治療紅細胞增多症的中藥製劑及其製備方法和質控方法

2023-10-04 18:07:59

專利名稱：治療紅細胞增多症的中藥製劑及其製備方法和質控方法
技術領域：
本發明涉及一種治療紅細胞增多症的中藥製劑及其製備方法和質量控制方法，屬於中藥製藥技術領域。
背景技術：
隨著生活節奏的加快，現代生活水平的提高，患有紅細胞增多症的人越來越多。紅細胞增多症是指紅細胞數目、血紅蛋白、紅細胞壓積和血液總容量顯著地超過正常水平，可分為原發性與繼發性兩大類。其中繼發性紅細胞增多症主要是由於組織缺氧所引起的，給患者的正常生活帶來極大的影響。因此，提供一種療效好，無毒副作用，安全性強的治療紅細胞增多症的藥物顯得十分重要。
引起繼發性紅細胞增多症的具體原因有如下幾種1.生理性紅細胞生成素適度增加，如動脈低氧血症(高海拔、慢性肺部疾病、心血管分流、過度肥胖、體位性低氧血症)、血紅蛋白釋放異常(遺傳性高氧親和性血紅蛋白、先天性紅細胞2，3-DPG降低、吸菸者紅細胞增多症)、組織代謝受到幹擾(鈷中毒)等情況；2.生理性紅細胞生成素產生失控，如某些腫瘤疾病、非腫瘤性腎臟疾病(囊腫、腎積水、Bartter症候群、腎移植後)、無明確解剖學病變的自發性紅細胞生成素恆定增加(家族性)、紅細胞生成素基礎水平升高靜脈放血後進一步增加(家族性)等情況；3.服用雄性激素或某些其他皮質類固醇，或體內這些激素生成過多。繼發性紅細胞增多症在中醫理論上屬「血證」範疇，因「氣陰不足、瘀血阻滯」引起，臨床上常表現有頭暈、心悸、胸悶、氣喘、乏力、頭痛等症狀。

