一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法
2023-12-03 05:03:06
專利名稱：一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法
技術領域：
本發明屬於製藥技術領域，涉及一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法。
背景技術：
蒲黃為香蒲科植物水燭香蒲(Typha angustifolia L.)、東方香蒲(Typha orientalis Presl.)或同屬植物的乾燥花粉，具有止血、化瘀、通淋的功能，用於吐血、崩漏、外傷出血，經閉痛經，血淋澀痛。蒲黃中黃酮類成分具有明顯增加冠脈流量、降低心腦組織耗氧量、擴張血管、降低血脂及康動脈粥樣硬化等作用，其中主要有效成分有香蒲新苷、 異鼠李素-3-0-新橙皮苷、柚皮素和異鼠李素等。傅大煦等在文獻「蒲黃總黃酮提取物中香蒲新苷及異鼠李素-3-0-新橙皮糖苷的 HPLC測定」中，採用60 %乙醇提取，提取液濃縮後上大孔樹脂，依次以水、20 %乙醇、50 % 乙醇洗脫，洗脫液真空乾燥得到總黃酮提取物。在文獻「大孔樹脂吸附和純化蒲黃總黃酮的工藝研究」中，以香蒲新苷及異鼠李素-3-0-新橙皮糖苷含量為指標，研究了 HZ802非極性大孔樹脂吸附和純化蒲黃總黃酮的工藝條件，結果表明HZ802非極性大孔樹脂對蒲黃總酮有良好的吸附純化性能。劉斌等用70%乙醇提取3次，溶劑用量依次為8，6，6倍，提取時間為60min，60min，30min。中國專利申請號03115508. 1，蒲黃提取物及其製備方法和用途，採用含水乙醇00-95%)加熱提取後濃縮，離心或過濾，取上清液或濾液，用大孔吸附樹脂吸附，先用水淋洗除去雜質，再用含水低級醇洗脫；洗脫液濃縮至一定體積，用乙醇 (70-95% )醇沉，去沉澱後濃縮至幹或除去乙醇後噴霧乾燥，得蒲黃提取物，並將得到的蒲黃提取物用於防治心肌缺血性心血管疾病。李維維等採用70%乙醇回流提取，再經大孔樹脂柱色譜、聚醯胺柱色譜及kphadex LH-20柱色譜分離得到香蒲新苷、異鼠李素-3_0_新橙皮苷、柚皮素和異鼠李素。張淑敏等在「蒲黃化學成分研究」中，採用聚醯胺及矽膠柱色譜進行成分分離，鑑定出9個黃酮類化合物。這些方法主要採用大孔樹脂、矽膠柱或聚醯胺柱層析等傳統柱色譜方法，存在提取率低、溶劑用量大、生產周期長、操作繁瑣、不宜工業化生產等問題。
發明內容
本發明的目的是克服已有技術中蒲黃提取工藝流程長、提取率低、難以連續操作、 難工業化生產的技術問題，提供一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法。本發明的目的是這樣實現的一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法，其特徵在於包括以下步驟A.提取將蒲黃藥材加入甲醇溶液提取，過濾除雜後得到蒲黃粗提液；B.雙水相萃取取上述蒲黃粗提液濃縮後加入乙醇和磷酸鹽雙水相系統，混勻， 分為上、下兩相，將下相降溫、結晶、過濾，回收磷酸鹽晶體；C.反萃取將上述上相加乙酸乙酯、水和無機鹽，系統室溫下混勻，進行反萃取， 靜置後分為上、下兩相；
D.乾燥取上述乙酸乙酯相，減壓濃縮、真空乾燥，得到蒲黃總黃酮。步驟B中加入的乙醇質量比為7-25%。步驟B中磷酸鹽選用磷酸鉀、磷酸二氫鉀或磷酸氫二鉀中的一種或幾種組合，加入的磷酸鹽質量比為10-22%。步驟B雙水相萃取中，分相溫度為10_25°C，分相時間為2-5小時。步驟C中無機鹽選用硫酸銨、硫酸鎂、氯化鈉。步驟C反萃取中分相時間為1-3小時。本發明的優點為本發明的雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法，是利用雙水相萃取方法，選擇性地富集分離純化黃酮成分，分離過程不經過層析柱，與傳統的矽膠柱層析、大孔吸附樹脂柱層析方法相比，具有工藝流程短、簡單易行、成本低，可放大工程進行連續性操作的優點。
