羊肚菌菌種的培育方法與流程
2024-02-26 09:58:15 2
本發明涉及食用菌技術領域，特別涉及一種羊肚菌菌種的培育方法。
背景技術：
羊肚菌又稱羊肚菜、羊肚蘑等，因其菌蓋凹凸不平，形態酷似羊肚而得名。羊肚菌可藥用，其性平、味甘寒，主治脾胃虛弱、消化不良、痰多氣短、精神虧損等，具有補腎、壯陽、補腦、提神等功效。藥用價值很高。
然而在羊肚菌的培育過程中，會遇到同一細胞的菌絲細胞表現不同，在同一條件下菌絲生長卻有不同的表現，特別是每接種一次都與前次菌絲生長不一樣，無論菌絲的長短、粗細、快慢、顏色、長勢以及最後的表現都不同，哪怕是原來用過的，或是第一年出過菇的老菌種也是如此，採取同樣的原料、配方、操作方法，同等的溫溼度和內外界條件，卻表現出較大的差距，因此，如何培育出性能穩定的菌種，使得後期產品質量穩定顯得尤為重要。
技術實現要素：
本發明要解決的技術問題是提供一種菌種特性穩定、適合於人工培養的羊肚菌菌種的培育方法。
為了解決上述技術問題，本發明的技術方案為：一種羊肚菌菌種的培育方法，包括如下步驟：
1)母種的製作及培養
a.製作母種培養基：以重量份數計：去皮馬鈴薯100-200份、葡萄糖10-20份、瓊脂10-15份、磷酸二氫鉀0.3-0.5份、硫酸鎂0.2-0.4份、維生素b10.2-0.3份，玉米粉05-17份，將上述組份均放進水中加熱，直至瓊脂完全煮化，放入離心機中離心，取上清液，即得母種培養基；
b.將製作好的母種培養基趁熱導入漏鬥中，分裝試管，每批要用大小一致的試管，裝量要相同，約為試管長度的1/4，待瓊脂凝固後塞上棉塞，棉塞部分做好防潮工作，放在高壓滅菌鍋中滅菌，滅菌後擺放斜面成捆，並在斜面上蓋幾層紗布保溼，待其完全凝固後，將每個試管中放入無菌接種箱中接入菌絲，置於培養箱中，直至長成母種；
2)原種的製作及培養
a.製作原種培養基：以重量份數計：將雜木屑60-70份、麥麩10-12份、蔗糖10-12份、石膏粉0.5-0.7份、過磷酸鈣0.2-0.4份、土壤0.5-0.7份、棉籽皮10-12份、木屑3-5份、土壤1-2份，無菌水20-35份，將ph調整至6-7，將上述組份倒入拌料機中攪拌3-5min，將水分控制在50-55％，裝入培養瓶，並將培養瓶放在滅菌鍋中滅菌後，取出冷卻得到原種培養基；
b.將培養瓶和裝有母種的試管放入接種箱中，將試管中的菌絲母種接入到原種培養基的培養瓶中，保持溫度在30℃；
3)培養種的製作及培養
a.製作培養種的液體培養基：以重量份數計，尿素5-8份，甘蔗渣9-10份，麥麩30-40份、葡萄糖5-10份、酵母膏10-15份、玉米漿5-10份、氯化鈣7-9份、檸檬酸鐵2-8份、氯化鈣2-6份，石膏粉1-5份，將上述組份混合，濾渣，得到培養液，將培養液倒入500毫升的三角瓶內，每瓶裝量100毫升，加入直徑在0.8毫米以下的玻璃碎片，用棉塞和牛皮紙封口，在1.5千克/平方釐米壓力下滅菌20-30min，取出冷卻至20-30℃以下，即得到培養基；
b.將原種培養瓶和液體培養基置於接種箱中密封半小時，再將原種接入到液體培養基中，在15-20環境下可獲得培養種。
所述的瓊脂在製作母種培養基之前選用冷水浸泡20min，撈起撕碎後慢慢加入。
步驟1)中的培養箱溫度保持在25-30℃。
