一種N‑芳基氨基甲醯基脯氨酸類化合物及其藥物組合物和應用的製作方法

2023-10-06 06:36:49 4

本發明涉及新的一種N-芳基氨基甲醯基脯氨酸類化合物及其藥學上可接受的鹽、氮氧化物、溶劑化物、各種比例混合物在內的立體異構體以及含有所述化合物的藥物組合物。本發明還涉及此類化合物的製備方法，並且還涉及該類化合物其藥學上可接受的鹽、氮氧化物、溶劑化物、各種比例混合物在內的立體異構體的用途，特別是在製備用於防護、處理、治療或減輕癌症病症的藥物中的用途。

背景技術：

從2001年至今，已經有二十餘個蛋白酪氨酸激酶抑制劑在臨床上用於各類腫瘤的治療，各大醫藥公司都開始這方面的研究。常見的受體PTK有：表皮生長因子受體(EGFR)，此類受體高表達於上皮細胞腫瘤；血小板衍化生長因子受體(PDGFR)，可通過多種效應作用於內皮細胞和間質細胞，促進血管形成；血管內皮細胞生長因子受體(VEGFR)。非受體PTK一般沒有細胞外結構，它們通常持續或暫時位於胞漿，或在細胞膜內側與跨膜受體結合，其通過細胞因子受體PTK細胞受體及其他信號通路執行信號轉導功能，主要包括SRC、ABL、JAK、CSK等家族。

就喹唑啉類化合物而言，在吉非替尼獲得很好的臨床效果之後，大家開始模仿此類化合物結構，經過電子等排原理等，迅速又上市了凡德他尼、拉帕替尼、來那替尼、伯舒替尼等藥物。凡德他尼(Vandetanib，ZD6474)是由阿斯利康公司開發的一類小分子化合物，對很多實體瘤均有潛在的抑制活性。凡德他尼可同時抑制VEGFR-2和EGFR兩種酪氨酸激酶，作用於腫瘤細胞的關鍵信號轉導通路上，進而抑制這類信號轉導通路中VEGF依賴型和EGFR依賴型腫瘤細胞的增殖和存活，對兩種激酶的IC50值分別為40、500nmol/L。

就脲類受體酪氨酸激酶抑制劑而言，首先上市的是索拉菲尼。索拉非尼(Sorafenib)，由Bayer公司和Onyx Pharmaceuticals公司研發，它能抑制VEGFR-2、VEGFR-3、PDGFR(血小板衍生生長因子受體，血管成長因子受體的一種，激活PDGFR可促進腫瘤生長)、c-Kit(幹細胞生長因子，在急性髓性白血病中表達較高)和Raf激酶。

卡博替尼(Cabozantinib)，由Exelixis公司研發。它能抑制VEGFR-2、MET(受體酪氨酸激酶的一種，在AML中分別較多)、RET、Kit、Flt3和Tek(受體酪氨酸激酶的一種)。2012年11月，美國FDA批准卡博替尼用於治療轉移性甲狀腺髓樣癌。

技術實現要素：

本發明的一方面涉及一種如通式I所示的化合物及其藥學上可接受的鹽、氮氧化物、溶劑化物以及包括其各種比例混合物在內的立體異構體，

X1為N，

E與X1一起構成具有1-3個N、0-2個O和/或0-2個S原子的3-7元飽和或不飽和雜環，

R1、R2彼此獨立，各自選自氫、滷素、硝基、氰基、N3、A、OR3a、SR3a、NHR3a、N(R3a)2、-OCOR3、OCONHR3、OCON(R3)3、NR3COA、NACOR3、NR3CONHA、NACONHR3、NR3CON(A)2、NACON(R3)2、NR3SO2A或者NASO2R3，

R3a為H、A、CH≡C-CH2-、A-C≡C-CH2-、CH2＝C-CH2-、A-CH＝C-CH2-、A-C(R4)＝C-CH2-、COOR4、CONHR4或CON(R4)2，

R3為H、A、CH≡C-CH2-、A-C≡C-CH2-、CH2＝C-CH2-、A-CH＝C-CH2-、A-C(R4)＝C-CH2-、COOR4、CONHR4、CON(R4)2、-[C(R4)2]g-Ar、-[C(R4)2]g-Het或-[C(R4)2]g-環烷基，

R4為H或A，

A為H或A2，

A2為具有1-10個碳原子的支鏈或者非支鏈烷基，其中，0-4個CH2基團可被O原子或S原子和/或-CH＝CH-基團替換，和/或0-7個H原子被滷素、羥基、氨基或下列基團替換，

其中，M為具有1-6個碳原子的支鏈或者非支鏈烷基，

X2為O、S或NR3，

X3為O、S、NR3、CHR3或C(R3)2，

G為-[C(R3)2]j-，

D為-[C(R3)2]g-環烷基，-[C(R3)2]g-Ar或-[C(R3)2]g-Het，

Y為Ar-二基或雜芳-二基，

L1為NH、NR9、O、S，R9為A、-[C(R3)2]g-Ar或-[C(R3)2]g-Het。，

T為下列結構，

其中，

Z1a為N或CR8，R8為氫、羥基、滷素、硝基、氰基、R3、OR3、COR3、COOR3或OCOOR3，

Z1b為N或CR7，R7選自氫、滷素、硝基、氰基、N3、A、OR3、SR3、NHR3、N(R3)2、COR3、SO2NHR3、SO2N(R3)2、SONHR3、SON(R3)2、COOR3、CONHR3、CON(R3)2、-[C(R3)2]g-Ar、-[C(R3)2]g-Het、-[C(R3)2]g-環烷基、-OCOR3、OCONHR3、OCON(R1)3、NR3COA、NACOR3、NR3CONHA、NACONHR3、NR3CON(A)2、NACON(R3)2、NR3SO2A或者NASO2R3，R5、R6相互獨立，各自選自氫、滷素、硝基、氰基、N3、A、OR3、SR3、NHR3、N(R3)2、COR3、SO2NHR3、SO2N(R3)2、SONHR3、SON(R3)2、COOR3、CONHR3、CON(R3)2、-[C(R3)2]g-Ar、-[C(R3)2]g-Het、-[C(R3)2]g-環烷基、-OCOR3、OCONHR3、OCON(R1)3、NR3COA、NACOR3、NR3CONHA、NACONHR3、NR3CON(A)2、NACON(R3)2、NR3SO2A或者NASO2R3，或者R5、R6、R7、R8兩兩之間形成飽和或不飽和的、芳族或非芳族碳環或雜環，其可被未取代或進一步被以下基團單取代、二取代或三取代：滷素、硝基、氰基、N3、A、OR3、SR3、NHR3、N(R3)2、COR3、SO2NHR3、SO2N(R3)2、SONHR3、SON(R3)2、COOR3、CONHR3、CON(R3)2、-[C(R3)2]g-Ar、-[C(R3)2]g-Het、-[C(R3)2]g-環烷基、-OCOR3、OCONHR3、OCON(R1)3、NR3COA、NACOR3、NR3CONHA、NACONHR3、NR3CON(A)2、NACON(R3)2、NR3SO2A或者NASO2R3，各取代基之間相互獨立；

Ar為苯基、萘基或聯苯基，它們各自未取代或被以下基團單取代、二取代、三取代或四取代：滷素、硝基、氰基、N3、A、OR3、SR3、NHR3、N(R3)2、COR3、SO2NHR3、SO2N(R3)2、SONHR3、SON(R3)2、COOR3、CONHR3、CON(R3)2、-OCOR3、OCONHR3、OCON(R3)2、NR3COA、NACOR3、NR3CONHA、NACONHR3、NR3CON(A)2、NACON(R3)2、NR3SO2A或者NASO2R3，各取代基之間相互獨立；

Het為具有1-4個N、O和/或S原子的單環或雙環或三環、飽和或不飽和的、芳族或非芳族雜環，其可被未取代或被以下基團單取代、二取代、三取代或四取代：滷素、硝基、氰基、N3、A、OR3、SR3、NHR3、N(R3)2、COR3、SO2NHR3、SO2N(R3)2、SONHR3、SON(R3)2、COOR3、CONHR3、CON(R3)2、-OCOR3、OCONHR3、OCON(R3)2、NR3COA、NACOR3、NR3CONHA、NACONHR3、NR3CON(A)2、NACON(R3)2、NR3SO2A或者NASO2R3，各取代基之間相互獨立；

j為0，1或2，

g為0，1或2，

滷素為氟、氯、溴或碘。

術語「環烷基」是指非芳族的、飽和的或部分不飽和的環烴基團，所述環烷基可以任意地被一個或多個本申請所述的取代基取代，其具有3-20個碳原子成為單環的環，或者7-12個碳原子成為二環的環，其可被未取代或被以下基團單取代、二取代、三取代或四取代：滷素、硝基、氰基、N3、E、OR5、SR5、NHR5、N(R5)2、COR5、SO2N(R5)2、SON(R5)2、COOR5、CONHR5、CON(R5)2、-OCOR5、OCONHR5、OCON(R5)2、NR5COE、NR5CONHE、NR5CON(E)2或者NR5SO2E，各取代基之間相互獨立。單環環烷基的實例包括但是不局限於環丙基、環丁基、環戊基、1-環戊-1-烯基、1-環戊-2-烯基、1-環戊-3-烯基、環己基、1-環己-1-烯基、環庚基、環辛基。示例性的成橋二環環烷基包括但是不局限於二環[2.2.1]庚烷、二環[2.2.2]辛烷、二環[3.2.2]壬烷。「亞環烷基」其通過從所述的環烴結構的單個碳原子或者兩個碳原子上除去兩個氫原子得到。

