一種抗氧化劑生物微膠囊的製備方法

2023-11-01 15:12:12 2

專利名稱：一種抗氧化劑生物微膠囊的製備方法
技術領域：
本發明提供一種抗氧化劑生物微膠囊的製備方法，涉及到酵母細胞的培養、處理和微膠 囊製備的方法，更進一步涉及通過該方法所製備的抗氧化劑生物微膠囊。技術背景近年來，功能性食品的防病保健作用受到越來越廣泛的重視。植物抗氧化劑特別是多酚 化合物在心血管疾病的防治及防癌抑癌等方面的獨特作用已使其成為了一個重要的研究領 域。但是抗氧化劑本身不穩定，很容易氧化變質，有的還有苦澀等不良味道，這極大地限制 了其廣泛應用。用適宜的壁材將抗氧化劑微膠囊化，通過在其周圍形成由壁材組成的保護層 而與外界隔絕，可防止由於氧氣、光照等造成的氧化變質，保持抗氧化劑的抗氧化活性；可 以掩蓋某些抗氧化劑的酚類氣味，提高其可接受性及其穩定性；還可以通過不同壁材的組成 及不同條件的調控，控制抗氧化劑的釋放速度，延長其保質期；抗氧化劑的微膠囊化擴大了 抗氧化劑的使用範圍，減少了其使用量，從而也就減小了其毒性，降低了成本。雖然微膠囊技術已在食品、化妝品、藥品工業領域得到了廣泛應用，但只用食品級的壁 材來實現芯物質特別是水溶性物質的穩定化還存在許多困難，往往要用到聚合物或者價格昂 貴的卵磷脂。解決製備成本過高和壁材及輔助料的安全性的問題是微膠囊研究中急需解決的 問題之一，尋找原料易得、價廉、適用範圍廣、微囊化製備簡單、對人類和生態環境安全的 壁材將極大地促進微膠囊技術的發展。尤其是在食品、醫藥工業領域，只能使用蛋白質、碳 水化合物和蠟等天然高分子壁材，所得的微膠囊脆弱，對芯物質適應性小，不耐壓、不耐熱， 加工性能差，而且產品的顆粒大小不均勻，因此，能用於工業化生產的卻並不多，有的微囊 化的過程中還會用到有毒的溶劑或輔料等。生物微膠囊以其製備簡單、損耗小、生物相容性 好、後處理方便等特性佔有重要地位， 一直受到許多研究者的關注。酵母細胞安全無毒，易 於培養，天然的細胞結構使其具有包埋物質的潛能，經過適當改性，完全能成為一種新型的、 最為經濟的微膠囊壁材，己成功用於精油和風味物質的包埋，而且近年來在藥物輸送體系中 也已得到了應用。自從上個世紀70年代，英國科學家發現黴菌、酵母等真菌微生物適於作微膠囊壁材以來， 人們就在不斷地進行改進。1973年，法國專利FR2179528報導了工業用酵母經過質壁分離 劑處理後，包埋了氯化釹、氯化鎂和洋蔥提取物；1977年，美國的Shank等利用在低氮高碳 源培養基上培養的脂肪含量高達40 60%的酵母細胞包埋了油溶性化合物(USA4001480);1983年，英國的Dunlop公司利用一種既能溶於油又能溶於水的公共溶劑，找到了一種以脂 肪含量高於10%的酵母菌製備微膠囊的方法(EP-0085805A1); 1987年，英國的AD2公司又 作了進一步的改進，通過將酵母細胞放在含有囊心的濃溶液或分散液中溶脹，在室溫條件下 攪拌進行擴散滲透的方法，使脂肪含量低於10%的酵母細胞也能作為微膠囊的壁材使用而無 需公共溶劑的參與(EP0242135A2)。此外，漂白劑和紡織柔軟劑中的芳香類物質也被成功地 包埋於酵母細胞中(EP 0414282A1, 0414283A1)。 