金蕎麥提取物在製備治療阿爾茨海默症藥物中的用途
2023-11-04 13:36:37
金蕎麥提取物在製備治療阿爾茨海默症藥物中的用途
【專利摘要】本發明涉及金蕎麥提取物在製備治療阿爾茨海默症藥物中的用途，本發明還涉及了一種用於預防或治療阿爾茨海默症的藥物組合物以及一種用於預防或治療阿爾茨海默症的功能性保健食品。本發明技術方案提供了一種金蕎麥提取物的新用途，可用於製備治療阿爾茨海默症的藥物或功能性保健食品，開拓了金蕎麥提取物的應用領域。金蕎麥提取物為天然產物，安全、無毒，可以有效地用來製備用於預防、延緩和治療阿爾茨海默症的藥物組合物和功能性保健食品。
【專利說明】金蕎麥提取物在製備治療阿爾茨海默症藥物中的用途
【技術領域】
[0001]本發明涉及天然藥物化學領域，具體涉及一種金蕎麥提取物的新用途以及含有金蕎麥提取物的藥物組合物和功能性保健食品。
【背景技術】
[0002]阿爾茨海默症(AD)是一種進行性的致命的神經退行性疾病，它的流行與世界人口的老齡化成正比。《2009世界阿爾茨海默症報告》中說，到2050年全球將有1.15億人受到這種疾病的困擾(Martin Prince, Jim Jackson等,2009)。AD的主要病理標誌是澱粉樣神經炎斑塊蛋白沉積(Melanie Meyer-Luehmann, Tara L等,2007),形成神經纖維纏結,反應性小膠質細胞和星型膠質細胞增生，長期激活的小膠質細胞釋放趨化因子和受損的細胞因子，如IL-1、IL-6和TNF-α導致炎症級聯反應，這些炎症因子反過來又加強了 Aβ的釋放(Mehlhorn 等，1999)。炎症可導致神經元死亡(L.E.Rojo, J.A.Fernandez 等，2008),或引發神經退行性疾病(P.D.Drew, P.D.Store等,2005)。根據澱粉樣蛋白的假說,A β在大腦中的沉積是促使AD發病的主要原因(Hardy及Selkoe，2002)。神經炎可能對AD的發展和長期性有顯著作用(Heneka及0』Ban1n，2007)。因此，清除大腦中的Αβ沉積和抗炎代表了一種重要的防治該病的策略(Wang J, Ho L, Zhao Z, Seror, Humala N, Dickstein DL, ThiyagarajanΜ, Percival SS,Talcott ST, Pasinetti GM(2006a)Moderate consumpt1n of CabernetSauvignon attenuate Abeta neuropathology in a mouse model of Alzheimer』 sdisease.FASE BJ20:2313 - 2320)。
[0003]目前臨床上用於治療AD的藥物有乙醯膽鹼酯酶(AchE)抑制劑(如加蘭他敏)，鈣拮抗劑，改善腦血液循環和腦細胞代謝的藥物(如腦復康)，激素類藥物(如雌激素)，非甾體抗炎藥物(如布洛芬和阿司匹林)，抗氧化劑(如維生素E)，毒蕈鹼受體激動劑(佔諾美林)等。這些藥物通過不同途徑緩解早期病人的認知障礙，適度改善症狀，但還不能有效地逆轉AD腦內老年斑沉積和神經元纖維纏結等病理改變以阻止病情進展。
[0004]金養麥(Fagopyrumdibotrys (D.Don)Hara)屬於寥科(Polygonaceae)養麥屬(Fagopyrum)的雙子葉植物,根據文獻記載,金養麥藥材以根莖入藥。據明代蘭茂所著《滇南本草》所載，金蕎麥「治五淋、(赤)白濁，楊梅結毒、丹流等症」，《本草拾遺》、《李氏草秘》、《綱目拾遺》中也均有「性寒、味酸苦，清熱，解毒，祛風利溼」的記載。它是雲南及我國南方常用的一種中草藥。近年研究發現，金蕎麥具有癌化學預防及抗癌活性，是一種很有前景的抗腫瘤中藥。