發明內容
本發明的目的在於提供一種治療紅細胞增多症的中藥製劑；本發明的另一個目的是提供這種治療紅細胞增多症的中藥製劑的製備方法；本發明的第三個目的在於提供這種治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量控制方法。
本發明所述製劑為口服製劑，具體包括片劑、膠囊劑和顆粒劑。
本發明是這樣構成的按照重量組份計算它由紅景天400-600、枸杞子150-300、沙棘鮮漿30-150和適量輔料製備而成。
具體的說，它由紅景天500g、枸杞子250g、沙棘鮮漿71.5g及適量輔料製備成片劑或顆粒劑。
本發明所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的製備方法為紅景天加8-12倍量60-85％的乙醇回流提取1-5次，合併提取液，回收乙醇後備用；枸杞子加10-12倍量水煎煮1-5次，合併煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮，減壓乾燥，粉碎，加入輔料，混勻，按照常規方法製成不同的製劑。
準確地說，紅景天加8倍量70％乙醇回流提取二次，第一次3小時，第二次2小時，合併提取液，回收乙醇後備用；枸杞子加10倍量水煎煮二次，每次2小時，合併煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至50℃相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓乾燥，粉碎成細粉，加入輔料，混勻，按照常規方法製成不同的製劑。
所述片劑這樣製備紅景天加8倍量70％乙醇回流提取二次，第一次3小時，第二次2小時，合併提取液，回收乙醇後備用；枸杞子加10倍量水煎煮二次，每次2小時，合併煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至50℃相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓乾燥，粉碎成細粉，加入澱粉適量，混勻，以無水乙醇制粒、乾燥、壓製成片，包薄膜衣，即得。
本發明製劑由中藥紅景天、枸杞子和沙棘鮮漿三味藥經加工研製而成。三味藥配伍具有益氣養陰、活血化痰的功能，用於氣陰不足，瘀血阻滯所引起的頭暈，頭痛，心悸，氣喘，乏力，缺氧引起的紅細胞增多症等見上述證候者。方中紅景天為組方君藥，性涼主降，味辛發散，微苦澀，有破堅、消積、活血、養血、破血、改善血液循環的作用；現代藥理研究證明紅景天含有2種不同的超氧化物歧化酶(SOD)同功酶，具有較強的清除氧自由基的能力，具有明確、肯定的抗高原缺氧作用。方中枸杞子有滋補的功效，具有一定的降血脂、血糖作用。沙棘鮮漿有活血化瘀的功效；含有醋柳酮，具有降低血粘度的作用，可改善血液流變學，促進心、腦血液循環。諸藥合用，共奏益氣養陰、活血化痰之效。是一種無毒副作用，安全性強的藥物。
本發明治療紅細胞增多症的片劑、膠囊劑和顆粒劑的質量控制方法為所述質量控制方法主要包括性狀、鑑別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑑別是對製劑中枸杞子的薄層色譜鑑別；含量測定是對製劑中紅景天所含紅景天苷的含量測定。
枸杞子的鑑別方法是以枸杞子對照藥材為對照，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑的薄層色譜法；紅景天中紅景天苷的含量測定方法是以紅景天苷對照品為對照，以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相的高效液相色譜法。
具體的鑑別方法為取片劑1-6g、或膠囊劑的內容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細，加水，超聲處理使溶解，濾過，加乙酸乙酯振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水煮沸，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
更具體的鑑別方法為取片劑1-6g、或膠囊劑的內容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細，加水10-200ml，超聲1-20分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯5-50ml振搖提取，提取液濃縮至0.5-3ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水10-200ml，煮沸5-20分鐘，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
紅景天苷的含量測定方法為照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，即得；供試品溶液的製備取裝量差異項下的本製劑，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本製劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
更具體的含量測定方法為照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，製成每1ml含紅景天苷0.05-1mg的溶液，即得；供試品溶液的製備取裝量差異項下的本製劑，研細，片劑取0.1-1g、膠囊劑取內容物0.1-1g、顆粒劑取1-10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇5-50ml，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5-25μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本製劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
本發明所述質量控制方法包括性狀對於片劑產品為薄膜衣片，除去包衣後顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對於膠囊劑其內容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對於顆粒劑產品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑑別取片劑1-6g、或膠囊劑的內容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細，加水，超聲處理使溶解，濾過，加乙酸乙酯振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水煮沸，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；檢查應符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，即得；供試品溶液的製備取裝量差異項下的本製劑，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本製劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
經研究發現，採用以下質量控制方法將更容易控制這種治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量，更利於保證該製劑的臨床療效。故所述質量控制方法也可包括性狀對於片劑產品為薄膜衣片，除去包衣後顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對於膠囊劑其內容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對於顆粒劑產品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑑別取片劑1-6g、或膠囊劑的內容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細，加水10-200ml，超聲1-20分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯5-50ml振搖提取，提取液濃縮至0.5-3ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水10-200ml，煮沸5-20分鐘，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；檢查應符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，製成每1ml含紅景天苷0.05-1mg的溶液，即得；供試品溶液的製備取裝量差異項下的本製劑，研細，片劑取0.1-1g、膠囊劑取內容物0.1-1g、顆粒劑取1-10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇5-50ml，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5-25μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本製劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
經研究發現，以下質量控制方法為最優選擇，更容易控制本發明治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量，保證其臨床療效。故所述質量控制方法還可以包括性狀對於片劑產品為薄膜衣片，除去包衣後顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；
對於膠囊劑其內容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對於顆粒劑產品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑑別取片劑3.6g、或膠囊劑的內容物2.5g、或顆粒劑10g，研細，加水50ml，超聲5分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯20ml振搖提取，提取液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.5g，加水50ml，煮沸10分鐘，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝3∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；檢查應符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇∶水＝15∶85為流動相；檢測波長為223nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，製成每1ml含紅景天苷0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的製備取裝量差異項下的本製劑，研細，片劑取0.6g、膠囊劑取內容物0.15g、顆粒劑取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理45分鐘，功率250W、頻率33kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液10ml，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，轉移至10ml量瓶中並稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本製劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
申請人對本發明製劑的製備工藝和質量控制方法進行了相關的試驗研究，具體如下實驗例1提取工藝考察1、申請人在產品研究過程中發現，本發明製劑的加水量影響到藥物的出膏率和有效成分的提取率，加水量少時提取物的出膏率低，有效成分的提取率也低，加水量多時提取物的出膏率較高，均會影響藥品的質量。故本發明對製劑的加水量進行考察(1)紅景天醇提時加醇量考察稱取紅景天100g，共稱取3份，分別加70％乙醇6、8、10、12倍量回流提取二次，第一次3小時，第二次2小時，濾過，濾液回收乙醇、濃縮、減壓乾燥、得到紅景天幹膏。測定幹膏中紅景天苷的含量

