一種抗中風及其後遺症,改善心腦缺血的藥用組合物及其製備工藝和製劑的製作方法

2023-11-03 07:41:37

專利名稱：一種抗中風及其後遺症,改善心腦缺血的藥用組合物及其製備工藝和製劑的製作方法
技術領域：
本發明屬於中藥研製領域，涉及一種抗中風及其後遺症，改善心腦缺血的藥物組 合物及其製備工藝和製劑，具體涉及一種由中藥材川芎、當歸和天然冰片配伍組合， 提取其中的藥用成分川芎總生物鹼、川芎總有機酸、川芎總內酯、當歸總有機酸、當 歸總內酯以及天然冰片作為主要入藥成份，用於製備治療和預防中風、中風後遺症、 血管性老年痴呆、改善記憶力及腦血管通透性以及用於治療心絞痛等功能的藥物中的 應用。
背景技術：
中風，又稱腦血管意外或腦卒中，它是以猝然昏倒、不省人事，伴發口眼歪斜、 語言不利、半身不遂或無昏倒而突然出現半身不遂為主要症狀的一類疾病。中風一般 分為出血性腦中風如腦溢血、蛛網膜下腔出血和缺血性腦中風如腦動脈血栓形成、腦 栓塞兩大類。大多由情緒波動、憂思惱怒、飲酒、精神過度緊張等因素誘發。由於腦 血管壁的粥樣硬化，致使血管腔變狹窄或形成夾層動脈瘤，在各種誘因如情緒激動、 精神緊張、用力過猛、血壓升高等影響下，造成血管破裂或堵塞，使腦血液循環障礙， 形成部分腦組織缺血、水腫等病理改變，導致神經功能障礙，從而相應出現一系列的 中風病症狀。中風病症的高發病率、高致殘率、高死亡率己引起國內外醫藥界高度重 視。目前，用於抗中風的西藥主要為溶栓藥和通道阻斷劑，但大多有相當大的副作用， 患者不宜長期服用，因此長期治療效果並不理想。以中醫藥理論為指導的傳統中藥不 僅具有療效平穩、確切、副作用低的特點，而且大量的科學實驗還表明可以改善機體 的免疫功能，修復腦神經細胞功能，起到綜合治療的作用。世界範圍內，中藥(含天 然藥物)已廣泛用於心腦血管疾病的治療，並取得了很大的成效。根據此類疾病的病 因均因血管窄縮、栓塞、血流量減少等原因致使供血不足引發疾病的原理，結合傳統 的醫藥學理論與基礎提出了本發明。

發明內容
4本發明提供一種由中藥材川芎、當歸的提取物和天然冰片組合而成的藥用組合 物用於製備具有保護腦血管、抗腦缺血缺氧、抗腦血管血栓形成、緩解心絞痛、改善 記憶力及腦血管通透性等功能的主治中風及其後遺症、血管性老年痴呆等缺血性心腦 血管疾病藥物。同時，本發明為純中藥製劑，所用原料均為常用藥材，無毒副作用和 不良反應。
本發明的另一目的在於提供上述藥用組合物的製備方法及其適宜的藥物製劑。下 面的詳細描述將有助於進一步理解本發明。
除另有說明外，本說明書的部分術語的定義如下
川芎是指傘形科植物川芎Ligustcumchuanxionghort的乾燥根。具有活血行氣， 祛風止痛的作用。在本發明使用時可以將其粗粉以便於提取。
當歸是指傘形科植物當歸Angelica sinensis(Oliv.) Diels的乾燥根.具有補 血活血，調經止痛，潤腸通便的作用。用於血虛萎黃，眩暈心悸，月經不調，虛寒腹 痛，腸燥便秘，風溼痺痛等。在本發明的使用中將其粉碎以便於提取。
天然冰片本品是樟科植物樟Cinnamomum camphora(L.) Presl新鮮的枝、葉提 取加工製成的結晶。具有開竅醒神，清熱止痛的作用。用於熱病神昏、痙厥，中風痰 厥，驚痛痰迷，喉痺齒痛，口瘡癰瘍，目赤。
藥用組合物是指從中藥材川芎、當歸和天然冰片中提取的包括川芎總生物鹼、 川芎總有機酸、川芎總內酯、當歸總有機酸、當歸總內酯在內的提取物與天然冰片組 合而成；還可以是上述有效成分、有效部位的各種鹽、衍生物、衍生物的鹽以及人工 合成或半合成產品的組合物。
