一種阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物及其製備方法
2023-12-11 06:29:12
專利名稱：一種阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物及其製備方法。
背景技術：
川芎為傘形科植物川芎Ligusticum wallichii Frannch.的根莖。為臨床常用中藥，具有活血行氣、去淤止痛的功效，主要用於月經不調、經閉痛經、頭痛、風溼痺痛等症。川芎的化學成分相當複雜，主要含有特殊臭味易升華的生物鹼、苯酞衍生物、雙苯酞衍生物、有機酸類、有機酸酯類等成分。現代藥理研究證明，其所含主要有效成分為川芎嗪、阿魏酸等，具有擴張血管、增加冠脈血流及腦血流、抑制血小板聚集和降低血小板活性的功效，為一種鈣拮抗劑。現在已經證實川芎嗪和阿魏酸對多系統均有強弱不等的作用。概括起來主要有以下幾個方面①擴張冠脈，增加冠脈流量；②擴張血管，降低血壓；③改善微循環；④抑制血小板聚集、抗血栓形成及溶解已形成的血栓；⑤調節血脂和抗動脈粥樣硬化；川芎嗪和阿魏酸的化學結構式如下 川芎嗪 阿魏酸臨床上現在有川芎嗪的鹽酸鹽和磷酸鹽藥物的開發和應用，川芎嗪的鹽具有抗血小板聚集的作用，並對已聚集的抗血小板有解聚作用。此外，尚具有擴張小動脈。改善微循環和增加腦血流量，從而產生抗血栓形成和溶血栓的作用。用於缺血性腦血管疾病，如腦供血不足、腦血栓形成、腦栓塞引起的腦梗死等。
阿魏酸是川芎中水溶性提取物主要單體活性成分，屬酚酸類化合物。結構中有酚羥基，具抗氧化活性，但在空氣中不穩定，因此臨床上用其鈉鹽(Sodium Ferulate，SF)。動物研究結果顯示阿魏酸鈉能抑制丙二醛及血栓素B2的產生，減輕心肌水腫及乳酸脫氫酶的釋放，並能促進6-酮-前列腺F1α的產生，具有抗血小板聚集、舒張血管及心肌保護作用。臨床上用於治療高血壓、冠心病、腦動脈硬化和血管閉塞性脈管炎等病症。
我國早就有川芎單味注射製劑的開發，臨床報導也顯示出很好的療效，後來研製的單一成分藥品的應用並不能完全發揮川芎中多種成分的協同效果。阿魏酸鈉和川芎嗪鹽現在都有注射液臨床使用，但是還沒有二者的複方製劑的研究。若將兩者注射液直接混合後同時臨床應用會存在下列問題1)注入量過大增加病人的負擔；2)溶液混合過程中因為酸鹼度和電解質的變化可能會產生不明顯的微粒，帶來臨床不良反應的風險；等等，因此有必要對二者的複方製劑進行充分的研究並開發為新型製劑。
我們並不能預見到兩個成分混合使用的效果、混合過程中發生的現象，以及製劑工藝，這也不是顯而易見的。二者混合應用也未見報導和應用，通過實驗研究，我們發現二者在治療心腦血管疾病領域中因為協同作用的存在同時使用效果更好，並且通過實驗可以找到二者的最佳配比，這也不是普通技術人員不經過創造性的勞動就可以發現的。
發明內容
本發明的目的之一是提供一種阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物，本發明的另一個目的是提供該藥物組合物的製備方法。
為了達到上述目的，我們提供了一種用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物，由藥學上可接受的1-10重量份的阿魏酸鹽(可以是鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、鋅鹽或者鐵鹽)、1-10重量份川芎嗪鹽(包括鹽酸川芎嗪和磷酸川芎嗪)和注射用輔料組成，劑型可以是注射液或注射用凍乾粉針。
其中阿魏酸鹽優選阿魏酸鈉，川芎嗪鹽優選磷酸川芎嗪。
實驗發現，當阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪的質量比為(1-5)∶(1-5)時協同效果更明顯。
阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪的質量比還優選(1-2)∶(1-3)。
阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪的質量比最優選2∶1。
當劑型為注射用凍乾粉時，注射用輔料可選自甘露醇、山梨醇、氯化鈉、乳糖、右旋糖苷中的一種或幾種。
我們可以製備出該藥物組合物的注射用凍乾粉針，每支凍乾粉含有100mg-160mg的阿魏酸鈉和50mg-80mg的磷酸川芎嗪。
