一種補腎養血方的提取方法及其藥物組合物的製作方法
2023-12-05 12:52:31
專利名稱：一種補腎養血方的提取方法及其藥物組合物的製作方法
技術領域：
本發明涉及一種補腎養血方的提取方法，以及含有該提取物的藥物組合物。
背景技術：
補腎養血方來源於《部頒中藥第五冊》標準號為WS3-B-0948-91的補腎養血丸，由制何首烏、當歸、黑豆、牛膝(鹽制)、茯苓、菟絲子、補骨脂(鹽制)、枸杞子組成。具有補肝腎，益精血的功效。其中制何首烏補肝益腎，澀精固氣；枸杞子、菟絲子均入肝腎，填精補腎，固精止遺；當歸補血養肝，牛膝強健筋骨，黑豆具有補肝腎的作用，以上諸藥共同達到滋補肝腎之陰的效果，藥性較平。補骨脂可溫補腎陽，此取之於「善補陰者，則陽中求陰」，使陰得陽升而泉源不竭；茯苓淡滲以洩濁，乃補中有瀉，諸藥配伍，共奏補肝益腎，澀精固本之功，故可廣泛應用於身體虛弱，血氣不足，遺精，鬚髮早白等症狀，廣泛用於臨床中肝腎不足的各種疾患。
原劑型為蜜丸及水丸，蜜丸及水丸為全粉入藥，服用量分別為9g、6g，服用量大，且服用不便，目前尚無針對補腎養血方進行提取方法的研究，因此該藥物劑型陳舊，病人的順應性差，隨著社會的發展，人們生活水平的提高，劑型改造勢在必行。
發明內容
本發明的目的在於針對補腎養血處方，提供一種提取方法，將得到的提取物加入輔料，製成新劑型。
補腎養血方見《部頒中藥第五冊》標準號為WS3-B-0948-91的補腎養血丸，由制何首烏80g、當歸20g、黑豆40g、牛膝(鹽制)20g、茯苓20g、菟絲子20g、補骨脂(鹽制)10g、枸杞子20g組成，原製法為以上八味，粉碎成細粉，過篩，混勻，每100粉末加煉蜜110～120g製成大蜜丸，或加煉蜜40～50g與適量的水泛丸，包衣，乾燥，即得。
本發明的提取工藝如下按照補腎養血丸的重量比稱取制何首烏、當歸、黑豆、牛膝(鹽制)、茯苓、菟絲子、補骨脂(鹽制)、枸杞子，加乙醇提取，合併煎液，濾過，濾液回收乙醇得清膏；醇提後的藥渣加水煎煮兩次濾過，濾液回收得清膏。合併兩個清膏，濃縮，得提取物。
其中醇提採用5～10倍量40～95％乙醇提取2～3次，每次0.5～3小時，合併煎液，濾過，濾液回收乙醇得清膏。
醇提優選採用加8倍量70％乙醇提取3次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液回收乙醇得清膏。
醇提後的藥渣加5～15倍量水煎煮2次，每次0.5～2小時，濾過，濾液回收得清膏。合併兩個清膏，濃縮，得提取物備用。
醇提後的藥渣優選加10倍量水煎煮2次，每次1小時，濾液回收得清膏。合併兩次清膏，濃縮，得提取物。
本發明的另一個目的在於提供含有上述提取物的藥物組合物。該藥物組合物含有有效量的補腎養血提取物以及藥物學上可以接受的載體和賦形劑，該組合物可以是口服液、合劑、糖漿劑、膏滋、硬膠囊、軟膠囊、片劑、顆粒劑、微丸。
含有補腎養血提取物的軟膠囊由藥液和囊殼兩部分製成。
藥液主要由補腎養血提取物、稀釋劑、助懸劑及潤溼劑按重量比為1∶0.6～1∶0.01～0.08∶0～0.06製成。
稀釋劑選自大豆油、聚乙二醇400。稀釋劑優選大豆油。
助懸劑選自蜂蠟、單硬脂酸甘油酯。
助懸劑優選蜂蠟。
潤溼劑選自卵磷脂。
囊殼材料由明膠、甘油、水和防腐劑組成。選擇明膠、甘油、水的重量百分比為明膠∶甘油∶水＝1∶0.3～0.7∶0.8～1。
軟膠囊的具體製備方法稀釋劑、助懸劑及潤溼劑加熱，80℃使混溶，放冷，將篩後的補腎養血乾粉逐漸加入混合油中，攪拌混勻，用膠體磨研磨，使其形成均勻的混懸液，壓製成軟膠囊。
