用於樣品分析儀的梯度液體輸送裝置的製造方法

2023-09-12 00:50:25 1

本發明涉及一種梯度液體輸送裝置，該裝置能夠在高性能液相色譜(High-PerformanceLiquidChromatography，HPLC)類型樣品分析儀中進行的載液(洗提液)輸送過程中改變載液成分(有機溶劑的含量、含鹽濃度，等等)，更具體涉及一種小型的高壓線性梯度液體輸送裝置。此外，本發明涉及一種使用該梯度液體輸送裝置的樣品分析儀以及一種血紅蛋白成分測定法。

背景技術：
在HPLC類型樣品分析儀(下文簡稱為「樣品分析儀」)中，為了提高樣品分離能力、減少分析時間，通常使用梯度液體輸送裝置，這種裝置會隨著時間的推移改變載液成分(載液的性質，如多種載液的混合比例，用於分離和洗提分析對象的試劑的濃度、載液的PH值，等等)。這種梯度液體輸送裝置包括線性梯度液體輸送裝置和分步梯度液體輸送裝置，其中線性梯度液體輸送裝置隨著時間推移呈直線或曲線改變載液的成分；分步梯度液體輸送裝置是以分步的方式改變載液成分的簡單類型裝置。線性梯度液體輸送裝置包括低壓梯度類型裝置和高壓梯度類型裝置，其中低壓梯度類型裝置使用1個低脈動泵，這種泵使用2個或多個柱塞(如雙柱塞泵)，並且通過使用設置在泵的抽吸埠一側的閥(電磁閥)在多個不同成分的載液之間切換(例如，見專利文獻1)；高壓梯度類型裝置使用多個低脈動泵，並且可改變各個泵的流量，這些泵使用與多種載液分別對應的兩個以上的柱塞，並且在它們的排放埠側合併成一個路徑(例如，見專利文獻2)。需要注意的是此處的術語「流量」是指體積流量，它可以表示為流體的橫截面積與流體流動速度(流速)的乘積。現有技術文獻專利文獻專利文獻1：日本專利申請公開號H09-264888專利文獻2：日本專利申請公開號2002-303613

技術實現要素：
發明要解決的問題前文所述的兩種線性梯度類型裝置中，在載液的流量較高時使用低壓梯度類型裝置。這是因為當載液的流量較低的時候梯度響應性也較低。本發明中術語「梯度響應性」是指相對於期望的載液成分變化的實際實現的載液成分變化的水平。另一方面，因為高壓梯度類型裝置中梯度響應性較高，所以這種高壓梯度類型裝置主要用於載液流量較低的情況。高壓梯度類型裝置能對梯度進行理想的控制，但是由於它使用多個低脈動泵，每個低脈動泵又都有多個柱塞，因而它的尺寸很大，相應的成本也很高。如前所述，在線性梯度液體輸送裝置中，使用具有兩個以上柱塞的泵，而不使用單柱塞的泵。這是因為在單柱塞泵中，載液不會在載液抽吸步驟中被排出，並且當流量較低時抽吸載液所用的時間比較長，因此會出現大幅度的脈動，所以單柱塞泵無法進行靈敏的分析。更具體地說，對於凸輪式柱塞泵，凸輪被設計為使得在柱塞的一個往復運動循環內抽吸步驟所花費的時間儘可能少，並且一個循環的時間大部分用於排放步驟。然而，因為抽吸時間和排放時間之間的比例是固定的，所以當柱塞的往復速度降低時，抽吸時間延長，流量相應減小。需要注意的是，當載液長時間沒有排放時，會不利地影響載液成分的變化。另外，隨著單位時間內抽吸和排放循環的次數增加，流速的變化會減小，因此在以高流量輸送液體的情況下，脈動的影響會減小，反之，在以低流量輸送液體的情況下，因為單位時間內抽吸和排放循環的次數由於柱塞的往復速度較低而減小，所以脈動會增大。在這些情況下，在HPLC類型樣品分析儀的實際應用中，為了將裝置成本和裝置尺寸限制在期望的範圍內，經常使用分步梯度液體輸送裝置，儘管可能部分犧牲樣品分離能力和分析時間。分步梯度液體輸送裝置使用一個單柱塞泵，這種泵通過使用閥(電子閥)在泵的抽吸側在多個不同成分的載液間切換，並且通過使用脈動阻尼器輸送液體來消除脈動。