作為治療劑的吡唑並嘧啶類的製作方法

2023-09-13 03:09:30

專利名稱：作為治療劑的吡唑並嘧啶類的製作方法
相關申請本申請要求1999年9月17日申請的美國臨時申請No.60/154,620的利益，其中全部教導引入本文作為參考。發明背景至少有400種酶被鑑定為蛋白激酶。這些酶催化靶蛋白底物的磷酸化作用。該磷酸化作用一般是將一個磷酸根基團從ATP轉移到蛋白底物中的反應。此磷酸根轉移的靶底物中的特異性結構是酪氨酸、絲氨酸或蘇氨酸殘基。由於這些胺基酸殘基是磷醯基轉移的靶結構，故這些蛋白激酶一般稱為酪氨酸激酶或絲氨酸/蘇氨酸激酶。
在酪氨酸、絲氨酸和蘇氨酸殘基上進行的此磷酸化反應及中和磷酸酶反應參與了無數的細胞過程，這些過程構成了對不同細胞內信號(一般通過細胞受體介導)的反應、細胞功能的調節及細胞過程的激活或滅活的基礎。蛋白激酶的級聯常常參與細胞內信號的傳遞，且是實現這些細胞過程所必需的。由於這些過程中它們的普遍存在，蛋白激酶作為漿膜的整個部分、或作為細胞質酶被發現，或者常常作為酶複合物的組分位於細胞核內。在很多情況下，這些蛋白激酶是酶和結構蛋白複合物的必需元素，其決定了細胞內細胞過程何時何地發生。
蛋白酪氨酸激酶蛋白酪氨酸激酶(PTKs)是催化細胞內蛋白中的特異性酪氨酸殘基的磷酸化作用的酶。這些底物蛋白的翻譯後修飾，常常是酶本身，作為調節細胞增殖、活化和分化的分子開關(其綜述，見Schlessinger and Ulrich，1992，Neuron 9383-391)。在很多病症中已發現了異常的或過度的PTK活性，這些病症包括良性和惡性增殖疾病及免疫系統不適當的激活導致的疾病(如，自身免疫性疾病)，同種移植物排斥和移植物抗宿主病。此外，內皮細胞受體PTKs如KDR和Tie-2介導血管生成過程，並因此參與支持癌症或涉及不適當的血管形成的其它疾病(例如，糖尿病性視網膜病，與年齡有關的視網膜黃斑變性引起的脈絡膜血管化，牛皮癬，關節炎，早產兒視網膜病，嬰兒血管瘤)。
酪氨酸激酶可以是受體型的(具有細胞外、跨膜和細胞內功能域)或非受體型的(全部在細胞內)。
受體酪氨酸激酶(RTKs)RTKs包括具有不同生物活性的一大類跨膜受體。目前，已鑑定了至少19種不同的RTK亞類。此受體酪氨酸激酶(RTK)族包括對多種類型細胞的生長和分化起決定作用的受體(Yarden and Ullrich，Ann.Rev.Biochem.57433-478，1988；Ullrich and Schlessinger，Cell 61243-254，1990)。RTKs的內在功能是在配體結合時激活，其導致受體和多種細胞底物的磷酸化，並隨後帶來多種細胞反應(Ullrich Schlessinger，1990，Cell 61203-212)。因此，受體酪氨酸激酶介導的信號傳導是由與特異性生長因子(配體)的細胞外作用引發的，一般隨之而來的是受體二聚作用、內在蛋白酪氨酸激酶活性的刺激和受體磷酸根轉移作用。於是創造了細胞內信號傳導分子的結合位點，並導致形成與一系列促進適當細胞反應的細胞質信號分子的複合物(例如，細胞分裂、分化、代謝作用、細胞內微環境的變化)，見Schlessinger and Ullrich，1992，Neuron91-20。
帶有SH2的蛋白(src同源性-2)或磷醯基酪氨酸結合(PTB)功能域結合活化的酪氨酸激酶受體及其具有傳播信號進入細胞的高親合力的底物。這兩種功能域都識別磷醯基酪氨酸(Fantl等，1992，Cell 69413-423；Songyang等，1994，Mol.Cell.Biol.142777-2785；Songyang等，1993，Cell 72767-778；和Koch等，1991，Science252668-678；Shoelson，Curr.Opin.Chem.Biol.(1997)，1(2)，227-234；Cowburn，Curr.Opin.Struct.Biol.(1997)，7(6)，835-838)。已鑑定了若干種與受體酪氨酸激酶(RTKs)有關的細胞內底物蛋白。它們被主要分為兩類(1)具有催化功能域的底物；和(2)缺少這樣的功能域但作為接合器並與催化活性分子有聯繫的底物(Songyang等，1993，Cell 72767-778)。受體或蛋白與其底物的SH2或PTB功能域之間的相互作用的特異性由直接圍繞所述磷醯化酪氨酸殘基的胺基酸殘基決定。例如，SH2功能域和圍繞特定受體上的磷醯基酪氨酸殘基的胺基酸序列之間的結合親合力的差別與在其底物磷醯基化特性中觀察到的差別相關(Songyang等，1993，Cell 72767-778)。所觀察到的現象暗示各受體酪氨酸激酶的功能不僅由其表達的形式和配體有效性決定，還由特定受體激活的下遊信號傳導路徑的排列以及那些刺激物的作用時間點和持續時期決定。因此，磷酸化作用提供了重要的調節步驟，該步驟決定了特定生長因子受體以及分化因子受體反射增進的信號路徑的選擇性。
雖然其中某些會間接促進血管生成，但是已表明若干受體酪氨酸激酶如FGFR-1、PDGFR、TIE-2和c-Met，及與其結合的生長因子，在血管生成中起一定作用(Mustonen and Alitalo，J.Cell Biol.129895-898，1995)。此類受體酪氨酸激酶中的一種，稱為「胎肝激酶1」(FLK-1)，是RTKs的III型亞類中的一員。人FLK-1的另一種命名是「含激酶插入功能域的受體」(KDR)(Terman等，Oncogene 61677-83，1991)。FLK-1/KDR的另一種命名是「血管內皮細胞生長因子受體」(VEGFR-2)，這是由於其以高親合力結合VEGF。鼠型FLK1/VEGFR-2還被稱為NYK(Oelrichs等，Oncogene 8(1)11-15，1993)。已分離出DNAs編碼小鼠、大鼠和人FLK-1，並報告了核苷酸和編碼的胺基酸序列(Matthews等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，889026-30，1991；Terman等，1991，出處同上；Terman等，Biochem.Biophys.Res.Comm.1871579-86，1992；Sarzani等，出處同上；及Millauer等，Cell 72835-846，1993)。一些研究，如在Millauer等在出處同上的文獻中所報告的，暗示VEGF和FLK-1/KDR/VEGFR-2在血管內皮細胞的增殖、血管的形成和抽芽(分別命名為血管生成和血管發生)中扮演重要角色的配體-受體對。
命名為「fms樣酪氨酸激酶1」(Flt-1)的另一種RTK的III型亞類與FLK-1/KDR有關(DeVries等，Science 255；989-991，1992；Shibuya等，Oneogene 5519-524，1990)。Flt-1的另一種命名是「血管內皮細胞生長因子受體1」(VEGFR-1)。目前，已發現FLK-1/KDR/VEGFR-2和Flt-1/VEGFR-1亞類中的很多成員主要表達在內皮細胞上。這些亞類成員接受血管內皮生長因子(VEGF)類配體的特異性刺激(Klagsburn and D′Amore，Cytokine Growth Factor Reviews7259-270，1996)。血管內皮細胞生長因子(VEGF)結合Flt-1的親合力較結合FLK-1/KDR的親合力高，並對血管內皮細胞具有致有絲分裂作用(Terman等，1992，出處同上；Mustonen等出處同上；DeVries等，出處同上)。據信Flt-1是血管發育期間內皮組織所必需的。Flt-1表達與小鼠胚胎的早期血管發育相聯繫，並與傷口癒合期間的新血管形成有關(Mustonen and Alitalo，出處同上)。Flt-1在單核細胞、破骨細胞和成骨細胞以及在成人組織如腎小球中的表達暗示了此受體的與細胞生長無關的其它功能(Mustonen and Alitalo，出處同上)。
如上所述，最近的證據表明VEGF在正常的血管發生和病理性血管發生的刺激中起了一定作用(Jakeman等，Endocrinology 133848-859，1993；Kolch等，Breast Cancer Research and Treatment36139-155，1995；Ferrara等，Endocrine Reviews 18(1)；4-25，1997；Ferrara等，Regulation of Angiogenesis(L.D.Goldberg and E.M.Rosen編輯)，209-232，1997)。此外，VEGF已涉足血管滲透性的控制和提高(Connolly等，J.Biol.Chem.26420017-20024，1989；Brown等，Regulation of Angiogenesis(L.D.Goldberg and E.M.Rosen編)，233-269，1997)。已報告了由mRNA的另一種剪接產生的不同形式的VEGF，按Ferrara等所述包括4種類型(J.Cell.Biochem.47211-218，1991)。VEGF的分泌型和主要與細胞有關的類型已由Ferrara等鑑定(出處同上)，且已知該蛋白以二硫鍵連接的二聚體的形式存在。
最近還確定了VEGF的若干相關同系物。但是，它們在正常生理和疾病過程中的作用還未得到說明。此外，VEGF類的很多成員在一些組織中常常與VEGF共同表達，且一般能與VEGF形成雜二聚體。此性質可能改變受體的特異性和此類雜二聚體的生物作用，並進一步使它們的特異性功能的說明複雜化，如下所述(Korpelainen and Alitalo，Curr.Opin.Cell Biol.，159-164，1998及其其中引用的文獻)。
胎盤生長因子(PlGF)的胺基酸序列與VEGF序列表現出顯著的同種性(Park等，J.Biol.Chem.26925646-54，1994；Maglione等，Oncogene 8925-31，1993)。正如VEGF，不同類型的PlGF由mRNA的另一種剪切產生，且蛋白己二聚形式存在(Park等，出處同上)。PlGF-1和PlGF-2已高親合力結合Flt-1，而PlGF-2還迫切地與神經纖維素(neuropilin)-1結合(Migdal等，J.Biol.Chem.273(35)22272-22278)，但是它們都不結合FLK-1/KDR(Park等，出處同上)。已報告當VEGF以低濃度存在時PlGF加強血管滲透性和內皮細胞上的VEGF的致有絲分裂作用(這意味著歸因於雜二聚體的形成)(Park等，出處同上)。
VEGF-B以兩種異構形式產生(167和185殘基)，其似乎也結合Flt-1/VEGFR-1。它通過調節脲激酶型纖溶酶原激活物和纖溶酶原激活物抑制劑1的表達和活性，可以在細胞外基質降解、細胞粘附性和遷移的調節中起一定作用(Pepper等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.(1998)，95(20)11709-11714)。
VEGF-C原本以VEGFR-3/Flt-4的配體形式克隆，其主要由淋巴內皮細胞表達。在其完全處理後的形式中，VEGF-C也可以結合KDR/VEGFR-2並刺激體內的內皮細胞增殖和遷移及體外模型中的血管發生(Lymboussaki等，Am.J.Pathol.(1998)，153(2)395-403；Witzenbichler等，Am.J.Pathol.(1998)，153(2)，381-394)。VEGF-C的轉基因過度表達只引起淋巴管的增殖和肥大，而對血管沒有影響。與VEGF不同，VEGF-C不會由低氧症引起(Ristimaki等，J.Biol.Chem.(1998)，273(14)，8413-8418)。
多數最近發現的VEGF-D與VEGF-C結構非常相似。據報告VEGF-D結合併激活至少兩種VEGFRs，即VEGFR-3/Flt-4和KDR/VEGFR-2。他原本以成骨細胞的c-fos可誘導的促細胞分裂劑形式克隆，並最主要表達在肺和皮膚的間質細胞中(Achen等，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.(1998)，95(2)，548-553及其中所引用的文獻)。
正如VEGF，已有人聲稱當注射到皮膚組織內時，VEGF-C和VEGF-D引起Miles檢測中的體內血管滲透性的升高(PCT/US97/14696；WO98/07832，Witzenbichler等，出處同上)。這些配體在調節血管滲透性過高和有其表達的組織中內皮反應中的生理作用和有效性尚不清楚。
最近已報告了病毒編碼的、新型血管內皮生長因子，VEGF-E(NZ-7VEGF)，其優先利用KDR/Flk-1受體並具有強有絲分裂活性而沒有肝素-結合功能域(Meyer等，EMBO J.(1999)，18(2)，363-374；Ogawa等，J.Biol.Chem.(1998)，273(47)，31273-31282)。VEGF-E序列與哺乳動物VEGF具有25％的同源性，並由副痘病毒Orf病毒(OV)編碼。此副痘病毒使綿羊和山羊並偶爾使人產生具有血管發生的傷害。VEGF-E是約20kDa的二聚體，其沒有基礎功能域，對肝素也不具親合力，但是具有存在於所有哺乳動物VEGF中的特徵性半胱氨酸結節方式(knot motif)，並令人驚奇地發現其具有類似於肝素結合VEGF-A的VEGF165異構形式的效力和生物活性，即兩種因子都刺激組織因子(TF)的釋放、體外培養的血管內皮細胞的增殖、趨化和發芽以及體內血管發生。正如VEGF165，發現VEGF-E以高親合力與VEGF受體-2(KDR)結合，導致受體自身磷酸化和在游離的細胞內Ca2+濃度中產生二相性，但與VEGF165相反，VEGF-E不結合的VEGF受體-1(Flt-1)。
基於VEGF和VEGFRs的其它同系物的發現及配體和受體雜二聚作用的先例，這些VEGF同系物的作用可以涉及VEGF配體雜二聚體的形成、和/或受體的雜二聚作用、或者結合尚未發現的VEGFR(Witzenbichler等，出處同上)。另外，最近的報告表明神經纖維素-1(Migdal等，出處同上)或VEGFR-3/Flt-4(Witzenbichler等，出處同上)，或KDR/VEGFR-2以外的受體可以涉及血管滲透性的誘發(Stacker，S.A.，Vitali，A.，Domagala，T.，Nice，E.和Wilks，A.F.，「Angiogenesis and Cancer」Conference，Amer.Assoc.Cancer Res.，1998年1月，Orlando，FL；Williams，Diabetelogia40S 118-120(1997))。
Tie-2(TEK)是最近發現的內皮細胞特異性受體酪氨酸激酶的一員，其涉及重要的血管發生過程，如血管分枝、發芽、改型、成熟和穩定。Tie-2是第一種哺乳動物受體酪氨酸激酶，其激動劑配體(一種或多種)(例如，for which both agonist ligand(s)(例如，血管生成素(Angiopoietin)1(「Ang1」)，其刺激受體自身磷酸化和信號傳導)，及拮抗劑配體(一種或多種)(例如，血管生成素2(「Ang2」))，二者都已得到鑑定。Tie-2及其配體表達的剔除和轉基因操作表明了對Tie-2信號的嚴格的空間和時間控制是新脈管系統的適當發育所必需的。通用的模型表明Ang1配體對Tie-2激酶的刺激直接涉及心血管的分枝、發芽和長出，而周皮內皮支撐細胞的募集和相互作用在維持血管完整性和誘導靜止中是重要的。對Tie-2缺乏Ang1刺激或用Ang2抑制Tie-2自身磷酸化，其在血管退化位點以高水平產生，可以引起血管結構和基質聯繫的喪失，這導致內皮細胞死亡，特別是在生長/存活刺激物不存在時。但是，由於最近報告的至少兩種其它Tie-2配體(Ang3和Ang4)，且已表明多種激動性或拮抗性血管生成素的雜低聚化的能力會因此修飾它們的活性，這樣情況變得更加複雜。靶向Tie-2配體-受體相互作用作為抗血管生成治療手段便倍受冷落，而激酶抑制策略成為優選。
Tie-2的可溶性細胞外功能域(「ExTek」)可以破壞乳腺癌異種移植和肺轉移模型中腫瘤脈管系統的建立以及腫瘤細胞介導的眼新血管生成。由於腺病毒感染，嚙齒類中可以在7-10天內造成體內mg/ml水平的ExTek的產生，而沒有副作用。這些結果暗示在正常健康的動物中破壞Tie-2信號路徑可以很好地被耐受。對ExTek的這些Tie-2抑制性反應可以是配體(一種或多種)的隨之而來的螯合作用和/或全長Tie-2非生產性雜二聚體的產生。
最近，在人關節炎關節的血管滑膜關節翳內已發現了Tie-2表達的顯著上調，這與其在不適當的新血管形成中的角色一致。此發現暗示在類風溼性關節炎的進展中Tie-2起了一定作用。已確定產生Tie-2基本活化形式的點突變與人靜脈畸形病有關。因此，Tie-2抑制劑被用於治療這些疾病，並用於不適當新血管生成的其它情形中。
非受體酪氨酸激酶非受體酪氨酸激酶代表了缺乏細胞外和跨膜序列的細胞酶的集合。目前，已確定了24種以上的具體非受體酪氨酸激酶，其中包括11種亞類(Src，Frk，Btk，Csk，Abl，Zap70，Fes/Fps，Fak，Jak，Ack和LIMK)。目前，非受體酪氨酸激酶的Src亞類由最多的PTK成員組成，並包括包括Src、Yes、Fyn、Lyn、Lck、Blk、Hck、Fgr和Yrk。該Src亞類已與瘤形成和免疫反應建立了聯繫。對非受體酪氨酸激酶的更詳細的討論由Bohlen，1993，Oncogene 82025-2031提供，將其引入作為參考。
已發現很多酪氨酸激酶，不論是RTK還是非受體酪氨酸激酶，參與了涉及多種致病性症狀的細胞信號路徑，包括癌症、牛皮癬及其它過度增殖性紊亂或過度免疫反應。
調節PTKs的化合物的開發考慮到PTKs對細胞增殖、與異常細胞增殖有關的疾病和紊亂的控制、調節和調製的臆測重要性，人們為了確定受體和非受體酪氨酸激酶「抑制劑」進行了很多嘗試，其中使用了多種手段，包括使用突變配體(美國專利No.4,966,849)、可溶性受體和抗體(WO 94/10202；Kendall Thomas，1994，Proc.Natl.Acad.Sci 9010705-09；Kim等，1993，Nature 362841-844)、RNA配體(Jellinek等，Biochemistry 3310450-56；Takano等，1993，Mol.Bio.Cell4358A；Kinsella等1992，Exp.Cell Res.19956-62；Wright等，1992，J.Cellular Phys.152448-57)和酪氨酸激酶抑制劑(WO 94/03427；WO 92/21660；WO 91/15495；WO94/14808；美國專利No.5,330,992；Mariani等，1994，Proc.Am.Assoc.Cancer Res.352268)。
最近，人們試圖識別作為酪氨酸激酶抑制劑的小分子。例如，雙單環、雙環或雜環芳基化合物(PCT WO 92/20642)和亞乙烯基-吖吲哚衍生物(PCT WO 94/14808)普遍被描述為酪氨酸激酶抑制劑。苯乙烯基化合物(美國專利No.5,217,999)、苯乙烯基-取代的吡啶基化合物(美國專利No.5,302,606)、某些喹唑啉衍生物(EP申請No.0 566 266A1；Expert Opin.Ther.Pat.(1998)，8(4)475-478)、硒代吲哚和硒化物(PCT WO 94/03427)、三環多羥基化合物(PCT WO 92/21660)和苄基膦酸化合物(PCT WO 91/15495)已被描述為用作酪氨酸激酶抑制劑用於治療癌症的化合物。苯氨基噌啉(PCT WO 97/34876)和喹唑啉衍生物化合物(PCT WO97/22596；PCT WO97/42187)已被描述為血管發生和血管滲透性的抑制劑。
此外，人們嘗試確定作為絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑的小分子。例如，已描述了雙(吲哚基馬來醯亞胺)化合物抑制特定PKC絲氨酸/蘇氨酸激酶異構形式，這些異構形式的信號傳遞功能與VEGF相關的疾病中的血管滲透性有關(PCT WO97/40830；PCT WO 97/40831)。Plk-1激酶抑制劑Plk-1是絲氨酸/蘇氨酸激酶，其是細胞循環過程的重要調節劑。其在有絲分裂紡錘體的裝配和動力功能中扮演關鍵角色。業已表明Plk-1和相關激酶緊密涉及其它細胞循環調節劑如細胞周期蛋白依賴性激酶的活化和滅活。Plk-1的高水平表達與細胞增殖活性有關。其常常發現於不同起因的惡性腫瘤中。預計Plk-1的抑制劑通過中斷涉及有絲分裂紡錘體和不適當活化的細胞周期蛋白依賴性激酶的過程來阻斷癌細胞增殖。Cdc2/細胞周期蛋白B激酶抑制劑(Cdc2也稱為cdkl)Cdc2/細胞周期蛋白B是屬於細胞周期蛋白依賴性激酶(cdks)類的其它絲氨酸/蘇氨酸激酶。這些酶涉及細胞周期過程的不同相之間的臨界過渡。據信作為癌症的證明的失控的細胞增殖，依賴於這些細胞中的升高的cdk活性。cdc2/細胞周期蛋白B激酶抑制劑對癌細胞中升高的cdk活性的抑制，可以抑制增殖，並可以恢復對細胞周期過程的正常控制。
CDK活化的調節很複雜，但是需要將CDK與細胞周期蛋白類的調節性亞單元的一員相聯繫(Draetta，Trends in Cell Biology，3287-289(1993))；Murray和Kirschner，Nature，339275-280(1989)；Solomon等，Molecular Biology of the Cell，313-27(1992))。水平更進一步的調節通過激活或滅活CDK亞單元的磷酸化作用而得以發生(Draetta，Trends in Cell Biology，3287-289(1993))；Murray和Kirschner，Nature，339275-280(1989)；Solomon等，Molecular Biology of the Cell，313-27(1992)；Ducommun等，EMBO Journal，103311-3319(1991)；Gautier等，Nature 339626-629(1989)；Gould和Nurse，Nature，34239-45(1989)；Krek和Nigg，EMBO Journal，103331-3341(1991)；Solomon等，Cell，631013-1024(1990))。不同細胞周期蛋白/CDK複合物的協調激活和滅活是細胞周期的正常過程所需要的(Pines，Trendsin Biochemical Sciences，18195-197(1993)；Sherr，Cell，731059-1065(1993))。臨界G1-S和G2-M轉變都由不同細胞周期蛋白/CDK活性的激活來控制。在G1中，細胞周期蛋白D/CDK4和細胞周期蛋白E/CDK2都被認為能介導S期的開始(Matsushima等，Molecular Cellular Biology，142066-2076(1994)；Ohtsubo和Roberts，Science，2591908-1912(1993)；Quelle等，Genes Development，71559-1571(1993)；Resnitzky等，Molecular Cellular Biology，141669-1679(1994))。通過S期的過程需要細胞周期蛋白A/CDK2的活性(Girard等，Cell，671169-1179(1991)；Pagano等，EMBO Journal，11961-971(1992)；Rosenblatt等，Proceedings of the National Academy of ScienceUSA，892824-2828(1992)；Walker和Maller，Nature，354314-317(1991)；Zindy等，Biochemical Biophysical ResearchCommunications，1821144-1154(1992))，其中細胞周期蛋白A/cdc2(CDK1)和細胞周期蛋白B/cdc2的激活是中期的開始所需要的(Draetta，Trends in Cell Biology，3287-289(1993))；Murray和Kirschner，Nature，339275-280(1989)；Solomon等，Molecular Biology of the Cell，313-27(1992)；Girard等，Cell，671169-1179(1991)；Pagano等，EMBO Journal，11961-971(1992)；Rosenblatt等，Proceedings of the National Academyof Science USA，892824-2828(1992)；Walker和Maller，Nature，354314-317(1991)；Zindy等，Biochemical BiophysicalResearch Communications，1821144-1154(1992))。因此，人們並不奇怪，CDK調節的失控是過度增殖性疾病和癌症中時常發生的事件(Pines，Current Opinion in Cell Biology，4144-148(1992)；Lees，Current Opinion in Cell Biology，7773-780(1995)；Hunter和Pines，Cell，79573-582(1994))。
參與了介導和維持疾病狀態的激酶的抑制劑代表了對這些疾病的新的治療方法。這些激酶的實例包括但不限於(1)抑制癌症中的c-Src(Brickell，Critical Reviews in Oneogenesis，3401-406(1992)；Courtneidge，Seminars in Cancer Biology，5236-246(1994)、抑制raf(Powis，Pharmacology Therapeutics，6257-95(1994))和抑制細胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)1、2和4(Pines，Current Opinion in Cell Biology，4144148(1992)；Lees，Current Opinion in Cell Biology，7773-780(1995)；Hunter和Pines，Cell，79573-582(1994))，(2)抑制再狹窄中的CDK2或PDGF-R激酶(Buchdunger等，Proceedings of the National Academyof Science USA，922258-2262(1995))，(3)抑制早老性痴呆中的CDK5和GSK3激酶(Hosoi等，Journal of Biochemistry(Tokyo)，117741-749(1995)；Aplin等，Journal of Neurochemistry，67699-707(1996)，(4)抑制骨質疏鬆中的c-Src激酶(Tanaka等，Nature，383528-531(1996)，(5)抑制II型糖尿病中的GSK-3激酶(Borthwick等，Biochemical Biophysical ResearchCommunications，210738-745(1995)，(6)抑制炎症中的p38激酶(Badger等，The Journal of Pharmacology and ExperimentalTherapeutics，2791453-1461(1996))，(7)抑制涉及血管發生的疾病中的VEGF-R 1-3和TIE-1及-2激酶(Shawver等，DrugDiscovery Today，250-63(1997))，(8)抑制病毒感染中的UL97激酶(He等，Journal of Virology，71405-411(1997))，(9)抑制骨和造血疾病中的CSF-1R激酶(Myers等，Bioorganic MedicinalChemistry Letters，7421-424(1997)，以及(10)抑制自身免疫性疾病和移植排斥中的Lck激酶(Myers等，Bioorganic MedicinalChemistry Letters，7417-420(1997))。
在所述激酶並未失調但是其是維持該疾病要素時，某些激酶的抑制劑還可能用於治療這些疾病。在此情況下，對激酶活性的抑制將是為了治療或減輕這些疾病。例如，很多病毒，如人乳頭狀瘤病毒，中斷細胞周期並使細胞進入細胞循環的S期(Vousden，FASEB Journal，78720879(1993))。通過抑制必要的S期起始活性如CDK2來阻止在病毒感染後細胞進入DNA合成階段，可以通過阻止病毒複製來中斷病毒生命周期。這一相同的原理可以用來保護機體的正常細胞免受周期特異性化療劑的毒性(Stone等，Cancer Research，563199-3202(1996)；Kohn等，Journal of Cellular Biochemistry，5444-452(1994))。抑制CDKs 2或4將阻止進入正常細胞的周期並限制在S期、G2或有絲分裂期起作用的細胞毒素的毒性。此外，還表明CDK2/細胞周期蛋白E活性調節NF-kB。抑制CDK2活性刺激NF-kB依賴性基因表達，這是通過與p300輔激活蛋白作用階段的事件(Perkins等，Science，275523-527(1997))。NF-kB調節牽涉炎性反應的基因(如造血生長因子、趨化因子和白細胞粘附分子)(Baeuerle和Henkel，Annual Review of Immunology，12141-179(1994))並可能涉及細胞內編程性細胞死亡信號的抑制(Beg and Baltimore，Science，274782-784(1996)；Wang等，Science，274784-787(1996)；Van Antwerp等，Science，274787-789(1996))。因此，抑制CDK2可以抑制細胞毒藥物通過涉及NF-kB的機理引起的編程性細胞死亡。因此，這表明抑制CDK2活性還在其中NF-kB的調節在疾病的病因中起一定作用的其它情況中具有應用價值。可以從真菌感染中列舉其它實例麴黴病是免疫遭到危害的患者中的常見感染(Armstrong，Clinical Infectious Diseases，161-7(1993))。對麴黴屬激酶Cdc2/CDC28或Nim A的抑制(Osmani等，EMBO Journal，102669-2679(1991)；Osmani等，Cell，67283-291(1991))可以引起該真菌的抑制或死亡，以便改進這些感染患者的治療結果。
因此需要對有效的小化合物進行鑑定，這些化合物通過調節受體和非受體酪氨酸及絲氨酸/蘇氨酸激酶的活性，來調節和調製反常或異常的細胞增殖、分化或代謝，特異性地抑制信號傳導和細胞增殖。具體地講，對特異性抑制酪氨酸激酶功能的方法和化合物的鑑定將是有利的，該酪氨酸激酶是血管生成(antiogenic)過程或血管滲透性過高的形成所必需的，血管滲透性過高導致水腫、腹水、滲漏、流出和大分子溢出及基質沉積以及相關的紊亂。發明概述本發明提供了式I的化合物， 其外消旋-非對映異構混合物、旋光異構體、藥用鹽、前藥或生物活性代謝物，其中G是 其中Z100是 或被R1任選地取代的基團，其選自如下環烷基、萘基、四氫萘基、苯並噻吩基、呋喃基、噻吩基、苯並噁唑基、苯並噻唑基、 噻唑基、苯並呋喃基、2，3-二氫苯並呋喃基、吲哚基、異噁唑基、四氫吡喃基、四氫呋喃基、哌啶基、吡唑基、吡咯基、噁唑基、異噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、二氫吲哚基、吲唑基、苯並異噻唑基、吡啶並-噁唑基、吡啶並-噻唑基、嘧啶並噁唑基、嘧啶並噻唑基和苯並咪唑基；Z110是共價鍵，或是任選地被取代的(C1-C6)，其任選地被一個或多個選自如下的取代基取代烷基、CN、OH、滷素、NO2、COOH、被取代或未被取代的氨基和被取代或未被取代的苯基；Z111是共價鍵，任選地被取代的(C1-C6)或任選地被取代的-(CH2)n-環烷基-(CH2)n-；其中此任選地被取代的基團任選地被一個或多個選自如下的取代基取代烷基、CN、OH、滷素，NO2、COOH、被取代或未被取代的氨基和被取代或未被取代的苯基；Ra和R1各表示一個或多個取代基，其每次出現時獨立地選自如下氫原子，滷素，-CN，-NO2，-C(O)OH，-C(O)H，-OH，-C(O)O-烷基，被取代或未被取代的甲醯氨基，四唑基，三氟甲基羰基氨基，三氟甲基磺醯氨基，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的鏈烯基，被取代或未被取代的芳基氧基，被取代或未被取代的雜芳基氧基，被取代或未被取代的芳基烷基，被取代或未被取代的鏈炔基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的氨基烷基，被取代或未被取代的醯氨基，被取代或未被取代的雜芳硫基，被取代或未被取代的芳硫基，-Z105-C(O)N(R)2，-Z105-N(R)-C(O)-Z200，-Z105-N(R)-S(O)2-Z200，-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200，Rc和CH2ORc；其中Rc每次出現時獨立地是氫原子，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，-CH2-NRdRe，-W-(CH2)t-NRdRe，-W-(CH2)t-O-烷基，-W-(CH2)t-S-烷基或-W-(CH2)t-OH；
Z105每次出現時獨立地是共價鍵或(C4-C6)；Z200每次出現時獨立地是被取代或未被取代的(C1-C6)，被取代或未被取代的苯基或者被取代的或未被取代的-(C1-C6)-苯基；Rd和Re每次出現時獨立地是H，烷基，烷醯基或SO2-烷基；或Rd、Re和它們所連接的氮原子一起形成5或6員雜環；t每次出現時獨立地是2至6的整數；W每次出現時獨立地是化學鍵或O、S、S(O)、S(O)2或NRf，其中Rf每次出現時獨立地是H或烷基；或者R1是被取代或未被取代的與環2稠合的碳環或雜環；R3是氫原子，羥基，被取代或未被取代的烷基或者被取代的或未被取代的烷氧基；A是-O-；-S-；-S(O)p-；-N(R)-；-N(C(O)OR)-；-N(C(O)R)-；-N(SO2R)-；-CH2O-；-CH2S-；-CH2N(R)-；-CH(NR)-；-CH2N(C(O)R))-；-CH2N(C(O)OR)-；-CH2N(SO2R)-；-CH(NHR)-；-CH(NHC(O)R)-；-CH(NHSO2R)-；-CH(NHC(O)OR)-；-CH(OC(O)R)-；-CH(OC(O)NHR)-；-CH＝CH-；-C(＝NOR)-；-C(O)-；-CH(OR)-；-C(O)N(R)-；-N(R)C(O)-；-N(R)S(O)p；-OC(O)N(R)-；-N(R)-C(O)-(CH2)n-N(R)-，-N(R)C(O)O-；-N(R)-(CH2)n+1-C(O)-，-S(O)pN(R)-；-O-(CR2)n+1-C(O)-，-O-(CR2)n+1-O-，-N(C(O)R)S(O)p-；-N(R)S(O)pN(R)-；-N(R)-C(O)-(CH2)n-O-，-C(O)N(R)C(O)-；-S(O)pN(R)C(O)-；-OS(O)pN(R)-；-N(R)S(O)pO-；-N(R)S(O)pC(O)-；-SOpN(C(O)R)-；-N(R)SOpN(R)-；-C(O)O-；-N(R)P(ORb)O-；-N(R)P(ORb)-；-N(R)P(O)(ORb)O-；-N(R)P(O)(ORb)-；-N(C(O)R)P(ORb)O-；-N(C(O)R)P(ORb)-；-N(C(O)R)P(O)(ORb)O-或-N(C(O)R)P(ORb)-；其中R每次出現時獨立地是H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基烷基或者被取代的或未被取代的芳基；Rb每次出現時獨立地是H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基烷基、被取代或未被取代的環烷基或者被取代的或未被取代的芳基；p是1或2；或在含磷的基團中，氮原子、磷原子、R和Rb一起形成5或6員雜環；或A是NRSO2，而R、Ra和氮原子一起形成被取代或未被取代的與環1稠合的5或6員雜環；R2是-Z101-Z102；Z101是共價鍵，-(C1-C6)-，-(C1-C6)-O-，-(C1-C6)-C(O)-，-(C1-C6)-C(O)O-，-(C1-C6)-C(O)-NH-，-(C1-C6)-C(O)-N((C1-C6))-或被取代或未被取代的苯基；Z102是氫原子，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的環烷基，被取代或未被取代的飽和或不飽和的雜環基團，或被取代或未被取代的飽和或不飽和的雜雙環基團；所述被取代的雜環或者被取代的雜雙環基團帶有一個或多個取代基，其各自獨立地選自羥基，氰基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代或未被取代的磺醯氨基，被取代或未被取代的脲基，被取代或未被取代的甲醯氨基；被取代或未被取代的氨基，氧代基團，飽和的、不飽和的或芳族的被取代或未被取代的雜環基團，該雜環中含有一個或多個氮原子、一個或多個氧原子或二者兼而有之；其中所述氮原子獨立地任選地被如下基團取代被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；或R2是式B-E，其中B是被取代或未被取代的環烷基，被取代或未被取代的氮雜環烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的氨基烷基磺醯基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代或未被取代的氨基烷基羰基，羥基，被取代或未被取代的亞烷基，被取代或未被取代的氨基烷基，被取代或未被取代的亞烷基羰基或者被取代的或未被取代的氨基烷基羰基；且E是被取代或未被取代的氮雜環烷基，被取代或未被取代的氮雜環烷基羰基，被取代或未被取代的氮雜環烷基磺醯基，被取代或未被取代的氮雜環烷基烷基，被取代或未被取代的雜芳基，被取代或未被取代的雜芳基羰基，被取代或未被取代的雜芳基磺醯基，被取代或未被取代的雜芳基烷基，被取代或未被取代的氮雜環烷基羰基氨基，被取代或未被取代的雜芳基羰基氨基或者被取代的或未被取代的芳基；a是1，而D1、G1、J1、L1和M1各自獨立地選自CRa和N，其條件是D1、G1、J1、L1和M1中至少兩個是CRa；或a是0，而D1、G1、L1和M1之一是NRa，D1、G1、L1和M1之一是CRa，且其餘獨立地選自CRa和N，其中Ra定義如上；b是1，而D2、G2、J2、L2和M2各自獨立地選自CRa和N，其條件是D2、G2、J2、L2和M2中至少兩個是CRa；或b是0，而D2、G2、L2和M2之一是NRa，D2、G2、L2和M2之一是CRa，且其餘獨立地選自CRa和N，其中Ra定義如上；且n每次出現時獨立地是0至6的整數。
優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R1每次出現時獨立地選自如下F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，-CH2NRdRc，叔丁基，吡啶基，被取代或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代或未被取代的苯磺醯基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，羧基，被取代或未被取代的四唑基及被取代或未被取代的苯乙烯基。
另一種優選的式(I)化合物是，其中R3是H；Ra每次出現時獨立地選自如下F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，叔丁基，吡啶基，被取代或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代或未被取代的苯磺醯基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，羧基，被取代或未被取代的四唑基及被取代或未被取代的苯乙烯基。
另一種優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式 其中n是1、2或3。
另一種優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式 其中m是0、1、2或3，且
Rg是H或-(CH2)pN(R4)R5，其中p是2至6的整數，而R4和R5各自獨立地是H、氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-、-(CH2)q、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的部分，其選自烷基、烷氧基、氨基、芳基、雜芳基和雜環烷基，或R4、R5和它們所連接的氮原子一起形成3、4、5、6或7-員被取代或未被取代的雜環或雜雙環基團。
另一種優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式 其中m是0、1、2或3，a和b各自獨立地是0至6的整數；Q是-OR6或-NR4R5；各R4和R5獨立地是H、氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-、-(CH2)q，-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基、氨基、芳基、雜芳基或雜環烷基，或R4、R5和它們所連接的氮原子一起形成3、4、5、6或7員被取代或未被取代的雜環或雜雙環基團；且R6是氫原子或被取代或未被取代的烷基。
另一種優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式 其中n是1、2或3；且
R4是H、氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-、-(CH2)q、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-)-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基。
另一種優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式 其中m是0、1、2或3；R5是H、氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自如下共價鍵、-C(O)-、-(CH2)q-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-、-(CH2)qC(O)-、-C(O)(CH2)q-和-(CH2)qS(O)r-，其中(CH2)q-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-、-(CH2)qC(O)-、-C(O)(CH2)q-和-(CH2)qS(O)r的烷基部分任選地被下列基團取代滷素、羥基或烷基；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的烷氧基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或Y和Z一起是天然或非天然胺基酸，其胺的氮原子上可以單或二烷基化；且R6表示一個或多個取代基，其各自獨立地選自氫原子、羥基、氧代基團、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜環基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基、被取代或未被取代的芳基羰基、被取代或未被取代的雜環基羰基、被取代或未被取代的氨基烷基和被取代或未被取代的芳基烷基；其條件是與氮原子相鄰的碳原子不被羥基取代。
另一種優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式 其中R4是H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-、(CH2)q、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)(O)r-；其中q是0至6的整數，而r是0、1或2；且Z是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基。
另一種優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式 其中m是1至6的整數；且R4和R5各自獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-、-(CH2)q、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)，-；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R4、R5和它們所連接的氮原子一起形成3、4、5、6或7員被取代或未被取代的雜環或者被取代的或未被取代的雜雙環基團。
另一種優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式 其中n是0至4的整數；r是0而m是1至6的整數；或r是1而m是0至6的整數；Q是-OR6或-NR4R5；各R4和R5獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-、-(CH2)q-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R4、R5和它們所連接的氮原子一起形成3、4、5或6員被取代或未被取代的雜環基團；且R6是氫原子或被取代或未被取代的烷基。
另一種優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式
n是0至4的整數；m是0至6的整數；R4是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-、-(CH2)q-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整數；且r是0，1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；且R6是氫原子或被取代或未被取代的烷基。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14各自獨立地是低級烷基或氫原子；或R7和R8；R9和R10；R11和R12；或R13和R14中的至少一對取代基一起是一個氧原子；或R7和R9中至少一個是氰基、CONHR15、COOR15、CH2OR15或CH2NR15(R16)，其中R15和R16各自獨立地是H、氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自-C(O)-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、(CH2)p-、-S(O)2-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R15、R16與氮原子一起形成3、4、5、6或7-員被取代或未被取代的雜環或被取代或未被取代的雜雙環基團；X是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳基烷基、-C(NH)NH2、-C(O)R17或-C(O)OR18，其中R18是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且t是0或1。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環 其中R19和R20各自獨立地是氫原子或低級烷基；或R19和R20一起是一個氧原子；R21和R22各自獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自如下-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0，1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R21、R22和氮原子一起形成3、4、5或6-員被取代或未被取代的雜環基團；m是1至6的整數；且n是0至6的整數。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中
m是1至6的整數；且R23是CH2OH、NRR′、C(O)NRR′或COOR，其中R和R′各自獨立地是氫原子或者被取代的或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中R24是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代或未被取代的芳烷基、羧基、氰基、C(O)OR25、CH2OR25、CH2NR26R27或C(O)NHR26，其中R25是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳烷基、被取代或未被取代的雜環基或者被取代或未被取代的雜環芳基；且R26和R27各自獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R26、R27和氮原子一起形成3、4、5或6-員被取代或未被取代的雜環基團。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4和R5的至少一個是式Y-Z，其中Z是下式 其中T是C(O)、S、SO、SO2、CHOR或NR，其中R是氫原子或被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且n是0、1或2。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4和R5的至少一個是式Y-Z，其中Z是式-N(R28)R29，其中R28和R29各自獨立地是被取代或未被取代的羧基烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基烷基、被取代或未被取代的羥基烷基、被取代或未被取代的烷基磺醯基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的氰基烷基；或R28和R29與氮原子一起形成5或6員被取代或未被取代的雜環基團。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14各自獨立地是低級烷基或氫原子；或R7和R8；R9和R10；R11和R12；或R13和R14中至少一對取代基一起是一個氧原子；或R7和R9的至少一個是氰基、CONHR15、COOR15、CH2OR15或CH2NR15(R16)，其中R15和R16各自獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自如下-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R15、R16和氮原子一起形成3、4、5、6或7-員被取代或未被取代的雜環或雜雙環基團；X是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳基烷基、-C(NH)NH2、-C(O)R11或-C(O)OR18，其中R18是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且t是0或1。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中R19和R20各自獨立地是氫原子或低級烷基；或R19和R20一起是一個氧原子；R21和R22各自獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R21、R22和氮原子一起形成3、4、5或6-員被取代或未被取代的雜環基團；m是1至6的整數；且n是0至6的整數。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中m是1至6的整數；且
R23是CH2OH、NRR′、C(O)NRR′或COOR，其中R是氫原子或被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中R24是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基、羧基、氰基、C(O)OR25、CH2OR25、CH2NR26R27或C(O)NHR26，其中R25是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳基烷基、被取代或未被取代的雜環基或者被取代的或未被取代的雜環芳基；且R26和R27各自獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R26、R27和氮原子一起形成3、4、5或6員被取代或未被取代的雜環基團。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4和R5的至少一個是式Y-Z，其中Z是下式 其中g是0或1；
T是C(O)、O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳基烷基、-C(NH)NH2、-C(O)R18或-C(O)OR18，其中R18是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且R32是氫原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羥基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4和R5的至少一個是式Y-Z，其中Z是式-N(R28)R29，其中R28和R29各自獨立地是被取代或未被取代的羧基烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基烷基、被取代或未被取代的羥基烷基、被取代或未被取代的烷基磺醯基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的氰基烷基；或R28和R29與氮原子一起形成5或6員被取代或未被取代的雜環基團。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R5是Y-Z，其中Z是式N(R30)R31，其中R30和R31各自獨立地是氫原子、烷基、烷氧基羰基、烷氧基烷基、羥基烷基、氨基羰基、氰基、烷基羰基或芳基烷基。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R5是Y-Z，其中Z是下式 其中各X獨立地是CH或N；且R32是氫原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羥基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R5是Y-Z，其中Z是下式 其中g是0或1；T是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的芳基烷基、C(O)NH2、-C(NH)NH2、-C(O)R17或-C(O)OR18，其中R18是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且R32是氫原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羥基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R5是Y-Z，其中Z是下式 其中g是0、1或2；且R32是氫原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羥基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R5是Y-Z，其中Z是下式 其中T是C(O)、O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氫原子、被取代或未被取代的烷基、芳基、芳基烷基、-C(NH)NH2、-C(O)R18或-C(O)OR18，其中R18是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；g是0或1；且R32是氫原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羥基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R5是Y-Z，其中Z是下式 其中R32是氫原子、氰基、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的羥基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基，烷基羰基、被取代或未被取代的硫代烷氧基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且R33是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的烷氧基羰基、被取代或未被取代的烷氧基烷基、被取代或未被取代的氨基羰基、全滷代烷基、被取代或未被取代的鏈烯基、被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式 其中m是0或1；R34、R35、R36、R37、R38、R39、R40和R41各自獨立地是甲基或氫原子；或R34和R35；R36；和R37；R38和R39；或R40和R41中的至少一對取代基一起是一個氧原子；且R42是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R42是下式 其中u是0或1；R43、R44、R45、R46、R47、R48、R49和R50各自獨立地是甲基或氫原子；或R43和R44；R45和R46；R47和R48；或R49和R50中的至少一對取代基一起是一個氧原子；且R51是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基。
優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是下式 其中h、i、j、k和l獨立地是0或1；R52、R53、R54、R55、R56、R57、R58、R59、Rg和Rh各自獨立地是甲基或氫原子；或R52和R53；R54和R55；R56和R57；或R58和R59中的至少一對取代基一起是一個氧原子；且R60是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R60是下式 其中v是0或1；R61、R62、R63、R64、R65、R66、R67和R68各自獨立地是低級烷基或氫原子；或R61和R62；R63和R64；R65和R66；且R67和R68中的至少一對取代基一起是一個氧原子；且
R69是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-1，其中V選自-C(O)-、-(CH2)p-、-S(O)2-、-C(O)O-、-SO2NH-、-CONH-、(CH2)qO-、-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氨基、被取代或未被取代的芳基、被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是Z101-Z102，其中Z101是共價鍵、-(C1-C6)-、-(C1-C6)-O-、-(C1-C6)-C(O)-、-(C1-C6)-C(O)O-、-(C1-C6)-C(O)-NH-、-(C1-C6)-C(O)-N((C1-C6))-或被取代的苯基；且Z102是氫原子、被取代或未被取代的烷基或被取代或未被取代的飽和或不飽和的雜環基團。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中Z101選自-CH2-C(O)O-、-CH2-C(O)-、-CH2-C(O)-NH-、-CH2-C(O)-N(Me)-、-CH(Me)-C(O)O-、(CH2)3-C(O)O-、-CH(Me)-C(O)-NH-和-(CH2)3-C(O)-NH-；且Z102選自如下氫原子、甲基、乙基、N，N-二甲基氨基乙基、N，N-二乙基氨基乙基、2-苯基-2-羥基乙基、4-嗎啉基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基和2-羥基甲基吡咯烷基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 或 其中Z100是被取代或未被取代的苯並噁唑基或被取代或未被取代的苯並噻唑基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 或 其中只有一個Ra且其是H或F。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中Z101是共價鍵；且Z102是任選地被取代的吡啶基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 另一種優選的式(I)化合物是，其中R3是H；R2是環戊基；且G是 另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中Z110是氫原子；A是O；且Z100是任選地被取代的苯基、呋喃基或噻吩基，其中Z100任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自如下F、COOH、NO2、-OMe、COOMe、OCF3和CF3。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中Z110是氫原子；A是-O-、-O-(CR2)n-C(O)-或-O-(CR2)n-O-；n每次出現時是0至3；Z100是任選地被取代的基團，其選自環己基、苯基、四氫吡喃基、四氫呋喃基、異噁唑基和哌啶基；其中Z100任選地被一個或多個選自如下的取代基取代烷基、烷氧基、滷素、羥基和烷氧基羰基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R2是任選地被取代的基團，其選自環丁基和環己基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R2任選地被一個或多個選自如下的取代基取代羥基，烷基、羥基烷基、羧基烷基和苯基烷氧基烷基。
另一種優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是4-苯氧基苯基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中m是2；a是0；R6是H；b是1或2；且R4和R5各是氫原子。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中m是0、1或2；R6是氫原子；R5是H或Y-Z；其中Y是共價鍵，-C(O)-、-(CH2)qO-、-(CH2)q、-(CH2)qC(O)-或-C(O)(CH2)q，其中-(CH2)qO-、-(CH2)p-、-(CH2)qC(O)-和-C(O)(CH2)q的烷基部分任選地被下列基團取代滷素、羥基或烷基；且Z是氫原子、烷基、任選地被取代的烷基、烷氧基烷基、任選地被取代的雜環烷基、任選地被取代的雜芳基、或任選地被取代的氨基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中Z是氫原子、甲基、乙基、羥基甲基、甲氧基乙基、N-甲基-哌啶基、(叔丁氧基羰基)(羥基)哌啶基、羥基哌啶基、(羥基甲基)哌啶基、(羥基)(甲基)哌啶基、4-嗎啉基、(甲氧基乙基)哌嗪基、甲基哌嗪基、4-哌啶基哌啶基、咪唑基、甲基咪唑基、N-甲基氨基、N，N-二甲基氨基、N-異丙基氨基、N，N-二乙基氨基、2，3-二羥基丙基氨基、2-羥基乙基氨基、3-羥基丙基氨基、甲氧基乙基氨基、乙氧基羰基甲基氨基、苯基甲基氨基、N-甲基-N-甲氧基氨基、 呋喃基甲基氨基、哌啶基乙基氨基、N-(2-N，N-二甲基氨基乙基)-N-甲基氨基、2-N，N-二甲基氨基乙基氨基、N-甲基-N-(N-甲基哌啶-4-基)氨基、2-(4-嗎啉基)-乙基氨基、3-(4-嗎啉基)-丙基氨基、3-咪唑基丙基氨基或3-(2-氧代吡咯烷基)丙基氨基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中m是2；R5是Y-Z；Y是-C(O)-；且Z是 其中n是0、1、2或3。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4是氫原子或甲基；G是 A選自O、-N(R)-和-N(R)C(O)-；Z111是-(CH2)n-環烷基-(CH2)n-；R是氫原子或烷基；n是0至5；Ra是一個或多個各自獨立地選自H、OH、F、Cl、甲基和甲氧基的取代基；R1是一個或多個取代基，其各自獨立地選自H、CN、F、CF3、OCF3、甲基、甲氧基和任選地被取代的氨基；且其中所述氨基任選地被一個或兩個基團取代，其各自獨立地選自烷基、烷氧基烷基、苯基、被取代的苯基及任選地被取代的雜芳基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R1是4-甲基苯硫基或2-吡啶硫基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 其中Z100選自苯並[b]噻吩基、呋喃基和噻吩基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中Ra是烷氧基；A是-NH-C(O)-；且在A和Z100之間存在一個共價鍵。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 其中A選自-N(R)-C(O)-N(R)-、-(CH2)n-N(R)C(O)N(R)-、-N(R)-和-N(R)-SO2-；R是氫原子或烷基；Z100是 吡啶基，噻唑基，呋喃基，苯並呋喃基或噁唑基；X是S、O或NR′，其中R′每次出現時獨立地是H或Me；Ra是一個或多個取代基，其各自獨立地選自H和F；且R1是一個或多個取代基，各自獨立地選自H、F、Cl、Br、NO2、CF3、烷基、烷氧基和烷氧基羰基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4是甲基；m是1、2或3；R5是Y-Z，其中Y是-C(O)O-、-C(O)-或-C(O)-(CH2)p-；且Z是氨基烷基、N-烷基氨基、N，N-二烷基氨基或羥基烷基氨基烷基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4是甲基；G是 其中n是0至3；Z100是任選地被取代的基團，其選自吲哚基、茚基、甲基茚基、甲基吲哚基、二甲基氨基苯基、苯基、環己基和苯並呋喃基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 Z100是任選地被取代的基團，其選自苯基、咪唑基、吲哚基、呋喃基、苯並呋喃基和2，3-二氫苯並呋喃基；其中Z100任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基自獨立地選自如下F、Cl、CN、任選地被取代的烷基、-O-(任選地被取代的烷基)、-COOH、-Z105-C(O)N(R)2、-Z105-N(R)-C(O)-Z200、-Z105-N(R)-S(O)2-Z200和-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200；Z105是共價鍵或(C1-C6)；Z200是任選地被取代的基團，其選自(C1-C6)、苯基和-(C1-C6)-苯基；Z110和Z111各自獨立的是共價鍵或(C1-C3)基團，其任選地被如下基團取代烷基、羥基、COOH、CN或苯基；且A是O、-N(R)-C(O)-N(R)-、-N(R)-C(O)-O-、-N(R)-或-N(R)-C(O)-，其中R是H或烷基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4是甲基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 其中Z100是任選地被取代的基團，其選自苯並噁唑基、苯並噻唑基和苯並咪唑基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4是甲基；A是-NH-；只有一個Ra且其是H或F；且Z100任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自烷基、滷素、CF3和烷氧基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 Z100是任選地被取代的基團，其選自苯基，吡咯基，吡啶基，苯並咪唑基，萘基和 其中Z100任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自如下F、Cl、Br、NO2、氨基、N-烷基氨基、N，N-二烷基氨基、CN、任選地被取代的烷基、-O-(任選地被取代的烷基)和苯基；
Z110和Z111每次出現時獨立地是(C0-C3)，其任選地被任選地被取代的苯基取代；且A是-N(R)-C(O)-N(R)-、-N(R)-S(O)2-、-N(R)-C(O)-、-N(R)-或-N(R)-C(O)-O-。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4是甲基和只有一個Ra且其是F。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 Z100是任選地被取代的基團，其選自苯基、異噁唑基、四氫萘基、呋喃基、苯並呋喃基、吡啶基和吲哚基；其中Z100任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自F、CN、NO2、-C(O)H、-CONH2、-NHSO2CF3、任選地被取代的烷基、任選地被取代的雜芳基和-O-(任選地被取代的烷基)；Z110和Z111各自獨立地是任選地被取代的(C0-C3)；且A是O、-N(R)-C(O)-(CH2)n-N(R)、-C(O)-N(R)-、-N(R)-C(O)-O-、-N(R)-C(O)-或-N(R)-。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中R4是甲基；Ra是H或甲氧基；且Z110和Z111各自是未被取代的。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 其中R是H或低級烷基而n每次出現時獨立地是1 to 6。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中Z100是被取代或未被取代的苯基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是 其中Z100是任選地被取代的基團，其選自苯並噁唑基、苯並噻唑基和苯並咪唑基。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中n是2；R6是H；m是1；r是1；且R4和R5各自是氫原子。
另一種更優選的式(I)化合物是，其中在任何適宜的上述優選化合物中G是4-苯氧基苯基。
在本發明的另一方面中，其涉及抑制患者的一種或多種蛋白激酶活性的方法，其中包括給所述患者使用治療有效量的式(I)的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物。優選的方法是其中所述蛋白激酶選自如下KDR、FGFR-1、PDGFRβ、PDGFRα、IGF-1R、c-Met、Flt-1、Flt-4、TIE-2、TIE-1、Lck、Src、fyn、Lyn、Blk、hck、fgr和yes。另一個優選的方法是其中所述蛋白激酶是蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶或蛋白酪氨酸激酶。更優選的方法是其中所述蛋白激酶是TIE-2，而另一種更優選的方法是其中所述蛋白激酶活性涉及T細胞活化、B細胞活化、肥大細胞脫粒、單核細胞活化、炎性反應的加強或其聯合。
本發明的另一個方面中，涉及影響患者的過度增殖性紊亂的方法，其中包括給所述患者使用治療有效量的式(I)的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物。
在本發明的另一個方面中，涉及影響患者的血管生成的方法，其中包括給所述患者使用治療有效量的式(I)的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物。優選的方法是其中所述化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物是以促進血管發生或血管生成的有效量給藥的。更優選的方法是其中所述患者患有貧血，局部出血，梗塞，移植排斥，創傷，壞疽或壞死。
在本發明的另一方面中，涉及治療患者的一種或多種潰瘍的方法，包括給所述患者使用治療有效量的式(I)的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物。優選的方法是其中所述一種或多種潰瘍是由細菌或真菌感染引起的；或所述一種或多種潰瘍是莫倫氏潰瘍；或所述一種或多種潰瘍是潰瘍性結腸炎的症狀。
在本發明的另一方面中，涉及治療患者的病症的方法，包括給所述患者使用治療有效量的式(I)的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物，其中所述病症是眼部病症，心血管病，癌症，Crow-Fukase(POEMS)症候群，糖尿病，鐮刀細胞貧血病，慢性炎症，系統性狼瘡，腎小球性腎炎，滑膜炎，炎性腸疾病，克羅恩氏病，腎小球性腎炎，類風溼性關節炎，骨關節炎，多發性硬化，移植物排斥，萊姆病，敗血症，von Hippel Lindau病，類天皰瘡，牛皮癬，佩吉特氏病，多囊性腎病，纖維變性疾病，肉樣瘤病，肝硬化，甲狀腺炎，粘滯性過高症候群，Osler-Weber-Rendu疾病，慢性梗塞性肺病，哮喘或燒傷、外傷、輻射、中風、低氧症、局部出血後水腫，卵巢高刺激性症候群，子癇前期，月經過多，子宮內膜異位，或單純性皰疹、帶狀皰疹、人類免疫缺陷病毒、副痘病毒、原生動物或弓形體病引起的感染。
優選的方法是其中所述眼部病症是眼或視網膜黃斑水腫，眼新血管病，鞏膜炎，光角膜切開術，眼色素層炎，玻璃體炎，近視，眼凹，慢性視網膜脫離，雷射治療後併發症，結膜炎，遺傳性黃斑變性，Eales病，視網膜病或視網膜黃斑變性；所述心血管病是動脈粥樣硬化，再狹窄，局部出血/再灌注損傷，血管閉塞或頸動脈梗塞性疾病；所述癌症是實體瘤，肉瘤，纖維肉瘤，骨瘤，黑素瘤，成視網膜細胞瘤，成橫紋肌細胞肉瘤，成膠質細胞瘤，成神經細胞瘤，畸胎樣瘤，造血系統惡性腫瘤，Kaposi′s肉瘤，何杰金氏病，淋巴瘤，骨髓瘤，白血病或惡性腹水；且所述糖尿病病症是胰島素依賴性糖尿病青光眼，糖尿病性視網膜病或微血管病。
在本發明的另一方面中，涉及降低患者生育力的方法，所述方法包括給所述患者使用有效量的式(I)的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物的步驟。
在本發明的另一方面中，涉及一種方法，其中所述式I的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物與原血管生成生長因子聯合給藥。優選的方法是其中所述原血管生成生長因子選自VEGF、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、HGF、FGF-1、FGF-2、其衍生物及其抗獨特型抗體。發明詳述在一個實施方案中，本發明提供了如上所述的式I化合物。在式I化合物的優選基團中取代基的含義給出如下。
優選R1選自如下F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，叔丁基，吡啶基，被取代或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代或未被取代的苯磺醯基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，羧基，被取代的和未被取代的四唑基，被取代的和未被取代的苯乙烯基，被取代的和未被取代的芳硫基，被取代或未被取代的硫代烷氧基，被取代的和未被取代的雜芳硫基；CH2ORc，其中Rc是氫原子或者被取代的或未被取代的烷基或芳基；及W-(CH2)t-NRdRe，其中t是約1至約6的整數；W是化學鍵、O、S、S(O)、S(O)2或NRf，其中Rf是H或烷基，而Rd和Re獨立地是H、烷基、烷醯基或SO2-烷基；或Rd、Re和它們所連接的氮原子一起形成5或6員雜環。
優選Ra選自如下F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，叔丁基，吡啶基，被取代或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代或未被取代的苯磺醯基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的硫代烷氧基，羧基，被取代的和未被取代的四唑基，被取代的和未取代的苯乙烯基，被取代的和未被取代的芳硫基，被取代的和未被取代的雜芳硫基；CH2ORc，其中Rc是氫原子或者被取代的或未被取代的烷基或芳基；且-W-(CH2)t-NRdRe，其中t是約1至約6的整數；W是化學鍵、O、S、S(O)、S(O)2或NRf，其中Rf是H或烷基，而Rd和Re獨立地是H、烷基、烷醯基或SO2-烷基；或Rd、Re和它們所連接的氮原子一起形成5或6員雜環。
式(I)的化合物可以以與藥用酸形成的鹽的形式存在。本發明包括這些鹽。此類鹽的實例包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、甲磺酸鹽、硝酸鹽、馬來酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽[例如(+)-酒石酸鹽、(-)-酒石酸鹽或其混合物，包括外消旋混合物]、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽，以及與胺基酸如穀氨酸形成的鹽。這些鹽可以通過本領域技術人員已知的方法製備。
具有酸性取代基的某些式(I)的化合物可以以與藥用鹼形成的鹽的形式存在。本發明包括這樣的鹽。此類鹽的實例包括鈉鹽、鉀鹽、賴氨酸鹽和精氨酸鹽。這些鹽可以通過本領域技術人員已知的方法製備。
某些式(I)的化合物及其鹽可以存在一種以上的結晶形式，本發明包括了各結晶形式及其混合物。
某些式(I)的化合物及其鹽還可以以溶劑化物的形式存在，例如水合物，本發明包括了各種溶劑化物及其混合物。
某些式(I)的化合物可以含有一個或多個手性中心，並可以存在不同的旋光活性形式。當式I的化合物含有一個手性中心時，這些化合物已兩種對映異構體的形式存在，本發明包括了這兩種對映異構體以及對映異構體的混合物，如外消旋混合物。這些對映體可以通過本領域技術人員已知的方法拆分，例如，通過結晶；形成非對映異構體衍生物或複合物，它們可以分離，例如，通過結晶、氣-液相或液相色譜；用對映體特異性試劑對一種對映體進行選擇性反應，例如酶酯化；或在手性環境中進行氣-液相或液相色譜，例如，在手性載體如結合了手性配體的矽膠，或者在手性溶劑的存在下。應領會當通過上述分離方法之一將需要的對映異構體轉變為另一種化學物質時，進一步需要釋放所需的對映異構形式的步驟。或者，特定的對映異構體可以通過不對稱合成用旋光性試劑、底物、催化劑或溶劑來合成，或通過不對稱轉化反應將一種對映異構體轉變為另一種。
當式(I)的化合物含有一個以上的手性中心時，其可以已非對映異構體的形式存在。可以通過本領域技術人員已知的方法分離這些非對映異構體對，例如，通過色譜或結晶，而每對中的單一對映體可以如上所述進行分離。本發明包括了式I化合物的各非對映異構體及其混合物。
某些式(I)的化合物可以存在不同的互變異構形式或幾何異構體，本發明包括了式I化合物的各互變異構體和/或幾何異構體及其混合物。
某些式(I)的化合物存在不同的穩定構象形式，它們是可以分離的。由於圍繞不對稱單鍵的受限制的旋轉(例如，由於空間位阻或環張力)帶來的扭轉不對稱性，為不同構象異構體的分離提供了可能。本發明包括了式(I)化合物的各構象異構體及其混合物。
某些式(I)的化合物可以存在兩性離子形式，本發明包括了式(I)化合物的各種兩性離子形式及其混合物。
雜芳基，在本文中，包括雜芳基環系(例如，其目的是舉例，不視為對本發明範圍的限制噻吩基，吡啶基，吡唑基，異噁唑基，噻二唑基，噁二唑基，吲唑基，呋喃基，吡咯基，咪唑基，吡唑基，三唑基，嘧啶基，吡嗪基，噻唑基，異噻唑基，噁唑基或四唑基)及其中碳環芳環、碳環非芳環或雜芳基環與一個或多個其它雜芳基環稠合的雜芳基環系(例如，目的是舉例，其不視為對本發明範圍的限制苯並(b)噻吩基，苯並咪唑基，苯並噁唑基，苯並噻唑基，苯並噻二唑基，苯並噁二唑基，吲哚基，四氫吲哚基，氮雜吲哚基，吲唑基，喹啉基，咪唑並吡啶，喹唑啉嘌呤，吡咯並[2，3-d]嘧啶，吡唑並[3，4-d]嘧啶)及其N-氧化物。被取代的雜芳基優選被一個或多個各自獨立地選自如下的取代基取代滷素、羥基、烷基、烷氧基、烷基-O-C(O)-、烷氧基烷基、雜環烷基、任選地被取代的苯基、硝基、氨基、單-取代的氨基或二-取代的氨基。
雜環(雜環基)基團，在本文中，指雜芳基和雜環烷基。
雜雙環基團，在本文中，指含有一個或多個雜原子的雙環基團，其是飽和的、部分不飽和的或不飽和的。
芳基烷基，在本文中，是通過具有1至約6個碳原子的脂族基團與某化合物連接的芳族取代基。優選的芳基烷基是苄基。
雜芳烷基，在本文中，是通過具有1至約6個碳原子的脂族基團與某化合物連接的雜芳族的取代基。
雜環烷基，在本文中，是具有3至8個原子並包括至少一個雜原子如氮原子、氧原子或硫原子的非芳族環系。
在本文中，脂族基團或符號如「(C0-C6)」包括直鏈的、支鏈的或環狀的烴，它們完全飽和或者含有一個或多個不飽和單元。當該基團是C0時，這意味著該部分不存在，或換言之該部分是一個化學鍵。
在本文中，芳族基團(或芳基)包括芳族的碳環環系(例如，苯基)和稠合的多環芳族環系(例如，萘基和1，2，3，4-四氫萘基)。
在本文中，術語「天然胺基酸」指本領域已知的23種天然胺基酸，它們是(以其前3個字母表示)Ala，Arg，Asn，Asp，Cys，Cys-Cys，Glu，Gln，Gly，His，Hyl，Hyp，Ile，Leu，Lys，Met，Phe，Pro，Ser，Thr，Trp，Tyr和Val。術語非天然胺基酸指式NH2-(C(X)2)n-COOH的化合物，它們是α-(當n是1時)或β-(當n是2時)胺基酸，其中X每次出現時獨立地是本領域技術人員認可的任何側鏈部分；非天然胺基酸的實例，包括但不限於羥基脯氨酸、高脯氨酸、4-氨基-苯基丙氨酸、β-(2-萘基)丙氨酸、正亮氨酸、環己基丙氨酸、β-(3-吡啶基)丙氨酸、β-(4-吡啶基)丙氨酸、α-氨基異丁酸、尿刊酸、N，N-四甲基脒基-組氨酸、N-甲基丙氨酸、N-甲基-甘氨酸、N-甲基-穀氨酸、叔丁基甘氨酸、α-氨基丁酸、叔丁基丙氨酸、鳥氨酸、α-氨基異丁酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、5-氨基戊酸、12-氨基十二烷酸、2-氨基二氫化茚-2-甲酸等，及其衍生物，特別是其中所述胺的氮原子已被單-或二-烷基化的。
在本文中，很多部分或取代基被命名為「被取代或未被取代的」或「任選地被取代的」。當某部分被這些術語之一修飾時，其表示該部分中任何本領域技術人員已知的可被取代的部分可以被取代，其包括一個或多個取代基，其中如果存在一個以上的取代基，則各取代基是獨立地進行選擇的。這意味著取代是本領域熟知的和/或是本公開文本中所教導的。出於舉例目的，其不視為對本發明範圍的限制，作為取代基的基團的一些實例為烷基(其本身也可被取代，如CF3)，烷氧基(其本身也可被取代，如OCF3)，滷素或滷素基團(F，Cl，Br，I)，羥基，硝基，氧代基團，CN，COH，COOH，氨基，N-烷基氨基或N，N-二烷基氨基(其中烷基也可被取代)，酯(-C(O)-OR，其中R是如烷基、芳基等，其可以被取代)，芳基(首選苯基，其可以被取代)和芳基烷基(其可以被取代)。
式I化合物的適當的合成路線在方案I-XII中給出。方案I說明了3-滷代-4-氯吡唑並嘧啶向N1-取代的3-芳基-4-氨基吡唑並嘧啶的轉變。方案II說明了在3-滷代-4-氨基吡唑並嘧啶的N-1位進行的取代，接著用芳基置換滷素。方案III闡明了在3-芳基-4-氨基吡唑並嘧啶的N-1位進行的取代。方案IV說明了4-羥基吡唑並嘧啶向1-取代的3-溴-4-氯吡唑並嘧啶的轉變。方案V闡明了吡唑並嘧啶核的形成。方案VI說明了3-芳基-4-氨基吡唑並嘧啶的形成。方案VII說明了對N-1取代基的進一步處理。P表示一種適宜的氨基保護基。方案VIII闡明了用於方案I中的芳基硼酸酯的製備。方案IX和X顯示了對N-1取代基的修飾。方案XI闡明3-芳基的官能基化。在方案I-XI中，正如本領域已知的，某些反應可能需要對不參與反應的官能團進行適當的保護/脫保護。
本發明的化合物具有抗血管生成性質。這些抗血管生成性質至少部分是由於對血管生成過程中必需的蛋白酪氨酸激酶的抑制。為此，這些化合物可以用作抗如下疾病的活性劑，例如，關節炎，動脈粥樣硬化，再狹窄，牛皮癬，血管瘤，心肌血管生成，冠狀和腦血管側支，局部缺血性四肢血管生成，局部出血/再灌注損傷，傷口癒合，消化潰瘍性螺桿菌屬相關的疾病，病毒引起的血管生成紊亂，骨折，Crow-Fukase症候群(POEMS)，子癇前期，月經過多，貓抓熱，潮紅，新血管性青光眼和視網膜病如與糖尿病性視網膜病有關的，早產兒視網膜病或與年齡有關的視網膜黃斑變性。此外，一些此類化合物可以用作抗如下疾病的活性劑實體瘤，惡性腹水，yon Hippel Lindau病，造血系統癌症和過度增殖性紊亂如甲狀腺增生(特別是Graves病)，及囊腫(如多囊卵巢症候群(Stein-Leventhal症候群)的卵巢基質血管過多和多囊性腎病。
此外，一些此類化合物可以用作治療如下疾病的活性劑燒傷，慢性肺病，中風，息肉，過敏症，慢性和急性炎性反應，延遲型過敏症，卵巢高刺激性症候群，與腦瘤有關的腦水腫，高空、外傷或低氧症誘發的腦或肺水腫，眼和視網膜黃斑水腫，腹水，腎小球性腎炎和其它其中血管滲透性、流出、滲出、蛋白溢出或水腫是疾病病症的疾病。這些化合物還可用於治療其中蛋白溢出導致纖維和細胞外基質沉積，促進基質增殖的疾病(例如瘢痕疙瘩，纖維變性疾病，肝硬化和腕管症候群)。VEGF產生的增加強化了炎症過程如單核細胞募集和活化。本發明的化合物還可用於治療炎性疾病如炎性腸疾病(IBD)和克羅恩氏病。方案I 方案II 方案III 方案IV 方案V 方案VI 方案VII 方案VIII 方案IX 方案X 方案XI
VEGF是已知的造成血管滲透性過高和水腫形成的僅有的血管生成生長因子，就此而言它們是獨一無二的。實際上，與很多其它生長因子的表達和使用有關的血管滲透性過高和水腫似乎是通過VEGF的產生來介導的。炎性細胞因子刺激VEGF的產生。低氧症導致很多組織中VEGF的明顯上調，於是，涉及梗塞、閉塞、局部出血、貧血或循環損傷的情況一般引起VEGF/VPF介導的反應。血管滲透性過高、相關性水腫、透皮交換的變化和大分子外滲(其常常伴發白血球滲出)，可以導致過量的基質沉積、異常的基質增殖、纖維變性疾病等。因此，VEGF介導的滲透性過高可顯著地造成具有這些病因學特徵的紊亂。
由於胚泡植入、胎盤發育和胚胎發生是血管生成依賴性的，本發明的某些化合物用作避孕藥和抗生育藥。
考慮到上述紊亂非常大的程度上是由涉及KDR/VEGFR-2和/或Flt-1/VEGFR-2和/或TIE-2酪氨酸激酶的蛋白酪氨酸激酶活性介導的。通過抑制這些酪氨酸激酶的活性，上述紊亂的發展受到抑制，這是因為此疾病狀態的血管生成或血管滲透性過高因素被嚴重地縮減。相對於使用低選擇性的酪氨酸激酶抑制劑帶來的副作用而言，本發明某些化合物通過它們對特異性酪氨酸激酶的選擇性，其的作用使副作用降低至最小。本發明的某些化合物還是FGFR、PDGFR、c-Met和IGF-1-R的有效抑制劑。這些受體激酶可以直接或間接加強多種疾病中的血管生成和過度增殖反應，因此，它們的抑制可以阻止疾病的惡化。
本發明的化合物對蛋白激酶具有抑制活性，即這些化合物通過蛋白激酶調節信號傳導。本發明的化合物抑制絲氨酸/蘇氨酸和酪氨酸激酶類的蛋白激酶。具體地講，這些化合物選擇性地抑制KDR/FLK-1/VEGFR-2酪氨酸激酶的活性。本發明的某些化合物還抑制其它酪氨酸激酶如Flt-1/VEGFR-1，Flt-4，Tie-1，Tie-2，FGFR，PDGFR，IGF-1R，c-Met，Src-亞類激酶如Lck、Src、hck、fgr、fyn、yes等的活性。此外，本發明的一些化合物顯著抑制絲氨酸/蘇氨酸激酶如如PKC、MAP激酶、erk、CDKs、Plk-1或Raf-1，它們在細胞增殖和細胞循環過程中扮演了重要的角色。本發明通式化合物對特定蛋白激酶的效力和特異性常常是可以改變的，並通過取代基(即R1、R2、R3、A和環1)的性質、數目和排列的改變以及構象限制得以實現最佳化。此外，某些化合物的代謝物也可以具有顯著的蛋白激酶抑制活性。
當給需要這些化合物的個體使用時，本發明的化合物抑制這些個體中血管滲透性過高和水腫的形成。據信，這些化合物通過抑制參與血管滲透性過高和水腫形成過程的KDR酪氨酸激酶的活性而發揮作用。KDR酪氨酸激酶也可稱作FLK-1酪氨酸激酶、NYK酪氨酸激酶或VEGFR-2酪氨酸激酶。當血管內皮細胞生長因子(VEGF)或其它活化配體(如VEGF-C，VEGF-D，VEGF-E或HIV Tat蛋白)結合細胞內皮細胞表面上的KDR酪氨酸激酶受體時，KDR酪氨酸激酶被激活。這些KDR酪氨酸激酶活化後，產生血管滲透性過高，並有流體從血流中通過血管壁進入到組織間隙中，於是形成水腫區域。血細胞滲出還常常伴發此反應。類似地，過度的血管高滲透性可以阻斷跨關鍵組織和器官(如肺和腎)中內皮的正常分子交換，於是引起大分子外滲和沉積。對KDR刺激的此急性反應(據信其加速隨後的血管生成過程)後，延長的KDR酪氨酸激酶刺激導致血管內皮細胞的增殖和趨化性以及新血管的形成。通過抑制KDR酪氨酸激酶活性，或者通過阻斷激活配體的產生，或者通過阻斷激活配體與KDR酪氨酸激酶受體結合，或通過阻止受體二聚化和磷酸根轉移作用，或通過抑制KDR酪氨酸激酶活性(抑制此酶的磷酸化功能)或者通過一些幹擾下遊信號的其它機理(D.Mukhopedhyay等，Cancer Res.581278-1284(1998)和其中引用的文獻)，滲透性過高及相關的外滲、隨後的水腫形成和基質沉積以及血管生成反應，可以受到抑制或最小化。
本發明一組優選的化合物具有抑制KDR酪氨酸激酶活性而不顯著抑制Flt-1酪氨酸激酶活性(Flt-1酪氨酸激酶也稱為VEGFR-1酪氨酸激酶)的性質。KDR酪氨酸激酶和Flt-1酪氨酸激酶通過VEGF分別結合KDR酪氨酸激酶受體和Flt-1酪氨酸激酶受體而被激活。本發明某些優選的化合物是獨一無二的，因為它們抑制通過激活配體激活的一種VEGF受體酪氨酸激酶(KDR)的活性而不抑制其它受體酪氨酸激酶。因此，本發明的某些優選化合物以此方式在它們的酪氨酸激酶抑制性中是有選擇性的。
在一個實施方案中，本發明提供了治療患者的蛋白激酶介導的病症的方法，包括給所述患者使用治療或預防有效量的一種或多種式I的化合物。
「蛋白激酶介導的病症」或「蛋白激酶活性介導的病症」是一種病症，如一種疾病或其它不需要的身體症狀，其發生或發展至少部分依賴於至少一種蛋白激酶的活性。此蛋白激酶可以是，例如，蛋白酪氨酸激酶或蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶。
接受治療的患者可以是任何動物，並優選哺乳動物，如馴養的動物或家畜。更優選，該患者是人。
「治療有效量」是完全或部分抑制病症的發展或者至少部分減輕該病症的一種或多種症狀的式I化合物或者兩種或多種此類化合物的聯合形式的量。治療有效量也可以是預防有效的量。治療有效量依賴於患者的體形大小性別、被治療的病症、該病症的嚴重性及要獲得的結果。對於指定的患者，治療有效量可以通過本領域技術人員已知的方法確定。
本發明的方法用於治療蛋白激酶介導的病症，如上述病症中的任何一種。在一個實施方案中，蛋白激酶介導的病症的特徵是不需要的血管生成、水腫或基質沉積。例如，此病症可以是一種或多種潰瘍，如細菌或真菌引起的潰瘍、莫倫氏潰瘍和潰瘍性結腸炎。病症也可以由微生物感染引起，如萊姆病、敗血症、膿毒性休克或單純性皰疹、帶狀皰疹、人類免疫缺陷病毒、原生動物、弓形體病或副痘病毒的感染；血管生成紊亂，如von Hippel Lindau病、多囊性腎病、類天皰瘡、佩吉特氏病和牛皮癬；生殖系統病症，如子宮內膜異位、卵巢高刺激性症候群、子癇前期或月經過多；纖維變性和水腫病症，如肉樣瘤病、纖維變性疾病、肝硬化、甲狀腺炎、系統性粘滯性過高症候群、Osler-Weber-Rendu病、慢性梗塞性肺病、哮喘和燒傷、外傷、輻射、中風、低氧症或局部出血後水腫；或炎性/免疫性病症，如系統性狼瘡、慢性炎症、腎小球性腎炎、滑膜炎、炎性腸疾病、克羅恩氏病、類風溼性關節炎、骨關節炎、多發性硬化和移植物排斥。適宜的蛋白激酶介導的病症還包括鐮刀細胞貧血病、骨質疏鬆、骨硬化病，腫瘤誘發的血鈣過多和骨轉移瘤。除了視網膜病而視網膜黃斑變性外，可以通過本發明方法治療的其它蛋白激酶介導的病症包括眼部病症，如眼和視網膜黃斑水腫、眼新血管病、鞏膜炎、光角膜切開術、眼色素層炎、玻璃體炎、近視、眼凹、慢性視網膜脫離、雷射治療後併發症、結膜炎、遺傳性黃斑變性和Eales病。
本發明的化合物也可以用於治療心血管病症，如動脈粥樣硬化、再狹窄、血管閉塞和頸動脈梗塞性疾病。
本發明的化合物還可以用於治療與癌症相關的適應徵，如實體瘤，肉瘤(特別是Ewing氏肉瘤和骨肉瘤)，成視網膜細胞瘤，成橫紋肌細胞肉瘤，成神經細胞瘤，造血系統惡性腫瘤，包括白血病和淋巴瘤，腫瘤誘發的胸膜或心包滲漏和惡性腹水。
本發明的化合物還可以用於治療Crow-Fukase(POEMS)症候群和糖尿病，如青光眼、糖尿病性視網膜病而微血管病。
Src、Tec、Jak、Map、Csk、NFκB和Syk類的激酶在調節免疫功能中起關鍵作用。Src類通常包括Fyn、Lck、Fgr、Fes、Lyn、Src、Yrk、Fyk、Yes、Hck和Blk。Syk類通常理解為只包括Zap和Syk。TEC類包括Tec、Btk、Rlk和Itk。Janus類激酶涉及生長因子和原炎性細胞因子信號通過一些受體的傳導。雖然Tec類激酶的成員BTK和ITK，在免疫生物學中起的作用還不明確，抑制劑對它們的調節可以改善治療效果。Csk類通常被認為包括Csk和Chk。激酶RIP、IRAK-1、IRAK-2、NIK、p38 MAP激酶、Jnk、IKK-1和IKK-2涉及關鍵原炎性細胞因子如TNF和IL-1的信號傳導路徑。藉助它們抑制一種或多種這些激酶的能力，式I的化合物可以作為免疫調節劑，用於維持同種移植物、治療自身免疫性疾病和治療敗血症和膿毒性休克。通過它們調節T細胞、B細胞、肝細胞、單核細胞和嗜中性白細胞的遷移或滅活，這些化合物可以用來治療自身免疫性疾病和敗血症。預防移植排斥，或者是固體器官的宿主抗移植物病，或者是骨髓的移植物抗宿主病，受到目前使用的免疫抑制劑的限制，應得益於具有改進的治療指數的有效藥物。基因靶向實驗已表明了Src在破骨細胞(負責骨吸收的細胞)的生物學中的重要作用。式I的化合物，通過它們調節Src的能力，還可以用於治療骨質疏鬆、骨硬化病、佩吉特氏病、腫瘤引起的血鈣過多並用於治療骨轉移瘤。
已表明一些蛋白激酶是原致癌基因。染色體破壞(在染色體5上的ltk激酶斷裂位點)、象對Abl基因的情況那樣用BCR易位(肺城染色體)、在如c-Kit或EGFR情況下的截短，或突變(例如，Met)，導致調節障礙的蛋白產生，將其從原致癌基因轉變為致癌基因產物。在其它腫瘤中，瘤形成是由自分泌或旁分泌配體/生長因子受體相互作用驅動的。src類激酶的一些成員一般參與下遊信號傳導，於是加強了癌形成，且通過過度表達或突變它們本身可以變成致癌性。通過抑制這些蛋白的蛋白激酶活性，可以破壞這些疾病過程。血管再狹窄可以包括FGF和/或PDGF-促進的平滑肌和內皮細胞增殖。對FGFR、PDGFR、IGF1-R和c-Met在體內的配體刺激是原血管生成性的，並強化血管生成依賴性的疾病。抑制FGFr、PDGFr、c-Met或IGF1-R激酶活性，不論針對個別的或是聯合的，都可以是抑制這些現象的有效策略。因此，抑制正常或異常的c-kit、c-met、c-fms、src-類成員、EGFr、erbB2、erbB4、BCR-Abl、PDGFr、FGFr、IGF1-R和其它受體或胞質酪氨酸激酶的激酶活性的式I化合物，可能對治療良性和腫瘤性增殖疾病是有價值的。
在很多病理症狀中(例如，原發實體瘤和轉移瘤、Kaposi氏肉瘤、類風溼性關節炎、由於不適當的眼新血管形成導致的失明、牛皮癬和動脈粥樣硬化)，疾病進展伴隨持久的血管生成。多肽生長因子常常由疾病組織或相關炎性細胞產生的，而其相應的內皮細胞特異性受體酪氨酸激酶(例如，KDR/VEGFR-2、Fltl/VEGFR-1、Flt-4、Tie-2/Tek和Tie)是刺激內皮細胞生長、遷移、組構、分化及必不可少的新功能性血管的建立所必需的。在介導血管高滲透性中VEGF的血管滲透性因子活性的結果，人們還確信VEGFR激酶的VEGF刺激在以下問題的形成中起重要作用腫瘤腹水，腦和肺水腫，胸膜和心包滲漏，延遲型過敏反應，外傷、燒傷、局部出血、糖尿病性併發症、子宮內膜異位、成人呼吸窘迫症候群(ARDS)、心肺搭橋術後相關低血壓和高滲透性後組織水腫和器官功能不全，以及由於不適當的新血管形成導致青光眼或失明的眼水腫。除VEGF外，最近鑑定的VEGF-C和VEGF-D，及病毒編碼的VEGF-E或HIV-Tat蛋白也可以通過刺激VEGFR激酶引起血管滲透性過高反應。KDR/VEGFR-2和/或Tie-2也在造血幹細胞的選擇群落中表達。此群落的某些成員本質上是多能的，並可以被生長因子刺激分化為內皮細胞，並參與血管發生性血管生成過程。為此，這些物質已被人們稱為內皮祖細胞(EPCs)(J.Clin.Investi.1031231-1236(1999))。在一些內皮祖細胞中，Tie-2可以在它們的募集、粘附、調節和分化中起一定作用(Blood，4317-326(1997))。因此，能阻斷內皮細胞特異性激酶的激酶活性的式I的某些試劑可以抑制涉及這些情形的疾病的發展。
據信Tie-2(Ang2)的拮抗劑配體的血管去穩定作用在內皮中引起不穩定的「塑料」態。在高VEGF水平的存在下，可以導致強有力的血管發生反應；但是，在VEGF或VEGF-血管刺激物不存在時，可以發生直接的血管退化和內皮編程性細胞死亡(Genes和Devel.131055-1066(1999))。在類似的方式中，在VEGF相關刺激物的存在或不存在下，Tie-2激酶抑制劑分別可以是原血管形成性的或抗血管生成性的。因此，Tie-2抑制劑可以與適當的原血管生成性刺激子如VEGF一起使用，以促進某些情形如傷口癒合、梗塞和局部出血中的治療性血管生成。
式I的化合物或其鹽或含其治療有效量的藥物組合物，可以用於治療蛋白激酶介導的病症，如上述良性或腫瘤性增殖疾病或免疫系統的紊亂。例如，這些疾病包括自身免疫性疾病如類風溼性關節炎，甲狀腺炎，I型糖尿病，多發性硬化，肉樣瘤病，炎性腸疾病，克羅恩氏病，重症肌無力和系統性紅斑狼瘡；牛皮癬，器官移植排斥(如腎排斥、移植物抗宿主病)，良性和腫瘤性增殖疾病，人癌症如肺、乳腺、胃、膀胱、結腸、胰腺、卵巢、前列腺和直腸癌症以及造血系統惡性腫瘤(白血病和淋巴瘤)，以及涉及不適當的血管化的疾病例如糖尿病性視網膜病，早產兒視網膜病，人類的由於與年齡有關的視網膜黃斑變性引起的脈絡膜新血管形成和嬰兒血管瘤。此外，這些抑制劑可以用於治療涉及VEGF介導的水腫、腹水、滲漏和滲出的疾病，包括，例如，視網膜黃斑水腫，腦水腫，急性肺損傷和成人呼吸窘迫症候群(ARDS)。
本發明的化合物還可以用於預防上述疾病。
考慮到上述紊亂很大程度上由涉及VEGF受體(例如，KDR、Flt-1和/或Tie-2)的蛋白酪氨酸激酶活性所介導。通過抑制這些受體酪氨酸激酶的活性，上述紊亂的進展受到抑制，這是由於此疾病態的血管生成因素被嚴重縮減。本發明化合物的作用，通過它們對特異性酪氨酸激酶的選擇性，使如果使用選擇性小的酪氨酸激酶抑制劑造成的副作用最小化。
在本發明的另一方面中，提供了如上所定義的式I化合物用作藥物，特別是用作蛋白激酶活性如酪氨酸激酶活性、絲氨酸激酶活性和蘇氨酸激酶活性的抑制劑。在本發明的另一方面中，提供了如上所定義的式I化合物在製備用於抑制蛋白激酶活性的藥物中的用途。
在本發明中，使用了下列定義「生理可接受鹽」指保留游離鹼的生物有效性和性質的那些鹽，其可以通過與無機酸或有機酸反應製備，無機酸例如氫氯酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸，有機酸如磺酸、羧酸、有機膦酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸、乳酸、酒石酸等。藥物製劑本發明的化合物可以以其本身或在藥物組合物給病人使用，在藥物組合物中它們以治療或改善血管滲透性過高、水腫和相關疾病的劑量與適宜的載體或賦形劑(一種或多種)混合。這些化合物的混合物也可以已簡單的混合物形式或以適宜的配製藥物組合物給該患者使用。治療有效量還指足以給不適當的新血管形成、過度增殖性疾病、水腫、VEGF相關性滲透性過高和/或VEGF相關性低血壓帶來預防或減輕作用的化合物(一種或多種)的量。有關本申請化合物的配製和使用技術，請見「Remington′s Pharmaceutical Sciences」Mack Publishing Co.，Easton，PA，最新版本。給藥途徑給藥的適宜途徑，例如，可以包括口服、滴眼、直腸、透黏膜、局部或腸道給藥。非腸道給藥，包括肌肉內、皮下、髓內注射，以及鞘內、直接心室內、靜脈內、腹膜內、鼻內或眼內注射。
或，可局部使用此化合物，而不是採用系統方式，例如，通過直接給水腫部位注射此化合物，該注射常常採用貯庫或緩釋製劑的形式。
此外，可以在靶向藥物轉運系統中使用此藥物，例如，在用內皮細胞特異性抗體包被的質脂體中。組合物/製劑本發明的藥物組合物可以以已知的方式製備，例如，通過常規混合、溶解、制粒、製糖衣丸、磨細、乳化、包囊、包載或凍幹方法。
因此，本發明使用的藥物組合物可以已常規方式配製，使用一種或多種生理可接受的包括賦形劑和輔劑的載體，它們有利於將活性化合物加工為可藥用的製劑。適宜的製劑依賴於所選擇的給藥途徑。
對於注射，本發明的試劑可以在水溶液中配製，優選生理相容的緩衝劑，如Hanks溶液、Ringer氏溶液或生理鹽水緩衝劑。對於透黏膜給藥，在該製劑中使用適於所透過屏障的滲透劑。這樣的滲透劑一般是本領域已知的。
對於口服給藥，該化合物可以容易地通過將活性化合物與本領域已知的藥用載體混合進行配製。這些載體能使本發明的組合物配製為片劑、丸劑、糖衣丸、膠囊、溶液劑、凝膠、糖漿、漿液、混懸劑等，以使接受治療的患者口服攝入。口服用藥物製劑可以按照如下方法製備將活性化合物與固體賦形劑混合，任選地研磨所得混合物，如果需要則加入適宜的輔劑，之後加工顆粒的混合物，以獲得片劑或糖衣丸核芯。具體地講，適宜的賦形劑為填充劑如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇；纖維素製劑如玉米澱粉、小麥澱粉、稻米澱粉、馬鈴薯澱粉、明膠、黃芪膠、甲基纖維素、羥丙甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要，可以加入崩解劑，如交聯聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂、藻酸或其鹽如藻酸鈉。
對糖衣丸核芯進行適當包衣。為此，可以使用濃的糖溶液，瓊脂可以任選地含有阿拉伯膠、滑石、聚乙烯吡咯烷酮、卡波姆膠、聚乙二醇和/或二氧化鈦、漆溶液以及適宜的有機溶劑或溶劑混合物。可以向片劑或糖衣丸包衣中加入染料或色素以識別或區別活性化合物劑量的不同聯合形式。
可以口服使用的藥物製劑包括明膠製成的推入配合膠囊，以及明膠和增塑劑如甘油和山梨醇製成的軟的密封膠囊。推入配合膠囊可以含有活性組分，其與填充劑如乳糖、粘合劑如澱粉和/或潤滑劑如滑石或硬脂酸鎂以及任選地存在的穩定劑混合。在軟膠囊中，活性化合物可以溶解於或懸浮於適當的液體如脂肪油、液體石蠟或液體聚乙二醇中。此外，可以加入穩定劑。口服給藥的所有製劑的劑量應適於此給藥方式。
對於頰部給藥，組合物可以是以常規方式配製的片劑或錠劑形式。
對於吸入給藥，用於本發明的化合物已從加壓包裝或噴霧器中提供的噴霧形式方便地給藥，其中使用適宜的拋射劑，例如，二氯二氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它適宜的氣體。在加壓氣霧劑中，劑量單位可以通過提供轉運計量量的閥來確定。例如，用於吸入器或吹入器的膠囊和藥筒可以配製為含有該化合物和適宜的粉末基質如乳糖或澱粉的粉末混合物的形式。
可以配製這些化合物以通過注射進行非腸道給藥，例如，快速濃注或連續輸液。注射劑可以以單位劑型的形式存在，例如，在安瓿或多劑量容器中，其中加入了防腐劑。這些組合物可以採用，例如，在含油或含水載體的混懸劑、溶液劑或乳液的形式，並可以含有配製試劑如助懸劑、穩定劑和/或分散劑。
非腸道給藥的藥物組合物包括水溶形式的活性化合物的水溶液。此外，活性化合物的混懸劑可以製備為適當的含油注射混懸劑。適宜的親脂溶劑或載體包括脂肪油如芝麻油，或者合成的脂肪酸酯，如油酸乙酯或甘油三酯，或者質脂體。含水注射混懸劑可以含有增加該混懸劑粘度的物質，如羧甲基纖維素鈉、山梨醇或右旋糖酐。該混懸劑可以任選地含有適宜的穩定劑或增加這些化合物溶解度的試劑，以製備高濃度的溶液。
或者，活性組分可以是在使用前，用適宜載體，例如，滅菌無熱原的水重新配製的粉末形式。
這些化合物還可以配製為直腸用組合物，如栓劑或保留灌腸劑，例如，其中含有常規栓劑基質如可可脂或其它甘油酯。
除上述製劑外，這些化合物還可以配製為貯庫製劑。此類長效製劑可以通過埋入法給藥(例如，透皮或肌內埋入，或通過肌內注射)。因此，例如，這些化合物可以與適宜的聚合物或疏水性物質(例如，在可接受的油中的乳液)或離子交換樹脂一起配製，或將其製成溶解度小的衍生物，例如，溶解度小的鹽。
用於疏水性的本發明化合物的藥物載體的實例是助溶劑系統，包括苄醇、非極性表面活性劑、與水混溶的有機聚合物以及水相。該助溶劑系統可以是VPD助溶劑系統。VPD是3％w/v苄醇、8％w/v的非極性表面活性劑吐溫80和65％w/v聚乙二醇300的溶液，在純乙醇中達到規定的體積。該VPD助溶劑系統(VPD5W)由在5％葡萄糖水溶液中進行1∶1稀釋的VPD組成。此助溶劑系統很好地溶解疏水性化合物，而其本身在系統給藥時只產生很低的毒性。當然，在不破壞其溶解性和毒性的前提下，助溶劑系統的比例可以作很大變化。此外，助溶劑組分的特性可以變化例如，可以使用其它低毒非極性表面活性劑代替吐溫80；聚乙二醇的餾份大小可以變化；可以用其它生物相容性聚合物如聚乙烯吡咯烷酮代替聚乙二醇；且其它糖或多糖可以代替葡萄糖。
或者，可以使用疏水性藥物化合物的其它轉運系統。質脂體和乳液是疏水性藥物的轉運載體的熟知實例。雖然通常要付出較大毒性的代價，但是也可以使用某些有機溶劑如二甲基亞碸。此外，這些化合物可以用緩釋系統轉運，例如含治療劑的固體疏水性聚合物的半滲透性基質。多種緩釋物質已得以確認，且它們是本領域技術人員熟知的。根據其化學性質，緩釋膠囊可以在幾周至100天以上釋放這些化合物。根據治療劑的化學性質和生物穩定性，可以使用蛋白穩定化的其它策略。
這些藥物組合物還可以含有固體或凝膠相載體或賦形劑。此類載體或賦形劑的實例包括但不限於碳酸鈣、磷酸鈣、多種糖、澱粉、纖維素衍生物、明膠和聚合物如聚乙二醇。
本發明的很多化合物可以以與藥學相容性相反離子形成的鹽的形式提供。藥學相容性鹽可以與很多酸形成，包括但不限於氫氯酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、蘋果酸、琥珀酸等。鹽在水或其它質子溶劑中比相應的游離鹼形式更易溶解。有效劑量適用於本發明的藥物組合物包括含有達到預定目的有效量的活性組分的組合物。更具體地講，治療有效量指有效防止接受治療對象的現存症狀的發展或減輕該症狀的量。有效量的確定在本領域技術人員的能力範圍內。
對於用於本發明方法中的任何化合物，可以先由細胞試驗評估此治療有效量。例如，可以在細胞或動物模型中使用某劑量以達到包括在細胞試驗中測定的IC50(即對指定的蛋白激酶活性達到半數最大抑制的被測化合物濃度)的循環濃度範圍。在一些情況下，適於在3至5％血清白蛋白的存在下測定IC50，這是由於這樣的檢測接近血漿蛋白對此化合物的結合作用。如此獲得的信息可以用來更準確地確定在人體內的有用的劑量。進一步講，首選的系統給藥的本發明的化合物，以在血漿中可以安全達到的濃度，有效地抑制完整細胞中的蛋白激酶信號。
治療有效量指減輕患者症狀的化合物的量。這些化合物的毒性和療效可以提供標準藥學方法在細胞培養物或試驗動物中測定，例如，測定最大耐受劑量(MTD)和ED50(產生50％最大反應的有效量)。毒性和療效之間的劑量比是治療指數，且可以可以以MTD和ED50之比表示。優選表現出高治療指數的化合物。由這些細胞培養試驗和動物研究中獲得的數據可以用於形成用於人的劑量範圍。這些化合物的劑量優選在包括ED50的循環濃度又幾乎沒有或沒有毒性的範圍內。根據所用劑型和所用給藥途徑，此劑量可以在此範圍內變化。確切的製劑、給藥途徑和劑量可以由具體醫生基於患者的情況作出選擇(見，例如，Fingl等，1975，「治療藥學基礎(The Pharmacological Basis ofTherapeutics)」，第一章，第1頁)。在危象的治療中，可能需要達到MTD的緊急快速濃注或輸液以獲得快速反應。
可以具體調整給藥劑量和間隔以提供足以為此激酶調節作用的活性組分的血漿濃度，即最低有效濃度(MEC)。MEC應隨各化合物有所變化，但是可以由體外數據估計；例如，用本文中描述的試驗檢測的達到對蛋白激酶50-90％抑制所需要的濃度。獲得MEC所需要的劑量應根據個體的特性和給藥的途徑變化。但是，可以用HPLC檢測或生物檢測來測定血漿濃度。
也可以用MEC值確定給藥間隔。化合物應使用的給藥方案中，應為維持此時的血漿水平高於MEC 10-90％，優選30-90％並首選50-90％，直到症狀獲得了所要求程度的減輕。在局部給藥或選擇性吸收的情況中，藥物的有效局部濃度可能與血漿濃度不相關。
當然，組合物的給藥量應依賴於接受治療的對象、對象的體重、疾病的嚴重性、給藥方式和主治醫的診斷。包裝如果需要，這些組合物可以存在於包裝或分配器中，其中可以裝有含有活性組分的一個或多個單位劑型。例如，此包裝可以包括金屬或塑料箔片，如凸泡包裝。此包裝或分配器可以附加給藥的說明。含有在相容藥用載體中配製的本發明化合物的組合物，也可以製備並置於適當的容器，並標示治療的適應徵。
在一些製劑中，以非常小的顆粒形式使用本發明的化合物可能是有利的，例如，該顆粒可以用流能磨獲得。
通過下面的描述舉例說明本發明化合物在製備藥物組合物中的用途。在本說明書中，術語「活性化合物」指本發明的任何化合物，但是特別是指作為上述實施例之一的終產物的化合物。a)膠囊在膠囊的製備中，可以將10重量份的活性化合物和240重量份的乳糖去凝聚化並混合。將此混合物填充入硬明膠膠囊中，每個膠囊含有單位劑量或部分單位劑量的活性化合物。b)片劑可以由下列組分製備片劑。
重量份活性化合物10乳糖 190玉米澱粉 22聚乙烯吡咯烷酮10硬脂酸鎂 3可以將活性化合物、乳糖和一些澱粉去凝聚化、混合併將所得混合物用聚乙烯吡咯烷酮的乙醇溶液制粒。乾燥的顆粒可以與硬脂酸鎂和其餘的澱粉混合。然後在製片機中壓縮此混合物以獲得片劑，每片含有單位劑量或部分單位劑量的活性化合物。c)腸溶包衣片劑可以通過上述(b)描述的方法製備片劑。這些片劑可以按照常規方式用20％鄰苯二甲酸乙酸纖維素和3％鄰苯二甲酸二乙酯在乙醇∶二氯甲烷(1∶1)中的溶液進行腸溶包衣。d)栓劑在栓劑的製備中，100重量份的活性化合物可以摻混在1300重量份的甘油三酯栓劑基質中，並將此混合物製成栓劑，每個栓劑含有治療有效量的活性組分。
在本發明的組合物中，如果需要，這些活性化合物可以與其它相容的藥學活性組分結合。例如，本發明的化合物可以與一種或多種其它藥物試劑聯合使用，這些其它的藥物能抑制或防止VEGF或血管生成素產生、減弱對VEGF或血管生成素的細胞內反應、阻斷細胞內信號傳導，抑制血管滲透性過高、降低炎症，或者抑制或防止水腫形成或新血管形成。本發明的化合物可以在其它藥劑給藥前、後或同時給藥，其中任何一種給藥方式都是適當的。其它藥劑包括但不限於抗水腫甾類、NSAIDS、ras抑制劑、抗TNF劑、抗-IL-1劑、抗組胺藥、PAF拮抗劑、COX-1抑制劑、COX-2抑制劑、NO合酶抑制劑、Akt/PTB抑制劑、IGF-1R抑制劑、PKC抑制劑和PI3激酶抑制劑。本發明的化合物和其它藥劑的作用或者是加和的或者是協同的。因此，抑制血管生成、血管滲透性過高和/或抑制水腫形成的物質的此聯合給藥，與其中任何一種物質單獨給藥相比，能更大地減輕過度增殖性疾病、血管生成、血管滲透性過高或水腫的有害作用。在惡性疾病的治療中，可先進行與抗增殖或細胞毒化療或放療的聯合治療。
本發明還包括式I化合物作為藥物的用途。
本發明的另一方面，提供了式I化合物或其鹽在製備治療哺乳動物特別是人的血管滲透性過高、血管生成依賴性疾病、增殖性疾病和/或免疫系統紊亂的藥物方面的用途。
本發明還提供了治療血管滲透性過高、不適當的新血管生成、增殖性疾病和/或免疫系統紊亂的方法，該方法包括給需要的哺乳動物特別是人使用治療有效量的式I化合物。
在抑制這些蛋白激酶方面化合物的體外效果，可以通過詳述如下的方法測定。
化合物的效力可以通過比較被測化合物和對照組抑制外源性底物(如合成肽)磷酸化的量來測定(Z.Songyang等，Nature.373536-539)。用杆狀病毒系統產生KDR酪氨酸激酶通過PCR用從HUVEC細胞中分離的cDNA生成人KDR細胞內功能域(aa789-1354)的編碼序列。將聚-His6序列引入此蛋白的N末端。將此片斷克隆到轉染載體pVL1393的Xbal和Not1位點。用BaculoGold轉染試劑(PharMingen)通過共轉染產生重組杆狀病毒(BV)。通過Western分析將重組BV進行噬斑純化和檢驗。為了產生蛋白，SF-9細胞以2×106/ml生長於SF-900-II培養基中，並以0.5噬斑形成單位每細胞(MOI)感染。感染後在第48小時收集細胞。KDR的純化通過向得自1L細胞培養物的細胞顆粒中加入50ml的TritonX-100裂解緩衝液(20mM Tris，pH8.0，137mM NaCl，10％甘油，1％Triton X-100，1mM PMSF，10μg/ml抑蛋白酶肽，1μg/ml亮抑蛋白酶肽)將表達了(His)6KDR(aa 789-1354)的SF-9細胞裂解。在4℃，在Sorval SS-34轉子中以19000rpm將此裂解物離心30分鐘。將此細胞裂解物加到5ml NiCl2螯合瓊脂糖凝膠柱上，用50mM HEPES，pH7.5，0.3 M NaCl進行平衡。用含0.25M咪唑的相同緩衝液洗脫KDR。用SDS-PAGE和檢測激酶活性的ELISA試驗(如下)分析柱餾份。純化的KDR交換到25mM HEPES，pH7.5，25mM NaCl，5 mM DTT緩衝液中，並在-80℃下保存。人Tie-2激酶的產生和純化通過PCR用從人胎盤模板中分離的cDNA生成人Tie-2細胞內功能域(aa 775-1124)的編碼序列。將聚-His 6序列引入此蛋白的N末端並將此構成物克隆到轉染載體pVL1939的Xba1和Not1位點。用BaculoGold轉染試劑(PharMingen)通過共轉染產生重組杆狀病毒(BV)。通過Western分析將重組BV進行噬斑純化和檢驗。為了產生蛋白，SF-9細胞以2×106/ml生長於SF-900-II培養基中，並以0.5的MOI感染。用於篩選的His標記的激酶類似於KDR所述進行純化。人Flt-1酪氨酸激酶的產生和純化用杆狀病毒表達載體pVL1393(Phar Mingen，Los Angeles，CA)。將編碼聚-His6的核苷酸序列的5′端置於編碼人Flt-1的整個細胞內激酶功能域(胺基酸786-1338)的核苷酸區域。編碼此激酶功能域的核苷酸序列通過PCR用分離自HUVEC細胞的cDNA文庫產生。此組氨酸殘基使蛋白的親和純化成為可行，如類似用於KDR和ZAP70的方式。以0.5的多重性感染SF-9昆蟲細胞，並在感染後48小時收集。EGFR酪氨酸激酶來源EGFR購自Sigma(Cat # E-3641；500單位/50μl)，而EGF配體得自Oncogene Research Products/Calbiochem(Cat # PF011-100)。ZAP70的表達用杆狀病毒表達載體pVL1393(Phar Mingen，Los Angeles，CA)。將編碼胺基酸M(H)6 LVPR9S的核苷酸序列的5′端置於編碼ZAP70整體(胺基酸786-1338)的區域。編碼ZAP70編碼區域的核苷酸序列通過PCR用分離自Jurkat無限增殖化T細胞的cDNA文庫產生。此組氨酸殘基使蛋白的親和純化成為可行(參見紅外)。此LVPR9S橋構成了通過凝血酶進行蛋白水解的識別序列，能從該酶中除去親和端。以0.5的感染多重性感染SF-9昆蟲細胞，並在感染後48小時收集。ZAP70的提取和純化將SE-9細胞在20 mM Tris，pH 8.0，137 mM NaCl，10％甘油，1％ Triton X-100，1 mM PMSF，1μg/ml亮抑蛋白酶肽，10μg/ml抑蛋白酶肽和1mM原釩酸鈉組成的緩衝液中裂解。將可溶性裂解物加到螯合瓊脂糖凝膠HiTrap柱(Pharmacia)上，該柱在50 mM HEPES，pH7.5，0.3 M NaCl中平衡。用250mM咪唑洗脫融合蛋白。將該酶保存在含50 mM HEPES，pH 7.5，50mM NaCl和5 mM DTT的緩衝液中。蛋白激酶來源Lck、Fyn、Src、Blk、Csk和Lyn，及其截短形式可以商購(例如，購自Upstate Biotechnology Inc.(Saranac Lake，N.Y)和SantaCruz Biotechnology Inc.(Santa Cruz，Ca.))或由已知的天然或重組原料用常規方法純化。PTKs的酶聯免疫吸附測定(ELISA)酶聯免疫吸附測定(ELISA)用於發現和檢測酪氨酸激酶活性的存在。ELISA按照已知方案進行，這些方案描述於，例如，Voller等，1980，「酶聯免疫吸附測定」，Manual of Clinical Immunology，第2版，Rose和Friedman編，pp 359-371 Am.Soc.of Microbiology，Washington，D.C。
所公開的方案適於檢測特異性的PTK活性。例如，進行ELISA試驗的優選方案如下。用這些方案來檢測化合物對PTK類其它成員以及非受體酪氨酸激酶的活性，是本領域技術人員力所能及的。為了測定抑制劑選擇性，在此檢測中使用通用的PTK底物(例如，聚(Glu4Tyr)的無規共聚物，20,000-50,000MW)，以約兩倍於外觀Km的濃度與其一起使用ATP(一般5μM)。
下面的方法用來檢測本發明化合物對KDR、Flt-1、Flt-4/VEGFR-3、Tie-1、Tie-2、EGFR、FGFR、PDGFR、IGF-1-R、c-Met、Lck、Blk、Csk、Src、Lyn、Fyn和ZAP70酪氨酸激酶活性的抑制作用緩衝液和溶液PGT聚(Glu，Tyr)4∶1將粉末保存在-20℃。在磷酸鹽緩衝的鹽水(PBS)中溶解粉末，形成50mg/ml的溶液。在-20℃下保存多個1ml等份。當制板時，在GibcoPBS中稀釋至250μg/ml。
反應緩衝液100mM Hepes，20mM MgCl2，4mM MnCl2，5mM DTT，0.02％ BSA，200μM NaVO4，pH 7.10。
ATP在-20℃下的保存等份。在水中稀釋至20μM。
洗滌緩衝液含0.1％Tween 20的PBS。
抗體稀釋緩衝液在PBS中的0.1％牛血清白蛋白(BSA)。
TMB底物臨用前混合的TMB底物和過氧化物溶液9∶1或使用Neogen的K-藍底物。
終止溶液1M磷酸。方法1.制板在PBS中將PGT貯存液(50mg/ml，冷凍)稀釋至250μg/ml。在Corning改良平底高親和性ELISA培養板(Corning # 25805-96)的每個孔中加入125μl。向空白孔中加入125μl PBS。用密封帶覆蓋並在37℃下孵育過夜。用250μl洗滌緩衝液洗滌1次，並在37℃乾燥恆溫箱中乾燥約2小時。在4℃下在密封袋中保存包被板直到使用。
2.酪氨酸激酶反應—以4倍的濃度在20％DMSO水溶液中製備抑制劑溶液。
—製備反應緩衝液。
—製備酶溶液，以便所需的單位是50μl，例如，在這些反應中每孔50ng總量的KDR的濃度為1ng/μl。保存在冰上。
—由100mM貯存液在水中製備4份20μM的ATP溶液。保存在冰上。
