可用作雄激素受體調節劑的四氫咔唑衍生物(sarm)的製作方法
2023-12-08 07:25:06 2
專利名稱：可用作雄激素受體調節劑的四氫咔唑衍生物(sarm)的製作方法
技術領域：
本發明涉及可用作治療劑的四氫咔唑化合物、包含所述化合物的藥物組合物、使用所述化合物治療患者病症的方法以及可用於合成所述化合物的中間體和方法。
背景技術：
核激素受體是一類進化保留的細胞內受體蛋白，其已被稱為「配體依賴性轉錄因子」。Evans等人，SCIENCE，240889(1988)。核激素受體基因超家族編碼糖皮質激素(例如皮質醇、皮質酮、可的松)、雄激素、鹽皮質激素(例如醛固酮)、孕酮、雌激素和甲狀腺激素的結構相關性受體蛋白。還包括在該核受體超家族中的有維生素D、視黃酸、9-順視黃酸的受體蛋白，以及無關連配體已被確認的那些受體(「孤兒受體」)。Ribeiro等人，Annual Rev.Med.，46443-453(1995)；Nature Rev.Drug Discovery，3950-964(Nov.2004)。類固醇激素受體代表核激素受體超家族的一個亞群。根據與天然狀態受體複合的關連配體命名，類固醇激素核受體包括糖皮質激素受體(GR)、雄激素受體(AR)、鹽皮質激素受體(MR)、雌激素受體(ER)和孕酮受體(PR)。Tenbaum等人，Int.J.Biochem.Cell.Bio.，29(12)1325-1341(1997)。
與膜結合受體不同，核激素受體在配體進入細胞後與它們各自的配體相遇。一旦發生配體結合，配體-受體複合物即調節細胞核內目標基因的轉錄。例如，大部分無配體的核受體與細胞質中的熱激蛋白(hsps)結合為複合物。在循環激素進入細胞後，結合引發受體的構象改變，使受體與熱激蛋白解離。配體結合的受體易位至核，在那裡它們作為單體以及雜二聚體和同二聚體結合於目標基因啟動區中的特定激素應答元件(HREs)。激素應答元件-受體複合物繼而再調節位於近側基因的轉錄(參見Ribeiro等人，見上)。另一方面，甲狀腺激素受體(TRs)和其他非類固醇受體如維生素D受體(VDR)和視黃酸受體(RAR)在熱激蛋白和/或關連配體不存在時與它們各自的激素應答元件結合。自循環釋放的激素進入細胞，在核中與這些受體結合，這些受體再雜二聚化為其他核受體如9-順式視黃酸(RXR)。對於類固醇激素核受體，在配體結合後，配體-結合的受體複合物再次調節鄰近基因的轉錄。
雄激素對眾多生理功能發揮深遠的影響，這是由於它們的以下多樣作用雄性性發育和性功能、維持雄性和雌性的肌肉質量和強度、維持骨質量、紅細胞生成、記憶和認知以及維持性行為(例如性慾和性能力)。雄激素(睪酮和5α-二氫睪酮(DHT))的作用通過AR介導，雄激素受體與雄激素結合後易位至細胞核中，在那裡其與被稱為雄激素應答元件(AREs)的特定DNA序列結合，以引發或阻抑目標基因的轉錄。雄激素的作用在性質上一般可描述為合成代謝性的和促雄性的(androgenic)。雄激素的合成代謝(即組織構建)作用包括增加肌肉質量和強度以及骨質量，而促雄(即雄性化)作用包括雄性第二性徵的發育，如內部生殖組織(即前列腺和精囊)、外部生殖器(陰莖和陰囊)、性慾和毛髮生長模式。
伴隨老化而發生的生物可利用血清雄激素水平的降低可能對雄性和雌性均具有嚴重的生理學影響。例如，在男性中，雄激素水平降低與性慾喪失、勃起功能障礙、抑鬱、認知能力降低、嗜睡、骨質疏鬆和肌肉質量和強度喪失相關。Rajfer(2003)，Rev.Urol.，5(Suppl.1)S1-S2。此外，隨著男性年齡增長和睪酮水平下降，骨弱化、糖尿病和心血管疾病的比例增加，且肌肉質量和脂肪的比率下降。Vastag，B.(2003)，JAMA；289971-972。在女性中，循環睪酮的低血漿水平與性慾減少、莫名疲勞和普遍缺乏幸福感相關。Davis，S.R.(1999)，Medical J.Australia；170545-549。在臨床上，雄激素療法已被原則上應用於治療男性性腺機能減退。值得注意的是，雄激素替代療法也已經顯示可減少骨吸收並增加骨質量。Katznelon，L.等人，J.Clin.Endocrinol Metab.；814358(1996)。臨床上雄激素所應用的其他適應症包括治療男性青年青春期延遲、貧血、原發性骨質疏鬆症和肌肉萎縮病。此外，雄激素替代療法近期已被用於老齡男性並用於調節雄性生育力。T.R.Brown，Endocrinology；145(12)5417-5419(2004)。在女性中，雄激素療法在臨床上已被用於治療性功能障礙或性慾減退。W.Arlt，Euro.J.Endocrinol.；154(1)1-11(2006)。
但是，激活某些組織中的AR也與嚴重的惡性後果相關。例如，類固醇雄激素療法的不期望副作用包括前列腺和精囊的生長刺激。Feldkorn等人，J.Steroid Bichem and Mol.Biol.；94(5)481-487(2005)。例如，前列腺癌的生長和發展依賴於AR。Gegory，C.W.等人(2001)，Cancer Res.，June1；61(11)4315-4319；和Jenster，G.(1999)，Semin.Oncol.，August；26(4)407-421。雄激素療法還與睡眠窒息、前列腺腫瘤刺激和前列腺特異性抗原(PSA)升高相關，後者是前列腺癌風險增加的指徵。Vastag，B.(2003)，JAMA；289971-972。此外，雄激素激動劑的使用已明確地與以下相關肝損傷、對雄性性功能的副作用、與心血管和紅細胞生成功能相關的副作用、前列腺腫大、多毛和男性化。(參見國際專利申請公布WO 03/011824和WO 03/034987)。而且，已發現，未修飾和修飾的類固醇雄激素製劑在肝臟中經歷迅速降解，導致胃腸外施用後口服生物利用度差且作用持續時間短、血漿水平變異、肝毒性或與其他類固醇激素受體(例如糖皮質激素受體(GR)、鹽皮質激素受體(MR)和孕酮受體(PR)，其配體結合域與AR同源)的交叉反應性。Yin等人，JPET；304(3)1323-1333(2003)。此外，在女性中，類固醇雄激素的使用可導致多毛或男性化。
由此，本領域仍然需要經典類固醇雄激素療法的備選療法，其具有類固醇雄激素的有益藥理學特性，但與類固醇雄激素療法相關的典型限制的可能性和發生率降低。近期，尋找類固醇雄激素適合替代物的努力集中於鑑定組織選擇性雄激素受體調節劑(SARMs)，其在促雄組織中顯示差異活性特徵。具體而言，這類活性劑優選在合成代謝組織如肌肉或骨骼中顯示雄激素激動劑活性，而在促雄組織如前列腺或精囊中則僅為部分激動劑或甚至是拮抗劑。
用於調節(即激動、部分激動、部分拮抗或拮抗)AR轉錄活性的配體顯示促雄或抗雄活性(或合成代謝或抗合成代謝活性)並進而可以在結構上是類固醇或非類固醇的。促雄劑(AR激動劑或部分AR激動劑)模擬天然雄激素的作用，激活或阻抑AR的轉錄活性，而抗雄劑(AR拮抗劑或部分AR拮抗劑)阻斷雄激素介導的AR的反式激活或反式阻抑作用。此外，也已報導AR配體-AR複合物影響輔因子蛋白向增強子和/或啟動子部位的募集。Shang等人(March 2002)，Mol.Cell.9(3)601-610。除了它們對目標基因轉錄的效果，AR配體還可以引發「非基因引向」作用。例如，配體可結合於位於非核區室如內質網、外細胞膜或細胞質中的AR，並引發由連接蛋白如磷脂醯肌醇-3-激酶(PI3K)、細胞外調節的激酶(ERKs)、促分裂原激活的蛋白激酶(MAPKs)或p38/應激激活的蛋白激酶/c-Jun N-末端激酶(p38/SAP/JNK)介導的生化改變。這些「非基因引向」效果涵蓋一大系列生理改變，包括觸發抗細胞調亡和存活途徑。(參見Bowen，R.L.(2001)，JAMA 286(7)790-1；Gouras，G.K.，H.Xu，et al.(2000)，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 97(3)1202-5；Kousteni，S.，T.Bellido，et al.(2001)，Cell 104(5)719-30；和Kousteni，S.，L.Han等人(2003)[評述]Journal of ClinicalInvestigation 111(11)1651-64.)。
因此，對AR具有親和性的配體顯然可用於調節受體活性並由此影響眾多與雄激素水平和/或AR活性改變相關的生理作用。此外，這類活性劑的作用可通過經典的常規HRE-介導(例如「基因引向」)的或非基因引向的機制實現。優選這類活性劑發揮選擇性雄激素受體調節劑(SARMs)的作用，在組織如肌肉和/或骨骼中顯示促雄作用，而同時在組織如前列腺、肝臟和在女性中負責男性化的那些組織中顯示抗雄特性。作為替代選擇，就其促雄作用而言，SARM可顯示組織選擇性，例如在合成代謝組織如肌肉或骨骼中發揮激動劑功能，但在組織如前列腺或精囊中僅發揮部分激動劑或拮抗劑功能。此外，這類配體優選是非類固醇性質的，由此避免它們的類固醇配對物的眾多不期望的藥理學、物理化學和藥動學特性，包括口服生物利用度差、肝代謝迅速和其他類固醇受體的交叉激活。He，Y，等人(2002)，Eur.J.Med.Chem.；37619-634。
據信，若干生理學障礙易感於AR調節，尤其是SARM調節。虛弱代表一種這類障礙。虛弱是一種老年病症，其導致人的儲備能力減少至多種生理系統接近或超過症狀性臨床衰竭閾值的程度。結果，虛弱人群因輕微外部應激(例如疾病或生活事件)而傷殘和死亡的風險增加。Campbell，A.J.，等人(1997)，Age and Ageing；26(4)315-318。虛弱代表一種複合症候群，其以多種肌肉骨骼症狀為特徵，包括肌肉質量和強度下降、動作範圍減少、運動緩慢和缺乏、平衡和步態異常、體重喪失和食物攝取減少、虛弱和疲勞、運動耐受力降低和肌肉減少(瘦體重喪失)。Brown，M.等人(2000)，J.ofGerontology；55(6)M350-M355；和Fried，L.and Watson，J.(1999)，Principles of Geriatric Medicine and Gerontolgy，1387-1402，New YorkMcGraw Hill。如此，在組織如肌肉和骨骼中具有促雄特性的活性劑有望具有治療虛弱患者的效用。
其他生理學障礙也適合於AR調節。例如，現在熟知男性性腺機能減退與骨質疏鬆相關。Kaufman，J.M.等人，Ann.Rheum.Dis.；Oct；59(10)765-772(2000)。此外，在患有前列腺癌的男性中，雄激素去除療法增加了骨密度喪失的速率。Preston，D.M.等人，Prostate Cancer Prostatic Dis.；5(4)304-310(2002)。此外，雄激素替代療法在性腺機能減退男性中降低骨吸收並增加骨質量。Katznelon，L.等人，J.Clin.Endocrinol Metab.；814358(1996)。由此，據信AR調節劑可用於治療骨質疏鬆症(作為單一療法或與其他骨吸收抑制劑組合，包括但不限於雌激素、雙膦酸類化合物和選擇性雌激素受體調節劑)。事實上，小規模臨床試驗已經顯示睪酮替代療法在老年男性中可幫助延遲或逆轉骨質疏鬆，很可能防止髖部和脊椎骨折。Vastag，B.，JAMA；289971-972(2003)。
而且，AR調節劑可用於增強男性和女性性功能障礙的治療效果(參見Morley，J.E.和Perry，H..M.，J.Steroid Biochem.Mol.Biol.；June；85(2-5)367-373(2003)和Medical J.Australia；170545-549(1999)，見上)。據信AR調節劑對其具有功效的其他適應症或生理學障礙包括維持肌肉質量、強度或功能；作為骨合成代謝劑用於治療骨質疏鬆或骨量減少；在前列腺或胰腺癌的治療中獨立地或作為雄激素去除療法的輔助進行骨修復；作為加速骨修復的活性劑(例如骨折)；治療肌肉減少症或年齡相關性功能衰退(ARFD)；作為增加能量(例如減少嗜睡)和性慾的活性劑；或用於治療性腺機能減退。此外，AR調節劑可用於治療前列腺癌。
因此，本發明的目的是提供具有雄激素受體調節活性的非類固醇AR配體。具體而言，本發明的目的是提供具有雄激素受體激動劑活性的非類固醇AR配體。更具體而言，本發明的優選實施方案提供以相對於其他類固醇激素受體更高的親和性與AR結合的非類固醇雄激素激動劑。甚至更具體而言，本發明優選的實施方案提供組織選擇性雄激素受體調節劑(SARMs)，其在肌肉或骨骼中顯示雄激素激動劑活性，但在促雄組織如前列腺或精囊中僅顯示部分激動劑、部分拮抗劑或拮抗劑活性。
以下文獻提供涉及本發明的本領域現狀的一些實例。
He等人，Eur.J.Med.Chem.；37619-634(2002)披露了作為非類固醇雄激素受體配體的比卡魯胺類似物。
國際PCT申請公開WO 03/051837披露了作為促性腺激素-釋放激素拮抗劑的三環衍生物。
國際PCT申請公開WO 03/011302 A1披露了作為雄激素受體調節劑的雄甾烯衍生化合物。
國際PCT申請公開WO 03/077919 A1披露了作為雄激素受體調節劑的氮雜甾體衍生化合物。
國際PCT申請公開WO 02/16310 A1披露了作為非類固醇雄激素受體配體的比卡魯胺類似物。
國際PCT申請公開WO 03/034987 A2披露了作為雄激素受體調節劑的三環衍生物。
國際PCT申請公開WO 03/011824 A1披露了雄激素受體的雙環調節劑。
國際PCT申請公開WO 04/041782披露了作為雄激素受體調節劑的吲哚衍生物分子。
國際PCT申請公開WO 03/0114420披露了作為雄激素受體調節劑的稠合雜環衍生物分子。
國際PCT申請公開WO 03/096980披露了作為雄激素受體調節劑的N-芳基乙內醯脲衍生物分子。
國際PCT申請公開03/011824披露了作為雄激素受體調節劑的N-萘基乙內醯脲衍生物分子。
國際PCT申請公開04/016576披露了作為雄激素受體調節劑的N-萘基吡咯烷衍生物分子。
國際PCT申請公開05/000795披露了作為雄激素受體調節劑的苯胺衍生物分子。
發明內容
本發明涉及如下定義的某些四氫咔唑衍生化合物是雄激素受體的調節劑這一發現。因此，本發明提供下式化合物或其藥學可接受的鹽
式I 其中 R1代表氫、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、SCH3、C(＝S)NH2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、CH＝NOH、COR1a、OR1b、SO2R1c、NHCOR1d，或任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷素、滷代(C1-C4)烷基或滷代(C1-C4)烷氧基； R1a代表氫、氨基、羥基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基或滷代(C1-C4)烷基； R1b代表(C1-C4)烷基、環丙基或環丙基甲基； R1c代表氨基或(C1-C4)烷基； R1d代表(C1-C4)烷氧基； R2代表氫、滷素、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基，或R1和R2一起形成下式基團
或
R3代表NHCOR3a或NHSO2R3b； R3a和R3b在每次出現時各自獨立地代表(C1-C6)烷基、滷代(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、環丙基、環丁基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺或N(CH3)OCH3；且 R4代表任選被1或2個選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺、NHSO2CH3或COOCH3，或任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、(C1-C4)烷基、滷素或羥基。
在另一實施方案中，本發明提供治療易感於雄激素受體調節的障礙或病症的方法，包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或其藥學可接受的鹽。更具體而言，本發明提供治療以下病症的方法肌肉質量或強度減少、虛弱、性腺機能減退、骨質疏鬆、骨量減少、骨質量或密度減少(獨立或因雄激素去除療法發生)、骨折、肌肉減少、年齡相關性功能衰退(ARFD)、性慾減少、雄性或雌性性功能障礙、勃起功能障礙、抑鬱、前列腺癌、認知能力降低或嗜睡，包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或其藥學可接受的鹽。作為更具體的方面，本發明提供治療虛弱、骨質疏鬆、骨量減少、前列腺癌和雄性或雌性性功能障礙的方法，包括向有需要的患者施用有效量的式I化合物或其藥學可接受的鹽。
進而，本發明提供式I化合物或其藥學可接受的鹽作為用於治療以下病症的活性劑的用途肌肉質量或強度減少、虛弱、性腺機能減退、骨質疏鬆、骨量減少、骨質量或密度減少(獨立或因雄激素去除療法發生)、骨折、肌肉減少、年齡相關性功能衰退(ARFD)、性慾減少、雄性或雌性性功能障礙、勃起功能障礙、抑鬱、前列腺癌、認知能力降低或嗜睡。更具體而言，本發明提供式I化合物或其藥學可接受的鹽作為用於治療虛弱、骨質疏鬆、骨量減少或雄性或雌性性功能障礙的活性劑的用途。
在另一實施方案中，本發明提供式I化合物或其藥學可接受的鹽在製備用於治療易感於雄激素受體調節的障礙或病症的藥物中的用途。具體而言，本發明提供式I化合物或其藥學可接受的鹽在製備用於治療以下障礙的藥物中的用途肌肉質量或強度減少、虛弱、性腺機能減退、骨質疏鬆、骨量減少、骨質量或密度減少(獨立或因雄激素去除療法發生)、骨折、肌肉減少、年齡相關性功能衰退(ARFD)、性慾減少、雄性或雌性性功能障礙、勃起功能障礙、抑鬱、前列腺癌、認知能力降低或嗜睡。更具體而言，本發明提供式I化合物或其藥學可接受的鹽在製備用於治療虛弱、骨質疏鬆、骨量減少或雄性或雌性性功能障礙的藥物中的用途。
此外，本發明提供包含式I化合物或其藥學可接受的鹽以及藥學可接受的載體、稀釋劑或賦形劑的藥物組合物。更具體而言，本發明提供用於治療虛弱、骨質疏鬆、骨量減少或雄性或雌性性功能障礙的藥物組合物，其包含式I化合物或其藥學可接受的鹽以及藥學可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
本發明還涵蓋可用於合成式I化合物的新中間體、試劑和方法，以及用於治療的式I化合物。
本發明提供對AR具親和性的化合物，其可用於調節(即激動、部分激動、部分拮抗或拮抗)受體活性和基因表達，從而影響與雄激素水平和/或AR活性相關的生理學功能。具體而言，式(I)化合物是強效AR配體，其優選激動雄激素受體。此外，特別優選的式(I)化合物以相對於其他類固醇激素受體更高的親和性選擇性結合於AR。更具體而言，本發明化合物是選擇性雄激素受體調節劑(SARMs)，其同時顯示促雄和抗雄特性，在一些組織中作為AR激動劑，而在其他組織中拮抗AR。作為替代選擇，本發明提供作為更具體實施方案的SARM，其在組織如肌肉或骨骼中顯示激動劑活性，而在組織如前列腺或精囊中僅顯示部分激動劑活性。在這方面，這類配體據信可用於治療或預防易感於AR調節的多種障礙和病症。因此，用於治療或預防易感於AR調節的障礙或病症的方法構成本發明重要的實施方案。作為特別優選的方面，本發明提供可用作SARM的化合物。
還應該理解許多本發明化合物可作為藥學可接受的鹽存在，因此藥學可接受的鹽也包括在本發明範圍內。此處使用的術語「藥學可接受的鹽」指的是對有生命的生物體基本無毒的本發明化合物的鹽。通常的藥學可接受的鹽包括使本發明化合物與藥學可接受無機或有機酸或有機或無機鹼反應而製備的那些鹽。這類鹽被稱為酸加成和鹼加成鹽。本領域閱讀者還應該理解鹽形式的藥用化合物被普遍使用是因為它們常常比游離鹼更易於結晶或更易於純化。在所有情況下，本發明藥用化合物作為鹽的使用均為本說明書所涵蓋。因此，應該理解，如果本發明化合物能夠形成鹽，其藥學可接受的鹽和異構體為本文提供的名稱或結構所涵蓋。適合於製備藥學可接受鹽的酸和鹼以及製備這類鹽的工藝為本領域技術人員所熟知。參見例如Stahl等人，「藥用鹽手冊性質、選擇及應用(Handbook ofPharmaceutical SaltsProperties，Selection and Use)」VCHA/Wiley-VCH，(2002)；Gould，P.L.，「鹼性藥物鹽的選擇(Salt selection for basic drugs)」International Journal of Pharmaceutics，33201-217(1986)；Berge等人，「藥用鹽(Pharmaceutical Salts)」Journal of Pharmaceutical Sciences，66，No.1，(January 1977)；Bastin等人，「Salt Selection and OptimizationProcedures for Pharmaceutical New Chemical Entities」，Organic ProcessResearch and Development，4427-435(2000)。
本文使用的術語「立體異構體」指的是由相同原子通過相同的鍵組成但具有不可互換的不同三維結構的化合物。三維結構被稱為「構型」。本文使用的術語「對映體」指的是分子彼此呈非重疊鏡像的兩個立體異構體之一。術語「手性中心」指的是連接四個不同基團的碳原子。本文使用的術語「非對映體」指的是不是對映體的立體異構體。此外，僅在一個手性中心具有不同構型的兩個非對映體在本文被稱為「差向異構體」。術語「外消旋物」、「外消旋混合物」或「外消旋修飾物」指的是同等部分對映體的混合物。
本發明化合物可具有一個或多個手性中心，因此可存在多種立體異構構型。由於這些手性中心，本發明化合物可呈現外消旋物、對映體混合物、單獨的對映體以及非對映體和非對映體混合物。所有這類外消旋物、對映體和非對映體均處於本發明範圍內。本發明所提供化合物的對映體可例如由本領域普通技術人員利用標準技術拆分，如J.Jacques等人，「對映體、外消旋物及拆分(Enantiomers，Racemates，and Resolutions)」，John Wileyand Sons，Inc.，1981所述及的那些技術。術語「R」和「S」如有機化學中通常所使用在本文用於表示手性中心的具體構型。術語「R」(右)指的是當沿著自手性碳指向最低優先級基團的鍵觀察時基團優先級序(從最高到第二低)為順時針關係的手性中心的構型。術語「S」(左)指的是當沿著自手性碳指向最低優先級基團的鍵觀察時基團優先級序(從最高到第二低)為逆時針關係的手性中心的構型。基團的優先級基於它們的原子數(按照原子數遞減的次序)。部分優先級列表和立體化學討論在「有機化合物的命名原則與實踐(Nomenclature of Organic CompoundsPrinciples and Practice)″，(J.H.Fletcher等人編輯，1974)的103-120頁論及。
本發明化合物的特定立體異構體和對映體可由本領域普通技術人員利用熟知的技術和方法製備，如以下公開的那些Eliel和Wilen，「有機化合物的立體化學(Stereochemistry of Organic Compounds)」，John Wiley& Sons，Inc.，1994，第7章；立體異構體的分離、拆分及外消旋(Separationof Stereoisomers，Resolution，Racemization)；以及Collet和Wilen，「對映體、外消旋物及拆分(Enantiomers，Racemates，and Resolutions)」，JohnWiley & Sons，Inc.，1981。例如，特定的立體異構體和對映體可通過立體特異性合成、使用對映體和幾何學純或對映體或幾何學富集的原料製備。此外，特定的立體異構體和對映體可通過各種技術如手性固定相色譜、酶促拆分或用於該目的的試劑所形成加成鹽的分步重結晶來拆分和回收。
本文使用的術語「對映體富集」指的是一種對映體相比另一種的量增加。表示對映體富集的常規方法是對映體過量的概念，或「ee」，其用以下方程表示 其中E1是第一種對映體的量，E2是第二種對映體的量。因此，如果兩種對映體的初始比例是50∶50，如外消旋混合物中的情形，且獲得足以產生最終比例50∶30的對映體富集，則就第一種對映體而言的ee是25％。但是，如果最終比例是90∶10，則就第一種對映體而言的ee是80％。優選的ee大於90％，更優選ee大於95％，最尤其優選ee大於99％。對映體富集易於由本領域普通技術人員使用標準技術和工藝確定，如使用手性柱的氣相或高效液相色譜。完成對映體對拆分所必須的手性柱、洗脫劑和條件的選擇為本領域普通技術人員所熟知。此外，式I化合物的對映體可由本領域普通技術人員使用本領域熟知的標準技術拆分，如J.Jacques等人，「對映體、外消旋物及拆分(Enantiomers，Racemates，and Resolutions)」，John Wiley and Sons，Inc.，1981所述的那些。
本文使用的術語「Pg」指的是適合的氧或氮保護基。本文使用的適合的氧或氮保護基指的是在合成工藝中用於保護或阻斷氧或氮以免於不期望反應的那些基團。本文使用的術語「Pg」代表的是氧保護基還是氮保護基對於本領域普通技術人員將是顯而易見的。所用氧或氮保護基的適合度取決於其中需要保護的隨後的反應步驟，且完全處於本領域普通技術人員的知識範圍內。通常使用的氮和氧保護基公開於Greene，「有機合成中的保護基團(Protective Groups In Organic Synthesis)，第三版」(John Wiley & Sons，New York(1999))中。
本文使用的以下術語具有所示含義「i.v.」指的是靜脈內；「p.o.」指的是口服；「i.p.」指的是腹膜內；「s.c.」指的是皮下；「eq」或「equiv.」指的是當量；「g」指的是克；「Kg」指的是千克；「mg」指的是毫克；「μg」指的是微克；「L」指的是升；「mL」指的是毫升；「μL」指的是微升；「mol」指的是摩爾；「mmol」指的是毫摩爾；「M」指的是摩爾；「mM」指的是毫摩爾；「nM」指的是納摩爾；「μM」指的是微摩爾；「N」指的是當量；「psi」指的是磅/平方英寸；「mm Hg」指的是毫米汞柱；「min」指的是分鐘；「h」或「hr」或「hrs.」指的是小時；「℃」指的是攝氏度；「δ」指的是由四甲基甲矽烷向低場移動的百萬分之一份；「MHz」指的是兆赫；「TLC」指的是薄層色譜；「HPLC」指的是高效液相色譜；「Rt」指的是保留時間；「UV」指的是紫外；「nm」指的是納米；「Anal」指的是分析的；「Calcd」指的是計算的；「mp」或「m.p.」指的是熔點；「CDCl3」指的是氯仿-d；「THF」指的是四氫呋喃；「DMF」指的是N，N-二甲基甲醯胺；「DMSO」指的是二甲基亞碸；「DMSO-d6」指的是二甲基-d6-亞碸；「EtOAc」指的是乙酸乙酯；「MeOH」指的是甲醇；「EtOH」指的是乙醇；「i-PrOH」指的是異丙醇；「Et2O」指的是乙醚；「MTBE」指的是叔丁基甲基醚；「DMEA」指的是N，N-二甲基乙基胺；「Na2SO4」指的是硫酸鈉；「MgSO4」指的是硫酸鎂；「Na2CO3」指的是碳酸鈉；「K2CO3」指的是碳酸鉀；「NaHCO3」指的是碳酸氫鈉；Na2S2O3指的是硫代硫酸鈉；「NaOH」指的是氫氧化鈉；「HCl」指的是氯化氫或鹽酸；「H2O2」指的是過氧化氫；「NaH」指的是氫化鈉；「LDA」指的是二異丙基氨化鋰；「CH2Cl2」指的是二氯甲烷；「NH4OH」指的是氫氧化銨；「NH4Cl」指的是氯化銨；「NH3」指的是氨；和「Al-Ni」指的是鋁-鎳。
本文還使用的「Kd」指的是配體-受體複合物的平衡解離常數；「Ki」指的是藥物-受體複合物的平衡解離常數，且是平衡時結合於半數結合位點的藥物濃度的指徵；「IC50」指的是產生該活性劑可能的50％最大抑制響應的活性劑濃度；「IC50」還指的是產生50％結合於受體的配體置換的活性劑濃度；「EC50」指的是產生該活性劑可能的50％最大響應的活性劑濃度；「ED50」指的是產生該活性劑50％最大響應的所施用治療劑的劑量。
本文所用的術語「(C1-C4)烷基」指的是1至4個碳原子的直鏈或支鏈單價飽和脂族鏈，包括但不限於甲基、乙基、正-丙基、異丙基、正-丁基、異丁基等。
本文所用的術語「(C1-C6)烷基」指的是1至6個碳原子的直鏈或支鏈單價飽和脂族鏈，包括但不限於甲基、乙基、正-丙基、異丙基、正-丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基等。應該理解術語「(C1-C4)烷基」包括在「(C1-C6)烷基」定義範圍內。
本文所用的術語「Me」、「Et」、「Pr」、「i-Pr」、「Bu」和「t-Bu」分別指的是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基和叔丁基。
本文所用的術語「(C1-C4)烷氧基」指的是攜帶1至4個碳原子的直鏈或支鏈單價飽和脂族鏈的氧原子，包括但不限於甲氧基、乙氧基、正-丙氧基、異丙氧基、正丁氧基等。本文所用的術語「(C1-C6)烷氧基」指的是攜帶1至6個碳原子的直鏈或直鏈單價飽和脂族鏈的氧原子，包括但不限於甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、正戊氧基、正己氧基等。應該理解術語「(C1-C4)烷氧基」包括在「(C1-C6)烷氧基」的定義範圍內。
本文使用的術語「滷代」、「滷素」、「hal」或「Hal」指的是氯、溴、碘或氟原子，本文另有指明除外。