換言之，雖然線性高壓梯度液體輸送裝置使用單柱塞泵，脈動水平低，而且即使在載液輸送流量較低的情況下也具有足夠的梯度響應，但它還沒有投入實際使用。本發明的設計已經考慮到了上述因素。本發明的目的是提供一種不犧牲樣品分離能力和分析時間的，具有高梯度響應性的低成本、小型的線性高壓梯度液體輸送裝置，作為在HPLC類型樣品分析儀中使用的梯度裝置。用於解決問題的方案為了解決以上描述的問題，本發明的發明人發現，HPLC類型樣品分析儀用的梯度液體輸送裝置可以包括：多個載液儲存罐，其用於儲存成分彼此不同的多個載液；多個單柱塞泵，其能夠抽吸和排放所述多個載液儲存罐中每一個的載液；混合器，其用於將從所述多個單柱塞泵中排出的載液混合在一起並輸送混合後的載液；以及脈動阻尼器，其與所述混合器相通，用於吸收液體輸送時可能出現的脈動，並且在所述梯度液體輸送裝置中，所述單柱塞泵包括以下功能中的至少1種，優選具有2種：可變地設置用於抽吸和排放所述載液的衝程長度的能夠；以及可變地設置載液抽吸時間和載液排放時間之間比例的功能。另外，本發明的發明人發現，為了進一步提高梯度響應性，可以在所述單柱塞泵和所述混合器之間設置的流路中安裝至少一個脈動阻尼器。另外，本發明的發明人發現，當使用日本專利申請號2013-148183(PCT/JP2014/61256)中公開的閥時，即使單柱塞泵抽吸和排放載液的衝程長度很短並且泵中沒有發生不良液體輸送，缸體室中的空氣也只能通過液體輸送裝置的操作排出，並由此完成了本發明。另外，本發明的發明人發現，HPLC類型樣品分析儀可以由以下裝置構成：梯度液體輸送裝置；樣品注入裝置，其用於將樣品注入到設置在所述梯度液體輸送裝置的混合器的下遊側的載液流路中；柱裝置，其位於設置在所述樣品注入裝置的下遊側的載液流路中，用於分離所述樣品的成分；以及檢測裝置，其位於設置在所述柱裝置的下遊側的載液流路中，用於檢測所述樣品的成分。發明效果根據本發明，通過採用線性高壓梯度系統，該線性高壓梯度系統使用多個泵，所述多個泵分別對應於多種載液，則可以提高梯度響應性。進一步，通過使用單柱塞泵作為該泵，可以減小梯度液體輸送裝置的尺寸。更進一步，當使用脈動阻尼器時，可以消除使用單柱塞泵輸送載液期間可能產生的脈動，單柱塞泵包括可變地設置抽吸和排放載液的衝程長度的功能，單柱塞泵還包括可變地設置載液抽吸時間和載液排放時間之間比例的功能。更具體地說，因為抽吸和排放載液的衝程長度是可變的，所以可以改變流量而不改變柱塞往復運動的循環時間。因為可以保證往復運動的循環次數，所以可以抑制脈動，使得可以減小低流量輸送液體期間脈動的影響。需要注意的是，本發明可以與改變流量的傳統技術結合使用，在這種傳統技術中，柱塞的往復運動的速度被改變。另外，因為載液抽吸時間和載液排放時間之間的比例是可變的，所以當柱塞做往復運動的速度隨著流量而變化時，可以自由設置抽吸步驟所用的時間，這樣就可以抑制脈動。此外，還可以適當地改變載液的成分。此外，通過結合可變地設置抽吸和排放載液的衝程長度的功能和可變地設置載液抽吸時間與載液排放時間之間比例的功能，可以通過將自由選擇的抽吸時間和排放時間、自由選擇的柱塞往復運動的速度以及自由選擇的柱塞往復運動的循環時間結合在一起，使柱塞在適合於抑制脈動的條件下工作。因此，可以提供低成本的小型線性高壓梯度液體輸送裝置。因此，通過使用該梯度液體輸送裝置配置HPLC類型樣品分析儀，可以實現快速和高精度的分析，同時可以減小HPLC類型樣品分析儀的尺寸。附圖說明圖1是HPLC類型樣品分析儀的系統圖，該HPLC類型樣品分析儀包括作為本發明一實施方式的梯度液體輸送裝置。