本發明提取工藝的優點1、製劑的質量標準中增加了有效成分二苯乙烯苷的含量控制指標，增加了當歸、補骨脂、制何首烏三味藥材的薄層鑑別，與原丸劑相比，本品的質量更加可控；2、本品進行提取後在不降低藥效的基礎上減少了服用量，使患者服用、攜帶更加方便。
藥效學試驗顯示1、補腎養血提取物能明顯增強其免疫功能；2、補腎養血提取物能加速RBC和Hb的恢復；3、補腎養血提取物能明顯改善其腎功能。
具體實施例方式
本發明由下列實施例來說明，但不應當構成對本發明的限制。
補腎養血方見部頒中藥第五冊標準號為WS3-B-0948-91的補腎養血丸，即由制何首烏80g、當歸20g、黑豆40g、牛膝(鹽制)20g、茯苓20g、菟絲子20g、補骨脂(鹽制)10g、枸杞子20g組成。
實施例一補腎養血提取工藝稱取補腎養血組方，加8倍量70％乙醇提取3次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液回收乙醇得清膏；藥渣加10倍量水煎煮兩次，每次1小時，濾過，濾液回收得清膏。合併兩個清膏，濃縮，得提取物。
實施例二補腎養血提取工藝稱取補腎養血組方，加8倍量80％乙醇提取3次，每次1小時，合併煎液，濾過，濾液回收乙醇得清膏；藥渣加8倍量水煎煮兩次，每次0.5小時，濾過，濾液回收得清膏。合併兩個清膏，濃縮，得提取物。
實施例三補腎養血提取工藝稱取補腎養血組方，加6倍量75％乙醇提取2次，每次1.5小時，合併煎液，濾過，濾液回收乙醇得清膏；藥渣加5倍量水煎煮兩次，每次1小時，濾過，濾液回收得清膏。合併兩個清膏，濃縮，得提取物。
實施例四補腎養血提取工藝稱取補腎養血組方，加6倍量70％乙醇提取2次，每次1小時，合併煎液，濾過，濾液回收乙醇得清膏；藥渣加10倍量水煎煮兩次，每次1小時，濾過，濾液回收得清膏。合併兩個清膏，濃縮，得提取物。
實施例五補腎養血軟膠囊採用實施例一製備補腎養血提取物(按出膏率25％)，乾燥得乾粉備用，補腎養血軟膠囊組方如下組方重量(g)補腎養血提取物乾粉 100大豆油 60卵磷脂 2蜂蠟2總重量 1641、製備方法按上述組方混合均勻，壓製成軟膠囊。製成300粒，每天服用2～3次，每次3粒。
2、含量測定照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI D)測定。
(1)色譜條件與系統適用性試驗用十八烷基矽烷鍵合矽膠為填充劑；乙腈—水(18∶82)為流動相；檢測波長為320nm。理論板數按2，3，5，4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰計算應不低於3000。
(2)對照品溶液的製備精密稱取2，3，5，4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷對照品約15mg，置50ml量瓶中，加50％乙醇適量，超聲使溶解，加50％乙醇稀釋至刻度，搖勻；精密量取5ml至50ml量瓶中，加50％乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得(每1ml中含2，3，5，4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷約30μg)。
(3)供試品溶液的製備取本品裝量差異項下的內容物，混勻，取約0.15g，精密稱定，置50ml量瓶中，加50％乙醇適量，超聲處15min，放冷至室溫，加50％乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。