本文使用的術語「滷代(C1-C4)烷基」指的是1至4個碳原子的直鏈或支鏈單價飽和脂族鏈，其攜帶一個或多個連接於一個或多個碳原子的滷代基團。本文使用的術語「滷代(C1-C6)烷基」指的是1至6個碳原子的直鏈或支鏈單價飽和脂族鏈，其攜帶一個或多個連接於一個或多個碳原子的滷代基團。應該理解，「滷代(C1-C4)烷基」包括在「滷代(C1-C6)烷基」的定義範圍內。「滷代(C1-C4)烷基」或「滷代(C1-C6)烷基」的通常實例包括CF3、CHF2、CH2F等。本文使用的術語「滷代(C1-C4)烷氧基」指的是攜帶1至4個碳原子的直鏈或支鏈單價飽和脂族鏈的氧原子，進一步攜帶一個或多個連接於一個或多個碳原子的滷代基團。本文使用的術語「滷代(C1-C6)烷氧基」指的是攜帶1至6個碳原子的直鏈或直鏈、單價、飽和脂族鏈的氧原子，進一步攜帶一個或多個連接於一個或多個碳原子的滷代基團。應該理解，術語「滷代(C1-C4)烷氧基」包括在「滷代(C1-C6)烷氧基」的定義範圍內。「滷代(C1-C4)烷氧基」或「滷代(C1-C6)烷氧基」的通常實例包括OCF3、OCHF2、OCH2F等。
本文使用的術語「芳基」指的是單價芳族碳環基團，包括基團如苯基、萘基等。
本文使用的術語「雜芳基」指的是含有1至4個各自獨立地選自氧、硫和氮的雜原子的5至6元單價單環芳族基團。應該理解，該基團的其餘原子是碳且該基團可以通過任意提供穩定結構的環系原子結合於例如式I結構。通常雜環基的實例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、四唑基、噻唑基、異噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基等。
本文使用的術語「N，N-(C1-C4)二烷基胺」指的是被兩個1至4個碳原子的直鏈或支鏈單價飽和脂族鏈取代的氮原子。包括在術語「N，N-(C1-C6)二烷基胺」內的有-N(CH3)2、-N(CH3)CH2CH3、-N(CH2CH3)2、-N(CH2CH2CH3)2、-N(CH2CH2CH2CH3)2等。術語「NH-(C1-C4)烷基胺」指的是被1至4個碳原子的單一直鏈或支鏈單價飽和脂族鏈取代的氮原子。
本領域普通技術人員將能夠領會式I化合物的一些雜環部分可以以位置異構體和互變異構形式存在。例如已知四唑存在互變異構結構
類似地，三唑存在兩種位置異構形式，1，2，4-三唑和1，2，3-三唑，其每種形式可以以互變異構結構存在。本發明涵蓋所有位置異構體、單個互變異構形式以及其任意組合。
標示
指的是向前伸出頁面平面的鍵。
標示
指的是向後伸出頁面平面的鍵。
本文使用的術語「雄激素受體」或「AR」指的是核激素受體大類中的雄激素受體亞型，其作為關連配體結合雄激素睪酮。本文使用的術語「雄激素受體調節劑」或「雄激素調節劑」或「AR調節劑」指的是那些核激素受體配體，其結合於AR亞型並調節(即激動、部分激動、部分拮抗、拮抗)受體活性。作為具體的實施方案，本發明提供選擇性雄激素受體調節劑(SARM)，其在某些組織(例如肌肉和/或骨骼)中顯示促雄特性而在其他組織如前列腺或肝臟中同時顯示抗雄效果。作為替代選擇，本發明的SARM在合成代謝組織如肌肉或骨骼中可顯示激動劑活性，而在組織如前列腺或精囊中則僅顯示部分激動劑活性或拮抗劑活性。
如本領域技術人員所理解，生理學障礙可表現為「慢性」病症，或「急性」發作。本文使用的術語「慢性」意指緩慢進展且長期持續的病症。由此，慢性病症在被診斷時即進行治療且治療持續貫穿疾病病程。相反，術語「急性」意指短期惡化事件或發作，繼之以一段恢復期。因此，病理性障礙的治療同時涵蓋急性事件和慢性病症。在急性事件中，在症狀開始時施用化合物，在症狀消失時終止。如上所述，慢性病症的治療貫穿疾病病程。
本文使用的術語「患者」指的是哺乳動物如小鼠、沙鼠、豚鼠、大鼠、犬或人。但是，應該理解優選的患者是人。本文使用的術語「治療」意指減輕症狀、暫時或長期消除所致症狀的原因以及防止、減緩指定障礙或病症所致症狀的出現或逆轉其進展或嚴重性。由此，本發明所提供的治療方法同時涵蓋治療性和預防性施用。
本文使用的術語「有效量」指的是單次或多次劑量施用於患者的化合物的量或劑量，其在經歷診斷或治療的患者中提供所需效果。有效量可容易地由主治診斷醫生如本領域技術人員利用已知技術、通過觀察類似情形下所獲得的結果來確定。在確定所施用化合物的有效量或劑量時，由主治診斷醫生考慮多種因素，包括但不限於哺乳動物種屬；其體積、年齡和一般健康狀況；累及程度或所涉及疾病的嚴重性；個體患者的響應；所施用的具體化合物；施用模式；所施用製劑的生物利用度特徵；所選劑量方案；並行藥物的使用；和其他相關情形。
通常的日劑量將含有有效量的約0.001mg/kg至約100mg/kg的本發明活性化合物。優選地，日劑量將含有有效量約0.05mg/kg至約50mg/kg本發明化合物。
口服施用是施用本發明所應用化合物的優選途徑，無論單獨施用還是與其他治療劑組合。但是，口服施用不是唯一途徑，甚至也不是唯一優選的途徑。其他優選的施用途徑包括透皮、經皮或皮下、肺、靜脈內、肌肉內、鼻內、腹膜內、口腔、舌下或直腸內途徑。如果AR調節劑與其他化合物組合施用，化合物之一可通過一種途徑如口服施用，另一種可通過透皮、經皮或皮下、肺、靜脈內、肌肉內、鼻內、腹膜內、口腔、舌下或直腸內途徑施用，如具體情形所需。施用途徑可以以任意方式改變，受限於化合物的物理性質和患者和護理者的便利程度。
本發明所應用的化合物可作為藥物組合物施用，因此包含本發明化合物的藥物組合物是本發明重要的實施方案。這類組合物可採取任意藥學可接受的物理形式，但特別優選口服施用藥物組合物。這類藥物組合物含有作為活性成分的有效量的式I化合物，包括其藥學可接受的鹽和水合物，該有效量與待施用化合物的日劑量相關。每個劑量單位可含有給定化合物的日劑量，或可含有一部分日劑量如二分之一或三分之一劑量。每個劑量單位中所含每種化合物的量取決於選擇用於治療的具體化合物的特徵以及其他因素如其使用的適應症。可對本發明的藥物組合物進行配製，以在應用熟知的方法施用於患者後提供活性成分的快速、持續或延遲釋放。
以下討論提供包含本發明化合物的藥物組合物的通常製備工藝。但是，以下所述決不旨在限制本發明提供的藥物組合物的範圍。
組合物優選配製成單位劑量形式，每劑含有約1至約500mg每種化合物，或單一單位劑量形式，更優選約5至約300mg(例如25mg)。術語「單位劑量形式」指的是適合作為整體劑量用於患者的物理離散單元，每個單元含有計算用於產生所需治療效果的預定量的活性物質以及適合的藥物載體、稀釋劑或賦形劑。
配製藥物組合物的惰性成分和配製方式是常規的。藥物科學中所用的通常方法可在此使用。可以使用所有常規類型的組合物，包括片劑、咀嚼片、膠囊、溶液、胃腸外溶液、鼻內噴劑或散劑、錠劑、栓劑、透皮貼劑或懸液。一般而言，組合物含有共計約0.5％至約50％的化合物，這取決於所需劑量和所用組合物的類型。但是，化合物的量最好定為「有效量」，即為需要這類治療的患者提供所需效果的每種化合物的量或劑量。本發明所應用化合物的活性不取決於組合物的性質，因此組合物的選擇和配製完全出於便利和經濟。
膠囊的製備是通過混合化合物和適合的稀釋劑並填充適當量的混合物在膠囊中。常用的稀釋劑包括惰性粉末狀物質如澱粉、粉狀纖維素尤其是晶體或微晶纖維素、糖如果糖、甘露糖醇和蔗糖、穀物粉和類似可食用粉末。
片劑的製備通過直接壓制、溼法制粒或幹法制粒。它們的製劑通常包括稀釋劑、粘合劑、潤滑劑和崩解劑以及化合物。典型的稀釋劑包括例如各種類型的澱粉、乳糖、甘露糖醇、高嶺土、磷酸鈣或硫酸鈣、無機鹽如氯化鈉和粉狀糖。粉狀纖維素衍生物也是有用的。典型的片劑粘合劑是這類物質如澱粉、明膠和糖如乳糖、果糖、葡萄糖等。天然和合成膠也很方便，包括阿拉伯膠、藻酸鹽、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷等。聚乙二醇、乙基纖維素和蠟也可用作粘合劑。
片劑常常包衣有糖作為矯味劑和密封劑。通過在製劑中使用大量的適口物質如甘露糖醇，化合物也可以配製為咀嚼片，如目前充分認可的做法。即溶片樣的製劑目前也常用於確保患者消耗所給劑型並避免困擾一些患者的吞咽固體物質困難的問題。
潤滑劑常常有必要用於片劑製劑中，以防止片劑和衝頭在衝模粘合。潤滑劑選自這類易滑固體如滑石、硬脂酸鎂和硬脂酸鈣、硬脂酸和氫化植物油。
片劑崩解劑是潤溼時膨脹使片劑分裂並釋放化合物的物質。它們包括澱粉、粘土、纖維素、褐藻酸和膠類。更具體而言，例如可以使用玉米和馬鈴薯澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、木材纖維素、粉狀天然海綿、陽離子交換樹脂、海藻酸、瓜兒膠、柑橘漿和羧甲基纖維素，以及十二烷基硫酸鈉。
腸溶製劑常常用於保護活性劑免於胃的強酸性物質。這類製劑的製備是通過對固體劑型包被聚合物膜，所述聚合物在酸性環境中不溶、在鹼性環境中可溶。示例性的膜有醋酸纖維素酞酸酯、聚醋酸乙烯酞酸酯、羥丙基甲基纖維素酞酸酯和羥丙基甲基纖維素醋酸酯琥珀酸酯。
當需要施用化合物的栓劑時，可以使用常用基質。可可油是傳統的栓劑基質，其可通過添加蠟以略微提高其熔點。還廣泛使用具體包含各種分子量聚乙二醇的水混溶性栓劑基質。
透皮貼劑近期已日漸普及。通常，它們包含樹脂質的組合物，藥物於其中溶解或部分溶解，其通過保護組合物的膜與皮膚保持接觸。近期在該領域已出現很多專利。其他更為複雜的貼劑組合物也已使用，特別是具有刺有無數孔的膜的那些，通過這些孔，藥物經滲透作用被泵出。
本領域普通技術人員理解如上所述工藝也可容易地應用於治療易感於雄激素受體調節的病症的方法中，特別是虛弱、骨質疏鬆、骨量減少和雄性或雌性性功能障礙。
當與本發明的方法和用途聯合使用時，本發明的化合物和組合物可以單獨施用或與用於治療特定障礙或病症的常規治療劑組合施用。當本發明的化合物或組合物被用作組合的一部分時，式I化合物或包含式I化合物的組合物可以分別施用或作為包含與其組合治療劑的製劑的一部分施用。
骨質疏鬆的組合治療 用於治療骨質疏鬆的常規治療劑可有利地與式I化合物或包含式I化合物的組合物組合。用於治療骨質疏鬆的常規活性劑包括激素替代療法如綴合馬雌激素(Premarin
)、合成綴合雌激素(Cenestin
)、酯化雌激素(Estratab
或Menest
)、estropiate(Ogen
或Ortho-est
)；以及透皮雌二醇製劑如Alora
、Climara
、Estraderm
和Vivelle
。組合雌激素-孕激素製劑也可用於治療骨質疏鬆，包括Prempro
(綴合馬雌激素和醋酸甲羥孕酮)、Premphase
(綴合馬雌激素和炔諾肟酯)、Ortho-Prefest
(雌二醇和炔諾肟酯)、Femhrt
(炔雌醇和醋酸炔諾酮)和Combipatch(透皮雌二醇和醋酸炔諾酮)、可與本發明化合物或組合物組合的其他常規骨質疏鬆治療劑包括雙膦酸類化合物如阿侖膦酸(Fosamax
)、利塞膦酸(Actonel
)和帕米膦酸(Aredia
)；選擇性雌激素受體調節劑(SERM)如雷洛昔芬(Evista
)；降鈣素(Calcimar
或Miacalcin
)；甲狀旁腺激素(Forteo
)；鈣；維生素D；利尿劑(以減少Ca2+排洩)；氟化物(fluoride)；和雄激素(睪酮或5α-二氫睪酮)。
因此，治療骨質疏鬆的組合療法製劑包含 成分(A1)式I化合物； 成分(A2)一種或多種常規用於治療骨質疏鬆的共用藥物(co-agent)，選自Premarin
、Cenestin
、Estratab
、Menest
、Ogen
Ortho-est
、Alora
、Climara
、Estraderm
、Vivelle
、Prempro
Premphase
、Ortho-Prefest
、Femhrt
、Combipatch
、Fosamax
Actonel
、Aredia
)；Evista
；Calcimar
、Miacalcin
、Forteo
鈣、維生素D、利尿劑、氟化物、睪酮和5α-二氫睪酮； 和任選的 成分(A3)藥學可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
本發明的具體方面 以下列表羅列出式I化合物的若干組具體取代基和具體變量。應該理解具有這類具體取代基或變量的式I化合物以及應用這類化合物的方法和用途代表了本發明的具體方面。應該進一步理解的是這些具體取代基和具體變量組的每一個可以與其他所述的基團組合，從而形成本發明化合物、方法和用途的又一另外具體方面。
因此，本發明的具體方面是如下定義的式I化合物，其中 (a)R1代表氰基、滷素、(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、C(＝S)NH2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a、OR1b、SO2R1c、NHCOR1d，或任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷素、滷代(C1-C4)烷基或滷代(C1-C4)烷氧基； (b)R1代表氰基、滷素、(C1-C4)烷基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a、OR1b、SO2R1c、NHCOR1d，或任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷素、滷代(C1-C4)烷基或滷代(C1-C4)烷氧基； (c)R1代表氰基、滷素、(C1-C4)烷基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a，其中R1a代表氫、羥基、甲基、甲氧基、乙氧基、氨基或三氟甲基；OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基；SO2R1c，其中R1c代表甲基或乙基；NHCOR1d，其中R1d代表甲氧基或乙氧基；或任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷素、滷代(C1-C4)烷基或滷代(C1-C4)烷氧基； (d)R1代表氰基、滷素、(C1-C4)烷基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a，其中R1a代表氫、羥基、甲基、甲氧基、乙氧基、氨基或三氟甲基；OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基；SO2R1c，其中R1c代表甲基或乙基；NHCOR1d，其中R1d代表甲氧基或乙氧基；或選自下組的5至6元雜芳基呋喃基、噻吩基、吡咯基、四唑基、噻唑基、異噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷素、滷代(C1-C4)烷基或滷代(C1-C4)烷氧基； (e)R1代表氰基、滷素、(C1-C4)烷基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a，其中R1a代表氫、羥基、甲基、甲氧基、乙氧基、氨基或三氟甲基；OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基；SO2R1c，其中R1c代表甲基或乙基；NHCOR1d，其中R1d代表甲氧基或乙氧基；或選自下組的5至6元雜芳基噻唑基、噻二唑基、異噁唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷素、滷代(C1-C4)烷基或滷代(C1-C4)烷氧基； (f)R1代表氰基、溴、氯、氟、甲基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3，COR1a，其中R1a代表氫、羥基、甲基、甲氧基、乙氧基、氨基或三氟甲基；OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基；SO2R1c，其中R1c代表甲基或乙基；NHCOR1d，其中R1d代表甲氧基或乙氧基；或選自下組的5至6元雜芳基噻唑基、噻二唑基、異噁唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基，每個任選被選自氰基、氨基、(C1-C4)烷基或滷素的第一取代基取代，和為(C1-C4)烷基的第二取代基取代； (g)R1代表氰基、溴、氯、氟、甲基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a，其中R1a代表氫、羥基、甲基、甲氧基、乙氧基、氨基或三氟甲基；OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基；SO2R1c，其中R1c代表甲基或乙基；NHCOR1d，其中R1d代表甲氧基或乙氧基；或選自下組的5至6元雜芳基噻唑基、噻二唑基、異噁唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基，每個任選被選自氨基、甲基或氟的第一取代基和為甲基的第二取代基取代； 本發明的其他具體方面為如下定義的式I化合物，其中 (a)R2代表氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、甲氧基、乙氧基、氟、溴、氯，或R1和R2一起形成下式基團
或
(b)R2代表氫、甲基、氟、溴、氯，或R1和R2一起形成下式基團
或
(c)R2代表氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、甲氧基、乙氧基、氟、溴或氯；或 (d)R2代表氫、甲基、氟、溴或氯； 本發明的其他具體方面為如下定義的式I化合物，其中 (a)R3代表NHCOR3a或NHSO2R3b，其中 R3a和R3b在每次出現時各自獨立地代表甲基、乙基、異丙基、CH(C2H5)2、CH(CH3)CH2CH3、CF3、CHF2、甲氧基、乙氧基、環丙基、環丁基、NH(CH3)、N(CH3)2或N(CH3)OCH3； (b)R3代表NHCOR3a，其中R3a在每次出現時代表甲基、乙基、異丙基、CH(C2H5)2、CH(CH3)CH2CH3、CF3、甲氧基、乙氧基、環丙基、環丁基、NH(CH3)或N(CH3)2，或R3代表NHSO2R3b，其中R3b在每次出現時代表環丙基、NH(CH3)、N(CH3)2或N(CH3)OCH3；或 (c)R3代表NHCOR3a，其中R3a代表異丙基； 本發明的其他具體方面為如下定義的式I化合物，其中 (a)R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、甲基、甲氧基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、NH(CH3)、NH(C2H5)、N(CH3)2、NHSO2CH3或COOCH3；或任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、(C1-C4)烷基或滷素； (b)R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、甲基、甲氧基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、NH(CH3)、NH(C2H5)、N(CH3)2、NHSO2CH3或COOCH3；或選自下組的5至6元雜芳基呋喃基、噻吩基、吡咯基、四唑基、噻唑基、異噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、(C1-C4)烷基或滷素； (c)R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、甲基、甲氧基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、NH(CH3)、NH(C2H5)、N(CH3)2、NHSO2CH3或COOCH3；或選自下組的5至6元雜芳基噻吩基、噻唑基、吡啶基或吡嗪基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、(C1-C4)烷基或滷素； (d)R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、甲基、甲氧基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、NH(CH3)、NH(C2H5)、N(CH3)2、NHSO2CH3或COOCH3；或選自下組的5至6元雜芳基噻吩基、噻唑基、吡啶基或吡嗪基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、甲基、氟或氯； (e)R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、甲基、甲氧基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、NH(CH3)、NH(C2H5)、N(CH3)2、NHSO2CH3或COOCH3；或選自下組的5至6元雜芳基噻吩基、噻唑基、吡啶基或吡嗪基，每個任選被獨立地選自下組的取代基取代氨基、甲基、氟或氯； 本發明更為具體的實施方案為以下式I(a)、I(b)和I(c)化合物或其藥學可接受的鹽
式(I(a) 其中 R1代表氰基、滷素、(C1-C4)烷氧基、滷代(C1-C4)烷氧基、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3或COH； R3代表NHCOR3a； R3a代表(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、環丙基、環丁基、NH-(C1-C4)烷基胺或N-(C1-C6)二烷基胺；且 R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、(C1-C4)烷基或滷素。
式I(a)化合物的更具體方面為如下定義的化合物，其中 (a)R1代表氰基、氟、溴、氯、甲氧基、OCF3、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3或COH； (b)R1代表氰基、氟、溴、氯、甲氧基、OCF3、CH＝NOCH3或COH； (c)R1代表氰基、溴、甲氧基、OCF3、CH＝NOCH3或COH； (d)R1代表氰基、甲氧基、OCF3、CH＝NOCH3或COH； (e)R1代表氰基； (f)R1代表甲氧基； (g)R1代表OCF3； (h)R1代表CH＝NOCH3；或 (i)R1代表COH。
式I(a)化合物的另外具體方面提供以下定義的化合物，其中 (a)R3代表NHCOR3a，其中R3a代表(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、環丙基或N，N-(C1-C6)二烷基胺； (b)R3代表NHCOR3a，其中R3a代表異丙基、甲氧基、環丙基或N(CH3)2； (c)R3代表NHCOR3a，其中R3a代表異丙基； (d)R3代表NHCOR3a，其中R3a代表甲氧基； (e)R3代表NHCOR3a，其中R3a代表環丙基；或 (f) R3代表NHCOR3a，其中R3a代表N(CH3)2 式I(a)化合物的另外具體方面提供以下定義的化合物，其中 (a)R4代表選自下組的5至6元雜芳基呋喃基、噻吩基、吡咯基、四唑基、噻唑基、異噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、(C1-C4)烷基或滷素； (b)R4代表選自下組的5至6元雜芳基噻吩基、噻唑基、吡啶基或吡嗪基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、(C1-C4)烷基或滷素； (c)R4代表選自下組的5至6元雜芳基噻吩基、噻唑基、吡啶基或吡嗪基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、甲基、氯或氟； (d)R4代表選自下組的5至6元雜芳基噻吩基、噻唑基、吡啶基或吡嗪基，每個任選被選自下組的取代基取代氨基、甲基、氯或氟； (e)R4代表以下基團
或
甚至更具體的本發明實施方案提供以下定義的式I(b)化合物
式I(b) 其中 R1代表氫、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、C(＝S)NH2、CH＝NOCH3、CH＝NOH、COR1a、OR1b、SO2R1c、NHCOR1d； R1a代表氫、氨基、羥基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基或滷代(C1-C4)烷基； R1b代表(C1-C4)烷基、環丙基或環丙基甲基； R1c代表(C1-C4)烷基； R1d代表(C1-C4)烷氧基； R2代表氫、滷素、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基，或R1和R2一起代表下式基團
或
R3代表NHCOR3a或NHSO2R3b； R3a和R3b在每次出現時各自獨立地代表(C1-C6)烷基、滷代(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、環丙基、環丁基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺或N(CH3)OCH3；且 R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺、NHSO2CH3或COOCH3； 式I(b)化合物的另外具體方面提供以下定義的化合物，其中 (a)R1代表羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a、OR1b、SO2R1c或NHCOR1d； (b)R1代表羥基、氰基、氟、氯、溴、硝基、甲基、CF3、CHF2、OCF3、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a、OR1b、SO2R1c或NHCORbd1d； (c)R1代表羥基、氰基、氟、氯、溴、硝基、甲基、CF3、CHF2、OCF3、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3，COR1a，其中R1a代表氫、羥基、氨基、甲基、甲氧基、乙氧基或CF3，OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基；SO2R1c，其中R1c代表甲基；或NHCOR1d，其中R1d代表甲氧基或乙氧基； (d)R1代表氰基、氟、氯、溴、甲基、CF3、CHF2、OCF3、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3，COR1a，其中R1a代表氫、羥基、氨基、甲基、甲氧基、乙氧基或CF3，OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基；SO2R1c，其中R1c代表甲基；或NHCOR1d，其中R1d代表甲氧基或乙氧基； (e)R1代表氰基、氟、氯、溴、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3或OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基； (f)R1代表氰基； (g)R1代表氟、溴或氯； (h)R1代表CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3或C(NOCH2CH3)CH3； (i)R1代表OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基； 式I(b)化合物的另外具體方面提供以下定義的化合物，其中 (a)R2代表氫、溴、氯、氟、甲基或甲氧基，或R1和R2一起代表下式基團
或
(b)R2代表氫、溴、氯或氟； (c)R2代表氫、甲基或甲氧基； (d)R2代表氫，或R1和R2一起代表下式基團
或
(e)R2代表氫。
式I(b)化合物的另外具體方面提供以下定義的化合物，其中 (a)R3代表NHCOR3a或NHSO2R3b，其中R3a和R3b在每次出現時各自獨立地代表甲基、乙基、異丙基、CH(C2H5)2、CH(CH3)CH2CH3、CF3、CHF2、甲氧基、乙氧基、環丙基、環丁基、NH(CH3)、N(CH3)2或N(CH3)OCH3； (b)R3代表NHCOR3a，其中R3a在每次出現時代表甲基、乙基、異丙基、CH(C2H5)2、CH(CH3)CH2CH3、CF3、甲氧基、乙氧基、環丙基、環丁基、NH(CH3)或N(CH3)2；或R3代表NHSO2R3b，其中R3b在每次出現時代表環丙基、NH(CH3)、N(CH3)2或N(CH3)OCH3； (c)R3代表NHCOR3a，其中R3a代表甲基、乙基、異丙基、環丙基或環丁基； (d)R3代表NHCOR3a，其中R3a異丙基； 式I(b)化合物的進一步具體方面提供以下定義的化合物，其中 (a)R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、溴、氯、氟、硝基、甲基、甲氧基、CF3、CHF2、OCF3、OCHF2、NH(C2H5)、N(CH3)2、NHSO2CH3或COOCH3； (b)R4代表任選被第一取代基和第二取代基取代，第一取代基選自氨基、羥基、氰基、溴、氯、氟、硝基、甲基、甲氧基、CF3、CHF2、OCF3、OCHF2、NH(C2H5)、N(CH3)2、NHSO2CH3或COOCH3，第二取代基選自溴、氯、氟或甲基； (c)R4代表任選被第一取代基和第二取代基取代，第一取代基選自氰基、溴、氯、氟、甲基或甲氧基，第二取代基為氟； (d)R4代表任選被選自下組的取代基取代的苯基氰基、溴、氯、氟、甲基或甲氧基； (e)R4代表任選被氰基取代的苯基； (f)R4代表任選被氟取代的苯基； (g)R4代表任選被甲基取代的苯基；或 (h)R4代表任選被甲氧基取代的苯基； 本發明另外的具體方面提供式I(c)化合物或其藥學可接受的鹽，其中