結果表明，加醇8倍量與10倍量及12倍量提取比較，無明顯差異，從生產實際考慮，最佳加醇量為8倍量。
(2)枸杞子水煎加水量的考察稱取枸杞子100g，共稱3份樣品，分別加水8、10、12倍量煎煮二次，每次2小時，濾過，合併濾液，加水，均稀釋至2500ml，攪拌均勻，各取100ml濃縮，減壓乾燥，計算出膏量，結果見下表。

結果表明，加水10倍量與12倍量出膏總量相差不大，從生產實際考慮，確定加水量為10倍量。
2、乾燥方法的研究稱取紅景天1000g、枸杞子500g、沙棘鮮漿143g，按本發明所述方法提取、混合，濃縮至相對密度為1.05～1.10(50℃)的清膏，分成兩組，每組平均分成4份，其中2份濃縮至1.25～1.30(50℃)減壓乾燥，另2份分別加入24g澱粉，加熱混勻，噴霧乾燥或減壓乾燥，分別測定幹膏得量和紅景天苷的含量。

注噴霧乾燥的幹膏量已減去加入澱粉量。
結果表明，減壓乾燥得到的幹膏量及紅景天苷含量均好於噴霧乾燥，故確定乾燥方法為減壓乾燥，條件為壓力-0.1mpa，溫度60℃，乾燥8小時。
3、稠膏濃縮密度考察將沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液的混合液濃縮成稠膏，當相對密度大於1.35(50℃)時，稠膏流動性差，不便操作，故將其濃縮至相對密度1.30～1.35(50℃)時，備用。
實驗例2紅景天含量測定方法研究1、儀器與試藥1.1儀器Agilent 1100高效液相色譜儀(在線脫氣機、四元泵、自動進樣器、柱溫箱、VWD檢測器)；MILLIPORE Simplicity超純水器；超聲波清洗器(型號SK5200H，功率350W，頻率33kHz，上海科導超聲儀器有限公司)。
1.2試劑甲醇(色譜純，Fisher，批號031123)。
2、系統適用性試驗2.1檢測波長的選擇檢測波長為223nm。
2.2流動相的考察

結果以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；陰性樣品色譜圖在紅景天峰位置處無假陽性峰，紅景天峰和相近的雜質峰分離完全(分離度＞1.5)，最佳流動相為甲醇∶水＝15∶85。
2.3色譜柱的考察在上述流動相條件下，考察以下色譜柱①Kromasil C18色譜柱(5μm，4.6×250mm，北京分析儀器廠，批號22198)；②Hypersil BDS C18色譜柱(5μm，4.6×250mm，ThermoQuest，SN3-18541)；③ZORBAX SB C18(5μm，4.6×250mm，Agilent，SNUSCL014736)。試驗結果表明以上三種色譜柱紅景天苷峰均可達到基線分離，且保留時間較合適，選擇色譜柱③進行試驗。
3、供試品溶液製備方法的考察3.1提取方法的確定取本製劑粉末，稱取供試品2份，每份0.6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入甲醇25ml，稱定重量，分別回流提取1小時和超聲30分鐘，取出，放冷，稱重，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液10ml，蒸乾。殘渣用流動相溶解，轉移至10ml容量瓶中並定容至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，即得。高效液相法測定樣品中紅景天苷的含量，結果見下表。
不同提取方法提取結果