本發明提供的具有保護腦血管、抗心腦缺血、抗腦血管血栓形成、緩解心絞痛、 改善記憶力及腦血管通透性等作用的藥用活性組分是從天然中藥材川芎、當歸中提取 的藥用成分和天然冰片組合而成的。所用藥材的重量配比為川芎10 80份、當歸80 10份、天然冰片O. 1 30份；優選配比為川芎40 60份、當歸60 30份、天然 冰片1 2份各藥材的最優重量配比為川芎49.32份、當歸49.32份、天然冰片 1.37份。本發明的藥用組合物主要包括川芎總生物鹼、川芎總有機酸、川芎總內酯、 當歸總有機酸、當歸總內酯，其中各藥用組分的含量在0.1 60 %之間；該藥用組合物還可以是上述有效成分、有效部位的各種鹽、衍生物、衍生物的鹽以及人工合成或半合成產品的組合物。本發明組合物包括上述藥用組合物和生理學上可以接受的藥用賦形劑。該藥用組合物由中藥材川芎、當歸和天然冰片經稱重、粉碎、乾燥、醇提或水提、醇溶或萃取、分離純化等工藝提取三味藥材的藥用成分，合併後製備而成的。該藥用組合物的工藝步驟主要包括以下幾個方面①將原藥材川芎當歸清洗、乾燥後粉碎，加90%乙醇浸泡，滲漉，減壓回收乙醇並濃縮，加入乙醇溶解(萃取)/或有機溶劑萃取2 4次，回收乙醇並濃縮至膏狀備用；②取適量天然冰片加入上述濃縮膏中混合，溶解完全後即得藥用組合物。
該藥用組合物的優選工藝為①川芎當歸粉料加入8 15倍量90%乙醇浸泡8小
時後，置滲漉器中進行滲漉，控制適宜的流速，過程中不斷補充溶媒，直至滲漉液呈
無色為止，滲漉液濃縮至相對密度為1.05 1.30 (5(TC)，分三次等量加入總共約3倍量95%乙醇溶解3次，合併上述醇溶液，減壓回收並濃縮至無醇味，相對密度為1.10 1.30 (50°C)，即得川芎當歸提取物；②將天然冰片加入所得提取物中溶解均勻後藥用組合物。
本發明的保護腦血管、抗腦缺血缺氧、抗腦血管血栓形成的藥物即是由上述的藥用組合物以及生理學上可以接受的適宜的藥用賦形劑組成。製劑可以是口服製劑，包括片劑如普通片、控釋片、緩釋片、口腔崩解片、泡騰片、分散片等以及硬膠囊劑、軟膠囊劑、滴丸、丸劑、顆粒劑、口服液等，也可以是胃腸外給藥用劑型如注射劑、粉針劑、凍乾粉針劑、輸液劑等，還可以是吸入劑、氣霧劑或栓劑形式。所述的藥物製劑中還含有藥學上可以接受的藥用輔料，所述的藥用組合物在藥物製劑中的單位含量在0. lmg 100mg 。
口服給藥的固體藥物製劑可以是片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、滴丸、顆粒劑、散劑、丸劑等。可以按照它們的常規製備方法製備而成，在製備的過程中使用可以藥用的輔料。例如，在片劑或膠囊劑的製備過程中可以使用填充劑(例如澱粉、糊精、蔗糖、乳糖、硫酸鈣、碳酸鈣、微晶纖維素等)、粘合劑(如甲基纖維素、乙基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、按甲基澱粉鈉、明膠、玉米澱粉等)、崩解劑(如乾燥澱粉、交聯羧甲基澱粉鈉、羧甲基澱粉鈉、低取代羥丙基纖維素等)、潤滑劑(如硬脂酸鎂、硬脂酸、微粉矽膠、聚乙二醇、滑石粉等)。片劑還可以按照目前已知的方法包衣。顆粒劑還需要選用相應的矯味劑(如蔗糖、枸椽糖漿等)。軟膠囊劑的製備中所用的稀釋劑包括但不限於植物油、礦物油、丙二醇、吐溫、聚乙二醇(PEG ) ( 200 8000 )中的一種或幾種。助懸劑包括但不限於纖維素類如輕甲基纖維素鈉、羥乙纖維素、乙基纖維素、羥乙基甲基纖維素、羥丙纖維素、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素等；樹膠類如阿拉伯膠等；其他如卡波姆、聚乙烯醇類等中的一種或幾種。乳化劑包括但不限於硬脂酸鈉、油酸鈉、司盤類(20 80 )、吐溫類(20 80 )、單硬脂酸甘油酯、羥化卵磷脂、二乙醯單甘油酯、二乙二醇硬脂酸酯、三羥基甲垸、乙二醇單硬脂酸酯、蜂蠟中的一種或幾種。所用防腐劑包括但不限子山梨酸甲酯、苯甲酸、山梨酸、對羥基苯甲酸甲酯、尼泊爾金甲酯、尼泊爾金乙酯、苯甲醇中的一種或幾種。滴丸劑的製備中，基質包括但不限於聚乙二醇(PEG) 6000 、聚乙二醇(PEG ) 4000 、聚乙二醇(PEG) 1000 、聚乙二醇(PEG ) 1500 、硬脂酸鈉、甘油明膠、硬脂酸、泊洛沙姆等；冷凝液包括但不限於二甲基矽油、液體石蠟、植物油等。
