薑黃素-鋅化合物及其固體分散體的製備方法與應用的製作方法

2023-11-11 20:45:07

專利名稱：：薑黃素-鋅化合物及其固體分散體的製備方法與應用的製作方法
技術領域：
：本發明涉及醫藥組合物領域，具體涉及薑黃素-鋅化合物結構、薑黃素-鋅化合物及其固體分散體製備方法與醫藥及保健用途。
背景技術：
：總薑黃素[包括薑黃素(curcumin)、去甲氧基薑黃素(demethoxycurcumin)、雙去甲氧基薑黃素(bisdemethoxycurcumin)]，主要活性成分是薑黃素(curcumin)，具有很好的清除自由基、抗氧化、抗突變、延緩衰老、防輻射、抗病毒、防癌抗癌、降血脂和降膽固醇、抗動脈粥樣硬化、治療抑鬱等多種保健及藥理作用。雖然薑黃素具有廣泛的藥理學作用，但極難溶於水，同時生物利用度極低，在鹼性條件或光照條件下不穩定，大大局限了其應用於藥物開發。給大鼠口服lg'kg"薑黃素，約75%自糞便排出，而尿中只有痕量的薑黃素，測定血中薑黃素含量和膽汁排洩結果表明腸吸收不好；動物藥理實驗給予薑黃素的方式釆用腹腔注射，需0.5%二甲基亞碸溶解，而且溶液不穩定，表明由於薑黃素的水溶性差、口服吸收差、生物利用度低，限制其合理應用在人體患者。薑黃素在鹼性溶液中容易降解，在pH7.4的磷酸鹽緩衝液中，薑黃素很快降解，其426nm的吸收值5min後降低到約50X，10min後只剩10X，最後溶液是無色的。AtanuBarik有報導應用薑黃素-銅化合物用於清除自由基反應，由於薑黃素-銅化合物水溶性極差、同時生物利用度極低，局限薑黃素-銅化合物在整體水平發揮作用。國內外査新表明目前並無應用薑黃素-銅化合物的醫藥研究報導，更無應用水溶性聚乙烯吡咯垸酮(PVP)於薑黃素-鋅化合物製備固體分散體及其醫藥用途的報導。由於生活水平的提高和醫療保健的不斷進步，人均壽命越來越長，使世界人口老齡化的趨勢越來越明顯。據中國老年協會專家指出，我國老年人口迅速增長，1990年以來，我國老年人口以平均每年3.32%的速度增長，到2006年底，全國60歲以上老年人口總數已達到1.2億，約佔人中總數的9.5。/。。我國已成為"老年型"國家，隨著老年人口增加，對老年性疾病的防治問題也越來越突出。因此，研製開發新的抗衰老及防治常見老年性疾病的新藥，已成為當今醫藥學界的一個ff究熱點。鋅為體內多種酶的重要組成成份，具有促進生長發育，改善味覺，加速傷口癒合、提高免疫功能、抗氧化等作用，缺鋅可引起的生長發育遲緩，營養不良，厭食症、異食癖以及口腔潰瘍。老年性痴呆症、記憶衰退、高血脂症、腦缺血、動脈硬化、血栓形成、血小板聚集、糖尿病、病毒性傳染病等是常見的老年性疾病，而且許多情況下是多種病症同時出現於同一病人身上。但是，現有的治療這些疾病的藥物普通存在著適用症單一、療效不盡理想的問題。因此，能否研究開發一種對上述多種老年性疾病具有良好綜合治療效果的藥物，這對方便老年性疾病的防治、保證老年人健康將具有十分重要的意義。
發明內容本發明的目的是針對現有老年性疾病治療中普遍存在藥物適用症單一、療效不盡理想的問題，提供一種療效顯著、用途廣泛的薑黃素-鋅化合物及其固體分散體製劑。本發明的另一個目的是提供上述薑黃素-鋅化合物及其固體分散體的製備方法。本發明的進一步目的是提供上述薑黃素-鋅化合物固體分散體在製備用於治療免疫功能低下、胃潰瘍、老年性痴呆症、腎衰、高血脂症、動脈硬化、糖尿病、腦缺血、記憶衰退、心肌缺血、炎症、病毒感染、腫瘤、自由基損傷、肝損傷、抑鬱症的藥物或保健品中的應用。為了實現上述目的，本發明採用如下技術方案本發明利用薑黃素分子中相鄰的兩個羰基與乙酸鋅形成絡合物，並利用聚乙烯吡咯垸酮(PVP-k30)作為載體，利用薑黃素分子中的活潑氫與PVP分子中的羰基O以氫鍵結合在一起，形成薑黃素-鋅化合物固體分散體，大大提高薑黃素-鋅化合物的水溶性，發揮薑黃素與Zn+離子的協同作用，具有更強的藥理作用。薑黃素-鋅化合物固體分散體中薑黃素-鋅與PVP-k30的質量比為1:11:28，優選比例為l:31:18，最佳比例為l:51:16。將薑黃素和乙酸鋅按摩爾比1:11:5分別溶於有機溶劑(如乙醇、丙醇等)，於氮氣保護或在無氧457(TC環境下，將含薑黃素的有機溶液滴加到含乙酸鋅的有機溶液中，攪拌回流35小時，冷卻過濾，收集沉澱物，分別用515。C無水乙醇洗滌沉澱物46次，沉澱物在真空乾燥，得到薑黃素一鋅化合物。將薑黃素-鋅化合物和聚乙烯吡咯垸酮按比例混合溶解於無水乙醇溶液中，通氮氣保護，經高壓均質機均質，過濾，濾液噴霧乾燥得薑黃素-鋅化合物固體分散體。薑黃素-鋅化合物固體分散體可提高薑黃素-鐸化合物的水溶性，療效高於薑黃素的藥理作用，在製備用於治療免疫功能低下、胃潰瘍、老年性痴呆症、腎衰、高血脂症、高膽固醇症、動脈硬化、糖尿病、腦缺血、記憶衰退、心肌缺血、炎症、病毒感染、腫瘤、自由基損傷、肝損傷、抑鬱症的藥物或保健品中具有重要的作用。薑黃素-鋅化合物固體分散體可與普通常規的藥用敷料配合(如十二烷基硫酸鈉(SDS)、微晶纖維素、硬酯酸鎂等)，經常規方法而製得；可根據需要製成適當的劑型，如片劑、粉劑、顆粒劑、膠囊劑、膏劑、糖漿劑、針齊l」、輸液、或栓劑等。通常以口服方式使用，當然也可以採用皮膚外用給藥等其它給藥方式；薑黃素-鋅化合物每天使用劑量一般為約11000毫克，成年人常用量為每天20900毫克，最常用劑量為50700毫克。每天一次或分數次使用。本發明與現有技術相比，具有如下有益效果1.薑黃素-鋅化合物為新化合物，提高提內含鋅抗氧化酶活性，發揮薑黃素與鋅離子的協同作用，大大提高了原有薑黃素的藥理作用。2.薑黃素-鋅化合物固體分散體提高薑黃素-鋅化合物水溶性，解決了薑黃素生物利用度低、吸收差等缺點，本發明的薑黃素-鋅化合物固體分散體用途廣泛，在治療各種老年性疾病中療效顯著；克服了現有老年性疾病治療中普遍存在藥物適用症單一、療效不盡理想的問題。3.本發明的製備方法簡單，應用前景廣闊。具體實施例方式實施例l薑黃素-鋅化合物的製備薑黃素，99.6%純度，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。二水合乙酸鋅(簡稱乙酸鋅)，分析純，由廣州化學試劑批發部提供。將4.8克薑黃素溶於300ml無水乙醇中，2.9克乙酸鋅溶於150ml無水乙醇中，將乙酸鋅乙醇溶液滴加到薑黃素乙醇溶液中，邊滴加邊攪拌，回流加熱3小時，至沉澱完全，抽濾收集沉澱物，重新用300ml5。