由結果可知，超聲提取對紅景天苷的提取率較高，因此採用超聲提取。
3.2溶劑用量的考察稱取供試品3份，每份0.6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入甲醇15、25、50ml，稱定重量，各超聲處理30分鐘，取出，放冷，稱重，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，分別精密量取續濾液6ml、10ml、20ml，蒸乾。殘渣用流動相溶解，轉移至10ml容量瓶中並定容至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，即得。高效液相法測定樣品中紅景天苷的含量，結果見下表。
溶劑用量考察結果

試驗結果表明溶劑用量達到25ml時，紅景天苷即可提取完全。
3.3超聲時間的選擇稱取供試品3份，每份0.6g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，分別精密加入甲醇25ml，稱定重量，分別超聲處理30分鐘、45分鐘、60分鐘，取出，放冷，稱重，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，各精密量取續濾10ml，蒸乾。殘渣用流動相溶解，轉移至10ml容量瓶中並定容至刻度，搖勻，用0.45μm濾膜濾過，即得。高效液相法測定樣品中紅景天苷的含量，結果見下表。
超聲時間考察結果(n＝2)

由結果可知，超聲提取45分鐘最佳。
4、對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，製成每1ml含紅景天苷0.1mg的溶液，即得。
5、空白試驗取陰性樣品(缺紅景天)，按供試品溶液製備方法製得空白溶液，精密量取空白溶液10μl，注入液相色譜儀，記錄液相圖譜。結果表明，與紅景天苷對照品色譜峰相應的位置上，沒有出現色譜峰，說明陰性無幹擾。
6、線性關係考察精密稱取紅景天苷對照品13.25mg，置50ml量瓶中，加流動相溶解並稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取1ml、2ml、3ml、4ml、5ml、6ml，分別置10ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取上述溶液各10μl注入高效液相色譜儀，記錄峰面積。以進樣量(靏)為橫坐標(X)，峰面積積分值為縱坐標(Y)，進行線性回歸，紅景天苷的回歸方程為Y＝1530.0138X+25.2889，r＝0.9999。擬合為過原點的回歸方程為Y＝1552.0360X，r＝0.9998，將1.590μg代入以上兩個回歸方程，峰面積分別為2458.011、2467.737，相對偏差為0.20％，因此採用一點法計算含量。
紅景天苷含量測定線性關係考察結果

結果表明紅景天苷含量在0.265～1.590μg範圍內，峰面積與進樣量有良好的線性關係。
7、精密度試驗精密吸取紅景天苷濃度為0.106mg/ml的對照品溶液10μl，注入HPLC儀，連續進樣6針，記錄紅景天苷峰面積A值。

結果表明，其精密度良好。
8、穩定性試驗精密吸取供試品溶液各10μl，分別在0、2、4、6、8h進樣測定，記錄紅景天苷的峰面積A值。

結果表明，供試品溶液在8h內穩定。
9、重複性試驗取同一批號的本製劑粉末(批號041012)0.6g，精密稱定，共6份，依上述方法測定本製劑中紅景天苷的含量。

結果表明，本方法重複性試驗符合要求。
10、回收率試驗稱取同一批次樣品(批號041012)6份，每份0.3g，精密稱定，再分別精密添加一定量的紅景天苷對照品，按供試品處理方法提取後測定，按以下公式計算加樣回收率，結果見下表。