式I(c) R1代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、(C1-C4)烷基或滷素； R3a代表(C1-C6)烷基、滷代(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、環丙基、環丁基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺或N(CH3)OCH3；且 R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺、NHSO2CH3或COOCH3。
式I(c)化合物的其他具體方面提供以下定義的化合物，其中 (a)R1代表選自下組的5至6元雜芳基呋喃基、噻吩基、吡咯基、四唑基、噻唑基、異噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷素、滷代(C1-C4)烷基或滷代(C1-C4)烷氧基； (b)R1代表選自下組的5至6元雜芳基噻唑基、噻二唑基、異噁唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷素、CF3、CHF2、OCF3或OCHF2； (c)R1代表選自下組的5至6元雜芳基噻唑基、噻二唑基、異噁唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、甲基或氟； (d)R1代表選自下組的5至6元雜芳基噻唑基、噻二唑基、異噁唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基，每個任選被選自氨基、甲基或氟的第一取代基和為甲基的第二取代基取代； (e)R1代表下式基團
或
式I(c)化合物的更具體方面提供以下定義的化合物，其中 (a)R3a代表(C1-C6)烷基、環丙基或環丁基； (b)R3a代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丁基； (c)R3a代表異丙基、環丙基或環丁基；或 (d)R3a代表異丙基。
式I(c)化合物的最具體方面提供以下定義的化合物，其中 (a)R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺、NHSO2CH3或COOCH3； (b)R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氰基、滷素、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基； (c)R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氰基、氟、甲基或甲氧基； (d)R4代表任選被選自下組的取代基取代的苯基氰基、氟、甲基或甲氧基； (e)R4代表任選被氰基取代的苯基； (f)R4代表任選被氟取代的苯基； (g)R4代表任選被甲基取代的苯基；或 (h)R4代表任選被甲氧基取代的苯基。
作為尤其具體的方面，本發明提供如下定義的式I(a)化合物或其藥學可接受的鹽，其中 R1代表氰基、滷素或CH＝NOCH3； R3代表NHCOR3a； R3a代表(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、環丙基或NH-(C1-C4)烷基胺；且 R4代表任選被選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、甲基、乙基、異丙基和氟。
作為最具體的方面，本發明提供如下定義的式I(a)化合物或其藥學可接受的鹽，其中 R1代表氰基或CH＝NOCH3； R3代表NHCOR3a； R3a代表甲基、乙基、異丙基或環丙基；且 R4代表吡啶、噻唑或吡嗪，任選被選自下組的取代基取代氨基、甲基或氟。
作為另外尤其具體的方面，本發明提供如下定義的式I(b)化合物或其藥學可接受的鹽，其中 R1代表氰基、滷素或CH＝NOCH3； R2代表氫； R3代表NHCOR3a； R3a代表(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、環丙基或NH-(C1-C4)烷基胺；且 R4代表任選被1或2個選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、甲基、氟和氯。
作為最尤其具體的方面，本發明提供如下定義的式I(b)化合物或其藥學可接受的鹽，其中 R1代表氰基或CH＝NOCH3； R2代表氫； R3代表NHCOR3a； R3a代表甲基、乙基、異丙基或環丙基；且 R4代表任選被選自下組的取代基取代的苯基氰基、甲基和氟。
作為另外尤其具體的方面，本發明提供如下定義的式I(c)化合物或其藥學可接受的鹽，其中 R1代表選自下組的5至6元雜芳基噻唑基、噻二唑基、異噁唑基、吡啶基、噠嗪基和嘧啶基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、甲基和氟； R3a代表(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、環丙基或NH-(C1-C4)烷基胺；且 R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、甲基、氟和氯。
作為最具體的一個方面，本發明提供如下定義的式I(c)化合物或其藥學可接受的鹽，其中 R1代表選自下組的5至6元雜芳基噻唑基、噻二唑基、異噁唑基、吡啶基、噠嗪基和嘧啶基，每個任選被選自下組的取代基取代氨基、甲基和氟； R3a代表甲基、乙基、異丙基或環丙基；且 R4代表任選被選自下組的取代基取代的苯基氰基、甲基和氟。
此外，應該理解，本發明最具體的方面提供本文所示例的式I、式I(a)、式I(b)和式I(c)的那些化合物。進而，包含本文所示例的式I、式I(a)、式I(b)和式I(c)的方法、用途和組合物也是本發明最具體的方面。
所有本發明化合物可通過化學方法製備，例如按照以下方案和/或製備和實施例所示出的合成路線。但是，以下討論不旨在以任何方式限制本發明的範圍。例如，每一所述途徑的具體合成步驟可以以不同方式組合，或與不同方案的步驟聯合，以製備其他式I化合物。
除非另外說明，所有取代基如前所定義。試劑和原料易於為本領域普通技術人員獲得。例如，某些試劑或原料可由本領域普通技術人員按照以下所公開的工藝製備Khanna，I.K.等人，J.Med.Chem.(2000)43，3168-3185；Erlenmeyer，H.等人，Helv.Chim.Acta(1944)，27，1437-1438；McElhinney，R.S.等人，J.Med.Chem.(1998)41，5265-5271；Yang，L.等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.(1999)9，1761-1766；Hermitage，S.A，Cardwell，K.S.，Chapman，T.，Cooke，J.W.B.，Newton，R.，Org.Process Res.Dev.，(2001)5(1)，37-44；R Frenette等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.，(1999)9(16)2391-2396；Campaigne，E.，Thompson，R.L.，Van Werth，J.E.，Journal of Medicinal & Pharmaceutical Chemistry，(1959)1，577-600；Kikelj，D.和Urleb，U.，Science of Synthesis，(2002)11，627-833；Tsunoda，T.等人，Tetrahedron Lett.(1996)37，2459-2462。四氫咔唑可由本領域普通技術人員利用Hughes，OPPI(1993)，25(6)，607-32所綜述的Fischer吲哚合成法製備。其他試劑、原料或可用工藝可見於WO99/55302。其他必要的試劑和原料可通過選自有機和雜環化學標準技術的那些工藝、類似於已知結構類似化合物合成法的工藝和以下實施例所述的工藝、包括任何新工藝製備。
方案I
在方案I的步驟A中，使醯氯或酸酐如異丁酸酐與取代或未取代的反-4-氨基環己醇(1)和三乙胺在惰性溶劑如四氫呋喃或二噁烷中於約0至50℃反應約10至48小時。式(2)的醯胺產物(其中Z代表例如低級烷基如異丙基或環烷基、O-Bn或烷氧基)可通過用水稀釋並用乙醚洗滌以除去副產物而分離。然後，通過添加氯化鈉並用二氯甲烷萃取，可將醯胺(2)鹽析。此外，也可通過過濾分離從水相沉澱出的醯胺(2)。
實施步驟A的另一優選方法利用含無機鹼如碳酸鉀的質子溶劑如甲醇與醯氯，優選環丙基碳醯氯。反應在約0至50℃進行約10至48小時。產物可通過濃縮反應物並重懸於甲醇/二氯甲烷以除去無機鹽而分離。
在其中產物(2)的Z＝O-苄基的方案I的步驟A中，優選的方法是Janda，K.D.and Ashley，J.A.Synth.Comm.(1990)20，1073-1082的方法。
在方案I的步驟B中，將式(2)的衍生物利用氧化劑如氯鉻酸吡啶鎓在惰性溶劑如二氯甲烷中並在約0至50℃攪拌約10至48小時而氧化為式(3)的酮。將反應物與大量二氧化矽混合併經二氧化矽墊過濾，用適合的溶劑如二氯甲烷和乙酸乙酯/己烷洗脫，得到式(3)的環酮醯胺。
作為替代選擇，特別是Z＝O-苄基時，Swern氧化法是獲得式(3)酮的優選方法。Swern氧化法利用本領域技術人員熟知的條件，如用草醯氯在DMSO存在下、在惰性溶劑如二氯甲烷中、於約-80至-60℃的溫度處理約1至2小時，繼而用三乙胺在-80℃至室溫處理約1至24小時。利用標準萃取技術分離產物。
方案II
在方案II、步驟A中，使式(4)的苯肼鹽(例如鹽酸鹽)與式(3)的環酮按照Fischer吲哚合成法反應，生成式(5)的四氫咔唑。使肼和酮在氯化氫氣體飽和的乙醇中於回流下反應約10至48小時並利用標準水相處理技術分離。作為替代選擇，反應可在無氯化氫氣體、僅僅通過使用式(4)的苯肼鹽酸鹽與式(3)的酮在乙醇中於約50至85℃反應約10至72小時而完成。在又一工藝中，式(4)的苯肼鹽酸鹽和式(3)的酮可以作為劇烈攪拌的水和濃鹽酸中的異相混合物於約80至100℃反應約4至8小時，基本上如U.S.專利No.6,359,146B1所述。四氫咔唑然後可通過過濾分離。根據另一種變通方法，將乙醯氯和無水乙醇在0℃至室溫攪拌約1至2小時。然後將式(4)的苯肼鹽酸鹽和式(3)的酮加至乙醇/HCl中並回流約10至72小時。
本領域技術人員將認識到，式(4)的苯肼可由相應的苯胺通過用亞硝酸處理以形成重氮鹽、繼而用氯化錫(II)還原而獲得。
式(6)的四氫咔唑衍生物的分離如下完成直接加入水並過濾所得沉澱，或利用水相處理的標準技術並用有機溶劑處理。式(6)四氫咔唑的(R)和(S)對映體通過手性色譜、利用本領域技術人員熟知的標準技術獲得。對映體在如方案III至方案VIII的隨後反應中使用。
在方案II的步驟B中，式(6)的四氫咔唑可通過鈀催化的式(3)環酮和式(5)碘苯胺之間的成環反應而獲得，如Chen，C.等人，J.Org.Chem.(1997)，62，2676-2677概括所述。酮和碘苯胺在惰性溶劑如二甲基甲醯胺中、在鈀催化劑如醋酸鈀和胺鹼如1，4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(DABCO)存在下反應。將反應物在無水條件下在約80至150℃的溫度加熱6至48小時。產物可通過普通的萃取技術分離並通過矽膠色譜純化。
方案III
在方案III的步驟A中，將式(7)的醛還原為式(10)的醇。還原醛的一大系列方法為本領域技術人員所熟知並可見於R.C.Larock在「Comprehensive Organic Transformations」，VCH Publishers，1989，p.528-534的文章中。優選的方法是用硼氫化鈉在乙醇或甲醇中、在室溫至60℃還原約30分鐘至24小時。
作為替代選擇，如方案III的步驟B所述，通過還原式(8)的酯獲得醇。多種還原羧酸酯為醇的方法為本領域技術人員所熟知並可見於R.C.Larock在「Comprehensive Organic Transformations」，VCH Publishers，1989，p.549-551的文章中。優選的方法是用硼氫化鋰在非質子溶劑如四氫呋喃或二噁烷中、在室溫至回流溫度還原約1至48小時。
在方案III的步驟C中，其中R4是芳基或雜芳基的式(9)化合物被滷化，得到式(11)的烷基滷化物。將式(9)化合物用自由基引發劑如過氧化苯甲醯或1，1』-偶氮二丁腈或1，1』-偶氮二(環己烷甲腈)在四氯化碳中與N-氯琥珀醯亞胺或N-溴琥珀醯亞胺在紫外光照射下處理。優選的方法式用1，1』-偶氮二(環己烷甲腈)和N-溴琥珀醯亞胺在約室溫至四氯化碳回流溫度處理約4至48小時。然後，產物可利用標準技術如過濾不溶組分、繼之以矽膠色譜而純化。
在方案III的步驟D中，將式(10)的醇轉化為式(11)的烷基滷化物，其中X代表例如Br或Cl，優選Br。多種用於該轉化的方法為本領域技術人員已知，如以下方法含47％溴化氫的乙酸，二溴三苯基正膦與三乙胺，亞硫醯氯，三溴化磷，N-氯琥珀醯亞胺或N-溴琥珀醯亞胺與二甲硫，或乙醯溴。優選的方法是用乙醯溴在-78℃至50℃、優選在0℃至室溫的溫度處理約1至48小時。產物利用乙酸乙酯、碳酸氫鈉處理進行分離並可通過標準技術如矽膠色譜純化。另一種優選的方法是用亞硫醯氯在約0℃處理長達30分鐘至4小時，得到其中X代表Cl的式(II)的烷基滷化物。
作為替代選擇，在方案III的步驟E中，將式(10)的醇轉化為式(12)的甲基磺酸酯。將醇與有機鹼如三乙胺或二異丙基乙基胺合併，並用甲磺醯氯在惰性溶劑如二氯甲烷中處理。將反應維持在0℃至室溫達15分鐘至4小時。產物通過本領域技術人員已知的萃取技術分離。
方案IV
在方案IV的步驟A中，將式(6)的四氫咔唑用其中X是溴或氯的烷基化劑或用式(12)的試劑烷基化，得到式(14)的N-取代的四氫咔唑。四氫咔唑陰離子在惰性溶劑如二甲基甲醯胺、N-甲基吡咯烷酮、四氫呋喃、二噁烷或甲苯中用鹼如氫化鈉、氫化鉀、二(三甲基甲矽烷基)氨化鉀或鈉或碳酸銫產生，優選的溶劑是二甲基甲醯胺和四氫呋喃，其中氫化鈉和二(三甲基甲矽烷基)氨化鉀是優選的鹼。用鹼處理約10至60分鐘後，將陰離子用苄基滷化物在約-78至23℃處理並持續約4至48小時。當使用碳酸銫時，鹼和苄基滷化物可直接加入，並將反應物在約50至100℃加熱約10至72小時。
在方案IV的步驟B中，使式(6)的四氫咔唑與式(10)的醇進行Mitsunobu反應，得到式(14)的四氫咔唑。本領域技術人員已知的通常的氧化還原系統如偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)/三苯膦、N，N，N′，N′-四甲基偶氮二甲醯胺(TMAD)/三丁基膦或1，1』-(偶氮二羰基)二哌啶(ADDP)/三丁基膦用於完成該轉化，後者為優選的氧化還原系統。產物通過溶劑蒸發和溶解粗產物於乙酸乙酯/水中而分離。將混合物經固相萃取柱用乙酸乙酯洗脫，然後可利用標準技術如矽膠色譜純化。
作為替代選擇，可以使用穩定化的三烷基磷烷(phosphoranes)如(氰基亞甲基)三丁基磷烷(CMBP)或(氰基-亞甲基)三甲基磷烷(CMMP)(如Tsunoda，T.等人，Tetrahedron Lett.(1996)37，2459-2462所述製備)與式(6)的醇製備式(11)的四氫咔唑(參見Bobrun，A.and Casi，G.，TetrahedronLett.(2002)43，2187-2190)。
方案IV的步驟C又提供了獲得式(14)四氫咔唑的另外途徑，其中用如式(13)中連接於苯肼的苄基構建四氫咔唑。N-苄基-N-苯基肼如Audrieth，L.F.，Weisiger，J.R.，Carter，H.E.，J.Org.Chem.(1941)6，417-420所述獲得。將式(3)的酮和式(13)的N-苄基-N-苯基肼在乙酸中於50℃至回流溫度攪拌約1至24小時。產物通過用水稀釋並用苯或甲苯萃取而分離，然後經重結晶而純化。
方案V
在方案V中，將式(15)的甲氧基四氫咔唑脫甲基，得到式(16)的酚。甲氧基芳基向酚的轉化通過多種本領域已知的方法完成。這些包括含乙硫醇鈉的DMF、含48％HBr的乙酸、高溫純吡啶鹽酸鹽和三溴化硼。甲氧基四氫咔唑優選用三溴化硼在惰性溶劑如二氯甲烷中、在0至40℃的溫度處理約4至48小時。產物通過在甲醇存在下進行溶劑蒸發而分離，並可通過矽膠色譜而純化。
在方案V的步驟B中，使用烷基滷化物和無機鹼如碳酸鉀、碳酸銫或氫化鈉、在惰性溶劑如丙酮、二甲基甲醯胺或N-甲基吡咯烷酮中，將式(16)的酚烷基化，得到式(17)的四氫咔唑。優選的條件使用碳酸銫或氫化鈉、於二甲基甲醯胺中、在室溫至50℃進行約4至48小時。產物通過萃取技術分離並可通過矽膠色譜純化。
方案VI
在方案VI中，將式(18)的甲氧基苄基四氫咔唑轉化為式(19)的酚，該反應可通過多種本領域技術人員熟知的方法完成，如方案V的步驟A所述。優選的方法是用三溴化硼在惰性溶劑如二氯甲烷中、在0至40℃的溫度處理約4至48小時。產物通過甲醇存在下的溶劑蒸發或通過常規萃取技術、使用水和有機溶劑而分離。純化通過矽膠色譜完成。
方案VII
在方案VII中，利用本領域技術人員熟知的化學法，將硝基進一步加工為胺或胺衍生物。因此，在方案VII的步驟A中，將式(20)的硝基苄基四氫咔唑還原為式(21)的苯胺。存在多種還原芳基硝基的方法，其為本領域技術人員所熟知並可見於R.C.Larock在「Comprehensive OrganicTransformations」，VCH Publishers，1989，p.412-415中的文章中。優選的方法是用氯化錫(II)二水合物在質子溶劑如乙醇和濃鹽酸的混合物中、在40至80℃的溫度還原約30分鐘至24小時。產物通過用氫氧化鈉使反應物呈鹼性並用有機溶劑萃取而分離。產物經矽膠色譜純化。
作為替代選擇，進行還原的另一優選方法是使用披硫化鉑5％wt的碳在溶劑如甲醇或乙醇中、於Parr振蕩器、55psi氫下進行。氫化在室溫進行約4至24小時。產物通過本領域技術人員共知的過濾技術分離並通過矽膠色譜純化。
在方案VII的步驟B中，式(21)的苯胺可轉化為其他衍生物如式(22)的磺醯胺。使苯胺與磺醯氯在含有有機鹼如吡啶的惰性溶劑如二氯甲烷或二甲基甲醯胺中反應。反應在0至40℃的溫度進行約4至48小時。產物可通過常規萃取技術分離並經矽膠色譜純化。
在方案VII的步驟C中，將式(21)的苯胺醯化，形成式(23)的醯胺。使苯胺和醯氯在惰性溶劑如二氯甲烷或四氫呋喃中、在有機鹼如三乙胺或二異丙基乙基胺存在下反應。反應在0至40℃的溫度進行約4至48小時。產物可通過常規萃取技術分離並經矽膠色譜純化。
在方案VII的步驟D中，將式(21)的苯胺在還原氨化反應中轉化為式(24)的烷基胺(R5和R6之一或全部代表烷基)。還原氨化方法為本領域技術人員所熟知並可見於R.C.Larock在「Comprehensive OrganicTransformations」，VCH Publishers，1989，p.421-423的文章中。獲得式(24)烷基胺的優選方法是與醛在惰性溶劑如四氫呋喃或二甲基甲醯胺中、在三乙醯氧基硼氫化鈉和乙酸存在下反應。將反應物與所需另外量的試劑在40至100℃加熱4至48小時。產物可通過常規萃取技術分離並經矽膠色譜純化。
作為替代選擇，還原反應可用氰基硼氫化鈉在惰性溶劑如乙腈、二甲基甲醯胺或四氫呋喃中完成。烷基醛如甲醛可以過量使用，以獲得式(24)的二甲基苯胺(R5和R6各自代表甲基)。反應在室溫至溶劑回流溫度進行約4至48小時完成。產物可通過常規萃取技術分離並經矽膠色譜純化。
方案VIII
在方案VIII的步驟A中，將式(25)的腈四氫咔唑用氨基硫脲環化，得到式(26)的氨基噻唑。將腈和氨基硫脲在有機酸如三氟乙酸中、在約40至120℃加熱約4至48小時。將反應混合物傾至稀氫氧化銨中並過濾沉澱，得到產物(26)。作為替代選擇，產物(26)通過標準萃取技術分離，然後可經矽膠色譜純化。
在方案IV的步驟B中，利用亞硝酸異戊酯可將氨基噻唑脫胺，得到式(27)未取代的噻唑衍生物。將氨基噻唑(26)用亞硝酸異戊酯在溶劑如二甲基甲醯胺或N-甲基吡咯烷酮中於環境溫度至100℃處理約0.5至16小時。產物利用標準萃取技術用水和乙酸乙酯分離並可經矽膠色譜純化。
方案IX
在方案IX的步驟A中，將式(25)的腈四氫咔唑轉化為式(28)的伯硫醯胺。將腈用硫代乙醯胺在回流的4N鹽酸二噁烷溶液中處理約4至48小時。將產物混合物用碳酸氫鈉中和並經標準技術如過濾分離產物(28)。
在方案V的步驟B中，使式(28)的伯硫醯胺與其中X代表Cl或Br且R』和R」各自獨立地代表例如H或烷基的α滷代酮反應，生成式(29)的噻唑。將硫醯胺用α滷代酮在溶劑如二甲基甲醯胺、N-甲基吡咯烷酮、四氫呋喃、二噁烷、甲苯、乙醇或異丙醇中、在約50至120℃處理約4至48小時。冷卻後，將反應物與水混合併收集沉澱。作為替代選擇，產物(29)可通過標準萃取技術分離並經矽膠色譜純化。
方案X
在方案X的步驟A中，使例如如方案II-IV所述製備的式(30)的溴四氫咔唑與硼酸酯(boronate ester)如二(頻哪醇)硼烷、膦配體如三環己基膦、鈀催化劑如三(亞苄基丙酮)二鈀和鹼如醋酸鉀反應。使用惰性溶劑如二甲基亞碸或二甲基甲醯胺並將反應物在氬或氮氣下、在50至120℃加熱4至48小時。將反應物傾至水中並利用標準萃取技術分離。然後，產物可通過經中性氧化鋁洗脫而純化，得到式(31)的硼酸酯。
在方案X的步驟B中，利用Suzuki反應，使用鈀催化劑如四(三苯基膦)鈀(0)和鹼如2M碳酸鉀，將式(31)的硼酸酯與未取代或取代的滷代雜芳基(Hetero-X，其中X代表滷素且Hetero代表未取代或取代的雜芳基)偶聯。使用惰性溶劑如四氫呋喃、二噁烷、二甲基甲醯胺、N-甲基吡咯烷酮或乙二醇二甲醚，優選二噁烷。將反應物在氬或氮惰性氣氛下於50至120℃加熱4至48小時。將反應物傾至水中並利用標準萃取技術分離。然後，產物可經矽膠色譜純化，得到式(32)的雜環取代的四氫咔唑。
方案XI
在方案XI的步驟A中，使其中Q代表O、S、N或CH＝CH的式(33)氨基滷代雜芳基與己烷-2，5-二酮以及碳酸鈉和乙酸在惰性溶劑如苯中反應。按照類似於Macor，J.E.，Chenard，B.L.，Post，R.J.J.Org.Chem.(1994)59，7496-7498所述工藝，將反應物用迪安-斯達克榻分水器回流4至48小時。將反應物濃縮，然後產物可經矽膠色譜純化，得到式(34)的氨基保護的雜芳基。
在方案XI的步驟B中，利用基本上如以上方案X的步驟B所述條件，將式(34)的保護的氨基雜芳基與式(31)的硼酸酯偶聯，得到式(35)的雜芳基取代的四氫咔唑。用於該反應的優選的鈀催化劑是二氯[1，1′-二(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物並使用2M碳酸鈉的二噁烷溶液。
在方案XI的步驟C中，將式(35)的保護的雜芳基脫保護，利用約十倍過量的鹽酸羥胺、三乙胺和1摩爾氫氧化鈉在回流乙醇中進行約4至48小時。利用標準萃取技術分離產物，得到式(36)的氨基雜芳基取代的四氫咔唑。
方案XII
在方案XII的步驟A中，將其中Z＝OBn的式(37)的取代的四氫咔唑脫保護，得到式(38)的胺取代的四氫咔唑。除去羧基苄基(CBZ)的常用脫保護條件為本領域技術人員所熟知並可見於T.W.Green和P.G.M.Wuts在「有機合成中的保護基團(Protective Groups in Organic Synthesis)」，John Wiley & Sons，Inc.，1991，335-338中的文章中。優選的條件使用乙醇和四氫呋喃的溶劑混合物、室溫、5％或10％披鈀碳、在正常大氣壓的氫氣下。
在方案XII的步驟B中，將其中醯胺被保護為氨基甲酸叔丁基酯(BOC)(Z＝O-叔丁基)的式(37)的四氫咔唑脫保護，得到式(38)的胺取代的四氫咔唑。除去BOC基團的常用脫保護條件為本領域技術人員所熟知並可見於T.W.Green和P.G.M.Wuts在「有機合成中的保護基團」，JohnWiley & Sons，Inc.，1991，328-330中的文章中。優選的條件使用4N氯化氫的二噁烷溶液、在約0℃至室溫的溫度進行約10分鐘至24小時。產物可作為HCl鹽經過濾分離。
在方案XII的步驟C中，將其中Z＝Me的式(37)的四氫咔唑水解為式(38)的氨基取代的四氫咔唑的馬來酸鹽。將醯胺用片狀氫氧化鉀在2-甲氧基乙醇和水的混合物中處理並在90℃加熱至回流溫度約4至48小時。在真空中除去溶劑並用水和有機溶劑萃取以分離產物。產物經馬來酸重結晶而純化，得到式(38)化合物，為馬來酸鹽。
在方案XII的步驟D中，將式(38)的四氫咔唑胺通過與磺醯滷或氨磺醯氯反應而磺醯化，得到式(39)的磺醯胺。將游離胺或胺鹽與過量的胺鹼如三乙胺或二異丙基乙基胺合併在惰性溶劑如四氫呋喃、二氯乙烷或二氯甲烷中。將反應物在0至40℃的溫度攪拌1至24小時。產物經常規萃取技術分離並可經重結晶或經矽膠色譜純化。
在方案XII的步驟E中，將式(38)的四氫咔唑胺用結構(42)的化合物醯化(其中X代表滷素，RY代表例如R3a或OPh-p-NO2)，得到式(40)的醯胺。本領域技術人員公知，存在極大數量的用羧酸醯化胺的方法。這類方法為本領域技術人員所熟知並可見於R.C.Larock在「Comprehensive OrganicTransformations」，VCH Publishers，1989，p.972-976的文章中。獲得式(40)四氫咔唑的優選方法是用醯氯(X代表例如Cl)、氨基甲醯氯或氯甲酸酯、利用本領域技術人員熟知的條件進行醯化。將游離胺或胺鹽與過量的有機胺鹼如三乙胺或二異丙基乙基胺合併在惰性溶劑如四氫呋喃、二氯乙烷或二氯甲烷、N-甲基吡咯烷酮或N，N-二甲基甲醯胺或其混合物中。將反應物在0至40℃的溫度攪拌1至72小時。產物經常規萃取技術分離並可經重結晶或經矽膠色譜純化。
在方案XII的步驟F中，使其中RY代表O-Ph-p-NO2(對硝基苯氧基)的式(39)的四氫咔唑胺與烷基胺或N，O-二烷基羥胺反應，得到式(41)的四氫咔唑脲。將氨基甲酸對硝基苯基酯與過量的有機胺如三乙胺或二異丙基乙基胺合併在惰性非質子溶劑如四氫呋喃、二噁烷、N-甲基吡咯烷酮或N，N-二甲基甲醯胺中。優選的方法使用四氫呋喃和N，O-二甲基羥胺的甲基胺的鹽酸鹽在0至60℃進行約1至48小時。產物經常規萃取技術分離並可經重結晶和經矽膠色譜純化。
方案XIII
在方案XIII的步驟A中，將式(30)的溴四氫咔唑轉化為式(25)的腈四氫咔唑。將溴化物用1至5當量的氰化銅(I)和1至5當量的碘化銅(I)在70-150℃的溫度、在惰性溶劑如1-甲基-2-吡咯烷酮處理約1至5天。利用萃取技術以乙酸乙酯和水和乙二胺分離產物，除去銅鹽。然後產物可經矽膠色譜純化。
在方案XIII的步驟B中，將式(25)的腈四氫咔唑通過格氏反應、用甲基滷化鎂轉化為式(43)的乙醯基四氫咔唑。將腈優選用甲基溴化鎂在惰性溶劑如乙醚和四氫呋喃中處理。優選的方法使用四氫呋喃、在0至50℃的溫度進行約1至24小時。將反應用醇如甲醇淬滅，除去固體，濃縮濾液。產物用回流的1N鹽酸/四氫呋喃處理約1至5小時。加入水不混溶性有機溶劑如乙酸乙酯，棄去所得沉澱，留下產物。
在方案XIII的步驟C中，將式(43)的乙醯基四氫咔唑轉化為式(44)的異噁唑取代的四氫咔唑。將乙醯基用二甲基甲醯胺縮二甲醇在80至100℃的溫度處理約12小時至4天。濃縮後，將中間體烯胺用鹽酸羥胺在惰性溶劑如二噁烷或THF在室溫至50℃的溫度處理約30分鐘至12小時。加入水，過濾收集式(44)的異噁唑。
方案XIV
在方案XIV的步驟A中，將式(30)的溴四氫咔唑羰基化，得到式(45)的酯取代的四氫咔唑。將溴化物與醋酸鹽如醋酸鈉在醇溶劑如甲醇中、在鈀催化劑存在下、在一氧化碳氣氛下合併。優選的方法使用二氯[1，1』-二(二苯基-膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物、在Parr反應器上且反應容器盛有55psi一氧化碳、在50至100℃的溫度進行約4至48小時。產物可經矽膠色譜直接分離。
在方案XIV的步驟B中，將式(45)的酯取代的四氫咔唑水解為式(46)的酸。本領域技術人員公知酯水解是常規的有機轉化且存在眾多完成該反應的方法，如各種無機鹼水溶液。甲基酯水解的具體方法可見於T.W.Green和P.G.M.Nuts，「有機化學中的保護基團(Protective Groups inOrganic Chemistry)」John Wiley & Sons，Inc.，第2版，1991，p.231-234。優選的方法使用過量的氫氧化鋰、在水、質子溶劑如甲醇和惰性水混溶性有機溶劑如四氫呋喃的溶劑混合物中進行。反應在0℃至溶劑回流溫度進行約1至48小時。產物經常規萃取技術分離，如酸化繼之以有機溶劑萃取。
在方案XIV的步驟C中，利用Curtius重排將式(46)的酸取代的四氫咔唑轉化為式(47)的氨基甲酸酯。Curtius重排為本領域技術人員所熟知且存在眾多完成該轉化的方案，如可見於R.C.Larock在「ComprehensiveOrganic Transformations」，VCH Publishers，1989，p.431-432中的文章中。優選的方法使用疊氮化物轉移試劑如疊氮化磷酸二苯酯和有機胺鹼如三乙胺在惰性芳族溶劑如苯或甲苯中進行。反應在50℃至溶劑回流溫度進行約4至24小時，以完成向異氰酸酯的重排。使異氰酸酯原位與醇如甲醇或乙醇反應，得到式(47)的化合物。分離產物並利用常規萃取技術和矽膠色譜純化。
