包含水難溶性藥劑和抗微生物劑的組合物的製作方法

2023-10-07 07:11:19 4

包含水難溶性藥劑和抗微生物劑的組合物的製作方法
【專利摘要】本發明提供包含水難溶性藥劑、載體蛋白、和抗微生物劑的組合物，其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。組合物中抗微生物劑的量可以處於引起毒理效應的水平以下或者處於可能的副作用可以被控制或耐受的水平。也提供包含水難溶性藥劑、載體蛋白、糖、和任選地抗微生物劑的組合物。也提供使用所述組合物的方法。
【專利說明】包含水難溶性藥劑和抗微生物劑的組合物
[0001] 本申請是分案申請，原申請的申請日為2006年8月30日、申請號為 200680038771. 3 (PCT/US2006/033931)、發明名稱為"包含水難溶性藥劑和抗微生物劑的組 合物"。
[0002] 相關申請的交叉參考
[0003] 本申請要求2005年8月31日提交的美國臨時申請60/712,865號、2005年11 月14日提交的美國臨時申請60/736, 962號和2005年11月14日提交的美國臨時申請 60/736,931號的優先權權益，所述申請在此引入其全部內容作為參考。

【技術領域】
[0004] 本申請涉及組合物，其包含用於腸胃外或其它用途的、與蛋白質結合的水難溶性 藥劑（protein-associated poorly water soluble pharmaceutical agents),其進一步包 含抗微生物劑。

【背景技術】
[0005] 許多用於腸胃外使用的藥物，尤其是那些靜脈內施用的藥物，引起不需要的副作 用。這些藥物常常是水不溶性的，並且因此用增溶劑、表面活性劑、溶劑、和/或乳化劑來 製備，所述增溶劑、表面活性劑、溶劑、和/或乳化劑在被施用給患者時可能是刺激性的、過 敏性的或毒性的（見，如，Briggs 等，Anesthesis37:1099 (1982);和 Waugh 等，Am. J. Hosp. Pharmacists, 48:1520(1991))。例如，化療藥物紫杉醇（paclitaxel)對卵巢癌、乳腺癌、 肺癌、食道癌和頭頸部癌症是有效的。然而，已經顯示，紫杉醇導致與施用有關的毒性，以 及顯著的急性和累積毒性，如骨髓抑制、粒細胞缺乏性發熱、過敏性反應和周圍神經病。紫 杉醇是非常難溶於水的，其結果是，實際上不能用水配製進行靜脈內（IV)施用。傳統上， 在含有聚氧乙基化蓖麻油（克列莫佛MCremophor)作為主要溶劑和高濃度乙醇作為助溶 劑的溶液中配製紫杉醇用於IV施用。克列莫佛與副作用有關，所述副作用可能是嚴重的， 包括過敏反應和需要用皮質類固醇、抗組胺劑和H 2受體阻滯劑預處理的其它超敏反應（參 見，例如，Gelderblom 等，Eur.J. of Cancer, 37:1590-1598, (2001))。類似地，多西紫杉醇 (docetaxel)被用於蒽環類抗生素抗性乳腺癌的治療，但是其也被顯示誘發超敏反應副作 用和可能嚴重的液體瀦留。
[0006] 為了防止與藥物製劑施用有關的副作用相關的問題，開發了替代性製劑 (formulations)。例如，Abraxane?是不含克列莫佛的、蛋白質穩定化的紫杉醇製劑，其被 開發以減輕由克列莫佛EL/乙醇製劑引起的副作用或使該副作用減到最少。類似的含蛋白 質的製劑也已經被開發用於其他紫杉烷類如多西紫杉醇和ortataxel，以及其它藥物。
[0007] 因為蛋白質是微生物生長的良好基質，當使用這些含有蛋白質的製劑時，遇到的 一個主要挑戰是可能的微生物汙染。例如，為了將微生物汙染的風險降到最低，目前的 Abraxane?靜脈製劑以凍幹的形式貯存，並且應該在其於水介質中重建之後立即被注射 (如，在數小時之內）。細菌生長可能是由於在含有單次劑量的容器中的不慎汙染。當需要 從容器中取出多次劑量時，細菌汙染甚至更是問題。
[0008] 抗菌劑如EDTA、噴替酸鹽（pentetate)、或含有亞硫酸鹽的藥劑通常是已知 的並且被用於藥物組合物中。參見，如美國專利第5, 714, 520、5, 731，355、5, 731，356、 6, 028, 108、6, 100, 302、6, 147, 122、6, 177, 477、6, 399, 087、和 6, 469, 069 號，國際專利申請 TO 99/39696號，和美國專利公布第20050004002號。然而，許多抗菌劑是相當有毒的。例 如，對於兒童群體和普通群體中對硫過敏的那些個體，向藥物製劑加入亞硫酸鹽出現可能 的不利影響。參見，如，Baker 等，Anesthesiology, 103 (4) :1_17 (2005) ;Mirejovsky, Am. J. Health Syst.Pharm. ,58:1047(2001)。在製備含有蛋白質的藥物組合物時，這些抗菌劑 的毒性成為明顯的問題，為了對抗其中明顯的微生物生長，經常需要比不含蛋白質的製劑 更多的抗微生物劑。
[0009] 此外，已經知道許多抗微生物劑與蛋白質相互作用並且引起穩定性問題，如聚集。 參見，如Lam等，Pharm. Res. 14:725-729 (1997)。抗微生物劑對蛋白質穩定性的影響為製備 水難溶性藥劑的含蛋白質組合物帶來了困難的問題，因為通常需要適當的蛋白質構型來穩 定組合物中的水難溶性藥劑。
[0010] 因此，需要開發水難溶性藥劑的含蛋白質製劑，其包含提供期望的抗菌效力、但不 顯著影響蛋白質穩定性和/或在施用時不引起無法接受的毒理作用的抗微生物劑。也需要 開發能夠被更容易地重建的水難溶性藥劑的含蛋白質製劑。
[0011] 本文引用的所有出版物、專利、專利申請和公開的專利申請的公開內容，在此通過 引用其全部內容作為參考。
[0012] 發明概述
[0013] 本發明提供組合物（如藥物組合物），其包括水難溶性藥劑、載體蛋白（如白蛋白， 例如，人血清白蛋白（HSA))、和抗微生物劑，其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。在 一些實施方式中，組合物中顯著的微生物生長被抑制，所述抑制持續指定的時期，如至少大 約4小時（包括例如，至少大約下列任意：8、12、16、24、36、48、60、72、84、96、108、或120小 時）。在一些實施方式中，與不包含抗微生物劑的組合物相比,所述組合物對微生物汙染的 易感性低。在一些實施方式中，本發明的組合物包括水難溶性藥劑、載體蛋白（如白蛋白， 例如HAS)、和抗微生物劑，其中抗微生物劑的量有效抑制組合物（一種或多種）中顯著的微 生物生長。
[0014] 在一些實施方式中，水難溶性藥劑是抗腫瘤劑或化療劑。在一些實施方式 中，水難溶性藥劑是下列中的任意（在一些實施方式中，選自）：紫杉醇、多西紫杉醇、 ortataxel或其它紫杉燒類、格爾德黴素、17-烯丙基氨基格爾德黴素（17-allyl amino geldanamycin)、硫代秋水仙鹼（thiocolchicine)和其二聚體、雷帕黴素（rapamycin)、環 孢菌素（cyclosporine)、埃坡黴素（epothilone)、根赤殼菌素（radicicol)、和考布他汀 (combretastatin)。例如，在一些實施方式中，提供組合物，其包括紫杉燒或其衍生物（如 紫杉醇、多西紫杉醇、或ortataxel)、載體蛋白（如白蛋白，例如HSA)、和抗微生物劑，其中， 組合物中顯著的微生物生長被抑制。在一些實施方式中，提供組合物，其包括紫杉烷或其衍 生物，（如紫杉醇、多西紫杉醇、或ortataxel)、載體蛋白（如白蛋白，例如HSA)、和抗微生 物劑，其中，抗微生物劑的量有效抑制組合物中顯著的微生物生長。在一些實施方式中，水 難溶性藥劑是無定形的和/或非結晶的紫杉烷（如紫杉醇）。在一些實施方式中，用於製備 組合物的水難溶性藥劑是無水形式（如無水多西紫杉醇）。在一些實施方式中，抗微生物劑 不是去鐵胺（即，除了去鐵胺）。
[0015] 在一些實施方式中，提供包含水難溶性藥劑、載體蛋白（如白蛋白，例如HSA)、和 抗微生物劑的組合物，其中抗微生物劑是螯合劑，並且其中組合物中顯著的微生物生長被 抑制。在一些實施方式中，提供組合物，其包括紫杉烷或其衍生物（如紫杉醇、多西紫杉醇、 或ortataxel)、載體蛋白（如白蛋白，例如HSA)、和抗微生物劑，其中抗微生物劑是螯合劑， 並且其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。在一些實施方式中，抗微生物劑是多齒螯合 劑（polydentate chelating agent)。在一些實施方式中，抗微生物劑包含一種或多種羧 酸基團。在一些實施方式中，螯合劑不是去鐵胺（即，除了去鐵胺）。在一些實施方式中， 螯合劑是下列任意（並且在一些實施方式中，選自）：乙二胺四乙酸鹽、檸檬酸鹽、噴替酸鹽 (pentetate)、氨基丁三醇、山梨酸酯、抗壞血酸、其衍生物、和其混合物。在一些實施方式 中，螯合劑包括檸檬酸鹽和EDTA (乙二胺四乙酸）。
[0016] 在一些實施方式中，提供包含水難溶性藥劑、載體蛋白（如白蛋白，例如HSA)、和 抗微生物劑的組合物，其中抗微生物劑是非螯合劑，並且其中組合物中顯著的微生物生長 被抑制。在一些實施方式中，提供組合物，其包括紫杉烷或其衍生物（如紫杉醇、多西紫杉 醇、或ortataxel)、載體蛋白（如白蛋白，例如HSA)、和抗微生物劑，其中抗微生物劑是非螯 合劑，並且其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。在一些實施方式中，非螯合抗微生物 劑起助氧化劑（pro-oxidant)的作用。在一些實施方式中，非螯合抗微生物劑起抗氧化劑 的作用。在一些實施方式中，非螯合劑是下列中的任意（並且在一些實施方式中，選自）： 亞硫酸鹽、苯甲酸、苯甲醇、氯代丁醇、對羥基苯甲酸酯、和其衍生物。
[0017] 在一些實施方式中，組合物包含水難溶性藥劑、白蛋白、和抗微生物劑，其中組合 物中白蛋白與水難溶性藥劑的重量比是大約〇. 01 :1至大約100 :1，並且其中組合物中顯著 的微生物生長被抑制。在一些實施方式中，組合物包含水難溶性藥劑、白蛋白、和抗微生物 齊IJ，其中組合物中白蛋白與水難溶性藥劑的重量比是大約18 :1或以下（包括，例如，大約 1 :1至大約18 :1、大約2 :1至大約15 :1、大約3 :1至大約12 :1、大約4 :1至大約10 :1、大約 5 :1至大約9 :1、和大約9 :1中的任意），並且其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。在 一些實施方式中，組合物包括紫杉烷或其衍生物（如紫杉醇、多西紫杉醇、或ortataxel)、 白蛋白、和抗微生物劑，其中組合物中白蛋白與紫杉烷或其衍生物的重量比是大約18 :1或 以下（包括例如，大約1 :1至大約18 :1、大約2 :1至大約15 :1、大約3 :1至大約12 :1、大 約4 :1至大約10 :1、大約5 :1至大約9 :1、和大約9 :1中的任意），並且其中組合物中顯著 的微生物生長被抑制。在一些實施方式中，水難溶性藥劑（如紫杉烷或其衍生物）被白蛋白 包覆。在一些實施方式中，抗微生物劑是螯合劑，如下列中的任意（在一些實施方式中，選 自） ：乙二胺四乙酸鹽、檸檬酸鹽、噴替酸鹽、氨基丁三醇、山梨酸酯、抗壞血酸、其衍生物、 和其混合物。在一些實施方式中，螯合劑不是去鐵胺（即，除了去鐵胺）。在一些實施方式 中，抗微生物劑是非螯合劑，如下列中的任意（在一些實施方式中，選自）：亞硫酸鹽、苯甲 酸、苯甲醇、氯代丁醇、對羥基苯甲酸酯、其衍生物、和其混合物。在一些實施方式中，組合物 進一步包括糖（如本文描述的糖）。
[0018] 在一些實施方式中，組合物包括與蛋白質結合的（protein-associated)水難溶 性藥劑和抗微生物劑，其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。在一些實施方式中，組合物 包括與蛋白質結合的紫杉烷或其衍生物（如與蛋白質結合的紫杉醇、與蛋白質結合的多西 紫杉醇、或與蛋白質結合的ortataxel)和抗微生物劑，其中組合物中顯著的微生物生長被 抑制。在一些實施方式中，抗微生物劑是螯合劑，如下列中的任意（並且在一些實施方式 中，選自） ：乙二胺四乙酸鹽、檸檬酸鹽、噴替酸鹽、氨基丁三醇、山梨酸酯、抗壞血酸、其衍 生物、和其混合物。在一些實施方式中，螯合劑不是去鐵胺（即，除了去鐵胺）。在一些實施 方式中，抗微生物劑是非螯合劑，如下列中的任意（在一些實施方式中，選自）亞硫酸鹽、苯 甲酸、苯甲醇、氯代丁醇、對羥基苯甲酸酯、其衍生物、和其混合物。
[0019] 在一些實施方式中，蛋白質/藥劑是顆粒形式，其在各種實施方式中可以具有如 本文所述的平均直徑。