[0005]金蕎麥的化學抗腫瘤活性成分原花色素縮合性單寧混合物，總單寧含量為67.49%,稱為原矢車菊素(procyanidin) B_2、B-4及原矢車菊素B-2的3，3』 - 二沒食子酸酉旨(3,3，-digalloylrocyanidin B—2)。
[0006]金蕎麥根為我國藥典收載品種(劉慧，劉月紅，安根炬等，金蕎麥活性成分的研究，遼寧醫藥2004，19，(4)35?37)，我國已批准其提取物的片劑和膠囊劑(肖培根主編，金蕎麥，新編中藥志第一卷，化學工業出版社，北京:607?610)為治療藥物。
【發明內容】
[0007]為進一步尋找金蕎麥提取物更多的應用領域，本發明的目的是提供金蕎麥提取物在製備治療阿爾茨海默症藥物中的用途。
[0008]其中，所述金蕎麥提取物為金蕎麥的乙醇提取物、甲醇提取物、正己醇提取物、丙醇提取物或熱水提取物。
[0009]優選地，所述金蕎麥提取物為金蕎麥的乙醇提取物。
[0010]其中，所述金蕎麥提取物的製備過程為:向金蕎麥中加入I?10倍重量的體積百分比濃度為20?90%的乙醇溶液或甲醇溶液或正己醇溶液或丙醇溶液，回流後濃縮即得。
[0011]本發明的另一目的是提供一種用於預防或治療阿爾茨海默症的藥物組合物，其包括金蕎麥提取物以及藥學上可接受的輔料。
[0012]其中，所述金蕎麥提取物為金蕎麥的乙醇提取物。
[0013]其中，所述金蕎麥提取物的製備過程為:向金蕎麥中加入I?10倍重量的體積百分比濃度為20?90%的乙醇溶液，回流後濃縮即得。
[0014]其中，所述藥物組合物為片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膏劑、混懸劑、凝膠劑、滴丸、口服液、注射劑或散劑。
[0015]本發明的另一目的是提供一種用於預防或治療阿爾茨海默症的功能性保健食品，其包括金蕎麥提取物。
[0016]其中，所述金蕎麥提取物為金蕎麥的乙醇提取物。
[0017]其中，所述金蕎麥提取物的製備過程為:向金蕎麥中加入I?10倍重量的體積百分比濃度為20?90%的乙醇溶液，回流後濃縮即得。
[0018]本發明技術方案提供了一種金蕎麥提取物的新用途，可用於製備治療阿爾茨海默症的藥物或功能性保健食品，開拓了金蕎麥提取物的應用領域。金蕎麥提取物為天然產物，安全、無毒，可以有效地用來製備用於預防、延緩和治療阿爾茨海默症的藥物組合物和功能性保健食品。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0019]圖1是實施例2的Morris水迷宮實驗結果，其中，圖1A為各組小鼠的平均逃避潛伏期結果，圖1B為各組小鼠的平均遊泳距離結果，圖1C為各組小鼠的平均遊泳速度結果，圖1D為各組小鼠在第八天探索平臺實驗的首次進入平臺的平均逃避潛伏期；
[0020]圖2是實施例3的耐受性實驗結果，其中，圖2A為各組小鼠的體重結果，圖2B為各組小鼠的進食量結果，圖2C為各組小鼠的肝功能ALT及AST的血清指標結果；
[0021]圖3是實施例4的Αβ水平測定結果，其中，圖3Α為各組小鼠大腦中總的Aβ水平結果，圖3Β為各組小鼠大腦中的Aβ 40水平結果，圖3C為各組小鼠大腦中的Aβ 42水平結果，圖3D為各組小鼠血清中總的A β水平結果，圖3Ε為轉基因小鼠食用金蕎麥提取物飼料後大腦組織中Aβ斑塊負荷的結果；
[0022]圖4是實施例5的實驗結果，其中，圖4Α為小鼠大腦中小膠質細胞的對比效果圖，圖4Β為小鼠大腦中星形細胞的對比效果圖，圖4C為小鼠大腦中出血斑點的對比效果圖；
[0023]圖5是實施例6炎症因子水平變化實驗中小鼠血清中的IL-1 β ,TNF- α和IFN- Y 濃度水平的結果。
【具體實施方式】