WO 93/11869則先用H202除臭後再製成 了液體漂白催化劑的微膠囊。WO 94/22572描述了一種先將待包埋物質的溶液進入到細胞 中，然後通過物理或化學方法使待包埋物殘留其中的製備生物微膠囊的方法。2000年成立的 Fluid Technologies Plc.公司專門生產風味物質的酵母微膠囊，日本也開發成功了油脂的酵母 微膠囊產品。所有這些專利文獻中至今還未見抗氧化劑生物微膠囊的製備方法。綠原酸存在於多種植物當中，由於它能作用於活性氧，是有效的羥自由基清除劑，具有心 血管防護，抗菌抗病毒、抗誘變抗癌，降脂降糖，抗白血病和免疫調節等廣泛的藥理作用。 然而其鄰二酚羥基結構使其易於氧化成高活性的醌，在儲存及加工過程中還易發生酯基轉移。 Kono等報導，綠原酸的抗氧化功能源於其兒茶酚和共軛的雙鍵結構。因此，綠原酸的穩定化 是發揮其功能作用的前提保證。此外，白藜蘆醇作為一種植物抗毒素，具有廣泛的生理和藥理活性，包括抗氧化、心血 管防護、抗炎、抗血小板凝集、抗癌和雌激素功能，但白藜蘆醇易於氧化和極端的光敏性也 使其應用受到了極大的限制。所以，現在需要一種高效製備抗氧化劑綠原酸和白藜蘆醇生物微膠囊的方法。發明內容本發明技術原理是採用將培養的酵母細胞經過化學方法處理後，與抗氧化劑溶液高頻度 接觸，使抗氧化劑通過擴散或滲透進入到酵母細胞中，利用抗氧化劑的羥基、芳香環與酵母 細胞壁或細胞膜之間的氫鍵作用、疏水相互作用以及範德華力等使抗氧化劑保留在酵母細胞 中，從而製得生物微膠囊。因此，本發明第一個目的是提供一種製備水溶性抗氧化劑生物膠囊的方法，包括 (l)以酵母細胞為出發菌株，經斜面培養和種子培養後，接種在發酵培養基中進行搖瓶培養；(2)將所得的細胞離心，洗滌後，重新懸浮在具有自溶促進功能的自溶促進劑中，在40 6(TC的溫度下進行振蕩處理24 48小時後，離心、洗滌，凍幹得到微膠囊化用壁材。其中所 述的自溶促進劑任一選自吐溫-80、 TritonX-100、溴化十六垸基三甲基銨、十二垸基硫酸鈉、 乙酸乙酯、乙醇、鹽酸、氫氧化鈉、氯化鉀以及氯化鈉； (3) 將酵母細胞壁材與水溶性抗氧化劑溶液高頻度接觸，離心，洗去細胞表面的抗氧化劑， 凍幹後磨細，即得抗氧化劑的酵母細胞微膠囊。(4) 如果需要，採用高效液相色譜法測定微膠囊中抗氧化劑的含量。(5) 包埋度定義包埋度(％)=實際包埋量/微膠囊重量乂 100%高頻度接觸定義以可實現溶液組分充分混和的轉速進行振蕩的頻度。本領域公知的 轉速50rpm/min以上或加壓2MPa以上，例如50-75rpm/min、 75-200rpm/min、或200rpm/min 以上的振蕩頻度。在一個具體實施方案中，所述的抗氧化劑為1%的綠原酸，所述的溶液為水溶液。在另 一個具體實施方案中，微膠囊的製備步驟如下將lg酵母細胞與l-20mLl^的綠原酸溶液 高頻度接觸。24小時後取出，離心，用水洗滌除去表面未包埋的綠原酸，冷凍乾燥。