口服液體製劑可以是合劑(口服液)、糖漿劑、乳劑、混懸劑、酊劑或懸浮液，還可以是在其使用前用水或者其他合適的載體衝調服用的乾燥產品。這些液體製劑可以按照本身已知的方法製備，在製備的過程中可以使用藥用添加劑，如懸浮劑(如纖維素衍生物、葡萄糖/蔗糖糖漿、山梨醇糖漿等)、乳化劑(如阿拉伯膠、大豆磷脂、卵磷脂、明膠、吐溫類等)、助懸劑(如甘油、單糖漿、單硬脂酸鋁植物油、膠體硫酸鎂鋁等)、防腐劑(如苯甲酸、羥基一苯甲酸甲酯、羥基苯甲酸丙酯、山梨酸等)。根據需要還可以加入矯味物質、芳香成分、甜味劑等。
非腸道給藥製劑可以製備成注射液、優選靜脈內、皮下、肌內注射液。可以是以安瓶形式，也可以加入防腐劑製備成輸液形式。該製劑可以是油性或水性載體中的溶液、懸浮液或者是乳液形式，還可以加入適宜的懸浮劑、穩定劑、分散劑或者是調節滲透壓的試劑等。另外，活性成分可以製成固體無菌粉末，在使用之前用適宜的載體配製溶解。
本發明還可以製備成直腸給藥製劑栓劑等。栓劑的基質可以選Wit印solH 、 S和E ,以及聚乙二醇、甘油明膠、吐溫61 、泊洛沙姆等。也可以製備成適宜的氣霧劑、噴霧劑、滴劑等製劑。
本發明的藥用組合物可以廣泛的用於製備抗中風、中風後遺症、血管性老年痴呆
7及缺血性心腦血管疾病藥物或保健食品、食品添加劑中的應用。
本品是一種具有保護腦缺血、缺氧，抗血栓形成，改善記憶力作用的主治中風及其後遺症以及血管性老年痴呆及缺血性心腦血管疾病的新一代藥物。和現有技術相比，它具有以下新穎性和先進性首先，從藥物配伍方面來說，本品是在中醫理論的指導下，以由三味中藥材進行配伍，方中選用川芎活血行氣，祛風止痛，當歸補血活血，天然冰片開竅醒神的作用，三藥配伍具有活血化淤，開竅醒神，行氣通絡之功效。本品避免了大複方入藥味數繁多之不足之處，不但保留了傳統中藥的優勢，而且充分體現了現代中藥科學合理的配伍和作用相輔相成的特點；其次，本發明從現代藥理學研究結果出發，採用現代中藥的提取工藝將三味中藥材經提取、精製，以提取物川芎總鹼、川芎總有機酸，川芎總內酯，當歸總有機酸、當歸總內酯和天然冰片作為入藥的主要成分，使得其中的藥用成分充分富集，含量較高，便於藥品的質量控制；再次，從藥效方面來看，本品是將三味藥材的提取物按照合適的比例配比組合作為藥物的主要入藥成分，三味藥物全方配合，使得藥物互補互促、協同增效，藥效顯著增加，避免了單味藥物療效單一的不足，同時本品還保留了三味中藥自身所具有的補益調理的
功效，達到了標本兼治的目的。
以下通過實施例對本發明作進一步說明，但本發明保護的範圍並不僅限於此。具體實施例
實施例1藥用組合物的製備工藝
川芎當歸粉料加入3倍量90%乙醇浸泡8小時後，置滲漉器中，緩緩進行滲漉，並不斷補充乙醇，直至滲漉液無色為止，滲漉液減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1. 05 1.30 (50°C),放冷後，分3次等量加入總共3倍量95%乙醇溶解3次，合併三次所得乙醇液並減壓回收乙醇濃縮至相對密度為1. 10 1.30 (50°C)，得川芎當歸提取物，備用；
天然冰片加入上述提取物溶解後即得藥用組合物。實施例2藥用組合物的製備工藝
川芎當歸粉料加入10倍量95%乙醇煎煮3次，每次煎煮時間2小時，合併三次提取液，減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1.05 1.30 (5(TC),分三次等量加入總共3倍量95%乙醇溶解3次，合併醇溶液，減壓回收乙醇並濃縮至相對密度為1.10 1.30(50°C)，得川芎當歸提取物，備用；
