一種北枳椇總黃酮的提取方法

2023-08-11 02:08:16 2

專利名稱：：一種北枳椇總黃酮的提取方法
技術領域：
：本發明涉及一種北枳模總黃酮的提取方法、質量控制方法及其在醫藥、食品、化妝品和保健品領域的應用，屬於天然產物領域。
背景技術：
：北枳模Thunb)為鼠李科枳棋屬植物，在我國資源極為豐富，其帶肉質果柄的果實或種子入藥，稱為"枳模子"，具有解酒毒，止渴除煩，止嘔，利大小便。主治醉酒，煩渴，嘔吐，二便不利、風溼麻木，手足拘攣等症。北枳模葉、花、根、莖、枝、皮、液汁有醒酒安神、促進尿液排洩，加速腸道蠕動、祛風通絡止痙、止渴除煩，補充營養、降血壓、抑瘤、鎮靜、抗驚厥、保肝、養肝、降血糖等作用，民間亦用入藥。黃酮為北枳模的有效成分，其主要結構為黃酮醇(苷)、黃烷醇和二氫黃酮醇類等類型的化合物，具有保肝、解酒毒、抗菌、抗氧化等作用。目前已有文獻報導北枳模子總黃酮的溶劑提取方法，但其只是將總黃酮簡單提取出來，沒有與其他方法結合，進行總黃酮粗提取物的分離和純化，因此提取物中總黃酮含量均在l"^以下，純度很低；也有文獻報導北枳模果實中單體黃酮的製備方法，但其僅提取黃酮的一種有效成分，沒有涉及總黃酮製備方法；而且北枳模其他活性部位如葉、花、根、莖、枝、皮和果渣黃酮的製備方法均沒有文獻報導，這些都嚴重的限制了北枳模總黃酮的利用和藥效作用的發揮。
發明內容本發明的目的在於提供一種北枳模子、果柄、果實、種子、種殼、葉、花、根、莖、枝、皮和果渣總黃酮的提取方法。本發明的另一個目的在於提供一種北枳模總黃酮作為藥物製劑、藥品輔料和功能因子在藥品、食品、化妝品和保健品領域的應用。本發明的另一個目的在於提供一種北枳模總黃酮可單獨作為製劑或與某些保肝、解酒、抗氧化、抗菌藥合用製成劑型，應用於藥品、食品和化妝品和保健品領域。本發明提出的北枳模總黃酮，是從北枳模子、果柄、果實、種子、種殼、葉、花、根、莖、枝、皮或果渣等部位提取出來的兩種或兩種以上黃酮類活性成分的組合，這些化合物結構如下名稱結構式tableseeoriginaldocumentpage6tableseeoriginaldocumentpage7tableseeoriginaldocumentpage8本發明所述材料，來源於鼠李科枳模屬植物北枳模(Z/owm'a^/C&Thimb)。作為提取北枳模總黃酮的原材料，可以是市售北枳模子，也可以是北枳模果柄、果實、種子、種殼、葉、花、根、莖、枝、皮和果渣等任一部位或全部植株，其中優選的藥材部位為北枳模果柄、種子、葉和果渣。上述所述的北枳模包括未經任何炮製處理的原藥材及飲片，還包括各種炮製品。本發明所述的北枳模總黃酮，是指從上述植物的任何部位提取得到的，含有以下兩種或兩種以上黃酮類活性成分的組合物。這些黃酮類成分包括槲皮素、槲皮素-3力-cc-L-鼠李糖苷、4，，5，7-三羥基-3'，5'-二甲氧基黃酮、楊梅素、洋芹素、花旗松素、3，4',5，5',7-五羥基-3'-甲氧基黃酮、北枳模醇、(+)-3,3',5'，5,7-五羥基雙氫黃酮、山萘酚、山萘酚-3-0-ct-L-鼠李糖苷、山柰酚-3,7-0-cc-L-二鼠李糖苷、山萘酚-3-0-"-L-鼠李糖-(1—6)-0-a-D-葡萄糖(142)-(9-〃-D-葡萄糖、山萘酚-3-o-a-L-鼠李糖-7-0-[y5-D-葡萄糖-(1—3)-cc-L-鼠李糖]、雙氫山萘酚、(+)-二氫楊梅素、(+)-焦兒茶素、枳模素I、枳模素II、枳模素III、(-)-兒茶素、香橙素和阿福豆素等。