方案XV
在方案XV的步驟A中，將式(25)的腈四氫咔唑還原為式(48)的甲醯基四氫咔唑。將腈用鋁-鎳催化劑在90至95％甲酸中、在室溫至回流溫度處理約2至48小時。加入質子溶劑如甲醇、繼而過濾並濃縮濾液以分離產物。將殘餘物進一步通過常規萃取技術如用碳酸氫鈉溶液和乙酸乙酯純化，得到式(48)的醛。
在方案XV的步驟B中，將式(48)的甲醯基四氫咔唑通過加入羥胺或烷氧基胺轉化為式(49)的肟四氫咔唑。將醛用羥胺或甲氧基胺的鹽酸鹽在吡啶中、在0至100℃處理約2至48小時。利用本領域技術人員已知的常規分離和萃取技術分離產物。
作為替代選擇，步驟B在無機鹼如氫氧化鈉或氫氧化鉀存在下完成。將式(48)的醛用羥胺或烷氧基胺和氫氧化鈉在質子溶劑如含水甲醇或乙醇、優選含水乙醇中、在約室溫至50℃處理約2至48小時。產物經常規萃取技術分離並經矽膠純化。
在方案XV的步驟C中，將其中Y＝H的式(49)的肟氧化為腈氧化物，然後與親偶極炔如丙炔原位進行1，3-偶極環加成，得到式(50)的異噁唑四氫咔唑。本領域技術人員公知存在多種用於完成肟向腈氧化物轉化的試劑。這類試劑包括氯、N-氯琥珀醯亞胺、N-溴琥珀醯亞胺、亞硝醯氯或次氯酸鈉。優選的方法使用丙炔氣體在溶劑如二氯甲烷中的溶液，例如次氯酸鈉或漂白粉溶液。反應優選在密閉試管中於-30至50℃、優選23℃進行約1至48小時。產物可通過常規技術如萃取和矽膠色譜分離和純化。
在方案XV的步驟D中，將式(48)的甲醯基四氫咔唑經由脫氧-氟化作用、利用親核氟化試劑轉化為式(51)的二氟甲基四氫咔唑。本領域技術人員公知二烷基氨基三氟化硫試劑如二乙基氨基三氟化硫(DAST)或[二(2-甲氧基乙基)氨基]三氟化硫(Deoxofluor)常規用於將氟引入有機分子中。優選的條件使用5至25當量的Deoxofluor、在非質子滷化溶劑如二氯乙烷、但優選二氯甲烷中、在0至80℃的溫度進行1至48小時。產物可通過常規技術如無機鹼中和並萃取、繼而矽膠色譜分離和純化。
方案XVI
方案XVI描述了其中R1的官能化發生於吲哚氮被X-CH2R4烷基化之前的合成法。在步驟A中，利用基本上如方案XIII的步驟A所述條件，將其中R1＝Br的式(6)化合物轉化為式(52)的腈四氫咔唑。
在方案XVI的步驟B中，利用基本上如方案XV的步驟A所述的條件，將式(52)的腈還原為式(53)的甲醯基四氫咔唑。
在方案XVI的步驟C中，利用基本上如方案XV的步驟B所述條件、通過添加甲氧基胺將式(53)的甲醯基四氫咔唑轉化，得到式(54)的甲肟四氫咔唑。
在方案XVI的步驟D中，利用如方案III所述製備的烷基化劑並利用基本上如方案IV的步驟A所述的烷基化條件或者作為替代選擇利用如方案IV的步驟B所述的Mitsunobu條件，將式(54)的甲肟四氫咔唑烷基化，得到式(55)的四氫咔唑。
方案XVII
方案XVII描述了其中Fisher-吲哚反應在胺官能團具有保護基時進行的合成法，使合成順序具有多樣性。
在方案XVII的步驟A中，使式(4)的苯肼鹽(例如鹽酸鹽)與其中Z＝OBn的式(3)的環酮進行Fischer吲哚反應，得到式(5)的四氫咔唑。使肼和酮在乙酸中反應，並在約60至110℃加熱約4至48小時。在減壓下除去乙酸並在惰性溶劑、優選二氯甲烷中研磨以分離產物。過濾後，濃縮濾液，所得物質利用標準技術如重結晶或矽膠色譜純化。
在方案XVII的步驟B中，利用基本上如方案XII的步驟A所述條件，將式(56)的氨基甲酸苄基酯四氫咔唑脫保護，得到式(57)的胺四氫咔唑。
作為替代選擇，在方案XVII的步驟C中，直接由式(4)的取代苯肼與其中Z＝O-叔丁基的式(3)的酮之間的Fisher-吲哚反應，獲得式(57)的胺四氫咔唑。在酸性反應條件下裂除叔丁氧羰基(BOC)保護基。優選的方法使用1體積的濃鹽酸和2體積的水在50℃至溶劑回流溫度進行約4至48小時。產物可經冷卻反應物並收集沉澱而分離。用無機鹼水溶液如碳酸鉀或碳酸鈉洗滌固體沉澱，然後相繼與氯仿、乙醇、然後氯仿共沸。
在又一方法中，應用BOC保護基，使其中Z＝O-叔丁基的式(3)的酮與式(5)的碘苯胺反應，如前方案II的步驟B所述。然後在隨後反應中除去BOC基團，如前方案XII的步驟B所述。
在方案XVII的步驟D中，基本上如方案XII的步驟E所述、用醯氯、氨基甲醯氯或氯甲酸酯、利用本領域技術人員熟知的、使得在相對吲哚氮更具親核性的胺上進行選擇性反應的條件，將式(57)的胺四氫咔唑醯化。優選的條件使用惰性溶劑如二甲基甲醯胺或DMSO和有機鹼如二異丙基乙基胺或三乙胺，將反應物在0至50℃的溫度加熱5分鐘至1小時。
在方案XVII的步驟E中，將式(58)的四氫咔唑用方案IV的步驟A或B中所述的烷基化劑烷基化，得到式(14)的四氫咔唑。
生物活性的測定 為證實本發明化合物對雄激素受體具有親和性並由此具有調節雄激素受體活性的能力，首先進行了核激素受體結合試驗。用於結合試驗的所有配體、放射性配體、溶劑和試劑易於由商業來源獲得，或可由本領域普通技術人員容易地合成。
類固醇激素核受體結合試驗 使用過量表達人GR(糖皮質激素受體)、AR(雄激素受體)、MR(鹽皮質激素受體)或PR(孕酮受體)的293細胞的細胞裂解物進行競爭性結合試驗，以測定供試化合物的Ki值。簡言之，競爭性結合試驗在緩衝液中進行，所述緩衝液含有20mM Hepes，pH 7.6、0.2mM EDTA、75mM NaCl、1.5mM MgCl2、20％甘油、20mM鉬酸鈉、0.2mM DTT、20μg/ml抑酶肽和20μg/ml亮抑酶肽，所述試驗使用0.3nM3H-地塞米松進行GR結合、0.36nM3H-甲基三烯炔諾酮進行AR結合、0.25nM3H-醛固酮進行MR結合或0.29nM 3H-甲基三烯炔諾酮進行PR結合，每孔20μg293-GR裂解物、22μg293-AR裂解物、20μg 293-MR裂解物或40μg293-PR裂解物。加入約0.01nM至10μM不同濃度的競爭性化合物。非特異性結合在以下物質存在下測定對於GR結合為500nM地塞米松，對於MR結合為500nM醛固酮，或對於AR和PR結合為500nM甲基三烯炔諾酮。將結合反應物(140μl)在4℃溫育過夜，然後向每個反應液加入70μl冷炭-葡聚糖緩衝液(每50mL試驗緩衝液含有0.75g碳和0.25g葡聚糖)。將各板在定軌振蕩器上於4℃混合8分鐘。然後將板於3,000rpm、4℃離心10分鐘。將混合物的120μl等分試樣轉移至另一96-孔板並向各孔加入175μl WallacOptiphase「Hisafe 3」閃爍液。將各板密封，在定軌振蕩器上劇烈振蕩。孵育2小時後，在Wallac Microbeta計數器上讀取各板。數據用於計算IC50和10μM時的％抑制。通過飽和結合測定就以下各物質而言的Kd對於GR結合的3H-地塞米松、對於AR結合的3H-甲基三烯炔諾酮、對於MR結合的H-醛固酮或對於PR結合的3H-甲基三烯炔諾酮。利用Cheng-Prusoff方程將供試化合物的IC50值轉化為Ki，通過飽和結合試驗測定Kd。
類似於以上所述那些類固醇激素核受體的結合試驗方案可容易地由本領域普通技術人員設計。本發明代表性化合物在AR結合試驗中的Ki≤5μM。此外，本發明示例性化合物在AR結合試驗中的Ki≤1.5μM。更具體而言，本發明優選化合物在AR結合試驗中的Ki≤1μM。甚至更具體而言，本發明更優選的化合物在AR結合試驗中的Ki≤500nM，仍然更具體而言，本發明尤其優選的化合物在AR結合試驗中的Ki≤100nM。表I(見下)提供本發明實例化合物代表性樣品的AR結合數據。此外，本發明最特別優選的化合物以相對於其他類固醇激素受體(MR、GR和PR)更高的親和性選擇性地結合於雄激素受體。
為證實本發明化合物調節雄激素受體活性(即激動、部分激動、部分拮抗或拮抗)的能力，進行了生物學試驗，其檢測用核受體蛋白和激素響應元件-報導基因構建體瞬時轉染的細胞中目標基因表達的調節。在功能性試驗中應用的溶劑、試劑和配體易於由商業途徑獲得，或可由本領域普通技術人員合成。
類固醇激素核受體調節的功能性試驗 將人胚胎腎hEK293細胞用FuGENETM共轉染。簡言之，將含有兩個拷貝probasin ARE(雄激素響應元件5』GGTTCTTGGAGTACT3』)(SEQID NO1)和螢光素酶報導基因cDNA上遊TK啟動子的報導基因質粒用組成型表達人雄激素受體(AR)、使用病毒CMV啟動子的制粒轉染。將含有兩個拷貝GRE(糖皮質激素響應元件5』TGTACAGGATGTTCT3)(SEQID NO2)和螢光素酶報導基因cDNA上遊TK啟動子的報導基因質粒用組成型表達人糖皮質激素受體(GR)、人鹽皮質激素受體(MR)或人孕酮受體(PR)、使用病毒CMV啟動子的制粒轉染。使細胞在T150cm2燒瓶中含有5％經炭吸附胎牛血清(FBS)的DMEM培養基中轉染。孵育過夜後，將經轉染的細胞用胰蛋白酶消化，接種於96孔皿中含5％炭吸附FBS的DMEM培養基中，孵育4小時，然後暴露於約0.01nM至10μMm各種濃度的供試化合物。在拮抗劑試驗中，向介質加入各種受體的低濃度激動劑(對於GR為0.25nM地塞米松，對於AR為0.3nM甲基三烯炔諾酮，對於PR為0.05nM普美孕酮，對於MR為0.05nM醛固酮)。與化合物孵育24小時後，裂解細胞並測定螢光素酶活性。
將數據代入四參數對數曲線擬合，以確定EC50值。相對於用以下參考激動劑獲得的最大刺激確定功效百分比(具有飽和最大響應的化合物)或最大刺激百分比(具有最大響應、不飽和的化合物)對於AR試驗為100nM甲基三烯炔諾酮，對於PR試驗為30nM普美孕酮，對於MR試驗為30nM醛固酮，對於GR試驗為100nM地塞米松。使用拮抗劑模式試驗可類似地確定IC50值。在拮抗劑模式中，通過比較在低濃度激動劑(對於GR為0.25nM地塞米松，對於AR為0.3nM甲基三烯炔諾酮，對於PR為0.05nM普美孕酮，對於MR為0.05nM醛固酮)存在下供試化合物活性與供試化合物不存在時由相同低濃度的激動劑產生的響應，確定抑制百分比。
C2C12AR/ARE報導基因試驗 作為肌肉組織中激動劑活性的指示，進行了C2C12AR/ARE報導基因試驗。簡言之，將小鼠成肌細胞C2C12細胞用FuGENETM共轉染。將含有GRE/ARE(糖皮質激素響應元件/雄激素響應元件5』TGTACAGGATGTTCT3)(SEQ ID NO3))和螢光素酶報導基因cDNA上遊TK啟動子的報導基因質粒用組成型表達人雄激素受體(AR)、使用病毒CMV啟動子的質粒轉染。使細胞在T150cm2燒瓶中含有4％或10％胎牛血清(FBS)的DMEM培養基中轉染。孵育5小時後，將經轉染的細胞用胰蛋白酶消化，接種於96孔皿中含10％炭吸附FBS的DMEM培養基中，孵育2小時，然後暴露於約0.01nM至10μM各種濃度的供試化合物。與化合物孵育48小時後，將細胞裂解並利用標準技術測定螢光素酶活性。將數據代入4參數對數方程，以確定EC50值。相對於用10nM甲基三烯炔諾酮獲得的最大刺激確定功效％。
類似於以上所述核激素受體調節的功能性試驗可容易地由本領域普通技術人員設計。表1(見下)提供本發明實例化合物的代表性樣品在C2C12AR/ARE報導基因試驗中的EC50平均值和功效數據。
功效和選擇性的體內小鼠模型 按照批准的方案(Taconic，NY)將雄性ICR小鼠(8周齡)去勢並使其萎縮8周。還準備了年齡匹配的假手術小鼠(假手術小鼠是暴露於與去勢動物相同的手術操作但其精巢未摘除的動物)。將動物供養於反向12小時明/暗循環(黑暗10:00/22:00)的溫控房間中(24℃)，水和食物隨意獲取。
為了證實體內功效，將本發明化合物每日通過管飼或皮下注射施用於去勢的十六周齡小鼠(體重約48-50g)。利用常規溶媒將供試化合物施用於動物。例如，對於口服給藥，可以使用含1％羧甲基纖維素鈉(CMC)+0.25％Tween 80的無菌H2O用於口服製劑，6％乙醇(EtOH)+94％cyclodexitrane(CDX)可用於皮下注射。用Testosteron Enanthate(TE)(10mg/kg/d)處理的去勢小鼠用作治療陽性對照，而僅用溶媒處理的去勢小鼠用作治療陰性對照。此外，僅用溶媒處理的假手術小鼠用作手術方法的對照。
在兩周時間段內，用例如0.3、1、3、10或30mg/kg/天的本發明化合物經口服或經皮下對試驗動物給藥。兩周治療後，作為活性指示，確定試驗組的提肌溼重，並與去勢、僅溶媒對照組的重量比較。然後如下計算功效百分比 (治療組的溼重/對照組的溼重)×100 作為組織選擇活性的指示，類似地比較試驗動物精囊的溼重與去勢、僅溶媒組的精囊重量。此外，藥物治療組前列腺的溼重與由去勢、僅溶媒組摘除的前列腺溼重的比值也可用作組織選擇性活性的指示。
表II(見下)提供本發明實例化合物選擇樣品的功效百分比數據。類似於以上所述功效和選擇性動物模型可容易地由本領域普通技術人員設計並實施，例如Eisenberg and Gilbert，J Pharmacol Exp Ther.1950，99(1)，38-44提供了備選的大鼠模型可用於顯示體內功效。
與骨丟失相關障礙的體內模型 為證實本發明化合物具有治療與骨丟失相關障礙如骨質疏鬆或骨量減少的能力，可以應用本領域熟知的動物模型。這類模型的實例在Y.L.Ma等人，Japanese Journal OF Bone and Mineral Metabolism 23(Suppl.)62-68(2005)；Y.L.Ma等人，Endocrinology 1442008-2015(2003)；和K.Hanada等人，Biol.Pharm.Bull.26(11)1563-1569(2003)中提供。本領域普通技術人員將領會以上參考文獻中所述的動物模型方案可容易地調整以與本發明的化合物和方法聯合使用。
以下製備和實施例進一步闡釋本發明並代表了式I化合物、包括任意新化合物的典型合成法，如以上概括所述。試劑和原料易於為本領域普通技術人員獲得或可容易地合成。在化合物的合成沒有明確示出的情況下，則提供描述化合物合成工藝的在先實施例或代表性方案的指示。應該理解製備和實施例以示例而非限制方式示出，本領域普通技術人員可進行各種改變。
質子核磁共振(1H NMR)光譜用Bruker Avance 300MHz或Varian400MHz光譜儀收集。化學位移值以相對於內標TMS的百萬分之一(ppm)份δ值報告(bs＝寬單峰；s＝單峰；d＝雙峰；t＝三重峰；q＝五重峰)。熔點於MelTemp II，model 1001或Mettler Toledo FP62熔點儀上測定且未經校正。所有產物均為R和S立體異構體的外消旋混合物，除非另外指出。
HPLC分析利用以下方法進行Agilent Zorbax SB-C18，5μm柱(4.6×250mm)。方法A洗脫系統由乙腈∶0.03M磷酸鹽緩衝液(80∶20)的10分鐘的恆溶劑洗脫組成。流速為1.5mL/min。UV檢測在220nm進行。方法B洗脫系統由乙腈∶0.03M磷酸鹽緩衝液(60∶40)的10分鐘恆溶劑洗脫組成。流速為1.5mL/min。紫外檢測在220nm進行。如果沒有另外指出，HPLC分析使用方法A進行。
質譜分析用以下之一進行1)ThermoFinnigen aQa，利用電噴霧離子化(ESI)；2)Applied Biosystems API150EX質譜儀，利用大氣壓化學離子化(APCI)；3)Micromass ZMD，裝備有Waters自動進樣器並使用電噴霧離子化(ES)；4)LCMS-APCI分析在Hewlett Packard LC/MSD上使用AgilentEclipse Zorbax SDB-C8，5.0μm柱(4.6×150mm)進行，流速為0.5mL/min。紫外檢測在254nm進行。利用以下方法之一。方法C70∶30甲醇/10mM醋酸銨緩衝液(pH 5.5)的10分鐘恆溶劑洗脫。方法D80∶20甲醇/10mM醋酸銨緩衝液(pH 5.5)的10分鐘恆溶劑洗脫。方法E梯度洗脫，始於80∶20甲醇/1mM醋酸銨緩衝液(pH 6.0)達1分鐘，歷經2分鐘以均一梯度調整溶劑組成至100％甲醇，然後保持100％甲醇達7分鐘；或5)Agilent1100系列LCMSD，大氣壓電噴霧(APES)，使用以下方法Waters ExterraC18，3.5μm柱(2.1×50mm)。洗脫系統由溶劑A＝0.2％甲酸銨水溶液，B＝含甲酸銨的50％甲醇/乙腈溶液組成。洗脫系統為梯度洗脫，始於5％B達1分鐘，歷經6分鐘以均一梯度調整溶劑組成至100％B，然後保持100％B達1分鐘。流速為1.0mL/min。紫外檢測在214nm進行。
製備和實施例 製備1 N-(4-羥基環己基)異丁醯胺
在機械攪拌的12升燒瓶中，歷經3小時向含反-4-氨基環己醇(210.0g，1.82mol)和三乙胺(279mL，2.01mol)的四氫呋喃(4500mL)中滴加異丁酸酐(317.3g，2.01mol)。在23-30℃、氮氣下攪拌18小時。用水(4500mL)稀釋並用乙醚(2×2000mL)洗滌以除去副產物。加入氯化鈉(700g)，用CH2Cl2(5000mL)洗滌以萃取出產物。除去有機部分，過濾水相，收集沉澱的固體。將濾液加至水中，用另外的CH2Cl2(2×2500mL)萃取。乾燥有機部分(Na2SO4)、過濾、在真空中濃縮，與所收集的沉澱合併，得到219.5g白色固體(65％)。MS(ES)m/z 186(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)δ5.23(br s，1H，NH)，3.75(m，1H)，3.59(m，1H)，2.27(七重峰，1H)，2.00(m，5H)，1.40(m，2H)，1.22(m，2H)，1.07(d，6H)。
製備2 N-(4-氧代環己基)異丁醯胺
將氯鉻酸吡啶鎓(561.6g，2.61mol)加至含N-(4-羥基環己基)異丁醯胺(321.8g，1.74mol)的CH2Cl2(8000mL)並在氮氣下機械攪拌24小時。加入矽膠(2000g)、攪拌、通過二氧化矽墊過濾(6000g)。用CH2Cl2、繼而用75-100％EtOAc/己烷洗脫，得到210g淡棕色固體(66％)。MS(ES)m/z 184(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)
5.54(br s，NH)，4.27(七重峰，1H)，2.20-2.60(m，7H)，1.78(m，2H)，1.15(d，6H)。
製備3 N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺
方法1將p-氰基苯基鹽酸肼(38.00g，224mmol)和N-(4-氧代-環己基)異丁醯胺(41.06g，224mmol)合併於無水乙醇(500mL)中並在70-85℃、氮氣下攪拌48-64小時。在真空中濃縮並在CH2Cl2/i-PrOH和水之間分配。乾燥有機部分(Na2SO4)、過濾並蒸發，得到55.7g(88％)黃色固體。MS(ES)m/z 282(M+1)。作為替代選擇，標題化合物可以如下所述製備 方法2將4-氰基苯基鹽酸肼(51.95g，306.3mmol)和N-(4-氧代-環己基)-異丁醯胺(56.13g，306.3mmol)合併在水(100mL)和濃鹽酸(140mL)中。在90℃劇烈攪拌粘稠懸液5.5小時。使其冷卻至室溫，然後冷卻至5℃，繼續攪拌30分鐘。過濾，在45℃、中央低真空(house vacuum)乾燥18小時。將所得固體粉末懸浮於水/THF(200mL/100mL)並用1N NaOH(10mL)調至鹼性。攪拌2小時，過濾，用水隨意洗滌。在中央低真空、45℃乾燥3天，得到71.97g(83％)淡棕色粉末。MS(ES)m/z 282(M+1)，280(M-1)；1HNMR(DMSO-d6)δ11.39(s，1H)，7.88(m，2H)，7.42(d，1H，J＝8.4Hz)，7.37(dd，1H，J＝8.4，1.3Hz)，4.06(m，1H)，2.96(dd，1H，J＝15.4，5.3Hz)，2.83(m，2H)，2.50(m，1H)，2.41(m，1H)，1.98(m，1H)，1.81(m，1H)，1.04(d，3H，J＝2.2Hz)，1.02(d，3H，J＝1.8Hz)。
製備4 (N-(9-苄基-6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺
將p-溴苯基鹽酸肼(10.0g，44.7mmol)和N-(4-氧代-環己基)異丁醯胺(8.20g，44.7mmol)合併在飽和HCl乙醇溶液(180mL)中並在回流、氮氣下加熱18小時。在真空中濃縮除去約1/2EtOH，然後用水(300mL)洗脫。收集所得固體，淤漿於EtOAc並再次收集，得到11.5g(77％)米色固體。MS(ES)335(M+1)，337(M+H+2)。1H NMR(DMSO-d6)δ10.93(s，1H，NH)，7.80(d，1H，J＝7.9Hz)，7.48(s，1H)，7.19(d，1H，J＝8.8Hz)，7.07(d，1H，J＝8.4Hz)，4.00(m，1H)，2.86(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.77(m，2H)，2.46-2.32(m，2H)，1.93(m，1H)，1.75(m，1H)，0.99(d，6H，J＝6.6Hz)。
製備4a N-(6-氟-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺
將p-氟苯基鹽酸肼(5.00g，30.7mmol)和N-(4-氧代-環己基)異丁醯胺(5.64g，30.7mmol)合併在HCl的乙醇溶液(125mL)中並在回流、氮氣下加熱18小時。在真空中濃縮反應物，除去大部分EtOH，用水稀釋並用EtOAc萃取。用水和鹽水洗滌EtOAc萃取液，經Na2SO4乾燥，蒸發，得到7.1g(56％)米色固體。MS(ES)m/z 275(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)δ10.79(s，1H，NH)，7.81(d，1H，J＝7.5Hz)，7.19(dd，1H，J＝8.6，4.6Hz)，7.07(d，1H，J＝10.1Hz)，6.79(dt，1H，J＝8.9，1.8Hz)，4.00(m，1H)，2.85(dd，1H，J＝15.0，5.3Hz)，2.76(m，2H)，2.39(m，2H)，1.93(m，1H)，1.75(m，1H)，0.99(d，6H，J＝6.6Hz)。
實施例1 N-(9-苄基-6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺
將N-(6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(0.25g，0.75mmol)加至氫化鈉(0.036g，0.90mmol 60％礦物油分散體)在DMF(3mL)中的懸液，攪拌15分鐘。加入3-氟苄基溴(0.10mL，0.90mmol)並攪拌18-72小時。用水稀釋，過濾收集沉澱。通過矽膠色譜純化，用20-100％EtOAc/己烷梯度洗脫，得到0.23g白色固體(71％)。MS(ES)m/z 443(M+1)，445(M+H+2)；HPLCRt＝3.71min(97.1％)；m.p.＝177-179℃。
使用適合的四氫咔唑衍生物、基本上如上製備3、4或4a中所述，用適合的苄基滷化物烷基化四氫咔唑、基本上如實施例1所述製備下表中實施例2-60。
實施例61 N-[9-(3-氟苄基)-6-硝基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
將p-硝基苯基鹽酸肼(5.00g，26.4mmol)和N-(4-氧代-環己基)異丁醯胺(5.31g，29.0mmol)在無水EtOH(105mL)中於70℃加熱2小時。過濾收集黃色腙產物並用EtOH漂洗，得到7.2g(86％)。將腙轉移至苯溶液並用對甲苯磺酸(2當量)回流處理18小時，得到四氫咔唑。以3-氟苄基溴、使用碳酸銫(1.2eq)作為鹼於23℃烷基化18小時。將反應混合物傾至水中，過濾沉澱。通過矽膠色譜純化產物，用20-80％EtOAc/己烷梯度洗脫，得到標題化合物。MS(ES)m/z 410(M+1)；HPLCRt＝2.60min，(100％)。
實施例62 N-[6-二甲基氨基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
在密封試管中，將N-[6-溴-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例35)(200mg，0.45mmol)、二甲基胺(2.0M四氫呋喃溶液，0.45mL，0.90mmol)、醋酸鈀(5mg，0.002mmol)、叔丁醇鈉(133mg，1.38mmol)和1，2，3，4，5-五苯基-1′-(二叔丁基膦基)二茂鐵配體(60mg，0.008mmol)在甲苯(5mL)中於70℃加熱過夜。冷卻至室溫，用乙酸乙酯/10％碳酸鉀稀釋，濾出紅色懸液。用10％碳酸鉀水溶液(2×)洗滌有機部分，經無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。通過矽膠柱色譜純化殘餘物，用40至100％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到標題化合物(135mg，74％)。MS(ES)m/z 408(M+1)；1HNMR(CD3OD)δ7.25(m，1H)，7.18(d，1H)，7.01(s，1H)，6.96(t，1H)，6.89(d，1H)，6.81(d，1H)，6.65(d，1H)，5.30(s，2H)，4.19(m，1H)，3.08(dd，1H)，2.88(s，6H)，2.77(m，2H)，2.63(m，1H)，2.50(m，1H)，2.12(m，1H)，1.97(m，1H)，1.18(m，6H)。
實施例63 9-(3-氟苄基)-6-異丁醯基氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲醯胺
將K2CO3(0.26g，1.93mmol)和30％H2O2(2.0mL)分批加至含N-(6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(實施例51)(1.50g，3.85mmol)的DMSO中，同時在冰浴中冷卻。攪拌18小時，加入更多H2O2，如果需要溫至50℃，以促進完全反應。用水稀釋，過濾收集沉澱(1.45g，92％)。用EtOAc重結晶，得到白色固體。MS(ES)m/z 408(M+1)；m.p.＝192-194℃。
實施例64 N-(9-(3-氟苄基)-6-硫代氨基甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺
將N-(6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(實施例51)(1.00g，2.57mmol)和硫代乙醯胺(0.386g，5.14mmol)在回流溫度於4NHCl的二噁烷溶液(30mL)中加熱4小時。使其冷卻，傾至水中並用NaHCO3中和。收集0.98g(90％)沉澱。通過矽膠色譜(25-80％EtOAc/己烷梯度)純化一部分產物，得到黃色固體。MS(ES)m/z 424(M+1)；HPLCRt＝1.90min，(95％)。
實施例65 N-(9-苄基-6-甲氧基-2，3-4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-乙醯胺
將N-苄基-N-(4-甲氧基-苯基)-肼(9.1g，0.04mol)(如Shaw，E.，J.Am.Chem.Soc.(1955)，77，4319-4324所述製備)加至含N-(4-氧代-環己基)-乙醯胺(6.2g，0.04mol)(如Dionne，G.，Hymbe，L.G.，Asselin，A.，McQuillan，J.and Treasureywala，A.M.，J.Med.Chem.，(1986)，29，1452-1457所述製備)的乙酸(60mL)中並回流2小時。傾至水中，用熱苯萃取，在真空中除去溶劑。自苯/環己烷重結晶所得固體，得到10.4g晶體固體。m.p＝184-185℃。自同樣溶劑重結晶，得到分析純的樣品。元素分析計算值C22H24N2O2C，75.83；H，6.94；N，8.04。實測值C，75.71；H，7.01；N，7.89。
製備5 9-苄基-6-甲氧基-2，34，9-四氫-1H-咔唑-3-基胺馬來酸鹽
將N-(9-苄基-6-甲氧基-2，3-4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-乙醯胺(6.5g0.020mol)和氫氧化鉀片狀物(35g，0.62mol)加至2-甲氧基乙醇(130mL)和水(35mL)中。回流18小時。在真空中除去溶劑，用水稀釋所得殘餘物，用熱苯萃取。合併有機部分，用水洗滌，直至洗液呈中性，然後乾燥(MgSO4)，在真空中濃縮，得到6.25g粘稠油。溶解殘餘物於溫甲醇(25mL)中並加入馬來酸(2.5g，0.0215mol)在無水甲醇(7mL)中的溶液。冷卻，過濾，得到6.2g精細的針狀晶體。m.p.＝167-168.5℃.。自母液得到第二份產物0.35g，合併產率80.5％。m.p.＝163-165℃.。自無水甲醇重結晶，得到分析用樣品。元素分析計算值C24H26N2O5C，68.23；H，6.20；N，6.63。實測值C，68.07；H，6.04；N，6.92。
實施例66 N-(9-苄基-6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-丙醯胺