天然冰片加入上述提取物溶解後即得藥用組合物。
實施例3 口服片劑藥用組合物 0.01 0.30克/片硬脂酸鎂 0. 1 0.3毫克/片
羧甲基澱粉鈉 4 12毫克/片微晶纖維素 50 100毫克/片將藥用組合物與羧甲基澱粉鈉、微晶纖維素混合，過篩，使其混勻，加入適量的水或適宜濃度的乙醇制粒，乾燥後，整粒，加入適量的硬脂酸鎂，然後用適當直徑的衝壓裝置將顆粒壓片。
實施例4硬膠囊劑藥用組合物 0.01 0.30克/粒
羧甲基澱粉鈉 4 12毫克/粒硬脂酸鎂 0. 1 0.3毫克/粒
澱粉 50 100毫克/粒將藥用組合物過篩，與羧甲基澱粉鈉、澱粉混合，過篩，加入適量的水或適宜濃度的乙醇制粒，乾燥後，整粒，加入適量的硬脂酸鎂，用合適的裝置將該混合物裝入硬明膠膠囊中。通過改變淨重，以及按照需要改變膠囊的大小可以製備不同的膠囊。
實施例3 口服片劑藥用組合物 0.01 0.30克/片硬脂酸鎂 0. 1 0.3毫克/片
羧甲基澱粉鈉 4 12毫克/片微晶纖維素 50 100毫克/片將藥用組合物與羧甲基澱粉鈉、微晶纖維素混合，過篩，使其混勻，加入適量的水或適宜濃度的乙醇制粒，乾燥後，整粒，加入適量的硬脂酸鎂，然後用適當直徑的衝壓裝置將顆粒壓片。
實施例4硬膠囊劑藥用組合物 0.01 0.30克/粒竣甲基澱粉鈉 4 12毫克/粒硬脂酸鎂 0.1 0.3毫克/粒
澱粉 50 100毫克/粒
將藥用組合物過篩，與羧甲基澱粉鈉、澱粉混合，過篩，加入適量的水或適宜濃度的乙醇制粒，乾燥後，整粒，加入適量的硬脂酸鎂，用合適的裝置將該混合物裝入硬明膠膠囊中。通過改變淨重，以及按照需要改變膠囊的大小可以製備不同的膠囊。
實施例5軟膠囊劑
藥用組合物 0. 01 0. 10克/粒
稀釋劑 250 450毫克/粒
助懸劑 5 10毫克/粒
乳化劑 5 10毫克/粒
每粒囊殼的組份和含量如下
明膠 100 150毫克
甘油 30 50毫克
水 100 150毫克
防腐劑 適量將明膠置於膠罐中，加入可溶解明膠量的純化水，膠罐溫度適宜，溶化後，加入甘油、防腐劑，攪拌均勻，抽真空脫氣後保溫靜置;按比例將藥用組合物與稀釋劑、乳化劑、助懸劑混合均勻，將內容物和製備好的明膠置旋轉壓囊機或滴制機，壓制或滴製成軟膠囊，定型、乾燥即可。可以按照不同需要，改變內容物製備成不同規格的軟膠囊。實施例6滴丸藥用組合物 1 100毫克/粒基質(聚乙二醇6000) 8 300毫克/粒冷凝液(二甲基矽油)
滴制溫度60 110。C冷凝液溫度0 30。C滴速10 80粒/分取適量基質於水浴(或電磁爐、電熱罐)中加熱熔融成澄清液體，加入藥用組合物後充分攪拌均勻，倒入已預熱的滴丸器中，控制滴制溫度和滴速，滴入適宜溫度的冷凝液中，冷卻成丸後吸乾(或甩幹)冷凝液，收集滴丸，選丸(包薄膜衣)，分裝。
實施例7顆粒劑藥用組合物 0.01 1.0克/袋糊精 2.0 10.0克/袋蔗糖 2.0 10.0克/袋矯味劑適量甜味劑適量
將藥用組合物和蔗糖、糊精、矯味劑、甜味劑混合均勻，加入適量的水或適宜濃度的乙醇制粒，乾燥後，整粒，分裝。
實施例8注射劑藥用組合物 1 100毫克/單位注射用0.9 %氯化鈉溶液至5 10毫升將藥用組合物溶解於注射用氯化鈉溶液中，將溶液調至所需要的體積，調節pH值,灌裝後在高溫下加熱滅菌。
實施例9舌下片藥用組合物 0.01 0.02克/片乳糖 0.03 0.20克/片
11硬脂酸鎂 0. 10 0. 20毫克/片
將藥用組合物粉適量的輔料經混合、制粒、過篩後，並用適當的衝壓裝置壓片。
實施例10直腸給藥的栓劑
藥物組合物 0. 02 0. 3克/粒
Wit印sol H15 1 2克製備藥用組合物在熔融Wit印sol H15種的懸浮液，並且適當的裝置將其裝入l克栓劑模中。
下面用藥理實驗進一步說明本發明
一、本品對小鼠常壓耐缺氧及斷頭張口喘氣時間的影響
1常壓耐缺氧實驗方法
