越橘治療呼吸道疾病的有效部位及其製備方法
2023-10-28 02:54:02 1
專利名稱：越橘治療呼吸道疾病的有效部位及其製備方法
技術領域：
本發明涉及一種治療急慢性呼吸道感染性疾病的有效部位及其製備方法。
背景技術：
越桔為杜鵑花科植物越桔Vaccinium Vitis-idaea L、的葉、果。越桔主要分布於北歐、北美、俄羅斯及我國黑龍江省大興安嶺地區、內蒙、新疆等地區。越桔所含化學成分複雜，文獻報導越桔含有天然活性成分主要包括三大類黃酮類、酚類、鞣質。日本學者Harukiti Nakamura分離出異槲皮素，Janina Kaminska分離出黃酮類如、匾蓄苷(avicularin)、蘆丁、槲皮素-3-D-葡萄糖-L-鼠李糖苷等，前蘇聯學者Shyakina G.P分離出金絲桃苷(hyperoside)；英國學者G.Britton分離出2-O-咖啡醯基熊果苷；德國學者分離出酚類如熊果苷(arbutin)、Sticher分離出對二苯酚、甲基熊果苷等。急、慢性支氣管炎是一種常見病、多發病，嚴重危害人民的身體健康，是目前世界醫藥界尚未攻克的難題，成人呼吸系統疾病是構成發病率和死亡率的重要原因。急性呼吸道感染仍佔世界兒童死亡原因的首位。病毒、細菌感染是發病的常見病源。雖然，抗生素和抗病毒藥物研究進展迅速，對防治呼吸道感染疾病發揮了巨大作用，但抗生素藥物的毒性反應，過敏及致病菌耐藥性的增多與增強，給患者帶來不少惡果，尤其是對病毒致病者，除流感外，病毒性呼吸道感染目前尚無好的治療方法。因此，研製有效低毒的抗菌抗病毒治療呼吸道感染疾病的新藥，是國內外醫藥工作者所關注的課題。隨著醫藥科學的發展，對越桔化學成分和藥理實驗均有報到，但對于越桔莖葉治療呼吸系統急、慢性感染疾病，國內外尚未見報導。
發明內容
本發明的目的在於提供一種更為有效治療急慢性呼吸道感染性疾病的有效部位。
為了達到上述目的，本發明採用的技術方案是它主要是由以熊果苷為主的酚苷類成分和黃酮類成分組成熊果苷含量為總有效部位的30~50％，黃酮類成分為總有效部位的5~20％。
本發明的製備方法包括以下步驟a)稱取原料藥越桔取藥材粗粉用70~95％乙醇進行回流提取，將提取液回收乙醇，加水沉澱除去葉綠素，濾過，減壓濃縮至相對密度為1.35的浸膏。
b)取上述浸膏上大孔樹脂柱，以0.1~4.5倍柱體積水衝洗，再以2~12倍柱體積10~70％乙醇溶液洗脫，減壓回收溶劑至幹，45~50℃乾燥得提取物，製成了本發明藥物的活性組分。
本發明的優點是本發明藥物的活性組分可以加入製備不同劑型時所需的各種常規輔料，如崩解劑、潤滑劑、粘合劑等以常規的中藥製劑方法製備成任何一種常用口服劑型，如丸劑、散劑、片劑、膠囊劑、口服液等。
本發明藥物具有抗炎、抗病毒、鎮咳、祛痰、平喘等功能，治療急慢性呼吸道感染性疾病。
具體實施例方式
下面對本發明的實施例作進一步詳細描述。
本發明它主要是由以熊果苷為主的酚苷類成分和黃酮類成分組成熊果苷含量為總有效部位的30-50％，黃酮類成分為總有效部位的5-20％。
本發明製備方法，它包括下列步驟a)稱取原料藥越桔取藥材粗粉用70-95％乙醇進行回流提取，將提取液回收乙醇，加水沉澱除去葉綠素，濾過，減壓濃縮至相對密度為1.35的浸膏。
b)取上述浸膏上大孔樹脂柱，以0.1-4.5倍柱體積水衝洗，再以2-12倍柱體積10-70％乙醇溶液洗脫，減壓回收溶劑至幹，45-50℃乾燥得提取物，製成了本發明藥物的活性組分。
所述的其中將步驟b)製得的提取物與膠囊常用輔料混合，制粒，裝膠囊。
