作為ASGPR靶向劑的被取代的‑6,8‑二氧雜雙環[3.2.1]辛烷‑2,3‑二醇化合物的製作方法

2023-06-04 06:33:01

本發明涉及取代的-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇衍生物、其晶體結構、其藥物組合物及其作為脫唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)靶向劑的用途。

背景

對某些分子實體和某些遞送部位而言，藥物遞送是一個嚴重問題。例如，遞送大分子，例如反義或RNAi分子是困難的，因為這類化合物通常不能穿透細胞膜。此外，帶大量負電荷並且是親水性的分子實體通過細胞膜時可能擴散受到限制。此外，選擇性藥物遞送至靶向遞送部位通常是一個挑戰，因為細胞可透過的分子通常無選擇性。細胞擴散和靶向遞送的一個解決方案是藥物與靶向劑綴合。

靶向劑通常增強藥物屬性，包括藥物動力學和藥效學。靶向劑能夠使得連接至靶向劑的藥物有效負荷有效地分布至特定細胞並且被其攝取。某些糖例如半乳糖、N-乙醯基半乳糖胺和其它半乳糖衍生物(包括M.G.Finn和V.Mascitti等人在Journal of the American Chemical Society，134，1978(2012)中所述的那些)已經用作肝細胞的靶向劑，這歸因於與存在於肝細胞表面上的脫唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)結合。然而，這類靶向劑有時存在一些藥物動力學問題或可能呈現不是最理想的藥物動力學特性。

在臨床試驗期間，在動物模型(通常是大鼠、小鼠、狗或非人類靈長類動物)中或在人體中進行靜脈內/口服(IV/PO)藥物動力學(PK)研究，得到有關藥物如何在體內吸收、分布、代謝和消除的信息。通常，在施用前，用甲基纖維素或聚乙二醇(PEG)、糖和水配製藥物。通常通過隱靜脈在不同時間點取血樣直到24小時。收集來自給藥分組群體的血樣，離心，並且採集血漿。稀釋血漿，使得濃度在標準曲線的動態範圍內(1-5000ng/mL)。然後對血漿樣品進行目標分析物的分析。

因此，對於有助於改善藥物動力學特性的藥物遞送物質仍然存在需求。

概述

本發明的一個方面包括式(A)的化合物

其中

R1是-CN、-CH2-CN、-C≡CH、-CH2-N3、-CH2-NH2、-CH2-N(R4)-S(O)2-R5、-CH2-CO2H、-CO2H、-CH2-OH、-CH2-SH、-CH＝CH-R5、-CH2-R5、-CH2-S-R5、-CH2-N(R4)-R5、-CH2-N(R4)-C(O)-R5、-CH2-N(R4)-C(O)-O-R5、-CH2-N(R4)-C(O)-N(R4)-R5、-CH2-O-R5、-CH2-O-C(O)-R5、-CH2-O-C(O)-N(R4)-R5、-CH2-O-C(O)-O-R5、-CH2-S(O)-R5、-CH2-S(O)2-R5、-CH2-S(O)2-N(R4)-R5、-C(O)-NH2、-C(O)-O-R5、-C(O)-N(R4)-R5或芳基或雜芳基，其中所述芳基或雜芳基任選地被R5取代；

或R1是-Z-X-Y，其中X是連接基或遞藥系統，Y不存在或是選自由小分子、胺基酸序列、核酸序列、抗體、寡聚體、聚合物、基因衍生的物質、脂質體、納米顆粒、染料、螢光探針或其組合組成的組的配體，且Z不存在或是-C≡C-、-CH＝CH-、-CH2-、-CH2-O-、-C(O)-N(R4)-、-CH2-S-、-CH2-S(O)-、-CH2-S(O)2-、-CH2-S(O)2-N(R4)-、-C(O)-O-、-CH2-N(R4)-、-CH2-N(R4)-C(O)-、-CH2-N(R4)-S(O)2-、-CH2-N(R4)-C(O)-O-、-CH2-N(R4)-C(O)-N(R4)-、-CH2-O-C(O)-、-CH2-O-C(O)-N(R4)-、-CH2-O-C(O)-O-或芳基或雜芳基，其中所述芳基或雜芳基任選地被R5取代；

R2是-OH、-N3、-N(R3)2、-N(R3)-C(O)-R3、-N(R3)-C(O)-N(R3)2、-N(R3)-C(O)-OR3、四唑或三唑，其中所述四唑和三唑任選地被R3取代，且其中當R1是-CH2-OH時，R2是-N3、-N(R3)2、-N(R3)-C(O)-R3、-N(R3)-C(O)-N(R3)2、-N(R3)-C(O)-OR3、四唑或三唑，其中所述四唑和三唑任選地被R3取代；

R3各自獨立地是-H、-(C1-C5)烷基、滷素取代的(C1-C5)烷基或(C3-C6)環烷基，其中所述烷基或環烷基的-CH2-基團可以被選自-O-、-S-和-N(R4)-的雜原子基團替代，且所述烷基的-CH3可以被選自-N(R4)2、-OR4和-S(R4)的雜原子基團替代，其中所述雜原子基團被至少2個碳原子隔開；

R4各自獨立地是-H、-(C1-C20)烷基或(C3-C6)環烷基，其中被至少兩個碳原子隔開的烷基或環烷基的1至6個-CH2-基團可以被-O-、-S-或-N(R4)-替代，且所述烷基的-CH3可以被選自-N(R4)2、-OR4和-S(R4)的雜原子基團替代，其中所述雜原子基團被至少2個碳原子隔開；且其中所述烷基和環烷基可以被1至6個滷原子取代；且

R5各自獨立地是-H、(C3-C20)環烷基或(C1-C20)烷基，其中被至少兩個碳原子隔開的烷基或環烷基的1至6個-CH2-基團可以被-O-、-S-或-N(R4)-替代，且所述烷基的-CH3可以被選自-N(R4)2、-OR4和-S(R4)的雜原子基團替代，其中所述雜原子基團被至少2個碳原子隔開；且其中所述烷基和環烷基可以被1至6個滷原子取代；

或其藥學上可接受的鹽。

本發明的另一個方面包括式(A)的化合物

其中

R1是-CN、-CH2-CN、-C≡CH、-CH2-N3、-CH2-NH2、-CH2-N(R4)-S(O)2-R5、-CH2-CO2H、-CO2H、-CH2-OH、-CH2-SH、-CH＝CH-R5、-CH2-R5、-CH2-S-R5、-CH2-N(R4)-R5、-CH2-N(R4)-C(O)-R5、-CH2-N(R4)-C(O)-O-R5、-CH2-N(R4)-C(O)-N(R4)-R5、-CH2-O-R5、-CH2-O-C(O)-R5、-CH2-O-C(O)-N(R4)-R5、-CH2-O-C(O)-O-R5、-CH2-S(O)-R5、-CH2-S(O)2-R5、-CH2-S(O)2-N(R4)-R5、-C(O)-NH2、-C(O)-O-R5、-C(O)-N(R4)-R5、-S(O)3H、-S(O)2Cl、S(O)2F或芳基或雜芳基，其中所述芳基或雜芳基任選地被R5取代；

或R1是-Z-X-Y、-Z-Y、-X-Y、-X、-Y或-Z-X，其中X是連接基或遞藥系統，Y是R6或是選自由小分子、胺基酸序列、核酸序列、抗體、寡聚體、聚合物、基因衍生的物質、脂質體、納米顆粒、染料、螢光探針或其組合組成的組的配體，且Z是-C≡C-、-CH＝CH-、-CH2-、-CH2-O-、-C(O)-N(R4)-、-CH2-S-、-CH2-S(O)-、-CH2-S(O)2-、-CH2-S(O)2-N(R4)-、-C(O)-O-、-CH2-N(R4)-、-CH2-N(R4)-C(O)-、-CH2-N(R4)-S(O)2-、-CH2-N(R4)-C(O)-O-、-CH2-N(R4)-C(O)-N(R4)-、-CH2-O-C(O)-、-CH2-O-C(O)-N(R4)-、-CH2-O-C(O)-O-或芳基或雜芳基，其中所述芳基或雜芳基任選地被R5取代；

R2是-OH、-N3、-N(R3)2、-N(R3)-C(O)-R3、-N(R3)-C(O)-N(R3)2、-N(R3)-C(O)-OR3、-N(R3)-S(O)2-R3、四唑或三唑，其中所述四唑和三唑任選地被R3取代，且其中當R1是-CH2-OH時，R2是-N3、-N(R3)2、-N(R3)-C(O)-R3、-N(R3)-C(O)-N(R3)2、-N(R3)-C(O)-OR3、N(R3)-S(O)2-R3、四唑或三唑，其中所述四唑和三唑任選地被R3取代；

R3各自獨立地是-H、-(C1-C5)烷基、滷素取代的(C1-C5)烷基或(C3-C6)環烷基，其中所述烷基或環烷基的一個或多個-CH2-基團可以各自被獨立地選自-O-、-S-和-N(R4)-的雜原子基團替代，且所述烷基的-CH3可以被選自-N(R4)2、-OR4和-S(R4)的雜原子基團替代，其中所述雜原子基團被至少2個碳原子隔開；

R4各自獨立地是-H、-(C1-C20)烷基或(C3-C6)環烷基，其中被至少兩個碳原子隔開的烷基或環烷基的1至6個-CH2-基團可以各自被獨立地選自-O-、-S-或-N(R4)-的雜原子替代，且所述烷基的-CH3可以被選自-N(R4)2、-OR4和-S(R4)的雜原子基團替代，其中所述雜原子基團被至少2個碳原子隔開；且其中所述烷基和環烷基可以被滷原子取代；

R5各自獨立地是-H、(C3-C20)環烷基或(C1-C60)烷基，其中所述環烷基的1至6個-CH2-基團或所述烷基的1至20個-CH2-基團可以各自被獨立地選自-O-、-S-和-N(R4)-的雜原子替代，其中所述雜原子被至少兩個碳原子隔開，且所述烷基的-CH3可以被選自-N(R4)2、-OR4和-S(R4)的雜原子基團替代，其中所述雜原子基團被至少2個碳原子隔開；且其中所述烷基和環烷基可以被滷原子取代；且

R6各自獨立地是H、-C≡CH、-C＝CH2、-CH3、-N3、-N(R4)2、-OH、-S(O)-(R4)、-S(O)2-(R4)、-C(O)-OH、-S-S-芳基、-S-S-雜芳基、雜環基、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基各自任選地被R5取代；

或其藥學上可接受的鹽。

本發明的另一個方面包括藥物組合物，其包含(i)式(A)的化合物；以及(ii)藥學上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。

本發明的另一個方面包括用於治療肝臟疾病或肝臟病症或肝臟調節的疾病或病症的方法，所述肝疾病或病症包括遺傳性血管水腫、I型家族性酪氨酸血症、Alagille症候群、α-1-抗胰蛋白酶缺乏症、膽汁酸合成和代謝缺陷、膽道閉鎖、囊性纖維化肝病、特發性新生兒肝炎、線粒體肝病、進行性家族性肝內膽汁鬱積、原發性硬化性膽管炎、轉甲狀腺素蛋白澱粉樣變性病、血友病、純合性家族性高膽固醇血症、高血脂症、脂肪性肝炎、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪肝病(NAFLD)、高血糖症如II型糖尿病和牽涉與II型糖尿病類似的異常增高的肝葡萄糖生成的疾病，該方法包括施用有效量的根據任意式(A)的化合物或其藥學上可接受的鹽。

本發明的另一個方面包括式(B)的化合物或其藥學上可接受的鹽

本發明的另一個方面包括式(C)的化合物或其藥學上可接受的鹽

本發明的另一個方面包括式(D)的化合物或其藥學上可接受的鹽

本發明的另一個方面包括式(E)的化合物或其藥學上可接受的鹽

本發明的另一個方面包括式(F)的化合物或其藥學上可接受的鹽

本發明的另一個方面包括式(G)的化合物或其藥學上可接受的鹽

式(H)的化合物或其藥學上可接受的鹽

應當理解，上文一般性描述和下文詳細描述僅是示例性的並且不限制所要求保護的本發明。

附圖簡述

圖1表示實施例23化合物的精製晶體結構，它是使用具有類橢圓體的SHELXTL繪圖包以50％置信水平繪製而作圖的。

詳細描述

參照如下本發明示例性實施方案的詳細描述和本申請中包括的實施例甚至可以更容易理解本發明。

在公開和描述本發明化合物、組合物和方法之前，應當理解本發明不限於特定的合成製備方法，它們當然可以改變。還應當理解，本申請中所用的術語學的目的僅在於描述具體的實施方案，而不想起限制作用。複數和單數應當被視為可互換，而不是表述數目：

本申請中所用的術語「烷基」是指通式CnH2n+1的烴基。烷基可以是直鏈或支鏈的。例如，術語「(C1-C6)烷基」是指包含1至6個碳原子的一價直鏈或支鏈脂族基團(例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、新戊基、3,3-二甲基丙基、己基、2-甲基戊基等)。類似地，烷氧基、醯基(例如烷醯基)、烷基氨基、二烷基氨基、烷基磺醯基和烷硫基基團的烷基部分(即，烷基部分)具有與上述相同的定義。當表示為「任選被取代的」時，烷基或烷基部分可以是未取代的或被一個或多個取代基取代(通常是1至3個取代基，除了滷素取代基的情況以外，例如全氯或全氟烷基)，所述取代基獨立地選自如下為「被取代的」的定義而列出的取代基的組。「滷素取代的烷基」是指烷基基團被一個或多個滷原子取代(例如氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、全氟乙基、1,1-二氟乙基等)。

類似地，「亞烷基」是指通式CnH2n的二價烴基，其可以是直鏈的或支鏈的。

術語「烯基」是指具有一個或多個碳-碳雙鍵的一價不飽和烴基。烯基部分可以是直鏈的或支鏈的。示例性的烯基基團包括乙烯基。本申請中所用的「亞烯基」是指具有一個或多個碳-碳雙鍵且可以是直鏈或支鏈的二價不飽和烴基。

術語「炔基」是指具有一個或多個碳-碳三鍵的一價不飽和烴基。炔基部分可以是直鏈的或支鏈的。本申請中所用的「亞炔基」是指具有一個或多個碳-碳三鍵且可以是直鏈或支鏈的二價不飽和烴基。

術語「芳基」是指包含1、2或3個環的碳環芳族系統，其中所述環可以是稠合的。如果所述環是稠合的，則環之一必須是完全不飽和的且稠合環可以是完全飽和的、部分不飽和的或完全不飽和的。術語「稠合的」是指通過與第一個環共有(即共享)2個相鄰原子而存在第二個環(即連接或形成)。術語「稠合的(fused)」與術語「稠合的(condensed)」等效。術語「芳基」涵蓋芳族基團，例如苄基、苯基、萘基、四氫萘基、茚滿基、聯苯基、苯並[b][1,4]嗪-3(4H)-酮基、2,3-二氫-1H茚基和1,2,3,4-四氫萘基。

術語「環烷基」是指非芳族環，其為完全氫化的並且可以作為單環、雙環或螺環存在。除非另有具體說明，否則碳環通常是3元至20元環。例如，環烷基包括例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環己烯基、降冰片基(雙環[2.2.1]庚基)、雙環[2.2.2]辛基等基團。

術語「雜芳基」是指包含1、2、3或4個獨立地選自氧、氮和硫的雜原子並且具有1、2或3個環的芳族碳環系統，其中所述環可以是稠合的，其中稠合的具有上述定義。術語「雜芳基」包括，但不限於呋喃基、噻吩基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基、異唑基、異噻唑基、二唑基、噻二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吡啶-2(1H)-酮基、噠嗪-2(1H)-酮基、嘧啶-2(1H)-酮基、吡嗪-2(1H)-酮基、咪唑並[1,2-a]吡啶基、吡唑並[1,5-a]吡啶基、5,6,7,8-四氫異喹啉基、5,6,7,8-四氫喹啉基、6,7-二氫-5H-環戊並[b]吡啶基、6,7-二氫-5H-環戊並[c]吡啶基、1,4,5,6-四氫環戊並[c]吡唑基、2,4,5,6-四氫環戊並[c]吡唑基、5,6-二氫-4H-吡咯並[1,2-b]吡唑基、6,7-二氫-5H-吡咯並[1,2-b][1,2,4]三唑基、5,6,7,8-四氫-[1,2,4]三唑並[1,5-a]吡啶基、4,5,6,7-四氫吡唑並[1,5-a]吡啶基、4,5,6,7-四氫-1H-吲唑基和4,5,6,7-四氫-2H-吲唑基。

術語「遞藥系統」是指遞送治療有效量的配體的工具，且包括，但不限於聚合物，例如PEG(聚(乙二醇)甲基醚)、PEG-PLA(聚(乙二醇)甲基醚-聚(D,L丙交酯))、PEG-PLGA(聚(乙二醇)甲基醚-聚(丙交酯-共-乙交酯))和PEG-PCL(聚(乙二醇)-聚(ε-己內酯)甲基醚)、Quantum Dots(Q dots)、脂質體、免疫-脂質體、膠束、納米顆粒和納米凝膠。示例性的遞藥系統描述在Tiwari，G.，「Drug Delivery Systems：an Updated Review」，Int J Pharm Investig 2(1)p.2-11(2012年1月)中，通過參考將該文獻的內容併入本申請用於所有目的。

術語「小分子」是指具有100至2,000道爾頓之間的分子量的有機化合物，包括，但不限於合成化合物和天然產物。

「抗體」是能夠通過至少一個抗原識別位點特異性結合至靶標(例如碳水化合物、多核苷酸、脂質、多肽等)的免疫球蛋白分子，所述抗原結合位點位於免疫球蛋白分子的可變區中。如本申請中所用，該術語不僅包括完整的多克隆或單克隆抗體，而且包括其片段(例如Fab、Fab』、F(ab』)2、Fv)、單鏈(ScFv)和結構域抗體)和包含抗體部分的融合蛋白和包含抗原識別位點的免疫球蛋白分子的任意其它被修飾的結構。抗體包括任意類型的抗體，例如IgG、IgA或IgM(或它們的亞類)和不需具有任意特定類型的抗體。根據其重鏈恆定結構域的抗體胺基酸序列的不同，可以將免疫球蛋白指定為不同的類型。存在5種主要類型的免疫球蛋白：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，且它們中的幾種可以進一步被分成亞類(同種型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。對應於不同類型免疫球蛋白的重鏈恆定結構域分別稱作α、δ、ε、γ和μ。不同類型免疫球蛋白的亞基結構和三維構型是眾所周知的。

本申請中所用的「單克隆抗體」是指得自基本上均質性抗體群體的抗體，即除了可能以微量存在的可能的天然存在的突變以外，構成所述群體的個體抗體相同。單克隆立體是高度特異性的，其定向於單一抗原位點。此外，與多克隆抗體製備物(其典型地包括定向於不同決定簇(表位)的不同抗體)形成鮮明對比，每種單克隆抗體定向於抗原上的單一決定簇。修飾語「單克隆」表示得自基本上均質性抗體群體的抗體的屬性且不應被解釋為需要通過任意特定方法生產的抗體。例如，本發明使用的單克隆抗體可以通過首先由Kohler和Milstein，1975，Nature 256：495所述的雜交瘤方法製備，或可以通過例如描述在美國專利US 4,816,567中的重組DNA方法製備。單克隆抗體還可以從使用例如McCafferty等人，1990，Nature 348：552-554中所述技術生成的噬菌體文庫中分離出來。

抗體的「可變區」是指單獨或以組合的抗體輕鏈的可變區或抗體重鏈的可變區。正如本領域中所知曉的，重鏈和輕鏈的可變區各自由通過3個包含高變區的互補決定區(CDRs)連接的4個框架區(FR)組成。每條鏈中的CDRs通過FRs緊密結合在一起，並且與來自另一條鏈的CDRs一起促進形成抗體的抗原結合位點。存在至少兩種用於測定CDRs的技術：(1)基於交叉物種序列變異性的方法(即，Kabat等人的Sequences of Proteins of Immunological Interest，(第5版，1991，National Institutes of Health，Bethesda MD))；以及(2)基於抗原-抗體複合物的結晶學研究的方法(Al-lazikani等人，1997，J.Molec.Biol.273：927-948)。如本申請中所用，CDR可以指由任一方法或通過兩種方法的組合界定的CDRs。

正如本領域中所知曉的，抗體的「恆定區」是指單獨或組合的抗體輕鏈的恆定區或抗體重鏈的恆定區。

短語「治療有效量」是指(i)治療所述特定疾病、病症或障礙、(ii)減弱、改善或消除所述特定疾病、病症或障礙的一種或多種症狀或(iii)預防或延遲本申請中所述特定疾病、病症或障礙的一種或多種症狀發作的本發明化合物的量。

術語「動物」是指人(男性或女性)、伴侶動物(例如狗、貓和馬)、食物來源動物、動物園動物、海洋動物、禽類和其它類似動物物種。「可食用動物」是指食物來源動物，例如牛、豬、綿羊和家禽。

術語「藥學上可接受的」表示必須在化學上和/或毒理學上與製劑包含的其它成分和/或所治療的哺乳動物相容的物質或組合物。

術語「治療」涵蓋預防，即預防性治療和治標性治療。

本申請中所用的「藥學上可接受的載體」或「藥學上可接受的賦形劑」包括與活性成分組合時能夠使該成分保持生物活性並且與受試者的免疫系統無反應的任意物質。實例包括，但不限於任意標準藥用載體，例如磷酸鹽緩衝鹽水溶液、水、乳劑例如油/水乳劑和不同類型的溼潤劑。優選的用於氣霧劑或胃腸外施用的稀釋劑是磷酸鹽緩衝鹽水(PBS)或生理(0.9％)鹽水。通過眾所周知的常規方法配製包含這類載體的組合物(參見，例如Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版，A.Gennaro，ed.，Mack Publishing Co.，Easton，PA，1990；以及Remington，The Science和Practice of Pharmacy，第20版，Mack Publishing，2000)。

術語「本發明的化合物」(除非另有特別地鑑定)是指式(A)的化合物和所有的對映體、互變異構體和同位素標記的化合物。本發明化合物的水合物和溶劑合物被視為本發明的組合物，其中所述化合物分別與水或溶劑結合。所述化合物還可以以一種或多種結晶狀態存在，即作為共晶、多晶型物存在，或它們可以作為無定形固體存在。本申請的權利要求涵蓋所有這類形式。

術語「連接基」是化學基團，它通過至少一個共價鍵連接一個或多個其它化學基團。所述連接基可以包括一個或多個間隔基團，包括，但不限於亞烷基、亞烯基、亞炔基、烷基、烯基、炔基、烷氧基、芳基、雜芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基等。所述連接基可以是電荷中性的、帶正電荷或帶負電荷。此外，所述連接基可以是可裂解的，使得連接基內將連接基與另一個化學基團連接的連接基的共價鍵或連接配體的鍵可在某些條件下被斷裂或裂解(參見，例如H.Bruyere，等人，「Tuning the pH Sensitivities of Orthoester based compounds for Drug Delivery Applications by Simple Chemical Modification」，Bioorganic和Medicinal Chemistry Letters，20，2200(2010)和A.A.Kislukhin等人，「Degradable Conjugates from Oxanorbornadiene Reagents」，Journal of the American Chemical Society，134，6491(2012)。這些條件包括pH、溫度、鹽濃度、催化劑或酶(G.M.Dubowchik等人，「Cathepsin B-Labile Dipeptide Linkers for Lysosomal Release of Doxorubicin from Internalizing Immunoconjugates：Model Studies of Enzymatic Drug Release and Antigen-Specific In Vitro Anticancer Activity」，Bioconjugate Chemistry，13，855(2002)，G.Leriche等人，「Cleavable Linkers in Chemical Biology」，Bioorganic and Medicinal Chemistry，20，571(2012)，C.P.R.Hackenberger等人，「Chemoselective Ligation and Modification Strategies for Peptides and Proteins」，Angewandte Chemie International Edition，47，10030(2008)；D.M.Patterson等人，「Finding the Right(Bioorthogonal)Chemistry」，ACS Chemical Biology，9，592(2014)；C.A.Blencowe等人，「Self-immolative Linkers in Polymeric Delivery Systems」，Polymer Chemistry，2，773(2011)。通過參考將上述出版物公開的內容以其完整的形式併入本申請用於所有目的。

在一些實施方案中，所述連接基在胞內條件下是可裂解的，使得連接基的裂解在胞內環境中從式A的化合物中釋放配體單元。在一些實施方案中，所述連接基可被存在於胞內環境中的裂解劑裂解(例如溶酶體或內涵體或caveolus內)。可裂解的連接基的一個實例是酶裂解的連接基，即可被胞內肽酶或蛋白酶(包括，但不限於溶酶體或內涵體蛋白酶)裂解的肽基連接基。在一些實施方案中，所述肽基連接基是至少兩個胺基酸長或至少三個胺基酸長。酶裂解劑包括組織蛋白酶B和組織蛋白酶D和纖溶酶，已知它們均水解二肽藥物衍生物，導致活性藥物在靶細胞內釋放(參見Dubowchik，Gene M.等人，Cathepsin B-Labile Dipeptide Linkers for Lysosomal Release of Doxorubicin，Bioconjugate Chem.2002，13，855-869)。這類連接基包括肽類和二肽類，包括上述出版物中所述的那些，為所有目的將這些文獻以其完整的形式併入本申請作為參考。

其它可裂解的連接基可以被親核試劑/鹼性試劑、還原劑、光照射和親電試劑/酸性試劑裂解(參見Leriche，Geoffray，等人，Cleavable Linkers in Chemical Biology，Bioorganic&Medicinal Chemistry 20(2012)571–582)。

在另一個實施方案中，所述連接基單元不是可裂解的，且所述藥物通過降解被式A的化合物釋放。該過程通常被稱作自我犧牲性消除，其通過被熵和熱力學驅動的環化或電子級聯反應起作用。不可裂解的連接基的一個實例是多取代的富含電子的芳族種類，其帶有氨基或羥基基團或其它給電子基團，該基團與苄型位置上的離去基綴合(參見Blencowe，Christopher A.等人，Self-immolative Linkers in Polymeric Delivery Systems，Polymer Chemistry，2011，2，773–790)。自我犧牲性消除連接基包括，但不限於基於苯胺的連接基、基於N-羥基苯胺的連接基、基於苯酚的連接基、基於1,8消除的連接基、基於環化的連接基(即，基於羥基的連接基、基於氨基的連接基和基於巰基的連接基)、聚合物-樹枝狀大分子綴合物和聚合物綴合物(即，N-(2-羥基丙基)-甲基丙烯醯胺(HPMA)聚合物綴合物、聚-乙二醇(PEG)聚合物綴合物)(參見I.Tranoy-Opalinski，等人，Design of Self-Immolative Linkers for Tumour-Activated Prodrug Therapy，Anti-Cancer Agents in Medicinal Chemistry，2008，8，618-637；Blencowe，Christopher A.等人，Self-immolative Linkers in Polymeric Delivery Systems，Polymer Chemistry，2011，2，773–790)。

典型地，所述連接基在胞外環境中基本上不裂解。本申請中所用的「在胞外環境中基本上不裂解」在連接基的上下文中意指當化合物存在於胞外環境(例如血漿)中時，在包括X-Y基團的式A化合物的樣品中不超過20％、典型地不超過約15％、更典型地不超過約10％、甚至更典型地不超過約5％、不超過約3％或不超過約1％的連接基被裂解。例如，可以通過將化合物與血漿一起溫育至多24小時的預定時間段(例如2、4、8、16或24小時)然後對存在於血漿中的游離配體的量進行量化，確定連接基是否在胞外環境中基本上不裂解。

所述連接基可以是一價、二價或三價有支鏈的連接基。在一個實施方案中，所述連接基是二硫鍵。在另一個實施方案中，所述連接基是結構L1-L10中的任一種，該結構顯示與Y和Z(其中Y和Z表示概述中所呈現的基團)的連接：

其中T各自獨立地不存在或是亞烷基、亞烯基或亞炔基，其中所述亞烷基、亞烯基或亞炔基的一個或多個-CH2-基團可以各自獨立地被獨立地選自-O-、-S-和-N(R4)-的雜原子基團替代，其中所述雜原子基團被至少2個碳原子隔開；

Q各自獨立地不存在或是C(O)、C(O)-NR4、NR4-C(O)、O-C(O)-NR4、NR4-C(O)-O、-CH2-、雜芳基或選自O、S、S-S、S(O)、S(O)2和NR4的雜原子基團，其中至少2個碳原子將雜原子基團O、S、S-S、S(O)、S(O)2和NR4與任意其它的雜原子基團隔開。

R4各自獨立地是-H、-(C1-C20)烷基或(C3-C6)環烷基，其中被至少2個碳原子隔開的烷基或環烷基的1至6個-CH2-基團可以被-O-、-S-或-N(R4)-替代，且所述烷基的-CH3可以被選自-N(R4)2、-OR4和-S(R4)的雜原子基團替代，其中所述雜原子基團被至少2個碳原子隔開；且其中所述烷基和環烷基可以被滷原子取代；且

n各自獨立地是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39或40，其中如果n大於1，則每個(T-Q-T-Q)的每個T和每個Q是獨立地選擇的。

在一個實施方案中，Q是選自1H-1,2,3-三唑基、吡啶基和1,2,3,4-四唑基的雜芳基。

連接基長度可以根據n的值進行調整以便優化至目標分子的可達性。在一些情況中，可以通過分析充分裂解式(A)的化合物所需的藥物-靶標相互作用位點或空間來設計連接基的最佳長度。

所謂「基因衍生的物質」意指包括蛋白質(包括Cas9蛋白)、質粒(包括編碼Cas9蛋白或cas9蛋白和指導序列的質粒)、RNA序列例如mRNA、siRNA序列和Cas9核糖核蛋白。Cas9核糖核蛋白可以包含兩種連接的或結合的元件：(a)第一種元件，其包含識別元件，該識別元件可以包括tracr配偶序列和至少一個用於插入tracr配偶序列上遊的指導序列或單一指導序列(sgRNA)，其中當進行表達時，所述指導序列指導真核細胞中的Cas9核糖核蛋白序列特異性結合至靶序列；以及(b)第二種元件，其包含Cas9蛋白序列並任選包含一種或多種核定位序列(NLSs)，例如約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10個或更多個NLSs或多於約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10個或更多個NLSs。在一些實施方案中，所述第二種元件在氨基末端、羧基末端或它們的組合或接近氨基末端、羧基末端或它們的組合包含約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10個或更多個NLSs(例如在氨基末端上的一個或多個NLS和在羧基末端上的一個或多個NLS)。當存在多於一個NLS時，它們各自可以彼此獨立地選擇，使得單一NLS可以以多於一個的拷貝存在和/或以與一個或多個以一個或多個拷貝存在的其它NLSs組合存在。「指導序列」是具有與靶多核苷酸序列足夠的互補性以便與靶序列雜交並且指導Cas9核糖核蛋白與靶序列的序列特異性結合的任意多核苷酸序列。示例性的Cas9蛋白、質粒和核糖核蛋白描述在如下文獻中：2014年3月6日公布的US20140068797；01/29/2015公布的US2015031134；以及3/19/2015公布的US2015079681，為所有目的將所有這些文獻以其完整的內容併入本申請。

在一些實施方案中，所述指導序列包含至少8個核苷酸，其中在使用適合的序列對比算法優化序列對比時，所述指導序列與其相應的靶序列之間的互補性程度為約50％、60％、75％、80％、85％、90％、95％、97.5％、99％或更大，或大於約50％、60％、75％、80％、85％、90％、95％、97.5％、99％或更大。最佳序列對比可以使用用於序列對比的任意適合的算法確定，其非限制性實例包括Smith-Waterman算法、Needleman-Wunsch算法、基於Burrows-Wheeler轉化的算法(例如Burrows Wheeler Aligner)，ClustalW，Clustal X，BLAT，Novoalign(Novocraft Technologies，ELAND(Illumina，San Diego，Calif.)，SOAP(在soap.genomics.org.cn得到)和Maq(在maq.sourceforge.net得到)。

來自不同物種(包括肺炎鏈球菌(S.pneumoniae)、化膿性鏈球菌(S.pyogenes)和嗜熱鏈球菌(S.thermophilus))的Cas9蛋白序列顯示出保守的結構，其具有HNH回歸內切核酸酶結構域和分離的RuvC/RnaseH內切核酸酶結構域，由此Cas9蛋白各自共有4個主要模體：模體1、2和4，它們為RuvC樣模體；以及模體3，其為HNH模體。對於化膿性鏈球菌(Steptococcus pyogenes)(SEQ ID No：8)，模體1是SEQ ID NO：260，模體2是SEQ ID NO：261，模體3是SEQ ID NO：262，且模體4是SEQ ID NO：263。因此，「Cas9蛋白序列」意指包含序列內具有至少4個模體的胺基酸序列的多肽，所述模體與SEQ ID NOs：260-263任一序列的Cas9胺基酸序列的模體1、2、3和4或與SEQ ID NOs：1-829中所示的任意胺基酸序列中的相應部分具有至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％、至少約95％、至少約99％或100％的胺基酸序列同一性。在另一個實施方案中，所述Cas9胺基酸序列與SEQ ID NO：8的7－166位或731－1003位的胺基酸或SEQ ID NOs：1-7、9-829中所示的序列相應的胺基酸具有至少約75％、至少約80％、至少約85％、至少約90％、至少約95％、至少約99％或100％胺基酸序列同一性。

所述Cas9蛋白序列可以被修飾，例如為了在真核細胞中表達進行密碼子優化或包括對序列的修飾以便影響其功能。在一些實施方案中，所述Cas9蛋白序列指導靶序列的位置上的DNA的一條鏈或兩條鏈裂解，例如使用用於與指導序列組合的Cas9切口酶(即，Cas9-D10A)，例如兩種指導序列，其分別靶向DNA靶標的有義鏈和反義鏈，由此使得兩條鏈帶切口，並且導致非同源的末端連接。具有單一指導序列的Cas9-D10A可以生成插入/缺失。然而，在其它實施方案中，Cas9蛋白序列缺乏DNA鏈裂解活性，例如具有選擇性使用催化滅活的Cas(dCas)結構域。在其它實施方案中，Cas9蛋白序列被修飾，以便與Cas9蛋白或Cas9核糖核蛋白共價鍵合，包括賴氨酸和半胱氨酸殘基修飾。在另外的實施方案中，Cas9核糖核蛋白能夠指導RNA鏈裂解，如O/'Connell，Mitchell R.，等人，Programmable RNA recognition and cleavage by CRISPR/Cas9，Nature，2014，516，p263-266中所述。