6、測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，按外標法以峰面積計算，即得。
7、本品含制何首烏以2，3，5，4′-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(C10H12N5O4，簡稱為二苯乙烯苷)計，每粒或者每片不得少於2.1mg。
檢測結果每粒軟膠囊中含二苯乙烯苷4.1mg。
實施例六補腎養血軟膠囊採用實施例一製備補腎養血提取物(出膏率為25％)，乾燥得乾粉備用，補腎養血軟膠囊組方如下組方 重量(g)補腎養血提取物乾粉100大豆油100卵磷脂6蜂蠟 6總重量212製備方法按上述組方混合均勻，壓製成軟膠囊。製成300粒，每天服用2～3次，每次3粒。
採用實施例五的含量測定方法，本品每粒含二苯乙烯苷4.3mg。
實施例七補腎養血軟膠囊採用實施例一製備補腎養血提取物(出膏率為25％)，乾燥得乾粉備用，補腎養血軟膠囊處方如下組方 重量(g)補腎養血提取物乾粉100大豆油80卵磷脂2蜂蠟 3總重量185製備方法按上述組方混合均勻，壓製成軟膠囊。製成300粒，每天服用2～3次，每次3粒。
採用實施例五的含量測定方法，本品每粒含二苯乙烯苷4.2mg。
實施例八補腎養血軟膠囊採用實施例一製備補腎養血提取物(出膏率為25％)，乾燥得乾粉備用，補腎養血軟膠囊組方如下組方 重量(g)補腎養血提取物乾粉100大豆油80卵磷脂3蜂蠟 4總重量187製備方法按上述組方混合均勻，壓製成軟膠囊。製成300粒，每天服用2～3次，每次3粒。
採用實施例5的含量測定方法，本品每粒含二苯乙烯苷3.8mg。
實施例九補腎養血軟膠囊採用實施例一製備補腎養血提取物(出膏率為25％)，乾燥得乾粉備用，補腎養血軟膠囊組方如下組方重量(g)補腎養血提取物乾粉 100聚乙二醇80總重量 185製備方法按上述組方混合均勻，壓製成軟膠囊。製成300粒，每天服用2～3次，每次3粒。
採用實施例五的含量測定方法，本品每粒含二苯乙烯苷4.3mg。
實施例十補腎養血軟膠囊採用實施例一製備補腎養血提取物(出膏率為25％)，乾燥得乾粉備用，補腎養血軟膠囊組方如下組方重量(g)補腎養血提取物乾粉 100大豆油 80單硬脂酸甘油酯 1.8總重量 181製備方法按上述組方混合均勻，壓製成軟膠囊。製成300粒，每天服用2～3次，每次3粒。
採用實施例五的含量測定方法，本品每粒含二苯乙烯苷4.2mg。
實施例十一補腎養血軟膠囊採用實施例二製備補腎養血提取物(出膏率為25％)，乾燥得乾粉備用，補腎養血軟膠囊組方如下組方重量(g)補腎養血提取物乾粉 100
大豆油90單硬脂酸甘油酯4總重量194製備方法按上述組方混合均勻，壓製成軟膠囊。製成300粒，每天服用2～3次，每次3粒。
採用實施例五的含量測定方法，本品每粒含二苯乙烯苷4.2mg。
實施例十二補腎養血軟膠囊採用實施例二製備補腎養血提取物(出膏率為25％)，乾燥得乾粉備用，補腎養血軟膠囊組方如下組方 重量(g)補腎養血提取物乾粉100大豆油100單硬脂酸甘油酯12總重量212製備方法按上述組方混合均勻，壓製成軟膠囊。製成300粒，每天服用2～3次，每次3粒。
採用實施例五的含量測定方法，本品每粒含二苯乙烯苷4.1mg。
實施例十三補腎養血膠囊採用實施例三製備補腎養血提取物(出膏率為25％)，乾燥得乾粉備用，補腎養血軟膠囊組方如下組方 重量(g)補腎養血提取物乾粉100大豆油80單硬脂酸甘油酯2總重量3.5製備方法按上述組方混合均勻，壓製成軟膠囊。製成300粒，服用方法同實施例五。