加樣回收率試驗結果

結果表明，本方法加樣回收率符合規定。
實驗例3枸杞子薄層鑑別研究供試品溶液製備方法一取本製劑，研細，加水50ml，超聲5分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯20ml振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液。
供試品溶液製備方法二取本製劑，研細，加水50ml，搖勻，濾過，加乙酸乙酯20ml振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液。
展開劑選擇分別以乙酸乙酯、三氯甲烷、甲酸不同比例的混合溶液；以氯仿、乙酸乙酯、甲醇不同比例的混合溶液為展開劑。
對照品溶液的製備取枸杞子對照藥材，加水煮沸10分鐘，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液。
陰性對照溶液的製備取缺枸杞子陰性樣品，按供試品溶液製備方法分別製備陰性對照溶液。
分別吸取上述三種溶液各10μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，分別以不同的展開劑展開，取出，晾乾，紫外光燈(365nm)下檢視，結果如下

結果表明，採用方法一製備供試品溶液，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑對本製劑中枸杞子進行薄層鑑別，結果薄層色譜斑點清晰，分離效果好，重現性好，陰性對照無幹擾。最佳展開劑為乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝3∶2∶1。
實驗例5沙棘鮮漿薄層鑑別研究供試品溶液製備方法取本製劑，研細，置具塞錐形瓶中，加乙醇50ml，加熱回流1小時，放冷，濾過。濾液加鹽酸7ml，在75℃水浴中加熱水解1小時，立即冷卻，將水解液濃縮至約5ml，加水25ml，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合併乙酸乙酯液，蒸乾，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。
展開劑選擇以甲苯、乙酸乙酯、甲酸不同比例的混合溶液為展開劑。
對照品溶液的製備取異鼠李素、槲皮素對照品加甲醇製成每1ml含1mg的混合溶液，作為對照品溶液。
陰性對照溶液的製備取缺沙棘鮮漿陰性樣品，按供試品溶液製備方法分別製備陰性對照溶液。
分別吸取上述供試品溶液、對照品溶液、陰性對照溶液各2μl，分別點於同一含3％醋酸鈉溶液製備的矽膠G薄層板上，分別以不同的展開劑展開，取出，晾乾，噴以三氯化鋁試液，置紫外光(365nm)下檢視，結果如下