具體實施方式下文將要描述本發明的實施方式。圖1是本發明的一個實施方式的系統圖，其中閥16是根據日本專利申請公開號2013-148183(PCT/JP2014/61256)的閥。根據本實施方式的HPLC類型樣品分析儀用於分析HPLC技術所能分析的不同種類的分析對象，例如包括血紅蛋白A1c的血液中血紅蛋白的成分。圖1所示的HPLC類型樣品分析儀通過常規除氣裝置54連接到載液儲存罐51、52和稀釋和洗滌液儲存罐53，其中載液儲存罐51、52用於儲存例如包括分離溶劑濃度等成分不同的第一載液和第二載液(洗提液)。需要注意的是，第一和第二載液儲存罐51、52以及稀釋和洗滌液儲存罐53可以設計為一個套件，作為試劑套件50。此外，稀釋和清洗液儲存罐53可以分成分開的儲存罐，即稀釋液儲存罐53a和洗滌液儲存罐53b。圖1所示的HPLC類型樣品分析儀由以下各部分構成：液體輸送泵1、2，其用於輸送來自儲存罐51、52的第一和第二載液；混合器3，其用於混合從液體輸送泵1、2輸送的載液；脈動阻尼器4，其與混合器3相通，用於吸收液體輸送期間可能出現的脈動；流路5，來自混合器3的載液在其中流動；樣品注入裝置6，其入口與流路5相連；流路7，載液在其中流動並且其出口連接到樣品注入裝置6；柱裝置8和檢測裝置9，它們位於流路7中；以及位於下遊側的排液流路10。液體輸送泵1、2都是單柱塞泵，在泵的缸體室(泵室)的抽吸埠和排放埠分別有止回閥(單向閥)61～64，缸體室的體積會隨著柱塞的運動發生變化。此外，液體輸送泵1、2是可變體積型泵，其排放量可以通過改變柱塞的衝程而改變，因此可以改變這兩個液體輸送泵之間的流量比例。在根據本發明的梯度液體輸送裝置中，使用根據日本專利申請號2013-148183(PCT/JP2014/61256)的閥，而且因為設置了用於使單柱塞泵的缸體室和計量泵相互連通的管道，所以即使單柱塞泵抽吸和排放載液的衝程長度很短，缸體室中的空氣也可以被排出。混合器3將來自液體輸送泵1的第一載液和來自液體輸送泵2的第二載液混合均勻。具體地說，混合器3將兩種載液沿切線方向輸入柱形容器中以使它們混合在一起，並使混合後的溶液沿軸線方向流動。這樣，通過改變液體輸送泵1、2之間的流量比例並用混合器3將載液混合，可以得到濃度能在第一載液的濃度和第二載液的濃度之間的水平自由選擇的載液(梯度功能)。需要注意的是，連接到混合器3的管道19用於在樣品分析儀工作的準備階段排出空氣和填充載液。在正常工作期間，管道19被切換閥16關閉，閥16將在下文中進行描述。脈動阻尼器4是膜片型阻尼器，它與混合器3的內部空間連通，並且吸收由於使用單柱塞泵作為液體輸送泵1、2而可能出現的脈動，使用單柱塞泵作為液體輸送泵1、2具體是為了減小樣品分析儀的尺寸。脈動阻尼器4可以設置有壓力傳感器。需要注意的是，脈動阻尼器4安裝在與混合器3連通的流路上，並且至少有一個脈動阻尼器4安裝在混合器3與樣品注入裝置6之間的流路，或混合器3與切換閥16之間的流路，或混合器3與液體輸送泵1之間的流路，或混合器3與液體輸送泵2之間的流路。最好是將至少一個脈動阻尼器4安裝在混合器3與液體輸送泵1之間的流路，或是混合器3與液體輸送泵2之間的流路，這是因為這樣配置可以提高梯度響應性。需要注意的是，作為液體輸送泵1、2使用的單柱塞泵通過使用其小體積的泵可以增加每單位液體輸送量的排放操作次數，通過在液體流量變低時縮短柱塞的衝程可以減少一個操作的排放量，進而通過改變抽吸時間和排放時間之間的比例可以抑制載液輸送期間可能出現的脈動。更進一步，由於混合器3和脈動阻尼器4的作用，能夠以相當低的脈動進行液體輸送。