注射用輔料包括骨架支撐劑和抗氧劑，骨架支撐劑選用甘露醇，抗氧劑選用半胱氨酸鹽酸鹽。
我們還提供了阿魏酸鹽和川芎嗪鹽藥物組合物的製備方法，該方法包括以下步驟1)取處方量川芎嗪鹽充分溶解於50℃以下注射用水中，調節pH值至5-7，再加入處方量阿魏酸鹽、注射用輔料充分溶解，除菌過濾得濃配液；2)將濃配液補加注射用水至所需體積，用0.05-0.2％的活性炭脫碳後再按注射製劑常規方法製成注射液或注射用粉針劑即得。
阿魏酸鹽優選阿魏酸鈉，川芎嗪鹽優選磷酸川芎嗪。
實驗中我們發現當骨架支撐劑甘露醇凍幹前的濃度為8％時，外觀和復溶都更好一些，加入半胱氨酸鹽酸鹽有利於製劑的長期穩定性，半胱氨酸鹽酸鹽凍幹前的濃度為0.1％時更利於製劑的長期穩定性。
當我們製備成小水針和大輸液時製備過程中還需要加入等滲調節劑，可以是氯化鈉或葡萄糖。
水針和輸液分裝過程中用氮氣保護有利於溶液的保護。
我們還提供了阿魏酸鹽和川芎嗪鹽藥物組合物作為製備治療腦血栓、冠狀動脈硬化、冠心病、心肌缺血、脈管炎等心腦血管疾病中的應用。
我們成功製備了阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的複方注射製劑，包括注射液和注射用凍乾粉針。實驗中我們發現而這組方的複方製劑效果明顯好於單方製劑，但是不同的比例效果也有較明顯的差別，我們通過垂體後葉素所致大鼠急性心肌缺血的保護試驗、結紮冠狀動脈所致大鼠急性心肌缺血的保護試驗和預防大白鼠血栓形成試驗成功的找到了二者複方協同作用範圍，並且確定了二者的最佳比例。我們在實驗過程中對阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的溶解性質作了研究，發現磷酸川芎嗪在溶解過程中控制溶解溫度非常重要，溫度若高的話製備成注射液後因為磷酸川芎嗪的分解造成成分的損失，並且溶液會成為膠體狀物質，為了解決這一問題我們採取了先較低溫度溶解川芎嗪鹽再溶解阿魏酸鹽的方法，我們發現後加入阿魏酸鹽有利於磷酸川芎嗪的穩定性，在後面的除熱源和滅菌等操作中試驗結果顯示成分損失很好。由本法製備過程製備的製劑穩定性出人意料的好，製劑36個月(加速實驗確定)後仍穩定。藥理實驗證明本發明製備的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽複方注射製劑療效明顯好於單方製劑，無毒性，並且製劑穩定，質量可控。
具體實施例下面我們通過實施例進一步說明本發明實施例1注射用阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪複方凍乾粉的製備取磷酸川芎嗪6g，加入250m1注射用水中，50℃下充分溶解，調節pH值至5.8，再加入處方量阿魏酸鹽6g，加入甘露醇3.6g，半胱氨酸0.2g，充分溶解，過0.22微米微孔濾膜，得濃配液；將濃配液補加注射用水至所需體積400ml，調節pH值至6.5，過0.22微米微孔濾膜，分裝於10ml西林瓶中，每隻裝量4ml，加塞，凍幹，壓蓋，加鋁蓋，即得。批號ALDG-1實施例2注射用阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪複方凍乾粉的製備取磷酸川芎嗪6g，加入250ml注射用水中，50℃下充分溶解，調節pH值至6.1，再加入處方量阿魏酸鹽3g，加入甘露醇3.2g，半胱氨酸0.2g，充分溶解，過0.22微米微孔濾膜，得濃配液；將濃配液補加注射用水至所需體積400ml，調節pH值至6.2，過0.22微米微孔濾膜，分裝於10ml西林瓶中，每隻裝量4ml，加塞，凍幹，壓蓋，加鋁蓋，即得。批號ALDG-2實施例3注射用阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪複方凍乾粉的製備取磷酸川芎嗪6g，加入250ml注射用水中，50℃下充分溶解，調節pH值至6.2，再加入處方量阿魏酸鹽12g，加入甘露醇3.6g，半胱氨酸0.2g，充分溶解，過0.22微米微孔濾膜，得濃配液；將濃配液補加注射用水至所需體積400ml，調節pH值至6.6，過0.22微米微孔濾膜，分裝於10ml西林瓶中，每隻裝量4ml，加塞，凍幹，壓蓋，加鋁蓋，即得。批號ALDG-3實施例4注射用阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪複方凍乾粉的製備方法同實施例1，處方為阿魏酸鈉2g磷酸川芎嗪 20g製成100支。批號ALDG-4實施例5注射用阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪複方凍乾粉的製備方法同實施例1，處方為阿魏酸鈉16g磷酸川芎嗪 2g製成100支。批號ALDG-5實施例6注射用阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪複方凍乾粉的製備方法同實施例1，處方為阿魏酸鈉20g磷酸川芎嗪 2g製成100支。批號ALDG-6