本發明所述的北枳模各種黃酮成分之中，其最主要的活性成分是槲皮素、山萘酚、楊梅素、(+)-二氫楊梅素、北枳模醇、(-)-兒茶素、枳模素I、枳模素II、枳模素III和香橙素等及其衍生物等。作為北枳棋總黃酮，其中各黃酮類成分百分含量的總和以重量計為12100%(W/W)，其中優選的為50100%(W/W)。本發明所述的製備北枳模總黃酮，除了可用於醫藥工業，還可用於食品工業、化妝品工業和保健品工業。本發明所述的製備北枳模總黃酮可單獨製成製劑或與其他解酒毒、保肝養肝、抗氧化、抗菌等藥物合用，用於酒精中毒、肝病的治療和因自由基所致的各種疾病，這些製劑具有與枳模總黃酮全部相同或相近的藥理活性和用途。本發明還提出了北枳模總黃酮提取方法，北枳模果柄、果實、種子、種殼、葉、花、根、莖、枝、皮和果柄果渣等任一部位或其組合，它採用溶劑提取法與以下任意一種方法，或這些方法的任意組合進行北枳模總黃酮提取①溶劑萃取法；②大孔吸附樹脂法；③超臨界流體萃取法；柱色譜法；⑤液-液逆流分配色譜法；其中優選的是大孔吸附樹脂法。在使用這些方法進行北枳模總黃酮提取時，一般包括以下一個或幾個步驟(1)提取所用溶劑可以是水或任意一種醇類、酮類或酯類溶劑，或這些溶劑按一定比例組成的混合溶劑，或由這些溶劑與酸、鹼、鹽配成的酸性或鹼性溶劑。提取方法可以是煎煮、加熱回流、索氏提取、超聲提取、冷浸、滲漏、微波提取、高壓提取等。優選的索氏提取法工藝為用095%乙醇溶液(V/V)，以料液比為l:1050(g/mL)，6010(TC連續加熱回流提取512h。優選的超聲提取法工藝為將北枳模提取材料裝入超聲提取器內，按料液比為1:615(g/mL)加入095X乙醇溶液(V/V)，採用溫度為3050°C，頻率為40kHz、功率為0.30.5W/cn^的超聲波提取1530分鐘，提取23次，合併提取液。優選的微波提取法工藝為以固液比1:2040(g/mL)加入095X乙醇溶液(V/V)浸泡2060分鐘，控制微波功率為900W，照射3050秒，取出後迅速冷卻至室溫，再照射2040秒，同法操作重複35次，過濾，合併提取液。(2)過濾包括離心、抽濾、超濾、壓濾等方法，使用或不使用以下任意一種澄清劑或其組合醇沉劑，明膠，高嶺土，各種樹脂，聚乙二醇，聚乙三醇，殼聚糖以及天然澄清劑成品如101果汁澄清劑、ZTC+1天然澄清劑等。優選的澄清劑為硅藻土，按照硅藻土與提取物重量比為1:25在提取液中加入硅藻土，105(TC攪拌處理2060min，然後過濾獲得濾液，再利用甲醇、乙醇、氯仿、乙醚、或其中兩種或幾種組合衝洗澄清劑獲得洗脫液，濾液和洗脫液合併。(3)濃縮包括常壓或減壓條件下的薄膜蒸發、旋轉蒸發及煎煮濃縮等。(4)乾燥包括真空乾燥、噴霧千燥、冷凍乾燥等。當採用萃取法進行製備進行時，一般先將提取物混懸於水中，然後用垸烴類(如石油醚、己垸、汽油等)萃取除去脂溶性雜質，然後用合適的溶劑，如乙醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、正丁醇等，或是這些溶劑的混合物，萃取獲得其中的總黃酮成分，得到總黃酮提取物。當採用大孔吸附樹脂法進行製備時，所用的大孔樹脂可以是非極性、弱極性、中等極性、弱鹼性或弱酸性等任意一種類型，如DIOI、D4020、D3500、D941、D21、HP-20、HP-20、XDA-1、AB-8、HPD400、S-8、HZ-806、H-50、H-30、LX-38、LX-28、LS-300B、LS畫306、LSD-958、PA等，其中優選的為弱極性或中等極性的樹脂，如LX-38、DlOl、AB-8等。