所述的越桔中提取的有效部位能治療急慢性呼吸道感染性疾病。
實施例1本發明藥物越桔膠囊劑的製備a)稱取30g原料藥越桔取藥材粗粉用80-95％乙醇進行回流提取，將提取液回收乙醇，加水沉澱除去葉綠素，濾過，減壓濃縮至相對密度為1.35的浸膏。
b)取上述浸膏上大孔樹脂柱，以1-2倍柱體積水衝洗，再以6-8倍柱體積20-30％乙醇溶液洗脫，減壓回收溶劑至幹，45-50℃乾燥得提取物。
c)將提取物粉碎，加入適當輔料混勻，裝入明膠硬膠囊內即得。
實施例2本發明藥物越桔膠顆粒劑的製備a)稱取30g原料藥越桔取藥材粗粉用70-95％乙醇進行回流提取，將提取液回收乙醇，加水沉澱除去葉綠素，濾過，減壓濃縮至相對密度為1.35的浸膏。
b)取上述浸膏上大孔樹脂柱，以1-2倍柱體積水衝洗，再以6-8倍柱體積20-50％乙醇溶液洗脫，減壓回收溶劑至幹，45-50℃乾燥得提取物。
c)將提取物粉碎，加入乙醇做粘合劑，加入糊精作為填充劑，壓製成顆粒劑。
實施例3本發明藥物越桔膠片劑的製備a)稱取30g原料藥越桔取藥材粗粉用70-95％乙醇進行回流提取，將提取液回收乙醇，加水沉澱除去葉綠素，濾過，減壓濃縮至相對密度為1.35的浸膏。
b)取上述浸膏上大孔樹脂柱，以1-2倍柱體積水衝洗，再以6-8倍柱體積20-30％乙醇溶液洗脫，減壓回收溶劑至於，45-50℃乾燥得提取物。
c)將提取物粉碎，加入乙醇做粘合劑，加入輔料壓製成顆粒，並乾燥，壓製成片。
以下通過試驗例來進一步闡明本發明所述藥物的有益效果，這些試驗包括了本發明藥物——越桔膠囊的藥效學試驗和越桔無糖顆粒臨床療效觀察試驗。
本發明藥物越桔膠囊對小鼠的止咳作用昆明種小鼠50隻，體重18-22克，雌雄各半，隨機分5組，每組10隻。高劑量組灌胃3.12g/kg，中劑量組灌胃低劑量組1.56g/kg，低劑量組0.39g/kg，陽性對照組灌服咳必清劑量為13mg/kg，空白組灌服等容積生理鹽水。每天給藥一次，連續給藥6天，於末次灌胃給藥1小時後，逐只將各組鼠放入帶有氨水的鐘罩內引咳，並記錄引咳開始至出現咳嗽的潛伏期(每次每隻鼠均以含1ml氨水的濾紙條引咳)及3分鐘咳嗽次數，試驗結果見表1。
表1越桔膠囊對小鼠的止咳作用(X±SD)組別例數 劑量 咳嗽潛伏期(S)咳嗽次數高劑量組103.12g/kg 50.42±12.41*31.73±8.00***中劑量組101.56g/kg 48.45±10.09*34.00±8.76***低劑量組100.39g/kg 41.52±4.90 50.20±10.33**陽性對照組 1013mg/kg56.10±4.70**27.00±10.17***空白組 100.2ml 36.50±5.80 79.62±10.90注*、**、***與空白對照組比較P＜0.05、P＜0.01、P＜0.001試驗結果經統計學T檢驗，給藥高劑量、中劑量和陽性對照藥組與空白組比較，給藥後潛伏期差異有顯著性意義，P＜0.05，低劑量組未見明顯影響；各給藥組與空白組比較，咳嗽次數差異均有顯著性意義，P＜0.01、P＜0.001。表明越桔中劑量、高劑量組有明顯的止咳作用。
本發明藥物越桔膠囊對豚鼠的平喘作用豚鼠40隻，體重200-250克，雌雄各半，隨機分5組，每組8隻，先將每組豚鼠放入噴霧箱中，噴入0.1％磷酸組胺，噴霧10秒，紀錄豚鼠用藥前引喘潛伏期。噴霧第二天，高劑量組灌胃給越桔1.86g/kg，中劑量組灌胃低劑量組0.93g/kg，低劑量組0.23g/kg，陽性對照組灌胃給氨茶鹼46.5mg/kg，空白組灌服生理鹽水5ml/kg，每天給藥一次，連續給藥6天，於末次灌胃給藥1小時後，將豚鼠再次放入噴霧箱中，噴入0.1％磷酸組胺10秒，紀錄給藥後引喘潛伏期，結果是表2。