選用昆明種小鼠60隻，雌雄各半，體重18 22g，隨機分為五組，分別為對照組、抗中風高劑量組(200mg / kg)、抗中風中劑量組(100mg/kg)、抗中風低劑量組(50 mg/kg)和陽性對照尼莫地平組(20mg/kg )，每組12隻。各組動物均一日一次灌胃給藥，對照組給予等量生理鹽水，連續7天，於末次給藥後1小時，將小鼠置於裝有20g鈉石灰的200ml廣口瓶中，密閉記錄小鼠存活時間，即耐缺氧時間，實驗結果進行t檢驗，以x ±sd表示。
2斷頭張口喘氣實驗方法
選用性昆明種小鼠60隻，雌雄各半，體重18 22g。隨機分為五組，分別為對照組、抗中風高劑量組(200mg / kg)、抗中風中劑量組(100mg/kg)、抗中風低劑量組
(50 mg/kg)和陽性對照尼莫地平組(20mg/kg)，每組12隻。各組動物均一日一次灌胃給藥，對照組給予等量生理鹽水，連續7天，於末次給藥後1小時，將小鼠頭快速剪下，立即記錄張口喘氣時間。實驗結果進行t檢驗，以x ± sd表示。實驗結果除低劑量組外，其餘各給藥組均可顯著延長小鼠常壓耐缺氧的存活時間以及斷頭張口喘氣的存活時間。提示本品具有顯著的腦缺氧保護作用。
注*與對照組比較P<0.05, **與對照組比較P<0.01 ，實驗結果詳見表1 。二、 本品對結紮小鼠帶迷走神經的頸總動脈所致小鼠急性腦缺血模型的影響實 驗方法
選用昆明種小鼠72隻，雌雄各半，體重18 22g ，隨機分為六組，分別為模型組、 假手術組，抗中風高劑量組(200mg/kg)、抗中風中劑量組(100mg/kg)、抗中風低劑 量組(50mg/kg)和陽性對照尼莫地平組(20mg/kg),每組12隻。各組動物均一日 一次灌胃給藥，模型組和假手術組給予等劑量生理鹽水，連續7天，於末次給藥後1 小時，各組小鼠以乙醚麻醉後，除假手術組分離雙側頸總動脈及迷走神經不進行結紮 外，其餘均結紮，觀察存活時間，呼吸提5次為死亡。實驗結果進行t檢驗，以x ± sd表示。實驗結果除低劑量組外，其餘各給藥組均可顯著延長小鼠急性腦缺血的存 活時間。提示本品具有顯著的抗小鼠急性腦缺血作用。
注*與對照組比較P〈0.05， **與對照組比較P<0.01 ，實驗結果詳見表2 。
三、 本品對大鼠血小板聚集功能的影響
取健康大鼠50隻，雌雄各半，體重220 250g,隨機分為五組，每組10隻，設對 照組，給予等量的生理鹽水；本品25mg/kg、 50mg/kg、 100mg/kg三個劑量組；陽性對 照藥阿司匹林IOO mg/kg。各組大鼠均連續灌胃給藥7天，阿司匹林組連續灌胃給藥3 天，給藥體積均為5mL/kg，測定前一天禁食，於末次給藥後1小時，腹腔注射3 %戊 巴比妥鈉0.059 / Kg麻醉，。仰臥位固定。以矽化注射器自大鼠腹主動脈採血6mL， 置矽化離心管中，以3.8%檸檬酸鈉溶液9: l抗凝，以1000rpm離心5分鐘，製成富 血小板血漿(PRP)，以2000rpm離心IO分鐘，製成貧血小板血漿(PPP)，採用比濁法， 將0. 2mLPPP置於測定管中(對照管)在BS-634型血小板聚集儀中校正100%透過率值。 隨後每隻大鼠再取0.2mLPRP置於另一測定管中，預熱2分鐘，加入50umolADP溶液 20uL，隨即記錄5分鐘內血小板最大聚集率。以各組的血小板最大聚集率進行組間比 較(t測驗)，並計算出血小板聚集抑制率。結果表明，本品低、中、高三個劑量組對 ADP誘導的大鼠血小板最大聚集率均有明顯的抑制作用，最大聚集抑制率分別為 19.53%、 33. 40%和53. 93%，與對照組比較均有顯著性差異(p〈0.01)，表明本品對體內 血小板聚集活性有明顯的抑制作用。
注*與對照組比較P < 0.05 ， **與對照組比較P < 0.01 ，實驗結果詳見表3。
13四、 本品對大鼠動-靜脈旁路血栓的影響
