大型真菌試管種培養基及其製備方法
2024-03-01 13:08:15 2
專利名稱：大型真菌試管種培養基及其製備方法
技術領域：
本發明涉及微生物，具體涉及微生物中大型真菌的培養基。
背景技術：
目前，大型真菌的試管種培養基主要分為固體物培養基，半固體形培養基， 這兩種培養基各有長處，但兩者都存在著難以克服的缺陷。
固體培養基主要有木屑培養基，木粒、竹粒培養基，穀粒、麥粒、稻穀培 養基，其中木屑或木粒、竹粒培養基存在著缺陷是營養成份低，製作費工費 時，轉接原種萌發慢，發菌勢弱，穀粒、麥粒、稻穀培養基易汙染、易老化、 轉接培養袋後易招致蟲、鼠害。
半固形培養基主要是固體物浸出液及添加劑溶化後加入瓊脂固化而得到， 這種培養基最大的缺陷是易老化，降低菌絲活力，生產優勢衰退，在常溫下， 往往需要多次轉管，因此又容易導致失純及再度退化。
隨著液體菌種的推廣，用上述試管種的菌胎轉接液體種，都存在著浮力差、 萌發慢且弱，因而汙染率高。 一般每支試管種只能轉接原種4~6瓶或袋，規模 化栽培的大型菌菇場或菌種場， 一支基礎菌種勢必須反覆擴轉，極易退化衰變， 所以一支性狀優良的菌種，往往在栽培中表現出退化變異現象，同時大量的罐 裝試管增加成本、廢工、廢時。
發明內容
本發明要解決的技術問題是提供一種大型真菌試管種培養基，克服現有技 術存在的培養基營養成份低、菌種萌發慢、易老化、汙染率高，需多次反覆擴 轉，生產成本高、生產效率低的缺陷。
本發明要解決的另一個技術問題是提供這種培養基的製備方法。 發明人所在單位是一個售菌種量、裁培量都較大的單位，歷年在三伏天高 溫季節，要大量生產試管種、原種、裁培種，天熱流汗、蚊蟲叮咬、深受其苦， 於是近些年來，發明人一直在探索、研究培養基的組成物質，終於獲得突破性 進展。
本發明通過以下技術方案實現
大型真菌試管種培養基，由營養液潤溼草籽製成，草籽與營養液重量比為1: 0.2~0.5。應使草籽表面全部溼潤營養液、並附著營養液為佳。 所述草籽為看麥娘、狗尾草草籽一種或兩種混合。
所述營養液為豆芽、麥皮、菇，經破碎、熱水浸提、濃縮製得，重量百分 比為豆芽20—40%，麥皮10—30%，菇35—70%;三種物質與水重量比為1-1—2。
所述的菇為鮮菇，為鮮菇中的平菇、草菇、蘑菇、猴頭菇的一種或幾種混 合。可根據當地的情況，選用較經濟的鮮菇。上述的鮮菇根、須、莖等均可作 營養液的原料。
所述豆芽為大豆芽、綠豆芽、碗豆芽、蠶豆芽一種或幾種混合。從營養價 值的角度，以大豆芽為佳。
大型真菌試管種培養基的製備方法，包括下列步驟
(1) 採集看麥娘或狗尾草籽，去除雜質後放入水中浸泡48—60小時，然 後取出草籽，晾乾表皮水份備用；
(2) 製備營養液按所述的重量百分比，以及總物質與水體積比，將豆芽、
麥皮、菇放入水中煮沸，保溫30—50分鐘，然後過濾取出液體，再將液體加熱 濃縮，直至用玻璃棒插入濃縮液中，再提起玻璃棒，有掛棒現象為止；
(3) 向步驟(2)得到的營養液中加入磷酸二氫鉀，調整PH至6.5—7.2;
(4) 用步驟(3)得到的營養液噴灑步驟(1)得到的草籽，並充分拌和均 勻，使草籽表面全部溼潤營養液、並附著營養液，即得到所述的培養基；
(5) 裝管、滅菌將步驟(4)得到的培養基裝入試管中，塞棉塞、包紮， 裝入高壓鍋中，保持1.5個大氣壓，滅菌60分鐘，自然冷卻至70度，開啟高 於鍋蓋取出試管，當試管溫度降到25。C左右，在無菌操作條件下，接入基礎菌 種；