—每孔加入50μl的酶溶液(一般5-50ng酶/孔，視該激酶的具體活性而定)。
—加入25μl的4×抑制劑。
—加入25μl的4×ATP，以進行抑制劑檢測。
—室溫下孵育10分鐘。
—通過每孔加入50μl 0.05N HCl停止反應。
—洗板。
**反應的最終濃度5μM ATP，5％DMSO。
3.抗體結合—通過2步稀釋法(100×，然後200×)，在含0.1％ BSA的PBS中將1mg/ml等份的PY20-HRP(Pierce)抗體(一種磷酸酪氨酸抗體)稀釋至50ng/ml。
—每孔加入100μl Ab。室溫下孵育1小時。在4℃下孵育1小時。
—洗滌4×培養板。
4.呈色反應—製備TMB底物並每孔加入100μl。
—在650nm監控OD值直到達到0.6。
—用1M磷酸停止反應。在培養板讀數器上搖動。
—在450nm立即讀取OD值。
最佳的孵育時間和酶反應條件隨酶製劑有輕微的變化，並對每批通過經驗確定。對於Lck，所用反應緩衝液為100 mM MOPSO，pH 6.5，4 mM MnCl2，20mM MgCl2，5 mM DTT，0.2％ BSA，200mM NaVO4，檢測條件類似。
式I的化合物在治療涉及包括本文中沒有提及的已確定的蛋白酪氨酸激酶和式I化合物能抑制的尚未確定的蛋白酪氨酸激酶的疾病中具有治療用途。本文中所列舉的所有化合物在濃度等於或低於50μM時顯著地抑制FGFR、PDGFR、KDR、Tie-2、Lck、Fyn、Blk、Lyn或Src。本發明的一些化合物在濃度等於或低於50μM時還顯著抑制其它酪氨酸或絲氨酸/蘇氨酸激酶如cdc2(cdk1)。Cdc2來源人重組酶和檢測緩衝液可以商購(New England Biolabs，Beverly，MA.USA)或由已知的天然或重組原料用常規方法純化。Cdc2檢測用所購買試劑提供的方法，只稍加修改。簡言之，該反應在如下組成的緩衝液中進行50mM Tris pH7.5，100mM NaCl，1mM EGTA，2mM DTT，0.01％ Brij，5％ DMSO和10mM MgCl2(商購緩衝液)，其中添加了新鮮的最終濃度為300μM ATP(31μCi/ml)和30μg/ml IIIss型組織蛋白。含酶單位的80μl反應體積在25℃下在存在或不存在抑制劑的條件下反應20分鐘。通過加入120μL的10％乙酸停止此反應。通過點混合物在磷酸纖維素紙上，接著用75mM磷酸洗滌5分鐘，洗滌3次，將此底物與未標記的物質分離。在液體閃爍體的存在下用倍他計數器檢測計數。本發明一些化合物在濃度低於50μM時顯著抑制cdc2。PKC激酶來源PKC的催化亞單位可以商購(Calbiochem)。PKC激酶檢測按照以下公開的方法進行A放射性激酶檢測(Yasuda，I.，Kirshimoto，A.，Tanaka，S.，Tominaga，M.，Sakurai，A.，Nishizuka，Y.，Biochemical and Biophysical ResearchCommunication 3166，1220-1227(1990))。簡言之，所有的反應在組成如下的激酶緩衝劑中進行50mM Tris-HCl pH7.5，10mM MgCl2，2mM DTT，1mM EGTA，100μM ATP，8μM肽，5％ DMSO和33P ATP(8Ci/mM)。在該反應容器中混合化合物和酶，通過加入ATP和底物混合物引發此反應。加入10μL停止緩衝液(5 mM ATP在75mM磷酸中)停止該反應後，將部分混合物點在磷酸纖維素濾紙上。在室溫下以75mM磷酸將所點樣品洗滌3次，每次5至15分鐘。通過液體閃爍計數測量放射標記物的摻入。Erk2酶來源重組鼠酶和檢測緩衝液可以商購(New England Biolabs，BeverlyMA.USA)或由已知天然或重組原料用常規方法純化。Erk2酶檢測簡言之，該反應在組成如下的緩衝液中在供應商推薦的條件下進行50mM Tris pH7.5，1mM EGTA，2mM DTT，0.01％ Brij，5％ DMSO和10mM MgCl2(商購緩衝液)，其中添加了新鮮的100μM ATP(31μCi/ml)和30μM髓鞘鹼性蛋白。反應體積和檢測摻入放射活性的方法如PKC檢測所述(參見上文)。T細胞活化的體外模型一旦促細胞分裂劑或抗原活化時，誘發T細胞分泌IL-2，一種支持其隨後增殖期的生長因子。因此，可以檢測初級T細胞或適當的T細胞系中IL-2的產生或其中的細胞增殖，作為T細胞活化的替代指標。這兩種檢測方法在文獻中進行了充分的描述，其參數得到適當記載(見Current Protocols in immunology，Vol 2，7.10.1-7.11.2)。
簡言之，通過與同種異體的刺激細胞共同培養可以激活T細胞，此方法稱為單向混合淋巴細胞反應。按照製造商的說明通過Ficoll-Hypaque梯度(Pharmacia)純化反應和刺激外周血單核細胞。通過用絲裂黴素C(Sigma)或γ輻射處理來通過抑制有絲分裂來滅活刺激子細胞。反應和刺激細胞以2∶1的比例在被測化合物存在或不存在下共同培養。一般105的反應細胞與5×104刺激細胞混合併置於(200μl體積)U型底微量滴定板(Costar Scientific)中。將這些細胞在RPMI1640中培養，其中添加了熱滅活的胎牛血清(Hyclone Laboratories)或得自男性供者的人混合AB血清，5×10-5M 2-巰基乙醇和0.5％DMSO，在收集細胞前一天(一般是第3天)將此培養物用0.5μCi的3H胸苷(Amersham)調製。收集培養物(Betaplate harvester，Wallac)並通過液體閃爍技術(Betaplate，Wallac)評價同位素的吸收。
通過檢測IL-2的產生，可以用相同的培養系統評價T細胞活化。培養開始後18至24小時，移出上清液並按照製造商的說明通過ELISA(R和D系統)檢測IL-2濃度。T細胞活化的體內模型化合物的體內效果可以在已知直接檢測T細胞活化的或其中已證明T細胞是效應物的動物模型中檢測。在體內，通過帶有單克隆抗-CD3抗體(Ab)的T細胞受體的固定部分的連接，可以激活T細胞。在此模型中，在放血前2小時，給BALB/c小鼠腹膜內注射10μg的抗-CD3Ab。在抗-CD3 Ab使用前，用單劑量的化合物預處理接受被測藥物的動物。通過ELISA檢測T細胞活化的指示劑原炎性細胞因子幹擾素-γ(NFN-γ)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)。使用類似的模型用特異性抗原如匙孔嘁血藍蛋白(K1H)體內引發T細胞，接著用相同的抗原二次刺激引流出的淋巴節細胞。如上所述，用對細胞因子產生的檢測評價培養細胞的活化狀態。簡言之，用在完全福氏佐劑(CFA)中乳化的100μg KLH在第0天皮下免疫C57BL/6小鼠。在免疫前1天用此化合物預處理動物，並在免疫後第1、2、3天用此化合物處理動物。在第4天收集引流出的淋巴節，並在組織培養基(添加了熱滅活的胎牛血清(HycloneLaboratories)、5×10-5M 2-巰基乙醇和0.5％ DMSO的RPMI 1640)中以6×106個細胞每毫升將其中的細胞培養24和48小時。然後，用ELISA評價培養物上清液的自分泌T細胞生長因子白細胞介素-2(IL-2)和/或IFN-γ水平。
重要的化合物也可在人疾病的動物模型中進行檢測。這些通過實驗性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)和膠原引起的關節炎(CIA)例證。在大鼠和小鼠中已描述了模擬人多發性硬化多個方面的EAE模型(綜述見FASEB J. 52560-2566，1991；鼠模型Lab.Invest.4(3)278，1981；齧齒動物模型J.Immuno l146(4)1163-8，1991)。簡言之，用髓鞘鹼性蛋白(MBP)或其神經原性肽衍生物和CFA免疫小鼠或大鼠。加入細菌毒素如百日咳桿菌抗原引起急性疾病。從MBP/肽免疫的動物中過繼轉移T細胞來誘發復發的/恢復原狀的疾病。
通過用II型膠原免疫可以在DBA/1小鼠中誘發CIA(J.Immunol142(7)2237-2243)。早在抗原刺激後10天小鼠就對產生關節炎徵兆，且在免疫後長達90天內可以進行評分。在EAF和CIA模型中，化合物可以預防性給藥或者疾病開始時給藥。有效的藥物應降低嚴重性和/或發病率。
抑制一種或多種血管生成受體PTK和/或參與介導炎性反應的蛋白激酶如lck的本發明的某些化合物，可以降低這些模型中關節炎的嚴重性和發病率。
在小鼠同種異體移植模型中也可檢測化合物，或者是皮膚(在Ann.Rev.Immunol.，10333-58，1992；Transplantation57(12)1701-1706，1994中綜述)或是心臟(Am.J.Anat.113273，1963)。簡言之，完整厚度的皮膚移植物由C57BL/6小鼠移植給BALB/c小鼠。在第6天開始每天檢查移植物以尋找排斥反應的證據。在小鼠新生心臟移植模型中，新生心臟由C57BL/6小鼠異位移植到成年CBA/J小鼠的耳廓。移植後心臟開始跳動4至7天，用解剖顯微鏡觀察跳動的停止以目測評價排斥反應。細胞受體PTK檢測下列細胞檢測用來測定本發明不同化合物對KDR/VEGFR2的活性和作用水平。按照與其它酪氨酸激酶的相同路線，用本領域熟知的技術可以設計使用特異性配體刺激的類似的受體PTK檢測。
在人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)中VEGF誘導的KDR磷酸化作用以Western印跡法檢測1.由Clonetics(San Diego，CA)購買HUVEC細胞(來自聯營供者)，並按照製造商的說明培養。只有前面幾代(3-8)用於此檢測。在100mm培養皿中培養細胞(組織培養用Falcon；Becton Dickinson；Plymouth，England)，使用完全EBM培養基(Clonetics)。
2.為了評價化合物的抑制活性，將細胞胰蛋白酶化並以0.5-1.0×105個細胞/孔接種6孔簇合培養板(Costar；Cambridge，MA)的每個孔中。
3.接種3-4天後，培養板90-100％融合。從所有孔中除去培養基，用5-10ml的PBS清洗細胞，並用不含補充成分(即沒有血清)的5ml的EBM鹼性培養基培養18-24小時。
4.將在1ml的EBM培養基中系列稀釋的抑制劑加入到(25μM，5μM或1μM最終濃度)細胞中，並在37℃下孵育1小時。然後向所有孔中加入存在於2ml的EBM培養基中的人重組VEGF165(R D Systems)，最終濃度為50ng/ml，並在37℃下孵育10分鐘。用未處理的或只用VEGF處理的對照細胞評價背景磷酸化作用和由VEGF誘發的磷酸化作用。
再用含1mM原釩酸鈉(Sigma)的5-10ml冷PBS清洗所有細胞，並在200μl的RIPA緩衝液(50mM Tris-Cl)pH7，150mM NaCl，1％NP-40，0.25％脫氧膽酸鈉，1mM EDTA)裂解並擊打細胞，該緩衝液中含有蛋白酶抑制劑(PMSF 1mM，抑蛋白酶肽1μg/ml，胃蛋白酶抑制劑1μg/ml，亮抑蛋白酶肽1μg/ml，釩酸鈉1mM，氟化鈉1mM)和1μg/ml的脫氧核糖核酸酶(所有化學品得自Sigma Chemical Company，St Louis，MO)。將此裂解物以14000rpm離心30分鐘以除去核。
然後，通過加入冷(-20℃)乙醇(2倍體積)，最少放置1小時，或最多放置過夜，沉澱等量的蛋白。在含5％巰基乙醇(BioRad；Hercules，CA)的Laemli樣品緩衝液中重新構建顆粒並煮沸5分鐘。通過聚丙烯醯胺凝膠電泳(6％，1.5mm Novex，San Deigo，CA)解離蛋白質，並用Novex系統轉移到硝酸纖維素膜上。用牛血清白蛋白(3％)阻斷後，用抗-KDR多克隆抗體(C20，Santa Cruz Biotechnology；Santa Cruz，CA)或用抗磷酸酪氨酸單克隆抗體(4G10，Upstate Biotechnology，Lake Placid，NY)在4℃下過夜探測這些蛋白質。洗滌並用綿羊抗兔或綿羊抗小鼠IgG的HRP-軛合F(ab)2孵育1小時後，用發射化學發光(ECL)系統(Amersham Life Sciences，Arlington Height，IL)可以看到譜帶。在濃度低於50μM時，本發明的某些實施例顯著抑制細胞VRGF誘導的KDR酪氨酸激酶磷酸化作用。體內子宮水腫模型此試驗檢測化合物抑制小鼠子宮重量快速增加的能力，此現象發生在雌激素刺激後的頭若干小時內。已知此子宮重量增加的早期發作是由於子宮脈管系統滲透性增加引起的水腫導致的。Cullinan-Bove和Koss(Endocrinology(1993)，133829-837)證明了雌激素刺激的子宮水腫與該子宮中VEGF mRNA表達增加之間的緊密的暫時聯繫。這些結果已通過使用VEGF的中和性單克隆抗體得到了證實，此抗體顯著降低了雌激素刺激後子宮重量的急性增加(WO 97/42187)。因此，此系統可以作為體內抑制VEGF信號和相關滲透性過高和水腫的模型。
材料所有激素以凍乾粉末的形式購自Sigma(St.Louis，MO)或Cal Biochem(La Jolla，CA)，並按照供應商的指示製備。
載體組分(DMSO，Cremaphor EL)購自Sigma(St.Louis，MO)。
小鼠(Balb/c，8-12周齡)購自Taconic(Germantown，NY)，並按照動物保護和使用委員會準則飼養在無熱原動物房中。方法第1天給Balb/c小鼠腹膜內(i.p.)注射12.5單位的妊娠母驢的血清促性腺素(PMSG)。
第3天小鼠i.p.接受15單位的人絨毛膜促性腺素(hCG)。
第4天將小鼠隨機分組，每組5-10隻。根據溶解度和載體，以1-100mg/kg的劑量，通過i.p.、i.v.或p.o.途徑使用被測化合物。載體對照組只接受載體，並保留兩組不進行處理。
30分鐘後，試驗組、載體組和一個未處理組接受腹膜內注射的17-雌二醇(500g/kg)。2-3小時後，通過吸入二氧化碳處死動物。剪開中線後，分離出各個子宮，並通過恰在子宮頸下和在子宮和輸卵管的接合處切割摘除。在稱重(溼重)前小心地除去脂肪和結締組織，避免破壞子宮的完整性。將子宮置於在兩頁過濾紙之間壓出流體以吸乾此子宮，用裝有水的1升玻璃瓶盛接。吸乾後稱重子宮(吸乾後重量)。將溼重和吸乾後重量的差作為子宮流體的含量。將治療組的平均流體含量和未治療或載體處理組的作比較。通過t檢驗確定顯著性。用未刺激對照組監控雌二醇反應。
結果表明當通過多種途徑進行系統給藥時本發明的某些化合物抑制水腫的形成。
抑制血管生成受體酪氨酸激酶的本發明的某些化合物，對新血管生成的Matrigel移植模型也能顯示出活性。Matrigel新血管生成模型包括在皮下移植的細胞外基質的清晰大理石花紋內新血管的形成，其是由生成腫瘤細胞的原血管生成因子的存在下引起的(例如，見Passaniti，A.，等，Lab.Investig.(1992)，67(4)，519528；Anat.Rec.(1997)，249(1)，63-73；Int.J.Cancer(1995)，63(5)，694-701；Vasc.Biol.(1995)，15(11)，1857-6)。此模型優選進行3-4天，終點包括從未用抑制劑治療動物中排除移植物對對照組後新血管生成的肉眼目視/圖象評分、顯微鏡下微血管密度檢測和血紅蛋白定量測定(Drabkin方法)。或者該模型使用bFGF或HGF作為刺激物。
抑制一種或多種致癌的、原致癌的或增殖依賴性或者血管生成受體PTK的蛋白激酶的本發明的某些化合物，也抑制初生鼠、大鼠或人異種移植腫瘤在小鼠中的生長，或者抑制鼠模型中的腫瘤轉移。實施例實施例11-(1-苄基-4-哌啶基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物1)3-溴-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-醇(中間體A)將1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-醇(10g，73.5mmol)懸浮於700ml水中。加入溴(10ml，194mmol)並將所得反應混合物加熱至91℃，保持過夜。在冰水上冷卻後，過濾收集固體得到1.508 g的3-溴-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-醇，為淡黃色固體。1H NMR(DMSO)8.06(s 1H)，12.25(bs，1H)，14.06(bs，1H)。
3-溴-4-氯-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(中間體B)將3-溴-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-醇(中間體A)(15.08g，70.5mmol)懸浮於189ml的磷醯氯中。加入二乙胺(19ml，119.4mmol)並將所得反應混合物加熱至106℃，保持2小時。冷卻至室溫後，除去溶劑並將所得琥珀色漿倒入到300ml冰水中。20分鐘後，用乙醚(500ml×4)萃取水層。將合併的有機層洗滌，乾燥並蒸發得到6.87g的3-溴-4-氯-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶，為淡黃色固體。1H NMR(DMSO)8.857(s 1H)，14.84(bs，1H)；LC/MS(MH+＝233)。
1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-4-氯-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(中間體C)將3-溴-4-氯-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(中間體B)(5.0g，21.42mmol)、1-苄基-4-哌啶醇(8.2g，42.83mmol)和三苯基膦(11.23g，42.83mmol)懸浮於250ml四氫呋喃中。該反應混合物在冰水浴中冷卻並滴加偶氮二甲酸二乙酯(6.8ml，42.83mmol)。10分鐘後，該反應混合物升溫至室溫。攪拌2小時後，除去溶劑並將此殘餘物在乙酸乙酯中回收。將有機層洗滌、乾燥並蒸發。粗品通過Biotage快速柱，用二氯甲烷/乙酸乙酯(90∶10)作為流動相，得到10.56g的1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-4-氯-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶。產物純度61％，HPLC保留時間為12.46分鐘(HPLC條件5至95％ CH3CN在0.1N醋酸銨水溶液中在20分鐘內，柱規格為3.9×150mm，300A)。
1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體D)將1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-4-氯-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(中間體C)(9g，純度61％)與二噁烷(100ml)和氫氧化銨(100ml)在壓力容器中混合。此混合物加熱至120℃過夜。除去溶劑並將此殘餘物通過急驟柱色譜純化，用乙酸乙酯作為流動相，得到1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(CDCl3)1.94(d，J＝11.23Hz，2H)，2.21(m，2H)，2.35(m，2H)，3.04(d，J＝11.48Hz)，3.57(s，2H)，4.71(m，1H)，5.98(s，2H)，7.34(m，5H)，8.33(s，1H)；LC/MS(MH+＝389)。
1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4胺將1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-溴-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體D)(4.3g，11.10mmol)、4-苯氧基苯基羥基代硼酸(中間體V)(2.61g，12.21mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.77g，0.67mmol)和碳酸鈉(2.82g，26.65mmol)與乙二醇二甲醚(100ml)和水(50ml)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。除去有機溶劑並將水層用乙酸乙酯萃取。將合併的有機層洗滌、乾燥並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用乙酸乙酯/甲醇(98/2)作為流動相，得到2.65g的1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1HNMR(CDCl3)1.99(d，J＝11.02Hz，2H)，2.25(m，2H)，2.47(m，2H)，3.07(d，J＝11.12Hz)，3.59(s，2H)，4.80(m，1H)，5.52(s，2H)，7.07(d，J＝0.67，1H)，7.15(m，3H)，7.37(m，6H)，7.66(d，J＝8.51，2H)，8.37(s，1H)；LC/MS(MH+＝477)。
實施例23-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1 H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將1-(1-苄基-4-哌啶基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物1)(1.224g，2.57mmol)、10％鈀碳(1.22g)和甲酸銨(0.81g，12.84mmol)與21ml甲醇混合。室溫下攪拌6小時後，該反應混合物過濾並用熱甲醇洗滌。除去溶劑並將此殘餘物在二氯甲烷中回收，並將有機層洗滌、乾燥並蒸發得到0.77g的3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(CDCl3)2.05(d，J＝12.17Hz，2H)，2.26(m，2H)，2.87(m，2H)，3.29(d，J＝12.76Hz)，4.89(m，1H)，5.54(s，2H)，7.09(m，2H)，7.15(m，3H)，7.39(m，2H)，7.67(d，J＝9.39Hz，2H)，8.37(s，1H)；LC/MS(MH+＝387)。
實施例31-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽(化合物3)1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體E)將3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物2)(199mg，0.515mmol)、1-甲基-4-哌啶酮(70μl，0.566mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(163mg，0.772mmol)和冰醋酸(34mg，0.566mmol)與3ml的1，2-二氯乙烷混合。室溫下攪拌過夜後，加入2ml水，接著加入固體碳酸氫鈉直到pH達到約8。分層並將水層用二氯甲烷萃取。將合併的有機層洗滌、乾燥並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化得到92mg的1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO)1.47(m，2H)，1.72(d，J＝11.75Hz，2H)，1.88(m，4H)，2.14(s，3H)，2.35(m，5H)，2.81(d，J＝11.32Hz，2H)，3.01(d，J＝11.26Hz，2H)，4.62(m，1H)，7.16(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(d，J＝8.69Hz，2H)，8.23(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽將1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(92mg，0.190mmol)溶解於25ml的熱乙酸乙酯中，並加入存在於5ml熱乙酸乙酯中的馬來酸(66mg，0.571mmol)。室溫下放置2小時後，濾出此固體再乾燥得到135mg的1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO)1.87(m，2H)，2.22(m，4)，2.45(m，2H)，2.77(s，3H)，2.18(bm，9H)，5.06(m，1H)，6.11(s，6H)，7.15(m，5H)，7.45(m，2H)，7.67(d，J＝8.51Hz，2H)，8.27(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
實施例41-[1-(1-異丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽(化合物4)1-[1-(1-異丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體F)將3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4胺(化合物2)(221mg，0.572mmol)、1-異丙基-4-哌啶酮(89mg，0.63mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(182mg，0.86mmol)和冰醋酸(40μl，0.63mmol)與3ml的1，2-二氯乙烷混合。室溫下攪拌過夜後，加入2ml水，接著加入固體碳酸氫鈉直到pH達到約8。分層並將水層用二氯甲烷萃取。將合併的有機層洗滌、乾燥並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化得到132mg的1-[1-(1-異丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO)0.99(d，J＝6.54Hz，6H)，1.42(m，2H)，1.72(d，J＝11.41Hz，2H)，1.88(d，J＝9.61Hz，2H)，2.14(s，3H)，2.16(m，6H)，2.66(m，2H)，2.83(d，J＝10.98Hz，2H)，2.98(d，J＝8.25Hz，2H)，4.62(m，1H)，7.16(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(d，J＝8.69Hz，2H)，8.23(s，1H)；LC/MS(MH+＝512)1-[1-(1-異丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽將1-[1-(1-異丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體F)(132mg，0.258mmol)溶解於30ml的熱乙酸乙酯中並加入存在於5ml熱乙酸乙酯中的馬來酸(90mg，0.774mmol)。室溫下放置2小時後，濾出此固體再乾燥得到205mg的1-[1-(1-異丙基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO)1.26(d，J＝6.34Hz，6H)，1.90(m，2H)，2.23(m，4H)，2.50(m，2H)，3.53(bm，9H)，5.08(m，1H)，7.16(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(d，J＝8.30Hz，2H)，8.28(s，1H)；LC/MS(MH+＝512)。
實施例51-[1-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽(化合物5)1-[1-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體G)將3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物2)(350mg，0.906mmol)、1-叔丁氧基羰基-4-哌啶酮(198mg，0.996mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(288mg，1.358mmol)和冰醋酸(60μl，0.996mmol)與5ml的1，2-二氯乙烷混合。室溫下攪拌過夜後，加入2ml水，接著加入固體碳酸氫鈉直到pH達到約8。分層並將水層用二氯甲烷萃取。將合併的有機層洗滌、乾燥並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化得到254mg的1-[1-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO)1.39(m，13H)，1.75(m，2H)，1.91(m，2H)，2.17(m，2H)，2.35(m，2H)，2.72(m，2H)，3.0(m，2H)，3.63(m，1H)，3.98(m，2H)，4.63(m，1H)，7.16(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(d，J＝8.60Hz，2H)，8.23(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
1-[1-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽將1-[1-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(254 mg，0.446mmol)在存在於二氯甲烷中的25ml的10％三氟乙酸中攪拌過夜。蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷。加入飽和碳酸氫鈉並將所得混合物攪拌30分鐘。分層並將水層用二氯甲烷萃取。將合併的有機層洗滌、乾燥並蒸發得到108mg的1-[1-(4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體GG)，其不經進一步純化直接使用。
將1-[1-(4-哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(108mg，0.230mmol)溶解於25ml的乙醇中並加入存在於5ml熱乙醇中的馬來酸(80mg，0.690mmol)。室溫下放置2小時後，濾出此固體並乾燥得到155mg的1-[1-(4哌啶基)-4-哌啶基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO)1.80(m，2H)，2.42(m，4)，2.51(m，2H)，2.95(m，3H)，3.44(bm，7H)，5.06(m，1H)，6.10(s，6H)，7.15(m，5H)，7.45(m，2H)，7.67(d，J＝8.51Hz，2H)，8.27(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
實施例61-(反-4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，二馬來酸鹽(化合物6)
1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶4-胺(化合物9)(中間體I)將3-(4-苯氧基苯基)-1 H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物15)(3.36g，11.1mmol)、1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇(中間體M)(5.26g，33.3mmol)、三苯基膦(5.81g，22.2mmol)懸浮於130ml四氫呋喃中。該反應混合物在冰水浴中冷卻並滴加偶氮二甲酸二乙酯(3.9ml，22.2mmol)。10分鐘後，該反應混合物升溫至室溫。攪拌2小時後，除去溶劑並將此殘餘物在乙酸乙酯中回收。將有機層洗滌、乾燥並蒸發。粗品通過Biotage急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(由50∶50至10∶90)作為流動相，得到3.829g的1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(CDCl3)1.83(m，2H)，1.945(m，2H)，2.05(m，2H)，2.45(m，2H)，3.99(s，4H)，4.86(m，1H)，5.74(bs，2H)，7.09(m，2H)，7.15(m，3H)，7.39(m，2H)，7.66(d，J＝8.70Hz，2H)，8.37(s，1H)；LC/MS(MH+＝444)。
4-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-環己酮(化合物10)(中間體J)將1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物9)(3.80g，8.57mmol)懸浮於190ml的丙酮中並冷卻至0℃。通過加液漏鬥緩慢加入48ml的5.0N鹽酸。除去冰水浴並將反應混合物室溫下攪拌過夜。除去丙酮並用1.0N氫氧化鈉將水層中和至pH約為10。濾出固體並乾燥得到2.926g的4-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-環己酮。1H NMR(CDCl3)2.39(m，2H)，2.62(m，6H)，5.30(m，1H)，6.08(b s，2H)，7.09(m，2H)，7.15(m，3H)，7.42(m，2H)，7.64(d，J＝8.70Hz，2H)，8.39(s，1H)；LC/MS(MH+＝400)。
1-(反-4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體K)和1-(順-4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體L)將4-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-環己酮(化合物10)(2.916g，7.30mmol)、4-甲基哌嗪(2.4ml，21.90mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(2.01mg，9.49mmol)和冰醋酸(1.31g，21.90mmol)與147ml的1，2-二氯乙烷混合。室溫下攪拌6小時後，加入57ml的水，接著加入3.8g的固體碳酸氫鈉。分層並將水層用二氯甲烷萃取。將合併的有機層洗滌、乾燥並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氨水(90/10/0.2至80/20/0.5)作為流動相，得到(A)，0.47g的反-1-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基)-3-(4苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO)1.49(m，2H)，2.00(m，6H)，2.23(s，3H)，2.59(m，9H)，4.66(m，1H)，7.17(m，5H)，7.44(m，2H)，7.64(d，J＝8.69Hz，2H)，8.23(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
(B)，2.582g的1-(順-4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO)1.58(m，2H)，1.68(m，2H)，2.08(m，2H)，2.15(s，3H)，2.28(m，11H)，4.79(m，1H)，7.17(m，5H)，7.44(m，2H)，7.64(d，J＝8.69Hz，2H)，8.23(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
1-(反-4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，二馬來酸鹽將反-1-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.47g，0.972mmol)溶解於140ml的熱乙醇中並加入存在於10ml熱乙醇中的馬來酸(0.40g，2.47mmol)。室溫下放置2小時後，濾出此固體再乾燥得到0.62g of 1-(反-4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，二馬來酸鹽。1H NMR(DMSO)1.58(m，2H)，2.04(m，6)，2.67(m，3H)，2.79(vbm，9H)，4.70(m，1H)，7.41(s，4H)，7.17(m，5H)，7.44(m，2H)，7.66(d，J＝8.63Hz，2H)，8.24(s，1H)；LC/MS(MH+＝484)。
實施例71-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺三馬來酸鹽(化合物7)將4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(化合物10)(中間體J)(4.45g)在300mL二氯甲烷中在氮氣氛下攪拌，同時加入3.72 mLN-甲基哌嗪和1.92 mL乙酸。30分鐘後加入三乙醯氧基硼氫化鈉(3.40g)並將此混合物攪拌過夜。第二天加入2 mLN-甲基哌嗪、1.2 mL乙酸和1.85g三乙醯氧基硼氫化鈉並攪拌過夜。再加入2 mLN-甲基哌嗪、1.2mL乙酸和1.85g三乙醯氧基硼氫化鈉並攪拌過夜。將混合物真空蒸發，將此殘餘物與250 mL水和100 mL 6M鹽酸一起攪拌並放置過夜。此混合物用乙酸乙酯洗滌兩次。將水層鹼化(過量的氨水)，用乙酸乙酯萃取並將此萃取物乾燥並蒸發得到3.5g淡棕色膠狀物，其通過急驟色譜純化，用8∶1∶1乙酸乙酯∶乙醇∶三乙胺洗脫，得到1.2g純品，為無色膠狀物。用存在於乙酸乙酯中的0.9g馬來酸處理此膠狀物的乙酸乙酯溶液得到馬來酸鹽，為無定形固體，其經收集並用乙酸乙酯洗滌。在空氣中乾燥，然後在80℃/20 mbar下乾燥，得到1.9g 1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺三馬來酸鹽，為0.8乙酸乙酯溶劑化物，熔點169-170℃。理論值C43.2H51.4N7O14.6C57.5，H5.7，N10.9，實測值C57.7，H5.7，N10.9。
實施例8N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-4-氟-1-苯磺醯胺二馬來酸鹽(化合物8)1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中間體KA)將3-氨基-4-吡唑基甲腈(26.85g，0.248mol)在甲醯胺(140mL)中的懸浮液在180℃下氮氣氛下加熱4小時。冷卻時產生沉澱，其經過濾收集並用水洗滌。將此固體凍幹得到1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺，為黃褐色粉末(87％，29.25g，0.217mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)13.34(br s，1H)，8.13(s，1H)，8.07(s，1H)，7.56(br s，2H)；TLC(二氯甲烷/甲醇＝9∶1)Rf0.16。
3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中間體LA)將4-氨基吡唑並[3，4-d]嘧啶(中間體KA)(11.75g，0.087mol)和N-碘代琥珀醯亞胺(25.45g，0.113mol)在二甲基甲醯胺(300mL)中的混合物在50℃下加熱24小時。再加入N-碘代琥珀醯亞胺(3.92g，0.017mol)，並在50℃下再繼續加熱24小時。將此混合物冷卻至室溫並通過減壓濃縮將體積降低1/3。將水(500mL)加入到所得漿狀物中得到暗棕色沉澱，其經過濾收集，用水和乙醇洗滌並真空乾燥得到3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺，為淡黃色粉末(97％，22g，0.084mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)13.81(s，1H)，8.17(s，1H)，2.73(s，1H)，2.57(s，1H)；TLC(二氯甲烷/甲醇＝9∶1)Rf0.4。
1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇(中間體M)將1，4-環己烷二酮單亞乙基縮酮(125g，0.8mol)的甲醇(21)溶液冷卻至0℃，然後在30分鐘內分批加入硼氫化鈉(30.3g，0.8mol)。將該反應混合物在0℃下攪拌3小時並減壓除去溶劑。黃色漿狀物再溶解於二氯甲烷/異丙醇(3∶1，1.51)並用2N氫氧化鈉洗滌(1L)。水層再用二氯甲烷/異丙醇(3∶1)萃取並將合併的有機層用水洗滌，用硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。收集的1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇，為無色油狀物(65％，82.4g，0.65mol)1H NMR(CDCl3400MHz)3.95(m，4H)，3.79(m，1H)，1.84(m，4H)，1.60(m，4H)。TLC(乙酸乙酯/庚烷＝1∶1)Rf0.16。
1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中間體N)在室溫、氮氣氛下將3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中間體LA)(11g，0.042mol)懸浮於四氫呋喃(500mL)中。將1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇(中間體M)(19.98g，0.126mol)的四氫呋喃(50mL)溶液，並隨後將三苯基膦(22.1g，0.084mol)加入到此懸浮液中。將此懸浮液冷卻至0℃，然後緩慢加入偶氮二甲酸二乙酯(14.67g，0.084mol)。在0℃攪拌此反應混合物15分鐘後，其升溫至室溫，保持1小時。將該反應混合物減壓濃縮。殘餘物溶解於乙酸乙酯(300-400mL)並放置過夜。形成沉澱，其經過濾收集，用乙酸乙酯洗滌，並凍幹得到1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺，為淡黃色固體(54％，9.12g，0.023mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.19(s，1H)，4.70(m，1H)，3.90(m，4H)，2.13(m，2H)，1.74(m，6H)。TLC(二氯甲烷/甲醇＝9∶1)Rf0.61。
N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(中間體P)在氮氣氛下，15分鐘內將雙(三甲基甲矽烷基)氨化鈉(1.0M四氫呋喃溶液，270mL，0.27mol)溶液滴加到4-溴-2-氟苯胺(24.78g，0.130 mol)的四氫呋喃(250 mL)溶液中。再過15分鐘後，分批加入二碳酸二叔丁基酯(34.12g，0.156mol)(注意觀察到輕微的放熱)並繼續攪拌4小時。該反應混合物經減壓濃縮並將此殘餘物在乙酸乙酯(300mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(150mL)之間分配。水層進一步用乙酸乙酯(2×200mL)萃取並將合併的有機層用硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。通過柱色譜在矽膠上用10％至15％乙酸乙酯/庚烷梯度純化得到淡黃色蠟狀固體(中間體O)(79％，30.0g)，1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.51(9H，s)，7.22(1H，m)，及7.24(2H，m)。
被保護的溴苯胺(中間體O)(54.0g，0.186mol)、雙-頻哪醇合二硼烷(pinacolatodiborane)(56.8g，0.223mol)、醋酸鉀(54.7g，0.558mol)和[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(4.65g，5.58mmol)在二甲基甲醯胺(1L)中的溶液在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將二甲基甲醯胺減壓除去並將所得深色固體殘餘物溶解於二氯甲烷(500mL)。通過矽膠墊過濾除去無機殘餘物並將此濾液通過柱色譜在矽膠上純化，用10％至15％乙酸乙酯/庚烷梯度洗脫得到產物，為黃色粘稠油狀物，其放置時產生結晶(92％，56.5g)，1H NMR(CDCl3，400MHz)δ1.33(12H，s)，1.53(9H，s)，6.82(1H，br s)，7.46(1H，d)，7.55(1H，br d)，及8.12(1H，br t)。
N-{4-[4-氨基-1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}氨基甲酸叔丁基酯(中間體Q)將1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中間體N)(6.5g，0.016mol)、N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(中間體P)(24.3g，0.024mol)，四(三苯基膦)鈀(0)(749mg，0.648mmol)和碳酸鈉(4.29g，0.04mol)在脫氣水(50mL)和二甲氧基乙烷(300mL)中的懸浮液，在80℃下加熱18小時。將該反應混合物減壓濃縮，然後用乙酸乙酯(500mL)和鹽水(500mL)稀釋。形成固體，其經過濾收集，用乙酸乙酯洗滌並真空乾燥得到N-{4-[4-氨基-1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}氨基甲酸叔丁基酯，為黃褐色固體(81％，6.38g，0.013mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)9.19(s，1H)，8.23(s，1H)，7.83(t，1H)，7.43(m，2H)，4.78(m，1H)，3.91(m，4H)，2.24(m，2H)，1.79(m，6H)，1.49(s，9H)。TLC(二氯甲烷/甲醇＝95∶5)Rf0.42。
4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(中間體R)將叔丁基N-{4-[4-氨基-1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}氨基甲酸酯(中間體Q)(6.38g，0.013mol)懸浮於丙酮(400mL)中並冷卻至室溫。向此懸浮液緩慢加入5M鹽酸(96mL)。該反應混合物再在60℃下加熱3小時並減壓濃縮。用碳酸氫鈉水溶液將剩餘的酸性層調節至pH8。形成沉澱，其經過濾收集，用水洗滌，並凍幹得到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮，為黃褐色固體(91％，4.1g，0.012mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.24(s，1H)，7.20(m，2H)，6.89(m，1H)，5.48(s，1H)，5.21(m，1H)，2.69(m，2H)，2.37(m，4H)，2.20(m，2H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷)＝4∶1；MH+341。
順-和反-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體S和T)將N-甲基哌嗪(3.6g，0.036mol)和乙酸(2.17g，0.036mol)加入到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(中間體R)(4.1g，0.012mol)在二氯乙烷(200mL)中的懸浮液中。然後向該反應混懸液中分批加入三乙醯氧基硼氫化鈉(3.32g，0.016mol)。該反應混合物室溫下攪拌18小時。在5天內分兩批再加入三乙醯氧基硼氫化鈉(1.79g，0.084mol和1.28g，0.06mol)。將該反應混合物過濾，用二氯乙烷(100mL)洗滌並將此濾液減壓濃縮得到3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為黃色固體(14.5g，0.034mol)。將黃色固體純化並將順/反異構體通過急驟柱色譜在矽膠上分離，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨(93∶5∶2)作為洗脫劑，得到反式3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(流出較慢組分)，為白色固體(115mg，0.27mmol)。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)8.19(s，1H)，7.18(m，2H)，6.88(m，1H)，5.46(s，2H)，4.60(m，1H)，2.35(br m，4H)，2.14(s，3H)，1.95(brm，6H)，1.44(m，2H)，1.26(m，4H)，0.86(m，2H)。TLC(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨＝95∶5)Rf0.31。
還收集到順-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(1.1g，2.59mmol)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.19(s，1H)，7.20(m，2H)，6.90(m，1H)，5.47(s，2H)，4.75(m，1H)，3.40(m，4H)，2.23(m，6H)，2.17(m，2H)，1.98(s，3H)，1.61(m，4H)；TLC(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨＝95∶5)Rf0.37。
N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-4-氟-1-苯磺醯胺二馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體T)(107mg，0.252mmol)和4-氟苯磺醯基氯(49mg，0.252mmol)在吡啶(2.5mL)中的混合物在40℃下加熱20小時。在24小時內再加入4-氟苯磺醯基氯(15mg，0.063mmol和10mg，0.051mmol)。將該反應混合物減壓濃縮得到桔黃色油狀物(220mg，0.378mmol)。將粗品油狀物通過製備RP-HPLC(Gilson C18)純化，用醋酸銨梯度/乙腈梯度洗脫得到N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-4-氟-1-苯磺醯胺(中間體U)，為白色固體(220mg)。將馬來酸(55mg，0.474mmol)和游離鹼N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-4-氟-1-苯磺醯胺(92mg，0.158mmol)溶解於熱乙醇(3mL)。冷卻時產生沉澱，其經過濾收集，並凍幹得到N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-4-氟-1-苯磺醯胺二馬來酸鹽，為白色固體(100mg，0.172mmol)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)10.42(s，1H)，8.23(s，1H)，7.86(m，2H)，7.41(m，5H)，6.16(s，4H)，4.67(br m，1H)，2.62(br m，6H)，2.01(br m，6H)，1.56(b rm，2H)；MH+583.6。
實施例9(中間體I)1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(化合物9，中間體I)4-苯氧基苯基羥基代硼酸(中間體V)向4-苯氧基溴苯(98.2g，0.39mol)的乾燥THF(800mL)溶液中，在氮氣氛下在-78℃下滴加n-BuLi(2.5M己烷溶液)(172mL，0.43mol)。觀察到溫度升高至-65℃。加畢，此混合物在-78℃下攪拌15分鐘。在30分鐘內，滴加硼酸三異丙基酯(109.2mL，0.473mol)。加畢，觀察到形成懸浮液。在1小時內將此混合物升溫至0℃，在0℃下攪拌4小時。通過加入水(300mL)使內部溫度＜20℃(需要冰浴)停止該反應。此混合物升溫至室溫過夜，然後蒸發至幹。將殘餘物懸浮於水(600mL)並通過小心地加入濃鹽酸進行酸化。通過過濾收集所得沉澱並在45℃下真空乾燥。將此固體磨為細粉並用石油醚研磨(40-60℃)。將此淡色固體過濾並乾燥得到4-苯氧基苯基羥基代硼酸(68.8g，83％)。1H NMR(250MHz，d6-DMSO)7.99(1H，m)，7.91(1H，t)，7.83(1H，d)，7.4(2H，m)，7.14(1H，m)，6.92-7.07(5H，m)。微量分析理論值C(71.4％)，H(5.45％)，實測值C(70.25％)，H(4.7％)1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇(中間體M)將1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-酮(150g，0.96mol)與MeOH(1200mL)在氮氣氛下攪拌直到發生溶解。乾冰(drykold)/丙酮浴中冷卻至-5℃並在2小時內分批用NaBH4(72.6g，1.82mol)處理(T＜10℃)。加畢，此混合物冷卻至-10℃並再使其升溫至室溫。室溫下攪拌過夜。將所得混合物蒸發並用冰冷的5N NaOH(400mL)處理，用CH2Cl2(2×500mL)萃取，接著用4∶1二氯甲烷∶異丙醇(2×250mL)萃取。合併的萃取物用鹽水(2×200mL)洗滌，乾燥過夜(硫酸鈉)並蒸發得到無色油狀物。將其進一步真空乾燥得到1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇(141.8g，93％收率)1H NMRCDCl3(250MHz)3.91(4H，m)，3.81(1H，m)，1.21-1.88(8H，m，脂族H的)。
3-溴-4-氯-1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(中間體W)在0℃下在氮氣氛下向3-溴-4-氯吡唑並[3，4-d]嘧啶(中間體B)(7.5g，32mmol)、1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇(中間體M)(15.17g，96mmol)、三苯基膦(16.86g，64mmol)的THF(275mL)溶液中加入存在於THF(50mL)中的偶氮二甲酸二乙酯(11.14g，64mmol)。該反應混合物在0℃下攪拌1小時，升溫至室溫並再在室溫下攪拌3小時。將該反應混合物真空濃縮並溶解於熱庚烷/EtOAc/DCM(5∶1∶5)。進行急驟矽膠柱色譜，用庚烷、庚烷/EtOAc(5/1)然後用庚烷/EtOAc(4/1)洗脫得到固體，其用庚烷研磨，並將此固體過濾移出得到8.2g的3-溴-4-氯-1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶，為白色固體(69％)[在1∶1庚烷EtOAc中Rf＝0.5]1HNMR(400MHz，d6-DMSO)8.89(1H，s)，4.92(1H，m)，3.90(4 H，m)，2.16(2H，m)，1.96(2H，m)，1.81(6H，m)HPLCTr＝17.11分鐘，96.6％。
3-溴-1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中間體X)將3-溴-4-氯-1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(中間體W)(8.2g，21mmol)、濃氨水(100mL)和二噁烷(100mL)在Parr壓力容器中在120℃下加熱20小時。蒸發溶劑並將此殘餘物在乙酸乙酯和水之間分配。乙酸乙酯層用硫酸鈉乾燥，過濾並蒸發得到3-溴-1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺固體(4.7g，61％)，其不經進一步純化直接使用。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.21(1H，s)，4.71(1H，m)，3.90(4H，m)，2.11(2H，m)，1.72-1.88(6H，m)HPLCTr＝11.84分鐘，92.1％。
1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺將3-溴-1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中間體X)(4.0g，11.3mmol)、4-苯氧基苯基羥基代硼酸(中間體V)(2.66g，12mmol)、碳酸鈉(2.87g，27mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.78g，0.6mmol)在二甲氧基乙烷(120mL)/水(60mL)的混合物中在85℃氮氣氛下加熱4小時。冷卻至室溫並放置72小時。過濾沉澱的固體並用水和乙醚(各100ml)洗滌。真空乾燥3小時得到4.2g的1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺，為米色固體(87％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.24(1H，s)，7.67(2H，m)，7.45(2H，m)，7.19(5H，m)，4.78(1H，m)，3.90(4H，m)，2.25(2H，m)，1.71-1.84(6H，m)，質譜MH+＝444.21-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺。
第二路線將在200mL乾燥的二甲基乙醯胺中的4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(化合物15)(4.9g)在氮氣氛下用60％氫化鈉(2.0g)處理並攪拌30分鐘。加入1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基4-甲基-1-苯磺酸酯(中間體Y)(15g)並將此混合物在105℃下加熱42小時。真空蒸發並用水處理得到固體，其經收集並用水充分洗滌然後在空氣中乾燥。將此固體用乙醚(6×120mL)煮沸並將此經過濾的溶液蒸發。用丙酮處理得到1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺，為米白色固體，其經收集並用丙酮洗滌，然後在空氣中乾燥，熔點200-202.5℃。理論值C25H25N5O3C67.7，H5.6，N15.8；實測值C67.6，H5.8，N15.4。
實施例104-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(化合物10，中間體J)向在丙酮(200mL)中的1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(4-苯氧基苯基)-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(化合物9)(4.2g，95mmol)中滴加HCl(5N，50mL)。室溫下攪拌24小時。蒸發丙酮並用氫氧化鈉(5N，60mL)鹼化。用EtOAc(3×200mL)萃取。乾燥、過濾並蒸發得到固體，其用EtOAcEt2O(1∶20)研磨並過濾得到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮，為霜狀固體(3.4g，90％)，熔點203-205℃。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.28(1H，s)，7.66(2H，m)，7.44(2H，m)，7.08-7.20(5H，m)，6.1-7.3(2H，bs)，5.26(1H，m)，2.71(2H，m)，2.41(4H，m)，2.24(2H，m)HPLCTr＝15.43分鐘，95％。
實施例114-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]環己基-1-哌嗪甲酸叔丁基酯(化合物11和12)向4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(化合物10)(2.0g，5mmol)和叔丁氧基羰基哌嗪(2.8g，15 mmol)的二氯乙烷(200 mL)溶液中，加入冰醋酸(0.9g，15 mmol)和三乙醯氧基硼氫化鈉(1.59g，7.5 mmol)。室溫氮氣氛下攪拌20小時。用NaOH溶液(2.5N，200mL)停止反應。分離有機層並用二氯甲烷(2×100mL)萃取水層。用水洗滌合併的有機層，乾燥(硫酸鈉)並過濾。將此溶液蒸發得到紅色油狀物，其進行急驟矽膠柱色譜，用乙酸乙酯至10％ MeOH/乙酸乙酯(2.5％甲醇的增量)。合併相應於快速流出物質的餾份(在9∶1 EtOAc∶MeOH中Rf＝0.27)並蒸發得到4-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]環己基-1-哌嗪甲酸叔丁基酯，為白色固體(1.48g，53％)，熔點170-172℃，鑑定為順式非對映異構體(化合物11)1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.23(1H，s)，7.65(2H，d，J＝8.8Hz)，7.43(2H，m)，7.12-7.20(5H，m)，4.82(1H，m)，3.34(4H，m)，2.40(4H，m)，2.30(3H，m)，2.04(2H，m)，1.60-1.72(4H，m)，1.39(9H，s)。HPLCTr＝15.74分鐘，98.16％，質譜MH+＝570.1。
合併相應於流出較慢的物質的餾份(在9∶1 EtOAc∶MeOH中Rf＝0.18)並蒸發得到4-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]環己基-1哌嗪甲酸叔丁基酯，為霜狀固體(0.5g，18％)，熔點178-179℃，鑑定為反式非對映異構體(化合物12)1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.23(1H，s)，7.65(2H，d，J＝8.4Hz)，7.42(2H，m)，7.11-7.20(5H，m)，4.63(1H，m)，3.34(4H，m)，2.47(5H，m)，1.89-2.06(6H，m)，1.34-1.55(11H，m)HPLCTr＝15.29分鐘，98.15％，質譜MH+＝570.1。
實施例12順-3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌嗪基環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺三馬來酸鹽(化合物13)在0℃下在氮氣氛下，向二氯甲烷(35mL)中的順-叔丁基4-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶1-基]環己基-1-哌嗪甲酸酯(化合物11)(1.4g，2.46mmol)中滴加TFA(6mL)。將該反應混合物室溫下攪拌48小時，用NaOH(5N水溶液，50mL)停止反應並用二氯甲烷(3×50mL)萃取。用水洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾並蒸發得到無色油狀物(1.23g)，其溶解於EtOAc(40mL)。向此溶液中加入馬來酸(913mg)的EtOAc(10mL)溶液。在氮氣流下過濾所得固體並在真空下再乾燥2小時。這樣得到1.8g(90％)的順-3-(4苯氧基苯基)-1-(4-哌嗪基環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺三馬來酸鹽，為白色固體熔點173-175℃。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.26(1H，s)，7.67(2H，d，J＝8.8Hz)，7.42(2H，m)，7.12-7.21(5H，m)，6.19(6H，s)，4.86(1H，m)，3.18(4H，m)，2.89(4H，m)，2.67(1H，m)，2.28(2H，m)，2.05(2 H，m)，1.7 4-1.80(4H，m)HPLCTr＝12.52分鐘，100％，質譜MH+＝470.3，微量分析C39H43N7O13理論值C57.3％，H5.3％，N12.0％；實測值C57.0％，H5.3％，N11.97％。
實施例13反式-3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌嗪基環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺三馬來酸鹽(化合物14)在0℃下在氮氣氛下，向在二氯甲烷(15mL)中的反-叔丁基4-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]環己基-1-哌嗪甲酸酯(化合物12)(0.5g，0.88mmol)中滴加TFA(4 mL)。室溫下攪拌48小時。用氫氧化鈉溶液(5N，25 mL)停止反應並用二氯甲烷(3×25mL)萃取。用水洗滌，乾燥(硫酸鈉)，過濾並蒸發得到米色固體(0.39g)，其溶解於EtOAc(20mL)。向此溶液中加入馬來酸(290mg)的EtOAc(5mL)溶液。在氮氣流下過濾所得固體並在真空下再乾燥2小時。這樣得到0.6g(83％)的反-3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌嗪基環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺三馬來酸鹽，為白色固體熔點153-155℃。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)8.25(1H，s)，7.65(2H，m)，7.43(2H，m)，7.11-7.21(5H，m)，6.17(6H，s)，4.69(1H，m)，3.20(4H，m)，2.97(4H，m)，2.84(1H，m)，2.04-2.09(6H，m)，1.59(2H，m)。HPLCTr＝12.65分鐘，100％，質譜MH+＝470.1微量分析理論值C39H43N7O13C57.3％ H5.3％ N12.0％，實測值C57.1％ H5.4％ N12.10％。
實施例144-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(化合物15)1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇(中間體M)在氮氣氛下將1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-酮(150g，0.96mol)與MeOH(1200 mL)一起攪拌直到發生溶解。將該反應混合物在乾冰(drykold)/丙酮浴中冷卻至-5℃並在2小時內分批用NaBH4處理(72.6g，1.82mol)(T＜10℃)。加畢，將此混合物冷卻至-10℃，然後使其升溫至室溫並室溫下攪拌過夜。將所得混合物蒸發並用冰冷的5N NaOH(400mL)處理，並用二氯甲烷(2×500mL)萃取，接著用4∶1二氯甲烷∶異丙醇(2×250mL)萃取。合併的萃取物用鹽水洗滌(2×200mL)，乾燥過夜(硫酸鈉)並蒸發得到無色油狀物。將其進一步真空乾燥(除去殘餘的異丙醇)得到1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇(141.8g，93％收率)1H NMRCDCl3(250MHz)3.91(4H，m)，3.81(1H，m)，1.21-1.88(8H，m，脂族H的)。
1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基4-甲基-1-苯磺酸酯(中間體Y)向攪拌的1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-醇(中間體M)(99.8g，0.63mol)的吡啶(450mL)溶液中，在0℃在氮氣氛下分批加入甲苯磺醯氯(132.4g，0.69mol)使T＜2℃。加畢，此混合物緩慢升溫至室溫並室溫下攪拌過夜。用水(750mL)處理並用乙酸乙酯(500mL，然後2×250mL)萃取。合併的萃取物用3N HCl(3×300mL)、鹽水(300mL)洗滌並用硫酸鈉乾燥。過濾並蒸發得到淡黃色油狀物(200g粗品)。將此油狀物用石油醚(40-60℃)(200mL)處理並刮劃以誘發固體形成。過濾1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基4-甲基1-苯磺酸酯，用石油醚(40-60℃)(200mL)洗滌並真空乾燥。收率＝181.0g，92％。
1，1-二氰基-2-羥基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯(中間體Z)將4-苯氧基苯甲酸(48g)加入到100mL亞硫醯氯中並在溫和回流下加熱1小時。蒸餾除去亞硫醯氯，殘餘的油狀物溶解於甲苯，並在80℃/20毫巴下除去揮發性物質。所得醯氯溶解於200mL甲苯和35mL四氫呋喃中。加入14.8g丙二腈，並將此溶液在-10℃攪拌，同時在0℃以下加入存在於150mL甲苯中的57.9g二異丙基乙基乙胺。再在0℃下1小時後，將此混合物在20℃攪拌過夜。將胺鹽酸鹽過濾移出並將此濾液真空蒸發，在乙酸乙酯中回收此殘餘物並用1.25M硫酸洗滌，然後用鹽水洗滌並用硫酸鈉乾燥。蒸發得到半固體殘餘物，將其用少量乙酸乙酯處理得到4.1g純品，為白色固體熔點160-162℃。將此濾液蒸發得到56.5g(96％)的1，1-二氰基-2-羥基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯，為灰棕色固體，其純度足以符合進一步使用的要求。1H NMR(DMSO-d6400MHz)8.18(寬s，1H)，7.62(d，2H)，7.42(m，2H)，7.19(m，1H)，7.07(d，2H)，6.94(d，2H)。
1，1-二氰基-2-甲氧基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯(中間體AA)將1，1-二氰基-2-羥基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯(中間體Z)(56.5g)在780mL乙腈和85mL甲醇中，在氮氣氛下，在0℃下攪拌，同時加入52.5mL二異丙基乙胺，然後加入150mL 2M三甲基甲矽烷基二偶氮甲烷的THF溶液。在20℃下攪拌2天後，加入2g矽膠進行色譜沒有注意到再放出氮氣。將此棕紅色溶液真空蒸發，殘餘物溶解於乙酸乙酯，並用水充分洗滌，然後用鹽水洗滌，乾燥並蒸發。殘餘物用乙醚(3×250mL)萃取，從不溶性油狀物中傾析。蒸發醚萃取物得到22.5g的1，1-二氰基-2-甲氧基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯，為淡桔黃色固體，通過TLC(3∶2乙酸乙酯∶環己烷)檢測其幾乎是純的。不溶性油狀物通過急驟色譜純化得到15.0g橘紅色油狀物。合併的收率(63％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)7.71(d，2H)，7.48(m，2H)，7.29(m，1H)，7.16(m，4H)，3.93(s，3H)。
3-氨基-4-氰基-5-(4-苯氧基苯基)吡唑(中間體AB)將1，1-二氰基-2-甲氧基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯(中間體AA)(22.5g)和1，1-二氰基-2-甲氧基-2-(4-苯氧基苯基)乙烯油狀物(15g)用18mL肼水合物的25mL乙醇溶液處理，並在蒸汽浴上加熱1小時，加入15mL乙醇，接著加入10mL水。收集沉澱的固體並用4∶1乙醇∶水洗滌，然後在空氣中乾燥得到3-氨基-4-氰基-5-(4-苯氧基苯基)吡唑，為淡桔黃色固體30.0g(80％)熔點187-188.5℃。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)12.11(寬s，1H)，7.80(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，1H)，7.09(m，4H)，6.47(寬s，2H)。理論值C16H12N4O，C 69.6，H4.3，N20.3；實測值C69.5，H4.4，N 20.2。
4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶將3-氨基-4-氰基-5-(4-苯氧基苯基)吡唑(中間體AB)(29.5g)懸浮於300mL甲醯胺中並在在氮氣氛下在180℃加熱4小時，冷卻至30℃，加入300mL水並收集固體，用水然後用甲醇充分洗滌並在空氣中乾燥得到24.6g純品(80％)的4-氨基3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶熔點267-269℃，為淡棕色-灰色固體。理論值C17H13N5OC67.3，H4.3，N23.1；實測值C67.0，H4.4，N23.1。
實施例15
4-氨基-1-環戊基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(化合物16)將4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(化合物15)(0.91g)在50mL乾燥二甲基乙醯胺中在25℃氮氣氛下攪拌，同時加入60％氫化鈉(0.20g)。攪拌30分鐘後，加入溴代環戊烷(0.8mL)並將此混合物攪拌過夜。真空蒸發後，殘餘物用水處理並用乙酸乙酯萃取。進行急驟色譜(3∶2環己烷∶乙酸乙酯)純化得到0.36g的1-環戊基-4-(環戊基氨基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶，為無色油狀物。1H n.m.r.(DMSO)8.319(s，1H)，7.65-7.69(m，2H)，7.40-7.48(m，2H)，7.09-7.23(m，5H)，5.926/5.955(d，1H)，5.17-5.29(五重峰，1H)，4.44-4.52(m，1H)，1.86-2.12(m，8H)，1.39-1.72(m，8H)。
用乙酸乙酯進一步洗脫得到4-氨基-1-環戊基-3-(4-苯氧基苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶。用甲基叔丁基醚重結晶得到無色針狀物熔點134.7-135.6℃(0.2g，18％)。理論值C22H21N5O C71.2，H5.7，N18.9；實測值C71.05，H5.7，N18.8。1H n.m.r.(DMSO)8.237(s，1H)，7.64-7.68(m，2H)，7.40-7.47(m，2H)，7.10-7.22(m，5H)，6.85(特寬s，2H)，5.17-5.30(五重峰，1H)，1.67-2.09(m，8H)。
實施例163-(4-苯氧基苯基)-1-(四氫吡喃-4-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(化合物17)將3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(化合物15)(0.97g)在33mL乾燥二甲基乙醯胺中在氮氣氛下攪拌，同時加入60％氫化鈉(0.22g)。30分鐘後加入四氫吡喃-4-基甲苯磺酸酯(1.0g)並將此混合物在105℃下加熱4小時，然後在135℃下加熱3.5小時。真空蒸發並用水處理得到淡棕色固體，其經收集並用水充分洗滌然後在空氣中乾燥。在19∶1乙酸乙酯∶三乙胺中進行急驟色譜得到0.22g(18％)的3-(4-苯氧基苯基)-1-(四氫吡喃-4-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺熔點187-187.5℃。理論值C22H21N5O2C68.2，H5.4，N 18.1；實測值C 68.1，H 5.5，N18.0。
實施例17順-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮二馬來酸鹽(化合物18)和反-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯基)(苯基)甲酮二馬來酸鹽(化合物19)苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲酮(中間體AL)將4-溴二苯酮(2.97g，0.011mol)、乙硼烷頻哪醇酯(diboronpinacol ester)(3.47g，0.014mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.28g，0.00034mol)和醋酸鉀(3.34g，0.034mol)在N，N-二甲基甲醯胺(65mL)中的混合物，在80℃下氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(50mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其通過急驟色譜純化，在矽膠上用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作為流動相，得到苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲酮(2.01g，0.0065mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)7.85(d，2H)，7.71(m，5H)，7.56(d，2H)，1.32(s，12H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf0.364-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-環己酮(中間體AK)將1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(中間體N)(13.12g，32.7mmol)懸浮於丙酮(240mL)並將此混合物冷卻至0℃。滴加5N鹽酸(200mL)，在加入期間保持溫度低於4℃。加畢，混合物升溫至室溫並攪拌18小時。濾出剩餘的固體，並用飽和碳酸氫鈉水溶液中和此濾液。沉澱通過過濾收集並用水洗滌並真空乾燥得到4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-環己酮(8.20g，32.8mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.23(s，1H)，5.18(m，1H)，2.64-2.73(m，2H)，2.26-2.37(m，4H)，2.17-2.30(m，2H)。
順-和反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AC和AD)將4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-環己酮(中間體AK)(1.32g，0.0037mol)、N-甲基哌嗪(1.11g，0.011mol)和乙酸(0.66g，0.011mol)在1，2-二氯乙烷(50mL)中的混合物在40℃下攪拌10分鐘，並立即加入三乙醯氧基硼氫化鈉(1.09g，0.0052mol)。將此混合物在室溫氮氣氛下攪拌24小時，並加入三乙醯氧基硼氫化鈉(0.25g，0.0012mol)。此混合物攪拌再攪拌48小時，減壓除去溶劑並將此殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(80mL)和氯仿(50mL)之間分配。分離有機層並將水層進一步用氯仿(3×50mL)萃取。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥並減壓除去溶劑得到黃色油狀物。此化合物在矽膠上通過急驟色譜進一步純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(88∶11∶1)作為流動相洗脫得到順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.93g，0.0021mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.18(s，1H)，4.71(m，1H)，2.38-1.9(m，13H)，2.17(s，3H)，1.63-1.5(m，4H)；TLC(二氯甲烷/三乙胺＝9∶1)Rf0.24和反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.38g，0.00086mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.18(s，1H)，4.55(m，1H)，2.38-1.9(m，15H)，2.15(s，3H)，1.42(m，2H)；TLC(二氯甲烷/三乙胺＝9∶1)Rf0.11。
順-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮二馬來酸鹽將苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲酮(中間體AL)(0.241g，0.00078mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AC)(0.30g，0.00068mol)、四(三苯基膦)鈀(0.047g，0.000041mol)和碳酸鈉(0.18g，0.0017mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(10mL)和水(5mL)的混合物中，在80℃下氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)和乙酸乙酯之間分配，分離有機層並將水層用乙酸乙酯再萃取兩次。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。減壓蒸發溶劑得到黃褐色固體，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(95∶4∶1)作為流動相洗脫得到順-{4-[4-氨基-1-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基)]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基-]-苯基}(苯基)甲酮，為白色固體(0.195g，0.0004mol)。其溶解於回流的乙醇(17mL)中並加入預熱的馬來酸(0.137g，0.0018mol)溶液。此混合物回流10分鐘，冷卻至室溫並過濾收集沉澱，用乙酸乙酯洗滌並乾燥得到順-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮二馬來酸鹽，為白色固體(0.221g，0.0003mol)1HNMR(DMSO-d6，400MHz)8.28(s，1H)，7.90(d，2H)，7.83(m，4H)，7.73(t，1H)，7.61(m，2H)，6.15(s，4H)，4.88(m，1H)，3.1(br，9H)，2.71(s，3H)，2.28(m，2H)，2.07(m，2H)，1.74(m，4H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.63min。MSMH+496。
反-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮二馬來酸鹽類似的方法用於反式異構體得到反-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮二馬來酸鹽，為白色固體(0.155g，0.0002mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.27(s，1H)，7.90(d，2H)，7.83(m，4H)，7.73(t，1H)，7.61(m，2H)，6.17(s，4H)，4.77(m，1H)，3.1(br，9H)，2.68(s，3H)，2.05(br，6H)，1.61(br，2H)RP-HPLC(Hypersil C18，5m，100A，25cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt12.59min。MSMH+496。
實施例18順-3-(4-苯氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三馬來酸鹽(化合物20)N-苯基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(中間體AE)將N，N-(4-溴苯基)-苯基胺(0.60g，0.0024mol)、乙硼烷頻哪醇酯(0.74g，0.0029mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.059g，0.000073mol)和醋酸鉀(0.71g，0.0073mol)在N，N-二甲基甲醯胺(25mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(50mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作為流動相，得到N-苯基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.33g，0.0011mol)1H NMR(DMSO-d6400MHz)8.42(s，1H)，7.51(d，2H)，7.27(m，2H)，7.12(d，2H)，7.01(d，2H)，6.83(t，1H)，1.27(s，12H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf0.54順-3-(4-苯氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三馬來酸鹽將N-苯基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(中間體AE)(0.33g，0.0011mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AC)(0.43g，0.00097mol)、四(三苯基膦)鈀(0.0067g，0.000058mol)和碳酸鈉(0.26g，0.0024mol)在乙二醇二甲基醚(16mL)和水(8mL)的混合物中在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)和乙酸乙酯(50mL)之間分配，分離有機層並將水層用乙酸乙酯再萃取兩次。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥並減壓蒸發得到黃褐色固體，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(92∶7∶1)作為流動相洗脫得到3-(4-苯氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.400g，0.00074mol)。其溶解於回流的乙醇(17mL)中並加入預熱的馬來酸(0.342g，0.003mol)的乙醇(8mL)溶液。將此混合物回流10分鐘，冷卻至室溫並過濾收集沉澱，用乙酸乙酯洗滌並乾燥得到順-3(4-苯氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三馬來酸鹽(0.44g，0.00053mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.45(s，1H)，8.23(s，1H)7.52(d，2H)，7.28(m，2H)，7.20(m，4H)，6.89(t，1H)，6.19(s，6H)，4.83(m，1H)，3.1(br，9H)，2.72(s，3H)，2.28(m，2H)，2.07(m，2H)，1.74(m，4H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.12min。MH+483。
實施例19順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽(化合物21)和反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺馬來酸鹽(化合物2 2)5-溴-2-苯氧基吡啶(中間體AF)將苯酚(1.99g，0.021mol)的N，N-二甲基甲醯胺(60mL)溶液冷卻至0℃並立即加入在石蠟中的氫化鈉(0.89g，0.022mol)的60％混懸液。此混合物在此溫度下攪拌10分鐘並立即加入2，4-二溴吡啶。此混合物升溫至室溫同時在氮氣氛下攪拌72小時並在70℃下加熱24小時。減壓除去溶劑；此殘餘物溶解於乙酸乙酯(150mL)中並飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)、鹽水(80mL)洗滌，用硫酸鎂乾燥並蒸發。殘餘物通過製備RP-LC/MS純化(Gilson-Micromass C18，5m，130A，21cm，0％-100％乙腈-0.1M醋酸銨在9分鐘內，25mL/min)得到2-溴-5-苯氧基吡啶，為黃色油狀物(1.40g，0.0056mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.28(s，1H)，8.07(d，1H)，7.45(t，2H)，7.25(t，1H)，7.16(d，2H)，7.04(d，1H)；MSMH+2502-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)吡啶(中間體AG)將5-溴-2-苯氧基吡啶(1.40g，0.0056mol)、乙硼烷頻哪醇酯(中間體AF)(1.71g，0.0067mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.137g，0.00017mol)和醋酸鉀(1.65g，0.0168mol)在N，N-二甲基甲醯胺(50mL)中的混合物在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(40mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶9)作為流動相，得到2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-吡啶，為白色固體(純度93％(HPLC)，1.20g，0.004mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.36(s，1H)，8.03(d，1H)，7.45(t，2H)，7.25(t，1H)，7.16(d，2H)，7.01(d，1H)，1.30(s，12H)；MSMH+2981-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AH)將2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)吡啶(中間體AG)(1.1g，0.0037mol)、1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-吲哚-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體N)(1.29g，0.0032mol)、四(三苯基膦)鈀(0.22g，0.00019mol)和碳酸鈉(0.85g，0.008mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(40mL)和水(20mL)的混合物中在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並將乙二醇二甲基醚減壓除去。通過過濾收集沉澱，用水洗滌1次，用乙腈洗滌2次，用乙醚洗滌2次，得到1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為米白色固體(1.03g，0.0023mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.36(s，1H)，8.24(s，1H)，8.03(d，1H)，7.45(t，2H)，7.22(m，3H)，7.16(d，1H)，4.81(m，1H)，3.93(s，4H)，2.24(m，2H)，1.88(m，6H)；MSMH+4454-[4-氨基-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(中間體AI)將1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AH)(1.00g，0.0022 mol)在丙酮(20mL)中研磨，並滴加5N鹽酸溶液。此混合物室溫下攪拌20小時並用飽和碳酸氫鈉溶液中和。通過過濾收集沉澱，用水洗滌兩次並乾燥得到4-[4-氨基-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮，為米白色固體(純度94％(HPLC)，0.90g，0.0022mol))1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.36(s，1H)，8.24(s，1H)，8.07(d，1H)，7.45(t，2H)，7.22(m，3H)，7.16(d，1H)，5.27(m，1H)，2.74(m，2H)，2.35(m，6H)；RP-HPLC(C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.29 min。
順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽和反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺馬來酸鹽將4-[4-氨基-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(中間體AI)(0.90g，0.0022mol)、N-甲基哌嗪(0.676g，0.0067mol)和乙酸(0.405g，0.0067mol)在1，2-二氯乙烷(40mL)中的混合物攪拌10分鐘，並立即加入三乙醯氧基硼氫化鈉(0.62g，0.0029mol)。將此混合物室溫下氮氣氛下攪拌24小時，並加入三乙醯氧基硼氫化鈉(0.30g，0.0014mol)。將此混合物再攪拌48小時，減壓除去溶劑並將此殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(80ml)和二氯甲烷(50mL)之間分配。分離有機層，並將水層用二氯甲烷再萃取兩次(50mL)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥並減壓除去溶劑得到黃色油狀物。此化合物在矽膠上通過急驟色譜進一步純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(89∶10∶1)作為流動相洗脫得到順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AJ)TLC(二氯甲烷/三乙胺＝9∶1)Rf0.29和反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺TLC(二氯甲烷/三乙胺＝9∶1)Rf0.14。
將順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AJ)(0.53g，0.0011mol)在乙酸乙酯(25mL)和乙醇(4mL)混合物中的溶液加熱回流並加入預熱的馬來酸(0.51g，0.0044mol)的乙酸乙酯(15mL)溶液。將此混合物再回流10分鐘，冷卻至室溫並過濾收集沉澱，用乙酸乙酯洗滌並乾燥得到順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽，為白色固體(0.61g，0.00084 mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.38(s，1H)，8.25(s，1H)，8.06(d，1H)，7.46(t，2H)，7.22(m，4H)，6.15(s，4H)，4.85(m，1H)，3.1(br，9H)，2.70(s，3H)，2.25(m，2H)，2.04(m，2H)，1.74(m，4H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.93 min。MSMH+485。
類似的方法用於反式異構體得到反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(6-苯氧基-3-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺馬來酸鹽，為白色固體(0.049g，0.00008mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.35(s，1H)，8.25(s，1H)，8.06(d，1H)，7.46(t，2H)，7.22(m，4H)，6.21(s，4H)，4.70(m，1H)，3.1(br，9H)，2.69(s，3H)，2.05(br，6H)，1.61(br，2H)RP-HPLC(Hypersil C18，5m，100A，25cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.40min。MSMH+485。
實施例20反-苄基-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸酯二馬來酸鹽(化合物23)苄基N-(4-溴-2-甲氧基苯基)氨基甲酸酯(中間體AM)將碳酸氫鈉(3.12g，0.0371mol)的水(35mL)溶液加入到4-溴-2-甲氧基苯胺(3.00g，0.0148mol)的二噁烷(50mL)溶液中。將所得混合物攪拌5分鐘並在3分鐘內滴加氯甲酸苄基酯(3.8g，0.022mol)。該反應混合物反應2小時，然後將二噁烷減壓除去並用乙酸乙酯兩次萃取水相(每次100mL)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥並在過濾後減壓濃縮。所得殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作為流動相，得到N-(4-溴-2-甲氧基苯基)氨基甲酸苄基酯(3.75g，0.011mol)，為白色固體1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.72(s，1H)，7.61(d，1H)，7.38(m，5H)，7.20(s，1H)，7.10(d，1H)，5.14(s，2H)，3.81(s，3H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf0.21N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸苄基酯(中間體AN)將N-(4-溴-2-甲氧基苯基)氨基甲酸苄基酯(中間體AM)(3.0g，0.0089mol)、乙硼烷頻哪醇酯(2.72g，0.0107mol)、[1，1′雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.219g，0.00027mol)和醋酸鉀(2.65g，0.027mol)在N，N-二甲基甲醯胺(70mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(70mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶9)作為流動相，得到N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸苄基酯(1.6g，0.0042mol)，為白色固體1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.66(s，1H)，7.80(d，1H)，7.38(m，5H)，7.25(d，1H)，7.17(s，1H)，5.15(s，2H)，3.81(s，3H)，1.29(s，12H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf0.13反-苄基N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並-[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸酯二馬來酸鹽將N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-苯基]氨基甲酸苄基酯(中間體AD)(1.26g，0.0033mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4胺(1.21g，0.0027mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.19g，0.00016mol)和碳酸鈉(0.726g，0.00685mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(40mL)和水(20mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)和乙酸乙酯(100mL)之間分配，分離有機層並將水層用乙酸乙酯再萃取兩次(每次600mL)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。減壓蒸發溶劑得到黃褐色固體，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(94∶5∶1)作為流動相洗脫得到反-N-({4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸苄基酯(中間體AO)，為白色固體(1.29g，0.0023mol)。將反-N-({4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸苄基酯(中間體AO)(0.222g，0.00039mol)溶解於回流的乙醇(17mL)中，並加入預熱的馬來酸(0.135g，0.00117mol)的乙醇(8mL)溶液。將此混合物回流10分鐘，冷卻至室溫並過濾收集沉澱，用乙酸乙酯洗滌並乾燥得到反-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}-氨基甲酸苄基酯二馬來酸鹽，為白色固體(0.250g，0.00031mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.76(s，1H)，8.23(s，1H)，7.89(d，1H)，7.40(m，5H)，7.20(m，2H)，6.15(s，4H)，5.18(s，2H)，4.69(m，1H)，3.87(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.86 min。
MSMH+570。
實施例21反-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}苯甲醯胺二馬來酸鹽(化合物24)3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AP)向攪拌的反-N-(4-4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基-2-甲氧基苯基)-氨基甲酸苄基酯(中間體AO)(0.95g，0.00167mol)的乙醇(35mL)溶液中，加入10％鈀碳(0.33g)並將所得混合物在一個大氣壓的氫氣中氫化18小時。通過硅藻土板過濾除去催化劑並將此濾液減壓濃縮得到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.71g，0.00164mol)RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.81 min。
MSMH+437。
反-N-(4-4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基-2-甲氧基苯基)苯甲醯胺二馬來酸鹽向攪拌的3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AP)(0.31g，0.00071mol)和苯甲醯基氯(0.105g，0.00075mol)的無水二氯甲烷(10mL)溶液中，在5分鐘內滴加N-乙基-N，N-二異丙基胺(0.11g，0.00085mol)。在氮氣氛下再繼續攪拌4小時，減壓除去溶劑並將此殘餘物在乙酸乙酯(30mL)和水(25mL)之間分配。將有機相用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮得到黃色油狀物，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(94∶5∶1)作為流動相洗脫得到反-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}苯甲醯胺，為白色固體(0.250g，0.00045mol)。其溶解於回流的乙醇(17mL)並加入預熱的馬來酸(0.155g，0.00133mol)的乙醇(8mL)溶液。此混合物回流10分鐘，冷卻至室溫並過濾收集沉澱，用乙酸乙酯洗滌並乾燥得到反-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}苯甲醯胺二馬來酸鹽，為白色固體(0.196g，0.000254mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)9.49(s，1H)，8.25(s，1H)，8.08(d，1H)，7.98(d，2H)，7.62(m，3H)，7.29(m，2H)，6.16(s，4H)，4.71(m，1H)，3.94(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.20min。
MSMH+571。
實施例22N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}-N′-苯基磺醯胺二馬來酸鹽(化合物25)在0℃，將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AP)(0.37g，0.00085mol)和三乙胺(0.086g，0.00085mol)懸浮於無水乙腈(15mL)中，並在5分鐘內滴加N-苯基氨磺醯基氯(0.88g，0.0046mol)的無水乙腈(15mL)溶液。此混合物在氮氣氛下升溫至室溫並攪拌2.5小時。減壓除去溶劑並將此殘餘物通過製備RP-HPLC純化(Rainin，Hypersil C18，8m，100A，25cm；5％-85％乙腈-0.1％醋酸銨，在20分鐘內，21ml/min)得到N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}-N′-苯基磺醯胺(0.1g，0.00017mol)。其溶解於回流的乙酸乙酯(17mL)並加入預熱的馬來酸(0.039g，0.00034mol)的乙酸乙酯(8mL)溶液。將此混合物回流10分鐘，冷卻至室溫並過濾收集沉澱，用乙酸乙酯洗滌並乾燥得到N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}-N′-苯基磺醯胺二馬來酸鹽，為白色固體(0.089g，0.00011mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)10.12(s，1H)，9.31(s，1H)，8.23(s，1H)，7.50(d，1H)，7.19(m，6H)，6.99(m，1H)，6.15(s，4H)，4.67(m，1H)，3.83(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.83 min。
MSMH+592。
實施例23順-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟二馬來酸鹽(化合物27)反式{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟二馬來酸鹽(化合物26)(4-溴苯基)(苯基)甲酮O-甲基肟(中間體AQ)將4-溴二苯酮(3.02g，0.0116mol)和甲氧基胺鹽酸鹽(4.83g，0.0578mol)的混合物在乙醇(90mL)和吡啶(18mL)的混合物中在氮氣氛下加熱回流2小時。減壓除去溶劑並將此殘餘物在水(150mL)和二氯甲烷(100mL)之間分配。水相進一步用二氯甲烷萃取兩次(各80mL)並將合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。減壓除去溶劑並將此殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作為流動相洗脫得到(4-溴苯基)(苯基)甲酮O-甲基肟，為無色油狀物(3.13g，0.0108mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)7.67(d，1H)，7.59(d，1H)，7.48(m，4H)，7.32(m，1H)，7.26(m，2H)，3.93(s，3H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf0.44苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲酮O-甲基肟(中間體AR)將(4-溴苯基)(苯基)甲酮O-甲基肟(中間體AQ)(2.41g，0.0083mol)、乙硼烷頻哪醇酯(2.53g，0.010mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.203g，0.00025mol)和醋酸鉀(2.44g，0.025mol)的混合物在N，N-二甲基甲醯胺(65mL)中在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(50mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作為流動相，得到苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲酮O-甲基肟(1.9g，0.0056mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)7.76(d，1H)，7.67(d，1H)，7.41(m，5H)，7.26(d，2H)，3.88(s，3H)1.30(s，12H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf0.27順-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟二馬來酸鹽將苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-甲酮O-甲基肟(中間體AQ)(0.701g，0.0021mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4胺(中間體AC)(0.80g，0.0018mol)、四(三苯基膦)鈀(0.125g，0.00011mol)和碳酸鈉(0.48g，0.0045mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(40mL)和水(20mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)和乙酸乙酯(100mL)之間分配，分離有機層並將水層用乙酸乙酯再萃取兩次(各自70mL)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。減壓蒸發溶劑得到黃褐色固體，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(96∶3∶1)作為流動相洗脫得到順-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟，為白色固體(0.700g，0.00133mol)。
將順-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟(0.201g，0.00039mol)溶解於回流的乙醇(17mL)並加入預熱的馬來酸(0.178g，0.0015mol)的乙醇(8mL)溶液。將此混合物回流10分鐘，冷卻至室溫並過濾收集沉澱，用乙酸乙酯洗滌並乾燥得到順-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟二馬來酸鹽，為白色固體(0.212g，0.00028mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz) 8.26(s，1H)，7.74(d，1H)，7.66(d，1H)，7.51(m，6H)，7.33(d，1H)，6.14(s，4H)，4.85(m，1H)，3.91(s，3H)3.1(br，9H)，2.71(s，3H)，2.33(m，2H)，2.07(m，2H)，1.74(m，4H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.25min。
MSMH+525。
反-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟二馬來酸鹽類似方法(c)用於反式異構體，以反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AD)(0.317g，0.00072mol)開始得到反-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基}(苯基)甲酮O-甲基肟二馬來酸鹽，為白色固體(0.255g，0.000337mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.25(s，1H)，7.75(d，1H)，7.66(d，1H)，7.51(m，6H)，7.33(d，1H)，6.17(s，4H)，4.71(m，1H)，3.91(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(br，6H)，1.59(br，2H)RP-HPLC(HypersilC18，5m，100A，25cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.10min。
MSMH+525。
實施例24反-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲酮肟二馬來酸鹽(化合物28)(4-溴苯基)(苯基)甲酮肟(中間體AS)將4-溴二苯酮(10.0g，0.0383mol)和羥基胺鹽酸鹽(13.3g，0.192mol)的混合物在乙醇(250mL)和吡啶(50mL)的混合物中在氮氣氛下加熱回流2小時。減壓除去溶劑並將此殘餘物在水(300mL)和二氯甲烷(300mL)之間分配。水相再用二氯甲烷萃取兩次(每次180mL)並將合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。減壓除去溶劑並將此殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶9)作為流動相洗脫得到(4-溴苯基)(苯基)甲酮肟，為白色固體(9.93g，0.036mol)1HNMR(DMSO-d6，400MHz)7.66(d，1H)，7.57(d，1H)，7.33(m，7H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.38；苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲酮肟(中間體AT)將(4-溴苯基)(苯基)甲酮肟(1.02g，0.0037mol)、乙硼烷頻哪醇酯(1.13g，0.0044mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.09g，0.00011mol)和醋酸鉀(1.09g，0.011mol)的混合物在N，N-二甲基甲醯胺(30mL)中在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(50mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶7)作為流動相，得到苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲酮肟(0.82g，0.00254mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)11.40(s，1H)，7.76(d，1H)，7.66(d，1H)，7.41(m，5H)，7.26(d，2H)，1.32(s，12H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.22反-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基}(苯基)甲酮肟二馬來酸鹽將苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲酮肟(0.357g，0.0011mol)、反式-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AD)(0.80g，0.00096mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.067g，0.00006mol)和碳酸鈉(0.26g，0.0024mol)在乙二醇二甲基醚(22mL)和水(11mL)的混合物中在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)和乙酸乙酯(50mL)之間分配，分離有機層並將水層用乙酸乙酯再萃取兩次(各40mL)。將合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。減壓蒸發溶劑得到黃褐色固體，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(93∶6∶1)作為流動相，得到反式-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基}(苯基)甲酮肟，為白色固體(0.211g，0.00041mol)。將其懸浮於回流的氯仿(17mL)中，並加入甲醇(4mL)，此時此混合物變得透明。加入預熱的馬來酸(0.096g，0.00082mol)的甲醇(8mL)溶液，並將此混合物回流10分鐘，冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將殘餘物懸浮於乙酸乙酯並通過過濾收集沉澱，用乙酸乙酯洗滌並乾燥得到反-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基-哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基}(苯基)甲酮肟二馬來酸鹽，為白色固體(0.295g，0.0004mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.26(s，1H)，7.75(d，1H)，7.65(d，1H)，7.51(m，6H)，7.33(d，1H)，6.14(s，4H)，4.72(m，1H)，3.1(b1，9H)，2.68(s，3H)，2.05(m，6H)，1.60(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min) Rt11.82 min。