[0020] 在一些實施方式中，組合物包括（1)顆粒（如納米顆粒），其包括（在多種實施方 式中，由其組成或基本上由其組成）：水難溶性藥劑和載體蛋白；和（2)抗微生物劑，其中組 合物中顯著的微生物生長被抑制。在一些實施方式中，水難溶性藥劑被載體蛋白所包覆。在 一些實施方式中，組合物包括顆粒（如納米顆粒），所述顆粒包括（在多種實施方式中，由其 組成或基本上由其組成）：（1)紫杉烷或其衍生物（如紫杉醇、多西紫杉醇、或ortataxel) 和載體蛋白；和（2)抗微生物劑，其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。在一些實施方式 中，紫杉烷或其衍生物被載體蛋白包覆。在一些實施方式中，抗微生物劑是螯合劑，如下列 中的任意（並且在一些實施方式中，選自）：乙二胺四乙酸鹽、檸檬酸鹽、噴替酸鹽、氨基丁 三醇、山梨酸酯、抗壞血酸、其衍生物、和其混合物。在一些實施方式中，螯合劑不是去鐵胺 (即，除了去鐵胺）。在一些實施方式中，抗微生物劑是非螯合劑，如下列中的任意（在一些 實施方式中，選自）：亞硫酸鹽或其衍生物、苯甲酸、苯甲醇、氯代丁醇、對羥基苯甲酸酯、其 衍生物、和其混合物。
[0021] 在一些實施方式中，組合物包括：（1)顆粒（如納米顆粒），其包括（在多種實施方 式中，由其組成或基本上由其組成）水難溶性藥劑和白蛋白；和（2)抗微生物劑，其中組合 物中白蛋白與水難溶性藥劑的重量比是大約〇. 01:1至大約100 :1，並且其中組合物中顯著 的微生物生長被抑制。在一些實施方式中，組合物包括：（1)顆粒（如納米顆粒），其包括 (在多種實施方式中，由其組成或基本上由其組成）水難溶性藥劑和白蛋白；和（2)抗微生 物劑，其中組合物中白蛋白與水難溶性藥劑的重量比是大約18 :1或以下（包括例如，大約 1:1至大約18:1、大約2:1至大約15:1、大約3:1至大約12:1、大約4:1至大約10:1、大約 5:1至大約9:1、和大約9:1中的任意），並且其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。在 一些實施方式中，組合物包括（如由其組成或基本上由其組成）：（1)顆粒（如納米顆粒）， 其包括紫杉烷或其衍生物（如紫杉醇、多西紫杉醇、或ortataxel)和白蛋白；和（2)抗微生 物劑，其中組合物中白蛋白與紫杉烷或其衍生物的重量比是大約18 :1或以下（包括例如， 大約1:1至大約18:1、大約2:1至大約15:1、大約3:1至大約12:1、大約4:1至大約10:1、 大約5:1至大約9:1、和大約9:1中的任意），並且其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。 在一些實施方式中，水難溶性藥劑（如紫杉烷或其衍生物）被白蛋白包覆。在一些實施方 式中，抗微生物劑是螯合劑，如下列中的任意（在一些實施方式中，選自） ：乙二胺四乙酸 鹽、檸檬酸鹽、噴替酸鹽、氨基丁三醇、山梨酸酯、抗壞血酸、其衍生物、和其混合物。在一些 實施方式中，螯合劑不是去鐵胺（即，除了去鐵胺）。在一些實施方式中，螯合劑不是檸檬 酸鹽（即，除了檸檬酸鹽）。在一些實施方式中，抗微生物劑是非螯合劑，如下列中的任意 (在一些實施方式中，選自）：亞硫酸鹽、苯甲酸、苯甲醇、氯代丁醇、對羥基苯甲酸酯、其衍 生物、和其混合物。在一些實施方式中，組合物進一步包含糖（如本文描述的糖）。在一些 實施方式中，水難溶性藥劑是多西紫杉醇或其衍生物。
[0022] 在一些實施方式中，組合物包括：（1)顆粒（如納米顆粒），其包括（在多種實施方 式中，由其組成或基本上由其組成）紫杉醇和白蛋白；和（2)抗微生物劑，其中組合物中白 蛋白與紫杉醇的重量比（w/w)是大約〇.〇1 :1至大約1〇〇:1，並且其中組合物中顯著的微生 物生長被抑制。在一些實施方式中，組合物包括：（1)顆粒（如納米顆粒），其包括（在多種 實施方式中，由其組成或基本上由其組成）紫杉醇和白蛋白；和（2)抗微生物劑，其中白蛋 白與紫杉醇的重量比（w/w)是大約18 :1或以下（包括例如，大約1:1至大約18:1、大約2:1 至大約15:1、大約3:1至大約12:1、大約4:1至大約10:1、大約5:1至大約9:1、和大約9:1 中的任意），並且其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。在一些實施方式中，白蛋白與紫 杉醇的重量比是大約下列任意：18 :1或以下、15 :1或以下、14 :1或以下、13 :1或以下、12 : 1或以下、11 :1或以下、10 :1或以下、9 :1或以下、8 :1或以下、7 :1或以下、6 :1或以下、5 :1 或以下、4 :1或以下、和3 :1或以下。在一些實施方式中，紫杉醇被白蛋白包覆。在一些實施 方式中，組合物基本上不含（如不含）克列莫佛。在一些實施方式中，組合物包括含有紫杉 醇和白蛋白（如包覆有白蛋白的紫杉醇顆粒）的顆粒（如納米顆粒）的穩定水懸浮液，其 中組合物進一步包括抗微生物劑，其中組合物中白蛋白和紫杉醇的重量比是大約9:1或以 下，並且其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。在一些實施方式中，組合物包括幹（如 凍幹的）組合物，其可以被重建（或重懸或再水化）以形成通常穩定的包含紫杉醇和白蛋 白（如被白蛋白包覆的紫杉醇）的顆粒（如納米顆粒）的水懸浮液，其中組合物進一步包 括抗微生物劑，其中組合物中白蛋白和紫杉醇的重量比是大約18:1或以下（包括例如，大 約1:1至大約18:1、大約2:1至大約15:1、大約3:1至大約12:1、大約4:1至大約10:1，大 約5:1至大約9:1、和大約9:1中的任意），並且其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。在 一些實施方式中，抗微生物劑是螯合劑，如下列中的任意（並且在一些實施方式中，選自） ： 乙二胺四乙酸鹽、檸檬酸鹽、噴替酸鹽、氨基丁三醇、山梨酸酯、抗壞血酸、其衍生物、和其混 合物。在一些實施方式中，螯合劑不是去鐵胺（即，除了去鐵胺）。在一些實施方式中，抗微 生物劑是非螯合劑，如下列中的任意（在一些實施方式中，選自）：亞硫酸鹽或其衍生物、 苯甲酸、苯甲醇、氯代丁醇、對羥基苯甲酸酯、其衍生物、和其混合物。在一些實施方式中，組 合物進一步包括糖（如本文中所述的糖）。
[0023] 在一些實施方式中，本文所描述的顆粒（如納米顆粒）具有不大於大約下列任意 的平均直徑（average diameter)或直徑均值（mean diameter) :1000、900、800、700、600、 500、400、300、200、和100納米（11111)。在一些實施方式中，顆粒的平均直徑或直徑均值不大 於大約200納米。在一些實施方式中，顆粒的平均直徑或直徑均值在大約20納米至大約 400納米之間。在一些實施方式中，顆粒的平均直徑或直徑均值在大約40納米至大約200 納米之間。在一些實施方式中，顆粒是無菌可濾過的。
[0024] 在一些實施方式中，組合物包括水難溶性藥劑（如紫杉烷或其衍生物）、載體蛋白 (如白蛋白）、和抗微生物劑--其量可有效抑制組合物中顯著的微生物生長。在一些實 施方式中，組合物包括水難溶性藥劑（如紫杉烷或其衍生物）、載體蛋白（如白蛋白）-- 其量可有效穩定水介質中的水難溶性藥劑、和抗微生物劑--其量可有效抑制組合物中顯 著的微生物生長。在一些實施方式中，組合物包括水難溶性藥劑（如紫杉烷或其衍生物）、 載體蛋白（如白蛋白）一其量可有效減少人體中施用水難溶性藥劑的一種或更多種副作 用、和抗微生物劑一其量可有效抑制組合物中顯著的微生物生長。在一些實施方式中，抗 微生物劑是螯合劑，如下列中的任意（並且在一些實施方式中，選自）：乙二胺四乙酸鹽、檸 檬酸鹽、噴替酸鹽、氨基丁三醇、山梨酸酯、抗壞血酸、其衍生物、和其混合物。在一些實施方 式中，抗微生物劑是非螯合劑，如下列中的任意（在一些實施方式中，選自）：亞硫酸鹽、苯 甲酸、苯甲醇、氯代丁醇、對羥基苯甲酸酯、其衍生物、和其混合物。抗微生物劑的具體量在 下文進一步描述。
[0025] 本文描述的組合物可以是穩定的水難溶性藥劑的水懸浮液，如濃度為下列任意的 穩定的水難溶性藥劑的水懸浮液：大約〇. 1至大約l〇〇mg/ml、大約0. 1至大約50mg/ml、 大約0· 1至大約20mg/ml、大約1至大約10mg/ml、大約2mg/ml至大約8mg/ml、大約4至 大約6mg/ml、和大約5mg/ml。在一些實施方式中，水難溶性藥劑的濃度是至少大約下列任 意：L 3mg/ml、L 5mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、 lOmg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、40mg/ml、和 50mg/ml 〇
[0026] 在一些實施方式中，組合物是幹（如凍幹）組合物，其可以被重建、重懸或再水化 以形成通常穩定的水難溶性藥劑的水懸浮液。在一些實施方式中，組合物是通過重建或重 懸幹組合物獲得的液體（如含水）組合物。在一些實施方式中，組合物是可以被乾燥（如 凍幹）的中間液體（如含水）組合物。
[0027] 在一些實施方式中，組合物適合腸胃外（如靜脈內）施用。在一些實施方式中，組 合物適合多劑量施用。在一些實施方式中，組合物是無菌可濾過的。在一些實施方式中，當 組合物被施用給個體時，其在個體（如人體）中不引起明顯的副作用。在一些實施方式中， 本文描述的組合物基本上不含（如不含）表面活性劑。在一些實施方式中，本文描述的組 合物基本上不含（如不含）克列莫佛。本文描述的包含抗微生物劑的組合物可以進一步包 括糖或其它凍幹或重建助劑（輔助劑）。
[0028] 在一些實施方式中，組合物中抗微生物劑的量是在引起毒理效應的水平（即，在 臨床可接受的毒性水平之上）以下，或處於這樣的水平：當組合物被施用給個體時，其可能 的副作用可以被控制或耐受。在一些實施方式中，抗微生物劑以這樣的量存在：其不對組合 物中載體蛋白的穩定性或特性產生不利影響。
[0029] 在另一個方面，提供包括水難溶性藥劑、載體蛋白（如白蛋白）、和糖的組合物（如 凍幹組合物或可以被凍幹的中間液體組合物）。在一些實施方式中，組合物包括：（1)顆粒 (如納米顆粒），其包括（在多種實施方式中，由其構成或基本上由其構成）水難溶性藥劑 (如紫杉烷或其衍生物）和白蛋白；和（2)糖，其中組合物中白蛋白與水難溶性藥劑的重量 比是大約0.01:1至大約100:1。在一些實施方式中，組合物包括：（1)顆粒（如納米微粒）， 其包括（在多種實施方式中，由其構成或基本上由其構成）水難溶性藥劑（如紫杉烷或其 衍生物）和白蛋白；和⑵糖，其中組合物中白蛋白與水難溶性藥劑的重量比是大約18:1 或以下（包括例如，大約1:1至大約18:1、大約2:1至大約15:1、大約3:1至大約12:1、大 約4:1至大約10:1、大約5:1至大約9:1、和大約9:1中的任意）。在一些實施方式中，水 難溶性藥劑被白蛋白包覆。在一些實施方式中，組合物是幹（如凍幹）組合物，其中凍幹的 組合物可以被重建（或被重懸浮或再水化）以形成通常穩定的水難溶性藥劑的水懸浮液， 並且其中組合物在水溶液中的重建時間少於不含糖的組合物的重建時間。在一些實施方式 中，組合物或由組合物產生的重建懸浮液中的糖濃度為大約50mg/ml以上。在一些實施方 式中，組合物進一步包括抗微生物劑，如本文描述的抗微生物劑。在一些實施方式中，水難 溶性藥劑是多西紫杉醇或其衍生物。
[0030] 在一些實施方式中，本發明提供了包括紫杉醇、白蛋白、和糖的組合物，其中白蛋 白與紫杉醇的重量比是大約9:1或以下，並且其中組合物或由組合物產生的重建懸浮液中 的糖為大約50mg/ml以上。在一些實施方式中，組合物包括：（1)顆粒（如納米微粒），其包 括（在多種實施方式中，由其構成或基本上由其構成）紫杉醇和白蛋白；和（2)糖，其中組 合物中白蛋白和紫杉醇的重量比是大約18:1或以下（包括例如，大約1:1至大約18:1、大 約2:1至大約15:1、大約3:1至大約12:1、大約4:1至大約10:1、大約5:1至大約9:1、和 大約9:1中的任意），並且其中組合物或由組合物產生的重建懸浮液中的糖為大約50mg/ml 以上。
[0031] 在一些實施方式中，與沒有糖的組合物相比，糖的量有效增加組合物中水難溶性 藥劑的穩定性。在一些實施方式中，與沒有糖的組合物相比，糖的量有效改善組合物的過濾 性。在一些實施方式中，與沒有糖的組合物相比，糖的量有效減少凍幹組合物重建過程中產 生泡沫。
[0032] 也提供本文描述的組合物的單位劑型，在適當包裝（如小瓶或容器（包括密封的 小瓶或容器以及無菌密封的小瓶或容器））中包含本發明組合物的或單位劑型的製品，和 包括組合物的試劑盒。本發明也提供製備和使用本文所述的這些組合物的方法。
[0033] 應當理解，可以組合本文描述的各種實施方式中的一種、一些、或所有特性以形成 本發明的其它實施方式。
[0034] 發明詳述