在另一具體實施方案中，所述的吐溫-80的加入重量為0.1 5%;或所述的TritonX-lOO的加入重量為0.1~5%;或所述的溴化十六烷基三甲基銨的加入重量為0.1 5%;或所述的十二烷基硫酸鈉的加入重量為0.1 5%;或所述的乙酸乙酯的加入重量為0.5 10%;或所述的乙醇的加入重量為0.5~10%;或所述的鹽酸的加入重量為0.5 10%;或所述的氫氧化鈉的加入重量為1 20%;或所述的氯化鈉的加入重量為1 20%;或所述的氯化鉀的加入重量為1 20%。在另一個具體實施方案中，搖瓶培養的步驟如下斜面種子活化4小時後接入種子培養 基，培養24小時後再按10%的接種量接入裝有50mL發酵培養基的500mL搖瓶中進行發酵 培養，發酵時間24小時，發酵溫度28-32'C，轉速180r/min。還在另一個具體實施方案中，酵母細胞處理的步驟如下培養的酵母細胞離心、洗滌後， 直接冷凍乾燥，或重新懸浮於0.1 20%的自溶促進劑溶液中，在40 6(TC下處理24 48小 時後，離心，冷凍乾燥。本發明第二個發明目的是提供一種脂溶性抗氧化劑生物微膠囊的製備方法。(l)採用酵母細胞為出發菌株，經斜面培養和種子培養後，接種在發酵培養基中進行搖瓶 培養；(2)將所得的細胞離心，洗滌後，重新懸浮在具有自溶促進功能的自溶促進劑中，在40 6CrC的溫度下進行振蕩處理24 48小時後，離心、洗滌，凍幹得到微膠囊化用壁材。其中所 述的自溶促進劑任一選自吐溫-80、 TritonX-lOO、溴化十六烷基三甲基銨、十二烷基硫酸鈉、 乙酸乙酯、乙醇、鹽酸、氫氧化鈉、氯化鉀以及氯化鈉；(3)將酵母細胞壁材與脂溶性抗氧化劑溶液高頻度接觸，離心，洗去細胞表面的抗氧化 劑，凍幹後磨細，即得抗氧化劑的酵母細胞微膠囊。(4)如果需要，採用高效液相色譜法測定微膠囊中抗氧化劑的含量。 其中包埋度和高頻度接觸定義可參見前文。在一個具體實施方案中，所述的抗氧化劑為1%的白藜蘆醇，所述的溶液為乙醇溶液。在另一具體實施方案中，所述的吐溫-80的加入重量為0.1 5%;或所述的TritonX-100的加入重量為0.1 5。/。；或所述的溴化十六烷基三甲基銨的加入重量為0.1 5%;或所述的十二烷基硫酸鈉的加入重量為0.1 5%;或所述的乙酸乙酯的加入重量為0.5 10%;或所述的乙醇的加入重量為0.5 10%;或所述的鹽酸的加入重量為0.5 10%;或所述的氫氧化鈉的加入重量為1~20%;或所述的氯化鈉的加入重量為1 20%;或所述的氯化鉀的加入重量為1 20%。在另一個具體實施方案中，搖瓶培養的步驟如下斜面種子活化4小時後接入種子培養 基，培養24小時後再按10%的接種量接入裝有50mL發酵培養基的500mL搖瓶中進行發酵 培養，發酵時間24小時，發酵溫度28-32t)，轉速180r/min。還在另一個具體實施方案中，酵母細胞處理的步驟如下培養的酵母細胞離心、洗滌後， 直接冷凍乾燥，或重新懸浮於0.1 20%的自溶促進劑溶液中，在40 60'C下處理24 48小 時後，離心，冷凍乾燥。還在另一個具體實施方案中，微膠囊的製備步驟如下將lg酵母細胞與l-20mL 1%脂 溶性抗氧化劑溶液高頻度接觸，24小時後取出，離心，用乙醇洗滌除去表面未包埋的抗氧化 劑。冷凍乾燥。在一個具體實施方案中，所述的菌株為釀酒酵母(Safcc/zara附j;cescewv/w'fleHan.)