採用實施例五的含量測定方法，本品每粒含二苯乙烯苷4.5。
實施例十四補腎養血膠囊採用實施例一製備的提取物(出膏率為25％)，乾燥取100g，灌裝膠囊，每粒膠囊裝量為0.33g。
採用實施例五的含量測定方法，本品每粒含二苯乙烯苷3.6mg。
實施例十五補腎養血片採用實施例一製備的提取物(出膏率為25％)，乾燥，得乾粉備用。
補腎養血乾粉100g澱粉20g製備方法按上述組方混合均勻，用95％的乙醇制軟材，制粒，乾燥，壓製成片，規格0.3g/片，每次服用四粒。
採用實施例五的含量測定方法，本品每片含二苯乙烯苷4.5mg。
實施例十六補腎養血顆粒劑採用實施例一製備的提取物，乾燥，得乾燥粉備用。
補腎養血乾粉100g蔗糖150g糊精50g混合均勻，用75％的乙醇制軟材，制粒，乾燥，分裝成2g/袋，每天服用2～3次，每次服用一袋。
採用實施例五的測定方法，本品每粒含二苯乙烯苷12.9mg。
以實施例一的提取物為基本藥物，與陽性藥物補腎養血丸相比較，用多種動物模型對補腎養血軟膠囊的增強免疫、益精血、增強腎功能等作用進行藥效試驗，具體方法及其結果如下實施例十七對正常小鼠淋巴細胞轉化率的影響試驗藥物實施例一提取的提取物乾燥得到的乾粉，每1g乾粉相當於4g生藥(簡稱補腎養血)。陽性藥物補腎養血丸，每1g丸重相當於0.69g生藥。洛陽君山製藥有限公司生產。上述藥物臨用前以0.5％CMC(羧甲基纖維素)配製成所需濃度的藥液，供動物灌胃給藥用。
試驗動物ICR小鼠，體重19.2±0.9(18～21)g，雌雄各半，北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。
試驗方法ICR小鼠50隻，按性別、體重隨機分為5組，每組10隻。對照組灌胃給予0.5％CMC，受試藥組灌胃給予補腎養血，劑量分別為2.5、5、10g生藥/kg，陽性藥組灌胃給予補腎養血丸，劑量為5g生藥/kg，給藥體積均為20ml/kg，每日一次，連續14天。
末次給藥後24h剪尾取血塗片，瑞氏染色，油鏡下計數100個淋巴細胞中淋巴母細胞和過度態細胞數，計算淋巴細胞轉換率，觀察藥物對免疫細胞的影響。
試驗結果與對照組比較，給予補腎養血後2.5、5、10g生藥/kg14天後，小鼠的淋巴母細胞分別增加了17.0％(P＞0.05)，45.9％(P＜0.01)，55.9％(P＜0.01)；過渡態細胞分別增加了5.5％(P＞0.05)，18.8％(P＜0.05)，24.3％(P＜0.01)。補腎養血丸陽性藥組，其淋巴母細胞和過渡態細胞分別增加了40.6％(P＜0.01)和16.3％(P＜0.05)。等劑量的補腎養血與丸劑作用相當。結果見表1。
表1補腎養血對正常小鼠淋巴細胞轉化率的影響(X±s，n＝10)
注與對照組比較※P＜0.05，※※P＜0.01；等劑量補腎養血與丸劑比較P＞0.05。
試驗結果表明補腎養血可增強小鼠細胞免疫功能。
實施例十八對小鼠溶血素(IgM)的影響試驗藥物同實施例十七。
試驗動物ICR小鼠，體重19.5±1.1(18～22)g，雌雄各半，北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。
試驗方法ICR小鼠60隻，按性別、體重隨機分為6組，每組10隻。正常對照組及免疫對照組灌胃給予0.5％CMC，受試藥組灌胃給予補腎養血，劑量分別為2.5、5、10g生藥/kg，陽性藥組灌胃給予補腎養血丸，劑量為5g生藥/kg；給藥體積均為20ml/kg，每日一次，連續給藥14天。試驗的第8天，除正常對照組外，其它各組小鼠分別腹腔注射5％雞血紅細胞生理鹽水混懸液0.2ml/只，進行致免。