表2越桔膠囊對豚鼠的平喘作用(X±SD)潛伏期(秒)組別 例數 劑量用藥前 用藥後差值高劑量組 8 1.86g/kg28.88±13.4360.63±29.15**31.75±17.70***中劑量組 8 0.93g/kg31.25±16.3760.38±18.35**29.10±10.96***低劑量組 8 0.23g/kg35.40±13.3960.38±16.50**24.53±5.33***氨茶鹼組 8 46.5mg/kg 33.38±26.3870.25±46.47**36.80±20.74***生理鹽水組8 0.2ml 35.88±17.7436.50±25.91 5.25±7.39注***與空白對照組比較P＜0.001結果表明，越桔組和氨茶鹼用藥前後對豚鼠喘息潛伏期有顯著性差異，各用藥組與空白前後比較差異，均有顯著性意義，P＜0.001。表明越桔組和氨茶鹼有明顯的平喘作用，但二者之間作用差異無明顯意義。
本發明藥物越桔膠囊祛痰作用試驗昆明種小鼠50隻，體重18-22克，雌雄各半，隨機分5組，每組10隻。高劑量組灌胃3.12g/kg，中劑量組灌胃1.56g/kg，低劑量組0.39g/kg，陽性對照組灌服氯化胺，劑量為234mg/kg，空白組灌服等容積生理鹽水。每天給藥一次，連續給藥6天，於末次灌胃給藥30分鐘後，由腹腔注射0.5％酚紅溶液0.5ml/只，30分表3越橘膠囊對小鼠酚紅法祛痰作用(X±SD)組別例數 劑量酚紅排出量(ug)高劑量組103.12g/kg5.68±1.70**中劑量組101.56g/kg4.56±1.32*低劑量組100.39g/kg3.51±0.99陽性對照組 10234mg/kg7.03±1.08***空白組 100.2ml 1.20±0.26注*、**與空白對照組比較P＜0.05、P＜0.01鍾後脫椎處死小鼠，仰位固定手術板上，手術分離氣管，於喉頭下將磨平頭的7號針頭插入氣管內，結紮固定，後用1毫升注射器吸取5％碳酸氫鈉溶液0.5ml，來回灌洗呼吸道3次後，將灌洗液放入比色管中，重新吸碳酸氫鈉溶液0.5ml，同上方法衝洗兩次，衝洗液合併，用752光柵分光光度計於560nm處進行比色，測定比值，結果見表3。
本發明藥物越桔膠囊抗炎作用試驗本試驗採用小鼠耳二甲苯致炎法。選昆明種小鼠50隻，體重18-22克，雄性，隨機分5組，每組10隻。高劑量組灌胃3.12g/kg，中劑量組灌胃1.56g/kg，低劑量組0.39g/kg，陽性對照組灌服阿斯匹林組0.1g/kg，對照組(飲用水20ml/kg灌胃)。動物灌胃給藥1小時後，以二甲苯棉球接觸小鼠右耳5秒鐘，15分鐘後拉頸處死，以打孔器將小鼠雙耳同部位等面積切下，天平稱重，左耳為對照，以左耳重量為100g，計算右耳炎症增重百分率，結果進行統計學處理，結果見表4。
表4越桔膠囊對小鼠耳二甲苯致炎的影響組別 例數 劑量致炎耳增重量(％)高劑量組 103.12g/kg5.68±1.70**中劑量組 101.56g/kg4.56±1.32*低劑量組 100.39g/kg3.51±0.99陽性對照組100.1g/kg 7.03±1.08***空白組100.2ml 1.20±0.26注同對照組相比*P＜0.05**P＜0.01從表比結果看出，越桔提取物高、中劑量組及阿斯匹林組同對照組相比，再給致炎劑後均有明顯的抑制小鼠耳腫脹的作用，低劑量組抑制作用不明顯。上述結果說明越桔具有明顯的抗炎作用，其作用隨劑量的增加而增強，呈一定的量效關係。