試驗表明供試品色譜中在與異鼠李素、槲皮素對照品色譜相應的位置未顯相同顏色的螢光斑點，故本鑑別項目未列入本發明質量標準中。
與現有技術相比，本發明所提供的製劑對紅細胞增多症的療效好，無毒副作用，安全性強，攜帶、服用方便，成本低；本發明質量控制方法精密度高，穩定性好，重現性好，回收率高，提高了該製劑的質量控制標準，可有效保證產品質量，從而確保其臨床療效。
具體實施例方式本發明的實施例1紅景天500g、枸杞子250g、沙棘鮮漿71.5g紅景天加8倍量70％乙醇回流提取2次，第一次3小時，第二次2小時，合併提取液，回收乙醇後備用；枸杞子加10倍量水煎煮2次，每次2小時，合併煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至相對密度為1.30～1.35(50℃)的清膏，減壓乾燥(壓力-0.1mpa，溫度60℃)8小時，粉碎成細粉，加入澱粉適量，混勻，以無水乙醇制粒、乾燥、壓製成1000片，包薄膜衣，即得片劑。
本發明的實施例2紅景天600g、枸杞子150g、沙棘鮮漿150g紅景天加10倍量60％的乙醇回流提取4小時，提取液回收乙醇後備用；枸杞子加12倍量水煎煮3小時，煎液濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至相對密度為1.30～1.35(50℃)的清膏，減壓乾燥，粉碎成細粉，加入澱粉適量，混勻，以無水乙醇制粒、乾燥、壓製成1000片，包薄膜衣，即得片劑。
本發明的實施例3紅景天600g、枸杞子300g、沙棘鮮漿150g
紅景天加12倍量85％的乙醇回流提取5次，合併提取液，回收乙醇後備用；枸杞子加12倍量水煎煮5次，合併煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮，減壓乾燥，粉碎，加入糊精和木糖醇，混勻，以85％乙醇製成顆粒，85℃乾燥，整粒，分裝，即得顆粒劑。
本發明的實施例4紅景天400g、枸杞子150g、沙棘鮮漿30g紅景天加10倍量70％的乙醇回流提取2次，第一次3小時，第二次2小時，合併提取液，回收乙醇後備用；枸杞子加11倍量水煎煮2次，每次2小時，合併煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至相對密度為1.05～1.10(50℃)的清膏，加入澱粉，加熱混勻，噴霧乾燥(70-90℃)，加入澱粉，混勻，裝入膠囊，即得膠囊劑。
本發明的實施例5本發明治療紅細胞增多症的片劑的質量控制方法包括性狀產品為薄膜衣片，除去包衣後顯淺褐色至褐色；氣微，味淡。
鑑別取片劑3.6g，研細，加水50ml，超聲5分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯20ml振搖提取，提取液濃縮至1ml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.5g，加水50ml，煮沸10分鐘，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液。照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝3∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
檢查應符合中國藥典片劑項下有關的各項規定。
含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇∶水＝15∶85為流動相；檢測波長為223nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000。
對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，製成每1ml含紅景天苷0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的製備取裝量差異項下的片劑0.6g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理45分鐘，功率250W、頻率33kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液10ml，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，轉移至10ml量瓶中並稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得。
本發明片劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g。
本發明的實施例6本發明治療紅細胞增多症的膠囊劑的質量控制方法包括性狀其內容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡。
鑑別取膠囊劑的內容物1g，研細，加水10ml，超聲1分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯5ml振搖提取，提取液濃縮至0.5ml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.1g，加水10ml，煮沸5分鐘，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液。照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1∶10∶0.5為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
檢查應符合中國藥典膠囊劑項下有關的各項規定。
含量測定紅景天苷 照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗色譜柱為C4柱；以乙睛∶水＝1∶9為流動相；檢測波長為200nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000。
對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，製成每1ml含紅景天苷0.05mg的溶液，即得。
供試品溶液的製備取裝量差異項下的膠囊劑內容物0.1g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇5ml，密塞，稱定重量，超聲處理10分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得。
本發明膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g。
本發明的實施例7本發明治療紅細胞增多症的顆粒劑的質量控制方法包括性狀產品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡。
鑑別取顆粒劑20g，研細，加水200ml，超聲20分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯50ml振搖提取，提取液濃縮至3ml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材1g，加水200ml，煮沸20分鐘，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液。照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各25μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝10∶0.5∶5為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
檢查應符合中國藥典顆粒劑項下有關的各項規定。
含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗色譜柱為C8柱；以甲醇∶水＝9∶1為流動相；檢測波長為500nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000。
對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，製成每1ml含紅景天苷1mg的溶液，即得。
供試品溶液的製備取裝量差異項下的顆粒劑10g，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，超聲處理100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各25μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得。