對於用於使本發明的梯度液體輸送裝置發揮其性能的單柱塞泵的效能，該梯度液體輸送裝置可以在單柱塞泵進行化學分析所要求的範圍內具有可變衝程設置功能。例如，每個單柱塞泵可以具有如下範圍內的可變衝程設置功能：流量範圍：1μL/min～10mL/min，柱塞衝程範圍：0.01mm～20mm，柱塞體積範圍：0.1μL～100μL。此外，優選地，抽吸時間和排放時間之間的比例是可變的，進行控制使得流量變低時縮短抽吸時間的比例同時增加排放時間，並且在低流量輸送液體期間載液抽吸時間是極短時間。注意，此處的術語「柱塞體積」是指由柱塞和缸體室形成的空間的體積。對於用於測量包括用於糖尿病檢測的血紅蛋白A1c值的血液中血紅蛋白的設備，本發明的梯度液體輸送裝置包括例如滿足以下作為例子給出的優選範圍的單柱塞泵：流量的優選範圍是10μL/min～1.5mL/min；柱塞衝程的優選範圍是0.1mm～2.21mm，柱塞體積的優選範圍是0.8μL～17.5μL。此外，當流量達到最大值時，抽吸時間和排放時間之間的比例的例子可以是1:1的比例，當流量變低時，優選地進行控制使得抽吸時間的比例減小而排放時間的比例增加，並且在低流量輸送液體期間使載液抽吸時間極短。作為流量很低時抽吸時間和排放時間之間的比例，作為例子可以給出1:1,000的比例。樣品注入裝置(主體)6的配置的詳細說明在這裡省略，它包括樣品注入部22。樣品注入部22配置在從混合器3輸送載液的流路5與處於其下遊側的流路7之間，它能夠用針27將樣品注入載液。注射樣品時，針27可依靠針移動裝置(未畫出)的上下移動，最後移動到注入位置完成注射。此外，樣品注入裝置6包括樣品抽吸部(容器保持部)39，它設置在樣品注入部22的下面。樣品抽吸部39能夠將針27移動到樣品抽吸位置，使用針27抽吸樣品。然後，通過樣品抽吸部39抽出的樣品被注入到樣品注入部22中的載液中。需要注意的是，在進行抽吸和注入操作之前，要將計量泵(採樣泵)11經切換閥16連接到管道12，再連接到針27。此外，樣品注入裝置6配備了洗滌部33，用於清洗針27。該部與樣品注入部22的外殼形成為一體，並設置在樣品注入部22與樣品抽吸部39之間的位置上。當針27移動到洗滌位置時，洗滌部33向針27提供洗滌液以完成針27的清洗。清洗前，先將計量泵11經切換閥16連接到管道13，再連接到稀釋和洗滌液儲存罐53，並抽吸出洗滌液，然後將計量泵11經切換閥16連接到管道12，再連接到針27，最終完成清洗。清洗完畢後，洗滌液由排液泵(廢液泵)14收集後排放到排液流路15中。柱裝置8設置在位於樣品注入裝置6下遊側的載液流路7中，它將樣品中的不同成分彼此分離。檢測裝置9位於柱裝置8的下遊側，它檢測分離出的成分並將檢測到的成分的信號發送到數據處理裝置(未畫出)。數據處理裝置輸出的數據處理結果，作為分析結果。控制裝置30控制液體輸送泵1、2、樣品注入裝置6、檢測裝置9、計量泵11、排液泵14和切換閥16。特別地，在進行梯度液體輸送時，控制裝置30控制液體輸送泵1、2的衝程長度、抽吸時間與排放時間之間的比例、柱塞往復運動的速度以及柱塞做往復運動的循環時間等等。此外，當脈動阻尼器4安裝有壓力傳感器時，壓力傳感器的信號會輸入控制裝置30。控制裝置30包括計算機和記錄介質，事先記錄了不同類型的程序。圖1所示的樣品分析儀安裝有切換閥16，它可以設置在從a到d的4個位置中的任一位置上。這四個位置a到d與埠a到d相對應，並且當第一閥內流路16a轉動時，與計量泵11連通的第一閥內流路16a選擇性地連接到埠a到d中的一個。另外，另一個弧形第二閥內流路16b隨著第一閥內流路16a的轉動而相應地轉動，位置a和位置b，由於弧形第二閥內流路16b的轉動，埠e和埠f相互連通。