苯並吡喃化合物的新用途的製作方法

2023-10-05 01:48:59

專利名稱：苯並吡喃化合物的新用途的製作方法
技術領域：
本發明涉及苯並吡喃化合物或含至少一種苯並吡喃化合物提取物在製備用於預防或治療C型肝炎產品中的用途。
背景技術：
下面通式1-4代表的苯並吡喃化合物是已知化合物，但有關通式1-4針對C肝生物活性至今未見報導。
C型肝炎病毒(Hepatitis C Virus，HCV)是一種導致C型肝炎的病毒，目前對HCV的治療還沒有很好的方法或藥物。由於HCV的組織培養和方便的動物模型目前還沒有得到解決，因此，目前人們對拮抗HCV產品的尋找可通過確定是否對HCV基因組編碼的NS3絲氨酸蛋白酶產生抑制來進行。即人們選擇HCV NS3絲氨酸蛋白酶作為靶酶進行抗C肝產品的研究和確定。
發明內容本發明人經研究現已發現通式1-4的多羥基-β-D-葡萄糖衍生物或含至少一個通式1-4化合物的提取物在C肝(HCV)NS3絲氨酸蛋白酶上顯示出拮抗活性。
因此，本發明涉及至少一個通式1-4化合物或其藥用鹽在製備用於預
防和/或治療和/或緩解C型肝炎的產品中用途。
本發明還涉及含至少一個通式1-4或其藥用鹽的提取物在製備用於
預防和/或緩解和/或治療C型肝炎的產品中用途。
本發明還涉及用於預防或治療C型肝炎的組合物或產品，其包括至少一種通式1-4化合物或其藥用鹽和載體或賦形劑。
本發明還涉及用於預防或治療C型肝炎的組合物或產品，其包括含至少一種通式1-4化合物或其藥用鹽的提取物和載體或賦形劑。
本發明還涉及預防或治療C型肝炎的方法，其包括給予需要預防或治療的患者預防或治療有效量的至少一種通式1-4的化合物或藥用鹽或含至少一種通式1-4化合物的提取物。
本發明進一步涉及至少一種通式1-4化合物或含至少一種通式1-4化合物的提取物在製備用於抑制HCV NS3絲氨酸蛋白酶的產品中用途。
根據本發明，本發明中所述的藥用鹽並不加以特別限定，舉例講，例如鹽酸鹽、硫酸鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽等無機鹽的加成鹽；醋酸鹽、馬來酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、三氟代醋酸鹽等有機羧酸的加成鹽；甲磺酸鹽、羥基甲磺酸鹽、羥基乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、牛磺酸等有機磺酸加成鹽；三甲胺鹽、三乙胺鹽、吡啶鹽、普魯卡因鹽、吡啶甲基鹽、二環己胺鹽、N，N，-二苄基乙二胺鹽、N-甲基葡糖胺鹽、二乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、三(羥基甲氨基)甲烷鹽、苯乙基苄胺鹽等胺的加成鹽；精氨酸鹽、賴氨酸鹽、絲氨酸鹽、甘氨酸鹽、天門冬氨酸鹽、穀氨酸鹽等胺基酸的加成鹽。
本發明的式1-4化合物或其藥用鹽也包括它們的對映異構體和/或幾何的異構體等立體異構體。
化合物1-4一般的製備方法是使用水、低級脂肪醇類、含水的低級脂肪醇類、芳香族醇類、低級酮類(丙酮等)，含滷素溶劑溶劑以及它們的混合溶劑在0℃左右至沸點範圍內，在減壓、常壓或加壓下對含有式1-4化合物的植物的全草或其部位如根、莖、葉、花等進行提取，可得到含至少一種通式1-4化合物的提取物。對提取物進行各種分離精製法就可得到作為活性物質的通式1-4化合物。
