菸草抗赤星病的抗病性強弱溫室苗期接種鑑定方法與流程
2024-03-01 06:37:15
本發明涉及微生物防治領域，特別是指一種菸草抗赤星病的抗病性強弱溫室苗期接種鑑定方法。
背景技術：
：菸草赤星病是我國菸草生產上的主要病害之一。我國各產煙區都有該病害的發生，其可侵染葉片、莖、花梗及蒴果等。葉片染病多從下部葉片發生，漸向上發展。病斑初為黃褐色小斑點，後發展為褐色圓或近圓形斑，上具赤褐或深褐色同心輪紋。擴展較快時，邊緣出現黃色暈圈。溼度大時斑上可見深褐色或黑色黴層。病斑質脆、易破。嚴重時，病斑融合使葉片成為碎葉。葉脈、花梗、蒴果、莖染病現長橢圓形或梭形深褐色凹陷斑。根據赤星病的發生規律、(初侵染、傳播途徑、再侵染等特點)，對於赤星病的防治，應採用以種植抗病品種、藥劑防治和實施合理栽培措施相結合的綜合防治措施，而對於如何篩選出抗病品種，則是關鍵，在傳統的篩選中，對於赤星病抗病品種的篩選，沒有形成較為統一的篩選方法，造成在篩選方法上的不統一，篩選效果的差異。技術實現要素：本發明提出一種菸草抗赤星病的抗病性強弱溫室苗期接種鑑定方法，方法合理，鑑定結果準確可靠，可大範圍的推廣應用。本發明的技術方案是這樣實現的：一種菸草抗赤星病的抗病性強弱溫室苗期接種鑑定方法，包括以下步驟：步驟一：將菸草赤星病菌在PDA平板培養基上培養，並配置接種液；步驟二：將菸草移栽至花盆內；步驟三：在煙苗長出真葉後，在植株上噴灑所述接種液進行接種，培養並鑑定抗病性強弱。進一步，在步驟一中，菸草赤星病菌在PDA平板培養基上26℃培養7天，所述接種液為用1％葡萄糖液配成濃度為1*105CFU/ml的孢子懸浮液，這一參數的設置保證了接種液的活性和有效性。進一步，所述花盆的直徑不小於10cm，每個所述花盆內移栽2株，降低移栽成本，同時不會造成相互間的影響，並且每個品種的菸草移栽20盆，並設重複，不少於3次，保證鑑定結果的準確性與可靠性。進一步，步驟三中，在煙苗長出9-10片真葉時，已經形成一定的植株，此時進行接種，結果更加可靠。進一步，步驟三中，培養於人工氣候箱內進行，設定溫度26-30℃，相對溼度70％，這些參數的設置便於將染病因素進行控制，防止其他病菌幹擾，同時也便於赤星病菌的正常浸染。進一步，為提高準確性，鑑定中同時還設定了感病品種，抗病品種作為對照，以及當地種植的當地抗病品種，當地中抗品種和當地感病品種作為輔助對照。進一步，步驟三中，在接種後的第7、10、20d調查發病程度，這3個階段分別對應赤星病菌發展的3個階段。進一步，抗病性鑑定以葉片為單位分級調查，並按照以下分級方式鑑定：0級：全葉無病；1級：病斑面積佔葉片面積的1％以下；3級：病斑面積佔葉片面積的2-5％；5級：病斑面積佔葉片面積的6-10％；7級：病斑面積佔葉片面積的11-20％；9級：病斑面積佔葉片面積的21％以上。本發明的所述菸草抗赤星病的抗病性強弱溫室苗期接種鑑定方法，根據赤星病的浸染過程和浸染的參數研究，設定了科學合理的鑑定方法與過程參數控制，同時還結合了菸草植株自身的生長特性，以及還結合了當地的植株的抗病情況，對菸草的抗赤星病的抗病強弱進行了有效的、合理的鑑定，可以進行大面積的推廣使用。具體實施方式下面將結合本發明的實施例，對本發明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發明一部分實施例，而不是全部的實施例。基於本發明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有作出創造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬於本發明保護的範圍。實施例1(廣東)溫室苗期抗赤星病的接種鑑定1.接種體的製備將菸草赤星病菌在PDA平板培養基(馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基)上26℃培養7d，用1％葡萄糖液配成濃度為1*105CFU/ml的孢子懸浮液作為接種液。2.接種材料的準備將菸草移栽至直徑大於10cm的花盆內，沒品種20盆，每盆2株，至少要設3次重複。3.接種方法於煙苗9-10片真葉時進行赤星病孢子(1*105CFU/ml)接種，用小型手持噴霧器將孢子懸浮液噴灑到植株上，然後置於人工氣候箱內，設定溫度26-30℃，相對溼度70％，設感病品種，抗病品種作為對照，以及當地種植的當地抗病品種，當地中抗品種和當地感病品種作為輔助對照。4.調查與鑑定調查時間：在接種後的第7、10、20d調查發病程度。鑑定。實施例2-3實施例2-3方法同實施例1，區別在於實施例2在山東進行，實施例3在雲南進行。鑑定結果顯示，廣東，雲南，山東的抗病性相差不大(溫室內病害嚴重度相差不大)，數據如下：7d(％)10d(％)20d(％)病害嚴重度(級)實施例11243實施例21385實施例31253以上所述僅為本發明的較佳實施例而已，並不用以限制本發明，凡在本發明的精神和原則之內，所作的任何修改、等同替換、改進等，均應包含在本發明的保護。當前第1頁1 2 3