需要注意的是，閥內流路16a和16b形成在切換閥16的轉子上，而埠a到埠f形成在切換閥16的定子上。埠a經管道17與液體輸送泵1的缸體室相連，用於排出空氣，填充載液。埠b經管道18與液體輸送泵2的缸體室相連，用於排出空氣，填充載液。埠c經管道12與針27相連。埠d經管道13與稀釋和洗滌液儲存罐53相連。埠e與從混合器3引出的管道19相連，用於排出空氣，填充載液。埠f與排液流路20相連。換言之，切換閥16的轉子內有一個中心管道連接埠，它連接計量泵11，有第一閥內流路16a與中心管道連接埠連通，還有弧形第二閥內流路16b，它隨著第一閥內流路16a的轉動而相應地轉動。切換閥16的定子設置有第一管道連接埠組，包括前文描述的埠a到埠d，還有第二管道連接埠組，包括前文描述的埠e和埠f。第一管道連接埠組(埠a到埠d)隨著第一閥內流路16a的轉動經第一閥內流路16a分別獨自與中心管道連接埠連通，第一閥內流路16a與埠a到埠d的連接位置在同一圓周上。第二管道連接埠組(埠e和埠f)可以隨著弧形第二閥內流路16b的轉動經由弧形第二閥內流路16b相互連通。弧形第二閥內流路16b與埠e和埠f的連接位置在同一圓周上，該圓周和埠a到埠d所在的圓周是同軸的，但直徑並不相同。對於第一管道連接埠組中的埠a和b，當中心管道連接埠與埠a或埠b連通時，第二管道連接埠組的兩個埠e和f通過弧形第二閥內流路16b相互連通。對於第一管道連接埠組中的另兩個埠c和d，當中心管道連接埠與埠c或埠d連通時，第二管道連接埠組的兩個埠e和f並不通過弧形第二閥內流路16b相互連通。對空氣排出和載液填充將在下文進行描述，它在如圖1所示的樣品分析儀的操作準備階段執行。在操作準備階段，將自動執行以下操作，通過排出流路內部的空氣將液體填充到流路的內部。切換閥16的位置切換到位置a(圖1所示的狀態)。在位置a，計量泵11連接到埠a(管道17)，此時埠e和埠f相互連通。在這種狀態下，首先，計量泵11進行抽吸操作。然後，儲存罐51中的第一載液經液體輸送泵1的抽吸側的止回閥61，然後從將液體輸送泵1的缸體室經過管道17，被抽吸到計量泵11中。通過這種方法，從儲存罐51到液體輸送泵1的流路充滿載液。接下來，計量泵11進行排放操作。第一載液經管道17從計量泵11被泵入到液體輸送泵1，此時在排放側的止回閥62打開，這樣載液就流入混合器3。此外，由於柱裝置8的阻力，載液由混合器3流入管道19，然後由管道19經切換閥16(埠e和埠f)流入到與之相連的排液流路管20作為排液排出。然後，切換閥16順時針旋轉60°轉動到位置b。在位置b，計量泵11與埠b相連(管道18)，此時埠e和埠f仍是相互連通的。在這種狀態下，首先，計量泵11進行抽吸操作。儲存罐52中的第二載液經液體輸送泵2抽吸側的止回閥63輸送，然後從液體輸送泵2的缸體室經管道18抽吸到計量泵11中。通過以上描述的方式，從第二載液儲存罐52到液體輸送泵2的流路就充滿了載液。接下來，計量泵11進行排放操作。第二載液經管道18從計量泵11泵入到液體輸送泵2，然後在排放側的止回閥64打開，這樣載液就流入混合器3。此外，由於柱裝置8的阻力，載液由混合器3流入管道19，然後由管道19經切換閥16(埠e和埠f)作為排液流入到與之相連的排液流路管20排出。然後，切換閥16轉動到位置a和位置b以外的位置，開始從液體輸送泵1、2中輸送，將載液流路管5和7、樣品注入部22、柱裝置8以及檢測裝置9注滿載液。圖1所示的樣品分析儀正常工作期間執行的稀釋步驟、抽吸樣品步驟、注入樣品步驟和洗滌步驟將在下文進行描述。