[0024]以下實施例用於說明本發明，但不用來限制本發明的範圍。
[0025]本發明使用的野生型(WT)和APPSwe/PSldE9轉基因小鼠購於南方模式動物研究所(上海)，動物的管理嚴格遵守2007年頒布的《雲南省動物管理條例》，並嚴格按照供應商提供的PCR方法對小鼠基因進行了鑑定。
[0026]將小鼠分別設為以下四個大組:APPSwe/PS I dE9轉基因小鼠的金蕎麥提取物給藥組(N= 12，金蕎麥提取物和普通飼料相混)、APPSwe/PS I dE9轉基因小鼠的薑黃素(Curcumin)給藥組(N=12，薑黃素和普通飼料相混)、APPSwe/PS I dE9轉基因小鼠的AD對照組(N=12，普通飼料)以及一個WT野生型對照組(N=12，普通飼料)。每個大組又分雌雄兩個小組，每組各6隻動物。
[0027]本發明所有數據的分析均使用SPSS17.0軟體，一般用mean土SEM表示，除非另有說明。單向ANOVA分析被用於確定所有測試組間顯著性的不同，P>0.05被認為無顯著性差巳升。
[0028]實施例1金蕎麥提取物的製備
[0029]取金蕎麥幹藥材破碎成顆粒、加I?10倍的20%?90%的乙醇回流提取三次、濾液減壓濃縮、加入鰲合劑(0.6%的檸檬酸)，混勻，噴霧乾燥製成浸膏粉，加入賦形劑，混勻，幹法制粒等步驟製成。
[0030]實施例2莫裡斯(Morris)水迷宮行為學實驗
[0031]小鼠水迷宮適應階段兩天(不記錄，可視平臺高於水面2cm)，訓練階段從第三天開始，平臺隱藏在水下1cm，水溫保持23°C左右，連續進行5天，每隻小鼠每天訓練3次。訓練時，將小鼠面向池壁從3個入水點分別放入水池，記錄小鼠從入水到找到水下隱蔽平臺和停留在平臺上所需時間，作為潛伏期(latency)，用秒(S)表示。若入水後60s內小鼠未能找到平臺，則將其輕輕從水中拖上平臺，並停留30s，然後進行下一次訓練。第8天移走平臺，每隻小鼠從平臺起始點對面下水，遊泳60秒，動物在目標區域遊泳的時間，穿越平臺的次數和路徑等主要參數將被微型攝像機(Stoelting C0.，America)跟蹤記錄供分析。
[0032]水迷宮實驗結果見附圖1，WT(野生型)作為野生型對照組，給予正常飼料。APPSwe/PSldE9轉基因小鼠給予正常的飲食，作為對照組。另一組APPSwe/PS I dE9小鼠從3個月起持續9個月按100mg/kg/d的劑量給予金蕎麥提取物。另外一組APPSwe/PSldE9轉基因小鼠按47mg/kg/d給予薑黃素作為陽性對照組。小鼠每天用Morris水迷宮進行3次尋找平臺實驗，持續7天，第8天移除平臺後，小鼠從平臺起始象限對面的點入水進行探索實驗。隱藏跳臺後的七天裡各組小鼠的潛伏期(圖1A)、遊泳距離(圖1B)、遊泳速度(圖1C)沒有明顯差異(P>0.05)。第8天的探索平臺實驗(圖1D)顯示潛伏期也沒有差異(P>0.05vs.Control),這意味著金蕎麥提取對AD小鼠的學習記憶能力有提高的趨勢。圖中所有的數據都進行了ANOVA 分析及 Student-Newman-Keulspost-hoc 檢驗。
[0033]實施例3耐受性實驗
[0034]APPSwe/PS I dE9轉基因小鼠從第三個月(此時大腦中還未形成A β沉積)開始餵食含有金蕎麥提取物和薑黃素的飼料，直至第十二個月。在此期間，動物無死亡發生，無行為異常，長期食用這種飼料的動物的體重和日食量也沒有受到影響(將圖2A和2B)。另外，長期食用金蕎麥和薑黃素也不會引起小鼠的肝功能損傷(圖2C)。