本發明中的通式1-4化合物廣泛存在於許多植物中，舉例講，例如狹葉紅景天(Rhodiolakirilowii，藏文音譯為索羅瑪保)，綠茶。進一步講，通式1-4化合物為已知化合物，其可通過本領域已知方法或文獻中公開的方法製備。舉例講，化合物1-4一般的製備方法是使用水、低級脂肪醇類、含水的低級脂肪醇類、芳香族醇類、低級酮類(丙酮等)，含滷素溶劑溶劑以及它們的混合溶劑在0℃左右至沸點範圍內，在減壓、常壓或加壓下對含有式1-4化合物的植物的全草或其部位如根、莖、葉、花等進行提取，可得到含至少一種通式1-4化合物的提取物。對提取物進行各種分離精製法就可得到作為活性物質式1-4化合物。
具體實施例方式
下面實施例用於進一步說明本發明，但其不意味著對本發明的任何限制。
實施例1
索羅瑪保乾燥粗粉3300g用80％的乙醇在室溫下進行滲漉，將滲漉液合併，40℃下減壓回收溶劑，得到浸膏630g。將浸膏分散在2000ml水中，用石油醚萃取脫脂後，水相依次用氯仿、乙酸乙酯萃取(600ml×5次)，將合併後的乙酸乙酯萃取相40℃下減壓回收溶劑後得到48g萃取物。將此萃取物用柱層析的方法分離精製得到化合物1-4依次為120、150、50、30mg。
乙酸乙酯部分NS3蛋白酶抑制活性IC50(0.05mg/mL)，正丁醇部分NS3蛋白酶抑制活性IC50(0.07mg/mL)，主要成分為3-O-棓醯-表棓兒茶素(2)、3-O-棓醯-表兒茶素-(4→8)3-O-棓醯-表兒茶素(3)、3-O-棓醯-表棓兒茶素-(4→8)3-O-棓醯-表棓兒茶素(4)、2-O-二棓醯基-1，3，4-三棓醯基-β-D-葡萄糖、木犀草素、槲皮素、紅景天苷、紅景天苷元、沒食子酸。
這些主要成分化合物佔乙酸乙酯部分60％以上。這些主要成分化合物佔正丁醇部分60％以上。
實施例2綠茶乾燥粗粉1000g用80％的乙醇在室溫下進行滲漉，將滲漉液合併，40℃下減壓回收溶劑，得到浸膏。將浸膏分散在水中，用石油醚萃取脫脂後，水相依次用氯仿、乙酸乙酯萃取(600ml×5次)，將合併後的乙酸乙酯萃取相40℃下減壓回收溶劑後得到150g萃取物。將此萃取物用柱層析的方法分離精製得到化合物1。
乙酸乙酯部分主要成分為3-O-棓醯-表兒茶素(1)、3-O-棓醯-兒茶素、兒茶素、1，3，6-三棓醯基-β-D-葡萄糖。
這些主要成分化合物佔乙酸乙酯部分50％以上。
化合物1-4的波譜數據化合物1黃色無定形粉末，負離子電噴霧飛行時間質譜ESI-TOF-MS獲得準分子離子峰m/z441[(C22H18O10)-H]-，13C NMR和1H NMR數據見表1和2。鑑定為3-O-棓醯-表兒茶素[13-15]。
化合物2黃色無定形粉末，負離子電噴霧飛行時間質譜ESI-TOF-MS獲得準分子離子峰m/z457[(C22H18O11)-H]-，13C NMR和1H NMR數據見表1和2。鑑定為3-O-棓醯-表棓兒茶素[13-15]。
化合物3黃色無定形粉末，負離子電噴霧飛行時間質譜ESI-TOF-MS獲得準分子離子峰m/z881[(C44H34O20)-H]-，13C NMR和1H NMR數據見表1和2。鑑定為3-O-棓醯-表兒茶素-(4→8)3-O-棓醯-表兒茶素[13-15]。
化合物4黃色無定形粉末，負離子電噴霧飛行時間質譜ESI-TOF-MS獲得準分子離子峰m/z913[(C44H36O20)-H]-，13C NMR和1H NMR數據見表1和2。鑑定為3-O-棓醯-表棓兒茶素-(4→8)3-O-棓醯-表棓兒茶素[13-15]。