MSMH+511。
實施例25反-1-{4-[4-氨基-3-(4-(1-苯基銨基)苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-環己基}-4-甲基六氫吡嗪二鎓三[(Z)-3-羧基-2-丙烯酸鹽](化合物29)與用於化合物20的方法類似，以反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AD)(0.33g，0.00075mol)開始，得到反-1-{4-[4-氨基-3-(4-(1-苯基銨基)苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-環己基}-4-甲基六氫吡嗪二鎓三[(Z)-3-羧基-2-丙烯酸鹽](0.245g，0.00034mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.43(s，1H)，8.22(s，1H)7.51(d，2H)，7.28(m，2H)，7.20(m，4H)，6.89(t，1H)，6.17(s，6H)，4.67(m，1H)，3.1(br，9H)，2.73(s，3H)，2.08(m，6H)，1.56(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.63 min。MH+483。
實施例26順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物30)5-溴-2-苯氧基嘧啶(中間體AU)將5-溴-2-氯嘧啶(5.00g，0.0259mol)、苯酚(3.16g，0.0336mol)、二苯並-18-冠-6(0.47g，0.0013mol)和研磨過的氫氧化鉀(3.51g，0.0626mol)在甲苯(75ml)中的混合物加熱回流5小時，共沸下除去水。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在水和氯仿之間分配。分層並將水相用氯仿萃取三次。合併的有機層用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用正庚烷/乙酸乙酯(98∶2)作為洗脫劑，得到5-溴-2-苯氧基-嘧啶，為白色固體(3.55g，0.0141mol)1H MNR(DMSO-d6，400MHz)8.80(s，2H)，7.45(t，2H)，7.27(t，1H)，7.22(d，2H)；TLC(正己烷/乙酸乙酯＝95∶5) Rf0.20；
2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)嘧啶(中間體AV)將5-溴-2-苯氧基-嘧啶(中間體AU)(3.00g，0.0119mol)、乙硼烷頻哪醇酯(3.64g，0.0143mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.29g，0.00036mol)和醋酸鉀(3.52g，0.0358mol)的混合物在N，N-二甲基甲醯胺(70mL)中在80℃下在氮氣氛下加熱過夜。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去大部分溶劑。將二氯甲烷(70ml)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到深色油狀物。殘餘物溶解於二氯甲烷(5mL)並加入到庚烷(75mL)中。將此混合物過濾，並將此沉澱在庚烷(75mL)成漿17小時。過濾並乾燥後，並真空乾燥，得到2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-嘧啶，為灰色固體(2.95g，0.00989mol)1H NMR(DMSO-d6400MHz)8.75(s，2H)，7.45(t，2H)，7.27(t，1H)，7.20(d，2H)，1.31(s，12H)；順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AW)將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AC)(0.297g，0.000674mol)、2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)嘧啶(中間體AV)(0.221g，0.000741mol)、碳酸鈉(0.179g，0.001684mol)在1，2-二甲氧基乙烷(10mL)和水(20mL)中的混合物，快速攪拌並加入四(三苯基膦)鈀(0)(0.047g，0.000040mol)。將該反應混合物在80℃下攪拌18小時。真空下除去溶劑並將此殘餘物在乙酸乙酯(50mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)之間分配。進行相分離並將水相用乙酸乙酯(3×25mL)萃取。合併的有機相用硫酸鎂乾燥，並真空下除去溶劑。產物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨(95∶5∶0.5)。真空下除去溶劑得到順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.185g，0.000381mol)1H NMR(DMSO-d6400MHz)8.79(s，2H)，8.24(s，1H)，7.48(t，2H)，7.28(t，1H)，7.27(d，2H)，4.81(m，1H)，1.55-2.56(m，20H)；TLC(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨＝90∶10∶0.5)Rf0.23。
順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽將順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AW)(0.193g，0.00040mol)在無水乙醇(15mL)中的溶液加熱回流。加入加熱至78℃的馬來酸(0.184g，0.00159mol)的無水乙醇(10mL)溶液並將此混合物加熱回流10分鐘。讓此混合物冷卻至室溫，並將所形成的白色沉澱通過過濾收集並用無水乙醇(2×10mL)洗滌。將此殘餘物真空下除去溶劑得到1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽，為白色固體(0.254g，0.00035mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.81(s，2H)，8.26(s，1H)，7.49(t，2H)，7.28(t，1H)，7，26(d，2H)，6.14(s，4H)，4.87(m，1H)，1.60-2.85(m，20H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.12 min。MSMH+486實施例27反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽(化合物31)反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AX)將反式3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AD)(0.300g，0.00068mol)、2-苯氧基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)嘧啶(中間體AV)(0.304g，0.00102mol)、碳酸鈉(0.180g，0.00170mol)在1，2-二甲氧基乙烷(10mL)和水(20mL)中的混合物，快速攪拌並加入四(三苯基膦)鈀(0)(0.047g，0.000040mol)。將該反應混合物在80℃下攪拌18小時。真空下除去溶劑並將此殘餘物在乙酸乙酯(50mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)之間分配。進行相分離並將水相用乙酸乙酯萃取(3×25mL)。合併的有機相用硫酸鎂乾燥，並真空下除去溶劑。產物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨(95∶5∶0.5)。真空下除去溶劑得到反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.155g，0.00032mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.78(s，2H)，8.25(s，1H)，7.48(t，2H)，7.28(t，1H)，7.27(d，2H)，4.65(m，1H)，1.44-2.36(m，20H)；TLC(二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨＝90∶10∶0.5)Rf0.33。
反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽(化合物31)將反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體AX)(0.155g，0.00032mol)的無水乙醇(15mL)溶液加熱回流。加入加熱至78℃的馬來酸(0.148g，0.000128mol)的無水乙醇(10mL)溶液，並將此混合物加熱回流10分鐘。讓此混合物冷卻至室溫，並將所形成的白色沉澱通過過濾收集並用無水乙醇(2×10mL)洗滌。將此殘餘物真空下除去溶劑得到反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(2-苯氧基-5-嘧啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽，為白色固體(0.082g，0.00011mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.78(s，2H)，8.26(s，1H)，7.48(t，2H)，7.28(t，1H)，7.26(d，2H)，4.70(m，1H)，1.50-3.00(m，20H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.83 min。MSMH+486實施例28順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(化合物32)2-苯氧基嘧啶(中間體AY)將5-氯嘧啶(5.00g，0.0437mol)、苯酚(5.38g，57.2mmol)、二苯並-18-冠-6(0.84g，0.0023mol)和研磨過的氫氧化鉀(5.92g，0.1055mol)在甲苯(75ml)的混合物加熱回流3小時，共沸下除去水。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在水和氯仿之間分配。分層並將水相用氯仿萃取三次。合併的有機層用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到2-苯氧基嘧啶，為白色粉末(95％純，4.56g，0.0265mol)1H NMR(CDCl3400MHz)8.57(d，2H)，7.43(t，2H)，7.26(t，1H)，7.20(d 2H)；TLC(正庚烷/乙酸乙酯＝1∶1)Rf0.422-(4-碘苯氧基)嘧啶(中間體AZ)將2-苯氧基嘧啶(中間體AY)(4.03g，0.0234mol)和N-碘代琥珀醯亞胺(10.52g，0.0468mol)在三氟乙酸(40mL)和三氟乙酸酐(8mL)中的混合物加熱回流4小時。將此混合物冷卻至室溫並加入水(75mL)。此混合物用50mL萃取三次。合併的有機層用飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)洗滌兩次，用10％硫代硫酸鈉水溶液(50mL)和鹽水(50mL)洗滌兩次。將此有機層用硫酸鎂乾燥，過濾並真空下除去溶劑。粗品固體在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用正庚烷/乙酸乙酯(3∶1)作為洗脫劑，得到2-(4-碘苯氧基)嘧啶，為淡黃色固體(3.49g，0.0117mol)1H NMR(CDCl3400MHz)8.57(d，2H)，7.73(d，2H)，7.07(t，1H)，6.98(d 2H)；TLC(正庚烷/乙酸乙酯＝1∶1)Rf0.452-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]嘧啶(中間體BA)將2-(4-碘苯氧基)嘧啶(中間體AZ)(3.50g，0.0118mol)、乙硼烷頻哪醇酯(3.58g，0.0141mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.29g，0.00035mol)和醋酸鉀(3.46g，0.00346mol)在N，N-二甲基甲醯胺(70ml)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱過夜。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去大部分溶劑。二氯甲烷(70ml)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到深色油狀物，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用正庚烷/乙酸乙酯(2∶1)作為洗脫劑，得到2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]嘧啶，為白色固體(2.95g，0.00989mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.65(d，2H)，7.74(d，2H)，7.29(t，1H)，7.20(d，2H)，1.31(s，12H)；
1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體BB)將1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體N)(1.50g，0.00374mol)、2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]-嘧啶(中間體BA)(1.23g，0.00412mol)、四(三苯基膦)鈀(0)(0.26g，0.00022mol)和碳酸鈉(0.993g，0.00937mol)在40mL 1，2-二甲氧基乙烷和20mL水中的混合物，在80℃下加熱18小時，之後再加入1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.15g，0.00037mol)。將此混合物再攪拌1小時，然後冷卻至室溫。過濾此沉澱並用1，2-二甲氧基乙烷洗滌，並真空乾燥，得到1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(1.26g，0.00283mol)1H NMR(DMSO-d6400MHz)8.68(d，2H)，8.254(s，1H)，7.73(d，2H)，7.37(d，2H)，7.31(t，1H)，6.30-7.20(bs，2H)，4.78-4.84(m，1H)，3.91(s，4H)，2.22-2.30(m，2H)，1.73-1.92(m，6H)；4-{4-氨基-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}環己酮(中間體BC)將1-(1，4-二氧雜螺[4.5]癸烷-8-基)-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體BB)(1.22g，0.00274mol)在丙酮中的漿狀物冷卻至0℃，並滴加5N鹽酸(15mL)，保持溫度低於5℃。加畢，將此混合物室溫下攪拌3小時。將此溶液通過硅藻土過濾並用飽和碳酸氫鈉水溶液中和。過濾所形成的沉澱，用水洗滌並真空乾燥過夜，得到4-{-4-氨基-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}-環己酮，為白色固體(0.937g，0.00243mol)1H NMR(DMSO-d6400MHz)8.68(d，2H)，8.29(s，1H)，7.56(d，2H)，7.37(d，2H)，7.31(t，1H)，6.30-7.20(bs，2H)，5.25-5.30(m，1H)，2.67-2.75(m，2H)，2.24-2.43(m，6H)；順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體BD)將4-{4-氨基-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]-嘧啶-1-基}-1-環己酮(中間體BC)(0.925g，0.0024mol)、N-甲基哌嗪(0.721g，0.0072mol)和乙酸(0.432g，0.0072mol)在二氯甲烷(40mL)中的混合物，快速攪拌並以30分鐘的間隔分2批加入三乙醯氧基硼氫化鈉(0.661g，0.00312mol)。將該反應混合物室溫下攪拌18小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉(0.300g，0.00142mol)並將此混合物再攪拌4小時。真空下除去溶劑並將此殘餘物在二氯甲烷(25mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。進行相分離並用二氯甲烷將水相萃取3次(25mL)。合併的有機相用硫酸鎂乾燥，並真空下除去溶劑。將順-和反式異構體在矽膠上通過急驟色譜進行分離，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(87∶10∶3)洗脫。從反式1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基1-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺餾份中真空下除去溶劑(TLC(二氯甲烷/三乙胺/甲醇＝90∶8∶2)Rf0.45)，並將此殘餘物溶解於二氯甲烷並用1.0M碳酸鈉水溶液萃取兩次。將有機相用硫酸鎂乾燥，過濾並真空下除去溶劑得到反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.272g，0.00056mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.68(d，2H)，8.25(s，1H)，7.73(d，2H)，7.39(d，2H)，7.31(t，1H)，6.30-6.20(bs，2H)，4.79-4.84(m，1H)，2.06-2.75(m，12H)，2.24-2.43(m，4H)；順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三馬來酸鹽將順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)-苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體BD)(0.193g，0.0004mol)的無水乙醇(15mL)溶液加熱回流。加入加熱至78℃的馬來酸(0.184g，0.00159mol)的無水乙醇(10mL)溶液並將此混合物加熱回流10分鐘。讓此混合物冷卻至室溫，並將所形成的白色沉澱通過過濾收集並用無水乙醇(2×10mL)洗滌。將此殘餘物真空下除去溶劑得到順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三馬來酸鹽，為白色固體(0.222g，0.00027mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.68(d，2H)，8.26(s，1H)，7.72(d，2H)，7.39(d，2H)，7.32(t，1H)，6.17(s，6H)，4.85-4.87(m，1H)，3.85-2.85(br，9H)，2.71(s，3H)，2.23-2.43(bs，2H)，2.03-2.18(bs，2H)，1.71-2.89(bs，4H)RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.56 min。
MSMH+486反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(中間體BE)用類似的方法，以反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.06g，0.000124mol)開始，得到反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-嘧啶基氧基)-苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽(化合物33)，為白色固體(0.06g，0.000084mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.68(d，2H)，8.25(s，1H)，7.71(d，2H)，7.37(d，2H)，7.31(t，1H)，6.18(s，4H)，4.71(m，1H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)2.06(m，6H)1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.45min。
MSMH+486實施例29向一系列5ml蓋著隔膜的小瓶中，加入3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基甲基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(300mg，0.776mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(247mg，1.16mmol)和適當的醛或酮(0.85mmol)。依次加入二氯乙烷(5mL)和冰醋酸(50μl，0.87mmol)。將小瓶蓋上並在軌道式震動器上搖動過夜。該反應混合物的HPLC表明對於一些反應，仍存在一些起始的胺。對這些反應，再加入醛或酮(0.85mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(247mg，1.16mmol)和冰醋酸(50μL)並將所得混合物再次搖動過夜。加入水(2mL)，接著加入過量的固體碳酸氫鈉，直到沒有氣體放出。通過將此混合物通過3MEmpore萃取圓盤柱(Octadecyl C18 SD)，移出水層。粗品用Supelco′s超淨(supelclean)矽膠固相柱(10g大小)純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作為洗脫劑，得到適當的產物。
分析LC/MS條件柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH 4.5)，3.5mL/min。LCMS數據詳述如下實施例30順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺a)(4-溴苯基)(苯基)甲胺將甲酸銨(20.1g，0.318mol)置於裝備有溫度控制器、磁力攪拌器和冷凝器的三頸燒瓶中，並在150℃下加熱。立即加入4-溴二苯酮(7.2g，0.0276mol)，將溫度升高到165℃並將此混合物攪拌加熱回流24小時。將該反應混合物冷卻至室溫，在乙酸乙酯(350mL)中研磨，用炭處理並通過硅藻土板過濾。濃縮此濾液，懸浮於濃鹽酸(120mL)並加熱回流8小時。該反應混合物冷卻至室溫並通過過濾收集沉澱。將其在水(120mL)中研磨，用飽和碳酸氫鈉水溶液鹼化並用乙酸乙酯(2×250mL)萃取。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮得到(4-溴苯基)(苯基)甲胺(5.25g，0.02mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.46(d，2H)，7.36(m，4H)，7.27(t，2H)，7.18(t，1H)，5.07(s，1H)。RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.54min。
b)N-[(4-溴苯基)(苯基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯將二-叔丁基-二碳酸酯(5.63g，0.0258mol)溶解於無水二氯甲烷(150mL)中，冷卻至0℃並滴加(4-溴苯基)(苯基)甲胺(5.2g，0.0198mol)的無水二氯甲烷(30mL)溶液。將此混合物升溫至室溫並在氮氣氛下攪拌16小時。有機相用碳酸氫鈉水溶液(120mL)洗滌，用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作為流動相，得到N-[(4-溴苯基)(苯基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯(5.9g，0.0163mol)，為無色油狀物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.01(d，1H)，7.51(d，2H)，7.36(m，7H)，5.81(d，1H)，1.39(s，9H)。TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf0.24c)N-{苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲基}氨基甲酸叔丁基酯將N-[(4-溴苯基)(苯基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯(4.5g，0.0123mol)、乙硼烷頻哪醇酯(3.79g，0.0149mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)的複合物與二氯甲烷(1∶1)(0.305g，0.000373mol)和醋酸鉀(3.66g，0.0373mol)在N，N-二甲基甲醯胺(80mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(80mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶9)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到N-{苯基-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲基}氨基甲酸叔丁基酯(3.0g，0.00733mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.01(d，1H)，7.61(d，2H)，7.33(d，2H)，7.28(m，5H)，5.81(d，1H)，1.39(s，9H)，1.27(s，12H)。TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.34；d)順-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯將N-{苯基[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]甲基}氨基甲酸叔丁基酯(3.0g，0.00733mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.4g，0.0054mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.381g，0.00033mol)和碳酸鈉一水合物(1.69g，0.0136mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(80mL)和水(40mL)的混合物中在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(200mL)和乙酸乙酯(200mL)之間分配，分離有機層並將水層用乙酸乙酯再萃取兩次(各100mL)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。減壓蒸發溶劑得到黃褐色固體，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(96∶3∶1)作為流動相洗脫，得到順-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)-甲基]氨基甲酸叔丁基酯(2.24g，0.00375mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，8.01(d，1H)，7.60(d，2H)，7.49(d，2H)，7.35(m，4H)，7.23(t，1H)，5.91(d，4H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，9H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，1.42(m，4H)，1.40(s，9H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.45 min。
e)順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將順-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]氨基甲酸叔丁基酯(2.05g，0.00344mol)在無水二氯甲烷(50mL)中研磨，並將該反應混合物冷卻至0℃。滴加三氟乙酸(10mL)並將所得溶液升溫至室溫並在氮氣氛下攪拌一個半小時。減壓除去溶劑，殘餘物懸浮於水(50mL)並用飽和碳酸氫鈉水溶液鹼化。將其用二氯甲烷萃取(3×150mL)，合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥並減壓除去溶劑得到順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-{4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.60g，0.00322mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.57(m，4H)，7.45(d，2H)，7.31(dd，2H)，7.20(t，1H)，5.17(s，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.36 min。
f)順-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]乙醯胺二乙酸鹽將順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)溶解於無水吡啶(1mL)中，加入乙酸酐(0.010g，0.0001mol)，並將所得溶液室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]乙醯胺二乙酸鹽(0.015g，0.000021mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.84(d，1H)，8.23(s，1H)，7.62(d，2H)，7.46(d，2H)，7.35(m，4H)，7.28(m，1H)，6.21(d，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.95(s，3H)，1.90(s，6H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.15 min。
MSMH+539。
實施例31順-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]苯甲醯胺二乙酸鹽將順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)溶解於無水吡啶(1mL)，加入苯甲醯基氯(0.014g，0.0001mol)並將所得溶液室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]苯甲醯胺二乙酸鹽(0.017g，0.000024mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.32(d，1H)，8.23(s，1H)，7.96(d，2H)，7.62(d，2H)，7.58-7.29(b，10H)，6.51(d，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.90(s，6H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.53 min。
MSMH+601。
實施例32順-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]甲烷磺醯胺將順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)溶解於無水吡啶(1mL)，加入甲烷磺醯基氯(0.011g，0.0001mol)並將所得溶液室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N-[(4{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]甲烷磺醯胺二乙酸鹽(0.021g，0.00003mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.39(d，1H)，8.23(s，1H)，7.65(d，2H)，7.57(d，2H)，7.47(d，2H)，7.37(t，2H)，7.27(t，1H)，5.72(d，1H)，4.78(m，1H)，2.70(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.90(s，6H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.81 min。
MSMH+575。
實施例33順-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-1-苯磺醯胺乙酸鹽將順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)溶解於無水吡啶(1mL)，加入苯磺醯基氯(0.018g，0.0001mol)並將所得溶液室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-1-苯磺醯胺乙酸鹽(0.045g，0.000065mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.89(d，1H)，8.23(s，1H)，7.65(d，2H)，7.57-7.27(br，12H)，5.66(d，1H)，4.78(m，1H)，2.70(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.90(s，3H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.78min。
MSMH+637。
實施例34順-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-3-羥基丁醯胺乙酸鹽將順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)和β-丁內酯(0.009g，0.0001mol)在二噁烷中加熱回流3小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸銨在25分鐘內，21mL/min)得到順-N1-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-3-羥基丁醯胺乙酸鹽(0.027g，0.000042mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.78(d，1H)，8.23(s，1H)，7.62(d，2H)，7.45(d，2H)，7.35(m，4H)，7.27(t，1H)，6.21(d，1H)，4.78(m，1H)，4.67(d，1H)，4.02(m，1H)，2.5-2.1(br，15H)，2.17(s，3H)，1.90(s，3H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)，1.07(d，3H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.97和11.13 min。
MSMH+583。
實施例35順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醯胺a)4-(4-溴苯氧基)苄腈將4-溴苯酚(4.56g，0.0264mol)、4-氟苄腈(0.0264mol)、18-冠-6(0.7g，0.00264mol)和40％在氧化鋁上的氟化鉀(10.8g)在無水乙腈(100mL)的混合物，在氮氣氛下加熱回流12小時。將其冷卻至室溫，通過硅藻土板過濾並減壓濃縮。殘餘物在乙醚(120mL)和水(100mL)之間分配，有機相進一步用氯化鉀飽和水溶液洗滌，用硫酸鎂乾燥並濃縮。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(3∶97)作為流動相，得到4-(4-溴苯氧基)苄腈(3.7g，0.0135mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.85(d，2H)，7.64(d，2H)，7.13(dd，4H)，TLC(乙酸乙酯/庚烷3∶97)Rf0.21b)4-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]苄腈將4-(4-溴苯氧基)苄腈(4.55g，0.0166mol)、乙硼烷頻哪醇酯(5.06g，0.020mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.407g，0.000498mol)和醋酸鉀(4.88g，0.0498mol)在N，N-二.甲基甲醯胺(90mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(120mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作為流動相。將合併的餾份減壓濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到4-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]苄腈(2.75g，0.0086mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.85(d，2H)，7.64(d，2H)，7.13(dd，4H)，1.28(s，12H)，TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.63c)順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈將4-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]苄腈(2.63g，0.00819mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.01g，0.00683mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.473g，0.00041mol)和碳酸鈉一水合物(2.12g，0.0171mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(80mL)和水(40mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(200mL)和乙酸乙酯(200mL)之間分配，分離有機層並將水層用乙酸乙酯再萃取兩次(各100mL)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。減壓蒸發溶劑得到黃褐色固體，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(96∶3∶1)作為流動相洗脫得到順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(2.45g，0.00483mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.87(d，2H)，7.71(d，2H)，7.30(d，2H)，7.25(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.04 min。
d)順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醯胺將順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.200g，0.000394mol)溶解於二噁烷(3mL)，加入氫氧化鈉(0.15g，0.00197mol)的水(2mL)溶液，接著加入30％過氧化氫水溶液(5滴)。該反應混合物在氮氣氛下加熱回流1.5小時，冷卻至室溫並用5％枸櫞酸水溶液中和。減壓除去溶劑並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醯胺(0.120g，0.000223mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.93(m，3H)，7.68(d，2H)，7.30(s，1H)，7.24(d，2H)，7.15(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta PakC18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.87 min。
MSMH+527。
實施例36順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酸將順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.200g，0.000394mol)溶解於乙酸(15mL)和6N鹽酸(15mL)的混合物中，並將此溶液加熱回流12小時。將其冷卻至室溫並減壓濃縮並將此殘餘物用N，N-二甲基甲醯胺重結晶得到順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酸(0.100g，0.00019mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.97(d，2H)，7.70(d，2H)，7.24(d，2H)，7.15(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.95 min。
MSMH+528。
實施例37順-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]乙醯胺乙酸鹽a)順-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.600g，0.00118mol)溶解於甲醇(50mL)和濃氫氧化銨水溶液(3mL)中，加入50％的阮內鎳在水(2mL)中的漿狀物，並將所得混合物在一個大氣壓下氫化18小時。該反應混合物通過硅藻土板過濾，減壓濃縮並將此殘餘物用二氯甲烷(50mL)浸提。將有機相用硫酸鎂乾燥，減壓濃縮並將此殘餘物懸浮於乙醚(25mL)中。過濾收集此沉澱並乾燥得到順-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.45g，0.0088mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.39(d，2H)，7.12(d，2H)，7.08(d，2H)，4.78(m，1H)，3.73(s，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.72 min.
b)順-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]乙醯胺乙酸鹽將順-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.051g，0.0001mol)溶解於無水吡啶(1mL)，加入乙酸酐(0.010g，0.0001mol)並將所得溶液室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]乙醯胺乙酸鹽(0.046g，0.0000749mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.38(t，1H)，8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.31(d，2H)，7.12(d，2H)，7.08(d，2H)，4.78(m，1H)，4.25(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.87(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.33 min。
MSMH+555。
實施例38順-N-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]甲烷磺醯胺乙酸鹽將順-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.051g，0.0001 mol)溶解於無水吡啶(1mL)，加入甲烷磺醯基氯(0.011g，0.0001mol)並將所得溶液室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N-[4(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]甲烷磺醯胺乙酸鹽(0.011g，0.000017mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.64(d，2H)，7.57(t，1H)，7.40(d，2H)，7.13(m，4H)，4.78(m，1H)，4.17(d，2H)，2.89(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.97 min。
MSMH+591。
製備順-3-{4-[3-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺及其衍生物的方法與製備順-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺及其衍生物的方法相同，其中使用適當的起始物。
實施例39
順-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醯胺二乙酸鹽a)3-(4-溴苯氧基)苄腈1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.59(m，5H)，7.38(m，1H)，7.06(d，2H)，TLC(乙酸乙酯/庚烷3∶97)Rf0.19b)3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]苄腈1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.65(m，5H)，7.41(m，1H)，7.06(d，2H)，1.27(s，12H)TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.56c)順-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.68(d，2H)，7.61(m，3H)，7.47(m，1H)，7.25(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.96 min。
d)順-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醯胺二乙酸鹽1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，8.02(s，1H)，7.68(m，3H)，7.60(s，1H)，7.50(t，1H)，7.44(s，1H)，7.27(m，1H)，7.15(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s.6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.99min。
MSMH+527。
實施例40順-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲酸1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.75(d，1H)，7.68(d，2H)，7..56(m，2H)，7.39(m，1H)，7.20(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.01 min。
MSMH+528。
實施例41順-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]乙醯胺乙酸鹽a)順-3-{4-[3-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.38(m，1H)，7.15(m，4H)，6.96(d，1H)，4.78(m，1H)，3.73(s，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.32 min。
b)順-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]乙醯胺乙酸鹽1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.38(t，1H)，8.23(s，1H)，7.65(d，2H)，7.36(t，1H)，7.15(d，2H)，7.07(d，1H)，7.00(m，2H)，4.78(m，1H)，4.25(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.87(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.44 min。
MSMH+555。
實施例42順-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]苯甲醯胺1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(t，1H)，8.23(s，1H)，7.86(d，2H)，7.63(d，2H)，7.48(m，4H)，7.10(m，5H)，4.78(m，1H)，4.49(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.58 min。
MSMH+617。
實施例43順-N-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]甲烷磺醯胺乙酸鹽1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.64(d，2H)，7.58(t，1H)，7.42(t，1H)，7.16(m，3H)，7.12(s，1H)，7.03(d，1H)，4.78(m，1H)，4.17(d，2H)，2.89(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.12 min。
MSMH+591實施例44順-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並-[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸苄基酯二馬來酸鹽將N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-苯基]氨基甲酸苄基酯(2.00g，0.0052mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.92g，0.0044mol)、四(三苯基膦)鈀(0.300g，0.00026mol)和碳酸鈉(1.35g，0.0109mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(70mL)和水(35mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(150mL)和乙酸乙酯(180mL)之間分配，分離有機層並將水層用乙酸乙酯再萃取兩次(各250mL)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。減壓蒸發溶劑得到黃褐色固體，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(96∶3∶1)作為流動相洗脫得到順-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}氨基甲酸苄基酯，為白色固體(1.88g，0.0023mol)。將順-N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸苄基酯(0.206g，0.00036mol)溶解於回流的乙醇(17mL)中並加入預熱的馬來酸(0.126g，0.00108mol)的乙醇(8mL)溶液。將此混合物回流10分鐘，冷卻至室溫並過濾收集沉澱，用乙酸乙酯洗滌並乾燥得到順-苄基N-{4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基}-氨基甲酸酯二馬來酸鹽，為白色固體(0.224g，0.00028mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.76(s，1H)，8.23(s，1H)，7.89(d，1H)，7.40(m，5H)，7.20(m，2H)，6.15(s，4H)，5.18(s，2H)，4.85(m，1H)，3.87(s，3H)，3.1(br，11H)，2.67(s，3H)，2.05(m，2H)，1.57(m，4H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.83 min。
MSMH+571。
實施例45順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-N′-苄基脲乙酸鹽將順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.082g，0.000188mol)溶解於無水吡啶(1mL)，加入異氰酸苄基酯(0.025g，0.000188mol)並將所得溶液室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-N』-苄基脲乙酸鹽(0.009g，0.0000142mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.29(d，1H)，8.18(m，2H)，7.33(m，5H)，7.26(t，1H)，7.19(s，1H)，7.13(d，1H)，4.78(m，1H)，4.33(d，2H)，3.91(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.90(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.35 min。
MSMH+570。
將順-或反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺還原烷基化的總方法步驟A將順-或反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(或者只是順或反式)(1當量)、醛(1當量)、三乙醯氧基硼氫化鈉(3.4當量)和乙酸(3.4當量)的混合物在無水1，2-二氯乙烷中攪拌16小時。將此反應混合物減壓濃縮，用飽和碳酸氫鈉水溶液停止反應，並再次濃縮。將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到所需的產物。
步驟B合成和純化(方法A)後，將此殘餘物用二氯甲烷(1mL)浸提，加樣到Trikonex柱(7cm)上並用二氯甲烷(5mL)洗脫。切下需要的帶(UV-檢測)並將此化合物用二氯甲烷∶甲醇∶三乙胺＝90∶5∶5的混合物(10mL)萃取，過濾並將此濾液減壓濃縮。殘餘物懸浮於乙醚(4mL)並過濾收集此沉澱並乾燥。
實施例46順-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽步驟A1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.34(m，4H)，7.22(t，1H)，7.06(s，1H)，6.99(d，1H)，6.55(d，1H)，5.90(t，1H)，4.78(m，1H)，4.40(d，2H)，3.88(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.81 min。
MSMH+527。
實施例47順-3-(3-甲氧基-4-[4-(三氟甲基)苄基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟A1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.69(d，2H)，7.59(d，2H)，7.06(s，1H)，6.99(d，1H)，6.49(d，1H)，6.14(t，1H)，4.78(m，1H)，4.50(d，2H)，3.88(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.50 min。
MSMH+595。
實施例48順-3-{4-[(1H-4-咪唑基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽步驟A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.85(br，1H)，8.19(s，1H)，7.59(s，1H)，7.06(br，3H)，6.77(d，1H)，5.30(br，1H)，4.78(m，1H)，4.24(d，2H)，3.88(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.70 min。
MSMH+517。
實施例49反-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽反-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺按照步驟A進行製備。將反-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.190g，0.00036mol)溶解於乙醇(20mL)中並將此溶液加熱回流。立即加入馬來酸(0.126g，0.00108mol)溶液並再繼續回流10分鐘。將該反應混合物冷卻至室溫，此沉澱通過過濾收集並乾燥。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.34(m，4H)，7.22(t，1H)，7.06(s，1H)，6.99(d，1H)，6.55(d，1H)，6.16(d，4H)，4.68(m，1H)，4.40(d，2H)，3.88(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.89min。
MSMH+527。
實施例50反-3-{4-[(2，6-二甲氧基苄基)氨基]-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟A
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.25(t，1H)，7.09(d，1H)，7.02(s，1H)，6.92(d，1H)，6.69(d，2H)，4.68(m，1H)，4.60(t，1H)，4.31(d，2H)，3.83(m，9H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.87min。
MSMH+587。
實施例51反-3-{4-[(2-氯-6-氟苄基)氨基]-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟A1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.39(m，2H)，7.26(t，1H)，7.10(d，1H)，7.02(s，1H)，6.86(d，1H)，5.21(t，1H)，4.68(m，1H)，4.31(d，2H)，3.83(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.23min。
MSMH+579。
還原烷基化中間體順-和反-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺a)N-(4-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯將二-叔丁基-二碳酸酯(16.5g，0.0756mol)溶解於無水二氯甲烷(150mL)，冷卻至0℃並滴加4-溴苯胺(9.75g，0.0567mol)的無水二氯甲烷(50mL)溶液。將此混合物升溫至室溫並在氮氣氛下攪拌16小時。有機相用碳酸氫鈉飽和水溶液洗滌(120mL)，用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(3∶97)作為流動相，得到N-[(4-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯(7.1g，0.0257mol)，為無色油狀物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.49(s，1H)，7.42(s，4H)1.47(s，9H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.74b)N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯將N-[(4-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯(5.95g，0.0219mol)、乙硼烷頻哪醇酯(6.67g，0.0263mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.536g，0.00066mol)和醋酸鉀(6.47g，0.066mol)在N，N-二甲基甲醯胺(120mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(100mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(6.0g，0.0188mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.50(s，1H)，7.55(d，2H)，7.46(d，2H)，1.47(s，9H)，1.27(s，12H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.56c)順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯將N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(3.71g，0.0116mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(4.46g，0.0101mol)、四(三苯基膦)鈀(0.700g，0.00061 mol)和碳酸鈉一水合物(3.13g，0.0253mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(140mL)和水(70mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(300mL)和乙酸乙酯(300mL)之間分配，分離有機層並將水層用乙酸乙酯再萃取兩次(各150mL)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。減壓蒸發溶劑得到黃褐色固體，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用二氯甲烷/三乙胺/甲醇(95∶4∶1)作為流動相洗脫得到順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.1g，0.0081mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.57(s，1H)，8.21(s，1H)，7.63(d，2H)，7.52(d，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，9H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，1.50(s，9H)，1.42(m，4H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.41 min。
順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.0g，0.0079mol)在無水二氯甲烷(75mL)中研磨並將該反應混合物冷卻至0℃。滴加三氟乙酸(10mL)並將所得溶液升溫至室溫，並在氮氣氛下攪拌1.5小時。減壓除去溶劑，殘餘物懸浮於水(70mL)並用飽和碳酸氫鈉水溶液鹼化。將其用二氯甲烷(3×150mL)萃取，合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥並減壓除去溶劑得到順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.0g，0.00739mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.18(s，1H)，7.30(d，2H)，6.71(d，2H)，5.41(s，2H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.64 min。
通過類似於順-3-(4-氨基苯基)-1-[4(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的路線，製備反-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。
反-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.30(d，2H)，6.69(d，2H)，5.40(s，2H)，4.60(m，1H)，4.40(d，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.50(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.32min。
將順-或反-3-(4-氨基-苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺還原烷基化的一般方法步驟C將順-或反-3-(4-氨基-苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(或者是中間體...或者...)(1當量)、醛(1當量)、三乙醯氧基硼氫化鈉(3.4當量)和乙酸(3.4當量)的混合物，在無水1，2-二氯乙烷中攪拌16小時。將該反應混合物減壓濃縮，用飽和碳酸氫鈉水溶液停止反應並再次濃縮。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到所需產物。
步驟D合成和純化(步驟C)後，將殘餘物用二氯甲烷浸提(1mL)，加樣到Trikonex柱(7cm)上並用二氯甲烷(5mL)洗脫。切下所需譜帶(UV-檢測)並將此化合物用二氯甲烷∶甲醇∶三乙胺＝90∶5∶5(10mL)的混合物萃取，過濾並將此濾液減壓濃縮。殘餘物懸浮於乙醚(4mL)並過濾收集此沉澱並乾燥。
實施例52順-3-[4-(苄基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.34(m，6H)，7.26(t，1H)，6.74(d，1H)，6.62(t，1H)，4.78(m，1H)，4.35(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.10 min。
MSMH+497。
實施例53順-3-{4-[(2-甲基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環-己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.37(m，3H)，7.18(m，3H)，6.75(d，2H)，6.43(t，1H)，4.76(m，1H)，4.28(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.35(s，3H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.25 min。
MSMH+511。
實施例54順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(4-[2-(三氟甲基)苄基]氨基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.76(d，1H)，7.64(d，2H)，7.48(t，1H)，7.36(d，2H)，6.75(t，1H)，6.69(d，2H)，4.76(m，1H)，4.52(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.95 min。
MSMH+565。
實施例55順-3-{4-[(2-氯苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺步驟D1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.38(m，6H)，6.74(d，2H)，6.55(t，1H)，4.76(m，1H)，4.39(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.43 min。
MSMH+531。
實施例56順-3-{4-[(2-溴苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺步驟D1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.68(d，1H)，7.38(m，4H)，7.20(t，1H)，6.70(m，3H)，4.76(m，1H)，4.39(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.76 min。
MSMH+576。
實施例57順-3-{4-[(2-乙氧基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺步驟D1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.34(d，2H)，7.29(s，1H)，7.20(t，1H)，6.99(d，1H)，6.88(t，1H)，6.72(d，2H)，6.42(t，1H)，4.76(m，1H)，4.30(d，2H)，4.12(q，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)，1.38(t，3H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.71 min。
MSMH+541。
實施例58順-3-(4-[2-(二氟甲氧基)苄基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺步驟D1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.33(m，7H)，6.83(d，2H)，6.62(t，1H)4.76(m，1H)，4.38(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.25min。
MSMH+563。
實施例59順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(4-[2-(三氟甲氧基)苄基]氨基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.62(d，1H)，7.38(m，4H)，6.73(d，2H)，6.64(t，1H)，4.76(m，1H)，4.40(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.33min。
MSMH+581。
實施例60順-2-[2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苯氧基-1-乙醇二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.32(m，3H)，7.21(t，1H)，7.00(d，1H)，6.90(t，1H)，6.74(d，2H)，6.42(t，1H)，4.76(m，1H)，4.33(d，2H)，4.07(t，2H)，3.78(t，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.08min。
MSMH+557。
實施例61順-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苄腈二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.86(d，1H)，7.69(t，1H)，7.59(d，1H)，7.47(t，1H)，7.37(d，2H)，6.73(m，3H)，4.76(m，1H)，4.53(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.72min。
MSMH+522。
實施例62順-3-{4-[(2，6-二氟苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.40(m，3H)，7.17(dd，2H)，6.82(d，2H)，6.38(t，1H)，4.78(m，1H)，4.33(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.59 min。
MSMH+533。
實施例63順-3-4-[(2-氯-6-氟苄基)氨基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.41(m，4H)，7.30(t，1H)，6.84(d，2H)，6.29(t，1H)，4.76(m，1H)，4.38(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.36min。
MSMH+549。
實施例64順-3-(4-[2-氟-6-(三氟甲基)苄基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺步驟D1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.67(m，3H)，7.39(m，2H)，6.84(d，2H)，6.18(t，1H)，4.76(m，1H)，4.38(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.02min。
MSMH+583。
實施例65順-3-{4-[(2-氟-6-甲氧基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽a)2-氟-6-甲氧基苯甲醛將3-氟茴香醚(3.36g，0.0266mol)的無水四氫呋喃溶液冷卻至-78℃，並滴加1.4M正丁基鋰的己烷溶液(19mL，0.0266mol)，保持該反應混合物溫度低於-75℃。加畢，滴加N，N，N′，N′，N″-五甲基二亞乙基三胺，並在-78℃下在氮氣氛下繼續攪拌2小時。滴加N，N-二甲基甲醯胺(3.89g，0.0532mol)並將該反應混合物緩慢升溫同時攪拌半小時。通過滴加1N鹽水停止反應並分層。水相進一步用乙酸乙酯(2×150mL)萃取並將合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。有機相減壓濃縮並將此殘餘物在正庚烷中研磨。過濾收集此沉澱並乾燥得到2-氟-6甲氧基苯甲醛(2.95g，0.0191mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.31(s，1H)，7.66(dd，1H)，7.06(d，1H)，6.89(dd，1H)，3.92(s，3H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf0.24b)順-3-{4-[(2-氟-6-甲氧基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.35(m，3H)，6.90(m，4H)，6.08(t，1H)，4.76(m，1H)，4.25(d，2H)，3.87(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.84min。
MSMH+550。
實施例66順-3-4-[(2，6-二氯苄基)氨基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺步驟D1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.54(d，2H)，7.39(m，3H)，6.84(d，2H)，6.18(t，1H)，4.76(m，1H)，4.44(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.20min。
MSMH+566。
實施例67順-3-{4-[(2，6-二甲氧基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.34(d，2H)，7.26(t，1H)，6.82(d，2H)，6.69(d，2H)，5.75(t，1H)，4.78(m，1H)，4.22(d，2H)，3.82(s，6H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.01min。
MSMH+557。
實施例68順-3-{4-[(2-氟-4-甲基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽a)2-氟-4-甲基苯甲醛將3-氟甲苯(2.91g，0.0266mol)的無水四氫呋喃溶液冷卻至-78℃並加入1.4M正丁基鋰的己烷溶液(19mL，0.0266mol)，保持該反應混合物溫度低於-75℃。加畢，滴加N，N，N′，N′，N″-五甲基二亞乙基三胺並在-78℃下在氮氣氛下繼續攪拌2小時。滴加N，N-二甲基甲醯胺(3.89g，0.0532mol)並將該反應混合物緩慢升溫，同時攪拌0.5小時。通過滴加1N鹽酸停止反應並分層。水相進一步用乙酸乙酯(2×150mL)萃取並將合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥。有機相減壓濃縮並將此殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作為流動相，得到2-氟-4-甲基苯甲醛(0.83g，0.006mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.17(s，1H)，7.74(d，1H)，7.23(m，2H)，2.41(s，3H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf0.18b)順-3-{4-[(2-氟-4-甲基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.33(m，3H)，7.00(m，2H)，6.74(d，2H)，6.52(t，1H)，4.76(m，1H)，4.32(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.34(s，3H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.58min。
MSMH+529。
實施例69順-3-{4-[(1H-2-吲哚基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.04(s，1H)，8.18(s，1H)，7.44(d，1H)，7.35(m，3H)，7.01(t，1H)，6.95(t，1H)，6.83(d，2H)，6.48(t，1H)，6.36(s，1H)，4.76(m，1H)，4.46(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.75 min。MSMH+536。
實施例70
順-3-(4-[(1-甲基-1H-2-吲哚基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.49(d，1H)，7.41(d，1H)，7.33(d，2H)，7.11(t，1H)，7.00(t，1H)，6.87(d，2H)，6.50(t，1H)，6.43(s，1H)，4.76(m，1H)，4.56(d，2H)，3.77(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.84 min。MSMH+550。
實施例71反-3-[4-(苄基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三馬來酸鹽反-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺按照步驟C製備。將反-3-[4-(苄基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.215g，0.00043mol)溶解於乙醇(20mL)並將此溶液加熱回流。立即加入馬來酸(0.151g，0.00129mol)溶液並再繼續回流10分鐘。該反應混合物冷卻至室溫，過濾收集此沉澱並乾燥。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.18(s，1H)，7.34(m，7H)，6.74(d，2H)，6.16(s， 6H)，4.65(m，1H)，4.33(s，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.09 min。
MSMH+497。
實施例72反-3-{4-[(2-甲基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.18(s，1H)，7.35(d，2H)，7.30(t，1H)，7.17(m，3H)，6.74(d，2H)，6.42(t，1H)，4.60(m，1H)，4.28(d，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.14(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.44(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.24 min。
MSMH+511。
實施例73反-3-{4-[(2，6-二甲氧基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.35(d，2H)，7.24(t，1H)，6.81(d，2H)，6.69(d，2H)，5.75(t，1H)，4.60(m，1H)，4.20(d，2H)，3.82(s，6H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.15 min。
MSMH+557。
實施例74反-3-{4-[(2-氯苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.18(s，1H)，7.40(m，6H)，6.65(m，3H)，4.60(m，1H)，4.40(d，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.53 min。
MSMH+531。
實施例75反-3-{4-[(2-溴苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽步驟D1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.18(s，1H)，7.64(d，1H)，7.39(m，4H)，7.22(t，1H)，6.65(m，3H)，4.60(m，1H)，4.36(d，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt14.79 min。
MSMH+576。
3-(4-氨基-苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺還原烷基化的總方法步驟E將3-(4-氨基-苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(1當量)、醛(1當量)、三乙醯氧基硼氫化鈉(3.4當量)和乙酸(3.4當量)的混合物在無水1，2-二氯乙烷中攪拌16小時。該反應混合物減壓濃縮，用飽和碳酸氫鈉水溶液停止反應並再次濃縮。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到所需產物。
步驟F合成和純化(步驟E)後，將殘餘物用二氯甲烷浸提(1mL)，加樣到Trikonex柱(7cm)上並用二氯甲烷(5mL)洗脫。切下所需譜帶(UV-檢測)並將此化合物用二氯甲烷∶甲醇∶三乙胺＝90∶5∶5(10mL)的混合物萃取，過濾並將此濾液減壓濃縮。殘餘物懸浮於乙醚(4mL)並過濾收集此沉澱並乾燥。
實施例763-[4-(苄基氨基)苯基]-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽步驟E1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.33(m，4H)，7.22(t，1H)，7.07(s，1H)，6.98(d，1H)，6.54(d，1H)，5.89(t，1H)，4.60(m，1H)，4.39(d，2H)，3.89(s，3H)，2.98(d，2H)，2.79(d，2H)，2.25(br，5H)，2.15(s，3H)，1.91(m，7H)，1.69(d，2H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.88min。
MSMH+527。
實施例773-{4-[(2，6-二甲氧基苄基)氨基]苯基}-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽步驟E1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.18(s，1H)，7.24(t，1H)，7.12(d，1H)，7.04(s，1H)，6.93(d，1H)，6.68(d，2H)，4.81(t，1H)，4.60(m，1H)，4.31(d，2H)，3.82(s，9H)，2.98(d，2H)，2.79(d，2H)，2.25(br，5H)，2.15(s，3H)，1.91(m，7H)，1.69(d，2H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.71 min。
MSMH+587。
實施例78
3-{4-[(2-氯-6-氟苄基)氨基]苯基}-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺步驟F1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.37(m，2H)，7.25(t，1H)，7.11(d，1H)，7.07(s，1H)，6.86(d，1H)，5.21(t，1H)，4.60(m，1H)，4.49(d，2H)，3.83(s，3H)，2.98(d，2H)，2.79(d，2H)，2.25(br，5H)，2.15(s，3H)，1.89(m，4H)，1.69(d，2H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.94 min。
MSMH+579。
實施例79順-3-4-[苄基(甲基)氨基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽a)N-苄基-N-甲基-N-苯基胺在0℃下，將60％氫化鈉在礦物油中的分散液(2.37g，0.0592mol)加入到N-苯基-N-苄基胺(10.33g，0.0564mol)的無水N，N-二甲基甲醯胺(200mL)溶液中。該反應混合物升溫至室溫並攪拌45分鐘。滴加碘代甲烷(7.99g，0.0564mol)並在室溫下在氮氣氛下繼續攪拌20小時。減壓除去溶劑並將此殘餘物在乙酸乙酯(250mL)和水(200mL)之間分配。將有機相用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作為流動相，得到N-苄基-N-甲基-N-苯基胺(4.4g，0.0223mol)，為黃色油狀物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 7.30(m，2H)，7.20(m，5H)，6.70(d，2H)，6.60(t，1H)，4.55(s，2H)，2.99(s，3H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf0.53b)N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-甲基胺將N-苄基-N-苯基-N-甲基胺(4.41g，0.0224mol)溶解於無水二氯甲烷(150mL)中，並在30分鐘內以10個相等的批量加入2，4，4，6-四溴環己二烯-1-酮(9.16g，0.0224mol)。室溫下繼續攪拌20小時。有機相依次用0.5N氫氧化鈉水溶液(100mL)、1N氫氧化鈉水溶液(100mL)、水(120mL)和鹽水(120mL)洗滌。將有機相用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶99)作為流動相，得到N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-甲基胺(3.52g，0.0127mol)，為無色油狀物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.27(m，7H)，6.65(d，2H)，4.55(s，2H)，2.99(s，3H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf0.67c)N-苄基-N-甲基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺將N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-甲基胺(3.52g，0.0128mol)、乙硼烷頻哪醇酯(3.89g，0.0153mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.312g，0.00038mol)和醋酸鉀(3.72g，0.038mol)在N，N-二甲基甲醯胺(75mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(120mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到N-苄基-N-甲基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.75g，0.00232mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 7.45(d，2H)，7.30(m，5H)，6.68(d，2H)，4.62(s，2H)，3.03(s，3H)，1.27(s，12H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf0.62d)順-3-{4-[苄基(甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽將N-苄基-N-甲基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.076g，0.000235mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.080g，0.000181mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.012g，0.000011mol)和碳酸鈉一水合物(0.056g，0.00045mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈0.1M醋酸銨在25分鐘內，21mL/min)得到順-3-{4-[苄基(甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽(0.069g，0.00011mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)8.19(s，1H)，(d，2H)，7.34(m，2H)，7.26(m，3H)，6.89(d，2H)，4.78(m，1H)，4.66(s，2H)，3.09(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.60 min。
MSMH+511。
實施例80順-3-{4-[苄基(乙基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽a)N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-乙胺將N-苄基-N-苯基-N-乙胺(2.25g，0.0107mol)溶解於無水二氯甲烷(80mL)中，並在20分鐘內以6個相等的批量加入2，4，4，6-四溴環己二烯-1-酮(4.36g，0.0107mol)。室溫下繼續攪拌20小時；有機相依次用0.5N氫氧化鈉水溶液(50mL)、1N氫氧化鈉水溶液(50mL)、水(70mL)和鹽水(75mL)洗滌。將有機相用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶99)作為流動相，得到N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-乙胺(2.38g，0.0082mol)，為無色油狀物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 7.27(m，7H)，6.59(d，2H)，4.51(s，2H)，3.46(q，2H)，1.11(t，3H)；
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶99)Rf0.23b)N-苄基-N-乙基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺將N-苄基-N-(4-溴苯基)-N-乙胺(2.22g，0.00765mol)、乙硼烷頻哪醇酯(2.33g，0.00919mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.188g，0.00023mol)和醋酸鉀(2.25g，0.023mol)在N，N-二甲基甲醯胺(50mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(100mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(3∶97)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到N-苄基-N-乙基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.24g，0.000712mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.42(d，2H)，7.30(m，2H)，7.20(m，3H)，6.63(d，2H)，4.57(s，2H)，3.48(q，2H)，1.27(s，12H)，1.09(t，3H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶99)Rf0.14c)順-3-{4-[苄基(乙基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽將N-苄基-N-乙基-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.065g，0.000193mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.071g，0.000161mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.011g，0.00001mol)和碳酸鈉一水合物(0.056g，0.00045mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，5μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-3-{4-[苄基(乙基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽(0.049g，0.000076mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.42(d，2H)，7.34(m，2H)，7.26(m，3H)，6.83(d，2H)，4.78(m，1H)，4.61(s，2H)，3.55(q，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，1.19(t，3H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.47 min。
MSMH+525。
實施例81順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-2-苯基乙醯胺二乙酸鹽將順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.255g，0.00063mol)和苯基乙醯基氯(0.102g，0.00066mol)溶解於無水二氯甲烷(20mL)並將所得混合物室溫氮氣氛下攪拌5分鐘。滴加N，N-二異丙基乙胺(0.097g，0.00076mol)並繼續攪拌16小時。有機相用碳酸氫鈉水溶液(25mL)洗滌，減壓濃縮並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-2-苯基乙醯胺二乙酸鹽(0.250g，0.000388mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.37(s，1H)，8.20(s，1H)，7.77(d，2H)，7.57(d，2H)，7.33(m，4H)，7.23(t，1H)，4.78(m，1H)，3.68(s，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.86 min。
MSMH+525。
實施例82
順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(苯乙基氨基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽將順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-2-苯基乙醯胺二乙酸鹽(0.200g，0.00031mol)懸浮於無水四氫呋喃(15mL)中，將此懸浮液冷卻至0℃並立即加入氫化鋰鋁(0.177g，0.00416mol)。將所得混合物升溫至室溫並在氮氣氛下攪拌18小時。通過滴加水停止反應，減壓除去溶劑並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(苯乙基氨基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽(0.039g，0.0000619mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ 8.20(s，1H)，7.37(d，2H)，7.31(m，4H)，7.22(m，1H)，6.75(d，2H)，6.07(t，1H)，4.78(m，1H)，3.32(m，2H)，2.86(t，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.03 min。
MSMH+511。
實施例83順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-3-苯基丙醯胺二乙酸鹽將順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.250g，0.000616 mol)和3-苯基丙醯氯(0.109g，0.000646mol)溶解於無水二氯甲烷(20mL)中，並將所得混合物室溫氮氣氛下攪拌5分鐘。滴加N，N-二異丙基乙胺(0.095g，0.00074mol)並繼續攪拌16小時。有機相用碳酸氫鈉水溶液洗滌(25mL)，減壓濃縮並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25m；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基苯基)-3-苯基}丙醯胺二乙酸鹽(0.225g，0.00034mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.12(s，1H)，8.20(s，1H)，7.77(d，2H)，7.57(d，2H)，7.29(m，4H)，7.19(t，1H)，4.78(m，1H)，2.94(m，2H)，2.67(m 2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.57 min。
MSMH+539。
實施例84順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-{4-[(3-苯基丙基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽將順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-3-苯基丙醯胺二乙酸鹽(0.090g，0.000167mol)懸浮於無水四氫呋喃(5mL)，將此懸浮液冷卻至0℃並立即加入氫化鋰鋁(0.01g，0.00025mol)。將所得混合物升溫至室溫並在氮氣氛下攪拌18小時。通過滴加水停止反應，減壓除去溶劑並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21 mL/min)得到順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-{4-[(3-苯基丙基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽(0.037g，0.000057mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(s，1H)，7.29(m，7H)，6.70(d，2H)，6.02(t，1H)，4.78(m，1H)，3.08(m，2H)，2.71(m，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(m，8H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.84 min。
MSMH+525。
中間體A3-(苄基氧基)苯基羥基代硼酸向3-苄基氧代溴苯(0.590g，2.24mmol，1當量)在THF(10mL)中的-78℃混合物中，加入正丁基鋰(1.6M在己烷中，2.9mL，4.7mmol，2.1當量)。將該反應混合物攪拌45分鐘，然後加入硼酸三異丙基酯(0.77mL，3.4mmol，1.5當量)。將該反應混合物在-78℃下攪拌30分鐘，並在2小時內升溫至室溫。加入鹽酸(2.5M，10mL)並將此混合物劇烈攪拌16小時。分離有機層並用兩部分乙醚萃取水層(各50mL)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到棕色油狀物。殘餘物用庚烷(100mL)研磨並通過過濾收集沉澱得到3-(苄基氧基)苯基羥基代硼酸，為淡紫色固體(0.111g，0.486mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.00(2H，bs)，7.02-7.46(9H，m)，及5.09(2H，s)。
中間體B4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚將3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.47g，6.41mmol，1當量)、Pb黑(0.341g，3.20mmol，0.5當量)及甲酸銨(2.02g，32mmol，5當量)在乙醇(50mL)中的混合物在80℃下加熱4小時。該反應混合物冷卻至室溫並將所得固體通過硅藻土板藉助於乙醇(300mL)過濾移出。濃縮此濾液得到淡黃色固體，其通過用二氯甲烷洗滌(200mL)純化，得到4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚，為白色固體(1.89g，6.4mmol)1HNMR(d6DMSO，400MHz)δH8.22(1H，s)，7.45(2H，d，J＝8.5Hz)，6.92(2H，d，J＝8.5Hz)，5.17-5.24(1H，m)，2.01-2.10(4H，m)，1.87-1.90(2H，m)，1.67-1.70(2H，m)。RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt13.13 min。MSMH+296。
中間體CN-(3-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯向二-叔丁基二碳酸酯(9mL，39mmol，1.3當量)在二氯甲烷(75mL)中的0℃混合物中，加入3-溴苯胺(3.3mL，30mmol，1當量)的二氯甲烷(75mL)溶液。該反應混合物緩慢升溫至室溫並攪拌16小時。粗品反應混合物在飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)和EtOAc(50mL)之間分配。分離有機層，並將水層用乙酸乙酯(100mL)萃取。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到紅色油狀物。通過柱色譜在矽膠上純化(以1L的3％ EtOAc/庚烷和1L 5％ EtOAc/庚烷洗脫)得到N-(3-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯，為粘稠的黃色固體(9.0g，33mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 9.54(1H，s)，7.75(1H，s)，7.37-7.39(1H，m)，7.12-7.22(2H，m)，及1.47(9H，s)。
中間體DN-[3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯將N-(3-溴苯基)氨基甲酸叔丁基酯(8.19g，30.1mmol，1當量)、PdCl2(dppf)2(0.675g，0.90mmol，0.03當量)、乙硼烷頻哪醇酯(9.17g，36.1mmol，1.2當量)及醋酸鉀(8.86g，90.3mmol，3.0當量)在DMF(150mL)中的混合物，在80℃下加熱12小時。該反應混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(100mL)並將固體通過硅藻土板藉助於二氯甲烷(100mL)和Et2O(100mL)過濾移出。減壓除去溶劑並將此殘餘物通過矽膠柱色譜純化(以1L的5％EtOAc/庚烷洗脫)得到N-[3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯，為白色固體(6.77g，21.2mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 9.30(1H，s)，7.85(1H，s)，7.45-7.50(1H，m)，7.25-7.30(2H，m)，1.47(9H，s)，及1.29(12H，s)。
中間體E順-N-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.89g，4.28mmol，1當量)、叔丁基N-[3-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸酯(1.64g，5.14mmol，1.2當量)、四(三苯基膦)鈀(0.271g，0.257mmol，0.06當量)及碳酸鈉一水合物(1.28g，10.3mmol，2.4當量)在水(13mL)和DME(18mL)中的混合物在85℃下加熱14小時。讓此混合物冷卻至室溫。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(15mL)並將此水相用乙酸乙酯(30mL)萃取。有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到淡黃色固體。通過柱色譜在矽膠上純化(以2L的95∶4∶1二氯甲烷∶Et 3N∶MeOH洗脫)得到順-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯，為白色固體(1.76g，3.47mmol)1H NMR(d6DMS0，400 MHz)δH 9.55(1H，s)，8.23(1H，s)，7.81(1H，s)，7.40-7.52(2H，m)，7.24(1H，d，J＝7.5Hz)，4.79-4.81(1H，m)，2.05-2.44(11H，m)，2.14(3H，s)，1.54-1.70(6H，m)，1.49(9H，s)；RP HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.61min。
中間體F順-3-(3-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將順-N-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)氨基甲酸叔丁基酯(1.7g，3.3mmol，1當量)和二氯甲烷(40mL)的混合物在0℃下冷卻，然後加入三氟乙酸(10.5mL，137mmol，41當量)。在3小時內將該反應混合物升溫至室溫，減壓除去溶劑，並將此殘餘物在二氯甲烷(50mL)和水(50mL)之間分配。分離有機層並用飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)處理。有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到順-3-(3-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(1.34g，3.30mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.21(1H，s)，7.17-7.21(1H，m)，6.85(1H，s)，6.72-6.74(1H，m)，6.65-6.68(1H，m)，5.36(2H，bs)，4.75-4.80(1H，m)，2.22-2.51(11H，m)，2.20(3H，s)，2.06-2.08(2H，m)，1.58-1.68(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.06 min。MSMH+407。
中間體G2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]苄腈將[2-(4-溴苯氧基)苯基](次甲基)銨(4.00g，14.6mmol，1當量)、PdCl2(dppf)2(0.320g，0.44mmol，0.03當量)、乙硼烷頻哪醇酯(4.45g，17.5mmol，1.2當量)及醋酸鉀(4.30g，43.8mmol，3.0當量)在DMF(70mL)中的混合物，在80℃下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑得到黑色泥狀沉澱。所得固體通過硅藻土板藉助於二氯甲烷(200mL)和EtOAc(200mL)過濾移出。濃縮此濾液得到暗棕色油狀物，其通過柱色譜在矽膠上純化(用500ml的5％MeOH/二氯甲烷洗脫)得到2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]苄腈，為淡黃色油狀物(2.04g，6.35mmol)1HNMR(d6DMSO，400MHz)H7.92-7.94(1H，m)，7.69-7.92(3H，m)，7.33-7.37(1H，m)，7.08-7.12(3H，m)，及1.30(12H，s)。
實施例851-環戊基-3-[4-(3-甲氧基苯氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將4-(4-氨基-1-環戊基-1 H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.195g，0.660mmol，1當量)、3-甲氧基羥基代硼酸(0.240g，1.58mmol，2.4當量)、醋酸酮(II)(0.180g，0.990mmol，1.5當量)和4分子篩在吡啶(0.27mL)中的混合物加熱回流5小時。將此混合物冷卻至室溫並將所得固體通過硅藻土板藉助於二氯甲烷(20mL)和MeOH(20mL)濾出。濃縮此濾液得到油狀綠色固體，其通過柱色譜在矽膠上純化(用1L的二氯甲烷、600ml的20％MeOH/二氯甲烷和600ml的40％ MeOH/二氯甲烷洗脫)得到1-環戊基-3-[4-(3-甲氧基苯氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為黃棕色固體(0.072g，0.179mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.23(1H，s)，7.67(2H，d，J＝8.6Hz)，7.34(1H，t，J＝8.2Hz)，7.16(2H，d，J＝8.6Hz)，6.78(1H，d，J＝8.3Hz)，6.65-6.70(2H，m)，5.21-5.25(1H，m)，3.76(3H，s)，2.02-2.11(4H，m)，1.87-1.91(2H，m)，1.67-1.71(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分鐘內5％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)。Rt13.35 min。MSMH+402。