將9-苄基-6-甲氧基-2，34，9-四氫-1H-咔唑-3-基胺馬來酸鹽(100mg，0.237mmol)在氮氣下混懸於二氯甲烷(2mL)中並相繼加入三乙胺(0.099mL，0.711mmol)和丙醯氯(0.021mL，0.237mmol)。在室溫攪拌反應物16小時。在真空中濃縮，通過矽膠色譜直接純化殘餘物，用25％乙酸乙酯/己烷、繼而用60％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到61mg(71％)固體。MS(ES)m/z 363(M+1)，361(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ7.90(d，1H，J＝7.5Hz)，7.33-7.20(m，4H)，7.02(d，2H，J＝7.0Hz)，6.92(d，1H，J＝2.2Hz)，6.67(dd，1H，J＝8.8，2.2Hz)，5.29(s，2H)，3.95(m，1H)，3.72(s，3H)，2.95(dd，1H，J＝15.0，5.3Hz)，2.80(m，1H)，2.79(m，1H)，2.42(m，2H)，2.11(q，2H，J＝7.6Hz)，1.99(m，1H)，1.79(m，1H)，1.02(t，3H，J＝7.5Hz)。
基本上如實施例66所述、分別使用異丁醯氯和環戊烷碳醯氯和9-苄基-6-甲氧基-2，34，9-四氫-1H-咔唑-3-基胺馬來酸鹽，製備實施例67和68。
實施例67 N-(9-苄基-6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
MS(ES)m/z 377(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)δ7.84(d，1H，J＝7.5Hz)，7.32-7.19(m，4H)，7.02(d，2H，J＝7.0Hz)，6.92(d，1H，J＝2.2Hz)，6.67(dd，1H，J＝8.8，2.2Hz)，5.29(s，2H)，4.00(m，1H)，3.75(s，3H)，2.95(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.83-2.63(m，2H)，2.52-2.36(m，2H)，1.97(m，1H)，1.80(m，1H)，1.02(m，6H). 實施例68 環丙烷甲酸(9-苄基-6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-醯胺
MS(ES)m/z 375(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)δ8.21(d，1H，J＝7.5Hz)，7.32-7.20(m，4H)，7.03(d，2H，J＝7.5Hz)，6.92(d，1H，J＝2.2Hz)，6.67(dd，1H，J＝8.8，2.2Hz)，5.29(s，2H)，4.03(m，1H)，3.75(s，3H)，2.96(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.86-2.77(m，1H)，2.74-2.63(m，1H)，2.00(m，1H)，1.80(m，1H)，1.60(m，1H)，0.66(m，4H). 製備6 N-(6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
將乙醯氯(8.5mL，120mmol)加至無水乙醇(30mL)並攪拌1小時。加入4-甲氧基苯基鹽酸肼(1.74g，10mmol)和N-(4-氧代-環己基)-異丁醯胺(製備2)(1.83g，120mmol)並攪拌回流56小時。冷卻至室溫，用乙酸乙酯(100mL)稀釋並用碳酸氫鈉溶液(2×50mL)、鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾並在真空中濃縮。將殘餘物溶解於二氯甲烷並通過矽膠墊，用20％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脫，得到2.32g固體。在乙醚中用少量二氯甲烷研磨固體，過濾，在中央低真空乾燥，得到2.14g(75％)類白色固體。MS(ES)m/z 287(M+1)，285(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ10.52(s，1H)，7.83(d，1H，J＝7.5Hz)，7.13(d，1H，J＝8.8Hz)，6.85(s，1H)，6.64(dd，1H，J＝8.8，2.2Hz)，4.02(m，1H)，3.75(m，3H)，2.90(dd，1H，J＝15.0，5.3Hz)，2.78(m，2H)，2.42(m，2H)，1.96(m，1H)，1.79(m，1H)，1.03(d，6H，J＝6.6Hz)。
製備7 N-(8-甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
將乙醯氯(34.1mL，480mmol)分批加至在冰浴中冷卻的無水乙醇(120mL)中並攪拌2小時。加入4-甲氧基苯基鹽酸肼(1.74g，10mmol)和N-(4-氧代-環己基)-異丁醯胺(製備2)(1.83g，120mmol)，攪拌回流18小時。按照基本上如上製備6所述的工藝，後處理後得到6.0g綠色膠狀物。通過矽膠墊，用二氯甲烷/25％乙酸乙酯洗脫，得到1.29g棕色泡沫。進一步通過快速色譜純化殘餘物，用二氯甲烷、二氯甲烷/25％乙酸乙酯、繼而梯度至二氯甲烷/40％乙酸乙酯洗脫，得到淺褐色固體。在乙醚中用少量己烷研磨，得到421mg(4％)類白色固體。MS(ES)m/z 287(M+1)，285(M-1)；1HNMR(DMSO-d6)δ10.77(s，1H)，7.83(d，1H，J＝7.5Hz)，6.95(d，1H，J＝7.9Hz)，6.86(t，1H，J＝7.7Hz)，6.61(d，1H，J＝7.5Hz)，4.02(m，1H)，3.90(s，3H)，2.89(dd，1H，J＝15.0，5.3Hz)，2.76(m，2H)，2.50-2.34(m，3H)，1.95(m，1H)，1.76(m，1H)，1.03(d，6H，J＝7.0Hz)。
製備8 N-(7-甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
按照基本上如上製備6所述工藝、使用乙醯氯(26mL，360mmol)和無水乙醇(90mL)以及3-甲氧基苯基鹽酸肼(5.24g，30mmol)和N-(4-氧代-環己基)-異丁醯胺(5.50g，30mmol)。完成時，用乙酸乙酯(200mL)稀釋反應物，用0.5N NaOH和碳酸氫鈉溶液洗滌。過濾有機相中的固體、在二氯甲烷中研磨。過濾，得到2.67g(31％)灰色固體。MS(ES)m/z 287(M+1)，285(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ10.52(s，1H)，7.83(d，1H，J＝7.5Hz)，7.21(d，1H，J＝8.4Hz)，6.78(s，1H)，6.60(d，1H，J＝8.4Hz)，4.00(m，1H)，3.75(s，3H)，2.87(dd，1H，J＝14.8，5.1Hz)，2.76(m，2H)，2.48-2.36(m，2H)，2.48-2.36(m，2H)，1.76(m，1H)，1.03(d，6H，J＝6.6Hz)。
實施例69 N-[9-(2-氯-苄基)-6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
在氮氣下將N-(6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備6)(100mg，0.35mmol)溶解於無水四氫呋喃(4mL)。滴加二(三甲基甲矽烷基)氨化鉀(0.77mL，0.385mmol，0.5N甲苯溶液)並攪拌25分鐘。緩慢加入2-氯苄基溴(0.050mL，0.385mmol)並在環境溫度攪拌18小時。用飽和氯化銨溶液(0.5mL)淬滅，用一定體積的二氯甲烷和水(1mL)稀釋。通過VarianChem Elut柱，除去水性部分並在真空中濃縮。作為替代選擇，用乙酸乙酯/水後處理並經MgSO4乾燥。通過快速色譜純化所得殘餘物，用二氯甲烷至10％乙酸乙酯/二氯甲烷梯度洗脫，得到99mg(69％)白色固體。MS(ES)m/z 411，413(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)δ7.86(d，1H，J＝7.5Hz)，7.52(d，1H，J＝8.4Hz)，7.28(t，1H，J＝7.7Hz)，7.17(m，2H)，6.97(d，1H，J＝2.2Hz)，6.68(dd，1H，J＝8.8，2.2Hz)，6.24(d，1H，J＝7.9Hz)，5.36(s，2H)，4.02(m，1H)，3.77(s，3H)，2.98(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.75-2.61(m，2H)，2.41(m，1H)，1.96(m，1H)，1.81(m，1H)，2.52(m，1H)。
使用來自以上製備3、6、7或8的適合的四氫咔唑衍生物並基本上如上製備4或4a所述，通過用適合的苄基滷化物烷基化四氫咔唑、基本上如實施例69所述製備實施例70-89。
實施例90 N-[9-(3-氨基-苄基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將硫化鉑(5wt％於碳上)(120mg)加至N-[6-氰基-9-(3-硝基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例88)(470mg，1.1mmol)的甲醇溶液(50mL)中。用氮(3×)、然後用氫(3×，55psi)吹掃並填充反應容器。密封反應容器於約55psi，並在室溫將混合物攪拌過夜。經
墊過濾反應混合物，用甲醇洗滌濾餅。在減壓下濃縮並通過快速色譜(2.5％甲醇/二氯甲烷)純化粗殘餘物，得到標題化合物。LCMS(方法D)m/z 387.1(M+1，APCI)；1H NMR(DMSO-d6)δ7.97(d，1H)，7.88(d，1H)，7.57(d，1H)，7.42(dd，1H)，6.94(t，1H)，6.24(d，1H)，6.20(m，1H)，5.26(s，2H)，5.07(s，2H)，4.03-4.06(m，1H)，3.01(dd，1H)，2.72-2.86(m，2H)，2.55(dd，1H)，2.38-2.46(m，1H)，1.98-2.02(m，2H)，1.79-1.87(m，1H)，1.04(d，3H)，1.02(d，3H)。
實施例91 N-[9-(3-氟-苄基)-6-羥基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將三溴化硼在二氯甲烷中的溶液(1.0M，33mL，33mmol)加至N-[9-(3-氟-苄基)-6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例79)(2.60g，6.59mmol)並在室溫攪拌過夜。緩慢用甲醇淬滅並在高真空下濃縮。通過矽膠色譜(15％甲醇的乙酸乙酯溶液)純化殘餘物，得到標題化合物，為黃色固體(1.34g，53％)。MS(ES)m/z 381(M+1)；1H NMR(CD3OD)δ7.28(m，1H)，7.07(d，1H)，6.97(m，1H)，6.78-6.85(m，2H)，6.65(d，1H)，5.28(s，2H)，4.18(m，1H)，3.05(dd，1H)，2.76(m，2H)，2.47-2.67(m，2H)，2.13(m，1H)，1.92(m，1H)，1.17(d，6H)。
實施例92 N-[6-環丙基甲氧基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將N-[9-(3-氟-苄基)-6-羥基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(167mg，0.44mmol)、環丙基甲基溴(59mg，0.44mmol)和碳酸銫(172mg，0.53mmol)在二甲基甲醯胺(1.5mL)中於室溫、氮氣下攪拌過夜。用乙酸乙酯稀釋反應物，用水洗滌(2×)，經硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。通過矽膠色譜純化殘餘物，用10至100％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到標題化合物(101mg，53％)。MS(ES)m/z 435(M+1)；1H NMR(CDCl3)δ7.28(m，1H)，7.13(d，1H)，6.98(s，1H)，6.95(m，1H)，6.85(d，1H)，6.79(d，1H)，6.65(d，1H)，5.60(broad s，1H，NH)，5.22(s，2H)，4.43(m，1H)，3.87(d，2H)，3.15(dd，1H)，2.60-2.81(m，3H)，2.34(m，1H)，2.18(m，2H)，1.34(m，1H)，1.18(m，6H)，0.65(d，2H)，0.39(d，2H)。
實施例93 N-[6-乙氧基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將N-[9-(3-氟-苄基)-6-羥基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(175mg，0.46mmol)、乙基碘(72mg 0.46mmol)和氫化鈉(60％礦物油分散體，37mg，0.92mmol)加至二甲基甲醯胺(1mL)中並在室溫攪拌過夜。用乙酸乙酯稀釋反應物，用水洗滌(2)，經硫酸鈉乾燥並濃縮。自乙酸乙酯/己烷重結晶，得到標題化合物(107mg，57％)MS(ES)m/z(M+1)；1H NMR(CDCl3)δ7.28(m，1H)，7.11(d，1H)，6.98(s，1H)，6.97(m，1H)，6.82(d，1H)，6.79(d，1H)，6.65(d，1H)，5.58(broad s，1H，NH)，5.22(s，2H)，4.44(m，1H)，4.09(q，2H)，3.15(dd，1H)，2.60-2.81(m，3H)，2.33(m，1H)，2.15(m，2H)，1.45(t，1H)，1.18(m，6H)。
基本上按照實施例93所述的工藝、使用適合的烷基滷和N-[9-(3-氟-苄基)-6-羥基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺，製備以下實施例94和95。
實施例94 N-[9-(3-氟-苄基)-6-異丙氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
MS(ES)m/z 423(M+1)；1H NMR(CDCl3)δ7.23(m，1H)，7.11(d，1H)，7.00(s，1H)，6.96(m，1H)，6.82(m，2H)，6.68(d，1H)，5.58(broad s，1H，NH)，5.22(s，2H)，4.54(m，1H)，4.44(m，1H)，3.15(dd，1H)，2.60-2.81(m，3H)，2.35(m，1H)，2.17(m，2H)，1.39(d，6H)，1.18(m，6H)。
實施例95 N-[9-(3-氟-苄基)-6-丙氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
MS(ES)m/z 423(M+1)；1H NMR(CD3OD)δ7.99(s，1H，NH)，7.26(m，1H)，7.11(d，1H)，6.96(m，2H)，6.81(d，1H)，6.77(d，1H)，6.65(d，1H)，5.27(s，2H)，4.18(m，1H)，3.96(t，2H)，3.08(dd，1H)，2.75(m，2H)，2.62(m，1H)，2.50(m，1H)，2.10(m，2H)，1.79-1.97(m，3H)，1.18(m，6H)，1.09(t，3H)。
製備9 N-(6，7，8，9-四氫-5H-1，3-二氧雜-9-氮雜-環戊二烯並[b]芴-6-基)-異丁醯胺
將N-(4-氧代-環己基)-異丁醯胺(974mg，5.32mmol)、苯並[1，3]二氧雜環戊烯-5-基-肼鹽酸鹽(Clemo，G.R.；Weiss，J.J.Chem.Soc.(1945)，702.)(1.00g，5.32mmol)的懸液加至水(7mL)和濃鹽酸(3mL)。將反應物加熱至90℃達12小時並冷卻至環境溫度。真空過濾收集所得固體，用水漂洗並置於高真空下達12小時，得到標題化合物(1.20g，75％)，為深棕色固體。m.p.＝198-200℃；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.77(br s，1H)，6.81(s，1H)，6.78(s，1)，5.91(s，2H)，5.57(br s，1H)，4.40(br s，1H)，3.00(dd，J＝15.4，5.1Hz，1H)，2.80-2.69(m，2H)，2.50(dd，J＝15.4，6.5Hz，1H)，2.30(七重峰，J＝6.9Hz，1H)，2.05-1.96(m，2H)，1.14(d，J＝6.9Hz，6H)。
製備10 (2，2-二氟-苯並[1，3]二氧雜環戊烯-5-基)-肼鹽酸鹽
將亞硝酸鈉(1.40g，20.3mmol)的水溶液(11mL)緩慢加至在-5℃含有盛有2，2-二氟-苯並[1，3]二氧雜環戊烯-5-基胺(3.41g，19.7mmol)、水(14mL)和濃鹽酸(5mL)的燒瓶中。將反應物冷卻至-10°，然後加入含氯化錫(II)(11.20g，49.6mmol)的濃鹽酸(9mL)。攪拌反應物1小時並過濾收集所得固體。將固體溶解於二氯甲烷(20mL)並用丙酮(5mL)處理。用水(50mL)洗滌所得有機溶液，經硫酸鎂乾燥，過濾並在減壓下蒸發。將所得油用2N鹽酸(100mL)攪拌12小時。過濾收集固體，用水洗滌並在真空爐中於40℃乾燥過夜，得到標題化合物(1.14g，26％)，為紅色粉末。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.32(br s，3H)，8.45(br s，1H)，7.34(d，J＝8.7Hz，1H)，7.11(d，J＝2.3Hz，1H)，6.79(dd，J＝8.7，2.3Hz，1H)。
製備11 N-(2，2-二氟-6，7，8，9-四氫-5H-1，3-二氧雜-9-氮雜-環戊二烯並[b]芴-6-基)-異丁醯胺
將N-(4-氧代-環己基)-異丁醯胺(933mg，5.09mmol)加至(2，2-二氟-苯並[1，3]二氧雜環戊烯-5-基)-肼鹽酸鹽(1.14g，5.09mmol)、水(7mL)的濃鹽酸(3mL)的懸液中。將反應物攪拌加熱至90℃達12小時並冷卻至環境溫度。真空過濾收集所得固體，用水漂洗並置於真空爐中達5小時，得到標題化合物(732mg，43％)，為褐色固體。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.96(br s，1H)，7.00(s，1H)，6.98(s，1H)，5.54(br d，J＝7.5Hz，1H)，4.40(br s，1H)，3.03(dd，J＝15.3，5.1Hz，1H)，2.88-2.71(m，2H)，2.51(dd，J＝15.3，7.0Hz，1H)，2.33(五重峰，J＝6.9Hz，1H)，2.12-1.91(m，2H)，1.16(d，J＝6.9Hz，6H)。
實施例96 N-[6-氰基-9-(2三氟甲基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將氫化鈉(60％於油中，48mg，1.20mmol)混懸於N，N-二甲基甲醯胺(2.5mL)中並冷卻至0℃。經由注射器緩慢加入N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(281mg，1.00mmol)在N，N-二甲基甲醯胺(2.5mL)中的溶液並攪拌10分鐘，然後溫至環境溫度達30分鐘。加入2-(三氟甲基)苄基溴(263mg，1.10mmol)並攪拌約16小時。加入乙酸乙酯(75mL)，用水(50mL)和鹽水(2×50mL)洗滌。經硫酸鎂乾燥有機相，過濾並在減壓下蒸發。用2∶1的己烷-二氯甲烷研磨殘餘物，得到標題化合物(333mg，76％)。MS(ES)m/z 440(M+1)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.83(s，1H)，7.73(d，J＝7.2Hz，1H)，7.39-7.29(m，3H)，7.16(d，J＝8.4Hz，1H)，6.27(d，J＝7.4Hz，1H)，5.53-5.51(m，1H)，5.46(s，2H)，4.47-4.30(m，1H)，3.21-3.15(m，1H)，2.67-2.59(m，3H)，2.33(七重峰，J＝6.8Hz，1H)，2.16-2.11(m，1H)，2.03-1.93(m，1H)，1.16(d，J＝6.8Hz，3H)，1.15(d，J＝6.8Hz，3H)；m.p.＝222-225℃。
使用如製備3、9和11所製備的四氫咔唑和適合的苄基滷化物、基本上按照如上實施例96所述的工藝製備以下97至100。
實施例97 N-[6-氰基-9-(2-二氟甲氧基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
MS(ES)m/z 438(M+1)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.81s，1H)，7.37-7.15(m，4H)，7.03(t，J＝7.5Hz，1H)，6.62(t，J＝73.4Hz，1H)，6.38(d，J＝8.1Hz，1H)，5.52(br d，J＝7.8Hz，1H)，5.32(s，2H)，4.38(br t，J＝8.2Hz，1H)，3.16(dd，J＝15.4，5.1Hz，1H)，2.74-2.59(m，3H)，2.33(七重峰，J＝6.9Hz，1H)，2.17-1.97(m，2H)，1.15(d，J＝6.9Hz，6H)；m.p.＝217-219℃. 實施例98 N-[9-(3-氟-苄基)-6，7，8，9-四氫-5H-1，3-二氧雜-9-氮雜-環戊二烯並[b]芴-6-基]-異丁醯胺
MS(ES)m/z 409(M+1)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.28-7.20(m，1H)，6.95-6.86(m，2H)，6.75(d，J＝7.7Hz，1H)，6.65-6.60(m，2H)，5.90(s，2H)，5.51(br d，J＝7.7Hz，1H)，5.14(s，2H)，4.40(br s，1H)，3.05(dd，J＝15.4，5.0Hz，1H)，2.95-2.53(m，3H)，2.32(七重峰，J＝6.9Hz，1H)，2.17-1.98(m，2H)，1.15(d，J＝6.9Hz，3H)，1.13(d，J＝6.9Hz，3H)；m.p.＝250-255℃. 實施例99 N-[2，2-二氟-9-(3-氟-苄基)-6，7，8，9-四氫-5H-1，3-二氧雜-9-氮雜-環戊二烯並[b]芴-6-基]-異丁醯胺
MS(ES)m/z 445(M+1)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.29-7.22(m，1H)，7.07(s，1H)，6.94(t，J＝8.3Hz，1H)，6.83(s，1H)，6.73(d，J＝7.8Hz，1H)，6.60(d，J＝9.3Hz，1H)，5.50(br d，J＝7.7Hz，1H)，5.19(s，2H)，4.40(br s，1H)，3.09(dd，J＝15.3，5.0Hz，1H)，2.75-2.54(m，3H)，2.32(七重峰，J＝6.9Hz，1H)，2.12-1.97(m，2H)，1.14(d，J＝6.9Hz，3H)，1.12(d，J＝6.9Hz，3H)；m.p.＝197-199℃. 實施例100 N-[6-氰基-9-(2-三氟甲氧基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
MS(ES)m/z 456(M+1)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.81(d，J＝1.0Hz，1H)，7.36(dd，J＝8.5，1.5Hz，1H)，7.32-7.30(m，2H)，7.18(d，J＝8.5Hz，1H)，7.13-7.07(m，1H)，6.36(d，J＝7.7Hz，1H)，5.58-5.51(m，1H)，5.34(s，2H)，4.46-4.33(m，1H)，3.22-3.10(m，1H)，2.78-2.57(m，3H)，2.33(七重峰，J＝6.9Hz，1H)，2.19-2.07(m，1H)，2.05-1.90(m，1H)，1.16(d，J＝6.9Hz，3H)，1.15(d，J＝6.9Hz，3H)；m.p.＝224-225℃. 實施例101 N-[6-氯-9-(2-羥基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
在氮氣下將N-[6-氯-9-(2-甲氧基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例19)(100mg，0.24mmol)溶解於無水二氯甲烷(3mL)並在鹽水/冰浴中冷卻至0℃。緩慢加入三溴化硼(1M二氯甲烷溶液，1.22mL，1.22mmol)。30分鐘後，除去冰浴並使其在4小時內溫至環境溫度。用乙酸乙酯(12mL)稀釋並用水洗滌。用乙酸乙酯萃取水性部分(3×)。合併所有有機部分，用水、鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)並在真空中濃縮，得到殘餘物。經矽膠墊、用25％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脫殘餘物，得到93mg(96％)褐色固體。MS(ES)m/z 397，399(M+1)，395，397(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ9.83(s，1H)，7.85(d，1H，J＝7.9Hz)，7.45(s，1H)，7.33(d，1H，J＝8.4Hz)，7.04(m，2H)，6.86(d，1H，J＝7.9Hz)，6.63(t，1H，J＝7.3Hz)，6.32(d，1H，J＝7.5Hz)，5.23(s，2H)，4.02(m，1H)，2.95(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.84-2.66(m，2H)，2.52(m，1H)，2.40(m，1H)，1.97(m，1H)，1.80(m，1H)，1.02(m，7H)。
使用實施例25和27的適合的甲氧基苄基前體、基本上按照實施例101所述工藝製備實施例102和103。
實施例102 N-[6-氯-9-(3-羥基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
MS(ES)m/z 397，399(M+1)，395，397(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ9.36(s，1H)，7.85(d，1H，J＝7.9Hz)，7.46(d，1H，J＝1.8Hz)，7.38(d，1H，J＝8.4Hz)，7.12-7.03(m，2H)，6.62(m，1H)，6.50(d，1H，J＝7.5Hz)，6.35(s，1H)，5.27(s，2H)，4.01(m，1H)，2.95(dd，1H，J＝15.0，4.8Hz)，2.85-2.64(m，2H)，2.51(m，1H)，2.40(m，1H)，1.98(m，1H)，1.80(m，1H)，1.02(m，6H). 實施例103 N-[6-氯-9-(4-羥基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
MS(ES)m/z 397，399(M+1)，395，397(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ9.36(s，1H)，7.84(d，1H，J＝7.5Hz)，7.44(d，1H，J＝2.2Hz)，7.41(d，1H，J＝8.4Hz)，7.04(dd，1H，J＝8.6，2.0Hz)，6.90(d，2H，J＝8.4Hz)，6.68(d，2H，J＝8.4Hz)，5.21(s，2H)，4.01(m，1H)，2.93(dd，1H，J＝15.0，4.8Hz)，2.77(m，2H)，2.49(m，1H)，2.40(m，1H)，1.97(m，1H)，1.80(m，1H)，1.02(d，6H，J＝6.6Hz). 實施例104 N-[6-氯-9-(2-硝基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