[0035] 本發明在一方面提供組合物，其包括：包含水難溶性藥劑、載體蛋白、和抗微生物 劑的藥物組合物。與不包含載體蛋白的組合物相比，該組合物中的載體蛋白通常使水難溶 性藥劑更容易在水介質中懸浮和/或幫助維持懸浮。載體蛋白通常，但不必須，以足以穩定 水懸浮液中水難溶性藥劑的量和/或以有效降低水難溶性藥劑向個體（如人）中施用的一 種或多種副作用的量存在。抗微生物劑通常以有效抑制（如延遲、降低、減緩、和/或防止） 組合物中顯著的微生物生長的量存在。優選地，組合物中抗微生物劑的量處於引起毒理效 應的水平以下或者處於可能的副作用可被控制或耐受的水平下。
[0036] 另一方面，提供包括水難溶性藥劑、載體蛋白（如白蛋白）、和糖的組合物（如凍幹 組合物或可以被凍幹的中間液體組合物）。
[0037] 對"組合物"或"多種組合物"的一般引用包括並且可應用於本發明的組合物。本 發明也提供包含本文所述成分的藥物組合物。
[0038] 本文提及的紫杉醇適用於紫杉醇或其衍生物，並且因此，本發明考慮和包括這兩 類實施方式。對"紫杉醇"的提及是為了簡化描述並且是示範性的。紫杉醇的衍生物或類 似物包括但不限於，在結構上與紫杉醇相似的化合物或同紫杉醇屬於同一普通化學種類的 化合物，如多西紫杉醇。在一些實施方式中，紫杉醇的衍生物或類似物保持紫杉醇的相似的 生物學、藥理學、化學和/或物理學特性（包括，例如官能性（功能））。紫杉醇的衍生物或 類似物的例子包括多西紫杉醇和ortataxel。這種相同的描述原則適用於本文提供的其它 藥劑，如包括，例如抗微生物劑和水難溶性藥劑（如紫杉烷（包括多西紫杉醇、ortataxel或 其它紫杉烷類）、格爾德黴素、17-烯丙基氨基格爾德黴素、硫代秋水仙鹼和其二聚體、雷帕 黴素、環孢菌素、埃坡黴素、根赤殼菌素、和考布他汀）。
[0039] 應當理解，本文描述的本發明的方面和實施方式包括"由其組成（由……組成， consisting of) "和/或"基本上由其組成（基本上由......組成，consistng essentially of)"的方面和實施方式。
[0040] 抗微生物劑
[0041] 本文使用的術語"抗微生物劑"指能夠抑制（如如延遲、降低、減緩、和/或預防） 一種或多種微生物生長的藥劑。通過本領域已知的許多方法，可以測量或表示顯著的微生 物生長，如下面的一種或多種：（1)當組合物被施用給個體時，組合物中的微生物生長足以 引起對個體的一種或多種不利作用；（2)被外來汙染時（如在20至25°C的溫度範圍下，暴 露於10-10 3個菌落形成單位），在一定時期內（例如24小時的時期內），微生物生長增加 大約10倍以上。顯著的微生物生長的其它指標在本文中描述。
[0042] 本文描述的抗微生物劑可以有效地抵抗細菌（包括革蘭氏陽性和革蘭氏陰性細 菌二者）、真菌、或黴菌中的一種或多種的生長。例如，在一些實施方式中，抗微生物劑有效 抵抗下列任何一種或多種的生長：革蘭氏陽性球菌（如金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus)和表皮葡萄球菌（Staphylococcus epidermidis)),發酵革蘭氏陰性桿菌 (fermentative gram-negative rods)(如月市炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae)、陰 溝腸桿菌（Enterobacter cloaceae)、大腸桿菌（Escherichia Coli)、變形桿菌（Proteus species)、和日勾維腸桿菌（Enterobacter gergoviae))，非發酵革蘭氏陰性桿菌（如 綠胺桿菌（Pseudomonas aeruginosa)、洋蔥假單胞菌（Pseudomonas cepacia)、突光假 單胞菌（Pseudomonas fluoresceins)、惡臭假單胞菌（Pseudomonas putida)、黃桿菌 (Flavobacterium)和不動桿菌（Acinetobacter species))，和抱子形成細菌（如枯草芽抱 桿菌（Bacillus subtilis))。在一些實施方式中，抗微生物劑有效抵抗下列任何一種或多 種：酵母（如白色念珠菌（Candida albicans)、近平滑假絲酵母（Candida parapsilosis)) 和黴菌（如黑麴黴（Aspergillus niger)和點青黴（Penicillium notatum))。
[0043] 其生長可以被抑制的其它細菌包括，例如，蠟狀芽孢桿菌（B. cereus)、 B. cohaerens、巨大芽胞桿菌（Β· megatherium)、Β· plicatus、Β· ubicuitarius、 Corynebacterium nicotinovorans、產氣腸桿菌(Enterobacter aerogenes)、阿拉伯 糖乳酸桿菌（Lactobacillus arabinosus)、L. asei、Ps. Effuse、和 Ps.Ovalis。其 生長可以被抑制的其它真菌包括，例如，克柔念珠菌（Candida krusei)、假熱帶念 珠菌（C. pseudotropicalis)、異常漢遜酵母（Hansenula anomala)、膜酸畢赤酵母 (Pichia membranaefaciens)、S. anamensis、釀酒酵母（S. cerevisiae)、葡萄酒酵母 (S. ellipsoideus)、S. spec、Torula lipolytica、異形威立氏酵母（Willia anomala)、和 Z. nussbaumii。其生長可以被抑制的其它黴菌包括，例如，Trichoderma lignorm、Fusarium spec、粉紅粘帚黴（Gliocladium roseum)、Mucor spec、和 Penicillium glausum。
[0044] 可以通過本領域已知的方法測定抗微生物劑針對各種微生物的效力，如美國藥典 /歐洲藥典（USP/EP)防腐效率試驗或其修改方法。見Sutton and Porter, PDA J Pharm. ScL Tech. ,2002 ;56:6, 300-311。也見美國專利公布號第2004/0009168號。例如，可以使 用膜過濾技術和肉湯培養（broth cultures)，評價最終組合物中抗微生物劑的生長抑制能 力。可以將美國藥典（USP)推薦的用於防腐效率試驗的每毫升（mL)大約50-200菌落形成 單位（colony forming units (CFU))的四種標準生物接種在每一種製劑中。這四種生物被 確定為：金黃色葡萄球菌（ATCC6538)、大腸桿菌（ATCC8739)、綠膿桿菌（ATCC9027)、和白色 念珠菌（ATCC10231)。除了這些生物以外，也可以檢測表皮葡萄球菌（ATCC12228)、和金黃 色葡萄球菌（凝固酶陰性，ATCC27734)。在接種測試生物之後，可以在30-35°C溫育測試製 齊U。可以測定在選取的時間點（如接種之後立即和30-35°C溫育24小時之後）測試生物的 存活計數。
[0045] 在一些實施方式中，抗微生物劑的量有效抑制顯著的微生物生長至少大約4、8、 12、18、24、36、48、60、72、84、96 或 108、或 120 小時中的任意時間。
[0046] 例如，如果在外來汙染後大約24小時內，抗微生物劑能夠阻止組合物中的微生物 生長至增加不大於大約1個對數（10倍），則認為抗微生物劑是有效的。在一些實施方式中， 在細菌樣品中，如果抗微生物劑使得在大約第7天比最初計數降低至少大約1.0個對數、在 大約第14天降低大約3. 0個對數、和/或在大約第28天計數沒有升高，則該抗微生物劑是 有效的。在一些實施方式中，在細菌樣品中，如果抗微生物劑使得在大約第6小時比最初計 數降低至少大約2. 0個對數、在大約第24小時降低大約3. 0個對數、和/或在大約第28天 沒有恢復，則該抗微生物劑是有效的。在一些實施方式中，在酵母和黴菌樣品中，如果抗微 生物劑使得在大約第7天比最初計數降低大約2. 0個對數和/或在大約第28天沒有升高， 則該抗微生物劑是有效的。在一些實施方式中，在細菌樣品中，如果抗微生物劑使得在大約 第24小時比最初計數降低至少大約1. 0個對數、在大約第7天降低大約3. 0個對數、和在 大約第28天沒有升高，則該抗微生物劑是有效的。在一些實施方式中，在酵母和黴菌樣品 中，如果抗微生物劑使得在大約第14天比最初計數降低大約1. 0個對數和在大約第28天 沒有升高，則該抗微生物劑是有效的。
[0047] 在一些實施方式中，組合物中抗微生物劑的量處於引起毒理效應的水平（即，在 臨床可接受的毒性水平以上）以下，或者處於這樣的水平：當組合物被施用給個體時，其可 能的副作用可被控制或耐受。測定給個體施用的藥劑的毒性或副作用的方法在本領域通常 是已知的，並且取決於組合物中具體的抗微生物劑。例如，當以高濃度施用給個體時，許多 鈣螯合抗微生物劑（如EDTA)可引起心臟問題（如心律失常）。因此，可以監測心律失常的 指標以評價鈣螯合藥劑的毒性效應。也可以在動物模型上評價其它指標如貧血（對於離子 螯合劑）、體重減輕、和死亡率以確定抗微生物劑的最佳用量。
[0048] 在一些實施方式中，抗微生物劑以不對組合物中載體蛋白的穩定性或性質產生不 利影響的量存在。在一些實施方式中，抗微生物劑（如EDTA和為抗氧化劑的非螯合抗微生 物劑）以有效抑制組合物中的氧化作用的量存在。組合物中抗微生物劑的具體量將依賴於 組合物中具體的抗微生物劑或藥劑而變化，其在下文被進一步詳述。
[0049] 螯合劑
[0050] 在一些實施方式中，抗微生物劑是螯合劑。螯合劑主要通過除去基本金屬離子 (如鈣、鋅、鎂等）起抗微生物劑的作用並且使它們不能為基本代謝過程所利用。這些螯合 劑或者特異於特定金屬離子（如鈣、鋅、鎂等），或者表現出廣譜的金屬離子特異性。在一些 實施方式中，螯合劑是多齒的（polydentate)。在一些實施方式中，螯合劑包括一個或多個 羧酸基。在一些實施方式中，螯合劑不是去鐵胺。合適的螯合劑包括，但不限於：乙二胺四 乙酸鹽、檸檬酸鹽、噴替酸鹽、氨基丁三醇、山梨酸酯、抗壞血酸、其衍生物、和其混合物。
[0051] 本文考慮的一種抗微生物劑是乙二胺四乙酸鹽，即乙二胺四乙酸（EDTA)和其衍 生物。用於本發明的合適的衍生物包括乙二胺四乙酸二鈉、乙二胺四乙酸三鈉、乙二胺四乙 酸四鈉和乙二胺四乙酸鈣二鈉。乙二胺四乙酸鹽的種類不是關鍵的，條件是其行使抑制顯 著的微生物生長的功能達延長的時期（如至少大約24小時）。在一些實施方式中，乙二胺四 乙酸鹽以大約〇. 〇〇lmg/ml至大約lmg/ml的濃度存在於組合物中，濃度包括，例如，0. Olmg/ ml 至大約 lmg/ml、大約 0· 01mg/ml 至大約 0· 5mg/ml、大約 0· 01mg/ml 至大約 0· 3mg/ml、大 約0· 02mg/ml至大約0· 2mg/ml、大約0· 03mg/ml至大約0· lmg/ml、和大約0· 05mg/ml中的任 意。在一些實施方式中，乙二胺四乙酸鹽的濃度為大約lmg/ml以下，如大約下列任意以下： 0· 9、0· 8、0· 7、0· 6、0· 5、0· 4、0· 3、0· 2、0· 1、0· 09、0· 08、0· 07、0· 06、0· 05、0· 04、0· 03、0· 02、 0· 01、0· 009、0· 008、0· 007、0· 006、0· 005、0· 004、0· 003、0· 002、或 0· 001mg/ml。在一些實施 方式中，組合物中乙二胺四乙酸鹽與水難溶性藥劑的重量比是大約〇. 002:1至大約0. 2:1， 包括例如，大約〇. 002:1至大約0. 1:1、大約0. 002:1至大約0. 06:1、大約0. 004:1至大約 0.04:1、大約0.006:1至大約0.02:1、和大約0.01:1。在一些實施方式中，組合物中乙二 胺四乙酸鹽和水難溶性藥劑的重量比為大約下列任意以下 ：0.2:1、1.5:1、0. 1:1、0.05:1、 0·01:1、和 0· 005:1。
[0052] 本文考慮的另一抗微生物劑是檸檬酸鹽，如檸檬酸鈉和檸檬酸。合適的檸檬酸鹽 的濃度包括，例如，大約〇· lmg/ml至大約200mg/ml、大約0· 2mg/ml至大約100mg/ml、大 約0· 3mg/ml至大約50mg/ml、大約0· 5mg/ml至大約10mg/ml、和大約lmg/ml至大約5mg/ ml。在一些實施方式中，檸檬酸鹽的濃度為大約200mg/ml以下，如大約下列任意以下：100、 50、30、20、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1、0· 9、0· 8、0· 7、0· 6、0·5、0·4、0·3、或 0· 2mg/ml。在一些 實施方式中，檸檬酸鹽與水難溶性藥劑的重量比是大約〇. 02:1至大約40:1，包括例如，大 約0. 04:1至大約20:1、大約0. 06:1至大約10:1、大約0. 1:1至大約2:1、大約0. 2:1至大 約lmg/ml。在一些實施方式中，檸檬酸鹽與水難溶性藥劑的重量比為大約下列任意以下： 40:1、30 :1、20:1、10:1、5:1、1:1、0. 5:1、和0. 1:1。在其它實施方式中，抗微生物劑不是檸檬 酸鹽（即，除了檸檬酸鹽）。
