一種桃金孃組培快繁技術的製作方法

2023-11-04 16:42:12

一種桃金孃組培快繁技術的製作方法
【專利摘要】本發明公開了一種桃金孃組培快繁技術，涉及桃金孃（Rhodomyrtustomentosa（Ait.）Hassk）通過無性快繁技術獲得株性穩定種苗的育苗方法。本發明包括外植體的採集及預處理、初代培養、增殖培養、生根培養、煉苗及移栽等過程，實現了桃金孃種苗的快速繁殖，解決了這一野生鄉土植物大規模種植對種苗需求的問題，對充分開發這一具有極高觀賞價值和食用價值的野生植物具有現實意義。
【專利說明】一種桃金孃組培快繁技術

【技術領域】
[0001]本發明涉及農業生物技術中植物組織培養的方法，具體地說，涉及一種桃金孃組培快繁技術。

【背景技術】
[0002]\h^M^Rhodomyrtus tomentosa (Ait.) Hassk)又名穩子、山穩，為桃金孃科桃金孃屬常綠多花小灌木，是一種目前尚未進行規模開發利用的食品新資源，具有較高的研究價值和應用前景。我國野生桃金孃植物資源豐富，是華南地區綠化荒山，保持水土的優良品種，耐旱瘠，適應性強。
[0003]桃金孃的利用價值高，其果實很早就引起人們的關注，但其開發利用進展較慢。目前華南地區的一些地方正在發展規模化桃金孃種植，優質桃金孃種苗是制約其規模化種植的難題之一。然而，目前桃金孃種苗主要依靠種子繁殖，但其發芽率低，而且實生苗分化明顯，個體之間各種性狀差異大。因此，非常有必要建立一套完整的桃金孃組培快繁技術。目前，完整的桃金孃組培快繁技術尚未見有報導。


【發明內容】

[0004]本發明的目的在於提供出一種桃金孃組培快繁技術，通過外植體的採集及預處理、初代培養、增殖培養、生根培養、煉苗及移栽等過程，從而實現了本發明的目的。
[0005]本發明的一種桃金孃組培快繁技術，包括以下的步驟:
(1)外植體的採集與處理:選擇桃金孃優良單株的當年生腑芽飽滿枝條，去葉後於洗衣粉水浸泡10?30min，刷淨後自來水衝洗1?2h，剪成長1?3cm帶腋芽的莖段，先用75%乙醇消毒5?30s後用無菌水洗3?5次，再用0.1%升萊溶液消毒10?25min,用無菌水衝洗4?6次後備用。
[0006](2)初代培養:將步驟(1)的莖段接種到初代培養基上，先在25?28°C條件下全暗培養30?45天，然後置於每天光照10?12小時，光照強度為1500?30001x，直至誘導形成不定芽。
[0007](3)增殖培養:將步驟(2)的不定芽轉入增殖培養基上進行增殖培養，接種後先在25?28°C條件下全暗培養7?14天，然後置於每天光照12?16小時，光照強度為3000?50001x，置於培養溫度為25?28°C的條件下培養，45?60天轉接一次。
[0008](4)生根培養:將步驟(1)或(2)高度約為3?5cm的叢生芽分切接種到生根培養基上進行生根培養，接種後先在25?28°C條件下全暗培養7?14天，然後置於每天光照14?16小時，光照強度為5000?60001x，培養溫度為25?28°C的條件下培養至生根。
[0009](5)煉苗移栽:將高約8?10cm的生根試管苗去瓶蓋置於自然光照下煉苗5?7天後，將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，栽入由泥炭土和黃沙泥混合成的基質中並定植於大田中。
[0010]上述步驟(2)所述的初代培養基為:MS+6-BAl.0?1.5mg/L+NAA0.2?0.5mg/L+CPPU0.01 ?0.5 mg/L+ Ad1.0 ?3.0mg/L+ 蔗糖 15 ?30g/L+ 瓊脂 3.5 ?6.0g/L，pH 為5.4 ?5.8。
[0011]上述步驟(3)所述的增殖培養基為:MS+6-BA0.5?1.0mg/L+NAA0.2?0.5mg/L+IBA0.2 ?0.5mg/L+ Ad1.0 ?3.0mg/L+鹿糖 15 ?30g/L+ 瓊脂 3.5 ?6.0g/L, pH 為 5.4 ?5.8。
[0012]上述步驟(4)所述的生根培養基為:1/2MS+IBA0.4?1.2mg/L+GGRl.0?2.0mg/L+PG10 ?40mg/L+ 蔗糖 15 ?30g/L+ 瓊脂 3.5 ?6.0g/L, pH 為 5.4 ?5.8。
[0013]目前國內關於桃金孃組培快繁技術尚未有報導，而本發明具有簡單、易行、經濟的特點。通過本發明育成的桃金孃試管苗移栽成活率達到95%以上，可以有效解決桃金孃規模化種植中的優質桃金孃種苗供應問題。