具體實施例方式下面結合具體實施例對本發明作進一步說明。實施例1 稱取20g蒲黃粉末，加入甲醇200ml加熱回流提取池，提取3次，過濾，合併提取液，濃縮得到濃縮液180g ；取濃縮液加入25g乙醇、40gK3P04和IOOg水，充分混勻，在15°C 分相4小時；取出富含乙醇聚合物的上相141ml，加水60ml，乙酸乙酯96ml，硫酸銨3g，充分混勻，室溫下靜置分相2小時，取出乙酸乙酯相進行減壓濃縮、真空乾燥得到蒲黃總黃酮。實施例2:稱取20g蒲黃粉末，加入甲醇300ml加熱回流提取池，提取2次，過濾，合併提取液，濃縮得到濃縮液195g ；取濃縮液加入35g乙醇、48gK3P04和66g水，充分混勻，在25°C分相5小時；取出富含乙醇聚合物的上相16細1，加水66ml，乙酸乙酯105ml，硫酸銨3g，充分混勻，室溫下靜置分相3小時，取出乙酸乙酯相進行減壓濃縮、真空乾燥得到蒲黃總黃酮。實施例3 稱取30g蒲黃粉末，加入甲醇MOml加熱回流提取池，提取3次，過濾，合併提取液，濃縮得到濃縮液275g ；取濃縮液加入40g乙醇、53gKH2P0jn 80g水，充分混勻，在25°C分相4小時；取出富含乙醇聚合物的上相205ml，加水82ml，乙酸乙酯12細1，硫酸鎂3g，充分混勻，室溫下靜置分相2小時，取出乙酸乙酯相進行減壓濃縮、真空乾燥得到蒲黃總黃酮。實施例4 稱取30g蒲黃粉末，加入甲醇360ml加熱回流提取池，提取2次，過濾，合併提取液，濃縮得到濃縮液；取濃縮液加入45g乙醇、55gK2HP0jn 98g水，充分混勻，在20°C分相2小時；取出富含乙醇聚合物的上相230ml，加水92ml，乙酸乙酯139ml，硫酸銨3g，充分混勻，室溫下靜置分相1小時，取出乙酸乙酯相進行減壓濃縮、真空乾燥得到蒲黃總黃酮。實施例5 稱取50g蒲黃粉末，加入甲醇400ml加熱回流提取池，提取2次，過濾，合併提取液，濃縮得到濃縮液356g ；取濃縮液加入55g乙醇、67gKH2P04和IlOg水，充分混勻，在10°C 分相5小時；取出富含乙醇聚合物的上相332ml，加水127ml，乙酸乙酯189ml，氯化鈉3g，充分混勻，室溫下靜置分相3小時，取出乙酸乙酯相進行減壓濃縮、真空乾燥得到蒲黃總黃酮。
權利要求
1.一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法，其特徵在於包括以下步驟A.提取將蒲黃藥材加入甲醇溶液提取，過濾除雜後得到蒲黃粗提液；B.雙水相萃取取上述蒲黃粗提液濃縮後加入乙醇和磷酸鹽雙水相系統，混勻，分為上、下兩相；C.反萃取將上述上相加乙酸乙酯、水和無機鹽，系統室溫下混勻，進行反萃取，靜置後分為上、下兩相；D.乾燥取上述乙酸乙酯相，減壓濃縮、真空乾燥，得到蒲黃總黃酮。
2.如權利要求1所述的一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法，其特徵在於步驟B中加入的乙醇質量比為7-25%。
3.如權利要求1所述的一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法，其特徵在於步驟B中磷酸鹽選用磷酸鉀、磷酸二氫鉀或磷酸氫二鉀中的一種或幾種組合，加入的磷酸鹽質量比為 10-22%。
4.如權利要求1所述的一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法，其特徵在於步驟B雙水相萃取中，分相溫度為10-25°C，分相時間為2-5小時。
5.如權利要求1所述的一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法，其特徵在於步驟C中無機鹽選用硫酸銨、硫酸鎂、氯化鈉。
6.如權利要求1所述的一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法，其特徵在於步驟C反萃取中分相時間為1-3小時。
全文摘要
本發明屬於醫藥技術領域，涉及一種雙水相萃取蒲黃總黃酮的方法。本發明的技術特徵在於先將蒲黃藥材提取、除雜後得到蒲黃粗提液，濃縮後加入乙醇和磷酸鹽雙水相系統，混勻，分為上、下兩相；上相加乙酸乙酯、水和無機鹽，室溫下混勻，進行反萃取。取出含有蒲黃總黃酮的乙酸乙酯相，對其減壓濃縮，真空乾燥得到蒲黃總黃酮。本發明的有益效果是採用雙水相從蒲黃中提取蒲黃總黃酮，方法簡單易行，可放大工程進行連續性操作，處理量大、成本低、不存在有機溶劑殘留。
文檔編號A61P9/10GK102233067SQ20111011757
公開日2011年11月9日 申請日期2011年5月6日 優先權日2011年5月6日
發明者劉東鋒, 楊成東, 郭琴 申請人:南京澤朗醫藥科技有限公司