本發明顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
本發明的實施例8本發明所述質量控制方法可以包括性狀對於片劑產品為薄膜衣片，除去包衣後顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對於膠囊劑其內容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對於顆粒劑產品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡。
鑑別取片劑1g、或膠囊劑的內容物2.5g、或顆粒劑10g，研細，加水100ml，超聲10分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯30ml振搖提取，提取液濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取枸杞子對照藥材0.8g，加水100ml，煮沸15分鐘，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液。照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各20μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝2∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
檢查應符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關的各項規定。
本發明的實施例9所述質量控制方法可以包括性狀對於片劑產品為薄膜衣片，除去包衣後顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對於膠囊劑其內容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對於顆粒劑產品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡。
檢查應符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關的各項規定。
含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗色譜柱為C18柱；以乙睛∶水80∶20為流動相；檢測波長為365nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000。
對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，製成每1ml含紅景天苷0.5mg的溶液，即得。
供試品溶液的製備取裝量差異項下的本製劑，研細，片劑取1g、膠囊劑取內容物0.15g、顆粒劑取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇35ml，密塞，稱定重量，超聲處理60分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得。
本製劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
權利要求
1.一種治療紅細胞增多症的中藥製劑，其特徵在於按照重量組份計算它由紅景天400-600、枸杞子150-300、沙棘鮮漿30-150和適量輔料製備而成。
2.按照權利要求1所述治療紅細胞增多症的中藥製劑，其特徵在於它由紅景天500g、枸杞子250g、沙棘鮮漿71.5g及適量輔料製備成片劑或顆粒劑。
3.如權利要求1或2所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的製備方法，其特徵在於紅景天加8-12倍量60-85％的乙醇回流提取1-5次，合併提取液，回收乙醇後備用；枸杞子加10-12倍量水煎煮1-5次，合併煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮，減壓乾燥，粉碎，加入輔料，混勻，按照常規方法製成不同的製劑。
4.按照權利要求3所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的製備方法，其特徵在於紅景天加8倍量70％乙醇回流提取二次，第一次3小時，第二次2小時，合併提取液，回收乙醇後備用；枸杞子加10倍量水煎煮二次，每次2小時，合併煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至50℃相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓乾燥，粉碎成細粉，加入輔料，混勻，按照常規方法製成不同的製劑。
5.按照權利要求3或4所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的製備方法，其特徵在於片劑這樣製備紅景天加8倍量70％乙醇回流提取二次，第一次3小時，第二次2小時，合併提取液，回收乙醇後備用；枸杞子加10倍量水煎煮二次，每次2小時，合併煎液，濾過，濾液備用；沙棘鮮漿與上述醇提液和水煎液混合，濃縮至50℃相對密度為1.30～1.35的清膏，減壓乾燥，粉碎成細粉，加入澱粉適量，混勻，以無水乙醇制粒、乾燥、壓製成片，包薄膜衣，即得。
6.一種治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量控制方法，所述製劑包括片劑、膠囊劑和顆粒劑，其特徵在於所述質量控制方法主要包括性狀、鑑別、檢查以及含量測定項目中的部分或全部；其中鑑別是對製劑中枸杞子的薄層色譜鑑別；含量測定是對製劑中紅景天所含紅景天苷的含量測定。
7.按照權利要求6所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量控制方法，其特徵在於枸杞子的鑑別方法是以枸杞子對照藥材為對照，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑的薄層色譜法；紅景天中紅景天苷的含量測定方法是以紅景天苷對照品為對照，以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相的高效液相色譜法。
8.按照權利要求6或7所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量控制方法，其特徵在於具體的鑑別方法為取片劑1-6g、或膠囊劑的內容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細，加水，超聲處理使溶解，濾過，加乙酸乙酯振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水煮沸，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
9.按照權利要求8所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量控制方法，其特徵在於更具體的鑑別方法為取片劑1-6g、或膠囊劑的內容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細，加水10-200ml，超聲1-20分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯5-50ml振搖提取，提取液濃縮至0.5-3ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水10-200ml，煮沸5-20分鐘，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點。
10.按照權利要求6或7所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量控制方法，其特徵在於紅景天苷的含量測定方法為照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，即得；供試品溶液的製備取裝量差異項下的本製劑，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本製劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