(6) 將步驟(5)得到的試管菌種在25。C左右培養10—13天就可用於生產。 看麥娘、狗尾草是一種野草，看麥娘成熟於春季、狗尾草成熟於秋季，其
籽粒飽滿，粒小且殼硬，它的體積約為麥粒的百分之一，經破碎化驗，所含碳、 氮比合理，營養成份優於麥粒、穀粒。由於草籽殼硬且光滑，因此，在製備過 程中，其殼不易破碎，受汙染率極低，但由於草籽殼硬且光滑，單用草籽作培 養基，接種後不易發菌，經試驗，將草籽殼表面溼潤營養液，接種萌發後就吃 料，發菌勢好、長速快。
本發明與現有技術相比具有以下明顯優點
一、 質量好本發明的培養基碳氮比合理，營養充分，菌絲長速快，滿 管時間比穀粒種早3天，比PDA種早2天，比木屑種早10天，比竹粒、木粒 種早7天，且菌絲潔白有力。
二、 耐老化本發明的培養基在常溫下存放一年，活力如故，轉接試管種
或原種，仍表現出萌發快、發菌有力、無汙染的特點。
三、 生產效率高正常情況下，以PDA為培養基的試管種，滿管需7—10 天，原種滿瓶、滿袋需30天，裁培種滿袋需30—40天， 一個三級種周期約80 天，由於草籽粒小、表面積大、且分散性能優越， 一支試管種相當於以PDA為
培養基的試管種經三級擴轉後的含種量，因此，本發明的試管種可直接轉接產
菇袋(省掉擴轉原種、裁培種工序)，可以縮短裁培周期70天左右。有利於抓 季節，搶早上市，提高效益。
如果用本發明的試管種轉接原種或裁培種， 一支試管種可轉接原種或裁培 種200瓶(袋)左右，是常規試管種的30—50倍。
四、 節約成本、減輕勞動強度用草籽試管種直接轉接產菇袋，省去了原 種，裁培種兩個生產環節，不僅節約了原種，裁培種的原材料，而且省去了兩 級原料的預溫配拌、裝瓶、裝袋、滅菌、接種的勞動量，既節本增效，又免除 了天熱蚊蟲叮咬之苦。
五、 汙染率低由於草籽粒小殼硬，因此本發明萌發表面積大，萌發快， 發菌勢好，汙染率低。
綜上，本發明具有生產環節少、生產周期短、生產效率高、生產成本低、 勞動強度低、經濟效率高的優點。
具體實施例方式
實施例1:
(1) 取狗尾草草籽100斤，去除雜質後放入水中浸泡55小時，然後取出 草籽，晾乾表皮水份備用；
(2) 製備營養液取大豆芽30%、麥皮15%、鮮燕中的平燕55%放入水 中煮沸(按三種物質與水重量比為1: 1.5)，保溫40分鐘，然後過濾取出液體，
再將液體加熱濃縮，直至用玻璃棒插入濃縮液中，再提起玻璃棒，有掛棒現象
為止；
(3) 向步驟(2)得到的營養液中加入磷酸二氫鉀，調整PH至7;
(4) 用步驟(3)得到的營養液噴灑步驟(1)得到的草籽(草籽與營養液
的重量比為l: 0.3)，並充分拌和均勻，使草籽表面全部溼潤營養液、並附著營 養液，即得到所述的培養基；
(5) 裝管、滅菌將步驟(4)得到的培養基裝入試管中，塞棉塞、包紮，
裝入高壓鍋中，保持1. 5個大氣壓滅菌60分鐘，自然冷卻至70度，開啟高於 鍋蓋取出試管，當試管溫度降到25'C左右，在無菌操作條件下，接入基礎菌種;
(6) 將步驟(5)得到的試管菌種在25。C左右培養10—13天就可用於生產。 實施例2:
(1) 取狗尾草草籽100斤，去除雜質後放入水中浸泡50小時，然後取出 草籽，晾乾表皮水份備用；
(2) 製備營養液取大豆芽20%、麥皮10%、鮮菇種的平菇35%放入水 中煮沸(按三種物質與水重量比為1: 1)，保溫30分鐘，然後過濾取出液體， 再將液體加熱濃縮，直至用玻璃棒插入濃縮液中，再提起玻璃棒，有掛棒現象 為止；
(3) 向步驟(2)得到的營養液中加入磷酸二氫鉀，調整PH至6.5;