稀釋步驟中，針27位於樣品抽吸位置(樣品抽吸部39)，即包含樣品的容器內的位置。對於切換閥16的位置，切換閥首先位於位置d。在位置d，計量泵11連接到埠d(管道13)。在這種狀態下，計量泵11進行抽吸操作。然後儲存罐53中的稀釋劑(稀釋和洗滌液)經管道13被抽吸到計量泵11中。接下來，切換閥16轉動到位置c。在位置c，計量泵11連接到埠c(管道12)。在這種狀態下，計量泵11進行排放操作。然後計量泵11中的稀釋劑經管道12被泵入到針27中。針27位於樣品抽吸位置(樣品抽吸部39)，即容器內的位置，從而將稀釋劑提供給容器。計量泵11重複抽吸和排放操作，針27反覆抽放容器內含有樣品和稀釋劑的混合溶液，這樣，混合溶液在容器內攪拌均勻，樣品均勻稀釋。在抽吸樣品步驟，針27位於樣品抽吸位置(樣品抽吸部39)，即包含樣品(被稀釋劑稀釋後的樣品)的容器內的位置。切換閥16的位置被設置在針27側(位置c)，計量泵11連接到管道12。在這種狀態下，計量泵11進行抽吸操作。容器內的樣品被抽吸到針27中。在注入樣品步驟，針27被置於樣品注入位置(樣品注入部22)。切換閥16的位置被設置在針27側(位置c)，計量泵11連接到管道12。在這種狀態下，計量泵11進行排放操作。針27中的樣品被注射到載液流路管5與7之間的樣品注入部22。在洗滌步驟，針27被設置在洗滌位置上(未畫出)。切換閥16的位置首先被設置在位置d。在位置d，計量泵11連接到埠d(管道13)。在這種狀態下，計量泵11進行抽吸操作。儲存罐53中的洗滌液(稀釋和洗滌液)經管道13被抽吸到計量泵11中。接下來，切換閥16的位置被設置在位置c。在位置c，計量泵11連接到埠c(管道12)。在這種狀態下，計量泵11進行排放操作。計量泵11中的洗滌液經管道12被泵入到針27中。針27位於洗滌位置並在此處用洗滌液進行洗滌。洗滌後，洗滌液由排液泵14收集，然後經排液流路管15作為排液被排放掉。在此步驟中，因為排液泵14的流量要比計量泵11的流量高，所以洗滌後的洗滌液將與由針27的導孔(未畫出)流入的空氣一併從排液流路15被排放出去，而不會洩漏到外部。洗滌液與空氣混合會形成霧，因此洗滌的效率會提高，洗滌液的消耗會相應地減少，針27的洗滌也因此可以很好地完成。圖1所示的樣品分析儀正常工作時載液的流動將在下文進行描述。液體輸送泵(單柱塞泵)1、2開始工作後，這兩個液體輸送泵的流量比例隨時變化。來自液體輸送泵1的第一載液與來自液體輸送泵2的第二載液混合在一起變得均勻，脈動阻尼器4吸收脈動。如上所述，液體輸送泵1與液體輸送泵2之間的流量比例被改變，混合器3將載液混合在一起，脈動阻尼器4吸收脈動，這樣就能獲得第一載液的濃度和第二載液的濃度之間自由選擇的濃度水平的載液。混合載液經流路5輸送到樣品注入部22，樣品，如被稀釋和溶解的血液等，在此處被注入到載液中。包括被注入樣品的載液輸送到柱裝置8中，然後經流路7流入檢測裝置9。在柱裝置8中，從樣品中分離出特定成分。在位於柱裝置8下遊側的檢測裝置9中，利用檢測方法，如吸光度測定法檢測分離出的成分(例如，血紅蛋白成分，如血紅蛋白A1c)。在梯度液體輸送時進行的泵的示例操作將結合以下情況進行描述，在該情況中使用用於測量血液中血紅蛋白的糖尿病測試儀。將描述產生梯度的情況，其中總流量(泵1的流量與泵2的流量之和)保持在一個特定的值，例如1ml/min。當液體從泵1以最高流量輸送而泵2停止時，按照該最高流量控制泵1的柱塞衝程的長度，並且抽吸時間與排放時間之間的比例被大體控制在1:1。接下來，將描述開始從泵2輸送液體時泵1的流量減小的情況。該控制被執行為使得當泵1的流量減小時，泵1的柱塞衝程長度減小，並且抽吸時間的比例減小，而排放時間的比例增大。