Cas9蛋白序列的修飾可以包括D1OA(SEQ ID NO：8的10位上的胺基酸由天冬氨酸變成丙氨酸)突變(或如SEQ ID NOs：1-829中所示的任意蛋白質的相應突變)，其可以裂解靶DNA的互補鏈，但裂解靶DNA的非互補鏈的能力下降(由此產生單一鏈斷裂而不是雙鏈斷裂)。另一種修飾是H840A(SEQ ID NO：8的840位上的胺基酸由組氨酸變成丙氨酸)突變(或如SEQ ID NOs：1-829中所示的任意蛋白質的相應突變)，其可以裂解靶DNA的非互補鏈，但裂解靶DNA的互補鏈的能力下降(由此產生單一鏈斷裂而不是雙鏈斷裂)。Cas9的D1OA或H840A變體(或如SEQ ID NOs：1-829中所示的任意蛋白質的相應突變)的應用可以改變預期的生物結果，因為與單鏈斷裂相反當雙鏈斷裂存在時非同源性末端連接更有可能發生。

其它殘基可以突變以便也使來自具有模體1、2、3或4的特定核酸酶失活。作為非限制性實例，殘基D10、G12、G17、E762、H840、N854、N863、H982、H983、A984、D986和/或A987(或如SEQ ID NOs：1-829中所示的任意蛋白質的相應突變)可以被修飾。突變可以包括取代、添加和缺失或其任意的組合。在一些情況中，突變將突變的胺基酸轉化成另一種胺基酸，例如丙氨酸。其它修飾包括鹼基修飾、骨架修飾和或核苷間連接修飾。

「核定位序列」(NLS)意指有助於Cas9核糖核蛋白進入真核細胞的細胞核的胺基酸序列。因此，NLS典型地包含暴露於蛋白質表面上的帶正電荷的賴氨酸或精氨酸的一種或多種短序列。示例性的NLSs包括，但不限於衍生自如下的NLS序列：SV40病毒大T抗原的NLS，其具有胺基酸序列PKKKRKV(SEQ ID NO：830)；來自核質蛋白的NLS(例如具有序列KRPAATKKAGQAKKKK(SEQ ID NO：831)的核質蛋白二分NLS；具有胺基酸序列PAAKRVKLD(SEQ ID NO：832)或RQRRNELKRSP(SEQ ID NO：833)的c-myc NLS；具有序列NQSSNFGPMKGGNFGGRSSGPYGGGGQYFAKPRNQGGY(SEQ ID NO：834)的hRNPA1M9NLS；來自核轉運蛋白α的IBB結構域的序列RMRIZFKNKGKDTAELRRRRVEVSVELRKAKKDEQILKRR NV(SEQ ID NO：835)；肌瘤T蛋白的序列VSRKRPRP(SEQ ID NO：836)和PPKKARED(SEQ ID NO：837)；人p53的序列PQPKKKPL(SEQ ID NO：838)；小鼠c-abl IV的序列SALIKKKKKMAP(SEQ ID NO：839)；流感病毒NS1的序列DRLRR(SEQ ID NO：840)和PKQKKRK(SEQ ID NO：841)；肝炎病毒δ抗原的序列RKLKKKIKKL(SEQ ID NO：842)；小鼠Mx1蛋白的序列REKKKFLKRR(SEQ ID NO：843)；人聚(ADP-核糖)聚合酶的序列KRKGDEVDGVDEVAKKKSKK(SEQ ID NO：844)；類固醇激素受體(人)糖皮質激素的序列RKCLQAGMNLEARKTKK(SEQ ID NO：845)；序列MAPKKKRKVGIHRGVP(SEQ ID NO：846)；以及序列PKKKRKVEDPKKKRKVD(SEQ ID NO：847)。

在式(A)的化合物的一個實施方案中，R1是Z-X-Y，且R2是-NH-C(O)-CH3。

在式(A)的化合物的另一個實施方案中，Y是RNA序列。

在式(A)的化合物的另一個實施方案中，Y是siRNA序列。

在另一個實施方案中，式(A)的化合物能夠結合肝細胞上存在的受體。

在另一個實施方案中，存在於肝細胞上的受體是脫唾液酸糖蛋白受體。

在藥物組合物的一個實施方案中，所述化合物或所述其治療上可接受的鹽以治療有效的量存在。

可以通過包括與化學領域中那些眾所周知的類似的方法、特別是根據本申請中包含的描述的合成路徑合成本發明的化合物。原料通常購自商業來源，例如Aldrich Chemicals(Milwaukee，WI)或易於使用本領域技術人員眾所周知的方法製備(例如通過一般性描述在如下文獻中的方法：Louis F.Fieser和Mary Fieser，Reagents for OrganicSynthesis，v.1-19，Wiley，New York(1967-1999ed.)或BeilsteinsHandbuch der organischen Chemie，4，Aufl.ed.Springer-Verlag，Berlin，包括增刊(也可以通過Beilstein在線資料庫得到))。

為了示例性目的，如下所述的反應方案提供了用於合成本發明化合物以及關鍵合成中間體的可能路徑。關於個體反應步驟的更詳細描述，見下文的實施例部分。本領域技術人員會理解，其它合成路徑可以用於合成本發明的化合物。儘管方案中描述並且在下文中討論了具體的原料和試劑，但是可容易地代之以其它的原料和試劑以提供各種衍生物和/或反應條件。此外，通過下述方法製備的許多化合物可以根據本申請公開的內容，使用本領域技術人員眾所周知的常規化學方法進一步修飾。

在製備本發明化合物的過程中，需要保護中間體的遠端官能團(例如伯胺或仲胺)。對這類保護的需求將根據遠端官能團的性質和製備方法的條件而改變。適合的氨基-保護基(NH-Pg或NPg)包括乙醯基、三氟乙醯基、叔丁氧羰基(BOC)、苄氧羰基(CBz)、9-芴基亞甲氧基羰基(Fmoc)和鄰苯二甲醯亞胺(Pht)。「羥基-保護基」是指阻滯或保護羥基官能團的羥基取代基。適合的羥基-保護基(O-Pg)包括，例如烯丙基、乙醯基(Ac)、甲矽烷基(如三甲基甲矽烷基(TMS)或叔丁基二甲基甲矽烷基(TBS))、苄基(Bn)、對甲氧基苄基(PMB)、三苯甲基(Tr)、對溴苯甲醯基、對硝基苯甲醯基等(亞苄基、環縮酮類、原酸酯類、用於保護1,2-或1,3-二醇類的原醯胺類)。對於這類保護的需求易於本領域技術人員決定。有關保護基及其應用的一般描述，參見T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，John Wiley&Sons，New York，1991。

方案1概括了可用於提供本發明化合物的通用方法。在方案1的步驟1中，可以在典型條件下[使用三甲基甲矽烷基氯和吡啶在室溫(約23℃)下]使通過H.Paulsen和M.Paal在Carbohydrate Research，135，53(1984)中所述方法製備的合成中間體(I-a)全甲矽烷基化，然後選擇性裂解保護伯醇的三甲基甲矽烷基基團(通過在鹼性條件下例如在醇溶劑如甲醇中的碳酸鉀在約-10攝氏度至室溫的溫度下處理)，以顯露伯醇中間體(I-b)。在方案1的步驟2中，可以通過J.R.Parikh和William v.E.Doering在Journal of the American Chemical Society，89，5505–5507(1967)中所述的Parikh-Doering氧化，將中間體(I-c)中發現的另外的羥基亞甲基基團引至糖苷上，然後用甲醛源(例如甲醛水溶液、固體低聚甲醛)在鹼金屬氫氧化物(例如氫氧化鈉、醇鈉)的存在下在水或醇溶劑中，在約室溫至約60攝氏度的溫度下處理。該步驟被稱作羥醛-康尼扎羅(Cannizzaro)反應。也可以使用本領域技術人員已知的該方法的變型。例如，還可以使用其它氧化劑，如Ozanne，A.等人在Organic Letters，5，2903(2003)中所述的穩定化2-碘醯基苯甲酸、Kanji Omura和Daniel Swern在Tetrahedron，34，1651(1978)中所述的Swern氧化以及本領域技術人員已知的其它氧化劑。Robert Schaffer在Journal of The American Chemical Society，81，5452(1959)中和Amigues，E.J.，等人在Tetrahedron，63，10042(2007)中描述了羥醛康尼扎羅反應順序。方案1步驟2的實驗條件也促進了保護仲醇類的三甲基甲矽烷基基團的裂解。在方案1的步驟3中，用有機酸或無機酸(例如硫酸)或酸性樹脂在溶劑如水中在約室溫至約100攝氏度的溫度下處理中間體(I-c)，得到本發明的化合物(1)。在方案1的步驟4中，可以用已知將疊氮基基團還原成相應胺的還原劑處理化合物(1)(例如過渡金屬介導的催化氫化，使用三苯膦的水溶液，在本領域技術人員眾所周知的典型實驗條件下)。隨後在醯化劑的存在下(例如乙酐或乙醯氯，在吡啶或三乙胺的存在下，在溶劑例如二氯甲烷或四氫呋喃中，在0至80攝氏度的溫度下)處理，得到本發明的化合物(2)。在方案1的步驟5中，在醇鹽(例如甲醇鈉)的存在下，在溶劑或溶劑混合物中，例如醇溶劑或四氫呋喃，在約0至室溫的溫度下處理化合物(2)，得到本發明的化合物(3)。此外，然後可容易地使用眾所周知的保護基和本領域技術人員已知的官能團操作順序將由此得到的化合物官能化成本發明的其它要求保護的化合物。因此，在方案1的步驟6和7中，可以進一步用適合的保護基分別保護化合物(1)和(3)上的仲羥基基團(例如在用2,2-二甲氧基丙烷在酸性條件下、在溶劑例如N,N-二甲基甲醯胺中在室溫至約90攝氏度的溫度下處理時，為環縮酮)，得到中間體，例如(I-d)和(I-e)。依次，使用本領域技術人員眾所周知的合成轉化和官能團和保護基操作，預先處理(I-d)和(I-e)以便進一步官能化和衍生伯羥基基團，以便連接所期望的連接基X和目標配體Y，從而產生本發明中要求保護的包含XY的化合物。使用本領域技術人員眾所周知的試劑和條件除去保護基(例如Pg)(例如在其中兩個Pg形成環縮酮例如丙酮化合物(acetonide)的情況中，可以使用酸例如乙酸在溶劑或溶劑混合物例如乙酸、醇溶劑、水、四氫呋喃中在室溫至約80攝氏度的溫度下除去它)，暴露仲羥基基產生本發明中要求保護的包含XY的化合物。例如，在保護基操作和除去後，(I-e)上伯羥基基團的烷基化可以產生本發明中要求保護的相應包含醚連接的XY的化合物。還可以便利地由(3)或中間體(I-e)，使用本領域技術人員眾所周知的適合的反應劑和試劑得到本發明中要求保護的包含酯連接的、碳酸酯連接的和氨基甲酸酯-連接的XY的化合物。在保護基操作和除去後，將(I-e)上的伯羥基基團轉化成相應的三氟甲磺酸酯(III-e-1)，然後用適合的親核體進行親核置換可以得到本發明中要求保護的包含相應的醚連接的和硫醚連接的XY化合物。氧化硫醚中間體還可以產生本發明中要求保護的包含相應的亞碸和碸連接的XY的化合物。此外，用硫代乙酸鉀置換(III-e-1)上的伯三氟甲磺酸酯，然後進行硫酯水解，可以得到相應的硫醇(III-e-2)，在保護基操作和除去後，其得到本發明的化合物(IV-e-1)；硫醇(III-e-2)的進一步烷基化以及保護基操作和除去還可以得到本發明中要求保護的包含硫醚連接的XY的化合物。還可以將(III-e-2)轉化成相應的磺醯氯並且用適合的胺處理，以便在保護基操作和除去後得到本發明包含磺醯胺連接的XY的化合物。用疊氮化鈉置換伯三氟甲磺酸酯(III-e-1)還可以產生包含相應的疊氮化物的化合物(III-e-3)，在保護基操作和除去後，其得到化合物(IV-e-2)。還原化合物(III-e-3)可以得到相應的伯胺(III-e-4)，將其預先處理用於進一步官能化(例如醯胺鍵形成、還原氨基化、磺醯胺形成、脲形成、氨基甲酸酯形成等)，以便連接所述XY取代基並且在保護基操作和除去後產生本發明中要求保護的化合物。在保護基操作和除去後，(III-e-4)還可以產生本發明的化合物(IV-e-3)。用包含炔或腈的試劑或合成中間體處理上述疊氮化物中間體(III-e-3)，然後在本領域技術人員眾所周知的條件下進行保護基操作和除去，還可以分別產生本發明中要求保護的包含三唑連接的或四唑連接的XY的化合物。將(I-e)上的伯羥基基團氧化成相應的醛(III-e-5)，然後在本領域和技術人員公知的典型條件下用適合的胺進行還原氨基化，或烯化(例如Wittig-、Horner-Wadsworth-Emmons-、Petterson、Julia類型及其變型)，然後還原所形成的烯烴(例如，使用本領域技術人員眾所周知的金屬為介體的催化氫化或二醯亞胺為介體的還原)，在官能團操作和保護基操作和除去後，可以分別得到本發明中要求保護的包含所期望的氮連接的或碳連接的X-Y的化合物。將醛(III-e-5)轉化成相應的炔(III-e-6)(使用Corey-Fuchs類型反應或使用Seyferth-Gilbert類型試劑)，然後進行保護基操作和除去，可以得到本發明中要求保護的化合物(IV-e-4)。依次，用包含疊氮化物的試劑或合成中間體處理炔(III-e-6)或(IV-e-4)，然後在本領域技術人員眾所周知的條件下進行保護基操作和除去，還可以得到本發明中要求保護的包含三唑連接的XY的化合物。當用適合的試劑在本領域技術人員公知的金屬為介體的交叉偶合(例如Sonogashira類型反應)下處理時，炔(III-e-6)也可以用作得到本發明中要求保護的其它化合物的有用合成中間體。使用本領域技術人員眾所周知的合成轉化，將(I-e)上的伯羥基基團氧化成相應的酸(III-e-7)，在保護基除去後，得到本發明中要求保護的包含酯連接的和醯胺連接的XY的化合物。(III-e-7)上的保護基操作和除去還易於得到本發明的化合物(IV-e-5)。在本領域技術人員眾所周知的條件下將(IV-e-5)或(III-e-7)轉化成相應的伯醯胺直接得到本發明中要求保護的化合物(IV-e-6)或化合物(III-e-8)，化合物(III-e-8)在保護基操作和除去後得到(IV-e-6)。此外，(III-e-8)上的醯胺官能團脫水可以得到相應的腈(III-e-9)，在官能團操作和除去後，其得到本發明的化合物(IV-e-7)。用氰化物陰離子置換伯三氟甲磺酸酯(III-e-1)，還可以產生相應的包含腈的化合物(III-e-10)，在保護基操作和除去後，得到本發明的化合物(IV-e-8)。依次，水解(IV-e-8)或(III-e-10)上的腈直接得到酸(IV-e-9)或(III-e-11)，(III-e-11)在保護基操作和除去後，得到(IV-e-9)。還可以進一步使包含炔的化合物例如(III-e-6)/(IV-e-4)、包含伯醯胺的化合物例如(III-e-8)/(IV-e-6)、包含腈的化合物例如(III-e-9)/(IV-e-7)/(III-e-10)/(IV-e-8)、包含酸的化合物例如(III-e-7)/(IV-e-5)/(III-e-11)/(IV-e-9)、包含醛的化合物例如(III-e-5)進一步官能化，並且與適合的試劑和合成中間體在本領域技術人員眾所周知的條件下反應(並且概述在如下文獻中：J.A.Joule和K.Mills，Heterocyclic Chemistry，第5版，Wiley Ed.，(2010)；J.J.Li，NameReactions in heterocyclic chemistry，Wiley，(2005)；M.R.Grimmett Advances in Heterocyclic Chemistry，27，241，(1981)；I.G.Turchi等人，Chemical Reviews，75，389，(1975)；K.T.Potts，ChemicalReviews，61，87，(1961)；R.H.Wiley，Organic Reactions，6，367，(1951)；L.B.Clapp，Advances in Heterocyclic Chemistry，20，65，(1976)；A.Hetzheim等人，Advances in Heterocyclic Chemistry，7，183，(1967)；j.Sandstrom，Advances in Heterocyclic Chemistry，9，165，(1968)；S.J.Wittenberger，Organic Preparations和ProceduresInternational，26，499，(1994)；M.G.Finn等人，Angewandte Chemie International Edition，48，9879，(2009))，得到另外的本發明中要求保護的包含5和6元環(例如異唑、異噻唑、吡唑、唑、噻唑、咪唑、1,2,4-二唑、1,2,4-噻二唑、1,2,4-三唑，1,3,4-二唑、1,3,4-噻二唑、四唑、1,2,3-三唑)連接的XY的化合物。還可以由炔類例如(III-e-6)和(IV-e-4)或這些炔的雜取代的類似物(即，通過用OR4、N(R4)2、SR4置換(III-e-6)/(IV-e-4)上的炔氫；這些化合物可以使用本領域技術人員公知的條件和試劑得到)、通過從本領域技術人員知曉的苯並成環反應(例如Danheiser類型或Dotz類型苯並成環)得到本發明中要求保護的包含芳基環連接的XY的化合物。

上文對(3)和(I-e)所述的類似化學方法也可以適用於(1)和中間體(I-d)，得到本發明中要求保護的另外的化合物。關於進一步詳細描述，見實施例部分。

方案1

方案1的步驟4中使用三氟乙酐也可以得到N-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)-2,2,2-三氟乙醯胺；本發明的化合物(24)。

或者，可以通過方案2中所述的順序製備本發明的化合物，例如(3)。因此，甲基2-乙醯氨基-2-脫氧-α-D-吡喃半乳糖苷(II-a)可以進行與A.W.Mazur在EP0341062(1989)中所述的類似的氧化/Aldo-Cannizzaro方案，得到中間體(II-b)。在如上所述和本領域技術人員已知的條件下，在方案1的步驟3(橋連縮酮形成)、4(乙醯化)和5(酯水解)中處理(II-b)得到化合物(3)。化合物(1)還可以由(I-a)(或其異頭位置上的差向異構體)，使用與方案2中所述相同的方法製備。

方案2

特別地，當R1包含脂族衍生的、PEG衍生的鏈、PEG衍生的寡聚體或聚合物時，本發明的化合物可以在本領域技術人員已知的條件下進一步被官能化、反應和配製，得到本發明中要求保護的另外的化合物，其可以用於和併入肝選擇性遞藥系統的製劑中，例如生物可降解的PLGA-b-PEG聚合物納米顆粒(參見，Erica Locatelli等人，Journal of Nanoparticle Research，14，1316，(2012))和基於脂質的平臺例如脂質體、脂質納米顆粒、穩定的核酸脂質納米顆粒(參見，Sara Falsini等人，Journal of Medicinal Chemistry，57，1138(2014))。

可以通過本領域技術人員眾所周知的方法，例如通過色譜法和/或分級結晶、蒸餾、升華將非對映異構體混合物基於其物理化學差異分離成其單個的非對映異構體。可以通過與適合的旋光化合物(例如手性助劑，例如手性醇或Mosher醯氯)反應，將對映體混合物轉化成非對映異構體混合物、分離非對映異構體並且將各非對映異構體轉化(例如水解)成相應的純對映體分離對映體。此外，本發明的一些化合物可以是阻轉異構體(例如取代的聯芳基化合物)，並且被視為本發明的組成部分。對映體還可以通過使用手性HPLC(高壓液相色譜法)柱分離。

另外可能的情況是，本發明的中間體和化合物可以以不同的互變異構形式存在，且所有這類形式均被本發明的範圍涵蓋。術語「互變異構體」或「互變異構體形式」是指可通過低能屏障互變的不同能量的結構異構體。例如，質子互變異構體(也稱作質子移變互變異構體)包括通過質子遷移的互變，例如酮-烯醇和亞胺-烯胺異構化。質子互變異構體的具體實例是咪唑部分，其中質子在兩個環氮之間遷移。化合價互變異構體包括通過一些成鍵電子的重組的互變。一些中間體(和/或中間體混合物)的封閉與開放形式之間的平衡表明牽涉本領域技術人員已知的醛糖的變旋過程。

本發明還涵蓋同位素標記的本發明的化合物，它們與本申請中所述的那些化合物相同，只是一個或多個原子被原子量或原子數不同於通常實際發現的原子量或原子數的原子替代。可以結合到本發明化合物中的同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯的同位素，例如分別為2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、31P、32P、35S、18F、123I、125I和36Cl。

本發明的一些同位素標記的化合物(例如被3H和14C標記的那些)可用於化合物和/或底物組織分布測定。氚化(即3H)和碳-14(即14C)同位素因其易於製備和可檢測性而成為特別優選的。此外，用重同位素例如氘(即2H)取代可以因較大的代謝穩定性而提供一些治療優勢(例如體內半衰期增加或劑量需求降低)，因此在一些情況中是優選的。電子發射同位素例如15O、13N、11C和18F可用於正電子發射斷層攝影術(PET)研究，以便檢查底物佔有率。本發明同位素標記的化合物通常可以通過下列與如下方案和/或實施例中所公開的那些類似的方法，通過用同位素標記的試劑取代非同位素標記的試劑來製備。

本發明的化合物可用於治療疾病、病症和/或障礙；因此，本發明的另一個實施方案是藥物組合物，其包含治療有效量的本發明的化合物和藥學上可接受的賦形劑、稀釋劑或載體。本發明的化合物(包括本申請中使用的組合物和方法)還可以用於製備用於本申請中所述的治療應用的藥劑。

本發明的組合物可以是液體溶液(例如可注射和可輸注溶液)。優選形式的取決於預期的施用模式和治療應用。典型的組合物是可注射或可輸注溶液的形式，例如與用於人被動免疫的那些類型的組合物。一種施用模式是胃腸外(例如靜脈內、皮下、腹膜內、肌內、真皮內和胸骨內)或通過輸注技術，為無菌可注射液體或油混懸液的形式。正如本領域技術人員可以理解的，施用途徑和/或模式取決於期望的結果。在一個優選的實施方案中，通過靜脈內輸注或注射施用抗體。在另一個優選的實施方案中，通過肌內或皮下注射施用抗體。

典型地治療組合物在製備和儲存條件下為無菌的和穩定的。

可以將組合物配製為溶液、微乳、分散液或脂質體。可以通過將本發明的化合物以所需量與上述成分的一種或其組合(如果需要)一起摻入適合的稀釋劑，然後滅菌(例如過濾滅菌)。通常，通過將活性化合物摻入無菌媒介物製備分散液，所述無菌媒介物包含基礎分散介質和來自如上所述的所需其它成分。可以根據已知技術，使用溼潤劑和助懸劑或其它可接受的試劑的那些適當分散來配製這類混懸液。無菌可注射製劑還可以是在無毒性胃腸外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或混懸液，例如為在1,3-丁二醇中的溶液。在可以使用的可接受的媒介物和溶劑中有水、林格液和等滲氯化鈉溶液。此外，無菌的固定油通常用作溶劑或助懸介質。為了該目的，可以使用任意溫和的固定油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。此外，n-3多不飽和脂肪酸可以應用於製備可注射製劑。

在用於製備無菌可注射溶液的無菌粉末的情況中，優選的製備方法是從上述其無菌過濾的溶液中真空乾燥和冷凍乾燥，得到活性成分+任意另外的期望的成分的粉末。例如，可以通過使用包衣層例如卵磷脂、通過維持分散液中所需的粒徑和通過使用表面活性劑維持溶液的適當流動性。

可注射的組合物的延長吸收可以通過在組合物中包括延遲吸收的物質例如單硬脂酸鹽和明膠或通過將組合物配製成延長吸收形式進行，例如儲庫藥劑、脂質體、聚合物微球、聚合物凝膠和植入物。

本申請中所述的本發明化合物的其它施用方法包括皮膚貼劑，其將藥物直接釋放入受試者皮膚。這類貼劑可以包含在任選緩衝的液體溶液中的溶於和/或分散於粘合劑或分散於聚合物中的本發明的化合物。

可以將所述化合物施用1次，但也可以施用多次。例如，可以將所述化合物每日施用1次至每6個月或更長時間施用1次。施用可以基於如下方案，例如每日3次，每日2次，每日1次，每2天1次，每3天1次，每周1次，每2周1次，每個月1次，每2個月1次，每3個月1次，和每6個月1次。

還可以將所述化合物通過微型泵連續施用。可以將所述化合物施用在患病的身體部位或距離患病的身體部位較遠的部位。可以將所述化合物施用1次、至少2次或至少一定時間期限，直到所述疾病得到治療、緩解或治癒。通常只要疾病存在，就施用所述化合物。將所述化合物典型地作為如上文所述的藥物組合物的組成部分施用。

本發明的組合物可以包括治療有效量或預防有效量的本發明的化合物。在製備該組合物的過程中，例如，可以通過考慮所期望的劑量體積和施用模式、待治療的病症的性質和嚴重性以及受試者的大小確定存在於組合物中的化合物的治療有效量。

用於將本發明藥物組合物施用於受試者的示例性的非限制性劑量範圍約為0.01mg/kg至約200mg/kg(以每千克(kg)受試者體重施用的以毫克(mg)計的式(A)的化合物表示)、約0.1mg/kg至約100mg/kg、約1.0mg/kg至約50mg/kg、約5.0mg/kg至約20mg/kg或約15mg/kg。就本發明的目的而言，人體受試者的平均體重約為70kg。還預期本申請中所述的中間至任意劑量的範圍例如約0.02mg/kg-199mg/kg為本發明的組成部分。例如，預期包括使用作為上限和/或下限的任意所述值的組合的數值範圍。

還可以調整劑量方案以便通過給受試者隨時間施用幾個分開的劑量以提供最佳的期望的響應(例如治療或預防響應)，或可以如治療情況的緊急程度所示將劑量按比例降低或增加。尤其有利的是配製易於施用和劑量均勻的劑型單位形式的胃腸外組合物。

本申請中所用的劑量單位形式是指適合作為單元劑量用於待治療的哺乳動物受試者的物理分散單元；每個單元包含經計算預定量的活性化合物以便與所需的藥用載體一起結合產生期望的治療作用。本發明劑量單位形式的規格根據如下條件指定並且直接依賴於它們：(a)所述化合物或部分的獨特特徵和所實現的特定治療或預防作用；以及(b)混合用於治療個體敏感性的這樣的抗體的領域中內在的限制。

可以將本發明的液體組合物製備成單位劑型。例如，每支小瓶中的單位劑量可以包含1-1000毫升(mls)的不同濃度的式(A)的化合物。在其它實施方案中，每支小瓶中的單位劑量可以包含約1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，7ml，8ml，9ml，10ml，15ml，20ml，30ml，40ml，50ml或100ml的不同濃度的式(A)的化合物。如果必要，可以通過向每支小瓶中添加無菌稀釋劑將這些製劑調整至期望的濃度。還可以將本發明的液體組合物製備成無菌袋或容器形式的單位劑型，其適合於連接靜脈內施用管線或導管。

通過將本發明的化合物與載體、稀釋劑或賦形劑混合製備另一種典型的製劑。適合的載體、稀釋劑和賦形劑是本領域技術人員眾所周知的且包括這樣的物質，例如碳水化合物、蠟、水溶性和/或水可溶脹的聚合物、親水性或疏水性物質、明膠、油、溶劑、水等。所用的具體載體、稀釋劑或賦形劑取決於施用本發明化合物的方式和目的。溶劑通常基於本領域技術人員視為安全(GRAS)施用於哺乳動物的溶劑進行選擇。通常，安全的溶劑是無毒性的水性溶劑，例如水和其它溶於水或與水易溶混的無毒性溶劑。適合的水性溶劑包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如PEG400、PEG300)等及其混合物。製劑還可以包括一種或多種緩衝劑、穩定劑、表面活性劑、溼潤劑、潤滑劑、乳化劑、助懸劑、防腐劑、抗氧化劑、遮光劑、助流劑、加工助劑、著色劑、甜味劑、芳香劑、矯味劑和其它已知的提供藥物(即本發明的化合物或其藥物組合物)的優美外觀或有助於製備藥物產品(即藥劑)的添加劑。

可以使用常規的溶解和混合方法製備製劑。例如，將散裝藥物物質(即本發明的化合物或該化合物的穩定形勢(例如與環糊精衍生物或其它已知配合劑的配合物))在上述賦形劑的一種或多種的存在下溶於適合的溶劑。將本發明的化合物典型地配製成藥物劑型，以便提供易於受控的藥物並且給患者提供美觀和易於操作的產品。

所述藥物組合物還包括式(I)的化合物的溶劑合物和水合物。術語「溶劑合物」是指由式(I)表示的化合物(包括其藥學上可接受的鹽)與一種或多種溶劑分子的分子配合物。這類溶劑分子是常用於製藥領域的那些，其對於接受者而言是無害的，例如水、乙醇、乙二醇等，術語「水合物」是指其中溶劑分子是水的配合物。溶劑合物和/水合物優選以結晶形式存在。其它的溶劑可以用作製備更期望的溶劑合物的中間溶劑合物，例如甲醇、甲基叔丁基醚、乙酸乙酯、乙酸甲酯、(S)-丙二醇、(R)-丙二醇、1,4-丁炔-二醇等。所述晶型還可以作為與其它無害小分子的配合物存在，例如L-苯丙氨酸、L-脯氨酸、L-焦穀氨酸等，為共晶或共晶物質的溶劑合物或水合物。溶劑合物、水合物和共晶化合物可以使用PCT公開號WO 08/002824(通過參考將該文獻併入本申請)中所述的方法或本領域技術人員眾所周知的其它方法製備。

可以以各種形式包裝應用的所述藥物組合物(或製劑)，這取決於施用所述藥物的方法。通常，用於分配的製品包括其中存放適合形式的藥物製劑的容器。這類容器是本領域技術人員眾所周知的且包括例如瓶子(塑料和玻璃)這樣的材料、小藥囊、安瓿、塑膠袋、金屬量筒等。所述容器還可以包括防幹擾裝置以便防止不慎接觸包裝內容物。此外，所述容器上貼有描述容器內含物的標籤。該標籤還可以包括適當的警告用語。

通過下列實施例舉例說明本發明的實施方案。然而，應當理解，本發明的實施方案不限於這些實施例的具體詳細描述，因為對本領域技術人員而言其變化形式是已知的或根據本申請公開的內容是顯而易見的。

實施例

除非另有具體說明，否則原料購自商業來源，例如Aldrich Chemicals Co.(Milwaukee，WI)、Lancaster Synthesis，Inc.(Windham，NH)、Acros Organics(Fairlawn，NJ)、Maybridge Chemical Company，Ltd.(Cornwall，England)、Tyger Scientific(Princeton，NJ)、AstraZeneca Pharmaceuticals(London，England)和Accela ChemBio(San Diego，CA)。

通用實驗方法

質子的NMR光譜使用Varian UnityTM400(購自Varian Inc.，Palo Alto，CA)在室溫用400MHz下記錄。以相對於作為內標的殘留溶劑的百萬分之份數(δ)表示化學位移。如下表示峰形：s，單峰；d，雙峰；dd，雙聯雙峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；bs或br.s.，寬單峰；2s，兩個單峰；br.d.，寬雙峰。在一些情況中，僅給出有代表性的1H NMR峰。使用BakerTM矽膠(40微米；J.T.Baker，Phillipsburg，NJ)或矽膠50(EM SciencesTM，Gibbstown，NJ)在玻璃柱或Flash 40BiotageTM柱(ISC，Inc.，Shelton，CT)上進行柱色譜法。使用BiotageTMSP純化系統或來自TeledyneTMIscoTM的進行MPLC(中壓液相色譜法)；使用在低氮氣壓力下的BiotageTMSNAP cartridge KPsil或Redisep Rf silica(來自TeledyneTMIscoTM)。除外另有注釋，否則全部反應均在氮氣惰性氣體氣氛中使用無水溶劑進行。此外，除外另有注釋，否則全部反應均在室溫(～23℃)下進行。當進行TLC(薄層色譜法)時，將Rf定義為化合物運行的距離與洗脫劑運行的距離之比。Rt(保留時間)。恆流氫化反應器：一種臺式獨立式氫化反應器，其組合了連續流動微量化學與內生請求型氫產生和一次性的催化劑柱系統。

LC/MS TOF(ESI)：全部數據使用Agilent 1100 LC採集，其帶有MSD TOF(Agilent型號G1969A)質譜檢測器，使用電噴霧電離源運行。LC儀器包括具有上限壓力為400巴的二元泵(Agilent型號G1312A)，其連接至使用樣品遞送的外部要求的自動採樣器(Agilent型號G1313A)。柱隔室(Agilent型號G1316A)連接至二極體陣列(Agilent型號G1315A)。使用Agilent MassHunter TOF/Q-TOF B.02(B11285)Patches 1.2.3進行儀器獲取和數據處理。洗脫條件：柱：不使用柱。流量注射：注射體積：1.0微升；流速：0.5毫升/分鐘。運行時間：1.0min；溶劑：甲醇(0.1％甲酸和0.05％甲酸銨)。TOF條件：電離源：正模式的電噴霧電離源；氣體溫度：325C；乾燥氣體：6L/min；霧化器：50psg；VCap：3500V；質量範圍110-100m/z；獲取速率：0.99光譜/s：獲取時間；1012.8ms/光譜。全部溶劑具有HPLC Chromasolv等級，來自Sigma Aldrich(St.Louis，Missouri)。大部分化學品和緩衝液購自Sigma Aldrich，純度全部為97％或更高。

方法C 1.5分鐘運行LRMS(低解析度質譜法)：Waters Acqity HSS T3，2.1mmx50mm，C18，1.7μm；流動相：A：0.1％甲酸的水溶液(v/v)；流動相B：0.1％甲酸的乙腈溶液(v/v)；流速-1.25ml/分鐘；起始條件：A-95％：B-5％；保持在起始0.0-0.1分鐘；線性坡度電壓至A-5％：B-95％，歷時0.1-1.0分鐘；保持在A-5％：B-95％1.0-1.1分鐘；返回至起始條件1.1-1.5分鐘。

方法C 3.0分鐘運行LRMS(低解析度質譜法)：Waters Acqity HSS T3，2.1mmx50mm，C18，1.7μm；流動相：A：0.1％甲酸的水溶液(v/v)；流動相B：0.1％甲酸的乙腈溶液(v/v)；流速-1.25ml/分鐘；起始條件：A-95％：B-5％；保持在起始0.0-0.1分鐘；線性坡度電壓至A-5％：B-95％，歷時0.1-2.6分鐘；保持在A-5％：B-95％2.6-2.95分鐘；返回至起始條件2.95-3.0分鐘。

方法

((2R,3S,4R,5R,6R)-5-疊氮基-6-甲氧基-3,4-雙((三甲基甲矽烷基)氧基)四氫-2H-吡喃-2-基)甲醇(I-b)

將(2R,3R,4R,5R,6R)-5-疊氮基-2-(羥基甲基)-6-甲氧基四氫-2H-吡喃-3,4-二醇(I-a)(5g，23mmol)溶於無水吡啶(100mL)，加入三甲基甲矽烷基氯(17.5ml，139mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌12小時，然後蒸發吡啶。將殘餘物溶於乙酸乙酯/水。用乙酸乙酯將水相萃取1次，用水、飽和氯化鈉水溶液洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，濃縮，得到9.9g(98％收率)相應的完全甲矽烷基化的化合物，為黃色油狀物。不經任何進一步純化將該物質用於下一步。向冷卻至0攝氏度的上述完全甲矽烷基化的化合物(9.71g，22.3mmol)在無水甲醇(45mL)中的溶液中加入9.06mL碳酸鉀的甲醇溶液(0.032M)。將該反應混合物在0℃攪拌1小時，然後通過添加17微升乙酸中和。蒸發溶劑，將殘餘物溶於乙酸乙酯。加入水，用乙酸乙酯萃取水相2次。用鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，濃縮。通過矽膠急驟色譜法純化粗物質(30％乙酸乙酯/己烷)，得到6.77g(84％)(I-b)，為油狀物。[α]D7(c 1，氯仿)；1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 0.14(s，9H)，0.20(s，9H)，1.80(br.s.，1H)，3.36-3.42(m，1H)，3.45(dd，J＝7.3，4.6Hz，1H)，3.54(dd，J＝10.0，8.0Hz，1H)，3.59(s，3H)，3.65(dd，J＝11.3，4.7Hz，1H)，3.77(d，J＝2.7Hz，1H)，3.87(dd，J＝11.2，7.3Hz，1H)，4.14(d，J＝8.0Hz，1H)；13C NMR(100MHz，氯仿-d)δppm 0.27(3C)，0.6(3C)，57.3，62.6，64.0，71.1，73.7，75.2，103.4；HRMS(ESI)計算值C13H29N3O5Si2(m/z)[M+Na]+386.1538，測定值386.1539.