C無水乙醇震蕩懸浮沉澱物，5000rpm離心5min，收集沉澱物，再用300ml無水乙醇震蕩懸浮，5000rpm離心5min，得4.9克薑黃素-鋅化合物。實施例2薑黃素固體分散體、薑黃素-鋅化合物固體分散體的製備薑黃素(Curcumin)，薑黃素-鋅化合物，純度為99.6%，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯烷酮PVP-k30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。將10.0克薑黃素溶於400ml含有80.0克PVP的無水乙醇溶液中，通氮氣保護，經高壓均質機均質，噴霧乾燥得薑黃素-鋅固體分散體86.7克。將10.0克薑黃素-鋅化合物溶於400ml含有80.0克PVP的無水乙醇溶液中，通氮氣保護，經高壓均質機均質，噴霧乾燥得薑黃素-鋅固體分散體86.2克。實施例3對小鼠急性毒性試驗實驗樣品薑黃素-鋅固體分散體(質量比薑黃素-鋅PVP:SDS=1:6)，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。實驗動物NIH系小鼠18-22g，60隻，雌雄各半，由廣東省醫學實驗動物中心提供。方法與結果選取健康NIH系小鼠，體重20土2g，20隻，雌雄各半，對小鼠禁食不禁水12h後，對應每組小鼠1次灌胃含有薑黃素-鋅固體分散體(200mg/0.5ml)溶液0.8ml，連續觀察7d，小鼠活動正常、敏捷，未引起死亡或異常反應，限於給受試樣品體積不能再增大，故進行最大耐受量試驗。另選擇健康NIH系小鼠20隻，體重20士2g，雌雄各半，對小鼠禁食不禁水12h後，對應每組小鼠1次灌胃裝薑黃素-鋅固體分散體(200mg/0.5ml)溶液0.5ml，每隔3h灌胃一次，共4次，此後連續觀察7d，此期間讓小鼠自由進食和飲水，觀察期間小鼠活動正常，未引起死亡或異常反應。小鼠限於給受試樣品體積不能再增大不能測出LD5。。故改作最大耐受量試驗，結果如下小鼠灌服薑黃素-鋅固體分散體最大耐受量不少於40g4g—1體重，相當給予薑黃素-鋅最大耐受量不少於5.7g.kg—1體重，在給受試樣品觀察期間，小鼠活動敏捷，毛皮光滑，未見死亡。由此可知，薑黃素-鋅固體分散體(質量比薑黃素-鋅PVP=1:6)的最大耐受量不少於40g.kgi體重，相當給予薑黃素-鋅最大耐受量不少於5.7g.kg-M本重，屬於實際無毒級，服用安全。實施例4對心肌缺血的保護作用及清除自由基作用一、實驗樣品薑黃素_鋅固體分散體(薑黃素_鋅PVP，質量比為1:6)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為l:6)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯垸酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。SD大鼠，廣東省醫學實驗動物中心提供；MS-302多媒體生物信號記錄分析系統(廣東生命科學學院)；WZ-50D型微量注射泵(浙江醫科大學醫學儀器廠)二、實驗方法試驗前測定SD大鼠心電圖和胸導聯，棄去T波、ST段位移有異常和心律失常者。選取合格大鼠，體重210.1±20.0g，雌雄兼用，每組8隻大鼠，隨機分為空白對照組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組，空白對照組大鼠灌胃給予等量PVP溶液，其餘各組大鼠分別對應灌胃給予薑黃素、薑黃素-鋅含量為80mg/Kg體重，30min後乙醚麻醉，記錄心電圖後頸背部皮下注射異丙腎上腺素(Isoproterenol,ISO)2mg/kg，30min後再記錄心電圖1次，24h和48h後再一次灌胃受試品30min後，各組按上述方法重複給ISO並記錄心電圖。72h後再一次灌胃受試品30min後，大鼠眼睚取血並離心分離血清，處死大鼠，剪取心尖以4。C生理鹽水製成10%的心肌組織勻漿備用o対i:st段位移幅度的影響測量第一次給ISO前、第一、二、三次皮下注射ISO後30min各鼠ST值，計算SST的nw數均值作為心肌損傷程度的指標並做t檢驗。對血清中CK、LDH和MDA的影響用試劑盒測血清中的丙二醛(MDA)、乳酸脫氫酶(LDH)和肌酸激酶(CK)的變化。三、結果1對SST段的影響ST段的變化幅度可基本反映心肌缺血的嚴重程度，而SST段可作為缺血程度的定量指標。皮下注射ISO誘發大鼠心肌缺血後，ST段明顯抬高，顯示大鼠心肌有嚴重的心肌缺血損傷。薑黃素-鋅固體分散體對能降低皮下注射ISO引起的ST段的異常抬高程度(SST平均位移幅度)，優於薑黃素固體分散體。如表l。表1對異丙腎上腺素致大鼠心肌損傷模型中2ST的影響(x±s,n=8)tableseeoriginaldocumentpage11與空白對照組相比，*P<0.05,**P<0.01;與薑黃素組比較，#P<0.05，對血清中CK、LDH和MDA的影響大鼠皮下注射ISO後，血清中的CK、LDH和MDA均明顯上升，顯示由於心肌組織的損傷而使心肌細胞中的CK和LDH漏出到血液中，血清中的脂質過氧化物(Lipidper-oxidation，LPO)大量增加。結果顯示受試化合物可明顯抑制CK和LDH從心肌細胞內向血清中漏出，顯著抑制Iso致大鼠血清中MDA的異常升高，對自由基損傷具有保護作用。結果表明薑黃素-鋅固體分散體對ISO致心肌缺血、自由基損傷具有保護作用，優於薑黃素固體分散體。表2對Iso致心肌損傷大鼠血清的影響(x土s，n=8)tableseeoriginaldocumentpage12與空白對照組相比，***P<0.001;與薑黃素組比較，#P<0.05，##P<0.01，鵬P〈0.001實施例5對腦缺血、記憶衰退模型的保護作用一、實驗材料薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為l:10)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為1:10)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯垸酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。