實施例7注射用阿魏酸鈉和鹽酸川芎嗪複方凍乾粉的製備方法同實施例1，處方為阿魏酸鈉 3g鹽酸川芎嗪 10g製成100支。批號ALDG-7實施例8注射用阿魏酸鈉和鹽酸川芎嗪複方凍乾粉的製備方法同實施例1，處方為阿魏酸鈉 12g鹽酸川芎嗪 3g製成100支。批號ALDG-8實施例9阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪複方注射液的製備取磷酸川芎嗪12g，加入1000ml注射用水中，50℃下充分溶解，調節pH值至5.6，再加入處方量阿魏酸鹽6g，充分溶解，過0.22微米微孔濾膜，得濃配液；將濃配液補加注射用水至至5000ml，加入90g的氯化鈉，繼續補加注射用水至10000ml，調節pH值至6.4，加入50g的活性炭加熱至80℃保溫30min，脫碳後過0.22微米微孔濾膜，分裝於100ml輸液瓶中，每隻裝量100ml，加塞，壓蓋，115℃滅菌30min，即得。批號ALSY-1實施例10阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪複方注射液的製備取磷酸川芎嗪9g，加入1000ml注射用水中，50℃下充分溶解，調節pH值至5.8，再加入處方量阿魏酸鹽9g，充分溶解，過0.22微米微孔濾膜，得濃配液；將濃配液補加注射用水至至5000ml，加入90g的葡萄糖，繼續補加注射用水至10000ml，調節pH值至6.4，加入30g的活性炭加熱至80℃保溫30min，脫碳後過0.22微米微孔濾膜，分裝於100ml輸液瓶中，每隻裝量100ml，加塞，壓蓋，115℃滅菌30min，即得。批號ALSY-2實施例11AL複方對垂體後葉素所致大鼠急性心肌缺血的影響實驗藥物本發明注射用凍乾粉針兩種配伍比例(ALDG-3，ALDG-4)垂體後葉素注射液，規格10u/ml生理鹽水實驗動物Wistar II級大白鼠40隻，雌性，體重160g-200g.
實驗方法選用健康大鼠60隻，按體重隨機分成6組，①空白對照組(生理鹽水)、②模型對照組，③ALDG-3組，④ALDG-4組，⑤磷酸川芎嗪組，⑥阿魏酸鈉組。所有動物給藥體積相同(2ml/100g)，造模前每天給藥1次，連續給藥3天，於末次給藥0.5h後開始造模，腹腔注射10％水合氯醛3ml/kg進行麻醉，仰臥固定，記錄II導心電圖，選擇心電圖正常動物進行舌靜脈注射垂體後葉素(0.5u/kg)造成心肌缺血模型，注射速度為10s，①組動物注射生理鹽水作相似處理，在注射垂體後葉素前及後0s，15s，30s，1min，2min，5min，10min，15min標記II導心電圖，以觀察心電圖ST段的改變。實驗結束後處死動物，取血檢測血清CK，心肌ATPase，SDH活性。並測量比較給藥前、後S-T段和T波高度的變化，所有數據均採用平均值±標準差(x±s)表示，兩組間均數比較用T比較，多組間均數比較用方差分析。結果見表1、2。
表1 AL複方對垂體後葉素所致大鼠急性心肌缺血心電圖ST段的影響(x±s，mv)
注與②對照組比較**P＜0.01表2 AL複方對心肌缺血大鼠血清CK，心肌代謝酶及糖原含量的影響
