一種肉仔雞下丘腦食慾調控研究的方法
2024-04-02 20:40:05 1
專利名稱：一種肉仔雞下丘腦食慾調控研究的方法
技術領域：
本發明涉及一種肉仔雞下丘腦食慾調控研究的方法，屬生物技術領域。
背景技術：
下丘腦作為動物食慾的中樞，對於採食量的調節起著重要作用。因此，不同藥物對於下丘腦中食慾相關神經元的研究越來越多。由於血腦屏障的作用，外周血液中的藥物很難進入下丘腦，或進入腦室內後劑量大大減少。第三腦室中位於下丘腦上部，能暫時容納一定劑量的藥物。通過先將藥物注入到第三腦室中，再觀察藥物對對下丘腦作用，這樣得到的數據更為直接和準確。但由於不同物種、品種、日齡的差異，第三腦室的位置也會不同，本技術建立利用7日齡肉仔雞第三腦室注射研究下丘腦食慾調控機制的研究方法，對於以後家禽生物學試驗的開展建立了一套迅速有效的試驗技術。
發明內容為了解決上述問題，本發明提供了一種肉仔雞下丘腦食慾調控研究的方法，具體是一種利用7日齡肉仔雞第三腦室注射研究下丘腦食慾調控機制的研究方法。通過確定7日齡 AA肉仔雞第三腦室的三維空間位置，實現研究某種生物活性物質(或信號物質)調控下丘腦神經中樞的目的，為以後生物學試驗研究提供一種方便快捷的技術手段。
本發明的目的是這樣實現的利用CT技術檢測7日齡雞的腦室三維圖譜，確定第三腦室的三維空間位置；再利用腦室注射儀將生物活性物質注入到7日齡AA肉仔雞第三腦室；利用染料伊卡斯蘭(其他試劑也可以)標記待測溶液，試驗結束後剖檢下丘腦及腦室，確定注射效果。
具體做法為在7日齡AA肉仔雞囟門處用記號筆做一標記，記為零點(0，0，0)， 以零點向雞耳蝸處為X軸，以零點向雞喙處為Y軸，以零點向雞顱骨下面垂直方向的延伸為Z軸。自零點處開始向喙端做螺旋CT，利用計算機斷層攝影系統(CT儀)中刻度尺測量從零點到出現第三腦室的距離和從零點到第三腦室消失的距離，並記錄第三腦室到顱骨的垂直距離，所得數據即為第三腦室的位置。第三腦室位於囟門向X軸方向延伸 1.8-2. 1mm，沿Z軸方向的延伸距離為5.4-5. 7mm。因此，7日齡AA肉仔雞第三腦室的坐標為(0，1. 8-2. 1，5. 4-5. 7)，單位為mm ；再利用腦室注射儀將生物活性物質注入到7日齡AA 肉仔雞第三腦室。
將染料伊卡斯蘭(其他試劑也可以)溶解在含有待測生物活性物質的生理鹽水中， 伊卡斯蘭溶液的質量體積濃度為0. 1%-0. 5%，其他試劑的注射濃度可根據需求而定，試驗結束後(一般不超過3 h)通過剖檢確定注射效果。如果在腦室外組織中不存在伊卡斯蘭染色， 判定為注射成功。
本發明的有益效果是快速確定7日齡AA肉仔雞第三腦室的位置，能迅速、高準確率的將試驗試劑注射到7日齡AA肉仔雞的第三腦室中，實現研究下丘腦採食調控機制的目的。
具體實施方式
實施例1在7日齡AA肉仔雞囟門處用記號筆做一標記，記為零點(0，0，0 )，以零點向耳蝸處為X 軸，以零點向喙處為Y軸，以零點向顱骨垂直方向的延伸為Z周。自零點處開始向喙端做螺旋CT，利用計算機斷層攝影系統(CT儀)中刻度尺測量從零點到出現第三腦室的距離以及從零點到第三腦室消失的距離，記錄第三腦室到顱骨的垂直距離，所得數據即為第三腦室的位置。第三腦室位於囟門向X軸方向延伸1. 8-2. 1mm，向Z軸方向延伸距離為5. 4-5. 7mm。 因此，7日齡AA肉仔雞第三腦室的坐標為(0，1.8-2. 1,5. 4-5. 7)，單位為mm。