(3R,4R,5R,6R)-5-疊氮基-2,2-雙(羥基甲基)-6-甲氧基四氫-2H-吡喃-3,4-二醇(I-c)

將(I-b)(7.73g，21.3mmol)溶於二氯甲烷(70mL)。加入二甲亞碸(10.6ml，150mmol)和三乙胺(9ml，60mmol)，將該反應混合物冷卻至0攝氏度。加入三氧化硫吡啶複合物(10.2g，64mmol)，將該混合物在0攝氏度攪拌1小時，然後溫熱至室溫，歷時30分鐘。用飽和氯化鈉溶液使反應停止，用二氯甲烷稀釋。用二氯甲烷將水相萃取3次，用飽和氯化鈉水溶液洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，濃縮，得到相應的醛。將該醛溶於無水乙醇(106mL)和低聚甲醛粉(40.3g，425mmol)，然後加入乙醇鈉的21％wt乙醇溶液(16ml，42.5mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌12小時，然後蒸發乙醇。向粗混合物中加入甲醇，過濾固體，用甲醇充分衝洗。向包含期望的產物的濾液中加入矽膠，蒸發甲醇。高度真空乾燥得到的幹負載物，上柱。通過矽膠急驟色譜法純化粗物質(10％甲醇/二氯甲烷)，得到3.03g(I-c)，為無色油狀物(57％，歷時2步)。[α]D-20(c 1.25，甲醇)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 3.46(dd，J＝10.2，8.1Hz，1H)，3.51(s，3H)，3.64-3.80(m，5H)，3.80-3.83(m，1H)，4.54(d，J＝8.0Hz，1H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 57.2，61.2，63.6，65.9，69.9，71.2，80.9，101.2；HRMS(ESI)計算值C8H15N3O6(m/z)[M+Na]+272.0853，測定值272.0856。

N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-4-(羥基甲基)-2,2-二甲基六氫-4,7-環氧[1,3]間二氧雜環戊烯[4,5-d]氧雜環庚三烯-8-基)乙醯胺(I-e-1)

向化合物(3)(230mg，0.986mmol)在6.6mL二甲基甲醯胺中的溶液中加入2,2-二甲氧基丙烷(0.8ml，6mmol)，然後加入(+/-)-樟腦-10-磺酸(101mg，0.435mmol)。將該反應混合物在70攝氏度攪拌24小時，冷卻至室溫，然後加入甲醇(1.2mL)。將該反應混合物在室溫攪拌30分鐘，然後用三乙胺(56微升)中和。蒸發溶劑，將殘餘物與甲苯一起共蒸發3次。通過矽膠急驟色譜法純化粗物質(15/1乙酸乙酯/甲醇)，得到化合物(I-e-1)，為白色固體(246mg，91％收率)。m.p.：164.7-166.0℃；[α]D147(c 1，甲醇)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.34(s，3H)，1.48(s，3H)，1.98(s，3H)，3.77(d，J＝7.8Hz，1H)，3.83(d，J＝7.8Hz，1H)，3.86(d，J＝11.6Hz，1H)，3.90(d，J＝11.3Hz，1H)，3.91-3.94(m，1H)，4.14-4.19(m，1H)，4.29(d，J＝6.0Hz，1H)，5.23(d，J＝2.0Hz，1H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 22.7，26.9，28.5，56.8，61.9，70.2，76.1，76.6，83.0，102.6，112.5，173.6；HRMS(ESI)計算值C12H19NO6(m/z)[M+H]+274.1285，測定值274.1274。

(1S,2R,3R,4R,5S)-4-疊氮基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(1)

將四-醇(I-c)(3g，12mmol)溶於水(40mL)，加入濃硫酸(6.7mL)。將該反應混合物在100攝氏度攪拌40小時，冷卻至室溫，然後通過添加濃氫氧化銨中和。蒸發水，向得到的混合物中加入甲醇。過濾固體，用甲醇充分衝洗。向包含期望的產物的濾液中加入矽膠，蒸發甲醇。高度真空乾燥得到的幹負載物，上柱。通過矽膠急驟色譜法純化粗物質(10％甲醇/二氯甲烷)，得到2.2g(84％)(1)，為無色油狀物。[α]D160(c 1.1，甲醇)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 3.35(dd，J＝9.2，1.6Hz，1H)，3.70(d，J＝8.2Hz，1H)，3.76(d，J＝8.0Hz，1H)，3.80(d，J＝11.3Hz，1H)，3.83-3.89(m，2H)，3.90(d，J＝11.5Hz，1H)，5.32(d，J＝1.4Hz，1H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 61.9，66.1，69.5，69.6，71.0，85.3，102.7；HRMS(ESI)計算值C7H11N3O5(m/z)[M+Na]+240.0591，測定值240.0596。

(1R,2R,3R,4R,5S)-4-乙醯氨基-1-(乙醯氧基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二基二乙酸酯(2)

在圓底燒瓶中，將化合物(1)(1.93g，8.9mmol)溶於乙醇(45mL)，用氮氣吹掃該體系。加入Lindlar催化劑(1.89g，0.9mmol)，用氮氣然後用氫氣吹掃該體系。將該反應混合物在室溫在氫氣氣氛中(使用氣囊)攪拌24小時。使用尼龍膜過濾鈀，用甲醇、然後用水充分衝洗。蒸發溶劑，將殘餘物溶於水，凍幹。然後將得到的粗物質溶於吡啶(40mL)，加入乙酐(9ml，100mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌48小時，蒸發吡啶。將殘餘物溶於乙酸乙酯，用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌。用乙酸乙酯將水相萃取2次，然後用飽和氯化鈉水溶液洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，蒸發。通過矽膠急驟色譜法純化粗物質(3％甲醇/二氯甲烷)，得到(2)(3.19g，定量)。[α]D75(c 1，氯仿)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.95(s，3H)，1.95(s，3H)，2.04(s，3H)，2.15(s，3H)，3.75(d，J＝8.6Hz，1H)，4.06(d，J＝8.6Hz，1H)，4.13(d，J＝11.6Hz，1H)，4.20(d，J＝10.6Hz，1H)，4.46(d，J＝11.3Hz，1H)，5.13(dd，J＝10.4，4.4Hz，1H)，5.35(d，J＝1.0Hz，1H)，5.38(d，J＝4.3Hz，1H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 20.6，20.7(2C)，22.6，53.3，63.0，68.9，69.1，70.3，82.6，103.0，171.8，171.9，172.1，173.8；HRMS(ESI)計算值C15H21NO9(m/z)[M+H]+360.1289，測定值360.1290。

N-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)乙醯胺(3)

將化合物(2)(3.19g，8.88mmol)溶於四氫呋喃(50mL)，加入甲醇鈉的0.5M甲醇溶液(100ml，50mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌12小時，然後通過添加H+AmberlyteTM IR-120樹脂中和。過濾出樹脂，蒸發溶劑，得到1.71g(3)，為白色固體(83％)。m.p.：175.7-176.1℃；[α]D164(c 1，甲醇)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.99(s，3H)，3.68(d，J＝8.1Hz，1H)，3.70-3.73(m，1H)，3.75(d，J＝7.8Hz，1H)，3.81(d，J＝11.3Hz，1H)，3.87(d，J＝4.3Hz，1H)，3.92(d，J＝11.3Hz，1H)，3.95(dd，J＝9.9，1.1Hz，1H)，5.22(d，J＝1.3Hz，1H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 22.7，56.4，62.1，69.2，69.3，70.6，85.1，102.8，174.1；HRMS(ESI)計算值C9H15NO6(m/z)[M+H]+234.0972，測定值234.0974。

(4-((2-((1-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-乙醯氨基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)乙基)氨基)-4-氧代丁基)氨基甲酸苄酯(4)、(4-((1,3-雙((1-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-乙醯氨基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)丙-2-基)氨基)-4-氧代丁基)氨基甲酸苄酯(5)、(4-((1,3-雙((1-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-乙醯氨基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)-2-(((1-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-乙醯氨基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)甲基)丙-2-基)氨基)-4-氧代丁基)氨基甲酸苄酯(6)

在微波小瓶中，將化合物(I-e-1)(50mg，0.18mmol)溶於1mL二氯甲烷。加入12.5M氫氧化鈉水溶液(0.5mL)，然後加入15-冠-5-醚(5微升，0.02mmol)和1-疊氮基-2-(2-(2-(2-碘乙氧基)乙氧基)乙氧基)乙烷(J.Am.Chem.Soc.132，1523(2010)中所述)(301mg，0.915mmol)。將該反應混合物在55℃劇烈攪拌24小時。取出有機相，用硫酸鎂乾燥，過濾，濃縮。通過矽膠急驟色譜法純化粗物質(5％甲醇/乙酸乙酯)，得到化合物(I-e-2)，為油狀物(52mg，60％收率)。[α]D74(c 1，氯仿)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.34(s，3H)，1.49(s，3H)，1.98(s，3H)，3.37(t，J＝4.9Hz，2H)，3.62-3.71(m，14H)，3.75-3.80(m，2H)，3.86(d，J＝8.1Hz，1H)3.90-3.97(m，2H)，4.12-4.19(m，1H)，4.31(d，J＝5.8Hz，1H)，5.23(d，J＝2.0Hz，1H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 22.7，26.9，28.5，51.9，56.7，70.9，71.1，71.3，71.6，71.7，71.8，71.81，71.82，72.7，76.1，76.5，82.1，102.4，112.4，173.6；HRMS(ESI)計算值C20H34N4O9(m/z)[M+H]+475.2399，測定值475.2386。

中間體(I-f-1)是已知的且描述在WO06120545中

可以如下合成中間體(I-f-2)：在室溫向Boc-絲氨醇(1000mg，5.1mmol)在四氫呋喃(21mL)中的溶液中加入碘化四丁基銨(287mg，0.76mmol)、碘化鈉(153mg，1.02mmol)和炔丙基溴(1.8ml，16mmol，80％的甲苯溶液)。逐步加入氫氧化鉀(569mg，10.1mmol)，歷時30分鐘，然後將該混合物在室溫攪拌16小時。用乙酸乙酯和水稀釋該反應混合物。用乙酸乙酯將水相萃取1次。用硫酸鎂乾燥合併的有機層，過濾，濃縮。通過矽膠急驟色譜法純化粗物質(30％乙酸乙酯/己烷)，得到化合物(I-f-2)，為油狀物(530mg，39％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d/TMS)δppm 1.44(s，9H)，2.44(t，J＝2.4Hz，2H)，3.53-3.67(m，4H)，3.92(br.s.，1H)，4.16(d，J＝2.5Hz，4H)，4.90(br.s.，1H)；13C NMR(100MHz，氯仿-d/TMS)δppm 28.4(3C)，49.5，58.5(2C)，68.6(2C)，74.6(2C)，77.2，79.5(2C)，155.4；HRMS(ESI)計算值C14H21NO4(m/z)[M+H]+268.1543，測定值268.1536。

中間體(I-f-3)是已知的且描述在R.Roy等人J.Org.Chem.73，5602(2008)中。

將化合物(I-f-1)、(I-f-2)或(I-f-3)(1當量)溶於二氯甲烷(0.2M)，加入氯化氫4M的二烷溶液(5-10當量)。將該反應混合物在室溫攪拌2-3小時，然後蒸發溶劑。將殘餘物高度真空乾燥1小時。將得到的中間體不經任何進一步純化用於下一步。將上述得到的中間體(1當量)和4-(((苄氧基)羰基)氨基)丁酸(1當量)溶於二烷和二甲基甲醯胺(0.09M，3：1)的混合物。加入(苯並三唑-1-基氧基)三吡咯烷磷鎓六氟磷酸鹽(1.2當量)，然後加入N,N-二異丙基乙胺(5當量)。將該反應混合物在室溫攪拌16小時。加入二氯甲烷和水，用二氯甲烷萃取水相2次。用硫酸鎂乾燥合併的有機層，過濾，濃縮。將粗物質溶於少量甲苯，上柱，通過矽膠急驟色譜法純化。

中間體(I-g-1)：純化條件：100％乙酸乙酯，定量，油狀物。1H NMR(400MHz，氯仿-d/TMS)δppm 1.80-1.91(m，2H)，2.24(t，J＝7.1Hz，2H)，2.46(t，J＝2.3Hz，1H)，3.22-3.31(m，2H)，3.43-3.51(m，2H)，3.56-3.64(m，2H)，4.16(d，J＝2.3Hz，2H)，5.07(br.s.，1H)，5.10(s，2H)，6.09(br.s.，1H)，7.28-7.42(m，5H)；13C NMR(100MHz，氯仿-d/TMS)δppm 25.9，33.7，39.1，40.5，58.3，66.7，68.7，74.8，79.4，128.1，128.5(4C)，136.6，156.7，172.5；HRMS(ESI)計算值C17H22N2O4(m/z)[M+H]+319.1652，測定值319.1646。

中間體(I-g-2)：純化條件：70％乙酸乙酯/己烷，65mg，油狀物(76％收率)，油狀物。1H NMR(400MHz，氯仿-d/TMS)δppm 1.79-1.91(m，2H)，2.24(t，J＝7.1Hz，2H)，2.44(t，J＝2.4Hz，2H)，3.20-3.29(m，2H)，3.54-3.69(m，4H)，4.16(d，J＝1.5Hz，4H)，4.22-4.33(m，1H)，5.10(br.s，3H)，6.04(d，J＝7.8Hz，1H)，7.28-7.42(m，5H)；13C NMR(100MHz，氯仿-d/TMS)δppm 25.8，33.7，40.4，48.2，58.4(2C)，66.6，68.3(2C)，74.7(2C)，79.4(2C)，128.1，128.5(4C)，136.6，156.6，172.2；HRMS(ESI)計算值C21H26N2O5(m/z)[M+H]+387.1914，測定值387.1904。

中間體(I-g-3)：純化條件：70％乙酸乙酯/己烷，42mg，油狀物(60％收率)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.76-1.88(m，2H)，2.21(t，J＝7.1Hz，2H)，2.44(t，J＝2.3Hz，3H)，3.18-3.30(m，2H)，3.84(s，6H)，4.14(d，J＝2.3Hz，6H)，5.10(s，2H)，5.12(br.s.，1H)，5.89(br.s.，1H)，7.28-7.40(m，5H)；13C NMR(100MHz，氯仿-d/TMS)δppm25.7，34.3，40.3，58.6(3C)，59.2，66.6，68.5(3C)，74.6(3C)，79.5(3C)，128.1，128.5(4C)，136.6，156.6，172.6；HRMS(ESI)計算值C25H30N2O6(m/z)[M+H]+455.2177，測定值455.2167。

中間體(I-h-1)：

將三(3-羥基丙基三唑基甲基)胺(THPTA；參見M.G.Finn等人Angewandte Chemie International Edition 48，9879(2009))(2mg，0.005mmol)和硫酸銅(1mg，0.004mmol)溶於水(50微升)，然後加到(I-e-2)(42mg，0.089mmol)和炔(I-g-1)(40mg，0.125mmol)在甲醇(0.9mL)中的溶液中。然後加入溶於水(30微升)的抗壞血酸鈉(1.8mg，0.009mmol)，將該反應混合物在室溫攪拌24小時。蒸發溶劑，通過矽膠急驟色譜法純化粗物質(5％-10％甲醇的二氯甲烷溶液)，得到所期望的化合物(I-h-1)，為油狀物(54mg，76％收率)；[α]D48.2(c 0.54，甲醇)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.33(s，3H)，1.48(s，3H)，1.70-1.83(m，2H)，1.98(s，3H)，2.21(t，J＝7.4Hz，2H)，3.13(t，J＝6.9Hz，2H)，3.37(t，J＝5.4Hz，2H)，3.51-3.70(m，14H)，3.71-3.95(m，7H)，4.15(t，J＝6.5Hz，1H)，4.29(d，J＝5.8Hz，1H)，4.56(t，J＝5.0Hz，2H)，4.60(s，2H)，5.06(s，2H)，5.22(d，J＝1.8Hz，1H)，7.25-7.38(m，5H)，8.01(s，1H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 22.7，27.0，27.4，28.5，34.4，40.5，41.4，51.6，56.7，62.4，64.9，67.5，70.0，70.5，70.8，71.1，71.5，71.6，71.65，71.7，71.73，72.6，73.8，76.2，76.5，82.1，102.4，112.4，126.1，129.0，129.1，129.6，138.6，146.1，159.0，173.6，175.7；HRMS(ESI)計算值C37H56N6O13(m/z)[M+H]+793.3978，測定值793.3959。

中間體(I-h-2)

將THPTA(22mg，0.051mmol)和硫酸銅(2.5mg，0.01mmol)溶於水(70微升)，然後加到(I-e-2)(48mg，0.1mmol)和炔(I-g-2)(20mg，0.051mmol)在甲醇(1mL)中的溶液中。然後加入溶於水(30微升)的抗壞血酸鈉(4mg，0.02mmol)，將該反應混合物在室溫攪拌72小時。蒸發溶劑，將殘餘物溶於二氯甲烷和飽和氯化銨水溶液。用二氯甲烷將水相萃取3次。用硫酸鎂乾燥合併的有機層，過濾，濃縮。將粗物質不經任何進一步純化用於下一步。

中間體(I-h-3)

將THPTA(34mg，0.079mmol)和硫酸銅(4mg，0.016mmol)溶於水(200微升)，然後加到(I-e-2)(50mg，0.1mmol)和炔(I-g-3)(24mg，0.053mmol)在甲醇(1mL)中的溶液中。然後加入溶於水(30微升)的抗壞血酸鈉(6.5mg，0.032mmol)，將該反應混合物在室溫攪拌72小時。蒸發溶劑，將殘餘物溶於二氯甲烷和飽和氯化銨水溶液。用二氯甲烷將水相萃取3次。用硫酸鎂乾燥合併的有機層，過濾，濃縮。將粗物質不經任何進一步純化用於下一步。

用於丙酮化合物除去的通用方法：

將化合物(I-h-1)、(I-h-2)或(I-h-3)(0.030-0.068mmol)溶於乙酸、甲醇和水的混合物(分別為1.6-1.8ml，0.5ml，0.5mL)，在70℃攪拌24小時。蒸發溶劑，將殘餘物與甲苯一起共蒸發2次。通過矽膠急驟色譜法純化粗物質。

實施例(4)：

純化條件：二氯甲烷中的10％甲醇，43.3mg，油狀物(85％收率)。[α]D45(c 1，甲醇)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.72-1.83(m，2H)，1.99(s，3H)，2.22(t，J＝7.4Hz，2H)，3.13(t，J＝6.8Hz，2H)，3.37(t，J＝5.4Hz，2H)，3.52-3.79(m，20H)，3.85-4.00(m，3H)，4.57(t，J＝5.0Hz，2H)，4.61(s，2H)，5.07(s，2H)，5.21(s，1H)，7.24-7.41(m，5H)，8.02(s，1H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm22.8，27.4，34.4，40.4，41.4，51.6，56.4，64.9，67.5，69.0，70.0，70.1，70.4，70.5，71.4，71.5(2C)，71.6，71.65，71.7，72.5，84.3，102.6，126.0，129.0(2C)，129.1，129.6(2C)，138.6，145.8，159.0，174.0，175.8；HRMS(ESI)計算值C34H52N6O13(m/z)[M+H]+753.3665，測定值753.3679。

實施例(5)：

純化條件：二氯甲烷中的20％甲醇，25mg，油狀物(20％收率，歷時2步)。[α]D56(c 1.25，甲醇)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm1.72-1.81(m，2H)，1.99(s，6H)，2.23(t，J＝7.5Hz，2H)，3.13(t，J＝6.9Hz，2H)，3.50-3.80(m，36H)，3.85-3.91(m，6H)，3.92-4.00(m，4H)，4.13-4.25(m，1H)，4.52-4.63(m，8H)，5.07(s，2H)，5.21(d，J＝1.3Hz，2H)，7.23-7.40(m，5H)，8.01(s，2H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 22.6(2C)，27.2，34.2，41.2，50.2，51.4(2C)，56.2(2C)，65.0(2C)，67.3，68.8(2C)，69.9(2C)，70.0(2C)，70.2(2C)，70.3(2C)，71.2(2C)，71.3(4C)，71.4(2C)，71.5(2C)，71.52(2C)，72.3(2C)，84.1(2C)，102.4(2C)，125.8(2C)，128.8(2C)，128.9，129.4(2C)，138.4，145.6(2C)，158.8，173.8(2C)，175.3；HRMS(ESI)計算值C55H86N10O23(m/z)[M+H]+1255.5940，測定值1255.5925。

實施例(6)：

純化條件：二氯甲烷中的20％甲醇，31mg，油狀物(18％收率，歷時2步)。[α]D53(c 1，甲醇)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.65-1.78(m，2H)，1.98(s，9H)，2.19(t，J＝7.3Hz，2H)，3.11(t，J＝6.8Hz，2H)，3.51-3.80(m，54H)，3.86-3.91(m，9H)，3.91-3.99(m，6H)，4.51-4.63(m，12H)，5.06(s，2H)，5.21(d，J＝1.3Hz，3H)，7.24-7.40(m，5H)，7.98(s，3H)；HRMS(ESI)計算值C76H120N14O33(m/z)[M+2H]+/2 879.4144，測定值879.4148。

N-(2-((1-(1-((1S,2R,3R,4R,5S)-4-乙醯氨基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基)乙基)-4-氨基丁醯胺(7)，4-氨基-N-{1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]丙-2-基}丁醯胺(8)，4-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)丁醯胺(9)

在圓底燒瓶中，將化合物(4)、(5)或(6)(1當量)溶於甲醇(0.01M)，用氮氣吹掃該燒瓶。加入披鈀碳(10％、0.7當量)，用氮氣然後用氫氣吹掃該燒瓶。將該反應混合物在氫氣氣氛中(使用充滿氫氣的氣囊)室溫攪拌12-24小時。使用0.45微米PTFE Acrodisc Cr過濾出鈀，用甲醇衝洗1次。蒸發溶劑。

實施例(7)：

25.5mg，油狀物，76％收率；[α]D57.6(c 1.25，甲醇)；1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.70-1.81(m，2H)，1.99(s，3H)，2.24(t，J＝7.4Hz，2H)，2.67(t，J＝6.8Hz，2H)，3.36-3.41(m，2H)，3.51-3.80(m，19H)，3.84-4.01(m，4H)，4.59(t，J＝5.2Hz，2H)，4.61(s，2H)，5.21(s，1H)，8.03(s，1H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 22.8，29.6，34.5，40.4，42.0，51.6，56.4，64.9，69.0，70.0，70.1，70.5，70.6，71.4，71.5(2C)，71.6，71.66，71.7，72.5，84.3，102.6，126.0，145.8，174.1，175.9；HRMS(ESI)計算值C26H46N6O11(m/z)[M+H]+619.3297，測定值619.3278。

實施例(8)：

將粗物質溶於0.5mL甲醇/水(50：50)，注射在HPLC柱上。使用Waters XBridge BEH C18 OBD Prep柱，5微米，19mm X 100mm(Waters，部件編號186002978)進行製備型高效液相色譜法(HPLC)，用17毫升/分鐘流速的線性坡度洗脫，溶劑梯度：乙腈/水/三氟乙酸(2：98：0.1)～(22：78：0.1)，40分鐘。通過分析型LCMS分析採集的級分，收集鑑定為具有足夠純度的25.7-27.3分鐘時的級分，且蒸發，得到10.7mg(8)，為油狀物，49％收率；[α]D56(c 1，甲醇)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δppm 1.86-1.95(m，2H)，1.99(s，6H)，2.37(t，J＝7.0Hz，2H)，2.96(t，J＝7.4Hz，2H)，3.50-3.80(m，36H)，3.84-4.00(m，10H)，4.17-4.26(m，1H)，4.57-4.62(m，8H)，5.21(s，2H)，8.03(s，2H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 22.8(2C)，29.2，34.5，41.8，50.4，51.6(2C)，56.4(2C)，65.1(2C)，69.0(2C)，70.1(2C)，70.3(2C)，70.5(2C)，70.6(2C)，71.4(2C)，71.5(4C)，71.6(2C)，7.67，(2C)，71.7(2C)，72.5(2C)，84.3(2C)，102.6(2C)，126.1(2C)，145.8(2C)，174.1(2C)，175.6；HRMS(ESI)計算值C47H80N10O21(m/z)[M+H]+1121.5572，測定值1121.5558。

實施例(9)：

將粗物質溶於0.5mL甲醇/水(50：50)，注射在HPLC柱上。使用Waters XBridge BEH C18 OBD Prep柱，5微米，19mm X 100mm(Waters，部件編號186002978)進行製備型高效液相色譜法(HPLC)，用17毫升/分鐘流速的線性坡度洗脫，溶劑梯度：乙腈/水/三氟乙酸(2：98：0.1)～(22：78：0.1)，40分鐘。通過分析型LCMS分析採集的級分，收集鑑定為具有足夠純度的30.3-32.0分鐘時的級分，且蒸發，得到15mg(9)，為油狀物，63％收率；[α]D59.1(c 1.1，甲醇)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δppm 1.84-1.92(m，2H)，2.00(s，9H)，2.31-2.38(m，2H)，2.97(t，J＝7.3Hz，2H)，3.54-3.80(m，54H)，3.86-3.93(m，9H)，3.93-4.00(m，6H)，4.57(s，6H)，4.60(t，J＝4.9Hz，6H)，5.22(s，3H)，8.02(s，3H)；HRMS(ESI)計算值C68H114N14O31(m/z)[M+H]+1623.7847，測定值1623.7803。

實施例(10)、(11)和(12)；Alexa647綴合物

Alexa647羧酸琥珀醯亞胺基酯來自Invitrogen(目錄號A-20106)。Invitrogen報導分子量為～1250。基於來自LCMS的Alexa Fluor 647羧酸琥珀醯亞胺基酯的955.07的[M+H]+測定值估計Alexa647標記的化合物分子量。λmax 650的消光係數是～270000±20000，其因批次的不同而改變。

用於HPLC純化的通用方法：

使用Waters XBridge BEH C18 OBD Prep柱，5微米，19mm X 100mm(Waters，部件編號186002978)進行製備型高效液相色譜法(HPLC)，用17毫升/分鐘流速的線性坡度洗脫，溶劑梯度：乙腈/水/三氟乙酸(2：98：0.1)～(22：78：0.1)，40分鐘。通過分析型LCMS分析採集的級分，收集鑑定為具有足夠純度的級分，且將其蒸發。

實施例(10)：

向化合物(7)(3.0mg，4.8微摩爾)在二甲亞碸(200微升)中的溶液中加入Alexa647羧酸琥珀醯亞胺基酯(5.0mg，4微摩爾)和N,N-二異丙基乙胺(10微升，10當量)。將該反應混合物在室溫振搖1小時，然後直接通過製備型HPLC純化。通過分析型LCMS分析採集的級分，收集鑑定為具有足夠純度的級分(Rt＝22.7-24分鐘)。得到3.2mg(10)(55％收率)。等分該溶液，用真空離心機蒸發，將產物儲存在4℃。MS(ESI)計算值(m/z)[M+H]+～1456，測定值1456.82。

實施例(11)：

向化合物(8)(6.0mg，5微摩爾)在二甲亞碸(200微升)中的溶液中加入Alexa647羧酸琥珀醯亞胺基酯(5.0mg，4微摩爾)和N,N-二異丙基乙胺(10微升，10當量)。將該反應混合物在室溫振搖1小時，然後直接通過製備型HPLC純化。通過分析型LCMS分析採集的級分，收集鑑定為具有足夠純度的級分(Rt＝25.3-26.7分鐘)。得到4.8mg(11)(62％收率)。等分該溶液，用真空離心機蒸發，將產物儲存在4℃。MS(ESI)計算值(m/z)[M+H]+～1958，測定值1958.74

實施例(12)：

向化合物(9)(9.8mg，6微摩爾)在二甲亞碸(200微升)中的溶液中加入Alexa647羧酸琥珀醯亞胺基酯(5.0mg，4.8微摩爾)和N,N-二異丙基乙胺(10微升，10當量)。將該反應混合物在室溫振搖1小時，然後直接通過製備型HPLC純化。通過分析型LCMS分析採集的級分，收集鑑定為具有足夠純度的級分(Rt＝27.7分鐘)。得到5.2mg(12)(52％收率)。等分該溶液，用真空離心機蒸發，將產物儲存在4℃。MS(ESI)計算值(m/z)[M+H]+～2460，測定值2461.18。

4-氨基-N-[1,31-雙(1-{[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]甲基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2,6,10,14,18,22,26,30-八氧雜三十一烷-16-基]丁醯胺(13)和4-氨基-N-{1,31-雙(1-{[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]甲基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)-16-[15-(1-{[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]甲基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2,6,10,14-四氧雜十五烷-1-基]-2,6,10,14,18,22,26,30-八氧雜三十一烷-16-基}丁醯胺(14)

將化合物(I-e-1)(247mg，0.904mmol)溶於二氯甲烷(15mL)中並添加吡啶(1.46ml，18.1mmol)。在-20℃冷卻該反應混合物，滴加在二氯甲烷(0.6mL)中的三氟甲磺酸酐(0.23ml，1.4mmol)，攪拌該混合物，同時溫熱至0攝氏度，歷時50分鐘。用二氯甲烷稀釋該反應混合物，用1M氯化氫水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和氯化鈉水溶液洗滌。用硫酸鎂乾燥有機相，過濾，濃縮。將粗物質不經進一步純化用於下一步。將疊氮化鈉(270mg，4.1mmol)加到上述三氟甲磺酸酯在二甲基甲醯胺(4.1mL)中的溶液中，將該反應混合物在60℃攪拌16小時。蒸發溶劑，通過矽膠急驟色譜法純化粗物質(15/1乙酸乙酯/甲醇)，得到所期望的化合物(I-e-3)，為黃色油狀物(227mg，92％收率)。[α]D127(c1，甲醇)；1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 1.34(s，3H)，1.53(s，3H)，2.00(s，3H)，3.67(d，J＝12.7Hz，1H)，3.72(d，J＝7.8Hz，1H)，3.74(d，J＝7.8Hz，1H)，3.75(d，J＝12.7Hz，1H)，4.02-4.10(m，2H)，4.11(d，J＝5.9Hz，1H)，5.35(d，J＝2.4Hz，1H)，5.95(d，J＝8.8Hz，1H)；13C NMR(125MHz，氯仿-d)δppm 23.2，26.2，27.7，51.0，54.2，69.3，74.8，76.1，80.6，101.2，111.6，170.1；HRMS(ESI)計算值C12H18N4O5(m/z)[M+H]+299.1350，測定值299.1344。

化合物(I-j-2)和(I-j-3)可以分別以炔丙基溴、(I-i-2)(可商購自Dalton Pharma；DC-001760)和(I-i-3)(B.Ernst等人在Bioorganic &Medicinal Chemistry，16，5216(2008)中所述)作為原料，按照用於形成化合物(I-f-2)所述的相同的方法製備。

化合物(I-j-2)：純化條件：20％乙酸乙酯/己烷，85mg，油狀物(8％收率)；1H NMR(400MHz，氯仿-d/TMS)δppm 1.77-1.90(m，14H)，2.23(t，J＝7.1Hz，2H)，2.43(t，J＝2.3Hz，2H)，3.20-3.29(m，2H)，3.39-3.55(m，24H)，3.60(t，J＝6.3Hz，4H)，4.13(d，J＝2.5Hz，4H)，4.15-4.24(m，1H)，5.09(s，2H)，5.16(br.s.，1H)，6.05(d，J＝8.1Hz，1H)，7.28-7.41(m，5H)；13C NMR(100MHz，氯仿-d/TMS)δppm25.8，29.8(2C)，29.9(2C)，30.0(2C)，33.7，40.4，48.5，58.1(2C)，66.6，67.2(2C)，67.6(2C)，67.7(2C)，67.8(2C)，67.9(2C)，68.3(2C)，69.0(2C)，74.2(2C)，79.9(2C)，128.1，128.5(4C)，136.6，156.6，172.1；HRMS(ESI)計算值C39H62N2O11(m/z)[M+H]+735.4426，測定值735.4424.