【具體實施方式】
[0014]以下實施例是對本發明的進一步說明，不是對本發明的限制。
[0015]實施例1
(1)、外植體的採集與處理:選擇桃金孃優良單株的當年生腑芽飽滿枝條，去葉後於洗衣粉水浸泡15min，刷淨後自來水衝洗lh，剪成長1?3cm帶腋芽的莖段，先用75%乙醇消毒8s後用無菌水洗3次，再用0.1%升汞溶液消毒20min，用無菌水衝洗5次後備用。
[0016](2)、初代培養:將上述的莖段接種到初代培養基上，先在28°C條件下全暗培養40天，然後置於每天光照10小時，光照強度為20001X，直至誘導形成不定芽。所述的初代培養基為:MS+6-BAl.2mg/L+NAA0.4mg/L+CPPU0.05 mg/L+ Ad1.0mg/L+ 蔗糖 25g/L+ 瓊脂 4g/L，pH 為 5.7。
[0017](3)、增殖培養:將上述的不定芽轉入增殖培養基上進行增殖培養，接種後先在28°C條件下全暗培養10天，然後置於每天光照14小時，光照強度為40001χ，置於培養溫度為28°C的條件下培養，50天轉接一次。所述的增殖培養基為:MS+6-BA0.8mg/L+NAA0.3mg/L+IBA0.2mg/L+ Ad1.0mg/L+ 蔗糖 20g/L+ 瓊脂 4g/L，pH 為 5.7。
[0018](4)、生根培養:將上述高度約為3?5cm的叢生芽分切接種到生根培養基上進行生根培養，接種後先在28°C條件下全暗培養9天，然後置於每天光照15小時，光照強度為50001x，培養溫度為28°C的條件下培養至生根。所述的生根培養基為:1/2MS+IBA0.6mg/L+GGR1.0mg/L+PG10mg/L+ 蔗糖 15g/L+ 瓊脂 4g/L，pH 為 5.7。
[0019](5)、煉苗移栽:將高約8?10cm的生根試管苗去瓶蓋置於自然光照下煉苗7天後，將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，栽栽入由泥炭土和河沙(3:1)混合成的基質中並定植於大田中，成活率達到92%。。
[0020]實施例2
(1)、外植體的採集與處理:選擇桃金孃優良單株的當年生腑芽飽滿枝條，去葉後於洗衣粉水浸泡30min，刷淨後自來水衝洗2h，剪成長1?3cm帶腋芽的莖段，先用75%乙醇消毒20s後用無菌水洗5次，再用0.1%升汞溶液消毒15min，用無菌水衝洗6次後備用。
[0021](2)、初代培養:將上述的莖段接種到初代培養基上，先在25°C條件下全暗培養30天，然後置於每天光照11小時，光照強度為20001X，直至誘導形成不定芽。所述的初代培養基為:MS+6-BAl.0mg/L+NAA0.2mg/L+CPPU0.1 mg/L+ Ad2.0mg/L+蔗糖 25g/L+瓊脂 4g/L，pH 為 5.8。
[0022](3)、增殖培養:將上述的不定芽轉入增殖培養基上進行增殖培養，接種後先在25°C條件下全暗培養13天，然後置於每天光照12小時，光照強度為30001χ，置於培養溫度為28°C的條件下培養，45天轉接一次。所述的增殖培養基為:MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L+ Ad3.0mg/L+ 鹿糖 25g/L+ 瓊脂 5g/L, pH 為 5.8。