[0053] 抗微生物劑也可以是噴替酸鹽（包括噴替酸鈣鈉）。在一些實施方式中，噴替酸 鹽的量為大約3mg/ml以下（包括例如，大約下列任意以下：2、1.5、1、0. 5、0. 3、0. 1、0. 09、 0· 08、(λ 7、(λ 6、(λ 5、(λ 4、(λ 3、(λ 2、0· 1、和(λ 05mg/ml)。例如，噴替酸鹽可以以大約(λ 005 至 大約3mg/ml、大約0. 005至大約0. lmg/ml、或大約0. 005至大約0. 05mg/ml中的任意範圍存 在。在一些實施方式中，噴替酸鹽與水難溶性藥劑的重量比是大約0. 001:1至大約0. 6:1， 包括例如，大約0.001:1至大約〇. 2:1，和大約0.01:1至大約0. 1:1。在一些實施方式中， 噴替酸鹽與水難溶性藥劑的重量比為大約下列任意以下：〇. 6:1、0. 3:1、0. 1: 1、0. 05:1、和 0· 01:1。
[0054] 本文考慮的另一抗微生物劑是氨基丁三醇（tromethamine)。如本文使用的氨基丁 三醇，指2-氨基-2-羥甲基-1，3-丙二醇，其也已知為TRIS。在一些實施方式中，氨基丁三 醇以不多於大約2. 5mg/ml的量（包括例如，大約下列任意以下：2. 5、2、1. 5、或lmg/ml)存 在於組合物中。例如，氨基丁三醇以大約1. 5至大約2. 5mg/ml中的任意範圍存在，如大約 2mg/ml。氨基丁三醇的另一示範性的量是大約2.4mg/ml。在一些實施方式中，氨基丁三醇 與水難溶性藥劑的重量比是大約0. 1:1至大約0. 5:1，包括例如，大約0. 2:1至大約0. 5:1， 和大約0. 2:1至大約0. 4:1。在一些實施方式中，組合物中氨基丁三醇和水難溶性藥劑的重 量比為大約下列任意以下：〇. 5:1、0. 4:1、0. 3:1、0. 2:1、和0. 1:1。
[0055] 在一些實施方式中，螯合抗微生物劑是山梨酸酯（如山梨酸鉀）。在一些實施方 式中，山梨酸酯以不超過大約2. 5mg/ml (包括例如，大約下列任意以下：2. 5、2、1. 5、或lmg/ ml)的量存在於組合物中。例如，山梨酸酯可以以大約0.5mg/ml的量存在。在一些實施 方式中，山梨酸酯和水難溶性藥劑的重量比為大約下列任意以下：〇. 5:1、0. 4:1、0. 2:1、或 0· 1:1。
[0056] 在一些實施方式中，螯合抗微生物劑是抗壞血酸（ascobate)(如抗壞血酸鈉）。 在一些實施方式中，抗壞血酸以不超過大約5mg/ml (包括例如，大約下列任意以下：2. 5、2、 1.5、或111^/1111)的量存在於組合物中。例如，抗壞血酸可以以111^/1111的量存在。在一些實 施方式中，組合物中抗壞血酸和水難溶性藥劑的重量比為大約下列任意以下：1:1、〇. 5:1、 0· 4:1、0· 2:1、或 0· 1:1。
[0057] 其它合適的金屬螯合抗微生物劑和它們的示範性量包括但不限於，甲醛合次硫酸 氫鈉 （sodium formaldehyde sulfoxylate) (0· lmg/ml)和硫代甘油（monothiolglycerol) (5mg/ml)〇
[0058] 非螯合劑
[0059] 在一些實施方式中，抗微生物劑不是螯合劑（即，它是非螯合抗微生物劑），其包 括但不限於，亞硫酸鹽、苯甲酸、苯甲醇、氯代丁醇、和它們的衍生物。這些非螯合抗微生物 劑通過各種機制起作用。在一些實施方式中，非螯合抗微生物劑作為助氧化劑起作用。在 一些實施方式中，非螯合抗微生物劑作為抗氧化劑起作用。
[0060] 本文考慮的一種抗微生物劑是亞硫酸鹽。術語"亞硫酸鹽"指所有藥學上可接受的 亞硫酸（原亞硫酸（orthosulfurous acid))和焦亞硫酸（metasulfurous acid)的衍生物。 合適的亞硫酸鹽包括但不限於，亞硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、亞硫酸鉀、亞硫酸氫鉀、焦亞硫酸氫 鈉、焦亞硫酸氫鉀、或其組合。在一些實施方式中，亞硫酸鹽以大約0. 075至大約6. 6mg/ml 存在，其包括例如，大約〇. 075至大約lmg/ml和大約0. 25mg/ml中的任意。在一些實施方 式中，亞硫酸鹽以大約下列任意以下的量存在：5mg/ml、3mg/ml、和lmg/ml。在一些實施方 式中，亞硫酸鹽和水難溶性藥劑的重量比是大約0. 01:1至大約1. 5:1，包括例如，0. 02:1至 大約1:1、和大約0. 05:1至大約0. 5:1。在一些實施方式中，亞硫酸鹽和水難溶性藥劑的重 量比為大約下列任意以下：1. 5:1、1:1、0. 5:1、0. 1:1、和0. 05:1。
[0061] 在一些實施方式中，抗微生物劑是苯甲酸、苯甲醇或其衍生物。在一些實施方式 中，抗微生物劑選自苯甲醇、苯索氯銨、苯甲酸鈉、苯甲酸鉀、苯甲酸苄酯、或其各種組合。在 一些實施方式中，苯甲醇的量在大約0. 175至大約9mg/ml的範圍內，包括例如，大約0.7至 大約4. 5mg/ml、大約1. 5mg/ml和大約lmg/ml中的任意。在一些實施方式中，苯甲醇的量 是大約0. 7至大約9mg/ml，任選地包括大約0. 05mg/ml的EDTA的量。在一些實施方式中， 組合物包含苯甲酸或其衍生物，其範圍在大約2mg/ml至大約50mg/ml，包括例如，大約lmg/ ml至大約20mg/ml、大約2mg/ml至大約10mg/ml、和大約5mg/ml中的任意。在一些實施方 式中，組合物包含苯甲酸節酯或苯甲酸鈉，其範圍是大約0. lmg/ml至大約460mg/ml，包括 例如，大約0. 5mg/ml至大約200mg/ml、大約lmg/ml至大約100mg/ml、大約lmg/ml至大約 50mg/ml、和lmg/ml。在一些實施方式中，組合物包含大約0. 1至大約lmg/ml的苯索氯銨 量（benzethonium chloride)。在一些實施方式中，組合物中苯甲酸或苯甲醇和水難溶性 藥劑的重量比是大約0.02:1至大約150:1，包括例如，大約0. 1:1至大約40:1、大約0.2:1 至大約20:1、和大約0. 2:1至大約10:1。在一些實施方式中，組合物中苯甲酸或苯甲醇和 水難溶性藥劑的重量比為大約下列任意以下：150 :1、100:1、50:1、10:1、5:1、1:1、0. 5:1、和 0· 1:1。
[0062] 在一些實施方式中，抗微生物劑是氯代丁醇或其衍生物（如氯代丁醇半水合物）。 氯代丁醇的合適量包括，例如，大約2. 5mg/ml至大約50mg/ml、大約5mg/ml至大約20mg/ ml。在一些實施方式中，抗微生物劑是酚或其衍生物。酚（或其衍生物）的合適量包括，例 如，大約0. 7至大約25mg/ml、大約lmg/ml至大約20mg/ml。在一些實施方式中，抗微生物 劑是甲酚（如間甲酚）或其衍生物。甲酚（或其衍生物）的合適量包括，例如，大約1.5mg/ ml至大約31mg/ml和大約5mg/ml至大約15mg/ml中的任意。
[0063] 在一些實施方式中，非螯合劑是對羥基苯甲酸酯，其包括但不限於，羥苯甲酸甲 酯、對羥基苯甲酸丁酯、和對羥苯甲酸丙酯。對羥基苯甲酸酯（如羥苯甲酸甲酯）的合適量 包括，例如，大約〇. 〇5mg/ml至大約5mg/ml、大約0. 08mg/ml至大約3mg/ml、大約0. lmg/ml 至大約2mg/ml、大約0. 2mg/ml至大約1. 5mg/ml、和大約lmg/ml中的任意。
[0064] 其它的合適的抗微生物劑包括但不限於，硝酸鹽和亞硝酸鹽（如硝酸苯汞）、對羥 基苯甲酸酯、丙酸和丙酸酯、雙乙酸鈉 （sodium diacetate)、山梨酸和山梨酸酯、二氧化硫、 焦碳酸二乙酯（DEPC)、次氯酸鈉、碘化鈉、乙基汞硫代水楊酸鈉、和類似物。
[0065] 在一些實施方式中，本文描述的組合物包含至少兩種（包括例如，至少下列任意 種：2、3、4、5、6、7、8、9、或10)不同的抗微生物劑（如本文所描述的抗微生物劑中的至少兩 種）。這些抗微生物劑可以是相同的種類（如，不同的亞硫酸鹽）或不同的種類（如，亞 硫酸鹽和苯甲醇）。例如，發現羥苯甲酸甲酯和對羥苯甲酸丙酯聯合（l-2mg/ml)針對真菌 特別好。當多種微生物劑存在於組合物中時，每種抗微生物劑的有效量取決於抗微生物劑 的聯合作用。例如，如果抗微生物劑協同作用，每種抗微生物劑的有效量可以比該抗微生 物劑單獨存在於組合物中時所需要的量少得多。在一些實施方式中，組合物包括檸檬酸鹽 和EDTA二者。發現檸檬酸鹽和EDTA針對大腸桿菌特別好。在一些實施方式中，組合物包 含200mM檸檬酸鹽和EDTA。在一些實施方式中，組合物包含200mM檸檬酸鹽和0. 001 %、 0· 01%、0· 1%、和 0· 2% (w/v)EDTA 中的任意。
[0066] 水難溶性藥劑
[0067] 本文描述的組合物包括水難溶性藥劑。例如，在大約20_25°C，水難溶性藥劑在水 中的溶解度可以是大約l〇mg/ml以下，包括例如，大約下列任意以下：5、2、1、0. 5、0. 2、0. 1、 0. 05、0. 02、或0. 01mg/ml。本文描述的水難溶性藥劑可以是，例如，抗癌劑或抗腫瘤劑、抗 微管劑、免疫抑制劑、麻醉劑、激素、用於心血管疾病的藥劑、抗心律失常藥、抗生素、抗真菌 齊LI、抗高血壓藥、止喘藥、抗炎劑、抗關節炎劑、血管活性劑、止痛劑/退熱劑、抗抑鬱劑、抗 糖尿病劑、抗真菌藥、消炎藥、抗焦慮劑、免疫抑制劑、抗偏頭痛劑、鎮靜劑、抗心絞痛劑、抗 精神病劑、抗躁狂劑、抗關節炎劑、抗痛風劑、抗凝血劑、血栓溶解劑、抗纖溶藥物、活血藥 (hemorheologic agents)、抗血小板劑、抗驚厥藥物、抗帕金森病藥、抗組胺劑/止癢劑、用 於鈣調節的藥劑、抗病毒劑、抗微生物劑、抗感染劑、支氣管擴張藥、激素、降血糖藥、降血脂 齊[J、抗潰瘍/抗反流劑、止噁心藥/止吐劑、和油溶性維生素（如，維生素 A、D、E、K、和類似 物）。
[0068] 在一些實施方式中，水難溶性藥劑是抗腫瘤劑。在一些實施方式中，水難溶性藥劑 是化療劑。
[0069] 合適的水難溶性藥劑包括但不限於，紫杉烷類（如紫杉醇、多西紫杉醇、 ortataxel和其它紫杉燒類）、埃坡黴素、喜樹鹼、秋水仙鹼、格爾德黴素、胺碘酮、甲狀 腺激素、兩性黴素、皮質類固醇、丙泊酚（propofol)、褪黑激素、環孢菌素、雷帕黴素（西 羅莫司）和衍生物、他克莫司（tacrolimus)、麥考酚酸、異環磷醯胺（ifosfamide)、長春 瑞賓（vinorelbine)、萬古黴素（vancomycin)、吉西他濱（gemcitabine)、SU5416、噻替 派（thiotepa)、博來黴素（bleomycin)、診斷放射性對比劑（diagnostic radiocontrast agents)、和其衍生物。在本發明組合物中有用的其它水難溶性藥劑在例如美國專利第 5, 916, 596、6, 096, 331、6, 749, 868、和6, 537, 539號中被描述。其它的水難溶性藥劑的例 子包括難溶於水的並且在默克索引（Merck Index)(第12th版，1996)的"Therapeutic Category and Biological Activity Index" 中列出的那些化合物。
[0070] 在一些實施方式中，水難溶性藥劑是下列任意（並且在一些實施方式中選自）：紫 杉醇、多西紫杉醇、ortataxel或其它紫杉烷或紫杉烷類似物、17-烯丙基氨基格爾德黴素 (17-AAG)、18_衍生化格爾德黴素（18-derivatized geldanamycin)、喜樹鹼、丙泊酚、胺碘 酮、環孢菌素、埃坡黴素、根赤殼菌素、考布他汀、雷帕黴素、兩性黴素、三碘甲狀腺氨酸（碘 賽羅寧，liothyronine)、埃坡黴素、秋水仙鹼、硫代秋水仙鹼和其二聚體、甲狀腺激素、血管 活性腸肽、皮質類固醇、褪黑激素、他克莫司、麥考酚酸、埃坡黴素類、根赤殼菌素類、考布他 汀類、和它們的類似物或衍生物。在一些實施方式中，水難溶性藥劑是下列任意（並且在一 些實施方式中選自）：紫杉醇、多西紫杉醇、ortataxel或其它紫杉烷類、格爾德黴素、17-烯 丙基氣基格爾德黴素、硫代秋水仙喊和其-聚體、雷帕黴素、環抱菌素、埃坡黴素、根赤殼菌 素、和考布他汀。在一些實施方式中，水難溶性藥劑是雷帕黴素。在一些實施方式中，水難溶 性藥劑是17-AAG。在一些實施方式中，水難溶性藥劑是硫代秋水仙鹼二聚體（如IDN5404)。
[0071] 在一些實施方式中，水難溶性藥劑是紫杉烷或其衍生物，其包括但不限於：紫杉 醇、多西紫杉醇和IDN5109 (ortataxel)、或它們的衍生物。在一些實施方式中，組合物包含 非結晶的和/或無定形的紫杉烷（如紫杉醇或其衍生物）。在一些實施方式中，通過使用無 水紫杉烷（如無水多西紫杉醇或其衍生物）製備組合物。已經顯示，無水多西紫杉醇產生 比用水合多西紫杉醇如多西紫杉醇三水合物或半水合物製備的製劑更穩定的製劑。