免疫後第7天，末次給藥後1h，所有各組均摘眼球取血約0.5ml，離心，取血清用生理鹽水稀釋100倍，取上述稀釋血清1ml與5％雞紅細胞懸液0.5ml混勻，冰浴(4℃)中加入10％補體0.5ml，370℃恆溫水浴箱中保溫30min後，冰水浴中終止反應，離心，取上清液於722分光光度計540nm處比色(以不加血清的空白管調零)，測吸光度(OD)，觀察藥物對體液免疫的影響。
試驗結果給予腹腔注射5％雞血紅細胞生理鹽水混懸液0.2ml後，第七天，免疫對照組的OD值明顯增加。給予補腎養血2.5、5、10g生藥/kg，與免疫對照組相比，OD值分別增加了9.7％(P＞0.05)，17.4％(P＜0.01)，20.1％(P＜0.01)。補腎養血丸組，其OD值增加了15.3％(P＜0.05)。等劑量的補腎養血與丸劑作用相當。結果見表2。
表2補腎養血對小鼠溶血素生成的影響(X±s，n＝10)
注與正常對照組比較△△P＜0.01；與免疫對照組比較※P＜0.05，※※P＜0.01；等劑量補腎養血與丸劑比較P＞0.05。
試驗結果表明補腎養血可增強小鼠特異性體液免疫。
實施例十九對血虛模型小鼠的影響試驗藥物同實施例十七。
試驗動物昆明種小鼠，體重19.7±1.3(18～22)g，雌雄各半。天津藥物研究院實驗動物室提供。
試驗方法試驗前小鼠尾靜脈取血20μl，採用血球計數儀測定紅細胞計數(RBC)及血紅蛋白含量(Hb)。小鼠眼眶放血0.5ml，使動物失血形成血虛模型。於失血後24h再測RBC、Hb。
按性別、體重和血虛程度隨機分層分為5組，每組10隻。然後開始灌胃給藥，對照組給予0.5％CMC，受試藥組給予補腎養血，劑量分別為2.5、5、10g生藥/kg，陽性藥組給予補腎養血丸，劑量為5g生藥/kg；給藥體積均為20ml/kg，每日一次，連續給藥6天。分別於藥後3和6天測定RBC、Hb，觀察藥物作用。
試驗結果小鼠眼眶放血後，紅細胞(RBC)、血紅蛋白含量(Hb)明顯減少。給予補腎養血2.5、5、10g生藥/kg後第6天，與模型對照組比較，RBC分別提高了3.7％(P＞0.05)，12.9％(P＜0.05)，13.6％(P＜0.05)；Hb分別提高了1.8％(P＞0.05)，9.8％(P＜0.05)，12.0％(P＜0.01)。補腎養血丸陽性藥組RBC和Hb分別提高了12.1％(P＜0.05)和8.8％(P＜0.05)。等劑量的補腎養血與丸劑作用相當。結果見表3、4。
表3補腎養血對血虛模型小鼠RBC(×1012/L)的影響(X±s，n＝10)
注與正常對照組比較△△P＜0.01；與模型對照組比較※P＜0.05；等劑量補腎養血與丸劑比較P＞0.05
表4補腎養血對血虛模型小鼠Hb(g/L)的影響(X±s，n＝10)
注與正常對照組比較△△P＜0.01，與模型對照組比較※P＜0.05，※※P＜0.01；等劑量補腎養血與丸劑比較P＞0.05。
試驗結果表明補腎養血能加速RBC和Hb的恢復。
實施例二十對腎虛模型大鼠的影響試驗藥物同實施例十七。
試驗動物Wistar大鼠，體重215±14(200～240)g，雌雄各半。北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。
試驗方法Wistar大鼠60隻，按性別、體重隨機分為6組。其中5組用含0.5％腺嘌呤飼料餵養大鼠一個月，每日平均投入量約相當於腺嘌呤350mg/kg。投入腺嘌呤飼料當日，各組大鼠即灌胃給予相應藥物。正常對照組和模型對照組給予0.5％CMC，受試藥組給予補腎養血，劑量分別為2、4、8g生藥/kg，陽性藥組給予補腎養血丸，劑量為4g生藥/kg；給藥體積均為10ml/kg，陽性藥組每日分二次給藥，其餘各組每日給藥一次，連續給藥30天。