化合物(I-j-3)：純化條件：85％乙酸乙酯/己烷，32.6mg，油狀物，(71％收率)；1H NMR(400MHz，氯仿-d/TMS)δppm 1.75-1.90(m，20H)，2.18(t，J＝6.9Hz，2H)，2.43(t，J＝2.4Hz，3H)，3.23(q，J＝6.3Hz，2H)，3.40-3.53(m，30H)，3.59(t，J＝6.3Hz，6H)，3.67(s，6H)，4.13(d，J＝2.3Hz，6H)，5.08(s，2H)，5.27(br.s.，1H)，5.85(s，1H)，7.27-7.40(m，5H)；13C NMR(100MHz，氯仿-d/TMS)δppm 25.7，29.7(3C)，29.9(3C)，30.0(3C)，34.4，40.4，58.1(3C)，59.8，66.5，67.1(3C)，67.6(3C)，67.7(3C)，67.8(3C)，67.82(3C)，68.4(3C)，69.1(3C)，74.2(3C)，79.9(3C)，128.0，128.4(4C)，136.6，156.6，172.3；HRMS(ESI)計算值C52H84N2O15(m/z)[M+H]+977.5944，測定值977.5943。

化合物(I-k-2)：

將THPTA(22.6mg，0.052mmol)和硫酸銅(2.5mg，0.01mmol)溶於水(200微升)，然後加到(I-e-3)(45mg，0.152mmol)和(I-j-2)(51mg，0.069mmol)在甲醇(1.1mL)中的溶液中。然後加入溶於水(100微升)的抗壞血酸鈉(4.2mg，0.021mmol)，將該反應混合物在50攝氏度攪拌24小時。蒸發溶劑，通過矽膠急驟色譜法純化粗物質(5％甲醇的二氯甲烷溶液)，得到所期望的化合物(I-k-2)，為油狀物(72mg，78％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.34(s，6H)，1.52(s，6H)，1.73-1.86(m，12H)，1.97(s，6H)，2.24(t，J＝7.4Hz，2H)，3.15(t，J＝6.8Hz，2H)，3.43-3.54(m，22H)，3.58(t，J＝6.3Hz，4H)，3.86(d，J＝8.1Hz，2H)，3.97(dd，J＝6.2，1.9Hz，2H)，4.11-4.23(m，5H)，4.58(s，4H)，4.78(s，6H)，4.91(d，J＝14.1Hz，2H)，4.98(d，J＝14.4Hz，2H)，5.07(s，2H)，5.24(d，J＝1.8Hz，2H)，7.25-7.40(m，5H)，7.99(s，2H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 22.7(2C)，26.8(2C)，27.5，28.4(2C)，31.1(4C)，31.2(2C)，34.5，41.4，50.6，51.0(2C)，56.3(2C)，64.8(2C)，67.5(2C)，68.7(2C)，68.8(2C)，68.9(3C)，69.0(2C)，69.4(2C)，69.7(2C)，70.9(2C)，76.3(2C)，76.6(2C)，81.5(2C)，102.5(2C)，112.8(2C)，127.2(2C)，129.0(2C)，129.1，129.6(2C)，138.6，146.3(2C)，159.0，173.5(2C)，175.5；HRMS(ESI)計算值C63H98N10O21(m/z)[M+H]+1331.6981，測定值1331.6971.

化合物(I-k-3)：

將THPTA(16mg，0.037mmol)和硫酸銅(1.7mg，0.007mmol)溶於水(100微升)，然後加到(I-e-3)(32.5mg，0.109mmol)和(I-j-3)(32mg，0.033mmol)在甲醇(1.1mL)中的溶液中。然後加入溶於水(100微升)的抗壞血酸鈉(3mg，0.015mmol)，將該反應混合物在50攝氏度攪拌24小時。蒸發溶劑，通過矽膠急驟色譜法純化粗物質(10％甲醇的二氯甲烷溶液)，得到所期望的化合物(I-k-3)，為油狀物(43.5mg，70％收率)。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 1.33(s，9H)，1.52(s，9H)，1.71-1.87(m，18H)，1.97(s，9H)，2.20(t，J＝7.3Hz，2H)，3.15(t，J＝6.8Hz，2H)，3.43-3.52(m，28H)，3.58(t，J＝6.3Hz，6H)，3.67(s，6H)，3.86(d，J＝8.3Hz，3H)，3.97(dd，J＝6.0，1.8Hz，3H)，4.14-4.22(m，5H)，4.58(s，6H)，4.78(s，8H)，4.91(d，J＝14.6Hz，3H)，4.97(d，J＝14.6Hz，3H)，5.07(s，2H)，5.24(d，J＝2.0Hz，3H)，7.26-7.38(m，5H)，7.98(s，3H)；13C NMR(100MHz，甲醇-d4)δppm 22.7(3C)，26.9(3C)，27.7，28.4(3C)，31.1(3C)，31.2(3C)，31.3(3C)，35.2，41.3，51.0(3C)，56.3(3C)，61.8，64.9(3C)，67.5(3C)，68.7(3C)，68.8(3C)，68.9(3C)，69.0(4C)，69.6(3C)，69.7(3C)，70.0(3C)，76.3(3C)，76.6(3C)，81.5(3C)，102.5(3C)，112.8(3C)，127.2(3C)，129.0(2C)，129.1，129.7(2C)，138.6，146.4(3C)，159.0，173.5(3C)，175.6；HRMS(ESI)計算值C88H138N14O30(m/z)[M+H]+1871.9776，測定值1871.9713。

將化合物(I-k-2)或(I-k-3)(0.068mmol)溶於乙酸、甲醇和水(分別為2.5-3ml，0.6-0.9ml，0.6-0.9mL)的混合物，在70攝氏度攪拌24小時。蒸發溶劑，將殘餘物與甲苯一起共蒸發2次。將得到的粗物質不經任何純化用於下一步。

在圓底燒瓶中，將化合物(I-l-2)或(I-l-3)(1當量)溶於甲醇(0.01M)，用氮氣吹掃燒瓶。加入披鈀碳(10％、0.7當量)，用氮氣然後用氫氣吹掃燒瓶。將該反應混合物在室溫在氫氣氣氛中(使用充滿氫氣的氣囊)攪拌24小時。使用0.45微米PTFE Acrodisc Cr過濾出鈀，用甲醇衝洗1次。蒸發溶劑。

實施例(13)：

將粗物質溶於0.5mL甲醇/水(50：50)，注射在HPLC柱上。使用Waters XBridge BEH C18 OBD Prep柱，5微米，19mm X 100mm(Waters，部件號186002978)進行製備型高效液相色譜法(HPLC)，用17毫升/分鐘流速線性坡度洗脫。溶劑梯度：乙腈/水/三氟乙酸(2：98：0.1)-(22：58：0.1)，40分鐘。通過分析型LCMS分析採集的級分，並且收集鑑定為具有足夠純度的34.7-35.6分鐘時的級分，且蒸發，得到12.8mg(13)，為油狀物(17％收率，歷時2步)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δppm 1.73-1.87(m，12H)，1.88-1.96(m，2H)，1.98(s，6H)，2.39(t，J＝7.0Hz，2H)，2.98(t，J＝7.4Hz，2H)，3.42(d，J＝8.5Hz，2H)，3.45-3.55(m，24H)，3.59(t，J＝6.3Hz，4H)，3.71-3.75(m，4H)，3.77(d，J＝8.3Hz，2H)，3.96-4.02(m，2H)，4.13-4.20(m，1H)，4.58(s，4H)，4.91-4.95(m，4H)，5.20(d，J＝1.5Hz，2H)，7.98(s，2H)；HRMS(ESI)計算值C49H84N10O19(m/z)[M+H]+1117.5987，測定值1117.5977。

實施例(14)：

將粗物質溶於0.5mL甲醇/水(50：50)，注射在HPLC柱上。使用Waters XBridge BEH C18 OBD Prep柱，5微米，19mm X 100mm(Waters，部件號186002978)進行製備型高效液相色譜法(HPLC)，用17毫升/分鐘流速線性坡度洗脫。溶劑梯度：乙腈/水/三氟乙酸(2：98：0.1)-(42：58：0.1)，40分鐘。通過分析型LCMS分析採集的級分，並且收集鑑定為具有足夠純度的24.7-25.6分鐘時的級分，且蒸發，得到5.5mg(14)，為油狀物(10％收率，歷時2步)；1H NMR(500MHz，甲醇-d4)δppm 1.75-1.86(m，18H)，1.87-1.94(m，2H)，1.98(s，9H)，2.37(t，J＝6.8Hz，2H)，2.98(t，J＝7.4Hz，2H)，3.43(d，J＝8.5Hz，3H)，3.46-3.53(m，31H)，3.59(t，J＝6.3Hz，6H)，3.68(s，6H)，3.72-3.76(m，5H)，3.77(d，J＝8.3Hz，3H)，3.97-4.02(m，3H)，4.59(s，6H)，4.90-4.96(m，6H)，5.20(d，J＝1.2Hz，3H)7.98(s，3H)；HRMS(ESI)計算值C71H120N14O28(m/z)[M+H]+1617.8469，測定值1617.8415。

實施例(15)和(16)；Alexa647(AF647)綴合物

Alexa647羧酸琥珀醯亞胺基酯來自Invitrogen(目錄號A-20106)。Invitrogen報導分子量為～1250。基於來自LCMS的Alexa Fluor 647羧酸琥珀醯亞胺基酯的955.07的[M+H]+測定值估計Alexa647標記的化合物分子量。λmax 650的消光係數是～270000±20000，其因批次的不同而改變。

用於HPLC純化的通用方法：

使用Waters XBridge BEH C18 OBD Prep柱，5微米，19mm X 100mm(Waters，部件編號186002978)進行製備型高效液相色譜法(HPLC)，用17毫升/分鐘流速的線性坡度洗脫。溶劑梯度：乙腈/水/三氟乙酸(2：98：0.1)～(22：78：0.1)，40分鐘。通過分析型LCMS分析採集的級分並且收集鑑定為具有足夠純度的級分且將其蒸發。

實施例(15)：

向化合物(13)(4.5mg，4微摩爾)在二甲亞碸(200微升)中的溶液中加入Alexa647羧酸琥珀醯亞胺基酯(5.0mg，4微摩爾)和N,N-二異丙基乙胺(10微升，10當量)。將該反應混合物在室溫振搖1小時，然後通過製備型HPLC直接純化。通過分析型LCMS分析採集的級分並且收集鑑定為具有足夠純度的級分(Rt＝37.3-39分鐘)。得到4.0mg(15)(50％收率)。等分該溶液，用真空離心機蒸發，將產物儲存在4攝氏度下。MS(ESI)計算值(m/z)[M+H]+～1955，測定值1955.32。

實施例(16)：

向化合物(14)(5.2mg，3.2微摩爾)在二甲亞碸(200微升)中的溶液中加入Alexa647羧酸琥珀醯亞胺基酯(5.0mg，4微摩爾)和N,N-二異丙基乙胺(10微升，10當量)。將該反應混合物在室溫振搖1小時，然後通過製備型HPLC直接純化。通過分析型LCMS分析採集的級分並且收集鑑定為具有足夠純度的級分(Rt＝24.3-25.3分鐘)。得到4.0mg(16)(51％收率)。等分該溶液，用真空離心機蒸發，將產物儲存在4攝氏度下。MS(ESI)計算值(m/z)[M+H]+～2455，測定值2456.90。

用於獲得實施例(17)-(21)的通用烷基化/脫保護條件：

向(I-e-1)在二氯甲烷中的溶液中加入期望的碘代烷、酸式硫酸四丁銨和12.5M氫氧化鈉水溶液。將該反應混合物在室溫攪拌過夜，用水和二氯甲烷稀釋，再用二氯甲烷將水相萃取2次。用1M鹽酸水溶液、水洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮。使得到的物質以粗品用於下一步反應或使用矽膠急驟色譜法純化。將得到的物質溶於乙酸/甲醇/水(3：1：1v/v)的混合物，將該溶液加熱至60–70攝氏度過夜。減壓濃縮該反應化合物，與甲苯共蒸發2次，通過矽膠急驟色譜法或反相色譜法純化粗物質。

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(乙氧基甲基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(17)

如上述通用方法中所述，使用碘乙烷(20當量)合成(17)。將粗產物溶於甲醇，向其中加入活性炭。將該混合物攪拌15分鐘，過濾，減壓濃縮。通過矽膠急驟色譜法純化期望的粗物質，用乙酸乙酯/甲醇(15：1)洗脫。採集包含期望的產物的級分，減壓濃縮。向粗物質中加入乙酸乙酯/甲醇(15：1)，得到沉澱，過濾，得到9.1mg(32％收率)期望的產物，為固體。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 5.23(d，J＝1.5Hz，1H)，3.97(dd，J＝9.7，1.4Hz，1H)，3.94(d，J＝9.3Hz，1H)，3.88(d，J＝4.3Hz，1H)，3.79(d，J＝8.1Hz，1H)，3.73(dd，J＝9.8，4.3Hz，1H)，3.66(d，J＝8.1Hz，1H)，3.60(d，J＝9.6Hz，1H)，3.59(dq，J＝9.6，7.1Hz，1H)，3.55(dq，J＝9.6，7.1Hz，1H)，2.00(s，3H)，1.19(t，J＝6.9Hz，3H)。LCMS(APCI)m/z：262.1[M+H](100％)。

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(丙氧基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(18)

如上述通用方法中所述，使用碘丙烷(20當量)合成(18)。使用矽膠急驟色譜法純化期望的粗產物，用乙酸乙酯/甲醇(15：2)洗脫，得到13.9mg(80％收率)期望的產物，為油狀物。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 5.23(d，J＝1.5Hz，1H)，3.97(dd，J＝9.7，1.4Hz，1H)，3.95(d，J＝9.6Hz，1H)，3.89(d，J＝4.3Hz，1H)，3.79(d，J＝7.8Hz，1H)，3.73(dd，J＝9.8，4.3Hz，1H)，3.66(d，J＝8.1Hz，1H)，3.59(d，J＝9.3Hz，1H)，3.49(dt，J＝9.3，6.5Hz，1H)，3.46(dt，J＝9.3，6.5Hz，1H)，2.01(s，3H)，1.60(qt，J＝7.4，6.5Hz，2H)，0.94(t，J＝7.4Hz，3H)。LCMS(APCI)m/z：276.2[M+H](100％)。

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(丁氧基甲基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(19)

如上述通用方法中所述，使用碘丁烷(20當量)合成(19)。使用矽膠急驟色譜法純化期望的粗產物，用乙酸乙酯/甲醇(15：1)洗脫，得到18mg(100％收率)期望的產物，為油狀物。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 5.23(d，J＝1.3Hz，1H)，3.97(dd，J＝9.6，1.3Hz，1H)，3.94(d，J＝9.6Hz，1H)，3.88(d，J＝4.3Hz，1H)，3.79(d，J＝7.8Hz，1H)，3.73(dd，J＝9.8，4.3Hz，1H)，3.66(d，J＝7.8Hz，1H)，3.59(d，J＝9.3Hz，1H)，3.54(dt，J＝9.3，6.5Hz，1H)，3.50(dt，J＝9.3，6.5Hz，1H)，2.00(s，3H)，1.52-1.61(m，2H)，1.34-1.45(m，2H)，0.95(t，J＝7.3Hz，3H)。LCMS(APCI)m/z：290.2[M+H](100％)。

N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-[(戊氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}乙醯胺(20)

如上述通用方法中所述，使用碘戊烷(20當量)合成(20)。使用矽膠急驟色譜法純化粗產物，用乙酸乙酯/甲醇(15：1)洗脫，得到17mg(68％收率)期望的產物，為油狀物。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)delta ppm 5.23(d，J＝1.5Hz，1H)，3.97(dd，J＝9.8，1.3Hz，1H)，3.94(d，J＝9.6Hz，1H)，3.88(d，J＝4.3Hz，1H)，3.79(d，J＝8.1Hz，1H)，3.73(dd，J＝9.8，4.3Hz，1H)，3.66(d，J＝8.1Hz，1H)，3.59(d，J＝9.6Hz，1H)，3.53(dt，J＝9.3，6.5Hz，1H)，3.49(dt，J＝9.3，6.5Hz，1H)，2.01(s，3H)，1.53-1.63(m，2H)，1.29-1.41(m，4H)，0.89-0.97(m，3H)。LCMS(APCI)m/z：304.1[M+H](100％)。

N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-1-[(己氧基)甲基]-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}乙醯胺(21)

如上述通用方法中所述，使用碘己烷(20當量)合成(21)。使用矽膠急驟色譜法純化粗產物，用乙酸乙酯/甲醇(15：1)洗脫，得到56mg產物，為油狀物。使用反相色譜法再純化該物質，得到7.1mg(15％收率)期望的產物，為固體。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 5.23(d，J＝1.5Hz，1H)，3.96(dd，J＝10.1，1.3Hz，1H)，3.94(d，J＝9.6Hz，1H)，3.88(d，J＝4.3Hz，1H)，3.79(d，J＝7.8Hz，1H)，3.73(dd，J＝9.8，4.3Hz，1H)，3.66(d，J＝8.1Hz，1H)，3.59(d，J＝9.6Hz，1H)，3.53(dt，J＝9.3，6.5Hz，1H)，3.49(dt，J＝9.3，6.5Hz，1H)，2.00(s，3H)，1.53-1.62(m，2H)，1.27-1.50(m，6H)，0.89-0.97(m，3H)。LCMS(APCI)m/z：318.1[M+H](100％)。

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(2,5,8,11,14-五氧雜十五烷-1-基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(22)

向(I-e-1)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中加入吡啶(0.3ml，4mmol)，將該混合物冷卻至-20攝氏度，加入在二氯甲烷(0.6mL)中的三氟甲磺酸酐(0.047ml，0.28mmol)。將該反應混合物溫熱至-10攝氏度，歷時1小時，用二氯甲烷稀釋，依次用1M鹽酸水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液、鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮，得到所期望的粗物質，不經進一步純化用於下一步。向冷卻至0攝氏度的2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-醇(207mg，0.994mmol)在N,N-二甲基甲醯胺中的溶液中加入氫化鈉(39.9mg，1.0mmol)，將該反應混合物攪拌10分鐘。滴加上述粗三氟甲磺酸((3aR,4R,7S,8R,8aR)-8-乙醯氨基-2,2-二甲基四氫-4,7-環氧[1,3]間二氧雜環戊烯[4,5-d]氧雜環庚三烯-4(5H)-基)甲酯在N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)中的溶液，將該反應混合物在0攝氏度攪拌25分鐘。用甲醇使反應停止，將該反應混合物攪拌5分鐘。然後減壓濃縮得到的混合物，將得到的殘餘物溶於二氯甲烷，用水洗滌。再用二氯甲烷萃取水層2次。用水洗滌合併的有機層，減壓濃縮。通過矽膠急驟色譜法純化粗物質，用乙酸乙酯/甲醇(15：2)洗脫，得到85mg(100％)期望的產物。將N-((3aR,4S,7S,8R,8aR)-2,2-二甲基-4-(2,5,8,11,14-五氧雜十五基)六氫-4,7-環氧[1,3]間二氧雜環戊烯[4,5-d]氧雜環庚三烯-8-基)乙醯胺(85mg，0.18mmol)在乙酸/甲醇/水(3.9：1.3：1.3v/v)混合物中的溶液加熱至70攝氏度過夜。減壓濃縮該反應混合物，將得到的粗物質與甲苯共蒸發2次，通過矽膠急驟色譜法純化，用10％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到15mg期望的產物(22)，為油狀物。1H NMR(400MHz，甲醇-d4)δppm 5.22(d，J＝1.3Hz，1H)，3.96(d，J＝9.6Hz，1H)，3.95(dd，J＝9.9，1.3Hz，1H)，3.89(d，J＝4.3Hz，1H)，3.78(d，J＝8.1Hz，1H)，3.59-3.74(m，17H)，3.53-3.56(m，2H)，3.36(s，3H)，1.99(s，3H)。LCMS(APCI)m/z：424.2[M+H](13％)，441.3[M+NH4](100％)。

雙(4-溴苯甲酸)(1R,2R,3R,4R,5S)-4-乙醯氨基-1-(((4-溴苯甲醯基)氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二基酯(23)

向在室溫冷卻的(3)(9mg)在無水N,N-二甲基甲醯胺(500微升)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(34微升)和4-(二甲基氨基)吡啶(4.3mg)，然後加入對溴苯甲醯氯(44mg)，將得到的混合物在室溫攪拌4.5小時。加入水，用乙酸乙酯將得到的混合物萃取3次，連續用0.5M鹽酸水溶液和鹽水洗滌合併的有機相。用硫酸鎂乾燥有機相，過濾，濃縮，通過矽膠急驟色譜法純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯的庚烷溶液梯度洗脫，得到23mg產物(23)(80％收率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ(ppm)7.89-7.95(m，2H)，7.78-7.84(m，2H)，7.54-7.66(m，6H)，7.41-7.46(m，2H)，5.87(d，J＝8.8Hz，1H)，5.80(d，J＝4.3Hz，1H)，5.60(d，J＝1.1Hz，1H)，5.44(dd，J＝10.2，4.5Hz，1H)，4.54-4.64(m，3H)，4.15(d，J＝8.6Hz，1H)，3.93(d，J＝8.6Hz，1H)，1.95(s，3H)。13C NMR(101MHz，CDCl3)δppm 170.6，165.6，165.0，164.9，132.1，131.9，131.8，131.4，131.2，131.2，129.3，129.0，128.9，127.7，127.5，127.4，101.8，81.6，69.5，68.8，68.4，62.5，52.7，23.2。通過蒸氣擴散技術，使用甲醇和庚烷作為溶劑得到單晶。單晶X射線分析：在室溫使用Bruker APEX衍射計進行數據採集。數據採集由3次ω掃描以及低角和高角3次組成；各自具有0.5個步長。此外，採集2phi掃描以便改善吸收校正的質量。結構是非缺面雙晶；通過忽略第二個晶疇精修。通過直接方法，使用SHELX軟體套件(參見SHELXTL，5.1版，Bruker AXS，1997)在空間群P2(1)中解析結構。隨後通過全矩陣最小二乘法精修結構。發現了全部非氫原子並且使用各向異性置換參數精修。使位於氮上的氫原子置於該位置上並且以合理的位置束縛。將其餘的氫原子置於計算的位置上並且使其位於其載體原子上。最終的精修包括用於全部氫原子的等向置換參數。使用PLATON(A.L.Spek，J.Appl.Cryst.，36，7-13(2003))，應用似然方法(R.W.W.Hooft等人J.Appl.Cryst.，41，96-103(2008))分析絕對結構。結果表明絕對結構被正確地指定。該方法計算出結果是正確的概率為100.0。將Hooft參數報導為0.036，esd為0.013。另外，Flack參數為0.03，esd為0.04。最終R指數為5.6％。最終的差示Fourier揭示無丟失或錯位電子密度。將相關的晶體、數據採集和精修概括在表1和圖1中。

表1.(23)的晶體數據和結構精修。

(1S,2R,3R,4R,5S)-4-疊氮基-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷(l-m-1)

在室溫向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-疊氮基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(1)(445mg，2.05mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中的溶液中加入氫化鈉(礦物油中的60％分散體，410mg，10.2mmol)。該反應體系變成極為濃稠，不能充分攪拌。再加入5mL N,N-二甲基甲醯胺，將該反應體系在室溫攪拌30分鐘，然後滴加苄基溴(1.23ml，10.2mmol)。將該反應體系在室溫攪拌過夜。第二天早晨用水使反應停止，用乙酸乙酯萃取3次。用水、鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 40g矽膠柱)純化粗物質，用0-30％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物(890.0mg，89.1％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+Na＝510]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.07-7.52(m，15H)，5.31(s，1H)，4.81(d，J＝5.1Hz，1H)，4.78(d，J＝5.5Hz，1H)，4.68-4.74(m，1H)，4.47-4.51(m，1H)，4.46(d，J＝6.6Hz，1H)，4.35-4.42(m，1H)，4.12(d，J＝3.9Hz，1H)，3.87-3.91(m，2H)，3.86(d，J＝8.2Hz，1H)，3.62(d，J＝8.2Hz，1H)，3.58(d，J＝9.4Hz，1H)，3.46(d，J＝8.6Hz，1H)

(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-胺(1-n-1)

將(1S,2R,3R,4R,5S)-4-疊氮基-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷(l-m-1)(310mg，0.64mmol)、三苯膦(334mg，1.27mmol)、水(92mg，5.1mmol)和四氫呋喃(10mL)的混合物在65℃攪拌16小時。減壓濃縮該反應混合物，使殘餘物上矽膠柱。進行色譜法，用20％-80％乙酸乙酯的庚烷溶液梯度洗脫，得到標題產物，為無色膠狀物(210mg，72％)。1H NMR(氯仿-d)δ：7.20-7.37(m，15H)，5.29(d，J＝1.2Hz，1H)，4.90(d，11.5Hz，1H)，4.79(d，J＝11.5Hz，1H)，4.57(d，J＝11.7Hz，1H)，4.56(d，J＝12.1Hz，1H)，4.43(d，J＝12.1Hz，1H)，4.39(d，J＝11.7Hz，1H)，3.97(d，J＝3.9Hz，1H)，3.90(d，J＝9.0Hz，1H)，3.69(d，J＝8.2Hz，1H)，3.59(d，J＝8.2Hz，1H)，3.42(d，J＝8.6Hz，1H)，3.37(dd，J＝9.4，3.5Hz，1H)，3.07(dd，J＝9.4，1.2Hz，1H)；13C NMR(氯仿-d)δ：131.8，131.6，131.5，128.2，128.2，128.1，128.1，128.0，127.7，127.6，127.6，127.4，103.5，82.6，80.3，74.5，73.3，73.1，72.2，69.9，69.3，55.1；LCMS(ES+)：1.18分鐘，484.2(M+Na)+。

N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}乙醯胺(l-n-2)

在室溫向攪拌的(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-胺(1-n-1)(25mg，0.054mmol)、吡啶(43mg，0.54mmol)和2-甲基-四氫呋喃(1mL)的混合物中一次加入乙酐(46mg，0.43mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌16小時，使其分配在乙酸乙酯和水之間。用鹽水洗滌有機萃取物，用無水硫酸鎂乾燥，減壓濃縮。用矽膠柱純化殘餘物，用20％-60％乙酸乙酯的庚烷溶液梯度洗脫，得到標題產物，為白色固體(20mg，73％)。1H NMR(氯仿-d)δ：7.24-7.43(m，15H)，5.35(d，J＝1.2Hz，1H)，5.06(d，J＝8.6Hz，1H)，4.96(d，J＝11.3Hz，1H)，4.74(d，J＝12.5Hz，1H)，4.58(d，J＝11.3Hz，1H)，4.42(d，J＝12.5Hz，1H)，4.40(s，2H)，4.30-4.36(m，1H)，4.04(d，J＝3.9Hz，1H)，3.96(d，J＝8.6Hz，1H)，3.67-3.70(m，1H)，3.58-3.61(m，1H)，3.41-3.47(m，2H)，1.87(s，3H)；13C NMR(氯仿-d)δ：170.0，138.2，137.8，137.4，128.7，128.5，128.4，128.3，128.3，128.2，128.1，128.0，127.8，101.6，82.8，75.7，75.0，73.8，73.2，71.5，70.1，69.5，53.5，23.3；LCMS(ES+)：1.87分鐘，526.3(M+Na)+。

N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}-2,2,2-三氟乙醯胺(1-n-3)

在室溫向攪拌的(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-胺(1-n-1)(75mg，0.16mmol)、吡啶(129mg，1.62mmol)和2-甲基-四氫呋喃(1mL)的混合物中一次加入三氟乙酐(102mg，0.49mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌16小時，使其分配在乙酸乙酯和水之間。用鹽水洗滌有機萃取物，用無水硫酸鎂乾燥，減壓濃縮。用矽膠柱純化殘餘物，用10％-40％乙酸乙酯的庚烷溶液梯度洗脫，得到標題產物，為白色固體(60mg，66％)。1H NMR(氯仿-d)δ：7.25-7.42(m，15H)，5.91(d，J＝8.6Hz，1H)，5.35(d，J＝1.2Hz，1H)，4.95(d，J＝11.3Hz，1H)，4.72(d，J＝12.5Hz，1H)，4.58(d，J＝11.3Hz，1H)，4.41(s，2H)，4.40(d，J＝12.5Hz，1H)，4.36(t，J＝9.8Hz，1H)，4.08(d，J＝3.9Hz，1H)，3.96(d，J＝9.0Hz，1H)，3.68-3.72(m，1H)，3.60-3.63(m，1H)，3.50(dd，J＝10.0，3.7Hz，1H)，3.45(d，J＝8.6Hz，1H)；13C NMR(氯仿-d)δ：137.9，137.1，136.1，128.9，128.5，128.5，128.4，128.4，128.1，128.1，128.1，127.9，100.6，83.0，75.0，74.9，73.8，72.7，71.4，70.3，69.2，54.1；19F NMR(氯仿-d)δ：-75.7(s)；LCMS(ES-)：2.11分鐘，556.2(M-H)-。

N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}甲磺醯胺(1-n-4)

在0℃向攪拌的(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-胺(1-n-1)(50mg，0.11mmol)、三乙胺(0.100ml，0.72mmol)和2-甲基-四氫呋喃(1mL)的混合物中滴加甲磺醯氯(0.025ml，0.33mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌16小時，使其分配在乙酸乙酯和飽和碳酸氫鈉之間。用水、鹽水洗滌有機萃取物，用無水硫酸鎂乾燥，濃縮。用矽膠柱純化殘餘物，用10％-50％乙酸乙酯的庚烷溶液梯度洗脫，得到標題產物，為白色固體(58mg，65％)。1H NMR(氯仿-d)δ：7.22-7.41(m，15H)，5.43(d，J＝1.2Hz，1H)，4.93(d，J＝11.3Hz，1H)，4.79(d，J＝11.7Hz，1H)，4.62(br.s.，1H)，4.56(d，J＝11.7Hz，1H)，4.54(d，J＝11.3Hz，1H)，4.41(d，J＝12.1Hz，1H)，4.37(d，J＝12.1Hz，1H)，4.05(d，J＝3.9Hz，1H)，3.92(d，J＝8.6Hz，1H)，3.74(d，J＝8.6Hz，1H)，3.68-3.72(m，1H)，3.62(d，J＝8.6Hz，1H)，3.54(dd，J＝10.0，3.7Hz，1H)，3.44(d，J＝9.0Hz，1H)，2.90(s，3H)；13C NMR(氯仿-d)δ：138.0，137.3，137.2，128.7(2)，128.5(2)，128.4(2)，128.3，128.1(2)，128.1，127.9(2)，127.8(2)，102.7，82.9，77.2，77.1，75.0，73.7，73.5，72.8，70.2，69.3，57.7，41.2；；LCMS(ES-)：1.97分鐘，538.3(M-H)-。

N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}丙醯胺(1-n-5)

在室溫向攪拌的丙酸(23mg，0.31mmol)在四氫呋喃(1mL)中的混合物中一次加入1,1』-羰基二咪唑(33mg，0.20mmol)，將澄清溶液在室溫攪拌3小時。在室溫一次加入三乙胺(0.028ml，0.20mmol)和(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-胺(1-n-1)(47mg，0.10mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌16小時，使其分配在乙酸乙酯(3mL)、鹽水(2mL)和水(2mL)之間。用鹽水洗滌有機萃取物，用無水硫酸鎂乾燥，濃縮。將殘餘物進行矽膠柱色譜法，用10％-50％乙酸乙酯的庚烷溶液梯度洗脫，得到標題產物，為白色固體(43mg，82％)。1H NMR(氯仿-d)δ：7.03-7.58(m，15H)，5.35(s，1H)，5.09(d，J＝8.2Hz，1H)，4.95(d，J＝11.3Hz，1H)，4.72(d，J＝12.1Hz，1H)，4.57(d，J＝11.3Hz，1H)，4.43(d，J＝12.1Hz，1H)，4.39(s，2H)，4.31-4.38(m，1H)，4.04(d，J＝3.9Hz，1H)，3.95(d，J＝9.0Hz，1H)，3.68(d，J＝8.2Hz，1H)，3.59(d，J＝8.2Hz，1H)，3.44-3.49(m，1H)，3.44(d，J＝8.6Hz，1H)，2.08(q，J＝7.4Hz，2H)，1.11(t，J＝7.6Hz，3H)；13C NMR(氯仿-d)δ：173.5，138.1，137.8，137.4，128.6，128.5，128.3，128.3，128.2，128.1，128.0，128.0，127.7，101.6，82.7，75.7，74.9，73.7，73.2，71.5，70.1，69.4，53.3，29.6，9.5；LCMS(ES-)：1.94分鐘，516.4(M-H)-；LCMS(AP+)：1.94分鐘，518.5(M+H)+。