，斜面培 養基為PDA培養基，種子培養基為高糖培養基，發酵培養基為高糖培養基。在另一個具體實施方案中，所述的種子培養基和發酵培養基均為YPD培養基，組成如下.-蛋白腖20.0g (單位(g/L)，下同)、酵母提取物10.0g、葡萄糖10.0g、添水至1000mL, pH4-5。在另一個具體實施方案中，所述的種子培養基和發酵培養基均為產脂培養基，組成如下 蛋白腖3.0g、酵母提取物8.0g、蔗糖170.0g、添水至1000mL。
還在另一個具體實施方案中，種子培養基和發酵培養基都為豆芽汁蔗糖培養基，配製如 下取黃豆芽200.0g，洗淨,放入水中煮沸30min,用紗布過濾，取豆芽汁加蔗糖30.0g，添水至 1000mL,調節pF^7.2。本發明的第三個發明目的是提供根據前述方法所製備的抗氧化劑生物微膠囊，其中在一個實施方案中，所製備的抗氧化劑生物微膠囊是水溶性抗氧化劑生物膠囊，其中涉 及的抗氧化劑為綠原酸，優選1%的綠原酸，涉及的溶液為水溶液。在另一個實施方案中，所製備的抗氧化劑生物微膠囊是脂溶性抗氧化劑生物膠囊，其中 涉及的抗氧化劑為白藜盧醇，優選1%的白藜盧醇，涉及的溶液為乙醇溶液。本發明的有益效果近年來，隨著人工合成抗氧化劑被嚴格限制使用，天然、廉價的抗 氧化劑的開發和利用倍受人們的重視。但由於其本身的易氧化性或光敏性又給其應用帶來了 諸多困難。採用原料易得、價廉、適用範圍廣、微囊化製備簡單、對人類和生態環境安全的 酵母細胞作為壁材進行包埋後，不僅能防止由於氧氣、光照等造成的氧化變質，保持抗氧化 劑的抗氧化活性，還可以掩蓋某些抗氧化劑的酚性氣味，提高其可接受性及其穩定性。本專 利技術對於實現微膠囊的國產化，改變我國微膠囊產品依賴進口的局面，同時為抗氧化劑作 為食品添加劑得到大規模應用奠定基礎。不僅能填補我國在這一領域的空白，對我國醫藥工 業、臨床醫學和食品工業均具有重大的社會效益和經濟效益。
具體實施方式
實施例1如前所述，進行搖瓶培養酵母細胞，然後收集並洗滌酵母。加入重量為0.5%-5%的吐溫-80，在40 60。C的溫度下進行振蕩處理24 48小時，以使 其充分自溶，然後離心、洗滌，凍幹。將lg酵母細胞與l-20mLl冗綠原酸水溶液，在30 60'C下進行高頻度接觸，24小時後 取出，離心，用水洗去表面未包埋的綠原酸後，冷凍乾燥。最後通過高效液相色譜法測定微膠囊中抗氧化劑的含量。應當指出所加入的自溶促進劑的作用在於促進細胞自溶，如果加入高濃度的自溶促進 劑則反應時間更短，如果加入低濃度的自溶促進劑則反應時間更長。因此在合適濃度範圍內， 加入不同濃度的自溶促進劑，本領域技術人員顯然可以通過控制時間長短來達到預期效果。 因此實施例中並不必要列出上述濃度範圍內任何點的濃度數值。實施例2培養、處理酵母及包埋步驟同實施例1，除了加入的自溶促進劑為TritonX-lOO。 實施例3培養、處理酵母及包埋步驟同實施例1,除了加入的自溶促進劑為溴化十六烷基三甲基銨。實施例4培養、處理酵母及包埋步驟同實施例1,除了加入的自溶促進劑為十二烷基硫酸鈉。所 得生物微膠囊中綠原酸包埋度比未經自溶處理者高3.75%。實施例5培養、處理酵母及包埋步驟同實施例1,除了加入的自溶促進劑為乙酸乙酯。