本發明將制種過程中的各個培養基均作了調整，並且各個培養基的製備方法也都作出調整，因羊肚菌菌種的不穩定性，本發明將母種培養基中加入了磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素和玉米粉，使得母種從培養基中吸取的營養物質更多，將試管斜面用紗布保溼，避免其被水汽侵襲，從而影響培養基的性能；將培養基製成液體培養基，並加入更多穩定性和富含養分的物質，如尿素、麥麩等，不容易被雜菌侵入，因此，其能夠保持菌種的穩定性，避免菌種在後期的繁育過程中表現形態和母本不一致，影響產量。
具體實施方式
下面對本發明的具體實施方式作進一步說明。在此需要說明的是，對於這些實施方式的說明用於幫助理解本發明，但並不構成對本發明的限定。此外，下面所描述的本發明各個實施方式中所涉及的技術特徵只要彼此之間未構成衝突就可以相互組合。
實施例1：
:一種羊肚菌菌種的培育方法，包括如下步驟：
1)母種的製作及培養
a.製作母種培養基：以重量份數計：去皮馬鈴薯100-200份、葡萄糖10-20份、瓊脂10-15份、磷酸二氫鉀0.3-0.5份、硫酸鎂0.2-0.4份、維生素b10.2-0.3份，玉米粉05-17份，將上述組份均放進水中加熱，直至瓊脂完全煮化，放入離心機中離心，取上清液，即得母種培養基；
b.將製作好的母種培養基趁熱導入漏鬥中，分裝試管，每批要用大小一致的試管，裝量要相同，約為試管長度的1/4，待瓊脂凝固後塞上棉塞，棉塞部分做好防潮工作，放在高壓滅菌鍋中滅菌，滅菌後擺放斜面成捆，並在斜面上蓋幾層紗布保溼，待其完全凝固後，將每個試管中放入無菌接種箱中接入菌絲，置於培養箱中，培養箱溫度為25-30攝氏度，直至長成母種；
2)原種的製作及培養
a.製作原種培養基：以重量份數計：將雜木屑60-70份、麥麩10-12份、蔗糖10-12份、石膏粉0.5-0.7份、過磷酸鈣0.2-0.4份、土壤0.5-0.7份、棉籽皮10-12份、木屑3-5份、土壤1-2份，無菌水20-35份，其中，所述的瓊脂在製作母種培養基之前選用冷水浸泡20min，撈起撕碎後慢慢加入。將ph調整至6-7，將上述組份倒入拌料機中攪拌3-5min，將水分控制在50-55％，裝入培養瓶，並將培養瓶放在滅菌鍋中滅菌後，取出冷卻得到原種培養基；
b.將培養瓶和裝有母種的試管放入接種箱中，將試管中的菌絲母種接入到原種培養基的培養瓶中，保持溫度在30℃；
3)培養種的製作及培養
a.製作培養種的液體培養基：以重量份數計，尿素5-8份，甘蔗渣9-10份，麥麩30-40份、葡萄糖5-10份、酵母膏10-15份、玉米漿5-10份、氯化鈣7-9份、檸檬酸鐵2-8份、氯化鈣2-6份，石膏粉1-5份，將上述組份混合，濾渣，得到培養液，將培養液倒入500毫升的三角瓶內，每瓶裝量100毫升，加入直徑在0.8毫米以下的玻璃碎片，用棉塞和牛皮紙封口，在1.5千克/平方釐米壓力下滅菌20-30min，取出冷卻至20-30℃以下，即得到培養基；
b.將原種培養瓶和液體培養基置於接種箱中密封半小時，再將原種接入到液體培養基中，在15-20環境下可獲得培養種。
實施例2：
一種羊肚菌菌種的培育方法，包括如下步驟：
1)母種的製作及培養
a.製作母種培養基：以重量份數計：去皮馬鈴薯200份、葡萄糖20份、瓊脂15份、磷酸二氫鉀0.5份、硫酸鎂0.4份、維生素b10.3份，玉米粉17份，將上述組份均放進水中加熱，直至瓊脂完全煮化，放入離心機中離心，取上清液，即得母種培養基；
b.將製作好的母種培養基趁熱導入漏鬥中，分裝試管，每批要用大小一致的試管，裝量要相同，約為試管長度的1/4，待瓊脂凝固後塞上棉塞，棉塞部分做好防潮工作，放在高壓滅菌鍋中滅菌，滅菌後擺放斜面成捆，並在斜面上蓋幾層紗布保溼，待其完全凝固後，將每個試管中放入無菌接種箱中接入菌絲，置於培養箱中，直至長成母種；