術語「Ar」表示芳基，即6-20個碳原子的單價芳族烴基，其通過從母體芳族環系統的單個碳原子上除去一個氫原子得到。芳基包括二環基團，該二環將基團中包括稠合至飽和的或部分不飽和的芳族環，或者芳族碳環或雜環的環。通常芳基基團包括但是不局限於以下的基團：苯、取代的苯、萘、蒽、聯苯基、1,2-二氫萘、1,2,3,4-四氫萘基等等。更具體地，

Ar為苯基、萘基或聯苯基，它們各自未取代或被以下基團單取代、二取代、三取代或四取代：滷素、硝基、氰基、N3、E、OR5、SR5、NHR5、N(R5)2、COR5、SO2N(R5)2、SON(R5)2、COOR5、CONHR5、CON(R5)2、-OCOR5、OCONHR5、OCON(R5)2、NR5COE、NR5CONHE、NR5CON(E)2或者NR5SO2E，各取代基之間相互獨立。「Ar-二基」即6-20個碳原子的單價芳族烴基，其通過從所述的母體芳族環系統的兩個碳原子上分別除去兩個氫原子得到。

術語「Het」為具有1-4個N、O和/或S原子的單環或雙環、飽和或不飽和的、芳族或非芳族雜環，其可被未取代或被以下基團單取代、二取代、三取代或四取代：滷素、硝基、氰基、N3、E、OR5、SR5、NHR5、N(R5)2、COR5、SO2N(R5)2、SON(R5)2、COOR5、CONHR5、CON(R5)2、-OCOR5、OCONHR5、OCON(R5)2、NR5COE、NR5CONHE、NR5CON(E)2或者NR5SO2E，各取代基之間相互獨立。更具體地，術語「Het」表示「雜環基」或者「雜芳基」。

「雜環基」是指3-20個環原子的飽和的或部分不飽和(即在環中具有一個或多個雙或三鍵)碳環基團，其中至少一個環原子是選自以下的雜原子：氮、氧、磷、硫，可以任意地被一個或多個本申請所述的取代基取代。還包括這樣的基團，即其中雜環基團與飽和的、部分飽和的環稠合，或者與芳族碳環或雜環的環稠合。「雜環基」的實例包括但是不局限於吡咯烷基、四氫呋喃基、四氫吡喃基、嗎啉代、硫嗎啉代、哌嗪基、環氧丙烷基、咪唑烷基、3-氮雜二環[3.1.0]己烷基、3-氮雜二環[4.1.0]庚烷基、氮雜二環[2.2.2]己烷基、N-吡啶基脲、嘧啶酮基和1,1-二氧代-硫嗎啉基。

「雜芳基」是指5-、6-、7-、8、9或10-元環的一價芳香基團，並且包括5-20個原子的稠合系統，含有一個或多個選自氮、氧、磷和硫的雜原子，可以任意地被一個或多個本申請所述的取代基取代。「雜芳基」的實例包括但是不局限於吡啶基、咪唑基、咪唑並吡啶基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、噻唑基、喹啉基、吲哚基等等。苯並噻唑基、苯並噁唑基、苯並噻吩基、喹啉基、奎寧環基、喹啉基-N-氧化物、四氫異喹啉基、異喹啉基、苯並咪唑基、苯並吡喃基、苯並呋喃基、喹喔啉基、噌啉基、吲唑基、吡咯並吡啶基、呋喃並吡啶基、二氫異吲哚基、二氫喹唑啉基、苯並異噻唑基、苯並異惡唑基、苯並二嗪基、苯並吡唑基、嘌呤基、吡啶並吡啶基、吡咯並三嗪基、喹唑啉基、四氫喹啉基、噻吩並呋喃基、噻吩並吡啶基等等。「雜芳-二基」是指其通過從所述的雜芳結構的兩個碳原子上分別除去兩個氫原子得到。

本發明的一方面涉及一種如通式I所示的化合物及其藥學上可接受的鹽、氮氧化物、溶劑化物以及包括其各種比例混合物在內的立體異構體，其中，，T包含下面的結構，

R10、R11相互獨立，各自選自氫、A、COOR3、CONHR3、CON(R3)2、-[C(R3)2]g-Ar、-[C(R3)2]g-Het、-[C(R3)2]g-環烷基；或R10、R11兩兩之間形成雜環，其可被未取代或進一步被以下基團單取代、二取代或三取代：A、OR3、SR3、NHR3、N(R3)2、COR3、SO2NHR3、SO2N(R3)2、SONHR3、SON(R3)2、COOR3、CONHR3、CON(R3)2、-[C(R3)2]g-Ar、-[C(R3)2]g-Het、-[C(R3)2]g-環烷基、-OCOR3、OCONHR3、OCON(R1)3、NR3COA、NACOR3、NR3CONHA、NACONHR3、NR3CON(A)2、NACON(R3)2、NR3SO2A或者NASO2R3，各取代基之間相互獨立；

R12、R13相互獨立，各自選自氫、滷素、硝基、氰基、N3、A、OR3、SR3、NHR3、N(R3)2、COR3、SO2NHR3、SO2N(R3)2、SONHR3、SON(R3)2、COOR3、CONHR3、CON(R3)2、-[C(R3)2]g-Ar、-[C(R3)2]g-Het、-[C(R3)2]g-環烷基、-OCOR3、OCONHR3、OCON(R1)3、NR3COA、NACOR3、NR3CONHA、NACONHR3、NR3CON(A)2、NACON(R3)2、NR3SO2A或者NASO2R3，

Z2a為N或CR14，R14為氫或氰基，

Z2b為N或CR15，R15為氫、A、NHR3、N(R3)2、-[C(R3)2]g-Ar、-[C(R3)2]g-Het、-[C(R3)2]g-環烷基、NR3COA、NACOR3、NR3CONHA、NACONHR3、NR3CON(A)2、NACON(R3)2、NR3SO2A或者NASO2R3。

本發明的一方面涉及一種如通式I所示的化合物及其藥學上可接受的鹽、氮氧化物、溶劑化物以及包括其各種比例混合物在內的立體異構體，其中，E與X1一起形成的飽和或不飽和雜環，包含但是不局限於下列的結構：

R14各自選自氫、滷素、OR3a或OCONHR3。

本發明的一方面涉及一種如通式I所示的化合物及其藥學上可接受的鹽、氮氧化物、溶劑化物以及包括其各種比例混合物在內的立體異構體，其中，其特徵在於，Y片段為Ar-二基，其未取代或被以下基團單取代或二取代：滷素、硝基、氰基、A、OR3、SR3、NHR3、N(R3)2、COR3、SO2NHR3、SO2N(R3)2、SONHR3、SON(R3)2、COOR3、CONHR3、CON(R3)2、-OCOR3、OCONHR3、OCON(R1)3、NR3COA、NACOR3、NR3CONHA、NACONHR3、NR3CON(A)2、NACON(R3)2、NR3SO2A或者NASO2R3，各取代基之間相互獨立。

本發明的一方面涉及一種如通式I所示的化合物及其藥學上可接受的鹽、氮氧化物、溶劑化物以及包括其各種比例混合物在內的立體異構體，其中，其特徵在於，D為苯基、吡啶基、噻吩基、呋喃基、咪唑基，其未取代或被以下基團單取代、二取代或三取代：滷素、硝基、氰基、N3、A、OR3、SR3、NHR3、N(R3)2、COR3、SO2NHR3、SO2N(R3)2、SONHR3、SON(R3)2、COOR3、CONHR3、CON(R3)2、-[C(R3)2]g-Ar、-[C(R3)2]g-Het、-[C(R3)2]g-環烷基、-OCOR3、OCONHR3、OCON(R1)3、NR3COA、NACOR3、NR3CONHA、NACONHR3、NR3CON(A)2、NACON(R3)2、NR3SO2A或者NASO2R3，各取代基之間相互獨立。

本發明的一方面涉及一種如通式I所示的化合物及其藥學上可接受的鹽、氮氧化物、溶劑化物以及包括其各種比例混合物在內的立體異構體，其中，其特徵在於，X1為NH，X2為O或NH，X3為NH，L1為NH或O。