實施例863-[4-(苄基氧基)苯基]-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺向1-環戊基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(5.41g，17.1mmol，1當量)和4-(苄基氧基)苯基羥基代硼酸(4.87g，21.4mmol，1.2當量)的DME(100mL)混合物中，加入四(三苯基膦)鈀(1.19g，1.03mmol，0.06當量)和碳酸鈉一水合物(5.09g，41mmol，2.4當量)的水(54mL)溶液。將此混合物在85℃下加熱2小時。再加入四(三苯基膦)鈀(1.19g，1.03mmol，0.06當量)並將該反應混合物在85℃下加熱3小時。將此混合物冷卻至室溫並過濾收集白色結晶固體(3.868g)。為了回收更多的產物，將此濾液真空濃縮並將此殘餘物在水(50mL)和EtOAc(50mL)之間分配。水層用3部分乙酸乙酯萃取(各150mL)並將合併的有機萃取物用3部分水(各100mL)和鹽水(100mL)洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到黃色固體(0.916g)。合併這兩批固體並用熱EtOAc重結晶，得到3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(3.41g，8.8mmol)1HNMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.22(1H，s)，7.19-7.62(7H，m)，7.18(2H，d，J＝6.9Hz)，5.18-5.23(1H，m)，5.22(2H，s)，2.00-2.10(4H，m)，1.87-1.89(2H，m)，1.66-1.70(2H，m)。RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分鐘內5％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)。Rt13.05 min。
實施例871-環戊基-3-[4-(4-氟苯氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.151g，0.511mmol，1當量)、4-(氟苯基)羥基代硼酸(0.357g，2.55mmol，5.0當量)、醋酸酮(II)(0.139g，0.766mmol，1.5當量)，及4分子篩在吡啶(0.21mL)和二氯乙烷(5mL)中的混合物，加熱回流48小時。將此混合物冷卻至室溫並將所得固體通過硅藻土板藉助於MeOH(20mL)過濾移出。濃縮此濾液得到棕色油狀物，其通過柱色譜在矽膠上純化(用300ml的二氯甲烷、400ml的10％ MeOH/二氯甲烷和400ml的20％ MeOH/CH2Cl2洗脫)得到紅色油狀物，其進一步通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；50％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，21mL/min)。真空下除去溶劑得到1-環戊基-3-[4-(4-氟苯氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.010g，0.025mmol)1H NMR(d6CDCl3，400MHz)δH8.37(1H，s)，7.65(2H，d，J＝8.6Hz)，7.03-7.26(6H，m)，5.59(2H，bs)，5.27-5.35(1H，m)，2.09-2.21(4H，m)，1.95-2.02(2H，m)，1.68-1.79(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分鐘內5％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.63 min。MSMH+390。
實施例881-環戊基-3-4-[3-(三氟甲基)苯氧基]苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.170g，0.576mmol，1當量)、3-(三氟甲基苯基)羥基代硼酸(0.328g，1.73mmol，3.0當量)、醋酸酮(II)(0.108g，0.594mmol，1.0當量)及4分子篩在吡啶(0.23mL)和二氯乙烷(5.8mL)中的混合物，加熱回流6小時。加入醋酸酮(II)(0.050g，0.5當量)並將該反應混合物加熱回流16小時。再加入分子篩和3-(三氟甲基苯基)羥基代硼酸(0.250g，2.3當量)並將該反應混合物加熱回流54小時。該反應混合物冷卻至室溫並將所得固體通過硅藻土板藉助於MeOH(20mL)濾出。濃縮此濾液得到棕色固體，其通過矽膠柱色譜純化(用400ml的庚烷、400ml的10％ EtOAc/庚烷、400ml的20％ EtOAc/庚烷和400ml的50％ EtOAc/庚烷洗脫)得到黃色固體。通過製備RP-LC/MS進一步純化(Gilson-Micromass C18，5μm，130，21cm，在9分鐘內0％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，25mL/min)，真空下除去乙腈，並將此含水混合物凍幹得到1-環戊基-3-4-[3-(三氟甲基)苯氧基]苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為淡棕色固體(0.017g，0.039mmol)1HNMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.29(1H，s)，7.68-7.74(3H，m)，7.6(1H，d，J＝8.1Hz)，7.52-7.54(2H，m)，7.24(2H，d，J＝8.7Hz)，7.7(2H，bs)，5.20-5.28(1H，m)，2.03-2.11(4H，m)，1.90-1.91(2H，m)，1.68-1.70(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分鐘內5％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.72min。MSMH+440。
實施例891-環戊基-3-[4-(3-硝基苯氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.202g，0.684mmol，1當量)、3-硝基苯基羥基代硼酸(0.571g，3.42mmol，5.0當量)、醋酸酮(II)(0.186g，1.02mmol，1.5當量)及4分子篩在吡啶(0.28mL)和二氯乙烷(6.8mL)中的混合物，加熱回流24小時。該反應混合物冷卻至室溫。將二氯甲烷(25mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板藉助於MeOH(20mL)濾出。濃縮此濾液得到棕色液體，其通過柱色譜在矽膠上純化(用400ml的庚烷、400ml的10％ EtOAc/庚烷、400ml的20％ EtOAc/庚烷和800ml的MeOH洗脫)得到紅色油狀物，其進一步通過製備RP-LC/MS純化(Gilson-Micromass C18，5μm，130，21cm，在9分鐘內0％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，25mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到1-環戊基-3-[4-(3-硝基苯氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為淡黃色固體(0.034g，0.081mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH8.22(1H，s)，7.28-7.74(6H，m)，7.18(2H，d，J＝8.6Hz)，7.7(2H，bs)，5.13-5.26(1H，m)，2.02-2.10(4H，m)，1.89-1.91(2H，m)，1.68-1.70(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分鐘內5％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt19.98 min。MSMH+417。
實施例901-環戊基-3-4-[4-(三氟甲氧基)苯氧基]苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.100g，0.339mmol，1當量)、4-三氟甲氧基苯基羥基代硼酸(0.349g，1.69mmol，5.0當量)、醋酸酮(II)(0.092g，0.51mmol，1.5當量)及4A分子篩在吡啶(0.12mL)和二氯乙烷(3.4mL)中的混合物，加熱回流72小時。將該反應混合物冷卻至室溫。加入二氯甲烷(25mL)並將所得固體通過硅藻土板濾出。減壓除去溶劑得到棕色油狀物其通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到1-環戊基-3-4-[4-(三氟甲氧基)苯氧基]苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.020g，0.044mmol)1HNMR(d6CDCl3，400MHz)δH 8.53(1H，s)，7.69(2H，d，J＝8.6Hz)，7.07-7.26(6H，m)，5.55(2H，bs)，5.28-5.36(1H，m)，2.16-2.21(4H，m)，1.94-2.04(2H，m)，1.72-1.79(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分鐘內5％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt16.33 min。MSMH+456。
實施例911-環戊基-3-4-[4-(三氟甲基)苯氧基]苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺用合成1-環戊基-3-4-[4-(三氟甲氧基)苯氧基]苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺時所詳述的方法，製備了1-環戊基-3-4-[4-(三氟甲基)苯氧基]苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.008g，0.018mmol)1H NMR(d6CDCl3，400MHz)δH8.34(1H，s)，7.60-7.73(4H，m)，7.05-7.32(4H，m)，5.89(2H，bs)，5.27-5.34(1H，m)，2.17-2.21(4H，m)，2.00-2.03(2H，m)，1.72-1.79(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分鐘內5％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.77min。MSMH+440。
實施例923-[3-(苄基氧基)苯基]-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺向1-環戊基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.200g，0.631mmol，1當量)和3-(苄基氧基)苯基羥基代硼酸(0.110g，0.487mmol，1.0當量)在DME(6mL)中的混合物中，加入四(三苯基膦)鈀(0.044g，0.038mmol，0.07當量)和碳酸鈉一水合物(0.187g，1.51mmol，2.4當量)的水(2mL)溶液。將此混合物在85℃下加熱16小時，然後冷卻至室溫。減壓除去溶劑並將此殘餘物在EtOAc(50mL)和水(50mL)之間分配。將此有機層用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到油狀橘紅色固體。用熱乙酸乙酯重結晶得到橘紅色固體，其通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到3-[3-(苄基氧基)苯基]-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.023g，0.060mmol)1H NMR(d6CDCl3，400MHz)δH8.34(1H，s)，7.27-7.46(8H，m)，7.07-7.10(1H，m)，5.63(2H，bs)，5.31(1H，五重峰，J＝7.6Hz)，5.16(2H，s)，2.15-2.20(4H，m)，1.96-2.01(2H，m)，1.72-1.75(2H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分鐘內5％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.00min。MSMH+386。
實施例93-99合成[被取代的(甲基氨基)]苯基吡唑並嘧啶的總方法如下向順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的二氯乙烷的0.10M溶液中，加入1.5當量的被取代的苯甲醛、3.8當量的冰醋酸和3.5當量的三乙醯氧基硼氫化鈉。此混合物室溫下攪拌16小時。再加入3.3當量的三乙醯氧基硼氫化鈉(如果需要)。將該反應混合物攪拌1.5小時，然後用二氯乙烷(5mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(5mL)稀釋。分離有機層並將此水層用二氯甲烷(10mL)萃取。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮。殘餘物通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到所需產物。
通過上述方式合成的化合物包括
名稱 HPLC rt M+(分鐘)實施例93 順-3-{4-[(3-氟苄基)氨基]苯 13.25515.3基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸鹽實施例94 順-3-{4-[(2-氟苄基)氨基]苯 13.24515.3基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸鹽實施例95 順-3-{4-[(4-甲氧基苄基)氨13.08527.3基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽實施例96 順-3-{4-[(3-甲氧基苄基)氨13.12527.3基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸鹽實施例97 順-3-{4-[(4-氟苄基)氨基]苯 13.35515.3基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸鹽實施例98 順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環 10.19498.5己基]3-4-[(3-吡啶基甲基)氨基]苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺實施例99 順-3-{4-[(2-甲氧基苄基)氨13.57527.4基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺RP-HPLC(Delta Pak C18，5mm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)實施例100順-3-[3-(苄基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸鹽向順-3-(3-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.104g，0.256mmol，1當量)的二氯乙烷(2mL)溶液中，加入苯甲醛(0.03mL，0.282mmol，1.1當量)、冰醋酸(0.06mL，1.0mmol，3.9當量)和三乙醯氧基硼氫化鈉(0.212g，1.0mmol，3.9當量)。此混合物室溫下攪拌16小時。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(5mL)，分離有機層，並將此水層用兩部分二氯甲烷萃取(各15mL)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到黃色油狀物，其通過製備RP-HPLC純化(兩次)(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到順-3-[3(苄基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三乙酸鹽，為白色固體(0.023g，0.046mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.21(1H，s)，7.40(4H，m)，7.20-7.25(2H，m)，6.88(1H，s)，6.78(1H，d，J＝7.7Hz)，6.67-6.69(1H，m)，6.56-6.58(1H，m)，4.75-4.79(1H，m)，4.32(2H，d，J＝5.8Hz)，2.21-2.49(11H，m)，2.14(3H，s)，2.05-2.14(2H，m)，1.89(9H，s)，1.54-1.68(4H，m)；RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分鐘內5％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.04min。
MSMH+497。
實施例101順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.29g，5.19mmol，1當量)、2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]苄腈(2.0g，6.2mmol，1.2當量)、四(三苯基膦)鈀(0.329g，0.311mmol，0.06當量)、DME(21mL)及碳酸鈉一水合物(1.54g，12.5mmol，2.4當量)在水(16mL)中的混合物，在85℃下加熱60小時。再加入四(三苯基膦)鈀(0.100g，0.02當量)並將該反應混合物在85℃下加熱6.5小時。該反應混合物冷卻至室溫並在飽和碳酸氫鈉水溶液(25mL)和EtOAc(25mL)之間分配。有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮。殘餘物用乙醚研磨，並通過柱色譜在矽膠上純化(用1L的5％甲醇/二氯甲烷、1L的10％甲醇/二氯甲烷、1L的20％甲醇/二氯甲烷和1L的25％甲醇/二氯甲烷洗脫)得到順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈，為淡黃色固體(1.79g，3.52mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.24(1H，s)，7.94(1H，d，J＝7.7Hz)，7.68-7.73(3H，m)，7.31-7.34(3H，m)，7.18(1H，d，J＝8.5Hz)，4.78-4.83(1H，m)，2.21-2.51(11H，m)，2.19(3H，s)，2.05-2.08(2H，m)，1.56-1.71(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.16min。MSMH+509。
實施例102順-2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醯胺三乙酸鹽將順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.111g，0.218mmol，1當量)、25％氫氧化鈉水溶液(1mL)及30％H2O2(1mL)在二噁烷(1mL)中的混合物，在100℃下加熱16小時。再加入部分30％H2O2(1mL)並將該反應混合物在100℃下加熱2小時。該反應混合物冷卻至室溫並用二氯甲烷(15mL)稀釋。分離有機層並減壓除去溶劑得到淡黃色固體，其通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到順-2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醯胺三乙酸鹽，為米白色固體(0.020g，0.038mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH8.23(1H，s)，7.75(1H，d，J＝7.7Hz)，7.64(3H，d，J＝6.7Hz)，7.56(1H，s)，7.48(1H，t，J＝7.5Hz)，7.27(1H，t，J＝7.4Hz)，7.19(2H，d，J＝8.6Hz)，7.06(1H，d，J＝7.7Hz)，4.76-4.82(1H，m)，2.20-2.50(11H，m)，2.14(3H，s)，2.04-2.08(2H，m)，1.89(9H，s)，1.58-1.70(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.79min。MSMH+527。
實施例103順-3-4-[2-(氨基甲基)苯氧基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.097g，0.19mmol，1當量)和氫化鋰鋁(0.036g，0.95mmol，5當量)在THF(2mL)中的混合物在66℃下加熱2小時。將該反應混合物冷卻至室溫並在冰水(30mL)和二氯甲烷(50mL)之間分配。有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到黃色固體，其通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到順-3-4-[2-(氨基甲基)苯氧基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.078g，0.152mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH8.22(1H，s)，7.57-7.64(3H，m)，7.21-7.29(2H，m)，7.04(2H，d，J＝8.7Hz)，7.01(1H，d，J＝7.9Hz)，4.76-4.81(1H，m)，3.74(2H，s)，2.20-2.51(11H，m)，2.14(3H，s)，2.05-2.08(2H，m)，1.57-1.70(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.85min。
MSMH+513。
實施例104順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-4-[2-(2H-1，2，3，4-四唑-5-基)苯氧基]苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽將順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄腈(0.070g，0.14mmol，1當量)和疊氮基三丁基錫(0.8mL，2.4mmol，17當量)的混合物，在85℃下加熱80小時。將該反應混合物冷卻至室溫並用EtOAc(15mL)稀釋。過濾收集所得沉澱得到米色固體，其通過製備RP-HPLC純化(RaininC18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此水層用飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)處理以除去殘餘的乙酸。此含水混合物用二氯甲烷(25mL)萃取，並將有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-4-[2-(2H-1，2，3，4-四唑-5-基)苯氧基]苯基1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽，為白色固體(0.009g，0.016mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.20(1H，s)，7.94(1H，d，J＝7.7Hz)，7.54(2H，d，J＝8.7Hz)，7.32-7.37(1H，m)，7.24-7.28(1H，m)，7.11(1H，d，J＝9.1Hz)，6.99(2H，d，J＝8.7Hz)，4.73-4.80(1H，m)，2.23-2.34(11H，m)，2.14(3H，s)，2.05-2.07(2H，m)，1.68(6H，s)，1.56-1.65(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.86min。MSMH+552。
實施例105順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-硝基苯氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽將4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(0.200g，0.491mmol，1當量)和60％氫化鈉(0.020g，0.49mmol，1當量)在二噁烷(4.9mL)中的混合物，室溫下攪拌20分鐘。加入2-氟硝基苯(0.06mL，0.6mmol，1.1當量)並將該反應混合物在100℃下加熱3小時。再加入氫化鈉(0.010g，0.24mmol，0.5當量)和2-氟硝基苯(0.02mL，0.2mmol，0.4當量)並將該反應混合物在100℃下加熱3小時。該反應混合物冷卻至室溫並將所得固體過濾移出，其中藉助二氯甲烷(10mL)和EtOAc(10mL)。濃縮此濾液得到黃色半固體，其通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-硝基苯氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽，為白色固體(0.023g，0.043mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.23(1H，s)，8.10(1H，d，J＝8.2Hz)，7.68-7.73(3H，m)，(1H，m)，7.33-7.40(1H，m)，7.31(1H，d，J＝7.3Hz)，7.24(2H，d，J＝8.7Hz)，4.76-4.82(1H，m)，2.26-2.51(11H，m)，2.24(3H，s)，2.17-2.21(2H，m)，2.05(6H，s)，1.56-1.71(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.09min。
實施例106順-3-[4-(2-氨基苯氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-[4-(2-硝基苯氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.059g，0.091mmol，1當量)、冰醋酸(0.03mL，0.5mmol，5當量)及10％ Pd-C(0.024g，0.4wt/wt當量)在乙醇(1mL)中的混合物，室溫下在氫氣的正壓下攪拌16小時。將固體過濾移出，其中藉助二氯甲烷(10mL)，並將此濾液濃縮得到黃色油狀物。殘餘物通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到順-3-[4-(2-氨基苯氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為米白色固體(0.018g，0.036mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.22(1H，s)，7.59(2H，d，J＝8.6Hz)，7.05(2H，d，J＝8.7Hz)，6.85-6.98(3H，m)，6.58-6.61(1H，m)，4.93(2H，bs)，4.78-4.80(1H，m)，2.20-2.50(11H，m)，2.14(3H，s)，2.05-2.09(2H，m)，1.55-1.70(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.00min。MSMH+499。
實施例107[2-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-5-苯氧基苯基]甲醇
a)(2-溴-5-苯氧基苯基)甲醇向3-苯氧基苯基甲醇(4.0g，0.020mol)的無水乙腈溶液中，室溫下加入1-溴-2，5-吡咯烷二酮(3.73g，0.021mol)。將此混合物室溫下攪拌1.5小時在氮氣氛下。減壓除去溶劑。將四氯甲烷(100mL)加入到此殘餘物中，並將此混合物過濾。將此濾液濃縮為殘餘物，並將此殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作為流動相洗脫得到(2-溴-5-苯氧基苯基)甲醇(4.7g，0.017mol)RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分鐘內含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt11.7min。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.18b)5-苯氧基-1，3-二氫-2，1-苯並氧雜硼雜環戊二烯-1-醇在-78℃下在氮氣氛下，將正丁基鋰的正己烷溶液(2.24M，8.6mL，0.019mol)緩慢加入到(2-溴-5-苯氧基苯基)甲醇(2.21g，0.0079mol)的無水四氫呋喃(50mL)溶液中。在-78℃下將該反應攪拌30分鐘，然後在-25℃下攪拌20分鐘。將該反應冷卻至-50℃並緩慢加入硼酸三異丙基酯(4.075g，0.0216mol)。該反應升溫至室溫並攪拌1小時。加入1N鹽酸(20mL)使pH達到5，然後將該反應室溫下攪拌1小時。該反應混合物用乙醚(3×40mL)萃取。合併的有機萃取物用水(60mL)和鹽水(60mL)洗滌，並用硫酸鈉乾燥。減壓蒸發溶劑得到殘餘物，並將此殘餘物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)，接著用乙酸乙酯/正庚烷(1∶4)作為流動相，得到5-苯氧基-1，3-二氫-2，1-苯並氧雜硼雜環戊二烯-1-醇(1.3g，0.0058mol)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分鐘內含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt10.8min。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶2)Rf0.24c)[2-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-5苯氧基苯基]甲醇將1-環戊基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.36g，0.0011mol)，5-苯氧基-1，3-二氫-2，1-苯並氧雜硼雜環戊二烯-1-醇(0.30g，0.0013mol)、四(三苯基膦)鈀(0.077g，0.000067mol)和碳酸鈉一水合物(0.34g，0.0028mol)在乙二醇二甲基醚(7mL)和水(5mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱17小時。讓此混合物冷卻至室溫，並減壓除去溶劑。殘餘物在乙酸乙酯(20mL)和飽和碳酸鈉水溶液(20mL)之間分配。水層進一步用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。減壓下除去有機溶劑。將乙酸乙酯(15mL)加入到殘餘物中並形成白色沉澱。將此固體過濾並用丙酮(2×15mL)和二氯甲烷(1×15mL)洗滌得到[2-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-5-苯氧基苯基]甲醇(0.267g，0.00067mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.46(m，2H)，7.38(m，1H)，7.28(m，1H)，7.13(m，3H)，7.00(m，1H)；5.28(m，1H)，5.17(m，1H)，4.48(d，2H)，2.08(br，2H)，1.98(br，2H)，1.86(br，2H)，1.68(br，2H)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分鐘內含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt10.5min。
MSMH+402實施例108順-1-(氨基甲基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己醇馬來酸鹽a)順-1-(1-氧雜螺[2.5]辛烷-6-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將氧化鋶三甲基碘(0.33g，0.0015mol)和氫化鈉(60％在油中，0.055g，0.00138mol)在甲基亞碸(4mL)中的混合物，室溫氮氣氛下攪拌30分鐘。將該反應混合物冷卻至10℃並加入存在於甲基亞碸(2mL)中的4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(0.5g，0.00125mol)。該反應混合物室溫氮氣氛下攪拌2小時。此混合物在飽和氯化銨水溶液(20mL)和二氯甲烷之間分配，並將水層用二氯甲烷(3×20mL)萃取。合併的有機萃取物用水和鹽水洗滌並用硫酸鈉乾燥。減壓除去溶劑得到順-1-(1-氧雜螺[2.5]辛烷-6-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.527g，0.00125mmol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.68(d，2H)，7.42(m，2H)，7.19(m，5H)，4.90(br，1H)，2.70(s，2H)，2.17(br，4H)，1.97(br，2H)，1.32(br，2H)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在23分鐘內含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt11.7min。
MSMH+413b)順-1-(氨基甲基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己醇馬來酸鹽將在氨(2M在甲醇中，15mL)的順-1-(1-氧雜螺[2.5]辛烷-6-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.62g，0.0015mol)和20％N，N-二甲基甲醯胺的異丙醇(15mL)溶液在65℃下在壓力容器中加熱18小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用氫氧化銨/甲醇/二氯甲烷(2∶5∶93)，接著用氫氧化銨/甲醇/二氯甲烷(2∶8∶90)作為流動相，得到順-1-(氨基甲基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己醇(0.11g，0.00026mol)。在40℃下將此化合物溶解於乙酸乙酯(10mL)並加入預熱的馬來酸(0.060g，0.000512mol)的乙酸乙酯(2mL)溶液。將此混合物在40℃下加熱10分鐘，冷卻至室溫並過濾收集沉澱，用乙酸乙酯洗滌並乾燥得到順-1-(氨基甲基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己醇馬來酸鹽(0.140g，0.00026mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.73(br，3H)，7.64(d，2H)，7.42(m，2H)，7.13(m，5H)，6.01(s，2H)，4.94(s，1H)，4.70(br，1H)，2.79(s，2H)，2.36(br，2H)，1.76(br，4H)，1.58(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.9min。
MSMH+431實施例109順-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己醇馬來酸鹽a)順-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}甲腈向順-1-(1-氧雜螺[2.5]辛烷-6-基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(4.4g，0.011mol)和高氯酸鋰(1.7g，0.016mol)的混合物中，加入在乙腈(600ml)中的氰化鉀(1.04g，0.016mol)。將該反應混合物回流6小時。減壓除去溶劑。將此混合物用水(200mL)稀釋並用乙醚(2×300mL)萃取。合併的有機相用水和鹽水洗滌並用硫酸鎂乾燥。減壓除去溶劑得到順-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}甲腈(4.30g，0.0098mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.4min。
MSMH+441b)順-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己醇馬來酸鹽向在甲醇(100ml)和氫氧化銨(5mL)的順-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}甲腈(3.4g，0.0077mol)中，加入阮內鎳(50％在水中的漿狀物，3mL)。將此混合物在氫氣氛下(1atm)攪拌18小時。將該反應混合物通過硅藻土過濾並真空下除去溶劑得到粗品順-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己醇(1.82g，0.0041mol)。將0.8g的粗品順-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己醇在矽膠上通過急驟色譜純化，用氫氧化銨/甲醇/二氯甲烷(2∶3∶95)，接著用氫氧化銨/甲醇/二氯甲烷(2∶12∶86)作為流動相，得到順-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己醇(0.423g，0.00095mol)。在40℃下將此化合物溶解於乙酸乙酯(40mL)中，並加入預熱的馬來酸(0.13g，0.0014mol)的乙酸乙酯(5mL)溶液。此混合物在40℃下加熱10分鐘，冷卻至室溫並過濾收集沉澱，用乙酸乙酯洗滌並乾燥得到順-1-(2-氨基乙基)-4-[4-氨基-3-(4苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己醇馬來酸鹽(0.186g，0.00033mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.67(m，2H)，7.60(br，3H)，7.42(m，2H)，7.16(m，5H)，6.01(s，2H)，4.73(br，1H)，4.53(s，1H)，2.92(br，2H)，2.38(br，2H)，1.72(br，6H)，1.54(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.1min。
MSMH+455c)順-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1羥基環己基}乙醯胺向順-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基)甲腈(0.972g，0.0022mol)和碳酸鉀(1.28g，0.00093)的甲基亞碸(20mL)混合物中，在20℃下緩慢加入30％過氧化氫水溶液(3mL)。將該反應混合物室溫下攪拌18小時。該反應燒瓶置於冰浴中，並將冰水(20mL)緩慢倒入到此反應中。將此混合物用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌並用硫酸鎂乾燥。真空下除去溶劑。殘餘物用二氯甲烷(8mL)研磨，並將此固體過濾得到順式-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙醯胺(0.542g，0.0012mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.67(m，2H)，7.42(m，3H)，7.16(m，5H)，7.06(s，1H)，4.95(br，1H)，4.65(m，1H)，2.39(m，2H)，2.24(s，2H)，1.70(br，6H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.6min。
MSMH+459實施例1101-(3-氮雜環丁烷基(azetanyl))-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺
a)3-羥基-1-氮雜環丁烷(azetane)甲酸叔丁基酯向1-二苯甲基-3-氮雜環丁醇(azetanol)(7.5g，0.031mol)和二碳酸二叔丁基酯(10.3g，0.047mol)的混合物中，加入在乙酸乙酯(200mL)中的20％氫氧化鈀-碳(1.0g)。此混合物在Parr-氫化儀中室溫下在氫氣氛下搖動20小時。此混合物通過硅藻土過濾，並將此濾液減壓濃縮。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用二氯甲烷、接著用甲醇/二氯甲烷(5∶95)作為流動相，得到3-羥基-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁基酯(5.015g，0.029mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ4.59(m，1H)，4.14(m，2H)，3.80(m，2H)，2.55(br，1H)，1.50(s，9H)TLC(甲醇/二氯甲烷＝2∶98)Rf0.13b)3-[(甲基磺醯基)氧基]-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁基酯向3-羥基-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁基酯(4.0g，0.023mol)的無水吡啶(50mL)溶液中，在-20℃氮氣氛下，加入甲烷磺醯基氯(5.3g，0.046mol)。在-20℃至-30℃下，將此黃色不均勻的混合物攪拌1小時，然後在0℃至-5℃下攪拌2小時。將此混合物倒入到冰水(50mL)中。水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合併的有機萃取物用水(1×50mL)、5％枸櫞酸水溶液(4×50mL)、水(1×50mL)、飽和碳酸氫鈉(1×50mL)和鹽水(1×50mL)洗滌，並用硫酸鈉乾燥。減壓除去溶劑得到3-[(甲基磺醯基)氧基]-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁基酯，為褐色油狀物(4.85g，0.019mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ5.19(m，1H)，4.25(m，2H)，4.07(m，2H)，3.04(s，3H)，1.42(s，9H)TLC(甲醇/二氯甲烷＝2∶98)Rf0.28c)3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁基酯向3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.0g，0.0033mol)和碳酸銫(2.14g，0.0066mol)在無水N，N-一甲基甲醯胺(30mL)中的混合物中，室溫氮氣氛下加入存在於無水N，N-二甲基甲醯胺(20mL)中的3-[(甲基磺醯基)氧基]-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁基酯(1.66g，0.0066mol)。此混合物在75℃下攪拌22小時。將此混合物倒入到冰水(50mL)中。水相用乙酸乙酯(3×50mL)萃取。合併的有機萃取物用水(1×70mL)和鹽水(1×70mL)洗滌，並用硫酸鈉乾燥。減壓除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用二氯甲烷接著用甲醇/二氯甲烷(5∶95)作為流動相，得到3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁基酯(0.81g，0.0018mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(m，2H)，7.19(m，5H)，5.70(br，1H)，4.35(br，4H)，1.39(s，9H)RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分鐘內含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt12min。
MSMH+4591-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺向3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷甲酸叔丁基酯(0.81g，0.0018mol)的二氯甲烷(5mL)溶液中，在0℃氮氣氛下緩慢加入20％三氟乙酸的二氯甲烷(10mL)溶液。將此混合物升溫至室溫並攪拌18小時。減壓除去溶劑。在0℃下將5N氫氧化鈉水溶液加入到殘餘物中，使pH為11。水相用乙酸乙酯(2×30mL)萃取。合併的有機萃取物用水(1×60mL)和鹽水(1×60mL)洗滌，並用硫酸鈉乾燥。減壓除去溶劑得到1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.44g，0.0012mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.28(s，1H)，7.70(d，2H)，7.45(m，2H)，7.18(m，5H)，5.70(m，1H)，4.20(m，2H)，4.05(m，2H)RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.8min。
MSMH+359總方法
將1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4胺烷基化向1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol，1當量)和碳酸鉀(0.058g，0.00042mol，3當量)在無水乙腈的混合物中，室溫下加入相應的烷基溴(0.00014mol，1當量)。將此混合物攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到相應的烷基氮雜環丁烷。
實施例111a)烷基溴2-溴-1-乙醇2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-1-乙醇1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(m，2H)，7.14(m，5H)，5.41(m，1H)，4.69(br，1H)，3.83(m，2H)，3.63(m，2H)，3.42(m，2H)，2.62(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.0min。
MSMH+403實施例112b)烷基溴2-溴乙基甲基醚1-[1-(2-甲氧基乙基)-3-氮雜環丁烷基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.09(br，1H)，8.27(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，5H)，5.69(m，1H)，4.13(m，2H)，3.94(m，2H)，3.51(m，2H)，3.36(s，3H)，2.95(m，2H)，2.08(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.6min。
MSMH+417實施例113c)烷基溴1-溴-2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷1-{1-[2-(2-甲氧基乙氧基)乙基]-3-氮雜環丁烷基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(m，2H)，7.14(m，5H)，5.41(m，1H)，3.79(m，2H)，3.62(m，2H)，3.44(br，6H)，3.23(s，3H)，2.69(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.6min。
MSMH+461實施例1141-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-3-氮雜環丁烷基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.06g，0.00017mol)、1-甲基-4-哌啶酮(0.057g，0.0005mol)，及乙酸(0.03g，0.0005mol)在二氯乙烷(2.5mL)中的混合物，室溫氮氣氛下攪拌一個半小時。將三乙醯氧基硼氫化鈉(0.072g，0.00034mol)加入到此混合物中，並在室溫氮氣氛下攪拌2小時。減壓除去溶劑，並將此殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用氫氧化銨/甲醇/二氯甲烷(2∶15∶83)作為流動相，得到1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)-3-氮雜環丁烷基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.029g，0.000064mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.68(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，3H)，7.08(d，2H)，5.64(m，1H)，5.57(br，2H)，3.93(m，2H)，3.73(m，2H)，2.83(br，2H)，2.40(br，3H)，2.00(br，1H)，1.78(br，4H)，1.46(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨在10分鐘內，1mL/min)Rt8.9min。
MSMH+456實施例1151-{1-[(1-甲基-1H-2-咪唑基)甲基]-3-氮雜環丁烷基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.06g，0.00017mol)、1-甲基-1H-2-咪唑甲酸(0.056g，0.0005mol)及乙酸(0.03g，0.0005mol)在二氯乙烷(2.5mL)中的混合物，室溫氮氣氛下攪拌一個半小時。將三乙醯氧基硼氫化鈉(0.072g，0.00034mol)加入到此混合物中，並在室溫氮氣氛下攪拌2小時。減壓除去溶劑，並將此殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HSC18，8μm，250×21.1mm；在25分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{1-[(1-甲基-1H-2-咪唑基)甲基]-3-氮雜環丁烷基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.020g，0.000044mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.35(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.20(d，3H)，7.18(d，2H)，6.93(s，1H)，6.85(s，1H)，5.59(m，3H)，3.93(m，6H)，3.85(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.5min。
MSMH+453實施例1161-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-1-乙酮向1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.020g，0.000056mol)和碳酸鉀(0.016g，0.00012mol)在無水N，N，-二甲基甲醯胺(1mL)中的混合物中，室溫下加入乙酸酐(0.009g，0.000084mol)。將該反應混合物攪拌1小時。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，5μm，100×20mm；在7.5分鐘內含0.05M乙酸銨的20％-85％，251mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-1-乙酮(0.014g，0.000035mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.71(d，2H)，7.44(m，2H)，7.17(m，5H)，5.72(m，1H)，4.66(m，1H)，4.58(m，1H)，4.35(m，1H)，4.29(m，1H)，1.84(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.9min。
MSMH+401實施例117 順-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁醇a)3-亞丙基環丁基甲烷磺酸酯將3-亞丙基-1-環丁醇(0.344g，0.00307mol)的吡啶(5mL)溶液冷卻至0℃。滴加甲烷磺醯基氯(0.422g，0.00369mol)，保持溫度低於2℃。將此混合物攪拌2小時，然後倒入到冰水(15mL)中，並用乙醚(2×10mL)萃取。合併的有機層用水洗滌(3×10mL)。將此有機層用硫酸鎂乾燥並真空下除去溶劑得到3-亞丙基環丁基甲烷磺酸酯(0.492g，0.00221mol)，為黃色油狀物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ5.25-5.29(m，1H)，4.98-5.04(m，1H)，3.17(s，3H)，2.98-3.16(m，2H)，2.78-2.96(m，2H)，1.86-1.91(m，2H)，0.91(t，3H)。
b)3-(4-苯氧基苯基)-1-(3-亞丙基環丁基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.743g，0.00245mol)的N，N-二甲基甲醯胺(20mL)溶液與3-亞丙基環丁基甲烷磺酸酯(0.699g，0.00367mol)和碳酸銫(0.866g，0.00367mol)在70℃下反應3天。將該反應混合物倒入水(30mL)中並用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。合併的有機層用水(2×20mL)和鹽水(20mL)洗滌。有機層用硫酸鎂乾燥並真空下除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(98∶2)。真空下除去溶劑得到3-(4-苯氧基苯基)-1-(3-亞丙基環丁基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.655g，0.00165mol)，為黃褐色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(t，2H)，7.10-7.19(m，5H)，5.35-5.40(m，1H)，5.38-5.33(m，1H)，3.09-3.38(m，4H)1.90-1.97(m，2H)，0.96(t，3H)；MSMH+398；TLC(二氯甲烷/甲醇95∶5)Rf0.52。
c)3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁酮將3-(4-苯氧基苯基)-1-(3-亞丙基環丁基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.156g，0.00039mol)的二氯甲烷(25mL)溶液冷卻至-78℃並通入臭氧直到該溶液變藍。將該反應混合物攪拌5分鐘並通氮氣直到藍色消失。加入二甲硫(0.12mL，0.097g，0.00157mol)並將此混合物溫度回到室溫下。真空下除去溶劑得到3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁酮(0.144g，0.00038mol)，為黃褐色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.29(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，5.61-5.66(m，1H)，3.65-3.74(m，4H)；MSMH+372；TLC(二氯甲烷/甲醇＝90∶10)Rf0.62。
順-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁醇將3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁酮(0.208g，0.00056mol)在四氫呋喃(10mL)和無水乙醇(5mL)中的溶液與硼氫化鈉(0.021g，0.00056mol)室溫下反應4小時。加入水(5mL)並用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。合併的有機相用硫酸鎂乾燥，並真空下除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(98∶2)。真空下除去溶劑得到順-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁醇(0.090g，0.00024mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.68(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，5.31(d，1H)，4.82-4.89(m，1H)，4.04-4.10(m，1H)，2.70-2.73(m，2H)，2.50-2.60(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.50min.；MSMH+374實施例118反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁醇a)反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]環丁基4-硝基苯甲酸酯將順-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁醇(0.113g，0.000302mol)、4-硝基苯甲酸(0.101g，0.000605mol)和三苯基膦(0.159g，0.000605mol)的四氫呋喃(5mL)溶液冷卻至0℃。滴加偶氮二甲酸二乙酯(0.096mL，0.159g，0.000605mol)，保持溫度低於10℃。在18小時內讓此混合物溫度回到室溫下。真空下除去溶劑並將此殘餘物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用庚烷/乙酸乙酯(3∶1)。真空下除去溶劑得到反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]環丁基4-硝基苯甲酸酯(0.081g，0.000164mmol)，為黃褐色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.39(d，2H)，8.29(d，2H)，8.26(s，1H)，7.72(d，2H)，7.44(t，2H)7.12-7.22(m，5H)，5.60-5.69(m，1H)，3.03-3.12(m，2H)，2.85-2.94(m，2H)。
反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁醇將反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]環丁基4-硝基苯甲酸酯(0.081g，0.000164mol)的甲醇(5mL)溶液與氫氧化鉀(0.091g，0.00164mol)加熱回流1小時。真空下除去溶劑並將此殘餘物在水(10mL)和乙酸乙酯(5mL)之間分配。分層並將水層用乙酸乙酯(2×5mL)萃取。合併的有機相用1N氫氧化鈉水溶液(5mL)和鹽水(5mL)洗滌。將此有機層用硫酸鎂乾燥，並真空下除去溶劑。殘餘物懸浮於水並凍幹得到反式3-[4氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁醇(0.055g，0.000147mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.68(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，5.43-5.52(m，1H)，4.53-4.65(m，1H)，2.75-2.80(m，2H)，2.39-2.44(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.77min。
MSMH+374實施例1191-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]環丁基}-4-甲基六氫吡嗪二鎓二馬來酸鹽將3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁酮(0.300g，0.00081mol)、N-甲基哌嗪(0.243g，0.00242mol)和乙酸(0.146g，0.00242mol)在1，2-二氯乙烷(20ml)中的混合物，在40℃下攪拌20分鐘，並在1小時內分三批加入三乙醯氧基硼氫化鈉(0.223g，0.00105mol)。將此混合物在40℃下攪拌18小時。減壓除去溶劑並將此殘餘物在飽和碳酸氫鈉水溶液(30ml)和氯仿(15ml)之間分配。分離有機層並將水層再用萃取氯仿3次(每次15ml)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥並減壓除去溶劑得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(97∶3)作為流動相。真空下除去溶劑並將此殘餘物(0.120g，0.000263mol)溶解於無水乙醇(10mL)。加入馬來酸(0.122g，0.001053mol)的無水乙醇(5mL)溶液並將此混合物回流攪拌15分鐘。將此溶液冷卻至室溫並過濾此沉澱，用無水乙醇(3×5mL)洗滌。真空下除去溶劑得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]環丁基}-4-甲基六氫吡嗪二鎓二馬來酸鹽(0.181g，0.000397mmol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6400MHz)δ8.25(s，1H)，7.67(d，2H)，7.44(t，2H)，7.10-7.20(m，5H)，6.14(s，4H)，5.05-5.16(m，1H)，2.77(s，1H)，2.48-3.00(m，5H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.35min。
MSMH+456。
實施例120反式1-{3-[(苄基氧基)甲基]環丁基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺a)順-3-[(苄基氧基)甲基]環丁基甲烷磺酸酯將順-3-((苄基氧基)甲基)-1-環丁醇(2.50g，0.0130mol)的吡啶(50mL)溶液冷卻至0℃。滴加甲烷磺醯基氯(1.21mL，1.79g，0.0126mol)，保持溫度低於2℃。將此混合物攪拌4小時，然後倒入到冰水(100mL)並用乙醚(2×50mL)萃取。合併的有機層用水(3×50mL)和鹽水(50mL)洗滌。將此有機層用硫酸鎂乾燥並真空下除去溶劑得到順3-[(苄基氧基)甲基]環丁基甲烷磺酸酯(2.73g，0.0101mol)，為黃色油狀物。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ7.29-7.38(m，5H)，4.88-4.94(m，1H)，4.52(s，2H)，3.45(d，2H)，2.99(s，3H)，2.50-2.56(m，2H)，2.12-2.19(m，3H)。
b)反式1-{3-[(苄基氧基)甲基]環丁基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.452g，0.00149mol)的N，N-二甲基甲醯胺(10mL)溶液與順3-[(苄基氧基)甲基]環丁基甲烷磺酸酯(0.483g，0.00179mol)和碳酸銫(0.582g，0.00179mol)在70℃下反應2天。將該反應混合物倒入水中(30mL)並用乙酸乙酯(3×15mL)萃取。合併的有機層用水(2×20mL)和鹽水(20mL)洗滌。有機層用硫酸鎂乾燥並真空下除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(98∶2)洗脫。真空下除去溶劑得到反式1-{3-[(苄基氧基)甲基]環丁基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.325g，0.000681mol)，為黃褐色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(t，2H)，7.37-7.39(m，4H)，7.29-7.31(m，1H)，7.11-7.21(m，5H)，5.42-5.47(m，1H)，4.57(s，1H)，3.63(d，2H)，2.76-2.81(m，2H)，2.60-2.70(m，1H)，2.28-2.34(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt21.92min。
MSMH+478。
反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]環丁基甲醇將反式1-{3-[(苄基氧基)甲基]環丁基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.244g，0.00051mol)的二氯甲烷(10mL)溶液冷卻至-78℃，並滴加1.0M三氯化硼的二氯甲烷溶液(1.53mL，0.00153mol)，保持溫度低於-70℃。在-78℃下將該反應混合物攪拌7小時，之後加入8M氨的甲醇溶液(1.5mL)。真空下除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(93∶7)洗脫。真空下除去溶劑得到反式3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]環丁基甲醇(0.192g，0.00049mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6400MHz)δ8.23(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，5.36-5.46(m，1H)，4.70-4.80(br，1H)，3.58(d，2H)2.70-2.75(m，2H)，2.43-2.50(m，1H)，2.26-2.32(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.31min。
MSMH+388。
實施例121-137合成芳基烷基順-3(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺類的總方法將順-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.118mmol)懸浮於1，2-二氯乙烷(4mL)中。將適當的醛(0.177mmol)、乙酸(35mg，0.59mmol)和三乙醯氧基硼氫化鈉(50mg，0.236mmol)加入到此懸浮液中。再將該反應混合物在100℃加熱1.5小時。所有反應完成的確定基於TLC和/或HPLC分析。在共3-5天內分兩批再將三乙醯氧基硼氫化鈉(100mg，0.472mmol)加入到各反應中，並在室溫下繼續搖動。各反應用二氯甲烷(4mL)稀釋，然後用飽和碳酸氫鈉(4mL)停止反應。形成乳液時，加入鹽水(1mL)。分離有機層再減壓濃縮。粗品通過RP-HPLC純化，或者用質譜檢測(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；在12.5分鐘內0-100％乙腈和0.05M醋酸銨，緩衝至pH 4.5，25mL/min)或紫外檢測(Waters PrepLC 4000，流速10mL/min。λ＝254nm，梯度在40分鐘內10％至30％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。以80％-100％的純度獲得了所需最終化合物，純度通過分析RP-HPLC(流速1mL/min，λ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)獲得。
生成馬來酸鹽的總方法實施例137順-3-{4-[(4-溴苄基)氨基]-3-氟苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三馬來酸鹽將游離鹼形式的順-3-{4-[(4-溴苄基)氨基]-3-氟苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(36mg，0.061mmol)溶解於乙醇(2mL)中，然後加入馬來酸(14mg，0.121mmol)。將此混合物加熱得到幾乎清澈的溶液。此溶液冷卻時形成沉澱。過濾收集固體，用最小量的乙醇洗滌，然後減壓乾燥。收集到16mg的順-3-{4-[(4-溴苄基)氨基]-3-氟苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺三馬來酸鹽。 實施例138-153合成順和反-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的磺醯胺衍生物的總方法將順-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.236mmol)溶解於吡啶(3mL)。然後，或者以在吡啶(0.25mL)中的溶液形式或者以固體形式加入適當的磺醯基氯(0.472mmol)。該反應混合物在40℃在氮氣氛下加熱約1-7天。如果需要，則再加入磺醯基氯(0.5當量)。將各反應濃縮至其原體積的-半，然後用N，N-二甲基甲醯胺(1.5mL)稀釋。這些樣品通過RP-HPLC純化，或者用質譜檢測(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；在12.5分鐘內0-100％乙腈和0.05M醋酸銨，緩衝至pH4.5，25mL/min)或紫外檢測(WatersPrepLC 4000，流速10mL/min，λ＝254nm，梯度在40分鐘內10％至30％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。以90％-100％的純度獲得所需最終化合物，純度通過分析RP-HPLC獲得(流速1mL/minλ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)。在某些情況下製備馬來酸鹽。 實施例154順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N′-(2，4-二氟苯基)脲將順-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.236mmol)溶解於乙酸(6mL)中，然後室溫下緩慢加入2，4-二氟苯基異氰酸酯(44mg，0.283mmol)。2天後，將該反應混合物減壓濃縮得到粗品，為淡黃色油狀物(185mg)。粗品物質通過RP-HPLC純化(Waters PrepLC 4000，流速10mL/min，λ＝254nm梯度在40分鐘內10％至30％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。收集所需產物，為白色固體(52mg，0.090mmol)。
HPLC-RT13.19分鐘(流速1mL/min，λ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝580.3。
實施例155反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N』-(3-甲氧基苯基)脲單乙酸鹽。
將反-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(77mg，0.182mmol)懸浮於吡啶(1mL)。將3-甲氧基苯基異氰酸酯(30mg，0.200mmol)的吡啶(1mL)加入到該反應混合物中並繼續攪拌19小時。將該反應混合物減壓濃縮得到粗品，為淡黃色油狀物(149mg)。粗品物質通過RP-HPLC純化(Waters PrepLC 4000，流速10mL/min，λ＝254nm梯度在40分鐘內10％至30％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak，C18，300A，15μm，40×100mm柱)得到反-N』-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-(3-甲氧基苯基)脲，為白色固體(76mg，0.133mmol)。HPLC-RT12.33min，(流速1mL/minλ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝574.2。
實施例156反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N』-(3-甲基苯基)脲單乙酸鹽，以如上所詳述的方式製備。
HPLC-RT13.02min，(流速1mL/minλ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝558.3。
實施例157順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N′-(3-甲基苯基)脲，用與反式異構體所述的相同方法製備。
HPLC-RT13.03min，(流速1mL/minλ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝558.5。
實施例158順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-乙基-N′-(3-甲基苯基)脲a.順-3-[4-(乙基氨基)-3-氟苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將順-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(75mg，0.177mmol)懸浮於1，2-二氯乙烷(6mL)。加入乙醛(12mg，0.266mmol)的1，2-二氯乙烷(0.300mL)溶液和乙酸(42mg，0.708mmol)並將此混合物攪拌1小時。加入三乙醯氧基硼氫化鈉(75mg，0.354mmol)。16小時後，再加入三乙醯氧基硼氫化鈉(37mg，0.175mmol)並將該反應再繼續3小時。該反應混合物再進行減壓濃縮。殘餘物溶解於二氯甲烷(75mL)中，然後用飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)和鹽水(100mL)洗滌。將此有機層用無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。收集粗品(80mg)，為無色油狀物。m/z(MH+)＝453.3。
b.順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-乙基-N′-(3-甲基苯基)脲將順-3-[4-(乙基氨基)-3-氟苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(80mg，0.177mmol)溶解於吡啶(3mL)，然後冷卻至0℃。將間甲苯基異氰酸酯(26mg，0.194mmol)加入到該反應中並在0℃下繼續攪拌2.5小時。將該反應混合物升溫至室溫並攪拌過夜。再將間甲苯基異氰酸酯(13mg，0.101mmol)加入到該反應混合物中並繼續攪拌1周。將該反應混合物減壓濃縮得到粗品，為淡黃色油狀物(110mg)。通過RP-HPLC純化(Waters PrepLC4000，流速10mL/min，λ＝254nm梯度在40分鐘內10％至30％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。收集順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-乙基-N′-(3-甲基苯基)脲，為白色固體(10mg)。HPLC-RT13.18min，(流速1mL/min，λ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝586.5。
實施例159順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-苄基-N′-(2，4-二氟苯基)脲將順-3-[4-(苄基氨基)-3-氟苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(28mg，0.054mmol)溶解於乙酸(3mL)，然後在4天內加入2，4-二氟苯基異氰酸酯(28mg，0.183mmol)。將該反應混合物減壓濃縮得到淡黃色油狀物(65mg)。通過RP-HPLC純化(Waters PrepLC 4000，流速10mL/min，λ＝254nm梯度在40分鐘內10％至30％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；DeltapakC18，300A，15μm，40×100mm柱)得到順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N-苄基-N′-(2，4-二氟苯基)脲，為白色固體(13mg，0.019mmol)。HPLC-RT14.66min，(流速1mL/min，λ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝670.1。
實施例160順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-N′-(3-甲基苯基)脲將順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.123mmol)溶解於吡啶(3.5mL)，然後冷卻至0℃。加入間甲苯基異氰酸酯(18mg，0.135mmol)並在16小時內將該反應升溫至室溫。該反應混合物減壓濃縮得到淡黃色油狀物(200mg)。通過RP-HPLC純化(Waters PrepLC 4000，流速10mL/min，λ＝254nm梯度在40分鐘內10％至30％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。收集所需產物，為白色固體(52mg)。HPLC-RT12.58min，(流速1mL/minλ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝540.1。
實施例161-164N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲的醯胺類物質
a.4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸叔丁基酯將3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.12g，6.48mmol)溶解於1∶1二噁烷/水(20mL)中。將碳酸鈉(1.03g，9.72mmol)和二碳酸二叔丁基酯(1.55g，7.12mmol)加入到該反應混合物。3小時後，將該反應減壓濃縮。剩餘的殘餘物在二氯甲烷(100mL)和水(100mL)之間分配，然後用二氯甲烷(200mL)萃取。合併有機層並用鹽水(100mL)洗滌。有機層再用硫酸鈉乾燥並減壓濃縮得到黃棕色泡沫(2.85g，6.67mmol)。HPLC-RT14.41min，(流速1mL/min，λ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝428.1。
a.4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯將4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸叔丁基酯(600mg，1.41mmol)溶解於吡啶(25mL)，並冷卻至0℃。加入間甲苯基異氰酸酯(206mg，1.54mmol)並將該反應在0℃下攪拌2.5小時。將該反應混合物減壓濃縮得到粗品，為棕黃色泡沫(841mg)。通過柱色譜在矽膠上純化，用25％至50％乙酸乙酯/庚烷梯度、接著用5％甲醇/二氯甲烷作為洗脫劑，得到4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯，為淡黃色固體(243mg，0.434mmol)。HPLC-RT17.82min，(流速1mL/min，λ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝561.4。
a.N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲二鹽酸鹽將4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(117mg，0.209mmol)懸浮於丙酮(7mL)，並冷卻至0℃。將鹽酸(6N，1.6mL)緩慢加入到該反應混合物中。將該反應混合物升溫至室溫，然後在50℃下加熱4小時。減壓下濃縮該反應混合物，接著用二氯甲烷(25mL)研磨，得到N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲二鹽酸鹽，為米白色固體(111mg，0.241mmol)。HPLC-RT11.98min，(流速1mL/minλ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝461.3。
a.合成N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲的醯胺類物質的總方法i).總方法(A)未保護的胺基酸實施例161N-[4-(4-氨基-1-{1-[2-(二甲基氨基)乙醯基]-4-哌啶基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-N′-(3-甲基苯基)脲將N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲二鹽酸鹽(50mg，0.109mmol)溶解於二氯甲烷(6mL)和N-乙基-N-異丙基胺(0.095mL)中。將N，N-二甲基甘氨酸(14mg，0.136mmol)、1-羥基-7-氮雜苯並三唑(15mg，0.109mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(26mg，0.136mmol)加入到該反應混合物中。16小時後，將該反應混合物用二氯甲烷(100mL)稀釋，然後用水(50mL)和鹽水(50mL)洗滌。將此有機層用無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。剩餘的殘餘物用乙醚(25mL)研磨得到淡黃色固體(52mg，0.097mmol)。通過RP-HPLC純化(WatersPrepLC 4000，流速10mL/min，λ＝254nm梯度在40分鐘內10％至30％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)得到N-[4-(4氨基-1-{1-[2-(二甲基氨基)乙醯基]-4-哌啶基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-N′-(3-甲基苯基)脲，為白色固體(27mg，0.050mmol)。HPLC-RT12.48min，(流速1mL/minλ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝546.0。
實施例162N-[4-(4-氨基-1-{1-[3-(二乙基氨基)丙醯基]-4-哌啶基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-N′-(3-甲基苯基)脲單乙酸鹽如總方法A所述製備。
HPLC-RT13.16min，(流速1mL/minλ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝588.2。
d.ii).總方法(B)叔丁氧基羰基保護的胺基酸實施例163N-[4-(4-氨基-1-{1-[2-(甲基氨基)乙醯基]-4-哌啶基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-N′-(3-甲基苯基)脲將N-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲二鹽酸鹽(63mg，0.118mmol)溶解於二氯甲烷(7mL)和N-乙基-N-異丙基胺(0.113mL)中，將2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]乙酸(28mg，0.147mmol)、1-羥基-7-氮雜苯並三唑(16mg，0.118mmol)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(28mg，0.147mmol)加入到該反應混合物中。16小時後，該反應混合物用二氯甲烷(75mL)稀釋，然後用水(75mL)洗滌。將此有機層用無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。分離粗品，為淡黃色固體(75mg，0.119mmol)。
將粗品N-{2-[4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶子基]-2-氧代乙基}-N-甲基氨基甲酸叔丁基酯(75mg，0.119mmol)溶解於丙酮(5mL)，然後緩慢加入鹽酸(6N，1mL)。該反應混合物在45℃下加熱2.5小時再減壓濃縮。剩餘的殘餘物用二氯甲烷(25mL)研磨得到淡黃色固體。通過RP-HPLC純化(Waters PrepLC 4000，流速10mL/min，λ＝254nm梯度在40分鐘內10％至30％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；DeltapakC18，300A，15μm，40×100mm柱)得到N-[4-(4-氨基-1-{1-[2-(甲基氨基)乙醯基]-4-哌啶基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-N′-(3-甲基苯基)脲，為白色固體(40mg，0.075mmol)。HPLC-RT12.22min，(流速1mL/minλ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝532.1。
實施例164N-{4-[4-氨基-1-(1-{3-[(2-羥基乙基)氨基]丙醯基}-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲單乙酸鹽a).3-[(叔丁氧基羰基)(2-羥基乙基)氨基]丙酸將商購的3-[(2-羥基乙基)氨基]丙酸(76mg，0.571mmol)溶解於二噁烷/水(1.5mL/1.5mL)中，然後加入碳酸鈉(91mg，0.886mmol)和二碳酸二叔丁基酯(137mg，0.628mmol)。將該反應混合物室溫下攪拌2天，過濾並減壓濃縮得到3-[(叔丁氧基羰基)(2羥基乙基)氨基]丙酸，為無色油狀物(135mg，0.579mmol)。1H NMR(d6-DMSO)δ1.40(s，9H)；2.36(br s，2H)；3.27(br s，3H)；3.46(br s，2H)；3.64(br s，2H)；5.71(br s，1H)。
b).N-{4-[4-氨基-1-(1-{3-[(2-羥基乙基)氨基]丙醯基}-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲單乙酸鹽通過d.ii).總方法B中描述的方法製備。
HPLC-RT12.19min，(流速1mL/min λ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝576.3。
實施例165順-3-{4-[(1-甲基-1H-苯並[d]咪唑-2-基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺
a)N2-(4-溴苯基)-1-甲基-1H-苯並[d]咪唑-2-胺將2-氯-1-甲基-苯並咪唑(0.639g，3.84mmol)和4-溴苯胺(0.710g，4.12mmol)在170℃加熱21小時。將所得棕色固體冷卻至室溫，用3份5mL的庚烷洗滌，然後用甲苯研磨得到N2-(4-溴苯基)-1-甲基-1H-苯並[d]咪唑-2-胺(1.120g，90％)，為棕色粉末。RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中的25至100％ CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝10.85分鐘，96％；m/z 302(MH+)。
b)N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1-甲基-1H-苯並[d]咪唑-2-胺向N2-(4-溴苯基)-1-甲基-1H-苯並[d]咪唑-2-胺(1.12g，3.71mmol)的二甲基甲醯胺(15mL)溶液中，在氮氣氛下加入雙(頻哪醇合)乙硼烷(1.129g，4.448mmol)，醋酸鉀(1.204g，12.27mmol)，和[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.334g，0.409mmol)。將此紫色溶液在80℃下攪拌18小時，然後冷卻至室溫。將所得暗棕色混合物真空濃縮得到暗棕色固體。此物質用二氯甲烷研磨，過濾，並濃縮此濾液得到暗棕色油狀物。通過急驟色譜在矽膠上純化(用30％乙酸乙酯/庚烷洗脫)得到N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1-甲基-1H-苯並[d]咪唑-2胺(0.515g，40％)，為白色粉末1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.10(s，1H)，7.88(d，2H)，7.63(d，2H)，7.40(m，1H)，7.30(m，1H)，7.08(m，2H)，3.72(s，3H)，1.29(s，12H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝11.70分鐘，90％；m/z 350(MH+)。
c)順-3-{4-[(1-甲基-1H-苯並[d]咪唑-2-基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺向順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.227mmol)的乙二醇二甲基醚(3mL)和水(1.5mL)溶液中，在氮氣氛下加入N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1-甲基-1H-苯並[d]咪唑-2-胺(0.099g，0.28mmol)、四(三苯基膦)鈀(0)(0.013mg，0.011mmol)及碳酸鈉(0.060mg，0.568mmol)。將此溶液在83℃下攪拌15小時。將所得黃色混合物真空濃縮得到黃色油狀物。通過製備HPLC純化(在20分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，tr＝7.3-11.2min)得到順-3-{4-[(1-甲基-1H-苯並[d]咪唑-2-基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為米白色固體(0.061g，50％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.17(s，1H)，8.23(s，1H)，8.08(d，2H)，7.62(d，2H)，7.42(m，1H)，7.33(m，1H)，7.08(m，1H)，4.80(m，1H)，3.76(s，3H)，2.50-2.07(m，12H)，1.80-1.60(m，8H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％ CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝5.92min.，99％；m/z 537(MH+)。
實施例166-170得自順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-7H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的醯胺典型方法向存在於二氯甲烷(1.5ml)中適當的甲酸(0.46mmol)加入草醯氯(400μl，0.2mmol)和DMF(1滴)。給小瓶蓋上隔膜，並在每個蓋上插入小孔針以釋放壓力。將小瓶在J-Kem震動器上搖動過夜。分離50％的溶液，並將過量的草醯氯和二氯甲烷在12-孔Supelco支管上真空下隨氮氣流除去。將粗品醯氯(0.23mmol)加入到存在於乾燥吡啶(800μl)的順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(40mg，0.09mmol)中並室溫下攪拌。將所得溶液直接通過製備HPLC純化(Hypersil BSD C18，5μm，100×21mm，在10分鐘內0％-100％乙腈/0.05M醋酸銨，25.0mL/min)。所得產物通過在二氯甲烷(4ml)和1.0N氫氧化鈉(2ml)之間分配，並通過Empor高效萃取圓盤柱(C18-SD十八烷基)進行純化，得到相應的產物。此化合物相應的LCMS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH 4.5)，3.5mL/min)數據在下頁詳述。
實施例171順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺向順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(75mg，0.17mmol)和三乙胺(34mg，0.34mmol)的二氯甲烷(2.5ml)溶液中，滴加存在於二氯甲烷(0.5ml)中的氫化肉桂醯氯(34mg，0.20mmol)。將此溶液在室溫下攪拌48小時，並再加入一個等份的氫化肉桂醯氯。將此反應混合物再攪拌24小時。將所得混合物在二氯甲烷(4ml)和2N NaOH(1.5ml)之間分配，並通過Empore萃取筒。蒸發溶劑得到油狀固體，其通過矽膠色譜純化，用10-20％ MeOH/二氯甲烷洗脫得到順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺(12mg，13％)。1H NMR(CDCl3)δH 8.55(1H，d)，8.36(1H，s)，7.75(1H，s)，7.25(7H，m)，5.51(2H，bs)，4.91(1H，m)，3.92(3H，s)，3.09(2H，m)，2.76(2H，m)，2.34-2.59(9H，m)，2.29(3H，s)，2.16(2H，m)，1.85(4H，m)，1.66(2H，m)。
LCMS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH 4.5)，3.5mL/min.)Rt＝1.92分鐘，MH+＝569.6。
實施例172反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲醯胺三馬來酸鹽向反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(500mg，1.15mmol)的吡啶(5ml)溶液中，滴加4-(二甲基氨基)苯甲醯基氯(420mg，2.28mol)。將此溶液攪拌過夜，蒸發溶劑並將此殘餘物在二氯甲烷和2N NaOH溶液之間分配。水層用二氯甲烷(X3)萃取。將有機相干燥，過濾並蒸發得到固體，其用EtOAc/Et2O(1∶4)研磨得到固體，其溶解於EtOAc並用馬來酸(3當量)處理得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲醯胺(320mg，30％)。1H NMR(d6-DMSO)δH 9.05(1H，s)，8.25(1H，s)，8.18(1H，d，J＝8Hz)，7.84(2H，d，J＝9.2Hz)，7.29(1H，s)，7.25(1H，d，J＝8Hz)，6.78(2H，d，J＝8.8Hz)，6.17(6H，s)，4.71(1H，m)，3.95(3H，s)，3.01(6H，s)，2.83-3.18(9H，m)，2.68(3H，s)，2.08(6H，m)，1.56(2H，m)。HPLC(5.23分鐘，100％)實施例173N-4-[4-氨基-1-(3-氰基-2-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基-N′-(3-甲基苯基)脲a).2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-3-吡啶甲腈將氫化鈉(60％在礦物油中的分散液，3.825mmol，153mg)加入到4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(1.0g，3.825mmol)的DMF(5mL)懸浮液中。10分鐘後，加入2-氯-3-氰基吡啶(531mg)並將該反應在60℃下加熱16小時。所得深色混合物倒入到冰水(50mL)中並過濾收集固體得到2-(4-氨基-3碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-3-吡啶甲腈，為棕色固體(1.1g，79％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.82(1H，m)，8.29(1H，s)，8.64(1H，m)和8.93(1H，m)；RP-HPLC(Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm柱，在50mM乙酸胺中0％至100％乙腈，緩衝至pH 4.5，3.5mL/min)Rt2.16min.
b)2-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-3-吡啶甲腈將2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-3-吡啶甲腈(1.35g)、N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(1.5g)、四-三苯基膦鈀(253mg)和碳酸鈉(1.153g)懸浮於脫氣的水(10mL)和DME(20mL)中並在85℃下加熱16小時。真空下除去溶劑並將此殘餘物在乙酸乙酯(200mL)和水(200mL)之間分配。移出固體沉澱並分離有機層，用無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。殘餘物用最少量的乙酸乙酯結晶得到N-4-[4-氨基-1-(3-氰基-2-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基氨基甲酸叔丁基酯，為米白色固體(400mg)。將TFA(4 mL)緩慢加入到N-4-[4-氨基-1-(3-氰基-2-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基氨基甲酸叔丁基酯(400mg)的二氯甲烷(4mL)懸浮液中。1小時後，將所得紅色溶液減壓濃縮並用飽和碳酸鈉水溶液中和油狀殘餘物得到2-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-3-吡啶甲腈，為黃色沉澱(300mg)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ5.61(2H，br s)，6.92(1H，t)，7.36(2H，m)，7.76(1H，m)，8.32(1H，s)，8.62(1H，m)和8.93(1H，m)；RP-HPLC(Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm柱，在50mM乙酸胺中0％至100％乙腈，緩衝至pH 4.5，3.5mL/min)Rt2.25min。
c).N-4-[4-氨基-1-(3-氰基-2-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基-N′-(3-甲基苯基)脲將間甲苯基異氰酸酯(0.1mmol)加入到(2-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-3-吡啶甲腈(35mg，0.1mmol)的吡啶溶液中，並將該反應室溫下攪拌2天。該反應真空濃縮。用質量驅動的製備RP-HPLC純化(Micromass/Gilson，Hypersil BDSC18，5μm，100×21.2mm柱；在12.5分鐘內0-100％乙腈和0.05M醋酸銨，緩衝至pH 4.5，25mL/min)得到N-4-[4-氨基-1-(3-氰基-2-吡啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基-N′-(3-甲基苯基)脲(4mg)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ2.30(3H，s)，6.84(1H，d)，7.19(1H，t)，7.25(1H，m)，7.33(1H，br s)，7.58(2H，m)，7.80(1H，m)，8.35(1H，s)，8.43(1H，t)，8.65(1H，m)，8.80(1H，br s)，8.95(1H，m)和9.10(1H，br s)，及RP-HPLC(Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm柱；在50mM乙酸胺中0％至100％乙腈，緩衝至pH 4.5，3.5mL/min)Rt3.09min。
實施例174-185製備N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2氟苯基-1-芳基磺醯胺的總路線a)4-(4-氨基-3-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氟苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯將4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(8.756g，20.26mmol)、N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(10.25g，30.38mmol)、四-三苯基膦鈀(940mg，0.81mmol)和碳酸鈉(4.20g，50.64mmol)的混合物懸浮於脫氣的水(57mL)和DME(323mL)中，並在80℃下加熱18小時。真空下除去溶劑並將此殘餘物在乙酸乙酯(200mL)和10％碳酸鈉水溶液(200mL)之間分配。有機層進一步用10％碳酸鈉水溶液(2×200mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮。在矽膠上通過柱色譜純化，用1∶1乙酸乙酯庚烷接著用純乙酸乙酯作為洗脫劑，得到不純的餾份。此餾份進一步通過用乙酸乙酯重結晶來純化得到4-(4-氨基-3-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氟苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(7.256g，68％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.43(9H，s)，1.49(9H，s)，1.93(2H，m)，2.01(2H，m)，3.00(2H，br m)，4.04(2H，br d)，4.90(1H，m)，7.42(2H，m)，7.83(1H，t)，8.24(1H，s)和9.17(1H，br s)。
b)3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將4-(4-氨基-3-{4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3氟苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(6.26g，11.9mmol)、5M HCl(95mL)和丙酮(390mL)的混合物，室溫下攪拌16小時。將該反應用碳酸鈉鹼化並減壓濃縮。殘餘物在二氯甲烷(200mL)和水(200mL)之間分配，並將此水相再用二氯甲烷(2×200mL)萃取。合併的有機層用無水硫酸鈉乾燥並蒸發至幹得到3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.427g，88％)；1H NMR(DMSOd6，400MHz)δ1.85(2H，br t)，2.06(2H，m)，2.65(2H，m)，3.10(2H，m)，4.72(1H，m)，5.45(2H，br s)，6.89(1H，m)，7.22(2H，m)和8.19(1H，s)。
c)N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基苯胺向3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.0g，6.11mmol)、N-甲基哌啶-4-酮(0.69g，6.11mmol，0.8mL)和冰醋酸(1.25mL)的N-甲基吡咯烷酮(100mL)溶液中，在氮氣氛下加入三乙醯氧基硼氫化鈉(1.5當量，1.94g，9.16mmol)。將此溶液攪拌18小時，再加入三乙醯氧基硼氫化鈉(0.6當量，0.78g)和N-甲基哌啶-4-酮(0.4當量，0.32mL)並將該反應再繼續18小時。該反應真空濃縮，在二氯甲烷(100mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)之間分配。水層再用二氯甲烷(4×100mL)萃取並將合併的有機層用無水硫酸鎂乾燥，並蒸發至幹得到黃色泡沫(0.95g)。在矽膠上通過柱色譜純化，用二氯甲烷∶甲醇(4∶1)作為洗脫劑得到N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基苯胺(1.67g，72％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.44(2H，m)，1.69(3H，m)，1.83(4H，m)，2.13(3H，s)，2.28(4H，m)，2.78(2H，br d)，2.98(2H，br d)，4.58(1H，m)，5.25(2H，br s)，6.89(1H，t)，7.18(1H，d)，7.24(1H，d)和8.19(1H，s)。
d)將N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基苯胺磺醯基化的總方法將N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基苯胺(100mg，0.236mmol)和芳基磺醯基氯(2當量，0.471mmol)在吡啶(2mL)中的混合物，在40℃下加熱3天。真空下除去溶劑。用質量驅動的製備RP-HPLC純化(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；在12.5分鐘內在0.05M醋酸銨中0-100％乙腈，緩衝至pH 4.5，25mL/min)得到下列化合物 分析RP-HPLC條件10至90％CH3CN在0.1N醋酸銨水溶液中，緩衝至pH 4.5，在12分鐘內，2mL/min，用Waters Symmetry C18，5μm，250×4.6mm柱。
實施例186-189順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺類似物a.合成磺醯胺和甲醯胺衍生物的總方法將順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.10mmol)、相應的親電子試劑(磺醯基氯或醯氯)(1當量)和吡啶(1mL)的混合物，在40℃下加熱24-72小時。(在一些情況下，需要再加入親電子試劑(一般1當量)以便使完成反應)。真空下除去溶劑。用質量驅動的製備RP-HPLC純化(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；0-100％乙腈和0.05M醋酸銨，緩衝至pH 4.5，在12.5分鐘內，25mL/min)得到下列化合物 分析RP-HPLC條件在0.1N醋酸銨水溶液中10至90％CH3CN，緩衝至pH 4.5，在12分鐘內，2mL/min，用Waters Symmetry C18，5μm，250×4.6mm柱。
實施例1951-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-{4-[(苯乙基氨基)(苯基)甲基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺向順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.10mmol)、苯乙醛(13mg)和冰醋酸(0.013mL)的1，2-二氯乙烷(1mL)溶液中，在氮氣氛下加入三乙醯氧基硼氫化鈉(2當量，43mg)。將此溶液攪拌18小時，然後真空濃縮，在二氯甲烷(10mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)之間分配，並分離有機層。水層再用二氯甲烷(4×10mL)萃取，並將合併的有機層用無水硫酸鎂乾燥並蒸發至幹。用質量驅動的製備RP-HPLC純化(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；0-100％乙腈和0.05M醋酸銨，緩衝至pH 4.5，在12.5分鐘內，25mL/min)得到1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-{4-[(苯乙基氨基)(苯基)甲基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(28mg)；RP-HPLC(在0.1N醋酸銨水溶液中10至90％ CH3CN，緩衝至pH 4.5，在12分鐘內，2mL/min，用Waters Symmetry C18，250×4.6mm柱)Rt＝12.269分鐘，95.2％；m/z(MH+)601.3。
實施例196N-{4-[4-氨基-1-(4-氧代環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲將間甲苯基異氰酸酯(1.2當量，37.7mg，0.283mmol)加入到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(80.3mg，0.236mmol)的吡啶溶液中。在40℃下16小時後，用水(2mL)停止該反應並蒸發至幹。通過製備RP-HPLC純化(10％至40％CH3CN在0.1N醋酸銨水溶液中，緩衝至pH 4.5，在60分鐘內，10mL/min，用水Deltapak C18，15μm，100×40mm柱，λ＝254nm)得到N-{4-[4-氨基-1-(4-氧代環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N′-(3-甲基苯基)脲(91mg，84％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ2.26(2H，br t)，2.30(3H，s)，2.43(4H，m)，2.69(2H，m)，5.26(1H，m)，6.82(1H，d)，7.18(1H，t)，7.25(1H，br d)，7.32(1H，br s)，7.45(2H，m)，8.26(1H，s)，8.36(1H，t)，8.72(1H，d)和9.05(1H，s)和RP-HPLC(10至90％CH3CN在0.1N醋酸銨水溶液中，緩衝至pH 4.5，在12分鐘內，2mL/min，用Waters SymmetryC18，5μm，250×4.6mm柱)Rt＝15.433分鐘，97.9％。
實施例1972-[4-氨基-3-(4-[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯a)2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯將氫化鈉(60％，0.138g，3.45mmol)加入到3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.750g，2.87mmol)的N，N-二甲基甲醯胺(9mL)懸浮液中，並將此混合物室溫下攪拌1小時，直到獲得均勻溶液。加入溴乙酸乙酯(0.447mL，4.03mmol)，並將此混合物在室溫氮氣氛下攪拌14小時。減壓除去溶劑並將所得固體依次用水(25mL)和乙醚/石油醚(4∶1，50mL)研磨，得到2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯(0.791g，2.28mmol)，為棕色固體1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.21(s，1H)，5.17(s，2H)，4.15(qt，2H)，1.20(t，3H)；RP-HPLC(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt6.87min。
b)2-(4-氨基-3-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氟苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯將2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯(0.790g，2.28mmol)、N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(1.08g，3.19mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.105g，0.091mmol)及碳酸氫鈉(0.478g，5.69mmol)在N，N-二甲基甲醯胺(12mL)和水(2mL)中的懸浮液，在90℃下在氮氣氛下加熱14小時。減壓除去溶劑，並將此殘餘物在飽和氯化鈉水溶液(50mL)和乙酸乙酯(30mL)之間分配。分離水層並進一步用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓濃縮。通過急驟色譜在矽膠上純化，用乙酸乙酯/庚烷(9∶1)作為流動相洗脫，得到2-(4-氨基-3-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氟苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯(0.193g，0.449mmol)，為黃色油狀物1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.41(s，1H)，8.30(m，1H)，7.47(m，2H)，6.81(s，1H)，5.47(br，2H)，5.20(s，2H)，4.25(qt，2H)，1.55(s，9H)，1.27(t，3H)；RP-HP(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt9.47min.