實驗結束前1天開始收集24h尿液，測尿液中微量總蛋白、肌酐、尿素氮。末次給藥後1h大鼠腹腔注射35％水合氯醛350mg/kg麻醉，腹主動脈取血6ml，3000rmp離心10min製備血清，測肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、三碘甲腺原氨酸(T3)、四碘甲腺原氨酸(T4)、皮質醇(C)、睪酮(T)、雌二醇(E2)，按下式計算肌苷清除率肌苷清除率(ml/min)＝尿肌苷濃度×尿液體積/血漿肌苷濃度/1440。取兩側腎臟稱重，大體觀察記錄後，10％福馬林固定，切片，HE染色進行組織病理學檢查。
試驗結果
1、臨床表現在整個實驗過程中，正常對照組大鼠生長旺盛，十分活躍，皮毛光潔，體重增加。模型對照組大鼠逐步消瘦，體重下降，活動減少，蜷縮、畏寒，毛色無光澤，反應遲鈍，尾巴溼冷。補腎養血3個給藥組大鼠體重亦呈下降或增長停滯，但較模型對照組輕；3個給藥組動物狀態也較模型組好。
2、對腎功能的影響腺嘌呤模型對照組血清尿素氮(BUN)和血清肌酐(Cr)顯著增加，較正常對照組分別增加了3～4倍，肌苷清除率(Clcr)顯著降低，較正常對照組約下降了6倍。與模型對照組相比，給予補腎養血2、4、8g/kg後，增加的BUN分別下降了26.9％(P＞0.05)，41.1％(P＜0.01)，50.6％(P＜0.01)；增加的Cr分別下降了20.5％(P＞0.05)，37.5％(P＜0.05)，39.6％(P＜0.05)；降低的ClCr分別增加了3.7％(P＞0.05)，13.4％(P＜0.01)，20.6％(P＜0.01)。補腎養血丸陽性藥組，其增加的BUN和Cr分別下降了34.5％(P＜0.05)，27.7％(P＜0.05)，降低的ClCr增加了8.8％(P＜0.05)。等劑量的補腎養血與丸劑作用相當。結果見表5。
表5補腎養血對腎虛模鼠腎功能的影響(X±s，n＝10)
注1.與正常對照組比較△△△P＜0.001；2.與模型對照組比較※P＜0.05，※※P＜0.01；3.等劑量補腎養血與丸劑比較P＞0.05。
飼食腺嘌呤形成腎虛模型後，大鼠尿量顯著減少，尿中尿素氮排出量顯著下降，尿中總微量蛋白顯著增加。與模型對照組比較，給予補腎養血2、4、8g/kg後，減少的尿量分別增加了17.0％(P＞0.05)，36.3％(P＜0.05)，62.6％(P＜0.01)；減少的尿中尿素氮排出量分別增加了59.3％(P＞0.05)，59.7％(P＜0.05)，97.3％(P＜0.01)；增加的尿蛋白分別減少了48.8％(P＞0.05)，92.3％(P＜0.05)，90.8％(P＜0.05)。補腎養血丸組，其減少的尿量和尿素氮排出量分別增加了37.4％(P＜0.05)和52.8％(P＜0.05)，增加的尿蛋白減少了81.5％(P＞0.05)。等劑量的補腎養血與丸劑作用相當。結果見表6。
表6補腎養血對腎虛大鼠尿液指標的影響(X±s，n＝10)
注1.與正常對照組比較△P＜0.05，△△P＜0.01，△△△P＜0.001；2.與模型對照組比較※P＜0.05，※※P＜0.01；3.等劑量補腎養血與丸劑比較P＞0.05。