短語「可接受的鹽」，是指本發明化合物的藥學上可接受有機或無機鹽。示例性的鹽包括但是不局限於硫酸鹽、枸櫞酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、酸式硫酸鹽、異煙酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、酸式枸櫞酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、葡萄糖酸鹽、甲酸鹽、甲磺酸鹽和巴莫酸鹽。「可接受的鹽」可涉及包括另一分子例如馬來酸鹽或其他平衡離子。平衡離子在母體化合物中穩定電荷。「可接受的鹽」可以有多於一個的荷電原子，多個荷電原子可具有多個平衡離子。

如果本發明化合物是鹼，需要的「可接受的鹽」可通過適宜的方法製備，例如，用以下的無機酸處理該游離鹼：鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸；或者用如下的有機酸：乙酸、馬來酸、琥珀酸、扁桃酸、富馬酸、丙二酸、丙酮酸、水楊酸、吡喃糖苷基酸如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸、α-羥基酸如枸櫞酸或酒石酸、胺基酸如穀氨酸、芳香族酸如苯甲酸或肉桂酸、磺酸如甲磺酸或對甲苯磺酸。

如果本發明化合物是酸，需要的「可接受的鹽」可通過適宜的方法製備，例如，用如下的無機鹼或者有機鹼處理該游離酸：胺、鹼金屬氫氧化物或鹼土金屬氫氧化物等。適宜的鹽的示例性的示例包括但是不限於由胺基酸得到的有機鹽，伯、仲、叔胺鹽，以及環狀胺例如哌啶、嗎啉和哌嗪的鹽，以及由鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁和鋰得到的無機鹽。

溶劑合物是指一個或多個溶劑分子與本發明化合物的結合物或絡合物。形成溶劑合物的溶劑的示例包括但是不局限於水、異丙醇、乙醇、甲醇、二甲亞碸、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。

本發明的化合物可以含有不對稱中心或手性中心，並且因此存在不同的立體異構體形式。本發明化合物的所有立體異構體形式，包括但不局限於，非對映體、對映體和位阻異構體，以及它們的混合物例如外消旋混合物，將形成本發明的一部分。在本文中，當任何特定手性原子的立體化學未確定時，所有立體異構體均被考慮。此外，本發明涉及所有的幾何和位置異構體。本發明化合物可以以不同的互變異構體形式存在，並且所有這些形式均包括在本發明範圍內。本發明化合物可以以非溶劑化形式存在，也可以與藥學上可接受的溶劑如水、乙醇等以溶劑化形式存在，所以本發明將包括溶劑化和非溶劑化的形式。

本發明的一方面涉及一種如通式I所示的化合物及其藥學上可接受的鹽、氮氧化物、溶劑化物以及包括其各種比例混合物在內的立體異構體，其中，包含但是不局限於下列結構：

本發明還公開了製備通式1所述的化合物及其藥學上可接受的鹽、氮氧化物、水合物、溶劑化物以及包括其各種比例混合物在內的立體異構體的方法，可以按照以下的路線以及步驟進行：

所述步驟包括：

(1)第一步：異氰酸酯類化合物與1-氨基環烷基甲酸酯及其類似物生成脲-酯類化合物；

(2)第二步：脲-酯類化合物水解後生成脲-酸類化合物(片段A)；

(3)第三步：脲-酸類化合物(片段A)與胺類化合物(片段B)在縮合劑的作用下生成目標化合物。

我們的合成策略是，首先是得到片段A以及片段B，然後進行兩個片段的拼接。片段A的合成，主要是指脲的合成方法。方法主要有以下幾種策略：

1)胺與異氰酸酯直接反應，

2)兩種胺類化合物在三光氣的作用下生成，

3)兩種胺類化合物在CDI(羰基二咪唑)的作用下生成，

4)兩種胺類化合物在氯甲酸酯的作用下生成，氯甲酸酯包括氯甲酸苯酯、氯甲酸對硝基苯酯、氯甲酸-2-異丙烯酯、氯甲酸-2-三氟乙基酯或者氯甲酸-2-三氯乙基酯。

片段A的合成，具體的，我們以如下的反應方程式舉例說明此類化合物反應路線：

異氰酸酯類化合物與1-氨基環烷基甲酸甲酯及其類似物生成脲-甲酯類化合物；然後甲酯水解之後生成酸類生成酸類化合物。水解的條件包括LiOH、NaOH、LiI/吡啶等等。

更加具體地，按照我們設計的合成方法，我們製備了片段A-1～片段A-6這6個化合物作為片段A類脲-酸類化合物的代表。

關於片段A的合成，除了上述的方法，在下面的文獻中也有相關的描述，比如片段A-7～A-8的合成：

(參考文獻：C·察克拉基迪斯，D·多爾施，W·梅德爾斯基，B·切贊尼，J·格萊茨.在治療血栓栓塞性疾病中用作凝血因子XA抑制劑的1-(苯基氨基甲醯基)-2-{4-(3-氧代-嗎啉-4-基)-苯基氨基甲醯基}吡咯烷衍生物及相關化合物[P].中國專利：CN1771237A.)

關於片段B的製備方法，目前已經有很多文獻報導，可以按照文獻的製備方法進行製備，現舉例如下：

例(1)

(參考文獻：Tran,A.T.；Wen,D.；West,N.P.；et al.Inhibition studies on Mycobacterium tuberculosis N-acetylglucosamine-1-phosphate uridyltransferase.Org.Biomol.Chem.2013,11,8113–8126.)

例(2)

(參考文獻：J·G·庫明.化合物[P].中國專利：CN1321151A.)

例(3)

(參考文獻：Kubo,K.；Shimizu,T.；Ohyama,S.；Murooka,H.；et al.Novel Potent Orally Active Selective VEGFR-2Tyrosine Kinase Inhibitors:Synthesis,Structure-Activity Relationships,and Antitumor Activities of N-Phenyl-N′-{4-(4-quinolyloxy)phenyl}ureas.J.Med.Chem.2005,48,1359-1366.)

例(4)

(參考文獻：Garofalo,A.；Goossens,L.；Baldeyrou,B.；et al.Design,Synthesis,and DNA-Binding of N-Alkyl(anilino)quinazoline Derivatives.J.Med.Chem.2010,53,8089–8103.)

例(5)

(參考文獻：Yao,J.；Chen,J.；He,Z.；et al.Design,synthesis and biological activities of thiourea containing sorafenib analogs as antitumor agents.Bioorg.Med.Chem.2012,20,2923–2929.)

例(6)

(參考文獻：Yao,J.；He,Z.；Chen,J.；et al.Design,synthesis and biological activities of sorafenib derivatives as antitumor agents.Bioorg.Med.Chem.Lett.2012,22,6549–6553.)

例(7)

(參考文獻：宮平，趙燕芳，劉亞婧，翟鑫.喹唑類及噌啉類化合物及其應用[P].中國專利：CN102643268B.)

例(8)

(參考文獻：Kung,P.；Funk,L.；Meng,J.；et al.Structure activity relationships of quinoline-containing c-Met inhibitors.Eur.J.Med.Chem.2008,43,1321-1329.)

關於包含片段B相關結構的合成方法，除了上述文獻報導了相關合成，在如下的文獻中也有詳細的描述：1)US20130137708A；2)US20090306103A；3)US20150376133A；4)Garofalo,A.；Goossens,L.；Six,P.；et al.Impact of aryloxy-linked quinazolines:A novel series of selective VEGFR-2receptor tyrosine kinase inhibitors.Bioorg.Med.Chem.Lett.2011,21,2106–2122；5)黃偉，叢欣，葉軍，趙興娥，王佳.一種稠雜環衍生物及其應用[P].中國專利：CN103183674A；6)Lü,S.；Zheng,W.；Ji,L.；et al.Synthesis,characterization,screening and docking analysis of 4-anilinoquinazoline derivatives as tyrosine kinase inhibitors.Eur.J.Med.Chem.2013,61,84-94；7)Rowbottom,M.W.；Faraoni,R.；Chao,Q.,et al.Identification of 1-(3-(6,7-Dimethoxyquinazolin-4-yloxy)phenyl)-3-(5-(1,1,1-trifluoro-2-methylpropan-2-yl)isoxazol-3-yl)urea Hydrochloride(CEP-32496),a Highly Potent and Orally Efficacious Inhibitor of V-RAF Murine Sarcoma Viral Oncogene Homologue B1(BRAF)V600E.J.Med.Chem.2012,55,1082–1105；8)Garofalo,A.；Farce,A.；Ravez,S.；et al.Synthesis and Structure-Activity Relationships of(Aryloxy)quinazoline Ureas as Novel,Potent,and Selective Vascular Endothelial Growth Factor Receptor-2Inhibitors.J.Med.Chem.2012,55,1189–1204；9)Shreder,K.R.；Wong,M.S.；Nomanbhoy,T.；et al.Synthesis of AX7593,a Quinazoline-Derived Photoaffinity Probe for EGFR.Org.Lett.2004,6(21),3715–3718。