所用的洗脫劑為水和含水的乙醇、甲醇、丙酮等，其中優選的為5095%的乙醇溶液(V/V)。優選的北枳模總黃酮提取物樹脂純化工藝為選用LX-38、DlOl、AB-8樹脂作為純化用樹脂，北枳犋粗總黃酮以生藥量(g)):分散毫升數計的上樣液稀釋倍數1:41:18，吸附流速29BV/h，樹脂柱徑高比1:31:10，上樣量為100500mg/mL(以生藥量計)，020^乙醇溶液(V/V)洗脫25倍樹脂體積進行除雜，除雜流速為27BV/h，用5095X乙醇溶液(V/V)洗脫310倍樹脂體積，洗脫流速為29BV/h。當採用超臨界流體萃取法進行製備時，可以對北枳模原料直接進行萃取，也可以對上述任一方法和步驟所獲得的產物進行萃取。萃取時可以使用或不使用以下任一種類溶劑及溶劑混合物水、醇類、酮類、酯類及醚溶劑。當採用柱色譜法進行製備時，其處理的對象可以是上述提取步驟所獲得的產物，也可以是經上述溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹脂法或超臨界流體萃取法初步純化後的產物。所用的固定相可以是矽膠、聚醯胺、氧化鋁、葡聚糖(Sephadex系列或Sephadex-20系列)、C-8、C-18、活性碳、纖維素等，所用的洗脫液因固定相的不同而不同，一般是水、甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、石油醚等組成的混合溶劑。其中優選的是聚醯胺柱色譜法。聚醯胺柱色譜法純化工藝為選用聚醯胺，北枳模粗提取物上樣液濃度1:41:16(以生藥量(g):分散毫升數)，吸附流速38BV/h，樹脂柱徑高比1:61:20，上樣量為100500mg/mL(以生藥量計)，010%乙醇溶液(V/V)洗脫15倍樹脂體積進行除雜，除雜流速為37BV/h，用5095%乙醇溶液(V/V)洗脫47倍樹脂體積，洗脫流速為29BV/h，收集洗脫液，減壓回收溶劑，殘留物減壓乾燥，得枳模總黃酮。當採用液-液逆流萃取法進行製備時，其處理的對象可以是上述提取步驟的產物，也可以是經上述溶劑提取法、溶劑萃取法、大孔吸附樹脂法、超臨界流體萃取法和柱色譜法初步純化後的產物。一般是將提取物混懸於水中，然後用低極性的烷烴類或醚類溶劑(如石油醚、己烷、汽油等)萃取除去脂溶性雜質，然後用合適極性的溶劑，如氯仿、乙酸乙酯、丙酮、正丁醇等，或是這些溶劑的混合物，萃取獲得其中的總黃酮成分，得北枳犋總黃酮。該北枳模總黃酮可以單獨或與其它任何中西藥、食物或輔料按任意比例配伍，用於製備藥物、食品、化妝品和保健品，所得的藥物、食品、化妝品和保健品可以是膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑、口服液、糖漿、衝劑、酒劑、注射劑、膏劑、散劑、飲料等。本發明質量控制方法可包括以下含量測定方法中的一種或幾種.-1.總黃酮精密稱取12(TC乾燥至恆重的蘆丁對照品250mg，用無水甲醇溶解，轉移入250mL容量瓶中，用無水甲醇定容，搖勻。精確移取5.00mL置於50mL容量瓶中，用無水甲醇定容，搖勻。此蘆丁對照品溶液濃度為0.1mg/mL。準確吸取0.1mg/mL蘆丁對照品溶液O.OOmL、l.OOmL、2.00mL、3.00mL、4.00mL、5.00mL、6.00mL，分別置於25mL容量瓶中，各加50%乙醇溶液(V/V)至6mL，分別加5。/o亞硝酸鈉溶液(W/V)1.00mL，搖勻，放置6min後分別加10n/。