N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}-3,3,3-三氟丙醯胺(1-n-6)

在室溫向攪拌的3,3,3-三氟丙酸(39mg，0.31mmol)在四氫呋喃(1mL)中的混合物中一次加入1,1』-羰基二咪唑(33mg，0.20mmol)，將澄清溶液在室溫攪拌3小時。在室溫一次加入三乙胺(0.028ml，0.20mmol)和(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-胺(1-n-1)(47mg，0.10mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌16小時，使其分配在乙酸乙酯(3mL)、鹽水(2mL)和水(2mL)之間。用鹽水洗滌有機萃取物，用無水硫酸鎂乾燥，濃縮。將殘餘物進行矽膠柱色譜法，用10％-50％乙酸乙酯的庚烷溶液梯度洗脫，得到標題產物，為白色固體(40mg，69％)。1H NMR(氯仿-d)δ：7.24-7.42(m，15H)，5.37(d，J＝8.6Hz，1H)，5.35(d，J＝1.6Hz，1H)，4.95(d，J＝11.3Hz，1H)，4.71(d，J＝12.1Hz，1H)，4.56(d，J＝11.3Hz，1H)，4.45(d，J＝12.1Hz，1H)，4.40(s，2H)，4.35-4.40(m，1H)，4.05(d，J＝3.5Hz，1H)，3.95(d，J＝8.6Hz，1H)，3.71(d，J＝8.2Hz，1H)，3.61(d，J＝8.2Hz，1H)，3.50(dd，J＝10.0，3.7Hz，1H)，3.45(d，J＝8.6Hz，1H)，2.92(q，J＝10.5Hz，2H)；13C NMR(氯仿-d)δ：162.3，138.0，137.6，137.3，128.7，128.5，128.4，128.3，128.3，128.2，128.0，128.0，127.8，101.1，82.8，75.8，75.0，73.7，73.2，71.9，70.2，69.3，54.0，41.7；19F NMR(氯仿-d)δ：-62.8(s)；LCMS(ES-)：2.05分鐘，570.3(M-H)-。

N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}-2,2-二氟乙醯胺(1-n-7)

在室溫向攪拌的二氟乙酸(29mg，0.31mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中的混合物中一次加入1,1』-羰基二咪唑(33mg，0.20mmol)，將澄清溶液在室溫攪拌3小時。在室溫一次加入三乙胺(0.028ml，0.20mmol)和(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-胺(1-n-1)(47mg，0.10mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌16h，使其分配在乙酸乙酯(3mL)、鹽水(2mL)和水(2mL)之間。用鹽水洗滌有機萃取物，用無水硫酸鎂乾燥，濃縮。將殘餘物進行矽膠柱色譜法，用10％-50％乙酸乙酯的庚烷溶液梯度洗脫，得到標題產物，為白色固體(32mg，58％)。1H NMR(氯仿-d)δ：7.14-7.47(m，15H)，6.02(d，J＝8.6Hz，1H)，5.83(t，J＝54.2Hz，1H)，5.35(s，1H)，4.96(d，J＝11.3Hz，1H)，4.73(d，J＝12.5Hz，1H)，4.58(d，J＝11.3Hz，1H)，4.45(d，J＝12.1Hz，1H)，4.41(s，2H)，4.34-4.40(m，1H)，4.08(d，J＝3.9Hz，1H)，3.96(d，J＝9.0Hz，1H)，3.67-3.75(m，1H)，3.59-3.65(m，1H)，3.53(dd，J＝9.8，3.9Hz，1H)，3.46(d，J＝8.6Hz，1H)；13C NMR(氯仿-d)δ：162.6，138.0，137.3，128.8，128.5，128.4，128.3，128.1，128.0，127.8，108.3(t，J＝253.1Hz)，100.9，82.9，75.3，75.0，73.8，72.9，71.6，70.2，69.3，53.5；19F NMR(氯仿-d)δ：-126.1(d，J＝53.1Hz)；LCMS(ES-)：2.05分鐘，538.2(M-H)-。

{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}氨基甲酸叔丁酯(l-n-8)

在室溫向攪拌的(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-胺(1-n-1)(120mg，0.26mmol)和N,N-二甲基氨基吡啶(DMAP)(6.4mg，0.052mmol)和四氫呋喃(2mL)中的混合物中一次加入二碳酸二-叔丁酯(113mg，0.52mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌16小時，減壓濃縮。用矽膠柱純化殘餘物，用10％-40％乙酸乙酯的庚烷溶液梯度洗脫，得到標題產物，為白色固體(104mg，71％)。1H NMR(氯仿-d)δ：7.17-7.45(m，15H)，5.35(s，1H)，4.97(d，J＝11.3Hz，1H)，4.74(d，J＝12.1Hz，1H)，4.57(d，J＝11.3Hz，2H)，4.47(d，J＝7.0Hz，1H)，4.39(s，2H)，4.09(br.s.，1H)，4.01(d，J＝3.9Hz，1H)，3.93(d，J＝9.0Hz，1H)，3.63-3.71(m，1H)，3.54-3.62(m，1H)，3.38-3.48(m，2H)，1.47(s，9H)；13C NMR(氯仿-d)δ：155.2，138.2，137.8，137.4，128.5，128.4，128.3，128.3，128.0，127.9，127.8，127.7，102.2，82.8，79.4，74.8，73.7，73.4，72.0，70.0，69.4，54.6，31.9，28.4；LCMS(AP+)：2.25分鐘，462.2(M-Boc+H)+。

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]丙醯胺(25)

將N-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)丙醯胺(1-n-5)(42mg，0.081mmol)、1-甲基-1,4-環己二烯(0.093ml，0.81mmol)、10％披Pd活性炭(20mg)和2-丙醇(2.5mL)的混合物在80℃攪拌3小時。加入水(0.2ml)，使全部混合物負載在矽膠上，用旋轉蒸發器乾燥。用矽膠柱純化該物質，用4％-15％甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脫，得到標題化合物，為無色膠狀物(12mg，60％)。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.21(d，J＝1.6Hz，1H)，3.95(dd，J＝10.1，1.2Hz，1H)，3.92(d，J＝11.3Hz，1H)，3.87(d，J＝3.9Hz，1H)，3.81(d，J＝11.3Hz，1H)，3.75(d，J＝8.2Hz，1H)，3.71-3.76(m，2H)，3.68(d，J＝8.2Hz，1H),，3.35(s，1H)，2.26(q，J＝7.4Hz，2H)，1.13(t，J＝7.4Hz，3H)；13C NMR(甲醇-d4)δ：177.7，102.6，84.9，70.4，69.1，69.0，61.9，56.0，30.0，10.3；LCMS(AP+)：0.25分鐘，248.2(M+H)+。

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]-2,2,2-三氟乙醯胺(24)

將N-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)-2,2,2-三氟乙醯胺(1-n-3)(20mg，0.036mmol)、1-甲基-1,4-環己二烯(0.093ml，0.81mmol)、10％披Pd活性炭(20mg)和2-丙醇(2.5mL)的混合物在80℃攪拌3小時。加入水(0.2ml)，使全部混合物負載在矽膠上，用旋轉蒸發器乾燥。用矽膠柱純化該物質，用4％-15％甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脫，得到標題化合物，為無色膠狀物(7.2mg，69％)。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.25(d，J＝1.2Hz，1H)，4.02(d，J＝8.6Hz，1H)，3.90(d，J＝7.0Hz，1H)，3.88-3.95(m，2H)，3.82(d，J＝11.7Hz，1H)，3.78(d，J＝7.8Hz，1H)，3.71(d，J＝7.8Hz，1H)，3.35(s，1H)；13C NMR(甲醇-d4)δ：159.8，102.3，85.5，70.8，69.7，68.4，62.2，57.4；19F NMR(氯仿-d)δ：-77.0(s)；LCMS(AP+)：0.42分鐘，288.2(M+H)+。

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]甲磺醯胺(26)

將N-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)甲磺醯胺(1-n-4)(19mg，0.035mmol)、1-甲基-1,4-環己二烯(0.093ml，0.81mmol)、10％披Pd活性炭(20mg)和2-丙醇(2.5mL)的混合物在80℃攪拌3小時。加入水(0.2ml)，使全部混合物負載在矽膠上，用旋轉蒸發器乾燥。用矽膠柱純化該物質，用4％-15％甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脫，得到標題化合物，為無色膠狀物(6.4mg，68％)。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.26(d，J＝1.6Hz，1H)，3.91(d，J＝11.3Hz，1H)，3.87(d，J＝4.3Hz，1H)，3.80(d，J＝11.3Hz，1H)，3.73(d，J＝7.8Hz，1H)，3.68(d，J＝7.8Hz，1H)，3.66-3.71(m，1H)，3.37(dd，J＝9.8，1.6Hz，1H)，3.35(s，1H)，3.04(s，3H)；13C NMR(甲醇-d4)δ：104.6，85.1，70.9，69.8，69.3，62.0，60.2，41.7；LCMS(ES-)：0.15分鐘，268.0(M-H)-。

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]-2,2-二氟乙醯胺(27)

向5mL微波小瓶中的N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}-2,2-二氟乙醯胺(1-n-7)(32.0mg，0.059mmol)在2-丙醇(1.0mL)和四氫呋喃(0.5mL)中的溶液中加入1-甲基-1,4-環己二烯(0.2ml，2mmol)，然後添加10％披鈀碳(50％溼的wt/wt，20.0mg，0mmol)。密封小瓶，加熱至80℃4小時。4小時後，TLC(10％甲醇/二氯甲烷)顯示反應未完成，但形成了所期望的產物。再加入1-甲基-1,4-環己二烯(0.2mL mg，2mmol)，再密封該反應體系，加熱至80℃過夜(18小時)。總計22小時後，用甲醇稀釋該反應體系，通過Life Sciences Acrodisc 25mm注射器式濾器過濾。減壓濃縮濾液。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為固體(5.0mg，SOLID，31％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+Na＝292]。1H NMR(甲醇-d4)δ：6.06(t，J＝54.2Hz，1H)，5.25(s，1H)，4.02(d，J＝9.4Hz，1H)，3.92(d，J＝11.7Hz，1H)，3.84-3.90(m，2H)，3.81(d，J＝11.7Hz，1H)，3.78(d，J＝8.2Hz，1H)，3.70(d，J＝8.2Hz，1H)

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]-3,3,3-三氟丙醯胺(28)

向5mL微波小瓶中的N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}-3,3,3-三氟丙醯胺(1-n-6)(40.0mg，0.070mmol)在2-丙醇(1.0mL)和四氫呋喃(0.5mL)中的溶液中加入1-甲基-1,4-環己二烯(0.2ml，1.75mmol)，然後添加10％披鈀碳(50％溼的wt/wt，20.0mg，0mmol)。密封小瓶，加熱至80℃4小時。4小時後，用甲醇稀釋該反應體系，通過Life Sciences Acrodisc 25mm注射器式濾器過濾。減壓濃縮濾液。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為固體(15.3mg，73％)。LRMS[M+1＝302]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.23(s，1H)，3.99(d，J＝9.8Hz，1H)，3.92(d，J＝11.3Hz，1H)，3.87(d，J＝4.3Hz，1H)，3.81(d，J＝11.3Hz，1H)，3.76(d，J＝8.2Hz，1H)，3.71-3.74(m，1H)，3.69(d，J＝8.2Hz，1H)，3.22(qd，J＝10.7，2.5Hz，2H)

N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}-N-甲基乙醯胺(l-o-1)

在室溫向攪拌的N-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)乙醯胺(l-n-2)(19mg，0.038mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(1.5mL)的混合物中一次加入氫化鈉(在礦物油中的60％分散體)，將該混合物攪拌30分鐘。在室溫一次加入碘甲烷(16mg，0.11mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌16小時，使其分配在乙酸乙酯(3mL)、鹽水(2mL)和水(2mL)之間。用鹽水洗滌有機萃取物，用無水硫酸鎂乾燥，減壓濃縮。用矽膠柱純化殘餘物，用10％-50％乙酸乙酯的庚烷溶液梯度洗脫，得到標題產物，為無色膠狀物(19mg，97％)。旋轉異構體混合物(3：1)。旋轉異構體1：1H NMR(氯仿-d)d：7.21-7.43(m，15H)，5.37(s，1H)，4.93(d，J＝10.9Hz，1H)，4.65(d，J＝11.7Hz，1H)，4.54(d，J＝11.3Hz，1H)，4.50(d，J＝11.7Hz，1H)，4.37-4.45(m，2H)，4.15(d，J＝9.8Hz，1H)，4.09(d，J＝3.5Hz，1H)，3.93(d，J＝8.6Hz，1H)，3.85(dd，J＝10.1，3.5Hz，1H)，3.78(d，J＝8.2Hz，1H)，3.64(d，J＝8.2Hz，1H)，3.45(d，J＝8.6Hz，1H)，2.80(s，3H)，2.19(s，3H)；旋轉異構體2：1H NMR(氯仿-d)d：7.21-7.43(m，15H)，5.27(s，1H)，5.12(d，J＝10.9Hz，1H)，4.94-4.98(m，1H)，4.74(d，J＝12.1Hz，1H)，4.56(d，J＝11.7Hz，1H)，4.46(d，J＝11.3Hz，1H)，4.37-4.46(m，2H)，4.14-4.17(m，1H)，3.97(d，J＝8.6Hz，1H)，3.82-3.89(m，2H)，3.79(d，J＝8.2Hz，1H)，3.60-3.63(m，1H)，2.71(s，3H)，2.08(s，3H)；13C NMR(氯仿-d)d：172.2，138.0，137.3，137.2，128.6，128.5，128.5，128.4，128.1，128.0，127.9，127.9，127.9，127.8，103.2，83.2，75.2，74.1，73.8，73.7，73.0，72.4，70.1，69.2，61.2，28.0，22.2；LCMS(AP+)：1.99分鐘，518.0(M+H)+。

N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}-N-甲基甲磺醯胺(l-o-2)

在室溫向攪拌的N-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)甲磺醯胺(1-n-4)(19mg，0.035mmol)和N,N-二甲基甲醯胺(1.5mL)的混合物中一次加入氫化鈉(礦物油中的60％分散體)，將該混合物攪拌30分鐘。在室溫一次加入碘甲烷(16mg，0.11mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌16小時，使其分配在乙酸乙酯(3mL)、鹽水(2mL)和水(2mL)之間。用鹽水洗滌有機萃取物，用無水硫酸鎂乾燥，減壓濃縮。用矽膠柱純化殘餘物，用10％-50％乙酸乙酯的庚烷溶液梯度洗脫，得到標題產物，為無色膠狀物(11mg，56％)。1H NMR(氯仿-d)δ：7.25-7.39(m，15H)，5.39(d，J＝0.8Hz，1H)，4.93(d，J＝11.7Hz，1H)，4.80(d，J＝11.3Hz，1H)，4.58(d，J＝11.3Hz，1H)，4.45(d，J＝11.7Hz，1H)，4.43(d，J＝11.7Hz，1H)，4.41(d，J＝11.7Hz，1H)，4.21(d，J＝3.5Hz，1H)，4.18(d，J＝10.5Hz，1H)，3.98(d，J＝8.6Hz，1H)，3.87(dd，J＝10.5，3.9Hz，1H)，3.82(d，J＝8.6Hz，1H)，3.62(d，J＝8.2Hz，1H)，3.45(d，J＝9.0Hz，1H)，2.83(s，3H)，2.68(s，3H)；13C NMR(氯仿-d)δ：138.1，137.3，136.8，128.7，128.5，128.4，128.4，128.1，128.1，128.0，127.8，104.6，82.9，74.9，73.8，73.5，73.3，71.6，70.3，69.4，59.7，37.5，29.5；LCMS(AP+)：2.08分鐘，575.8(M+Na)+。

{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}甲基氨基甲酸叔丁酯(l-o-3)

在室溫向攪拌的{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}氨基甲酸叔丁酯(l-n-8)(100mg，0.178mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(1.5mL)中的溶液中加入氫化鈉(礦物油中的60％分散體，8.55mg，0.214mmol)。將該反應體系攪拌1小時，然後添加碘甲烷(0.055ml，0.89mmol)。將該反應體系在室溫攪拌過夜。24小時後，用水使反應停止，用乙酸乙酯萃取3次。用水、鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g矽膠柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物(78mg，76％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+Na＝598]。1H NMR(化合物為兩種旋轉異構體的～1：1混合物)

旋轉異構體1：1H NMR(甲醇-d4)δ：7.08-7.48(m，15H)，5.26(s，1H)，4.83-4.90(m，1H)，4.73(d，J＝11.7Hz，1H)，4.47-4.58(m，3H)，4.36-4.47(m，2H)，4.21(d，J＝3.5Hz，1H)，3.98(dd，J＝10.7，3.3Hz，1H)，3.92(d，J＝8.2Hz，2H)，3.61(d，J＝7.8Hz，1H)，3.47(dd，J＝8.6，3.9Hz，1H)，2.75(s，3H)，1.42(s，9H)

旋轉異構體2：1H NMR(甲醇-d4)δ：7.08-7.48(m，15H)，5.21(s，1H)，4.83-4.90(m，1H)，4.73(d，J＝11.7Hz，1H)，4.47-4.58(m，3H)，4.36-4.47(m，2H)，4.21(d，J＝3.5Hz，1H)，3.98(dd，J＝10.7，3.3Hz，1H)，3.92(d，J＝8.2Hz，2H)，3.61(d，J＝7.8Hz，1H)，3.47(dd，J＝8.6，3.9Hz，1H)，2.70(s，3H)，1.44-1.52(m，9H)

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]-N-甲基乙醯胺(29)

將N-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)-N-甲基乙醯胺(l-o-1)(19mg，0.037mmol)、1-甲基-1,4-環己二烯(0.093ml，0.81mmol)、10％披Pd活性炭(20mg)和2-丙醇(2.5mL)的混合物在80℃攪拌3小時。加入水(0.2ml)，將全部混合物負載在矽膠上，用旋轉蒸發器乾燥。用矽膠柱純化該物質，用4％-15％甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脫，得到標題化合物，為無色膠狀物(4.3mg，47％)。1H NMR(旋轉異構體的～1：1混合物)

旋轉異構體1：1H NMR(甲醇-d4)δ：5.20(s，1H)，4.65(d，J＝10.5Hz，1H)，4.02-4.09(m，1H)，3.89-3.98(m，2H)，3.84(s，1H)，3.78-3.82(m，1H)，3.68(s，1H)，3.11(s，3H)，2.15(s，3H)

旋轉異構體2：1H NMR(甲醇-d4)δ：5.37(s，1H)，4.02-4.09(m，1H)，3.89-3.98(m，3H)，3.84-3.87(m，1H)，3.79-3.83(m，1H)，3.71(d，J＝8.2Hz，1H)，2.98(s，3H)，2.15(s，3H)

13C NMR(甲醇-d4)δ：175.4，104.6，85.8，71.3，69.7，66.2，62.3，59.1，28.8，22.7；LCMS(ES-)：0.41分鐘，246.2(M-H)-。

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]-N-甲基甲磺醯胺(30)

將N-((1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-((苄氧基)甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基)-N-甲基甲磺醯胺(l-o-2)(11mg，0.020mmol)、1-甲基-1,4-環己二烯(0.093ml，0.81mmol)、10％披Pd活性炭(20mg)和2-丙醇(2.5mL)的混合物在80℃攪拌3小時。加入水(0.2ml)，將全部混合物負載在矽膠上，用旋轉蒸發器乾燥。進行矽膠柱色譜法，用4％-15％甲醇的二氯甲烷溶液梯度洗脫，得到標題化合物，為無色膠狀物(2.9mg，51％)。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.26(d，J＝1.2Hz，1H)，4.00-4.05(m，1H)，3.92-3.96(m，1H)，3.89-3.91(m，1H)，3.84(d，J＝1.2Hz，1H)，3.77-3.83(m，2H)，3.68(d，J＝7.8Hz，1H)，3.35(s，3H)，2.93(s，3H)；13C NMR(甲醇-d4)δ：106.1，85.5，71.5，69.7，65.9，62.6，62.2，37.8，30.4；LCMS(ES-)：0.42分鐘，282.0(M-H)-。

[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]甲基氨基甲酸叔丁酯(31)

向5mL微波小瓶中的{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-雙(苄氧基)-1-[(苄氧基)甲基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}甲基氨基甲酸叔丁酯(l-o-3)(75mg，0.13mmol)在2-丙醇(1.0mL)和四氫呋喃(0.5mL)中的溶液中加入1-甲基-1,4-環己二烯(0.18ml，1.56mmol)，然後添加10％披鈀碳(50％溼的wt/wt，20.0mg)。密封小瓶，加熱至80℃4小時。4小時後，TLC(10％甲醇/二氯甲烷)顯示反應未完成，但形成了所期望的產物。再加入1-甲基-1,4-環己二烯(0.18ml，1.6mmol)，再密封該反應體系，加熱至80℃過夜(18小時)。總計22小時後，用甲醇稀釋該反應體系，通過Life Sciences Acrodisc 25mm注射器式濾器過濾。減壓濃縮濾液。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物(29.0mg，73％)，為固體。方法C：3分鐘運行

LRMS[M+Na＝328]。化合物為兩種旋轉異構體的～1：1混合物：

旋轉異構體1：1H NMR(甲醇-d4)δ：5.22(br.s.，1H)，4.19(d，J＝10.6Hz，1H)，4.00(d，J＝10.6Hz，1H)，3.90-3.95(m，2H)，3.77-3.82(m，2H)，3.67(d，J＝7.6Hz，1H)，2.94(s，3H)，1.47(s，9H)

旋轉異構體2：1H NMR(甲醇-d4)δ：5.21(br.s.，1H)，4.05-4.10(m，1H)，4.00(d，J＝10.6Hz，1H)，3.90-3.95(m，2H)，3.77-3.82(m，2H)，3.67(d，J＝7.6Hz，1H)，2.94(s，3H)，1.47(s，9H)

(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(羥基甲基)-4-(甲基氨基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇鹽酸鹽(32)

向[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]甲基氨基甲酸叔丁酯(31)(25.3mg，0.0829mmol)在二氯甲烷(5.0mL)中的溶液中加入4.0M氯化氫的二烷溶液(0.518ml，2.07mmol)，將該反應體系在室溫攪拌48小時。48小時後，減壓濃縮該反應體系。用乙酸乙酯(5mL)洗滌粗物質，產生固體，用庚烷(10mL)稀釋，減壓濃縮，得到標題化合物，為固體(30.0mg，130％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝206]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.63(s，1H)，3.90-3.97(m，3H)，3.84(s，2H)，3.78(d，J＝8.2Hz，1H)，3.10-3.20(m，1H)，2.84(s，3H)

N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-1-(15-苯基-2,5,8,11,14-五氧雜十五烷-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-3)

向N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(羥基甲基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(I-e-1)(1200mg，4.39mmol)和13-碘-1-苯基-2,5,8,11-四氧雜十三烷(參見Synthetic Metals，162(23)，2163-2170；2012；7000mg，17.76mmol)在二氯甲烷(30.0mL)中的溶液中加入酸式硫酸四丁銨(2290mg，6.60mmol)，然後添加12.5M氫氧化鈉水溶液(30.0ml，380mmol)。將該反應體系在室溫攪拌64小時。64小時後，用水稀釋該反應體系和二氯甲烷。分離各層，再用二氯甲烷萃取水層2次。用1N鹽酸洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮。將得到的粗物質加入乙酸乙酯(50mL)，攪拌30分鐘。過濾得到的沉澱。減壓濃縮濾液。使用CombiFlash Rf(ISCO RediSep Gold 80g矽膠柱)純化粗物質，即刻用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，然後用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物(1267mg，53.5％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+Na＝562]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.13-7.45(m，5H)，5.22(d，J＝1.6Hz，1H)，4.55(s，2H)，4.30(d，J＝5.9Hz，1H)，4.15(t，J＝6.4Hz，1H)，3.89-3.97(m，2H)，3.85(d，J＝7.8Hz，1H)，3.73-3.79(m，2H)，3.58-3.71(m，16H)，1.98(s，3H)，1.48(s，3H)，1.33(s，3H)

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(15-苯基-2,5,8,11,14-五氧雜十五烷-1-基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(33)

將N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-1-(15-苯基-2,5,8,11,14-五氧雜十五烷-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-3)(60.0mg，0.11mmol)在乙酸(4.0mL)、甲醇(1.0mL)和水(1.0mL)中的溶液加熱至70℃過夜。18小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(42.5mg，77％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝500]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.14-7.45(m，5H)，5.21(s，1H)，4.55(s，2H)，3.92-4.01(m，2H)，3.88(d，J＝4.3Hz，1H)，3.77(d，J＝7.8Hz，1H)，3.70(dd，J＝9.8，3.9Hz，1H)，3.58-3.68(m，18H)，1.98(s，3H)

N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-2)

在5℃(冰/水)向攪拌的N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(羥基甲基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(I-e-1)(10.0g，36.59mmol，1.0eq)在N,N-二甲基甲醯胺(200ml)中的溶液中加入氫氧化鉀(8.21g，146.37mmol，4eq)。添加後，將該反應混合物在5℃攪拌30分鐘。然後在5℃(冰/水)將1-疊氮基-2-{2-[2-(2-碘乙氧基)乙氧基]乙氧基}乙烷(36.13g，109.78mmol，3.0eq)加到該反應混合物中。將該反應混合物在5℃(冰/水)攪拌30分鐘，將該反應混合物加熱至27℃，在27℃攪拌18小時。18小時後，將該反應混合物傾入冰/水，用二氯甲烷(400ml)萃取3次。用水(400ml)、鹽水(500ml)將合併的有機層洗滌3次，用硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，得到粗產物。通過矽膠色譜法純化粗產物，用二氯甲烷：甲醇＝100：1-40：1洗脫，得到標題化合物(10.0g，57.6％)，為無色油狀物。方法C：3分鐘運行LRMS[M+45(甲酸)＝519]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.23(d，J＝2.0Hz，1H)，4.31(d，J＝5.9Hz，1H)，4.16(t，J＝6.6Hz，1H)，3.93-3.97(m，1H)，3.90-3.93(m，J＝2.0Hz，1H)，3.86(d，J＝7.8Hz，1H)，3.78(d，J＝3.9Hz，1H)，3.75(d，J＝1.6Hz，1H)，3.61-3.71(m，14H)，3.37(t，J＝4.9Hz，2H)，1.98(s，3H)，1.49(s，3H)，1.34(s，3H)

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(34)

將N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-2)(82.0mg，0.17mmol)在乙酸(6.0mL)、甲醇(1.45mL)和水(1.45mL)中的溶液加熱至70℃過夜。18小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為油狀物(43.3mg，58％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M-1＝433]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.21(d，J＝0.8Hz，1H)，3.98(d，J＝9.8Hz，1H)，3.94(d，J＝9.8Hz，1H)，3.89(d，J＝4.3Hz，1H)，3.78(d，J＝7.8Hz，1H)，3.72(dd，J＝10.1，4.3Hz，1H)，3.61-3.69(m，16H)，3.38(t，J＝4.9Hz，2H)，1.99(s，3H)

N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-1-(2,5,8,11-四氧雜十四-13-烯-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-4)

向N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(羥基甲基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(I-e-1)(50.0mg，0.18mmol)和3-{2-[2-(2-碘乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙-1-烯(參見Organic Letters，5(11)，1887-1890；2003，139.0mg，0.463mmol)在二氯甲烷(1.5mL)中的溶液中加入酸式硫酸四丁銨(95.3mg，0.275mmol)，然後添加12.5M氫氧化鈉水溶液(0.75ml，9.4mmol)。將該反應體系在室溫攪拌過夜。18小時後，用水稀釋該反應體系和二氯甲烷。分離各層，用二氯甲烷將水層萃取2次。用1N鹽酸、水洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮。用乙酸乙酯(5mL)稀釋得到的粗物質，將得到的沉澱在室溫攪拌30分鐘。過濾沉澱，用乙酸乙酯(2x5mL)洗滌濾餅。減壓濃縮濾液。使用CombiFlash Rf(ISCO RediSep Gold 4g矽膠柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫。然後用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫柱，得到標題化合物(13.6mg，17％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+Na＝468]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.92(ddt，J＝16.8，10.9，5.7Hz，1H)，5.28(dd，J＝17.4，1.4Hz，1H)，5.23(d，J＝1.6Hz，1H)，5.16(dd，J＝10.3，1.0Hz，1H)，4.31(d，J＝5.9Hz，1H)，4.15(t，J＝6.4Hz，1H)，4.02(d，J＝5.5Hz，2H)，3.89-3.97(m，2H)，3.86(d，J＝7.8Hz，1H)，3.73-3.80(m，2H)，3.56-3.72(m，12H)，1.98(s，3H)，1.49(s，3H)，1.34(s，3H)。

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(2,5,8,11-四氧雜十四-13-烯-1-基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(35)

將N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-1-(2,5,8,11-四氧雜十四-13-烯-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-4)(13.0mg，0.029mmol)在乙酸(1.0mL)、甲醇(0.25mL)和水(0.25mL)中的溶液加熱至70℃過夜。18小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物(6.5mg，55％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝406]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.80-6.09(m，1H)，5.28(dd，J＝17.2，1.6Hz，1H)，5.21(d，J＝0.8Hz，1H)，5.16(dd，J＝10.5，1.2Hz，1H)，4.02(d，J＝5.5Hz，2H)，3.98(d，J＝9.8Hz，1H)，3.95(d，J＝10.1Hz，1H)，3.89(d，J＝3.9Hz，1H)，3.78(d，J＝8.2Hz，1H)，3.71(dd，J＝10.0，4.5Hz，1H)，3.57-3.68(m，14H)，1.99(s，3H)。

N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-1-(2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-炔-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-5)

向N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-1-(15-苯基-2,5,8,11,14-五氧雜十五烷-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(I-e-1)(100.0mg，0.366mmol)和3-{2-[2-(2-碘乙氧基)乙氧基]乙氧基}丙-1-炔(參見Synthesis，(10)，1639-1644；2010，425.0mg，1.43mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中加入酸式硫酸四丁銨(191mg，0.550mmol)，然後添加12.5M氫氧化鈉水溶液(1.5ml，19mmol)。將該反應體系在室溫攪拌過夜。18小時後，用水稀釋該反應體系和二氯甲烷。分離各層，用二氯甲烷將水層萃取2次。用1N鹽酸、水洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮。用乙酸乙酯(20mL)稀釋得到的粗物質，將得到的沉澱在室溫攪拌30分鐘。過濾沉澱，用乙酸乙酯(2x15mL)洗滌濾餅。減壓濃縮濾液。使用CombiFlash Rf(ISCO RediSep Gold 12g矽膠柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫。然後用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫柱，得到標題化合物(70.0mg，43％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+Na＝466]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.23(d，J＝1.6Hz，1H)，4.31(d，J＝5.9Hz，1H)，4.19(d，J＝2.3Hz，2H)，4.16(t，J＝6.4Hz，1H)，3.90-3.97(m，2H)，3.86(d，J＝7.8Hz，1H)，3.74-3.79(m，2H)，3.60-3.72(m，12H)，2.85(t，J＝2.3Hz，1H)，1.98(s，3H)，1.49(s，3H)，1.34(s，3H)

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-炔-1-基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(36)

將N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-1-(2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-炔-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-5)(70.0mg，0.16mmol)在乙酸(4.0mL)、甲醇(1.0mL)和水(1.0mL)中的溶液加熱至70℃過夜。18小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(57.6mg，90％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝404]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.22(s，1H)，4.19(d，J＝1.8Hz，2H)，3.98(d，J＝10.0Hz，1H)，3.94(d，J＝10.0Hz，1H)，3.89(d，J＝4.1Hz，1H)，3.78(d，J＝8.2Hz，1H)，3.71(dd，J＝10.0，4.1Hz，1H)，3.60-3.69(m，14H)，2.86(s，1H)，1.99(s，3H)

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(13-氨基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(37)

使N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(34)(40.0mg，0.092mmol)在乙醇(2mL)中的溶液通過H-立方體(條件：催化劑(10％披鈀碳(30x4mm)，流速：1毫升/分鐘，溫度：室溫，壓力＝全H2)。在通過H-立方體後，採集該溶液，減壓濃縮，得到標題化合物，為膠狀物(17.2mg，46％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝409]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.21(s，1H)，3.92-4.00(m，2H)，3.89(d，J＝3.9Hz，1H)，3.78(d，J＝8.2Hz，1H)，3.69-3.74(m，1H)，3.61-3.69(m，14H)，3.56(t，J＝5.1Hz，2H)，2.85(t，J＝5.1Hz，2H)，1.99(s，3H)

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(13-羥基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(38)

使溶於甲醇(2mL)的N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-(15-苯基-2,5,8,11,14-五氧雜十五烷-1-基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺(33)(43mg，0.086mmol)通過H-立方體(條件：催化劑(20％氫氧化鈀碳(30x4mm)，流速：1毫升/分鐘，溫度：60℃，壓力＝全H2)。在通過H-立方體後，採集該溶液，減壓濃縮，得到標題化合物(32.2mg，91％)。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.21(s，1H)，3.98(d，J＝9.4Hz，1H)，3.95(d，J＝10.1Hz，1H)，3.89(d，J＝4.3Hz，1H)，3.78(d，J＝8.2Hz，1H)，3.71(dd，J＝9.8，4.3Hz，1H)，3.61-3.69(m，16H)，3.54-3.59(m，2H)，1.99(s，3H)。13C NMR(甲醇-d4)δ：174.1，102.6，84.3，73.8，72.5，71.7，71.7(2)，71.6，71.5，71.4，70.5，70.2，69.0，62.4，56.4，22.7

N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(13-羥基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-6)