另一方面，當以接近可設置的最低流量的流量從泵2輸送的液體時進行控制，使得泵2的柱塞衝程長度減小，載液抽吸時間變得極短，載液的排放時間增長。流量的增加和減小可以通過調節泵的轉速、柱塞的衝程長度等來控制。可以根據這些參數的組合進行控制。載液抽吸時間和載液排放過時間的增加和減小可以通過調節柱塞的衝程長度、改變往復運動的特定循環時間內抽吸時間與排放時間之間的比例來控制。可以根據這些參數的組合進行控制。將描述泵1的流量進一步減小而泵2的流量增加的情況。當以接近可設置的最低流量的流量從泵1輸送液體時進行控制，使得泵1的柱塞衝程長度會變短，載液抽吸時間變得極短，並且載液排放時間增長。進行控制使得當泵2的流量增加時，泵2的柱塞衝程長度增加，並且抽吸時間的比例增加，而排放時間的比例減小。當以最高流量從泵2輸送液體，而泵1停止時，可以按照該最高流量控制泵2的柱塞衝程長度，並且可以將抽吸時間與排放時間之間的比例大體控制在1:1。在使用凸輪式柱塞泵輸送液體時，常規技術存在的問題是會增加由於以低流量輸送液體時抽吸時間較長而可能出現的脈動的影響。然而，用以上所描述的方式控制泵1和泵2，即使載液輸送的流量較低，抽吸載液的時間也可以減小到極小值。這是因為載液流速變慢的時間可以縮短到極短的時間。如上所述，柱塞的衝程長度和載液抽吸時間與載液排放時間之間的比例被可變地控制，因而即使液體輸送的流量較低時也可以抑制脈動的影響。通過使用以上述方式組合工作的上述泵和脈動阻尼器，液體輸送可以在脈動足夠低的情況下進行。根據本實施方式的梯度液體輸送裝置由以下各部分構成：多個載液儲存罐51、52，其用於儲存成分彼此不同的多個載液；多個單柱塞泵(液體輸送泵)1、2，其能夠抽吸和排放所述多個載液儲存罐51、52的載液；混合器3，其用於將從所述多個單柱塞泵1、2排出的載液混合在並輸送混合後的載液；以及脈動阻尼器4，其與所述混合器3連通，用於吸收脈動，並且在所述梯度液體輸送裝置中，所述單柱塞泵1、2具有用於可變地設置用於抽吸和排放所述載液的衝程的長度的功能和用於可變地設置載液抽吸時間和載液排放時間之間比例的功能，從而可以實現以下效果。當線性高壓梯度系統根據多種載液相應使用多個泵時，可以提高梯度響應性。此外，通過將單柱塞泵1、2作為泵來使用，可以減小梯度液體輸送裝置的尺寸。另外，使用脈動阻尼器可以消除使用單柱塞泵1、2輸送液體期間可能出現的脈動，單柱塞泵具有可變地設置用於抽吸和排放載液的衝程長度的功能，單柱塞泵還有可變地設置載液抽吸時間和載液排放時間之間比例的功能。結果，可以提供小型的低成本線性高壓梯度液體輸送裝置。此外，在根據本實施方式的梯度液體輸送裝置中，包括下述(A)～(C)的切換閥16的中心管道連接埠通過切換閥16連接到計量泵11，並且該梯度液體輸送裝置包括管道17、18，管道17、18通過使第一管道連接埠組中的至少一個管道連接埠與單柱塞泵1、2的缸體室連通而使計量泵11與單柱塞泵1、2的缸體室連通。(A)轉子，其包括下述(1)～(3)：(1)至少一個中心管道連接埠；(2)至少一個第一閥內流路，其與所述中心管道連接埠連通；以及(3)至少一個弧形第二閥內流路，其隨著第一閥內流路的轉動而轉動，其流路長度等於或大於一個轉動動作所經過的距離。在本實施方式中，設置有一個中心管道連接埠、一個第一閥內流路16a以及一個弧形第二閥內流路16b。(B)定子，其包括下述(4)和(5)：(4)第一管道連接埠組，其中的至少兩個管道連接埠在轉子的第一閥內流路16a轉動時經由第一閥內流路獨自與所述中心管道連接埠連通，並且它們的連接位置在圍繞轉子的中心軸線的一個圓周上。