11.按照權利要求10所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量控制方法，其特徵在於更具體的含量測定方法為照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，製成每1ml含紅景天苷0.05-1mg的溶液，即得；供試品溶液的製備取裝量差異項下的本製劑，研細，片劑取0.1-1g、膠囊劑取內容物0.1-1g、顆粒劑取1-10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇5-50ml，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5-25μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本製劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
12.按照權利要求6所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量控制方法，其特徵在於所述質量控制方法包括性狀對於片劑產品為薄膜衣片，除去包衣後顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對於膠囊劑其內容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對於顆粒劑產品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑑別取片劑1-6g、或膠囊劑的內容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細，加水，超聲處理使溶解，濾過，加乙酸乙酯振搖提取，提取液濃縮，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水煮沸，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；檢查應符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，即得；供試品溶液的製備取裝量差異項下的本製劑，研細，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本製劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
13.按照權利要求6或12所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量控制方法，其特徵在於所述質量控制方法包括性狀對於片劑產品為薄膜衣片，除去包衣後顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對於膠囊劑其內容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對於顆粒劑產品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑑別取片劑1-6g、或膠囊劑的內容物1-6g、或顆粒劑5-20g，研細，加水10-200ml，超聲1-20分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯5-50ml振搖提取，提取液濃縮至0.5-3ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.1-1g，加水10-200ml，煮沸5-20分鐘，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5-25μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝1-10∶0.5-10∶0.5-5為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；檢查應符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗色譜柱為C18或C4或C8柱；以甲醇或乙睛∶水＝1-9∶9-1為流動相；檢測波長為200-500nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，製成每1ml含紅景天苷0.05-1mg的溶液，即得；供試品溶液的製備取裝量差異項下的本製劑，研細，片劑取0.1-1g、膠囊劑取內容物0.1-1g、顆粒劑取1-10g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇5-50ml，密塞，稱定重量，超聲處理10-100分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各5-25μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本製劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
14.按照權利要求13所述治療紅細胞增多症的中藥製劑的質量控制方法，其特徵在於所述質量控制方法包括性狀對於片劑產品為薄膜衣片，除去包衣後顯淺褐色至褐色；氣微，味淡；對於膠囊劑其內容物為淺褐色的粉末；氣微，味淡；對於顆粒劑產品為淺褐色至褐色的顆粒；氣微，味淡；鑑別取片劑3.6g、或膠囊劑的內容物2.5g、或顆粒劑10g，研細，加水50ml，超聲5分鐘使溶解，濾過，加乙酸乙酯20ml振搖提取，提取液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取枸杞子對照藥材0.5g，加水50ml，煮沸10分鐘，放冷，濾過，濾液同法製成對照藥材液；照中國藥典薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點於同一矽膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶三氯甲烷∶甲酸＝3∶2∶1為展開劑，展開，取出，晾乾，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的螢光斑點；檢查應符合中國藥典片劑、膠囊劑或顆粒劑項下有關的各項規定；含量測定紅景天苷照中國藥典高效液相色譜法測定色譜條件與系統適用性試驗以十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；以甲醇∶水＝15∶85為流動相；檢測波長為223nm；理論板數按紅景天苷峰計算應不低於2000；對照品溶液的製備精密稱取紅景天苷對照品適量，加流動相溶解，製成每1ml含紅景天苷0.1mg的溶液，即得；供試品溶液的製備取裝量差異項下的本製劑，研細，片劑取0.6g、膠囊劑取內容物0.15g、顆粒劑取3g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理45分鐘，功率250W、頻率33kHz，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續濾液10ml，蒸乾；殘渣加流動相使溶解，轉移至10ml量瓶中並稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入高效液相色譜儀，測定，即得；本製劑中，片劑含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於3mg/g；膠囊劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於4mg/g；顆粒劑中含紅景天以紅景天苷C14H20O7計，不得少於0.3mg/g。
全文摘要
本發明提供了一種治療紅細胞增多症的中藥製劑及其製備方法和質量控制方法，按照重量組份計算它由紅景天400－600、枸杞子150－300、沙棘鮮漿30－150和適量輔料製備而成。與現有技術相比，本發明所提供的製劑對紅細胞增多症的療效好，無毒副作用，安全性強，攜帶、服用方便，成本低；本發明質量控制方法精密度高，穩定性好，重現性好，回收率高，提高了該製劑的質量控制標準，可有效保證產品質量，從而確保其臨床療效。
文檔編號G01N30/90GK1994398SQ20061020145
公開日2007年7月11日 申請日期2006年12月29日 優先權日2006年12月29日
發明者葉湘武, 簡高華, 陳孜孜 申請人:貴州益佰製藥股份有限公司