硝酸鋁溶液(W/V)1.00mL，搖勻，放置6min，再分別加1%氫氧化鈉溶液10.00mL，再用50%乙醇溶液(V/V)定容，搖勻，放置15min後，以空白溶液為參比，在波長510nm處測吸光度，得回歸方程。分別準確吸取枳模黃酮提取物樣品各3份，每份20mg，置50mL容量瓶中，加50%乙醇溶液(V/V)超聲溶解並稀釋至刻度，搖勻。按上所述顯色並在510nm波長處測定其吸光度A，由回歸方程計算樣品中總黃酮含量。2.北枳模醇、槲皮素、香橙素和山萘酚的含量色譜條件色譜柱反相C18(4.6X250mm，5pm);流動相3085^甲醇溶液(V/V)(用磷酸調pH至3.0)洗脫(020min);流速1.0mL/Min;檢測波長360nm;柱溫室溫。標準曲線繪製分別精密吸取稱取北枳模醇、槲皮素、香橙素和山萘酚對照品，用甲醇溶解分別配製成濃度為100、288、190嗎/mL對照品溶液，0、2、5、10、15、20^iL注入液相色譜儀，測定各色譜峰峰面積，以對照進樣量(pg)為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪製標準曲線。含量測定精密稱取3批總黃酮提取物樣品各3份，每份約20mg，置於50mL量瓶中，加甲醇超聲溶解，並稀釋至刻度，搖勻，作為北枳犋醇、槲皮素、香橙素和山萘酚含量測定的供試樣品溶液，精密吸取上述供試樣品溶液20pL注入液相色譜儀，測定各色譜峰峰面積，計算含量。3.二氫楊梅素色譜條件色譜柱反相C18(4.6X250mm，5pm);流動相2540%甲醇溶液(V/V)(用磷酸調pH至3.0)洗脫(050min);流速1.0mL/Min;檢測波長294nm;柱溫室溫。標準曲線繪製分別精密吸取(+)-二氫楊梅素對照品溶液(2.0|igL)0、2、5、10、15、20pL注入液相色譜儀，測定各色譜峰峰面積，以對照進樣量(pg)為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪製標準曲線。含量測定精密稱取3批總黃酮提取物樣品各3份，每份約20mg，置於50mL量瓶中，加20%乙腈溶液(V/V)超聲溶解，並稀釋至刻度，搖勻，作為(+)-二氫楊梅素含量測定的供試樣品溶液，精密吸取上述供試樣品溶液20pL注入液相色譜儀，測定各色譜峰峰面積，計算含量。4.楊梅素色譜條件:色譜柱反相C18(4.6X250mm，5)im);流動相4060%甲醇溶液(V/V)(用磷酸調pH至3.0)洗脫(050min);流速l.OmL艇in;檢測波長370nm;柱溫室溫。標準曲線繪製精密稱取楊梅素對照品9.80mg、置100mL容量瓶中，用甲醇溶解並定容至刻度，搖勻，作為對照品溶液。用甲醇稀釋並定容至刻度，搖勻，配成9.8、19.6、29.4、39.2、49.(Vg/mL系列濃度的楊梅素溶液注入液相色譜儀，測定各色譜峰峰面積，以對照進樣量(pg)為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪製標準曲線。含量測定精密稱取3批總黃酮提取物樣品各3份，每份約20mg，置於50mL量瓶中，加甲醇超聲溶解，並稀釋至刻度，搖勻，作為楊梅素含量測定的供試樣品溶液，精密吸取上述供試樣品溶液20|iL注入液相色譜儀，測定各色譜峰峰面積，計算含量。4.兒茶素、枳模素I、枳模素II、枳模素m色譜條件色譜柱反相C18(4.6X250mm,5jum);流動相1560%(040min)甲醇溶液(V/V)洗脫；流速1.OmL/Min;檢測波長280nm。