NIH系小鼠，由廣東省醫學實驗動物中心提供。劑量實驗方法與結果NIH小鼠，18-22g，以戊巴比妥鈉6011^.]^-1，麻醉，進行手術。將小鼠仰臥位固定，頸部正中切開皮膚約7mm，分離兩側頸總動脈，並套以"O"號絲線，缺血時用動脈夾夾閉雙側頸總動脈2min，造成大腦缺血狀態，缺血結束，鬆開動脈夾，恢復血液再灌注，短時間歇5min，如此反覆二次。阻斷頸總動脈血流後，縫合切口。加上尾端放血，放血量為總血量的10%以下。術畢從腹腔內注入適量的生理鹽水以補充血容量。假手術組麻醉後分離雙側頸總動脈但不阻斷血流，亦不放血。雙側頸總動脈完全阻斷後，首先出現驚厥，體溫降低，呼吸減慢，最後翻正反射消失。實驗動物以體溫降低和翻正反射消失為缺血陽性指標，無典型缺血指徵者棄之不用。在缺血過程中、或手術後均會有動物死亡。恢復血液灌注後，動物翻正反射逐漸恢復，呼吸加快，3-5h基本恢復正常活動。手術後的動物隨機分為4組假手術組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組、空白對照組，每組10隻。每天給藥一次，空白對照組小鼠灌胃給予等量PVP，其餘各組小鼠分別對應給予薑黃素、薑黃素-鋅含量為卯mg/Kg體重，按表3劑量灌胃，連續給藥15天。15天後進行記憶試驗。表3對腦缺血再灌注損傷小鼠腦記憶避暗實驗的作用(i±s,f10)tableseeoriginaldocumentpage13與空白對照組相比，'戶<0.05/*屍<0.001;與薑黃素組比較，#P<0.05從表3的結果顯示，假手術組與空白組相比，進入暗箱的潛伏期明顯延長，受電擊次數明顯減少(代0.01)，說明腦缺血再灌注對小鼠的學習記憶功能造成了明顯損害。與空白對照組相比，薑黃素-鋅固體分散體能夠明顯延長進入暗箱的潛伏期，同時能顯著降低錯誤次數，對腦缺血、記憶衰退具有保護作用。薑黃素-鋅固體分散體對腦缺血、記憶衰退具有保護作用，優於薑黃素固體分散體。實施例6對機體免疫功能的影響一、實驗材料薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為1:8)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為l:8)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯烷酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。NIH系小白鼠，S.D.系大白鼠，由廣東省醫學實驗動物中心提供；家雞，由中山大學菜市場購得。二、實驗方法對小鼠胸腺和脾臟的作用選擇健康NIH系小鼠40隻，1822g，雌雄各半，隨機選取10隻作為正常對照組，雌雄各半，其餘30隻實驗時腹腔注射環磷醯胺60mg/Kg體重，隨機分成3組，每組10隻，雌雄各半，即空白對照組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組。灌胃給受試樣品，空白對照組及正常對照組小鼠給予同量PVP，薑黃素組、薑黃素-鋅固體分散體組小鼠分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅50mg/Kg體重相應製劑受試樣品，連續給受試樣品30d，第30d各組小鼠禁食一天，但提供飲水。第31d，處死各組小鼠，稱量各組小鼠的體重，胸腺及脾臟重量，計算胸腺指數及脾臟指數，比較各組間的差異。三、實驗結果表4對小鼠胸腺和脾臟的作用(x士SD，n=10)tableseeoriginaldocumentpage15與空白對照組相比，**P<0.01，***P<0,001。與薑黃素組比較,W〈0.05與空白對照組相比，受試物能夠對小鼠胸腺指數及脾臟指數顯著升高，具有提高免疫功能作用。薑黃素-鋅固體分散體對小鼠胸腺指數及小鼠脾臟指數升高優於薑黃素固體分散體。實施例7對腎功能衰竭的作用一、實驗材料1.1動物NIH小鼠，18-22g，雌雄各半，由廣東省醫學實驗動物中心提供。1.2薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為h8)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為1:8)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯烷酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。二、實驗方法內毒素致動物急性腎衰模型選取小鼠40隻，隨機分為4組，分別為正常對照組、病理模型組、薑黃素組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組10隻。正常對照組、病理模型組小鼠分別灌胃給予等量PVP溶液，薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組小鼠分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅50mg/Kg體重相應製劑受試樣品，然後立即尾靜脈注射內毒素0.06g/kg(正常對照組注射等量的等量PVP溶液)。5h後，小鼠摘眼球取血，測定血清尿素氮(BUN)和肌肝(Cr)濃度。取各小鼠一隻腎分別製成100mhL—1勻漿，測定穀胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性。三、實驗結果與模型組相比，薑黃素-鋅固體分散體能夠有效抑制因內毒素致小鼠血清BUN、Cr值升高，提高GSH-Px酶活性，對內毒素致動物急性腎衰具有保護作用，優於薑黃素固體分散體。