關於結構通式I所示的化合物的合成，可以用片段A中的任一結構與片段B中的任一結構在縮合劑的存在下縮合而成。更加具體地，本專利所保護的化合物包括但是並不局限於A1～A8所代表的任一結構與B1～B9所代表的任一結構隨機搭配縮合生成的任何化合物。縮合過程中，所用到的縮合試劑選自但是不局限於磷酸鹽類試劑(PyCloP、PyBroP、PyBOP、PyAOP)，脲類試劑(HBTU、HATU、TBTU)，苯並三氮唑類縮合試劑(BOMI、BDMP)，碳二醯亞胺類試劑(DCC、EDC、DIC)，咪唑類試劑(CDI)，有機磷類試劑(DPPA、DPP-Cl、BOP-Cl)，酸性滷化物試劑(氯化試劑選自新戊醯氯、亞硫醯氯、草醯氯、氰尿醯氯、BTC)，氯代甲酸酯；所用到的鹼選自但是不局限於三乙胺，DIEA，NMM，DMAP，三甲基吡啶，碳酸氫鈉。

本發明的另一方面提供了一種藥物組合物，包含一種或多種所述的式I的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其異構體，以及藥學上可接受的載體、稀釋劑、賦形劑、輔劑、媒介物或它們的組合。這些組合物亦可在食品或保健品中有所應用。

所述的藥物組合物可以包含一種或多種所述的式I的化合物，也可以更進一步地包含附加治療劑，這些附加治療劑選自：抗腫瘤藥、抗增殖劑、抗病毒劑、抗炎劑、免疫調節劑、神經因子、心血管疾病治療劑、血管障礙治療劑、免疫缺陷性障礙治療劑、抗抑鬱藥、帕金森病治療藥、阿爾茲海默病治療藥或它們的組合。但是不局限於上述已經列出的化合物。

本發明的另一方面提供了用所述的式I化合物來製備用於防護、處理、治療或減輕患者疾病、病症或病狀的藥物的用途，其包含給需要的哺乳動物施用有效量的本發明的化合物或其立體異構體、幾何異構體、互變異構體、溶劑合物和「可接受的鹽」。所述的疾病、病症或病狀的實例包括但是不局限於癌症、瘤轉移、病毒性病症、細菌感染病症、血管生成性病症、自體免疫疾病、炎症性病症、與器官移植相關聯的病狀、帕金森病、阿爾茲海默病、亨廷頓病、精神分裂症、抑鬱症、焦慮症、躁狂症。更加具體地，用所述的式I化合物來製備用於防護、處理、治療或減輕患者癌症、瘤轉移、病毒性病症、細菌感染病症、帕金森病、阿爾茲海默病、抑鬱症的用途。更加更加具體的用途，是用所述的式I化合物來製備用於防護、處理、治療或減輕癌症、瘤轉移。

根據本發明方法，用所述的式I化合物來製備用於防護、處理、治療或減輕癌症、瘤轉移，包括但是不局限於乳腺癌、卵巢癌、宮頸癌、前列腺癌、睪丸癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、成膠質細胞癌、成神經細胞癌、胃癌、皮膚癌、角化棘皮癌、肺癌、表皮樣癌、大細胞癌、非小細胞癌、小細胞癌、肺腺癌、骨癌、結腸癌、腺癌、胰腺癌、腺癌、甲狀腺癌、濾泡性癌、未分化癌、乳頭狀癌、精原細胞癌、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌和膽管癌、腎癌、骨髓樣障礙、淋巴樣障礙、毛細胞癌、口腔和咽癌、唇癌、舌癌、嘴癌、小腸癌、結腸直腸癌、大腸癌、直腸癌、腦和中樞神經系統癌、何杰金氏病或白血病。

本發明的另一方面提供了用包含所述的式I化合物的藥物組合物來製備用於防護、處理、治療或減輕患者疾病、病症或病狀的藥物的用途。這些藥物組合物包含一種或多種所述的式I的化合物或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物或其異構體，以及藥學上可接受的載體、稀釋劑、賦形劑、輔劑、媒介物或它們的組合。所述的疾病、病症或病狀的實例包括但是不局限於癌症、瘤轉移、病毒性病症、血管生成性病症、自體免疫疾病、炎症性病症、與器官移植相關聯的病狀、帕金森病、阿爾茲海默病、抑鬱症、焦慮症。更加具體地，是用包含所述的式I化合物的藥物組合物來製備用於防護、處理、治療或減輕患者癌症、瘤轉移的用途。

根據本發明方法，用所述的式I化合物的藥物組合物來製備用於防護、處理、治療或減輕癌症、瘤轉移，包括但是不局限於胃癌、乳腺癌、甲狀腺癌、腎癌、肝癌、卵巢癌、宮頸癌、肺癌、前列腺癌、睪丸癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、皮膚癌、角化棘皮癌、表皮樣癌、大細胞癌、非小細胞癌、小細胞癌、肺腺癌、骨癌、結腸癌、胰腺癌、腺癌、乳頭狀癌、黑素瘤、肉瘤、膀胱癌、膽管癌、口腔和咽癌、唇癌、舌癌、嘴癌、小腸癌、結腸癌、大腸癌、直腸癌、腦和中樞神經系統癌、何杰金氏病或白血病。

根據本發明方法，所述的心血管疾病包括但是不局限於再狹窄、心肥大、動脈粥樣硬化、心肌梗塞和充血性心力衰竭。

根據本發明方法，所述的的神經變性疾病包括但是不局限於阿爾茨海默氏病、帕金森病、肌萎縮側索硬化、亨廷頓病和腦缺血，以及由創傷性損傷、穀氨酸神經毒性和缺氧引起的神經變性疾病。

根據本發明方法，所述的炎症疾病包括但是不局限於前列腺炎、乳腺炎、腎炎、類風溼性關節炎、牛皮癬、接觸性皮炎和遲髮型超敏反應。

本發明化合物可以通過適宜所治療病況的任何途徑施用。適宜的途徑包括但是不局限於口腔、胃腸外(包括皮下、肌內、靜脈內、動脈內、皮內)、陰道、腹膜內、肺內和鼻內。應當理解，優選的途徑可以因例如病人的病況變化。當所述化合物經口施用時，可以將其與藥學上可接受的載體或賦形劑配製成丸劑、膠囊劑、片劑等。當所述化合物配製成胃腸外時，其可以與藥學上可接受的胃腸外載體配製。

本發明可以以任意方便的給藥形式施用化合物，例如，片劑、粉末、膠囊、溶液、分散系、懸浮液、糖漿、噴霧劑、栓劑、凝膠、乳劑、貼劑等。這樣的組合物可以含有藥物製劑的常規組分，例如稀釋劑、載體、pH調節劑、甜味劑、填充劑和其他活性劑。如果需要胃腸外給藥，組合物是無菌的，且是適合注射或者輸注的溶液或懸浮液形式。

典型的製劑是通過將本發明化合物和載體、稀釋劑或賦形劑混合來製備。適宜的載體載體、稀釋劑或賦形劑混包括但是不局限於如下的材料：碳水化合物、蠟類、水可溶或可膨脹聚合物、親水性或疏水性材料、明教、油類、溶劑、水等。所用的具體載體、稀釋劑或賦形劑將取決於本發明化合物被應用的方式和目的。溶劑根據安全性來選擇，一般選擇水性溶劑以及可溶解或分散於水中的其他非毒性溶劑。適宜的水性溶劑包括但是不局限於水、乙醇、聚乙二醇等及其混合物。所述的製劑還可以包括一種或者多種緩衝劑、增溶劑、表面活化劑、潤溼劑、潤滑劑、乳化劑、混懸劑、防腐劑、抗氧劑、遮光劑、助流劑、著色劑、增甜劑、芳香劑、調味劑和其他已知的添加劑。製備緩控釋製劑包括但是不局限於聚酯、水凝膠、聚乳酸化合物、L-穀氨酸的共聚物、非降解乙烯醋酸乙烯酯、可降解的乳酸-羥基乙酸共聚物。

本發明的化合物可以單獨使用，或者與其他治療劑聯合使用。聯合治療可以提供協同作用，即當活性成分一起使用時達到的效果，大於分別使用所述化合物所產生效果的加和。

所述聯合治療可以以同時或連續的方案施用。當連續施用時，所述組合可以以兩種或多種用法來施用。化合物可以再單一的藥物組合中一起施用，或分開施用，且當分開施用時，可以同時地或以任意次序先後地進行。