[0072] 載體蛋白
[0073] 本文描述的組合物也包含載體蛋白。術語"蛋白質"指多肽或任何長度（包括全長 或片段）的胺基酸的聚合物，其可以是線性的或分支的，包括被修飾的胺基酸、和/或被非 胺基酸中斷。該術語也包括被天然修飾或通過幹涉被修飾的胺基酸聚合物；例如二硫鍵形 成、糖基化、脂質化（lipidation)、乙醯化作用、磷酸化、或任何其它操作或修飾。也包括在 本術語之內的是，例如，含有一個或多個胺基酸類似物（包括，例如，非天然胺基酸等）以及 本領域已知的其它修飾的多肽。本文描述的蛋白質可以是天然存在的，即從天然來源（如 血液）獲得或得到，或者是被合成的（如化學合成或通過重組DNA技術合成）。
[0074] 合適的載體蛋白的例子包括在血液或血漿中通常發現的蛋白質，其包括但不限 於，白蛋白、免疫球蛋白包括IgA、脂蛋白、載脂蛋白Β、α-酸糖蛋白、β-2-巨球蛋白、甲 狀腺球蛋白、轉鐵蛋白（transferin)、纖連蛋白（fibronectin)、因子VII、因子VIII、因 子IX、因子X，和類似物。在一些實施方式中，載體蛋白是非血液蛋白，如酪蛋白、α-乳 清蛋白、和β_乳球蛋白。載體蛋白可以是天然來源的或者是合成製備的。在一些實施 方式中，藥學上可接受的載體包括白蛋白，如HSA。HSA是高度可溶的凡65Κ的球狀蛋白， 並且由585個胺基酸組成。HSA是血漿中最豐富的蛋白質，並且佔人血漿膠體滲透壓的 70-80%。HAS的胺基酸序列包含總計17個二硫橋、一個游離的硫醇（Cys34)、和一個色氨 酸（Trp214)。已經顯示，HSA溶液的靜脈內使用被用於預防和治療低血容量性休克（參 見，如，JAMA，237, 355-360,460-463，（1977))和 Houser 等，Surgery, Gynecology and Obstetrics, 150, 811-816(1980))和與交換輸血結合治療新生兒高膽紅素血症（見，如 Finlayson, Seminars in Thrombosis and Hemostasis, 6, 85-120，（1980)) 〇 其它的白蛋白 被考慮，如牛血清白蛋白。這種非人類白蛋白的使用可以是合適的，例如，在非人類哺乳動 物中使用這些組合物的情況下，如，獸醫動物（包括家庭寵物和農業動物）。
[0075] 人血清白蛋白（HSA)具有多個疏水結合位點（對於HSA的內源性配體脂肪酸， 共計8個）並且結合不同組的藥物，尤其是中性和負電荷的疏水化合物（Goodman等，The Pharmacological Basis of Therapeutics,9th ed,McGraw-Hill New York(1996))〇 HSA 的亞結構域IIA和IIIA中的兩個高親和力結合位點已被提出，其為高度伸長的疏水口 袋，其表面附近具有帶電荷的賴氨酸和精氨酸殘基，所述殘基起到用於極性配體發揮作用 的連接點的作用（見，如，Fehske 等，Biochem.Pharmcol, 30, 687-92(1981) ;Vorum, Dan. Med.Bull,46,379-99(1999) ；Kragh-Hansen, Dan. Med. Bull, 1441, 131-40(1990) ；Curry 等，Nat. Struct. Biol, 5, 827-35 (1998) ;Sugio 等，Protein. Eng，12, 439-46 (1999) ;He 等，Nature, 358, 209-15 (1992);和 Carter 等，Adv. Protein. Chem.，45, 153-203 (1994))。 已經表明，紫杉醇和丙泊酚結合HSA (見，例如，Paal等，Eur. J. Biochem.，268 (7)， 2187-91 (2001) ;Purcell 等，Biochim.Biophys. Acta，1478 (1),61-8 (2000) ;Altmayer 等，Arzneimittelforschung, 45, 1053-6 (1995)；和 Garrido 等，Rev. Esp. Anestestiol. Reanim.，41，308-12(1994))。此外，已經表明，多西紫杉醇結合人血漿蛋白質（見，如， Urien 等，Invest. New Drugs, 14 (2)，147-51 (1996))。
[0076] 組合物中的載體蛋白（如白蛋白）通常作為水難溶性藥劑的載體使用，即與不含 載體蛋白的組合物相比，組合物中的載體蛋白使水難溶性藥劑更容易在水介質中懸浮或者 幫助維持懸浮。這能夠避免使用毒性溶劑對水難溶性藥劑增溶，並且因此可以減少向個體 (如人）中施用水難溶性藥劑的一種或多種副作用。因此，在一些實施方式中，本文描述的 組合物基本上不含（如無）克列莫佛，如克列莫佛EL? (CremophorELs)，BASF)。在一些 實施方式中，組合物基本上不含（如無）表面活性劑。當組合物被施用給個體時，如果組 合物中的克列莫佛或表面活性劑的量不足以引起個體中的一種或多種副作用，則組合物是 "基本上不含克列莫佛"或"基本上不含表面活性劑"。
[0077] 在一些實施方式中，載體蛋白與水難溶性藥劑結合，S卩，組合物包含結合載體蛋白 的水難溶性藥劑。"結合（association)"或"結合的（associated)"在本文以一般的含義 被使用並且指載體蛋白影響含水組合物中水難溶性藥劑的行為和/或性質。例如，如果與 沒有載體蛋白的組合物相比，載體蛋白使水難溶性藥劑在水介質中更容易懸浮，則認為載 體蛋白和水難溶性藥劑是"結合的"。作為另一例子，如果載體蛋白使水難溶性藥劑在水懸 浮液中穩定，則載體蛋白和水難溶性藥劑是結合的。例如，載體蛋白和水難溶性藥劑可以以 顆粒或納米顆粒存在，其在本文中進一步描述。
[0078] 如果水難溶性藥劑在水介質中保持懸浮（如沒有看得見的沉澱或沉降）一段延 長的時間，則它在水懸浮液中是"穩定的"，所述時間如，至少大約下列任意：〇. l、〇. 2、0. 25、 0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、24、36、48、60、或72小時。懸浮液一般但不必須適合施 用給個體（如人）。懸浮液的穩定性通常（但不必須）是在存儲溫度（如室溫（如20-25°C ) 或冷藏條件（如4°C ))下被評價。例如，在懸浮液製備之後大約15分鐘，如果懸浮液沒有 表現出肉眼可見的或在1000倍光學顯微鏡下觀察可見的凝絮或顆粒聚集，則該懸浮液在 存儲溫度下是穩定的。也可以在加速試驗條件下，如在大約40°C以上的溫度下，評價穩定 性。
[0079] 組合物中的載體蛋白和水難溶性藥劑可以以不同的方式結合。例如，在一些實施 方式中，載體蛋白是與水難溶性藥劑混合。在一些實施方式中，載體蛋白包裹水難溶性藥劑 或將水難溶性藥劑陷入其中。在一些實施方式中，載體蛋白結合（如非共價結合）於水難 溶性藥劑。在一些實施方式中，組合物可以表現上述情況中的一種或多種。
[0080] 在一些實施方式中，組合物包括包含（在多種實施方式中，基本上由其組成）水 難溶性藥劑和載體蛋白的顆粒（如納米顆粒）。當水難溶性藥劑是液體形式時，顆粒或納 米顆粒也被稱為滴（droplets)或納米滴。在一些實施方式中，水難溶性藥劑被載體蛋白 包覆。水難溶性藥劑的顆粒（如納米顆粒）在，例如，美國專利第5, 916, 596、6, 506, 405、 6, 537, 579號中公開，也在美國專利申請公布第2005/0004002A1號中公開。
[0081] 在一些實施方式中，組合物包括具有不大於大約1000納米（nm)的平均直徑或直 徑均值的顆粒（如納米顆粒），如不大於大約下列任意：900、800、700、600、500、400、300、 200、和100nm。在一些實施方式中，顆粒的平均直徑或直徑均值不大於大約200nm。在一些 實施方式中，顆粒的平均直徑或直徑均值在大約20至大約400nm之間。在一些實施方式中， 顆粒的平均直徑或直徑均值在大約40至大約200nm之間。在一些實施方式中，顆粒是無菌 可濾過的。
[0082] 本文描述的顆粒（如納米顆粒）可以以幹製劑（如凍幹組合物）存在或重懸於生 物相容性介質中。合適的生物相容性介質包括但不限於，水、緩衝水介質、鹽水、緩衝鹽水、 任選地緩衝胺基酸溶液、任選地緩衝蛋白質溶液、任選地緩衝糖溶液、任選地緩衝維生素溶 液、任選地緩衝合成聚合物溶液、含脂質乳液、和類似溶液。
[0083] 本文描述組合物中的載體蛋白的量將依賴於組合物中的水難溶性藥劑和其它成 分而變化。在一些實施方式中，組合物包括載體蛋白，其量足以使水難溶性藥劑在水懸浮液 中穩定，例如，以穩定的膠體懸浮液（如穩定的納米顆粒懸浮液）的形式。在一些實施方式 中，載體蛋白處於降低水難溶性藥劑在水介質中的沉降速度的量。對於含有顆粒的組合物， 載體蛋白的量也依賴於水難溶性藥劑顆粒的大小和密度。
[0084] 在一些實施方式中，載體蛋白以足以將水難溶性藥劑在水懸浮液中穩定在一定濃 度下的量存在。例如，組合物中水難溶性藥劑的濃度為大約〇. 1至大約l〇〇mg/ml，包括例 如，大約〇· 1至大約50mg/ml、大約0· 1至大約20mg/ml、大約1至大約10mg/ml、大約2mg/ ml至大約8mg/ml、大約4至大約6mg/ml、大約5mg/ml中的任意。在一些實施方式中，水難 溶性藥劑的濃度是至少大約下列任意：1. 3mg/ml、l. 5mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、1Omg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、40mg/ ml、和50mg/ml。在一些實施方式中，載體蛋白以避免使用表面活性劑（如克列莫佛）的量 存在，所以，組合物不含或基本上不含表面活性劑（如克列莫佛）。
[0085] 在一些實施方式中，液體形式的組合物包括大約0. 1 %至大約50% (w/v)(如，大 約 0.5% (w/v)、大約 5% (w/v)、大約 10% (w/v)、大約 15% (w/v)、大約 20% (w/v)、大約 30% (w/v)、大約40 % (w/v)、或大約50 % (w/v))的載體蛋白。在一些實施方式中，液體形 式的組合物包括大約0.5%至大約5% (w/v)的載體蛋白。
[0086] 在一些實施方式中，載體蛋白如白蛋白與水難溶性藥劑的重量比是這樣的：足夠 量的水難溶性藥劑結合到細胞或被細胞運送。雖然對於不同的載體蛋白和藥物聯合，載體 蛋白與藥劑的重量比必須被優化，一般地，載體蛋白如白蛋白與藥劑的重量比（w/w)是大 約0. 01:1至大約100:1、大約0. 02:1至大約50:1、大約0. 05:1至大約20:1、大約0. 1:1至 大約20:1、大約1:1至大約18:1、大約2:1至大約15:1、大約3:1至大約12:1、大約4:1至 大約10:1、大約5:1至大約9:1、或大約9:1。在一些實施方式中，載體蛋白與藥劑的重量比 是大約下列任意：18:1或以下、15:1或以下、14:1或以下、13:1或以下、12:1或以下、11:1 或以下、10:1或以下、9:1或以下、8:1或以下、7:1或以下、6:1或以下、5:1或以下、4:1或以 下、和3:1或以下。
[0087] 在一些實施方式中，載體蛋白使得組合物被施用給個體（如人）而沒有顯著的副 作用。在一些實施方式中，載體蛋白（如白蛋白）的量有效減少向人施用水難溶性藥劑的 一種或多種副作用。術語"減少水難溶性藥劑的施用的一種或多種副作用"指減少、緩解、 消除、或避免由水難溶性藥劑引起的一種或多種不期望的作用，以及由用於運送水難溶性 藥劑的輸送工具（vehicles)(如使水難溶性藥劑適合注射的溶劑）引起的副作用。這樣的 副作用包括，例如，骨髓抑制、神經毒性、超敏性、炎症、靜脈刺激、靜脈炎、疼痛、皮膚刺激、 周圍神經病、粒細胞減少性發熱、過敏反應、靜脈血栓形成、外滲、和其組合。然而，這些副作 用僅僅是示範性的，並且與各種藥劑有關的其它副作用或副作用的組合可以被減少。
[0088] 在一些實施方式中，組合物包括包含（在多種實施方式中，由其組成或基本由其 組成）水難溶性藥劑和白蛋白的顆粒（如納米顆粒），其中白蛋白與水難溶性藥劑的重量比 (w/w)是大約0. 01:1至大約100:1、大約0. 02:1至大約50:1、大約0. 05:1至大約20:1、大 約0. 1:1至大約20:1、大約1:1至大約18:1、大約2:1至大約15:1、大約3:1至大約12:1、 大約4:1至大約10:1、大約5:1至大約9:1、或大約9:1。在一些實施方式中，載體蛋白與 藥劑的重量比為大約下列任意以下：18:1或以下、15:1或以下、14:1或以下、13:1或以下、 12:1或以下、11:1或以下、10:1或以下、9:1或以下、8:1或以下、7:1或以下、6:1或以下、 5:1或以下、4:1或以下、和3:1或以下。在一些實施方式中，水難溶性藥劑是紫杉烷或其衍 生物，如紫杉醇、多西紫杉醇、ortataxel、或其衍生物。
