一種微生物菌株及其應用的製作方法
2024-04-04 06:23:05
專利名稱：一種微生物菌株及其應用的製作方法
技術領域：
:本發明涉及一種微生物菌株及其應用，屬微生物農藥技術領域。
背景技術：
:植物寄生線蟲是作物上普遍發生的病害之一，危害幾乎所有作物。僅根結線蟲(Meloidogyne spp.)每年在全球造成的損失就高達數百億美元。由於生產上缺乏抗性品種，農作物複種指數高，化學殺線劑的使用受到限制，以及現代農業可持續發展的需要，生物防治植物線蟲日益受到重視。放線菌作為一種獨特的微生物資源，其豐富的代謝產物具有多種多樣的活性。本專利利用雲南特有的生物資源，篩選出產生高效毒殺線蟲活性代謝產物來毒殺根結線蟲的放線菌菌株，在線蟲的生物防治中具有潛在和實際的應用價值
發明內容
:本發明的目的在於提供一種微生物菌株及其應用。本發明具體是這樣實現的:發明人在前期研究中，篩選獲得了具有良好殺線蟲功能的放線菌糞生鏈黴菌(Streptomyces fimicarius) D153。D153菌株已於2012年7月12日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏單位地址:北京市朝陽區北辰西路I號院3號中國科學院微生物研究所；保藏號為CGMCC N0.6353。糞生鏈黴菌(Streptomyces fimicarius)孢子絲直或柔曲，孢子為長圓形、柱形或杆狀，表面光滑，在合成培養基上培養時，菌落微褐色帶微紅色調或淺黃色調，可溶色素為褐色或黃褐色，氣生菌絲為暗煙色或微灰色(Taguchi，1993)。本發明的糞生鏈黴菌D153菌株作為製備用於防治根結線蟲製劑的應用。本發明將糞生鏈黴菌D153通過常規的液體體培養，獲得包括菌體和胞外分泌物的菌液，穴施使用。本放線菌劑能與其他的殺線蟲農藥、植物生長調節劑混合使用，但必須保證所混合藥劑對本發明採用的菌劑無副作用。本發明的放線菌劑一般在作物播種或移栽時施用。方法是播種時與種子共同施入土壤中，移栽時將本製劑施入作物根際周圍。對線蟲發生嚴重地區可在作物生長過程中追施一次，方法是將本製劑施入作物根際周圍。本發明與現有的殺植物寄生線蟲藥相比，具有高效、低毒以及無殘留的優點。
具體實施方式
:本發明化合物的發 酵生產方法(常規方法):1、液體種子培養:高氏一號液體培養基分裝到500ml三角瓶中，常規滅菌,再於超淨工作檯上用接種針從試管斜面上挑取一些菌絲接種於其中，然後22-28°C，150-180rpm/min於搖床上培養5-8天備用。2、將搖好的種子按10-20%的接種量接種到發酵罐中，控制溫度在22_28°C，培養
2-3天，然後將發酵液用水調節，使CFU在105-108，備用。本發明製劑對根結線蟲的防效試驗:1、南方根結線蟲(Meloidogyne incognita)的培養將溫室培養的帶有南方根結線蟲的番茄根用無菌水洗淨，解剖針挑取根結線蟲的卵囊置於0.4M的KCl溶液中，在5ml離心管中依次用4ml無菌水(三次)、Iml無菌青-鏈黴素雙抗溶液、3ml 0.1%的NaClO溶液洗滌和消毒，每一步驟均通過短暫離心(8000轉30秒)除去上清液。洗滌好的蟲卵置於0.4M的ZnCl2溶液中孵化48小時，二齡幼蟲用移液器收集於1.5ml離心管，通過短暫離心(5000轉30秒)富集備用。2、防效試驗方法( I)試驗所用藥劑及處理A、液體菌劑,在作物移栽時一次性施於作物根際；B、陽性對照，0.5%阿維菌素按37.5 kg/hm2處理；C、空白對照，不加菌劑或藥劑處理。(2)試驗方法在直徑為15 cm的盆缽加入500g 土樣(病土:沙土:腐殖土 =1:1:1)，做以上幾個處理。每個處理5盆且3次重複，置於25 — 28°C的溫室中培養。移栽後每隔3天澆水，使其正常生長。菌劑處理後30、60天分別調查各處理組作物根部的根結數、根際的蟲卵數和作物的株高、地上部分重以及根的溼重，計算菌劑對根結線蟲病的防治效果。實施例1:用菌劑防治番茄根結線蟲病試驗移栽I月齡番爺(4-6葉),番爺品種為:中雜9號，山東農業科技開發公司生產。每盆施用IOOml菌劑，按上述試驗方法進行防效試驗。列表所示為防效數據。表1菌劑對番茄根結線蟲病的防治效果(60d)
權利要求
1.種微生物菌株，其特徵在於該微生物菌株為糞生鏈黴菌(Streptomycesfimicarius) D153，保藏號為:CGMCC N0.6353。
2.利要求1所述的糞生鏈黴菌(Streptomycesfimicarius)D153菌株在製備用於防治根結線蟲製劑中 的應用。
全文摘要
本發明涉及一種微生物菌株及其應用，屬微生物農藥技術領域。本發明的微生物菌株為糞生鏈黴菌 (Streptomyces fimicarius) D153。D153菌株已於2012年7月18日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC No.6353。本發明的微生物菌株作為製備用於防治根結線蟲製劑的應用。用本發明的微生物菌株製備的菌劑對番茄根結線蟲病溫室防效達到60%以上，對菸草根結線蟲病溫室防效達到40%以上。並能明顯促進植物的生長。用本發明的微生物菌株製備的防治根結線蟲製劑，具有高效、低毒及無殘留的優點。
文檔編號C12N1/20GK103087946SQ20121058032
公開日2013年5月8日 申請日期2012年12月28日 優先權日2012年12月28日
發明者劉亞君, 楊敏敏, 張克勤 申請人:雲南大學