表5受試化合物對急性腎功能衰竭的作用(5土SD，n=10)劑量組別^^^mg/kgCr/10mg.U1BUN/10mg,U1GSH-Px/nU.U1正常對照組—17.5±2.4***247.5±23.2***50.2±22.4,病理模型組—70.2±20.1420.3±27.828.7±10.6薑黃素-鋅組5035.3±11.4**##283.0±25.4***絲#34.5±9.2**##薑黃素組5048.2±7.2*"362.4±31.7***22.4±5.9*與病理模型組相比，"巧—<0.01:——^5T^S録il^W，〈^T"""~實施例8對治療老年性痴呆症的藥理作用一、實驗樣品薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為l:8)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為1:8)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯垸酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。NIH系小鼠18-22g，60隻，雌雄各半，由廣東省醫學實驗動物中心；實驗藥品致老年痴呆藥物AmyloidP-蛋白(AP1-42片段)，分子量4514.1，SigmaChemicalCo.出品，產品號[107761-42匿2]。二、方法與結果NIH系小鼠，40隻，雌雄各半，隨機分為4組，每組10隻，分別為正常對照組、空白模型組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組10隻。正常對照組、空白模型組小鼠分別灌胃給予等量PVP溶液，薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組小鼠分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅50mg/Kg體重相應製劑受試樣品。各組NIH小鼠(正常組除外)，每隻小鼠腹腔注射0.45%戊巴比妥鈉O.lm1/10g體重麻醉。碘酒、酒精消毒頭頂皮膚後，縱向正中切開顱頂皮膚，暴露顱骨，在bregzna點後2.0mm，左右旁開2.5mm處用注射器鑽一小孔，以5^1注射器緩速注入2^1AP溶液，濃度為7|ag/)Lil，30分鐘內注射完畢，留針5分鐘，取出注射器，縫合皮膚。造模次日開始給藥，連續30d每天灌胃一次。跳臺法實驗跳臺法實驗的原理是反應箱底鋪有通36V電的銅柵，動物受到電擊。其正常反應是跳上箱內絕緣的平臺以避免傷害性刺激。多數動物可能再次或多次跳至銅柵上，受到電擊又迅速跳回平臺，如此訓練5min，並記錄每隻小鼠受到電擊的次數，即錯誤次錯誤次數，以此作為學習成績。24h後重複作試驗，此即記憶保持試驗。記錄受電擊的動物數，第一次跳下平臺的潛伏期和3min的錯誤次數。具體做法是:給藥末次後次日開始訓練。將動物放入反應箱內適應環境3min，然後立即通以36V的交流電。動物受到電擊，其正常反應是跳回平臺，以躲避傷害性剌激。小鼠雙足同時接觸銅柵為觸電，視為錯誤反應。多數動物可能再次或多次跳至銅柵上，受到電擊又迅速跳回平臺上，如此訓練5min(同一試驗中所有小鼠訓練時間相同)，記錄每鼠後5min的錯誤次數，以此作為學習成績。24h後重複作試驗，即記憶保持試驗。記錄動物第一次跳下平臺的潛伏期和3min內的錯誤總數，同時計算動物出現錯誤反應的頻率。表6對Ap所致小鼠痴呆模型跳臺法實驗的作用(5±SD,n=10)tableseeoriginaldocumentpage18與空白對照組比較，*P<0.05,"PO.01,"*P<0.001與薑黃素組比較,#P<0.05，老年性痴呆症是以大腦神經細胞死亡，神經纖維纏結，大腦神經細胞和腦血管出現老年性斑塊為特徵。往小鼠的海馬區注射Ap蛋白造成大腦神經細胞和腦血管形成老年性斑塊，從而形成痴呆模型。薑黃素-鋅固體分散體對老年痴呆模型小鼠腦記憶的獲得、鞏固均表現出明顯的增強作用，提示具有抗痴呆作用，優於薑黃素固體分散體。實施例9對動脈硬化的藥理作用一、實驗樣品薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為1:8)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為1:8)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯烷酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。實驗動物SD系雄性大鼠，由廣東省醫學實驗動物中心提供。二、實驗方法選擇健康S.D.系大鼠，體重275±20g，雄性，共30隻，隨機分組，分別為空白模型組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組10隻。空白模型組大鼠灌胃給予等量PVP溶液，薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組大鼠分別對應給予含薑黃素、薑黃素-鋅80mg/Kg體重相應製劑受試樣品。按表9連續給受試樣品15d，第16d禁食12h，給受試樣品lh後，用4%戊巴比妥鈉42mg/kg腹腔注射麻醉，仰臥體位固定動物手術臺上，進行頸動脈-頸靜脈環插管手術；將大鼠氣管分離，插入一短塑料管，隨時將氣管分泌物從套管中吸出。剖離左頸總動脈，右側頸外靜脈，取一段聚乙烯軟質塑料細管(長管為7.3cm，內徑0.15cm，管厚為0.03cm)，內放一根8cm長的醫用縫合線，塑料管兩端用小管將肝素鈉水溶液(50U/ml)充滿聚乙烯管。將聚乙烯管的一端插入右側頸外靜脈，而另一端插入左頸總動脈，結紮固定。準備好後，打開血流，血流從左頸總動脈流至聚乙烯管內，返回右外側靜脈管，準確開^^血流15min後，立即中斷血液，迅速取出絲線，用電子分析天平稱總溼重。總溼重量減去絲線重得血栓溼重。選擇健康SD系大鼠，體重275士20g，雄性，共30隻，隨機分組，分為空白模型組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組10隻。空白模型組大鼠灌胃給予等量PVP溶液，薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組大鼠分別對應給予含薑黃素、薑黃素-鋅80mg/Kg體重相應製劑受試樣品。按表9連續給受試樣品15d，第16d禁食12h，給受試樣品0.5h後，用戊巴比妥鈉溶液(30mg/kg體重)腹腔注射麻醉後解剖分離頸總動脈，插入聚乙烯管取血，用3.8%枸椽酸鈉作抗凝劑(抗凝劑血體積為1:9)，800rpm離心5min，吸取上層乳白色的富血小板血漿(PRP)，剩餘部分再以3000rpm離心10min，取上清液即貧血小板血漿(PPP)，用PPP調PRP，使血小板記數為6090萬/mm3。