[0089] 在一些實施方式中，水難溶性藥劑被白蛋白包覆。在一些實施方式中，包含水難 溶性藥劑和白蛋白的顆粒（如納米顆粒）懸浮於水介質中（如含有白蛋白的水介質）。例 如，組合物可以是水難溶性藥劑顆粒（如納米顆粒）的膠體懸浮液。在一些實施方式中，組 合物是幹的（如凍幹的）組合物，該組合物可以被重建或懸浮為本文描述的顆粒的穩定懸 浮液。液體組合物或重建組合物中水難溶性藥劑的濃度可以被稀釋（0. lmg/ml)或被濃縮 (100mg/ml)，包括例如，大約0· 1至大約50mg/ml、大約0· 1至大約20mg/ml、大約1至大約 10mg/ml、大約2mg/ml至大約8mg/ml、大約4至大約6mg/ml、大約5mg/ml中的任意。在一些 實施方式中，水難溶性藥劑的濃度是大約下列任意：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、 15、16、17、18、19、20、25、30、35、40、45、或5011^/1111。在一些實施方式中，水難溶性藥劑是紫 杉烷或其衍生物，如紫杉醇、多西紫杉醇、ortataxel、或其衍生物。
[0090] 在一些實施方式中，組合物包括包含紫杉醇的顆粒（如納米顆粒），如具有大約20 至大約400nm的平均直徑或直徑均值的顆粒，包括例如，大約40至大約200nm。在一些實施 方式中，組合物包括包含（在多種實施方式中，由其組成或基本由其組成）紫杉醇和白蛋白 的顆粒（如納米顆粒）。在一些實施方式中，紫杉醇被白蛋白包覆。在一些實施方式中，白 蛋白與紫杉醇的重量比（w/w)是大約0. 01:1至大約100:1、大約0. 02:1至大約50:1、大約 0. 05:1大約20:1、大約0. 1:1至大約20:1、大約1:1至大約18:1、大約2:1至大約15:1、大 約3:1至大約12:1、大約4:1至大約10:1、大約5:1至大約9:1、和大約9:1中的任意。在 一些實施方式中，白蛋白與紫杉醇的重量比為大約下列任意以下：18:1或以下、15:1或以 下、14:1或以下、13:1或以下、12:1或以下、11:1或以下、10:1或以下、9:1或以下、8:1或以 下、7:1或以下、6:1或以下、5:1或以下、4:1或以下、和3:1或以下。
[0091] 在一些實施方式中，包含紫杉醇和白蛋白的顆粒（如納米顆粒）懸浮於水介質中 (如包含白蛋白的水介質）。例如，組合物可以是含紫杉醇顆粒（如納米顆粒）的膠體懸浮 液。在一些實施方式中，組合物是幹的（如凍幹的組合物），其可以被重建為含紫杉醇顆粒 的水懸浮液。在一些實施方式中，組合物中紫杉醇的濃度在大約0. 1至大約l〇〇mg/ml之間， 包括例如，大約〇· 1至大約50mg/ml、大約0· 1至大約20mg/ml、大約1至大約10mg/ml、大約 2mg/ml至大約8mg/ml、大約4至大約6mg/ml、和大約5mg/ml中的任意。在一些實施方式 中，紫杉醇的濃度是至少大約下列任意：1. 3mg/ml、l. 5mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml、25mg/ml、30mg/ml、40mg/ ml、和 50mg/ml〇
[0092] 在一些實施方式中，組合物包括紫杉醇的含白蛋白納米顆粒製劑（下文稱為 Nab-紫杉醇）。Nab-紫杉醇如Capxol?(也已知為Abraxane?)在美國專利第6, 096, 331 號中被描述。Capxol?是被人白蛋白USP所穩定的紫杉醇製劑，其可以在直接可注射的生 理溶液中被分散。當被分散在合適的水介質如0. 9%氯化鈉注射液或5%葡萄糖注射液中 時，Capxol?形成穩定的紫杉醇膠體懸浮液。膠體懸浮液中顆粒的尺寸（即，平均直徑或直 徑均值）範圍可以從20納米至8微米，優選範圍是大約20-400nm。因為HSA在水中是自由 可溶的，Capxol?可以在從稀（0· lmg/ml紫杉醇）至濃（20mg/ml紫杉醇）的廣泛濃度範圍 內被重建，其包括例如，大約2mg/ml至大約8mg/ml、大約5mg/ml。在一些實施方式中，紫杉 醇濃度是大約下列任意：1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、和2〇11^/ ml〇
[0093] 含糖組合物
[0094] 本發明也提供包含水難溶性製劑、載體蛋白（如白蛋白）、和糖的組合物（如藥物 組合物）。該組合物可以進一步包括如本文描述的抗微生物劑。本文描述的組合物包括，例 如，幹（如凍幹）組合物、通過重建或重懸幹組合物獲得的液體（如含水）組合物，或者可 以被乾燥（如凍幹）的中間液體（如含水）組合物。
[0095] 本文使用的"糖"包括但不限於，單糖、二糖、多糖、和其衍生物或修飾物。用於本文 描述組合物的合適的糖包括，例如，甘露醇、蔗糖、果糖、乳糖、麥芽糖、和海藻糖。在一些實 施方式中，糖起重建增強劑（重建促進劑）的作用，其使凍幹的組合物比沒有糖的凍幹組合 物更快地溶解或懸浮於水和/或水溶液中。例如，組合物可以是幹的（如凍幹的）組合物， 其中，組合物可以被重建（或重懸或再水化）成穩定的水難溶性藥劑的水懸浮液，並且其中 組合物在水溶液中的重建時間比沒有糖的組合物的重建時間少。在一些實施方式中，組合 物可以在大約下列任意以下的時間內被重建（如通過混合、輕拍、或旋渦）：8分鐘、5分鐘、 或2分鐘。
[0096] 在一些實施方式中，糖的量有效增加水難溶性藥劑在組合物中的化學穩定性。在 一些實施方式中，糖的量有效改善組合物的過濾性。在一些實施方式中，糖的量有效減少幹 (如凍幹）組合物重建過程中形成泡沫。這些改進是與沒有糖的組合物相比較而言的。
[0097] 在一些實施方式中，液體懸浮液（如在凍幹之前的懸浮液或重建的懸浮液）中的 糖濃度為大約下列任意以上：50、60、70、80、90、或10011^/1111。在一些實施方式中，糖以大約 20至大約100mg/ml、大約50mg/ml至大約100mg/ml、大約90mg/ml中的任意量存在。組合 物中糖與水難溶性藥劑的比（w/w)可以依賴水難溶性藥劑而變化。糖與水難溶性藥劑（如 紫杉醇）的示範性比值包括，例如，大約下列任意：2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、 10:1、或以上。
[0098] 在一些實施方式中，組合物包括：（1)包含水難溶性藥劑（如紫杉烷或其衍生 物）和白蛋白的顆粒（如納米顆粒）；和⑵糖，其中白蛋白與藥劑的重量比（w/w)是大約 0. 01:1至大約100:1，包括例如，大約0. 02:1至大約50:1、大約0. 05:1至大約20:1、大約 0. 1:1至大約20:1、大約1:1至大約18:1、大約2:1至大約15:1、大約3:1至大約12:1、大 約4:1至大約10:1、大約5:1至大約9:1、和大約9:1。在一些實施方式中，白蛋白與藥劑的 重量比是大約18:1或以下，包括例如，大約下列任意：15:1或以下、14:1或以下、13:1或以 下、12:1或以下、11:1或以下、10:1或以下、9:1或以下、8:1或以下、7:1或以下、6:1或以 下、5:1或以下、4:1或以下、和3:1或以下。水難溶性藥劑可以被白蛋白包覆。
[0099] 在一些實施方式中，本發明提供包含紫杉醇、白蛋白、和糖的組合物，其中，白蛋白 與紫杉醇的重量比（w/w)是大約0. 01:1至大約100:1，包括例如，大約0. 02:1至大約50:1、 大約0. 05:1至大約20:1、大約0. 1:1至大約20:1、大約1:1至大約18:1、大約2:1至大約 15:1、大約3:1至大約12:1、大約4:1至大約10:1、大約5:1至大約9:1、和大約9:1。在 一些實施方式中，白蛋白與紫杉醇的重量比是大約18:1或以下，其包括例如，大約下列任 意：15:1或以下、14:1或以下、13:1或以下、12:1或以下、11:1或以下、10:1或以下、9:1或 以下、8:1或以下、7:1或以下、6:1或以下、5:1或以下、4:1或以下、和3:1或以下。在一些 實施方式中，組合物包括：（1)包含紫杉醇和白蛋白的顆粒（如納米顆粒）；和（2)糖，其中 白蛋白與紫杉醇的重量比（w/w)是大約0. 01:1至大約100:1，包括例如，大約0. 02:1至 大約50:1、大約0. 05:1至大約20:1、大約0. 1:1至大約20:1、大約1:1至大約18:1、大約 2:115:1、大約3:1至大約12:1、大約4:1至大約10:1、大約5:1至大約9:1、和大約9:1中 的任意。在一些實施方式中，白蛋白與紫杉醇的重量比是大約18:1或以下，包括例如，大約 下列任意：15:1或以下、14:1或以下、13:1或以下、12:1或以下、11:1或以下、10:1或以下、 9:1或以下、8:1或以下、7:1或以下、6:1或以下、5:1或以下、4:1或以下、和3:1或以下。 紫杉醇可以被白蛋白包覆。在一些實施方式中，組合物是幹（如凍幹）組合物，其可以被重 建（或重懸或再水化）以形成通常穩定的水難溶性藥劑的水懸浮液，並且其中組合物在水 溶液中的重建時間比沒有糖的組合物的重建時間短。在一些實施方式中，組合物或由組合 物產生的重建懸浮液中的糖濃度為大約50、60、70、80、90、或10011^/1111中的任意以上。在一 些實施方式中，糖以大約20至大約100mg/ml、大約50mg/ml至大約100mg/ml、或大約90mg/ ml中的任意濃度存在。
[0100] 本文描述的含糖組合物可以進一步包括一種或多種抗微生物劑，如本文描述的抗 微生物劑。除了糖以外，其它的重建增強劑（如在美國專利申請公開第2005/0152979號中 描述的那些）也可以被加入到組合物中。
[0101] 組合物中的其它成分
[0102] 本文描述的組合物可以包括其它藥劑、賦形劑、或穩定劑以改善組合物的性質。例 如，可以加入某些帶負電荷的成分，通過增加納米顆粒的ζ (Zeta)負電位增加穩定性。這 種帶負電荷的成分包括但不限於，膽汁酸鹽、膽汁酸、甘氨膽酸、膽酸、鵝脫氧膽酸、牛磺膽 酸、甘氨鵝脫氧膽酸、牛磺鵝脫氧膽酸、石膽酸（litocholic acid)、熊脫氧膽酸、脫氫膽酸 和其它成分；磷脂，包括基於卵磷脂（卵黃）的磷脂--其包括下列磷脂醯膽鹼：棕櫚醯油 醯磷脂醯膽鹼（palmitoyloleoylphosphatidylcholine)、棕櫚醯亞油醯磷脂醯膽鹼（palm itoyllinoleoylphosphatidylcholine)、硬脂醜亞油醜憐脂醜膽喊（stearoyllinoleoylp hosphatidylcholine)、硬脂醜油醜憐脂醜膽喊（stearoyloleoylphosphatidylcholine)、 硬脂醯花生四烯醯磷脂醯膽鹼（stearoy larachidoylphosphat idyl choline)、和二棕櫚醯 磷脂醯膽鹼（dipalmitoylphosphatidylcholine)。其它磷脂包括L- α -二豆蘧醯磷脂醯 膽喊（L-a-dimyristoylphosphatidylcholine) (DMPC)、二油醜憐脂醜膽喊（dioleoylph osphatidylcholine (D0PC)、二硬脂醜憐脂醜膽喊（distearoylphosphatidylcholine (DSP C))、氫化大豆卵磷脂（hydrogenated soy phosphatidylcholine (HSPC))，和其它相關化合 物。帶負電荷的表面活性劑或乳化劑也適合作為添加劑，如，膽固醇硫酸酯鈉鹽（sodium cholesteryl sulfate)和類似物。
[0103] 在一些實施方式中，組合物適合施用給人。在一些實施方式中，組合物適合施用給 哺乳動物，如，在獸醫方面，家庭寵物和農業動物。有各種各樣的本發明組合物的合適的制 齊[J (見，如美國專利號5, 916, 596和6, 096, 331)。下列製劑和方法僅僅是示範性的並且決不 是限制性的。適合口服施用的製劑可以包括：(a)液體溶液，如溶解在稀釋液如水、鹽水或 橙汁中的有效量的化合物；(b)膠囊、囊劑或片劑，每個含有預定量的活性成分，為固體或 顆粒；（c)合適液體中的懸浮液；(d)合適的乳劑；和（e)粉劑（散劑）。片劑形式可以包括 下列一種或多種：乳糖、甘露醇、玉米澱粉、馬鈴薯澱粉、微晶纖維素、阿拉伯樹膠、明膠、膠 體二氧化娃、交聯羧甲基纖維素納（croscarmellose sodium)、滑石、硬脂酸鎂、硬脂酸、和 其它的賦形劑、著色劑、稀釋劑、緩衝劑、潤溼劑、防腐劑、矯味劑、和藥物上相容的賦形劑。 錠劑（Lozenge)形式可以包括調味劑（flavor)--一般為蔗糖和阿拉伯樹膠或西黃芪膠 (tragacanth)-中的活性成分，以及在惰性基質如明膠和甘油、或鹿糖和阿拉伯樹膠、乳 液、凝膠中包含活性成分的錠劑（pastilles)，和類似物--其除了活性成分之外還包含本 領域已知的賦形劑。