[0023](4)、生根培養:將上述高度約為3?5cm的叢生芽分切接種到生根培養基上進行生根培養，接種後先在28°C條件下全暗培養12天，然後置於每天光照16小時，光照強度為60001x，培養溫度為28°C的條件下培養至生根。所述的生根培養基為:1/2MS+IBA0.8mg/L+GGR2.0mg/L+PG15mg/L+ 蔗糖 20g/L+ 瓊脂 4g/L，pH 為 5.8。
[0024](5)、煉苗移栽:將高約8?10cm的生根試管苗去瓶蓋置於自然光照下煉苗7天後，將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基，栽栽入由泥炭土和河沙(4:1)混合成的基質中並定植於大田中，成活率達到94%。
【權利要求】
1.一種桃金孃組培快繁技術，其特徵在於包括以下步驟: (1)外植體的採集與處理:選擇桃金孃優良單株的當年生腑芽飽滿枝條，去葉後於洗衣粉水浸泡10?30min，刷淨後自來水衝洗I?2h，剪成長I?3cm帶腋芽的莖段，先用75%乙醇消毒5?30s後用無菌水洗3?5次,再用0.1%升萊溶液消毒10?25min,用無菌水衝洗4?6次後備用； (2)初代培養:將步驟(I)的莖段接種到初代培養基上，先在25?28°C條件下全暗培養30?45天，然後置於每天光照10?12小時，光照強度為1500?30001x，直至誘導形成不定芽； (3)增殖培養:將步驟(2)的不定芽轉入增殖培養基上進行增殖培養，接種後先在25?28 °C條件下全暗培養7?14天，然後置於每天光照12?16小時，光照強度為3000?50001x，置於培養溫度為25?28°C的條件下培養，45?60天轉接一次； (4)生根培養:將步驟(I)或(2)高度約為3?5cm的叢生芽分切接種到生根培養基上進行生根培養，接種後先在25?28°C條件下全暗培養7?14天，然後置於每天光照14?16小時，光照強度為5000?60001x，培養溫度為25?28°C的條件下培養至生根； (5)煉苗移栽:將高約8?1cm的生根試管苗去瓶蓋置於自然光照下煉苗5?7天後,將試管苗從培養瓶中取出，洗掉根部培養基,栽入由泥炭土和黃沙泥混合成的基質中並定植於大田中。
2.根據權利要求1所述的一種桃金孃組培快繁技術，其特徵在於步驟(2)所述的初代培養基為:MS+6-BAl.0 ?1.5mg/L+NAA0.2 ?0.5mg/L+CPPU0.01 ?0.5 mg/L+ Adl.0 ?3.0mg/L+ 鹿糖 15 ?30g/L+ 瓊脂 3.5 ?6.0g/L, pH 為 5.4 ?5.8。
3.根據權利要求1所述的一種桃金孃組培快繁技術，其特徵在於步驟(3)所述的增殖培養基為:MS+6-BA0.5 ?1.0mg/L+NAA0.2 ?0.5mg/L+IBA0.2 ?0.5mg/L+ Adl.0 ?3.0mg/L+ 鹿糖 15 ?30g/L+ 瓊脂 3.5 ?6.0g/L, pH 為 5.4 ?5.8。
4.根據權利要求1所述的一種桃金孃組培快繁技術，其特徵在於步驟(4)所述的生根培養基為:1/2MS+IBA0.4 ?1.2mg/L+GGRl.0 ?2.0mg/L+PG10 ?40mg/L+ 蔗糖 15 ?30g/L+ 瓊脂 3.5 ?6.0g/L, pH 為 5.4 ?5.8。
【文檔編號】A01H4/00GK104247662SQ201410512809
【公開日】2014年12月31日 申請日期:2014年9月29日 優先權日:2014年9月29日
【發明者】梁彩英 申請人:梁彩英