在氮氣下將氫化鈉(60％，120mg，3mmol)混懸於無水DMF(2.5mL)並在冰浴中冷卻。緩慢加入N-(6-氯-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(基本上如製備4所述製備)(727mg，2.5mmol)的DMF溶液(8mL)。10分鐘後除去冰浴並令反應物歷經1小時溫至環境溫度。加入DMF(25mL)並在乾冰/丙酮浴中冷卻。滴加2-硝基苄基溴(648mg，3mmol)的DMF溶液(2.5mL)。攪拌18小時，溫至環境溫度。傾至水中並用乙酸乙酯/乙醚萃取(100mL/50mL)。分離並用乙酸乙酯(50mL)洗滌水相。合併有機相，用1N鹽酸(2×100mL)、鹽水(2×100mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，並在真空中濃縮，得到黃色固體。通過快速色譜純化，用二氯甲烷、然後用10％乙酸乙酯/二氯甲烷梯度洗脫，得到833mg(79％)黃色固體。MS(ES)m/z 426，428(M+1)，424，426(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ8.21(dd，1H，J＝7.9，1.3Hz)，7.86(d，1H，J＝7.9Hz)，7.60-7.51(m，3H)，7.40(d，1H，J＝8.8Hz)，7.03(dd，1H，J＝8.6，2.0Hz)，6.18(d，1H，J＝7.0Hz)，5.75(s，2H)，4.05(m，1H)，2.99(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.74-2.53(m，3H)，2.40(m，1H)，1.95(m，1H)，1.82(m，1H)，1.01(m，6H)。
實施例105 N-[6-氰基-9-(2-甲氧基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
按照基本上如以上實施例104所述的工藝、使用N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(3.38g，12mmol)並用氫化鈉(580mg，14.4mmol)處理。在乾冰/乙腈浴中冷卻所形成的鈉鹽並於-35至-30℃加入含2-甲氧基苄基氯(1.84mL，13.2mmol)的DMF(2mL)。除去冷卻浴，令反應物歷經3小時溫至環境溫度，同時攪拌。滴加水(250mL)，在冰浴中攪拌冷卻30分鐘。過濾所得沉澱並在中央低真空下於45℃乾燥18小時。將產物在乙醚中研磨並超聲1.5小時，過濾並乾燥，得到3.98g(83％)類白色固體。MS(ES)m/z 402(M+1)，400(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ7.98(s，1H)，7.87(d，1H，J＝7.5Hz)，7.50(d，1H，J＝8.4Hz)，7.40(dd，1H，J＝8.3，1.3Hz)，7.26(t，1H，J＝7.9Hz)，7.06(d，1H，J＝8.4Hz)，6.80(t，1H，J＝7.5Hz)，6.40(d，1H，J＝7.5Hz)，5.34(s，2H)，4.03(m，1H)，3.87(s，3H)，3.02(dd，1H，J＝15.4，5.3Hz)，2.84-2.65(m，2H)，2.40(m，1H)，2.57(dd，1H，J＝15.3，8.6Hz)，1.98(m，1H)，1.82(m，1H)，1.02(m，6H)。
實施例106 N-[9-(2-氨基-苄基)-6-氯-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將氯化錫(II)二水合物(2.15g，9.5mmol)溶解於無水乙醇(10mL)並將其加至含N-[6-氯-9-(2-硝基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例104)(810mg，1.9mmol)的濃鹽酸(10mL)中。將反應物在60℃加熱1小時。使其冷卻並加入5N NaOH(27mL)直至pH＝11-12。萃取所混懸的固體於乙酸乙酯中(4×)。合併有機部分並用水、鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)並在真空中濃縮，得到固體。使其通過二氧化矽墊，用25％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脫，得到640mg(85％)。MS(ES)m/z 396，398(M+1)，394(M-1)；1HNMR(DMSO-d6)δ7.86(d，1H，J＝7.5Hz)，7.49(d，1H，J＝1.8Hz)，7.24(d，1H，J＝8.8Hz)，7.04(dd，1H，J＝8.6，2.0Hz)，6.93(dt，1H，J＝7.5，1.3Hz)，6.71(dd，1H，J＝8.1，1.1Hz)，6.37(dt，1H，J＝7.5，1.3Hz)，5.89(d，1H，J＝7.0Hz)，5.14(m，4H)，4.03(m，1H)，2.98(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.75-2.60(m，2H)，2.55(m，1H)，2.41(m，1H)，1.97(m，1H)，1.81(m，1H)，1.03(d，3H，J＝4.0Hz)，1.02(d，3H，J＝4.4Hz)。
實施例107 N-[6-氰基-9-(2-羥基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
按照基本上如以上實施例101所述的工藝、使用N-[6-氰基-9-(2-甲氧基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例105)(3.90g，9.71mmol)，後處理後得到4.4g固體。將其部分溶解於二氯甲烷/THF/丙酮和少量的甲醇。過濾並將剩餘的固體溶解於THF/甲醇。將兩份溶液加至大二氧化矽墊並用二氯甲烷、25％乙酸乙酯/二氯甲烷和50％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脫，總體積為3-4L。在真空中濃縮，得到棕色固體。在二氯甲烷中研磨固體並過濾，得到3.15g(84％)白色固體。MS(ES)m/z 388(M+1)，386(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ9.87(s，1H)，7.97(s，1H)，7.88(d，1H，J＝7.5Hz)，7.53(d，1H，J＝8.8Hz)，7.40(m，1H)，7.08(t，1H，J＝7.7Hz)，6.86(d，1H，J＝7.9Hz)，6.65(t，1H，J＝7.3Hz)，6.40(d，1H，J＝7.5Hz)，5.30(s，2H)，4.03(m，1H)，3.01(dd，1H，J＝15.4，4.8Hz)，2.88-2.68(m，2H)，2.56(m，1H)，2.40(m，1H)，1.98(m，1H)，1.82(m，1H)，1.02(m，6H)。
實施例108 N-[6-氰基-9-(2-硝基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例104所述工藝、使用N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備3)(5.63g，20mmol)、氫化鈉(0.96g，24mmol)和2-硝基苄基溴(5.18g，24mmol)製備標題化合物。後處理後，在真空中濃縮溶液，當呈漿液時，過濾並在中央低真空下乾燥，得到6.33g(76％)黃色固體，其不經進一步純化即可使用。MS(ES)m/z 417(M+1)，415(M-1)；1HNMR(DMSO-d6)δ8.22(dd，1H，J＝7.3，2.0Hz)，8.05(s，1H)，7.88(d，1H，J＝7.5Hz)，7.62-7.52(m，3H)，7.41(dd，1H，J＝8.4，1.3Hz)，6.20(d，1H，J＝7.0Hz)，5.83(s，2H)，4.07(m，1H)，3.05(dd，1H，J＝15.4，4.8Hz)，2.77-2.57(m，3H)，2.41(m，1H)，1.96(m，1H)，1.85(m，1H)，1.02(m，6H)。
實施例109 N-[9-(2-氨基-苄基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將氯化錫(II)二水合物(16.70g，74.0mmol)溶解於無水乙醇(35mL)並將其加至N-[6-氰基-9-(2-硝基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(6.18g，14.8mmol)。加入濃鹽酸(35mL)並在60℃加熱2小時。使其冷卻並加入5N NaOH(80mL)。萃取所混懸的固體於乙酸乙酯(150mL)中。加入更多的5N NaOH(5mL)並用乙酸乙酯(200mL)萃取。合併有機部分，用水(2×200mL)、鹽水(150mL)洗滌，乾燥(MgSO4)、過濾並在真空中濃縮，得到3.45g。在二氯甲烷中研磨產物，過濾並在中央低真空下乾燥，得到1.71g(30％)白色固體。MS(ES)m/z 387(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)δ8.00(s，1H)，7.88(d，1H，J＝7.9Hz)，7.42(m，2H)，6.94(t，1H，J＝7.6Hz)，6.72(dd，1H，J＝7.9，0.9Hz)，6.37(dt，1H，J＝7.4，0.9Hz)，5.90(d，1H，J＝7.0Hz)，5.19(m，4H)，4.05(m，1H)，3.03(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.71(m，2H)，2.59(dd，1H，J＝15.9，8.4Hz)，2.41(m，1H)，1.98(m，1H)，1.83(m，1H)，1.03(d，3H，J＝4.4Hz)，1.01(d，3H，J＝4.4Hz)；HPLCRt＝1.95min，(93％)。
用5N NaOH使水性部分呈鹼性並用兩倍體積的乙酸乙酯萃取，獲得更多產物。合併有機部分，用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾並在真空中濃縮，得到1.36g類白色固體，HPLC檢測純度為92.6％。將其與來自以上研磨的母液合併並用THF/二氯甲烷吸收於二氧化矽上，應用於二氧化矽墊。用大體積的1二氯甲烷/乙酸乙酯、2二氯甲烷/3乙酸乙酯、1二氯甲烷/2乙酸乙酯、然後直接用乙酸乙酯洗脫，得到1.96g(34％)產物，為淺褐色固體。1H NMR(DMSO-d6)與以上給出的一致。HPLCRt＝1.99min，(96％)。
實施例110 R-N-[9-(2-氨基-苄基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
通過手性色譜法分離外消旋N-[9-(2-氨基-苄基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(1.50g)。使用Chiralpak AD柱，4.6×150mm，用庚烷/異丙醇(60/40)以0.6mL/min的流速洗脫，UV檢測設置於300nm。得到640mg標題化合物，為異構體1，ee＝98.4％。
實施例111 S-N-[9-(2-氨基-苄基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
使用實施例110的條件，經手性色譜法得到623mg標題化合物，為異構體2，ee＝94.9％。
實施例112 N-[6-氰基-9-(2-乙基氨基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
在氮氣下將N-[9-(2-氨基-苄基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例109)(193mg，0.5mmol)溶解於無水DMF(2mL)。加入乙醛(0.34mL，0.6mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(191mg，0.9mmol)和乙酸(0.072mL，1.25mmol)並在40℃加熱6小時。進行TLC(1己烷/3乙酸乙酯)，觀察到仍然存在原料。加入更多的乙醛(0.010mL，0.18mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(60mg，0.3mmol)和乙酸(0.030mL，0.5mmol)並在40℃加熱18小時。觀察TLC，其顯示仍然沒有反應完全但正在形成新的副產物。令反應物冷卻，用水(20mL)稀釋，用乙酸乙酯萃取(3×20mL)。合併有機部分，用鹽水(40mL)洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾並在真空中濃縮，得到416mg棕色固體。用THF和少量的甲醇吸收於二氧化矽上並通過快速色譜純化。用二氯甲烷、然後用10％乙酸乙酯/二氯甲烷至50％乙酸乙酯/二氯甲烷梯度洗脫，得到103mg(50％)白色固體。MS(ES)m/z 415(M+1)，413(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ8.02(s，1H)，7.88(d，1H，J＝7.5Hz)，7.41(d，2H，J＝0.9Hz)，7.07(t，1H，J＝7.7Hz)，6.67(d，1H，J＝7.9Hz)，6.42(t，1H，J＝7.6Hz)，5.85(d，1H，J＝7.4Hz)，5.25(s，2H)，5.06(t，1H，J＝5.3Hz)，4.04(m，1H)，3.17(m，2H)，3.04(dd，1H，J＝15.4，5.3Hz)，2.74-2.55(m，3H)，2.41(m，1H)，1.97(m，1H)，1.83(m，1H)，1.28(t，3H，J＝7.0Hz)，1.02(m，6H)。
實施例113 N-[6-氰基-9-(2-甲磺醯基氨基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
在氮氣下將N-[9-(2-氨基-苄基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例109)(116mg，0.3mmol)混懸於無水二氯甲烷(3mL)。加入甲磺醯氯(0.028mL，0.36mmol)和吡啶(0.032mL，0.39mmol)，繼而加入無水DMF(2mL)以完成溶解。在室溫攪拌5.5小時。加入另外的甲磺醯氯(0.010mL，0.13mmol)和吡啶(0.010mL，0.12mmol)並在室溫攪拌18小時。用二氯甲烷稀釋並用1N鹽酸洗滌。用二氯甲烷反洗滌水性部分。合併有機部分並用鹽水洗滌，乾燥(MgSO4)，過濾並在真空中濃縮，得到74mg黃色油。將油用THF和少量的甲醇吸收於二氧化矽上並通過快速色譜純化。用10％乙酸乙酯/二氯甲烷、25％乙酸乙酯/二氯甲烷和50％乙酸乙酯/二氯甲烷的步進梯度洗脫，得到19mg(14％)淺黃色固體。MS(ES)m/z 465(M+1)，463(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ9.43(s，1H)，8.02(s，1H)，7.88(d，1H，J＝7.5Hz)，7.43-7.36(m，3H)，7.31(dt，1H，J＝7.6，1.0Hz)，7.12(dt，1H，J＝7.5，0.9Hz)，6.21(d，1H，J＝7.5Hz)，5.54(s，2H)，4.06(m，1H)，3.12(s，3H)，3.04(dd，1H，J＝15.4，5.3Hz)，2.70(m，2H)，2.59(dd，1H，J＝15.4，8.4Hz)，2.41(m，1H)，1.97(m，1H)，1.85(m，1H)，1.02(m，6H)。
實施例114 N-[6-氰基-9-呋喃-(2-二甲基氨基-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將氰基硼氫化鈉(0.030g，0.48mmol)加至N-[9-(2-氨基苄基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例109)(0.116g，0.3mmol)和含37％甲醛(0.112mL，1.5mmol)的乙腈(5mL)中。加入乙酸後在環境溫度攪拌16小時，1小時後加入1滴，1.5小時後加2滴。用1N氫氧化鈉(5mL)小心地淬滅反應。將反應物用水稀釋，用乙酸乙酯萃取。用乙酸乙酯洗滌，用水萃取，經硫酸鎂乾燥並在減壓下蒸發。用矽膠柱色譜純化，用乙酸乙酯/己烷洗脫，得到產物(36mg，29％產率)。LCMS(方法D)m/z 415(M+1，APCI).Good for C26H30N4O，MW 414.56.1H NMR(DMSOd6)δ7.98(s，1H)，7.87(d，1H，J＝7.9Hz)，7.42(m，2H)，7.22(m，2H)，6.87(m，1H)，6.30(d，1H，J＝7.5Hz)，5.42(s，2H)，4.03(m，1H)，3.79(s，6H)，3.02(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.73-2.56(m，3H)，2.40(m，1H)，2.00-1.92(m，1H)，1.86-1.76(m，1H)，1.02(dd，6H，J＝6.8，3.7Hz)。
製備12 (4-溴-3-氟-苯基)-肼
根據Street，L.J.；et al.J.Med.Chem.(1993)36，1529-1538的工藝，轉化4-溴-3-氟苯胺為標題化合物，產率71％。1H NMR(CDCl3)δ7.32(m，1H)，6.71(dd，1H，J＝10.8，2.4Hz)，6.51(dd，1H，J＝8.8，2.6Hz)，6.51(dd，1H，J＝8.8，2.6Hz)，6.51(dd，1H，J＝8.5，2.5Hz)，5.33(br s，1H)，3.62(br s，2H)；HPLCRt＝1.89min，(96％)。
使用市售可得的苯胺、基本上按照Street等人，J.Med.Chem.(1993)36，1529-1538的工藝製備以下苯肼類化合物(製備13至15)。
製備16 N-(6-溴-7-氟-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺和N-(6-
基本上按照製備4(方法2)所述工藝、用(4-溴-3-氟-苯基)-肼(製備12)和N-(4-氧代-環己基)-異丁醯胺製備標題化合物，得到褐色固體，含65∶35異構體混合物，總產率20％。MS(ES)m/z 353，355(M+H)，351，353(M-H)；HPLC(方法A)Rt＝2.22min，(95％)。
製備17 N-(7-氯-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺和N-(5-氯-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
基本上按照製備4(方法2)所述工藝、用3-氯-4-氰基苯肼(1/3Et3N.HCl)(製備15)和N-(4-氧代-環己基)-異丁醯胺製備標題化合物，得到褐色固體，含有50∶50異構體混合物，總產率52％。MS(ES)m/z 316(M+H)，314(M-H)；HPLC(方法A)Rt＝1.83min，(82％)。
製備18 N-(8-氯-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
基本上按照製備4(方法2)所述工藝、用2-氯-4-氰基苯肼(製備13)和N-(4-氧代-環己基)-異丁醯胺製備標題化合物，得到的標題化合物為粉色粉末，產率50％。MS(ES)m/z 316(M+H)，314(M-H)；HPLC(方法A)Rt＝1.96，(90％)。
製備19 N-(6-溴-8-氟-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
基本上按照製備4(方法2)所述工藝、用2-氟-4-溴苯肼(製備14)和N-(4-氧代-環己基)-異丁醯胺製備標題化合物，得到的標題化合物為褐色泡沫，產率32％。MS(ES)m/z 353，355(M+H)，351，353(M-H)；HPLC(方法A)Rt＝2.34，(89％)。
製備20 N-[6-溴-7-氟-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺和N-[6-溴-5-氟-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例96所述工藝、用N-(6-溴-7-氟-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺和N-(6-溴-5-氟-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(65∶35混合物)和3-氟苄基溴製備標題化合物，得到含有異構體混合物的白色固體，總產率78％。MS(ES)m/z 461，463(M+1)，459，461(M-1)；HPLCRt＝3.67min，(59％)；Rt＝3.92min，(38％)。
實施例115 N-[6-氰基-7-氟-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將N-[6-溴-7-氟-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺和N-[6-溴-5-氟-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(500mg，1.08mmol；製備20)的65∶35混合物溶解於N-甲基吡咯烷酮(10mL)中。用氮衝洗所得溶液30分鐘，然後加入氰化亞銅(I)(291mg，3.25mmol)和碘化亞酮(I)(619mg，3.25mmol)。加熱至130℃達三天，然後冷卻至室溫。用EtOAc(200mL)和水(100mL)稀釋反應混合物。加入乙二胺直至所有固體溶解(約20mL)。分離各層，然後用水洗滌有機層(3×75mL)。乾燥有機部分(MgSO4)，過濾並濃縮有機層，得到474mg粗產物。通過矽膠色譜(0-10％EtOAc/CHCl3)自該混合物分離標題化合物，得到的標題化合物為白色固體，產率20％。MS(ES)m/z 408(M+1)，406(M-1)；HPLCRt＝2.51min，(96％)。
實施例116 N-[6-氰基-5-氟-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
通過矽膠色譜(0-10％EtOAc/CHCl3)自實施例115獲得的混合物分離標題化合物，得到標題化合物，產率7％。MS(ES)m/z 408(M+1)，406(M-1)；HPLCRt＝2.60min，(97％)。
實施例117 N-[5-氯-6-氰基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例96所述工藝，使用N-(7-氯-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺和N-(5-氯-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(50∶50混合物-製備17)以及3-氟苄基溴製備標題化合物，得到區域異構體混合物。使用矽膠色譜(0-20％EtOAc/CHCl3)自該區域異構體混合物分離標題化合物，得到標題化合物，產率5％。MS(ES)m/z 424(M+1)，422(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝6.87min，(97％)。
實施例118 N-[7-氯-6-氰基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
使用矽膠色譜(0-20％EtOAc/CHCl3)自實施例117所得區域異構體混合物分離標題化合物，得到標題化合物，產率3％。MS(ES)m/z 424(M+H)，422(M-H)；HPLC(方法B)Rt＝7.16min，(100％)。
實施例119 N-[8-氯-6-氰基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例96所述工藝，使用N-(8-氯-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備18)和3-氟苄基溴製備標題化合物，獲得的標題化合物為白色固體，產率10％。MS(ES)424(M+1)，422(M-1)；HPLC(方法A)Rt＝3.18(92％)。
實施例120 N-[6-溴-8-氟-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例96所述工藝，使用N-(6-溴-8-氟-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備19)和3-氟苄基溴製備標題化合物，獲得的標題化合物為白色固體，產率36％。MS(ES)m/z 461，463(M+1)，459，461(M-1)；HPLC(方法A)Rt＝4.60(92％)。
實施例121 N-[6-氰基-8-氟-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
按照基本上如實施例115所述的工藝、使用N-[6-溴-8-氟-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺，製備標題化合物，為白色固體，產率29％。MS(ES)408(M+1)，406(M-1)；HPLC(方法A)Rt＝2.75(97％)。
製備21 (R)-N-(6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺
經由手性色譜拆分N-(6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺，使用0.46×15cm Chiralpak AD-H柱，用100％MeOH洗脫。流速＝0.6mL/min。利用穩態循環以二甲基乙基胺純化，以改進拆分得到e.e.＞98％。首先洗脫的是異構體1(S異構體)，其次洗脫的異構體為標題化合物R異構體。MS(ES)m/z 335(M+1)，337(M+1+2)。
實施例122 (R)-N-(9-苄基-6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺
使用基本上如實施例1所述工藝，用1-溴甲基-3-氟苯烷基化(R)-N-(6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺，得到標題化合物。MS(ES)m/z443(M+1)，445(M+1+2)；m.p.＝204-207℃。(以類似方式烷基化S異構體，得到(S)-N-(9-苄基-6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺。) 實施例123 (R)-N-(6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺
經由手性色譜將N-(6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(實施例51)拆分為其對映異構體，使用0.46×15cm ChiralpakAD-H柱，用EtOH/MeOH/庚烷15/10/75洗脫，流速＝0.6mL/min。首先洗脫的是異構體1(R)，為標題化合物，e.e.＞99.5％。MS(ES)m/z 390(M+1)；m.p.＝223-225℃。
實施例124 (S)-N-(6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺
如實施例123所述經手性色譜獲得標題化合物。洗脫的第二種異構體是(S)異構體。MS(ES)m/z 390(M+1)；m.p.＝223-225℃。
實施例125 N-[6-(5-氨基[1，3，4]噻二唑-2-基)-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
在70℃、氮氣下將N-[6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(實施例51)(0.500g，1.28mmol)和氨基硫脲(0.129g，1.41mmol)在三氟乙酸(5mL)中的混合物加熱18小時。將混合物傾至稀NH4OH溶液並過濾收集0.510g所得沉澱。使沉澱與無水EtOH共沸並通過二氧化矽色譜純化，用含0.05％NH4OH的EtOAc洗脫，得到0.10g白色固體。MS(ES)m/z 464(M+1)；HPLCRt＝1.89min，(100％)；m.p.＝251-254℃。
實施例126 (R)-N-[6-(5-氨基[1，3，4]噻二唑-2-基)-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
以基本上如實施例125所述方式、從(R)-N-(6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(實施例123)開始製備標題化合物，得到白色固體。MS(ES)m/z 464(M+1)；HPLCRt＝1.88min(95.6％)。
實施例127 (R)-N-[9-(3-氟苄基)-6-[1，3，4]噻二唑-2-基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