c)2-[4-氨基-3-(4-[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯向其中裝有氯化氫的二噁烷溶液(4M，6mL)和乙醇(6mL)的50mL燒瓶中，加入2-(4-氨基-3-4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氟苯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯(0.452g，1.05mmol)。在此燒瓶上安裝空氣冷凝器，並將此混合物在50℃在氮氣氛下攪拌。16小時後，該反應混合物冷卻至室溫，並減壓除去溶劑。殘餘物在鹽酸(0.5M，30mL)和乙醚(20mL)之間分配。分離有機層並傾析掉。將水層用飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)鹼化，並將所得混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合併的乙酸乙酯萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到黃色固體(0.295g)。
將黃色固體加入到2，3-二氯苯磺醯基氯(0.263g，1.07mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.005g，0.041mmol)的吡啶(5mL)溶液中，並將所得溶液並在氮氣氛下攪拌3天。加入甲醇/二氯甲烷(1∶19，100mL)並將所得混合物用碳酸氫鈉水溶液(3×10mL)萃取。將此有機層用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮。將此物質的一部分通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt12.4-13.9min)得到2-[4-氨基-3-(4-[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯，為白色固體(0.011g，0.020mmol)RP-HP(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt9.78min。1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.84(s，1H)，8.25(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.43(m，3H)，5.21(s，2H)，4.15(qt，2H)，1.20(t，3H)；MSMH+539。
實施例198N1-4-[4-氨基-1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基-2，3-二.氯-1-苯磺醯胺將2-[4-氨基-3-(4-[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(0.120g，0.222mmol)懸浮於乙二醇二甲基醚(2mL)中，並將此懸浮液冷卻至0C。加入氫化鋰鋁(0.025g，0.660mmol)。並將該反應混合物升溫至室溫。24小時後，通過加入鹽酸(0.5M，10mL)來停止過量的氫化物的反應。水層用乙酸乙酯(2×7mL)萃取，並將有機萃取物傾析掉。將水層用飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)鹼化，用氯化鈉飽和，並用甲醇/二氯甲烷(1∶9，4×20mL)萃取。合併有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓濃縮。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt8.93-9.90min)得到N1-4-[4-氨基-1-(2-羥基乙基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基-2，3-二氯-1-苯磺醯胺，為米白色固體(0.004g，0.008mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.82(s，1H)，8.23(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.39(m，3H)，6.90(br，2H)，4.86(t，1H)，4.35(t，2H)，4.04(t，2H)；MS(M-H)-495。
實施例199N1-(4-{4-氨基-1-[2-氰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基｝-2-氟苯基)-2，3-二氯-1-苯磺醯胺將3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.172g，0.66mmol)、氫化鈉(60％，0.030g，0.75mmol)、2，5-二氟苄腈(0.105g，0.75mmol)和N，N-二甲基甲醯胺(2.5mL)的懸浮液在100℃下加熱24小時。將此反應混合物冷卻至室溫，並減壓濃縮。將此萃取物在二氯甲烷(50mL)和水(10mL)之間分配。分離有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓濃縮。
將此物質(0.045g)和碳酸銫(0.115g，0.353mmol)懸浮液1-甲基哌嗪(1mL)中，並將此混合物在110℃下在密封試管中加熱20小時。將此反應混合物冷卻至室溫並減壓濃縮。殘餘物用鹽酸(1M，10mL)酸化，並將水相用乙醚(10mL)萃取。傾析有機相，並將此水相用碳酸鈉水溶液(3M，10mL)鹼化。將水相用二氯甲烷(3×15mL)萃取，並將合併的有機餾份用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓濃縮。此物質用(b)中的方法加工，並用(c)中的方法脫保護並磺醯基化。通過製備HPLC純化產物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt8.4-9.4min)得到N1-(4-{4-氨基-1-[2-氰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-2，3-二氯-1-苯磺醯胺，為黃色固體(0.007g，0.011mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.98(d，1H)，7.86(d，1H)，7.69(d，1H)，7.53(m，6H)，3.30(m，4H)，2.70(m，4H)，2.40(s，3H)；MS(M-H)-650。
實施例200順-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺a)4-溴-2-甲氧基苄腈在-50℃下，將甲醇鉀(4.24g，60.0mmol)的四氫呋喃(40mL)懸浮液分批加入到4-溴-2-氟苄腈(8.0g，40.0mmol)的四氫呋喃(50mL)溶液中。1小時後，除去乾冰浴並將該反應混合物升溫至室溫，並室溫下攪拌6小時。該反應混合物倒入到水(250mL)中，並過濾收集此固體得到4-溴-2-甲氧基苄腈(7.85g，92％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.94(s，3H)，7.32(d，J＝8.23Hz，1H)，7.15(s，1H)，7.69(d，J＝8.23Hz，1H)。
b)4-溴-2-甲氧基苯甲酸將4-溴-2-甲氧基苄腈(7.35g，35mmol)溶解於二噁烷(400mL)。加入氫氧化鈉(2.0N，200mL)並將此懸浮液在100℃下加熱16小時。減壓除去有機溶劑並將此含水混合物過濾並用水洗滌。此濾液用鹽酸(5.0N)中和至pH 1。過濾收集固體得到4-溴-2-甲氧基苯甲酸(3g，37％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.84(s，3H)，7.21(d，J＝8.25Hz，1H)，7.33(s，1H)，7.58(d，J＝8.23Hz，1H)。
c)4-溴-2-甲氧基-1-苯羰基氯將4-溴-2-甲氧基苯甲酸(2.934g，12.70mmol)與碳酸鈉(2.2g，26.51mmol)混合。加入亞硫醯氯(20mL)並將該反應混合物在80℃下加熱16小時。蒸餾掉過量的亞硫醯氯後，加入庚烷並過濾收集固體，得到4-溴-2-甲氧基-1-苯羰基氯(3.16g，100％)。1H NMR(CDCl3)δ3.94(s，3H)，7.16(s，1H)，7.20(d，J＝8.51Hz，1H)，7.95(d，J＝8.51Hz，1H)。
d)N1-苯基-4-溴-2-甲氧基苯甲醯胺將苯胺(1.24mL，13.62mmol)緩慢加入到4-溴-2-甲氧基-1-苯羰基氯(3.24g，12.98mmol)和三乙胺(2.7mL，19.48mmol)在二氯甲烷(130mL)中的混合物中。3小時後，減壓除去溶劑。加入乙酸乙酯並將此混合物過濾。此濾液減壓濃縮並將此殘餘物用乙酸乙酯/庚烷重結晶得到N1-苯基-4-溴-2-甲氧基苯甲醯胺(2.92g，74％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.92(s，3H)，7.09(s，1H)，7.27(m，1H)，7.33(m，2H)，7.39(s，1H)，7.55(d，J＝8.15Hz，1H)，7.71(m，2H)，10.10(s，1H)。
e)4-(苯氨基羰基)-3-甲氧基苯基羥基代硼酸在-78℃下將正丁基鋰(1.6M在己烷溶液中，5.1ml，8.16mmol)緩慢加入到N1-苯基-4-溴-2-甲氧基苯甲醯胺(1.0g，3.26mmol)的四氫呋喃(25mL)溶液中。30分鐘後，快速加入硼酸三異丙基酯(1.13mL，4.90mmol)。15分鐘後將該反應混合物升溫至室溫並在室溫下攪拌16小時。加入鹽酸(2.5N，18mL)並將此混合物攪拌5小時。分層並將水層用乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物用乙酸乙酯/庚烷重結晶，得到4-(苯氨基羰基)-3-甲氧基苯基羥基代硼酸(0.549g，62％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.91(s，3H)，7.08(m，1H)，7.33(m，2H)，7.47(d，J＝7.57Hz，1H)，7.59(m，2H)，7.73(d，J＝7.36Hz，2H)，8.24(s，2H)，10.10(s，1H)。
f)順-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-基胺(148mg，0.335mmol)、4-(苯氨基羰基)-3-甲氧基苯基羥基代硼酸(100mg，0.369mmol)、四(三苯基膦)鈀(23mg，0.020mmol)和碳酸鈉(85mg，0.845mmol)與乙二醇二甲醚(4mL)和水(2mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作為流動相，得到順-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺(125mg，69％)。1H NMR(CDCl3)δ1.69(m，2H)，1.86(m，2H)，2.17(m，2H)，2.31(s，3H)，2.44(m，11H)，4.15(s，3H)，4.96(m，1H)，5.69(bs，2H)，7.14(m，1H)，7.37(m，2H)，7.45(m，2H)，7.68(m，2H)，8.41(m，2H)，9.77(s，1H)。LC/MS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.5mL/min.)MH+＝541.2，Rt＝2.58min。
實施例201反-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺將反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(266mg，0.604mmol)、4-(苯氨基羰基)-3-甲氧基苯基羥基代硼酸(180mg，0.664mmol)、四(三苯基膦)鈀(42mg，0.036mmol)和碳酸鈉(154mg，1.449mmol)與乙二醇二甲醚(8mL)和水(4mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作為流動相，得到反-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺(226mg，69％)。1H NMR(CDCl3)δ1.58(m，4H)，2.17(m，7H)，2.32(s，3H)，2.52(m，2H)，2.69(2.69，3H)，4.16(s，3H)，4.78(m，1H)，5.49(bs，2H)，7.14(m，1H)，7.43(m，4H)，7.69(m，2H)，8.44(m，2H)，9.77(s，1H)。LC/MS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.5mL/min.)MH+541.2，Rt＝2.61min。
實施例202順-N1-苄基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺a)N1-苄基-4-溴-2-甲氧基苯甲醯胺將苄基胺(0.69mL，6.31mmol)緩慢加入到4-溴-2-甲氧基-1-苯羰基氯(1.5g，6.01mmol)和三乙胺(1.3mL，9.02mmol)在二氯甲烷(60mL)中的混合物中。3小時後，減壓除去溶劑。加入乙酸乙酯並將此混合物過濾。此濾液減壓濃縮並將此殘餘物用乙酸乙酯/庚烷重結晶得到N1-苄基-4-溴-2-甲氧基苯甲醯胺(1.654g，86％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.92(s，3H)，4.67(d，J＝5.67Hz，32H)，7.31(m，7H)，8.03(bs，1H)，8.13(d，J＝8.41，1H)。
b)4-[(苄基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羥基代硼酸在-78℃下將正丁基鋰(1.6M在己烷溶液中，8.0ml，12.88mmol)緩慢加入到N1-苄基-4-溴-2-甲氧基苯甲醯胺(1.65g，5.15mmol)的四氫呋喃(40mL)溶液中。30分鐘後，快速加入硼酸三異丙基酯(1.8mL，7.73mmol)。13分鐘後將該反應混合物升溫至室溫並攪拌16小時。加入鹽酸(2.5N，36mL)並將此混合物攪拌過夜。除去有機溶劑並將水層用乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作為流動相，得到4-[(苄基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羥基代硼酸(0.675g，46％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.90(s，3H)，4.51(d，J＝6.18Hz，2H)，7.24(m，1H)，7.34(m，4H)，7.43(d，J＝7.55Hz，1H)，7.59(s，1H)，7.69(d，J＝7.55Hz，1H)，8.23(s，2H)，8.69(m，1H)。
c)順-N1-苄基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(141mg，0.319mmol)、4-[(苄基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羥基代硼酸(100mg，0.351mmol)、四(三苯基膦)鈀(22mg，0.019mmol)和碳酸鈉(81mg，0.765mmol)與乙二醇二甲醚(4mL)和水(2mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作為流動相，得到順-N1-苄基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺(126mg，71％)。1H NMR(CDCl3)δ1.83(m，6H)，2.34(s，3H)，2.45(m，11H)，4.02(s，3H)，4.43(d，J＝5.66Hz，2H)，4.95(m，1H)，5.52(bs，2H)，7.37(m，7H)，8.18(m，1H)，8.41(m，1H)；LC/MS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％ B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.5mL/min.)MH+555.5，Rt＝2.65min。
實施例203順-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺a)N1-苯乙基-4-溴-2-甲氧基苯甲醯胺將苯乙胺(0.79mL，6.31mmol)緩慢加入到4-溴-2-甲氧基-1-苯羰基氯(1.5g，6.01mmol)和三乙胺(1.3mL，9.02mmol)在二氯甲烷(60mL)中的混合物中。2小時後，減壓除去溶劑。加入乙酸乙酯並將此混合物過濾。此濾液減壓濃縮並將此殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(97∶3)作為流動相，得到N1-苯乙基-4-溴-2-甲氧基苯甲醯胺(1.81g，90％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.83(m，2H)，3.50(m，2H)，3.84(s，3H)，7.31(m，7H)，7.65(d，J＝8.28Hz，1H)，8.15(m，1H)。
b)4-[(苯乙基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羥基代硼酸在-78℃下將正丁基鋰(1.6M在己烷溶液中，8.5ml，13.54mmol)緩慢加入到N1-苯乙基-4-溴-2-甲氧基苯甲醯胺(1.81g，5.41mmol)的四氫呋喃(40mL)溶液中。30分鐘後，快速加入硼酸三異丙基酯(1.87mL，8.12mmol)。13分鐘後將該反應混合物升溫至室溫並攪拌3小時。加入鹽酸(2.5N，40mL)並將此混合物攪拌過夜。分層並將水層用乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作為流動相，得到4-[(苄基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羥基代硼酸(0.916g，56％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.85(m，2H)，3.53(m，2H)3.88(s，3H)，7.31(m，7H)，7.70(d，J＝7.61Hz，1H)，8.19(m，2H)，9.10(m，1H)。
c)順-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(154mg，0.349mmol)、4-[(苯乙基氨基)羰基]-3-甲氧基苯基羥基代硼酸(115mg，0.384mmol)、四(三苯基膦)鈀(24mg，0.021mmol)和碳酸鈉(89mg，0.839mmol)與乙二醇二甲醚(4mL)和水(2mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作為流動相，得到順-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺(64mg，32％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.62(m，4H)，2.16(m，16H)，2.87(m，2H)，3.57(m，2H)，3.90(s，3H)，4.83(m，1H)，7.31(m，7H)，7.95(m，1H)，8.22(m，2H)；LC/MS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.5mL/min.)MH+＝569.3，Rt＝2.50min。
實施例204順-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醯胺a)N1-苯基-4-溴苯甲醯胺將苯胺(0.87mL，9.57mmol)緩慢加入到4-溴-1-苯羰基氯(2.0g，9.11mmol)和三乙胺(1.9mL，13.67mmol)在二氯甲烷(95mL)的混合物中。3小時後，減壓除去溶劑。加入乙酸乙酯並將此混合物過濾。將此濾液減壓濃縮並將此殘餘物用乙酸乙酯/庚烷重結晶得到N1-苯基-4-溴苯甲醯胺(1.00g，40％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.11(m，1H)，7.38(m，2H)，7.76(m，4H)，7.92(m，2H)，10.30(s，1H)。
b)4-(苯氨基羰基)苯基羥基代硼酸在-78℃下將正丁基鋰(1.6M在己烷溶液中，5.7ml，9.05mmol)緩慢加入到N1-苯基-4-溴-2-甲氧基苯甲醯胺(1.0g，3.62mmol)的四氫呋喃(27mL)溶液中。30分鐘後，快速加入硼酸三異丙基酯(1.25mL，5.43mmol)。13分鐘後將該反應混合物升溫至室溫並攪拌6小時。加入鹽酸(2.5N，27mL)並將此混合物攪拌過夜。分層並將水層用乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物用乙酸乙酯/庚烷重結晶得到4-(苯氨基羰基)苯基羥基代硼酸(0.354g，40％)。1H NMR(DMSO-d6)δ7.10(m，1H)，7.35(m，2H)，7.80(m，4H)，7.92(m，2H)，8.23(s，2H)，10.23(s，1H)。
c)順-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醯胺將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.226mmol)、4-(苯氨基羰基)苯基羥基代硼酸(60mg，0.249mmol)、四(三苯基膦)鈀(16mg，0.014mmol)和碳酸鈉(58mg，0.544mmol)與乙二醇二甲醚(3mL)和水(1.5mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過製備薄層柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨(95∶5∶05)作為流動相，得到順-N1-苯基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醯胺(32mg，27％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，4H)，1.73(m，2H)，2.08(m，2H)，2.19(s，3H)，2.28(m，11H)，4.84(m，1H)，7.12(m，1H)，7.38(m，2H)，7.81(m，4H)，8.16(d，J＝8.30Hz，2H)，8.27(s，1H)，10.34(s，1H)。LC/MS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.5mL/min.)MH+＝511.2，Rt＝2.41min。
實施例205順-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醯胺a)N1-苯乙基-4-溴苯甲醯胺將苯乙胺(1.2mL，9.57mmol)緩慢加入到4-溴-1-苯羰基氯(2.0g，9.11mmol)和三乙胺(1.9mL，13.67mmol)在二氯甲烷(95mL)中的混合物中。3小時後，減壓除去溶劑。加入乙酸乙酯並將此混合物過濾。將此濾液減壓濃縮並將此殘餘物用乙酸乙酯/庚烷重結晶得到N1-苯基-4-溴苯甲醯胺(1.925g，69％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.84(m，2H)，3.47(m，2H)，7.28(m，5H)，7.67(d，J＝8.59Hz，2H)，7.76(d，J＝8.59Hz，4H)，8.64(m，1H)。
b)4-[(苯乙基氨基)羰基]苯基羥基代硼酸在-78℃下將正丁基鋰(1.6M在己烷溶液中，10ml，15.78mmol)緩慢加入到N1-苯基-4-溴-2-甲氧基苯甲醯胺(1.92g，6.31mmol)的四氫呋喃(47mL)溶液中。30分鐘後，快速加入硼酸三異丙基酯(2.2mL，9.47mmol)。13分鐘後將該反應混合物升溫至室溫並攪拌16小時。加入鹽酸(2.5N，47mL)並將此混合物攪拌5小時。分層並將水層用乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮。殘餘物用乙酸乙酯/庚烷重結晶得到4-[(苯乙基氨基)羰基]苯基羥基代硼酸(0.486g，28％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.85(m，2H)，3.49(m，2H)，7.22(m，5H)，7.73(m，4H)，8.17(s，2H)，8.54(m，1H)。
c)順-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醯胺將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.226mmol)、4[(苯乙基氨基)羰基]苯基羥基代硼酸(60mg，0.249mmol)、四(三苯基膦)鈀(16mg，0.014mmol)和碳酸鈉(58mg，0.544mmol)與乙二醇二甲醚(3mL)和水(1.5mL)混合。將該反混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過製備薄層柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作為流動相，得到順-N1-苯乙基-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醯胺(28mg，23％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.62(m，4H)，2.24(m，16H)，2.88(m，2H)，3.54(m，2H)，4.82(m，1H)，7.29(m，7H)，8.73(d，J＝8.10Hz，2H)，7.99(d，8.17Hz，1H)，8.67(m，1H)。LC/MS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.5mL/min.)MH+＝539.3，Rt＝2.50min。
實施例206反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲醯胺，三馬來酸鹽a)反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯將反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(4.0g，9.06mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(3.48g，9.97mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.63g，0.64mmol)和碳酸鈉(2.30g，21.75mmol)與乙二醇二甲醚(100ml)和水(50ml)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作為流動相，得到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.75g，98％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(m，11H)，2.02(m，6H)，2.15(s，3H)，2.35(m，5H)，2.53(m，4H)，3.87(s，3H)，4.64(m，1H)，7.20(m，2H)，7.90(d，J＝8.15，1H)，8.03(s，1H)，8.22(s，1H)。
b)反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺在0℃下，將三氟乙酸/二氯甲烷(20∶80，150mL)的混合物加入到N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.75g，8.85mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中。2小時後，除去冰浴並蒸發溶劑，並將此殘餘物溶解於二氯甲烷。加入氫氧化鈉(1.0N)以調節pH約為10。過濾收集除去有機溶劑時形成的固體，得到反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.85g，100％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.44(m，2H)，1.96(m，6H)，2.21(s，3H)，2.33(m，5H)，2.53(m，4H)，3.83(s，3H)，4.60(m，1H)，5.03(bs，2H)，6.76(d，J＝7.91Hz，1H)，6.98(d，J＝7.89Hz，1H)，7.03(m，2H)，8.19(s，1H)。
c)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲醯胺向存在於二氯甲烷(14mL)的1H-2-吲哚基甲酸(0.738g，4.58mmol)中加入草醯氯(4mL，45.8mmol)和DMF(1滴)。將該反應混合物攪拌過夜。蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷(5mL)。在0℃，將此二氯甲烷溶液的一半(2.5mL)加入到存在於吡啶(6mL)的反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.50g，1.145mmol)中。30分鐘後，過濾收集此固體。然後將水加入到此固體中並用氫氧化鈉(1.0N)將此溶液的pH調節至10，水相用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作為流動相，得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲醯胺(0.312g，47％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(m，2H)，2.05(m，6H)，2.15(s，3H)，2.32(m，5H)，2.51(m，4H)，3.97(s，3H)，4.66(m，1H)，7.10(m，1H)，7.22(m，1H)，7.30(d，J＝7.98Hz，1H)，8.11(d，J＝8.14Hz，1H)，8.24(s，1H)，9.44(s，1H)。
d)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲醯胺，三馬來酸鹽將反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲醯胺(312mg，0.539mmol)溶解於熱乙酸乙酯(35mL)中並加入存在於熱乙酸乙酯(5mL)的馬來酸(187mg，1.614mmol)。將該反應混合物室溫下攪拌5小時。過濾收集固體得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1H-2-吲哚基甲醯胺，二馬來酸鹽(473mg，95％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，2H)，2.09(m，6H)，2.68(s，3H)，2.84-3.19(bm，9H)，3.97(s，3H)，4.73(m，1H)，6.17(s，6H)，7.11(m，1H)，7.25(m，1H)，7.30(m，1H)，7.34(s，1H)，7.41(s，1H)，7.49(d，J＝8.21，1H)，7.68(d，J＝8.02Hz，1H)，8.13(d，J＝8.15Hz，1H)，8.26(s，1H)，9.44(s，1H)，11.38(s，1H)。LCMS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.0mL/min.)MH+＝580.4，Rt＝2.01min。
實施例207反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺，三馬來酸鹽a)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺向存在於二氯甲烷(14mL)的1-甲基-1H-2-吲哚基甲酸(0.802g，4.58mmol)中加入草醯氯(4mL，45.8mmol)和DMF(1滴)。將該反應混合物攪拌過夜。蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷(5mL)。在0℃，將此二氯甲烷溶液的一半(2.5mL)加入到存在於吡啶(6mL)的反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.50g，1.145mmol)中。30分鐘後，過濾收集固體。然後將水加入到此固體中並用氫氧化鈉(1.0N)將此溶液的pH調節至10。水相用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作為流動相，得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺(0.545g，80％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(m，2H)，2.02(m，6H)，2.17(s，3H)，2.36(m，5H)，2.55(m，4H)，3.96(s，3H)，4.04(s，3H)，4.66(m，1H)，7.15(m，1H)，7.28-7.35(m，4H)，7.58(d，J＝8.42Hz，1H)，7.70(d，J＝7.96Hz，1H)，8.11(d，J＝8.14，1H)，8.24(s，1H)，9.43(s，1H)。
b)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺，三馬來酸鹽將反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺(545mg，0.917mmol)溶解於熱乙酸乙酯(60mL)並加入存在於熱乙酸乙酯(5mL)的馬來酸(320mg，2.75mmol)。將該反應混合物室溫下攪拌5小時。過濾收集固體得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺，二馬來酸鹽(473mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，2H)，2.06(m，6H)，2.68(s，3H)，2.83-3.57(bm，9H)，3.96(s，3H)，4.04(s，3H)，4.72(m，1H)，6.18(s，6H)，7.16(m，1H)，7.28-7.36(m，4H)，7.59(d，J＝8.44Hz，1H)，7.72(d，J＝7.94Hz，1H)，8.13(d，J＝8.15，1H)，8.28(s，1H)，9.44(s，1H)。LC/MS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.0mL/min.)MH+＝594.4，Rt＝2.24。
實施例208
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲醯胺，三馬來酸鹽a)反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲醯胺在0℃下，將存在於二氯甲烷(1mL)的4-(三氟甲基)-1-苯羰基氯(262mg，1.256mmol)加入到反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(500mg，1.145mmol)的吡啶(8mL)溶液中。30分鐘後，除去冰浴並將該反應混合物室溫下攪拌1.5小時。蒸發溶劑並將此殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作為流動相，得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲醯胺(516mg，74％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.55(m，2H)，1.74(m，2H)，2.10-2.27(m，6H)，2.30(s，3H)，2.51(m，4H)，2.66(m，3H)，3.96(s，3H)，4.04(s，3H)，4.78(m，1H)，5.57(bs，2H)，7.30(m，2H)，7.79(d，J＝8.25Hz，2H)，8.04(d，J＝8.05Hz，2H)，8.38(s，1H)，8.64(s，1H)，8.68(d，J＝8.20Hz，1H)。
b)反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲醯胺三馬來酸鹽將反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲醯胺(510mg，0.838mmol)溶解於熱乙酸乙酯(55mL)，並加入存在於熱乙酸乙酯(5mL)的馬來酸(292mg，2.513mmol)。將該反應混合物室溫下攪拌5小時。過濾收集固體得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲基)苯甲醯胺，二馬來酸鹽(802mg，100％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，2H)，2.06(m，6H)，2.68(s，3H)，2.83-3.17(bm，9H)，3.93(s，3H)，4.72(m，1H)，6.17(s，6H)，7.29(d，J＝8.12Hz，1H)，7.33(s，1H)，7.92(d，J＝8.34Hz，2H)，8.02(d，J＝8.12Hz，1H)，8.17(d，J＝8.12Hz，2H)，8.26(s，1H)，9.83(s，1H)。LCMS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.0mL/min.)MH+＝609.4，Rt＝2.16min。
實施例209反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺，三馬來酸鹽a)反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺在0℃下，將存在於二氯甲烷(1mL)的4-(三氟甲氧基)-1-苯羰基氯(283mg，1.256mmol)加入到反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(500mg，1.145mmol)的吡啶(8mL)溶液中。30分鐘後，除去冰浴，將該反應混合物室溫下攪拌1.5小時。蒸發溶劑並將此殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作為流動相，得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺(526mg，74％)。1H NMR(CDCl3)δ1.57(m，2H)，1.74(m，2H)，2.10-2.27(m，6H)，2.30(s，3H)，2.51(m，4H)，2.66(m，3H)，4.03(s，3H)，4.77(m，3H)，5.56(bs，2H)，7.26-7.37(m，4H)，7.99(m，2H)，8.38(s，1H)，8.59(s，1H)，8.67(d，J＝8.21Hz，1H)。
b)反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺，三馬來酸鹽將反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺(520mg，0.832mmol)溶解於熱乙酸乙酯(55mL)並加入存在於熱乙酸乙酯(5mL)的馬來酸(290mg，2.497mmol)。將該反應混合物室溫下攪拌5小時。過濾收集固體得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺，二馬來酸鹽(780mg，96％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，2H)，2.06(m，6H)，2.68(s，3H)，2.83-3.17(bm，9H)，3.93(s，3H)，4.72(m，1H)，6.18(s，6H)，7.28(d，J＝8.14Hz，1H)，7.33(s，1H)，7.54(d，J＝8.47Hz，2H)，8.01(d，J＝8.12Hz，1H)，8.10(d，J＝8.69Hz，2H)，8.26(s，1H)，9.69(s，1H)。LCMS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.0mL/min.)MH+＝625.4，Rt＝2.21min。
實施例210N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-3-苯基丙醯胺a)4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯在0℃下，將硼氫化鈉(3.8g，100.4mmol)分批加入到4-氧代-1-哌啶甲酸叔丁基酯(20g，100.4mmol)的甲醇(600mL)溶液中。15分鐘後，除去冰水浴並將該反應混合物室溫下攪拌3小時。加入氫氧化鈉(1.0N，100mL)並蒸發有機溶劑。水層用乙醚萃取4次。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到叔丁基4-羥基-1-哌啶甲酸酯(20.48g，100％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.48(s，9H)，1.63(m，2H)，1.87(m，2H)，3.03(m，2H)，3.83(m，3H)。
b)4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯將3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(10g，38.3mmol)、4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(16.96g，84.2mmol)和三苯基膦(20.09g，76.0mmol)懸浮於四氫呋喃(425mL)。將該反應混合物在冰水浴中冷卻並滴加偶氮二甲酸二乙酯(12.09mL，76.0mmol)。10分鐘後，該反應混合物升溫至室溫。5小時後，減壓除去溶劑並在加熱下加入二氯甲烷(65mL)。將此固體過濾並用二氯甲烷(20ml)洗滌。此固體進-步用乙酸乙酯(5×20mL)洗滌得到二乙基1，2-肼二甲酸酯和叔丁基4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸酯(1∶1，14.98g，63％)，其不經進一步純化直接使用。1H NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.95(m，2H)，2.20(m，2H)，2.92(m，2H)，4.23(m，2H)，4.84(m，1H)，8.31(s，1H)。
c)3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺在0℃下，將三氟乙酸/二氯甲烷(20∶80，250mL)的混合物加入到存在於二氯甲烷(100mL)的4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(10.72g，24.1mmol)中。15分鐘後，除去冰浴並將該反應混合物室溫下攪拌5小時。蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷。加入鹽酸(5.0N)並將水層用二氯甲烷洗滌3次。加入氫氧化鈉(50％)以調節pH為約10。將此懸浮液凍幹，將體積降低到原體積的三分之一。過濾收集此固體得到3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(8.109g，97％)。1H NMR(CDCl3)δ1.81(m，2H)，1.99(m，2H)，2.65(m，2H)，3.07(m，2H)，4.68(m，1H)，8.19(s，1H)。
d)3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.00g，5.81mmol)、1-甲基-4-哌啶酮(2.14mL，17.42mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(2.45g，11.62mmol)和冰醋酸(1.05g，17.42mmol)與1，2-二氯乙烷(75mL)混合。將該反應混合物室溫下攪拌6小時並加入飽和碳酸氫鈉溶液以調節PH為約8。過濾收集固體得到3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.39g，93％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.52(m，2H)，1.75(m，2H)，1.87(m，2H)，2.05(m，4H)，2.24(s，3H)，2.28(m，3H)，2.91(m，2H)，3.00(m，2H)，4.55(m，1H)，8.18(s，1H)。
e)N-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯將3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.39g，5.41mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(2.08g，5.96mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.375g，0.32mmol)和碳酸鈉(1.38g，13.00mmol)與乙二醇二甲醚(80mL)和水(40mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨(95∶5∶0.5)作為流動相，得到N-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯(1.67g，57％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(m，11H)，1.71(m，2H)1.86(m，4H)，2.14(s，3H)，2.18(m，3H)，2.32(m，2H)，2.80(m，2H)，3.89(s，3H)，4.64(m，1H)，7.22(m，2H)，7.91(d，J＝8.12，1H)，8.03(s，1H)，8.21(s，1H)。
f)N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-3-苯基丙醯胺將3-苯基丙醯氯(77mg，0.458mmol)加入到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.229mmol)的吡啶(1.2mL)溶液中。5小時後，蒸發溶劑並將此殘餘物通過急驟柱色譜純化得到N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-3-苯基丙醯胺(24mg，18％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.70(m，2H)，1.85(m，2H)，2.04(m，4H)，2.30(s，3H)，2.41(m，5H)，2.75(m，2H)，2.97(m，2H)，3.08(m，4H)，3.90(s，3H)，4.75(m，1H)，5.71(bs，2H)，7.24(m，8H)，7.76(s，1H)，8.34(s，1H)，8.52(d，J＝8.12，1H)。LCMS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH 4.5)，3.0mL/min.)MH+＝569.5，Rt＝1.65min。
實施例211N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺將4-(三氟甲氧基)-1-苯羰基氯(103mg，0.458mmol)加入到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.229mmol)的吡啶(1.0mL)溶液中。5小時後，蒸發溶劑並將此殘餘物通過急驟柱色譜純化得到N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺(40mg，28％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.67(m，2H)，1.84(m，2H)，1.97(m，2H)，2.06(m，2H)，2.28(s，3H)，2.45(m，5H)，2.94(m，2H)，3.10(m，2H)，4.03(s，3H)，4.77(m，1H)，5.53(bs，2H)，7.34(m，4H)，7.98(d，J＝8.73Hz，2H)，8.38(s，1H)，8.59(s，1H)，8.66(d，J＝8.73Hz，1H)。
LCMS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH 4.5)，3.0mL/min.)MH+＝625.5，Rt＝2.00min。
實施例212N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲醯胺，三馬來酸鹽a)N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲醯胺將4-(三氟甲基)-1-苯羰基氯(48mg，0.231mmol)加入到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(101mg，0.231mmol)的吡啶(1.0mL)溶液中。5小時後，蒸發溶劑並將此殘餘物通過急驟柱色譜純化得到N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲醯胺(83mg，59％)。1H NMR(CDCl3-d)δ1.68(m，2H)，1.82(m，4H)，2.01(m，4H)，2.29(s，3H)，2.44(m，3H)，2.93(m，2H)，3.30(m，2H)，4.03(s，3H)，4.77(m，1H)，5.60s，2H)，7.33(m，2H)，1.79d，J＝8.19Hz，2H)，8.04(d，J＝8.04Hz，2H)，8.37(s，1H)，8.66(m，2H)。LCMS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH 4.5)，3.5mL/min.)MH+＝609.4，Rt＝2.50min。
b)N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲醯胺，三馬來酸鹽將N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲醯胺(78mg，0.128mmol)溶解於熱乙酸乙酯(10mL)中，並加入在熱乙酸乙酯(1mL)中的馬來酸(45mg，0.387mmol)。將該反應混合物室溫下攪拌5小時。除去溶劑並加入乙酸乙酯，過濾收集固體得到N1-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-4-(三氟甲基)苯甲醯胺，三馬來酸鹽(115mg，94％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.87(m，2H)，2.24(m，4H)，2.79(s，3H)，3.01-3.57(bm，11H)，3.93(s，3H)，5.09(m，1H)，6.12(s，6H)，7.32(m，2H)，7.93(d，J＝8.37Hz，2H)，8.04(d，J＝8.11Hz，1H)，8.16(d，J＝8.18Hz，2H)，8.29(s，1H)，9.84(s，1H)。LCMS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH 4.5)，3.5mL/min.)MH+＝609.4，Rt＝2.50min。
實施例2131-[1-(1H-2-咪唑基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺a)3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-吡咯烷甲酸叔丁基酯將3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.5g，1.648mmol)，3-｛[(4-甲基苯基)磺醯基]氧基}-1-吡咯烷甲酸叔丁基酯(1.12g，3.30mmol)和碳酸銫(1.07g，3.30mmol)在N，N-二甲基甲醯胺(12mL)中在75℃下加熱過夜。將該反應混合物倒入到冰水(100mL)中。水層用乙酸乙酯萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用乙酸乙酯作為流動相，得到3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-吡咯烷甲酸叔丁基酯(0.20g，28％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.38(m，9H)，2.37(m 2H)，3.32(s，3H)，3.44(m，1H)，3.59(m，1H)，3.65(m，1H)，3.75(m，1H)，5.44(m，1H)，7.16(m，5H)，7.43(m，2H)，7.65(m，2H)，8.26(s，1H)。
b)3-(4-苯氧基苯基)-1-四氫-1H-3-吡咯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺在0℃下，將三氟乙酸/二氯甲烷(20∶80，8mL)的混合物加入到3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-吡咯烷甲酸叔丁基酯(240mg，0.508mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液中。15分鐘後，除去冰浴並將該反應混合物室溫下攪拌5小時。然後蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於乙酸乙酯。加入飽和碳酸氫鈉以調節pH為約8。分層並將水層用乙酸乙酯萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到3-(4-苯氧基苯基)-1-四氫-1H-3-吡咯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.157mg，91％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.99-2.21(m，2H)，2.94(m，1H)，3.04-3.23(m，3H)，5.31(m，1H)，7.14(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(m，2H)，8.24(s，1H)。
c)1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-(4-苯氧基苯基)-1-四氫-1H-3-吡咯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，5.81mmol)、1H-2-咪唑甲醛(77mg，0.806mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(113mg，0.537mmol)和冰醋酸(48mg，0.806mmol)與1，2-二氯乙烷(4mL)混合。將該反應混合物室溫下攪拌6小時，並加入飽和碳酸氫鈉溶液以調節pH為約9。水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(90∶10)作為流動相，得到1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)四氫-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，83％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.33(m，2H)，2.81(m，4H)，3.15(m，1H)，3.69(s，2H)，5.38(m，1H)，6.90(s，2H)，7.15(m，5H)，7.44(m，2H)，7.66(m，2H)，8.24(s，1H)。LCMS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH 4.5)，3.5mL/min.)MH+453.4，Rt＝2.17min。
實施例2141-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氫-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽a)1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氫-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-(4-苯氧基苯基)-1-四氫-1H-3-吡咯基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(150mg，0.403mmol)、1-甲基-4-哌啶酮(0.099mL，0.806mmol)，三乙醯氧基硼氫化鈉(113mg，0.537mmol)和冰乙酸(48mg，0.806mmol)與1，2-二氯乙烷(4mL)混合。將反應混合物室溫下攪拌6小時，並加入飽和碳酸氫鈉溶液以調節pH為約9。水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(85∶15)作為流動相，得到1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氫-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(148mg，78％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.42(m，2H)，1.81(m，2H)，1.92(m，2H)，2.15(m，1H)，2.26(m，2，3H)，2.28(m，2H)，2.75(m，4H)，2.86(m，1H)，3.22(m，1H)，5.36(m，1H)，7.16(m，5H)，7.44(m，2H)，7.67(m，2H)，8.24(s，1H)。LCMS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH 4.5)，3.5mL/min.)MH+＝470.4，Rt＝2.01。
b)1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氫-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽將1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氫-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(148mg，0.315mmol)溶解於熱乙酸乙酯(20mL)，並加入存在於熱乙酸乙酯(1mL)的馬來酸(110mg，0.946mmol)。將該反應混合物室溫下攪拌5小時。過濾收集固體得到1-[1-(1-甲基-4-哌啶基)四氫-1H-3-吡咯基]-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，三馬來酸鹽(230mg，90％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.81(m，2H)，2.27(m，2H)，2.78(s，3H)，2.97-3.84(bm，11H)，5.63(m，1H)，6.12(s，6H)，7.17(m，5H)，7.45(m，2H)，7.68(m，2H)，8.29(s，1H)。LCMS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH 4.5)，3.5mL/min.)MH+＝470.4，Rt＝2.01。
實施例215N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺a)1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.5g，1.45mmol)、1H-2-咪唑甲醛(0.42g，4.34mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(0.61g，2.90mmol)和冰醋酸(0.26g，4.36mmol)與1，2-二氯乙烷(20mL)混合。將該反應混合物室溫下攪拌6小時，並加入飽和碳酸氫鈉溶液以調節pH為約9。水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.57g，92％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.85(m，2H)，2.17(m，4H)，2.92(m，2H)，3.55(s，2H)，4.57(m，1H)，6.92(s，2H)，8.14(s，1H)。
b)N-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯將1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(127mg，0.299mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(115mg，0.329mmol)、四(三苯基膦)鈀(21mg，0.018mmol)和碳酸鈉(76mg，0.718mmol)與乙二醇二甲醚(3mL)和水(1.5mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作為流動相，得到N-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(64mg，41％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(m，9H)，1.87(m，2H)，2.23(m，4H)，2.94(m，2H)，3.56(s，2H)，3.88(s，3H)，4.66(m，1H)，6.92(s，2H)，7.21(m，2H)，7.90(d，J＝8.14，1H)，8.04(s，1H)，8.22(s，1H)。
c)3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺在0℃下，將三氟乙酸/二氯甲烷(20∶80，2mL)的混合物加入到N-(4-{4-氨基-1-[1-(1H 2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(55mg，0.106mmol)的二氯甲烷(0.5mL)溶液中。15分鐘後，除去冰浴並將該反應混合物室溫下攪拌5小時。然後蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷。加入飽和碳酸氫鈉以調節PH為約8。分層並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1H 2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(30mg，68％)。1H NMR(CDCl3-d)δ2.20(m，2H)，2.44(m，2H)，3.04(m，2H)，3.75(s，2H)，3.93(s，3H)，4.01(s，2H)，4.80(m，1H)，5.58(bs，2H)，6.82(m，1H)，7.01(m，4H)，8.34(s，1H)。
e)N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺在0℃下將3-苯基丙醯氯(0.011mL，0.0715mmol)加入到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(30mg，0.0715mmol)的吡啶(1.2mL)溶液中。2小時後，蒸發溶劑並將此殘餘物通過急驟柱色譜純化，得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺(20mg，51％)。1H NMR(CDCl3)δ2.27(m，2H)，2.61(m，2H)，2.76(m，4H)，3.09(m，2H)，3.93(s，3H)，4.07(s，2H)，4.96(m，1H)，5.61(bs，2H)，7.06-7.33(m，10H)，7.78(s，1H)，8.35(s，1H)，8.55(d，J＝8.15Hz，1H)。LCMS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，3.0mL/min.)MH+＝552.5，Rt＝1.83min。
實施例216-221得自順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-7H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的醯胺典型方法向存在於二氯甲烷(1.4mL)的適當羧酸(0.46mmol)中加入草醯氯(0.4mL，4.6mmol)和DMF(1滴)。將小瓶用隔膜蓋上並在各蓋上插入小號針頭以釋放壓力。這些小瓶在J-Kem震搖器上搖動過夜。分離50％的溶液，然後將過量的草醯氯和二氯甲烷在12孔Supelco支管上真空下隨氮氣流除去。將粗品醯氯(0.23mmol)加入到存在於乾燥吡啶(0.6mL)中的順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.11mmol)中，並室溫下攪拌過夜。所得溶液直接通過製備HPLC進行純化(HypersilBSD C18，5μm，100×21mm，在10分鐘內0％-100％乙腈/0.05M醋酸銨，25.0mL/min)。所得產物通過在二氯甲烷(4ml)和1.0N氫氧化鈉(2ml)之間分配並通過Empore高效萃取圓盤柱(C18-SD十八烷基)來進一步純化，得到相應的產物。對這些化合物的詳細描述見下頁，其中給出了相應的LCMS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH 4.5)，3.5L/min.)數據。
實施例221順-3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.41g，7.74mmol)在乙二醇二甲基醚(50mL)中的混合物用4-(苄基氧基)苯基羥基代硼酸(1.94g，8.51mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.537g，0.464mmol)和碳酸鈉(1.97g，18.58mmol)的水(25mL)溶液處理。將該反應混合物在85℃氮氣氛下攪拌過夜。減壓下除去有機溶劑。將乙酸乙酯(300mL)加入到水層中。分層，並將水層用乙酸乙酯(200mL)萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌(各1L)，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發。將乙酸乙酯加到此固體中。大部分此固體不溶於乙酸乙酯，接著過濾得到2.95g(77％)的順-3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.217(s，1H)，7.592-7.570(m，2H)，7.504-7.483(m，2H)，7.440-7.369(m，3H)，7.206-7.184(m，2H)，5.186(s，2H)，4.802-4.755(m，1H)，2.497-2.354(m，7H)，2.256-2.228(m，4H)，2.151(s，3H)，2.076-1.989(m，2H)，1.694-1.673(m，2H)，1.607-1.545(m，2H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.128min(100％)。
實施例222順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈順-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶3-基}苯酚將順-3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.005mmol)的無水乙醇(25mL)溶液用10wt.％鈀-活性炭(0.100g，0.201mmol)和甲酸銨(0.317g，5.03mmol)處理。將該反應混合物在80℃下攪拌2小時；通過薄層色譜觀察不到起始物。將該反應混合物通過硅藻土墊過濾，用乙醇(500mL)洗滌。減壓下除去有機層。所得固體真空下乾燥過夜，得到0.406g(99％)的順-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.204-8.194(m，2H)，7.472-7.437(m，2H)，6.947-6.912(m，2H)，4.791-4.744(m，1H)，2.418(m，9H)，2.249-2.243(m，2H)，2.193(s，3H)，2.077-2.050(m，2H)，1.688-1.666(m，2H)，1.656-1.578(m，2H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt3.47min(99％)。
2-氟-6-[(2-甲氧基乙基)氨基]苄腈將2，6-二氟苄腈(3.5g，25.16mmol)的二甲基甲醯胺(50mL)溶液用3-甲氧基丙基胺(2.24g，25.16mmol)和碳酸鉀(6.94g，50.32mmol)處理。將該反應混合物在氮氣氛下攪拌過夜。將水(100mL)加入到該反應溶液中。分層，並將水層用乙酸乙酯(1.2L)萃取。將合併的有機層用水洗滌(1.5L)，用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓蒸發。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用7∶1庚烷∶乙酸乙酯作為洗脫劑。過柱後得到3.5g(68％)的2-氟-6-[(2-甲氧基乙基)氨基]苄腈。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.48-7.39(m，1H)，6.64-6.48(m，2H)，3.45-3.31(m，2H)，3.30-3.20(m，5H)，1.85-1.75(m，2H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt6.57min(97％)。
順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈將順-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(0.200g，0.491mmol)的二甲基甲醯胺(25mL)溶液，用2-氟-6-[(2-甲氧基乙基)氨基]苄腈(0.124g，0.589mmol)和碳酸鉀(0.136，0.982mmol)處理。將該反應混合物在120℃下在氮氣氛下攪拌過夜。該反應18小時後還沒有完成，因此再將2-氟-6-[(2-甲氧基乙基)氨基]苄腈(0.12g，0.574mmol)加入到該反應混合物中並攪拌過夜。將乙酸乙酯加入到該反應混合物中，並用1N氫氧化鈉溶液(300mL)洗滌。將此有機層用水和鹽水洗滌(各300mL)，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發。產物通過急驟色譜在矽膠Supelco柱上純化，用存在於二氯甲烷中的20％甲醇作為洗脫劑。過柱後得到0.050g的產物，其中含有一些起始物。粗品通過製備HPLC純化(Hypersil C18，100×21mm柱，5μm，15-100％乙腈梯度在8分鐘內，總過柱時間-10min，緩衝液-50mM醋酸銨，25ml/min)。將得自HPLC柱的產物溶解於二氯甲烷，用飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌以除去殘餘的醋酸銨。分層，用Empore萃取圓盤柱純化得到0.010g(3％)順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈。
1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.328(s，1H)，7.706-7.678(m，2H)，7.305-7.211(m，4H)，6.433-6.411(d，1H，J＝8.8Hz)，4.925-4.904(m，1H)，3.574-3.547(m，2H)，3.400(s，3H)，3.389-3.343(m，2H)，2.441-2.418(m，3H)，2.382(s，3H)，2.25-2.10(m，2H)，2.031(s，3H)，1.973-1.944(m，2H)，1.851-1.829(m，2H)，1.700-1.679(m，3H)，1.355-1.200(m，5H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.185min(100％)。
實施例223順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈三馬來酸鹽2-氟-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈將2，6-二氟苄腈(5.18g，37.26mmol)的二甲基甲醯胺(100mL)溶液用對甲苯硫酚(4.628g，37.26mmol)和碳酸鉀(10.28g，74.52mmol)處理。將該反應混合物在氮氣氛下攪拌24小時。將水(150mL)和乙酸乙酯(250mL)加入到該反應混合物中。分層，並將水層用乙酸乙酯(500mL)萃取。合併的有機層用水洗滌(1L)，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用7∶1庚烷∶乙酸乙酯洗脫。過柱後得到3.341g(37％)的2-氟-6-[(4甲基苯基)硫基]苄腈。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.66-7.61(m，1H)，7.47-7.45(m，2H)，7.36-7.32(m，3H)，6.83-6.79(m，1H)，2.36(s，3H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt8.04min(93％)。
順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈三馬來酸鹽將順-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(0.300g，0.736mmol)的二甲基甲醯胺(20mL)溶液，用2-氟-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈(0.447g，1.84mmol)和碳酸鉀(0.203，1.47mmol)處理。將該反應混合物在120℃下在氮氣氛下攪拌過夜。將乙酸乙酯(150mL)和1N氫氧化鈉溶液加入到該反應溶液中。分層，並將有機層用1N氫氧化鈉溶液(300mL)洗滌。將此有機層用水和鹽水洗滌(各400mL)，用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓蒸發。粗品通過急驟矽膠柱色譜純化，用存在於二氯甲烷中的10％甲醇作為流動相。淡棕色固體用乙酸乙酯研磨並過濾得到0.050g(11％)順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈。將順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈(0.050g，0.079mmol)在乙酸乙酯/甲醇中的溫溶液用馬來酸(0.028g，0.240mmol)的乙酸乙酯溫溶液處理。立即形成沉澱並在氮氣氛下過濾，得到0.028g的順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(4-甲基苯基)硫基]苄腈三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.251(s，1H)，7.72-7.70(d，2H，J＝8Hz)，7.55-7.48(m，3H)，7.37-7.33(m，4H)，6.96-6.93(d，1H，J＝12Hz)，6.74-6.72(d，1H，J＝8Hz)，6.18(s，6H)，4.85(m，1H)，3.15-2.90(m，4H)，2.85-2.75(m，3H)，2.38(s，3H)，2.05-1.99(m，2H)，1.90-1.60(m，5H)；HPLC Waters 2690 AllianceHPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt6.359min(100％)。
實施例224順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-(2-吡啶基硫基)苄腈二馬來酸鹽順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-(2-吡啶基硫基)苄腈二馬來酸鹽將順-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(0.300g，0.736mmol)的二甲基甲醯胺(20mL)溶液，用2-氟-6-(2-吡啶基硫基)苄腈(0.424g，1.84mmol)和碳酸鉀(0.203，1.47mmol)處理。將該反應混合物在120℃氮氣氛下攪拌2小時。將乙酸乙酯(125mL)和1N氫氧化鈉溶液(50mL)加入到該反應混合物中。分層，並將有機層用1N氫氧化鈉溶液(300mL)洗滌。將此有機層用水和鹽水洗滌(各250mL)，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發。此固體用乙酸乙酯研磨得到0.310g(68％)的順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-(2-吡啶基硫基)苄腈。將順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-(2-吡啶基硫基)苄腈(0.310g，0.502mmol)的溫乙醇溶液用馬來酸(0.175g，1.503mmol)的溫乙醇溶液處理。冷卻時產生沉澱並在氮氣氛下過濾，得到0.356g的順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-(2-吡啶基硫基)苄腈二馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.47-8.46(d，1H，J＝4Hz)，8.26(s，1H)，7.79-7.72(m，4H)，7.53-7.51(d，1H，J＝8Hz)，7.38-7.34(m，3H)，7.28-7.24(m，2H)，6.14(s，4H)，4.85(m，1H)，3.60-3.10(m，7H)，3.1-2.85(m，2H)，2.71-2.67(m，2H)，2.32-2.27(m，3H)，2.05-1.99(m，2H)，1.78-1.71(m，4H)；HPLC Waters2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.196min(98％)。
實施例225反-3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.50g，3.4mmol)在乙二醇二甲基醚(100mL)中的混合物用4-(苄基氧基)苯基羥基代硼酸(0.853g，3.74mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.236g，0.204mmol)和碳酸鈉(0.864g，8.16mmol)的水(35mL)溶液處理。該反應混合物在85℃氮氣氛下攪拌過夜。減壓下除去有機溶劑。將乙酸乙酯(100mL)加入到水層中。分層，並將水層用乙酸乙酯(300mL)萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌(各500mL)，用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓蒸發。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷中的5％甲醇、存在於二氯甲烷中的10％甲醇、存在於二氯甲烷中的20％甲醇、再用存在於二氯甲烷中的30％甲醇洗脫。過柱後得到0.817g(49％)的反-3-[4(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.22(s，1H)，7.59-7.57(m，2H)，7.53-7.50(m，2H)，7.48-7.21(m，3H)，7.19-7.17(d，2H，J＝8Hz)，5.18(s，2H)，4.65-4.60(m，1H)，2.5(s，3H)，2.45-2.25(m，5H)，2.15(s，3H)，2.04-1.92(m，7H)，1.50-1.44(m，2H)；HPLC Waters2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.021min(95％)。
實施例226反-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈三馬來酸鹽反-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚將反-3-[4-(苄基氧基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.806g，1.62mmol)的無水乙醇(40mL)溶液用10wt.％鈀-活性炭(0.161g，0.324mmol)和甲酸銨(0.511g，8.1mmol)處理。將此反應混合物在80℃下攪拌3小時。通過薄層色譜只觀察到極少的產物。加入10wt.％鈀-活性炭(0.161g，0.324mmol)，並再攪拌1小時，還是只檢測到極少的產物。加入甲酸銨(0.204g，3.24mmol)並攪拌過夜。將此反應混合物通過硅藻土墊過濾，將其用乙醇(500mL)洗滌。減壓下除去有機層。將所得固體用乙酸乙酯研磨，並在高真空下乾燥過夜，得到0.491g(75％)的反-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.74(s，1H)，8.2(s，1H)，7.46-7.44(d，2H，J＝8Hz)，6.92-6.90(d，2H，J＝8Hz)，4.64-4.58(m，1H)，2.67-2.50(m，5H)，2.39-2.34(m，4H)，2.17(s，3H)，2.06-1.92(m，6H)，1.50-1.42(m，2H)；HPLC Waters 2690 AllianceHPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt3.337min(96％)。
反-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈三馬來酸鹽將反-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(0.100g，0.245mmol)的二甲基甲醯胺(25mL)溶液，用2-氟-6-[(2-甲氧基乙基)氨基]苄腈(0.128g，0.613mmol)和碳酸鉀(0.068g，0.49mmol)處理。將此反應混合物在120℃下在氮氣氛下攪拌過夜。將乙酸乙酯和1N氫氧化鈉溶液加入到該反應混合物中。有機層用1N氫氧化鈉溶液(1L)洗滌。分層，並將此有機層用水和鹽水洗滌(各500mL)，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷中的10％甲醇作為洗脫劑，得到71mg(48％)的反-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3甲氧基丙基)氨基]苄腈。將反-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈(0.071g，0.119mmol)的乙酸乙酯溫溶液用馬來酸(0.042g，0.358mmol)的乙酸乙酯溫溶液處理。在氮氣氛下過濾此沉澱並高真空下乾燥，得到反-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)-6-[(3-甲氧基丙基)氨基]苄腈三馬來酸鹽。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.69-7.67(d，2H，J＝8Hz)，7.37-7.33(m，1H)，7.25-7.23(d，2H，J＝8Hz)，6.53-6.51(d，1H，J＝8Hz)，6.30-6.29(m，1H)，6.19-6.17(d，1H，J＝8Hz)，6.17(s，6H)，4.65-4.64(m，1H)，3.45-3.42(m，2H)，3.27(s，3H)，2.55-2.50(m，4H)，2.50-2.30(m，5H)，2.33(br.s.，3H)，2.01-1.96(m，8Hz)，1.84-1.80(m，2H)，1.49-1.46(m，2H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.181min(95％)。
實施例227反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺三馬來酸鹽4-溴-2-甲氧基苯胺將鄰甲氧基苯胺(5.46g，44.3mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液用2，4，4，6-四溴-2，5-環己二烯-1-酮(18.16g，44.3mmol)在-5℃下在1小時內分批處理。加入溴化試劑後，除去乾冰/丙酮浴並將該反應混合物室溫下攪拌過夜。將氫氧化鈉溶液(1N)加入到該反應混合物中，並分層。有機層用1N氫氧化鈉溶液(1L)洗滌，用水(750mL)洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓蒸發，得到8.096g(89％)的4-溴-2-甲氧基苯胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ6.90(s，1H)，6.83-6.76(m，1H)，6.57-6.55(m，1H)，4.86(s，2H)，3.76(s，3H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.635min(89％)。
N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺將4-溴-2-甲氧基苯胺(8.096g，40.04mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液用三乙胺(6.06g，60.06mmol)處理，然後用氫化肉桂醯氯(7.08g，42.04mmol)處理。將該反應混合物在氮氣氛下攪拌48小時。減壓除去溶劑，並加入乙酸乙酯。過濾此沉澱，並將濾液減壓下蒸發為固體。將此固體溶解於乙酸乙酯，並用5N鹽酸溶液、5N氫氧化鈉溶液、水和鹽水洗滌。粗品(薄層色譜存在兩個點)用甲醇研磨。過濾不溶固體，得到6g(50％)的N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.17(s，1H)，7.92-7.90(m，1H)，7.30-7.24(m，4H)，7.20-7.18(m，2H)，7.09-7.07(m，1H)，3.83(s，3H)，2.90-2.86(m，2H)，2.72-2.69(m，2H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨在15分鐘內，0.5mL/min)Rt7.491min(97％)。
3-甲氧基-4-[(3-苯基丙醯基)氨基]苯基羥基代硼酸將N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺(1.004g，3mmol)的無水四氫呋喃(30mL)溶液，在-78℃下用1.6M正丁基鋰的己烷溶液(4.7mL，7.5mmol)處理。將該反應混合物在-78℃下攪拌40分鐘。將三異丙基硼酸酯(1.05mL，4.5mmol)加入到此反應混合物中，並在-78℃下攪拌20分鐘。除去丙酮/乾冰浴。將該反應混合物室溫下攪拌4小時。將該反應混合物用2.5N鹽酸溶液(30mL)停止反應。減壓下除去有機層。將乙酸乙酯加入到酸性水層。分層，並將水層用乙酸乙酯(250mL)萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用1∶1二氯甲烷∶乙酸乙酯作為洗脫劑。梯度變為存在於二氯甲烷中的15％甲醇，以除去基線產物，得到0.209g(23％)的3-甲氧基-4-[(3-苯基丙醯基)氨基]苯基羥基代硼酸。1H NMR(DMS0-d6，400MHz)δ9.08(s，1H)，7.89-7.95(m，3H)，7.45-7.42(s，1H)，7.35-7.16(m，5H)，3.82(s，3H)，2.91-2.81(m，2H)，2.74-2.70(s，2H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.389min(95％)。
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺三馬來酸鹽將反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.268g，0.607mmol)的乙二醇二甲基醚(20mL)溶液用3-甲氧基-4-[(3-苯基丙醯基)氨基]苯基羥基代硼酸(0.200g，0.669mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.042g，0.036mmol)和碳酸鈉(0.154，1.46mmol)的水(10mL)溶液處理。將該反應混合物在85℃在氮氣氛下攪拌9小時。加入四(三苯基膦)鈀(0.035g，0.03mmol)並將此混合物攪拌過夜(15小時)。減壓下除去有機層，並加入乙酸乙酯。分層，並將水層用乙酸乙酯(300mL)萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷中的10％甲醇(6L)作為洗脫劑。需要在Supelco急驟色譜柱上進行二次純化，用存在於二氯甲烷中的20％甲醇作為洗脫劑。第二次過柱得到0.132g(38％)的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺。產物進行製備HPLC純化(Hypersil C18，100×21mm柱，5μm，15-100％乙腈梯度，在8分鐘內，總過柱時間-10min，緩衝液-50mM醋酸銨，25ml/min)，得到0.026g的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺。將反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺(0.026g，0.046mmol)的乙酸乙酯溫溶液用馬來酸(0.016g，0.137mmol)的乙酸乙酯溫溶液處理。在氮氣氛下過濾此沉澱並高真空下乾燥，得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.25(s，1H)，8.23-8.19(m，2H)，7.33-7.27(m，5H)，7.23-7.18(m，2H)，6.17(s，6H)，4.72-4.69(m，1H)，3.87(s，3H)，2.94-2.90(m，4H)，2.79-2.75(m，5H)，2.67(s，4H)，2.10-1.99(m，8H)，1.59-1.56(m，3H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt4.844min(90％)。
實施例228順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙醯胺N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙醯胺將N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-3-苯基丙醯胺(1.0g，3mmol)的二甲基甲醯胺(20mL)溶液，在0℃下用經過洗滌(用庚烷洗滌3次)的氫化鈉(0.158g，6.6mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌1小時。滴加碘代甲烷(0.511g，3.6mmol)，並將此溶液在0℃下攪拌15分鐘。除去冰浴並將該反應混合物室溫下攪拌過夜。該反應過夜後仍沒有反應完全；再加入碘代甲烷(0.511g，3.6mmol)並將該反應混合物攪拌過夜。該反應混合物用水(30mL)停止反應。加入乙酸乙酯，並分層。水層用乙酸乙酯萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用3∶1庚烷∶乙酸乙酯洗脫，得到0.729g(70％)的N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙醯胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.330-7.326(s，1H)，7.235-7.178(m，2H)，7.161-7.116(m，3H)，7.058-7.040(m，2H)，3.811(s，3H)，3.002(s，3H)，2.753-2.708(m，2H)，2.282-2.204(m，1H)，2.138-2.061(m，1H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt7.366min(96％)。
N1-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-N1-甲基-3-苯基丙醯胺將N1-(4-溴-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙醯胺(0.729g，2.09mmol)的二甲基甲醯胺(10mL)溶液，用乙硼烷頻哪醇酯(0.637g，2.51mmol)、醋酸鉀(0.615g，6.27mmol)處理，再用[1，1′-雙(二苯基膦基二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.052g，0.063mmol)處理。將該反應混合物在80℃下攪拌26小時，再加入乙硼烷頻哪醇酯(0.318g，1.254mmol)、醋酸鉀(0.312g，3.135mmol)和1，1′-雙(二苯基膦基二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.025g，0.031mmol)。將該反應混合物攪拌48小時。減壓除去溶劑，並在高真空下乾燥。將二氯甲烷加入到此黑色固體中，再通過硅藻土板和矽膠墊過濾。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用1∶1乙酸乙酯庚烷作為洗脫劑。過柱後得到0.290g(35％)的N1-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-N1-甲基-3-苯基丙醯胺，和0.148g(18％)的勻偶聯的二聚產物。N1-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-N1-甲基-3-苯基丙醯胺1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.33(s，1H)，7.29-7.27(m，2H)，7.22-7.13(m，5H)，7.06-7.03(m，1H)，3.81(s，3H)，3.03-3.00(m，3H)，2.75-2.71(m，4H)，2.30-2.15(m，2H)，2.15-2.05(m，2H)，1.30(s，12H)；HPLC Waters 2690 AllianceHPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.296min(100％)。勻偶聯的二聚產物1H NMR(DMSO，400MHz)δ7.374(s，2H)，7.293-7.276(m，4H)，7.258-7.188(m，4H)，7.142-7.107(m，2H)，7.067-7.049(m，4H)，3.921(s，6H)，2.992(s，6H)，2.756-2.741(m，4H)，2.339-2.263(m，2H)，2.196-2.070(m，2H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt7.910min(100％)。
順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙醯胺將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.293g，0.664mmol)的乙二醇二甲基醚(10mL)溶液，用3-甲氧基-4-[甲基(3苯基丙醯基)氨基]苯基羥基代硼酸(0.290g，0.730mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.046g，0.040mmol)和碳酸鈉(0.169g，1.59mmol)的水(5mL)溶液處理。該反應混合物在85℃氮氣氛下攪拌過夜。減壓除去溶劑，並加入乙酸乙酯到水層。分層，並將水層用乙酸乙酯(150mL)萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓蒸發。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷中的4％甲醇、存在於二氯甲烷中的8％甲醇、以及存在於二氯甲烷中的12％甲醇作為洗脫劑。第二次過柱採用Supelco急驟色譜矽膠柱，用存在於二氯甲烷中的30％甲醇洗脫，得到0.037g(10％)的順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-N1-甲基-3-苯基丙醯胺。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.374(s，1H)，7.315-7.312(m，1H)，7.285-7.213(m，3H)，7.174-7.087(m，4H)，5.795(br.s.，2H)，4.965-4.922(m，1H)，3.892(s，3H)，3.213(s，3H)，2.948-2.918(m，2H)，2.667(m，6H)，2.455-2.349(m，10H)，2.25-2.15(m，2H)，1.867-1.845(m，2H)，1.718-1.710(m，2H)；HPLC Waters 2690Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt4.947min(98％)。
實施例229N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺三馬來酸鹽N-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯將3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.667g，6.04mmol)的乙二醇二甲基醚(95mL)溶液，用N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(2.32g，6.64mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.419g，0.362mmol)和碳酸鈉(1.54g，14.5mmol)的水(40mL)溶液處理。將該反應混合物在85℃在氮氣氛下攪拌18小時。減壓下除去有機層。加入乙酸乙酯(100mL)，並分層。水層用乙酸乙酯(1L)萃取。合併的有機層用水(1L)和鹽水(500mL)洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發得到3.71g的粗品。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷中的20％甲醇(4L)、存在於二氯甲烷中的30％甲醇(1L)、及1∶1甲醇二氯甲烷(1L)作為洗脫劑，得到2.305g(71％)的N-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.221(s，1H)，8.030(s，1H)，7.921-7.901(m，1H)，7.239-7.195(m，2H)，4.652-4.594(m，1H)，3.890(s，3H)，2.988-2.804(m，2H)，2.776-2.507(m，2H)，2.40-2.21(m，5H)，2.190(s，3H)，1.898-1.815(m，4H)，1.716-1.686(m，2H)，1.482-1.446(m，11H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt4.541min(98％)；TLC(存在於二氯甲烷中的20％甲醇)Rt＝0.4。
3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將N-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(2.298g，4.28mmol)的二氯甲烷(26mL)溶液，在0℃下用三氟乙酸(9.2mL)的二氯甲烷(20mL)溶液處理。將該反應溶液在0℃下攪拌20分鐘，之後除去冰浴，並在室溫下再攪拌2小時。減壓除去溶劑，並將此殘餘物在高真空下乾燥。將乙酸乙酯(150mL)和5N鹽酸溶液(100mL)加入到此油狀物中。分層，並將有機層用5N鹽酸溶液(400mL)萃取。在冰浴中將合併的水層冷卻至0℃，並用50％氫氧化鈉溶液中和至pH 10。中和後的層用二氯甲烷(700mL)萃取。將此有機層用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發得到1.769g(95％)的3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.189(s，1H)，7.048-7.043(s，1H)，7.004-6.980(d.d.，1H，J＝1Hz，J＝4Hz)，6.775-6.755(m，1H)，5.039(s，2H)，4.605-4.565(m，1H)，3.831(s，3H)，2.992-2.882(m，2H)，2.882-2.794(m，2H)，2.40-2.15(m，5H)，2.149(s，3H)，1.876-1.849(m，4H)，1.727-1.698(m，2H)，1.486-1.448(m，2H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt2.83min(99％)。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺三馬來酸鹽向3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.450g，1.03mmol)的吡啶(8mL)溶液中，在-5℃下滴加4-(三氟甲氧基)-1-苯羰基氯(0.231g，1.03mmol)的二氯甲烷(2.5mL)溶液進行處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌30分鐘。除去冰浴並將該反應混合物室溫下攪拌3小時。加入1N氫氧化鈉溶液(10mL)，並攪拌1小時。減壓下除去有機溶劑。加入二氯甲烷(10mL)並用Empore萃取柱分層。減壓除去有機溶劑並將粗品化合物在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷中的10％甲醇作為洗脫劑，得到0.430g(67％)的N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺(0.430g，0.688mmol)的乙酸乙酯(15mL)熱溶液用馬來酸(0.240g，2.07mmol)的乙酸乙酯熱溶液處理。形成沉澱，在氮氣氛下過濾，並高真空下乾燥，得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.70(s，1H)，8.28(s，1H)，8.11-8.08(m，2H)，8.05-8.03(m，1H)，7.56-7.54(m，2H)，7.34(m，1H)，7.31-7.29(m，1H)，6.11(s，6H)，5.10-5.00(m，1H)，3.93(s，3H)，3.54(m，4H)，2.99(m，2H)，2.79(s，3H)，2.22-2.19(m，4H)，1.84(m，2H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt4.999min(100％)。
實施例2304-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮二馬來酸鹽將3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4胺(0.300g，0.780mmol)的吡啶(5mL)溶液在0℃下用4-甲基-1-哌嗪羰基氯鹽酸鹽(0.127g，0.780mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌5分鐘，之後除去冰浴，並將該反應室溫下攪拌過夜。再加入等量的4-甲基-1-哌嗪羰基氯鹽酸鹽(0.127g，0.780mmol)並攪拌2小時。減壓除去溶劑。將二氯甲烷(10mL)和碳酸氫鈉(5mL)飽和水溶液加入到此固體中。分層，用Empore萃取柱。減壓下除去有機層得到0.417g的粗品。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷中的8％甲醇、存在於二氯甲烷中的15％甲醇、以及存在於二氯甲烷中的20％甲醇作為洗脫劑，得到0.178g(45％)的4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮。將4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(0.178g，0.347mmol)的乙酸乙酯熱溶液用馬來酸(0.081g，0.693mmol)的乙酸乙酯熱溶液處理。溶劑冷卻時形成沉澱，在氮氣氛下過濾，並高真空下乾燥，得到0.124g的4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮二馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.257(s，1H)，7.661-7.639(d，2H，J＝8.8Hz)，7.441-7.42(m，2H)，7.210-7.112(m，5H)，6.142(s，4H)，4.963-4.908(m，1H)，3.784-3.754(d，2H，J＝12Hz)，3.7-3.2(br.s.，11H)，3.15-3.05(m，2H)，2.922(s，3H)，2.161-2.138(m，2H)，1.989-1.93(m，2H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(SymmetryShield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.159min(97％)。
實施例231N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲醯胺三馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.398g，0.912mmol)的吡啶(7mL)懸浮液，在-5℃用4-(二甲基氨基)-1-苯羰基氯(0.167g，0.912mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液處理。該反應混合物在-5℃下攪拌2.5小時，並除去冰浴。將1N氫氧化鈉溶液(10mL)加入到該反應混合物中並攪拌1小時。減壓下除去有機層，並加入二氯甲烷(15mL)。分層，用Empore萃取柱。減壓下除去有機層。粗品固體通過急驟色譜在矽膠上純化兩次，用存在於二氯甲烷中的12％(甲醇，其中含5％氫氧化銨)作為洗脫劑，得到0.284g(53％)的N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲醯胺的(0.284g，0.487mmol)在乙酸乙酯和幾滴乙醇中的熱溶液，用馬來酸(0.169g，1.46mmol)的乙酸乙酯熱溶液處理。在氮氣氛下過濾形成的沉澱並高真空下乾燥，得到0.409g的N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-4-(二甲基氨基)苯甲醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.054(s，1H)，8.278(s，1H)，8.215-8.194(m，1H)，7.851-7.828(m，2H)，7.312-7.308(m，1H)，7.288-7.263(m，1H)，6.794-6.772(m，2H)，6.096(s，6H)，5.10-5.00(m，1H)，3.951(s，3H)，3.538(s，4H)，3.061(s，8H)，2.215-2.183(m，4H)，1.90-1.81(m，2H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(SymmetryShield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt4.496min(97％)。
實施例232-237順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-(三氟甲基)苯甲醯胺順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-(三氟甲氧基)苯甲醯胺順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-(三氟甲氧基)苯甲醯胺順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-氟-4-(三氟甲基)苯甲醯胺順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-(三氟甲基)苯甲醯胺得自順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-7H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的醯胺將存在於二氯甲烷(100μL)的商購醯氯(0.23mmol)加入到存在於吡啶(800μL)的順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-7H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.050g，0.115mmol)中。將該反應混合物攪拌過夜。該反應混合物用1N氫氧化鈉溶液驟冷。在Supelco-支管上真空和氮氣流下除去溶劑。剩餘的固體進行製備HPLC(Hypersil C18，100×21mm柱，5μm，15-100％乙腈梯度，在8分鐘內，總過柱時間-10min，緩衝液50mM醋酸銨，25ml/min)。將二氯甲烷和1N氫氧化鈉溶液加入到此固體中。分層，用Empore萃取柱，得到相應的產物。HPLC Perkin Elmer Pecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5ml/min)
實施例238順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯氨基)-2-苯基-1-乙醇將順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.075g，0.000172mol)和氧化苯乙烯(0.029g，0.000172mol)溶解於異丙醇(3mL)，並將所得混合物加熱回流24小時。除去溶劑並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)，得到順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯氨基)-2-苯基-1-乙醇(0.005g，0.0000089mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.36(m，5H)，7.06(s，1H)，6.91(d，1H)，6.36(d，1H)，5.55(d，1H)，5.20(s，1H)4.78(m，1H)，4.43(d，2H)，3.88(s，3H)，3.74(m，1H)，3.58(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.97min。
MSMH+557。
中間體順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將順-或反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺還原烷基化的總方法步驟A將順-或反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的混合物(或者單獨的順式或反式)(1當量)、醛(1當量)、三乙醯氧基硼氫化鈉(3.4當量)和乙酸(3.4當量)在無水1，2-二氯乙烷中攪拌16小時。將該反應混合物減壓濃縮，用飽和碳酸氫鈉水溶液停止反應並再次濃縮。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到所需產物。
步驟B合成和純化(步驟A)後，將殘餘物用二氯甲烷浸提(1mL)，加樣到Trikonex柱(7cm)上並用二氯甲烷(5mL)洗脫。切下所需譜帶(UV-檢測)並將此化合物用二氯甲烷∶甲醇∶三乙胺＝90∶5∶5(10mL)的混合物萃取，過濾並將此濾液減壓濃縮。殘餘物懸浮於乙醚(4mL)並過濾收集此沉澱並乾燥。
實施例239順-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽步驟A1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.57(s，1H)，7.06(br，2H)，6.77(d，1H)，6.38(d，1H)，6.32(d，1H)，5.65(t，1H)，4.78(m，1H)，4.38(d，2H)，3.88(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.65min。
MSMH+517。
實施例240順-5-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯氨基)甲基]-2-呋喃基甲醇乙酸鹽步驟A1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.06(br，2H)，6.77(d，1H)，6.23(d，1H)，6.19(d，1H)，5.63(t，1H)，5.18(t，1H)，4.78(m，1H)，4.35(d，4H)，3.88(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.91min。
MSMH+547。
實施例241反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺按照步驟A進行製備。將反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(1當量)溶解於乙醇(20mL)並將此溶液加熱回流。立即加入馬來酸溶液(3當量)並再繼續回流10分鐘。該反應混合物冷卻至室溫，過濾收集此沉澱並乾燥。
反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.57(s，1H)，7.06(br，2H)，6.77(d，1H)，6.38(d，1H)，6.32(d，1H)，6.16(s，4H)，5.65(t，1H)，4.67(m，1H)，4.38(d，2H)，3.88(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.62min。
MSMH+517。
實施例242反-3-(3-甲氧基-4-[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽其以與上述反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二馬來酸鹽相同的方式製備。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.08(d，2H)，6.77(d，1H)，6.16(m，5H)，5.95(d，1H)，5.65(t，1H)，4.67(m，1H)，4.32(d，2H)，3.88(s，3H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.22(s，3H)，2.05(m，6H)，1.57(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.73min。
MSMH+531。
將順-或反-3-(4-氨基-苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺還原烷基化的總方法步驟C將順-或反-3-(4-氨基-苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(或者中間體…或…)(1當量)、醛(1當量)、三乙醯氧基硼氫化鈉(3.4當量)和乙酸(3.4當量)的混合物在無水1，2-二氯乙烷中攪拌16小時。將該反應混合物減壓濃縮，用飽和碳酸氫鈉水溶液停止反應並再次濃縮。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到所需產物。
實施例243順-2-[2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苯氧基乙酸二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.33(m，3H)，7.17(t，1H)，6.83(m，4H)，4.76(m，1H)，4.46(s，2H)，4.29(s，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.78min。
MSMH+571。
實施例244順-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.58(s，1H)，7.36(d，2H)，6.81(d，2H)，6.46(t，1H)，6.41(d，1H)，6.34(d，1H)，4.78(m，1H)，4.31(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.29min。
MSMH+487。
實施例245順-3-(4-[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.36(d，2H)，6.79(d，2H)，6.43(t，1H)，6.21(d，1H)，5.98(d，1H)，4.78(m，1H)，4.24(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.86min。
MSMH+501。
實施例246順-3-{4-[(3-呋喃基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.64(d，2H)，7.37(d，2H)，6.79(d，2H)，6.52(s，1H)，6.29(t，1H)，4.76(m，1H)，4.18(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.17min。
MSMH+488。
實施例247順-3-{4-[(苯並[b]呋喃-2-基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.58(d，1H)，7.53(d，1H)，7.38(d，2H)，7.23(m，2H)，6.86(d，2H)，6.80(s，1H)，6.66(t，1H)，4.78(m，1H)，4.52(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.65(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.00min。
MSMH+537。
實施例248反-3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.59(s，1H)，7.35(d，2H)，6.79(d，2H)，6.45(t，1H)，6.39(d，1H)，6.33(d，1H)，4.60(m，1H)，4.30(d，2H)，3.1(br，9H)，2.67(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.96min。
MSMH+487。
將3-(4-氨基-苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺還原烷基化的總方法步驟D將3-(4-氨基-苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(1當量)、醛(1當量)、三乙醯氧基硼氫化鈉(3.4當量)和乙酸(3.4當量)的混合物在無水1，2-二氯乙烷中攪拌16小時。將該反應混合物減壓濃縮，用飽和碳酸氫鈉水溶液停止反應並再次濃縮。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到所需產物。
實施例2493-(4-[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽步驟D1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.07(br，2H)，6.76(d，1H)，6.17(d，1H)，5.97(d，1H)，5.57(t，1H)，4.60(m，1H)，4.30(d，2H)，3.86(s，3H)，2.98(d，2H)，2.79(d，2H)，2.27(s，3H)，2.25(br，5H)，2.15(s，3H)，1.91(m，7H)，1.69(d，2H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.97min。
MSMH+531。
實施例250順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-{4-[(1-苯基乙基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽a)N-(4-溴苯基)-N-(1-苯基乙基)胺向冷卻至-78C的N-(4-溴苯基)-N-(1-苯基亞甲基)胺(1.0g，0.00385mol)的甲苯(30mL)溶液中，滴加1.4M甲基鋰的乙醚(5.5mL)溶液，保持溫度低於-75℃。將此溶液升溫至-40℃並在此溫度下在氮氣氛下攪拌3小時。通過滴加水將該反應混合物驟冷並分層。有機相用鹽水(50mL)洗滌，用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮得到N-(4-溴苯基)-N-(1-苯基乙基)胺(1.03g，0.00373mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.30(m，4H)，7.18(t，1H)，7.09(d，2H)，6.43(d，2H)，6.38(d，1H)，4.43(m，1H)，1.40(d，3H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷5∶95)Rf0.27b)N-(1-苯基乙基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺將N-(4-溴苯基)-N-(1-苯基乙基)胺(0.87g，0.00315mol)、乙硼烷頻哪醇酯(0.96g，0.00378mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.077g，0.0000945mol)和醋酸鉀(0.93g，0.00945mol)在N，N-二甲基甲醯胺(20mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(60mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到N-(1-苯基乙基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.3g，0.00093mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.30(m，6H)，7.18(t，1H)，6.58(d，1H)，6.46(d，2H)，4.51(m，1H)，1.40(d，3H)，1.27(s，12H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷5.95)Rf0.17c)順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-{4-[(1-苯基乙基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽將N-(1-苯基乙基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.070g，0.000235mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.080g，0.000181mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.012g，0.000011mol)和碳酸鈉一水合物(0.056g，0.00045mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈0.1M醋酸銨在25分鐘內，21mL/min)得到順-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-{4-[(1-苯基乙基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽(0.062g，0.0000984mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.42(d，2H)，7.30(m，4H)，7.19(t，1H)，6.68(d，2H)，6.52(d，1H)，4.78(m，1H)，4.53(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，1.44(d，3H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.96min。
MSMH+511。
實施例251和實施例252順-3-[4-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺反-3-[4-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽a)N-(4-溴苯基)-N-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基)胺將60％氫化鈉在礦物油中的分散液(0.145g，0.00362mol)加入到氧化鋶三甲基碘(0.8g，0.00362mol)的無水二甲基亞碸(10mL)溶液中，並將所得混合物並在氮氣氛下攪拌10分鐘。滴加2-{[(4-溴苯基)亞氨基]甲基}苯酚(0.4g，0.00145mol)的無水二甲基亞碸(5mL)溶液並將所得混合物室溫下攪拌2.5小時。將其倒入到冰冷的水(100mL)中並用乙醚(2×50mL)萃取。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮得到N-(4-溴苯基)-N-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基)胺(0.321g，0.0011mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.34(d，1H)，7.23(m，3H)，6.90(m，2H)，6.67(d，2H)，6.34(d，1H)，5.23(m，1H)，4.72(dd，1H)，4.19(dd，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.52b)N-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺將N-(4-溴苯基)-N-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基)胺(1.65g，0.00569mol)、乙硼烷頻哪醇酯(1.73g，0.00683mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.139g，0.000171mol)和醋酸鉀(0.81g，0.0171mol)在N，N-二甲基甲醯胺(35mL)的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(100mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到N-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.59g，0.00176mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.42(d，2H)，7.34(d，1H)，7.23(t，1H)，6.89(m，2H)，6.68(d，2H)，6.52(d，1H)，5.23(m，1H)，4.74(dd，1H)，4.20(dd，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.37c)順-3-[4-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將N-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.080g，0.000237mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.087g，0.000198mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.014g，0.000012mol)和碳酸鈉一水合物(0.061g，0.000495mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，在25分鐘內，21mL/min)。隨後，將粗品溶解於二氯甲烷，加樣到Trikonex柱(7cm)並用二氯甲烷洗脫(5mL)。切下所需譜帶，產物用二氯甲烷/甲醇/三乙胺90∶5∶5的混合物(10mL)萃取，並減壓除去溶劑。殘餘物用乙醚研磨，過濾收集此沉澱並乾燥得到順-3-[4-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.021g，0.00004mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.40(m，3H)，7.25(t，1H)，6.90(m，4H)，6.50(d，1H)，5.35(m，1H)，4.80(m，2H)，4.28(dd，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.39min。
MSMH+525。
反-3-[4-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽將N-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.089g，0.000265mol)、反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.090g，0.000204mol)、四(三苯基膦)鈀(0.014g，0.000012mol)和碳酸鈉一水合物(0.063g，0.00051mol)的混合物，在乙二醇二甲醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸銨在25分鐘內，21mL/min)得到反-3-[4-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽(0.078g，0.000121mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.40(m，3H)，7.25(t，1H)，6.90(m，4H)，6.50(d，1H)，5.33(m，1H)，4.79(dd，1H)，4.60(m，1H)，4.28(dd，1H)，3.1(br，9H)，2.17(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.49(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt13.05min。
MSMH+525。
實施例253順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-1-苯基-1-乙酮二乙酸鹽將順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.6g，0.00148mol)和溴苯乙酮(0.295g，0.00148mol)溶解於無水N，N-二甲基甲醯胺(30mL)中，並將所得混合物室溫氮氣氛下攪拌5分鐘。滴加N，N-二異丙基乙胺(0.095g，0.00074mol)並在氮氣氛下繼續攪拌16小時。該反應混合物經減壓濃縮並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，在25分鐘內，21mL/min)得到順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-1-苯基-1-乙酮二乙酸鹽(0.410g，0.00064mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(s，1H)，7.99(d，2H)，7.75(t，1H)，7.61(t，2H)，7.29(d，2H)，6.69(d，2H)，5.41(br，3H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.16min。
MSMH+525。
實施例254順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-1-苯基-1-乙醇二乙酸鹽將順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-1-苯基-1-乙酮二乙酸鹽(0.050g，0.000077mol)的無水甲醇(5mL)溶液冷卻至0℃，並立即加入硼氫化鈉(0.018g，0.0000477mol)。將此混合物升溫至室溫同時在氮氣氛下攪拌3小時。通過滴加乙酸停止該反應，將該反應混合物減壓濃縮，並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，在25分鐘內，21mL/min)得到順-2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-1-苯基-1-乙醇二乙酸鹽(0.035g，0.000054mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(s，1H)，7.31(m，7H)，6.69(d，2H)，5.41(br，2H)，5.31(d，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，14H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.34min。
MSMH+527。
實施例255順-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-N′-苄基脲乙酸鹽將順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.0001mol)溶解於無水吡啶(1mL)，加入異氰酸苄基酯(0.013g，0.0001mol)並將所得溶液室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲基]-N′-苄基脲乙酸鹽(0.015g，0.000022mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.62(d，2H)，7.45(d，2H)，7.57-7.27(br，10H)，7.04(d，1H)，6.41(t，1H)，6.03(d，1H)，4.78(m，1H)，4.25(d，2H)，2.70(s，3H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.90(s，3H)，1.68(m，2H)，1.56(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.39min。
MSMH+630。
實施例256順-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]苯甲醯胺乙酸鹽將順-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.051g，0.0001mol)溶解於無水吡啶(1mL)，加入苯甲醯基氯(0.014g，0.0001mol)並將所得溶液室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]苯甲醯胺乙酸鹽(0.042g，0.000062mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(t，1H)，8.23(s，1H)，7.91(d，2H)，7.63(d，2H)，7.49(m，3H)，7.38(t，2H)，7.12(d，2H)，7.08(d，2H)，4.78(m，1H)，4.49(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.62min。
MSMH+617。
實施例257順-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-1-苯磺醯胺乙酸鹽將順-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.051g，0.0001mol)溶解於無水吡啶(1mL)，加入苯磺醯基氯(0.018g，0.0001mol)並將所得溶液室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N1-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-1-苯磺醯胺乙酸鹽(0.042g，0.000048mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，8.18(t，1H)，7.79(d，2H)，7.63(m，3H)，7.58(t，2H)，7.26(d，2H)，7.09(d，2H)，7.01(d，2H)，4.78(m，1H)，4.01(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.31min。
MSMH+653。
實施例258順-N-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-N′-苄基脲乙酸鹽將順-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.051g，0.0001mol)溶解於無水吡啶(1mL)，加入異氰酸苄基酯(0.013g，0.0001mol)並將所得溶液室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈0.1M醋酸銨在25分鐘內，21mL/min)得到順-N-[4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-N′-苄基脲乙酸鹽(0.019g，0.000027mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.27(m，7H)，7.13(d，2H)，7.09(d，2H)，6.46(m，2H)，4.78(m，1H)，4.24(d，4H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.49min。
MSMH+646。
製備順-3-{4-[3-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺及其衍生物的方法與製備順-3-{4-[4-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺及其衍生物的方法相同。
實施例259順-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]苯甲醯胺二乙酸鹽a)順-3-{4-[3-(氨基甲基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.38(m，1H)，7.15(m，4H)，6.96(d，1H)，4.78(m，1H)，3.73(s，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.32min。
b)順-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]苯甲醯胺二乙酸鹽1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(t，1H)，8.23(s，1H)，7.86(d，2H)，7.63(d，2H)，7.48(m，4H)，7.10(m，5H)，4.78(m，1H)，4.49(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.58min。
MSMH+617。
實施例260順-N1-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-1-苯磺醯胺乙酸鹽
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(m，2H)，7.78(d，2H)，7.62(m，5H)，7.31(m，1H)，7.04(m，5H)，4.78(m，1H)，4.03(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.36min。
MSMH+653。
實施例261順-N-[3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]-N′-苄基脲乙酸鹽1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.63(d，2H)，7.35(t，1H)，7.27-7.04(m，10H)，6.46(m，2H)，4.78(m，1H)，4.25(d，2H)，4.22(d，2H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.44min。
MSMH+646。
實施例262和實施例263順-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮乙酸鹽反-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮a)2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙酮向含4-溴苯胺(7.42g，0.0431mol)和2-溴苯乙酮(8.58g，0.0431mol)的N，N-二甲基甲醯胺(200mL)溶液中，滴加N，N-二異丙基乙胺並將該反應混合物室溫下攪拌5小時。減壓除去溶劑並將此殘餘物在二氯甲烷(150mL)和水(100mL)之間分配。將有機相用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮。殘餘物懸浮於乙醚，過濾收集此沉澱並乾燥得到2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙酮(10.03g，0.0346mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.06(d，2H)，7.69(t，1H)，7.58(m，2H)，7.20(d，2H)，6.66(d，2H)，6.11(t，1H)，4.68(d，2H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶2)Rf0.39b)2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙醇將2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙酮(3.50g，0.0121mol)的無水甲醇(200mL)溶液冷卻至0℃，並立即加入硼氫化鈉(2.28g，0.0603mol)。將此混合物升溫至室溫同時在氮氣氛下攪拌3小時。通過滴加乙酸停止該反應，將該反應混合物減壓濃縮並將此殘餘物在二氯甲烷(120mL)和水(85mL)之間分配。將有機相用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮得到2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙醇(3.49g，0.0117mol)，為黃色油狀物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.39(d，2H)，7.33(m，2H)，7.24(t，1H)，7.17(d，2H)，5.81(t，1H)，5.47(d，1H)，4.71(m，1H)，3.18(m，1H)，3.07(m，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶2)Rf0.22c)3-(4-溴苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮將含2-(4-溴苯氨基)-1-苯基-1-乙醇(0.74g，0.00253mol)、N，N-二異丙基乙胺(1.01g，0.00786mol)和N，N-二甲基氨基吡啶(0.092g，0.00076mol)的無水二氯甲烷(32mL)溶液冷卻至0℃，並滴加三光氣(0.38g，0.00127mol)的無水二氯甲烷(8mL)溶液。將該反應混合物緩慢升溫至室溫同時在氮氣氛下攪拌18小時。有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液(40mL)、鹽水(30mL)洗滌並用硫酸鎂乾燥。減壓除去溶劑並將此殘餘物通過急驟色譜在矽膠上純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作為流動相，得到3-(4-溴苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮(0.62g，0.00192mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.58(s，4H)，7.47(m，5H)，5.77(m，1H)，4.46(t，1H)，4.01(t，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶2)Rf0.28d)5-苯基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮將3-(4-溴苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮(0.6g，0.00189mol)、乙硼烷頻哪醇酯(0.58g，0.00226mol)、[1，1』-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.046g，0.000057mol)和醋酸鉀(0.56g，0.0057mol)在N，N-二甲基甲醯胺(20mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(100mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到5-苯基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮(0.19g，0.00052mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.69(d，2H)，7.62(d，2H)，7.47(m，5H)，5.77(m，1H)，4.46(t，1H)，4.01(t，1H)，1.27(s，12H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶2)Rf0.19e)順-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮乙酸鹽將5-苯基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮(0.085g，0.000233mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.086g，0.000194mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.013g，0.000012mol)和碳酸鈉一水合物(0.060g，0.000485mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，在25分鐘內，21mL/min)得到順-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮乙酸鹽(0.074g，0.000121mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.79(d，2H)，7.68(d，2H)，7.47(m，5H)，5.82(t，1H)，4.78(m，1H)，4.57(t，1H)，4.09(t，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt12.84min。
MSMH+553。
f)反-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮此化合物通過類似於製備順-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苯基-1，3-噁唑烷-2-酮乙酸鹽的合成途徑來製備。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.79(d，2H)，7.68(d，2H)，7.47(m，5H)，5.82(t，1H)，4.64(m，1H)，4.57(t，1H)，4.09(t，1H)，3.1(br，9H)，2.17(s，3H)，2.05(m，6H)，1.49(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.72min。
MSMH+553。