按比濁法，為了消除不同血小板數量的影響，用同一血樣的PRP和PPP作為縱生標(血小板聚集率)的零點和頂點，以PPP為100%，PRP為0。/c)，這樣的相對測量就排除了血小板數量的影響。每支比濁管加入20)^1PRP，用20^1誘導劑(4mMAA，或0.2M/LpH7.4磷酸緩衝液配製3.0pMADP),誘導血小板聚集，10min內測定血小板聚集表7tableseeoriginaldocumentpage21與空白對照組相比***p<0.001;與薑黃素組比乾糾P〈0.0]，,PO.001由大鼠血栓形成及血小板聚集實驗結果可知，薑黃素-鋅固體分散體具有明顯的抗血栓形成作用及血小板聚集作用，提示其具有抗動脈硬化作用，優於薑黃素固體分散體。實施例10對大鼠脂代謝紊亂治療性給藥模型的藥理作用一、實驗樣品薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為l:8)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為1:8)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯垸酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。二、實驗動物SD系雄性大鼠，由廣東省醫學實驗動物中心提供.選擇健康S.D.系大白鼠，雄性，200±20g，在實驗環境下給普通飼料餵養，觀察6d，無發現異常。然後剪尾取血，分離血清，測定其各項血脂指標，淘汰異常血脂指標的動物，選取血脂指標正常者，共50隻，供給食物和飲水，這批大鼠每天上午定時灌服高脂食物(80%豬油+4。/。膽酸鈉+4n/。膽固醇+12n/。蛋黃粉)20ml/kg體重，連續灌服30d。第31d禁食12h，剪尾取血，分離血清，測定甘油三酯TC含量，挑出高於600mg/dl的大鼠30隻，隨機分為3組，即高脂對照組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組。高脂對照組大鼠分別灌胃給予等量PVP溶液，薑黃素組、薑黃素-鋅固體分散體組大鼠分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅50mg/Kg體重相應製劑受試樣品。連續給受試樣品25d，第26d禁食12h，將大鼠取血測定各項血脂指標。表9對大鼠脂代謝率紊亂治療性給藥血脂指標的影響(rr-10，5士SD)tableseeoriginaldocumentpage22與高脂對照組相比**p<0.01,***p<0.001;與薑黃素組比較P<0.01,,P<0.001由大鼠脂代謝紊亂預防性給藥及治療性給藥模型實驗結果表明與模型組相比，薑黃素-鋅固體分散體能夠對高血脂症、高膽固醇症具有明顯的治療作用，優於薑黃素固體分散體。實施例11對糖尿病模型的藥理作用一、實驗樣品薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為l:8)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為1:8)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯烷酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。實驗試劑四氧嘧啶二、實驗動物NIH系小鼠，由廣東省醫學實驗動物中心提供；三、方法與結果選擇健康NIH系小鼠，雄性，1822g，50隻，隨機選擇10隻小鼠作為正常對照組，另外40隻禁食12h後，腹腔注射四氧嘧澱250mg/Kg體重，6h後灌服2.5g/Kg的葡萄糖液，使小鼠安全渡過低血糖相，隨後小鼠提供食物和飲水，36h後再禁食12h，從小鼠眼眶靜脈取血，測定腹腔注射四氧嘧啶小鼠的血糖值，選擇血糖值大於200mg/dl的小鼠30隻，隨機分成3組，高血糖模型組、薑黃素組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組10隻。正常對照組、高血糖模型組小鼠分別灌胃給予等量PVP溶液，薑黃素固體分散體組、薑黃素_鋅固體分散體組小鼠分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅40mg/Kg體重相應製劑受試樣品。連續給受試樣品12d。末次給受試樣品前禁食12h，小鼠給受試樣品後lh眼眶靜脈取血，採用血糖測定試劑盒測定血糖含量。表10對四氧嘧啶所致小鼠糖尿病模型的藥理作用(；土SD，n=10)tableseeoriginaldocumentpage24與高血糖對照組相比**p<0.01,***p<0.001與薑黃素組比較,P〈0.01由四氧嘧啶所致小鼠糖尿病模型所致小鼠糖尿病模型實驗結果可知，與模型組相比，薑黃素-鋅固體分散體具有明顯的降血糖作用，優於薑黃素固體分散體。實施例12對B肝病毒的藥理作用一、實驗樣品薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為1:8)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為l:8)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯烷酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。實驗動物紐西蘭兔，由中山醫科大學實驗動物中心提供，自由飲水，普通兔飼料餵養。實驗試劑HBsAg標準品，由中國藥品生物製品檢定所提供，HBeAg酶聯診斷試劑盒，上海實業科華生物工程有限分司生產。HbsAg強陽性血清，由廣州中醫藥大學第一附屬醫院檢驗科提供，為20份高效價HBsAg強陽性血清(HBsAg、HBeAg、抗-HBc、HBVDNA均為陽性)混合而成，置-2(TC冰箱保存備用。二、方法與結果含藥血清的製備選取24隻體重為2.0±0.2kg的紐西蘭兔，隨機分成空白模型組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組8隻，雌雄各半。