[0035]小鼠平均每天的進食量為每克體重0.14-0.16g，每日金蕎麥提取物的消耗量為每克體重54 μ g，薑黃素為每克體重消耗77 - 98μ g。在餵食期間為觀察到小鼠死亡和生理異常情況，且未引起肝功能損傷。血清中總膽紅素(Tb)、谷丙轉氨酶(ALT)和穀草轉氨酶(AST)測定的值依然在正常範圍內(由昆醫附一院檢驗科協助完成)，由於總膽紅素(Tb)的含量較低(〈1U/L)，圖中未顯示。這些數據說明，金蕎麥提取物毒性小，長期食用是安全的。
[0036]實施例4大腦和血清中A β水平的測定實驗
[0037]將APPSwe/PS I dE9轉基因小鼠從第三個月開始餵食含有金蕎麥提取物和薑黃素的飼料。九個月後吸入乙醚麻醉處死小鼠，通過灌注取右心房的血及腦組織並稱重，對左腦大腦半球做組織病理分析，右腦半球則裝入凍存管存放在在-80° C液氮中用於生化分析。
[0038]小鼠大腦的組織病理分析:對給藥組的轉基因小鼠的大腦海馬區和大腦皮層中的Αβ做定量分析，並與對照組比較，觀察Aβ斑塊的沉積的影響、對小膠質細胞和星形細胞增生的影響，並用ELISA實驗進行驗證。
[0039]三大系列的六個等距離跨越海馬區域的組織切片(?200 μ m部分)被隨機挑選出來，使用免疫組織化技術對所有的Aβ進行染色，分別激活小膠質細胞和星型膠質細胞。切片與主要抗體(CD45和GFAP抗體)在4°C過夜培育，以二氨基氧化酶和葡萄糖為底物，進一步用 DAB 試劑盒(Cat.N0.AB500-500Slide Kit CHEMICON Internat1nal, Inc.)展開。對所有的Αβ沉澱、小膠質細胞和星形膠質細胞增生進行定量分析，病理圖像可以通過數字顯微鏡的攝像頭獲得，然後進行圖像分析，所有的圖像處理和分析都採用單盲分析。小鼠大腦和血清中A β 40和A β 42肽水平的定量採用ELISA(Cat.#EZBRAIN40及Cat.#EZBRAIN42,MILLIP0RE)試劑盒。
[0040]如圖3所示，用ELISA試劑盒對各組小鼠大腦SDS (Α β-SDS)及甲酸(Α β-FA)提取部分中的Aβ進行檢測，Aβ-SDS代表可溶性Aβ，Ai3-FA代表不可溶的Αβ，單個動物的總的A β水平的計算是用總的可溶性A β (可溶性的SDS-A β 42加上可溶性的SDS-A β 40)加上總的FA中的可溶性A β (可溶性的FA-A β 42加上可溶性的FA-A β 40)。
[0041]與食用普通飼料的轉基因小鼠相比，食用含金蕎麥提取物(P=0.001)飼料及含有薑黃素(ρ〈0.001)飼料的轉基因小鼠大腦中總的Αβ的負荷明顯降低(圖3Α) (ANOVAF=71.044，P=0.003<0.05)。食用含金蕎麥提取物飼料的小鼠大腦中A β的負荷降低約45%，食用薑黃素飼料的AD小鼠則降低約57%，SDS-A β及FA-A β (Α β 40及A β 42)的組間比較與總的Αβ的比較本質上一致(圖3Β和圖3C)。
[0042]食用含金蕎麥提取物及含有薑黃素飼料的轉基因小鼠的血清中的Αβ也顯著降低(圖3D) (AN0VA，F=53.057，P=0.005)，小鼠血清中總的Αβ的濃度與大腦中Αβ的總負荷有正相關性(Pearson r=0.986，P=0.014)，這就表明，在用金蕎麥提取物作為食物防治阿爾茨海默氏症(AD)的研究中，對血清中Αβ濃度的檢測值可以反應小鼠大腦Αβ的負荷。
[0043]圖3Ε為APPSwe/PSldE9轉基因小鼠食用金蕎麥提取物飼料後大腦組織中Aβ斑塊負荷的結果。6個空間等距離系列腦組織切片，用漂片免疫組化法對腦片上的Αβ澱粉蛋白斑塊進行反應(ant1-Αβ antibody6E10, Serotec),並用DAB試劑盒完成顯色反應,對新皮層區和海馬區的Αβ澱粉蛋白斑塊進行定量，對總的檢測區域內的陽性反應斑點與面積比進行分析，計算單位面積的陽性反應的數量的平均值及標準差。對比食用薑黃素飼料的AD小鼠與對照組小鼠新皮層區和海馬區Αβ斑塊所佔的面積部分(AVOVA分析，P〈0.01orP<0.05)有顯著性差異。