(4) 用步驟(3)得到的營養液噴灑步驟(1)得到的草籽(草籽與營養液 的重量比為l: 0.2)，並充分拌和均勻，使草籽表面全部溼潤營養液、並附著營 養液，即得到所述的培養基。
其餘實施如實施例l。
實施例3:
(1) 取看麥娘草籽100斤，去除雜質後放入水中浸泡60小時，然後取出 草籽，晾乾表皮水份備用；
(2) 製備營養液取大豆芽40%、麥皮30%、鮮燕中的平燕70%放入水 中煮沸(按三種物質與水重量比為1: 2),保溫50分鐘，然後過濾取出液體，再將液體加熱濃縮，直至用玻璃棒插入濃縮液中，再提起玻璃棒，有掛棒現象
為止；
(3) 向步驟(2)得到的營養液中加入磷酸二氫鉀，調整PH至7.2;
(4) 用步驟(3)得到的營養液噴灑步驟(1)得到的草籽(草籽與營養液 的重量比為l: 0.5)，並充分拌和均勻，使草籽表面全部溼潤營養液、並附著營 養液，即得到所述的培養基。
其餘實施如實施例l。
權利要求
1、大型真菌試管種培養基，其特徵在於由營養液溼潤草籽製成，草籽與營養液重量比為1∶0.2～0.5。
2、 如權利要求1所述的大型真菌試管種培養基，其特徵在於所述草籽為 看麥娘、狗尾草籽一種或兩種混合。
3、 如權利要求1所述的大型真菌試管種培養基，其特徵在於所述營養液 為豆芽、麥皮、菇，經破碎、熱水浸提、濃縮製得，重量百分比為豆芽20—40 %，麥皮10—30%，菇35—70%;三種物質與水重量比為l: l一2。
4、 如權利要求3所述的大型真菌試管種培養基，其特徵在於所述的菇為鮮燕，為鮮菇中的平燕、草燕、蘑菇、猴頭燕的一種或幾種混合。
5、 如權利要求3所述的大型真菌試管種培養基，其特徵在於所述豆芽為大豆芽、綠豆芽、碗豆芽、蠶豆芽一種或幾種混合。
6、 大型真菌試管種培養基的製備方法，其特徵在於包括下列步驟(1) 採集看麥娘或狗尾草籽，去除雜質後放入水中浸泡48—60小時，取 出晾乾草籽表皮水份備用；(2) 製備營養液按權利要求3所述的重量百分比，以及總物質與水體積 比，將豆芽、麥皮、菇放入水中煮沸，保溫30—50分鐘，然後過濾取出液體， 再將液體加熱濃縮；(3) 向步驟(2)得到的營養液中加入磷酸二氫鉀，調整PH至6.5—7.2;(4) 用步驟(3)得到的營養液噴灑步驟(1)得到的草籽，並充分拌和均 勻，即得到所述的培養基；(5) 裝管、滅菌將步驟(4)得到的培養基裝入試管中，塞棉塞、包紮， 裝入高壓鍋中，保持1.5個大氣壓，滅菌60分鐘，自然冷卻至70度，開啟高 壓鍋蓋取出試管，當試管溫度降到25。C左右，在無菌操作條件下，接入基礎菌種；(6)將步驟(5)得到的試管菌種在25"C左右培養10—13天就可用於生產。
全文摘要
本發明公開了大型真菌試管種培養基及其製備方法，由營養液潤溼看麥娘或狗尾草籽製成，草籽與營養液重量比為1∶0.2～0.5。應使草籽表面全部溼潤營養液、並附著營養液為佳。用本培養基製備試管種，菌絲長速快，滿管時間比PDA種早2天，比木屑種早10天，比竹粒、木粒種早7天。由於草籽粒小殼硬，發菌勢好，汙染率低。同時由於草籽粒小、表面積大、且分散性能優越，一支試管種相當於以PDA為培養基的試管種經三級擴轉後的含種量，因此，本發明的試管種可直接轉接產菇袋，可以縮短裁培周期70天左右。本發明具有生產效率高、生產成本低、勞動強度低、經濟效率高的優點。
文檔編號C12N1/14GK101173219SQ20071013372
公開日2008年5月7日 申請日期2007年9月30日 優先權日2007年9月30日
發明者張嘉聞 申請人:張嘉聞