使溶於甲醇(150mL)的N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-1-(15-苯基-2,5,8,11,14-五氧雜十五烷-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-3)(2.897g，5.37mmol)通過H-立方體(條件：催化劑(10％披鈀碳(30x4mm)，流速：1毫升/分鐘，溫度：60℃，壓力＝全H2)。在通過H-立方體後，採集該溶液，減壓濃縮，得到標題化合物，為膠狀物(2.5g，100％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+1＝450]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.23(d，J＝1.6Hz，1H)，4.31(d，J＝5.9Hz，1H)，4.16(t，J＝6.4Hz，1H)，3.89-3.97(m，2H)，3.86(d，J＝7.8Hz，1H)，3.74-3.80(m，2H)，3.60-3.71(m，14H)，3.53-3.59(m，2H)，1.98(s，3H)，1.49(s，3H)，1.34(s，3H)

N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-1-(13-氧代-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-6a)

向N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(13-羥基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-6)(175mg，0.389mmol)在二氯甲烷(5.0mL)中的溶液中加入戴斯-馬丁(Dess-Martin)試劑(354mg，0.584mmol)，產生混合物。～30分鐘後，該反應體系幾乎變均勻。3小時後，用二氯甲烷稀釋該反應體系，通過C鹽墊過濾，用二氯甲烷洗滌。減壓濃縮濾液。使用CombiFlash Rf(RediSep 24g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫。減壓濃縮包含期望的產物的試管。用二氯甲烷(4mL)稀釋得到的物質，用乙醚(10mL)稀釋，得到白色沉澱。潷析該溶液，用二氯甲烷(2mL)和乙醚(8mL)稀釋固體，第二次潷析。使潷析的溶液通過帶有0.45um尼龍膜的Life Science Acrodisc 25mm注射器式濾器。減壓濃縮採集的溶液，得到標題化合物，為膠狀物(65.0mg，37％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝448]。1H NMR(氯仿-d)δ：9.74(s，1H)，5.63(d，J＝9.0Hz，1H)，5.34(d，J＝1.6Hz，1H)，4.23(d，J＝5.9Hz，1H)，4.17(s，2H)，4.09-4.15(m，1H)，4.01(t，J＝6.2Hz，1H)，3.97(d，J＝10.1Hz，1H)，3.77-3.85(m，3H)，3.68-3.76(m，5H)，3.61-3.68(m，7H)，2.03(s，3H)，1.56(s，3H)，1.36(s，3H)。

1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-酸(38A)

用2-甲基-2-丁烯(1.0mL)處理N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-4,4-二甲基-1-(13-氧代-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-6a)(60.0mg，0.13mmol)在四氫呋喃/叔丁醇(1.5mL/1.5mL)中的溶液，然後通過玻璃移液管加入亞氯酸鈉(169.4mg，2.01mmol)和磷酸鈉(250.0mg，2.58mmol)(一鈉和一水合物，250mg，2.58mmol)在水(1.5mL)中的溶液。將該反應體系在室溫攪拌24小時。24小時後，將該反應混合物傾入水，用乙酸乙酯萃取(3次)。棄去有機層。減壓濃縮水層，將得到的粗產物溶於甲醇(10mL)和二氯甲烷(100mL)，過濾得到的混合物。減壓濃縮濾液。將得到的物質溶於甲醇(5mL)和二氯甲烷(50mL)，過濾得到的混合物。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g矽膠柱)純化濾液，用0-100％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物，為鈉鹽(40mg，無，67％)。LRMS[M+1＝424]；1H NMR(甲醇-d4)δ：5.24(s，1H)，4.14(s，2H)，3.97(d，J＝10.1Hz，2H)，3.90(d，J＝3.9Hz，1H)，3.81(d，J＝7.8Hz，1H)，3.63-3.77(m，15H)，2.01(s，3H)

甲磺酸1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基酯(l-e-7)

向甲磺酸1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基酯(l-e-6)(1117mg，2.49mmol)在二氯甲烷(12.4mL)中的溶液中加入三乙胺(1.05ml，7.45mmol)，使用冰浴冷卻至0℃，然後添加甲磺醯氯(0.232ml，2.98mmol)。將該反應體系緩慢地溫熱至室溫，在室溫攪拌1.5小時。1.5小時後，用水使反應停止，萃取。分離各層，再用二氯甲烷萃取水層。用鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮粗產物，得到標題化合物(1300.0mg，99.2％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+Na＝550]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.23(d，J＝2.0Hz，1H)，4.34-4.40(m，2H)，4.31(d，J＝5.9Hz，1H)，4.15(t，J＝6.4Hz，1H)，3.89-3.97(m，2H)，3.86(d，J＝7.8Hz，1H)，3.72-3.81(m，4H)，3.59-3.71(m，12H)，3.11(s，3H)，1.98(s，3H)，1.48(s，3H)，1.34(s，3H)

硫代乙酸S-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}酯(l-e-8)

向甲磺酸1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基酯(l-e-7)(125.0mg，0.237mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(2mL)中的溶液中加入硫代乙酸鉀(135mg，1.18mmol)，將該反應體系在室溫攪拌64小時。64小時後，用水稀釋該反應體系，用乙酸乙酯萃取3次。用鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(95.2mg，79.2％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+Na＝530]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.23(d，J＝1.6Hz，1H)，4.31(d，J＝5.9Hz，1H)，4.16(t，J＝6.4Hz，1H)，3.90-3.97(m，2H)，3.86(d，J＝7.8Hz，1H)，3.74-3.79(m，2H)，3.55-3.72(m，14H)，3.08(t，J＝6.6Hz，2H)，2.32(s，3H)，1.98(s，3H)，1.49(s，3H)，1.34(s，3H)

硫代乙酸S-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}酯(39)

將硫代乙酸S-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}酯(l-e-8)(81.0mg，0.16mmol)在乙酸(6.0mL)、甲醇(1.45mL)和水(1.45mL)中的溶液加熱至70℃過夜。18小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(53.7mg，72％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝468]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.23(s，1H)，4.00(d，J＝9.8Hz，1H)，3.97(d，J＝9.8Hz，1H)，3.91(d，J＝4.3Hz，1H)，3.80(d，J＝7.8Hz，1H)，3.73(dd，J＝10.1，4.3Hz，1H)，3.63-3.70(m，14H)，3.60(t，J＝6.6Hz，2H)，3.10(t，J＝6.4Hz，2H)，2.34(s，3H)，2.01(s，3H)

N-{(1S,2R,3R,4R,5S)-2,3-二羥基-1-[13-(吡啶-2-基二硫烷基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基]-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基}乙醯胺(40)

向硫代乙酸S-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}酯(39)(50mg，0.11mmol)在甲醇(3mL)中的溶液中添加0.5M甲醇鈉的甲醇溶液(1.28ml，0.642mmol)，將該反應體系在室溫攪拌45分鐘。45分鐘後，加入乙酸(42mg，0.70mmol，0.040mL)，攪拌10分鐘。然後將甲醇溶液滴加到2,2'-二硫烷二基二吡啶(35.3mg，0.160mmol)在甲醇(2mL)和乙酸(1mL)的混合物中的攪拌溶液中。將該反應體系在室溫攪拌2小時。2小時後，減壓濃縮該反應體系。使用CombiFlash Rf(RediSep Gold 4g矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物(31.4mg，55％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+Na＝557]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.39(d，J＝4.3Hz，1H)，7.94(d，J＝8.2Hz，1H)，7.83(td，J＝7.8，1.6Hz，1H)，7.22(dd，J＝6.8，5.3Hz，1H)，5.21(s，1H)，3.92-4.00(m，2H)，3.88(d，J＝4.3Hz，1H)，3.77(d，J＝7.8Hz，1H)，3.71(t，J＝6.0Hz，3H)，3.59-3.67(m，12H)，3.52-3.58(m，2H)，3.02(t，J＝6.0Hz，2H)，1.99(s，3H)

{1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-基}氨基甲酸叔丁酯(l-f-3)

有關(I-f-3)的合成，見Journal of Organic Chemistry，73(14)，5602-5605；2008。

1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-胺鹽酸(l-p-1)

向{1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-基}氨基甲酸叔丁酯(l-f-3)(3000mg，8.945mmol)在二氯甲烷(45mL)中的溶液中加入4.0M氯化氫的二烷溶液(20ml，89.4mmol)，將該反應體系在室溫攪拌18小時。18小時後，減壓濃縮該反應體系，得到油狀物。向粗混合物中加入乙酸乙酯(20mL)，攪拌得到的混合物。加入庚烷(20mL)，將該混合物在室溫攪拌2小時。過濾該物質，用乙酸乙酯洗滌濾餅，通過抽真空乾燥2小時，得到標題化合物(2140mg，88％)。1H NMR(甲醇-d4)δ：4.25(s，6H)，3.72(s，6H)，2.97(s，3H)。

[6-({1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-基}氨基)-6-氧代己基]氨基甲酸苄酯(l-q-1)

向6-{[(苄氧基)羰基]氨基}己酸(2910mg，11.0mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(4mL)和四氫呋喃(20.0mL)中的溶液中加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N』-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(l-p-1)(2150mg，11.0mmol)和1-羥基苯並三唑(1480mg，11.0mmol)，將該反應體系在室溫攪拌1小時，在此過程中，反應體系變均勻。向攪拌的反應混合物中一次加入純淨的1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-胺鹽酸(2130mg，7.84mmol)，然後添加N,N-二異丙基乙胺(5.46ml，31.4mmol)，將該反應體系加熱至60℃24小時。將該反應體系冷卻至室溫，攪拌24小時.用水使反應停止(150mL)，用乙酸乙酯萃取。再用乙酸乙酯將水層洗滌1次。用鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep80g矽膠柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物，為油狀物，靜置時固化(3250mg，86％)。方法C：MassLynx\Acid_3.0Min.olp–LRMS[M+1＝483]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.10-7.46(m，5H)，5.06(s，2H)，4.14(d，J＝2.0Hz，6H)，3.79(s，6H)，3.03-3.20(m，2H)，2.83(t，J＝2.1Hz，3H)，2.18(t，J＝7.2Hz，2H)，1.59(五重峰，J＝7.3Hz，2H)，1.44-1.54(m，2H)，1.28-1.40(m，2H)

6-(吡啶-2-基二硫烷基)己酸(l-r-1)

在氮氣氣氛下攪拌2,2'-二硫烷二基二吡啶(1490mg，6.75mmol)在乙醇(12.0mL)和乙酸(0.291mL)的混合物中的溶液，然後滴加在乙酸乙酯(6.0mL)中的6-硫烷基己酸(1000.0mg，6.75mmol)。將該反應體系在室溫攪拌2小時。2小時後，減壓濃縮該反應體系。使用CombiFlash Rf(RediSep Gold 40g矽膠柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯(2％乙酸調節劑)/庚烷梯度洗脫，得到粗製標題化合物(1170mg)。使用CombiFlash Rf(RediSep Gold 40g矽膠柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯(2％乙酸調節劑)/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物，為油狀物(544mg，31％)。

1-{[6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯基]氧基}吡咯烷-2,5-二酮(l-s-1)

向6-(吡啶-2-基二硫烷基)己酸(l-r-1)(705mg，2.2mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(4mL)中的溶液中加入N-羥基琥珀醯亞胺(306mg，2.66mmol)，然後加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N』-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(520mg，2.66mmol)。將該反應體系在室溫攪拌過夜。第二天早晨，用水使反應停止，用二氯甲烷萃取3次。用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 40g Gold柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物(364mg，47％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+1＝355]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.39(d，J＝4.7Hz，1H)，7.85-7.90(m，1H)，7.77-7.84(m，1H)，7.21(dd，J＝6.6，5.5Hz，1H)，2.77-2.90(m，6H)，2.61(t，J＝7.2Hz，2H)，1.63-1.83(m，4H)，1.46-1.59(m，2H)

N-{1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-基}-6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯胺(l-t-1)

向1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-胺鹽酸(l-p-1)(100.0mg，0.324mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(2.0mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.339ml，1.95mmol)，攪拌10分鐘，然後一次添加1-{[6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯基]氧基}吡咯烷-2,5-二酮(l-s-1)(138mg，0.389mmol)，然後將該反應體系加熱至60℃16小時。16小時後，用水稀釋該反應體系，用乙酸乙酯萃取3次。用水、鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g矽膠柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(66.7mg，43％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+Na＝497]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.39(d，J＝4.7Hz，1H)，7.85-7.90(m，1H)，7.78-7.84(m，1H)，7.19-7.25(m，1H)，4.06-4.23(m，6H)，3.72-3.84(m，6H)，2.78-2.87(m，5H)，2.12-2.20(m，2H)，1.71(五重峰，J＝7.3Hz，2H)，1.57(五重峰，J＝7.3Hz，2H)，1.36-1.50(m，2H)

1-{[4-(苄氧基)丁醯基]氧基}吡咯烷-2,5-二酮(l-u-1)

向4-(苄氧基)丁酸(1000mg，3.77mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(7.54mL)中的溶液中加入N-羥基琥珀醯亞胺(521mg，4.52mmol)，然後加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N』-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(885mg，4.52mmol)。將該反應體系在室溫攪拌過夜。第二天早晨，用水使反應停止，用二氯甲烷萃取3次。用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 40g Gold柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物(1098mg，100％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+Na＝314]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.11-7.50(m，5H)，4.51(s，2H)，3.56(t，J＝6.0Hz，2H)，2.81(s，4H)，2.73(t，J＝7.2Hz，2H)，1.99(五重峰，J＝6.6Hz，2H)

4-(苄氧基)-N-{1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)-甲基]丙-2-基}丁醯胺(l-v-1)

向1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-胺三氟乙酸(l-p-1)(750.0mg，1.62mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(5mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(1.69ml，9.71mmol)，攪拌10分鐘，然後添加在N,N-二甲基甲醯胺(1mL)中的1-{[4-(苄氧基)丁醯基]氧基}吡咯烷-2,5-二酮(l-u-1)(566mg，1.94mmol)，然後將該反應體系加熱至60℃72小時。72小時後，用水稀釋該反應體系，用乙酸乙酯萃取3次。用水、鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 24g矽膠柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(495mg，無，74％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+1＝412]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.21-7.41(m，5H)，4.51(s，2H)，4.12(d，J＝2.3Hz，6H)，3.78(s，6H)，3.51(t，J＝6.2Hz，2H)，2.82(t，J＝2.3Hz，3H)，2.28(t，J＝7.2Hz，2H)，1.79-1.94(m，2H)

(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(l-w-1)

在配備攪拌棒的50mL圓底燒瓶中加入{1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-基}氨基甲酸叔丁酯(l-f-3)(305.0mg，0.909mmol)，向其中加入在叔丁醇(12mL)中的N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-2)(1433.0mg，3.020mmol)，接著加入水(5mL)，然後添加純淨的抗壞血酸鈉(1840mg，9.09mmol)，用氮氣將該反應混合物吹掃10分鐘，然後在1mL水(去離子水)中添加硫酸銅(II)(147mg，0.909mmol)，在室溫攪拌24小時。24小時後，通過將該反應混合物加到飽和氯化銨(30mL)和濃氫氧化銨(3mL)中使反應停止，用二氯甲烷(20mL)萃取3次。用硫酸鎂乾燥合併的有機層，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 80g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為白色泡沫體(789.0mg，無，49.3％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+45-1＝1804]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.00(s，3H)，5.23(d，J＝1.6Hz，3H)，4.51-4.63(m，12H)，4.29(d，J＝5.9Hz，3H)，4.16(t，J＝6.4Hz，3H)，3.87-3.96(m，12H)，3.84(d，J＝7.8Hz，3H)，3.73-3.80(m，6H)，3.64-3.72(m，12H)，3.54-3.63(m，30H)，1.98(s，9H)，1.48(s，9H)，1.40(s，9H)，1.33(s，9H)

N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)-6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯胺(l-x-1)

向N-{1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-基}-6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯胺(l-t-1)(66.0mg，0.14mmol)和N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-2)(219mg，0.459mmol)在叔丁醇(2mL)中的溶液中加入水(0.5ml，去離子水)。將抗壞血酸鈉(84.3mg，0.417mmol)作為固體加入，用氮氣將該反應混合物吹掃5分鐘，然後添加硫酸銅(II)(6.73mg，0.0417mmol)的水(0.5ml，去離子水)溶液，在室溫攪拌24小時。通過將該反應混合物加到飽和氯化銨(20mL)和濃氫氧化銨(2mL)中使反應停止，用二氯甲烷(15mL)萃取3次。用鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到不純的標題化合物(105.0mg，無，40％)。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g Gold矽膠柱)純化粗物質(105.0mg)，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(94.5mg，36％)。方法C：MassLynx\Acid_3.0Min.olp–LRMS[M+Na＝1921]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.38(d，J＝4.7Hz，1H)，7.97(s，3H)，7.82-7.88(m，1H)，7.78-7.81(m，1H)，7.20(t，J＝5.9Hz，1H)，5.23(s，3H)，4.52-4.62(m，12H)，4.29(d，J＝5.9Hz，3H)，4.15(t，J＝6.4Hz，3H)，3.86-3.96(m，12H)，3.81-3.85(m，3H)，3.72-3.80(m，12H)，3.54-3.71(m，36H)，2.79(t，J＝7.2Hz，2H)，2.16(t，J＝7.2Hz，2H)，1.98(s，9H)，1.64-1.73(m，2H)，1.50-1.57(m，2H)，1.48(s，9H)，1.42(d，J＝6.6Hz，2H)，1.32(s，9H)

{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基甲酸苄酯(l-y-1)

向配備攪拌棒的250mL圓底燒瓶中加入[6-({1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-基}氨基)-6-氧代己基]氨基甲酸苄酯(l-q-1)(880.0mg，1.82mmol)，向其中加入在叔丁醇(26mL)中的N-[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]乙醯胺(l-e-2)(3075.0mg，6.8mmol)，接著添加水(12mL)，然後添加純淨的抗壞血酸鈉(3690mg，18.2mmol)，用氮氣將該反應體系吹掃10分鐘。加入在1mL水中的硫酸銅(II)(294mg，1.82mmol)，在室溫攪拌24小時。24小時後，通過將該反應混合物加到飽和氯化銨(50mL)和濃氫氧化銨(5mL)中使反應停止，用二氯甲烷(45mL)萃取3次。用硫酸鎂乾燥合併的有機層，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 80g Gold矽膠柱)純化粗物質，用梯度洗脫0-20％甲醇/二氯甲烷，得到標題化合物，為固體(1890.0mg，54.4％)和不純的標題化合物。使用CombiFlash Rf(RediSep 80g Gold矽膠柱)純化粗物質(1270.0mg，36.5％)，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，(607.0mg，17.5％)。標題化合物的總收率為2.497g(72％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝1907]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.99(s，3H)，7.21-7.47(m，5H)，5.25(d，J＝1.6Hz，3H)，5.07(s，2H)，4.53-4.62(m，12H)，4.31(d，J＝5.9Hz，3H)，4.18(t，J＝6.4Hz，3H)，3.88-3.98(m，12H)，3.85(d，J＝7.8Hz，3H)，3.74-3.81(m，12H)，3.53-3.71(m，36H)，3.10(q，J＝6.2Hz，2H)，2.18(t，J＝7.2Hz，2H)，2.00(s，9H)，1.53-1.65(m，2H)，1.50(s，11H)，1.34(s，11H)

N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)-6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯胺(41)

將N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)-6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯胺(I-x-1)(94.5mg，0.0498mmol)在乙酸(4mL)、甲醇(1mL)和水(1.0mL)中的溶液加熱至70℃64小時。64小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮，得到不純的標題化合物，為膠狀物(85.3mg)。使用反相色譜法，應用如下條件純化粗物質，得到標題化合物，為膠狀物(47.6mg，53.8％)。

純化條件：

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC純化。柱：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：80.0％H2O/20.0％乙腈線性至65％H2O/35％乙腈，8.5分鐘至0％H2O/100％MeCN，至9.0分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，9.0-10.0分鐘。流速：25毫升/分鐘，得到47.6mg標題化合物，為膠狀物(保留時間2.87，觀測到的質量＝890.4376)。

QC條件：

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；95.0％H2O/5.0％乙腈線性至50％H2O/50％乙腈，3.75分鐘，至5％H2O/95％乙腈，至4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘－5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘。保留時間＝2.87；觀察到的質量＝890.4376。方法C：3分鐘運行LRMS[1/2M＝889]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.41(d，J＝4.7Hz，1H)，7.99(s，3H)，7.84-7.91(m，2H)，7.26(t，J＝5.9Hz，1H)，5.21(s，3H)，4.58(t，J＝5.0Hz，6H)，4.56(s，6H)，3.95(t，J＝8.8Hz，6H)，3.89(t，J＝5.0Hz，6H)，3.86-3.88(m，3H)，3.74-3.78(m，9H)，3.71(dd，J＝9.4，4.1Hz，3H)，3.54-3.67(m，42H)，2.80(t，J＝7.0Hz，2H)，2.16(t，J＝7.3Hz，2H)，1.99(s，9H)，1.68(五重峰，J＝7.3Hz，2H)，1.50-1.57(m，2H)，1.35-1.44(m，2H)

N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(13-{4-[(3-[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-2-氨基丙氧基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺–鹽酸鹽(42)

將(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(l-w-1)(210mg，0.119mmol)在乙酸(8.0mL)、甲醇(2.0mL)和水(2.0mL)中的溶液加熱至70℃過夜。18小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質和甲醇，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮。用二氯甲烷(10mL)和甲醇(4mL)稀釋粗物質，向其中加入4.0M氯化氫的二烷溶液(2.0ml，8mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌過夜。18小時後，減壓濃縮該反應體系。用乙酸乙酯(1mL)稀釋粗物質，向其中加入庚烷(10mL)，減壓濃縮。然後將該物質放入高度真空中18小時，得到標題化合物，為固體(198.8mg，106％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+Na＝1561]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.13-8.21(m，3H)，5.22(s，3H)，4.71(s，9H)，4.65(d，J＝4.7Hz，6H)，3.92-4.00(m，12H)，3.90(d，J＝4.3Hz，3H)，3.58-3.80(m，51H)，2.02(s，9H)

6-疊氮基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(43)

向N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(13-{4-[(3-[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-2-氨基丙氧基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺–鹽酸鹽(42)(25mg，0.016mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0111ml，0.0635mmol)，攪拌10分鐘，然後加到純1-[(6-疊氮基己醯基)氧基]吡咯烷-2,5-二酮(參見PCT Int.Appl.，2011034951，24Mar 2011，6.05mg，0.0238mmol)中，將該反應體系在室溫攪拌18小時。然後將該反應體系加熱至60℃32小時。32小時後，減壓濃縮該反應體系。用二甲亞碸(1mL)稀釋粗物質，通過注射器式濾器過濾，使用反相色譜法，應用如下看到的條件純化粗物質，得到標題化合物，為膠狀物(6.2mg，23％)。

純化條件

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC純化(柱：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；90.0％H2O/10.0％乙腈線性至70％H2O/30％乙腈，10.5分鐘，70％H2O/30％乙腈線性至0％H2O/100％MeCN，0.5分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，11.0分鐘至12.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.77分鐘；觀察到的質量＝839.7097。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝1678]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.00(s，3H)，5.21(s，3H)，4.58(t，J＝4.7Hz，6H)，4.57(s，6H)，3.95(t，J＝10.0Hz，6H)，3.85-3.92(m，9H)，3.74-3.80(m，9H)，3.71(dd，J＝10.0，4.1Hz，3H)，3.55-3.68(m，42H)，3.25(t，J＝6.5Hz，2H)，2.19(t，J＝7.3Hz，2H)，1.99(s，9H)，1.52-1.62(m，4H)，1.33-1.41(m，2H)

N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)庚-6-烯醯胺(44)

向N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(13-{4-[(3-[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-2-氨基丙氧基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺–鹽酸鹽(42)(25mg，0.016mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0111ml，0.0635mmol)，攪拌10分鐘，然後加到純1-(庚-6-烯醯基氧基)吡咯烷-2,5-二酮(參見Angewandte Chemie，國際版，51(25)，6144-6148，S6144/1-S6144/53；2012，5.36mg，0.0238mmol)中，將該反應體系在室溫攪拌18小時。然後將該反應體系加熱至60℃32小時。32小時後，減壓濃縮該反應體系。用二甲亞碸(1mL)稀釋粗物質，通過注射器式濾器過濾，使用反相色譜法，應用如下看到的條件純化粗物質，得到標題化合物，為膠狀物(4.9mg，19％)。

純化條件：

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC純化(柱：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；95.0％H2O/5.0％乙腈線性至55％H2O/45％乙腈，10.5分鐘，55％H2O/45％乙腈線性至0％H2O/100％MeCN，0.5分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，11.0分鐘至12.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件：

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.81；觀察到的質量＝825.2381)。方法C：3分鐘運行LRMS[M-1＝1647]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.99(s，3H)，5.69-5.88(m，1H)，5.21(s，3H)，4.95(m，2H)，4.51-4.63(m，12H)，3.95(t，J＝9.7Hz，6H)，3.85-3.91(m，9H)，3.74-3.81(m，9H)，3.71(dd，J＝9.4，4.1Hz，3H)，3.54-3.68(m，42H)，2.17(t，J＝7.3Hz，2H)，2.01-2.09(m，2H)，1.99(s，9H)，1.52-1.61(m，2H)，1.39(五重峰，J＝7.5Hz，2H)

N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)庚-6-炔醯胺(45)

向N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(13-{4-[(3-[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-2-氨基丙氧基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺–鹽酸鹽(42)(25mg，0.016mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0111ml，0.0635mmol)，攪拌10分鐘，然後加到純1-(庚-6-炔醯基氧基)吡咯烷-2,5-二酮(參見PCT Int.Appl.，2007056389，2007年5月18日，5.31mg，0.0238mmol)中，將該反應體系在室溫攪拌18小時。然後將該反應體系加熱至60℃32小時。32小時後，減壓濃縮該反應體系。用二甲亞碸(1mL)稀釋粗物質，通過注射器式濾器過濾，使用反相色譜法，應用如下看到的條件純化粗物質，得到標題化合物，為膠狀物(5mg，19％)。

純化條件：

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC純化(柱：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；95.0％H2O/5.0％乙腈線性至55％H2O/45％乙腈，10.5分鐘，55％H2O/45％乙腈線性至0％H2O/100％MeCN，0.5分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，11.0分鐘至12.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件：

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.68；觀察到的質量＝824.2237。方法C：3分鐘運行LRMS[1/2M＝823]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.99(s，3H)，5.21(s，3H)，4.59(t，J＝5.0Hz，6H)，4.56(s，6H)，3.95(t，J＝10.0Hz，6H)，3.85-3.92(m，9H)，3.74-3.79(m，9H)，3.71(dd，J＝10.0，4.1Hz，3H)，3.54-3.67(m，41H)，2.13-2.24(m，6H)，1.99(s，9H)，1.66(五重峰，J＝7.5Hz，2H)，1.50(五重峰，J＝7.3Hz，2H)

7-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-7-氧代庚酸乙酯(l-z-1)

向7-乙氧基-7-氧代庚酸(448mg，2.38mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(6.0mL)中的溶液中加入N-羥基琥珀醯亞胺(329mg，2.86mmol)，然後加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N』-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(559mg，2.86mmol)。將該反應體系在室溫攪拌72小時。72小時後，用水使反應停止，用二氯甲烷萃取3次。用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 40g gold柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(426mg，63％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+Na＝308]。1H NMR(甲醇-d4)δ：4.12(q，J＝7.0Hz，2H)，2.83(s，4H)，2.64(t，J＝7.2Hz，2H)，2.33(t，J＝7.2Hz，2H)，1.74(五重峰，J＝7.4Hz，2H)，1.58-1.68(m，2H)，1.40-1.53(m，2H)，1.24(t，J＝7.0Hz，3H)。

7-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-7-氧代庚酸(鈉鹽)(46)

向N-[(1S,2R,3R,4R,5S)-1-(13-{4-[(3-[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-2-氨基丙氧基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-4-基]乙醯胺–鹽酸鹽(42)(30.0mg，0.019mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0133ml，0.0762mmol)，攪拌10分鐘，然後加到純7-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-7-氧代庚酸乙酯(I-z-1)(7.4mg，0.026mmol)中，將該反應體系在室溫攪拌18小時。然後將該反應體系加熱至60℃32小時。32小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用乙醇(1mL)和水(0.03mL)洗滌粗物質，然後添加12.5M氫氧化鈉水溶液(0.015ml，0.190mmol)。將該反應體系在室溫攪拌3小時。3小時後，減壓濃縮該反應體系。用二甲亞碸(1mL)稀釋粗物質，通過注射器式濾器過濾。使用反相色譜法，應用如下條件純化該溶液，得到標題化合物，為膠狀物(3.7mg，11％)。

純化條件

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC純化(柱：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；90.0％H2O/10.0％乙腈線性至70％H2O/30％乙腈，10.5分鐘，70％H2O/30％乙腈線性至0％H20/100％MeCN，0.5分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，11.0分鐘至12.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.58分鐘；觀察到的質量＝839.7097)。方法C：MassLynx\Acid_3.0Min.olp–LRMS[M+1＝1681]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.99(s，3H)，5.21(s，3H)，4.58(t，J＝4.7Hz，6H)，4.56(s，6H)，3.95(t，J＝9.7Hz，6H)，3.89(dt，J＝9.8，4.8Hz，9H)，3.74-3.79(m，9H)，3.71(dd，J＝10.0，4.1Hz，3H)，3.53-3.67(m，42H)，2.25(t，J＝7.3Hz，2H)，2.17(t，J＝7.3Hz，2H)，1.99(s，9H)，1.58(d五重峰，J＝14.3，7.3Hz，4H)，1.31-1.39(m，2H)

{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基甲酸苄酯(47)

將{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基甲酸苄酯(l-y-1)(308mg，0.162mmol)在乙酸(6mL)、甲醇(1.5mL)和水(1.5mL)中的溶液加熱至70℃64小時。64小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮，得到標題化合物(286mg，無，99％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+1＝1787]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.98(s，3H)，7.19-7.43(m，5H)，5.21(s，3H)，5.06(s，2H)，4.50-4.66(m，12H)，3.95(dd，J＝9.6，5.7Hz，6H)，3.86-3.91(m，9H)，3.74-3.78(m，9H)，3.71(dd，J＝10.0，4.1Hz，3H)，3.54-3.67(m，42H)，3.03-3.12(m，2H)，2.11-2.24(m，2H)，1.98(s，9H)，1.51-1.63(m，2H)，1.43-1.51(m，2H)，1.33(d，J＝6.6Hz，2H)。

6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺乙酸鹽(48)

將{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基甲酸苄酯(47)(640mg，0.358mmol)溶於甲醇(20.0mL)和乙酸(0.041ml，0.717mmol)。然後使用10％披鈀碳(小柱體)，使用下列參數(溫度＝50℃，流速＝1.0毫升/分鐘，壓力＝全H2(1巴))使該溶液通過H-立方體。採集該溶液，減壓濃縮，得到標題化合物，為白色泡沫體(572mg，93％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝1652]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.00(s，3H)，5.21(s，3H)，4.59(t，J＝4.9Hz，6H)，4.56(s，6H)，3.95(d，J＝9.8Hz，6H)，3.85-3.92(m，9H)，3.74-3.79(m，9H)，3.69-3.74(m，3H)，3.55-3.69(m，42H)，2.91(t，J＝7.6Hz，2H)，2.20(t，J＝7.2Hz，2H)，1.99(s，9H)，1.90(s，3H)，1.52-1.68(m，4H)，1.34-1.43(m，2H)

N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}-6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺

在室溫向6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(48)(60mg，0.036mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)和四氫呋喃(0.5mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0253ml，0.145mmol)和1-{6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-6-氧代己基}-1H-吡咯-2,5-二酮(12.3mg，0.040mmol)16小時。16小時後，減壓濃縮該反應體系。使用反相色譜法，應用如下條件純化粗物質，得到標題化合物，為膠狀物(15.4mg，23％)。

純化條件

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC柱純化：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：80.0％H2O/20.0％乙腈線性至75％H2O/25％乙腈，10.5分鐘至0％H2O/100％MeCN，至11.0分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，11.0至12.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.69分鐘；觀察到的質量＝923.4907。方法C：3分鐘運行LRMS[M-1＝1843]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.00(s，3H)，6.80(s，2H)，5.21(s，3H)，4.59(t，J＝5.0Hz，6H)，4.56(s，6H)，3.95(t，J＝9.7Hz，6H)，3.90(t，J＝5.0Hz，6H)，3.88(d，J＝4.1Hz，3H)，3.74-3.79(m，9H)，3.71(dd，J＝10.0，4.1Hz，3H)，3.55-3.68(m，42H)，3.48(t，J＝7.0Hz，2H)，3.12(t，J＝7.0Hz，2H)，2.11-2.23(m，4H)，1.99(s，9H)，1.53-1.66(m，6H)，1.48(五重峰，J＝7.2Hz，2H)，1.24-1.36(m，4H)

N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}-6-[(溴乙醯基)氨基]己醯胺(50)

在室溫向6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(48)(60mg，0.036mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)和四氫呋喃(0.5mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0253ml，0.145mmol)和6-[(溴乙醯基)氨基]己酸五氟苯酯(參見Chemistry–歐洲期刊，14(16)，4939-4947；2008，16.7mg，0.0400mmol)16小時。16小時後，減壓濃縮該反應體系。使用反相色譜法，應用如下條件純化粗物質，得到標題化合物，為膠狀物(4.4mg，6.4％)。觀察到的質量：944.1543

純化條件

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC柱純化：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：80.0％H2O/20.0％乙腈線性至75％H2O/25％乙腈，10.5分鐘至0％H2O/100％MeCN，至11.0分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，11.0-12.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.64分鐘；觀察到的質量＝944.1543。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝1886]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.99(s，3H)，5.21(s，3H)，4.57-4.62(m，6H)，4.56(s，6H)，3.92-3.98(m，6H)，3.83-3.91(m，10H)，3.80(s，2H)，3.69-3.79(m，12H)，3.54-3.68(m，43H)，3.13(t，J＝6.7Hz，2H)，2.18(d，J＝6.5Hz，4H)，1.98(s，9H)，1.59-1.67(m，2H)，1.51-1.59(m，4H)，1.48(br.s.，2H)，1.27-1.41(m，4H)