本發明的化合物或其異構體、溶劑合物、可接受的鹽，被來製備用於防護、處理、治療或減輕患者疾病、病症或病狀的藥物的用途時，可以與附加治療劑聯合使用。其中，抗腫瘤藥包括在靶向治療和常規化療中使用的化合物。預見到用於聯合治療的許多合適的化療劑用於本發明的方法中。本發明預見到，但是不局限於，施用多種抗癌劑，例如：誘導細胞凋亡的試劑，多核苷酸；多肽；藥物；生物模擬物；生物鹼；烷化劑；抗腫瘤抗生素；抗代謝物；激素；鉑化合物；與抗癌藥物綴合的單克隆抗體，毒素，或者放射性核素；生物效應調節劑(如幹擾素和白介素)；過繼免疫治療劑；造血生長因子；誘導腫瘤細胞分化的試劑(如全反式維甲酸)；基因治療劑；反義治療劑和核苷酸；腫瘤疫苗；血管生成劑等。

在化療劑的定義中也包括但是不局限於：(1)對腫瘤起作用的激素進行調節或抑制的抗激素劑，如抗雌激素和選擇性的雌激素受體調節劑，包括他莫昔芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬；(2)抑制酶芳香酶抑制劑(所述芳香酶調節腎上腺的雌激素產生)，例如氨魯米特、福美坦；(3)抗雄激素例如氟他胺、尼魯米特、亮丙瑞林和戈舍瑞林；(4)蛋白激酶抑制劑；(5)脂質激酶抑制劑；(6)抗血管生成劑如貝伐單抗；以及上述任一種的藥學上可接受的鹽、酸和衍生物。

化療劑實例包括但是不局限於伊馬替尼、埃羅替尼、尼洛替尼、舒尼替尼、達沙替尼、拉帕替尼、索拉菲尼、硼替佐米、奧沙利鉑、5-氟尿嘧啶、亞葉酸、雷帕黴素、烷化劑如塞替派和環磷醯胺；烷基磺酸酯如白消安和英丙舒凡；氮芥丙烷類如卡波醌；喜樹鹼，伊立替康，託泊替康，苔蘚抑素，紫杉醇，長春鹼，長春新鹼，替莫唑胺；氮芥如苯丁酸氮芥；抗生素如烯二炔，抗生素如卡其黴素，達內黴素，阿克拉黴素，放線菌素，安麴黴素，博來黴素，阿黴素，卡柔比星，柔紅黴素，抗代謝物如葉酸類似物(如二甲葉酸)，嘌呤類似物(如氟達拉濱)；雄激素如卡普睪酮，抗腎上腺素如米託坦；葉酸補充物如亞葉酸。

所述的附加劑還包括具有抗腫瘤潛力的人源化單克隆抗體，這些人源化單克隆抗體包括但是不局限於阿倫單抗、安泊珠單抗、安塞珠單抗、西利珠單抗、達珠單抗。

上述的附加治療劑，可單獨與本發明化合物聯合使用，也可以多種附加治療劑組合後，再與本發明的化合物聯合使用。

總結來說，上述的附加治療劑，包括但是不局限於伊馬替尼、埃羅替尼、尼洛替尼、舒尼替尼、達沙替尼、拉帕替尼、索拉菲尼、硼替佐米、奧沙利鉑、5-氟尿嘧啶、亞葉酸、雷帕黴素、塞替派、環磷醯胺、白消安、英丙舒凡、卡波醌、喜樹鹼、伊立替康、託泊替康、紫杉醇、長春鹼、長春新鹼、替莫唑胺、苯丁酸氮芥、卡其黴素、達內黴素、阿克拉黴素、放線菌素、安麴黴素、博來黴素、阿黴素、卡柔比星、柔紅黴素、二甲葉酸、氟達拉濱、卡普睪酮、他莫昔芬、雷洛昔芬、屈洛昔芬、氨魯米特、福美坦、氟他胺、尼魯米特、亮丙瑞林、戈舍瑞林、貝伐單抗、阿倫單抗、安泊珠單抗、安塞珠單抗、西利珠單抗、達珠單抗，或它們的組合。

對於預防和/或治療用途，根據本發明的生理活性化合物的劑量可在寬的範圍內變化，並且可根據個體需要進行調節。通常情況下，每日1mg～4000mg的劑量是合適的，優選的劑量為每日10mg～3000mg。在適合的情況下，該劑量也可在上述數值之上或者之下。該每日劑量可以單個劑量或者多個劑量給藥。典型的單個劑量包含約10mg、20mg、30mg、50mg、100mg、250mg、300mg、500mg、1g或2g的所述活性成分。

附圖說明

圖1為具體實施方式第三部分的ZJD-5作用於2株細胞的存活率曲線圖；

圖2為具體實施方式第三部分的ZJD-7作用於2株細胞的存活率曲線圖；

圖3為具體實施方式第三部分的ZJD-13作用於2株細胞的存活率曲線圖。

具體實施方式

在以下實施例中，僅以闡明本發明方法的方式給出本發明的部分實施例。然而，這些實施例不以任何方式限制本發明的範圍，在本發明的構思前提下對本發明製備方法的簡單改進都屬於本發明要求保護的範圍。也就是，結合所列舉的實施方案來描述本發明時，應當理解為其無意將本發明限制為那些實施方案。相反，本發明意欲包括所有的變化、改良和等價形式。本領域技術人員會認識到與本申請所述的那些類似或等同的許多方法和物質，它們可以用於實現本發明。

在下文描述的實施例中，除非另外說明，所有溫度均以攝氏度給出。除非另外說明，試劑從商業供應商購置或者定製，例如希恩思、阿拉丁、TCI、Sigma等等。

第一部分：片段A的製備

(1)片段A-1的製備

取4g L-脯氨酸甲酯溶解於100ml的DCM中，加入等當量異氰酸酯，室溫攪拌過夜。加入DCM稀釋反應液，加入2M鹽酸100ml，分出有機層，2MHCl洗滌，飽和碳酸氫鈉洗滌，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去溶劑，真空乾燥得到粗品，直接投入下一步反應。

將上述乾燥的產物溶解於120ml THF/30ml H2O，加入LiOH 4.3g，攪拌6h。減壓除去溶劑，加入水至150ml，有DCM40ml洗滌2次。分出水層，向水層中加入濃鹽酸10ml，調節pH小於1，有白色固體出現，加入乙酸乙酯，充分攪拌，分出乙酸乙酯層，水層用乙酸乙酯再次萃取，合併有機相，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去溶劑，真空乾燥，得到泡沫狀白色固體9g。可以不做進一步的純化，直接投入下步反應。

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:12.48(br,1H),7.92(s,1H),7.71(s,1H),7.70(d,J＝10.5Hz,1H),7.58(d,J＝8.4Hz,1H),4.27(d,J＝6.6Hz,1H),3.41-3.39(m,2H),2.17-2.06(m,1H),1.91(s,br,3H)ppm；

13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ:174.8,154.9,137.1,133.5,131.6,130.1,127.1,126.8,124.9,122.7,120.5,59.6,46.8,30.2,24.8ppm；

LC-MS，計算(C13H12ClF3N2O3，M)為336.0489，發現[M+H]+：337.0873，337.0971，337.0858，337.0620；[M+Na]+：359.0392，359.0373，359.0374；[2M+H]+：673.1061，673.1042，673.1054，673.1039；[M-H]-：335.0455，335.0513，335.0489，335.0420；[2M-H]-：671.0898，671.0892，671.0897，671.0908。

(2)片段A-2的製備

取3.4g L-脯氨酸甲酯溶解於100ml的DCM中，加入等當量異氰酸酯，室溫攪拌過夜。加入DCM稀釋反應液，加入2M鹽酸100ml，分出有機層，2MHCl洗滌，飽和碳酸氫鈉洗滌，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去溶劑，真空乾燥得到粗品，直接投入下一步反應。

將上述乾燥的產物溶解於120ml THF/30ml H2O，加入LiOH 5g，攪拌6h。減壓除去溶劑，加入水至150ml，有DCM40ml洗滌2次。分出水層，向水層中加入濃鹽酸10ml，調節pH小於1，有白色固體出現，加入乙酸乙酯，充分攪拌，分出乙酸乙酯層，水層用乙酸乙酯再次萃取，合併有機相，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去溶劑，真空乾燥，得到白色固體6.2g。可以不做進一步的純化，直接投入下步反應。

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:12.48(br,1H),7.83(s,1H),7.73-7.58(m,3H),7.33(d,J＝7.5Hz,1H),4.28(d,J＝7.77Hz,1H),3.50-3.39(m,2H),2.18-2.01(m,1H),1.92(s br,3H)ppm；

13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ:174.9,155.0,137.9,133.5,129.5,126.9,126.0,125.9,123.7,121.5,56.9,46.8,30.2,24.9ppm；

LC-MS，計算(C13H13F3N2O3，M)為302.0878，發現[M+H]+：303.1337，303.1488，303.1445，303.1137；[M+Na]+：325.0768，325.0772，325.0791，325.0766；[2M+H]+：605.1817，605.1851，605.1839，605.1821；[M-H]-：301.0799，301.0849，301.0869，301.0829；[2M-H]-：603.1680，603.1681，603.1676，603.1674。