標準曲線繪製分別精密吸取兒茶素、枳模素l、枳模素n、枳模素ni對照品溶液(0.027pg4iL)0、2、5、10、15、20]uL注入液相色譜儀，測定各色譜峰峰面積，以對照進樣量(pg)為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪製標準曲線。含量測定精密稱取3批總黃酮提取物樣品各3份，每份約20mg，置於50mL量瓶中，用50%甲醇水溶液(V/V)超聲溶解，並稀釋至刻度，搖勻，作為兒茶素和枳模素I、枳模素II、枳模素III含量測定的供試樣品溶液，精密吸取上述供試樣品溶液20ML注入液相色譜儀，測定各色譜峰峰面積，計算具體實施例方式實施例l:北枳模總黃酮的提取取北枳模葉1Kg粉碎至50目，按照l:50(g/mL)的料液比加入75%乙醇溶液(V/V)，連續加熱回流提取9h，回收溶劑除去乙醇，調節提取液的pH=6，濾液上己處理好的大孔樹脂LSD-958，用4倍樹脂床體積的水溶液和3倍樹脂床體積20%乙醇溶液(V/V)衝洗除雜，衝洗液棄去，用7倍樹脂床體積的95X乙醇溶液(V/V)洗脫，收集洗脫液，濃縮至稠膏乾燥得北枳模總黃酮。測定北枳模總黃酮含量為66%，其中槲皮素、山萘酚、楊梅素、(+)-二氫楊梅素、北枳模醇、(-)-兒茶素、枳模素I、枳模素II、枳模素III和香橙素等及其衍生物等含量和為51%。實施例2:北枳模總黃酮的提取取成熟千燥北枳模子1Kg粉碎至60目，以固液比1:40(g/mL)加入蒸餾水浸泡40分鐘，控制微波功率為900W，照射50秒，取出後迅速冷卻至室溫，再照射20秒，同法操作重複3次，過濾，合併提取液。提取液減壓濃縮至20^(V/V)，將其懸浮於水，然後依次用正己垸、乙酸乙酯萃取，分別回收溶劑並保留有機溶劑提取物。取乙酸乙酯萃取物並用乙醇溶解，按照重量的30%加入硅藻土，室溫攪拌處理30分鐘，過濾並用乙醇洗滌，合併濾液，真空濃縮乾燥得枳模總黃酮。測定總黃酮的含量為87%，其中槲皮素、山萘酚、楊梅素、(+)-二氫楊梅素、北枳犋醇、(-)-兒茶素、枳模素I、枳模素II、枳模素111和香橙素等及其衍生物含量和為63%。實施例3:北枳棋總黃酮的提取取枳模果柄去汁後的乾燥果渣1Kg，粉碎，過100目篩，濾除纖維素等雜質，粉末乾燥，8倍量(g/mL)的70X乙醇溶液(V/V)8(TC熱回流提取3次，每次2小時，合併濾液，真空濃縮除去乙醇，提取物按重量比加3倍蒸餾水溶解，上聚醯胺色譜柱，吸附流速5BV/h，聚醯胺柱徑高比1:8，上樣量為400mg/mL(以生藥量計)，先用水洗脫流出近無色，再用4倍樹脂床體積30%乙醇溶液(V/V)衝洗除雜，衝洗液棄去，用5倍聚醯胺床體積的95X乙醇溶液(V/V)洗脫，洗脫流速為4BV/h，收集洗脫液，減壓濃縮至稠膏乾燥得枳棋總黃酮。測定總黃酮的含量為75%，其中槲皮素、山萘酚、楊梅素、(+)-二氫楊梅素、北枳模醇、(-)-兒茶素、枳棋素I、枳模素II、枳模素III和香橙素等及其衍生物含量和為52%。實施例4:北枳模總黃酮的提取取成熟乾燥枳模種子1Kg粉碎，過100目篩，加入7倍量(g/mL)70X乙醇溶液(V/V)，回流提取3次，每次2小時，提取液濃縮除去乙醇，將其懸浮於水，石油醚萃取除去色素等雜質，水相提取液上LX-38型大孔樹脂柱，緩慢上樣，先用水洗脫4個柱留體積，改用10X乙醇溶液(V/V)洗脫5倍柱留體積，最後用95X乙醇溶液(V/V)洗脫，當10XA1C13溶液(W/V)檢測成陰性時，停止收集，合併95X乙醇溶液(V/V)洗脫溶劑，真空濃縮乾燥得枳模總黃酮。