實施例2 (一)固定1、在一水平桌面上，水平調整好立體定向器(江彎I型C)，包括水平上的左右2個固定夾、前面的喙固定夾。要求左右2個固定夾在一水平線上，左右距離一致，喙固定夾部位水平，與左右2個固定夾在一水平面上，並且與左右2個固定夾的尖端連接處形成一個邊長為 2-3cm的等邊三角形。
2、將7日齡肉仔水平並以俯臥的姿勢置於固定夾處，並使水平上的左右2根固定夾剛好對準耳蝸，先將喙卡好，然後慢慢的旋緊水平固定夾，使之尖端緩緩的伸進耳蝸(一側一側進行)，直至鬆緊適宜，整個頭顱水平固定，不能搖動為止(可從定向器前方察看)。
(二)注射將染料伊卡斯蘭(其他試劑也可以)溶解在生理鹽水中，伊卡斯蘭溶液的質量體積濃度為0. 1%-0. 5%，(其他試劑的注射濃度可根據需求而定)，將盛有伊卡斯蘭溶液的微量注射器固定在腦室注射儀上，移動微量注射器對準因門，以此為坐標的0點，向X軸移動注射器 1. 8-2. Imm,然後Z軸移動注射器至針頭接觸到頭部皮下組織，繼續向Z軸移動5. 4-5. 7mm 距離，調整微量注射泵注射劑量為2-lOul，注射時間為30-60秒，按下微量注射泵注射開關，注射完畢後移出微量注射器，鬆開肉仔雞。按照同樣的方法連續將伊卡斯蘭注入到40 只7日齡肉仔雞第三腦室中。
(三)檢測腦組織體外檢測發現按照本發明確定的第三腦室的坐標，成功將藥物注入到7日齡肉仔雞的第三腦室的有36隻，成功率為90%。
權利要求
1. 一種肉仔雞下丘腦食慾調控研究的方法，其特徵在於先利用CT技術檢測7日齡雞腦室三維圖譜，確定第三腦室的三維空間位置在7日齡AA肉仔雞囟門處用記號筆做一標記，記為零點(0，0，0)，以零點向雞耳蝸處為X軸，以零點向雞喙處為Y軸，以零點向雞顱骨下面垂直方向的延伸為Z軸；自零點處開始向喙端做螺旋CT，利用計算機斷層攝影系統CT 儀中刻度尺測量從零點到出現第三腦室的距離和從零點到第三腦室消失的距離，並記錄第三腦室到顱骨的垂直距離；所得數據即為第三腦室的位置，第三腦室位於因門向X軸方向延伸1.8-2. 1mm，沿Z軸方向的延伸距離為5.4-5. 7mm ；確定7日齡AA肉仔雞第三腦室的坐標為(0，1. 8-2. 1，5. 4-5. 7)，單位為mm ；再利用腦室注射儀將生物活性物質注入到7日齡 AA肉仔雞第三腦室。
全文摘要
本發明涉及一種肉仔雞下丘腦食慾調控研究的方法，是先利用CT技術確定7日齡AA肉仔雞第三腦室位置；通過利用腦室注射儀，將藥物注入到第三腦室中，檢測其成功率。作為一種生物技術，能迅速準確地將藥物注射到7日齡AA肉仔雞第三腦室中，為研究藥物對下丘腦作用提供有效的技術手段。
文檔編號A61D7/00GK102512260SQ20111042970
公開日2012年6月27日 申請日期2011年12月20日 優先權日2011年12月20日
發明者劉磊, 宋志剛, 朱立賢, 李先磊, 林海, 焦洪超 申請人:山東農業大學