2)原種的製作及培養
a.製作原種培養基：以重量份數計：將雜木屑60-70份、麥麩10-12份、蔗糖10-12份、石膏粉0.5-0.7份、過磷酸鈣0.2-0.4份、土壤0.5-0.7份、棉籽皮10-12份、木屑3-5份、土壤1-2份，無菌水20-35份，將ph調整至6-7，將上述組份倒入拌料機中攪拌3-5min，將水分控制在50-55％，裝入培養瓶，並將培養瓶放在滅菌鍋中滅菌後，取出冷卻得到原種培養基；
b.將培養瓶和裝有母種的試管放入接種箱中，將試管中的菌絲母種接入到原種培養基的培養瓶中，保持溫度在30℃；
3)培養種的製作及培養
a.製作培養種的液體培養基：以重量份數計，尿素8份，甘蔗渣10份，麥麩40份、葡萄糖10份、酵母膏15份、玉米漿10份、氯化鈣9份、檸檬酸鐵8份、氯化鈣6份，石膏粉1-5份，將上述組份混合，濾渣，得到培養液，將培養液倒入500毫升的三角瓶內，每瓶裝量100毫升，加入直徑在0.8毫米以下的玻璃碎片，用棉塞和牛皮紙封口，在1.5千克/平方釐米壓力下滅菌20-30min，取出冷卻至20-30℃以下，即得到培養基；
b.將原種培養瓶和液體培養基置於接種箱中密封半小時，再將原種接入到液體培養基中，在15-20環境下可獲得培養種。
實施例3：
一種羊肚菌菌種的培育方法，包括如下步驟：
1)母種的製作及培養
a.製作母種培養基：以重量份數計：去皮馬鈴薯200份、葡萄糖20份、瓊脂15份、磷酸二氫鉀0.5份、硫酸鎂0.4份、維生素b10.3份，玉米粉17份，將上述組份均放進水中加熱，直至瓊脂完全煮化，放入離心機中離心，取上清液，即得母種培養基；
b.將製作好的母種培養基趁熱導入漏鬥中，分裝試管，每批要用大小一致的試管，裝量要相同，約為試管長度的1/4，待瓊脂凝固後塞上棉塞，棉塞部分做好防潮工作，放在高壓滅菌鍋中滅菌，滅菌後擺放斜面成捆，並在斜面上蓋幾層紗布保溼，待其完全凝固後，將每個試管中放入無菌接種箱中接入菌絲，置於培養箱中，培養箱溫度為25-30攝氏度，直至長成母種；
2)原種的製作及培養
a.製作原種培養基：以重量份數計：將雜木屑70份、麥麩12份、蔗糖12份、石膏粉0.7份、過磷酸鈣0.4份、土壤0.7份、棉籽皮12份、木屑5份、土壤2份，無菌水35份，其中，所述的瓊脂在製作母種培養基之前選用冷水浸泡20min，撈起撕碎後慢慢加入。將ph調整至6-7，將上述組份倒入拌料機中攪拌3-5min，將水分控制在50-55％，裝入培養瓶，並將培養瓶放在滅菌鍋中滅菌後，取出冷卻得到原種培養基；
b.將培養瓶和裝有母種的試管放入接種箱中，將試管中的菌絲母種接入到原種培養基的培養瓶中，保持溫度在30℃；
3)培養種的製作及培養
a.製作培養種的液體培養基：以重量份數計，尿素5-8份，甘蔗渣9-10份，麥麩40份、葡萄糖10份、酵母膏15份、玉米漿10份、氯化鈣9份、檸檬酸鐵8份、氯化鈣6份，石膏粉5份，將上述組份混合，濾渣，得到培養液，將培養液倒入500毫升的三角瓶內，每瓶裝量100毫升，加入直徑在0.8毫米以下的玻璃碎片，用棉塞和牛皮紙封口，在1.5千克/平方釐米壓力下滅菌20-30min，取出冷卻至20-30℃以下，即得到培養基；
b.將原種培養瓶和液體培養基置於接種箱中密封半小時，再將原種接入到液體培養基中，在15-20環境下可獲得培養種。
本發明中實施例1-3所制的菌種，和普通羊肚菌菌種相比，穩定性高，並且畝產量高。