取大鼠50隻，雌雄各半，體重250 350g，隨機分為5組，每組10隻，設對照組， 給予等量的生理鹽水；本品25mg/kg、 50mg/kg、 100mg/kg三個劑量組；陽性對照藥阿 司匹林100mg/kg。各組大鼠均連續灌胃給藥7天， 一日一次；阿司匹林組連續灌胃給 藥3天，給藥體積均為5raL/kg。測定前一天禁食，於末次給藥後1小時，腹腔注射3 % 戊巴比妥鈉0.059 / Kg麻醉，仰臥位固定，氣管內插入聚乙烯管以便清除氣管內分 泌物，分離右頸總動脈和左頸外靜脈，結紮離心端。取一外徑為1.6mm的聚乙烯管， 內置一根5cm長的四號手術絲線，聚乙烯管內充滿肝素生理鹽水溶液(50u/ml)兩端 分別插入右頸總動脈及左頸外靜脈。血流循環15min後中斷血流，迅速取出絲線稱重， 總重量減去絲線重量即血栓溼重，計算抑制率。結果表明，本品中、高劑量組均可使 大鼠血栓溼重顯著減輕，其血栓抑制率分別為38. 03%和47. 21%。與對照組比較有顯著 性差異(p均〈0.01)，表明本品對大鼠體內血栓形成有明顯的抑制作用。
注*與對照組比較P 〈 0.05 ， **與對照組比較P 〈 0.01;實驗結果詳見表4。 血栓抑制率(％)=對照組血栓溼重一給藥組血栓溼重/對照組血栓溼重乂100%
五、 本品對腦缺血大鼠腦血管通透性的影響
取健康大鼠60隻，雌雄各半，體重300 350g，隨機分為6組，每組10隻，設假 手術組和模型對照組，均給予等量的生理鹽水；本品25mg/kg、 50mg/kg、 100mg/kg三 個劑量組；陽性對照藥尼莫地平50mg/kg。各組大鼠均預先連續灌胃給藥7天，給藥體 積為5mL/kg。於末次給藥後l小時，水合氯醛350mg/kg腹腔注射麻醉。仰臥位固定， 頸中切口，切開氣管，分離並結紮大鼠雙側頸總動脈，形成急性不完全性腦缺血模型。 模型對照組和各給藥組則在結紮雙側頸總動脈前5分鐘由股靜脈注射伊文思藍溶液 50mg/2mL/kg，假手術組於股靜脈注射伊文思藍50mg/2mL/kg後不結紮雙側頸總動脈。 經結紮3小時後，斷頭取腦，將每個腦稱重後分別浸泡於10mL甲醯胺溶液中，在45'C 恆溫箱中溫育72小時，待腦組織中色素全部浸出後，取甲醯胺色素溶液在日立U—llO 型分光光度計於620nm波長處比色，根據標準曲線(C=( -0. 00296)/0. 060)計算出 腦內伊文思藍含量，以此來反映腦毛細血管通透性。結果顯示，本品中、高兩個劑量組大鼠腦內伊文思藍含量均明顯低於模型對照組，與模型對照組比較有顯著性差異(P 均〈0.01)，其通透抑制率分別為36. 07%、和38.90%。表明本品可明顯的抑制腦缺血 大鼠的腦血管通透性。
注與假手術組比較P<0.01。與模型對照組比較** P<0. 01.實驗結果
詳見表5。
六、本品對東莨菪鹼致小鼠記憶獲得障礙的影響
取健康小鼠84隻，雌雄各半，體重18 20g,均分6組，每組14隻，設空白對照 組和模型組，給予等量的生理鹽水；本品40mg/kg、 80mg/kg、 160mg/kg三個劑量組； 陽性對照藥吡拉西坦1.20g/kg。各組小鼠均預先連續灌胃給藥30天，給藥體積為 10mL/kg。第29天開始訓練動物，先將跳臺儀電壓控制在36V，各組平行給藥1小時後， 除空白對照組外，其餘各組均腹腔注射氫溴酸東莨菪鹼2mg/kg， 15分鐘後將小鼠分別 放入跳臺儀的5個格子內，適應環境3分鐘，然後通電，小鼠受電擊後，多數跳上跳 臺，逃避電擊。跳下時以小鼠雙足同時接觸銅柵為觸電，視為錯誤反應，訓練5分鐘， 並記錄5分鐘內觸電次數，對於訓練後反應異常的小鼠剔除。次日在給藥l小時後同 法重新測試，測試時將小鼠放在跳臺上，記錄小鼠第一次跳下的時間，作為觸電潛伏 期，並記錄小鼠5分鐘內跳下次數(錯誤次數)，作為記憶指標。分別將各組記憶指標 與模型組進行比較(t檢驗)。結果表明，模型組與空白對照組比較，模型組的潛伏期 顯著縮短，5分鐘內跳下次數顯著增多，說明已造成小鼠記憶獲得障礙。本品中、高劑 量的潛伏期明顯延長，與模型組比較有顯著性差異(P〈0.05和0.01),低、中、高劑 量組5分鐘內錯誤次數與模型組比較也有顯著性減少(P〈0.05和0.01)。表明本品可 明顯的改善小鼠的記憶障礙。