{(1S)-1-環戊基-2-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-2-氧代乙基}氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯(l-aa-1)

在5-10℃將N,N'-二環己基碳二亞胺(247mg，1.2mmol)分次加到(2S)-環戊基{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}乙醇酸(380mg，1.04mmol)和N-羥基琥珀醯亞胺(137.6mg，1.2mmol)在無水四氫呋喃(40mL)中的溶液中。添加後，將該混合物在室溫攪拌過夜。將該混合物冷卻至-20℃，然後過濾以除去副產物。用冷四氫呋喃洗滌濾餅，濃縮濾液至幹，用閃蒸塔純化(用石油醚：乙酸乙酯100：10－100：50洗脫)，得到標題化合物(380mg，79％)。

N～5～-氨基甲醯基-N～2～-[(2S)-2-環戊基-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}乙醯基]-L-鳥氨酸(l-ab-1)

在0℃向(2S)-2-氨基-5-(氨基甲醯基氨基)戊酸(151mg，0.86mmol)和碳酸氫鈉(72.5mg，0.86mmol)在水(15mL)中的溶液中加入四氫呋喃(10mL)。在氮氣氣氛下向得到的混合物中滴加{(1S)-1-環戊基-2-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-2-氧代乙基}氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯(l-aa-1)(380mg，0.82mmol)在1,2-二甲氧基-乙烷(15mL)中的溶液。添加後，將該混合物在室溫攪拌過夜。用甲基叔丁基醚(50mL)將該反應混合物洗滌4次。棄去有機相，用鹽酸水溶液(1M)將水相酸化至pH＝3-4。使用氯仿/異丙醇(4：1)(50mL)萃取該溶液6次。用硫酸鈉乾燥合併的有機層，濃縮至幹，得到標題化合物(403mg，93.7％)，為白色固體。

[(1S)-2-{[(2S)-5-(氨基甲醯基氨基)-1-{[4-(羥基甲基)苯基]氨基}-1-氧代戊-2-基]氨基}-1-環戊基-2-氧代乙基]氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯(l-ac-1)

向N～5～-氨基甲醯基-N～2～-[(2S)-2-環戊基-2-{[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基}乙醯基]-L-鳥氨酸(l-ab-1)(500mg，0.95mmol)和4-氨基苄醇(470mg，3.82mmol)在二氯甲烷/甲醇(30mL/15mL)中的溶液中加入N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氫喹啉(708mg，2.86mmol)。然後將該反應混合物在室溫在黑暗中攪拌過夜。第二天早晨，減壓濃縮該反應體系，用甲基叔丁基醚(100mL×3)洗滌殘餘物。然後通過製備型-HPLC純化濾餅(參見如下條件)，得到標題化合物，為黃色固體(31mg，5.1％)。1H NMR(400MHz，DMSO)：δ9.95(s，1H)，8.09(d，1H)，7.90-7.88(d，2H)，7.73-7.71(t，2H)，7.55-7.53(t，2H)，7.41(t，2H)，7.34-7.30(t，2H)，7.24-7.22(d，2H)，5.96(t，1H)，5.39(s，2H)，5.11-5.08(t，1H)，4.44-4.42(d，3H)，4.32-4.23(m，3H)，3.96-3.92(t，1H)，3.01-3.00(m，3H)，2.15-2.13(m，1H)，1.66-1.24(m，12H)，C35H41N5O6的m/z：628.4(M+H)+，保留時間：4.213分鐘

純化條件：

柱：DIKMA Diamonsil(2)C18 200*20mm*5um；流動相：30％乙腈的水溶液(0.1％TFA)至50％乙腈的水溶液(0.1％TFA)；波長＝220nm；後處理：濃縮和凍幹。

QC條件：

柱：Ultimate XB-C18,3*50mm，3um；保留時間：4.33分鐘；流動相：A，水(2.7mL TFA的4L水溶液)B，乙腈(2.5mL TFA的4L乙腈溶液)洗脫梯度1％-100％；波長：220nm；ee值：100％。柱：Chiralcel OD-3 50*4.6mm I.D.，3um；保留時間：1.923分鐘；流動相：在CO2中的乙醇(0.05％DEA)5％-40％；流速：2.5mL/分鐘；波長：254nm；ee值＝100％。柱：AD-3 50*4.6mm I.D.，3um；保留時間：1.981分鐘；流動相：在CO2中的乙醇(0.05％DEA)5％-40％；流速：2.5毫升/分鐘；波長：220nm

N～2～-[(2S)-2-氨基-2-環戊基乙醯基]-N～5～-氨基甲醯基-N-[4-(羥基甲基)苯基]-L-鳥氨醯胺(l-ad-1)

在5℃在氮氣氣氛下向攪拌的[(1S)-2-{[(2S)-5-(氨基甲醯基氨基)-1-{[4-(羥基甲基)苯基]氨基}-1-氧代戊-2-基]氨基}-1-環戊基-2-氧代乙基]氨基甲酸9H-芴-9-基甲酯(l-ac-1)(500mg，0.797mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(10mL)中的溶液中滴加哌啶(4mL)。將該混合物在室溫攪拌1.5小時。將該反應體系濃縮至幹。用二氯甲烷(20mL)洗滌粗產物，過濾，真空乾燥濾餅，得到標題化合物(300mg，93.1％)，為固體，不經純化用於下一步。

N-[(1S)-2-{[(2S)-5-(氨基甲醯基氨基)-1-{[4-(羥基甲基)苯基]氨基}-1-氧代戊-2-基]氨基}-1-環戊基-2-氧代乙基]-6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺(l-ae-1)

在3℃在氮氣氣氛下向攪拌的N～2～-[(2S)-2-氨基-2-環戊基乙醯基]-N～5～-氨基甲醯基-N-[4-(羥基甲基)苯基]-L-鳥氨醯胺(l-ad-1)(300mg，0.74mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(12mL)中的溶液中加入1-{6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-6-氧代己基}-1H-吡咯-2,5-二酮(272mg，0.889mmol)。將該混合物在室溫攪拌2小時。將該反應體系滴入甲基叔丁基醚(250mL)，在室溫攪拌20分鐘，過濾，濃縮濾餅至幹，得到標題化合物(300mg，67.8％)，為固體，不經進一步純化用於下一步。

N～5～-氨基甲醯基-N～2～-[(2S)-2-環戊基-2-{[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]氨基}乙醯基]-N-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-L-鳥氨醯胺(l-af-1)

在3℃在氮氣氣氛下向攪拌的N-[(1S)-2-{[(2S)-5-(氨基甲醯基氨基)-1-{[4-(羥基甲基)苯基]氨基}-1-氧代戊-2-基]氨基}-1-環戊基-2-氧代乙基]-6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯胺(l-ae-1)(300mg，0.740mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(12mL)中的溶液中加入碳酸雙(4-硝基苯基)酯(900mg，2.96mmol)和N,N-二異丙基乙胺(390mg，2.96mmol)。將該反應體系在室溫攪拌過夜。將該反應體系滴入甲基叔丁基醚(60mL)，在室溫攪拌20分鐘，過濾，用甲基叔丁基醚(100mL)洗滌濾餅。真空乾燥粗產物至幹。通過閃蒸塔色譜法純化粗產物，用二氯甲烷：甲醇100：1-94：6洗脫，得到標題化合物(50mg，17.7％)，為固體。1H NMR(400MHz，DMSO)：δ10.09(br，1H)，8.33(d，2H)，8.13(d，1H)，7.93(d，1H)，7.67-7.41(m，6H)，7.01(s，2H)，5.98(br，1H)，5.43(s，2H)，5.25(s，2H)，4.39(m，1H)，4.23-4.19(m，1H)，3.37(m，1H)，3.03-2.96(m，2H)，2.14-2.11(m，3H)，1.70-1.19(m，19H)。LC-MS：m/z C37H45N7O11：764.3(M+H)+；保留時間：0.823分鐘。

{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基甲酸4-{[(2R)-5-(氨基甲醯基氨基)-2-{[(2R)-2-環戊基-2-{[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]氨基}乙醯基]氨基}戊醯基]氨基}苄酯(51)

在室溫向6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(48)(45mg，0.027mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)和四氫呋喃(0.3mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.019ml，0.109mmol)和N～5～-氨基甲醯基-N～2～-[(2S)-2-環戊基-2-{[6-(2,5-二氧代-2,5-二氫-1H-吡咯-1-基)己醯基]氨基}乙醯基]-N-[4-({[(4-硝基苯氧基)羰基]氧基}甲基)苯基]-L-鳥氨醯胺(I-af-1)(20.8mg，0.0272mmol)18小時。18小時後，取出樣品，UPLC顯示形成了所期望的產物。減壓濃縮粗反應混合物。通過反相色譜法，應用如下條件純化得到的粗物質，得到標題化合物，為膠狀物(21.7mg，35％)。

純化條件：

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反向HPLC柱純化：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：75.0％H2O/25.0％乙腈線性至65％H2O/35％乙腈，10.5分鐘至0％H2O/100％MeCN，至11.0分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，11.0-12.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件：

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.99分鐘；保留時間＝1.99分鐘；觀察到的質量＝1139.1254。方法C：1.5分鐘運行LRMS[1/2M＝1138]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.99(s，3H)，7.57(d，J＝8.2Hz，2H)，7.30(d，J＝8.2Hz，2H)，6.79(s，2H)，5.21(s，3H)，5.01(s，2H)，4.55-4.64(m，12H)，4.51(dd，J＝9.0，5.1Hz，1H)，4.43(q，J＝7.2Hz，1H)，4.16(d，J＝9.4Hz，1H)，3.95(d，J＝9.8Hz，6H)，3.85-3.91(m，9H)，3.74-3.79(m，9H)，3.71(dd，J＝9.8，4.3Hz，3H)，3.54-3.67(m，41H)，3.47(t，J＝7.0Hz，2H)，3.16-3.26(m，1H)，3.10-3.16(m，1H)，3.07(t，J＝6.8Hz，2H)，2.24(q，J＝7.7Hz，3H)，2.16(t，J＝7.4Hz，2H)，1.99(s，9H)，1.85-1.95(m，1H)，1.42-1.84(m，16H)，1.37(t，J＝7.0Hz，2H)，1.23-1.34(m，5H)

N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)-3,19-二氧代-1-(吡啶-2-基二硫烷基)-7,10,13,16-四氧雜-4,20-二氮雜二十六-26-醯胺(52)

向6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺乙酸鹽(48)(70.0mg，0.041mmol)和N-{15-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-15-氧代-3,6,9,12-四氧雜十五烷-1-基}-3-(吡啶-2-基二硫烷基)丙醯胺(27.5mg，0.0491mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.6mL)和四氫呋喃(0.6mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0285ml，0.164mmol)。將該反應體系在室溫攪拌18小時。18小時後，減壓濃縮該反應體系。使用反相色譜法，應用如下條件純化粗物質，得到標題化合物，為膠狀物(47.7mg，56％)。方法C：3分鐘運行LRMS[1/3M+1＝699]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.47(d，J＝4.7Hz，1H)，8.01(s，3H)，7.93(d，J＝3.5Hz，2H)，7.30-7.38(m，1H)，5.21(s，3H)，4.57-4.62(m，6H)，4.57(s，6H)，3.92-3.99(m，6H)，3.89(dd，J＝10.7，4.9Hz，9H)，3.74-3.80(m，9H)，3.72(dd，J＝9.8，4.7Hz，6H)，3.51-3.68(m，55H)，3.35-3.41(m，2H)，3.14(t，J＝7.0Hz，2H)，3.10(t，J＝6.8Hz，2H)，2.64(t，J＝7.0Hz，2H)，2.43(t，J＝6.0Hz，2H)，2.17(t，J＝7.4Hz，2H)，1.99(s，9H)，1.52-1.61(m，2H)，1.43-1.51(m，2H)，1.27-1.38(m，2H)

純化條件

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC柱純化：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：80.0％H2O/20.0％乙腈線性至70％H2O/30％乙腈，8.5分鐘至0％H2O/100％MeCN，至9.0分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，9.0-10.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.78分鐘；觀察到的質量＝699.6404

N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)-3,31-二氧代-1-(吡啶-2-基二硫烷基)-7,10,13,16,19,22,25,28-八氧雜-4,32-二氮雜三十八-38-醯胺(53)

向6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺乙酸鹽(48)(70.0mg，0.041mmol)和N-{27-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-27-氧代-3,6,9,12,15,18,21,24-八氧雜二十七烷(heptacos)-1-基}-3-(吡啶-2-基二硫烷基)丙醯胺(30.1mg，0.041mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.6mL)和四氫呋喃(0.6mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0285ml，0.164mmol)。將該反應體系在室溫攪拌18小時。18小時後，減壓濃縮該反應體系。使用反相色譜法，應用如下條件純化粗物質，得到標題化合物，為膠狀物(59.2mg，64％)。方法C：3分鐘運行LRMS[1/3M＝757]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.47(d，J＝5.1Hz，1H)，8.01(s，3H)，7.92(d，J＝3.5Hz，2H)，7.30-7.39(m，1H)，5.21(s，3H)，4.57-4.62(m，6H)，4.57(s，6H)，3.92-3.99(m，6H)，3.86-3.92(m，9H)，3.77(s，9H)，3.69-3.74(m，6H)，3.50-3.68(m，73H)，3.14(t，J＝7.0Hz，2H)，3.10(t，J＝7.0Hz，2H)，2.64(t，J＝6.8Hz，2H)，2.43(t，J＝6.0Hz，2H)，2.17(t，J＝7.4Hz，2H)，1.99(s，9H)，1.53-1.63(m，2H)，1.42-1.52(m，2H)，1.32(dt，J＝15.1，7.5Hz，2H)

純化條件

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC柱純化：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：80.0％H2O/20.0％乙腈線性至70％H2O/30％乙腈，8.5分鐘至0％H2O/100％MeCN，至9.0分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，9.0-10.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.85分鐘；觀察到的質量＝758.405

6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(l-ag-1)

將{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基甲酸苄酯(l-y-1)(1200mg，0.63mmol)溶於甲醇(30mL)。然後使用10％披鈀碳(小柱體)，使用下列參數(溫度＝50℃，流速＝1.0毫升/分鐘，壓力＝全H2(1巴))使該溶液通過H-立方體。採集該溶液。取出樣品，UPLC顯示原料剩餘。使用上述參數使該反應體系第二次通過H-立方體。減壓濃縮採集的溶液，得到標題化合物，為白色泡沫體(1039mg，93％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[1/2M＝886]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.99(s，3H)，5.23(d，J＝1.6Hz，3H)，4.45-4.62(m，12H)，4.29(d，J＝5.9Hz，3H)，4.16(t，J＝6.4Hz，3H)，3.87-3.98(m，12H)，3.73-3.85(m，15H)，3.54-3.70(m，36H)，2.87(t，J＝7.6Hz，2H)，2.20(t，J＝7.2Hz，2H)，1.98(s，9H)，1.53-1.69(m，4H)，1.48(s，9H)，1.34-1.41(m，2H)，1.33(s，9H)

N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}-6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯胺(l-ag-2)

向6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(l-ag-1)(105.0mg，0.0593mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.5mL)和四氫呋喃(0.5mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.031ml，0.178mmol)，攪拌10分鐘，然後加到1-{[6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯基]氧基}吡咯烷-2,5-二酮(l-s-1)(25.2mg，0.0711mmol)中，然後將該反應體系加熱至室溫16小時。16小時後，用水(15mL)和鹽水(5mL)稀釋該反應體系，用二氯甲烷(20mL)萃取3次。用水(20mL)、鹽水(20mL)洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物(59.6mg，50％)。方法C：MassLynx\Acid_3.0Min.olp–LRMS[1/2M+1＝1006]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.39(d，J＝4.7Hz，1H)，7.98(s，3H)，7.83-7.87(m，1H)，7.77-7.83(m，1H)，7.21(t，J＝5.9Hz，1H)，5.23(d，J＝1.6Hz，3H)，4.50-4.64(m，12H)，4.29(d，J＝5.9Hz，3H)，4.16(t，J＝6.4Hz，3H)，3.87-3.96(m，12H)，3.84(d，J＝7.8Hz，3H)，3.71-3.79(m，15H)，3.54-3.70(m，31H)，3.18-3.28(m，2H)，3.13(q，J＝6.5Hz，2H)，2.82(t，J＝7.2Hz，2H)，2.12-2.23(m，4H)，1.98(s，9H)，1.71(五重峰，J＝7.3Hz，2H)，1.51-1.64(m，6H)，1.44-1.51(m，11H)，1.28-1.34(m，11H)

N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}-6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯胺(54)

將N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}-6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯胺(l-ag-2)(59mg，0.029mmol)在乙酸(4mL)、甲醇(1mL)和水(1mL)中的溶液加熱至70℃24小時。24小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮，得到粗標題化合物(50.5mg，91％)。使用反相色譜法，應用如下條件純化粗物質，得到標題化合物，為膠狀物(25.2mg，45％)。

純化條件：

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC柱純化：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：80.0％H2O/20.0％乙腈線性至70％H2O/30％乙腈，10.5分鐘至0％H2O/100％MeCN，至11.0分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，11.0-12.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件：

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.96分鐘；觀察到的質量＝946.5137。方法C：MassLynx\Acid_3.0Min.olp–LRMS[1/2M+1＝946]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.45(d，J＝5.1Hz，1H)，8.01(s，3H)，7.94(d，J＝3.1Hz，2H)，7.29-7.36(m，1H)，5.21(s，3H)，4.57-4.62(m，6H)，4.57(s，6H)，3.92-4.00(m，6H)，3.89(dd，J＝10.7，4.9Hz，9H)，3.74-3.80(m，9H)，3.71(dd，J＝10.1，4.3Hz，3H)，3.53-3.68(m，42H)，3.13(t，J＝6.8Hz，2H)，2.85(t，J＝7.2Hz，2H)，2.17(t，J＝7.2Hz，4H)，1.99(s，9H)，1.71(五重峰，J＝7.4Hz，2H)，1.52-1.64(m，4H)，1.45(td，J＝15.0，7.8Hz，4H)，1.26-1.37(m，2H)

{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基甲酸2-(吡啶-2-基二硫烷基)乙酯(l-ag-3)

在室溫向6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(l-ag-1)(61.4mg，0.0347mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.3mL)和四氫呋喃(0.3mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0241ml，0.139mmol)和2-(吡啶-2-基二硫烷基)乙基碳酸4-硝基苯酯(參見European Journal of Medicinal Chemistry，82，355-362；2014，18.0mg，0.051mmol)16小時。16小時後，減壓濃縮該反應混合物。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(57.4mg，無，83％)。方法C：MassLynx\Acid_3.0Min.olp–LRMS[1/2M+1＝993]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.40(d，J＝4.3Hz，1H)，7.98(s，3H)，7.83-7.89(m，1H)，7.75-7.83(m，1H)，7.15-7.25(m，1H)，5.22(d，J＝1.2Hz，3H)，4.51-4.64(m，12H)，4.29(d，J＝5.9Hz，3H)，4.23(t，J＝6.2Hz，2H)，4.15(t，J＝6.4Hz，3H)，3.86-3.97(m，12H)，3.83(d，J＝7.8Hz，3H)，3.72-3.79(m，12H)，3.53-3.69(m，36H)，3.05(t，J＝5.7Hz，4H)，2.17(t，J＝7.0Hz，2H)，1.98(s，9H)，1.51-1.61(m，2H)，1.48(s，11H)，1.33(s，11H)

{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基甲酸2-(吡啶-2-基二硫烷基)乙酯(55)

將{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基甲酸2-(吡啶-2-基二硫烷基)乙酯(l-ag-3)(57.4mg，0.0289mmol)在乙酸(4.0mL)、甲醇(1.0mL)和水(1.0mL)中的溶液加熱至70℃24小時。24小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。使用反相色譜法，應用如下條件純化粗物質，得到標題化合物，為膠狀物(29.8mg，55％)。

純化條件：

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC柱純化：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：80.0％H2O/20.0％乙腈線性至70％H2O/30％乙腈，10.5分鐘至0％H2O/100％MeCN，至11.0分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，11.0-12.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件：

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.91分鐘；觀察到的質量＝933.4313。方法C：MassLynx\Acid_3.0Min.olp–LRMS[1/2M+1＝933]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.46(d，J＝4.7Hz，1H)，8.01(s，3H)，7.86-7.97(m，2H)，7.32(t，J＝5.3Hz，1H)，5.21(s，3H)，4.55-4.62(m，12H)，4.24(t，J＝6.0Hz，2H)，3.92-3.99(m，6H)，3.85-3.92(m，9H)，3.74-3.79(m，9H)，3.71(dd，J＝9.8，4.3Hz，3H)，3.52-3.68(m，42H)，2.99-3.15(m，4H)，2.17(t，J＝7.2Hz，2H)，1.99(s，9H)，1.56(五重峰，J＝7.4Hz，2H)，1.42-1.50(m，2H)，1.24-1.38(m，2H)

1-{[6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)己醯基]氧基}吡咯烷-2,5-二酮(l-ah-1)

用氮氣將氯三(三苯膦)銠(I)，威爾金斯催化劑(39.7mg，0.0429mmol)在二氯甲烷(5.0mL)中的溶液吹掃10分鐘，然後滴加4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷(299mg，2.34mmol，0.340mL)。將該反應體系在室溫攪拌10分鐘。將己烯-5-酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯(參見Journal of the American Chemical Society，132(35)，12197-12199；2010，412mg，1.95mmol)溶於二氯甲烷(1.0mL)，並滴加。將該反應體系在室溫攪拌18小時。第二天早晨，用二氯甲烷稀釋該反應體系，用水洗滌。用硫酸鎂乾燥有機層，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 24g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到粗製標題化合物(366mg)。使用CombiFlash Rf(RediSep 24g Gold矽膠柱)純化粗標題化合物，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物，為油狀物(271.0mg，無，41.0％)。1H NMR(甲醇-d4)δ：2.83(s，4H)，2.61(t，J＝7.4Hz，2H)，1.71(五重峰，J＝7.1Hz，2H)，1.38-1.50(m，4H)，1.24(s，12H)，0.75(t，J＝6.8Hz，2H)。

N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)己醯胺(l-ag-4)

向6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(l-ag-1)(200mg，0.113mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.6mL)和四氫呋喃(0.6mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0786ml，0.451mmol)，然後添加1-{[6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)己醯基]氧基}吡咯烷-2,5-二酮(l-ah-1)(57.4mg，0.169mmol)，將該反應體系在室溫攪拌24小時。24小時後，減壓濃縮該反應體系。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(209.0mg，無，93％)。方法C：3分鐘運行LRMS[1/2M＝998]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.98(s，3H)，5.23(d，J＝1.6Hz，3H)，4.52-4.62(m，12H)，4.29(d，J＝5.9Hz，3H)，4.16(t，J＝6.4Hz，3H)，3.87-3.97(m，12H)，3.84(d，J＝8.2Hz，3H)，3.72-3.79(m，12H)，3.54-3.69(m，36H)，3.13(q，J＝6.6Hz，2H)，2.16(q，J＝7.3Hz，4H)，1.98(s，9H)，1.52-1.66(m，4H)，1.44-1.51(m，11H)，1.35-1.43(m，2H)，1.27-1.35(m，13H)，1.18-1.25(m，12H)，0.73(t，J＝7.6Hz，2H)

N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)己醯胺(56)

將N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜環戊硼烷-2-基)己醯胺(l-ag-4)(104.0mg，0.0521mmol)在乙酸(4mL)、甲醇(1mL)和水(1mL)中的溶液加熱至70℃24小時。24小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮，得到粗製標題化合物(112.0mg，115％)。使用反相色譜法純化部分粗標題化合物(52.7mg)，得到標題化合物，為膠狀物(18.2mg，19％)。

純化條件

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC柱純化：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：80.0％H2O/20.0％乙腈線性至65％H2O/35％乙腈，8.5分鐘至0％H2O/100％MeCN，至9.0分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，9.0-10.0分鐘。流速：25毫升/分鐘。

QC條件

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝2分鐘；觀察到的質量＝938.9628)。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.01(s，3H)，5.21(s，3H)，4.51-4.66(m，12H)，3.95(dd，J＝9.4，5.9Hz，6H)，3.89(dd，J＝11.7，4.7Hz，9H)，3.74-3.81(m，9H)，3.71(dd，J＝9.8，4.3Hz，3H)，3.52-3.68(m，42H)，3.13(t，J＝6.8Hz，2H)，2.17(q，J＝7.0Hz，4H)，1.99(s，9H)，1.53-1.66(m，4H)，1.45-1.52(m，2H)，1.36-1.44(m，2H)，1.27-1.35(m，4H)，1.23(s，12H)，0.73(t，J＝7.6Hz，2H)

7-[(1,3-二羥基丙-2-基)氨基]-7-氧代庚酸乙酯(l-ai-1)

向7-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-7-氧代庚酸乙酯(l-z-1)(228.0mg，0.799mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(1.0mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.557ml，3.20mmol)，攪拌10分鐘，然後添加2-氨基丙-1,3-二醇(72.8mg，0.799mmol)，將該反應體系在室溫攪拌72小時。72小時後，用水稀釋該反應體系，再用二氯甲烷萃取3次。用鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗製標題化合物(89.0mg，無，43％)。減壓濃縮水層。用甲醇(5mL)和二氯甲烷(10mL)稀釋粗濃縮的水層。潷析該混合物，與來自第一次萃取的粗混合物合併。減壓濃縮該溶液。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g矽膠柱)純化合併的粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物(183.0mg，88％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝262]。1H NMR(甲醇-d4)δ：4.11(q，J＝7.2Hz，2H)，3.83-3.99(m，1H)，3.60(d，J＝5.5Hz，4H)，2.31(t，J＝7.2Hz，2H)，2.23(t，J＝7.4Hz，2H)，1.63(五重峰，J＝7.5Hz，4H)，1.30-1.45(m，2H)，1.24(t，J＝7.0Hz，3H)

7-[(2,2-二甲基-1,3-二烷-5-基)氨基]-7-氧代庚酸乙酯(l-aj-1)

向7-[(1,3-二羥基丙-2-基)氨基]-7-氧代庚酸乙酯(l-ai-1)(180.0mg，0.689mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(2mL)中的溶液中加入2,2-二甲氧基丙烷(0.53ml，4.13mmol)，然後加入(1S)-(+)-10-樟腦磺酸(64.0mg，0.276mmol)。將該反應體系加熱至70℃72小時。72小時後，將該反應體系冷卻至室溫，使其分配在水(20mL)與乙酸乙酯(10mL)之間。萃取各層，分離各層。再用乙酸乙酯(10mL)將水層萃取2次。用水、鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥。過濾，減壓濃縮，得到粗標題化合物(94.0mg，無，45％)。

7-[(2,2-二甲基-1,3-二烷-5-基)氨基]-7-氧代庚酸(l-ak-1)

向7-[(2,2-二甲基-1,3-二烷-5-基)氨基]-7-氧代庚酸乙酯(l-aj-1)(94.0mg，0.31mmol)在乙醇(5mL)中的溶液中加入1.0M氫氧化鈉水溶液(1.5ml，1.5mmol)，將該反應體系在室溫攪拌過夜。第二天早晨，減壓濃縮該反應體系。用1N鹽酸(3.0mL)和乙酸乙酯稀釋得到的粗物質。分離各層，再用乙酸乙酯將有機層萃取2次。用鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗標題化合物(29.4mg，無，34％)。

N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}-N'-(1,3-二羥基丙-2-基)庚烷二醯胺(57)

向7-[(2,2-二甲基-1,3-二烷-5-基)氨基]-7-氧代庚酸(l-ak-1)(18.8mg，0.0688mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.3mL)和四氫呋喃(0.3mL)中的溶液中加入1-羥基苯並三唑(10.3mg，0.0762mmol)和N-(3-二甲基氨基丙基)-N』-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(14.9mg，0.0762mmol)，將該反應體系在室溫攪拌1小時。將該反應混合物加到6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(l-ag-1)(75.0mg，0.042mmol)中，然後添加N,N-二異丙基乙胺(0.0295ml，0.169mmol)，將該反應體系在室溫攪拌16小時。16小時後，減壓濃縮該反應體系。將粗物質溶於乙酸(4.0mL)、甲醇(1mL)和水(1.0mL)，加熱至70℃24小時。24小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮，得到粗標題化合物(175.0mg，220％)。將該粗標題化合物通過反相色譜法，使用如下條件純化，得到標題化合物，為膠狀物(10.9mg，14％)。

純化條件：

將殘餘物溶於二甲亞碸(1mL)，通過反相HPLC柱純化：Waters Sunfire C18 19x100，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；梯度：85.0％H2O/15.0％乙腈線性至75％H2O/25％乙腈，8.5分鐘至0％H2O/100％MeCN，至9.0分鐘，保持在0％H2O/100％乙腈，9.0-10.0分鐘。流速：25毫升/分鐘

QC條件：

柱：Waters Atlantis dC18 4.6x50，5u；流動相A：0.05％TFA的水溶液(v/v)；流動相B：0.05％TFA的乙腈溶液(v/v)；95.0％H2O/5.0％乙腈線性至5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘，保持在5％H2O/95％乙腈，4.0分鐘至5.0分鐘。流速：2毫升/分鐘；保留時間＝1.53分鐘；觀察到的質量＝934.548。方法C：3分鐘運行LRMS[M+Na＝1889]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.00(s，3H)，5.21(s，3H)，4.52-4.62(m，12H)，3.95(t，J＝9.4Hz，6H)，3.85-3.91(m，9H)，3.74-3.79(m，9H)，3.71(dd，J＝10.0，4.1Hz，3H)，3.55-3.67(m，47H)，3.12(t，J＝6.7Hz，2H)，2.22(t，J＝7.3Hz，2H)，2.17(t，J＝7.3Hz，4H)，1.98(s，9H)，1.58-1.69(m，4H)，1.51-1.57(m，2H)，1.48(五重峰，J＝7.2Hz，2H)，1.26-1.40(m，4H)

6-疊氮基-N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}己醯胺(l-ag-5)

向6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(l-ag-1)(300mg，0.169mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.6mL)和四氫呋喃(0.6mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.118ml，0.677mmol)和1-[(6-疊氮基己醯基)氧基]吡咯烷-2,5-二酮(56.0mg，0.220mmol)。將該反應體系在室溫攪拌24小時。24小時後，減壓濃縮該反應體系。使用CombiFlash Rf(RediSep 24g Gold矽膠柱)純化粗反應混合物，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(269mg，83％)。方法C：3分鐘運行LRMS[1/2M+1＝956]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.98(s，3H)，5.22(s，3H)，4.50-4.65(m，12H)，4.29(d，J＝5.9Hz，3H)，4.16(t，J＝6.5Hz，3H)，3.87-3.95(m，12H)，3.83(d，J＝7.6Hz，3H)，3.73-3.79(m，12H)，3.55-3.71(m，36H)，3.26-3.30(m，2H)，3.14(q，J＝6.5Hz，2H)，2.18(q，J＝7.6Hz，4H)，1.98(s，9H)，1.53-1.68(m，6H)，1.45-1.51(m，11H)，1.36-1.43(m，2H)，1.29-1.36(m，11H)

6-疊氮基-N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}己醯胺(58)

將6-疊氮基-N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}己醯胺(l-ag-5)(25.0mg，0.013mmol)在乙酸(3mL)、甲醇(0.75mL)和水(0.75mL)中的溶液加熱至70℃24小時。24小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮，得到標題化合物，為膠狀物(22.7mg，97％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝1791]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.99(s，3H)，5.21(s，3H)，4.51-4.66(m，12H)，3.92-4.01(m，6H)，3.89(dd，J＝10.1，4.7Hz，9H)，3.74-3.81(m，9H)，3.71(dd，J＝10.0，4.1Hz，3H)，3.52-3.68(m，42H)，3.25-3.30(m，2H)，3.08-3.19(m，2H)，2.13-2.23(m，4H)，1.99(s，9H)，1.54-1.69(m，6H)，1.49(dt，J＝14.4，7.2Hz，2H)，1.36-1.44(m，2H)，1.32(dd，J＝14.8，6.2Hz，2H)

1-{[6-(苄氧基)己醯基]氧基}吡咯烷-2,5-二酮(l-al-1)

向6-(苄氧基)己酸(參見Synlett，(4)，693-697；2004，1400.0mg，6.298mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中的溶液中加入N-羥基琥珀醯亞胺(870mg，7.56mmol)，然後加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N』-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1480mg，7.56mmol)。將該反應體系在室溫攪拌過夜。第二天早晨，用水使反應停止，用二氯甲烷萃取3次。用飽和碳酸氫鈉、鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 40g Gold柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(715mg，36％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+Na＝342]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.22-7.42(m，5H)，4.51(s，2H)，3.53(t，J＝6.4Hz，2H)，2.85(s，4H)，2.65(t，J＝7.4Hz，2H)，1.76(五重峰，J＝7.5Hz，2H)，1.61-1.71(m，2H)，1.47-1.59(m，2H)

6-(苄氧基)-N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}己醯胺(l-ag-6)

向6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(l-ag-1)(200mg，0.113mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(0.6mL)和四氫呋喃(0.6mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0786ml，0.451mmol)和1-{[6-(苄氧基)己醯基]氧基}吡咯烷-2,5-二酮(l-al-1)(46.9mg，0.147mmol)，將該反應體系在室溫攪拌24小時。24小時後，減壓濃縮該反應體系。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(203mg，91％)。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.98(s，3H)，7.19-7.38(m，5H)，5.23(d，J＝1.2Hz，3H)，4.52-4.64(m，12H)，4.48(s，2H)，4.29(d，J＝5.9Hz，3H)，4.15(t，J＝6.4Hz，3H)，3.86-3.96(m，12H)，3.83(d，J＝7.8Hz，3H)，3.72-3.80(m，12H)，3.54-3.70(m，36H)，3.49(t，J＝6.4Hz，2H)，3.08-3.15(m，2H)，2.12-2.26(m，4H)，1.98(s，9H)，1.51-1.68(m，6H)，1.48(s，11H)，1.37-1.44(m，2H)，1.33(s，11H)