本發明藥物越桔膠囊越桔對小鼠感染流感病毒的對抗作用取昆明小鼠80隻，體重18-22克，雌雄各半，隨機分4組，每組20隻，每隻鼠鼻腔接種流感病毒(A1)0.03ml(10-2.7)，越桔高劑量組3.12g/kg，中劑量組灌胃1.56g/kg，低劑量組0.39g/kg；雙黃連7.8ml/kg；空白組10ml/kg，每天給藥2次，連續灌胃16天，觀察記錄21天小鼠存活和死亡情況，實驗結果見表6表6越桔對感染流感病毒小鼠生存和死亡時間的影響(X±SD)組別 例數 劑量平均生存時間(h) 生存數死亡數高劑量203.12g/kg296.50±175.8*1010中劑量201.56g/kg268.15±130.2*7 13低劑量200.39g/kg181.20±82.58 3 17雙黃連205.8ml/kg280.33±140.7*9 11空對照2010ml/kg 148.0±39.9 0 20注同對照組相比*P＜0.05試驗結果統計學T檢驗，越桔高、中劑量組和雙黃連口服液組均有明顯延長小鼠平均生存時間的作用，且作用強度相近。
本發明藥物越桔顆粒臨床研究我們在研究基礎上，我們將越桔製成衝劑(每克含生藥1g)，對其治療呼吸道急慢性疾病的臨床療效進行了觀察。
全部病例均源於黑龍江中醫藥大學附屬醫院門診病人。上呼吸道感染、急性支氣管炎、慢性支氣管炎急性發作期及遷延期、肺炎診斷均按高等醫藥院校教材二版《內科學》；急性扁桃體炎診斷按《實用炎症手冊》。
121例患者隨機分為兩組進行療效觀察。療程5-15天，治療組(口服越桔衝劑，分三次口服，每天服用30克生藥)80例，男44例，女36例。年齡3-15歲15例，16-40歲19例，41-60歲12例。其中上呼吸道感染29例，急性支氣管炎14例，慢性支氣管炎急性期及遷延期27例，肺炎10例。治療組中又以末梢血象中淋巴細胞偏高或升高者59例作為病毒的療效觀察；末梢血象中白細胞和/或中性分葉核增高者21例作為對細菌療效觀察。對照組(口服螺旋黴素，每6小時服一次，每天1.20g，)41例，男22例，女19例。年齡年齡3-15歲12例，16-40歲19例，41-60歲10例。其中上呼吸道感染13例，急性支氣管炎9例，慢性支氣管炎急性期及遷延期12例，肺炎7例。對照組中又分為對病毒療效觀察26例，對細菌療效觀察15例。兩組患者在平均年齡、性別、病種分布等方面基本平衡，具有可比性。同時對高度懷疑為病毒感染的44例病人進行病毒檢測(採用螢光免疫法檢測腺病毒及合胞病毒)其中治療組31例，對照組13例，末梢血象中淋巴細胞平均0.44，所有的觀察病例療前均進行胸透或拍胸片，並進行療前及療後的白細胞加分類的檢查。
臨床療效，見表7。
表7兩組抗病毒療效比較
上表中，兩組對病毒治療總有效率對比，查X2界值表P＜0.01，差異有極顯著性意義，說明治療組明顯優於對照組。平均療程治療組為8天，對照組為12天。
對主要症狀、體徵的影響，見表8、9、10、11。
表8兩組止咳、祛痰的改善情況檢驗樣本數組別 7天內止咳祛痰 7天後止咳祛 合計止咳祛痰率痰治療組40165671.0％對照組8 132138.0％合計 48297762.3％表8反映出兩組對止咳祛痰治療的影響，查X2界值表P＜0.01，兩組進行比較7天內止咳祛痰率差異有極顯著性意義，說明越桔衝劑有明顯的止咳祛痰作用。