所得生物 微膠囊中綠原酸包埋度比未經自溶處理者高17.96%。實施例6培養、處理酵母及包埋步驟同實施例l，除了加入的自溶促進劑為乙醇。 實施例7培養、處理酵母及包埋步驟同實施例1，除了加入的自溶促進劑為鹽酸。 實施例8培養、處理酵母及包埋步驟同實施例1，除了加入的自溶促進劑為氫氧化鈉。所得生物 微膠囊中綠原酸包埋度比未經自溶處理者高43.52 % 。實施例9培養、處理酵母及包埋步驟同實施例l，除了加入的自溶促進劑為氯化鈉。 實施例10培養、處理酵母及包埋步驟同實施例l,除了加入的自溶促進劑為氯化鉀。實施例11培養、處理酵母及包埋步驟同實施例l,除了加入的抗氧化劑為l-20mLl冗白藜蘆醇乙 醇溶液。
實施例12培養、處理酵母及包埋步驟同實施例11，除了加入的自溶促進劑為TritonX-100。 實施例13培養、處理酵母及包埋步驟同實施例ll,除了加入的自溶促進劑為溴化十六垸基三甲基銨。實施例14培養、處理酵母及包埋步驟同實施例ll，除了加入的自溶促進劑為十二垸基硫酸鈉。 實施例15培養、處理酵母及包埋步驟同實施例ll，除了加入的自溶促進劑為乙酸乙酯。 實施例16培養、處理酵母及包埋步驟同實施例ll，除了加入的自溶促進劑為乙醇。 實施例17培養、處理酵母及包埋步驟同實施例ll，除了加入的自溶促進劑為鹽酸。 所得生物微膠囊中白藜蘆醇包埋度比未經自溶處理者高25.06%。實施例18培養、處理酵母及包埋步驟同實施例ll，除了加入的自溶促進劑為氫氧化鈉。所得生物 微膠囊中白藜蘆醇包埋度比未經自溶處理者高18.08%。實施例19培養、處理酵母及包埋步驟同實施例ll，除了加入的自溶促進劑為氯化鈉。 實施例20培養、處理酵母及包埋步驟同實施例ll，除了加入的自溶促進劑為氯化鉀。所得生物微 膠囊中白藜蘆醇包埋度比未經自溶處理者高1.28%。 從上述實施例的結果中，經過分析我們發現1. 所製備的酵母細胞壁材對綠原酸和白藜蘆醇的包埋度分別為6.93%~8.76%和3.62% 4.81%。經過改性處理後，酵母細胞製備壁材對水溶性綠原酸和脂溶性白藜戸醇的包埋度都 有不同程度的提高，對綠原酸的包埋度分別比改性前提高了 3.75% 43.52%不等(參見實施例 1-10)，白藜蘆醇的包埋度則提高了 1.28% 25.06%不等(參見實施例11-20)。2. 製得的綠原酸酵母微膠囊在25°0/75% RH, 25°C/90% RH和60 。C下能保持穩定，而且 在模擬胃液中，綠原酸在2 h內的釋放率達95X以上，5 h後，綠原酸已釋放完全。3. 綠原酸酵母微膠囊化後，其對羥自由基和DPPH自由基的清除能力顯著提升。當微膠囊 乙醇提取液中綠原酸濃度為17.54mg/L時，其對羥自由基清除率預測值為39.56%，而實測值 為63.52±1.59%;當綠原酸濃度為123.14 mg/L時，預測值為50.19%,實測值為74. 62±0. 54 %。當微膠囊乙醇提取液中綠原酸濃度為17. 54 mg/L時，對DPPH自由基的清除率為48.91士0.48 %，高於預測值44.85%;當綠原酸濃度為23.14 mg/L時，預測值為56.99%，實測值為 64.66±0.74%;當綠原酸濃度為35.08 mg/L時，預測值為75.44%，實測值為87. 