(3)片段A-3的製備

取3.2g L-脯氨酸甲酯鹽酸鹽溶解於100ml的DCM中，加入等當量異氰酸酯，室溫攪拌過夜。加入DCM稀釋反應液，加入2M鹽酸100ml，分出有機層，2MHCl洗滌，飽和碳酸氫鈉洗滌，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去溶劑，真空乾燥得到粗品，直接投入下一步反應。

將上述乾燥的產物溶解於120ml THF/30ml H2O，加入LiOH 5g，攪拌6h。減壓除去溶劑，加入水至150ml，有DCM 40ml洗滌2次。分出水層，向水層中加入濃鹽酸10ml，調節pH小於1，有白色固體出現，加入乙酸乙酯，充分攪拌，分出乙酸乙酯層，水層用乙酸乙酯再次萃取，合併有機相，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去溶劑，真空乾燥，得到白色固體4.8g。可以不做進一步的純化，直接投入下步反應。

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:12.44(br,1H),8.46(s,1H),7.76(d,J＝9.0Hz,1H),7.45-7.39(m,1H),7.26(t,J＝9.0Hz,1H),4.28(d,J＝6.6Hz,1H),3.51-3.42(m,2H),2.19-2.11(m,1H),1.94-1.85(m,3H)ppm；

13CNMR(125MHz,DMSO-d6)δ:174.9,154.3,154.0,152.1,138.6,121.3,120.2,119.5,119.4,117.3,117.2,59.6,46.9,30.1,25.0ppm；

LC-MS，計算(C12H12ClFN2O3，M)為286.0520，發現[M+H]+：287.0613，287.0753，287.0754，287.0620；[M+Na]+：309.0412，309.0404，309.0417，309.0418；[2M+H]+：573.1110，573.1130，573.1121，573.1115；[M-H]-：285.0450，285.0457，285.0456，285.0444；[2M-H]-：571.0963，571.0974，571.0977，571.0957。

(4)片段A-4的製備

取2.9g L-脯氨酸甲酯溶解於100ml的DCM中，加入等當量的異氰酸酯，室溫攪拌過夜。加入DCM稀釋反應液，加入2M鹽酸100ml，分出有機層，2M HCl洗滌，飽和碳酸氫鈉洗滌，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去溶劑，真空乾燥得到粗品，直接投入下一步反應。

將上述乾燥的產物溶解於120ml THF/30ml H2O，加入LiOH 1.8g，攪拌6h。減壓除去溶劑，加入水至150ml，有DCM 40ml洗滌2次。分出水層，向水層中加入濃鹽酸10ml，調節pH小於1，有白色固體出現，加入乙酸乙酯，充分攪拌，分出乙酸乙酯層，水層用乙酸乙酯再次萃取，合併有機相，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去溶劑，真空乾燥，得到淺黃色固體4.7g。可以不做進一步的純化，直接投入下步反應。

1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:12.49(br,1H),8.74(s,1H),7.71-7.63(m,4H),4.32(s,1H),3.54-3.47(m,2H),2.18-2.12(m,1H),1.90(s br,3H)ppm；

13CNMR(125MHz,DMSO-d6)δ:174.8,154.0,145.8,133.7,120.3,119.8,103.9,59.7,47.1,30.1,24.9ppm；

LC-MS，計算(C13H13N3O3，M)為259.0957，發現[M+H]+：260.1049，260.1131，260.1083，260.1035；[2M+H]+：519.1979，519.1993，519.1985，519.1975；[M-H]-：258.0878，258.0876，258.0883，258.0882；[2M-H]-：517.1826，517.1834，517.1837，517.1828。

(5)片段A-5的製備

取3g L-脯氨酸甲酯溶解於100ml的DCM中，加入等當量的異氰酸酯，室溫攪拌過夜。加入DCM稀釋反應液，加入2M鹽酸100ml，分出有機層，2MHCl洗滌，飽和碳酸氫鈉洗滌，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去溶劑，真空乾燥得到粗品，直接投入下一步反應。

將上述乾燥的產物溶解於120ml THF/30ml H2O，加入LiOH 4g，攪拌6h。減壓除去溶劑，加入水至150ml，有DCM 40ml洗滌2次。分出水層，向水層中加入濃鹽酸10ml，調節pH小於1，有白色固體出現，加入乙酸乙酯，充分攪拌，分出乙酸乙酯層，水層用乙酸乙酯再次萃取，合併有機相，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去溶劑，真空乾燥，得到白色固體6g。可以不做進一步的純化，直接投入下步反應。

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:12.49(br,1H),8.72(s,1H),8.09(s,1H),7.81(d,J＝8.7Hz,1H),7.52(d,J＝8.7Hz,1H),4.30(d,J＝6.3Hz,1H),3.52-3.42(m,2H),2.19-2.12(m,1H),1.89(s br,3H)ppm；

13CNMR(125MHz,DMSO-d6)δ:174.8,154.2,140.9,132.4,127.3(m),124.8,124.5,122.9,122.7,118.6,59.7,47.0,30.1,24.9ppm；

LC-MS，計算(C13H12ClF3N2O3，M)為336.0489，發現[M+H]+：337.0571，337.0729，337.0797，337.0698；[2M+H]+：673.1053，673.1079，673.1149，673.1075；[M-H]-：335.0417，335.0358，335.0359，335.0418；[2M-H]-：671.0903，671.0973，671.0987，671.0928。

(6)片段A-6的製備

取4g L-脯氨酸甲酯溶解於100ml的DCM中，加入等當量的異氰酸酯，室溫攪拌過夜。減壓除去溶劑DCM，加入1M鹽酸100ml，但是沒有固體出現，瓶底有一些粘稠物，無法過濾。加入乙酸乙酯，這次，在乙酸乙酯層和水層中間沒有懸浮物，分出乙酸乙酯層，減壓除去溶劑，真空乾燥。

將上述乾燥的產物溶解於50ml THF/10ml H2O，加入LiOH 7g，攪拌6h。減壓除去溶劑，加入水至100ml，發現有不溶物(很少)，過濾除去不溶物。向澄清濾液中加入濃鹽酸10ml，調節pH小於1，有白色固體出現，加入乙酸乙酯，充分攪拌，分出乙酸乙酯層，水層用乙酸乙酯再次萃取，合併有機相，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去溶劑，真空乾燥，得到泡沫狀固體6.2g。可以不做進一步的純化，直接投入下步反應。

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:12.39(br,1H),8.29(s,1H),7.49-7.45(m,2H),7.03(t,J＝9.0Hz,1H),4.28(d,J＝6.6Hz,1H),3.52-3.42(m,2H),2.17-2.10(m,1H),1.94-1.83(m,3H)ppm；

13CNMR(125MHz,DMSO-d6)δ:175.1,159.1,157.2,154.7,137.5,122.0,115.7,115.5,59.8,46.9,30.1,25.0ppm；

LC-MS，計算(C12H13FN2O3，M)為252.0910，發現[M+H]+：253.0994，253.1151，253.1163，253.1010；[M+Na]+：275.0804，275.0795，275.0798，275.0815；[2M+H]+：505.1878，505.1881，505.1904，505.1885。

第二部分：ZJD的製備

(1)ZJD-1的製備

底物1(酸)340mg，底物2(胺)200mg，HATU 510mg，DIEA 0.23ml，DMF 20ml，攪拌24h。加入2倍量的水，有固體析出，加入乙酸乙酯萃取3次，合併有機相，飽和碳酸氫鈉洗滌，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑，矽膠柱層析，洗脫劑(CHCl3/MeOH＝20:1-15:1)，得到產物140mg。

LC-MS，計算(C29H26ClF3N6O4，M)為614.1656，發現[M+H]+：615.2014，615.2148，615.2105，615.2038；[2M+H]+：1229.3380，1229.3362，1229.3353，1229.3391；[M-H]-：613.1578，613.1577，613.1579，613.1574；[2M-H]-：1227.3251，1227.3236，1227.3266，1227.3246。

(2)ZJD-2的製備

底物1(酸)880mg，底物2(胺)600mg，HATU 1.1g，DIEA 0.52ml，DMF 40ml，攪拌24h。加入2倍量的水，有固體析出，加入乙酸乙酯萃取3次，合併有機相，飽和碳酸氫鈉洗滌，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑，矽膠柱層析，洗脫劑(CHCl3/MeOH＝20:1-15:1)，得到產物1.1g。

LC-MS，計算(C29H26ClF3N6O4，M)為614.1656，發現[M+H]+：615.2161，615.2195，615.2137，615.2098；[2M+H]+：1229.3396，1229.3407，1229.3363，1229.3423；[M-H]-：613.1579，613.1568，613.1573，613.1572；[2M-H]-：1227.3267，1227.3258，1227.3252，1227.3254。