[0104] 適合腸胃外施用的製劑包括水的和非水的、等滲無菌注射液，其可以含有抗氧化 齊IJ、緩衝液、抑菌劑、和使製劑與意圖的受者的血液相容的溶質、以及可以包括懸浮劑、增溶 齊U、增稠劑、穩定劑、和防腐劑的水的和非水無菌懸浮液。製劑可以存在於單位劑量或多劑 量的密封容器如安瓿和小瓶中，並且能夠被存儲在冷凍-乾燥（凍幹）條件下，其在使用之 前即刻，只需要加入無菌液體賦形劑，例如，注射用水。可以從以前描述種類的無菌的粉劑、 顆粒和片劑製備臨時注射溶液。優選可注射製劑。
[0105] 適合氣霧劑（氣溶膠，aerosol)施用的製劑包括本發明的組合物，其包括水的和 非水的、等滲無菌溶液，其可以含有抗氧化劑、緩衝液、抑菌劑、和溶質，以及可以包括懸浮 齊U、增溶劑、增稠劑、穩定劑、和防腐劑的水的和非水無菌懸浮液，上述成分單獨地或與其它 合適的組分聯合，其可以被製成氣霧劑製劑通過吸入施用。這些氣溶膠製劑可以被置於受 壓的可接受的推進劑中，如二氯二氟甲烷、丙烷、氮、和類似物。它們也可以被製備為用於非 受壓配製的藥物，如在噴霧器或霧化器中。
[0106] 在一些實施方式中，組合物被配製為具有大約4. 5至大約9. 0的pH範圍，包括例 如，大約5. 0至大約8. 0、大約6. 5至大約7. 5、和大約6. 5至大約7. 0中的任意pH範圍。 在一些實施方式中，組合物的pH被配製為不低於大約6,包括例如，不低於大約下列任意： 6. 5、7、或8 (如大約8)。通過添加合適的張度修飾劑（tonicity modifier)如甘油，組合物 也可以被製成與血液等滲。
[0107] 也提供在合適的包裝中包含本文描述的組合物的製品。用於本文描述的組合物的 合適的包裝在本領域內是已知的，包括例如，小瓶（如密封小瓶）、容器、安瓿、瓶、罐、軟包 裝（如，密封的邁拉（Mylar)或塑膠袋）、和類似物。可以進一步消毒和/或密封這些製品。 也提供包含本文描述的組合物的單位劑型。這些單位劑型可以以單個或多個單位劑量被保 存在合適的包裝中並且也可以被進一步滅菌和密封。
[0108] 本發明也提供包含本文描述的組合物（或單位劑型和/或製品）的試劑盒，並且 可以進一步包括使用組合物的方法的說明書，如本文進一步描述的使用。在一些實施方式 中，本發明的試劑盒包括上面描述的包裝。在另外的實施方式中，本發明的試劑盒包括上面 描述的包裝和包含緩衝液的第二包裝。在一些實施方式中，本發明提供試劑盒，其包括：（1) 包含水難溶性藥劑和載體蛋白的組合物；和（2)抗微生物劑，其中，水難溶性藥劑/蛋白質 組合物和抗微生物劑在獨立的包裝中存在，並且其中當將抗微生物劑加入到水難溶性藥劑 /蛋白質組合物時，組合物中顯著的微生物生長被抑制。在一些實施方式中，試劑盒進一步 包括向藥物/蛋白質組合物加入抗微生物劑的說明書。本文描述的試劑盒可以進一步包括 從商業和使用者的觀點而言需要的其它材料，其包括另外的緩衝液、稀釋劑、過濾器、針、注 射器以及帶有用於實施本文描述的任何方法的說明書的包裝插入物（package inserts)。
[0109] 也可以提供包含足夠劑量的如本文公開的水難溶性藥劑（如紫杉醇）的試劑盒， 以便為個體提供延長時期的有效治療，所述時期如，1周、2周、3周、4周、6周、8周、3個月、 4個月、5個月、6個月、7個月、8個月、9個月或更長時間中的任意。試劑盒也可以包括多個 單位劑量的水難溶性藥劑和藥物組合物以及使用說明書，並且以足夠在藥房例如醫院藥房 和混合藥房（compounding pharmacies)中存儲和使用的量被包裝。
[0110] 製造和使用組合物的方法
[0111] 也提供製造和使用本文描述的組合物的方法。例如，提供了製備組合物的方法，所 述組合物包括水難溶性藥劑（如紫杉燒，例如，紫杉醇、多西紫杉醇或ortataxel)、載體蛋 白（如白蛋白）、和抗微生物劑，其中組合物中顯著的微生物生長被抑制，所述方法包括使 含有水難溶性藥劑和載體蛋白的組合物與抗微生物劑組合（如混合）。
[0112] 製造含有載體蛋白和水難溶性藥劑的組合物的方法在本領域內是已知的。例如， 可以在高剪切力的條件下（如，超聲處理、高壓勻漿，或類似方法）製備含有水難溶性藥劑 (如紫杉醇）和載體蛋白（如白蛋白）的納米顆粒。這些方法在例如美國專利第5,916, 596、 6, 506, 405、和6, 537, 579中被公開，並且也在美國專利公開第2005/0004002A1號中被公 開。
[0113] 簡要地，水難溶性藥物（如多西紫杉醇）被溶解在有機溶劑中，並且該溶液可以被 加到人血清白蛋白溶液中。混合物接受高壓勻漿。然後可以通過蒸發除去有機溶劑。得到 的分散體可以進一步被凍幹。合適的有機溶劑包括，例如，酮、酯、醚、氯化溶劑、和本領域已 知的其它溶劑。例如，有機溶劑可以是二氯甲烷和氯仿/乙醇（例如，以1:9、1:8、1:7、1:6、 1:5、1:4、1:3、1:2、1:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、或9:1的比例）。
[0114] 抗微生物劑或者在水難溶性藥劑/載體蛋白組合物的製備過程中，與水難溶性藥 劑和/或載體蛋白混合，或者在製備水難溶性藥劑/載體蛋白組合物之後被加入。例如，抗 微生物劑可以連同用於重建/懸浮水難溶性藥劑/載體蛋白組合物的水介質被加入，或者 被加入到載體蛋白結合的水難溶性藥劑的水懸浮液中。在一些實施方式中，在凍幹之前，抗 微生物劑與水難溶性藥劑/載體蛋白組合物混合。在一些實施方式中，抗微生物劑被加到 凍幹的藥劑/載體蛋白組合物中。
[0115] 在一些實施方式中，當抗微生物劑的加入改變了組合物的pH時，組合物的pH通常 (但不是必需地）被調整到所期望的pH。組合物的示範pH值包括，例如，在大約5至大約 8. 5的範圍內。在一些實施方式中，組合物的pH被調整到不低於大約6,其包括例如，不低 於大約6. 5、7、或8 (如大約8)中的任意。
[0116] 也提供製造藥物組合物的方法，其包括使本文描述的任意組合物（包括上面的那 些）與藥學上可接受的賦形劑結合。
[0117] 本文也提供使用本發明組合物的方法。在一些實施方式中，提供治療對水難溶性 藥劑起反應的疾病和病症的方法，其包括施用包含有效量的水難溶性藥劑、載體蛋白、和抗 微生物劑的組合物，其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。例如，在一些實施方式中，提 供治療個體（如人）中的癌症的方法，其包括給對象施用包含有效量的水難溶性抗腫瘤劑 (如紫杉烷）、載體蛋白、和抗微生物劑的組合物，其中組合物中顯著的微生物生長被抑制。 在一些實施方式中，抗微生物劑的量足以抑制組合物中顯著的微生物生長。在一些實施方 式中，當組合物被施用給個體（如人）時，組合物中的抗微生物劑進一步處於不引起任何毒 理效應的量。
[0118] 本文所用的術語"有效量"指足以治療指定的病症、狀況或疾病如改善、緩和、減 輕、和/或延遲其一種或多種症狀的化合物或組合物的量。關於癌症或其它不期望的細胞 增殖，有效量包括足以引起腫瘤縮小和/或減少腫瘤的生長速率（如抑制腫瘤生長）的量。 在一些實施方式中，有效量是足以延遲發展的量。在一些實施方式中，有效量是足以預防發 生和/或再發生的量。有效量可以在一次或多次給藥中被施用。
[0119] 被本文描述的組合物（如包含抗腫瘤劑如紫杉烷、雷帕黴素、和17-AAG的組合 物）治療的癌症包括但不限於，癌、淋巴瘤、胚細胞瘤、肉瘤、和白血病。可以被本文描述的 組合物治療的癌症的例子包括但不限於，鱗狀細胞癌、肺癌（包括小細胞肺癌、非小細胞肺 癌、肺腺癌、肺鱗狀細胞癌）、腹膜癌、肝細胞癌、胃的或胃癌（gastric or stomach cancer) (包括胃腸癌）、胰腺癌、惡性膠質瘤、宮頸癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝癌（heptoma)、乳 腺癌、結腸癌、黑素瘤、子宮內膜癌或子宮癌、唾液腺癌、腎癌或腎臟癌（kidney or renal cancer)、肝癌（liver cancer)、前列腺癌、夕卜陰癌、甲狀腺癌、肝癌（hepatic carcinoma)、 頭頸癌、結腸直腸癌、直腸癌、軟組織肉瘤、卡波西肉瘤、B-細胞淋巴瘤（包括低度/濾泡性 非霍奇金淋巴瘤（NHL)、小淋巴細胞（SL) NHL、中度/濾泡性NHL、中度彌散性NHL、高度免 疫母細胞NHL、高度成淋巴細胞NHL、高度小無裂細胞NHL(high grade small non-cleaved cell NHL)、巨大腫塊 NHL(bulky disease NHL)、套細胞淋巴瘤（mantle cell lymphoma)、 愛滋病相關淋巴瘤（AIDS-related lymphoma)、和巨球蛋白血症（Waldenstrom's macroglobulinemia))、慢性淋巴細胞白血病（CLL)、急性淋巴細胞白血病（ALL)、骨 髓瘤、毛細胞白血病、慢性髓性白血病、和移植後淋巴組織增生症（post-transplant lymphoproliferative disorder(PTLD))，以及與斑疲性錯構瘤病（phakomatoses)有關的 異常血管增生、水腫（如與腦瘤有關的水腫）、和梅格斯症候群（Meigs'syndrome)。在一些 實施方式中，提供治療轉移癌（就是，已經從原始腫瘤轉移的癌症）的方法。在一些實施方 式中，提供降低細胞增殖和/或細胞遷移的方法。在一些實施方式中，提供治療增生的方 法。
[0120] 在一些實施方式中，提供了治療晚期癌症的方法。在一些實施方式中，提供了治 療乳腺癌（其可以是HER2陽性或HER2陰性）的方法，其包括，例如，晚期乳腺癌、IV期乳 腺癌、局部晚期乳腺癌、和轉移性乳腺癌。在一些實施方式中，癌症是肺癌，包括例如，非小 細胞肺癌（NSCLC，如晚期NSCLC)、小細胞肺癌（SCLC，如晚期SCLC)、和肺中的晚期實體惡 性腫瘤。在一些實施方式中，癌症是卵巢癌、頭頸癌、胃惡性腫瘤、黑素瘤（包括轉移性黑素 瘤）、結腸直腸癌、胰腺癌、和實體瘤（如晚期實體瘤）。在一些實施方式中，癌症是下列任意 (並且在一些實施方式中選自）：乳腺癌、結腸直腸癌、直腸癌、非小細胞肺癌、非霍奇金淋 巴瘤（NHL)、腎細胞癌、前列腺癌、肝癌、胰腺癌、軟組織肉瘤、卡波西肉瘤、類癌（carcinoid carcinoma)、頭頸癌、黑素瘤、卵巢癌、間皮瘤、神經膠質瘤、惡性膠質瘤、成神經細胞瘤、和 多發性骨髓瘤。在一些實施方式中，癌症是實體瘤。
[0121] 適合接受這些組合物的個體取決於水難溶性藥劑的性質、以及要治療和/或預防 的疾病/狀況/病症。因此，術語個體包括脊椎動物、哺乳動物、和人類中的任意。在一些 實施方式中，個體是哺乳動物，包括但不限於，人類、牛、馬、貓、犬、齧齒動物、或靈長類。在 一些實施方式中，個體是人。
[0122] 本文描述的組合物可以被單獨施用或與包括水難溶性藥劑的其它藥劑聯合施 用。例如，當組合物包含紫杉烷（如紫杉醇）時，它可以與一種或多種其它的化療劑共同 施用，所述化療劑包括但不限於，卡鉬、mvelbine 1''(長春瑞賓（vinorelbine))、蒽環類抗 生素（Doxil)、拉帕替尼（lapatinib)(GW57016)、赫賽汀（Herceptin)、吉西他濱（健擇） (gemcitabine (Gemzar?))、卡培他濱（希羅達? ) (capecitabine (Xel〇da?)、力比泰 (alimta)、順鉬、5-氟尿啼陡、表阿黴素（epirubicin)、環磷醯胺、阿瓦斯丁（avastin)、萬 珂（veleade")等。在一些實施方式中，紫杉烷組合物與化療劑被同時施用，所述化療劑選 自：抗代謝物（包括核苷類似物）、基於鉬的藥劑、烷化劑、酪氨酸激酶抑制劑、蒽環類抗生 素、長春花鹼、蛋白酶抑制劑、大環內酯類（macrolides)、和拓撲異構酶抑制劑。這些其它 藥劑可以與藥物（如紫杉烷）存在於同一組合物中、或存在於與含有藥物（如紫杉烷）的 組合物同時或相繼施用的單獨組合物中。使用紫杉烷納米顆粒製劑與其它藥劑（或治療方 法）的聯合治療方法在國際專利申請第PCT/US2006/006167號中被描述。
[0123] 被施用給個體（如人）的本發明組合物的劑量將隨具體的組合物、施用方法、 和被治療的具體疾病而不同。所述劑量應該足以實現所期望的反應，如針對具體疾病的 治療性的或預防性反應。例如，組合物中紫杉醇的量，當以3周的時間表給藥時，可以在 100-400mg/m 2的範圍內，或當以每周的時間表給藥時，可以在50-250mg/m2的範圍內。此外， 如果以節拍式給藥法（metronomic regimen)(如每日、或每周幾次）給藥，所述劑量可以在 大約5-75mg/m2的範圍之內。