實施例264反-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苄基-1，3-噁唑烷-2-酮二乙酸鹽a)1-(4-溴苯氨基)-3-苯基-2-丙醇將4-溴苯胺(1.75g，0.0102mol)和2，3-環氧基丙基苯(1.77g，0.0132mol)在甲醇(40mL)中的混合物加熱回流16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓濃縮。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作為流動相，得到1-(4-溴苯氨基)-3-苯基-2-丙醇(2.2g，0.00719mol)，為無色油狀物。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.33(m，7H)，6.50(d，2H)，5.76(t，1H)，4.83(d，1H)，3.82(m，1H)，2.98(m，1H)，2.90(m，1H)，2.78(dd，1H)，2.67(dd，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf0.29b)5-苄基-3-(4-溴苯基)-1，3-噁唑烷-2-酮將含1-(4-溴苯氨基)-3-苯基-2-丙醇(1.90g，0.00621mol)、N，N-二異丙基乙胺(2.48g，0.0193mol)和N，N-二甲基氨基吡啶(0.152g，0.00124mol)的無水二氯甲烷(64mL)溶液冷卻至0℃，並滴加三光氣(0.92g，0.0031mol)的無水二氯甲烷(16mL)溶液。將該反應混合物緩慢升溫至室溫同時在氮氣氛下攪拌18小時。有機相用碳酸氫鈉水溶液(70mL)、鹽水(60mL)洗滌並用硫酸鎂乾燥。減壓除去溶劑並將此殘餘物通過急驟色譜在矽膠上純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作為流動相，得到5-苄基-3-(4-溴苯基)-1，3-噁唑烷-2-酮(1.25g，0.00377mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.54(d，2H)，7.47(d，2H)，7.27(m，5H)，4.95(m，1H)，4.12(t，1H)，3.78(t，1H)，3.07(d，2H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf0.37c)5-苄基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮將5-苄基-3-(4-溴苯基)-1，3-噁唑烷-2-酮(1.25g，0.00377mol)、乙硼烷頻哪醇酯(1.15g，0.00452mol)、[1，1』-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.092g，0.000114mol)和醋酸鉀(1.12g，0.0113mol)在N，N-二甲基甲醯胺(30mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(100mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到5-苄基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮(1.03g，0.0027mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.65(d，2H)，7.54(d，2H)，7.27(m，5H)，4.95(m，1H)，4.12(t，1H)，3.78(t，1H)，3.07(d，2H)，1.28(s，12H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf0.25。
d)反-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苄基-1，3-噁唑烷-2-酮二乙酸鹽將5-苄基-3-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-噁唑烷-2-酮(0.110g，0.00029mol)、反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.080g，0.000181mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.012g，0.000011mol)和碳酸鈉一水合物(0.056g，0.00045mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到反-3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-苄基-1，3-噁唑烷-2-酮二乙酸鹽(0.049g，0.000072mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.65(m，4H)，7.32(m，5H)，5.02(m，1H)，4.64(m，1H)，4.19(t，1H)，3.85(t，1H)，3.11(d，2H)，3.1(br，9H)，2.17(s，6H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.49(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt13.13min。
MSMH+567。
實施例265順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-2-甲基-2-苯基丙醯胺二乙酸鹽將含順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.1g，0.000246mol)、α，α-二甲基苯基乙酸(0.045g，0.000271mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.071g，0.000369mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.0037g，0.000271mol)的無水N，N-二甲基甲醯胺(5mL)溶液攪拌5分鐘。滴加N，N-二異丙基乙胺(0.098g，0.00076mol)並在氮氣氛下繼續攪拌16小時。減壓濃縮此反應混合物並將殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯基)-2-甲基-2-苯基丙醯胺二乙酸鹽(0.014g，0.000021mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.29(s，1H)，8.20(s，1H)，7.82(d，2H)，7.55(d，2H)，7.83(m，4H)，7.27(m，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.59(s，6H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt13.59min。
MSMH+553。
實施例266和實施例267順-4(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-2-苯基丁酸乙酸鹽順-4(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-3-苯基丁酸乙酸鹽a)1-(4-溴苯基)-3-苯基-2，5-吡咯烷二酮將4-溴苯胺(5.48g，0.0318mol)和苯基琥珀酸酐(5.89g，0.0334mol)的無水苯(80mL)溶液加熱回流1.5小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓濃縮。向此殘餘物中，加入乙醯基氯(60mL)並將此溶液加熱回流1.5小時。將該反應混合物冷卻至室溫並過濾收集沉澱，用乙醚洗滌並乾燥得到1-(4-溴苯基)-3-苯基-2，5-吡咯烷二酮(8.7g，0.0264mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.72(d，2H)，7.40(m，7H)，4.33(dd，1H)，3.33(dd，1H)，2.94(dd，1H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶4)Rf0.34
b)3-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-2，5-吡咯烷二酮將1-(4-溴苯基)-3-苯基-2，5-吡咯烷二酮(2.00g，0.00602mol)、乙硼烷頻哪醇酯(1.85g，0.00727mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.148g，0.000182mol)和醋酸鉀(1.784g，0.0182mol)在N，N-二甲基甲醯胺(40mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(100mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶4)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到3-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-2，5吡咯烷二酮(0.78g，0.00207mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.79(d，2H)，7.40(m，7H)，4.33(dd，1H)，3.33(dd，1H)，2.97(dd，1H)，1.31(s，12H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶4)Rf0.21c)順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-2-苯基丁酸乙酸鹽，和順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-3-苯基丁酸乙酸鹽將3-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-2，5-吡咯烷二酮(0.35g，0.00093mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.34g，0.000773mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.053g，0.000046mol)和碳酸鈉一水合物(0.24g，0.00193mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(14mL)和水(7mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，在25分鐘內，21mL/min)得到順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-2-苯基丁酸乙酸鹽(0.150g，0.000233mol)和順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-3-苯基丁酸乙酸鹽(0.11g，0.000171mol)，都是白色固體。
順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-2-苯基丁酸乙酸鹽1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.37(s，1H)，8.21(s，1H)，7.73(d，2H)，7.55(d，2H)，7.25(m，5H)，4.76(m，1H)，4.00(m，1H)，3.12(dd，1H)，2.71(dd，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.54min。
MSMH+583。
順-4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)-4-氧代-3-苯基丁酸乙酸鹽1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.46(s，1H)，8.21(s，1H)，7.78(d，2H)，7.54(d，2H)，7.41(d，5H)，7.31(t，2H)，7.24(t，1H)，4.76(m，1H)，4.16(m，1H)，3.08(dd，1H)，2.51(dd，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.11min。
MSMH+583。
實施例268順-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲腈a)2-苯基-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]乙腈將(4-溴苯基)(苯基)甲腈(0.604g，0.00222mol)、乙硼烷頻哪醇酯(0.677g，0.00266mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.054g，0.000067mol)和醋酸鉀(0.52g，0.00666mol)在N，N-二甲基甲醯胺(30mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(80mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶9)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到2-苯基-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]乙腈(0.110g，0.000345mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.67(d，2H)，7.40(m，7H)，5.87(s，1H)，1.31(s，12H)；TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf0.18b)順-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲腈將2-苯基-2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]乙腈(0.120g，0.000376mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.083g，0.000188mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.013g，0.000011mol)和碳酸鈉一水合物(0.058g，0.00047mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到順-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)(苯基)甲腈(0.025g，0.0000494mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.70(d，2H)，7.58(d，2H)，7.47(m，4H)，7.38(t，1H)，5.93(s，1H)，4.76(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.95min。
MSMH+507。
實施例269順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺二乙酸鹽a)N-(1，3-苯並噁唑-2-基)-N-(4-溴苯基)胺將4-溴苯胺(3.9g，0.0227mol)加入到2-氯苯並噁唑(1.16g，0.00755mol)的二甲苯溶液中，並將該反應混合物在100℃下加熱2小時。將其冷卻至室溫並減壓濃縮。殘餘物在乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)之間分配，將有機相用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮。殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱，並乾燥得到N-(1，3-苯並噁唑-2-基)-N-(4-溴苯基)胺(1.48g，0.00512mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.78(s，1H)，7.74(d，2H)，7.57(d，2H)，7.50(m，2H)，7.23(t，1H)，7.16(t，1H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf0.34b)N-(1，3-苯並噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺將N-(1，3-苯並噁唑-2-基)-N-(4-溴苯基)胺(0.800g，0.00277mol)、乙硼烷頻哪醇酯(0.84g，0.00332mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.068g，0.000083mol)和醋酸鉀(0.81g，0.0083mol)的混合物在N，N-二甲基甲醯胺(20mL)中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。讓此混合物冷卻至室溫，並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(100mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到N-(1，3-苯並噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.59g，0.00176mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.80(s，1H)，7.78(d，2H)，7.68(d，2H)，7.50(d，2H)，7.23(t，1H)，7.16(t，1H)，1.26(s，12H)TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf0.29
c)順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺二乙酸鹽將N-(1，3-苯並噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.073g，0.000217mol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.080g，0.000181mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.012g，0.000011mol)和碳酸鈉一水合物(0.056g，0.000453mol)的混合物，在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，在25分鐘內，21mL/min)得到順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺二乙酸鹽(0.082g，0.000128mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.95(d，2H)，7.66(d，2H)，7.51(m，2H)，7.25(t，1H)，7.15(t，1H)，4.78(m，1H)，2.5-2.1(br，13H)，2.17(s，3H)，1.91(s，6H)，1.68(m，2H)，1.58(m，2H)，RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.80min。
MSMH+524。
中間體A2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]苯甲醛將2-(4-碘苯氧基)苯甲醛(1.31g，4.03mmol，1當量)、PdCl2(dppf)2(0.092g，0.13mmol，0.03當量)、乙硼烷頻哪醇酯(1.23g，4.84mmol，1.2當量)及醋酸鉀(1.19g，12.1mmol，3.0當量)在DMF(15mL)中的混合物，在80℃下加熱5.5小時。將該反應混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(50mL)並將固體通過硅藻土板藉助於二氯甲烷(100mL)和Et2O(100mL)濾出。濃縮此濾液得到棕色油狀物，其通過柱色譜在矽膠上純化(用500ml的5％MeOH/二氯甲烷洗脫)得到2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]苯甲醛，為紅色-棕色油狀物(0.875g，2.70mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 10.30(1H，s)，7.87-7.89(1H，m)，7.69-7.75(3H，m)，7.36-7.38(1H，m)，7.05-7.22(3H，m)及1.29(12H，s)。
實施例2702-[4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯氧基]乙醯胺將4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.050g，0.17mmol，1.0當量)、二噁烷(1.7mL)及氫化鈉(60％，0.010g，0.17mmol，1.0當量)的混合物室溫下攪拌10分鐘。加入碘代乙醯胺(0.031g，0.17mmol，1.0當量)。該反應混合物室溫下攪拌30分鐘，然後在110℃下加熱3.5小時。將此混合物冷卻至室溫並將所得固體過濾移出，其中藉助二氯甲烷(5mL)和EtOAc(5mL)。減壓除去溶劑得到黃色固體，其用乙酸乙酯研磨得到2-[(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)氧基]乙醯胺，為米色固體(0.045g，0.13mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.22(1H，s)，7.60(2H，d)，7.12(2H，d)，5.20-5.25(1H，m)，4.50(2H，s)，2.02-2.10(4H，m)，1.87-1.90(2H，m)，1.68-1.71(2H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.38min。MSMH+353。
實施例2715-[4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯氧基]-2-呋喃甲酸甲酯將4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.107g，0.362mmol，1.0當量)、DMSO(0.5mL)、氫化鈉(60％，0.030g，0.72mmol，2.0當量)和甲基-5-硝基-2-呋喃甲酸酯(0.062g，0.36mmol，1.0當量)在90℃下加熱3小時。將該反應混合物冷卻至室溫，倒入到冰水(10mL)，並用3部分二氯甲烷(各50mL)萃取。合併的有機萃取物用5％KOH溶液(50mL)洗滌，並將有機層用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到紅色油狀物，其通過柱色譜在矽膠上純化(用300ml的5％MeOH/二氯甲烷洗脫)得到5-[4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯氧基]-2-呋喃甲酸甲酯，為紅色固體(0.070g，0.17mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.24(1H，s)，7.70-7.74(2H，m)，7.35-7.39(3H，m)，6.9(2H，bs)，6.02(1H，s)，5.22-5.26(1H，m)，3.79(3H，s)，2.01-2.11(4H，m)，1.88-1.91(2H，m)，1.67-1.71(2H，m)。RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt18.17min。MSMH+420。
實施例2725-[4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯氧基]-2-呋喃甲酸將5-[4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯氧基]-2-呋喃甲酸甲酯(0.030g，0.072mmol，1當量)和氫氧化鈉(0.020g，0.50mmol，7當量)在50％ EtOH水(1mL)中的混合物，在80℃下加熱6小時。該反應混合物冷卻至室溫並用水(10mL)稀釋。通過加入1M HCl中和此混合物並用兩部分二氯甲烷(各20mL)和兩部分EtOAc(各20mL)萃取。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到黃色油狀物，其通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；50％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到淡棕色固體(0.009g，0.022mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 13.0(1H，bs)，8.23(1H，s)，7.74(2H，d)，7.35(2H，d)，7.29(1H，s)，6.03(1H，s)，5.21-5.28(1H，m)，2.01-2.11(4H，m)，1.89-1.90(2H，m)，1.68-1.71(2H，m)。RP-HPLC(Hypercil C18，5μm，100，15cm；在15分鐘內5％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt6.45min。MSMH+406。
實施例2731-環戊基-3-[4-(3-噻吩基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將4-(4-氨基-1-環戊基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)苯酚(0.212g，0.718mmol，1當量)、碳酸鉀(0.060g，0.43mmol，0.6當量)、銅粉末(0.015g，0.24mmol，0.33當量)及3-溴噻吩(0.09mL，0.9mmol，1.3當量)在DMF(7.2mL)的混合物在153℃下加熱24小時。將該反應混合物冷卻至室溫，濃縮，並將此殘餘物通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到1-環戊基-3-[4-(3-噻吩基氧基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為淡棕色固體(0.060g，0.16mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 9.77(1H，s)，8.46(1H，s)，8.41(1H，s)，7.73-7.74(1H，m)，7.57(2H，d，J＝4.5Hz)，7.46-7.48(1H，m)，7.15(1H，d，J＝5.2Hz)，6.96(2H，d，J＝8.6Hz)，5.24-5.30(1H，m)，2.03-2.05(4H，m)，1.89-1.93(2H，m)，1.70-1.72(2H，m)。RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt18.76min。MSMH+378。
實施例274順-3-{3-[(苯並[b]呋喃-2-基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺單乙酸鹽將順-3-(3-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.107g，0.263mmol，1當量)、冰醋酸(0.06mL，1.0mmol，3.8當量)、苯並[B]呋喃-2-甲醛(0.1g，0.3mmol，1當量)、三乙醯氧基硼氫化鈉(0.212g，1.0mmol，3.8當量)及二氯乙烷(2mL)的混合物，室溫下攪拌4.5小時。加入碳酸氫鈉水溶液，分離有機層，並將水層用兩部分的二氯甲烷萃取(各10mL)。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到黃色油狀物其通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到順-3-{3-[(苯並[b]呋喃-2-基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺單乙酸鹽，為白色固體(0.017g，0.031mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH8.22(1H，s)，7.51-7.58(2H，m)，7.22-7.28(3H，m)，6.98(1H，s)，6.79-6.84(2H，m)，6.59-6.62(1H，m)，4.76-4.81(1H，m)，4.50(2H，d，J＝5.6Hz)，2.19-2.24(14H，m)，2.05-2.07(2H，m)，1.91(3H，s)，1.60-1.75(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.99min。MSMH+537。
實施例275順-3-{3-[二(2-呋喃基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將順-3-(3-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.120g，0.296mmol，1當量)、糠醛(0.03mL，0.3mmol，1.1當量)、冰醋酸(0.07mL，1.1mmol，3.8當量)和三乙醯氧基硼氫化鈉(0.314g，1.48mmol，5.0當量)在二氯乙烷(2mL)中的混合物，室溫下攪拌60小時。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(5mL)，分離有機層，並將水層用兩部分的二氯甲烷萃取(各10mL)。有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到黃色油狀物。通過柱色譜在矽膠上純化(用200ml的5％ MeOH/二氯甲烷，100ml的10％ MeOH/二氯甲烷，和300ml的10∶20∶70％ MeOH/Et3N/二氯甲烷洗脫)得到順-3-{3-[二(2-呋喃基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為白色固體(0.051g，0.10mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.22(1H，s)，7.60(2H，s)，7.31-7.35(1H，m)，7.19(1H，s)，7.00(1H，d，J＝8.4Hz)，6.93(1H，d，J＝7.6Hz)，6.39(2H，s)，6.32(2H，s)，4.77-4.80(1H，m)，4.60(4H，s)，2.23-2.39(11H，m)，2.16(3H，s)，2.05-2.07(2H，m)，1.59-1.71(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.52min。MSMH+567。
實施例276順-N-[2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]三氟甲烷磺醯胺二乙酸鹽向順-3-4-[2-(氨基甲基)苯氧基]苯基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.018g，0.035mmol，1當量)和吡啶(0.4mL)的混合物中，在0℃下在20秒內滴加CF3SO2Cl(0.05mL，0.04mmol，1.2當量)。將該反應混合物緩慢升溫至室溫並攪拌3小時。減壓蒸發溶劑並將此油狀黃色殘餘物通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到順-N-[2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苄基]三氟甲烷磺醯胺二乙酸鹽(0.004g，0.006mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH8.22(1H，s)，7.61-7.67(3H，m)，7.25-7.30(2H，m)，7.19-7.23(2H，m)，6.96-6.98(1H，m)，4.77-4.81(1H，m)，4.25(2H，s)，2.09-2.54(14H，m)，2.05-2.08(2H，m)，1.91(6H，s)，1.57-1.74(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.15min。MSMH+645。
實施例277順-2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醛將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.970g，2.20mmol，1當量)、2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯氧基]苯甲醛(0.842g，2.60mmol，1.2當量)、四(三苯基膦)鈀(0.186g，0.180mmol，0.08當量)、DME(9mL)及碳酸鈉一水合物(0.655g，5.30mmol，2.4當量)在水(7mL)中的混合物，在85℃下加熱7小時，然後冷卻至室溫。加入飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)，並將此溶液用EtOAc(25mL)萃取。有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到淡棕色固體。用乙醚(35mL)研磨得到順-2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醛，為米白色固體(0.830g，1.62mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 10.42(1H，s)，8.24(1H，s)，7.89(1H，d，J＝7.7Hz)，7.69-7.71(3H，m)，7.30-7.36(1H，m)，7.29(2H，d，J＝6.3Hz)，7.16(1H，d，J＝8.2Hz)，4.79-4.81(1H，m)，2.18-2.55(11H，m)，2.17(3H，s)，2.05-2.09(2H，m)，1.56-1.71(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.56min。MSMH+512。
實施例278順-3-{3-[2-(1H-2咪唑基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將順-2-(3-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氧基)苯甲醛(0.102g，0.199mmol，1當量)、乙二醛(0.12mL，0.99mmol，5當量)和碳酸銨(0.078g，0.99mmol，5當量)在甲醇(1mL)中的混合物，室溫下攪拌16小時。再加入乙二醛(0.20mL，1.6mmol，8.3當量)和碳酸銨(0.130g，1.66mmol，8.4當量)，並將此反應混合物在室溫下攪拌24小時。粗品反應混合物通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到順-3-{3-[2-(1H-2-咪唑基)苯氧基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為棕色固體(0.010g，0.018mmol)1H NMR(d6DMSO，400MHz)δH 8.23(1H，s)，8.11-8.13(1H，dd，J＝7.7，1.9Hz)，7.95(1H，s)，7.66(2H，d，J＝8.5Hz)，7.34-7.39(1H，m)，7.23-7.27(3H，m)，7.07-7.19(3H，m)，4.77-4.82(1H，m)，2.16-2.56(11H，m)，2.14(3H，s)，2.05-2.11(2H，m)，1.55-1.71(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.43min。MSMH+550。
實施例279
順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-苯氨基乙醯胺將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.151g，0.356mmol，1當量)、碳酸鉀(0.098g，0.711mmol，2當量)及氯乙醯基氯(0.04mL，0.5mmol，1.5當量)在DMF(1.5mL)中的混合物，室溫下攪拌20分鐘，然後加入苯胺(0.32mL，3.5mmol，10當量)。將該反應混合物室溫下攪拌72小時。減壓除去溶劑並將此殘餘物通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300，25cm；在20分鐘內10％-60％乙腈0.1M醋酸銨，21mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物用飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)洗滌，然後用二氯甲烷(25mL)萃取。有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-苯氨基乙醯胺，為黃色固體(0.010g，0.017mmol)1H NMR(d6DMS0，400MHz)δH 9.30(1H，s)，8.35-8.38(1H，m)，8.21(1H，s)，7.21-7.23(2H，m)，7.12-7.16(2H，m)，6.64-6.66(3H，m)，6.31-6.34(1H，m)，4.77-4.81(1H，m)，3.90(2H，d，J＝6.0Hz)，3.82(3H，s)，2.21-2.51(11H，m)，2.16(3H，s)，2.06-2.08(2H，m)，1.55-1.70(4H，m)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.37min。MSMH+570。
實施例280(2S)-3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}丙烷-1，2-二醇室溫下，在氮氣氛下向1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)的溶液中加入(R)-(+)-縮水甘油(0.05M在異丙醇中，2.8mL，0.00014mol)。此混合物在80℃下攪拌3小時。減壓除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用氫氧化銨/甲醇/二氯甲烷(2∶7∶91)，接著用氫氧化銨/甲醇/二氯甲烷(2∶10∶88)作為流動相洗脫，得到(2S)-3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}丙烷-1，2-二醇(0.023g，0.000053mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.31(s，1H)，7.64(d，2H)，7.38(m，2H)，7.15(m，5H)，5.90(br，2H)，5.60(m，1H)，3.97(m，3H)，3.88(m，1H)，3.75(m，2H)，3.61(m，1H)，2.80(m，2H)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分鐘內含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt8.6min。
MSMH+433實施例281(2R)-3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}丙烷-1，2-二醇實驗方法類似於(2S)-3-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基丙烷-1，2-二醇的合成，其中使用(S)-(-)-縮水甘油。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.39(m，2H)，7.15(m，5H)，5.65(br，3H)，4.00(m，3H)，3.90(m，1H)，3.75(m，2H)，3.62(m，1H)，2.85(m，2H)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分鐘內含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt8.76min。
MSMH+433實施例2824-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基甲基)-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯a)1-氧雜-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯將氧化鋶三甲基碘(2.62g，0.012mol)和氫化鈉(0.44g，0.011mol)在無水二甲基亞碸(30mL)中的混合物，室溫氮氣氛下攪拌30分鐘。將該反應混合物冷卻至10℃，並加入存在於無水二甲基亞碸(10mL)中的4-氧代-1-哌啶甲酸(2.0g，0.010mol)。將該反應混合物升溫至室溫並攪拌1.5小時。此混合物倒入到飽和氯化銨水溶液(60mL)中。水相用乙酸乙酯(2×100mL)萃取。合併的有機萃取物用水(1×60mL)和鹽水(1×50mL)洗滌並用硫酸鈉乾燥。減壓除去溶劑得到1-氧雜-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(2.12g，0.0099mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ3.74(br，2H)，3.44(m，2H)，2.69(s，2H)，1.80(m，2H)，1.47(s，9H)，1.46(m，2H)TLC(乙酸乙酯/二氯甲烷＝20∶80)Rf0.574-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基甲基)-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯室溫下，在氮氣氛下向1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.4g，0.0011mol)在異丙醇(40mL)中的混合物中，加入1-氧雜-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(0.27g，0.0013mol)。此混合物在80℃下攪拌3.5小時。再加入1-氧雜-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(0.13g，0.00061mol)並將此混合物在80℃下攪拌7小時。再加入1-氧雜-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(0.13g，0.00061mol)並將此混合物在60℃下攪拌18小時，然後在80℃攪拌8小時。減壓除去溶劑。殘餘物懸浮於水(50mL)中並將水相用乙酸乙酯(2×50mL)萃取。合併的有機萃取物用水(1×50mL)和鹽水(1×50mL)洗滌並用硫酸鎂乾燥。減壓除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用甲醇/二氯甲烷(5∶95)，接著用甲醇/二氯甲烷(10∶90)作為流動相，得到4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基甲基)-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.243g，0.000425mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.43(t，2H)，7.17(m，3H)，7.10(d，2H)，5.78(m，1H)，5.48(br，2H)，4.34(br，2H)，4.20(br，2H)，3.89(br，2H)，3.18(br，2H)，2.91(br，2H)，1.60(br，2H)，(s，9H)。
RP-HPLC(Hypersil C18，5μm，250×4.6mm；在10分鐘內含0.1M乙酸胺的25％-100％，1mL/min)Rt10.7min。
MSMH+572
實施例2834-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基甲基)-4-哌啶醇在0℃下在氮氣氛下，向4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基甲基)-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.090g，0.00016mol)的二氯甲烷(2mL)溶液中，緩慢加入20％三氟乙酸的二氯甲烷溶液(10mL)。將此混合物升溫至室溫並攪拌4小時。減壓除去溶劑。在0℃下加入5N氫氧化鈉水溶液至pH為11。水相用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合併的有機萃取物用水(1×60mL)和鹽水(1×60mL)洗滌並用硫酸鈉乾燥。減壓除去溶劑得到4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基甲基)-4-哌啶醇(0.045g，0.000096mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.68(d，2H)，7.42(t，2H)，7.11(m，3H)，7.00(d，2H)，5.64(m，1H)，5.43(br，2H)，4.02(m，4H)，3.28(br，1H)，3.10(m，4H)，2.67(s，2H)，1.67(m，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.5min。
MSMH+472實施例2844-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基甲基)-1-甲基-4-哌啶醇將4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基甲基)-4-哌啶醇(0.035g，0.000074mol)和甲醛(0.006mL，37％在水中，0.000082mol)在二氯乙烷(4mL)中的混合物，室溫氮氣氛下攪拌1小時。將三乙醯氧基硼氫化鈉(0.022g，0.000104mol)加入到此混合物中並在室溫氮氣氛下攪拌18小時。加入分子篩(0.05g，3A，4-8目)和甲醛(0.006mL，37％在水中，0.000082mol)並將該反應混合物室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑，並將此殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersil HS C18，8μm，250×21.1mm；在25分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到4-(3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基甲基)-1-甲基-4-哌啶醇(0.020g，0.000041mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.63(s，1H)，7.69(d，2H)，7.42(t，2H)，7.17(m，5H)，5.42(m，1H)，3.88(m，2H)，3.67(m，2H)，2.37(m，2H)，2.25(m，2H)，2.14(s，3H)，1.90(s，2H)，1.50(m，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.5min。
MSMH+486總方法將1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.06g，0.00017mol，1當量)、相應的氯乙醯胺(0.0005mol，3當量)及N，N-二異丙基乙胺(0.033g，0.00026mol，1.5當量)在乙腈(2.5mL)中的混合物，在75℃氮氣氛下攪拌3小時。將此混合物倒入水中(10mL)，並用乙酸乙酯(2×10mL)萃取水相。合併的有機萃取物用水(1×10mL)和鹽水(1×10mL)洗滌並用硫酸鈉乾燥。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；5％-100％在25分鐘內含0.1M乙酸胺，21mL/min)得到相應的醯胺。
實施例285N-甲基-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}乙醯胺a)氯乙醯胺N-甲基-2-氯乙醯胺1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.35(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，3H)，7.08(d，2H)，5.80(br，2H)，5.60(m，1H)，4.00(m，4H)，3.37(s，2H)，2.85(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.2min。
MSMH+430實施例286N，N-二甲基-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}乙醯胺b)氯乙醯胺N，N-二甲基-2-氯乙醯胺1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.33(s，1H)，7.65(d，2H)，7.41(m，2H)，7.16(m，3H)，7.08(d，2H)，5.86(br，2H)，5.67(m，1H)，4.15(m，2H)，3.90(m，2H)，3.57(s，2H)，3.00(s，3H)，2.90(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.3min。
MSMH+444實施例287N-異丙基-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}乙醯胺c)氯乙醯胺N-異丙基-2-氯乙醯胺1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.40(m，2H)，7.18(m，3H)，7.09(d，2H)，6.90(br，1H)，5.66(m，3H)，4.11(m，1H)，3.99(m，4H)，3.39(s，2H)，1.19(d，6H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.8min。
MSMH+458實施例288N-(3-羥基丙基)-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}乙醯胺d)氯乙醯胺N-(3-羥基丙基)-2-氯乙醯胺1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.31(s，1H)，7.67(d，2H)，7.40(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(d，2H)，5.99(br，2H)，5.62(m，1H)，3.95(m，4H)，3.78(m，2H)，3.63(m，2H)，3.40(s，2H)，1.71(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.9min。
MSMH+474實施例2892-[(2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}乙醯基)氨基]乙酸乙酯(4037150)e)氯乙醯胺2-[(2-氯乙醯基)氨基]乙酸乙酯1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.66(d，2H)，7.65(br，1H)，7.40(m，2H)，7.18(m，3H)，7.09(d，2H)，5.67(m，1H)，5.56(br，2H)，4.23(m，2H)，4.10(m，4H)，4.00(m，2H)，3.47(s，2H)，1.29(t，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，I mL/min)Rt9.9min。
MSMH+502實施例290N-苄基-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}乙醯胺f)氯乙醯胺N-苄基-2-氯乙醯胺1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.63(d，2H)，7.40(m，2H)，7.33(m，5H)，7.16(m，5H)，5.72(m，1H)，4.49(d，2H)，3.97(m，4H)，3.44(s，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.7min。
MSMH+506實施例291N，N-甲氧基甲基-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}乙醯胺g)氯乙醯胺N，N-甲氧基甲基-2-氯乙醯胺1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，3H)，7.08(d，2H)，5.71(m，1H)，5.48(br，2H)，4.16(m，2H)，3.92(m，2H)，3.72(s，3H)，3.69(s，2H)，3.18(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.5min。
MSMH+460實施例2922-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-1-(4-嗎啉基)-1-乙酮h)氯乙醯胺2-氯-1-(4-嗎啉基)-1-乙酮1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，3H)，7.08(d，2H)，5.71(m，3H)，4.13(m，2H)，3.93(m，2H)，3.69(br，4H)，3.60(br，4H)，3.51(s，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.3min。
MSMH+486實施例293N-(3-甲基-5-異噁唑基)-2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}乙醯胺
i)氯乙醯胺N-(3-甲基-5-異噁唑基)-2-氯乙醯胺1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ10.10(br，1H)，8.37(s，1H)，7.66(d，2H)，7.40(m，2H)，7.19(m，3H)，7.09(d，2H)，6.26(s，1H)，5.65(m，1H)，4.07(m，4H)，3.54(s，2H)，2.28(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，I mL/min)Rt10.3min。
MSMH+497實施例2941-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-(1H-4-咪唑基)-1-乙酮將1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)、2-(1H 4-咪唑基)乙酸鈉(0.0026g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.0034g，0.000175mol)、N，N-二異丙基乙胺(0.033g，0.00026mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.019g，0.00014mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(6mL)中的混合物，室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-(1H-4-咪唑基)-1-乙酮(0.018g，0.00004mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.90(br，1H)，8.27(s，1H)，7.71(d，2H)，7.53(s，1H)，7.42(m，2H)，7.19(m，5H)，6.92(br，1H)，5.73(m，1H)，4.74(m，1H)，4.61(m，1H)，4.42(m，2H)，3.42(s，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.0min。
MSMH+467
實施例2951-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-3-(1H-4-咪唑基)-1-丙酮將1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.10g，0.00028mol)、3-(1H-4-咪唑基)丙酸(0.050g，0.00035mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.0068g，0.00035mol)、N，N-二異丙基乙胺(0.068g，0.00053mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.038g，0.00028mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(13mL)的混合物，室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(5mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-3-(1H-4-咪唑基)-1-丙酮(0.040g，0.00008mol)。
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.96(s，1H)，7.77(br，1H)，7.64(d，2H)，7.40(m，2H)，7.17(m，3H)，7.08(m，2H)，6.90(br，1H)，5.78(m，1H)，5.56(br，2H)，4.76(m，1H)，4.57(m，3H)，2.98(m，2H)，2.55(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.0min。
MSMH+481總方法向1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol，1當量)和碳酸鉀(0.039g，0.00028mol，2當量)在無水N，N-二甲基甲醯胺中的混合物中，室溫下加入氯乙醯基氯(0.031g，0.00028mol，2當量)。將此混合物攪拌10分鐘，之後加入此胺(0.0014mol，10當量)。根據所用的胺，將此混合物室溫下攪拌-個半小時至兩天。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到相應的乙醯胺。
實施例2961-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[(2-羥基乙基)氨基]-1-乙酮a)胺2-氨基-1-乙醇1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.15(m，3H)，7.08(m，2H)，5.83(m，1H)，5.57(br，2H)，4.82(m，1H)，4.65(m，3H)，3.71(m，2H)，3.45(m，2H)，2.92(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.7min。
MSMH+460實施例2971-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[(2-甲氧基乙基)氨基]-1-乙酮b)胺2-甲氧基-1-乙胺1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.83(m，1H)，5.54(br，2H)，4.81(m，1H)，4.64(m，2H)，4.56(m，1H)，3.55(t，2H)，3.41(s，2H)，3.37(s，3H)，2.88(t，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.0min。MSMH+474實施例2981-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[(3-羥基丙基)氨基]-1-乙酮
c)胺3-氨基-1-丙醇1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.86(m，1H)，5.54(br，2H)，4.81(m，1H)，4.64(m，3H)，3.87(m，2H)，3.48(m，2H)，3.01(m，2H)，1.83(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.7min。
MSMH+474實施例2991-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[(2，3-二羥基丙基)氨基]-1-乙酮d)胺3-氨基-1，2-丙烷二醇1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.72(d，2H)，7.46(m，2H)，7.16(m，5H)，5.73(m，1H)，4.67(m，1H)，4.59(m，2H)，4.37(m，2H)，3.53(m，1H)，3.30(m，1H)，3.22(m，2H)，2.59(m，1H)，2.45(m，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，ImL/min)Rt8.6min。
MSMH+490實施例3001-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[(四氫-2-呋喃基甲基)氨基]-1-乙酮e)胺四氫-2-呋喃基甲胺1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.81(m，1H)，5.54(br，2H)，4.80(m，1H)，4.64(m，2H)，4.57(m，1H)，4.05(m，1H)，3.87(m，1H)，3.76(m，1H)，3.42(m，2H)，2.83(m，1H)，2.74(m，1H)，2.00(m，1H)，1.89(m，2H)，1.57(m，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，ImL/min)Rt9.3min。
MSMH+500實施例301f)胺2-哌啶子基-1-乙胺1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[(2-哌啶子基乙基)氨基]-1-乙酮1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.70(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，5H)，5.73(m，1H)，4.60(m，2H)，4.36(m，2H)，3.24(d，2H)，2.60(m，2H)，2.36(m，6H)，1.49(m，4H)，1.36(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.4min。
MSMH+527實施例302g)胺N，N，N-三甲基-1，2-乙二胺1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[[2-(二甲基氨基)乙基](甲基)氨基]-1-乙酮1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.70(d，2H)，7.44(m，2H)，7.17(m，5H)，5.75(m，1H)，4.70(m，2H)，4.40(m，2H)，3.22(d，2H)，2.75(br，2H)，2.61(m，2H)，2.47(s，6H)，2.29(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.4min。
MSMH+501實施例303h)胺N，N-二甲基-1，2-乙二胺
1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-{[2-(二甲基氨基)乙基]氨基}-1-乙酮乙酸鹽1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.33(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，3H)，7.11(m，2H)，5.81(br，3H)，4.81(m，1H)，4.59(m，3H)，3.38(s，2H)，2.89(t，2H)，2.68(t，2H)，2.43(s，6H)，2.05(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.0min。
MSMH+487實施例304i)胺N-甲基-N-(1-甲基-4-哌啶基)胺1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[甲基(1-甲基-4-哌啶基)氨基]-1-乙酮1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.76(m，1H)，5.58(br，2H)，4.87(m，1H)，4.79(m，1H)，4.62(m，1H)，4.55(m，1H)，3.27(m，2H)，2.97(br，2H)，2.51(br，1H)，2.35(s，3H)，2.31(s，3H)，2.04(br，2H)，1.79(br，2H)，1.65(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.1min。
MSMH+527實施例305j)胺2-(4-嗎啉基)-1-乙胺1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[(2-(4-嗎啉基)乙基)氨基]-1-乙酮1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.40(m，2H)，7.19(m，3H)，7.09(m，2H)，5.86(m，1H)，5.50(br，2H)，4.82(m，1H)，4.67(m，3H)，3.77(m，4H)，3.50(s，2H)，2.92(t，2H)，2.66(t，2H)，2.57(br，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.1min。
MSMH+529實施例306k)胺3-(4-嗎啉基)-1-丙胺1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[(3-(4-嗎啉基)丙基)氨基]-1-乙酮1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.68(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.85(m，1H)，5.54(br，2H)，4.81(m，1H)，4.64(m，3H)，3.74(m，4H)，3.40(s，2H)，2.83(br，2H)，2.52(br，6H)，1.80(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.9min。
MSMH+543實施例3071)胺3-(1H-1-咪唑基)-1-丙胺1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-{[3-(1H-1-咪唑基)丙基]氨基}-1-乙酮1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.37(s，1H)，7.65(d，2H)，7.40(m，3H)，7.15(m，3H)，7.08(m，3H)，6.93(s，1H)，5.82(m，1H)，5.62(br，2H)，4.75(m，1H)，4.62(m，3H)，4.07(t，2H)，3.27(s，2H)，2.58(t，2H)，1.97(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨在10分鐘內，1mL/min)Rt8.7min。
MSMH+524實施例308m)胺1-(3-氨基丙基)-2-吡咯烷酮1-{3-[(2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-氧代乙基)氨基]丙基}-2-吡咯烷酮
1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.82(m，1H)，5.54(br，2H)，4.81(m，1H)，4.64(m，3H)，3.42(m，6H)，2.79(t，2H)，2.42(t，2H)，2.07(m，2H)，1.86(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.0min。
MSMH+541實施例309n)胺4-哌啶醇1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-(4-羥基哌啶子基)-1-乙酮1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.38(s，1H)，7.67(d，2H)，7.38(m，2H)，7.18(m，3H)，7.09(m，2H)，5.77(m，1H)，5.57(br，2H)，4.90(m，1H)，4.78(m，1H)，4.63(m，1H)，4.56(m，1H)，3.73(br，1H)，3.18(s，2H)，2.91(br，2H)，2.38(br，2H)，1.95(br，2H)，1.62(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.9min。
MSMH+500實施例310o)胺4-哌啶基甲醇1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[4-(羥基甲基)哌啶子基]-1-乙酮1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，3H)，7.10(m，2H)，5.78(m，1H)，5.64(br，2H)，4.89(m，1H)，4.81(m，1H)，4.62(m，1H)，4.55(m，1H)，3.49(m，2H)，3.13(s，2H)，2.97(m，2H)，2.10(m，2H)，1.74(m，2H)，1.49(br，1H)，1.30(m，2H)。
RP-HPLC(De1ta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.0min。
MSMH+514實施例311p)胺1-(2-甲氧基乙基)哌嗪1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[4-(2-甲氧基乙基)哌啶子基]-1-乙酮1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.71(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，5H)，5.69(m，1H)，4.73(m，2H)，4.38(m，2H)，3.39(t，2H)，3.30(s，2H)，3.21(s，3H)，3.05(m，2H)，2.43(br，8H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.0min。
MSMH+543實施例312q)胺嗎啉1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-(4-嗎啉基)-1-乙酮1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.70(d，2H)，7.42(m，2H)，7.18(m，5H)，5.70(m，1H)，4.73(m，2H)，4.40(m，2H)，3.57(m，4H)，3.08(m，2H)，2.44(m，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.6min。
MSMH+486實施例313r)胺1-甲基哌嗪1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-1-乙酮1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.70(d，2H)，7.44(m，2H)，7.16(m，5H)，5.70(m，1H)，4.70(m，2H)，4.35(m，2H)，3.29(s，2H)，3.06(m，2H)，2.45(br，6H)，2.16(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.0min。
MSMH+499實施例314s)胺4-哌啶子基哌啶1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-[4-(哌啶-1-基)哌啶子基]-1-乙酮1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.70(d，2H)，7.44(m，2H)，7.18(m，5H)，5.70(m，1H)，4.73(m，2H)，4.40(m，1H)，4.30(m，1H)，2.88(m，4H)，2.38(br，4H)，2.13(m，1H)，2.00(m，2H)，1.61(br，2H)，1.43(br，6H)，1.34(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.2min。
MSMH+567實施例315t)胺1H-咪唑1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-(1H-1-咪唑基)-1-乙酮1H NMR(氯仿-d，400MHz)δ8.31(s，1H)，7.87(br，1H)，7.65(d，2H)，7.41(m，2H)，7.18(m，4H)，7.10(m，3H)，5.90(br，2H)，5.80(m，1H)，4.82(m，1H)，4.72(m，3H)，4.59(m，1H)，4.47(m，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.2min。
MSMH+467實施例3161-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-(甲基氨基)-1-乙酮乙酸鹽將1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)、2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]乙酸(0.0033g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.0034g，0.000175mol)、N，N′-二異丙基乙胺(0.033g，0.00026mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.019g，0.00014mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(6mL)中的混合物，室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N-(2-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-氧代乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁基酯。將此固體溶解於二氯甲烷(2mL)並在0℃下將2 5％三氟乙酸的二氯甲烷溶液(4mL)緩慢加入到該反應中。將該反應混合物室溫下攪拌5小時。減壓除去溶劑。在0℃下加入5N氫氧化鈉水溶液至pH為11。水相用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合併的有機萃取物用水(1×60mL)和鹽水(1×60mL)洗滌並用硫酸鈉乾燥。減壓除去溶劑得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-(二甲基氨基)-1-乙酮乙酸鹽(0.022g，0.00004mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.69(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，5H)，5.75(m，1H)，4.70(m，1H)，4.60(m，1H)，4.40(m，1H)，4.35(m，1H)，3.18(s，2H)，2.25(s，3H)，1.90(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，I mL/min)Rt8.9min。
MSMH+430實施例3171-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-(二甲基氨基)-1-乙酮乙酸鹽將1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)、2-(二甲基氨基)乙酸(0.0018g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.0034g，0.000175mol)、N，N′-二異丙基乙胺(0.033g，0.00026mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.019g，0.00014mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(6mL)中的混合物，室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-2-(二甲基氨基)-1-乙酮乙酸鹽(0.022g，0.00004mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.69(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，5H)，5.69(m，1H)，4.70(m，2H)，4.40(m，2H)，2.97(m，2H)，2.20(s，6H)，1.89(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.6min。
MSMH+444實施例3181-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-3-(二乙基氨基)-1-丙酮將1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)、3-(二乙基氨基)丙酸鹽酸鹽(0.0032g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.0034g，0.000175mol)、N，N′-二異丙基乙胺(0.068g，0.00053mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.019g，0.00014mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(6mL)中的混合物，室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-3-(二乙基氨基)-1-丙酮(0.025g，0.00005mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(m，2H)，7.14(m，5H)，5.70(m，1H)，4.67(m，2H)，4.37(m，2H)，2.66(m，2H)，2.45(m，4H)，2.21(m，2H)，0.95(m，6H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨在10分鐘內，1mL/min)Rt9.3min。
MSMH+486實施例3191-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-(甲基氨基)-1-乙酮乙酸鹽將3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.054g，0.00014mol)、2-[(叔丁氧基羰基)(甲基)氨基]乙酸(0.0033g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.0034g，0.000175mol)、N，N′-二異丙基乙胺(0.033g，0.00026mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.019g，0.00014mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(6mL)中的混合物，室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N-(2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-氧代乙基)-N-甲基氨基甲酸叔丁基酯。將此固體溶解於二氯甲烷(2mL)並在0℃下將存在於二氯甲烷(4mL)的25％三氟乙酸緩慢加入到該反應。將該反應混合物室溫下攪拌5小時。減壓除去溶劑。在0℃下向此殘餘物中加入5N氫氧化鈉水溶液至pH為11。水相用二氯甲烷(2×30mL)萃取。合併的有機萃取物用水(1×60mL)和鹽水(1×60mL)洗滌並用硫酸鈉乾燥。減壓除去溶劑得到1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-(甲基氨基)-1-乙酮乙酸鹽(0.010g，0.00002mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.67(d，2H)，7.45(m，2H)，7.13(m，5H)，4.94(br，1H)，4.53(br，1H)，3.99(br，1H)，3.36(m，2H)，3.21(br，1H)，2.85(br 1H)，2.26(s，3H)，2.10(br，1H)，1.96(br，3H)，1.85(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.1min。
MSMH+458實施例320 1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-(二甲基氨基)-1-乙酮將3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.054g，0.00014mol)、2-(二甲基氨基)乙酸(0.0018g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.0034g，0.000175mol)、N，N′-二異丙基乙胺(0.033g，0.00026mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.019g，0.00014mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(6mL)中的混合物，室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-(二甲基氨基)-1-乙酮(0.031g，0.00007mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，5H)，4.97(br，1H)，4.50(br，1H)，4.22(br，1H)，3.25(br，1H)，3.12(m，2H)，2.83(br，1H)，2.21(s，6H)，2.16(br，1H)，1.90(br，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.3min。
MSMH+472實施例3211-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-(二乙基氨基)-1-丙酮乙酸鹽將3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.054g，0.00014mol)、3-(二乙基氨基)丙酸鹽酸鹽(0.0032g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.0034g，0.000175mol)、N，N′二異丙基乙胺(0.068g，0.00053mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.019g，0.00014mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(6mL)中的混合物，室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-(二乙基氨基)-1-丙酮乙酸鹽(0.038g，0.00006mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.15(m，5H)，4.97(br，1H)，4.52(br，1H)，4.03(br，1H)，3.27(br，1H)，2.80(br，1H)，2.66(m，2H)，2.49(m，8H)，2.11(br，1H)，1.95(br，3H)，1.87(s，3H)，0.93(m，6H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.7min。
MSMH+514總方法向3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00013mol，1當量)和碳酸鉀(0.036g，0.00026mol，2當量)在無水N，N-二甲基甲醯胺(3mL)的混合物中，室溫下加入氯乙醯基氯(0.028g，0.00026mol，2當量)。此混合物攪拌10分鐘，之後加入胺(0.0013mol，10當量)。將此混合物攪拌室溫下3小時。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到相應的乙醯胺。
實施例322a)胺嗎啉
1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}2-(4-嗎啉基)-1-乙酮乙酸鹽1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.65(d，2H)，7.44(m，2H)，7.16(m，5H)，4.99(m，1H)，4.47(br，1H)，4.19(br，1H)，3.58(m，4H)，3.25(m，2H)，3.11(m，1H)，2.83(br，1H)，2.43(m，4H)，2.25(br，1H)，1.99(br，3H)，1.89(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.7min。
MSMH+514實施例323b)胺1-甲基哌嗪1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-(4-甲基哌嗪-1-基)-1-乙酮乙酸鹽1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.65(d，2H)，7.44(m，2H)，7.16(m，5H)，4.99(m，1H)，4.47(br，1H)，4.19(br，1H)，3.29(m，2H)，3.22(m，2H)，3.05(m，1H)，2.80(br，1H)，2.33(br，6H)，2.22(br，1H)，2.13(s，3H)，1.94(br，3H)，1.89(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.3min。
MSMH+527實施例324和實施例325順式和反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸a)順式和反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸叔丁基酯將用酸洗滌的鋅粉(0.350g，0.00535mol)和氯化亞銅(0.053g，0.000535mol)的無水四氫呋喃(10mL)懸浮液加熱回流30分鐘。中斷加熱並立即加入部分(1mL)的2-溴乙酸叔丁基酯(0.261g，0.00134mol)的四氫呋喃(10mL)溶液。將此混合物攪拌5分鐘，然後滴加剩餘的混合物。將此混合物加熱回流30分鐘。將此混合物冷卻至室溫，並在5分鐘內滴加4-(4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-環己酮(0.200g，0.00053mol)的無水四氫呋喃(5mL)溶液。將此混合物攪拌室溫下4小時。過濾除去未反應的鋅，用乙醚(3×5mL)洗滌。此濾液用水(3×5mL)和鹽水(10mL)洗滌。將此有機層用硫酸鎂乾燥，並真空下除去溶劑。粗品物質1∶1的順式反式比例。此異構體在矽膠上通過急驟色譜進行分離，用二氯甲烷/甲醇(98∶2)洗脫。真空下除去溶劑得到低極性的反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸叔丁基酯，為白色固體(0.092g，0.00018mol)和高極性的順式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸叔丁基酯，為白色固體(0.049g，0.000096mol)。
順式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸叔丁基酯1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.66(d，2H)，7.43(t，2H)，7.11-7.20(m，5H)，4.70-4.84(m，1H)，2.36(s，2H)，1.89-2.12(m，4H)，1.51-1.67(m，2H)，1.43(s，9H)，1.37-1.42(m，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt19.31min.；MSMH+516。
反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸叔丁基酯1H NMR(DMSO-d6400MHz)δ8.23(s，1H)，7.66(d，2H)，7.43(t，2H)，7.11-7.20(m，5H)，4.45-4.61(m，1H)，2.36(s，2H)，1.78-1.85(m，2H)，1.64-1.71(m，2H)，1.43(s，9H)，1.36-1.45(m，4H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，I mL/min)Rt19.64min.；MSMH+516。
順式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1羥基環己基}乙酸順式2-(4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸叔丁基酯(0.092g，0.000178mol)與20％三氟乙酸的二氯甲烷(10mL)溶液在室溫、氮氣氛下反應45分鐘。真空下除去溶劑並將此殘餘物溶解於乙酸乙酯(25mL)並用水(3×10mL)洗滌。此溶液用硫酸鎂乾燥並真空下除去溶劑。殘餘物懸浮於水(25mL)並凍幹得到順式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸，為白色粉末(0.078g，0.000170mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.32(s，1H)，7.66(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，4.62-4.67(m，1H)，2.39(s，2H)，2.27-2.43(m，2H)，1.55-1.90(m，6H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.65min。
MSMH+460。
反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸叔丁基酯(0.049g，0.000096mol)與20％三氟乙酸二氯甲烷(10mL)溶液在室溫在氮氣氛下反應45分鐘。真空下除去溶劑並將此殘餘物溶解於乙酸乙酯(25mL)，並用水(3×10mL)洗滌。此溶液用硫酸鎂乾燥，並真空下除去溶劑。殘餘物懸浮於水(25mL)並凍幹，得到反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸，為白色粉末(0.038g，0.000083mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.36(s，1H)，7.67(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.22(m，5H)，4.72-4.79(m，1H)，1.99(s，2H)，1.91-2.09(m，6H)，1.61-1.65(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt13.46min。
MSMH+460。
實施例326反式1-{3-[(苄基氧基)甲基]環丁基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.69(d，2H)，7.44(t，2H)，7.37-7.39(m，4H)，7.29-7.31(m，1H)，7.11-7.21(m，5H)，5.42-5.47(m，1H)，4.57(s，1H)，3.63(d，2H)，2.76-2.81(m，2H)，2.60-2.70(m，1H)，2.28-2.34(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt21.92min。
MSMH+478。
實施例327[3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-(羥基甲基)環丁基]甲醇a)3-[(甲基磺醯基)氧基]-1，1-環丁烷二甲酸二乙酯將3-羥基-1，1-環丁烷二甲酸二乙酯(0.268g，0.00116mol)的吡啶(7mL)溶液冷卻至0℃。滴加甲磺醯氯(0.11mL，0.160g，0.00140mol)，保持溫度低於2℃。將此混合物攪拌4小時，然後倒入冰水(20mL)中並用乙醚(2×10mL)除去。合併的有機層用水(3×10mL)和鹽水(10mL)洗滌。將此有機層用硫酸鎂乾燥並真空下除去溶劑得到3-[(甲基磺醯基)氧基]-1，1-環丁烷二甲酸二乙酯(0.302g，0.00102mol)，為黃色油狀物1H NMR(CDCl3400MHz)5.08-5.11(m，1H)，4.23(q，4H)，3.01(s，3H)，2.98-3.03(m，2H)，2.81-2.86(m，2H)，1.27(t，6H)。
b)3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1，1-環丁烷二甲酸二乙酯3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.129g，0.00042mmol)的N，N-二甲基甲醯胺(5mL)溶液與3-[(甲基磺醯基)氧基]-1，1-環丁烷二甲酸二乙酯(0.150g，0.00051mmol)和碳酸銫(0.166g，0.00051mmol)在70℃下反應5天。將該反應混合物倒入水中(20mL)並用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合併的有機層用水(2×10mL)和鹽水(10mL)洗滌。將此有機層用硫酸鎂乾燥並真空下除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(98∶2)洗脫。真空下除去溶劑得到3-[4-氨基-3-(4-苯氧基-苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1，1-環丁烷二甲酸二乙酯(0.060g，0.00012mol)，為黃褐色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.67(d，2H)，7.44(t，2H)，7.12-7.21(m，5H)，5.38-5.42(m，1H)，4.16-4.28(m，4H)，3.14-3.17(m，2H)，2.96-3.00(m，2H)，1.17-1.28(m，6H)。
c)[3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-(羥基甲基)環丁基]甲醇向3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1，1-環丁烷二甲酸二乙酯(0.045g，0.000089mol)的四氫呋喃(10mL)溶液中，加入氫化鋰鋁(0.010g，0.000270mol)。室溫下將該反應混合物攪拌6小時，之後加入水(1.0mL)。將此混合物過濾通過Celite521墊過濾。真空下除去此濾液中的溶劑。殘餘物在水(15mL)和乙酸乙酯(15mL)之間分配。水層用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。合併的有機層用硫酸鎂乾燥並真空下除去溶劑。殘餘物通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300A，25cm；5分鐘內40％恆溶劑成分，然後在30分鐘內40％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，21ml/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到[3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-(羥基甲基)環丁基]甲醇，為白色固體(0.007g，0.000017mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.22(s，1H)，7.68(d，2H)，7.44(t，2H)，7.11-7.20(m，5H)，5.28-5.34(m，1H)，4.76(t，1H)，4.58(t，1H)，3.55(d，2H)3.47(d，2H)，2.46-2.55(m，2H)，2.24-2.31(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.81min。
MSMH+418。
實施例328-334合成芳基烷基順-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺類物質的總方法用上述合成芳基烷基順-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺類物質的方法進行合成這些化合物。 實施例335N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-5-氯-2-噻吩磺醯胺馬來酸鹽用上述順和反-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的方法合成此化合物，為馬來酸鹽HPLC-RT12.39min，(流速1mL/min，λ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝606.1。
實施例3361-(4-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯並噁唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}哌啶子基)-2-(二甲基氨基)-1-乙酮a).4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯4-氧代-1-哌啶甲酸叔丁基酯(20g，100.4mmol)溶解於甲醇(250mL)，然後冷卻至0℃，並在10分鐘內加入硼氫化鈉(3.8g，100.4mmol)。將該反應混合物由0℃升溫至室溫。4小時後，將該反應減壓濃縮並將剩餘的漿狀物溶解於3∶1二氯甲烷/異丙醇(400mL)。有機層用1N氫氧化鈉水溶液(200mL)洗滌。水層再用3∶1二氯甲烷/異丙醇(3×150mL)萃取。將此有機層用鹽水(400mL)洗滌，然後用無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮得到4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯，為淡黃色漿狀物(20g，100.4mmol)。
1H NMR(d6-DMSO)δ1.21-1.28(m，2H)，1.38(s，9H)，1.65-1.69(m，2H)，2.94-2.96(m，2H)，3.59-3.68(m，3H)，4.68(d，1H)。
b).4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯將3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(17.3g，66.33mmol)懸浮於四氫呋喃(800mL)，並加入4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(20g，99.5mmol)的四氫呋喃(300mL)溶液和三苯基膦(34.8g，132.66mmol)。將該反應混合物冷卻至0℃並滴加偶氮二甲酸二乙酯(23.1g，132.66mmol)。室溫下放置2小時後，該反應減壓濃縮得到粗品4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯，為桔黃色油狀物(69.44g)。HPLC-RT14.29min.，19％，(流速1mL/min λ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)。
c).3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二鹽酸鹽將粗品4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1哌啶甲酸叔丁基酯(69.4g，156.30mmol)溶解於丙酮(900mL)，並緩慢滴加6N鹽酸(300mL)。然後在45℃下加熱該反應，得到沉澱。1.5小時後，通過真空過濾收集沉澱，用最小量的丙酮洗滌並凍幹，得到3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二鹽酸鹽，為黃色固體(16.61g，39.8mmol)。
HPLC-RT6.16min，(流速1mL/min λ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300A，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝345.0。
d).1-[4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶子基]-2-(二甲基氨基)-1-乙酮將3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二鹽酸鹽(3g，7.19mmol)懸浮於二氯甲烷(350mL)，然後在4天內加入N，N-二甲基甘氨酸(1.02g，9.88mmol)、1-羥基-7-氮雜苯並三唑(1.08g，7.91mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(1.89g，9.89mmol)及N-乙基-N-異丙基胺(5.06g，39.2mmol)。該反應用二氯甲烷稀釋(300mL)，再用水(150mL)和鹽水(150mL)洗滌。將此有機層用無水硫酸鈉乾燥並減壓濃縮得到1-[4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶子基]-2-(二甲基氨基)-1-乙酮，為黃褐色固體(2.74g，6.39mmol)。HPLC-RT7.40min，(流速1mL/minλ＝254nm梯度在20分鐘內5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝430.3。
e).1-(4-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯並噁唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}哌啶子基)-2-(二甲基氨基)-1-乙酮將1-[4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)哌啶子基]-2-(二甲基氨基)-1-乙酮(100mg，0.233mmol)溶解於乙二醇二甲基醚(10mL)和水(1.5mL)。加入N-(1，3-苯並噁唑-2-基)-N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(103mg，0.291mmol)、四(三苯基膦)鈀(13mg，0.051mmol)和碳酸鈉(62mg，0.583mmol)並將該反應在80℃下加熱24小時。減壓濃縮該反應。剩餘的殘餘物在二氯甲烷(100mL)和最小量的水之間分配。將有機層減壓濃縮並用乙醚(25mL)研磨，得到黃色-棕色固體(172mg)。通過RP-HPLC純化(Waters PrepLC 4000，流速10mL/min.，λ＝254nm梯度15％至35％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度，在40分鐘內；Deltapak C18，300，15μm，40×100mm柱)得到1-(4-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯並噁唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}哌啶子基)-2-(二甲基氨基)-1-乙酮，為米白色固體(64mg，0.121mmol)。HPLC-RT7.27min，(流速1mL/min λ＝254nm梯度5％至95％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度，在20分鐘內；Waters Symmetry Shield C18，3.5μm，50×2.1mm柱)；m/z(MH+)＝530.2。
實施例3371-(4-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯並噻唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}哌啶子基)-2-(二甲基氨基)-1-乙酮HPLC-RT10.09min，(流速1mL/min λ＝254nm梯度5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度，在20分鐘內；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝546.2。
實施例338-364a)烷基化的典型方法將氫化鈉(60％，0.138g，3.45mmol)加入到3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.750g，2.87mmol)的DMF(9mL)懸浮液中，並將此混合物室溫下攪拌1小時，直到獲得均勻的溶液。加入烷基溴(4.03mmol)，並將此混合物室溫下在氮氣氛下攪拌14小時。減壓下除去溶劑並將所得固體依次用水(25mL)和乙醚/石油醚(4∶1，50mL)研磨得到產物。
b)Suzuki偶聯的典型方法將芳基碘(2.28mmol)、N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(1.08g，3.19mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.105g，0.091mmol)、碳酸氫鈉(0.478g，5.69mmol)在N，N-二甲基甲醯胺(12mL)和水(2mL)中的懸浮液，在90℃下在氮氣氛下加熱14小時。減壓下除去溶劑，並將此殘餘物在飽和氯化鈉(50mL)和乙酸乙酯(30mL)之間分配。分離水層並再用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓濃縮。通過急驟色譜在矽膠上純化，用乙酸乙酯/庚烷(9∶1)作為流動相洗脫，得到該被保護的苯胺產物。
c)脫保護的典型方法向裝有氯化氫的二噁烷溶液(4M，6mL)和乙醇(6mL)的50mL燒瓶中，加入該被保護的苯胺(1.05mmol)。將空氣冷凝器固定在該燒瓶上，並將此混合物在50℃氮氣氛下攪拌。16小時後，該反應混合物冷卻至室溫，並減壓除去溶劑。殘餘物在鹽酸(0.5M，30mL)和乙醚(20mL)之間分配。分離有機層並傾析掉。將水層用飽和碳酸氫鈉水溶液(30mL)鹼化，並將所得混合物用乙酸乙酯(3×30mL)萃取。合併的乙酸乙酯萃取物用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到該苯胺產物。
d)磺醯基化的典型方法將該苯胺(1.0mmol)加入到2，3-二氯苯磺醯基氯(0.263g，1.07mmol)和4-二甲基氨基吡啶(0.005g，0.041mmol)的吡啶(5mL)溶液中，並將所得溶液在氮氣氛下攪拌3天。加入甲醇/二氯甲烷(1∶19，100mL)並將所得混合物用半飽和的碳酸氫鈉水溶液(3×10mL)萃取。有機層用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到該磺醯胺產物。
e)酯交換的典型方法將此乙基酯(2.76mmol)加入到三乙胺(3.8mL，28mmol)和甲醇(30mL)的溶液中。將回流冷凝器安裝到該反應器上，並將此反應混合物在75℃下在氮氣氛下加熱。24小時後，將反應冷卻至室溫，減壓下除去溶劑得到該甲基酯產物。
f)酯交換的另一種方法將乙基酯(0.279mmol)和甲醇鈉(0.015g，0.279mmol)的甲醇(2mL)溶液在密封的試管中在75℃下加熱2小時。將該反應冷卻至室溫。加入甲醇/二氯甲烷(1∶19，100mL)，並將所得混合物用半飽和碳酸氫鈉水溶液(3×10mL)萃取。將此有機層用硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到此甲基酯產物。
g)醯胺形成的典型方法在可再密封的Schlenk燒瓶中，將該酯(0.056mmol)懸浮於某種胺溶劑(1mL)中。用聚四氟乙烯螺旋蓋密封此燒瓶，並在80℃下加熱2天。將該反應冷卻至室溫得到醯胺產物。
h)伯醯胺形成的典型方法在可密封的Schlenk燒瓶中裝入該甲基酯(0.086mmol)。加入用氨(1mL)飽和的甲醇溶液，並密封此Schlenk燒瓶，並在90℃下加熱24小時。將該反應冷卻至室溫，並減壓除去溶劑得到此伯醯胺產物。
i)形成脲的典型方法將苯胺(0.152mmol)溶解於吡啶(1mL)，並將此溶液冷卻至-20℃。加入間甲苯基異氰酸酯(0.143mmol)，並讓此溶液自然升溫至室溫。6小時後，減壓濃縮產物得到此脲產物。
實施例3382-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯按順序進行烷基化(用溴乙酸乙酯作為此烷基溴)、Suzuki偶聯、脫保護和磺醯基化的典型方法。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μHypersilHS C18，250×21mm柱，Rt12.4-13.9min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯，為白色固體(0.011g，0.020mmol)RP-HP(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)R 9.78min。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.84(s，1H)，8.25(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.43(m，3H)，5.21(s，2H)，4.15(qt，2H)，1.20(t，3H)；MSMH+539。
實施例339N1-{4-[4-氨基-1-(2-(4-嗎啉基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-2，3-二氯-1-苯磺醯胺用醯胺形成的典型方法用嗎啉處理2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯。通過製備HPLC純化(25至100％CH3CN，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt9.3-9.8min)得到N1-{4-[4-氨基-1-(2-(4-嗎啉基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-2，3-二氯-1-苯磺醯胺，為白色固體(0.005g，0.009mmol)RP-HP(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用HypersilHS C18，250×4.6mm柱)Rt8.22min。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.82(s，1H)，8.21(s，1H)，7.96(d，1H)，7.94(m，1H)，7.53(t，1H)，7.39(m，3H)，6.97(br，2H)，5.32(s，2H)，3.5(m，8H)；MSMH+580。
實施例340N1-(4-{4-氨基-1-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-2，3-二氯-1-苯磺醯胺用醯胺形成的典型方法，用1-甲基哌嗪處理2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯。通過製備HPLC純化(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt6.4-7.0min)得到N1-(4-{4-氨基-1-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-2，3-二氯-1-苯磺醯胺，為白色固體(0.005g，0.009mmol)RP-HP(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt6.83min。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(s，1H)，7.96(d，1H)，7.88(d，1H)，7.50(t，1H)，7.36(m，3H)，5.31(s，2H)，3.45(m，4H)，2.50(m，4H)，2.30(s，3H)，MSMH+593。
實施例341N1-[(1R，2S)-2-羥基-1-甲基-2-苯基乙基]-N1-甲基-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺將(+)-偽麻黃鹼(0.037g，0.224mmol)的乙二醇二甲基醚(0.75mL)的溶液用正丁基鋰的溶液(2.5M在己烷中，0.060mL，0.150mmol)處理。20分鐘後，通過套管將此溶液轉移至2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(0.040g，0.074mmol)的N，N-二甲基甲醯胺(0.75mL)溶液中。所得溶液在50℃下攪拌15小時。然後冷卻至室溫並在甲醇/二氯甲烷(1∶9，50mL)和水(15mL)之間分配。分離有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓濃縮。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HSC18，250×21mm柱，Rt11.88-12.65min)得到N1-[(1R，2S)-2-羥基-1-甲基-2-苯基乙基]-N1-甲基-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺，為米白色固體(0.010g，0.015mmol)RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用HypersilHS C18，250×4.6mm柱)Rt9.63min；MS(MH)+658。
實施例342N1-[(1S，2S)-2-羥基-1-甲基-2-苯基乙基]-N1-甲基-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺用與上述類似的方法，將(+)-麻黃鹼鹽酸鹽(0.061g，0.302mmol)和2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(0.054g，0.10mmol)混合。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt11.4-11.9min)得到N1-[(1S，2S)-2-羥基-1-甲基-2-苯基乙基]-N1-甲基-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺，為米白色固體(0.010g，0.015mmol)RP-HPLC(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸銨水溶液在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt9.36min；MS(M-H)-656。
實施例343N1-[4-(4-氨基-1-{2-[(2S)-2-(羥基甲基)四氫-1H-1-吡咯基]-2-氧代乙基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-2，3-二氯-1-苯磺醯胺用與上述類似的方法，將(R)-吡咯烷甲醇(0.038mL，0.385mmol)和2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(0.060g，0.111mmol)混合。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt8.45-9.90min)得到N1-[4-(4-氨基-1-{2-[(2S)-2-(羥基甲基)四氫-1H-1-吡咯基]-2-氧代乙基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-2，3-二氯-1-苯磺醯胺，為米白色固體(0.024g，0.040mmol)RP-HPLC(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt8.05min；MS(M-H)-592。
實施例344N1-[4-(4-氨基-1-{2-[(2R)-2-(羥基甲基)四氫-1H-1-吡咯基]-2-氧代乙基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-2，3-二氯-1-苯磺醯胺用與上述類似的方法，將(S)-吡咯烷甲醇(0.038mL，0.385mmol)和2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(0.060g，0.111mmol)混合。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt8.15-9.70min)得到N1-[4-(4-氨基-1-{2-[(2R)-2-(羥基甲基)四氫-1H-1-吡咯基]-2-氧代乙基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基}-2，3-二氯-1-苯磺醯胺，為米白色固體(0.022g，0.037mmol)RP-HPLC(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt7.98min；MS(M-H)-592。
實施例3452-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯用酯交換的典型方法，2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯(1.49g，2.76mmol)轉變為相應的甲基酯。一部分粗品物質通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt11.0-12.3min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯，為白色固體(0.016g，0.030mmol)RP-HP(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt9.22min；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.84(s，1H)，8.25(s，1H)，7.96(m，2H)，7.60(m，1H)，7.56(m，3H)，5.23(s，2H)，3.68(s，3H)；MSMH+525。
實施例3462-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸在可再密封的Schlenk燒瓶中，將2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.030g，0.057mmol)溶解於甲醇/水(1∶1，1mL)。用聚四氟乙烯螺旋蓋密封此燒瓶，並在90℃下加熱。2天後，將此反應冷卻至室溫。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt6.3-6.7min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸，為白色固體(0.006g，0.030mmol)RP-HP(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt6.42min；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.13(s，1H)，7.97(d，1H)，7.62(d，1H)，7.36(t，1H)，7.19(m，3H)，7.15(d，1H)，4.59(s，2H)；MS(M-H)-509。
實施例347N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺醯胺形成的典型方法用於2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.035g，0.067mmol)與N，N-二甲基亞乙基二胺(1mL)的反應。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt6.85-7.45min)得到N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺，為米白色固體(0.008g，0.014mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.20(br，1H)，8.22(m，2H)，7.96(d，1H)，7.80(d，1H)，7.45(t，1H)，7.31(m，3H)，6.90(br，2H)，4.96(s，2H)，3.40(m，2H)，2.75(m，2H)，2.07(s，6H)；MS(M-H)-579。
實施例348N1-[2-(二乙基氨基)乙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺醯胺形成的典型方法用於2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.035g，0.067mmol)與N，N-二乙基亞乙基二胺(1mL)的反應。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt7.12-7.98min)得到N1-[2-(二乙基氨基)乙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺，為米白色固體(0.017g，0.028mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.22(s，1H)，8.12(br，1H)，7.96(d，1H)，7.78(d，1H)，7.44(t，1H)，7.31(m，3H)；6.95(br，2H)，4.96(s，2H)，3.35(m，2H)，2.82(m，2H)，2.50(m，4H)，1.05(t，6H)；MS(M-H)-607。
實施例3492-(二甲基氨基)乙基2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸酯醯胺形成的典型方法用於2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.035g，0.067mmol)與N，N-二甲基乙醇胺(1mL)的反應。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt7.50-8.07min)得到2-(二甲基氨基)乙基2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸酯，為米白色固體(0.008g，0.014mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.96(d，1H)，7.83(d，1H)，7.48(t，1H)，7.32(m，3H)，5.23(s，2H)，4.29(t，2H)，2.86(m，2H)，2.39(s，6H)；MS(M-H)-580。
實施例350
N1-[3-(二甲基氨基)丙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺醯胺形成的典型方法用於2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.025g，0.048mmol)與3-(二甲基氨基)丙基胺(1mL)的反應。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt6.7-7.3min)得到N1-[3(二甲基氨基)丙基]-2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺，為米白色粉末(0.015g，0.025mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(m，1H)，7.96(m，1H)，7.76(m，1H)，7.43(t，1H)，7.30(m，2H)，4.93(s，2H)，3.12(m，2H)，2.82(m，2H)，2.50(s，6H)，1.73(m，2H)；MS(M-H)-593。
實施例3512-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺伯醯胺形成的典型方法用來將2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸甲酯(0.045g，0.086mmol)轉變為相應的伯醯胺。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt6.9-8.5min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙醯胺，為米白色粉末(0.015g，0.029mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.83(br，2H)，8.84(br，1H)，7.93(s，1H)，7.82(s，1H)，7.80(s，1H)，7.62(s，1H)，7.50(m，2H)，7.36(m，1H)；3.87(s，2H)；MS(M-H)-508。
實施例3522-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯按順序進行烷基化(用溴乙酸乙酯作為此烷基溴)、Suzuki偶聯、脫保護和脲形成的典型方法。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HSC18，250×21mm柱，Rt12.1-13.5min)得到2-(4-氨基-3-{3氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-17吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯，為黃色粉末(0.015g，0.032mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(br，1H)，8.73(br，1H)，8.38(t，1H)，8.26(s，1H)，7.48(m，2H)，7.32(s，1H)，7.25(d，1H)，7.19(t，1H)，6.82(d，1H)，5.23(s，2H)，4.17(qt，2H)，2.30(s，3H)，1.21(t，3H)；MS(M-H)-462。
實施例353N-{4-[4-氨基-1-(2-(4-嗎啉基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基)-N″-(3-甲基苯基)脲用酯交換的典型方法，將2-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯(0.025g，0.054mmol)轉變為相應的甲基酯。將此產物溶解於嗎啉(1mL)並將此溶液在50℃下在密封的試管中加熱2天。將該反應冷卻至室溫，濃縮，並通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt9.3-10.2min)得到N-{4-[4-氨基-1-(2-(4-嗎啉基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-N″-(3-甲基苯基)脲，為黃色固體(0.009g，0.018mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(s，1H)，8.72(s，1H)，8.37(t，1H)，8.23(s，1H)，7.45(m，2H)，7.33(t，1H)，7.27(m，1H)，7.19(t，1H)，6.83(d，1H)，5.34(s，2H)，3.5(m，8H)，2.30(s，3H)；MS(M-H)-503。
實施例354N-(4-{4-氨基-1-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N″-(3-甲基苯基)脲使用與上述類似的方法，不同的是用1-甲基哌嗪(1mL)代替嗎啉作為溶劑，接著通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt7.1-7.8min)得到N-(4-{4-氨基-1-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N″-(3-甲基苯基)脲，為米白色固體(0.008g，0.015mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.07(s，1H)，8.72(s，1H)，8.37(t，1H)，8.22(s，1H)，7.45(m，2H)，7.32(s，1H)，7.25(m，1H)，7.19(t，1H)，6.90(br，2H)，6.83(d，1H)，5.33(s，2H)，3.39(m，4H)，2.40(m，4H)，2.30s，3H)；MS(M-H)-516。
實施例3552-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸乙酯按順序進行烷基化(用乙基2-溴丙酸酯作為此烷基溴)，Suzuki偶聯，脫保護和磺醯基化的典型方法。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt10.1-11.0min)得到2-[4氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸乙酯(0.016g，0.029mmol)，為灰色固體1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.84(br，1H)，8.24(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)；7.41(m，3H)，7.0(br，1H)，5.61(qt，1H)，4.10(qt，2H)，1.73(d，3H)，1.11(t，3H)；MS(M-H)-551。
實施例3562-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸甲酯(4032811)
用酯交換的典型方法將2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸乙酯(0.400g，0.723mmol)轉變為相應的甲基酯。通過製備HPLC純化部分此物質(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt12.4-12.9min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸甲酯(0.008g，0.015mmol)，為灰色固體1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.84(s，1H)，8.24(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.40(m，3H)，4.10(m，1H)，3.62(s，3H)，1.73(d，3H)；MS(MH)+539。
實施例3572-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丙醯胺用伯醯胺形成的典型方法將2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸甲酯(0.040g，0.074mmol)轉變為相應的伯醯胺。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt8.1-9.6min)得到2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丙醯胺(0.015g，0.029mmol)，為白色粉末1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.82(s，1H)，8.22(s，1H)，7.98(s，1H)，7.96(s，1H)，7.56(t，1H)，7.42(m，3H)，7.31(br，1H)，7.21(br，1H)，5.34(qt，1H)，1.71(d，3H)；MS(MH)+524。
實施例3582-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)丙酸乙酯按順序進行烷基化(用2-溴丙酸乙基酯作為此烷基溴)，Suzuki偶聯，脫保護和脲形成的典型方法。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt13.3-14.3min)得到2-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)丙酸乙酯，為白色固體(0.022g，0.046mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.06(s，1H)，8.73(s，1H)，8.37(t，1H)，8.25(s，1H)，7.46(m，2H)，7.32(s，1H)，7.25(m，1H)，7.19(t，1H)，6.83(d，1H)，5.63(qt，1H)，4.12(qt，2H)，2.30(s，3H)，1.76(d，3H)，1.15(t，3H)；MS(M-H)-476。
實施例3592-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)丙醯胺按順序進行烷基化(用2-溴丙酸乙基酯作為此烷基溴)、Suzuki偶聯、脫保護的典型方法、酯交換的另一種方法和伯醯胺形成和脲形成的典型方法。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt9.1-10.1min)得到2-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)丙醯胺，為灰色固體(0.010g，0.022mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.08(s，1H)，8.38(s，1H)，8.37(t，1H)，8.23(s，1H)，7.46(m，2H)，7.33(m，2H)，7.24(m，2H)，7.12(d，1H)，6.97(br，2H)，6.82(d，1H)，5.35(qt，1H)，2.30(s，3H)，1.75(d，3H)；MS(MH)+449。
實施例3604-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸乙酯按順序進行烷基化(用4-溴丁酸乙酯作為此烷基溴)，Suzuki偶聯，脫保護和磺醯基化的典型方法。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ HypersilHS C18，250×21mm柱，Rt12.8-13.8min)得到4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸乙酯(0.010g，0.018mmol)，為米白色固體1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.83(s，1H)，8.23(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.40(m，3H)，6.95(m，2H)，4.35(t，2H)，3.97(qt，2H)，2.30(t，2H)，2.08(m，2H)，1.12(t，3H)；MS(M-H)-565。
實施例3614-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸甲酯按順序進行烷基化(用4-溴丁酸乙酯作為此烷基溴)、Suzuki偶聯、脫保護的典型方法，酯交換的另一種方法和磺醯基化的典型方法。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt11.7-12.2min)得到4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸甲酯，為黃色固體(0.015g，0.027mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.84(br，1H)，8.23(s，1H)，7.95(m，2H)，7.52(m，1H)，7.40(m，3H)，4.35(t，2H)，3.52(s，3H)，2.32(t，2H)，2.09(m，2H)；MS(MH)+553。
實施例3624-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丁醯胺用伯醯胺形成的典型方法將4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸甲酯(0.026g，0.047mmol)轉變為相應的伯醯胺。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt8.0-9.0min)得到4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丁醯胺，為白色固體(0.007g，0.013mmol)1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.82(s，1H)，8.24(s，1H)，7.97(s，1H)，7.95(s，1H)，7.54(t，1H)，7.45(m，3H)，7.24(br，1H)，6.93(br，2H)，6.73(br，1H)，4.31(t，2H)，2.05(m，4H)；MS(M-H)-536。
實施例3634-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)丁酸乙酯(4032812)按順序進行烷基化(用4-溴丁酸乙酯作為此烷基溴)，Suzuki偶聯，脫保護和脲形成的典型方法。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HSC18，250×21mm柱，Rt12.6-13.6min)得到4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)丁酸乙酯，為米白色粉末(0.015g，0.030mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.06(s，1H)，8.72(s，1H)，8.36(t，1H)，8.24(s，1H)，7.47(m，2H)，7.32(s，1H)，7.22(m，1H)，7.19(t，1H)，6.82(d，1H)，4.37(t，3H)，3.99(qt，3H)，2.34(t，2H)，2.30(s，3H)，2.11(m，2H)，1.13(t，3H)；RP-HPLC(25至100％ CH3CN，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt10.00min。
實施例3644-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)丁醯胺按順序進行烷基化(用4-溴丁酸乙酯作為烷基溴)、Suzuki偶聯、脫保護的典型方法，酯交換的另一種方法和伯醯胺形成和脲形成按的典型方法。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt8.4-9.1min)得到4-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)丁醯胺，為白色固體(0.010g，0.022mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.08(s，1H)，8.73(s，1H)，8.38(t，1H)，8.25(s，1H)，7.47(m，2H)，7.32(s，1H)，7.25(m，2H)，7.19(m，1H)，6.83(d，1H)，6.75(s，1H)，4.34(t，2H)，2.30(s，3H)，2.05(m，4H)；MS(MH)+463。
實施例3652-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯並噁唑-2-基氨基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苄腈將3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.172g，0.66mmol)、氫化鈉(60％，0.030g，0.75mmol)、2，5-二氟苄腈(0.105g，0.75mmol)和N，N-二甲基甲醯胺(2.5mL)的懸浮液在100℃下加熱24小時。將該反應混合物冷卻至室溫並減壓濃縮。殘餘物在二氯甲烷(50mL)和水(10mL)之間分配。分離有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓濃縮。
將一部分此物質(0.045g，0.118mmol)和碳酸銫(0.115g，0.353mmol)懸浮於1-甲基哌嗪(1mL)，並將此化合物在110℃下在密封試管中加熱20小時。將該反應混合物冷卻至室溫並減壓濃縮。殘餘物用鹽酸(1M，10mL)酸化，並將水相用乙醚(10mL)萃取。傾析有機相，並將此水相用碳酸鈉水溶液(3M，10mL)鹼化。水相用二氯甲烷(3×15mL)萃取，合併的有機餾份用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓濃縮。
此物質進行Suzuki偶聯，用典型方法，不同的是用N-(1，3-苯並噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺代替N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt7.0-8.6min)得到2-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯並噁唑-2-基氨基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苄腈，為灰色固體(0.009g，0.017mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.93(s，1H)，8.29(s，1H)，7.98(d，2H)，7.78(d，2H)，7.73(d，1H)，7.52(m，3H)，7.44(m，1H)，7.26(t，1H)，7.17(t，1H)，3.24(m，4H)，2.45(m，4H)，2.28(s，3H)；MS(MH)+543。
實施例3662-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯並噻唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}丙酸乙酯按順序進行烷基化的典型方法(用2-溴丙酸乙酯作為此烷基溴)和Suzuki偶聯的典型方法(不同的是用N-(1，3-苯並噻唑-2-基)-N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺代替N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯)。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HSC18，250×21mm柱，Rt14.4-14.9min)得到2-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯並噻唑-2-基氨基)-3-氟苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}丙酸乙酯，為米白色固體(0.022g，0.046mmol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.52(s，1H)，8.82(t，1H)，8.26(s，1H)，7.85(d，1H)，7.66(d，1H)，7.55(m，2H)，7.36(t，1H)，7.22(t，1H)，5.65(qt，1H)，4.14(qt，2H)，1.77(d，3H)，1.14(t，3H)；MS(MH)+478。
實施例367順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺向4-溴-2-氟苯胺(1.00g，5.26mmol)的甲苯(25mL)溶液中加入2-氯苯並噁唑(0.66mL，5.79mmol)。將此紫色溶液加熱回流30分鐘，然後在100℃下加熱17小時。將所得白色混懸液/紫色溶液冷卻至室溫並過濾此沉澱。此濾餅用5個2mL每部分的庚烷洗滌得到N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺(1.480g，92％)，為淡紫色粉末。RP-HPLC(在10分鐘內，在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝12.87分鐘，97％；m/z 307(MH+)。
N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺向4-溴-2-氟苯胺(1.00g，5.26mmol)的甲苯(25mL)溶液中加入2-氯苯並噻唑(0.75mL，5.79mmol)。將此紫色溶液在110-150℃在可再密封的試管中加熱66小時，然後冷卻至室溫。將所得棕色溶液濃縮得到紫色固體，其用庚烷研磨得到N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺(1.699g，99％)，為淡紫色粉末。RP-HPLC(在10分鐘內，在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％ CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝13.82分鐘，95％；m/z325(MH+)。
N2-(4-溴苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺以類似N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺使用的方式從4-溴苯胺(1.00g，5.81mmol)製備N2-(4-溴苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺。得到淡紫色粉末(0.867g，49％)。RP-HPLC(10分鐘，25-100％乙腈的0.1N醋酸銨溶液，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝13.82min，100％；m/z 307(MH+)。
N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噁唑-2-胺向N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺(1.480g，4.819mmol)的二甲基甲醯胺(15mL)溶液中在氮氣氛下加入雙(頻哪醇合)乙硼烷(1.468g，5.781mmol)、醋酸鉀(1.419g，14.45mmol)和[1，1′-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.119g，0.146mmol)。將此紫色溶液在80℃下攪拌18小時，然後冷卻至室溫。將所得深棕色混合物真空濃縮得到暗棕色固體。此物質用二氯甲烷研磨，過濾，並濃縮此濾液得到暗棕色油狀物。通過急驟色譜在矽膠上純化(用30％乙酸乙酯/庚烷洗脫)得到2.28g的黃色固體。此物質用庚烷研磨並收集此固體得到N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噁唑-2-胺(0.961g，56％)，為白色粉末。RP-HPLC(在10分鐘內，在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝13.80分鐘，88％；m/z 355(MH+)。
N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噻唑-2-胺以類似於用於N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噁唑-2-胺的方式，由N2-(4-溴-2-氟苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺(1.699g，5.258mmol)製備N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噻唑-2-胺。形成此化合物，為米白色粉末(0.825g，42％)。RP-HPLC(在10分鐘內，在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝14.48分鐘，90％；m/z371(MH+)。
N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噻唑-2-胺以類似於用於N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噁唑-2-胺的方式，由N2-(4-溴苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺(0.909g，2.98mmol)製備N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噻唑-2-胺。形成此化合物，為米白色粉末(0.321g，31％)。RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用HypersilHSC18，250×4.6mm柱)tr＝13.82min.，92％；m/z 351(MH+)。
實施例367順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺向順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.150g，0.340mmol)在乙二醇二甲基醚(3mL)和水(1.5mL)的溶液中，在氮氣氛下加入N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噁唑-2-胺(0.151g，0.425mmol)、四(三苯基膦)鈀(0)(0.020mg，0.017mmol)及碳酸鈉一水合物(0.105mg，0.850mmol)。此溶液在83℃下攪拌19小時。將所得黃色混合物真空濃縮得到黃色油狀物。通過製備RP-HPLC純化(在20分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，21mL/min，用8m Hypersil HS C18，250×21mm柱，tr＝5.7-8.1min.)得到順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺，為米白色固體(0.046g，25％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.65(s，1H)，8.49(m，1H)，8.25(s，1H)，7.53(d，2H)，7.48(d，2H)，7.26(t，1H)，7.20(t，1H)，4.80(m，1H)，3.51-2.50(m，11H)，2.33-2.32(m，4H)，2.09-2.06(m，2H)，1.80-1.40(m，3H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝6.95min.，99％；m/z 542(MH+)。