空白模型組紐西蘭兔分別灌胃給予等量PVP溶液，薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組紐西蘭兔分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅200mg/Kg體重相應製劑受試樣品。每天1次，連續8天。於最後一次給藥後lh，心臟採血，無菌分離血清，部分血清經56"C30miii滅活，部分不滅活，用0.45^liti的微孔濾膜過濾除菌，置-2(TC冰箱保存備用。HBsAg陽性血清中HBsAg含量的標定將HBsAg強陽性血清用含20%小牛血清的生理鹽水1:2、1:4、1:8、1:16......1:16384的倍比稀釋，隨後用ELISA法檢測各樣品和1嗎/L、2嗎/L、5嗎/LHBsAg標準品的P/N值，重複做3次，每次均做雙份平行實驗。最後根據HBsAg濃度--P/N值標準曲線求出HBsAg強陽性血清中的HBsAg濃度，置-2(TC冰箱保存備用。空白血清滅活與否對HBeAg的影響取滅活空白兔血清、未滅活空白兔血清、含20%小牛血清的生理鹽水各200^1分別與50|_il500pg/LHBsAg陽性血清在37。C下作用4h，每個樣品均做10孔,然後用HBeAg酶聯診斷試劑盒檢測作用後HBeAg的P/N值，並進行t檢驗分析。含藥血清、空白兔血清各200(i1分別與50p500|1g/LHBsAg陽性血清在37t:下作用4h，每個樣品均做10孔，然後用HBeAg酶聯診斷試劑盒檢測作用後HBeAg的P/N值，並進行t檢驗分析。空白血清滅活與否對HbeAg的影響滅活空白兔血清、未滅活空白兔血清分別與500|lig/LHBsAg陽性血清在37。C下作用4h，檢測作用後HBeAg的P/N值，結果未滅活空白兔血清對HBeAg具有抑制作用(P〈0.05)，且未滅活空白兔血清和滅活空白兔血清對HBeAg的影響有顯著性差異(P<0.05)，故在以下的實驗中將家兔的空白血清和含藥血清均進行56°C30min滅活處理。表ll空白血清滅活與否對HBsAg的影響(^士SD)tableseeoriginaldocumentpage26注與滅活空白兔血清比較APX).05J"P〈0.001;與薑黃素組比較，存P〈0.05，*P<0.01,###P<0.001與空白血清相比，薑黃素-鋅固體分散體對B肝病毒具有明顯的抑制作用，優於薑黃素固體分散體。實施例13對乙酸燒灼誘導大鼠胃潰瘍模型作用實驗樣品薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為h8:)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為1:8)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯烷酮PVPk30(簡稱PVP),進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。實驗動物SD系雄性大鼠，由廣東省醫學實驗動物中心提供。選擇健康SD大鼠30隻，雌雄各半，體重200士10g，實驗前大鼠禁食不禁水24h，用30mg/kg戊巴比妥鈉麻醉，無菌條件於劍突下2cm處打開腹腔，將內徑5mm、長30mm的玻璃管垂直放於胃體部漿膜面上，向管內加入乙酸0.02mL，lmin後用棉籤蘸出乙酸，用無菌生理鹽水衝洗兩次，逢合切口。隨機分成3組，每組10隻(雌雄各半)，即隨機分成空白模型組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組10隻，雌雄各半。空白對照組大鼠灌胃給予PVP500mg/Kg體重(排除敷料對胃黏膜的影響)，薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組大鼠分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅200mg/Kg體重相應製劑受試樣品。連續給藥14d，第15d禁食不禁水24h後，眼眶靜脈叢取血3mL，其中2mL注入含10%EDTA-Na230aL和抑肽酶的試管中，混勻，4°c,3000rmp離心10min，分離血漿，-20卩保存待測；餘下lmL注入玻璃管中，室溫靜置一段時間後分離血清，-20°<:保存待測。血清NO和血漿ET測定按說明書操作。脫頸椎處死大鼠，打開腹腔結紮幽門賁門取胃，向胃中注入4%甲醛溶液5mL，固定30min後沿胃大彎剪開，將胃外翻，洗去食物殘渣。潰瘍成圓形或橢圓形，測量潰瘍處的最長徑和最短徑，以他們的均值作為潰瘍指數。在各組間進行統計比較，按公式l-l計算潰瘍抑制率。扭、Awzv啦…對照組潰瘍直徑均值—實驗組潰瘍直徑均值潰瘍癒合百分率(％)=-甜昭站德皮古込化估-xioo%與模型組相比，薑黃素-鋅固體分散體對該模型胃潰瘍具有顯著的抑制作用，優於薑黃素固體分散體。表13對乙酸燒灼性胃潰瘍的作用G土SD，n=10)組別劑量(mg/kg:i潰瘍指數癒合率(％)模型組(給予輔料PVP)5009.76士0.69—薑黃素-鋅組50372+035***###61,9薑黃素組505.26±0.10***46.1與模型組比較，***p<0.001;與薑黃素組比較，弁P〈0.05，抑ttP〈0.001對血清NO與血漿ET含量的影響與模型組相比，薑黃素-鋅固體分散體具有升高血清NO水平作用，降低血漿ET水平作用，優於薑黃素固體分散體。表14對各組血清NO和血漿ET含量的影響(；±SD，n=10)組別劑量(mg/kg)血清NO(iimol/mL)血漿ET(pg/mL)模型組(給予輔料PVP)50031.4±6.5213.1±25.3薑黃素-鋅組5052.5±11.4***#125.7士14.2,絲薑黃素組5040.4±7.6*156.7土20.9***與模型組比較，"*p<0.001;與薑黃素組比較，雜ttP〈0.001實施例14對大鼠棉球肉芽腫的炎症實驗實驗樣品薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為1:8)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為1:8)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯垸酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。