(3)ZJD-3的製備

底物1(酸)870mg，底物2(胺)590mg，HATU 1.1g，DIEA 0.52ml，DMF 40ml，攪拌24h。加入2倍量的水，有固體析出，加入乙酸乙酯萃取3次，合併有機相，飽和碳酸氫鈉洗滌，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑，矽膠柱層析，洗脫劑(CHCl3/MeOH＝20:1-15:1)，得到產物940mg。

LC-MS，計算(C29H26ClF3N6O4，M)為614.1656，發現[M+H]+：615.2224，615.2149，615.2107，615.2067；[2M+H]+：1229.3419，1229.3329，1229.3350，1229.3413；[M-H]-：613.1581，613.1570，613.1569，613.1576；[2M-H]-：1227.3249，1227.3246，1227.3245，1227.3246。

(4)ZJD-4的製備

底物1(酸)750mg，底物2(胺)600mg，HATU 1.1g，DIEA 0.52ml，DMF 40ml，攪拌24h。加入2倍量的水，有固體析出，加入乙酸乙酯萃取3次，合併有機相，飽和碳酸氫鈉洗滌，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑，矽膠柱層析，洗脫劑(CHCl3/MeOH＝20:1-15:1)，得到產物500mg。

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.11(s,1H),8.76(s,1H),8.50(s,1H),8.13(s,1H),7.84(d,J＝8.7Hz,1H),7.69(d,J＝8.7Hz,2H),7.56-7.49(m,2H),7.35(s,1H),7.22(d,J＝8.7Hz,2H),4.46(d,J＝6.0Hz,1H),3.96(s,3H),3.95(s,3H),3.64-3.52(m,2H),2.20-1.96(m,4H)ppm；

13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ:170.0,165.8,156.6,154.3,153.1,150.9,149.7,148.5,140.9,137.5,132.4,127.0(m),124.9,124.6,123.2,122.9,122.7,121.1,118.6,110.6,107.6,101.6,61.5,57.0,26.9,47.5,30.8,25.2ppm；

LC-MS，計算(C29H25ClF3N5O5，M)為615.1496，發現[M+H]+：616.1648，616.1617，616.1916，616.1942；[2M+H]+：1231.3120，1231.3045，1231.3105，1231.3091；[M-H]-：614.1413，614.1416，614.1420，614.1409；[2M-H]-：1229.2930，1229.2914，1229.2923，1229.2930。

(5)ZJD-5的製備

底物1(酸)700mg，底物2(胺)600mg，HATU 1.1g，DIEA 0.52ml，DMF 40ml，攪拌24h。加入2倍量的水，有固體析出，加入乙酸乙酯萃取3次，合併有機相，飽和碳酸氫鈉洗滌，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑，矽膠柱層析，洗脫劑(CHCl3/MeOH＝40:1)，得到產物1.0g。

1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.08(s,1H),8.50(s,1H),8.32(s,1H),7.68(d,J＝8.7Hz,2H),7.54-7.48(m,3H),7.36(s,1H),7.22(d,J＝8.7Hz,2H),7.04(t,J＝8.7Hz,2H),4.44(d,J＝7.5Hz,1H),3.96(s,3H),3.95(s,3H),3.62-3.46(m,2H),2.18-1.97(m,4H)ppm；

13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ:172.4,165.8,159.1,157.3,156.6,154.8,153.1,150.9,149.7,148.5,137.5,123.2,122.1,121.1,115.7,115.5,110.6,107.6,101.6,61.4,57.0,56.9,47.4,30.8,25.2ppm；

LC-MS，計算(C28H26FN5O5，M)為531.1918，發現[M+H]+：532.2202，532.2475，532.2145，532.2067；[M+Na]+：554.1793，554.1794，554.1863，554.1787；[M+K]+：570.1515，570.1575。

(6)ZJD-6的製備

底物1(酸)870mg，底物2(胺)590mg，HATU 1.1g，DIEA 0.52ml，DMF 40ml，攪拌24h。加入2倍量的水，有固體析出，加入乙酸乙酯萃取3次，合併有機相，飽和碳酸氫鈉洗滌，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑，矽膠柱層析，洗脫劑(CHCl3/MeOH＝50:1)，得到產物860mg。

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.15(s,1H),8.53(s,1H),8.31(s,1H),7.68(s,1H),7.53-7.32(m,6H),7.06-6.96(m,3H),4.41(d,J＝7.8Hz,1H),3.96(s,3H),3.95(s,3H),3.58-3.36(m,2H),2.16-1.92(m,4H)ppm；

13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ:172.7,165.6,159.1,157.3,156.6,154.8,153.4,153.1,151.0,149.7,141.3,137.5,130.5,122.1,117.6,117.0,115.6,115.5,113.7,110.6,107.6,101.5,61.4,57.0,56.8,47.3,30.7,25.2ppm；

LC-MS，計算(C28H26FN5O5，M)為531.1918，發現[M+H]+：532.2066，532.2430，532.2220，532.1983；[M+Na]+：554.1792，554.1801，554.1777，554.1772；[M+K]+：570.1528，570.1508，570.1493。

(7)ZJD-7的製備

底物1(酸)1.2g，底物2(胺)900mg，HATU 1.7g，DIEA 0.8ml，DMF 50ml，繼續室溫下攪拌過夜。加入2倍量的飽和碳酸氫鈉溶液，有固體析出，加入乙酸乙酯萃取3次，合併有機相，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑，矽膠柱層析，洗脫劑(DCM/MeOH＝40:1-20:1)，得到產物1g。

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.16(s,1H),8.50(d,J＝5.1Hz,1H),8.34(s,1H),7.76(d,J＝8.7Hz,2H),7.564-7.47(m,3H),7.39(s,1H),7.23(d,J＝8.7Hz,2H),7.05(t,J＝8.7Hz,2H),6.50(d,J＝5.4Hz,1H),4.44(d,J＝7.5Hz,1H),3.93(s,6H),3.52-3.5249(m,2H),2.18-1.95(m,4H)ppm；

13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ:172.4,162.1,159.2,157.3,154.8,154.1,150.5,149.6,148.5,145.4,137.9,137.5,122.2(m),121.8,116.0,115.7,115.5,107.1,103.9,100.2,61.4,56.7,47.4,30.7,25.3ppm；

LC-MS，計算(C29H27FN4O5，M)為530.1965，發現[M+H]+：531.2500，531.2583，531.2616，531.2536；[M+Na]+：553.1860，553.1847，553.1856，553.1850。

(8)ZJD-9的製備

底物1(酸)480mg，底物2(胺)400mg，HATU 610mg，DIEA 0.4ml，DMF 40ml，攪拌過夜。加入飽和碳酸氫鈉溶液，有固體析出，加入乙酸乙酯萃取，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑。矽膠柱層析，洗脫劑CHCl3/MeOH＝40:1～30:1，得到產物220mg。

LC-MS，計算(C29H26F3N5O5，M)為581.1886，發現[M+H]+：582.2044，582.2581，582.2858，582.2282；[M-H]-：580.1810，580.1807，580.1806，580.1811；[M+Cl]-：616.1577，616.1582，616.1581，616.1584。

(9)ZJD-10的製備

底物1(酸)460mg，底物2(胺)400mg，HATU 610mg，DIEA 0.4ml，DMF 40ml，攪拌過夜。加入乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液，分出乙酸乙酯層，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑。矽膠柱層析，洗脫劑CHCl3/MeOH＝40:1～30:1，得到產物530mg。

LC-MS，計算(C28H25ClFN5O5，M)為565.1528，發現[M+H]+：566.1712，566.1914，566.1800，566.1616；[M-H]-：564.1449，564.1427，564.1444，564.1445；[M+Cl]-：600.1221，600.1210，600.1220，600.1217。

(10)ZJD-13的製備

底物1(酸)560mg，底物2(胺)430mg，HATU 840mg，DIEA 0.6ml，DMF 40ml，攪拌過夜。加入乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液，分出乙酸乙酯層，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑。矽膠柱層析，洗脫劑CHCl3/MeOH＝40:1～30:1，得到產物530mg。

1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ:10.13(s,1H),8.74(s,1H),8.76(d,J＝4.8Hz,1H),8.33(s,1H),7.72(d,J＝8.7Hz,2H),7.51-7.48(m,2H),7.35(s,1H),7.17-7.01(m,5H),4.44(d,J＝5.1Hz,1H),3.62-3.48(m,2H),2.76(d,J＝4.5Hz,3H),2.17-1.94(m,4H)ppm；

13C NMR(125MHz,DMSO-d6)δ:172.4,166.8,164.6,159.1,157.3,154.8,153.3,151.2,149.2,137.9,137.5,122.1,121.8,115.7,115.5,114.8,109.7,61.4,47.4,30.8,26.9,25.2ppm；

LC-MS，計算(C25H24FN5O4，M)為477.1812，發現[M+H]+：478.2270，478.2386，478.2113，478.1909；[2M+H]+：955.3797，955.3900，955.3725，955.3704；[M-H]-：476.1734，476.1728，476.1727，476.1730；[M+Cl]-：512.1505，512.1499，512.1498，512.1499；[2M-H]-：953.3550，953.3543，953.3547。