注*與模型組比較P 〈 0.05 ， **與模型組比較P 〈 0.01，實驗結果詳見表6。表l.本品對小鼠常壓耐缺氧及斷頭張口喘氣時間的影響
分組
對照組
尼莫地平組
低劑量組
中劑量組
高劑量組
劑量(mg/kg. d)
NSX7 20X7 25X7 50X7 100X7
耐缺氧時間 (min )
24. 84± 1.38 30. 22± 2.12** 26. 02±1. 18 29. 04±1.96** 32. 14±2. 76**
斷頭張口喘氣(sec )
16. 88±2. 48 31.84±1.63** 21.04±2.85* 24. 92 ±2. 44** 31. 02±1. 55**
表2.本品對結紮小鼠帶迷走神經的頸總動脈所致小鼠急性腦缺血模型的影響
分組劑量(mg/kg. d)動物數(只)存活時間(sec)
假手術組NSX712一
對照組NSX712179. 08 ±46. 86
尼莫地平組20X712250. 34±51.18**
低劑量組50X712212. 24±46, 28*
中劑量組100X712238. 68±66. 64**
高劑量組200X712257. 06±47. 88**
表3.本品對大鼠血小板聚集功能的影響
分組劑量 (mg/kg- d)動物數 (只)最大聚集率 (X±SD.%)聚集抑制率 (%)
對照組NSX71052. 06 ±7. 32一
阿司匹林組100X71021. 61 ±5. 74**58. 49
低劑量組25X71041. 89 ±4. 72**19. 53
中劑量組50X71034. 67 ±6. 98林33.40
高劑量組100X71023. 98±7. 66**53.93表4.本品對大鼠動-靜脈旁路血栓的影響
分組劑量 (mg/kg. d)動物數 (只)血栓重量 (X士SD. mg)血栓抑制率 (%)
對照組NSX71030. 50±3.43一
阿司匹林組 100X71015. 88 ±3. 88**47.93
低劑量組25X71023.60±7.8322.62
中劑量組50X71018. 90±5. 82**38. 03
高劑量組100X71016. 10±5. 74**47.21
表5.本品,對腦缺血大鼠腦血管通透性的影響
分組劑量 (mg/kg. d)動物數 (只)腦內伊文思藍含量 (w g /g腦溼重)通透抑制率 (%)
假手術組NSX7101.028±0.112—
模型對照組NSx7101.802±0. 398##—
尼莫地平50x7101.088±0. 302**39. 62
低劑量組25X7101.428±0. 40420. 75
中劑量組50X7101.152±0.198**36, 07
高劑量組100X7101.102±0. 188**38. 85
表6.本品i對東茛菪鹼致小鼠記憶獲得障礙的影響
分組劑量 (mg/kg- cO動物數 (只)測試潛伏期 5min (X土SD， See)內錯誤次數 (次)
空白對照組NSx3014211.80 ± 70.04**1.80±2.18**
模型組NSx301456.30 ±28.858,20 ±3.98
吡拉西坦1200x301498.20 ±38.36*3.60 士 1.12**
低劑量組40x301465.40 ±31,214.20±2.56*
中劑量組80X301488.70 ±31.97*3.00 ±1.42**
高劑量組160X3014124.90 ±38.37**2.80±1說**
1權利要求