注與②對照組比較**P＜0.01實施例12AL複方對結紮冠狀動脈所致大鼠急性心肌缺血的影響實驗藥物本發明注射用凍乾粉針兩組配伍比例(ALDG-3，ALDG-4)生理鹽水實驗動物Wistar II級大白鼠60隻，雌雄各半，體重160g-200g實驗方法取體重200g-240g的健康Wistar大鼠60隻，隨機分成6組，每組10隻，①正常未結紮組，②缺血對照組(生理鹽水)，③ALDG-3組，④ALDG-4組，⑤磷酸川芎嗪組，⑥阿魏酸鈉組。所有動物給藥體積相同(2ml/100g)，造模前腹腔注射藥物，每天給藥1次，連續給藥3天，於木次給藥後1h，腹腔注射10％水合氯醛3ml/kg進行麻醉，置於大鼠手術臺上固定仰臥位固定，縱形切開頸部皮膚，鈍性分離氣管周圍組織，暴露氣管，行氣管內插管，確認插入氣管中，後縫線固定插管於大鼠嘴旁。將針狀電極插入四肢皮下，記錄II導心電圖，於大鼠腋下平行線，左側橫行切開皮膚約1.5cm，在第4或第5肋間鈍性分離肌層，打開胸腔，緊接上動物呼吸機，輔助大鼠呼吸。剪開心包，輕壓右側胸廓，擠出心臟，在右側圓錐與左心耳之間冠狀靜脈處用5個0的絲線結紮左冠狀動脈以阻斷左冠狀動脈血流，此時缺血心肚壁呈現發紺、膨出，心肌收縮減弱，同時心電圖示S-T段明顯上抬，T波高聳，造成心肌缺血，缺血45min後剪開縫線以恢復冠狀動脈血液灌流，心肌再灌注2h，心電圖示S-T段回落1/2以上。結紮前心電圖不正常，或未到觀察終點而死亡以及造模不成功者剔除。實驗結束後處死動物，眼後動脈取血，LDH，CPK檢測試劑盒測定血清LDH，CPK活性，並於斷頭取血後迅速取出心臟.用生理鹽水衝洗，除去血汙，剔除血管、脂肪等非心肌組織，用吸水紙吸去水分，稱全心溼重。沿冠狀溝切除心房，留下心室，稱重，順房室溝從心尖到心基部平行將心室肌橫切成厚約0.1cm的心肌片4片，用生理鹽水衝洗乾淨。將心肌片放在0.1％的N-BT溶液中，在37℃水浴條件下染色15min.染色後立即用水衝洗去多餘的染料。梗死區不著色，非梗死區被N-BT溶液染成藍色。剪去梗死心肌，稱溼重，以梗死區溼重與全心溼重的百分比表示心肌梗死範圍。結果見表3、4。
表3 AL複方對結紮大鼠冠狀動脈所致急性心肌缺血再灌注心肌梗死範圍的影響
注與②對照組比較**P＜0.01表4 AL複方對結紮大鼠冠狀動脈所致急性心肌缺血再灌注CPK和LDH的影響(x±s，iv/L)
注與②對照組比較**P＜0.01說明配AL複方在配伍使用後在抗心肌缺血作用更強，以ALDG-3配伍比例更優。
實施例13利用血栓法測定複方AQ對大白鼠血栓形成的影響實驗藥物本發明凍乾粉針兩組配伍比例(ALDG-3，ALDG-4)生理鹽水丹參注射液實驗動物體重300-400克的SD大白鼠40隻，雌雄各半。隨機分為①空白對照(生理鹽水)，②丹參注射液對照組，③ALDG-3組，④ALDG-4組，⑤磷酸川芎嗪組，⑥阿魏酸鈉組，每組10隻。
實驗方法將大鼠給藥，所有動物給藥體積相同(2ml/100g)，造模前腹腔注射各組藥物，每天給藥1次，共5天。大鼠給藥第5天，末次給藥後1小時後，動物稱重，iv 3％戊巴比妥納1ml/kg麻醉。仰臥位固定，取頸正中切口，分離氣管，分離雙側頸總A，V，在聚乙烯管中穿6cm5個0絲線，以肝素生理鹽水溶液充滿聚乙烯管，當聚乙烯管的一端插入左側頸外靜脈後，由聚乙烯管準確的注入肝素抗凝，再將聚乙烯管另一端插入右側頸動脈，打開動脈夾，造成A-V旁路，開放血流15min，取出矽膠管，抽出絲線(含血栓)，按號置於已稱重的小培養皿中，分析天平稱取血栓溼重，總重量減去絲線重量即得血栓重量。
結果見表5表5各給藥組的血栓重量比較(x±s)
注與生理鹽水對照組比較 **P＜0.01與丹參注射液對照組比較ΔΔP＜0.01說明配AL複方配伍使用後在抗血栓形成、活血作用更強，以ALDG-3配伍比例更優。
權利要求
1.一種用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物，由藥學上可接受的1-10重量份的阿魏酸鹽、1-10重量份川芎嗪鹽和注射用輔料組成，劑型可以是注射液或注射用凍乾粉針。
2.如權力要求1所述的用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物，其特徵是阿魏酸鹽可以是鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、鋅鹽或者鐵鹽。
3.如權力要求2所述的用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組和物，其特徵是川芎嗪鹽可以是鹽酸川芎嗪或磷酸川芎嗪。
4.如權力要求2或3所述的用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物，其特徵是阿魏酸鹽是指阿魏酸鈉，川芎嗪鹽是指磷酸川芎嗪。