表1化合物1-313C NMR數據(δc，CD3OD，ppm，參見式(III))Compound 123C環 c-2 78.6 78.6 76.4c-3 70.0 70.0 69.8c-4 30.7 30.7 34.6A環 c-4a 99.4 99.5 97.1c-5 157.9157.9156.2c-6 96.6 96.6 96.3c-7 157.7157.2156.2c-8 95.9 95.9 96.0c-8a 157.3157.2156.2B環 c-1』 131.5130.8131.8c-2』 115.1106.9115.0c-3』 145.9146.3145.8c-4』 145.9133.8145.5c-5』 116.0146.3116.0c-6』 119.4106.9119.8棓醯基c-1」 121.4121.6121.6c-2」 110.2110.3110.3c-3」 146.3146.7146.2c-4」 139.8139.8139.8c-5」 146.3146.7146.2c-6」 110.2110.3110.3C＝O 167.6167.7167.7表2化合物1-41H NMR數據(δc，CD3OD，ppm，參見式(III))Compound1 2 34C環 H-2 4.95，s 4.85，s 4.87，s 4.86，sH-3 5.51，s 5.51，s 5.45，m 5.54，sH-4 2.82-3.00，m 2.80-3.00，m 3.59，m 3.30，m 3.59，m 330，mA環 H-6 5.95，s 5.95，s 5.83，s 5.95，sH-8 5.95，s 5.95，s 6.03，s 6.05，sB環 H-2』6.68，d 6.49，s 6.53，d 6.39，sH-3』6.79.d 6.73，dH-6』6.81，d 6.49，s 6.92，m 6.52，s棓醯基H-2」，6」 6.93，s 6.94，s 6.98，s 6.98，s

式(III)實施例3式1-4化合物拮抗HCV NS3絲氨酸蛋白酶的活性抗HCV NS3絲氨酸蛋白酶活性測定是本領域用來判斷拮抗C型肝炎的常規實驗，該方法是將包含了NS3蛋白酶基因質粒pMANS34NsH克隆進入JM109細胞，然後進行擴大培養、收集細胞、破碎、離心、收集上清液。通過直鏈澱粉親和柱及金屬螯合柱分離純化得到NS3蛋白酶[11a]。NS3蛋白酶抑制活性測定方法是採用了ELISA方法[11b]。化合物1-4對NS3蛋白酶的活性測定結果如表3所示表3.抗HCV NS3絲氨酸蛋白酶活性

由表3可看到，式1-4化合物分別對NS3蛋白酶有良好的抑制活性。
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權利要求
1.至少一種下面通式1-4的化合物或其藥用鹽或其立體異構體在制 備用於預防和/或治療C型肝炎的產品中用途。
2.至少一種下面通式1-4的化合物或其藥用鹽或其立體異構體在制 備用於抑制HCV NS3絲氨酸蛋白酶的產品中用途。
3.含至少一種通式1-4化合物或其藥用鹽或其立體異構體的提取物在製備用於預防和/或治療C型肝炎的產品中用途。
4.用於預防和/或治療C型肝炎的產品，其包括至少一種通式1-4化合物或含至少一種通式1-4化合物的提取物，及載體或賦形劑。
全文摘要
本發明涉及苯並吡喃化合物或含至少一種苯並吡喃化合物在製備用於預防或治療C型肝炎產品中的用途。
文檔編號A61K31/353GK1704051SQ20041004288
公開日2005年12月7日 申請日期2004年5月28日 優先權日2004年5月28日
發明者徐筱傑, 左國營, 段德良, 李正全, 陳麗蓉 申請人:養生堂有限公司