 徐, 王明強 申請人:貴陽中醫學院