測定總黃酮的含量為81%，其中槲皮素、山萘酚、楊梅素、(+>二氫楊梅素、北枳棋醇、(-)-兒茶素、枳模素i、枳棋素n、枳模素m和香橙素等及其衍生物含量和為67%。實施例5:北枳犋總黃酮片的製備北枳模總黃酮10g澱粉10g上述組分混合均勻，加滑石粉適量，壓製成100片。實施例6:北枳棋總黃酮複方製劑的製備北枳模總黃酮20g葛花黃酮15g上述組分混合均勻，裝入硬明膠膠囊中，共100粒膠囊。實施例7:北枳模總黃酮複方製劑的製備北枳模總黃酮10g銀線草提取物10g蛇莓提取物10g上述組分混合均勻，製成100粒顆粒劑。權利要求1.一種北枳椇總黃酮的提取方法，其特徵在於，本發明提出的北枳椇總黃酮是從北枳椇提取出來的兩種或兩種以上黃酮類活性成分的組合，這些黃酮類成分包括槲皮素、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷、4』，5，7-三羥基-3』，5』-二甲氧基黃酮、楊梅素、洋芹素、花旗松素、3，4』，5，5』，7-五羥基-3』-甲氧基黃酮、北枳椇醇、(+)-3，3′，5′，5，7-五羥基雙氫黃酮、山萘酚、山萘酚-3-O-α-L-鼠李糖苷、山萘酚-3，7-O-α-L-二鼠李糖苷、山萘酚-3-O-a-L-鼠李糖-(1→6)-O-β-D-葡萄糖(1→2)-O-β-D-葡萄糖、山萘酚-3-O-α-L-鼠李糖-7-O-[β-D-葡萄糖-(1→3)-α-L-鼠李糖]、雙氫山萘酚、(+)-二氫楊梅素、(+)-焦兒茶素、枳椇素I、枳椇素II、枳椇素III、(-)-兒茶素、香橙素和阿福豆素等；其中最主要的活性成分是槲皮素、山萘酚、楊梅素、(+)-二氫楊梅素、北枳椇醇、(-)-兒茶素、枳椇素I、枳椇素II、枳椇素III和香橙素等及其衍生物等。2.如權利要求1所述的一種北枳模總黃酮的提取方法，其特徵在於北枳模(/fowm'adw/c^Thunb)為鼠李科枳犋屬，作為提取北枳模總黃酮的原材料，可以是市售北枳模子，也可以是北枳模果柄、果實、種子、種殼、葉、花、根、莖、枝、皮和果渣等任一部位或其組合，其中優選的藥材部位為北枳模果柄、種子、葉和果渣；上述所述的北枳模包括未經任何炮製處理的原藥材及飲片，還包括各種炮製品。3.如權利要求1所述的一種北枳模總黃酮的提取方法，其特徵在於，作為北枳模總黃酮，其中各黃酮類成分百分含量的總和為12100%(W/W)，其中優選的為50100%(W/W)。4.如權利要求1所述的一種北枳模總黃酮的提取方法，其特徵在於，作為北枳模總黃酮，除了可用於醫藥工業，還可用於食品工業、化妝品工業和保健品工業。5.如權利要求14所述的一種北枳模總黃酮的提取方法，其特徵在於，採用溶劑提取法與以下任意一種方法，或這些方法的任意組合進行北枳模總黃酮提取純化①溶劑萃取法；②大孔吸附樹脂法；③超臨界流體萃取法；④柱色譜法；⑤液-液逆流分配色譜法。6、如權利要求5所述的一種北枳模總黃酮的提取方法，其特徵在於當使用這些方法進行北枳模總黃酮提取純化時，一般包括以下一個或幾個步驟①提取所用溶劑可以是水或任意一種醇類、酮類或酯類溶劑，或這些溶劑按一定比例組成的混合溶劑，或由這些溶劑與酸、鹼、鹽配成的酸性或鹼性溶劑。提取方法可以是煎煮、加熱回流、超聲提取、冷浸、滲漏、微波提取、高壓提取等。優選的索氏提取法工藝為用095%乙醇溶液(V/V)，以料液比為l:1030(g/mL)，50100。C連續加熱回流提取512h。