實驗動物SD系雄性大鼠，由廣東省醫學實驗動物中心提供選取體重健康的雄性SD大鼠30隻，體重180-200g，隨機分成3組，分別為病理模型組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組10隻大鼠。大鼠在乙醚淺麻醉下腹部去毛並用75%酒精和碘酒消毒。在腹部正中做一個切口，將兩個滅菌棉球(每個棉球重20mg，高壓滅菌，各加入氨苄青黴素每個lmg/0.1ml，5(TC烘箱烤乾)分別植入大鼠兩側腋窩皮下(或兩側腹股溝皮下)，將切口縫合後用75%酒精和碘酒消毒。於手術後當天開始灌胃給藥，空白對照組大鼠灌胃給予等量PVP溶液，薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅60mg/Kg體重相應製劑受試樣品。每天一次，連續14d。15d頸椎脫臼處死，剝離並取出棉球肉芽組織，然後在6(TC烘箱內烘12h後稱千重，相比各組肉芽腫脹重量。實驗結果進行統計學處理並比較組間差異。大鼠棉球肉芽腫實驗植入棉球後，大鼠傷口癒合良好。連續給藥14d後，空白對照組大鼠腋下肉芽腫非常明顯。與模型組相比，薑黃素-鋅固體分散體能夠明顯抑制棉球肉芽腫的增生，具有抗炎作用，優於薑黃素固體分散體。表15對大鼠棉球肉芽腫的影響(5士S)complextableseeoriginaldocumentpage30實施例15抗腫瘤實驗實驗樣品薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為1:8)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為1:8)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯烷酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。實驗動物NIH純系小白鼠，由廣東省醫學實驗動物中心提供，艾氏腹水瘤腫瘤、移植性肉瘤(S180)和移植性肝癌(HepA)細胞，由廣州中山大學腫瘤研究中心提供。對小鼠移植性肉瘤S180的作用取小鼠30隻,於小鼠右腋下皮下接種肉瘤S180細胞懸液(1.0X1(f個/L)0.2ml，接種次日隨機分為3組，分別為空白對照組、薑黃素組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組10隻小鼠，空白對照組小鼠灌胃給予等量膠囊，薑黃素組、薑黃素-鋅固體分散體組分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅60mg/Kg體重相應製劑受試樣品。每天一次，連續10d，停藥次日處死動物，稱量體重、胸腺及脾臟重量,按下式計算抑瘤率抑瘤率(％)=(1—給藥組平均瘤重/對照組平均瘤重>100%。對HepA小鼠生存期的影響取小鼠30隻，於小鼠腹腔內接種HepA細胞懸液(1.0x107個/ml)0.2ml，接種次日隨機分為3組，分別為空白對照組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組10隻小鼠，空白對照組小鼠灌胃給予等量PVP溶液，薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅60mg/Kg體重相應製劑受試樣品。每天一次，連續10d，記錄自然死亡的天數,按下式計算其生命延長率生命延長率=(實驗組平均生存天數/對照組平均生存天數一1)><100%。對小鼠艾氏腹水瘤的作用取小鼠30隻，於小鼠腹腔接種艾氏腹水瘤(1加107個1)0.21111,接種次日隨機分為3組，分別為空白對照組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組10隻小鼠，空白對照組小鼠灌胃給予等量PVP溶液，薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅60mg/Kg體重相應製劑受試樣品。每天一次，連續10d，連續10d，記錄自然死亡的天數,按下式計算其生命延長率生命延長率=(實驗組平均生存天數/對照組平均生存天數一1)X100%。抑瘤率(％)=(1_給藥組平均瘤重/對照組平均瘤重)乂100%。表16對小鼠移植性肉瘤S180的抑制作用(5±s,n=10)tableseeoriginaldocumentpage32與空白對照組比較，**P<0.01,***P〈0.001;與薑黃素組比較,#P<0.05，P<0.01,tt,〈0.001表17對H印A小鼠生存期的影響(S±s，n=10)tableseeoriginaldocumentpage32與空白對照組比較，*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001與薑黃素組比較,抑ttP〈0.001表18對艾氏腹水瘤小鼠生存期的影響(5±S，n=10)tableseeoriginaldocumentpage32與空白對照組比較，*P〈0.01;與薑黃素組比乾糊P<0.01與空白對照組相比，薑黃素-鋅固體分散體對Sl80肉瘤有顯著的抑制作用，對艾氏腹水瘤小鼠、HepA小鼠生存期延長，優於薑黃素固體分散體。實施例16對四氯化碳所致大鼠肝損傷的保護作用實驗樣品薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為l:6)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為1:6)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯垸酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。