實施例368順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺以類似於用於順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺的方式，由順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.227mmol)和N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷2-基)苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺(0.105g，0.283mmol)，製備順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺。形成此化合物，為米白色粉末(0.051g，41％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.51(s，1H)，8.80(m，1H)，8.24(s，1H)，7.85(d，1H)，7.65(d，1H)，7.51(m，2H)，7.36(t，1H)，7.20(t，1H)，4.82(m，1H)，3.51-2.25(m，14H)，2.15-2.10(m，2H)，1.80-1.50(m，4H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.63min.，100％；m/z 558(MH+)。
實施例369順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺以類似於用於順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺的方式，由順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.227mmol)和N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噻唑-2-胺(0.100g，0.283mmol)，製備順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺。形成此化合物，為米白色粉末(0.035g，28％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.71(s，1H)，8.23(s，1H)，7.98(d，2H)，7.84(d，1H)，7.65(d，3H)，7.35(t，1H)，7.19(t，1H)，4.80(m，1H)，3.50(m，1H)，2.67-2.09(m，15H)，1.71-1.57(m，4H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.47min.，100％；m/z 540(MH+)。
實施例370反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺以類似於用於順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺的方式，由反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.036g，0.082mmol)和N2-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噁唑-2-胺(0.034g，0.10mmol)，製備反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺。形成此化合物，為米白色粉末(0.021g，50％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.86(s，1H)，8.23(s，1H)，7.93(d，2H)，7.66(d，2H)，7.51(t，1H)，7.25(t，1H)，7.16(t，1H)，4.65(m，1H)，3.51(m，1H)，2.67-1.91(m，17H)，1.49-1.46(m，2H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％ CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.17min.，100％；m/z524(MH+)。
實施例371反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺以類似於用於此順-異構體的方式，由反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4胺(0.100g，0.227mmol)和N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噁唑-2-胺(0.151g，0.425mmol)，製備反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噁唑-2-胺。形成此化合物，為白色粉末(0.053g，43％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.63(s，1H)，8.45(m，1H)，8.24(s，1H)，7.55-7.48(m，4H)，7.25(t，1H)，7.17(t，1H)，4.65(m，1H)，3.36(m，1H)，3.31-1.93(m，16H)，1.46-1.23(m，3H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝6.73min.，99％；m/z 542(MH+)。
實施例372反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺以類似於用於此順-異構體的方式，由反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4胺(0.100g，0.227mmol)和N2-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-1，3-苯並噻唑-2-胺(0.105g，0.283mmol)，製備反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-1，3-苯並噻唑-2-胺。形成此化合物，為白色粉末(0.052g，41％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.51(s，1H)，8.79(m，1H)，8.24(s，1H)，7.85(d，1H)，7.66(d，1H)，7.51(m，2H)，7.36(t，1H)，7.20(t，1H)，4.66(m，1H)，3.69(m，1H)，2.89-1.94(m，17H)，1.50-1.4 (m，2H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用HypersilHS C18，250×4.6mm柱)tr＝6.30min.，99％；m/z 558(MH+)。
實施例373順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺在0℃下，將1，1′-硫羰基二-2(1H)-吡啶酮(0.086g，0.369mmol)加入到順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.150g，0.369mmol)的吡啶(7mL)溶液中，並將此混合物在0℃下攪拌1小時。所得桔黃色溶液在二氯甲烷(10mL)和水(10mL)之間分配。分離有機層並用0.5N HCl(10mL)洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮。將2-氨基-間甲酚(0.045g，0.369mmol)加入到所得桔黃色固體和甲苯(10mL)的懸浮液中，並將此混合物在80℃下加熱1小時。加入1，3-二環己基碳二亞胺(0.114g，0.554mmol)並將該反應混合物在80℃下再加熱18小時。將所得桔黃色棕色溶液冷卻至室溫並濃縮得到淡棕色玻璃狀固體。通過製備HPLC純化(在20分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，tr＝8.1-10.3min.)得到順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺，為米白色固體(0.024g，12％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.81(s，1H)，8.24(s，1H)，7.96(d，2H)，7.66(d，2H)，7.33(d，1H)，7.06(m，2H)，4.80(m，1H)，3.391(m，1H)，2.67-2.10(m，18H)，1.71-1.60(m，4H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.57min.，99％；m/z 538(MH+)。
實施例374順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-氯-1，3-苯並噁唑-2-胺以類似於用於順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺的方式，由順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.246mmol)和2-氨基-4-氯苯酚(0.035g，0.246mmol)，製備順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-氯-1，3-苯並噁唑-2-胺。形成此化合物，為淡黃色固體(0.020g，15％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.03(s，1H)，8.24(s，1H)，7.92(d，2H)，7.67(d，2H)，7.56(m，2H)，7.20(m，1H)，7.16(t，1H)，4.81(m，1H)，3.41-1.60(m，20H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.83min.，99％；m/z 558(MH+)實施例375順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺以類似於用於順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺的方式，由順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.057g，0.140mmol)和2-氨基-對甲酚(0.017g，0.140mmol)，製備順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺。形成此化合物，為米白色固體(0.010g，13％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.81(s，1H)，8.23(s，1H)，7.93(d，2H)，7.66(d，2H)，7.38(d，1H)，7.30(s，1H)，6.96(d，1H)，4.80(m，1H)，2.60-2.07(m，12H)，2.39(s，3H)，2.15(s，3H)，1.71-1.59(m，5H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝7.48min.，90％；m/z 538(MH+)。
實施例376順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺以類似於用於順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺的方式，由順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.246mmol)和6-氨基-2，4-二甲苯酚(0.034g，0.246mmol)，製備順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺。形成此化合物，為米白色固體(0.031g，23％)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.85(s，1H)，8.23(s，1H)，7.93(d，2H)，7.65(d，2H)，7.11(s，1H)，6.80(s，1H)，4.80(m，1H)，2.60-2.17(m，12H)，2.41(s，3H)，2.37(s，3H)，2.22(s，3H)，1.71-1.59(m，5H)；RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)tr＝8.00min.，93％；m/z 552(MH+)。
實施例377N2-[4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-5-氯-2-噻吩磺醯胺用上述方法，由N1-4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基苯胺(100mg，0.236mmol)製備此化合物，得到N2-[4-(4-氨基-1-{4-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶基]}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-氟苯基]-5-氯-2-噻吩磺醯胺(51mg)；RP-HPLC條件10至90％CH3CN在0.1N醋酸銨水溶液中，緩衝至pH 4.5，在20分鐘內，2mL/min，用WatersSymmetry C18，300，5μm，250×4.6mm柱Rt11.219min.，98.5％和m/z(MH+)605.2。
實施例378-383合成順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的脲和磺醯胺類物質的總方法這些類似物由順-3-{4-[氨基(苯基)甲基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.10mmol)用上述方法製備，得到下列實施例 分析RP-HPLC條件10至90％CH3CN在0.1N醋酸銨水溶液中，緩衝至pH 4.5，在20分鐘內，2mL/min，用Waters Symmetry C18，5μm，300，250×4.6mm柱。
實施例384反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-N′-(3-甲基苯基)脲將含反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(850mg，1.93mmol)、N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苄基]氨基甲酸叔丁基酯(1.25當量，812mg，2.41mmol)、四-(三苯基膦)鈀(135mg)和碳酸鈉(2.5當量，511mg，4.83mmol)的在脫氣水(10mL)和DME(30mL)中的混合物，加熱並在85℃下攪拌16小時。減壓除去溶劑得到棕色泡沫，其在矽膠上通過柱色譜純化，用10％甲醇和存在於二氯甲烷中的1％氫氧化銨作為洗脫劑。形成反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)氨基甲酸叔丁基酯，為米白色泡沫(800mg，80％)。
將N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)氨基甲酸叔丁基酯(800mg)的TFA(4mL)和二氯甲烷(4mL)溶液，室溫下攪拌2小時。真空下除去溶劑並將此油狀殘餘物用飽和碳酸氫鈉水溶液鹼化並將水層用二氯甲烷(3×20mL)洗滌。濃縮水層並加入DMF(20mL)。過濾移出鹽並真空下除去DMF。殘餘物在矽膠上通過柱色譜純化，用存在於二氯甲烷中的10％甲醇作為洗脫劑得到3-[4-(氨基甲基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺，為黃色固體(70mg，11％)。
將間甲苯基異氰酸酯(1.1當量，13.7mg，0.1mmol)加入到3-[4-(氨基甲基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(35mg，0.083mmol)的吡啶(0.5mL)溶液中，然後攪拌2天。將該反應混合物純化，用質量驅動的製備RP-HPLC(Micromass/Gilson，Hypersil BDS C18，5μm，100×21.2mm柱；0-100％乙腈和0.05M醋酸銨，緩衝至pH 4.5，在12.5分鐘內，25mL/min)得到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-N′-(3-甲基苯基)脲(17mg，37％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.46(2H，m)，2.05(4H，m)，2.18(2H，m)，2.25(3H，s)，2.33(4H，m)，2.45-2.53(8H，m)，4.38(2H，br d)，4.65(1H，m)，6.52(1H，t)，6.66(1H，d)，7.10(1H，t)，7.19(1H，br d)，7.26(1H，br s)，7.46(2H，d)，7.63(2H，d)，8.23(1H，s)和8.51(1H，s)和m/z(MH+)554.2。
實施例385反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-N′-(3-甲氧基苯基)脲用實施例240所述的相同的方法和用量來製備反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-N′-(3-甲氧基苯基)脲(17mg，36％)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.46(2H，m)，2.05(4H，m)，2.18(2H，m)，2.35(4H，m)，2.45-2.53(8H，m)，3.70(3H，s)，4.38(2H，br d)，4.65(1H，m)，6.49(1H，m)，6.67(1H，m)，6.90(1H，br d)，7.12(1H，t)，7.17(1H，m)，7.46(2H，d)，7.63(2H，d)，8.23(1H，s)和8.62(1H，s)，m/z(MH+)570.2。
實施例386順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙醯胺2，2-二甲基-3-苯基丙腈將N-異丙基環己基胺(2.8g，19.72mmol)的無水四氫呋喃(25mL)溶液，在-78℃下，通過在15分鐘內滴加1.6M正丁基鋰己烷溶液(12.23mL，19.72mmol)進行處理。將該反應溶液在-78℃下攪拌10分鐘。此溶液由無色轉變為黃色。將異丁腈(1.36g，19.72mmol)加入到該反應溶液中，並將該反應混合物在-78℃下再攪拌10分鐘。在-78℃下在氮氣氛下將此溶液注入到苄基氯(2.62g，20.71mmol)的無水四氫呋喃溶液中。將此紅色/棕色反應溶液在-78℃下攪拌1小時。然後移出此乾冰/丙酮浴，並將此溶液室溫下攪拌5小時。該反應溶液用飽和氯化銨水溶液(10mL)驟冷。將乙酸乙酯(25mL)加入到此驟冷後的反應溶液中。分層，並將水層用乙酸乙酯(150mL)萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓蒸發得到3.18g的粗品。粗品物質在2N鹽酸溶液和乙酸乙酯之間分配。將此有機層用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到2.18g(69％)2，2-二甲基-3-苯基丙腈。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.369-7.333(m，2H)，7.309-7.270(m，3H)，2.832(s，2H)，1.294(s，6H)。將此化合物不經進一步分析用於接下來的反應中。
2，2-二甲基-3-苯基丙酸將2，2-二甲基-3-苯基丙腈(1.0g，6.28mmol)的乙二醇(5mL)溶液用固體氫氧化鉀(1.06g，18.84mmol)處理。將該反應混合物在196℃在氮氣氛下攪拌48小時。真空下蒸餾除去乙二醇。將1N氫氧化鈉溶液(25mL)和乙酸乙酯(15mL)加入到此棕色殘餘物中。分層，並將水層用乙酸乙酯(375mL)萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，並減壓蒸發得到0.856g(76％)的2，2-二甲基-3-苯基丙酸。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ12.20(s，1H)，7.28-7.24(m，2H)，7.22-7.20(m，1H)，7.15-7.13(m，2H)，2.78(s，2H)，1.07(s，6H)。將此化合物不經進一步分析用於接下來的反應中。
2，2-二甲基-3-苯基丙醯氯將2，2-二甲基-3-苯基丙酸(0.856g，4.8mmol)的氯仿(6mL)溶液在0℃下用草醯氯(3.05g，24mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將此反應溶液在0℃下攪拌1小時。移出冰浴，並將此反應混合物在室溫下攪拌過夜。減壓下除去溶劑，並在高真空下乾燥，得到定量的2，2-二甲基-3-苯基丙醯氯。此油狀物直接用於下面的反應。
順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙醯胺將順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.23mmol)的吡啶(2.5mL)溶液用2，2-二甲基-3-苯基丙醯氯(0.120g，0.61mmol)處理。將該反應混合物在室溫、氮氣氛下攪拌2小時。加入飽和碳酸氫鈉溶液(10mL)，並將該反應混合物攪拌20分鐘。減壓除去溶劑。將二氯甲烷和飽和碳酸氫鈉溶液加入到此殘餘物。分層，用Empore萃取柱。減壓下除去有機溶劑。粗品化合物在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷中的10％甲醇作為洗脫劑洗脫，得到0.085g(62％)的順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙醯胺。1H NMR(CDCl3，400MHz)δ8.595-8.574(m，1H)，8.372(s，1H)，7.985(s，1H)，7.292-7.158(m，7H)，4.923(m，1H)，3.891(s，3H)，3.050-3.013(m，1H)，2.965(s，2H)，2.65-2.55(m，5H)，2.440-2.346(m，4H)，2.244-2.166(m，4H)，1.854-1.823(m，3H)，1.688(m，3H)，1.334(s，6H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(SymmetryShield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.517min(100％)。
實施例387反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙醯胺三馬來酸鹽將反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.250g，0.573mmol)的吡啶(3mL)溶液，在0℃下用2，2-二甲基-3-苯基丙醯氯(0.304g，1.55mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌10分鐘。除去冰浴並將該反應混合物室溫下攪拌5小時。減壓除去溶劑至幹。將二氯甲烷(15mL)和飽和碳酸氫鈉溶液(5mL)加入到此固體。分層，用Empore萃取柱。減壓下除去有機溶劑。粗品固體通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷中的10％甲醇，然後用存在於二氯甲烷中的15％(含5％氫氧化銨的甲醇)作為洗脫劑。用乙酸乙酯和庚烷將上一純化步驟得到粗品固體重結晶。過濾此沉澱得到0.201g(59％)的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙醯胺。將反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙醯胺(0.201，0.337mmol)的乙酸乙酯熱溶液用馬來酸(0.117g，1.011mmol)的乙酸乙酯熱溶液處理。在氮氣氛下過濾此沉澱，並高真空下乾燥，得到0.265g的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2，2-二甲基-3-苯基丙醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.46(s，1H)，8.241(s，1H)，8.107-8.086(d，1H，J＝8.4Hz)，7.248-7.183(m，7H)，6.170(s，6H)，4.697(m，1H)，3.883(s，3H)，2.931(s，3H)，2.9-2.75(br.s.，4H)，2.671(s，3H)，2.104-1.990(m，7H)，1.588-1.5632(m，2H)，1.226(s，7H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.413min(95％)。
實施例388反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺三馬來酸鹽將反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.162g，0.371mmol)的吡啶(2mL)溶液，在0℃下在氮氣氛下用反-2-苯基-1-環丙基羰基氯(0.134g，0.742mmol)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌20分鐘，除去冰浴並將此反應混合物室溫下攪拌5小時。再加入反-2-苯基-1-環丙基羰基氯(0.034g，0.186mmol)，並將此反應混合物攪拌1小時。減壓下除去有機層，再加入二氯甲烷(15mL)。分層，用Empore萃取柱。減壓下除去有機層。粗品在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷中的15％甲醇，然後用存在於二氯甲烷中的20％甲醇作為洗脫劑。過柱後得到0.150g(70％)的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺。將反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺(0.147，0.253mmol)的乙酸乙酯熱溶液，用馬來酸(0.088g，0.759mmol)的乙酸乙酯熱溶液處理。在氮氣氛下過濾所形成的沉澱，並高真空下乾燥，得到0.204g的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.64(s，1H)，8.23-8.21(m，2H)，7.33-7.29(m，2H)，7.24-7.17(m，4H)，6.16(s，6H)，4.69-4.66(m，1H)，3.90(s，3H)，2.90-2.60(m，7H)，2.37-2.35(m，2H)，2.10-1.99(m，8H)，1.70-1.50(m，3H)，1.32(m，1H)；HPLCWaters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.346min(97％)。
實施例389順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯並[b]噻吩-2-甲醯胺實施例390順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-噻吩甲醯胺實施例391順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-呋喃甲醯胺得自順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-7H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的醯胺將存在於二氯甲烷(100μL)中的商購的醯氯(0.23mmol)加入到存在於吡啶(800μL)的順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-7H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.050g，0.115mmol)中。將該反應混合物攪拌過夜。該反應混合物用1N氫氧化鈉溶液驟冷。在Supelco-支管上真空和氮氣流下除去溶劑。剩餘的固體進行製備HPLC(Hypersil C18，100×21mm柱，5μm，15-100％乙腈梯度，在8分鐘內，總過柱時間-10min，緩衝液50mM醋酸銨，25ml/min)。將二氯甲烷和1N氫氧化鈉溶液加入到此固體中。分層，用Empore萃取柱，得到相應的產物。HPLC Perkin Elmer Pecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5ml/min)。
實施例392反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-甲基-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽
3-甲基-3-苯基丁醯基氯將存在於二氯甲烷(10mL)的3-甲基-3-苯基丁酸(0.508g，2.85mmol)在-78℃下用草醯氯(3.62，28.5mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將該反應混合物在-78℃下攪拌10分鐘，並除去乾冰/丙酮浴，室溫下攪拌過夜。減壓除去溶劑，並高真空下乾燥。產物不經分析直接用於下一步反應。
反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-甲基-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽將反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-7H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.200g，0.458mmol)的吡啶(4mL)溶液，在-5℃下通過滴加存在於二氯甲烷(1mL)3-甲基-3-苯基丁醯基氯(0.101g，0.514mmol)進行處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌20分鐘，然後除去乾冰/丙酮浴並將該反應混合物室溫下攪拌4小時。加入1N氫氧化鈉溶液(5mL)並將此混合物攪拌過夜。減壓除去溶劑。粗品固體在高真空下乾燥。加入二氯甲烷(10mL)和1N氫氧化鈉溶液(10mL)。分層，用Empore萃取柱。從頂部吹入氮氣除去有機溶劑，得到0.240g(88％)的反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-甲基-3-苯基丁醯胺。將反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-甲基-3-苯基丁醯胺(0.240g，0.402mmol)在乙酸乙酯和幾滴乙醇中的熱溶液，用馬來酸(0.140g，1.206mmol)的乙酸乙酯熱溶液處理。在氮氣氛下過濾所形成的沉澱，並凍幹得到0.323g反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3-甲基-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.807(s，1H)，8.226(s，1H)，8.109-8.088(d，1H，J＝8.4Hz)，7.489-7.470(d，2H，J＝7.6Hz)，7.345-7.306(m，2H)，7.213-7.134(m，3H)，6.151(s，5H)，4.680(m，1H)，3.836(s，3H)，3.3(br.s.，7H)，2.655(s，3H)，2.541(s，4H)，2.085-1.989(m，6H)，1.574-1.551(m，2H)，1.431(s，6H)；HPLC Waters 2690 AllianceHPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt5.407min(99％)。
實施例393-397得自順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-7H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的醯胺典型方法向存在於二氯甲烷(1.4mL)的適當甲酸(0.46mmol)中，加入草醯氯(0.4mL，4.6mmol)和DMF(1滴)。將小瓶用隔膜蓋上並在各蓋上插入小號針頭以釋放壓力。這些小瓶在J-Kem震搖器上搖動過夜。分離50％的溶液，然後將過量的草醯氯和二氯甲烷在12孔Supelco支管上真空下隨氮氣流除去。將此粗品醯氯(0.23mmol)加入到存在於乾燥吡啶(0.6mL)的順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(50mg，0.11mmol)中並室溫下攪拌過夜。所得溶液直接通過製備HPLC進行純化(HypersilBSD C18，5μm，100×21mm，在10分鐘內0％-100％乙腈/0.05M醋酸銨，25.0mL/min)。所得產物通過在二氯甲烷(4ml)和1.0N氫氧化鈉(2ml)之間分配來進一步純化並通過EmporeTM高效萃取圓盤柱(C18-SD十八烷基)得到相應的產物。這些化合物詳見下頁，其中給出了相應的LCMS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.5mL/min.)數據。
實施例398順-N4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3，5-二甲基-4-異噁唑甲醯胺a)順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(10g，22.66mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(9.49g，27.17mmol)、四(三苯基膦)鈀(1.57g，1.36mmol)和碳酸鈉(5.76g，54.38mmol)與乙二醇二甲醚(180mL)和水(90mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過製備薄層柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作為流動相，得到順-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(10.859g，89％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(s，9H)，1.58(m，2H)，1.71(m，2H)，2.08(m，2H)，2.17(s，3H)，2.45(m，4H)，2.38(m，4H)，2.45(m，3H)，3.87(s，3H)，4.80(m，1H)，7.22(m，2H)，7.91(d，J＝8.14，1H)，8.04(s，1H)，8.22(s，1H)。
b)順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺在0℃下將三氟乙酸/二氯甲烷的混合物(20∶80，200mL)加入到存在於二氯甲烷(100mL)的N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(10.85g，20.24mmol)中。2小時後，除去冰浴並蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷。加入氫氧化鈉(1.0N)以調節pH為約10。過濾收集除去有機溶劑時形成的固體得到順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(8.84g，100％)。1H NMR(CDCl3)δ1.65(m，2H)，1.83(m，2H)，2.18(m，2H)，2.31(s，3H)，2.35-2.60(m，11H)，3.90(s，3H)，4.00(bs，2H)，4.89(m，1H)，5.61(bs，2H)，6.83(d，J＝7.78Hz，1H)，7.12(m，2H)，8.35(s，1H)。
c)順-N4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3，5-二甲基-4-異噁唑甲醯胺將3，5-二甲基-4-異噁唑羰基氯(22mg，0.137mmol)加入到順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(30mg，0.067mmol)的吡啶(0.5mL)溶液中。5小時後，蒸發溶劑並將此殘餘物用DMSO重結晶得到順-N4-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-3，5-二甲基-4-異噁唑甲醯胺(33mg，87％)。1HNMR(DMSO-d6)δ1.91(m，2H)，2.24(m，2H)，2.36(m，2H)，2.41(s，3H)，2.63(s，3H)，2.77(m，3H)，3.17(s，3H)，3.37(bm，8H)，3.95(s，3H)，4.95(m，1H)，7.37(m，2H)，8.17(d，J＝8.17，1H)，8.30(s，1H)，9.26(s，1H)。LC/MS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，3.5mL/min.)，MH+＝560.2，Rt＝2.44min。
實施例399順-N3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-5-甲基-3-異噁唑甲醯胺將5-甲基-3-異噁唑羰基氯(20mg，0.137mmol)加入到順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(30mg，0.067mmol)的吡啶(0.5mL)溶液。5小時後，蒸發溶劑並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil BSD C18，5μm，100×21mm，在10分鐘內0％-100％乙腈/0.05M醋酸銨，25.0mL/min)。所得產物進一步通過在二氯甲烷(4ml)和1.0N氫氧化鈉(2ml)之間分配進行純化，並通過EmporeTM高效萃取圓盤柱(C18-SD十八烷基)得到順-N3-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-5-甲基-3-異噁唑甲醯胺(14mg，38％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.81(m，2H)，2.14(m，2H)，2.35(m，2H)，2.53(s，3H)，2.76(m，3H)，3.37(bm，8H)，3.99(s，3H)，4.93(m，1H)，6.74(s，1H)，7.36(m，2H)，8.26(m，1H)，9.48(s，1H)；LCMS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，3.0mL/min.)MH+＝546.4，Rt＝1.82min。
實施例400順-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺，二馬來酸鹽將順-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺(100mg，0.172mmol)溶解於熱乙酸乙酯(12mL)，並加入存在於熱乙酸乙酯(3mL)中的馬來酸(60mg，0.515mmol)。將該反應混合物室溫下攪拌5小時。過濾收集固體得到順-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺，二馬來酸鹽(117mg，87％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.25(d，J＝6.96，3H)，1.73(m，42H)，2.09(m，2H)，2.26(m，2H)，2.71(s，3H)，2.74(m，2H)，2.85-3.70(bm，7H)，3.89(s，3H)，4.85(m，1H)，6.14(s，4H)，7.20(m，3H)，7.31(d，J＝4.33，4H)，8.12(d，J＝8.17Hz，1H)，8.24(s，1H)，9.20(s，1H)。LC/MS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，3.0mL/min.)MH+＝583.4 Rt＝2.14min。
實施例401反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯並[b]呋喃-2-甲醯胺，三馬來酸鹽a)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯並[b]呋喃-2-甲醯胺向存在於二氯甲烷(14mL)的苯並[b]呋喃-2-甲酸(0.743g，4.58mmol)中加入草醯氯(4mL，45.8mmol)和DMF(1滴)。將該反應混合物攪拌過夜。蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷(5mL)。在0℃下將此二氯甲烷溶液的一半(2.5mL)加入到存在於吡啶(6mL)的反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.50g，1.145mmol)。30分鐘後，過濾收集此固體。然後將水加入到此固體並用氫氧化鈉(1.0N)將此溶液的pH調節至10。水相用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作為流動相，得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯並[b]呋喃-2-甲醯胺(0.497g，75％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(m，2H)，2.01(m，6H)，2.15(s，3H)，2.40(m，3H)，2.51(m，4H)，4.00(s，3H)，4.66(m，1H)，7.31(m，1H)，7.39(m，2H)，7.54(m，1H)，7.81(m，3H)，8.24(m，1H)，9.50(s，1H)。
b)反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯並[b]呋喃-2-甲醯胺，三馬來酸鹽將反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯並[b]呋喃-2-甲醯胺(497mg，0.855mmol)溶解於熱乙酸乙酯(56mL)，並加入存在於熱乙酸乙酯(5mL)的馬來酸(298mg，2.566mmol)。將該反應混合物室溫下攪拌5小時。過濾收集固體得到反-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)苯並[b]呋喃-2-甲醯胺，三馬來酸鹽(117mg，92％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.60(m，2H)，2.09(m，6H)，2.68(s，3H)，2.82-3.17(bm，9H)，4.00(s，3H)，4.69(m，1H)，6.16(s，6H)，7.30-7.42(m，3H)，7.54(m，1H)，7.76-7.85(m，3H)，8.25(m，2H)，9.51(s，1H)；LCMS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，3.0mL/min.)MH+＝581.4，Rt＝2.12min。
實施例402
反-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺，三馬來酸鹽a)反-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺向存在於二氯甲烷(7mL)的(3R)-3-苯基丁酸(376mg，2.29mmol)中，加入草醯氯(2mL，22.9mmol)和DMF(1滴)。將該反應混合物攪拌過夜。蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)。在0℃下將此二氯甲烷溶液加入到反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(448mg，1.026mmol)的吡啶(6mL)溶液中。2小時後，該反應混合物倒入到乙酸乙酯(60ml)中並過濾收集此固體。然後將水加入到此固體中，並用氫氧化鈉(1.0N)調節此溶液的pH至10。用二氯甲烷萃取水層。用水和鹽酸洗滌合併的有機層，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。將此殘餘物通過急驟色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(80∶20)作為流動相，得到反-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺(383mg，64％)。1HNMR(CDCl3)δ1.40(d，J＝6.96，3H)，1.57(m，2H)，2.08-2.21(m，6H)，2.30(s，3H)，2.50(m，5H)，2.63-2.74(m，6H)，3.40(m，1H)，3.88(s，3H)，4.74(m，1H)，5.69(br，2H)，7.16-7.34(m，7H)，7.66(s，1H)，8.34(s，1H)，8.49(d，J＝8.21，1H)。
b)反-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺，三馬來酸鹽將反-N1-[(2R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺(383mg，0.657mmol)溶解於熱乙酸乙酯(42mL)，並加入馬來酸(229mg，1.971mmol)的熱乙酸乙酯(5mL)溶液。將此反應混合物室溫下攪拌5小時。過濾收集固體得到反-N1-[(2 R)-2-苯基丙基]-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯甲醯胺，三馬來酸鹽(571mg，93％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.25(d，J＝6.95，3H)，1.57(m，2H)，2.03(m，6H)，2.60-3.40(bm，18H)，3.89(s，3H)，4.67(m，1H)，6.16(s，6H)，7.20(m，3H)，7.31(d，J＝4.37Hz，4H)，8.14(d，J＝8.22Hz，1H)，8.23(s，1H)，9.18(s，1H)；LC/MS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，3.5mL/min.)MH+＝583.2，Rt＝2.89min。
實施例403N-{4-[4-氨基-1-(1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯a)4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯在0℃下將硼氫化鈉(3.8g，100.4mmol)分批加入到4-氧代-1-哌啶甲酸叔丁基酯(20g，100.4mmol)的甲醇(600mL)溶液中。15分鐘後，除去冰水浴並將該反應混合物室溫下攪拌3小時。加入氫氧化鈉(1.0N，100mL)並蒸發有機溶劑。水層用乙醚萃取4次。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(20.48g，100％)。1H NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.63(m，2H)，1.87(m，2H)，3.03(m，2H)，3.83(m，3H)。
b)4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯將3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(10g，38.3mmol)、4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(16.96g，84.2mmol)和三苯基膦(20.09g，76.0mmol)懸浮於四氫呋喃(425mL)中。將該反應混合物在冰水浴中冷卻並滴加偶氮二甲酸二乙酯(12.09mL，76.0mmol)。10分鐘後，將該反應混合物升溫至室溫。5小時後，減壓除去溶劑，加熱下加入二氯甲烷(65mL)。將此固體過濾並用二氯甲烷(20ml)洗滌。此固體進一步用乙酸乙酯(5×20mL)洗滌得到1，2-肼二甲酸二乙酯和4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯的混合物(1∶1，14.98g，63％)，其不經進一步純化直接使用。1H NMR(CDCl3)δ1.48(s，9H)，1.95(m，2H)，2.20(m，2H)，2.92(m，2H)，4.23(m，2H)，4.84(m，1H)，8.31(s，1H)。
c)3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺在0℃下將三氟乙酸/二氯甲烷的混合物(20∶80，250mL)加入到4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(10.72g，24.1mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中。15分鐘後，除去冰浴並將該反應混合物室溫下攪拌5小時。蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷。加入鹽酸(5.0N)，並將此水層用二氯甲烷洗滌3次。加入氫氧化鈉(50％)調節pH為約10。將此懸浮液凍幹至原體積的三分之一。過濾收集此固體得到3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(8.109g，97％)。1H NMR(CDCl3)δ1.81(m，2H)，1.99(m，2H)，2.65(m，2H)，3.07(m，2H)，4.68(m，1H)，8.19(s，1H)。
d)3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.00g，5.81mmol)、1-甲基-4-哌啶酮(2.14mL，17.42mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(2.45g，11.62mmol)和冰醋酸(1.05g，17.42mmol)與1，2-二氯乙烷(75mL)混合。將該反應混合物室溫下攪拌6小時並加入飽和碳酸氫鈉溶液以調節pH為約9。過濾收集固體得到3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.39g，93％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.52(m，2H)，1.75(m，2H)，1.87(m，2H)，2.05(m，4H)，2.24(s，3H)，2.28(m，3H)，2.91(m，2H)，3.00(m，2H)，4.55(m，1H)，8.18(s，1H)。
e)N-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯將3-碘-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)]-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.39g，5.41mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(2.08g，5.96mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.375g，0.32mmol)和碳酸鈉(1.38g，13.00mmol)與乙二醇二甲醚(80mL)和水(40mL)混合。該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨(95∶5∶0.5)作為流動相，得到N-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯(1.67g，57％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(m，11H)，1.71(m，2H)1.86(m，4H)，2.14(s，3H)，2.18(m，3H)，2.32(m，2H)，2.80(m，2H)，3.89(s，3H)，4.64(m，1H)，7.22(m，2H)，7.91(d，J＝8.12，1H)，8.03(s，1H)，8.21(s，1H)。
實施例4043-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺a)3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺在0℃下將三氟乙酸/二氯甲烷的混合物(20∶80，28mL)加入到N-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯(0.914g，1.70mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中。15分鐘後，除去冰浴並將該反應混合物室溫下攪拌5小時。然後蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷。加入飽和碳酸氫鈉以調節pH為約8。分層並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.726g，97％)。1H NMR(CDCl3)δ1.67(m，2H)1.83(m，4H)，2.00(m，2H)，2.27(s，3H)，2.39(m，5H)，2.91(m，2H)，3.08(m，2H)，3.92(s，3H)，3.99(m，2h)，4.73(m，1H)，5.56(bs，2H)，6.82(d，J＝7.87，1H)，7.08(d，J＝7.84，1H)，7.13(s，1H)，8.34(s，1H)。
b)3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.229mmol)、2-呋喃甲醛(0.027mL，0.321mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(193mg，0.916mmol)和冰醋酸(55mg，0.916mmol)與1，2-二氯乙烷(5mL)混合。將該反應混合物室溫下攪拌過夜。飽和碳酸氫鈉溶液以調節pH為約8。分層並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨(95∶5∶0.2)作為流動相，得到3-{4-[(2-呋喃基甲基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(57mg，48％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.45(m，2H)，1.71(m，2H)，1.87(m，4H)，2.14(s，3H)，2.28(m，5H)，2.80(m，2H)，3.01(m，2H)，3.86(s，1H)，4.37(d，J＝3.13，1H)，6.76(d，J＝8.62，1H)，7.07(m，2H)，7.57(s，1H)，8.19(s，1H)。LCMS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH 4.5)，3.0mL/min.)MH+517.3，Rt＝2.28min。
實施例405N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺，二馬來酸鹽a)N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺將反-2-苯基-1-環丙烷羰基氯(42mg，0.231mmol)加入到3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)-哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(100mg，0.229mmol)的吡啶(1.0mL)溶液中。5小時後，蒸發溶劑並將此殘餘物通過急驟柱色譜純化得到N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺(80mg，60％)。1H NMR(CDCl3)δ1.42(m，1H)，1.77(m，2H)，1.85(m，2H)，2.06(m，3H)，2.36-2.45(m，8H)，2.62(m，1H)，3.00(m，2H)，3.10(m，2H)，3.96(s，3H)，4.75(m，1H)，5.54(bs，2H)，7.14-7.33(m，7H)，8.10(s，1H)，8.36(s，1H)，8.54(d，J＝8.50，1H)。LCMS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，3.0mL/min.)MH+＝581.4，Rt＝1.77min。
b)N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺，二馬來酸鹽將N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺(75mg，0.129mmol)溶解於乙醇(2mL)並加入存在於乙醇(1mL)的馬來酸(45mg，0.387mmol)。將該反應混合物室溫下攪拌5小時。除去溶劑並加入乙酸乙酯，過濾收集固體得到N1-{4-[4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-反-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺，二馬來酸鹽(75mg)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.17(m，1H)，1.32(m，2H)，1.48(m，2H)，1.48，(m，2H)，2.19(m，4H)，2.37(M，1H)，2.46(m，1H)，2.59(m，1H)，2.78(s，3H)，2.98-3.52(bm，9H)，3.90(s，3H)，5.02(m，1H)，6.08(s，4H)，7.17-7.33(m，7H)，8.25(m，2H)，9.65(s，1H)。LCMS(Finigan-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑0％B/A至100％B/A，在4分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，3.0mL/min.)MH+＝581.4，R＝1.77min。
實施例406和407得自順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-7H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的醯胺典型方法
向存在於二氯甲烷(1.5ml)的適當甲酸(0.46mmol)中，加入草醯氯(400μl，0.2mmol)和DMF(1滴)。將小瓶用隔膜蓋上並在各蓋上插入小號針頭以釋放壓力。這些小瓶在J-Kem震搖器上搖動過夜。分離50％的溶液，然後將過量的草醯氯和二氯甲烷在12孔Supelco支管上真空下隨氮氣流除去。將粗品醯氯(0.23mmol)加入到存在於乾燥吡啶(800μl)的順-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(40mg，0.09mmol)中並室溫下攪拌。所得溶液直接通過製備HPLC進行純化(Hypersil BSD C18，5μm，100×21mm，在10分鐘內0％-100％乙腈/0.05M醋酸銨，25.0mL/min)。所得產物通過在二氯甲烷(4ml)和1.0N氫氧化鈉(2ml)之間分配來進一步純化並通過EmporeTM高效萃取圓盤柱(C18-SD十八烷基)得到相應的產物。這些化合物詳見下頁，其中給出了相應的LCMS(Micromass-柱Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑在4.5分鐘內0％B/A至100％B/A，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，PH4.5)，3.5mL/min.)數據。
實施例408N2-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]苯基}-5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺二鹽酸鹽 a)4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯將二碳酸二叔丁基酯(0.287g，1.32mmol)加入到3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二鹽酸鹽(0.50g，1.20mmol)和碳酸鈉(0.445g，4.20mmol)在二噁烷(10mL)和水(10mL)中的混合物中，並將該反應攪拌18小時。加入二氯甲烷(100mL)，並將有機層用水(30mL)和鹽水(30mL)洗滌，乾燥(硫酸鈉)並真空濃縮得到4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯，為淡黃色固體(0.524g，98％)；RP-HPLC 12.227分鐘，100％純度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液，緩衝至pH4.5，在20分鐘內，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝445.1。
b)4-(4-氨基-3-{4-[(5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-基)氨基]苯基}1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(524mg，1.18mmol)溶解於乙二醇二甲基醚(50mL)和水(10mL)。加入N-(1，3-苯並噁唑-2-基)-N-[2-氟-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(537mg，1.47mmol)、四(三苯基膦)鈀(68mg，0.059mmol)和碳酸鈉(313mg，2.95mmol)並將該反應在80℃下加熱19小時。再加入羥基硼酸酯(188mg，0.515mmol)和四(三苯基膦)鈀(27mg，0.024mmol)並將該反應在80℃下再加熱23小時。減壓濃縮該反應。剩餘的殘餘物在二氯甲烷(100mL)和水(100mL)之間分配。將此有機層乾燥(硫酸鈉)再減壓濃縮得到桔黃色油狀物(1.4g)。在矽膠上通過色譜純化，用2∶1至9∶1乙酸乙酯∶庚烷梯度，接著用存在於二氯甲烷中的2％至5％甲醇梯度洗脫，得到4-(4-氨基-3-{4-[(5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯，為黃褐色固體(577mg，85％)；RP-HPLC 17.090分鐘，98％純度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液，緩衝至pH4.5，在20分鐘內，1mL/min；λ＝254nm；DeltapakC18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝555.2。
c).N2-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]苯基}-5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺二鹽酸鹽將4-(4-氨基-3-{4-[(5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸叔丁基酯(142mg，0.256mmol)溶解於丙酮(7mL)和6N鹽酸(1.4mL)中。然後將該反應在45℃下加熱，得到沉澱。2.5小時後，通過真空過濾收集沉澱，用最小量的丙酮洗滌並凍幹得到N2-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]苯基}-5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺二鹽酸鹽，為桔黃色固體(130mg，96％)；-HPLC 10.436分鐘，96％純度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液，緩衝至pH4.5，在20分鐘內，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝455.3。
實施例409-416合成N2-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]苯基}-5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺的哌啶醯胺類似物的總方法 在各20mL的閃爍小瓶中，加入N2-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]苯基}-5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺二鹽酸鹽(45mg，0.085mmol)、N-未保護的或N-保護的胺基酸(1.25當量)、1-羥基-7-氮雜苯並三唑(12mg，0.085mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(20mg，1.06mmol)、N-乙基-N，N-二異丙基胺(74μl，0.425mmol)和二氯甲烷(5mL)。將該反應在室溫下振動2.5天。對於沒有完全的反應，再加入N-乙基-N，N-二異丙基胺(15μl，0.085mmol)和)和1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(8mg，0.0425mmol)。此外，對於溶解度低的反應，還加入DMF(1mL)。將反應真空濃縮，溶解於二氯甲烷(2mL)，用鹽水(2mL)洗滌並通過Empore柱(6mL)來分層。將有機層減壓濃縮。對於純度小於80％的產物，將樣品通過RP-HPLC純化(Waters PrepLC4000，流速10mL/min，λ＝254nm梯度15％至35％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度，在40分鐘內；Deltapak C18，300，15μm，40×100mm柱)。將N-叔丁氧基羰基保護的產物(0.11mmol)脫保護用6N HCl(0.7mL)和丙酮(3.5mL)，在45℃下處理4.5小時。將丙酮減壓除去，並將此產物通過RP-HPLC純化(Waters PrepLC 4000，流速10mL/min.λ＝254nm梯度15％至35％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度，在40分鐘內；Deltapak C18，300A，15μm，40×100mm柱)。
將N-(9-芴基甲氧基羰基)保護的產物(0.126mmol)脫保護用哌啶(0.4mL)在DMF(1.6ml)中室溫下處理3.5小時脫保護。產物再通過RP-HPLC純化(Waters PrepLC 4000，流速10mL/min.，λ＝254nm梯度15％至35％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液梯度，在40分鐘內；Deltapak C18，300，15μm，40×100mm柱)。
產物通過RP-HPLC(5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液，緩衝至pH4.5，在20分鐘內，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)和質譜進行分析，給下列化合物定性 實施例417順-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基2，3-二氯-1-苯磺酸酯將含順-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯酚(100mg，0.245mmol)、2，3二氯苯磺醯基氯(180mg，0.735mmol)和三乙胺(0.34mL，2.45mmol)的二氯甲烷(8mL)溶液，室溫下攪拌17小時。再加入二氯甲烷(20mL)，並將該反應用鹽水(10mL)、飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)洗滌，乾燥(硫酸鈉)並減壓濃縮得到順-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基2，3-二氯-1-苯磺酸酯，為白色固體(135mg，90％)；RP-HPLC 11.787分鐘，97％純度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液，緩衝至pH4.5，在20分鐘內，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝616.2。 實施例418N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-胺(a)順-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醛將順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(5.0g，11.33mmol)、4-甲醯基苯基羥基代硼酸(2.55g，16.98mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.47g，0.4mmol)和碳酸鈉(3.002g，28.32mmol)的混合物在乙二醇二甲醚(170mL)和水(30mL)中在80℃加熱18小時。再加入羥基硼酸酯(1.567當量)和催化劑(0.0135當量)並將該反應再繼續40小時。將該反應冷卻至室溫，並真空濃縮。殘餘物在乙酸乙酯(300mL)和水(200mL)之間分配。通過過濾收集所得沉澱並冷凍乾燥得到順-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醛，為淡棕色固體(2.1g，43％)；RP-HPLC 7.003分鐘，98％純度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液，緩衝至pH4.5，在20分鐘內，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.60(2H，brt)，1.72(2H，m)，2.06(2H，m)，2.17(3H，s)，2.27(3H，m)，2.35-2.50(6H，m)，3.39(2H，m)，4.84(1H，m)，7.88(2H，d)，8.07(2H，d)，8.26(1H，s)，及10.11(1H，s)。
b)N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-胺將含順-4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯甲醛(100mg，0.24mmol)和2-氨基-5-甲基噻唑(33mg，0.29mmol)在異丙醇鈦(0.48mL)中的漿狀物，室溫下攪拌4小時。加入甲醇(2mL)，接著小心加入硼氫化鈉(13.5mg，0.36mmol)。10分鐘後，泡騰停息，並用氫氧化鈉水溶液(0.1N，10mL)將該反應驟冷。所得混合物放置過夜，再通過硅藻土板過濾，再用加入甲醇(約10mL)。將濾液蒸發至幹，再溶解於二氯甲烷(50mL)並用鹽水(50mL)洗滌。水層進一步用二氯甲烷(3×50mL)萃取並將合併的有機層乾燥(硫酸鎂)並真空濃縮。通過RP-HPLC純化(Pecosphere，C18，3μm，33×4.6mm柱，在50mM乙酸銨中0％至100％乙腈，緩衝至pH4.5，3.5mL/min)得到2個餾份。第一個餾份含有(4-{4-氨基-7-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-7H-環戊烷並[d]嘧啶-5-基}苯基)甲醇(5mg，5％)；RP-HPLC 6.261分鐘，82％純度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液，緩衝至pH4.5，在20分鐘內，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；m/z(MH+)＝422.1。
第二個餾份中得到N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-5-甲基-1，3-噻唑-2-胺(4mg，3％)；RP-HPLC 8.344分鐘，100％純度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液，緩衝至pH4.5，在20分鐘內，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.59(2H，br t)，1.70(2H，m)，2.07(2H，m)，2.10-2.50(9H，m)，2.16(3H，s)，2.54(3H，s)，3.29(2H，m)，4.47(2H，d)，4.80(1H，m)，6.66(1H，s)，7.49(2H，d)，7.61(2H，d)，7.88(1H，m)，及8.23(1H，s)。 實施例419N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-4-甲基-1，3-噻唑-2-胺用對於5-甲基類所詳述的相同的方法和用量(見上)，製備N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苄基)-4-甲基-1，3-噻唑-2-胺(11mg，8％)；RP-HPLC 8.177分鐘，97％純度(5％至85％乙腈/0.1M醋酸銨水溶液，緩衝至pH4.5，在20分鐘內，1mL/min；λ＝254nm；Deltapak C18，300，5μm，150×3.9mm柱)；1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ1.57(2H，br t)，1.67(2H，m)，2.07(2H，m)，2.10-2.50(9H，m)，2.19(3H，s)，2.54(3H，s)，3.29(2H，m)，4.50(2H，br s)，4.79(1H，m)，6.17(1H，s)，7.50(2H，d)，7.62(2H，d)，7.99(1H，m)，及8.23(1H，s)。
實施例420順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5，7-二氯-1，3-苯並噁唑-2-胺a)2-氨基-6-氯苯酚將2-氯-6-硝基苯酚(1.210g，6.972mmol)的乙醇(50mL)溶液用鐵粉(1.947g，34.86mmol)和濃HCl(3mL)處理。將黃色混合物加熱回流18小時，再冷卻至室溫。將該反應混合物通過硅藻土墊過濾，並將此濾液用飽和碳酸氫鈉水溶液中和。所得灰色混懸液通過硅藻土墊過濾，並將此濾液用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鎂乾燥，過濾，並濃縮得到黑色固體。用庚烷研磨得到2-氨基-6-氯苯酚(0.577g，58％)，為暗棕色固體。RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝7.30min.，91％；m/z 143(MH+)。
b)順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5，7-二氯-1，3-苯並噁唑-2-胺由順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.245mmol)和2-氨基-4，6-二氯苯酚(0.044 g，0.245mmol)以類似於合成順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺(PH4042235)所用的方式來製備。形成此化合物，為米白色固體(0.008g，6％)RP-HPLC(25至100％CH3CN，在0.1N醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝8.93min.，95％；m/z 594(MH+)。
實施例421順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-7-甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺a)2-氨基-4，6-二氯苯酚2-氨基-4，6-二氯苯酚由2，4-二氯-6-硝基苯酚(0.625g，2.40mmol)類似於2-氨基-6-氯苯酚所述的方式來製備。形成此化合物，為黑色固體(0.044g，10％)。RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝9.033min.，74％；m/z 177(MH+)。
b)順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-7-甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺由順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.245mmol)和2-氨基-6-甲基苯酚(0.030g，0.245mmol)以類似於合成順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺(PH4052419F)所用的方式來製備。形成此化合物，為米白色固體(0.018g，14％)RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝7.37min.，85％；m/z 539(MH+)。
實施例422順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-7-氯-1，3-苯並噁唑-2-胺a)2-氨基-6-甲基苯酚2-氨基-6-甲基苯酚由2-甲基-6-硝基苯酚(0.500g，3.26mmol)以類似於2-氨基-6-氯苯酚所述的方式來製備。形成的此化合物為黑色固體(0.030g，8％)。RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝5.78min.，86％；m/z 123(MH+)。
b)順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-7-氯-1，3-苯並噁唑-2-胺由順-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.100g，0.245mmol)和2-氨基-6-氯苯酚(0.053g，0.367mmol)以類似於合成順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4甲基-1，3-苯並噁唑-2-胺(PH4052419F)所用的方式來備。形成此化合物，為米白色固體(0.018g，13％)RP-HPLC(在10分鐘內在0.1N醋酸銨水溶液中25至100％CH3CN，1mL/min，用Hypersil HS C18，100，5μm，250×4.6mm柱)tr＝7.78min.，94％；m/z 558(MH+)。
實施例4232-{4-氨基-3-[4-(1，3-苯並噁唑-2-基氨基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}-3-吡啶甲腈製備2-[4氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯的Suzuki偶聯方法，用來將N-(1，3-苯並噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.052g，0.155mmol)與2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-3-吡啶甲腈(0.045g，0.124mmol)偶聯。通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt10.1-11.2min)得到2-{4-氨基3-[4-(1，3-苯並噁唑-2-基氨基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基}-3吡啶甲腈，為黃色粉末(0.004g，0.009mmol)RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱) Rt8.55min；MS(MH)+446。
實施例424N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-(4-氨基-3-{4-[(5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)丙醯胺用製備4-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丁酸甲酯所描述的酯化方法，將2-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)丙酸乙酯(2.03g，5.62mmol)，製備2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]丙酸乙酯所述的中間體，轉變為相應的甲基酯(1.90g，5.47mmol)RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μHypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt6.88min再將一部分此甲基酯(0.110g，0.32mmol)用N，N-二甲基亞乙基二胺，用製備N1-{4-[4-氨基-1-(2-(4-嗎啉基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-氟苯基}-2，3-二氯-1-苯磺醯胺所用的醯胺形成的方法轉變為仲醯胺RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt3.47min。
用製備2-[4-氨基-3-(4-{[(2，3-二氯苯基)磺醯基]氨基}-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]乙酸乙酯所用的Suzuki偶聯方法，將此仲醯胺(0.12g，0.30mmol)與N-(5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.100g，0.275mmol)偶聯。通過製備HPLC純化產物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt6.3-8.3min)得到N1-[2-(二甲基氨基)乙基]-2-(4-氨基-3-{4-[(5，7-二甲基-1，3-苯並噁唑-2-基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)丙醯胺，為黃色粉末(0.0015g，0.003mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HSC18，250×4.6mm柱)Rt7.60min；MS(MH)+514。
實施例425N-(4-{4-氨基-1-[2-氰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N′-(3-甲基苯基)脲使用與製備N1-(4-{4-氨基-1-[2-氰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-2，3-二氯-1-苯磺醯胺相同的方法，不同的是最後步驟使用製備2-(4-氨基-3-{3-氟-4-[(3-甲苯氨基羰基)氨基]苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)乙酸乙酯所用的脲形成的方法，行2-[4-氨基-3-(4-氨基-3-氟苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-5-(4-甲基哌嗪-1-基)苄腈(0.018g，0.041mmol)與間甲苯基異氰酸酯(0.005mL，0.040mmol)的反應。通過製備HPLC純化產物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt9.3-10.3min)得到N-(4-{4-氨基-1-[2-氰基-4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氟苯基)-N′-(3-甲基苯基)脲，為黃色粉末(0.008g，0.014mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μHypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt8.03min；MS(MH)+577。
實施例426順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6-氯-1，3-苯並噻唑-2-胺在裝備有空氣冷凝器的燒瓶中，將固體4-溴苯胺(1.00g，5.81mmol)和2，6-二氯苯並噻唑(1.18g，5.81mmol)在140℃加熱3天(在幾分鐘內發生融合得到清澈液體，其在3天內固化)。將該反應混合物冷卻至室溫得到N-(4-溴苯基)-N-(6-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)胺(1.97g，5.81mmol)RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt14.65min。
羥基硼酸酯的形成方法將粗品N-(4-溴苯基)-N-(6-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)胺(0.178g，0.525mmol)、雙(頻哪醇合)乙硼烷(0.180g，0.709mmol)、醋酸鉀(0.154g，1.57mmol)和[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)(0.043g，0.053mmol[與二氯甲烷的1∶1複合物])在N，N-二甲基甲醯胺(3mL)中在一個可再密封的Schlenk燒瓶中在90℃下加熱24小時。將此混合物冷卻至室溫，通過硅藻土過濾，並將粗品通過急驟柱色譜在矽膠上純化，用乙酸乙酯/庚烷(1∶3)洗脫得到此羥基硼酸酯中間體N-(6-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺，為白色粉末(0.116g，0.30mmol)RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt15.15min。
Suzuki偶聯的方法將N-(6-氯-1，3-苯並噻唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.116g，0.30mmol)、順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.106g，0.24mmol)和四(三苯基膦)鈀(0)(0.014g，0.012mmol)在乙二醇二甲基醚(3.0mL)中的混合物，碳酸鈉(0.064g，0.60mmol)和水(1.5mL)在密封的Schlenk燒瓶中在90℃加熱24小時。將此混合物冷卻，用水(10mL)稀釋並用甲醇/二氯甲烷(1∶19，3×20mL)萃取。將合併的有機餾份乾燥(硫酸鎂)，過濾，濃縮並通過製備HPLC純化(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt7.8-10.0min)得到順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6氯-1，3-苯並噻唑-2-胺，為黃色粉末(0.036g，0.062mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt8.42min；MS(MH)+574。
實施例427順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6-甲氧基-1，3-苯並噻唑-2-胺用類似於製備順-N2-(4-4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基苯基)-6-氯-1，3-苯並噻唑-2-胺所用的方法，不同的是使用2-氯-6-甲氧基苯並噻唑(0.352g，2.05mmol)，通過製備HPLC純化產物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt6.3-8.3min)得到順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6-甲氧基-1，3-苯並噻唑-2-胺，為白色粉末(0.046g，0.080mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt7.40min；MS(MH)+570。
實施例428順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺將芴基甲基氧基羰基異硫氰酸酯(1.36g，4.84mmol，Kearney，P.C.；Fernandez，M.；Flygare，J.A.J.Org.Chem.1998，63，196-200)的二氯甲烷(40mL)溶液，通過移液管加入到維持在0℃的4-溴苯胺(0.86g，5.00mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中，並將所得混合物室溫下攪拌14小時。將該反應用二氯甲烷(60mL)稀釋並用鹽酸(0.5M，2×10mL)洗滌。將此有機層乾燥(硫酸鎂)，過濾，並濃縮得到9H-9-芴基-甲基-N-[(4-溴苯氨基)硫羰基]氨基甲酸酯(2.25g，4.97mmol)RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt14.25min。
噻唑合成的方法將9H-9-芴基-甲基-N-[(4-溴苯氨基)硫羰基]氨基甲酸酯(0.25g，0.55mmol)溶解於哌啶/N，N-二甲基甲醯胺(1∶6，3.5mL)並將此混合物室溫下攪拌2小時。減壓除去溶劑並將此殘餘物溶解於乙酸(1mL)、乙醇(2mL)和二噁烷(2mL)的混合物中。加入1-溴-2-丁酮(90％，0.11mL，1.10mmol)並將此混合物室溫下攪拌14小時。將該反應混合物用半飽和的碳酸鈉水溶液(15mL)稀釋並用甲醇/二氯甲烷(1∶19，3×20mL)萃取。將合併的有機層乾燥(硫酸鎂)，過濾，濃縮並通過急驟色譜在矽膠上純化，用乙酸乙酯/庚烷(1∶4)洗脫，得到該溴噻唑N-(4-溴苯基)-N-(4-乙基-1，3-噻唑-2-基)胺(0.15g，0.53mmol)RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt13.15min。
用製備N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6-氯-1，3-苯並噻唑-2-胺所述的方法，將上述溴噻唑中間體轉變為羥基硼酸酯，得到該羥基硼酸酯中間體N-(4-乙基-1，3-噻唑-2-基)-N-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]胺(0.158g，0.48mmol)RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μHypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt13.60min。
用製備N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-6-氯-1，3-苯並噻唑-2-胺所述的Suzuki偶聯方法，將該羥基硼酸酯中間體(0.15g，0.45mmol)與順-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.182g，0.41mmol)偶聯。通過製備HPLC純化產物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μHypersil HS C18，250×21mm柱，Rt7.0-8.0min)得到順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺，為米白色粉末(0.069g，0.133mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt7.05min；MS(MH)+518。
實施例429順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4，5-二甲基-1，3-噻唑-2-胺使用製備順-N2(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺所述的噻唑合成的方法，不同的是將3-溴-2-丁酮(0.183g，1.21mmol)用作烷基化試劑，而烷基化反應在40℃下進行2 4小時。通過製備HPLC純化產物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt6.7-7.7min)得到順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4，5-二甲基-1，3-噻唑-2-胺，為米白色粉末(0.069g，0.133mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt6.83min；MS(MH)+518。
實施例430順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-苯基-1，3-噻唑-2-胺使用製備順-N2(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺所描述的噻唑合成方法，不同的是將2-溴苯乙酮(0.131g，0.66mmol)用作烷基化試劑。通過製備HPLC純化產物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt8.7-9.8min)得到順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-苯基-1，3-噻唑-2-胺，為黃色粉末(0.036g，0.064mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt8.22min；MS(MH)+566。
實施例431順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-(4-甲基苯基)-1，3-噻唑-2-胺使用製備順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺所述的噻唑合成方法，不同的是用2-溴-4′-甲基苯乙酮(0.118g，0.554mmol)作為烷基化試劑。通過製備HPLC純化產物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt9.1-10.7min)得到順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-(4-甲基苯基)-1，3-噻唑-2-胺，為米白色粉末(0.022g，0.038mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt8.88min；MS(MH)+580。
實施例432順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-甲基-4-苯基-1，3-噻唑-2-胺使用製備順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-4-乙基-1，3-噻唑-2-胺所述的噻唑合成方法，不同的是用2-溴苯基丙基酮(0.081ml，0.532mmol)作為烷基化試劑。烷基化反應在50℃進行24小時。通過製備HPLC純化產物(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在20分鐘內，21mL/min，用8μ Hypersil HS C18，250×21mm柱，Rt9.1-10.3min)得到順-N2-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-5-甲基-4-苯基-1，3-噻唑-2-胺，為米白色粉末(0.015g，0.026mmol)；RP-HPLC(25至100％乙腈，在0.1M醋酸銨水溶液中，在10分鐘內，1mL/min，用5μ Hypersil HS C18，250×4.6mm柱)Rt8.67min；MS(MH)+580。
實施例433N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽(3R)-3-苯基丁醯氯將R-3-苯基丁酸(0.755g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液用草醯氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將此反應混合物在室溫下氮氣氛下搖動15小時。將該反應混合物搖動15小時。減壓除去溶劑並高真空下乾燥，得到定量的(3R)-3-苯基丁醯基氯。將此油狀物直接用於以下的反應。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用(3R)-3-苯基丁醯基氯(0.420g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌20分鐘，然後除去乾冰/丙酮浴並在室溫、氮氣氛下攪拌。將(3R)-3-苯基丁醯基氯(0.210g，1.15mmol)加入到該反應混合物並攪拌2小時。加入氫氧化鈉(1N)溶液(10mL)並攪拌過夜。減壓除去有機溶劑，並加入二氯甲烷(20mL)。分層，並將水層用二氯甲烷(125mL)萃取。將合併的有機層用水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓除去溶劑。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷中的15％(含2％氫氧化銨甲醇)(10min)、存在於二氯甲烷中的20％(含2％氫氧化銨的甲醇)(15min)、存在於二氯甲烷中的50％(含2％氫氧化銨的甲醇)(7min)洗脫，得到0.378g(57％)純N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺(0.378g，0.649mmol)的乙酸乙酯溫溶液，用馬來酸(0.226g，1.95mmol)的乙酸乙酯溫溶液處理。在氮氣氛下過濾此沉澱並凍幹得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.200(s，1H)，8.263(s，1H)，8.1747-8.1543(d，1H，J＝8.16Hz)，7.312-7.282(m，4H)，7.235-7.232(s，1H)，7.211-7.168(m，2H)，6.114(s，6H)，5.061(m，1H)，3.890(s，3H)，3.301(m，4H)，2.997(m，2H)，2.783-2.741(m，6H)，2.541(m，8H)，2.261-2.185(m，4H)，1.879(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)Rt2.64min(100％)。
實施例434N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺三馬來酸鹽苯並[b]呋喃-2-羰基氯將2-苯並呋喃甲酸(0.746g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)懸浮液用草醯氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將該反應混合物搖動15小時。減壓除去溶劑並高真空下乾燥，得到定量的苯並[b]呋喃-2-羰基氯。將此油狀物直接用於以下的反應。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺三馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用苯並[b]呋喃-2-羰基氯(0.415g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌20分鐘，然後除去乾冰/丙酮浴並在室溫下氮氣氛下攪拌。將苯並[b]呋喃-2-羰基氯(0.207g，1.15mmol)加入到該反應混合物並攪拌2小時。加入氫氧化鈉(1N)溶液(10mL)並攪拌過夜。減壓除去有機溶劑，並加入二氯甲烷(20mL)。分層，並將水層用二氯甲烷(125mL)萃取。合併的有機層用水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓除去溶劑。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷的15％(含2％氫氧化銨的甲醇)(10min)、存在於二氯甲烷的20％(含2％氫氧化銨的甲醇)(15min)、存在於二氯甲烷的50％(含2％氫氧化銨的甲醇)(7min)洗脫，得到0.143g(21％)純N1-(4-{4-氨基1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺(0.143g，0.246mmol)的乙酸乙酯溫溶液用馬來酸(0.086g，0.739)的乙酸乙酯溫溶液處理。在氮氣氛下過濾此沉澱並凍幹得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-甲氧基苯基)-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.518(s，1H)，8.282(s，1H)，8.2652-8.2447(d，1H，J＝8.2Hz)，7.849-7.814(m，2H)，7.7813-7.7603(d，1H，J＝8.4Hz)，7.562-7.523(m，1H)，7.418-7.369(m，2H)，7.338-7.313(m，1H)，6.088(s，5H)，5.10-5.00(m，1H)，4.003(s，3H)，3.529(m，4H)，3.314(m，2H)，2.971(m，2H)，2.778(s，3H)，2.497(m，3H)，2.209(m，4H)，1.909(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)Rt2.73min(100％)。
實施例435N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽(3S)-3-苯基丁醯基氯將S-3-苯基丁酸(0.755g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液用草醯氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將該反應混合物在室溫、氮氣氛下搖動15小時。將該反應混合物搖動15小時。減壓除去溶劑並高真空下乾燥，得到定量的(3S)-3-苯基丁醯基氯。此油狀物直接用於以下的反應。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用(3S)-3-苯基丁醯基氯(0.420g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌20分鐘，然後除去乾冰/丙酮浴並在室溫、氮氣氛下攪拌。將(3S)-3-苯基丁醯基氯(0.210g，1.15mmol)加入到該反應混合物並攪拌2小時。加入氫氧化鈉(1N)溶液(10mL)並攪拌過夜。減壓除去有機溶劑，並加入二氯甲烷(20mL)。分層，並將水層用二氯甲烷(125mL)萃取。合併的有機層用水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓除去溶劑。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷的15％(含2％氫氧化銨的甲醇)(10min)、存在於二氯甲烷的20％(含2％氫氧化銨的甲醇)(15min)、存在於二氯甲烷的50％(含2％氫氧化銨的甲醇)(7min)洗脫，得到0.455g(68％)純N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺(0.455g，0.782mmol)的乙酸乙酯溫溶液用馬來酸(0.272g，2.35)的乙酸乙酯溫溶液處理。在氮氣氛下過濾此沉澱並凍幹得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.199(s，1H)，8.261(s，1H)，8.1733-8.1528(d，1H，J＝8.2Hz)，7.312-7.282(m，4H)，7.236-7.232(m，1H)，7.211-7.168(m，2H)，6.094(s，6H)，5.046(m，1H)，3.890(s，3H)，3.534(m，4H)，2.994(m，2H)，2.784-2.740(m，6H)，2.506-2.470(m，8H)，2.442-2.200(m，4H)，1.855(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)Rt2.64min(100％)。
實施例436N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶將3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.00g，7.66mmol)在二甲基甲醯胺(40mL)中的懸浮液用碳酸銫(3.74g，11.49mmol)和對氟硝基苯(1.08g，7.66mmol)處理。將該反應混合物在80℃下在氮氣氛下攪拌5小時。將該反應混合物加入到冰中。過濾此沉澱並用水洗滌。將產物4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶凍幹過夜得到2.55g(87％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.4952-8.4720(m，2H)，8.4142-8.3654(m，3H)；LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)tR＝3.73min(100％)M+380.6.
N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯將4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(0.500g，1.31mmol)在二甲基甲醯胺(8mL)中的懸浮液，用N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(0.915g，2.62mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.091g，0.06mmol)及碳酸鈉(0.333g，3.14mmol)的水(4mL)溶液進行處理。將該反應混合物在85℃下在氮氣氛下攪拌26小時。將水加入到該反應混合物。過濾此沉澱並用水洗滌。將此固體用乙醚研磨，得到0.431g(63％)的N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.6862-8.6634(d，2H，J＝9.12Hz)，8.4897-8.4423(m，3H)，8.1117(s，1H)，8.0074-7.9872(d，1H，J＝8.08Hz)，7.3743-7.3293(m，2H)，3.9189(s，3H)，1.4959(s，9H)；LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)tR＝4.38min M+478.1。
實施例4374-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶將N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(0.386g，0.808mmol)的二氯甲烷(8mL)懸浮液，在0℃下用三氟乙酸(1.6mL)處理。將該反應混合物在0℃下攪拌20分鐘，然後除去冰浴，在室溫、氮氣氛下攪拌。將該反應混合物攪拌18小時。減壓除去溶劑。將二氯甲烷(15mL)和氫氧化鈉1N溶液加入到此油狀物殘餘物。將所形成的沉澱過濾並凍幹過夜得到0.286g(94％)的4氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.7826-8.759(m，2H)，8.4892-8.4296(m，3H)，7.1861-7.1338(m，2H)，6.8320-6.8121(d，1H，J＝7.96Hz)，5.2225(s，2H)，3.8672(s，3H)；LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)tR＝3.48min M+377.6。
實施例438N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯將1-甲基吲哚基-2-甲酸(0.805g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)的懸浮液用草醯氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將該反應混合物搖動18小時。減壓除去溶劑並高真空下乾燥，得到定量的1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯。此油狀物直接用於以下的反應。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液在-5℃下用1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯(0.445g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌20分鐘，然後除去乾冰/丙酮浴並在室溫下氮氣氛下攪拌。將1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯(0.221g，1.15mmol)加入到該反應混合物並攪拌2小時。加入氫氧化鈉(1N)溶液(10mL)並攪拌過夜。減壓除去有機溶劑，並加入二氯甲烷(20mL)。分層，並將水層用二氯甲烷(125mL)萃取。合併的有機層用水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓除去溶劑。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷的15％(含2％氫氧化銨的甲醇)(10min)、存在於二氯甲烷的20％(含2％氫氧化銨的甲醇)(15min)、存在於二氯甲烷的50％(含2％氫氧化銨的甲醇)(7min)洗脫，得到0.463g(68％)純N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H 2-吲哚基甲醯胺(0.463g，0.781mmol)的乙酸乙酯溫溶液用馬來酸(0.272，2.34mmol)的乙酸乙酯溫溶液處理。在氮氣氛下過濾此沉澱，並凍幹得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.4495(s，1H)，8.2848(s，1H)，8.1505-8.1301(d，1H，J＝8.16Hz)，7.7232-7.7034(d，1H，J＝7.92Hz)，7.6054-7.5844(d，1H，J＝8.4Hz)，7.3583-7.3012(m，4H)，7.1778-7.1406(m，1H)，6.0804(s，4H)，5.10-5.00(m，1H)，4.0403(s，3H)，3.9614(s，3H)，3.5336(m，4H)，3.1879(m，2H)，2.9937(m，2H)，2.7836(s，3H)，2.4979(m，3H)，2.2157(m，4H)，1.8513(m，2H)；HPLC Perkin Elmer，PecosphereC18，3μM，33×4.6mm，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)Rt2.76min(100％)。
實施例439N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽1H-2-吲哚基羰基氯將吲哚基-2-甲酸(0.742g，4.6mmol)在二氯甲烷(3mL)中的懸浮液用草醯氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將該反應混合物搖動18小時。減壓除去溶劑並高真空下乾燥，得到定量的1H-2-吲哚基羰基氯。此油狀物直接用於以下的反應。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用1H-2-吲哚基羰基氯(0.413g，2.3mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌20分鐘。除去乾冰/丙酮浴並將該反應混合物在氮氣氛下攪拌18小時。加入1H-2-吲哚基羰基氯(0.207g，1.15mmol)並再攪拌2小時。加入氫氧化鈉(1N)溶液(10mL)並攪拌30分鐘。減壓除去有機溶劑，並加入二氯甲烷(25mL)。分層，並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，並在減壓下得到粗品N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷的15％(含2％氫氧化銨的甲醇)洗脫還是得到粗品。第二次過柱用梯度10％(含2％氫氧化銨的甲醇)至50％(含2％氫氧化銨的甲醇)洗脫，得到0.139g(21％)純N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺(0.139g，0.24mmol)在溫乙酸乙酯中用馬來酸(0.083g，0.719mmol)的乙酸乙酯溫溶液處理。在氮氣氛下過濾所形成的沉澱得到0.166g的N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.83(s，1H)，9.442(s，1H)，8.283(s，1H)，8.154-8.134(d，1H，J＝8.12Hz)，7.694-7.674(d，1H，J＝8.04Hz)，7.498-7.477(d，1H，J＝8.20Hz)，7.407-7.402(m，1H)，7.352-7.325(m，2H)，7.267-7.229(m，1H)，7.112-7.074(m，1H)，6.078(s，4H)，5.10-5.00(m，1H)，3.974(s，3H)，3.525(m，4H)，3.178(m，2H)，2.975(m，2H)，2.771(s，3H)，2.457(s，3H)，2.208(m，4H)，1.909(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)Rt2.67min(100％)。
實施例4403-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.0g，11.5mmol)在二甲基甲醯胺(50mL)中的懸浮液用碳酸銫(5.62g，17.25mmol)和三苯基甲基氯(3.85g，13.8mmol)處理。將該反應混合物在70℃下在氮氣氛下攪拌22.5小時。將碳酸銫(3.75g，11.5mmol)和三苯基甲基氯(3.2g，11.5mmol)加入到該反應混合物並攪拌6.5小時。將該反應混合物加入到冰水中。過濾此沉澱並用水洗滌。將產物3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺凍幹過夜。所得固體用乙酸乙酯研磨得到3.05g(53％)的3-碘1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.3190-7.1106(m，16H)；TLC(Baker Pre-coated Hard Layer矽膠TLC板，Si250F254，30％乙酸乙酯在庚烷中)Rf＝0.33。
3-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.0g，1.99mmol)的二甲基甲醯胺(20mL)溶液用苯基羥基代硼酸(0.485g，3.8mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.138g，0.119mmol)及碳酸鈉(0.506g，4.78mmol)的水(10mL)溶液處理。將該反應混合物在80℃下在氮氣氛下攪拌18.5小時。將該反應混合物冷卻至室溫並加入水(15mL)。過濾此沉澱並用水洗滌。粗品固體用乙醚研磨(30mL)。將所得固體凍幹過夜，得到0.407g(45％)的3-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.9416(s，1H)，7.6190-7.6011(m，2H)，7.5369-7.4493(m，3H)，7.3995-7.2248(m，15H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt＝11.813min(97％)。
實施例441N1-{4-[4-氨基-1-(4-氧代環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(3R)-3-苯基丁醯胺在-10℃下將存在於二氯甲烷(10mL)中的(3R)-3-苯基丁醯基氯(2.22g，12.18mmol)加入到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(2.86g，8.12mmol)的吡啶(50mL)溶液中。15分鐘後，除去冰水浴並將此反應混合物室溫下攪拌過夜。加入氫氧化鈉(1.0N，15mL)並蒸發有機溶劑。將此水殘餘物用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。將此殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作為流動相，得到N1-{4-[4-氨基-1-(4-氧代環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(3R)-3-苯基丁醯胺(3.11g，77％)。1H NMR(CDCl3)δ1.40(d，J＝6.97Hz，3H)，2.04(m，1H)，2.59-2.78(m，9H)，3.40(m，1H)，3.98(s，3H)，5.28(m，1H)，5.70(bs，2H)，7.15-7.35(m，7H)，7.66(s，1H)，8.38(s，1H)，8.51(d，J＝8.18，1H)。HPLC(Waters Alliance-柱Symmetry ShieldRP183.5μm，2.1×50mm；洗脫劑5％B/A至95％B/A，9.0分鐘(B乙腈，A100mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.5mL/min)Rt＝6.273min。
實施例442{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇a)4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛將3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.0g，6.59mmol)與4-氟苯甲醛(1.06mL，9.89mmol)、碳酸銫(4.30g，13.19mmol)在DMF(6mL)中混合。將此反應混合物在86℃下加熱過夜。冷卻至室溫後，將此反應混合物倒入到冰水上。過濾收集此固體得到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(2.46g，92％)。1H NMR(CDCl3)δ7.19(m，5H)，7.46(m，2H)，7.78(d，J＝8.64Hz，2H)，8.10(d，J＝8.70Hz，2H)，8.44(s，1H)，8.59(d，J＝8.70Hz，2H)，10.03(s，1H)。
b){4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇將硼氫化鈉(19mg，0.491mmol)加入到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(100mg，0.245mmol)的甲醇(2mL)溶液中。16小時後，加入THF(1mL)和硼氫化鈉(19mg，0.491mmol)。5小時後，除去溶劑並加入水。將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用乙酸乙酯/二氯甲烷(80∶20至100∶0)作為流動相，得到{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇(36mg，36％)。1H NMR(DMSO-d6)δ4.56(s，2H)，5.27(bs，1H)，7.16(m，5H)，7.47(m，4H)，7.76(d，J＝8.64Hz，2H)，8.18(d，J＝8.52，2H)，8.37(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA singleQuad MS，Finnigan HPLC-柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝410.1，Rt＝2.43min。
實施例4431-{4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將三乙醯氧基硼氫化鈉(67mg，0.319mmol)加入到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(100mg，0.245mmol)、4-甲基哌嗪(37mg，0.369mmol)、冰醋酸(35mg，0.589mmol)在二氯乙烷(4mL)中的混合物中。室溫下攪拌過夜後，再加入三乙醯氧基硼氫化鈉(67mg，0.319mmol)並將該反應混合物攪拌過夜。加入水(2mL)，接著加入碳酸氫鈉(250mg)。劇烈攪拌1小時後，分層並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(97∶3 to 80∶20)作為流動相，得到1-{4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(25mg，21％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，3H)，2.48(bm，8H)，3.56(s，3H)，5.75(bs，2H)，7.11(d，J＝8.50，2H)，7.18(m，3H)，7.40(m，2H)，7.48(d，J＝8.50Hz，2H)，7.29(d，J＝8.63Hz，2H)，8.12(d，J＝8.50Hz，2H)，8.47(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA single Quad MS，Finnigan HPLC柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A，在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝492.2，Rt＝2.97min。
實施例444N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯a)1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯在0℃下將叔丁醇鉀(1.0N在THF中，38mL，38mmol)加入到存在於THF(30mL)的甲醇(1.54mL，38.0mmol)中。30分鐘後，在-78℃下將此絮狀溶液通過導管加入到1-溴-2，5-二氟-4-硝基苯(9.04g，38.0mmol)的THF(27mL)溶液中。30分鐘後，除去冷卻浴並將該反應混合物升溫至0℃。加入水(250mL)，並在10分鐘後，除去有機溶劑。過濾收集固體得到1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯(9.28g，98％)。1H NMR(CDCl3)δ3.97(s，3H)，7.30(d，J＝5.48Hz，2H)，7.71(d，J＝7.58Hz，2H)。
b)4-溴-5-氟-2-甲氧基苯胺在80℃下，分三批，將亞硫酸氫鈉(14.7g，84.4mmol)加入到1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯(9.28g，37.12mmol)在乙醇(180mL)和水(130mL)中的溶液中。5小時後除去有機溶劑並通過過濾收集水層中的固體。將此固體進一步用庚烷/乙酸乙酯(3∶2，400mL)洗滌。將濾液蒸發得到4-溴-5-氟-2-甲氧基苯胺(3.29g，40％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.75(s，3H)，5.22(s，2H)，6.56(d，J＝10.68Hz，2H)，6.94(d，J＝6.57Hz，2H)。
c)N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯將二-叔丁基二碳酸酯(3.42g，15.70mmol)與4-溴-5-氟-2-甲氧基苯胺(3.29g，14.95mmol)在THF(30mL)中混合。將該反應混合物在65℃下加熱3天，每天加入二碳酸二叔丁基酯(3.42g，15.70mmol)。除去溶劑後，將殘餘物通過急驟柱色譜純化，用庚烷/乙酸乙酯(95∶5至85∶15)作為流動相，得到所需產物N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯和二碳酸二叔丁基酯的混合物(10.4g)。在0℃下將氫氧化鈉(50％溶液，2.0mL)加入到存在於甲醇(30mL)中的此混合物中，並將該反應混合物室溫下攪拌過夜。除去溶劑後，加入水並將水層用庚烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.24g，89％)。1H NMR(CDCl3)δ1.52(s，9H)，3.85(s，3H)，6.93(d，J＝6.10Hz，1H)，7.06(s，1H)，8.01(d，J＝10.4Hz，1H)。
d)N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯將N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.24g，13.26mmol)、乙硼烷頻哪醇酯(4.04g，15.91mmol)、醋酸鉀(3.90g，39.78mmol)和[1，1′-雙(二苯基膦基)-二茂鐵)二氯鈀(II)與二氯甲烷的複合物(0.32g，0.40mmol)在DMF(75mL)中，在85℃下加熱過夜。加入乙硼烷頻哪醇酯(2.02g，7.96mmol)和[1，1』-雙(二苯基膦基)-二茂鐵)二氯鈀(II)與二氯甲烷的複合物(0.32g，0.40mmol)，並再繼續加熱5小時。除去溶劑後，將此黑色殘餘物溶解於二氯甲烷，並通過硅藻土過濾。將粗品混合物通過急驟柱色譜純化，用庚烷/乙酸乙酯(95∶5至85∶15)作為流動相，得到N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯和乙硼烷頻哪醇酯(1∶1，4.23g)的混合物，其不經進一步純化，直接用於下一步反應。
e)反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯將反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.60g，1.36mmol)、N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(1.0g，2.72mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.094g，0.082mmol)和碳酸鈉(0.35g，3.27mmol)與乙二醇二甲醚(14mL)和水(7mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5 to 70∶30)作為流動相，得到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(0.264g，35％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(s，9H)，1.97(m，6H)，2.16(s，3H)，2.33(m，5H)，2.53(m，4H)，3.84(s，3H)，4.64(m，1H)，7.60(d，J＝6.78Hz，1H)，7.83(d，J＝11.96Hz，1H)，8.20(s，1H)，8.24(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA single QuadMS，Finnigan HPLC-柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝555.3，Rt＝2.00min。
實施例445
反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺在0℃下將三氟乙酸/二氯甲烷的混合物(20∶80，7mL)加入到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(250mg，0.451mmol)的二氯甲烷(4.0mL)溶液中。15分鐘後，除去冰浴並將該反應混合物室溫下攪拌4小時。再蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷。加入飽和碳酸氫鈉以調節pH至8。分層並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(179mg，87％)。1H NMR(CDCl3)δ1.56(m，2H)，2.15(m，7H)，2.31(s，3H)，2.51(m，4H)，2.67(m，4H)，3.88(s，3H)，4.16(bs，2H)，4.74(m，1H)，5.64(bs，2H)，6.56(d，J＝10.84Hz，1H)，6.88(d，J＝6.55Hz，1H)，8.33(s，1H)。LCMS(ThermoquestAQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝455.2，Rt＝0.63min。
實施例446反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)-反-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺在0℃下將存在於二氯甲烷(0.3mL)中的反-2-苯基-1-環丙烷羰基氯(32mg，0.176mmol)加入到反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(80mg，0.176mmol)的吡啶(1.5mL)溶液中。5分鐘後，除去冰水浴並將該反應混合物室溫下攪拌3小時。再加入反-2-苯基-1-環丙烷羰基氯(32mg，0.176mmol)以保證此反應進行完全。蒸發溶劑並將此殘餘物通過急驟柱色譜純化得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺(93mg，88％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.35(m，1H)，1.50(m，3H)，1.98(m，6H)，2.19(s，3H)，2.37-2.68(m，11H)，3.87(s，3H)，4.64(m，1H)，7.09(m，1H)，7.21(m，3H)，7.31(m，2H)，8.21(m，2H)，9.82(m，1H)。LCMS(ThermoquestAQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝599.3，Rt＝1.97min。
實施例447N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯a)3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.5g，1.45mmol)、甲醛(30％在水中，0.16mL，1.60mmol)和三乙醯氧基硼氫化鈉(0.43g，2.03mmol)在二氯乙烷(5mL)中混合。4小時後，加入飽和碳酸氫鈉，接著加入氫氧化鈉(1.0N)以使pH為10。水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.275g，53％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.85(m，2H)，2.09(m，4H)，2.22(s，3H)，2.88(m，2H)，4.75(m，1H)，8.19(s，1H)，8.32(s，1H)。
b)N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯將3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(270mg，0.754mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(290mg，0.829mmol)、四(三苯基膦)鈀(52mg，0.045mmol)和碳酸鈉(192mg，1.81mmol)與乙二醇二甲醚(8mL)和水(4mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(90∶10 to 70∶30)作為流動相，得到N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯(250mg，73％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(s，9H)，1.88(m，2H)，2.10(m，2H)，2.24(m，5H)，2.92(m，2H)，3.69(s，3H)，4.64(m，1H)，7.21(m，2H)，7.91(d，J＝8.16Hz，1H)，8.04(s，1H)，8.23(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQAsingle Quad MS，Finnigan HPLC-柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝454.2，Rt＝1.67min。
實施例448N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽(3R)-3-苯基丁醯基氯將R-3-苯基丁酸(0.755g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液用草醯氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將該反應混合物在室溫、氮氣氛下搖動15小時。該反應混合物搖動15小時。減壓除去溶劑並高真空下乾燥，得到定量的(3R)-3-苯基丁醯基氯。此油狀物直接用於以下的反應。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用(3R)-3-苯基丁醯基氯(0.420g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌20分鐘，然後除去乾冰/丙酮浴並在室溫、氮氣氛下攪拌。將(3R)-3-苯基丁醯基氯(0.210g，1.15mmol)加入到該反應混合物中並攪拌2小時。加入氫氧化鈉(1N)溶液(10mL)並攪拌過夜。減壓除去有機溶劑，並加入二氯甲烷(20mL)。分層，並將水層用二氯甲烷(125mL)萃取。合併的有機層用水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓除去溶劑。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷的15％(含2％氫氧化銨的甲醇)(10min)、存在於二氯甲烷的20％(含2％氫氧化銨的甲醇)(15min)、存在於二氯甲烷的50％(含2％氫氧化銨的甲醇)(7min)洗脫，得到0.378g(57％)純N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺(0.378g，0.649mmol)的乙酸乙酯溫溶液用馬來酸(0.226g，1.95mmol)的乙酸乙酯溫溶液處理。在氮氣氛下過濾此沉澱並凍幹得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3R)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.200(s，1H)，8.263(s，1H)，8.1747-8.1543(d，1H，J＝8.16Hz)，7.312-7.282(m，4H)，7.235-7.232(s，1H)，7.211-7.168(m，2H)，6.114(s，6H)，5.061(m，1H)，3.890(s，3H)，3.301(m，4H)，2.997(m，2H)，2.783-2.741(m，6H)，2.541(m，8H)，2.261-2.185(m，4H)，1.879(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)Rt2.64min(100％)。
實施例449N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺三馬來酸鹽苯並[b]呋喃-2-羰基氯將2-苯並呋喃甲酸(0.746g，4.6mmol)在二氯甲烷(3mL)中的懸浮液用草醯氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將該反應混合物搖動15小時。減壓除去溶劑並高真空下乾燥，得到定量的苯並[b]呋喃-2-羰基氯。此油狀物直接用於以下的反應。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺三馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液在-5℃下用苯並[b]呋喃-2-羰基氯(0.415g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌20分鐘，然後除去乾冰/丙酮浴並在室溫下氮氣氛下攪拌。將苯並[b]呋喃-2-羰基氯(0.207g，1.15mmol)加入到該反應混合物並攪拌2小時。加入氫氧化鈉(1N)溶液(10mL)並攪拌過夜。減壓除去有機溶劑，並加入二氯甲烷(20mL)。分層，並將水層用二氯甲烷(125mL)萃取。合併的有機層用水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓除去溶劑。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷的15％(含2％氫氧化銨的甲醇)(10min)、存在於二氯甲烷的20％(含2％氫氧化銨的甲醇)(15min)、存在於二氯甲烷的50％(含2％氫氧化銨的甲醇)(7min)洗脫，得到0.143g(21％)純N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺(0.143g，0.246mmol)的乙酸乙酯溫溶液用馬來酸(0.086g，0.739)的乙酸乙酯溫溶液處理。在氮氣氛下過濾此沉澱並凍幹得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-苯並[b]呋喃-2-甲醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.518(s，1H)，8.282(s，1H)，8.2652-8.2447(d，1H，J＝8.2Hz)，7.849-7.814(m，2H)，7.7813-7.7603(d，1H，J＝8.4Hz)，7.562-7.523(m，1H)，7.418-7.369(m，2H)，7.338-7.313(m，1H)，6.088(s，5H)，5.10-5.00(m，1H)，4.003(s，3H)，3.529(m，4H)，3.314(m，2H)，2.971(m，2H)，2.778(s，3H)，2.497(m，3H)，2.209(m，4H)，1.909(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)Rt2.73min(100％)。
實施例450N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽(3S)-3-苯基丁醯基氯將S-3-苯基丁酸(0.755g，4.6mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液用草醯氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將該反應混合物在室溫、氮氣氛下搖動15小時。該反應混合物搖動15小時。減壓除去溶劑並高真空下乾燥，得到定量的(3S)-3-苯基丁醯基氯。此油狀物直接用於以下的反應。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用(3S)-3-苯基丁醯基氯(0.420g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌20分鐘，然後除去乾冰/丙酮浴並在室溫、氮氣氛下攪拌。將(3S)-3-苯基丁醯基氯(0.210g，1.15mmol)加入到該反應混合物並攪拌2小時。加入氫氧化鈉(1N)溶液(10mL)並攪拌過夜。減壓除去有機溶劑，並加入二氯甲烷(20mL)。分層，並將水層用二氯甲烷(125mL)萃取。合併的有機層用水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓除去溶劑。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷的15％(含2％氫氧化銨的甲醇)(10min)、存在於二氯甲烷的20％(含2％氫氧化銨的甲醇)(15min)、存在於二氯甲烷的50％(含2％氫氧化銨的甲醇)(7min)洗脫，得到0.455g(68％)純N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺(0.455g，0.782mmol)的乙酸乙酯溫溶液用馬來酸(0.272g，2.35)的乙酸乙酯的溫溶液處理。在氮氣氛下過濾此沉澱並凍幹得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(3S)-3-苯基丁醯胺三馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.199(s，1H)，8.261(s，1H)，8.1733-8.1528(d，1H，J＝8.2Hz)，7.312-7.282(m，4H)，7.236-7.232(m，1H)，7.211-7.168(m，2H)，6.094(s，6H)，5.046(m，1H)，3.890(s，3H)，3.534(m，4H)，2.994(m，2H)，2.784-2.740(m，6H)，2.506-2.470(m，8H)，2.442-2.200(m，4H)，1.855(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecospher C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)Rt2.64min(100％)。
實施例451N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯
4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶將3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.00g，7.66mmol)在二甲基甲醯胺(40mL)中的懸浮液，用碳酸銫(3.74g，11.49mmol)和對氟硝基苯(1.08g，7.66mmol)處理。將該反應混合物在80℃下氮氣氛下攪拌5小時。將此反應混合物加入到冰中。濾出沉澱並用水洗滌。將產物4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶凍幹過夜，得到2.55g(87％)。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.4952-8.4720(m，2H)，8.4142-8.3654(m，3H)；LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)tR＝3.73min(100％)M+380.6。
N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯將4-氨基-1-[4-硝基苯基]-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶(0.500g，1.31mmol)在二甲基甲醯胺(8mL)中的懸浮液，用N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(0.915g，2.62mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.091g，0.06mmol)及碳酸鈉(0.333g，3.14mmol)的水(4mL)溶液處理。將該反應混合物在85℃下在氮氣氛下攪拌26小時。將水加入到此反應混合物中。過濾此沉澱並用水洗滌。將此固體用乙醚研磨得到0.431g(63％)的N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.6862-8.6634(d，2H，J＝9.12Hz)，8.4897-8.4423(m，3H)，8.1117(s，1H)，8.0074-7.9872(d，1H，J＝8.08Hz)，7.3743-7.3293(m，2H)，3.9189(s，3H)，1.4959(s，9H)；LCMS(Perkin Elmer，PecosphereC18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)tR＝4.38min M+478.1。
實施例4524-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶將N-(4-{4-氨基-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(0.386g，0.808mmol)在二氯甲烷(8mL)中的懸浮液，在0℃下用三氟乙酸(1.6mL)處理。該反應混合物在0℃下攪拌20分鐘，然後除去冰浴，在室溫、氮氣氛下攪拌。將該反應混合物攪拌18小時。減壓除去溶劑。將二氯甲烷(15mL)和氫氧化鈉1N溶液加入到此油狀物殘餘物。將所形成的沉澱過濾並凍幹過夜得到0.286g(94％)的4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-硝基苯基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.7826-8.759(m，2H)，8.4892-8.4296(m，3H)，7.1861-7.1338(m，2H)，6.8320-6.8121(d，1H，J＝7.96Hz)，5.2225(s，2H)，3.8672(s，3H)；LCMS(Perkin Elmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)tR＝3.48min M+377.6。
實施例453N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯將1-甲基吲哚基-2-甲酸(0.805g，4.6mmol)在二氯甲烷(3mL)的懸浮液，用草醯氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將該反應混合物搖動18小時。減壓除去溶劑並高真空下乾燥，得到定量的1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯。此油狀物直接用於以下的反應。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯(0.445g，2.3mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌20分鐘，然後除去乾冰/丙酮浴並在室溫下氮氣氛下攪拌。將1-甲基-1H-2-吲哚基羰基氯(0.221g，1.15mmol)加入到該反應混合物並攪拌2小時。加入氫氧化鈉(1N)溶液(10mL)並攪拌過夜。減壓除去有機溶劑，並加入二氯甲烷(20mL)。分層，並將水層用二氯甲烷(125mL)萃取。合併的有機層用水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並減壓除去溶劑。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷的15％(含2％氫氧化銨的甲醇)(10min)、存在於二氯甲烷的20％(含2％氫氧化銨的甲醇)(15min)、存在於二氯甲烷的50％(含2％氫氧化銨的甲醇)(7min)洗脫，得到0.463g(68％)純N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺(0.463g，0.781mmol)的乙酸乙酯溫溶液用馬來酸(0.272，2.34mmol)的乙酸乙酯溫溶液處理。在氮氣氛下過濾此沉澱，並凍幹得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1-甲基-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.4495(s，1H)，8.2848(s，1H)，8.1505-8.1301(d，1H，J＝8.16Hz)，7.7232-7.7034(d，1H，J＝7.92Hz)，7.6054-7.5844(d，1H，J＝8.4Hz)，7.3583-7.3012(m，4H)，7.1778-7.1406(m，1H)，6.0804(s，4H)，5.10-5.00(m，1H)，4.0403(s，3H)，3.9614(s，3H)，3.5336(m，4H)，3.1879(m，2H)，2.9937(m，2H)，2.7836(s，3H)，2.4979(m，3H)，2.2157(m，4H)，1.8513(m，2H)；HPLC Perkin Elmer Pecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(Perkin Elmer，PecosphereC18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)Rt2.76min(100％)。
實施例454
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽1H-2-吲哚基羰基氯將吲哚基-2-甲酸(0.742g，4.6mmol)在二氯甲烷(3mL)的懸浮液，用草醯氯(0.700g，5.52mmol)和1滴二甲基甲醯胺處理。將該反應混合物搖動18小時。減壓除去溶劑並高真空下乾燥，得到定量的1H-2-吲哚基羰基氯。此油狀物直接用於以下的反應。