優選的超聲提取法工藝為將北枳模提取材料裝入超聲提取器內，按料液比為1:615(g/mL)加入095X乙醇溶液(V/V)，採用溫度為3050°C，頻率為40kHz、功率為0.30.5W/cm2的超聲波提取，每次1530分鐘，提取23次，合併提取液。優選的微波提取法工藝為以固液比l:2040(g/mL)加入095X乙醇溶液(V/V)浸泡3060分鐘，控制微波功率為900W，照射3050秒，取出後迅速冷卻至室溫，再照射2040秒，同法操作重複35次，過濾，合併提取液。②過濾包括離心、抽濾、超濾、壓濾等方法，使用或不使用以下任意一種澄清劑或其組合醇沉劑，明膠，高嶺土，各種樹脂，聚乙二醇，聚乙三醇，殼聚糖以及天然澄清劑成品如101果汁澄清劑、ZTC+1天然澄清劑等。優選的澄清劑為硅藻土，按照硅藻土與提取物重量比為1:25在提取液中加入硅藻土，105(TC攪拌處理2060min，然後過濾獲得濾液，再利用甲醇、乙醇、氯仿、乙醚或其中兩種或幾種組合衝洗澄清劑獲得洗脫脫液，濾液和洗脫液合併。③濃縮包括常壓或減壓條件下的薄膜蒸發、旋轉蒸發及煎煮濃縮等。千燥包括真空乾燥、噴霧乾燥、冷凍乾燥等。7、如權利要求6所述的一種北枳模總黃酮的提取方法，其特徵在於，當採用大孔吸附樹脂法進行製備時，所用的大孔樹脂可以是非極性、弱極性、中等極性、弱鹼性或弱酸性等任意一種類型，如D101、D4020、D3500、D941、D21、HP-20、HP-20、XDA-1、AB-8、HPD400、S-8、HZ-806、H-50、H-30、LX-38、LX-28、LS-300B、LS-306、LSD-958、PA等，其中優選的為弱極性或中等極性的樹脂，如LX-38、DlOl、AB-8等。所用的洗脫劑為水和含水的乙醇、甲醇、丙酮等，其中優選的為5095%的乙醇溶液(V/V)。8、如權利要求7所述的一種北枳模總黃酮的提取方法，其特徵在於選用LX-38、DlOl、AB-8等弱極性或中等極性的樹脂作為純化用樹脂，北枳模粗總黃酮以生藥量(g)):分散毫升數計的上樣液稀釋倍數1:41:18，吸附流速29BV/h，樹脂柱徑高比1:31:10，上樣量為100500mg/mL(以生藥量計)，020%乙醇溶液(V/V)洗脫25倍樹脂體積進行除雜，除雜流速為27BV/h，用5095%乙醇溶液(V/V)洗脫310倍樹脂體積，洗脫流速為29BV/h。9、如權利要求14所述的一種北枳模總黃酮的提取方法，其特徵在於該北枳模總黃酮可以單獨或與其它任何中西藥、食物或輔料按任意比例配伍，用於製備藥物、食品、化妝品和保健品，所得的藥物、食品、化妝品和保健品可以是膠囊劑、片劑、丸劑、顆粒劑、口服液、糖漿、衝劑、酒劑、注射劑、膏劑、散劑、飲料等。全文摘要本發明公開了一種北枳椇總黃酮的提取方法。該方法是採用溶劑提取法與溶劑萃取法、大孔吸附樹脂法、超臨界流體萃取法、柱色譜法或液-液逆流分配色譜法中任意一種方法或這些方法的任意組合，對北枳椇果柄、果實、種子、種殼、葉、花、根、莖、枝、皮和果渣等任一部位或其組合進行提取、分離和純化；製備的總黃酮為含兩種或兩種以上黃酮類活性成分的組合，其中最主要的活性成分是槲皮素、山萘酚、楊梅素、(+)-二氫楊梅衍生物等；各黃酮類成分百分含量的總和以重量計為12～100％，可用於醫藥工業、食品工業、化妝品工業和保健品工業。文檔編號A61K9/20GK101336978SQ200810150590公開日2009年1月7日申請日期2008年8月12日優先權日2008年8月12日發明者光蘭,劉元偉,麗張,張存莉,楊質瑾,王家龍,雷中鋒申請人:西北農林科技大學