在60℃將(R)-N-[6-(5-氨基[1，3，4]噻二唑-2-基)-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(實施例126)(0.104g，0.224mmol)加至亞硝酸異戊酯(0.039g，0.337mmol)在DMF中的溶液並加熱1小時。用水淬滅反應，用EtOAc萃取，得到80mg黃色固體。經二氧化矽純化，用25-90％EtOAc/己烷梯度洗脫，得到20mg(20％)。MS(ES)m/z 449(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)δ9.56(s，1H)，8.08(s，1H)，7.89(d，1H)，7.77(d，1H)，7.57(d，1H)，7.38(dd，1H)，7.12(dd，2H)，6.84-6.94(m，2H)，5.44(s，2H)，4.05(m，1H)，3.07(dd，1H)，2.70-2.84(m，2H)，2.63(m，2H)，2.41(七重峰，1H)，2.00(m，1H)，1.88(m，1H)，1.04(dd，6H)。
製備22 (R)-N-(9-(3-氟苄基)-6-硫代氨基甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺
將(R)-N-(6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(實施例127)(4.00g，10.3mmol)和硫代乙醯胺(1.54g，20.5mmol)在回流下於4NHCl的二噁烷溶液(100mL)中加熱16小時。冷卻反應物，傾至水中，用NaHCO3中和。用EtOAc萃取並蒸發，得到4.2g紅色泡沫。使用矽膠色譜純化，用25-100％EtOAc/己烷梯度洗脫，得到2.6g(60％)黃色固體。MS(ES)m/z 424(M+1)；HPLCRt＝1.90min(95％)。
實施例128 (R)-N-[9-(3-氟苄基)-6-(4-甲基噻唑-2-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
合併氯丙酮(0.197g，2.13mmol)和(R)-N-(9-(3-氟苄基)-6-硫代氨基甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(製備22)(0.300g，0.708mmol)並在80℃、DMF中於氮氣下加熱2.5小時。冷卻後，用水稀釋混合物並過濾收集沉澱。將沉澱淤漿於熱EtOAc中，得到0.278g黃色固體。MS(ES)m/z 462(M+1)；HPLCRt＝3.33min(100％)。
實施例129 (R)-N-[9-(3-氟苄基)-6-(3，4-二甲基噻唑-2-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
合併3-溴-2-丁酮(0.224g，1.48mmol)和(R)-N-(9-(3-氟苄基)-6-硫代氨基甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(製備22)(0.209g，0.493mmol)並在DMF中於80℃、氮氣下加熱2小時。冷卻後，用水稀釋混合物並過濾收集沉澱。自無水EtOH重結晶，得到黃色晶體。MS(ES)m/z 476(M+1)；HPLCRt＝3.87min(100％)。
製備23 N-[9-(3-氟苄基)-6-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
合併N-[6-溴-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例1)(3.00g，6.77mmol)、雙(頻哪醇)硼烷(1.89g，7.44mmol)、tricyclophosphine(0.270g，0.961mmol)、醋酸鉀(1.99g，20.3mmol)、三(亞苄基丙酮)二鈀(0.366g，0.399mmol)於DMSO(15mL)中，用氬於密閉試管中吹掃並於95℃加熱24小時。冷卻後，將混合物傾至水中並用EtOAc萃取。用水和鹽水洗滌EtOAc萃取液，乾燥(Na2SO4)，過濾並蒸發。經中性氧化鋁色譜處理，用20-40％EtOAc/己烷洗脫，得到2.2g(66％)黃色泡沫。MS(ES)m/z 491(M+1)。
製備24 (R)-N-[9-(3-氟苄基)-6-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
基本上如製備23所述自(R)-N-(9-苄基-6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(實施例122)製備標題化合物。MS(ES)491(M+1)；m.p.＝93-96℃； 實施例130 N-[9-(3-氟苄基)-6-噻唑-2-基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
合併N-[9-(3-氟苄基)-6-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(製備23)、2-溴噻唑(0.0602g，0.367mmol)、四(三苯基膦)鈀(0)(0.0353g，0.031mmol)和K2CO3(2mL 2M溶液)於1，4-二噁烷(4mL)中，用氬吹掃並於95℃加熱18小時。冷卻後，將混合物傾至水中並用EtOAc萃取。用鹽水洗滌EtOAc萃取液，乾燥(Na2SO4)，過濾並蒸發，得到棕色固體。經矽膠色譜處理，用20-80％EtOAc/己烷洗脫，得到0.050g(37％)類白色固體。MS(ES)m/z 448；m.p.＝221-225℃。
實施例131 N-[9-(3-氟苄基)-6-吡啶-2-基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
基本上如實施例130所述、使用N-[9-(3-氟苄基)-6-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(製備23)(0.200g，408mmol)、2-氯吡啶(0.0556g，0.489mmol)、四(三苯基膦)鈀(0)(0.0471g，0.041mmol)和K2CO3(2mL 2M溶液)於1，4-二噁烷(4mL)中製備標題化合物，後處理及色譜處理後，得到0.039g(22％)米色固體。MS(ES)m/z 442；m.p.＝228-230℃。
基本上如實施例136所述、從適合的滷代雜芳基和N-[9-(3-氟苄基)-6-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(製備23)(對於實施例132、134至138)或(R)-N-[9-(3-氟苄基)-6-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(製備24)(對於實施例133)開始，製備實施例132至138。
實施例139 N-[9-(3-氟-苄基)-6-(6-甲基-噠嗪-3-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將N-[9-(3-氟苄基)-6-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(製備23)(150mg，0.31mmol)和3-氯-6-甲基噠嗪(39mg，0.31mmol)溶解於二噁烷(2.5mL)和2M Na2CO3(388μL)。用氮氣吹掃溶液5分鐘，加入二氯雙(三苯基膦)鈀(II)(11mg，0.016mmol)並密封反應容器。於微波反應器中加熱至140℃達30分鐘，然後用水(20mL)稀釋。萃取至EtOAc中(3×25mL)，乾燥有機相(MgSO4)，過濾並在真空中濃縮，得到粗產物(179mg)，為棕色固體。在矽膠(12g)上純化粗產物，用25-70％(4％(2M NH3/MeOH)/CH2Cl2)/己烷洗脫，得到35mg(25％)標題化合物，為白色固體。MS(ES)m/z 457(M+1)，455(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝3.37min(100％)。
製備25 5-溴-2-(2，5-二甲基吡咯-1-基)噻唑
用Na2CO3處理中和2-氨基-5-溴噻唑氫溴酸鹽(2.90g，16.2mmol游離胺，然後將其加至己烷-2，5-二酮(2.04g，17.8mmol)和乙酸(1.1mL)在苯中的混合物。在裝備有迪安-斯達克榻分水器的燒瓶中將混合物加熱18小時。過濾並在真空中濃縮，得到暗色油。經二氧化矽色譜處理該油，用20-80％EtOAc/己烷洗脫，得到2.95g(71％)黃色油。MS(ES)259(M+1)，261(M+H+2)。
製備26 N-[9-[2-(2，5-二甲基吡咯-1-基)噻唑-5-基]-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
合併N-[9-(3-氟苄基)-6-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]-二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(製備20)(0.458g，0.934mmol)、5-溴-2-(2，5-二甲基吡咯-1-基)噻唑(製備22)(0.312g，1.21mmol)、二氯[1，2-二(二苯基膦基)-二茂鐵]鈀II二氯甲烷複合物(0.137g，0.168mmol)、2MNa2CO3(10mL)和二噁烷(12mL)並用氬吹掃5分鐘。將混合物回流加熱18小時。傾至水中，用EtOAc萃取並經二氧化矽色譜處理，得到標題化合物，為褐色固體。MS(ES)m/z 541(M+1)；HPLC Rt＝5.87min，(97％)。
實施例140 N-[9-[2-(氨基噻唑-5-基]-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
用鹽酸羥胺(0.257g，3.70mmol)、三乙胺(0.15mL，1.1mmol)和1MNaOH(1.1mL)在無水EtOH(2mL)中處理N-[9-[2-(2，5-二甲基吡咯-1-基)噻唑-5-基]-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(製備26)(0.200g，0.370mmol)並回流加熱，直至TLC(70％EtOAc/己烷)顯示反應完全。萃取並蒸發，得到標題化合物。MS(ES)m/z 463(M+1)。
實施例141 (R)-N-[9-[2-(氨基噻唑-5-基]-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
基本上如實施例140所述、從(R)-N-[9-(3-氟苄基)-6-(4，4，5，5-四甲基[1，3，2]二氧雜硼雜環戊烷-2-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(製備24)開始製備手性產物。MS(ES)m/z 363(M+1)；HPLCRt＝1.90min(97％)。
製備27 5-溴-2-(2，5-二甲基吡咯-1-基)吡啶
使用基本上如對5-溴-2-(2，5-二甲基吡咯-1-基)噻唑(製備25)所述工藝、從2-氨基-5-溴吡啶開始進行製備。MS(ES)m/z 252(M+1)。
製備28 N-[6-[6-(2，5-二甲基吡咯-1-基)-吡啶-3-基]-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
使用基本上如製備26所述工藝製備標題化合物，得到類白色固體。MS(ES)m/z 535(M+1)；HPLCRt＝4.32min，(100％)。
實施例142 N-[6-(6-(氨基-吡啶-3-基)-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺
基本上如以上實施例140所述自N-[6-[6-(2，5-二甲基吡咯-1-基)-吡啶-3-基]-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(製備28)製備標題化合物。MS(ES)m/z 457(M+1)；HPLCRt＝1.79min，(95％)。
製備29 N-(6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
將乙醯氯(8.5mL，120mmol)加至無水乙醇(30mL)中並攪拌1小時。加入4-甲氧基苯肼鹽酸鹽(1.74g，10mmol)和N-(4-氧代-環己基)-異丁醯胺(製備2)(1.83g，120mmol)並攪拌回流56小時。冷卻至室溫，用乙酸乙酯(100mL)稀釋並用碳酸氫鈉溶液(2×50mL)和鹽水洗滌。乾燥有機部分(MgSO4)，過濾並在真空中濃縮。溶解於二氯甲烷並通過矽膠墊，用20％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脫。得到2.32g固體。在乙醚和少量二氯甲烷中研磨固體，過濾並在中央低真空下乾燥，得到2.14g(75％)類白色固體。MS(ES)m/z 287(M+1)+，285(M-1)-；1H NMR(DMSO-d6)δ10.52(s，1H)，7.83(d，1H，J＝7.5Hz)，7.13(d，1H，J＝8.8Hz)，6.85(s，1H)，6.64(dd，1H，J＝8.8，2.2Hz)，4.02(m，1H)，3.75(m，3H)，2.90(dd，1H，J＝15.0，5.3Hz)，2.78(m，2H)，2.42(m，2H)，1.96(m，1H)，1.79(m，1H)，1.03(d，6H，J＝6.6Hz)。
實施例143 N-(6-甲氧基-9-吡啶-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
在氮氣下將N-(6-甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(200mg，0.70mmol)溶解於四氫呋喃(6mL)。滴加二(三甲基甲矽烷基)氨化鉀(3.2mL，1.6mmol，0.5M甲苯溶液)並攪拌30分鐘。緩慢加入含2-(氯甲基)吡啶鹽酸鹽(131mg，0.80mmol)的THF/DMF(0.4mL/1.3mL)並在環境溫度攪拌18小時。用飽和氯化銨溶液(0.5mL)淬滅並在乙酸乙酯和水之間分配。分離兩相，用乙酸乙酯洗滌水相(2×)。乾燥合併的有機部分(MgSO4)，過濾並在真空中濃縮，得到殘餘物。通過矽膠色譜純化產物，用50％乙酸乙酯/二氯甲烷至80％乙酸乙酯/二氯甲烷的梯度洗脫，得到199mg(75％)淺黃色固體。MS(ES)m/z 378(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)δ8.50(dd，1H，J＝4.8，0.9Hz)，7.82(d，1H，J＝7.5Hz)，7.65(dt，1H，J＝7.6，1.6Hz)，7.22(m，2H)，6.89(d，1H，J＝2.2Hz)，6.77(d，1H，J＝7.9Hz)，6.63(dd，1H，J＝8.6，2.4Hz)，5.32(s，2H)，3.97(m，1H)，3.72(s，3H)，2.91(dd，1H，J＝15.0，5.3Hz)，2.85-2.76(m，1H)，2.74-2.64(m，1H)，2.45(m，1H)，2.37(m，1H)，1.94(m，1H)，1.77(m，1H)，0.99(m，6H)。
基本上如以上實施例143所述、分別使用以下雜甲基試劑，製備下表中的實施例144至1463-(氯甲基)吡啶鹽酸鹽、4-(氯甲基)吡啶鹽酸鹽和2-(氯甲基)吡啶鹽酸鹽。
製備30 (4-甲基-噻唑-2-基)-甲醇
方法A將4-甲基-噻唑-2-甲醛(根據基本上如Khanna，I.K.等人，J.Med.Chem.(2000)43，3168-3185所述工藝製備，產率92％)(15.0g，118mmol)溶解於EtOH(250mL)並加入硼氫化鈉(2.23g，59.0mmol)。在室溫攪拌1小時，然後小心向反應混合物加入NH4Cl水溶液(50mL)。在45℃真空中濃縮以除去EtOH。用水(50mL)稀釋並萃取至EtOAc中(3×100mL)。乾燥合併的有機部分(MgSO4)，過濾並在45℃真空中濃縮，得到14.39g(94％)標題化合物，為黃色油。MS(ES)130(M+1)；1H NMR(CDCl3)δ6.88(s，1H)，4.94(s，2H)，3.16(s，1H)，2.46(s，3H)。
方法B作為替代選擇，將4-甲基-噻唑-2-甲酸乙酯(根據基本上如Erlenmeyer，H.，et al.，Helv.Chim.Acta(1944)，27，1437-1438所述工藝製備，產率27％)(1.52g，8.88mmol)溶解於THF(60mL)並加入硼氫化鈉(2.0MTHF溶液，9mL，17.8mmol)。在回流溫度加熱18小時。使其冷卻至室溫並用水稀釋反應混合物(20mL)。萃取至乙酸乙酯中(3×50mL)。乾燥合併的有機部分(MgSO4)，過濾並在45℃真空中濃縮。在矽膠(40g)上純化殘餘產物，用40-80％EtOAc/己烷洗脫，得到690mg(60％)標題化合物，為無色油。
製備31 噻唑-5-基-甲醇
根據文獻工藝製備標題化合物(McElhinney，R.S.等人，J.Med.Chem.(1998)41，5265-5271)。
製備32 (2-氯-噻唑-4-基)-甲醇
基本上按照製備27(方法B)所述工藝、使用2-氯-噻唑-4-甲酸乙酯(根據基本上如Erlenmeyer，H.，et al.，Helv.Chim.Acta(1944)27，1432-1436所報導的工藝製備)製備標題化合物。MS(ES)m/z 150(M+1)；1H NMR(CDCl3)δ7.16(t，1H，J＝1.0Hz)，4.75(d，2H，J＝0.9Hz)，2.48(s，1H)。
製備33 (5-氯-噻吩-2-基)-甲醇
將5-氯-噻吩-2-甲酸乙酯(5.0g，28mmol)在Et2O(100mL)中的溶液滴加至氫化鋁鋰(1.1g，28mmol)在Et2O中的混合物。在室溫攪拌18小時，然後用水和20％NaOH水溶液淬滅反應。萃取至Et2O/EtOAc中，乾燥(Na2SO4)，過濾並濃縮有機部分，得到粗產物。通過真空蒸餾純化，得到3.4g油，沸點160℃/20mm Hg.MS[FD]148；元素分析計算值C5H5ClOSC，40.41；H，3.39。實測值C，39.59；H 3.59。
製備34 甲磺酸4-甲基-噻唑-2-基甲基酯
合併4-甲基-噻唑-2-基)-甲醇(製備30)(1.00g，7.74mmol)和三乙胺(1.25g，1.73mL，12.4mmol)於二氯甲烷(30mL)中，同時攪拌，在氮氣下冷卻至0℃。向反應混合物加入甲磺醯氯(931mg，633μL，8.13mmol)並在0℃攪拌30分鐘。歷經30分鐘溫至室溫，然後用水(40mL)和二氯甲烷(40mL)稀釋。分離各層，乾燥有機部分(MgSO4)，過濾並在40℃真空中濃縮，得到1.15g(72％)標題化合物，為棕色油。MS(ES)m/z 208(M+1)；1H NMR(CDCl3)δ7.03(m，1H)，5.48(s，2H)，3.11(s，3H)，2.50(d，3H，J＝0.9Hz)。
製備35 甲磺酸2-氯-噻唑-4-基甲基酯
基本上按照製備31所述工藝、使用(2-氯-噻唑-4-基)-甲醇(製備29)製備標題化合物，得到的標題化合物為無色油。1H NMR(CDCl3)δ7.39(s，1H)，5.27(d，2H，J＝0.9Hz)，3.10(s，3H)。
製備36 2-溴甲基-噻唑
根據文獻工藝製備標題化合物(Yang，L等人，Bioorg.Med.Chem.Lett.(1999)9，1761-1766)。
製備37 2-溴甲基-5-氯-噻吩
冷卻(5-氯-噻吩-2-基)-甲醇(製備30)(330mg，2.22mmol)至0℃並加入乙醯溴(709mg，430μL，5.76mmol)。使其歷經18小時溫至室溫，用EtOAc(10mL)稀釋並小心加入飽和NaHCO3溶液(3mL)。當二氧化碳停止逸出時，將混合物加載至Varian Chem Elut CE1005固相萃取柱(Varian部件編號12198006)。用EtOAc洗脫，收集並濃縮至約50mL，得到粗產物。在矽膠(12g)上使用0-15％EtOAc/己烷純化，得到250mg(53％)標題化合物，為黃色油。MS(EI)210，212；1H NMR(CDCl3)δ6.92(d，1H，J＝3.5Hz)，6.78(d，1H，J＝4.0Hz)，4.66(s，2H)。
實施例147 N-(6-氰基-9-噻唑-4-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
使4-氯甲基-噻唑鹽酸鹽(199mg，1.17mmol)在Et2O(20mL)和飽和NaHCO3水溶液(20mL)之間分配。分離各層，經MgSO4乾燥醚層。將DMF(3mL)加至醚層，在真空中濃縮以除去醚。將該溶液加至N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備3)(300mg，1.07mmol)和氫化鈉(60％礦物油懸液，47mg，1.17mmol)在DMF(3mL)中的漿液中，該漿液已在室溫攪拌30分鐘。在室溫攪拌反應物2小時，然後加入NaHCO3水溶液(30mL)和EtOAc(50mL)。分離各層，用NaHCO3水溶液洗滌有機部分(2×30mL)。乾燥有機層(MgSO4)。過濾並在真空中濃縮，得到487mg粗製黃色油。自沸騰甲苯(10mL)重結晶產物，得到296mg(73％)標題化合物，為黃色固體。MS(ES)m/z 379(M+1)，377(M-1)；1H NMR(DMSO-d6)δ9.01(d，1H，J＝1.8Hz)，7.90(d，1H，J＝1.3Hz)，7.84(d，1H，J＝7.9Hz)，7.69(d，1H，J＝8.4Hz)，7.56(d，1H，J＝1.8Hz)，7.40(dd，1H，J＝8.6，1.5Hz)，5.47(s，2H)，3.99(m，1H)，3.03-2.81(m，3H)，2.49(m，1H)，2.37(m，1H)，1.98(m，1H)，1.80(m，1H)，0.99(d，6H，J＝7.0Hz)；HPLC(方法A)Rt＝1.93min，(97％)。
實施例148 N-[9-(5-氯-噻吩-2-基甲基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例147所述工藝、使用2-溴甲基-5-氯-噻吩(製備37)製備標題化合物。通過矽膠色譜(50-90％EtOAc/己烷)純化，得到產物，產率24％，為黃色固體。MS(ES)m/z 412(M+1)，410(M-1)；HPLC(方法A)Rt＝2.86min，(92％)。
實施例149 N-(6-氰基-9-噻唑-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
基本上按照實施例147所述工藝、使用2-溴甲基-噻唑(製備36)製備標題化合物。通過矽膠色譜(80-100％EtOAc/己烷)純化，得到產物，產率55％，為白色固體。MS(ES)m/z 379(M+1)，377(M-1)；HPLC(方法A)Rt＝1.88min，(100％)。
實施例150 N-[6-氰基-9-(2-甲基-噻唑-4-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例147所述工藝、使用4-氯甲基-2-甲基噻唑鹽酸鹽製備標題化合物。通過自沸騰甲苯重結晶純化粗物質，得到產物，產率75％。MS(ES)m/z 393(M+1)，391(M-1)；HPLC(方法A)2.14min，(100％)。
實施例151 (R)-N-[6-氰基-9-(2-甲基-噻唑-4-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
通過製備型手性色譜、使用以下條件自97.7％ee外消旋N-[6-氰基-9-(2-甲基-噻唑-4-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例150)製備標題化合物Chiralpak AD(8×30cm)，75∶15∶10庚烷∶EtOH∶MeOH(350mL/min)，240nm檢測。首先洗脫標題化合物，其次洗脫另一對映體(實施例152)。MS(ES)m/z 393(M+1)，391(M-1)；1H NMR(CDCl3)δ7.95(d，1H，J＝1.1Hz)，7.88(d，1H，J＝7.7Hz)，7.72(d，1H，J＝8.4Hz)，7.44(dd，1H，J＝8.6，1.5Hz)，5.40(s，2H)，4.04(m，1H)，2.95(m，3H)，3.05-2.85(m，3H)，2.59(s，3H)，2.56(m，1H)，2.41(m，1H)，2.02(m，1H)，1.85(m，1H)，1.03(d，6H，J＝6.8Hz)。
實施例152 (S)-N-[6-氰基-9-(2-甲基-噻唑-4-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
通過製備型手性色譜、使用以下條件自93.6％ee外消旋N-[6-氰基-9-(2-甲基-噻唑-4-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例154)製備標題化合物Chiralpak AD(8×30cm)，75∶15∶10庚烷∶EtOH∶MeOH(350mL/min)，240nm檢測。標題化合物是第二個所洗脫的異構體。MS(ES)m/z 393(M+1)，391(M-1)。. 實施例153 N-[9-(2-氯-噻唑-4-基甲基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例143所述工藝、使用甲磺酸2-氯-噻唑-4-基甲基酯(製備35)(190mg，1.0mmol)和N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(製備4)製備標題化合物，得到的產物為白色固體(21％)。MS(ES)m/z 413(M+1)，411(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝4.66min，(96％)。
製備38 (R)-N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
將(R)-N-(6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備21)(1.00g，2.98mmol)溶解於1-甲基-2-吡咯烷酮(30mL)。用氮衝洗所得溶液15分鐘。加入氰化亞銅(I)(801mg，8.95mmol)和碘化亞銅(I)(1.70g，8.95mmol)。加熱至130℃達3天，然後冷卻至室溫。用水(100mL)、EtOAc(250mL)和足夠的乙二胺稀釋反應混合物以溶解銅固體(約70mL)。分離各層，然後用水洗滌有機層(2×50mL)。經MgSO4乾燥有機部分。過濾，濃縮並在矽膠(80g)上用50-80％EtOAc/己烷純化，得到530mg(63％)標題化合物，為白色固體。MS(ES)282(M+1)，280(M-1)；1H NMR(CDCl3)δ8.44(s，1H)，7.76(s，1H)，7.40(dd，1H，J＝8.4，1.3Hz)，7.37(d，1H，J＝8.5Hz)，5.64(d，1H，J＝7.5Hz)，4.42(m，1H)，3.11(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.98-2.80(m，2H)，2.59(dd，1H，J＝15.4，7.5Hz)，2.38(m，1H)，2.17(m，1H)，2.02(m，1H)，1.21(d，6H，J＝7.0Hz)；手性HPLCChiralcel OD-H 0.46×15cm柱，1585EtOH/庚烷，1.0mL/min，225nm檢測；Rt＝7.37min；＞99％ee。
實施例154 (R)-N-[9-(2-氯-噻唑-4-基甲基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例147所述工藝、使用(R)-N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備38)和甲磺酸2-氯-噻唑-4-基甲基酯(製備35)製備標題化合物，得到產物，產率49％，為淺黃色固體。MS(ES)m/z 413(M+1)，411(M-1)；1H-NMR(CDCl3)δ7.82(d，1H，J＝0.9Hz)，7.43(dd，1H，J＝8.6，1.5Hz)，7.34(d，1H，J＝8.4Hz)，6.59(s，1H)，5.59(d，1H，J＝7.9Hz)，5.32(s，2H)，4.44(m，1H)，3.16(dd，1H，J＝15.4，4.8Hz)，2.89(t，2H，J＝5.9Hz)，2.64(dd，1H，J＝15.6，7.3Hz)，2.38(m，1H)，2.20(m，1H)，2.06(m，1H)，1.20(d，6H，J＝7.0Hz)。
製備39 (2-氯-噻唑-5-基)-甲醇
用硼氫化鈉(60mg，1.6mmol)處理2-氯-5-噻唑甲醛(350mg，2.4mmol)的EtOH溶液(10mL)。1小時後，小心地用飽和氯化銨溶液淬滅並在減壓下除去EtOH。使反應混合物在EtOAc/水之間分配。乾燥有機部分(Na2SO4)，過濾並濃縮，得到296mg(82％)標題化合物，為無色油。MS(ES)m/z 150(M+1)；HPLC(方法B)Rt＝1.86min(98％)。
製備40 甲磺酸2-氯-噻唑-5-基甲基酯