[0124] 本文描述的組合物可以經由各種途徑被施用給個體（如人），所述途徑包括，例 如，靜脈內、動脈內、肺內、口、吸入、囊內、肌肉內、氣管內、皮下、眼內、鞘內、經黏膜、和經 皮。例如，可以通過吸入施用本發明的組合物以治療呼吸道疾病。組合物可以被用於治療 呼吸疾病如肺纖維化、閉塞性細支氣管炎（broncheolitis obliterans)、肺癌、支氣管肺泡 癌、和類似疾病。
[0125] 本文也提供減少與給人施用水難溶性藥劑有關的副作用的方法，其包括給人施用 包含水難溶性藥劑、載體蛋白、和抗微生物劑的藥物組合物，其中組合物中顯著的微生物生 長被抑制。例如，本發明提供減少與水難溶性藥劑的施用有關的各種副作用的方法，所述副 作用包括但不限於，骨髓抑制、神經毒性、高敏性（超敏性）、炎症、靜脈刺激、靜脈炎、疼痛、 皮膚刺激、周圍神經病、粒細胞減少性發熱、過敏性反應、血液毒性、和腦或神經毒性，和它 們的組合。在一些實施方式中，提供減少與水難溶性藥劑施用有關的超敏反應的方法，所述 超敏反應包括，例如，嚴重的皮疹、麻疹、面紅（flushing)、呼吸困難、心動過速和其它。在一 些實施方式中，抗微生物劑以有效抑制藥物組合物中顯著的微生物生長的量存在。在一些 實施方式中，組合物中的抗微生物劑進一步以當組合物被施用給個體時，不引起任何毒理 效應的量、或可能的副作用可以被控制或耐受的水平存在。
[0126] 此外，提供增加包含水難溶性藥劑和載體蛋白的液體組合物的保存期（貨架期） 的方法。例如，在一些實施方式中，本發明提供保持被保存的包含水難溶性藥劑和載體蛋白 的組合物在液體介質中抵抗微生物生長（即無菌的或基本上沒有顯著的微生物生長）至少 24小時的方法，其包括向組合物中加入有效抑制組合物中的顯著的微生物生長的量的抗微 生物劑。在一些實施方式中，提供抑制包含載體蛋白和水難溶性藥劑的組合物（尤其在藥 物組合物中）中微生物生長的方法，所述方法包括向組合物加入有效抑制組合物中顯著的 微生物生長的量的抗微生物劑。
[0127] 抗微生物劑或是可以在水難溶性藥劑/載體蛋白組合物的製備過程中與水難溶 性藥劑和/或載體蛋白混合，或是可以連同用於重建藥物/載體蛋白組合物的水介質被加 入。在一些實施方式中，提供用於保持被保存的組合物抵抗微生物生長（即，無菌的或基本 上沒有顯著的微生物生長）至少下列任意時間的方法：24、36、48、60、72、84、或96小時。
[0128] 在本發明的另外的方面，提供了本文描述的組合物在藥物製備中的應用。特別地， 製造用於治療本文描述的疾病的藥物。進一步地，本文多方面描述的其藥物組合物，也意圖 用於製造在治療所述疾病中使用的藥物，所述藥物按照本文描述的方法使用，除非另外指 明。
[0129] 提供下列的實施例闡明本發明但不限制本發明。
[0130] 實施例1
[0131] 本實施例提供紫杉醇/白蛋白和防腐劑的製劑。基本上如在美國專利第 5, 439, 686和5, 916, 596號所述製備組合物。簡要地，紫杉醇被溶解在有機溶劑（如二氯甲 烷或氯仿/乙醇混合物）中，並且該溶液被加到人血清白蛋白溶液中。然後向混合物加入合 適量的抗微生物劑。將混合物在低的每分鐘轉數（RPM)下勻漿5分鐘以形成粗製乳液，然 後轉到高壓勻漿器中。在9000-40, 000磅/平方英寸（psi)下進行乳化，同時使乳液再循 環至少5個循環。得到的體系被轉移進旋轉蒸發器中，並且在40°C、在減壓（30mm Hg)下， 迅速去除有機溶劑20-30分鐘。然後將分散體進一步凍幹48小時。通過加入可能含有另 外的抗微生物劑（一種或幾種）的無菌水或鹽水，得到的團塊（cake)可以被容易地重建成 最初的分散體。
[0132] 下面提供了可以被製備的組合物的示範製劑（只提供紫杉醇、人白蛋白、和抗微 生物劑的濃度）：
[0133] 制齊Ll 1 :5mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白；0· 25ml焦亞硫酸鈉
[0134] 製劑2 :5mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白；0· 05mg/ml乙二胺四乙酸二鈉
[0135] 制齊Ll 3:5mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白；0· 5mg/ml山梨酸鉀
[0136] 制齊Ll 4:5mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白；lmg/ml苯甲酸鈉
[0137] 制齊Ll 5:7mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白；lmg/ml抗壞血酸鈉
[0138] 製劑6:7mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白；lmg/ml輕苯甲酸甲酯
[0139] 制齊Ll 7:7mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白；lmg/ml苯甲醇
[0140] 實施例2
[0141] 本實施例證明如何確定實施例1中描述的組合物中的抗微生物劑的有效性。
[0142] 利用膜過濾技術和肉湯培養，評價實施例1描述的製劑中的抗微生物劑的生長抑 制能力。被美國藥典（USP)推薦用於防腐效率試驗的每毫升大約50-200個菌落形成單位 (CFU)的四種標準生物體被接種到每一種製劑中。這四種生物體被確定為：金黃色葡萄球 菌（ATCC6538)、大腸桿菌（ATCC8739)、綠膿桿菌（ATCC9027)、和白色念珠菌（ATCC10231)。 除了這些生物體，表皮葡萄球菌（S.印idermidis) (ATCC12228)和金黃色葡萄球菌（凝固酶 陰性，ATCC27734)也可以被測試。接種測試生物體之後，在30-35°C溫育測試製劑。確定測 試生物體在選定時間點（如接種之後立刻和在30-35°C孵育24小時之後）的存活計數。
[0143] 如果在外源汙染後的24小時內，抗微生物劑能夠阻礙組合物中的微生物生長至 不大於1個對數的增長（10倍），則認為製劑中的抗微生物劑是有效的。
[0144] 實施例3
[0145] 本實施例證明紫杉醇和白蛋白的含糖製劑的改善的重建時間。在糖存在或不存在 的情況下，基本上如美國專利第5, 439, 686和5, 916, 596號所述製備組合物。簡言之，將紫 杉醇溶解在氯仿/乙醇（1 :1)混合物中，並且將該溶液加到人血清白蛋白溶液中。在低的 每分鐘轉數（RPM)下對混合物勻漿5分鐘以形成粗製乳液，然後轉移到高壓勻漿器中。在 9000-40, 000磅/平方英寸（psi)下進行乳化，同時使乳液再循環至少5個循環。得到的體 系被轉移進旋轉蒸發器中，並且在40°C、在減壓（30mm Hg)下，迅速去除氯仿/乙醇20-30 分鐘。然後分散體被進一步凍幹48小時。通過加入可能含有另外的抗微生物劑（一種或 幾種）的無菌水或鹽水，得到的團塊可以被容易地重建成最初的分散體。
[0146] 糖或者被加到人血清白蛋白溶液中，或者被加到在凍幹以前的分散體中。
[0147] 在本特定的實驗中，不加入抗微生物劑，但是其可以被加入。
[0148] 製備下列製劑：
[0149] 製劑1 :凍幹之前的懸浮液含有5mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白；10mg/ml甘露 醇。將該懸浮液裝進小瓶，每個小瓶中有250毫克紫杉醇。
[0150] 製劑2:凍幹之前的懸浮液含有5mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白；10mg/ml鹿糖。 將該懸浮液裝進小瓶，每個小瓶中有250毫克紫杉醇。
[0151] 製劑3:凍幹之前的懸浮液含有7mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白；90mg/ml鹿糖。 將該懸浮液裝進小瓶，每個小瓶中有300毫克紫杉醇。
[0152] 制齊[J 4:凍幹之前的懸浮液含有7mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白；50mg/ml甘露 醇。將該懸浮液裝進小瓶，每個小瓶中有300毫克紫杉醇。
[0153] 製劑5:凍幹之前的懸浮液含有7mg/ml紫杉醇；56mg/ml人白蛋白。將該懸浮液 裝進小瓶，每個小瓶中有300毫克紫杉醇。
[0154] 製劑3和4的凍乾產物在2分鐘以下被重建。製劑1、2和5的凍乾產物的重建 時間是相似的並且在大約8-12分鐘之間。令人驚訝地發現，10mg/ml的糖不足以顯著減少 nab-紫杉醇的重建時間。需要大約50-90mg/ml的糖減少重建時間。
[0155] 實施例4
[0156] 本實施例進一步證明含糖的紫杉醇/白蛋白製劑的有利性質。
[0157] 在一個實驗中，在糖存在或不存在的情況下，如上述製備紫杉醇和白蛋白的組合 物（nab-紫杉醇）。對於這兩種製劑，製備白蛋白-紫杉醇的凍幹小瓶，每瓶含有300mg。基 於糖的製劑含有90mg/ml濃度的蔗糖。使該凍乾產物接受加速穩定條件，55°C達30天。在 每一種製劑中測定雜質7-表紫杉醇（7-印itaxol)的百分比並且在零點大約是0.1%。在 第15天和第30天，在55°C，發現不含糖製劑的雜質水平分別為0. 6%和0. 8%，並且發現基 於糖的製劑的雜質水平分別為0. 4%和0. 6%。在基於糖的製劑令人驚訝地產生低較雜質 的基礎上，它的儲藏期應該實質上比不含糖的製劑長。
[0158] 在另外一個實驗中，大約1500毫升每種含有大約7mg/ml紫杉醇、56mg/ml人 白蛋白和90mg/ml鹿糖的製劑的液體懸浮液通過一系列具有0. 2 μ m的最終過濾能力 (200cm2EKV被膜）的濾器進行過濾。基於可濾過通過濾器的納米顆粒懸浮液的體積量，評 定每種製劑的過濾性。對於不含糖的製劑，可濾過的最大體積是1300毫升，在該點，濾過壓 增加超過25psi，表明濾膜堵塞或飽和。對於基於糖的製劑，注意到實質上增加的過濾性，在 沒有壓力增加的情況下濾過1500毫升。這令人驚訝地證明，與沒有糖的製劑相比，基於糖 的nab-紫杉醇製劑更容易被濾過同時潛能損失最小。
[0159] 實施例5
[0160] 本實施例證明在外來的汙染情況下，nab-紫杉醇可以作為微生物的生長培養基。 所述製劑分別含有5mg/ml的多西紫杉醇、紫杉醇和17-AAG。
[0161] 四種微生物株被用在本實驗中：大腸桿菌（ATCC Lot#97-08/Lot#483284); 金黃色葡萄球菌（ATCC Lot#1836394/Lot#485823);白色念球菌（ATCC Lot#98-01A/ Lot#443131);綠膿桿菌（ATCC Lot#378667/Lot#484882)。
[0162] 100-600 μ 1 (大約100-200CFU/ml)的每一種菌株被接種到2ml的測試批量樣品 管（見表1，每一個樣品都是2份）中，2ml TSB作為對照。用10%的樣品（10 μ 1無菌一次 性環的20滴）接種胰酶大豆瓊脂（Tryptic Soy Agar (TSA))平板，每一個樣品重複兩次。 TSA板於25°C ±1°C，在溫控培養箱中有氧溫育。在微生物接種後0小時、24小時和48小 時測定測試生物體菌落數和CFU/ml。
[0163] 如果在24小時或48小時的時期內、製劑顯示微生物生長的增加不超過10倍，則 該製劑被記為"是"（即，該製劑通過了測試）。
[0164] 表1.接種後48小時微生物生長
[0165]

【權利要求】
1. 組合物，其包括a)包含水難溶性藥劑和白蛋白的納米顆粒、b)乙二胺四乙酸鹽、和 c)蔗糖，其中所述組合物中顯著的微生物生長被抑制。
2. 權利要求1的組合物，其中所述組合物中白蛋白與所述水難溶性藥劑的重量比是 18:1或更低。
3. 權利要求1的組合物，其中所述組合物包括包覆有白蛋白的所述水難溶性藥劑的納 米顆粒。
4. 權利要求3的組合物，其中所述組合物中白蛋白與所述水難溶性藥劑的重量比是 18:1或更低。
5. 權利要求3的組合物，其中所述組合物中的所述納米顆粒具有不大於200nm的平均 直徑。
6. 權利要求5的組合物，其中所述組合物是無菌可濾過的。
7. 權利要求1的組合物，其中所述組合物是濃度為0. 1至20mg/ml的所述水難溶性藥 劑的水懸浮液。
8. 權利要求1的組合物，其中所述組合物是凍幹組合物，其可以被重建為0. 1至20mg/ ml濃度的所述水難溶性藥劑的水懸浮液。
9. 權利要求1的組合物，其中所述組合物適合腸胃外施用。
10. 權利要求1的組合物，其中所述組合物不含聚氧乙基化蓖麻油。
【文檔編號】A61K47/18GK104189905SQ201410319045
【公開日】2014年12月10日 申請日期:2006年8月30日 優先權日:2005年8月31日
【發明者】N·P·德賽, R·賽爾瓦拉賈, A·楊, P·M·D·順-希昂 申請人:阿布拉科斯生物科學有限公司