表9對肺部羅音的治療情況檢驗樣本數6天內羅音組別合計6天內羅音消失 6天後羅音消失 消失率治療組206 2676.9％對照組5 8 1338.5％合計 2514 3964.0％表9反映出兩組對肺部羅音治療的影響，查X2界值表P＜0.01，兩組進行比較6天內肺部羅音消失率有差異極顯著性意義，說明越桔衝劑消除肺部羅音效果顯著。
表10對扁桃體腫大的治療情況檢驗樣本數7天內扁桃組別合計7天內扁桃體消腫 7天後扁桃體消腫 體消腫率治療組426 66.7％對照組224 50％合計 6410 60％表10反映出兩組治療扁桃體腫大的影響，查X2界值表P＞0.05，兩組進行比較差異無顯著性。
表11對末梢血象淋巴細胞的影響
表11說明兩組治療對末梢淋巴細胞的影響，治療組療前療後進行比較差異有極顯著性意義P＜0.001；對照組療前療後進行比較差異無顯著性意義P＞0.05；而組間對比差異有極顯著性意義P＜0.001，說明越桔衝劑可明顯改善末梢血象中淋巴細胞的百分率，使其恢復正常。
兩組病毒的分布，結果見表12表12兩組病毒的分布情況合胞病毒腺病毒上感4 1急支3 4治療組慢支急發8 4肺炎0 2上感2 1急支0 1對照組慢支急發2 0肺炎0 1本組病例121例，其中對44例進行病毒檢測，33例檢測出病毒，檢出率為75％。
對細菌感染為主的療效表13兩組治療前後WBC、S的變化項目組別 例數 療前(X±SD 療後(X±SDP值治療組2111.5±2.878.93±1.12 P＜0.00WBC對照組1511.3±1.958.60±1.28 P＜0.00治療組210.76±0.050.68±0.03 P＜0.00S對照組150.76±0.050.67±0.02 P＜0.00表13表明兩組治療前後對中性粒細胞進行對比差異有極顯著性意義P＜0.001。組間對比差異無顯著性意義，P＞0.05。說明越桔衝劑在治療細菌感染與螺旋黴素治療一致。
毒、副作用越桔衝劑在臨床觀察過程中無毒、副作用發生，療後病人的血、尿、肝功能檢查未見異常。
權利要求
1.越桔中提取的有效部位，其特徵在於它主要是由以熊果苷為主的酚苷類成分和黃酮類成分組成熊果苷含量為總有效部位的30-50％，黃酮類成分為總有效部位的5-20％。
2.權利要求1所述藥物有效部位的製備方法，它包括下列步驟a)稱取原料藥越桔取藥材粗粉用70-95％乙醇進行回流提取，將提取液回收乙醇，加水沉澱除去葉綠素，濾過，減壓濃縮至相對密度為1.35的浸膏。b)取上述浸膏上大孔樹脂柱，以0.1-4.5倍柱體積水衝洗，再以2-12倍柱體積10-70％乙醇溶液洗脫，減壓回收溶劑至幹，45-50℃乾燥得提取物，製成了本發明藥物的活性組分。
3.權利要求2所述藥物有效部位的製備方法，其中將步驟b)製得的提取物與膠囊常用輔料混合，制粒，裝膠囊。
4.權利要求1所述的越桔中提取的有效部位能治療急慢性呼吸道感染性疾病。
全文摘要
本發明公開了越桔治療急慢性呼吸道感染性疾病的有效部位，其主要以熊果苷為主的酚苷類成分和黃酮類成分組成。它可以被製備成任何一種常用內服製劑。本發明藥物有效部位具有抗炎、抗病毒、鎮咳、祛痰、平喘等功能，治療急慢性呼吸道感染性疾病見效快治癒率高。
文檔編號C07H1/08GK1609113SQ20031010762
公開日2005年4月27日 申請日期2003年10月20日 優先權日2003年10月20日
發明者王喜軍, 林 發, 陳曦, 吳修紅 申請人:林 發, 王喜軍