3、對內分泌功能的影響大鼠飼食腺嘌呤形成腎虛模型後內分泌功能顯著降低。同時給予補腎養血2、4、8g/kg，下降的T3分別增加了6.5％(P＞0.05)，58.8％(P＜0.05)，65.3％(P＜0.05)；下降的T4分別增加了0.4％(P＞0.05)，46.5％(P＜0.05)，81.6％(P＜0.01)；下降的皮質醇(C)分別增加了12.7％(P＞0.05)，94.1％(P＜0.01)，124.8％(P＜0.01)；下降的睪酮(T)分別增加了22.0％(P＜0.05)，38.4％(P＜0.05)，59.0％(P＜0.01)；下降的雌二醇(E2)分別增加了42.6％(P＞0.05)，58.7％(P＜0.05)，64.9％(P＜0.05)。補腎養血丸陽性藥組，其下降的T3、T4、C、T、E2也有相應的增加。等劑量的補腎養血與丸劑作用相當。
4、組織病理學檢查腎臟大體解剖可見，正常對照組腎臟表面光滑呈紅褐色，正常大小，彈性好；切麵皮髓質界限清楚，無異常。模型對照組腎臟體積增大，表面凹凸不平，顏色蒼白，間有紅色點狀顆粒；切麵皮髓質界限不清，腎孟擴張。補腎養血2g/kg劑量組腎臟體積增大，比模型對照組略小，顏色花白；切麵皮髓質界限不清。補腎養血4、8g/kg劑量組腎臟體積增大，但比病理組明顯減小，顏色花白；切面可分辨皮髓質界限。陽性藥補腎養血丸組腎臟體積增大，比病理組小，顏色花白；切面略顯淡紅，可分辨皮髓質界限。
顯微鏡下可見，模型對照組病變主要在腎小管，其管內有大量結晶，腎小管囊狀擴張，間質纖維化，並有淋巴細胞浸潤；腎小管數量減少。給予補腎養血後，腎臟病變改變的嚴重程度明顯減輕，其中，中、高劑量組，其腎小管內結晶較模型組少，腎小管擴張較模型組輕，腎小球數量較模型組多。
權利要求
1.一種補腎養血方的提取方法，按照《部頒中藥第五冊》標準號為WS3-B-0948-91的補腎養血丸處方量的重量比稱取制何首烏、當歸、黑豆、牛膝(鹽制)、茯苓、菟絲子、補骨脂(鹽制)、枸杞子，其特徵在於加乙醇提取，合併煎液，濾過，濾液回收乙醇，得清膏；醇提後的藥渣加水煎煮兩次濾過，濾液回收得清膏，合併兩個清膏，濃縮，得提取物。
2.根據權利要求1所述的補腎養血的提取方法，其特徵在於醇提採用5～10倍量40～95％乙醇提取2～3次，每次0.5～3小時。
3.根據權利要求2所述的補腎養血的提取方法，其特徵在醇提採用加8倍量70％乙醇提取3次，每次1.5小時。
4.根據權利要求1所述的補腎養血的提取方法，其特徵在於醇提後的藥渣加5～15倍量水煎煮2次，每次0.5～2小時。
5.根據權利要求4所述的補腎養血的提取方法，其特徵在於醇提後的藥渣加10倍量水煎煮2次，每次1小時。
6.一種含有補腎養血方提取物的藥物組合物，其特徵是含有有效量的補腎養血提取物以及藥物學上可以接受的載體和賦形劑。
7.根據權利要求6所述的含有補腎養血方提取物的藥物組合物，其特徵是口服液、合劑、糖漿劑、膏滋、硬膠囊、軟膠囊、片劑、顆粒劑、微丸。
8.根據權利要求6所述的含有補腎養血方提取物的藥物組合物，其特徵是軟膠囊，由藥液和囊殼兩部分構成，藥液由補腎養血提取物、稀釋劑、助懸劑及潤溼劑按重量比為1∶0.6～1.0∶0.01～0.08∶0～0.06製成。
全文摘要
本發明涉及一種補腎養血方的提取方法，以及含有該提取物的藥物組合物。該藥物組合物含有有效量的補腎養血提取物以及藥物學上可以接受的載體和賦形劑，該組合物可以是口服液、合劑、糖漿劑、膏滋、硬膠囊、軟膠囊、片劑、顆粒劑、微丸。
文檔編號A61K9/10GK1879757SQ20061007519
公開日2006年12月20日 申請日期2006年4月30日 優先權日2006年4月30日
發明者張宏武, 劉翠豔, 梁敏, 湛福春, 申東民, 劉海麗 申請人:石藥集團中奇製藥技術(石家莊)有限公司