48±0. 75%; 當綠原酸濃度為46.28 mg/L時，預測值為84.87%，實測值為91. 75±0.15%;可見，綠原酸微 囊化後，其抗氧化性能顯著提高。4. 製得的白藜蘆醇酵母微膠囊在6(TC下能保持穩定。而且，在25"/75%朋和25°0/90% RH光照下(ca.3001x)貯存10天後的白藜蘆醇保有率分別為97. 58±1. 81%和93.13±1.81%， 顯著高於未微囊化的79.88土2. 05%和77. 77±1. 50% 。5. 微囊化後白藜蘆醇的在水中的溶解度為6.67土0.03 mg/100 mL，比結晶型白藜蘆醇的 1.96±0.01 mg/100 mL高2倍以上，比無定形白藜戶醇的3.06土0. 02 mg/100 mL也要高出l倍以 上，表明白藜戶醇酵母微膠囊化以後，其生物利用度提高了1 2倍。6. 酵母微膠囊化的白藜蘆醇對羥自由基和DPPH自由基的清除能力顯著提高。當微膠囊乙 醇提取液中白藜蘆醇濃度為9.64mg/L時，其對羥自由基的清除能力預測值為20.00%，而實測 值為30.11±1.69%:當白藜蘆醇濃度為15.60 mg/L時，預測值為29.78%，實測值為33.86士2.73 %。當微膠囊乙醇提取液中白藜蘆醇濃度為10.18 mg/L時，對DPPH自由基的清除率為 34.98±1.12%，高於預測值27.31Q/^;當白藜蘆醇濃度為19. 28 mg/L時，預測值為41.30%， 實測值為50.68±1.36%;當白藜蘆醇濃度為31.22 mg/L時，預測值為53.72%，實測值為 63.53±0.31%。可見，白藜蘆醇微囊化後，其抗氧化性能顯著提高。7. 酵母細胞微膠囊化的白藜蘆醇在模擬胃液中90min內釋放率達90X,這一釋放特性對 於提高白藜蘆醇由於代謝和排洩過於迅速而引起的低生物利用度極為有利。由於白藜戶醇無 法在血管外的組織中積累且血漿中白藜蘆醇半衰期極短，因而微囊化白藜蘆醇的緩釋性能對 於維持白藜蘆醇的生物活性極為重要。
可見，對於製備水溶性抗氧化劑生物膠囊，綠原酸經過酵母細胞微膠囊化後，不僅達到 了穩定化的目的，而且並未顯著降低其釋放速度，通過酵母細胞微膠囊化，綠原酸對DPPH 自由基和羥自由基的清除能力得到了明顯提升；對於製備脂溶性抗氧化劑生物膠囊，白藜蘆醇酵母微膠囊化後，能顯著降低其極端的光 敏性。通過酵母細胞微膠囊化，不僅其水溶性提高了2倍以上，對DPPH自由基和羥自由基 的清除能力得到了明顯提升，而且微膠囊的緩釋性能對於提高白藜蘆醇由於過於迅速的代謝 和排洩導致的低生物利用度極為有利。
權利要求
1.一種製備抗氧化劑生物微膠囊的方法，其特徵在於，該方法包括如下步驟(1)採用酵母細胞作為出發菌珠，經斜面培養和種子培養後，接種在發酵培養基中進行搖瓶培養；(2)將所得的細胞離心，洗滌後，重新懸浮在具有自溶促進功能的自溶促進劑中，在40～60℃的溫度下進行振蕩處理24～48小時後，離心、洗滌，凍幹，得到用於微膠囊化的酵母細胞壁材，其中所述的自溶促進劑任一選自吐溫-80或TritonX-100、溴化十六烷基三甲基銨、十二烷基硫酸鈉、乙酸乙酯、乙醇、鹽酸、氫氧化鈉、氯化鈉或氯化鉀。(3)將酵母細胞壁材與1％抗氧化劑溶液高頻度接觸，離心，洗去細胞表面的抗氧化劑，凍幹後磨細，即得抗氧化劑的酵母細胞微膠囊；(4)如果需要，採用高效液相色譜法測定微膠囊中抗氧化劑的含量。