6-(苄氧基)-N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}己醯胺(59)

將6-(苄氧基)-N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}己醯胺(l-ag-6)(180.0mg，0.0911mmol)在乙酸(6.0mL)、甲醇(1.5mL)和水(1.5mL)中的溶液加熱至70℃24小時。24小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮，得到標題化合物，為膠狀物(164.0mg，97.0％)。方法C：3分鐘運行LRMS[1/2M＝928]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.99(s，3H)，7.25-7.39(m，5H)，5.21(s，3H)，4.52-4.66(m，12H)，4.48(s，2H)，3.92-3.99(m，6H)，3.84-3.91(m，9H)，3.74-3.81(m，9H)，3.71(dd，J＝9.8，4.3Hz，3H)，3.54-3.67(m，42H)，3.49(t，J＝6.4Hz，2H)，3.08-3.17(m，2H)，2.13-2.22(m，4H)，1.99(s，9H)，1.51-1.68(m，6H)，1.48(t，J＝7.4Hz，2H)，1.39(dt，J＝15.3，7.8Hz，2H)，1.26-1.35(m，2H)

乙酸(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2-(乙醯氧基)-1-{13-[4-(4,4-雙{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-6,13-二氧代-20-苯基-2,19-二氧雜-5,12-二氮雜二十碳烷(diazaicos)-1-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基}-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-3-基酯(l-am-1)

在室溫將6-(苄氧基)-N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}己醯胺(59)(130mg，0.07mmol)溶於(3ml，40mmol)，向其中加入乙酐(0.198ml，2.10mmol)。然後將該反應體系加熱至50℃過夜。第二天早晨，減壓濃縮該反應體系。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(130.0mg，88％)。方法C：3分鐘運行LRMS[1/2M＝1054]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.98(s，3H)，7.16-7.39(m，5H)，5.44(d，J＝4.3Hz，3H)，5.32(s，3H)，5.10(dd，J＝10.5，4.3Hz，3H)，4.52-4.60(m，12H)，4.48(s，2H)，4.18(d，J＝10.5Hz，3H)，3.99(d，J＝8.2Hz，3H)，3.89(t，J＝5.1Hz，6H)，3.70-3.81(m，12H)，3.52-3.67(m，39H)，3.49(t，J＝6.2Hz，2H)，3.13(q，J＝6.6Hz，2H)，2.13-2.21(m，13H)，1.94(d，J＝1.6Hz，18H)，1.51-1.68(m，6H)，1.45-1.50(m，2H)，1.37-1.43(m，2H)，1.28-1.35(m，2H)

N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}-6-羥基己醯胺(l-an-1)

將乙酸(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2-(乙醯氧基)-1-{13-[4-(4,4-雙{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-6,13-二氧代-20-苯基-2,19-二氧雜-5,12-二氮雜二十碳烷-1-基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基}-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-3-基酯(l-am-1)(110mg，0.0522mmol)溶於甲醇(10.0mL)，然後使用10％披鈀碳(小柱體)，使用下列參數(溫度-60℃，流速-1.0毫升/分鐘，壓力-全H2(1巴))使該溶液通過H-立方體。採集該溶液，減壓濃縮，得到標題化合物，為膠狀物(91.6mg，87％)。方法C：3分鐘運行LRMS[1/2M＝1009]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.98(s，3H)，5.44(d，J＝4.3Hz，3H)，5.32(s，3H)，5.10(dd，J＝10.5，4.3Hz，3H)，4.50-4.64(m，12H)，4.18(d，J＝10.5Hz，3H)，3.99(d，J＝8.2Hz，3H)，3.90(t，J＝4.9Hz，6H)，3.71-3.82(m，9H)，3.44-3.66(m，44H)，3.08-3.19(m，2H)，2.16-2.22(m，4H)，2.15(s，9H)，1.94(d，J＝1.2Hz，18H)，1.44-1.68(m，8H)，1.27-1.42(m，4H)

乙酸(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-1-{13-[4-({3-[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-2-({6[(6羥基己醯基)氨基]己醯基}氨基)丙氧基}甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基}-3-(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-2-基酯(60)

將6-(苄氧基)-N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}己醯胺(l-an-1)(31.0mg，0.017mmol)溶於甲醇(5mL)，使用10％披鈀碳(小柱體)，使用下列參數(溫度-60℃，流速-1.0毫升/分鐘，壓力-全H2(1巴))使該溶液通過H-立方體。採集該溶液，減壓濃縮，得到標題化合物，為膠狀物(7.9mg，27％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+1＝1766]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.99(s，3H)，5.21(s，3H)，4.49-4.63(m，12H)，3.92-4.00(m，6H)，3.89(dd，J＝10.3，4.5Hz，9H)，3.74-3.79(m，9H)，3.71(dd，J＝9.8，4.3Hz，3H)，3.53-3.67(m，44H)，3.02-3.16(m，2H)，2.18(td，J＝7.3，3.3Hz，4H)，1.99(s，9H)，1.44-1.72(m，8H)，1.25-1.42(m，4H)

[6-({6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基)-6-氧代己基]氨基甲酸苄酯(l-ag-7)

向6-氨基-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)己醯胺(l-ag-1)(222mg，0.125mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(1.5mL)和四氫呋喃(1.0mL)中的溶液中加入N,N-二異丙基乙胺(0.0873ml，0.501mmol)和{6-[(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)氧基]-6-氧代己基}氨基甲酸苄酯(參見Journal of Heterocyclic Chemistry，23(3)，901-3；1986，68.1mg，0.188mmol)。將該反應體系在室溫攪拌24小時。24小時後，減壓濃縮該反應體系。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g Gold矽膠柱)純化粗反應混合物，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(250mg，99％)。方法C：3分鐘運行LRMS[1/2M+1＝1010]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.98(s，3H)，7.22-7.40(m，5H)，5.22(d，J＝1.2Hz，3H)，5.06(s，2H)，4.51-4.61(m，12H)，4.29(d，J＝5.9Hz，3H)，4.16(t，J＝6.4Hz，3H)，3.86-3.96(m，12H)，3.83(d，J＝7.8Hz，3H)，3.73-3.79(m，12H)，3.53-3.70(m，36H)，3.04-3.19(m，4H)，2.17(t，J＝7.4Hz，4H)，1.98(s，9H)，1.58(td，J＝14.5，7.6Hz，4H)，1.48(s，13H)，1.33(s，13H)

[6-({6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基)-6-氧代己基]氨基甲酸苄酯(61)

將[6-({6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-(乙醯氨基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基)-6-氧代己基]氨基甲酸苄酯(l-ag-7)(250.0mg，0.124mmol)在乙酸(8mL)、甲醇(2mL)和水(2mL)中的溶液加熱至70℃36小時。36小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用甲苯稀釋粗物質，減壓濃縮。用甲苯第二次稀釋粗物質，減壓濃縮，得到標題化合物，為膠狀物(225mg，96％)。方法C：3分鐘運行

LRMS[1/2M+1＝950]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.98(s，3H)，7.22-7.41(m，5H)，5.21(s，3H)，5.05(s，2H)，4.57(t，J＝5.0Hz，6H)，4.55(s，6H)，3.92-4.00(m，6H)，3.83-3.91(m，9H)，3.73-3.78(m，9H)，3.68-3.72(m，J＝10.0，4.1Hz，3H)，3.52-3.68(m，42H)，3.05-3.17(m，4H)，2.16(t，J＝7.3Hz，4H)，1.98(s，9H)，1.57-1.65(m，2H)，1.53-1.57(m，2H)，1.43-1.52(m，4H)，1.24-1.39(m，4H)

6-氨基-N-{6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}己醯胺乙酸鹽(62)

將[6-({6-[(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)氨基]-6-氧代己基}氨基)-6-氧代己基]氨基甲酸苄酯(61)(200mg，0.105mmol)溶於甲醇(20mL)和乙酸(0.024ml，0.421mmol)，然後使用10％披鈀碳(小柱體)，應用下列參數(溫度-50℃，流速-1.0毫升/分鐘，壓力–全H2(1巴))使該溶液通過H-立方體。採集該溶液，減壓濃縮，得到標題化合物，為膠狀物(148mg，77％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+45(甲酸)＝1809]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.02(s，3H)，5.23(s，3H)，4.59-4.63(m，6H)，4.58(s，6H)，3.97(dd，J＝9.6，5.3Hz，6H)，3.91(dd，J＝11.3，4.7Hz，9H)，3.76-3.82(m，9H)，3.73(dd，J＝10.1，4.3Hz，3H)，3.56-3.70(m，42H)，3.16(t，J＝6.8Hz，2H)，2.93(t，J＝7.6Hz，2H)，2.16-2.29(m，4H)，2.01(s，9H)，1.92(s，3H)，1.62-1.74(m，4H)，1.54-1.61(m，2H)，1.46-1.53(m，2H)，1.39-1.45(m，2H)，1.29-1.38(m，2H)

[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-疊氮基-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]甲醇(l-d-1)

向(1S,2R,3R,4R,5S)-4-疊氮基-1-(羥基甲基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛烷-2,3-二醇(1)(2.52g，11.61mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(21mL)中的溶液中加入2 2-二甲氧基丙烷(9.0ml，69.6mmol)，然後加入(1S)-(+)-10-樟腦磺酸(1.08g，4.65mmol)。將該反應體系加熱至70℃，歷時24小時。24小時後，將該反應體系冷卻至室溫，然後添加甲醇(5mL)，然後添加三乙胺(0.22ml，1.55mmol)，將該溶液攪拌10分鐘，然後減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 80g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到不純的標題化合物。使用CombiFlash Rf(RediSep 40g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物(2419mg，81％)。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.42(d，J＝1.6Hz，1H)，4.34-4.43(m，2H)，3.88-3.98(m，3H)，3.81-3.87(m，1H)，3.37(dd，J＝6.2，1.6Hz，1H)，1.54(s，3H)，1.42(s，3H)

(1S,2R,6R,7R,8S)-7-疊氮基-4,4-二甲基-1-(15-苯基-2,5,8,11,14-五氧雜十五烷-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一烷(l-d-2)

在室溫向[(1S,2R,6R,7R,8S)-7-疊氮基-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基]甲醇(l-d-1)(490mg，1.90mmol)在四氫呋喃(5mL)中的溶液中加入氫化鈉礦物油中的60％分散體(127mg，3.2mmol)。將該反應體系在氮氣氣氛下攪拌30分鐘，然後添加在四氫呋喃(2mL)中的13-碘-1-苯基-2,5,8,11-四氧雜十三烷(1130mg，2.86mmol)。將該反應體系在室溫攪拌過夜。第二天早晨(18小時)，用水使反應停止，用乙酸乙酯萃取。用乙酸乙酯將水層再洗滌2次。用水、鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(ISCO RediSep Gold 40g矽膠柱)純化粗物質，用0-100％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(336.0mg，34％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+Na＝546]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.17-7.47(m，5H)，5.35(d，J＝1.6Hz，1H)，4.55(s，2H)，4.32-4.37(m，1H)，4.25-4.32(m，1H)，3.92(d，J＝10.1Hz，1H)，3.88(d，J＝8.2Hz，1H)，3.73-3.80(m，2H)，3.55-3.71(m，17H)，1.49(s，3H)，1.36(s，3H)

[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(13-羥基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]氨基甲酸叔丁酯(l-ao-1)

在50毫升反應器中將原料(1S,2R,6R,7R,8S)-7-疊氮基-4,4-二甲基-1-(15-苯基-2,5,8,11,14-五氧雜十五烷-1-基)-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一烷(l-d-2)(310.0mg，0.592mmol)溶於甲醇(6mL)，然後添加二-叔丁基-二碳酸酯(162mg，0.74mmol)和10％披鈀碳(50％溼的wt/wt，100.0mg，0.940mmol)。密封反應器，用氮氣(50psi)將該反應體系吹掃3次，然後用氫氣(50psi)吹掃2次，用氫氣充至50psi，攪拌過夜。第二天早晨(24小時)，通過C鹽墊過濾該反應體系，用甲醇洗滌。減壓濃縮濾液。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲梯度洗脫烷，得到標題化合物，為膠狀物(304mg，100％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+Na＝530]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.22(s，1H)，4.28(d，J＝5.9Hz，1H)，4.11(t，J＝6.4Hz，1H)，3.93(d，J＝10.1Hz，1H)，3.80-3.85(m，1H)，3.76(d，J＝6.2Hz，1H)，3.74(d，J＝3.9Hz，1H)，3.60-3.71(m，15H)，3.53-3.59(m，2H)，1.50(s，3H)，1.45(s，9H)，1.34(s，3H)

甲磺酸1-{(1S,2R,6R,7R,8S)-7-[(叔丁氧羰基)氨基]-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基酯(l-ap-1)

向[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(13-羥基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]氨基甲酸叔丁酯(l-ao-1)(300.0mg，0.591mmol)在二氯甲烷(2mL)中的溶液中加入三乙胺(0.332ml，2.36mmol)，使用冰浴冷卻至0℃，然後添加甲磺醯氯(0.055ml，0.71mmol)。將該反應體系緩慢地溫熱至室溫，在室溫攪拌20小時。20小時後，用水使反應停止，萃取。分離各層，再用二氯甲烷將水層萃取1次。用鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮，得到標題化合物，為油狀物(339mg，98％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+Na＝608]。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.22(s，1H)，4.33-4.43(m，2H)，4.28(d，J＝5.9Hz，1H)，4.11(t，J＝6.4Hz，1H)，3.93(d，J＝10.1Hz，1H)，3.80-3.86(m，1H)，3.72-3.79(m，4H)，3.61-3.70(m，12H)，3.58(d，J＝5.9Hz，1H)，3.11(s，3H)，1.50(s，3H)，1.45(s，9H)，1.34(s，3H)

[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]氨基甲酸叔丁酯(l-aq-1)

向甲磺酸1-{(1S,2R,6R,7R,8S)-7-[(叔丁氧羰基)氨基]-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基酯(l-ap-1)(339mg，0.579mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(1.5mL)中的溶液中加入疊氮化鈉(67.7mg，1.04mmol)，將該反應體系在密封的5mL微波小瓶中加熱至100℃過夜。18小時後，將該反應體系冷卻至室溫，用水稀釋該反應體系，用乙酸乙酯萃取3次。用水、鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗物質，使用CombiFlash Rf(RediSep 12g Gold矽膠柱)純化，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(246mg，80％)。1H NMR(甲醇-d4)δ：5.24(s，1H)，4.30(d，J＝5.9Hz，1H)，4.13(t，J＝6.4Hz，1H)，3.95(d，J＝9.8Hz，1H)，3.82-3.88(m，1H)，3.75-3.80(m，2H)，3.53-3.74(m，15H)，3.39(t，J＝4.9Hz，2H)，1.52(s，3H)，1.47(s，9H)，1.36(s，3H)

{(1S,2R,6R,7R,8S)-1-[13-(4-{[2-{[4-(苄氧基)丁醯基]氨基}-3-{[1-(1-{(1S,2R,6R,7R,8S)-7-[(叔丁氧羰基)氨基]-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲氧基}-2-({[1-(1-{(1S,2R,6R,7R,8S)-7-[(叔丁氧羰基)氨基]-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲氧基}甲基)丙氧基]甲基}-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基]-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基}氨基甲酸叔丁酯(l-ar-1)

在配備攪拌棒的20mL小瓶中加入4-(苄氧基)-N-{1,3-雙(丙-2-炔-1-基氧基)-2-[(丙-2-炔-1-基氧基)甲基]丙-2-基}丁醯胺(l-v-1)(45.0mg，0.11mmol)，向其中加入在叔丁醇(3mL)和水(1.5ml，去離子水)中的[(1S,2R,6R,7R,8S)-1-(13-疊氮基-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基]氨基甲酸叔丁酯(l-aq-1)(192mg，0.361mmol)。用氮氣將該反應體系吹掃5分鐘，然後添加抗壞血酸鈉(66.3mg，0.328mmol)，滴加硫酸銅(II)(5.24mg，0.0328mmol)的水(500uL，去離子水)溶液。將該反應體系在室溫攪拌20小時。20小時後，將該反應體系冷卻至室溫，通過將該反應混合物添加到飽和氯化銨(30mL)和濃氫氧化銨(2mL)中使反應停止，用二氯甲烷(15mL)萃取3次。用硫酸鈉乾燥合併的有機層，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(165mg，無，75％)。方法C：3分鐘運行

LRMS[1/2M+1＝1005]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.97(s，3H)，7.17-7.43(m，5H)，5.21(s，3H)，4.52-4.60(m，12H)，4.45(s，2H)，4.25(d，J＝5.9Hz，3H)，4.10(t，J＝6.2Hz，3H)，3.85-3.93(m，9H)，3.71-3.82(m，15H)，3.63-3.69(m，6H)，3.53-3.62(m，33H)，3.48(t，J＝6.2Hz，2H)，2.27(t，J＝7.2Hz，2H)，1.74-1.96(m，2H)，1.49(s，9H)，1.45(s，27H)，1.32(s，9H)

4-(苄氧基)-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-氨基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-氨基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)丁醯胺(63)

將{(1S,2R,6R,7R,8S)-1-[13-(4-{[2-{[4-(苄氧基)丁醯基]氨基}-3-{[1-(1-{(1S,2R,6R,7R,8S)-7-[(叔丁氧羰基)氨基]-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲氧基}-2-({[1-(1-{(1S,2R,6R,7R,8S)-7-[(叔丁氧羰基)氨基]-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲氧基}甲基)丙氧基]甲基}-1H-1,2,3-三唑-1-基)-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基]-4,4-二甲基-3,5,9,11-四氧雜三環[6.2.1.0～2,6～]十一-7-基}氨基甲酸叔丁酯(l-ar-1)(150.0mg，0.0747mmol)在乙酸(5mL)、甲醇(1.5mL)和水(1.5mL)中的溶液加熱至70℃18小時。18小時後，將該反應體系冷卻至室溫，減壓濃縮。用二氯甲烷(10mL)和甲醇(4mL)稀釋粗物質，向其中加入4.0M氯化氫的二烷溶液(2.0ml，8mmol)。將該反應混合物在室溫攪拌過夜。18小時後，減壓濃縮該反應體系。用乙酸乙酯(1mL)稀釋粗物質，向其中加入庚烷(10mL)，減壓濃縮。然後將該物質置於高度真空中18小時，得到標題化合物(139.0mg，103％)。方法C：3分鐘運行LRMS[1/2M+1＝795]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.09(s，3H)，7.27-7.39(m，5H)，5.48(s，3H)，4.57-4.66(m，12H)，4.47(s，2H)，3.98(d，J＝9.8Hz，3H)，3.90-3.95(m，9H)，3.82-3.89(m，6H)，3.79(s，6H)，3.76(d，J＝8.2Hz，3H)，3.71(d，J＝9.8Hz，3H)，3.57-3.69(m，36H)，3.50(t，J＝6.2Hz，2H)，3.21(d，J＝9.4Hz，3H)，2.29(t，J＝7.2Hz，2H)，1.85(五重峰，J＝6.8Hz，2H)

乙酸(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-1-(13-{4-[(3-[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-2-{[4-(苄氧基)丁醯基]氨基}丙氧基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-3-(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-2-基酯(l-as-1)

將4-(苄氧基)-N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-氨基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-氨基-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)丁醯胺(63)(80mg，0.044mmol)溶於吡啶(無水)(1.5ml，19mmol)，在室溫下向其中加入乙酐(0.125ml，1.33mmol)。然後將該反應體系加熱至50℃過夜。第二天早晨，減壓濃縮該反應體系。使用CombiFlash Rf(RediSep 12g Gold矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷洗梯度脫，得到粗製標題化合物。使用CombiFlash Rf(RediSep 4g Gold矽膠柱)純化粗標題化合物，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，為膠狀物(54.0mg，62％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[1/2M+1＝984]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.97(s，3H)，7.19-7.42(m，5H)，5.44(d，J＝4.3Hz，3H)，5.31(s，3H)，5.10(dd，J＝10.3，4.1Hz，3H)，4.51-4.64(m，12H)，4.45(s，2H)，4.18(d，J＝10.1Hz，3H)，3.99(d，J＝8.6Hz，3H)，3.88(t，J＝4.9Hz，6H)，3.68-3.82(m，12H)，3.52-3.64(m，39H)，3.48(t，J＝6.2Hz，2H)，2.26(t，J＝7.4Hz，2H)，2.15(s，9H)，1.94(d，J＝1.2Hz，18H)，1.84(t，J＝6.8Hz，2H)。

乙酸(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-1-{13-[4-({3-[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-2-[(4-羥基丁醯基)氨基]丙氧基}甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基}-3-(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-2-基酯(l-at-1)

將乙酸(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-1-(13-{4-[(3-[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-2-{[4-(苄氧基)丁醯基]氨基}丙氧基)甲基]-1H-1,2,3-三唑-1-基}-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基)-3-(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-2-基酯(l-as-1)(54.0mg，0.027mmol)溶於甲醇(10.0mL)，然後使用10％披鈀碳(小柱體)，應用如下參數(溫度-60℃，流速-1.0毫升/分鐘，壓力–全H2(1atm))使該溶液通過H-立方體。採集該溶液，減壓濃縮，得到標題化合物，為膠狀物(51.0mg，99％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+Na＝1899]。1H NMR(甲醇-d4)δ：7.98(s，3H)，5.44(d，J＝4.3Hz，3H)，5.32(s，3H)，5.10(dd，J＝10.5，3.9Hz，3H)，4.41-4.66(m，12H)，4.18(d，J＝10.5Hz，3H)，3.99(d，J＝8.6Hz，3H)，3.90(t，J＝5.1Hz，6H)，3.68-3.83(m，12H)，3.51-3.67(m，41H)，2.24(t，J＝7.6Hz，2H)，2.15(s，9H)，1.94(s，18H)，1.69-1.83(m，2H)

N-(1,3-雙[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-二羥基-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}丙-2-基)-4-羥基丁醯胺(64)

向乙酸(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-1-{13-[4-({3-[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]-2-{[(1-{1-[(1S,2R,3R,4R,5S)-4-(乙醯氨基)-2,3-雙(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基}-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲氧基]甲基}-2-[(4-羥基丁醯基)氨基]丙氧基}甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]-2,5,8,11-四氧雜十三烷-1-基}-3-(乙醯氧基)-6,8-二氧雜雙環[3.2.1]辛-2-基酯(l-at-1)(8.5mg，0.0045mmol)在甲醇(1mL)中的溶液中加入0.5M甲醇鈉的甲醇溶液(0.154mL mg，0.0770mmol)，將該反應體系在室溫攪拌3小時。3小時後，通過添加甲醇衝洗的Amberlyst 15離子交換樹脂(CAS#＝39389-20-3，RS-106008)中和該反應體系至pH＝5。過濾該反應混合物，用甲醇將樹脂衝洗2次。減壓濃縮濾液，得到標題化合物，為膠狀物(1.5mg，20％)。方法C：3分鐘運行LRMS[M+45(甲酸)＝1668]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.00(s，3H)，5.21(s，3H)，4.53-4.65(m，12H)，3.92-4.00(m，6H)，3.89(dd，J＝11.1，4.9Hz，9H)，3.74-3.79(m，9H)，3.71(dd，J＝9.8，4.3Hz，3H)，3.52-3.69(m，44H)，2.24(t，J＝7.4Hz，2H)，1.99(s，9H)，1.76(五重峰，J＝6.9Hz，2H)

在方案4中化合物(66)所例示的和在方案3中一般描述的原酸酯連接基可以由本領域技術人員使用(I-aw-1)(參見H.Bruyère等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.，20，2200-2203，(2010))和適合的醇例如(I-an-1)、適合的酸例如對甲苯磺酸吡啶鎓在適合的溶劑例如甲苯中在回流條件下合成，得到(I-ax-1)。可以在本領域技術人員已知的鹼性條件下(例如在甲醇中的催化性碳酸鉀)使(I-ax-1)脫保護，得到本發明的化合物(65)。可以進一步使(65)官能化，得到本發明要求保護的另外的化合物。因此，適合的酸和偶合劑(本領域技術人員已知)或活化酯(例如羥基琥珀醯胺)例如(I-s-1)在適合的溶劑例如N,N-二甲基甲醯胺中使用適合的鹼例如N,N-二異丙基乙胺處理(65)，可以得到化合物(66)。

方案3。

方案4。

按照類似於方案5中所示的類似方式，還可以由本領域技術人員使用(I-av-1)和適合的醇例如(I-an-1)，應用上述對方案4所述的反應條件合成化合物(66)。

方案5。

N-(1,3-二羥基丙-2-基)-6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯胺(l-au-1)

向1-{[6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯基]氧基}吡咯烷-2,5-二酮(l-s-1)(518mg，2.01mmol)在N,N-二甲基甲醯胺(7mL)中的溶液中加入N-(3-二甲基氨基丙基)-N』-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(463mg，2.42mmol)和1-羥基苯並三唑(326mg，2.42mmol)，在室溫攪拌1小時。1小時後，加入2-氨基丙-1,3-二醇(183mg，2.01mmol)，然後加入N,N-二異丙基乙胺(1.05ml，6.04mmol)。將該反應體系在室溫攪拌過夜。18小時後，用水稀釋該反應體系，用二氯甲烷萃取3次。用鹽水洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，減壓濃縮。使用CombiFlash Rf(RediSep 24g矽膠柱)純化粗物質，用0-20％甲醇/二氯甲烷梯度洗脫，得到標題化合物，(368mg，55％)。方法C：1.5分鐘運行LRMS[M+45(甲酸)＝375]。1H NMR(甲醇-d4)δ：8.38(d，J＝4.3Hz，1H)，7.84-7.89(m，1H)，7.77-7.83(m，1H)，7.21(t，J＝5.7Hz，1H)，3.92(五重峰，J＝5.5Hz，1H)，3.51-3.70(m，4H)，2.82(t，J＝7.2Hz，2H)，2.21(t，J＝7.4Hz，2H)，1.71(五重峰，J＝7.3Hz，2H)，1.60(五重峰，J＝7.5Hz，2H)，1.37-1.51(m，2H)

N-(2-甲氧基-1,3-二烷-5-基)-6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯胺(l-av-1)

向N-(1,3-二羥基丙-2-基)-6-(吡啶-2-基二硫烷基)己醯胺(l-au-1)(280mg，0.847mmol)在二氯甲烷(0.605mL)和原甲酸三甲酯(0.5ml，5mmol)中的混合物中加入對甲苯磺酸一水合物(1.78mg，0.00847mmol)。將該反應體系在室溫攪拌3小時。3小時後，TLC顯示原料幾乎完全耗盡。用二氯甲烷稀釋該反應體系，用飽和碳酸氫鈉水溶液(3x1mL)、鹽水(1mL)洗滌，用無水碳酸鉀乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗製標題化合物(263.0mg，83.3％)。方法C：3分鐘運行(基本模式：柱：基質：Waters Acquity UPLC BEH，2.1mmx50mm，C18，1.8μm；流動相：A：0.1％氨水(v/v)；B：0.1％氨的乙腈溶液(v/v))LRMS[M+45＝417]。1：1順式/反式異構體混合物：

異構體1：1H NMR(甲醇-d4)δ：8.41(d，J＝4.7Hz，1H)，7.86-7.92(m，1H)，7.80-7.86(m，1H)，7.20-7.27(m，1H)，5.31(s，1H)，4.29(d，J＝2.7Hz，1H)，3.92-3.96(m，1H)，3.83(br.s.，1H)，3.63(d，J＝5.1Hz，1H)，3.59(dd，J＝11.5，3.7Hz，1H)，3.42(s，3H)，2.85(t，J＝7.2Hz，2H)，2.21-2.30(m，2H)，1.68-1.80(m，2H)，1.56-1.67(m，2H)，1.39-1.53(m，2H)

異構體2：1H NMR(甲醇-d4)δ：8.41(d，J＝4.7Hz，1H)，7.86-7.92(m，1H)，7.80-7.86(m，1H)，7.20-7.27(m，1H)，5.27(s，1H)，4.26(d，J＝2.7Hz，1H)，3.92-3.96(m，2H)，3.86-3.91(m，1H)，3.59(dd，J＝11.5，3.7Hz，1H)，3.38(s，3H)，2.85(t，J＝7.2Hz，2H)，2.21-2.30(m，2H)，1.68-1.80(m，2H)，1.56-1.67(m，2H)，1.39-1.53(m，2H)

藥理學數據

下文所述的功能試驗的一種或多種中的活性可以證明使用本發明化合物治療通過靶向脫唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)調節的疾病的本發明的實施。圓括號內提供供應源。

表面等離振子共振測量

生物素化ASGPR的製備：

在大腸桿菌(E.coli)中將ASGPr H1野生型表達為不溶性包涵體(IB)。將細胞沉澱重新混懸於TBS緩衝液pH 8.0，其含有0.1mg/mL溶菌酶+25微克/毫升DNase+10微克/毫升RNase+10mM MgCl2，並且在冰上攪拌至充分混合。使該混合物通過微觀流體機(microfluidizer)2次，並且以30,000xg離心30分鐘。用TBS緩衝液pH 8.0+3M脲洗滌得到的IB沉澱並且將該過程用水再重複3次。將IB沉澱溶於10mM Tris+8M脲+100mMβ---巰基乙醇(pH 8.5)，攪拌約20分鐘，然後離心以棄去任何沉澱。對於接下來的操作，「緩衝液T」是指20mM Tris+0.5M NaCl+25mM CaCl2。用緩衝液T+2mMβ---巰基乙醇+8M脲(pH 8.0)將上清液稀釋至約0.5mg/mL，然後在4℃對8---10x過量體積的緩衝液T+2mMβ---巰基乙醇+2M脲(pH 8.0)透析過夜。在4℃用緩衝液T+1mMβ---巰基乙醇+1M脲(pH 8.0)重複透析約24h，其中有幾次體積改變，且最終對緩衝液T+5mM GSH+1mM GSSG(pH 7.5)透析，其中有3個體積的改變。離心得到的樣品並且使上清液上N---乙醯基---D---半乳糖胺瓊脂糖填充的Pharmacia XK 26柱，該柱用緩衝液T+2mM TCEP(pH 8.0)平衡。用這種緩衝液洗滌該柱，直到基線再次建立。用20mM Tris+0.5M NaCl+2mM TCEP+2mM EDTA(pH 8.0)洗脫結合的蛋白質。最終來自5L(70wgm.)大腸桿菌細胞沉澱的收率約為50mg。

儘管BSA具有一個未參與二硫鍵的半胱氨酸(Cys34)時，但巰基基團通常用小硫醇類例如半胱氨酸阻滯為混合的二硫化物或通過有氧氧化阻滯為次磺酸。在我們測試的方法中，發現二硫化物還原和標記為用於衍生ASGPR結合結構域的最清潔的方法。選擇弱二硫化物還原條件以便不破壞隱藏的鏈內(溶劑無法接近的)交聯鍵。因此，在生物素化之前即刻首先將ASGPR樣品與1mM TCEP一起溫育，以確保樣品包含單一游離巰基。在4℃使蛋白質與19倍摩爾過量的Pierce馬來醯亞胺---PEG2---生物素試劑在PBS中反應過夜。

使用PD---10柱(GE Healthcare)或Zeba Spin Desalting柱(Thermo/Pierce)，應用製造商的方案，從樣品中除去過量的生物素。產物的LC---MS分析驗證了存在單一物質，添加了525amu，與馬來醯亞胺加合物的分子量一致。由於TCEP存在於馬來醯亞反應整個過程中，所以如果蛋白質被完全還原(使得能夠利用另外的半胱氨酸巰基)，則結果可以為包含多種加合物的不均勻產物，並且在除去關鍵結構二硫鍵時可能發生錯誤摺疊或沉澱。未觀察到這類結果。此外，標準結合特異性(GalNAc與甲基半乳糖苷與乳糖)的觀察強烈地啟示SPR晶片上足夠的蛋白質被適當摺疊並且展示。

SPR結合試驗：

使用化合物的全部SPR測定應用Biacore 3000(GE Healthcare)在25℃下進行。生物素化ASGPR典型地以2000-3000個共振單元(Ru)被固定，該過程使用SA傳感器晶片(GE Healthcare)或常規傳感器晶片與標準胺固定的Neutravidin(Pierce Biochemical)，所述標準胺與CM5傳感器晶片(GE Healthcare)偶合。電泳緩衝液為HBS(10mM HEPES，150mM NaCl)、20mM CaCl2、0.01％p20、3％DMSO或50mM tris、150mM NaCl、50mM CaCl2、0.01％p20、3％DMSO pH 7.5。將化合物以900uM的濃度稀釋入電泳緩衝液，並且順序稀釋3倍至3.7uM。將化合物溶液以50ul/min注射1分鐘，然後進行1min解離，每種濃度一式兩份。對於多聚化綴合物(二聚體、三聚體)，用電泳緩衝液將所述綴合物稀釋至100nM或10nM濃度並且順序稀釋。將綴合物注射2分鐘，並且離線檢測300或600秒。在離線數據完成後，使用注射電泳受體表面至游離狀態的900uM GalNAc替代所述化合物。使用Scrubber2(Biologic Software，Inc.)處理全部數據至零點、校準、參比和校正，以便排除體積效應。通過Scrubber2中擬合所述化合物和單一綴合分子的穩態結合響應確定KDs。用Scrubber2處理顯示動力學響應的多聚化綴合物的KD，並且用BiaEval(GE Healthcare)擬合，以便提取在線和離線參數，從而計算KD。數值反映了來自多次實驗的標準偏差。

得到了下列SPR結合試驗的結果，其中分別報告每次測試或注釋測試次數(n)和標準偏差：

在本申請的上下文中，參考了不同的出版物。通過參考將這些出版物的公開內容完整地併入本申請用於所有目的。

本領域技術人員應當理解，可以在不脫離本發明範圍或精神的情況下進行各種變型和改變。本發明的另外的實施方案從對本說明書的考量和本申請中公開的本發明的實施中對本領域技術人員顯而易見。預期本說明書、包括實施例僅被視為示例性的，本發明的確切的範圍和精神由如下權利要求表示。