實驗動物SD純系大白鼠，由廣東省醫學實驗動物中心提供；取健康SD大鼠40隻，雄性，體重230士25g，隨機分成4組，分別為正常對照組、空白對照組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組，每組10隻大鼠，空白對照組、正常對照組大鼠灌胃給予等量PVP溶液，薑黃素組、薑黃素-鋅固體分散體組分別對應給予含薑黃素或薑黃素-鋅60mg/Kg體重相應製劑受試樣品。從開始實驗之日起，正常對照組大鼠腹腔注射花生油5ml/kg，其餘五組大鼠腹腔注射25。/。CCU-花生油5ml/kg，連續給藥10天，第11天禁食，不禁水24h，給藥lh後取血離心3000rpmxl0min,測定血清中ALT、AST、Alb含量。與空白對照組比較，薑黃素-鋅固體分散體具有抗肝損傷作用，抑制血清中ALT和AST的含量，同時顯著的提高血清中Alb的含量，優於薑黃素固體分散體。表19tableseeoriginaldocumentpage33與空白對照組比較,^P<0.001;與薑黃素組比較,糊P〈0.01實施例17對強迫小鼠遊泳不動時間的影響實驗樣品薑黃素-鋅固體分散體(薑黃素-鋅PVP，質量比為1:8)，薑黃素固體分散體(薑黃素PVP，質量比為1:8)，製備方法同實施例2，由中山大學生命科學學院中藥與海洋藥物實驗室提供。聚乙烯吡咯垸酮PVPk30(簡稱PVP)，進口分裝，由廣州化學試劑批發部提供。使用時樣品溶於水中分別用灌胃給藥。實驗動物昆明純系小白鼠，由廣東省醫學實驗動物中心提供；雄性昆明小鼠30隻，體重1825g，隨機分成3組，每組10隻，分別為正常對照組、空白對照組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組。空白對照組給予等量PVP溶液，每日上午準時灌胃給藥，1次/d，連續8d。小鼠末次灌胃給藥後lh，將小鼠置於水深10cm的玻璃皿(高30cm，直徑18cm)，小鼠遊泳2min後，立即開始觀察，觀察持續4min，累計此4min內小鼠在水中停止掙扎，或呈漂浮狀態，僅有細小的肢體運動以保持頭部浮在水面的持續時間(不動時間)。比較給藥組和對照組在後4min內的累計不動時間。表20對小鼠強迫遊泳不動時間的影響(i土S.D.，n=10)tableseeoriginaldocumentpage34與空白對照組比較，*P<0.01,***P<0.001;與薑黃素組比較/P〈0.05對小鼠懸尾不動時間的影響雄性昆明小鼠，體重1825g，共30隻，隨機分成3組，每組IO只，分別為空白對照組、薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組。空白對照組給予等量PVP溶液，每日上午準時灌胃給藥，l次/d，連續8d。小鼠末次灌胃lh後將小鼠尾端2cm處固定於水平面上，使其呈倒掛狀態，頭部離臺面30cm，四周以板隔離動物視線，首先讓小鼠適應2min，記錄小鼠在後6min內的不動時間。表21對小鼠懸尾不動時間的影響(3f±S.D.，n=10)tableseeoriginaldocumentpage35與空白對照組比較，*P<0.01,***P〈0.001;與薑黃素組比較/P〈0.05小鼠在強迫遊泳模型中出現的不動狀態也反映了動物的絕望行為。薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組能顯著縮短小鼠強迫遊泳不動時間，與空白對照組，具有顯著性差異，提示薑黃素固體分散體、薑黃素-鋅固體分散體具有抗抑鬱的作用，而薑黃素-鋅固體分散體的效果優於薑黃素固體分散體。小鼠在懸尾模型中出現的不動狀態反映了動物的絕望行為。小鼠在強迫遊泳模型中出現的不動狀態也反映了動物的絕望行為。薑黃素固體分散體組、薑黃素-鋅固體分散體組能顯著縮短小鼠強迫遊泳不動時間，與空白對照組，具有顯著性差異，提示薑黃素固體分散體、薑黃素-鋅固體分散體具有抗抑鬱的作用，而薑黃素-鋅固體分散體的效果優於薑黃素固體分散體。權利要求1.一種薑黃素-鋅化合物，其結構式如(I)所示Me代表CH3。2.權利要求1所述薑黃素-鋅化合物的製備方法，其特徵在於將薑黃素和乙酸鋅按摩爾比l:11:5分別溶於有機溶劑，於氮氣保護或在無氧4570℃環境下，將含乙酸鋅的有機溶液滴加到含薑黃素的有機溶液中，攪拌回流35小時，冷卻過濾，收集沉澱物，分別用515℃無水乙醇洗滌沉澱物46次，沉澱物在真空乾燥，得到薑黃素-鋅化合物。3.如權利要求2所述的製備方法，其特徵在於所述有機溶劑為乙醇、丙醇等溶解乙酸鋅的溶液。4.一種薑黃素-鋅化合物固體分散體，其特徵在於由薑黃素-鋅化合物、聚乙烯吡咯烷酮組成，薑黃素-鋅化合物和聚乙烯吡咯烷酮的質量比為1:11:28。5.如權利要求4所述的薑黃素-鋅化合物固體分散體，其特徵在於所述薑黃素-鋅化合物和聚乙烯吡咯烷酮的質量比為1:31:18。6.如權利要求4所述的薑黃素-鋅化合物固體分散體，其特徵在於所述薑黃素-鋅化合物和聚乙烯吡咯垸酮的質量比為1:51:16。7.權利要求4所述薑黃素-鋅化合物固體分散體的製備方法，其特徵在於包括如下步驟將薑黃素-鋅化合物、PVP按比例混合溶解於無水乙醇中，通氮氣保護，經高壓均質機均質，過濾，濾液噴霧乾燥得薑黃素-鋅化合物固體分散體。8.權利要求4所述薑黃素-鋅化合物固體分散體在製備用於治療免疫功能低下、胃潰瘍、老年性痴呆症、腎衰、高血脂症、高膽固醇症、動脈硬化、糖尿病、腦缺血、記憶衰退、心肌缺血、炎症、病毒感染、腫瘤、自由基損傷、肝損傷、抑鬱的藥物或保健品中的應用。全文摘要本發明公開了一種薑黃素-鋅化合物及其固體分散體的製備方法與應用。薑黃素-鋅化合物與聚乙烯吡咯烷酮K30的質量比為1∶1～1∶28。將薑黃素和乙酸溶於有機溶劑，氮氣保護下，將含有乙酸鋅的有機溶液滴加到含有薑黃素的有機溶液中，攪拌回流，冷卻過濾，收集沉澱物，洗滌，沉澱物在真空乾燥，得到薑黃素-鋅化合物。將薑黃素-鋅化合物和PVP-k30混合溶解於無水乙醇中，通氮氣保護，均質，過濾，濾液噴霧乾燥即可得到薑黃素-鋅化合物固體分散體。薑黃素-鋅化合物固體分散體解決了薑黃素存在的各種缺點，在治療各種老年性疾病中療效顯著；克服了現有老年性疾病治療中普遍存在藥物適用症單一、療效不盡理想的問題；製備方法簡單，應用前景廣闊。文檔編號C07F3/06GK101205234SQ200710032500公開日2008年6月25日申請日期2007年12月14日優先權日2007年12月14日發明者梅雪婷,許東暉,許實波申請人:中山大學