2. 如權利要求1所述的方法，其特徵在於所述的抗氧化劑為綠原酸，所述的抗氧化劑溶液 為水溶液。
3. 如權利要求l-2所述的方法，其特徵在於所述的抗氧化劑為白藜蘆醇，所述的抗氧化劑 溶液為乙醇溶液。
4.如權利要求1-3中任一項所述的方法，其特徵在於 所述的吐溫-80的加入重量為0.1 5%;或 所述的TritonX-lOO的加入重量為0.1 5%;或 所述的溴化十六烷基三甲基銨的加入重量為0.1 5%;或 所述的十二垸基硫酸鈉的加入重量為0.1~5%;或 所述的乙酸乙酯的加入重量為0.5 10%;或 所述的乙醇的加入重量為0.5 10%;或 所述的鹽酸的加入重量為0.5 10Q/。；或 所述的氫氧化鈉的加入重量為1 20%;或 所述的氯化鈉的加入重量為1 20%;或 所述的氯化鉀的加入重量為1 20%。
5.如權利要求1-4中任一項所述的方法，其特徵在於所述的菌株為釀酒酵母 (5"flcc^ww^ce;y cewv/w'fle Han.)，斜面培養基為PDA培養基，種子培養基為高糖培養基，發 酵培養基為高糖培養基。
6.如權利要求1-4中任一項所述的方法，其特徵在於種子培養基和發酵培養基均為YPD培養基，組成如下蛋白腖20.0g、酵母提取物10.0g、 葡萄糖10.0g、添水至1000mL， pH4-5。
7. 如權利要求1-4中任一項所述的方法，其特徵在於種子培養基和發酵培養基均為產 脂培養基，組成如下蛋白腖3.0g、酵母提取物8.0g、蔗糖170.0g、添水至1000mL。
8. 如權利要求1-4中任一項所述的方法，其特徵在於種子培養基和發酵培養基都為豆芽汁蔗糖培養基，配製如下取黃豆芽200.0g，洗淨，放 入水中煮沸30min，用紗布過濾,取豆芽汁加蔗糖30.0g，添水至1000mL,調節pH-7.2。
9. 根據權利要求1-8的方法所製備的抗氧化劑生物微膠囊。
全文摘要
本發明提供一種抗氧化劑生物微膠囊的製備方法，涉及到酵母細胞的培養、處理和微膠囊製備的方法，更進一步涉及通過該方法所製備的抗氧化劑生物微膠囊。將在合適的條件下搖瓶培養的酵母細胞經過吐溫-80或TritonX-100、溴化十六烷基三甲基銨、十二烷基硫酸鈉、乙酸乙酯、乙醇、鹽酸、氫氧化鈉、氯化鉀及氯化鈉等進行改性處理後，離心、洗滌，凍幹。將酵母細胞壁材與水溶性的綠原酸或脂溶性的白藜蘆醇高頻度接觸，離心，洗去細胞表面的抗氧化劑，凍幹後磨細，即得大小均勻，不黏結，抗氧化性能更強且表面無抗氧化劑的酵母細胞微膠囊。實現了綠原酸的穩定化，有效降低了白藜蘆醇的光降解速度，水溶性增加了2-3倍且具有緩釋性能。
文檔編號A61P39/06GK101125289SQ20071013755
公開日2008年2月20日 申請日期2007年8月7日 優先權日2007年7月1日
發明者石國榮, 饒力群 申請人:饒力群;石國榮