1、一種抗中風及其後遺症，改善心腦缺血的藥用組合物，其特徵在於，它是以一定重量配比的川芎、當歸和天然冰片三味中藥材經過稱重、粉碎、醇浸泡、滲漉、醇溶、萃取、濃縮、合併等工序製備所得的藥用提取物組合而成，所用藥材及其重量配比如下所述川芎10～80份當歸80～10份天然冰片0.1～30份
2 、根據權利要求l所述的抗中風及其後遺症的藥用組合物，其特徵在於所述各藥材 的重量配比為川芎10 80份 當歸80 10份 天然冰片0. 1 30份
3 、根據權利要求2所述的抗中風及其後遺症的藥用組合物，其特徵在於所述各藥材 的重量的優選配比為川芎49.32份 當歸49.32份 天然冰片1. 37份。
4 、根據權利要求1 3所述的抗中風及其後遺症的藥用組合物的製備方法，其特徵 在於藥用組合物是按照以下的工藝步驟製備而成①將原藥材川芎及當歸清洗、乾燥後粉碎作為原料。加90%乙醇浸泡8小時後， 置於滲漉器中滲漉，控制適宜的流速，並於過程中不斷補充溶媒，直至滲漉液呈無 色為止，減壓回收滲漉液並濃縮成膏，濃縮膏加入3 8倍量95%乙醇溶解(萃取) 3 4次，合併醇溶液並回收乙醇，濃縮至無醇味，備用； ②天然冰片備用。將① ②所得合併即得藥用組合物。
5 、根據權利要求4所述的藥用組合物的製備方法，其特徵還在於①川芎當歸物料加入5 12倍量進行滲漉，可以是混合進行，也可以是單獨進 行，滲漉液濃縮至相對密度為1.05 1.30 (50°C)，加入3 8倍量乙醇溶解(萃取)2 3次，醇液濃縮至相對密度為1. 10 1.30 (5(TC)。 ②天然冰片加入上述提取物溶解完全後，即得藥用組合物。
6、根據權利要求4或5所述的藥用組合物的製備方法，其特徵還在於滲漉所使用 的乙醇濃度範圍在20% 95%，提取方法可以是洄流、提取、逆流提取、低或超低 溫提取、浸泡、滲漉、超聲波提取、超臨界提取等；溶解或萃取精製所用乙醇濃 度範圍在30% 100%，也可以是丙酮、丁酮、乙酸乙酯等其他有機溶劑;也可以 不經乙醇溶解或萃取，直接將滲漉濃縮膏和天然冰片與相應輔料配比後製劑。
7 、根據權利要求5或6所述的製備方法製得的藥用組合物，其特徵在於該藥用組合物主要包括川芎總鹼、川芎總有機酸、川芎總內酯、當歸總有機酸、當歸總內酯 和天然冰片在內的藥用組分，其中各藥用組分的含量在1 99 %之間。
8 、根據權利要求7所述的藥用組合物，其特徵在於該藥用組合物還可以是上述三味藥物提取物的有效成分、有效部位的各種鹽、衍生物、衍生物的鹽以及人工合成 或半合成產品的組合物。
9 、根據權利要求1 8所述的藥用組合物的製劑，其特徵在於所述的製劑可以是口服製劑，包括片劑如普通片、控釋片、緩釋片、口腔崩解片、泡騰片、分散片等 以及硬膠囊劑、軟膠囊劑、滴丸、丸劑、顆粒劑、口服液等，也可以是胃腸外給 藥用劑型如注射劑、粉針劑、凍乾粉針劑等，還可以是吸入劑、氣霧劑或栓劑形 式。
10、根據權利要求1 10所述的藥用組合物及其製劑的用途，其特徵在於該藥用組 合物及其製劑可以廣泛的用於製備抗中風、中風後遺症、血管性老年痴呆等缺血 性腦血管疾病、緩解心絞痛、改善記憶力及腦血管通透性等功能的藥物或保健食 品、食品添加劑中的應用。
全文摘要
本發明提供了一種抗中風及其後遺症，改善心腦供血的藥用組合物及其製備工藝和製劑。本發明的中藥複方中川芎活血行氣，祛風止痛，當歸補血活血，調經止痛，天然冰片開竅醒神，清熱止痛。，三藥配伍具有活血養血、開竅安神、祛痺止痛之功效，可用於製備預防和治療中風、中風後遺症、血管性老年痴呆、改善記憶力及腦血管通透性以及用於治療心絞痛等各種缺血性心腦血管疾病的藥物、保健品中應用。本發明還提供了藥用組合物的製備方法和可以接受的所有藥物製劑。
文檔編號A61K36/185GK101683368SQ200810151609
公開日2010年3月31日 申請日期2008年9月23日 優先權日2008年9月23日
發明者石林平 申請人:石林平