5.如權力要求4所述的用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組和物，其特徵是阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪的質量比為(1-5)∶(1-5)。
6.如權力要求5所述的用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組和物，其特徵是阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪的質量比為(1-2)∶(1-3)。
7.如權力要求6所述的用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組和物，其特徵是阿魏酸鈉和磷酸川芎嗪的質量比為2∶1。
8.如權力要求4或7所述的用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物，其特徵是劑型為注射用凍乾粉，注射用輔料可選自甘露醇、山梨醇、氯化鈉、乳糖、右旋糖苷中的一種或幾種。
9.如權力要求8所述的用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物，其特徵是每支凍乾粉含有100mg-160mg的阿魏酸鈉和50mg-80mg的磷酸川芎嗪。
10.如權力要求8所述的用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物，其特徵是注射用輔料包括骨架支撐劑和抗氧劑，骨架支撐劑選用甘露醇，抗氧劑選用半胱氨酸鹽酸鹽。
11.如權力要求1所述的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽藥物組合物的製備方法，該方法包括以下步驟1)取處方量川芎嗪鹽充分溶解於50℃以下注射用水中，調節pH值至5-7，再加入處方量阿魏酸鹽、注射用輔料充分溶解，除菌過濾得濃配液；2)將濃配液補加注射用水至所需體積，用0.05-0.2％的活性炭脫碳後再按注射製劑常規方法製成注射液或注射用粉針劑即得。
12.如權力要求11所述的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽藥物組合物的製備方法，其特徵是阿魏酸鹽是指阿魏酸鈉，川芎嗪鹽是指磷酸川芎嗪。
13.如權力要求11或12所述的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽藥物組合物的製備方法，其特徵是製成濃配液後按凍乾粉常規工藝製成注射用凍乾粉針。
14.如權力要求13所述的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽藥物組合物的製備方法，其特徵是骨架支撐劑甘露醇凍幹前的濃度為8％，半胱氨酸鹽酸鹽凍幹前的濃度為0.1％。
15.如權力要求11所述的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽藥物組合物的製備方法，其特徵是還包括等滲調節劑，可以是氯化鈉或葡萄糖，按該領域內常規工藝製成小水針或大輸液。
16.如權力要求13或15所述的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽藥物組合物的製備方法，其特徵是分裝過程中用氮氣保護。
17.如權力要求1-10所述的任意一種阿魏酸鹽和川芎嗪鹽藥物組合物作為製備治療腦血栓、冠狀動脈硬化、冠心病、心肌缺血、脈管炎等心腦血管疾病中的應用。
全文摘要
一種用於心腦血管疾病的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽的藥物組合物，由藥學上可接受的1－10重量份的阿魏酸鹽、1－10重量份川芎嗪鹽和注射用輔料組成，劑型可以是注射液或注射用凍乾粉針。通過大量試驗我們成功製備了該複方注射製劑，找到了二者複方協同作用範圍，並且確定了二者的最佳比例。我們還提供了該複方藥物組合物的製備方法，所得製劑穩定性高，重現性好。藥理實驗證明本發明製備的阿魏酸鹽和川芎嗪鹽複方注射製劑療效明顯好於單方製劑，無毒性，並且製劑穩定，質量可控。
文檔編號A61P9/00GK1820742SQ20061003428
公開日2006年8月23日 申請日期2006年3月15日 優先權日2006年3月15日
發明者王偉, 劉二偉 申請人:廣東中科藥物研究有限公司