[0044]食用金蕎麥提取物組(P=0.007)與食用薑黃素(P=0.005 小鼠大腦海馬區及新皮質區的Αβ明顯減少。這與ELISA試劑盒對Αβ水平的檢測結果的趨勢一致，食用金蕎麥提取物飼料的組用免疫組化定量，總的Αβ沉積減少了 65%，薑黃素組減少了 70%，這些數據表明金蕎麥提取物在減少Aβ負荷和預防Αβ沉積方面有明顯效果。
[0045]實施例5金蕎麥提取物阻礙神經病理通路的實驗
[0046]採用抗體⑶45加小膠質細胞及GFAP加星形細胞的免疫組化實驗來檢測新皮質區和海馬區域。
[0047]圖4Α為小鼠大腦中小膠質細胞的對比效果圖。6個空間等距離系列腦組織切片，用漂片免疫組化法對腦片上的激活小膠質細胞進行反應(大鼠單克隆ant1-⑶45，Millipore)，並用DAB試劑盒完成顯色反應，同時對新皮層區和海馬區的激活的小膠質細胞進行定量，對總的檢測區域內的陽性反應斑點與面積比進行分析，計算單位面積的陽性反應斑點的數量的平均值及標準差(AN0VA分析，P〈0.01)，有顯著性差異。野生型(WT)小鼠的大腦組織上幾乎沒有觀察到小膠質細胞，APPSwe/PS I dE9轉基因小鼠則有明顯的小膠質細胞。統計用的是ANOVA分析(F=42.635，P〈0.001)。結果表明，與餵普通飼料的轉基因小鼠相比，食用含金蕎麥提取物的小鼠的小膠質細胞的水平明顯降低(7 ± 3.8vs32.6 ± 11.2，F〈0.001)，與食用薑黃素的小鼠相比則水平一致(7±3.8±3.8vs4.8±2.2，P=0.012)。
[0048]圖4B為小鼠大腦中星形細胞的對比效果圖。6個空間等距離系列腦組織切片，用免疫組化漂片法對腦片上的星形細胞進行反應(兔抗-膠質纖維酸蛋白，DAK0)，並用DAB試劑盒完成顯色反應，對新皮層區和海馬區的星形細胞細胞進行定量，對總的檢測區域內的陽性反應斑點與面積比進行分析，計算單位面積的陽性反應斑點的數量的平均值及標準差，(AN0VA分析，P〈0.05)，有顯著性差異。食用含有金蕎麥提取物飼料的小鼠星形細胞明顯較少(F=19.966，P〈0.001)，與食用普通飼料的小鼠的大腦上的星形細胞相比水平明顯降低(14.8±5.1vs35.2±3.9，P〈0.001 )，與食用含薑黃素飼料的小鼠相比，無顯著性差異(14.8±5.lvsl5.7±5.3, P=0.801)。
[0049]圖4C為小鼠大腦中出血斑點的對比效果圖。準備6張空間等距離系列腦組織切片，用含濃鹽酸2%的亞鐵氰化鉀溶液(體積比計算為2%)對腦片上的血紅素斑點進行染色，然後再用1%的核固紅復染，對每張腦片子上的藍色微型斑點進行計數，計算單位面積的陽性反應斑點的數量的平均值及標準差、(AN0VA分析，Ρ〈0.05)，有顯著性差異。含鐵血黃素陽性反應的藍色特徵顆粒是出血點，主要觀察新皮層區、柔腦膜區、大腦的海馬區和丘腦區域。餵食普通飼料的每個轉基因小鼠的單側大腦的微出血點率為38±13.0，遠高於野生型(WT)4.0±11.0 (P〈0.001)。同樣，餵含有金蕎麥提取物(10.4±119，P〈0.05)和薑黃素(23.2±16.8)飼料的小鼠也沒有觀察到明顯的微出血點(ANOVA，F=7.125，P=0.003)。
[0050]實施例6炎症因子水平變化實驗
[0051]給藥組的小鼠取右心房血液，並做心臟灌注，對血清中的炎症因子IL-1、IL-6和TNF-α的水平進行測評，並與對照組比較，觀察AD小鼠血清中炎症因子水平的變化，採用ELISA 試劑盒(Cat N0.BMS607/2, BMS6002, BMS606, eB1science, USA)進行測定，並嚴格按照廠家提供的操作指南進行。