(11)ZJD-14的製備

底物1(酸)740mg，底物2(胺)430mg，HATU 840mg，DIEA 0.6ml，DMF 40ml，攪拌過夜。加入乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液，分出乙酸乙酯層，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑。矽膠柱層析，洗脫劑CHCl3/MeOH＝40:1～30:1，得到產物110mg。

LC-MS，計算(C26H23ClF3N5O4，M)為561.1391，發現[M+H]+：562.1730，562.1838，562.1674，562.1487；[M+Na]+：584.1298，584.1285，584.1275，584.1319；[M-H]-：560.1306，560.1292，560.1291，560.1311；[M+Cl]-：596.1077，596.1067，596.1062，596.1080。

(12)ZJD-15的製備

底物1(酸)570mg，底物2(胺)430mg，HATU 840mg，DIEA 0.6ml，DMF 40ml，攪拌過夜。加入乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液，分出乙酸乙酯層，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑。矽膠柱層析，洗脫劑CHCl3/MeOH＝40:1～30:1，得到產物50mg。

LC-MS，計算(C26H24N6O4，M)為484.1859，發現[M+H]+：485.2119，485.2357，485.2229，485.1956；[M+Na]+：507.1732，507.1748，507.1762，507.1750；[2M+H]+：969.3811，969.3894，969.3804，969.3771；[M-H]-：483.1756，483.1780，483.1774，483.1782；[2M-H]-：967.3637，967.3626，967.3653；[M+Cl]-：519.1549，519.1556，519.1552，519.1533。

(13)ZJD-16的製備

底物1(酸)570mg，底物2(胺)460mg，HATU 860mg，DIEA 0.6ml，DMF 40ml，攪拌過夜。加入乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉溶液，分出乙酸乙酯層，飽和氯化鈉洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓除去有機溶劑。矽膠柱層析，洗脫劑CHCl3/MeOH＝40:1～30:1，得到產物180mg。

LC-MS，計算(C25H24FN5O4，M)為477.1812，發現[M+H]+：478.1967，478.1977，478.2306，478.2033；[M+Na]+：500.1695，500.1713，500.1706，500.1700；[2M+H]+：955.3690，955.3767，955.3764，955.3672；[M-H]-：476.1725，476.1739，476.1725，476.1733；[M+Cl]-：512.1497，512.1509，512.1498，512.1504；[2M-H]-：953.3537，953.3546，953.3552，953.3567。

第三部分：本發明產物的抗腫瘤活性研究

體外抗腫瘤細胞活性：我們以化合物ZJD-5、ZJD-7和ZJD-13為例，考察HepG2、MGC803細胞經不同濃度梯度的藥物處理48h後，通過MTT法檢測藥物對細胞生長的影響。按照如下步驟進行：

(1)藥物配製：藥物取樣20mg，加入2mL DMSO溶解得到母液濃度為10mg/mL，加藥時用培養基稀釋藥物至最大濃度為100μg/mL，隨後5倍濃度梯度稀釋至20μg/mL、4μg/mL、0.8μg/mL、0.16μg/mL。

(2)細胞準備：培養HepG2和MGC803細胞至80～90％滿瓶，以5×104個/mL的細胞密度接種6孔細胞培養板(2mL/well)，37℃、5％CO2細胞培養箱培養4h換液，待細胞匯合度80％時開始鋪板。

(3)MTT實驗：取對數生長期生長狀態良好的MGC803、HepG2細胞，棄掉上層培養液，用PBS洗滌1次，棄去PBS，加入1ml胰蛋白酶-EDTA靜置消化1-3分鐘，於顯微鏡下觀察消化完全後棄去胰酶，加入含10％的胎牛血清的1640培養基終止消化，吹打收集細胞。1200rpm離心5min後，計數，調節細胞密度為5×104個/mL，分別接種於96孔板上，每孔100μL，恆溫箱中於37℃，5％CO2，飽和溼度過夜。24h後觀察細胞是否貼壁良好，並小心使用移液器小心棄去上清培養液，分別加入10μL新鮮完全培養基(含10％胎牛血清的RPMI-1640培養基)的各藥物濃度的培養液各100μL，每株細胞每濃度復孔4個，於37℃，5％CO2的培養箱中繼續培養。48h後取出96孔板，每孔中避光加入5μg/mL的MTT溶液10uL，繼續孵育4h，棄去培養液和藥液，加入二甲基亞碸100uL，於微量振蕩器上水平緩慢震蕩1分鐘，待充分結晶沉澱後，酶聯檢測儀檢測波長為570nm處吸光度(OD)，記錄數據，實驗重複3次，按公式計算抑制率。存活率＝加藥組OD/對照組OD。

MTT結果數據如表1、表2、表3所示，細胞的存活率曲線圖如圖1、圖2、圖3所示，ZJD-5針對HepG2的IC50＝102.4μg/mL；針對MGC803的IC50＝124.1μg/mL。ZJD-7針對HepG2的IC50＝32.33μg/mL。

表1藥物ZJD-5作用於2株細胞的MTT結果數據

表2藥物ZJD-7作用於2株細胞的MTT結果數據

表3藥物ZJD-13作用於2株細胞的MTT結果數據

第四部分：藥物組合物的製備

本發明中通式I的化合物可以單獨使用，但通常是和藥用載體混合物給與，所述藥用載體的選擇要根據所需給藥途徑和標準藥物實踐，下面分別用該類化合物的各種藥物劑型來說明其在製藥領域中的新應用。在此，我們列舉了片劑、膠囊劑、注射劑、氣霧劑、栓劑、滴丸劑、膜劑的製備方法，儘管可以通過下面特定的實施方案描述了本發明，但是修改和更新變化對於精通此領域的技術人員而言是顯而易見的，但是它們都包含在本發明範圍之類。

(1)片劑

用含有權利要求1中化合物(以實施例ZJD-2化合物為例)10g，按照藥劑學一般壓片法加輔料20g混勻，壓製成100片，每片重300mg，含有活性成分100mg。更具體地，可以按照如下的處方付諸實踐。

(2)膠囊

用含有權利要求1中化合物(以實施例ZJD-3化合物為例)10g，按照藥劑學膠囊劑的要求將輔料20g混勻後，裝入空心膠囊，每個膠囊重300mg，含有活性成分100mg。更具體地，可以按照如下的處方付諸實踐。

(3)注射劑1

用含有權利要求1中化合物(以實施例ZJD-5化合物為例)20g，按照藥劑學常規方法，進行活性炭吸附，經0.65um微孔濾膜過濾後，填入氮氣灌封製成水針製劑，每支裝2ml，共灌裝1000瓶。更具體地，可以按照如下的處方付諸實踐。

(4)注射劑2

用含有權利要求1中化合物(以實施例ZJD-7化合物為例)20g，按照藥劑學常規方法，溶解於適量注射用水中，0.1mol/L鹽酸調節pH到適當，進行活性炭吸附，用無菌抽濾漏鬥鋪二層滅菌濾紙過濾，用經滅菌的G6垂熔玻璃漏鬥精濾，濾液檢查合格後，分裝於2ml安瓿，在無菌條件下低溫冷凍乾燥約26小時，並且在無菌條件下熔封，每支安瓿中含有20mg活性成分。更具體地，可以按照如下的處方付諸實踐。

(5)氣霧劑

用含有權利要求1中化合物(以實施例ZJD-2化合物為例)10g，按照藥劑學常規方法，加入適量潛溶劑溶解，如乙醇、聚乙二醇、丙二醇、甘油、油酸等，分裝於耐壓容器中，安裝閥門後壓入拋射劑，如氟氯烷烴、碳氫化合物類，即得。更具體地，可以按照如下的處方付諸實踐。

(6)栓劑

用含有權利要求1中化合物(以實施例ZJD-2化合物為例)20g，與100g大豆卵磷脂和1400g可可脂的混合物熔化，倒入模具中，然後冷卻。每支栓劑含活性成分20mg。

(7)滴丸劑

用含有權利要求1中化合物(以實施例ZJD-2化合物為例)20g，與明膠等基質180g加熱熔化混勻後，趁熱過濾置貯液瓶中。用管口內、外徑分別為90mm、98mm的滴管滴制，滴速80滴/min，滴入含43煤油的液體石蠟中冷凝成丸(外層為冰水浴冷卻液)，以液體石蠟洗丸至無煤油味，用毛邊紙吸去粘附的液體石蠟即得，共製得滴丸1000丸，每丸含有活性成分20mg。

(8)膜劑

用含有權利要求1中化合物(以實施例ZJD-2化合物為例)20g，將聚乙烯醇、藥用甘油、水等攪拌膨脹後加熱過濾，80目篩網過濾，再將實施例12化合物加入到濾液中攪拌溶解，塗膜機制膜1000片，每片含活性成分20mg。