N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽將3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.500g，1.15mmol)的吡啶(8mL)溶液，在-5℃下用1H-2-吲哚基羰基氯(0.413g，2.3mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液處理。將該反應混合物在-5℃下攪拌20分鐘。除去乾冰/丙酮浴並將該反應混合物在氮氣氛下攪拌18小時。加入1H-2-吲哚基羰基氯(0.207g，1.15mmol)並再攪拌2小時。加入氫氧化鈉(1N)溶液(10mL)並攪拌30分鐘。減壓除去有機溶劑，並加入二氯甲烷(25mL)。分層，並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾，並在減壓下得到粗品N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺在矽膠上通過急驟色譜純化，用存在於二氯甲烷的15％(含2％氫氧化銨的甲醇)洗脫仍得到粗品。第二此過柱用梯度10％(含2％氫氧化銨的甲醇)至50％(含2％氫氧化銨的甲醇)洗脫，得到0.139g(21％)純N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺。將N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺(0.139g，0.24mmol)在溫乙酸乙酯中用馬來酸(0.083g，0.719mmol)的乙酸乙酯溫溶液處理。在氮氣氛下過濾所形成的沉澱得到0.166g的N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1-甲基哌啶-4-基)哌啶-4-基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基))-1H-2-吲哚基甲醯胺二馬來酸鹽。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.83(s，1H)，9.442(s，1H)，8.283(s，1H)，8.154-8.134(d，1H，J＝8.12Hz)，7.694-7.674(d，1H，J＝8.04Hz)，7.498-7.477(d，1H，J＝8.20Hz)，7.407-7.402(m，1H)，7.352-7.325(m，2H)，7.267-7.229(m，1H)，7.112-7.074(m，1H)，6.078(s，4H)，5.10-5.00(m，1H)，3.974(s，3H)，3.525(m，4H)，3.178(m，2H)，2.975(m，2H)，2.771(s，3H)，2.457(s，3H)，2.208(m，4H)，1.909(m，2H)；HPLC Perkin ElmerPecosphere C18，3μM，33×4.6，3.5ml/min 100-100％50mM醋酸銨至乙腈，在4.5分鐘內，C36H44N6O3(581.2)，95％。LCMS(PerkinElmer，Pecosphere C18柱，3μm粒度，33×4.6mm；100％50mM醋酸銨水溶液至100％乙腈，在5分鐘內，3.0至3.5mil/min)Rt2.67min(100％)。
實施例4553-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(3.0g，11.5mmol)在二甲基甲醯胺(50mL)中的懸浮液用碳酸銫(5.62g，17.25mmol)和三苯基甲基氯(3.85g，13.8mmol)處理。將該反應混合物在70℃下在氮氣氛下攪拌22.5小時。將碳酸銫(3.75g，11.5mmol)和三苯基甲基氯(3.2g，11.5mmol)加入到該反應混合物並攪拌6.5小時。該反應混合物加入到冰水。過濾此沉澱並用水洗滌。將產物3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺凍幹過夜。所得固體用乙酸乙酯研磨得到3.05g(53％)的3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.3190-7.1106(m，16H)；TLC(BakerPre-coated Hard Layer矽膠TLC板，Si250F254，30％乙酸乙酯在庚烷中)Rf＝0.33。
3-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-碘-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.0g，1.99mmol)的二甲基甲醯胺(20mL)溶液，用苯基羥基代硼酸(0.485g，3.8mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.138g，0.119mmol)及碳酸鈉(0.506g，4.78mmol)的水(10mL)溶液處理。將該反應混合物在80℃下在氮氣氛下攪拌18.5小時。將該反應混合物冷卻至室溫並加入水(15mL)。過濾此沉澱並用水洗滌。粗品固體用乙醚(30mL)研磨。將所得固體凍幹過夜得到0.407g(45％)的3-苯基-1-三苯甲基-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺。1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.9416(s，1H)，7.6190-7.6011(m，2H)，7.5369-7.4493(m，3H)，7.3995-7.2248(m，15H)；HPLC Waters 2690 Alliance HPLC(Symmetry Shield RP183.5μm，2.1×50mm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在15分鐘內，0.5mL/min)Rt＝11.813min(97％)。
實施例456N1-{4-[4-氨基-1-(4-氧代環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(3R)-3-苯基丁醯胺在-10℃下將存在於二氯甲烷(10mL)的(3R)-3-苯基丁醯基氯(2.22g，12.18mmol)，加入到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(2.86g，8.12mmol)的吡啶(50mL)溶液中。15分鐘後，除去冰水浴並將該反應混合物室溫下攪拌過夜。加入氫氧化鈉(1.0N，15mL)並蒸發有機溶劑。將此含水殘餘物用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)作為流動相，得到N1-{4-[4-氨基-1-(4-氧代環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(3R)-3-苯基丁醯胺(3.11g，77％)。1H NMR(CDCl3)δ1.40(d，J＝6.97Hz，3H)，2.04(m，1H)，2.59-2.78(m，9H)，3.40(m，1H)，3.98(s，3H)，5.28(m，1H)，5.70(bs，2H)，7.15-7.35(m，7H)，7.66(s，1H)，8.38(s，1H)，8.51(d，J＝8.18，1H)。HPLC(Waters Alliance-柱WatersSymmetryShield，RP18，3.5μm，2.1×50mm。洗脫劑5％B/A至95％B/Ain 9.0min，(B乙腈，A100mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.5mL/min.)Rt＝6.273min。
實施例457{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛將3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.0g，6.59mmol)與4-氟苯甲醛(1.06mL，9.89mmol)、碳酸銫(4.30g，13.19mmol)在DMF(6mL)中混合。將該反應混合物在86℃下加熱過夜。冷卻至室溫後，將該反應混合物倒入到冰水中。過濾收集固體得到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(2.46g，92％)。1H NMR(CDCl3)δ7.19(m，5H)，7.46(m，2H)，7.78(d，J＝8.64Hz，2H)，8.10(d，J＝8.70Hz，2H)，8.44(s，1H)，8.59(d，J＝8.70Hz，2H)，10.03(s，1H)。
b){4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇將硼氫化鈉(19mg，0.491mmol)加入到4-[4氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(100mg，0.245mmol)的甲醇(2mL)溶液中。16小時後，加入THF(1mL)和硼氫化鈉(19mg，0.491mmol)。5小時後，除去溶劑並加入水。水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用乙酸乙酯/二氯甲烷(80∶20至100∶0)作為流動相，得到{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯基}甲醇(36mg，36％)。1H NMR(DMSO-d6)δ4.56(s，2H)，5.27(bs，1H)，7.16(m，5H)，7.47(m，4H)，7.76(d，J＝8.64Hz，2H)，8.18(d，J＝8.52，2H)，8.37(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA singleQuad MS，Finnigan HPLC-柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝410.1，Rt＝2.43min。
實施例4581-{4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將三乙醯氧基硼氫化鈉(67mg，0.319mmol)加入到4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]苯甲醛(100mg，0.245mmol)、4-甲基哌嗪(37mg，0.369mmol)、冰醋酸(35mg，0.589mmol)在二氯乙烷(4mL)中的混合物中。室溫下攪拌過夜後，再加入三乙醯氧基硼氫化鈉(67mg，0.319mmol)並將該反應混合物攪拌過夜。加入水(2mL)，並接著加入碳酸氫鈉(250mg)。劇烈攪拌1小時後，分層並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(97∶3至80∶20)作為流動相，得到1-{4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]苯基}-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(25mg，21％)。1H NMR(DMSO-d6)δ2.30(s，3H)，2.48(bm，8H)，3.56(s，3H)，5.75(bs，2H)，7.11(d，J＝8.50，2H)，7.18(m，3H)，7.40(m，2H)，7.48(d，J＝8.50Hz，2H)，7.29(d，J＝8.63Hz，2H)，8.12(d，J＝8.50Hz，2H)，8.47(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA single Quad MS，Finnigan HPLC柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝492.2，Rt＝2.97min。
實施例459N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯c)1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯在0℃下將叔丁醇鉀(1.0N在THF中，38mL，38mmol)加入到存在於THF(30mL)的甲醇(1.54mL，38.0mmol)。30分鐘後，在-78℃下將絮狀溶液通過導管加入到1-溴-2，5-二氟-4-硝基苯(9.04g，38.0mmol)的THF(27mL)溶液中。30分鐘後，除去冷卻浴並將該反應混合物升溫至0℃。加入水(250mL)，並在10分鐘後，除去有機溶劑。過濾收集固體得到1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯(9.28g，98％)。1H NMR(CDCl3)δ3.97(s，3H)，7.30(d，J＝5.48Hz，2H)，7.71(d，J＝7.58Hz，2H)。
d)4-溴-5-氟-2-甲氧基苯胺在80℃下分三批將亞硫酸氫鈉(14.7g，84.4mmol)加入到1-溴-2-氟-5-甲氧基-4-硝基苯(9.28g，37.12mmol)在乙醇(180mL)和水(130mL)的溶液中。5小時後，除去有機溶劑並通過過濾收集水層中的固體。將此固體進一步用庚烷/乙酸乙酯(3∶2，400mL)洗滌。將濾液蒸發得到4-溴-5-氟-2-甲氧基苯胺(3.29g，40％)。1H NMR(DMSO-d6)δ3.75(s，3H)，5.22(s，2H)，6.56(d，J＝10.68Hz，2H)，6.94(d，J＝6.57Hz，2H)。
c)N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯將二-叔丁基二碳酸酯(3.42g，15.70mmol)與4-溴-5氟-2-甲氧基苯胺(3.29g，14.95mmol)在THF(30mL)中混合。將該反應混合物在65℃下加熱3天，每天加入二碳酸二叔丁基酯(3.42g，15.70mmol)。除去溶劑後，殘餘物通過急驟柱色譜純化，用庚烷/乙酸乙酯(95∶5至85∶15)作為流動相，得到所需產物N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯和二碳酸二叔丁基酯的混合物(10.4g)。在0℃下將氫氧化鈉(50％溶液，2.0mL)加入到存在於甲醇(30mL)的此混合物中，並將該反應混合物室溫下攪拌過夜。除去溶劑後，加入水並將水層用庚烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.24g，89％)。1H NMR(CDCl3)δ1.52(s，9H)，3.85(s，3H)，6.93(d，J＝6.10Hz，1H)，7.06(s，1H)，8.01(d，J＝10.4Hz，1H)。
d)N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯將N-(4-溴-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(4.24g，13.26mmol)、乙硼烷頻哪醇酯(4.04g，15.91mmol)、醋酸鉀(3.90g，39.78mmol)和[1，1′-雙(二苯基膦基)-二茂鐵)二氯鈀(II)與二氯甲烷的複合物(0.32g，0.40mmol)在DMF(75mL)中在85℃加熱過夜。加入乙硼烷頻哪醇酯(2.02g，7.96mmol)和[1，1』-雙(二苯基膦基)-二茂鐵)二氯鈀(II)與二氯甲烷的複合物(0.32g，0.40mmol)，並再繼續加熱5小時。除去溶劑後，將此黑色殘餘物溶解於二氯甲烷，並通過硅藻土過濾。粗品混合物通過急驟柱色譜純化，用庚烷/乙酸乙酯(95∶5至85∶15)作為流動相，得到N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯和乙硼烷頻哪醇酯的混合物(1∶1，4.23g)，其不經純化直接用於下一步反應。
e)反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯將反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.60g，1.36mmol)、N-[5-氟-2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸酯(1.0g，2.72mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.094g，0.082mmol)和碳酸鈉(0.35g，3.27mmol)與乙二醇二甲醚(14mL)和水(7mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5 to 70∶30)作為流動相，得到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(0.264g，35％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.49(s，9H)，1.97(m，6H)，2.16(s，3H)，2.33(m，5H)，2.53(m，4H)，3.84(s，3H)，4.64(m，1H)，7.60(d，J＝6.78Hz，1H)，7.83(d，J＝11.96Hz，1H)，8.20(s，1H)，8.24(s，1H)。LCMS(Thermoquest AQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝555.3，Rt＝2.00min。
實施例460反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺在0℃下將三氟乙酸/二氯甲烷的混合物(20∶80，7mL)加入到反-N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(250mg，0.451mmol)的二氯甲烷(4.0mL)溶液中。15分鐘後，除去冰浴並將該反應混合物室溫下攪拌4小時。然後蒸發溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷。加入飽和碳酸氫鈉以調節pH至8。分層並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(179mg，87％)。1H NMR(CDCl3)δ1.56(m，2H)，2.15(m，7H)，2.31(s，3H)，2.51(m，4H)，2.67(m，4H)，3.88(s，3H)，4.16(bs，2H)，4.74(m，1H)，5.64(bs，2H)，6.56(d，J＝10.84Hz，1H)，6.88(d，J＝6.55Hz，1H)，8.33(s，1H)。LCMS(ThermoquestAQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝455.2，Rt＝0.63min。
實施例461反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)-反-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺在0℃下將存在於二氯甲烷(0.3mL)中的反-2-苯基-1-環丙基羰基氯(32mg，0.176mmol)加入到反-3-(4-氨基-2-氟-5-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(80mg，0.176mmol)的吡啶(1.5mL)溶液中。5分鐘後，除去冰水浴，並將此反應混合物室溫下攪拌3小時。再加入反-2-苯基-1-環丙基羰基氯(32mg，0.176mmol)以保證反應進行完全。蒸發溶劑，並將此殘餘物通過急驟柱色譜純化，得到反-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-5-氟-2-甲氧基苯基)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺(93mg，88％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.35(m，1H)，1.50(m，3H)，1.98(m，6H)，2.19(s，3H)，2.37-2.68(m，11H)，3.87(s，3H)，4.64(m，1H)，7.09(m，1H)，7.21(m，3H)，7.31(m，2H)，8.21(m，2H)，9.82(m，1H)。LCMS(ThermoquestAQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A，在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝599.3，Rt＝1.97min。
實施例462N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯b)3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.5g，1.45mmol)、甲醛(30％在水中，0.16mL，1.60mmol)和三乙醯氧基硼氫化鈉(0.43g，2.03mmol)在二氯乙烷(5mL)中混合。4小時後，加入飽和碳酸氫鈉，接著加入氫氧化鈉(1.0N)，使pH至10。水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發得到3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.275g，53％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.85(m，2H)，2.09(m，4H)，2.22(s，3H)，2.88(m，2H)，4.75(m，1H)，8.19(s，1H)，8.32(s，1H)。
b)N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯將3-碘-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(270mg，0.754mmol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(290mg，0.829mmol)、四(三苯基膦)鈀(52mg，0.045mmol)和碳酸鈉(192mg，1.81mmol)與乙二醇二甲醚(8mL)和水(4mL)混合。將該反應混合物加熱回流過夜。減壓除去有機溶劑並將水層用二氯甲烷萃取。合併的有機層用水洗滌，然後用鹽水洗滌，用硫酸鎂乾燥，過濾並蒸發。殘餘物通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(90∶10至70∶30)作為流動相，得到N-{4-[4-氨基-1-(1-甲基-4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}氨基甲酸叔丁基酯(250mg，73％)。1H NMR(DMSO-d6)δ1.48(s，9H)，1.88(m，2H)，2.10(m，2H)，2.24(m，5H)，2.92(m，2H)，3.69(s，3H)，4.64(m，1H)，7.21(m，2H)，7.91(d，J＝8.16Hz，1H)，8.04(s，1H)，8.23(s，1H)。LCMS(ThermoquestAQA single Quad MS，Finnigan HPLC-柱Genesis，C18，3μm，33×4.6mm。洗脫劑30％B/A至95％B/A在4.5分鐘內，(B乙腈，A50mM醋酸銨緩衝液，pH4.5)，0.8mL/min.)MH+＝454.2，Rt＝1.67min。
實施例463反-3-{4-[(2-氯苄基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟A(反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的還原烷基化的總方法)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.46(d，1H)，7.30(m，3H)，7.08(s，1H)，7.01(d，1H)，6.42(d，1H)，5.96(t，1H)，4.59(m，1H)，4.45(d，2H)，3.90(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.22min。
MSMH+561。
實施例464反-3-{3-甲氧基-4-[(1，3-噻唑-2-基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟A1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.76(d，1H)，7.59(d，1H)，7.08(s，1H)，7.02(d，1H)，6.59(d，1H)，6.27(t，1H)，4.68(d，2H)，4.61(m，1H)，3.89(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.09min。
MSMH+534。
實施例465反-3-(3-甲氧基-4-[(3-甲基-1H-4-吡唑基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟A1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.47(s，1H)，7.06(m，3H)，6.74(d，1H)，5.08(t，1H)，4.61(m，1H)，4.13(d，2H)，3.84(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.25(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.65min。
MSMH+531。
實施例466反-3-{3-甲氧基-4-[(2-噻吩基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽步驟A1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.36(d，1H)，7.01(m，4H)，6.71(d，1H)，5.87(t，1H)，4.61(m，3H)，3.86(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/mi n)Rt13.61min。
MSMH+533。
實施例467反-3-(3-甲氧基-4-[(5-甲基-2-噻吩基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽步驟A1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.04(m，2H)，6.84(d，1H)，6.70(d，1H)，6.62(d，1H)，5.77(t，1H)，4.61(m，1H)，4.47(d，2H)，3.86(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.37(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.66min。
MSMH+547。
實施例468反-3-(4-[(5-氯-2-噻吩基)甲基]氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽步驟A1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.04(m，2H)，6.95(s，1H)，6.69(d，1H)，5.99(t，1H)，4.61(m，1H)，4.50(d，2H)，3.86(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt15.04min。
MSMH+567。
實施例469
反-3-(3-甲氧基-4-[(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽a)2-甲基-1，3-噻唑-4-甲醛向4-氯甲基-2-甲基-1，3-噻唑(1.91g，0.0129mol)的甲苯(50mL)溶液中，加入N-甲基嗎啉-N-氧化物(4.55g，0.0389mol)並將該反應混合物在90℃下加熱4小時。加入N-甲基嗎啉-N-氧化物(1.60g，0.0137mol)並繼續再加熱1.5小時。將此混合物冷卻至室溫，用水(3×50mL)洗滌並濃縮得到2-甲基-1，3-噻唑-4-甲醛(1.40g，0.011mol)，為棕色液體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.87(s，1H)，8.57(s，1H)，2.72(s，3H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf0.26b)反-3-(3-甲氧基-4-[(2-甲基-1，3-噻唑-4-基)甲基]氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟A1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.21(s，1H)，7.06(m，2H)，6.66(d，1H)，5.70(t，1H)，4.60(m，1H)，4.41(d，2H)，3.87(s，3H)，2.64(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.71min。
MSMH+548。
實施例470反-3-{4-[(1H-7-吲哚基甲基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C(反-3-(4-氨基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺的還原烷基化的總方法)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.14(s，1H)，8.18(s，1H)，7.44(d，1H)，7.37(m，3H)，7.12(d，1H)，6.97(t，1H)，6.77(d，2H)，6.55(t，1H)，6.46(m，1H)，4.60(m，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.68min。
MSMH+536。
實施例471反-3-{4-[(2-氯-6-氟苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMS0-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.41(m，4H)，7.29(t，1H)，6.83(d，2H)，6.26(t，1H)，4.61(m，1H)，4.37(d，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.46min。
MSMH+549。
實施例472反-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-3-(4-[(5-甲基-1H-4-吡唑基)甲基]氨基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽步驟C1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.49(s，1H)，7.35(d，2H)，6.76(d，2H)，6.07(t，1H)，4.59(m，1H)，4.06(d，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.21(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt10.15min。
MSMH+501。
實施例473反-3-{4-[(2-氨基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽a)N-[2-(羥基甲基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯向二碳酸二叔丁基酯(23.04g，0.106mol)的無水二氯甲烷(150mL)溶液中，在0℃下加入2-氨基苄基醇(10.0g，0.0812mol)並將所得混合物在氮氣氛下在室溫下攪拌18小時。有機相用飽和碳酸氫鈉水溶液(2×250mL)洗滌，用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(1∶5)作為流動相，得到N-[2-(羥基甲基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(17.2g，0.077mol)，為無色油狀物。
1H NMR(DMS0-d6，400MHz)δ8.52(s，1H)，7.57(d，1H)，7.30(d，1H)，7.22(t，1H)，7.04(t，1H)，5.42(t，1H)，4.51(d，2H)，1.46(s，9H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶3)Rf0.28b)N-(2-甲醯基苯基)氨基甲酸叔丁基酯將吡啶鎓氯鉻酸鹽在鹼性氧化鋁中的20％分散液(50g)加入到N-[2-(羥基甲基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(11.0g，0.0493mol)的無水氯仿溶液中並將所得混懸液在氮氣氛下室溫下攪拌1小時。再加入16g的吡啶鎓氯鉻酸鹽的鹼性氧化鋁分散液，並繼續攪拌45分鐘。此時，再加入15g的吡啶鎓氯鉻酸鹽在鹼性氧化鋁中的20％分散液並繼續攪拌25分鐘。將所得混懸液通過矽膠墊過濾，將此濾液減壓濃縮並將此殘餘物通過急驟色譜在矽膠上純化，用乙酸乙酯/正庚烷(2∶98)作為流動相，得到N-(2-甲醯基苯基)氨基甲酸叔丁基酯(8.67g，0.0392mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ10.31(s，1H)，9.95(s，1H)，8.18(d，1H)，7.87(d，1H)，7.67(t，1H)，7.24(t，1H)，1.49(s，9H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.56c)反-N-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苯基氨基甲酸叔丁基酯乙酸鹽步驟C1HNMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.69(s，1H)，8.18(s，1H)，7.33(m，4H)，7.18(t，1H)，7.12(t，1H)，6.68(d，2H)，6.51(t，1H)，4.58(m，1H)，4.30(d，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.47(s，9H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.73min。
d)反-3-{4-[(2-氨基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽在0℃下將反-N-2-[(4-4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基苯氨基)甲基]苯基氨基甲酸叔丁基酯乙酸鹽(0.080g，0.000118mol)溶解於二氯甲烷(4mL)，並滴加三氟乙酸(1mL)。將此混合物在室溫氮氣氛下攪拌1.5小時，減壓濃縮並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到反-3-{4-[(2-氨基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽(0.067g，0.000106mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.18(s，1H)，7.35(d，2H)，7.09(d，1H)，6.95(t，1H)，6.73(d，2H)，6.66(d，1H)，6.53(d，1H)，6.36(t，1H)，4.97(br，1H)，4.58(m，1H)，4.13(d，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.87min。
MSMH+512。
實施例474反-N1-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苯基乙醯胺二乙酸鹽向反-3-{4-[(2-氨基苄基)氨基]苯基}-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽(0.050g，0.000079mol)的二氯甲烷(3mL)溶液中，在0℃下依次加入N，N-二異丙基乙胺(0.041g，0.000316mol)和乙酸酐(0.011g，0.000103mol)並將所得混合物室溫氮氣氛下攪拌18小時。將此混合物減壓濃縮並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到反-N1-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯氨基)甲基]苯基乙醯胺二乙酸鹽(0.010g，0.0000148mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.48(s，1H)，8.18(s，1H)，7.35(m，4H)，7.20(m，1H)，7.13(m，1H)，6.66(d，2H)，6.53(t，1H)，4.58(m，1H)，4.29(d，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.08(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.67min。
MSMH+554。
實施例475反-3-[3-氯-4-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽a)N-(4-溴-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯將4-溴-2-氯苯胺(5.00g，0.0242mol)的四氫呋喃(50mL)溶液與1.0M的雙(三甲基甲矽烷基)氨化鈉的四氫呋喃溶液(53.2mL，0.0532mol)反應。將此混合物室溫下攪拌15分鐘。加入二碳酸二叔丁基酯(6.34g，0.0290mol)並將溶液攪拌2小時。真空下除去溶劑，粗品物質在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用庚烷/乙酸乙酯(4∶1)洗脫。真空下除去溶劑得到N-(4-溴-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯，為白色固體(4.214g，0.0137mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.75(s，1H)，7.71(d，1H)，7.54(d，1H)，7.50(dd，5H)，1.46(s，9H)；TLC(庚烷/乙酸乙酯4∶1)Rf0.54。
b)N-[2-氯-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯將N-(4-溴-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯(2.10g，0.00685mol)、乙硼烷頻哪醇酯(2.09g，0.00822mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.17g，0.00021mol)和醋酸鉀(2.02g，0.02055mol)在N，N-二甲基甲醯胺(50ml)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱6小時。減壓除去溶劑。殘餘物用庚烷(70mL)研磨並將固體通過硅藻土板濾出。真空下除去庚烷得到N-[2-氯-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯，為灰色固體(1.93g，0.00546mol)。
1H NMR(DMSO-d6400MHz)δ8.65(s，1H)，7.74(d，1H)，7.61(d，1H)，7.56(dd，1H)，1.47(s，9H)，1.29(s，12H)。
c)反式N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯將反式3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(2.20g，0.00498mol)、N-[2-氯-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸酯(1.93g，0.00548mol)、碳酸鈉(1.32g，0.01245mol)在1，2-二甲氧基乙烷(50mL)和水(100mL)中的混合物，快速攪拌並加入四(三苯基膦)鈀(0)(0.345g，0.00030mol)。將該反應混合物在80℃下攪拌6小時，之後再加入四(三苯基膦)鈀(0)(0.345g，0.00030mol)。該反應混合物在80℃下再攪拌16小時。真空下除去溶劑並將此殘餘物在乙酸乙酯(100mL)和飽和碳酸氫鈉水溶液(200mL)之間分配。進行相分離並將水相用乙酸乙酯(3×75mL)萃取。將合併的有機相用硫酸鎂乾燥，並真空下除去溶劑。產物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇/氫氧化銨(90∶10∶0.5)洗脫。真空下除去溶劑得到反式N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯，為白色固體(1.993g，0.00368mol)1H NMR(DMSO-d6400MHz)δ8.76(s，2H)，8.23(s，1H)，7.80(d，1H)，7.68(d，1H)，7.57(dd，1H)，4.58-4.71(m，1H)，2.15(2，3H)，1.89-2.61(m，15H)，1.49(s，9H)，1.40-1.48(m，2H)；TLC(二氯甲烷/甲醇＝90∶10)Rf0.13，MSMH+541。
d)反式3-(4-氨基-3-氯苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將反式N-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氯苯基)氨基甲酸叔丁基酯(1.993g，0.00368mol)加入到20％三氟乙酸的二氯甲烷溶液中。將此混合物室溫下攪拌2小時。真空下除去溶劑並將此殘餘物溶解於二氯甲烷(50mL)，並用1.0M氫氧化鈉水溶液(2×25mL)洗滌。將此有機層用硫酸鎂乾燥並真空下除去溶劑得到反式3-(4-氨基-3-氯苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(1.564g，0.00355mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6400MHz)δ8.20(s，1H)，7.45(d，1H)，7.31(dd，1H)，6.92(d，1H)，4.57-4.63(m，1H)，2.23-2.55(m，9H)，2.14(s，3H)，1.89-2.08(m，6H)，1.38-1.52(m，2H)；TLC(二氯甲烷/甲醇＝90∶10)Rf0.08，MSMH+441。
e)反-3-[3-氯-4-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽將水楊醛(0.033g，0.000274mol)和反-3-(4-氨基-3-氯苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.115g，0.000261mol)在無水乙醇中混合併在室溫下攪拌48小時。將該反應混合物經減壓濃縮並將此殘餘物乾燥過夜，得到反-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氯苯基)亞氨基]甲基苯酚，其不經進一步純化直接使用。將氧化鋶三甲基碘(0.110g，0.0005mol)溶解於無水二甲基亞碸(2mL)，並立即加入氫化鈉在石蠟中的60％分散液(0.02g，0005mol)。10分鐘後，加入反-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-氯苯基)亞氨基]甲基苯酚的無水二甲基亞碸(2 mL)溶液，並將所得混合物室溫氮氣氛下攪拌2.5小時。將此溶液倒入到冰冷的水(50mL)中並用二氯甲烷(2×40mL)萃取。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到反-3-[3-氯-4-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基氨基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽(0.044g，0.000071mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.21(s，1H)，7.55(s，1H)，7.45(d，1H)，7.38(d，1H)，7.25(t，1H)，7.11(d，1H)，6.89(m，2H)，5.70(d，1H)，5.54(m，1H)，4.83(t，1H)，4.61(m，1H)，4.41(m，1H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.94min。
MSMH+559。
實施例476反-3-[4-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽將水楊醛(0.034g，0.000282mol)和反-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.117g，0.000268mol)在純乙醇中混合，並室溫下攪拌48小時。該反應混合物經減壓濃縮並將此殘餘物乾燥過夜，得到反-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)亞氨基]甲基苯酚，其不經進一步純化直接使用。將氧化鋶三甲基碘(0.145g，0.00068mol)溶解於無水二甲基亞碸(2mL)，並立即加入氫化鈉在石蠟中的60％分散液(0.027g，00068mol)。10分鐘後，加入反-2-[(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)亞氨基]甲基酚的無水二甲基亞碸(2mL)溶液，並將所得混合物室溫氮氣氛下攪拌2.5小時。將此溶液倒入到冰冷的水(50mL)中並用二氯甲烷(2×40mL)萃取。合併的有機萃取物用硫酸鎂乾燥並減壓濃縮。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到反-3-[4-(2，3-二氫苯並[b]呋喃-3-基氨基)-3-甲氧基苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽(0.096g，0.000142mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.21(s，1H)，7.38(d，1H)，7.25(t，1H)，7.11(m，2H)，6.89(m，3H)，5.42(m，1H)，5.18(d，1H)，4.77(t，1H)，4.61(m，1H)，4.37(m，1H)，3.83(s，3H)，2.6-2.2(br，9H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.16min。
MSMH+555。
實施例477反式-3-[4-(3-甲基-5-苯基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽a)1-(4-溴苯基)-3-甲基-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑向1-苯甲醯基丙酮(3.63g，0.0224mol)和N，N-二異丙基乙胺(2.88g，0.0224mol)的無水甲醇(160mL)溶液中，加入4-溴苯基肼鹽酸鹽並將所得混合物室溫下攪拌20小時。減壓除去溶劑並將所得混合物在5％枸櫞酸水溶液(200mL)和乙酸乙酯(150mL)之間分配。將有機相依次用水(2×200mL)和鹽水(150mL)洗滌，用硫酸鎂乾燥並濃縮。所得殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(5∶95)作為流動相，得到1-(4-溴苯基)-3-甲基-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑(4.05g，0.0129mol)，為米白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.58(d，2H)，7.36(m，3H)，7.21(d，2H)，7.17(d，2H)，6.46(s，1H)，2.72(s，3H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.41b)3-甲基-5-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-4，5-二氫-1H-吡唑將1-(4-溴苯基)-3-甲基-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑(2.17g，0.00693mol)、乙硼烷頻哪醇酯(2.11g，0.00832mol)、[1，1』-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)的複合物(0.170g，0.000207mol)和醋酸鉀(2.03g，0.0207mol)在N，N-二甲基甲醯胺(50mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(70mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土板濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨並過濾收集沉澱得到3-甲基-5-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-4，5-二氫-1H-吡唑(1.00g，0.00278mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.65(d，2H)，7.36(m，3H)，7.21(m，4H)，6.46(s，1H)，2.79(s，3H)，1.29(s，12H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶5)Rf0.27c)反-3-[4-(3-甲基-5-苯基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽將3-甲基-5-苯基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]-4，5-二氫-1H-吡唑(0.102g，0.000283mol)、反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.104g，0.000236mol)、四-(三苯基膦)鈀(0.016g，0.000014mol)和碳酸鈉一水合物(0.073g，0.00055mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到反-3-[4-(3-甲基-5-苯基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二乙酸鹽(0.094g，0.000141mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.64(d，2H)，7.37(m，7H)，6.49(s，1H)，4.63(m，1H)，2.6-2.2(br，9H)，2.30(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt14.10min。
MSMH+548。
實施例478反-3-[4-(5-乙氧基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽a)1-(4-溴苯基)-1H-5-吡唑基乙醚將乙醯基乙酸乙酯(3.49g，0.02684mol)和4-溴苯基肼鹽酸鹽(6.00g，0.02684mol)在乙酸(50mL)中回流4小時。過濾除去沉澱，將此濾液減壓濃縮並將此殘餘物通過急驟色譜在矽膠上純化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作為流動相，得到1-(4-溴苯基)-1H-5-吡唑基乙醚(2.63g，0.00936mol)，為米白色固體。
1H NMR(CDCl3-d6，400MHz)δ7.61(d，2H)，7.49(d，2H)，7.26(s，1H)，5.47(s，1H)，4.14(q，2H)，2.26(s，3H)，1.44(t，3H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf0.24b)5-乙氧基-3-甲基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧雜環戊烷-2-基)苯基]-1H-吡唑將1-(4-溴苯基)-1H-5-吡唑基乙醚(2.22g，0.00791mol)、乙硼烷頻哪醇酯(2.41g，0.00949mol)、[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]-二氯鈀(II)與二氯甲烷(1∶1)複合物(0.194g，0.000237mol)和醋酸鉀(2.32g，0.0237mol)在N，N-二甲基甲醯胺(60mL)中的混合物，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。讓此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。將二氯甲烷(70mL)加入到此殘餘物中並將所得固體通過硅藻土墊濾出。濃縮此濾液得到黃色油狀物，其在矽膠上通過急驟色譜純化，用乙酸乙酯/正庚烷(7∶93)作為流動相。將所得餾份濃縮，殘餘物在正庚烷中研磨，並過濾收集沉澱得到5-乙氧基-3-甲基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧雜環戊烷-2-基)苯基]-1H-吡唑(0.604g，0.00184mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ7.72(s，4H)，5.72(s，1H)，4.18(q，2H)，2.16(s，3H)，1.37(t，3H)，1.29(s，12H)。
TLC(乙酸乙酯/庚烷1∶9)Rf0.18c)反-3-[4-(5-乙氧基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽將5-乙氧基-3-甲基-1-[4-(4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧雜環戊烷-2-基)苯基]-1H-吡唑基(0.062g，0.00019mol)、反-3-碘-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)-環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.070g，0.000159mol)、四(三苯基膦)鈀(0.011g，0.0000095mol)和碳酸鈉一水合物(0.049g，0.000398mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(5mL)和水(3mL)的混合物中，在80℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫並減壓除去溶劑。殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；在25分鐘內10-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21mL/min)得到反-3-[4-(5-乙氧基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽(0.037g，0.000064mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，7.85(d，2H)，7.71(d，2H)，5.75(s，1H)，4.65(m，1H)，4.21(q，2H)，2.6-2.2(br，9H)，2.18(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，3H)，1.46(m，2H)，1.40(t，3H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt12.59min。
MSMH+516。
實施例479反-1-(4-{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-3-甲基-4，5-二氫-1H-5-吡唑酮二乙酸鹽將反-3-[4-(5-乙氧基-1H-1-吡唑基)苯基]-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺乙酸鹽(0.100g，0.000194mol)在存在於乙酸(2.5mL)的30％氫溴酸中加熱回流1.5小時。將該反應混合物經減壓濃縮並將此殘餘物濃氫氧化銨水溶液中和。將所得混懸液減壓濃縮並將此殘餘物通過製備HPLC純化(Hypersil C18，8μm，25cm；5-45％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，21mL/min)得到反-1-(4{4-氨基-1-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}苯基)-3-甲基-4，5-二氫-1H-5-吡唑酮二乙酸鹽(0.066g，0.00011mol)，為白色固體。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.23(s，1H)，8.02(d，2H)，7.65(d，2H)，4.64(m，1H)，2.6-2.2(br，9H)，2.53(s，2H)，2.21(s，3H)，2.13(s，3H)，2.05(m，6H)，1.91(s，6H)，1.46(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.34min。
MSMH+488。
實施例4802-(2-氨基-1H-1-咪唑基)-1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-1-乙酮乙酸鹽向1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00014mol)和碳酸鉀(0.039g，0.00028mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(3mL)中的混合物中，室溫下加入氯乙醯基氯(0.0031g，0.00028mol)。將此混合物攪拌10分鐘，之後加入2-氨基咪唑硫酸鹽(0.18g，0.0014mol)和碳酸鉀(0.19g，0.0014mol)。將此混合物室溫下攪拌2天，然後升溫至60℃，保持6小時。減壓除去溶劑。將殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到2-(2-氨基-1H-1-咪唑基)-1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-1-乙酮乙酸鹽(0.006g，0.00001mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.71(d，2H)，7.44(m，2H)，7.19(m，5H)，6.55(s，1H)，6.36(s，1H)，5.76(m，1H)，5.30(s，2H)，4.59(m，2H)，4.40(m，2H)，1.90(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.1min。
MSMH+482實施例4811-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-3-[(2-羥基乙基)氨基]-1-丙酮a)N-(3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-3-氧代丙基)-N-(2-羥基乙基)氨基甲酸叔丁基酯將1-(3-氮雜環丁烷基)-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4胺(0.05g，0.00014mol)、3-[(叔丁氧基羰基)(2-羥基乙基)氨基]丙酸(0.038g，0.000175mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.034g，0.000175mol)、N，N-二異丙基乙胺(0.034g，0.00026mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.019g，0.00014mol)在無水二氯甲烷(5mL)中的混合物，室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N-(3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-3-氧代丙基)-N-(2-羥基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.040g，0.000070mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.3min。
MSMH+574b)1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-3-[(2-羥基乙基)氨基]-1-丙酮將2ml 6N鹽酸加入到N-(3-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-3-氧代丙基)-N-(2-羥基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.040g，0.000070mol)在丙酮(5mL)中的混合物中。將此混合物在45℃下攪拌1.5小時。減壓下除去溶劑。將水(10mL)加入到此殘餘物中，將此混合物凍幹。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-氮雜環丁烷基}-3-[(2-羥基乙基)氨基]-1-丙酮(0.003g，0.00001mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.27(s，1H)，7.69(d，2H)，7.42(m，2H)，7.19(m，5H)，5.70(m，1H)，4.67(m，1H)，4.57(m，1H)，4.40(m，1H)，4.31(m，1H)，3.40(m，2H)，2.74(m，2H)，2.51(m，2H)，2.29(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.7min。
MSMH+474實施例4822-(2-氨基-1H 1-咪唑基)-1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-1-乙酮乙酸鹽向3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00013mol)和碳酸鉀(0.036g，0.00026mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(3mL)中的混合物中，室溫下加入氯乙醯基氯(0.028g，0.00026mol)。將此混合物攪拌10分鐘，之後加入2-氨基咪唑硫酸鹽(0.18g，0.0014mol)和碳酸鉀(0.19g，0.0014mol)。將此混合物室溫下攪拌18小時，然後升溫至60℃，保持6小時。減壓除去溶劑。將殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到2-(2-氨基-1H-1-咪唑基)-1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-1-乙酮乙酸鹽(0.015g，0.00003mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.67(d，2H)，7.44(m，2H)，7.17(m，5H)，6.52(s，1H)，6.38(s，1H)，5.49(br，2H)，4.99(m，1H)，4.76(m，2H)，4.59(m，1H)，3.99(m，1H)，3.30(m，1H)，2.80(m，1H)，2.20(m，1H)，1.99(m，3H)，1.90(s，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.4min。
MSMH+510實施例4831-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-[(2-羥基乙基)氨基]-1-乙酮向3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.05g，0.00013mol)和碳酸鉀(0.036g，0.00026mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(3mL)中的混合物中，室溫下加入氯乙醯基氯(0.028g，0.00026mol)。將此混合物攪拌10分鐘，之後加入乙醇胺(0.078mL，0.0013mol)。將此混合物室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。將殘餘物溶解於二氯甲烷(3mL)並用水(2mL)洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內，含0.1M醋酸銨的5％-100％，21mL/min)得到1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-2-[(2-羥基乙基)氨基]-1-乙酮(0.022g，0.00005mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.26(s，1H)，7.67(d，2H)，7.44(m，2H)，7.17(m，5H)，5.03(br，1H)，5.00(br，1H)，4.52(m，1H)，4.05(m，1H)，3.87(m，2H)，3.64(m，2H)，2.96(m，2H)，2.92(m，2H)，2.17(m，1H)，1.90(m，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨在10分鐘內，1mL/min)Rt9.0min。
MSMH+488實施例484合成1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-[(2-羥基乙基)氨基]-1-丙酮
N-(3-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-氧代丙基)-N-(2-羥基乙基)氨基甲酸叔丁基酯將3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4胺(0.05g，0.00013mol)、3-[(叔丁氧基羰基)(2-羥基乙基)氨基]丙酸(0.038g，0.000163mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.031g，0.000163mol)、N，N-二異丙基乙胺(0.031g，0.00024mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.018g，0.00013mol)在無水二氯甲烷(5mL)中的混合物，室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N-(3-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-氧代丙基)-N-(2-羥基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.050g，0.000083mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.4min。
MSMH+602b)1-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-[(2-羥基乙基)氨基]-1-丙酮將2ml的6 N鹽酸加入到N-(3-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-氧代丙基)-N-(2-羥基乙基)氨基甲酸叔丁基酯(0.050g，0.000083mol)在丙酮(5mL)中的混合物中。將此混合物在45℃下攪拌1.5小時。減壓除去溶劑。將水(10mL)加入到此殘餘物，將此混合物凍幹。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到1-{4-[4氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}-3-[(2-羥基乙基)氨基]-1-丙酮(0.014g，0.00003mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.25(s，1H)，7.67(d，2H)，7.42(m，2H)，7.19(m，5H)，4.98(m，1H)，4.52(m，2H)，4.04(m，1H)，3.31(m，2H)，2.81(m，2H)，2.78(m，1H)，2.74(m，2H)，2.58(m，2H)，1.99(m，1H)，1.90(m，3H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，ImL/min)Rt9.1min。
MSMH+502實施例485合成2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸a)2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸叔丁基酯向3-(4-苯氧基苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.10g，0.00026mol，1當量)和碳酸鉀(0.072g，0.000526mol，2當量)在無水N，N-二甲基甲醯胺(8mL)中的混合物中，室溫下加入2-溴乙酸叔丁基酯(0.0768g，0.00039mol，1.5當量)。將混合物室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物溶解於二氯甲烷(5mL)並用水(3mL)洗滌。減壓除去溶劑。將殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用甲醇/二氯甲烷(5∶95)作為流動相，得到2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸叔丁基酯(0.10g，0.0002mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.8min。
MSMH+5012-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸將2ml的6N鹽酸加入到2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸叔丁基酯(0.10g，0.0002mol)在丙酮(5mL)中的混合物中。此混合物在45℃攪拌2小時。減壓除去溶劑。將水(10mL)加入到殘餘物中，並將此混合物凍幹得到2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸(0.010g，0.0002mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.50(s，1H)，7.69(d，2H)，7.43(m，2H)，7.19(m，5H)，5.07(m，1H)，4.02(s，2H)，3.50(br，2H)，3.42(br，2H)，2.53(br，2H)，2.25(br，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.7min。
MSMH+445實施例486N1-(1H-2-咪唑基)-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙醯胺將2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙酸(0.06g，0.00013mol)、2-氨基咪唑硫酸鹽(0.022g，0.000163mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.031g，0.000163mol)、N，N-二異丙基乙胺(0.047g，0.00036mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.018g，0.00013mol)在無水二氯甲烷(8mL)中的混合物，室溫下攪拌18小時。再加入2-氨基咪唑硫酸鹽(0.022g，0.000163mol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.031g，0.000163mol)、N，N-二異丙基乙胺(0.047g，0.00036mol)和1-羥基-7-氮雜苯並三唑(0.018g，0.00013mol)並將此混合物室溫下攪拌18小時。此混合物升溫至50℃，保持6小時，然後室溫下攪拌2天。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N1-(1H-2-咪唑基)-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]哌啶子基}乙醯胺(0.005g，0.00001mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)，7.68(d，2H)，7.43(m，2H)，7.19(m，5H)，6.80(br，1H)，6.70(br，1H)，4.80(br，1H)，3.06(s，2H)，3.05(m，2H)，2.43(m，2H)，2.33(m，2H)，1.92(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt9.2min。
MSMH+510實施例487反式N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺馬來酸鹽a)4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯向3-碘-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺二鹽酸鹽(13.86g，0.0333mol)和碳酸氫鈉(8.4g，0.0999mol)在水(140mL)中的混合物中，室溫下加入存在於二噁烷(120mL)中的氯甲酸苄基酯(6.48g，0.0383mol)。將此混合物室溫氮氣氛下攪拌18小時。濾出黃色固體並用乙醚洗滌得到4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯(12g，0.025mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.5min。
MSMH+479b)4-(4-氨基-3-{4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯將4-(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯(7.0g，0.0146mol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸酯(6.15g，0.0176mol)、四(三苯基膦)鈀(1.0g，0.000876mol)和碳酸鈉(3.9g，0.0365mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(170mL)和水(70mL)中，在75℃下在氮氣氛下加熱16小時。加入N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸叔丁基酯(6.15g，0.0176mol，1.2當量)和四(三苯基膦)鈀(1.0g，0.000876mol)，再將此混合物在85℃下攪拌16小時。將此混合物冷卻至室溫並將乙二醇二甲基醚減壓除去。水層用乙酸乙酯(3×150mL)萃取。合併的有機萃取物用水、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，並用硫酸鎂乾燥。減壓蒸發溶劑得到棕色固體，其通過急驟柱色譜在矽膠上進行純化，用20％-40％乙酸乙酯/二氯甲烷，接著2％-5％甲醇/二氯甲烷作為流動相，得到4-(4-氨基-3-{4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯(8.0g，0.014mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，在10分鐘內，1mL/min)Rt12.6min。
MSMH+574c)4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯向4-(4-氨基-3-{4-[(叔丁氧基羰基)氨基]-3-甲氧基苯基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)-1-哌啶甲酸苄基酯(7.68g，0.0134mol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中，在0℃下加入25％三氟乙酸的二氯甲烷溶液。將此混合物在氮氣氛下室溫下攪拌18小時。減壓除去溶劑。將殘餘物冷卻至0℃，並用5N氫氧化鈉水溶液鹼化。水層用二氯甲烷(3×150mL)萃取。合併的有機層用水和鹽水洗滌，並用硫酸鎂乾燥。減壓除去溶劑得到4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(6.02g，0.0127mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.3min。
MSMH+474d)反式4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基環丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯向4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(3.0g，0.0063mol)在吡啶(100mL)中的混合物中，在-5℃下加入外消旋的反-2-苯基-環丙烷羰基氯(1.163g，0.007mol)。將此混合物在-5℃下攪拌10分鐘，然後升溫至室溫並攪拌1.5小時。將此混合物用1N氫氧化鈉水溶液驟冷。減壓下除去有機溶劑。將殘餘物在水(200mL)和乙酸乙酯(200mL)之間分配。將有機層洗滌用5％枸櫞酸水溶液(3×100mL)、1N鹽酸(3×100mL)、水、飽和碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗滌，並用硫酸鎂乾燥。減壓除去溶劑得到反式4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基環丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1哌啶甲酸苄基酯(3.47g，0.006mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt11.5min。
MSMH+618e)反式N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺馬來酸鹽將反式4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基環丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(3.4g，0.0055mol)和20％氫氧化鈀-碳(0.4g)在乙醇(150mL)中的混合物，在氫氣氛下室溫下攪拌18小時。將此混合物過濾並除去溶劑。向此殘餘物中，加入20％氫氧化鈀-碳(0.4g)、存在於乙醇(60mL)中的乙酸(0.25mL)和乙酸乙酯(40mL)。將此混合物在氫氣氛下室溫下再攪拌18小時。將此混合物過濾並減壓除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用25％-50％甲醇/二氯甲烷洗脫，得到反式N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺(1.36g，0.0028mol)。將反式N1-{4-[4-氨基-1-(4哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺(0.05g，0.000104mol)在乙酸乙酯(5mL)中加熱至40℃。將先溶解於溫乙酸乙酯中的馬來酸(0.00133g，0.000114mol)加入到此混合物中。將此混合物在40℃下攪拌10分鐘，然後冷卻至室溫。濾出白色沉澱，得到反式N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺馬來酸鹽(0.0044g，0.00001mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.65(s，1H)，8.26(m，2H)，7.25(m，7H)，6.01(d，2H)，5.09(br，1H)，3.90(s，3H)，3.48(m，2H)，3.18(m，2H)，2.61(br，1H)，2.37(m，3H)，2.13(m，2H)，1.50(br，1H)，1.34(br，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨在10分鐘內，1mL/min)Rt9.0min。
MSMH+484實施例488N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1H-2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺將N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺(0.10g，0.00021mol)、2-咪唑甲醛(0.022g，0.00023mol)及乙酸(0.037g，0.0006mol)在二氯乙烷(8mL)中的混合物，室溫氮氣氛下攪拌1.5小時。將三乙醯氧基硼氫化鈉(0.133g，0.00063mol)加入到此混合物並在室溫氮氣氛下攪拌18小時。再將乙酸(0.037g，0.0006mol)、2-咪唑甲醛(0.011g，0.00012mol)和三乙醯氧基硼氫化鈉(0.133g，0.00063mol)加入到此混合物中，並將此混合物攪拌18小時。該反應用5N氫氧化鈉水溶液驟冷。減壓除去溶劑，並將此殘餘物在水和二氯甲烷之間分配。將此有機層用水和鹽水洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到N1-(4-{4-氨基-1-[1-(1H 2-咪唑基甲基)-4-哌啶基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺(0.019g，0.000034mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ11.8(br，1H)，9.63(s，1H)，8.22(m，2H)，7.25(m，7H)，6.99(br，1H)，6.83(br，1H)，4.68(br，1H)，3.90(s，3H)，3.56(s，2H)，2.93(m，2H)，2.58(br，1H)，2.37(br，1H)，2.22(m，3H)，1.90(m，3H)，1.50(br，1H)，1.30(br，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨在10分鐘內，1mL/min)Rt9.4min。
MSMH+564
實施例489N1-[4-(4-氨基-1-{1-[(1-甲基-1H-2-咪唑基)甲基]-4-哌啶基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-甲氧基苯基](1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺將N1-{4-[4-氨基-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基}-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺(0.1g，0.00021mol)、1-甲基-2-咪唑甲醛(0.025g，0.00023mol)及乙酸(0.037g，0.0006mol)在二氯乙烷(8mL)中的混合物，室溫氮氣氛下攪拌1.5小時。將三乙醯氧基硼氫化鈉(0.133g，0.00063mol)加入到此混合物並在室溫氮氣氛下攪拌18小時。該反應用5N氫氧化鈉水溶液驟冷。減壓除去溶劑，並將此殘餘物在水和二氯甲烷之間分配。將此有機層用水和鹽水洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用5％-50％甲醇/二氯甲烷作為流動相，得到N1-[4-(4-氨基-1-{1-[(1-甲基-1H 2-咪唑基)甲基]-4哌啶基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基)-2-甲氧基苯基]-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺(0.070g，0.00012mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.63(s，1H)，8.22(m，2H)，7.25(m，7H)，7.09(s，1H)，6.75(s，1H)，4.68(br，1H)，3.90(s，3H)，3.68(s，3H)，3.20(s，2H)，2.93(m，2H)，2.58(br，1H)，2.35(br，1H)，2.24(m，4H)，1.89(m，2H)，1.50(br，1H)，1.30(br，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨在10分鐘內，1mL/min)Rt9.6min。
MSMH+578實施例4903-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺a)4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯將4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(3.0g，0.0063mol)、5-甲基糠醛(0.77g，0.007mol)及乙酸(1.15g，0.019mol)在二氯乙烷(100mL)中的混合物，室溫氮氣氛下攪拌1.5小時。將三乙醯氧基硼氫化鈉(4.1g，0.0195mol)加入到此混合物並將此混合物在室溫氮氣氛下攪拌18小時。該反應用5N氫氧化鈉水溶液驟冷。減壓除去溶劑，並將此殘餘物在水和二氯甲烷之間分配。水層用二氯甲烷(3×200mL)萃取，並將合併的有機層用水和鹽水洗滌，並用硫酸鎂乾燥。減壓除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟色譜純化，用2％-5％甲醇/二氯甲烷作為流動相，得到4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(2.63g，0.0046mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨在10分鐘內，1mL/min)Rt11.59min。
MSMH+568b)3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將4-[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-哌啶甲酸苄基酯(0.18g，0.000317mol)和20％氫氧化鈀-碳(0.02g)在乙酸乙酯(10mL)中的混合物，在氫氣氛下室溫下攪拌18小時。將此混合物過濾並除去溶劑。殘餘物在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用5％-10％甲醇/二氯甲烷(2％NH4OH)洗脫，得到3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.02g，0.000046mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.20(s，1H)，7.07(m，2H)，6.78(m，1H)，6.18(s，1H)，5.97(s，1H)，5.59(m，1H)，4.79(br，1H)，4.31(m，2H)，3.86(s，3H)，3.16(m，2H)，2.74(m，2H)，2.23(s，3H)，2.15(m，2H)，1.90(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨在10分鐘內，1mL/min)Rt8.7min。
MSMH+434實施例4913-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-{1-[(1-甲基-1H-2-咪唑基)甲基]-4-哌啶基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺將3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-(4-哌啶基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.045g，0.0001mol)、1-甲基-2-咪唑甲醛(0.011g，0.00011mol)及乙酸(0.018g，0.0003mol)在二氯乙烷(4mL)中的混合物，室溫氮氣氛下攪拌1.5小時。將三乙醯氧基硼氫化鈉(0.064g，0.0003mol)加入到此混合物並將此混合物在室溫氮氣氛下攪拌18小時。該反應用5N氫氧化鈉水溶液驟冷。減壓除去溶劑，並將此殘餘物在水和二氯甲烷之間分配。將此有機層用水和鹽水洗滌。減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/min)得到3-(3-甲氧基-4-{[(5-甲基-2-呋喃基)甲基]氨基}苯基)-1-{1-[(1-甲基-1H-2-咪唑基)甲基]-4-哌啶基}-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.03g，0.00006mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.19(s，1H)，7.16(s，1H)，7.06(m，2H)，6.86(s，1H)，6.77(d，1H)，6.18(s，1H)，5.98(s，1H)，5.59(m，1H)，4.67(br，1H)，4.31(m，2H)，3.85(s，3H)，3.71(s，3H)，3.66(s，2H)，2.96(m，2H)，2.27(m，2H)，2.23(s，3H)，2.18(m，2H)，1.91(m，2H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨在10分鐘內，1mL/min)Rt9.5min。
MSMH+528實施例492反式N1-(4-{4-氨基-1-[(4-羥基-4-哌啶基)甲基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺a)4-[(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)甲基]-4羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯將3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-4-胺(0.86g，0.0033mol)、1-氧雜-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(0.7g，0.0033mol)和碳酸銫(1.1g，0.0033mol)在無水N，N-二甲基甲醯胺(30mL)中的混合物，在60℃下攪拌18小時。減壓除去溶劑。殘餘物在水和二氯甲烷(200mL)之間分配。將此有機層用水和鹽水洗滌，並用硫酸鎂乾燥。減壓除去溶劑。殘餘物用二氯甲烷研磨，並將此固體過濾得到4-[(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)甲基]-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.66g，0.0014mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.7min。
MSMH+475b)4-{[4-氨基-3-(4-{[(苄基氧基)羰基]氨基}-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯將4-[(4-氨基-3-碘-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基)甲基]-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.27g，0.00057mol)、N-[2-甲氧基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)苯基]氨基甲酸苄基酯(0.26g，0.00068mol)、四(三苯基膦)鈀(0.039g，0.000034mol)和碳酸鈉(0.15g，0.0014mol)的混合物在乙二醇二甲基醚(7mL)和水(3mL)中，在85℃下在氮氣氛下加熱16小時。將此混合物冷卻至室溫，並減壓下除去乙二醇二甲基醚。水層用二氯甲烷(2×100mL)萃取。將合併的有機萃取物用水和鹽水洗滌，並用硫酸鎂乾燥。有機層通過矽膠過濾兩次以除去催化劑，並減壓除去溶劑。殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸胺的5％-100％，21mL/mi n)得到4-{[4-氨基-3-(4-{[(苄基氧基)羰基]氨基}-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羥基-1哌啶甲酸叔丁基酯(0.1g，0.00017mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.9min。
MSMH+604
c)4-{[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯將4-{[4-氨基-3-(4-{[(苄基氧基)羰基]氨基}-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.1g，0.000017mol)和鈀碳(0.01g)在乙醇(2.5mL)和四氫呋喃(2.5mL)中的混合物，在氫氣氛下室溫下攪拌18小時。將此混合物過濾並再加入鈀碳(0.01g)。將此混合物在氫氣氛下室溫下攪拌18小時。將此混合物通過硅藻土過濾並減壓除去溶劑得到4-{[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.08g，0.00017mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt8.8min。
MSMH+470d)反式4-{[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基環丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯向4-{[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.08g，0.00017mol)在吡啶(4mL)中的混合物中，在-5℃下加入反-2-苯基-環丙烷羰基氯(0.035g，0.00019mol)。將此混合物在-5℃下攪拌10分鐘，然後升溫至室溫，攪拌1小時。將此混合物用1N氫氧化鈉的水溶液驟冷。減壓下除去吡啶。將此殘餘物在水和二氯甲烷(50mL)之間分配。有機層用水洗滌。減壓下除去溶劑，並將此殘餘物通過RP-HPLC純化(Hypersilprep HS C18，8μm，250×21.1mm；在35分鐘內含0.1M乙酸銨的5％-100％，21mL/min)得到反式4-{[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基環丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.08g，0.00013mol)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在10分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt10.7min。
MSMH+614e)反式N1-(4-{4-氨基-1-[(4-羥基-4-哌啶基)甲基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺鹽酸鹽將反式4-{[4-氨基-3-(3-甲氧基-4-{[(2-苯基環丙基)羰基]氨基}苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]甲基}-4-羥基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(0.08g，0.00013mol)在丙酮(12mL)和6N鹽酸(3mL)中的混合物，在40℃下攪拌2小時。減壓下除去丙酮，並將此殘餘物凍幹得到反式N1-(4-{4-氨基-1-[(4-羥基-4-哌啶基)甲基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-2-苯基-1-環丙烷甲醯胺鹽酸鹽(0.07g，0.00012mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.65(s，1H)，8.71(br，1H)，8.43(s，1H)，8.26(m，1H)，7.25(m，7H)，4.40(s，2H)，3.90(s，3H)，3.10(m，2H)，2.98(m，2H)，2.51(m，1H)，2.34(m，1H)，1.89(m，2H)，1.71(m，2H)，1.48(m，1H)，1.31(m，1H)。
RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨在10分鐘內，1mL/min)Rt8.7min。
MSMH+514實施例493N1-4-[4-氨基-1-(4-氧代環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺將4-[4-氨基-3-(4-氨基-3-甲氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環己酮(2.00g，0.00568mol)在吡啶(20mL)中的懸浮液冷卻至-10℃。滴加外消旋的反-2-苄基環丙烷-1-羰基氯(1.53g，0.00852mol)的二氯甲烷(5mL)溶液，保持溫度低於-5℃。在4小時內將該反應混合物升溫至室溫。加入氫氧化鈉水溶液(1.0M，10mL)並將此混合物攪拌1小時。真空下除去溶劑並將此殘餘物在乙酸乙酯(25mL)和水(50mL)之間分配。進行相分離並將水相用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。合併的有機相用硫酸鎂乾燥，並真空下除去溶劑得到N1-4-[4-氨基-1-(4-氧代環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基-(1S，2S)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺，為白色固體(1.603g，0.00323mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.64(s，1H)，8.27(s，1H)，8.23(d，1H)，7.14-7.35(m，7H)，5.24-5.27(m，1H)，3.90(s，3H)，2.65-2.78(m，2H)，2.56-2.63(m，1H)，2.34-2.37(m， 5H)，2.20-2.30(m，2H)，1.45-1.53(m，1H)，1.28-1.35(m，1H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，在20分鐘內，1mL/min)Rt15.04min.；MSMH+497。
實施例494順式N1-(4-{4-氨基-1-[4-(銨基甲基)-4-羥基環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺乙酸鹽a)順式N1-4-[4-氨基-1-(1-氧雜螺[2.5]辛烷-6-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基-(1S，2S)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺在加熱乾燥的燒瓶中，存在於二甲基亞碸(5ml)中的氧化鋶三甲基碘(0.425g，0.00193mol)與60％氫化鈉在礦物油中的分散液(0.071g，0.00193mol)反應。將此混合物室溫下攪拌30分鐘，然後冷卻至10℃。加熱N1-4-[4-氨基-1-(4-氧代環己基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺(0.800g，0.00161mol)的二甲基亞碸(5ml)溶液，並將此混合物室溫下攪拌6小時。加入水(5mL)並將此混合物用乙酸乙酯(3×10mL)萃取。有機相用水(5mL)、鹽水(5mL)洗滌並用硫酸鎂乾燥。真空下除去溶劑得到順-N1-4-[4-氨基-1-(1-氧雜螺[2.5]辛烷-6-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺，為白色固體(0.820g，0.00160mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.64(s，1H)，8.24(s，1H)，8.22(d，1H)，7.17-7.31(m，7H)，4.84-4.90(m，1H)，3.92(s，3H)，2.70(s，2H)，2.56-2.63(m，1H)，2.34-2.42(m，1H)，2.12-2.33(m，4H)，1.90-1.99(m，2H)，1.44-1.52(m，1H)，1.27-1.37(m，3H)；MSMH+413。
b)順式N1-(4-{4-氨基-1-[4-(銨基甲基)-4-羥基環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺乙酸鹽將順-N1-4-[4-氨基-1-(1-氧雜螺[2.5]辛烷-6-基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基]-2-甲氧基苯基-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺(0.200g，0.000391mol)在2-丙醇(5mL)和氫氧化銨(5mL)中的混合物，在加壓試管中在65℃下加熱18小時。真空下除去溶劑，並將此殘餘物通過製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300A，25cm；5分鐘內30％恆溶劑成分，然後在15分鐘內30％-60％乙腈-0.1M醋酸銨，21ml/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到順-N1-(4-{4-氨基-1-[4-(銨基甲基)-4-羥基環己基]-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-3-基}-2-甲氧基苯基)-(1S，2S)/(1R，2R)-2-苯基環丙烷-1-甲醯胺乙酸鹽，為白色固體(0.112g，0.000212mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ9.64(s，1H)，8.23(d，1H)，8.22-8.24(m，1H)，7.17-7.33(m，7H)，4.59-4.80(m，1H)，3.91(s，3H)，2.28-2.65(m，4H)，1.88(s，3H)，1.68-1.72(m，4H)，1.47-1.51(m，3H)，1.30-1.33(m，1H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt13.11min.；MSMH+528。
實施例495反式N1-苄基-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙醯胺將反式2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙酸(0.076g，0.000165mol)在二氯甲烷(2mL)中的懸浮液與三乙胺(0.050g，0.000496mol)和雙(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦醯氯(0.063g，0.000248mol)處理。將此混合物室溫下攪拌2小時，在此期間發生溶解。將此溶液用水(2×2mL)洗滌。將此有機層用硫酸鎂乾燥，並真空下除去溶劑。粗品溶解於二氯甲烷(5mL)並與苄基胺(0.052g，0.000489mol)在室溫下反應18小時。粗品物質在矽膠上通過急驟柱色譜純化，用二氯甲烷/甲醇(95∶5)洗脫，接著用製備RP-HPLC純化(Rainin C18，8μm，300A，25cm；5分鐘內60％恆溶劑成分，然後在20分鐘內60％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，21ml/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到反式N1-苄基-2-{4-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-羥基環己基}乙醯胺，為白色固體(0.010g，0.000018mol)1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.53(t，1H)，8.24(s，1H)，7.66(d，2H)，7.43(t，2H)，7.09-7.34(m，10H)，5.24(s，1H)，4.70-4.79(m，1H)，4.30(d，2H)，2.02-2.18(m，2H)，1.91(s，2H)，1.86-1.98(m，4H)，1.56-1.64(m，2H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-95％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/min)Rt16.16min；MSMH+549。
實施例4961-(氨基甲基)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁醇將3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁酮(0.150g，0.000404mol)的二氯甲烷(5mL)溶液與1，1，1-三甲基甲矽烷腈(0.060g，0.000606mol)和無水碘化鋅(0.004g，0.000012mol)反應。將此混合物在回流溫度下攪拌8小時。將此混合物在水(20mL)和乙醚(10mL)之間分配。分離有機層並用乙醚(10mL)萃取水層。將合併的有機層用鹽水洗滌，並用硫酸鎂乾燥。真空下除去溶劑，並將粗品溶解於無水四氫呋喃(10mL)中，並在室溫下與氫化鋰鋁(0.031g，0.000804mol)反應18小時。將粗品物質通過製備RP-LC/MS純化(Gilson-Micromass C18，5μm，130A，21cm，在9分鐘內0％-100％乙腈-0.1M醋酸銨，25mL/min)。真空下除去乙腈並將此含水混合物凍幹得到1-(氨基甲基)-3-[4-氨基-3-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑並[3，4-d]嘧啶-1-基]-1-環丁醇的異構體4∶1混合物，為白色固體(0.024g，0.000060mol)。
1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ8.24(s，1H)少量，8.23(s，1H)主要，7.66-7-70(m，2H)，7.41-7.46(m，2H)，7.11-7.21(m，5H)，5.45-5.50(m，1H)少量，4.87-4.96(m，1H)主要，4.30(d，2H)，2.34-2.72(m，6H)；RP-HPLC(Delta Pak C18，5μm，300A，15cm；在20分鐘內5％-85％乙腈-0.1M醋酸銨，1mL/mi n)Rt12.07min(少量)和12.36min(主要)；MSMH+403。
權利要求
1.式(I)的化合物，其外消旋-非對映異構體混合物、旋光異構體、藥用鹽、前藥或生物活性代謝物， 其中G是 其中Z100是 或者任選地被R1取代的基團，該基團選自環烷基、萘基、四氫萘基、苯並噻吩基、呋喃基、噻吩基、苯並噁唑基、苯並噻唑基、 噻唑基、苯並呋喃基、2，3-二氫苯並呋喃基、吲哚基、異噁唑基、四氫吡喃基、四氫呋喃基、哌啶基、吡唑基、吡咯基、噁唑基、異噻唑基、噁二唑基、噻二唑基、二氫吲哚基、吲唑基、苯並異噻唑基、吡啶並噁唑基、吡啶並-噻唑基、嘧啶並噁唑基、嘧啶並噻唑基和苯並咪唑基；Z110是共價鍵，或是任選地被取代的(C1-C6)其任選地被一個或多個選自如下的取代基取代烷基、CN、OH、滷素、NO2、COOH、被取代或未被取代的氨基及被取代或未被取代的苯基；Z111是共價鍵，任選地被取代的(C1-C6)或任選地被取代的-(CH2)n-環烷基-(CH2)n-；其中任選地被取代的基團任選地被一個或多個選自如下的取代基取代烷基、CN、OH、滷素、NO2、COOH、被取代或未被取代的氨基被取代或未被取代的苯基；Ra和R1各表示一個或多個取代基，其每次出現時獨立地選自如下氫原子，滷素，-CN，-NO2，-C(O)OH，-C(O)H，-OH，-C(O)O-烷基，被取代或未被取代的甲醯氨基，四唑基，三氟甲基羰基氨基，三氟甲基磺醯氨基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的鏈烯基，被取代或未被取代的芳基氧基，被取代的或未被取代的雜芳基氧基，被取代或未被取代的芳基烷基，被取代或未被取代的鏈炔基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的氨基烷基，被取代或未被取代的醯氨基，被取代或未被取代的雜芳硫基，被取代的或未被取代的芳硫基，-Z105-C(O)N(R)2，-Z105-N(R)-C(O)-Z200，-Z105-N(R)-S(O)2-Z200，-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200，Rc和CH2ORc；其中Rc每次出現時獨立地是氫原子，被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，-CH2-NRdRe，-W-(CH2)t-NRdRe，-W-(CH2)t-O-烷基，-W-(CH2)t-S-烷基或-W-(CH2)t-OH；Z105每次出現時獨立地是共價鍵或(C1-C6)；Z200每次出現時獨立地是被取代或未被取代的(C1-C6)，被取代或未被取代的苯基或者被取代的或未被取代的-(C1-C6)-苯基；Rd和Re每次出現時獨立地是H，烷基，烷醯基或SO2-烷基；或Rd、Re和它們所連接的氮原子一起形成5員或6員雜環；t每次出現時獨立地是2至6的整數；W每次出現時獨立地是化學鍵或者O、S、S(O)、S(O)2或NRf，其中Rf每次出現時獨立地是H或烷基；或者R1是被取代或未被取代的與環2稠合的碳環或雜環；R3是氫原子，羥基，被取代或未被取代的烷基或者被取代的或未被取代的烷氧基；A是-O-；-S-；-S(O)p-；-N(R)-；-N(C(O)OR)-；-N(C(O)R)-；-N(SO2R)-；-CH2O-；-CH2S-；-CH2N(R)-；-CH(NR)-；-CH2N(C(O)R))-；-CH2N(C(O)OR)-；-CH2N(SO2R)-；-CH(NHR)-；-CH(NHC(O)R)-；-CH(NHSO2R)-；-CH(NHC(O)OR)-；-CH(OC(O)R)-；-CH(OC(O)NHR)-；-CH＝CH-；-C(＝NOR)-；-C(O)-；-CH(OR)-；-C(O)N(R)-；-N(R)C(O)-；-N(R)S(O)p-；-OC(O)N(R)-；-N(R)-C(O)-(CH2)n-N(R)-，-N(R)C(O)O-；-N(R)-(CH2)n+1-C(O)-，-S(O)pN(R)-；-O-(CR2)n+1-C(O)-，-O-(CR2)n+1-O-，-N(C(O)R)S(O)p-；-N(R)S(O)pN(R)-；-N(R)-C(O)-(CH2)n-O-，-C(O)N(R)C(O)-；-S(O)pN(R)C(O)-；-OS(O)pN(R)-；-N(R)S(O)pO-；-N(R)S(O)pC(O)-；-SOpN(C(O)R)-；-N(R)SOpN(R)-；-C(O)O-；-N(R)P(ORb)O-；-N(R)P(ORb)-；-N(R)P(O)(ORb)O-；-N(R)P(O)(ORb)-；-N(C(O)R)P(ORb)O-；-N(C(O)R)P(ORb)-；-N(C(O)R)P(O)(ORb)O-或-N(C(O)R)P(ORb)-；其中R每次出現時獨立地是H，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基烷基或者被取代的或未被取代的芳基；Rb每次出現時獨立地是H，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基烷基，被取代或未被取代的環烷基或被取代或未被取代的芳基；p是1或2；或在含磷的基團中，氮原子、磷原子、R和Rb一起形成5或6員雜環；或A是NRSO2，而R、Ra和氮原子一起形成被取代或未被取代的與環1稠合的5或6員雜環；-R2是-Z101-Z102；Z101是共價鍵，-(C1-C6)-，-(C1-C6)-O-，-(C1-C6)-C(O)-，-(C1-C6)-C(O)O-，-(C1-C6)-C(O)-NH-，-(C1-C6)-C(O)-N((C1-C6))-或被取代的或未被取代的苯基；Z102是氫原子，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的環烷基，被取代或未被取代的，飽和或不飽和雜環基團，或被取代或未被取代的，飽和或不飽和雜雙環基團；所述被取代的雜環或者被取代的雜雙環基團具有一個或多個取代基，其各自獨立地選自羥基，氰基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代的或未被取代的磺醯氨基，被取代或未被取代的脲基，被取代的或未被取代的甲醯氨基；被取代或未被取代的氨基，氧代基團，飽和的、不飽和的或芳族的被取代或未被取代的雜環基團，其中含有一個或多個氮原子、一個或多個氧原子或其聯合；其中所述氮原子獨立地任選地被下列基團取代被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代或未被取代的芳基烷基；或R2是式B-E，其中B是被取代或未被取代的環烷基，被取代或未被取代的氮雜環烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的氨基烷基磺醯基，被取代的或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代的或未被取代的氨基烷基羰基，羥基，被取代或未被取代的亞烷基，被取代或未被取代的氨基烷基，被取代的或未被取代的亞烷基羰基或者被取代的或未被取代的氨基烷基羰基；且E是被取代或未被取代的氮雜環烷基，被取代或未被取代的氮雜環烷基羰基，被取代或未被取代的氮雜環烷基磺醯基，被取代的或未被取代的氮雜環烷基烷基，被取代或未被取代的雜芳基，被取代或未被取代的雜芳基羰基，被取代或未被取代的雜芳基磺醯基，被取代或未被取代的雜芳基烷基，被取代的或未被取代的氮雜環烷基羰基氨基，被取代或未被取代的雜芳基羰基氨基或者被取代的或未被取代的芳基；a是1，而D1、G1、J1、L1和M1各自獨立地選自如下CRa和N，其條件是至少兩個D1、G1、J1、L1和M1是CRa；或者a是0，而D1、G1、L1和M1之一是NRa，D1、G1、L1和M1之一是CRa，而其餘獨立地選自如下CRa和N，其中Ra定義如上；b是1，而D2、G2、J2、L2和M2各自獨立地選自如下CRa和N，其條件是至少兩個D2、G2、J2、L2和M2是CRa；或者b是0，而D2、G2、L2和M2之一NRa，D2、G2、L2和M2之一是CRa，而其餘獨立地選自如下CRa和N，其中Ra定義如上；且n每次出現時獨立地是0至6的整數。
2.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R1每次出現時獨立地選自如下F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，-CH2NRdRe，叔丁基，吡啶基，被取代的或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代的或未被取代的苯磺醯基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，羧基，被取代或未被取代的四唑基，及被取代的或未被取代的苯乙烯基。
3.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；Ra每次出現時獨立地選自如下F，Cl，Br，I，CH3，NO2，OCF3，OCH3，CN，CO2CH3，CF3，叔丁基，吡啶基，被取代或未被取代的噁唑基，被取代或未被取代的苄基，被取代或未被取代的苯磺醯基，被取代或未被取代的苯氧基，被取代的或未被取代的苯基，被取代或未被取代的氨基，羧基，被取代或未被取代的四唑基，及被取代或未被取代的苯乙烯基。
4.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式 其中n是1、2或3。
5.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式 其中m是0、1、2或3，且Rg是H或-(CH2)pN(R4)R5，其中p是2至6的整數，而R4和R5各自獨立地是H、氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-，-(CH2)q，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)，-；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的部分，其選自烷基、烷氧基、氨基、芳基、雜芳基和雜環烷基，或R4、R5和它們連接的氮原子一起形成3、4、5、6或7員被取代的或未被取代的雜環或雜雙環基團。
6.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式 其中m是0、1、2或3，a和b各自獨立地是0至6的整數；Q是-OR6或-NR4R5；各R4和R5獨立地是H、氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-，-(CH2)q-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烷氧基，氨基，芳基，雜芳基或雜環烷基，或R4、R5和它們所連接的氮原子一起形成3、4、5、6或7員的被取代或未被取代的雜環或雜雙環基團；且R6是氫原子或被取代或未被取代的烷基。
7.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式 其中n是1、2或3；且R4是H、氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-，-(CH2)q-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)-；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基。
8.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式 其中m是0、1、2或3；R5是H、氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自共價鍵，-C(O)-，-(CH2)q，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-，-(CH2)qC(O)-，-C(O)(CH2)q-和-(CH2)qS(O)r-，其中-(CH2)q-、-(CH2)qO-、-(CH2)qNH-、-(CH2)qC(O)-、-C(O)(CH2)q-和-(CH)qS(O)r的烷基部分任選地被下列基團取代滷素、羥基或烷基；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的氨基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或Y和Z一起是天然或非天然胺基酸，其在該胺的氮原子上可以單-或二-烷基化；且R6表示各自獨立地選自如下的一個或多個取代基氫原子，羥基，氧代基團，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜環基，被取代或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代的或未被取代的烷基羰基，被取代或未被取代的芳基羰基，被取代或未被取代的雜環基羰基，被取代的或未被取代的氨基烷基和被取代或未被取代的芳基烷基；其條件是與氮原子相鄰的碳原子不被羥基取代。
9.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式 其中R4是H、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自C(O)-，-(CH2)q，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整數，而r是0、1或2；且Z是氫原子，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基。
10.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式 其中m是1至6的整數；且R4和R5各自獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-，-(CHZ)q-，-S(O)，-C(O)O-，-SONH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代或未被取代的雜環烷基；或R4、R5和它們所連接的氮原子一起形成3、4、5、6或7-員被取代或未被取代的雜環或者被取代的或未被取代的雜雙環基團。
11.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式 其中n是0至4的整數；r是0而m是1至6的整數；或r是1而m是0至6的整數；Q是-OR6或-NR4R5；各R4和R5獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-，-(CH2)q-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烷氧基，被取代的或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R4、R5和它們所連接的氮原子一起形成3、4、5或6員被取代或未被取代的雜環基團；且R6是氫原子或被取代或未被取代的烷基。
12.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式 n是0至4的整數；m是0至6的整數；R4是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-，-(CH2)q-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中q是0至6的整數；且r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；且R6是氫原子或被取代或未被取代的烷基。
13.權利要求10所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中R7、R8、R9、R11、R12、R13、R13和R14各自獨立地是低級烷基或氫原子；或者至少一對取代基R7和R8；R9和R10；R11和R12；或R13和R14一起是一個氧原子；或R7和R9中至少一個是氰基，CONHR15，COOR15，CH2OR15或CH2NR15(R16)，其中R15和R16各自獨立地是H、氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自-C(O)-，-(CH2)p，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R15、R16和氮原子一起形成3、4、5、6或7-員被取代或未被取代的雜環或被取代的或未被取代的雜雙環基團；X是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氫原子、被取代的或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基、被取代的或未被取代的芳基烷基、-C(NH)NH2，-C(O)R17或-C(O)OR18，其中R18是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的芳基烷基；且t是0或1。
14.權利要求10所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環 其中R19和R20各自獨立地是氫原子或低級烷基；或R10和R20一起是一個氧原子；R21和R22各自獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自如下-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R21、R22和氮原子一起形成3、4、5或6-員被取代的或未被取代的雜環基團；m是1至6的整數；且n是0至6的整數。
15.權利要求10所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中m是1至6的整數；且R23是CH2OH，NRR′，C(O)NRR′或COOR，其中R和R′各自獨立地是氫原子或者被取代的或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
16.權利要求10所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中R24是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或被取代或未被取代的芳基烷基，羧基，氰基，C(O)OR25，CH2OR25，CH2NR26R27或C(O)NHR26，其中R25是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的芳基烷基，被取代或未被取代的雜環基或者被取代的或未被取代的雜環芳基；且R26和R27各自獨立地是H、被取代的或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R26、R27和氮原子一起形成3、4、5或6-員被取代或未被取代的雜環基團。
17.權利要求10所述的化合物，其中R4和R5的至少一個是式Y-Z，其中Z是下式 其中T是C(O)、S、SO、SO2、CHOR或NR，其中R是氫原子或被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且n是0、1或2。
18.權利要求10所述的化合物，其中R4和R5的至少一個是式Y-Z，其中Z是式-N(R28)R29，其中R28和R29各自獨立地是被取代或未被取代的羧基烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基烷基，被取代或未被取代的羥基烷基，被取代或未被取代的烷基磺醯基，被取代的或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的氰基烷基；或R28和R29與氮原子一起形成5或6員被取代或未被取代的雜環基團。
19.權利要求11所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13和R14各自獨立地是低級烷基或氫原子；或取代基R7和R8；R9和R10；R11和R12；或R13和R14中至少一對一起是一個氧原子；或R7和R9中至少一個是氰基，CONHR15，COOR15，CH2OR15或CH2NR15(R16)，其中R15和R16各自獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代或未被取代的雜環烷基；或R15、R16和氮原子一起形成3、4、5、6或7-員被取代或未被取代的雜環或雜雙環基團；X是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氫原子，被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的芳基烷基，-C(NH)NH2，-C(O)R18或-C(O)OR18，其中R18是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的芳基或被取代或者未被取代的芳基烷基；且t是0或1。
20.權利要求11所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中R19和R20各自獨立地是氫原子或低級烷基；或R19和R20一起是一個氧原子；R21和R22各自獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R21、R22和氮原子一起形成3、4、5或6-員被取代的或未被取代的雜環基團；m是1至6的整數；且n是0至6的整數。
21.權利要求11所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中m是1至6的整數；且R23是CH2OH、NRR′、C(O)NRR′或COOR，其中R是氫原子或被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
22.權利要求11所述的化合物，其中R4、R5和氮原子一起形成下式的雜環基團 其中R24是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代或未被取代的芳基烷基，羧基，氰基，C(O)OR25，CH2OR25，CH2NR26R27或C(O)NHR26，其中R25是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的芳基烷基，被取代或未被取代的雜環基或者被取代的或未被取代的雜環芳基；且R26和R27各自獨立地是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CHZ)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R26、R27和氮原子一起形成3、4、5或6-員被取代或未被取代的雜環基團。
23.權利要求11所述的化合物，其中R4和R5的至少一個是式Y-Z，其中Z是下式 其中g是0或1；T是C(O)、O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氫原子，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的芳基烷基，-C(NH)NH2，-C(O)R18或-C(O)OR18，其中R18是氫原子、被取代或未被取代的烷基、被取代的或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且R32是氫原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羥基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
24.權利要求11所述的化合物，其中R4和R5的至少一個是式Y-Z，其中Z是式-N(R28)R29，其中R28和R29各自獨立地是被取代或未被取代的羧基烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基烷基，被取代或未被取代的羥基烷基，被取代或未被取代的烷基磺醯基，被取代的或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的氰基烷基；或R28和R29與氮原子一起形成5或6員被取代或未被取代的雜環基團。
25.權利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是式N(R30)R31，其中R30和R31各自獨立地是氫原子，烷基，烷氧基羰基，烷氧基烷基，羥基烷基，氨基羰基，氰基，烷基羰基或芳基烷基。
26.權利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是下式 其中各X獨立地是CH或N；且R32是氫原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羥基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
27.權利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是下式 其中g是0或1；T是O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氫原子，被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基，被取代的或未被取代的芳基烷基，C(O)NH2，-C(NH)NH2，-C(O)R17或-C(O)OR18，其中R18是氫原子，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；且R32是氫原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羥基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
28.權利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是下式 其中g是0、1或2；且R32是氫原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羥基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
29.權利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是下式 其中T是C(O)、O、S、SO、SO2、CH2、CHOR17或NR17，其中R17是氫原子，被取代或未被取代的烷基，芳基，芳基烷基，-C(NH)NH2，-C(O)R18，或C(O)OR18，其中R18是氫原子，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的芳基或者被取代的或未被取代的芳基烷基；g是0或1；且R32是氫原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羥基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代的或未被取代的芳基烷基。
30.權利要求8所述的化合物，其中R5是Y-Z，其中Z是下式 其中R32是氫原子，氰基，被取代或未被取代的烷基，被取代的或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的羥基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，烷基羰基，被取代或未被取代的硫代烷氧基或者被取代或未被取代的芳基烷基；且R33是氫原子，被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的烷氧基羰基，被取代或未被取代的烷氧基烷基，被取代或未被取代的氨基羰基，全滷代烷基，被取代的或未被取代的鏈烯基，被取代或未被取代的烷基羰基或者被取代或未被取代的芳基烷基。
31.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式 其中m是0或1；R34、R35、R36、R37、R38、R39、R40和R41各自獨立地是甲基或氫原子；或R34和R35；R36和R37；R38和R39；或R40和R41中的至少一對取代基一起是一個氧原子；且R42是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基；或R42是下式 其中u是0或1；R43、R44、R45、R46、R47、R48、R49和R50各自獨立地是甲基或氫原子；或R43和R44；R45和R46；R47和R48；或R49和R50中至少一對取代基一起是一個氧原子；且R51是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-L，其中V選自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代或未被取代的雜環烷基。
32.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是下式 其中h、i、j、k和l獨立地是0或1；R52、R53、R54、R55、R56、R57、R58、R59、Rg和Rh各自獨立地是甲基或氫原子；或R52和R53；R54和R55；R56和R57；或R58和R59中的至少一對取代基一起是一個氧原子；且R60是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或Y-Z，其中Y選自-C(O)-，-(CH2)p，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，-(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r-；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且Z是被取代或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或者未被取代的雜環烷基；或R60是下式 其中v是0或1；R61、R62、R63、R64、R65、R66、R67和R68各自獨立地是低級烷基或氫原子；或R61和R62；R63和R64；R65和R66；及R67和R68中的至少一對取代基一起是一個氧原子；且R69是H、被取代或未被取代的氮雜雙環烷基或V-1，其中V選自-C(O)-，-(CH2)p-，-S(O)2-，-C(O)O-，-SO2NH-，-CONH-，(CH2)qO-，-(CH2)qNH-和-(CH2)qS(O)r；其中p是0至6的整數，q是0至6的整數，而r是0、1或2；且L是被取代的或未被取代的烷基，被取代或未被取代的氨基，被取代的或未被取代的芳基，被取代或未被取代的雜芳基或者被取代的或未被取代的雜環烷基。
33.抑制患者的一種或多種蛋白激酶活性的方法，該方法包括給所述患者使用治療有效量的權利要求1所述的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物。
34.權利要求33所述的方法，其中所述蛋白激酶選自KDR、FGFR-1、PDGFRβ、PDGFRα、IGF-1R、c-Met、Flt-1、Flt-4、TIE-2、TIE-1、Lck、Src、fyn、Lyn、Blk、hck、fgr和yes。
35.影響患者的過度增殖性紊亂的方法，該方法包括給所述患者使用治療有效量的權利要求1所述的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物。
36.影響患者的血管生成的方法，該方法包括給所述患者使用治療有效量的權利要求1所述的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物。
37.權利要求33所述的方法，其中所述蛋白激酶是蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶或蛋白酪氨酸激酶。
38.治療患者的一種或多種潰瘍的方法，該方法包括給所述患者使用治療有效量的權利要求1所述的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物。
39.權利要求38的方法，其中所述一種或多種潰瘍是由細菌或真菌感染引起的；或所述一種或多種潰瘍是莫倫氏潰瘍；或所述一種或多種潰瘍是潰瘍性結腸炎的症狀。
40.治療患者的病症的方法，該方法包括給所述患者使用治療有效量的權利要求1所述的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物，其中所述病症是眼部病症，心血管病，癌症，Crow-Fukase(POEMS)症候群，糖尿病，鐮刀細胞貧血病，慢性炎症，系統性狼瘡，腎小球性腎炎，滑膜炎，炎性腸疾病，克羅恩氏病，腎小球性腎炎，類風溼性關節炎，骨關節炎，多發性硬化，移植物排斥，萊姆病，敗血症，von Hippel Lindau病，類天皰瘡，牛皮癬，佩吉特氏病，多囊性腎病，纖維變性疾病，肉樣瘤病，肝硬化，甲狀腺炎，粘滯性過高症候群，Osler-Weber Rendu病，慢性梗塞性肺病，哮喘或燒傷、外傷、輻射、中風、低氧症、局部出血後水腫，卵巢高刺激性症候群，子癇前期，月經過多，子宮內膜異位或單純性皰疹、帶狀皰疹、人類免疫缺陷病毒、副痘病毒、原生動物或弓形體病引起的感染。
41.權利要求40所述的方法，其中所述眼部病症是眼或視網膜黃斑水腫，眼新血管病，鞏膜炎，光角膜切開術，眼色素層炎，玻璃體炎，近視，眼凹，慢性視網膜脫離，雷射治療後併發症，結膜炎，遺傳性黃斑變性，Eales病，視網膜病視網膜黃斑變性。
42.權利要求40所述的方法，其中所述心血管病是動脈粥樣硬化、再狹窄、局部出血/再灌注損傷、血管閉塞或頸動脈梗塞性疾病。
43.權利要求40所述的方法，其中所述癌症是實體瘤，肉瘤，纖維肉瘤，骨瘤，黑素瘤，成視網膜細胞瘤，成橫紋肌細胞肉瘤，成膠質細胞瘤，成神經細胞瘤，畸胎樣瘤，造血系統惡性腫瘤，Kaposi氏肉瘤，何杰金氏病，淋巴瘤，骨髓瘤，白血病或惡性腹水。
44.權利要求40所述的方法，其中所述糖尿病是胰島素依賴性糖尿病性青光眼，糖尿病性視網膜病或微血管病。
45.降低患者生育力的方法，該方法包括給所述患者使用有效量的權利要求1所述的化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物的步驟。
46.權利要求36的方法，其中所述化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物是以促進血管生成或血管發生的有效量給藥的。
47.權利要求34的方法，其中所述蛋白激酶是Tie-2。
48.權利要求46的方法，其中所述式I化合物或其生理可接受鹽、前藥或生物活性代謝物與原血管生成生長因子聯合給藥。
49.權利要求48的方法，其中所述原血管生成生長因子選自VEGF、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、HGF、FGF-1、FGF-2、其衍生物及抗獨特型抗體。
50.權利要求46的方法，其中所述患者患有貧血，局部出血，梗塞，移植排斥，創傷，壞疽或壞死。
51.權利要求33所述的方法，其中所述蛋白激酶活性參與T細胞活化、B細胞活化、幹細胞脫粒、單核細胞活化、炎性反應的強化或其組合。
52.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是-Z101-Z102，其中Z101是共價鍵，-(C1-C6)-，-(C1-C6)-O-，-(C1-C6)-C(O)-，-(C1-C6)-C(O)O-，-(C1-C6)-C(O)-NH-，-(C1-C6)-C(O)-N((C1-C6))-或被取代的苯基；且Z102是氫原子、被取代或未被取代的烷基、或被取代的或未被取代的飽和或不飽和的雜環基團。
53.權利要求52所述的化合物，其中Z101選自-CH2-C(O)O-，-CH2-C(O)-，-CH2-C(O)-NH-，-CH2-C(O)-N(Me)-，-CH(Me)-C(O)O-，-(CH2)3-C(O)O-，-CH(Me)-C(O)-NH-和-(CH2)3-C(O)-NH-；Z102選自如下氫原子，甲基、乙基、N，N-二甲基氨基乙基、N，N-二乙基氨基乙基、2-苯基-2-羥基乙基、4-嗎啉基、哌嗪基、N-甲基哌嗪基和2-羥基甲基吡咯烷基。
54.權利要求53所述的化合物，其中G是 或 其中Z100是被取代或未被取代的苯並噁唑基或者被取代的或未被取代的苯並噻唑基。
55.權利要求8、9、10或53所述的化合物，其中G是 或 其中只有一個Ra且其是H或F。
56.權利要求52所述的化合物，其中Z101是共價鍵；且Z102是任選地被取代的吡啶基。
57.權利要求56所述的化合物，其中G是
58.權利要求1所述的化合物，其中R3是H；R2是環戊基；且G是
59.權利要求58所述的化合物，其中Z110是氫原子；A是O；且Z100是任選地被取代的苯基、呋喃基或噻吩基，其中Z100任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自F、COOH、NO2、OMe、-COOMe、OCF3和CF3。
60.權利要求58所述的化合物，其中Z110是氫原子；A是-O-、-O-(CR2)n-C(O)-或-O-(CR2)n-O-；n每次出現時是0至3；Z100是任選地被取代的基團，取代基選自環己基，苯基，四氫吡喃基，四氫呋喃基，異噁唑基和哌啶基；其中Z100任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基選自烷基、烷氧基、滷素、羥基和烷氧基羰基。
61.權利要求58所述的化合物，其中R2是任選地被取代的基團，其選自環丁基和環己基。
62.權利要求61所述的化合物，其中R2任選地被選自如下的一個或多個取代基取代羥基，烷基，羥基烷基，羧基烷基和苯基烷氧基烷基。
63.權利要求62所述的化合物，其中G是4-苯氧基苯基。
64.權利要求6所述的化合物，其中m是2；a是0；R6是H；b是1或2；而R4和R5各是氫原子。
65.權利要求8所述的化合物，其中m是0、1或2；R6是氫原子；R5是H或Y-Z；其中Y是共價鍵，-C(O)-，-(CH2)qO-，-(CH2)q-，-(CHZ)qC(O)-或-C(O)(CH2)q-，其中-(CH2)qO-、-(CH2)q、-(CH2)qC(O)-和-C(O)(CH2)q-的烷基部分任選地被下列基團取代滷素、羥基或烷基；且Z是氫原子、烷基、任選地被取代的烷基、烷氧基烷基、任選地被取代的雜環烷基、任選地被取代的雜芳基、或任選地被取代的氨基。
66.權利要求65所述的化合物，其中Z是氫原子、甲基、乙基、羥基甲基、甲氧基乙基、N-甲基哌啶基、(叔丁氧基羰基)(羥基)-哌啶基、羥基哌啶基、(羥基甲基)哌啶基、(羥基)(甲基)-哌啶基、4-嗎啉基、(甲氧基乙基)哌嗪基、甲基哌嗪基、4-哌啶基哌啶基、咪唑基、甲基咪唑基、N-甲基氨基、N，N-二甲基氨基、N-異丙基氨基、N，N-二乙基氨基、2，3-二羥基丙基氨基、2-羥基乙基氨基、3-羥基丙基氨基、甲氧基乙基氨基、乙氧基羰基甲基氨基、苯基甲基氨基、N-甲基-N-甲氧基氨基、 呋喃基甲基氨基、哌啶基乙基氨基、N-(2-N，N-二甲基氨基乙基)-N-甲基氨基、2-N，N-二甲基氨基乙基氨基、N-甲基-N-(N-甲基哌啶-4-基)氨基、2-(4-嗎啉基)-乙基氨基、3-(4-嗎啉基)-丙基氨基、3-咪唑基丙基氨基或3-(2-氧代吡咯烷基)丙基氨基。
67.權利要求8所述的化合物，其中m是2；R5是Y-Z；Y是-C(O)-；且Z是 其中n是0、1、2或3。
68.權利要求9所述的化合物，其中R4是氫原子或甲基；G是 A選自O，-N(R)-和-N(R)C(O)-；Z111是-(CH2)n-環烷基-(CH2)n-；R是氫原子或烷基；n是0至5；Ra是一個或多個取代基，各自獨立地選自H、OH、F、Cl、甲基和甲氧基；且R，is一個或多個取代基，各自獨立地選自H、CN、F、CF3、OCF3、甲基、甲氧基和任選地被取代的氨基；其中所述氨基任選地被一個或兩個基團取代，取代基各自獨立地選自烷基、烷氧基烷基、苯基、被取代的苯基、及任選地被取代的雜芳基。
69.權利要求68所述的化合物，其中R1是4-甲基苯硫基或2-吡啶硫基。
70.權利要求9所述的化合物，其中G是 其中Z100選自苯並[b]噻吩基、呋喃基和噻吩基。
71.權利要求9所述的化合物，其中Ra是烷氧基；A是-NH-C(O)-；且在A和Z100之間存在一個共價鍵。
72.權利要求1、8或9所述的化合物，其中G是 其中A選自-N(R)-C(O)-N(R)-，-(CH2)n-N(R)C(O)N(R)-，-N(R)-和-N(R)-SO2-；R是氫原子或烷基；Z100是 吡啶基，噻唑基，呋喃基，苯並呋喃基或噁唑基；X是S、O或NR′其中R′每次出現時獨立地是H或Me；Ra是一個或多個取代基，其各自獨立地選自H和F；且R1是一個或多個取代基，其各自獨立地選自H、F、Cl、Br、NO2、CF3、烷基、烷氧基和烷氧基羰基。
73.權利要求72所述的化合物，其中R4是甲基；m是1、2或3；R5是Y-Z，其中Y是-C(O)O-、-C(O)-或-C(O)-(CH2)p-；且Z是氨基烷基、N-烷基氨基、N，N-二烷基氨基或羥基烷基氨基烷基。
74.權利要求9所述的化合物，其中R4是甲基；G是 其中n是0至3；Z100是任選地被取代的基團，選自吲哚基、茚基、甲基茚基、甲基吲哚基、二甲基氨基苯基、苯基、環己基和苯並呋喃基。
75.權利要求9的化合物，其中G是 其中Z100是任選地被取代的基團，其選自如下苯基、咪唑基、吲哚基、呋喃基、苯並呋喃基和2，3-二氫苯並呋喃基；其中Z100任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自如下F、Cl、CN、任選地被取代的烷基、-O-(任選地被取代的烷基)、-COOH、-Z105-C(O)N(R)2、-Z105-N(R)-C(O)-Z200、-Z105-N(R)-S(O)2-Z200及-Z105-N(R)-C(O)-N(R)-Z200；，Z105是共價鍵或(C1-C6)；Z200是任選地被取代的基團，其選自(C1-C6)、苯基和-(C1-C6)-苯基；Z110和Z111各自獨立地是共價鍵或(C1-C3)基團，其任選地被烷基、羥基、COOH、CN或苯基取代；且A是O、-N(R)-C(O)-N(R)-、-N(R)-C(O)-O-、-N(R)-或-N(R)-C(O)-，其中R是H或烷基。
76.權利要求75所述的化合物，其中R4是甲基。
77.權利要求8、9或10所述的化合物，其中G是 其中Z100是任選地被取代的基團，其選自苯並噁唑基、苯並噻唑基和苯並咪唑基。
78.權利要求77所述的化合物，其中R4是甲基；A是-NH-；只有一個Ra且其是H或F；且Z100任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自烷基、滷素、CF3和烷氧基。
79.權利要求9所述的化合物，其中G是 Z100是任選地被取代的基團，其選自苯基、吡咯基、吡啶基、苯並咪唑基、萘基和 其中Z100任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自如下F、Cl、Br、NO2、氨基、N-烷基氨基、N，N-二烷基氨基、CN、任選地被取代的烷基、-O-(任選地被取代的烷基)和苯基；Z110和Z111每次出現時獨立地是(C1-C3)，其任選地被任選地被取代的苯基取代；且A是-N(R)-C(O)-N(R)-，-N(R)-S(O)2-，-N(R)-C(O)-，-N(R)-或-N(R)-C(O)-O-。
80.權利要求79所述的化合物，其中R4是甲基且只存在一個Ra且其是F。
81.權利要求9或66所述的化合物，其中G是 其中Z110是任選地被取代的基團，其選自苯基、異噁唑基、四氫萘基、呋喃基、苯並呋喃基、吡啶基和吲哚基；其中Z100任選地被一個或多個取代基取代，所述取代基各自獨立地選自F、CN、NO2、-C(O)H、-CONH2、-NHSO2CF3、任選地被取代的烷基、任選地被取代的雜芳基和-O-(任選地被取代的烷基)；Z110和Z111各自獨立的是任選地被取代的(C0-C3)；且A是O，-N(R)-C(O)-(CH2)n-N(R)-，-C(O)-N(R)-，-N(R)-C(O)-O-，-N(R)-C(O)-或-N(R)-。
82.權利要求81所述的化合物，其中R4是甲基；Ra是H或甲氧基；且Z110和Z111各自都未被取代。
83.權利要求9所述的化合物，其中G是 其中R是H或低級烷基，而n每次出現時獨立地是1至6。
84.權利要求83所述的化合物，其中G是
85.權利要求84所述的化合物，其中Z100是被取代的或未被取代的苯基。
86.權利要求8、9或10所述的化合物，其中G是 其中Z100是任選地被取代的基團，其選自苯並噁唑基、苯並噻唑基和苯並咪唑基。
87.權利要求11所述的化合物，其中n是2；R6是H；m是1；r是1；而R4和R5各是氫原子。
88.權利要求64或87所述的化合物，其中G是4-苯氧基苯基。
全文摘要
本發明提供了式(I)的化合物,包括其藥用鹽和/或前藥,其中G、R
文檔編號A61P37/06GK1390219SQ00815759
公開日2003年1月8日 申請日期2000年9月15日 優先權日1999年9月17日
發明者G·C·希爾斯特, D·卡爾德伍德, N·維沙特, P·拉菲蒂, K·裡特, L·D·阿諾, M·M·弗裡德曼 申請人:艾博特股份有限兩合公司