[0052]圖5為測得的小鼠血清中IL-1 β ,TNF- α和IFN- Y濃度水平的結果(AN0VA分析，P>0.05vs餵正常飼料的WT野生型，P>0.05vs餵對照藥物飼料的AD組)。
[0053]小膠質細胞和巨噬細胞被激活後會釋放出一些炎症因子IL-1 β、TNF-α和IFN-Y，在AD大腦內部的炎症級聯反應的進展過程中，這是一個重要的病理現象。通常情況下，轉基因小鼠血清中炎症因子的水平應該趨向於增高，但檢測發現IL-Ιβ和IFN-Y的水平變化不大，與野生型小鼠相比無顯著性差異(ANOVA IL-1 β，F=L 520，P=0.253AN0VAIFN- Y , F=0.252，P=0.859)。食用金蕎麥提取物飼料轉基因小鼠與食用正常飼料的對照組轉基因小鼠AD組相比，血清中的TNF-a水平也無明顯降低，沒有顯著性差異(0.08±0.0025pg/mL vs0.0858±0.0061pg/mL, P=0.093)，食用薑黃素飼料的 AD 小鼠也沒有顯著變化(0.08±0.0025vs0.0824±0.0071, P=0.470)，這表明金蕎麥提取物對AD小鼠血清中的炎症因子抑制效果不明顯(ANOVATNF-a，F=8.39，P=0.002)。
[0054]以上實施例說明:
[0055](I)施用對象對金蕎麥提取物具有很好的耐受性，長期服用不會引起肝功能受損和其它生理功能異常。
[0056](2)金蕎麥提取物能有效清除AD小鼠大腦中Αβ的沉積，減少血清中Αβ負荷的的水平，減輕炎症引起的小膠質細胞增生，減少由Αβ澱粉纏結引起的出血，金蕎麥提取物可作為一種潛在的對AD有防治和治療作用的藥物(或功能性保健食品)。
[0057]雖然，上文中已經用一般性說明及具體實施方案對本發明作了詳盡的描述，但在本發明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬於本發明要求保護的範圍。
【權利要求】
1.金蕎麥提取物在製備治療阿爾茨海默症藥物中的用途。
2.根據權利要求1所述的用途，其特徵在於，所述金蕎麥提取物為金蕎麥的乙醇提取物、甲醇提取物、正己醇提取物、丙醇提取物或熱水提取物。
3.根據權利要求2所述的用途，其特徵在於，所述金蕎麥提取物的製備過程為:向金蕎麥中加入I?10倍重量的體積百分比濃度為20?90%的提取溶液，回流後濃縮即得，所述提取溶液為乙醇、甲醇、正己醇或丙醇。
4.一種用於預防或治療阿爾茨海默症的藥物組合物，其特徵在於，包括金蕎麥提取物以及藥學上可接受的輔料。
5.根據權利要求4所述的藥物組合物，其特徵在於，所述金蕎麥提取物為金蕎麥的乙醇提取物。
6.根據權利要求5所述的藥物組合物，其特徵在於，所述金蕎麥提取物的製備過程為:向金蕎麥中加入I?10倍重量的體積百分比濃度為20?90%的乙醇溶液，回流後濃縮即得。
7.根據權利要求4-6任一項所述的藥物組合物，其特徵在於，所述藥物組合物為片劑、膠囊劑、顆粒劑、軟膏劑、混懸劑、凝膠劑、滴丸、口服液、注射劑或散劑。
8.一種用於預防或治療阿爾茨海默症的功能性保健食品，其特徵在於，包括金蕎麥提取物。
9.根據權利要求8所述的功能性保健食品，其特徵在於，所述金蕎麥提取物為金蕎麥的乙醇提取物。
10.根據權利要求9所述的功能性保健食品，其特徵在於，所述金蕎麥提取物的製備過程為:向金蕎麥中加入I?10倍重量的體積百分比濃度為20?90%的乙醇溶液，回流後濃縮即得。
【文檔編號】A61P25/28GK104510782SQ201310445027
【公開日】2015年4月15日 申請日期:2013年9月23日 優先權日:2013年9月23日
【發明者】袁建平, 曾躍勤 申請人:雲南康創生物醫藥科技孵化有限公司