在本實施方式中，設置有四個管道連接埠a、b、c、d，它們獨自與中心管道連接埠相互連通。(5)第二管道連接埠組，其具有與弧形第二閥內流路16b相連的連接位置，這些連接位置位於一圓的圓周上，該圓與轉子的第一閥內流路16a和第一管道連接埠組(a、b、c、d)之間的連接位置所在的圓周同軸，但直徑不同，第二管道連接埠組有至少兩個管道連接埠，當弧形第二閥內流路16b轉動時，所述至少兩個管道連接埠相互連通。在本實施方式中，設置有兩個管道連接埠e、f，當弧形第二閥內流路16b轉動時，這兩個管道連接埠e、f相互連通。(C)轉子和定子的配置滿足下述關係(6)和(7)：(6)對於定子的第一管道連接埠組中獨自與轉子的第一閥內流路連通的至少一個管道連接埠，當中心管道連接埠與該管道連接埠相互連通時，第二管道連接埠組中的至少兩個相鄰的管道連接埠通過弧形第二閥內流路16b相互連通。在本實施方式中，當中心管路連接埠與管路連接埠a或b相互連通時，管路連接埠e、f經由弧形第二閥內流路16b相互連通。(7)對於第一管道連接埠組中的其它管道連接埠，當中心管道連接埠與該管道連接埠相互連通時，第二管道連接埠組中的所述相鄰的管道連接埠不通過弧形第二閥內流路相互連通。本發明的實施方式中，當中心管道連接埠與管道連接埠c或d相互連通時，管道連接埠e、f不會通過弧形第二閥內流路16b相互連通。採用上文描述的配置，可以進行上文描述的空氣排出操作。需要注意的是，對於第(3)條中描述的弧形第二閥內流路，優選地，流路長度等於或大於一個轉動動作所經過的距離，並且更優選地，其流路長度等於或大於兩個轉動動作所經過的距離。另外，根據本實施方式的HPLC類型樣品分析儀由以下裝置構成：梯度液體輸送裝置；樣品注入裝置6，其用於將樣品注入到設置在該梯度液體輸送裝置的混合器3的下遊側的載液流路5中；柱裝置8，其位於設置在樣品注入裝置6的下遊側的載液流路7中，用於分離樣品的成分；以及檢測裝置9，其位於設置在柱裝置8的下遊側的載液流路中，用於檢測樣品的成分，從而能夠以高精度和高速度進行分析。另外，本發明的實施方式使用HPLC類型樣品分析儀將血液作為樣品注入載液流路中，分離和檢測血液的血紅蛋白成分，並且測量檢測出的各種成分的含量(如血紅蛋白A1c值等)，從而可以有助於提高糖尿病檢測的精度和速度。需要注意的是，在前文的描述中，關於如下情況描述了梯度的例子：分離溶劑的濃度互不相同的兩種載液的混合比例被改變，以改變分離溶劑的濃度。當然，本實施方式並不限於此，還可以改變成分彼此不同的兩種或多種載液的混合比例，以改變載液的成分。以上參照附圖描述的實施方式僅僅是本發明的一個例子，本發明當然不僅可以包括上述實施方式直接給出的發明，還可以包括在所附權利要求中要求保護的本發明的範圍內本領域技術人員做出的不同變更和修改。工業上的可利用性根據本發明的梯度液體輸送裝置適合與需要使用梯度液體輸送裝置的HPLC類型樣品分析儀一起使用，以用HPLC方法對樣品進行分析，如進行糖尿病檢測等，因此具有很高的工業應用價值。附圖標記列表1.第一液體輸送泵(單柱塞泵)2.第二液體輸送泵(單柱塞泵)3.混合器4.脈動阻尼器5.載液流路6.樣品注入裝置7.載液流路8.柱裝置9.檢測裝置10.排液流路11.計量泵(採樣泵)12.管道13.管道14.排液泵(廢液泵)15.排液流路16.切換閥16a.第一閥內流路16b.第二閥內流路17～19.管道20.排液流路22.樣品注入部27.針30.控制裝置33.洗滌部39.樣品抽吸部(容器保持部)50.試劑套件51.第一載液儲存罐52.第二載液儲存罐53.稀釋和洗滌液儲存罐54.除氣裝置61～64.止回閥