基本上按照製備34所述工藝、使用(2-氯-噻唑-5-基)-甲醇(200mg，1.3mmol)製備標題化合物，得到277mg(93％)標題化合物。不經進一步純化即可使用。1H NMR(CDCl3)δ7.62(s，1H)，5.38(s，2H)，3.05(s，3H)。
實施例155 N-[9-(2-氯-噻唑-5-基甲基)-6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例143所述工藝、使用甲磺酸2-氯-噻唑-5-基甲基酯(製備40)(1.3mmol)和N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(製備4)(281mg，1.0mmol)製備標題化合物，得到的產物為白色固體(10％)。MS(ES)m/z 413(M+1)，411(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝3.99min，(95％)。
實施例156 (R)-N-[6-氰基-9-(4-甲基-噻唑-2-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例147所述工藝、使用(R)-N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備38)和甲磺酸4-甲基-噻唑-2-基甲基酯(製備34)製備標題化合物，得到產物，產率54％，為白色固體。MS(ES)m/z 393(M+1)，391(M-1)；1H-NMR(CDCl3)δ7.83(d，1H，J＝0.9Hz)，7.45(dd，1H，J＝8.6，1.5Hz)，7.41(d，1H，J＝7.9Hz)，6.82(d，1H，J＝0.9Hz)，5.56(d，1H，J＝7.9Hz)，5.53(s，2H)，4.45(m，1H)，3.16(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.98-2.82(m，2H)，2.64(dd，1H，J＝15.9，7.0Hz)，2.47(d，3H，J＝0.9Hz)，2.36(m，1H)，2.20(m，1H)，2.08(m，1H)，1.19(dd，6H，J＝7.0，1.8Hz)。
實施例157 N-(6-氰基-9-噻吩-3-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
向N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備3)(100mg，0.36mmol)在THF(2mL)中的0℃漿液相繼加入三甲基膦(1.0M甲苯溶液，530μL，0.53mmol)、3-噻吩甲醇(61mg，50μL，0.53mmol)和1，1』-(偶氮二羰基)-二哌啶(ADDP，134mg，0.53mmol)。溫至室溫並在密閉瓶中攪拌18小時。蒸發反應溶劑並將殘餘物溶解於EtOAc(5mL)。加入水(2mL)並加載至Varian Chem Elut CE1005固相萃取柱(Varian部件編號12198006)。用EtOAc洗脫，收集並濃縮(約50mL)。在矽膠(12g)上用30-90％EtOAc/己烷洗脫純化粗產物，得到標題化合物，產率11％，為無色油。MS(ES)m/z 378(M+1)，376(M-1)；1H NMR(CDCl3)δ7.81(s，1H)，7.40(dd，1H，J＝8.4，1.2Hz)，7.33(d，1H，J＝8.4Hz)，7.30(m，1H)，6.86-6.81(m，2H)，5.60(d，1H，J＝7.5Hz)，5.29(s，2H)，4.41(m，1H)，3.16(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.90-2.72(m，2H)，2.63(dd，1H，J＝15.4，7.5Hz)，2.36(m，1H)，2.16(m，1H)，2.02(m，1H)，1.18(dd，7H，J＝6.8，3.7Hz)，1.18(dd，6H，J＝6.8，3.7Hz)。
實施例158 N-(6-氰基-9-噻吩-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
基本上按照實施例157所述工藝、使用2-噻吩甲醇製備標題化合物，得到產物，產率15％，為白色固體。MS(ES)m/z 378(M+1)，376(M-1)；HPLC(方法A)Rt＝2.34min，(99％)。
實施例159 N-(6-氰基-9-噻唑-5-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
在0℃、氮氣下向氰基甲基-三甲基-氯化鏻(根據基本上如Tsunoda，T.；et al.，Tetrahedron Lett.(1996)37，2459-2462所述工藝製備)(166mg，1.10mmol)的漿液加入氫化鉀(30％w/w礦物油分散體，129mg，0.97mmol)。令反應混合物溫至室溫並攪拌3小時。加入噻唑-5-基甲醇(100mg，0.87mmol)在THF(2mL)中的溶液，然後加入N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備5)(122mg，0.44mmol)並在70℃加熱18小時。冷卻至室溫並用水(40mL)稀釋。萃取至EtOAc(3×50mL)中並乾燥有機部分(MgSO4)。過濾並濃縮，得到粗產物(340mg)，為黃色油。在矽膠(24g)上使用5％(2M NH3/MeOH)/CH2Cl2純化，然後在矽膠(40g)上使用80∶18∶2EtOAc∶己烷∶(2M NH3/MeOH)再次純化，得到70mg(42％)標題化合物，為橙色固體。MS(ES)m/z 379(M+1)，377(M-1)；1H-NMR(CDCl3)δ8.78(s，1H)，7.83(d，1H，J＝1.3Hz)，7.74(s，1H)，7.47(dd，1H，J＝8.6，1.5Hz)，7.38(d，1H，J＝8.4Hz)，5.53(d，1H，J＝7.9Hz)，5.50(s，2H)，4.42(m，1H)，3.16(dd，1H，J＝15.4，5.3Hz)，2.97-2.80(m，2H)，2.62(dd，1H，J＝15.4，7.5Hz)，2.37(m，1H)，2.21(m，1H)，2.05(m，1H)，1.20(dd，6H，J＝7.0，1.8Hz)。
製備41 反-(4-羥基-環己基)-氨基甲酸苄基酯
按照基本上如文獻所述工藝(Janda，K.D.；Ashley，J.A.Synth.Comm.1990，20，1073-1082)，不同的是將有機層在減壓下反覆濃縮並過濾所得沉澱。不將反應混合物濃縮至幹，而是僅僅濃縮至顯著量的沉澱已形成。使用該改進的工藝，得到產率80％，規模35.00g。
製備42 (4-氧代-環己基)-氨基甲酸苄基酯
將草醯氯(18.4mL，211mmol)溶解於CH2Cl2(1000mL)，冷卻至-70℃以下並歷經30分鐘經由注射器加入DMSO(18.0mL，253mmol)。攪拌45分鐘，然後分批加入反-(4-羥基-環己基)-氨基甲酸苄基酯(35.00g，140mmol)在CH2Cl2(1000mL)中的懸液，同時保持溫度低於-70℃。加入懸液時除去反應燒瓶的塞子並迅速傾倒入可能多的懸液，同時保持溫度低於-70℃，完全加入後得到稍微混濁的溶液。將反應物攪拌90分鐘，然後經由注射器緩慢加入三乙胺(97.8mL，702mmol)。攪拌另外1小時，使反應物緩慢溫至室溫過夜。相繼用水(1500mL)、鹽水(2×1500mL)和飽和NaHCO3水溶液(2×1500mL)洗滌。分離有機部分並乾燥(MgSO4)，過濾，在減壓下濃縮。將粗殘餘物用4∶1己烷/EtOAc(500mL，然後250mL)研磨兩次。(作為替代選擇，用15％EtOAc/己烷研磨。僅需研磨一次)。過濾，收集固體並在35℃真空爐中乾燥，得到26.44g產物。合併研磨的濾液並在減壓下濃縮，繼而在9∶1己烷/EtOAc(100mL)中研磨殘餘物，得到第二份產物5.70g，合併產率32.14g(93％)。ESI MSm/z 248[C14H17NO3+H]+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ1.63-1.78(m，2H)，2.22-2.27(m，2H)，2.32-2.49(m，4H)，3.95-4.04(m，1H)，4.75(br s，1H)，5.11(s，2H)，7.29-7.42(m，5H)。
製備43 (6-三氟甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸苄基酯
合併4-(三氟甲基)苯肼鹽酸鹽(31.9g，140mmol)和(4-氧代-環己基)-氨基甲酸苄基酯(製備42)(34.6g，140mmol)並加入乙酸(700mL)。加熱反應物至90℃過夜，冷卻至室溫並在減壓下濃縮。通過快速色譜(矽膠，9∶1氯仿∶丙酮)純化殘餘物，研磨(9∶1己烷∶二氯甲烷)，得到50.9g(90％)標題化合物，為褐色固體，mp 123-126℃.MS(ES)m/z 403(M-1)；1H NMR(CDCl3)δ7.86(s，1H)，7.28-7.36(m，5H)，7.26(m，1H)，7.23(d，J＝8.8Hz，1H)，6.99(dd，J＝1.3，8.7Hz，1H)，5.11(s，2H)，4.90-4.92(m，1H)，4.18(m，1H)，3.08(dd，J＝4.9，15.4Hz，1H)，2.76-2.89(m，2H)，2.59(dd，J＝6.8，15.3Hz，1H)，2.08-2.16(m，1H)，1.93-2.04(m，1H)。
製備44 2-溴甲基-6-氟-吡啶
合併2-甲基-6-氟-吡啶(19.6g，176mmol)、1，1』-偶氮雙-(環己烷-甲腈)(0.431g，1.77mmol)和新鮮重結晶的N-溴-琥珀醯亞胺(32.96g，185mmol)於四氯化碳(200mL)中並在1000mL燒瓶中伴以紫外光照射攪拌18小時。使其冷卻，然後過濾除去琥珀醯亞胺並用稀Na2S2O3溶液洗滌。經Na2SO4乾燥，過濾並蒸發，得到琥珀色油。通過矽膠色譜純化，用0-30％EtOAc/己烷洗脫，得到12.3g(37％)澄清油。MS 100％(m/e)190(EI)；1H NMR(DMSO，400MHz)δ8.03-7.95(m，1H)，8.03-7.95(m，1H)，7.48(dd，1H，J＝7.5，2.6Hz)，7.11(dd，1H，J＝7.9，2.6Hz)，4.63(s，2H)。
製備45 [9-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-6-三氟甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸苄基酯
將Cs2CO3(6.44g，19.8mmol)加至(6-三氟甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸苄基酯(製備43)(4.00g，9.88mmol)和2-溴甲基-6-氟吡啶(製備44)(3.11g，13.8mmol)在DMF中的溶液(40mL)。加熱反應混合物至50℃達18小時，然後用EtOAc(120mL)稀釋。用水洗滌有機相(3×40mL)，乾燥(MgSO4)，過濾並濃縮，得到粗產物(5.40g)，為棕色油。在矽膠(120g)上用25-45％EtOAc/己烷洗脫純化粗產物，得到2.85g(56％)標題化合物，為褐色油。MS(ES)m/z 514(M+1)；HPLC(方法A)Rt＝4.54min(95％)。
製備46 [9-(3-氟苄基)-6-三氟甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸苄基酯
基本上按照製備45所述工藝、使用3-氟苄基溴製備標題化合物，得到6.15g(95％)淡黃色油。在矽膠上純化(10-60％EtOAc/己烷)，得到標題化合物，產率95％。MS(ES)m/z 513(M+1)，513(M-1)；HPLC(方法A)Rt＝6.23min(97％)。
實施例160 (R)-N-(6-氰基-9-吡嗪-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
基本上按照製備45所述工藝、使用(R)-N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備38)和2-氯甲基吡嗪(根據基本上如Newkome，G.R等人，Synthesis 1984，8，676-679所述文獻工藝製備)製備標題化合物。在矽膠上純化(EtOAc)，得到標題化合物，為淺黃色固體。MS(ES)m/z 374(M+1)，372(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝2.34min(98％)。
實施例161 (R)-N-(6-氰基-9-吡啶-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺
基本上按照製備45所述工藝、使用(R)-N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備35)和2-氯甲基吡啶HCl製備標題化合物，得到的標題化合物為白色固體。MS(ES)m/z 373(M+1)；HPLC(方法B)Rt＝2.79min(100％)。
製備47 9-(6-氟吡啶-2-基甲基)-6-三氟甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基胺
將[9-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-6-三氟甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸苄基酯(製備45)(2.73g，5.32.mmol)溶解於EtOH(100mL)和THF(50mL)。加入10％Pd/C(200mg)並在室溫於氫氣囊下攪拌18小時。通過
墊過濾反應物，用THF(50mL)漂洗墊並在真空中濃縮濾液，得到2.37g(90％)標題化合物，為暗棕色油。MS(ES)m/z 380(M+1)；HPLC(方法A)Rt＝1.76min(89％)。
製備48 9-(3-氟苄基)-6-三氟甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基胺
基本上按照製備47所述工藝、使用[9-(3-氟苄基)-6-三氟甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸苄基酯(製備46)製備標題化合物，得到4.08g(92％)標題化合物，為棕色油。MS(ES)m/z 379(M+1)弱，362(M+1-NH3)；HPLC(方法A)Rt＝1.83min(89％)。
實施例162 N-[9-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-6-三氟甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將9-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-6-三氟甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基胺(製備47)(580mg，1.53mmol)和三乙胺(201mg，277μL，1.99mmol)溶解於CH2Cl2(20mL)。緩慢加入異丁醯氯(212mg，208μL，1.99mmol)並在室溫攪拌18小時。用稀HCl(10mL)稀釋反應混合物，然後加載反應物至VarianChemElut CE1020固相萃取柱(Varian部件編號12198008)。洗脫，收集並濃縮125mL CH2Cl2，得到粗產物(794mg)，為棕色油。在矽膠(40g)上用35-65％EtOAc/己烷洗脫純化粗產物，得到358mg(52％)標題化合物，為黃色泡沫。MS(ES)m/z 450(M+1)，448(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝8.21min(100％)。
基本上如以上實施例162所述、分別使用以下氯醯基試劑製備下表中的實施例163至165環丙烷碳醯氯、氯甲酸甲酯和二甲基氨基甲醯氯。
基本上如以上實施例162所述、使用9-(3-氟苄基)-6-三氟甲氧基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基胺(製備45)和以下各個氯醯基試劑製備下表中的實施例166至169異丁醯氯、環丙烷碳醯氯、氯甲酸甲酯和二甲基氨基甲醯氯。
製備49 6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸叔丁基酯
按照基本上如製備3(方法1)所述工藝。混合對-溴苯肼鹽酸鹽(1.99g，8.9mmol)和(4-氧代-環己基)-氨基甲酸叔丁基酯(1.9g，8.9mmol)於乙醇(50mL)中，自甲苯中重結晶後得到780mg(25％)標題化合物。MS(ES)363，365(M-1)；HPLCRt＝3.39min，(94％)。
製備50 [6-溴-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸叔丁基酯
基本上按照實施例96所述工藝、使用6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸叔丁基酯(6.0g，16.4mmol)、間-氟苄基溴(2.2mL，18mmol)和氫化鈉(720mg，60％，18mmol)製備標題化合物。通過柱色譜、使用己烷/EtOAc純化，得到5.95g(77％)。MS(ES)m/z 473，475(M+1)；HPLCRt＝7.24min，(97％)。
製備51 6-溴-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基胺鹽酸鹽
為除去-BOC保護基，將[6-溴-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸叔丁基酯(6.0mg，12.7mmol)溶解於4N HCl的二噁烷溶液(100mL)。攪拌10分鐘，然後加入更多二噁烷(50mL)以幫助攪拌粘稠的白色固體。收集固體，用乙醚洗滌，得到5.2g(99％)6-溴-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基胺HCl鹽。MS(ES)m/z 356，358(M+1)；HPLCRt＝1.84min，(96％)。
實施例170 環丙烷甲酸[6-溴-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
混合6-溴-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基胺鹽酸鹽(195mg，0.48mmol)、三乙胺(210μL，1.5mmol)、環丙烷碳醯氯(55μL，0.6mmol)於二氯甲烷(10mL)中並在室溫攪拌18小時。振蕩反應物與稀HCl/水/EtOAc。乾燥(MgSO4)有機層並濃縮，得到120mg粗產物。重結晶(EtOH)，得到50mg(24％)標題化合物。MS(ES)m/z 441，443(M+1)；1H NMR(CDCl3)δ7.63(s，1H)，7.27(m 2H)，7.08(d，1H)，6.92(t，1H)，6.75(d，1H)，6.63(d，1H)，5.58(br d，1H)，5.23(s，2H)，4.44(br m，1H)，3.13(dd，1H)，2.74(m，2H)，2.64(dd，1H)，2.23(m，2H)，2.16(m，1H)，2.02(m，1H)，1.09(m，4H)；HPLCRt＝3.55min，(95％)。
按照基本上如實施例170所述工藝製備下表中的實施例171至175。
實施例176 3-[6-溴-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-1，1-二甲基-脲
混合6-溴-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基胺HCl(製備51)(200mg，0.49mmol)、N，N-二甲基氨基甲醯氯(54μL，63mg，0.59mmol)、三乙胺(205μL，149mg，1.47mmol)、CH2Cl2(6mL)和N-甲基吡咯烷酮(2mL)。在室溫攪拌18小時，然後加入更多N，N-二甲基氨基甲醯氯(54μL，63mg，0.59mmol)。在室溫下攪拌60小時，然後蒸發溶劑。用EtOAc(80mL)稀釋殘餘物，用HCl(＜1N水溶液，40mL)和NaHCO3水溶液洗滌有機相。乾燥(MgSO4)，過濾並濃縮有機部分，得到308mg粗產物，為棕色油。在矽膠(12g)上用80-100％EtOAc/己烷洗脫純化，得到164mg(75％)標題化合物，為白色泡沫。MS(ES)444，446(M+1)；HPLCRt＝3.27min，(92％)。
製備52 6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸叔丁基酯
如C Chen等人，J.Org.Chem.(1997)62，2676-2677所述，混合3-碘-4-氨基苄腈(T.H.Jonckers等人，J.Med.Chem.45(16)3497-3508(2002))(1.3g，5.3mmol)和(4-氧代-環己基)-氨基甲酸叔丁基酯(3.4g，16mmol)、1，4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(DABCO)(1.8g，16mmol)、硫酸鎂(960mg，8mmol)和DMF(30mL)。用氮衝洗攪拌的混合物達10分鐘，加入醋酸鈀(II)(58mg，0.26mmol)並置於105℃預熱的油浴中。18小時後，冷卻並用EtOAc稀釋。重力過濾反應物至分液漏鬥中並與水/EtOAc振蕩。乾燥有機層(MgSO4)並濃縮，得到暗棕色油。用己烷研磨(不溶物是原料酮)。濃縮己烷溶液並經矽膠色譜(120g)純化，用二氯甲烷(0-40min)、然後10％EtOAc/二氯甲烷(40-70min)洗脫，得到550mg(33％)類白色泡沫。MS(ES)m/z 312(M+1)，310(M-1)；HPLCRt＝2.30min，(97％)。
製備53 [6-氰基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸叔丁基酯
按照基本上如實施例96所述工藝、使用6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸叔丁基酯(2.0g，6.4mmol)、間-氟苄基溴(0.982mL，8mmol)和含60％NaH(435mg，10.9mmol)的DMF(70mL)，經快速色譜、使用EtOAc/己烷純化後，得到1.41g(53％)標題化合物。MS(ES)m/z 420(弱)(M+1)，418(弱)(M-1)；HPLCRt＝3.86min，(100％)。
製備54 6-氨基-9-(3-氟-苄基)-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲腈鹽酸鹽
基本上按照製備48所述工藝、從[6-氰基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸叔丁基酯(1.38g，3.28mmol)和4N HCl/二噁烷(10mL)開始製備標題化合物，得到1.02g(87％)。MS(ES)m/z 320(弱)(M+1)；HPLCRt＝1.64min，(92％)。
實施例177 環丙烷磺酸[6-氰基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-醯胺
在氮氣下合併6-氨基-9-(3-氟-苄基)-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲腈鹽酸鹽(製備54)(125mg，0.35mmol)和三乙胺(0.195mL，1.4mmol)於二氯甲烷(3mL)中。加入含環丙基磺醯氯(51mg，0.36mmol)的二氯甲烷(1mL)。在室溫攪拌18小時。直接通過快速色譜純化反應溶液，用20％乙酸乙酯/己烷、然後梯度至50％乙酸乙酯/己烷洗脫，得到80mg。在乙醚中研磨，得到61mg(41％)褐色固體。MS(ES)m/z 424(M+1)，422(M-1)；1HNMR(DMSO-d6)δ7.98(d，1H，J＝1.3Hz)，7.56(d，1H，J＝8.4Hz)，7.41(dd，1H，J＝8.4，1.3Hz)，7.36-7.30(m，2H)，7.07(dt，1H，J＝8.7，2.5Hz)，6.88(d，1H，J＝9.7Hz)，6.83(d，1H，J＝7.9Hz)，5.42(d，2H，J＝5.3Hz)，3.68(m，1H)，3.10(dd，1H，J＝15.4，5.3Hz)，2.90-2.81(m，1H)，2.79-2.61(m，3H)，2.13(m，1H)，1.86(m，1H)，0.98-0.91(m，4H)。
實施例178 3-[6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-1，1-二甲基脲
基本上按照實施例162所述工藝、使用6-氨基-9-(3-氟-苄基)-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲腈鹽酸鹽(製備54)和二甲基氨基甲醯氯製備標題化合物。通過矽膠色譜(30-70％(4％(2M NH3/MeOH)/CH2Cl2)己烷)純化，得到標題化合物，產率69％，為白色固體。MS(ES)m/z 391(M+1)，389(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝4.11min(99％)。
製備55 [6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸4-硝基苯基酯
基本上按照實施例162所述工藝、使用6-氨基-9-(3-氟-苄基)-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲腈鹽酸鹽(製備51)和氯甲酸4-硝基苯基酯製備標題化合物。通過矽膠色譜(50％(4％(2M NH3/MeOH)/CH2Cl2)/己烷)純化，得到標題化合物，產率33％，為白色固體。MS(ES)m/z 346(M-對-硝基酚化物)；HPLC(方法B)Rt＝2.23min(86％)。
實施例179 1-[6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-3-甲基-脲
合併[6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸4-硝基苯基酯(製備55)(306mg，0.63mmol)、甲基胺鹽酸鹽(426mg，6.30mmol)、三乙胺(1.40g，1.93mL，13.9mmol)和THF(30mL)。將反應混合物在室溫攪拌18小時，然後用水(100mL)稀釋。萃取至EtOAc中(3×65mL)，乾燥合併的有機部分(MgSO4)，過濾並濃縮，得到粗產物(310mg)，為黃色油。在40g矽膠上純化粗產物(50-100％(4％(2M NH3/MeOH)/CH2Cl2)/己烷)，得到58mg(24％)標題化合物，為黃色固體。MS(ES)m/z 377(M+1)；HPLC(方法B)Rt＝3.22min(98％)。
實施例180 3-[6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-1-甲氧基-1-甲基-脲
基本上按照實施例179所述工藝、使用N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽製備標題化合物。在矽膠上純化(10-30％(2％(2M NH3/MeOH)/CH2Cl2)/己烷)，得到11mg(13％)標題化合物，為無色油。MS(ES)m/z 407(M+1)，405(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝5.42min(88％)。
製備56 (5-氟-吡啶-2-基)-甲醇
將丁基鋰(10.9mL，27.22mmol，2.5M己烷溶液)加至2-溴-5-氟-吡啶(3.99g，22.68mmol)在甲苯(200mL)中的-78℃溶液中。將反應物在-78℃攪拌90分鐘，然後經由注射器加入N，N-二甲基甲醯胺(2.3mL，29.71mmol)。將反應物在-78℃攪拌另外2小時，然後加入硼氫化鈉(1.72g，45.36mmol)並令反應物歷經12小時溫至室溫。用飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)淬滅反應並用乙酸乙酯(100mL)稀釋。分離有機相，乾燥(硫酸鎂)，過濾並在真空中濃縮，得到黃色油。通過柱色譜(矽膠；10％至50％乙酸乙酯/己烷)純化該油，得到1.30g(45％)澄清無色油。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.41s，1H)，7.46-7.37(m，1H)，7.32-7.27(m，1H)，4.75(s，2H)，3.64(br s，1H)。
製備57 2-氯甲基-5-氟-吡啶鹽酸鹽
將亞硫醯氯(320μL，4.30mmol)緩慢加至(5-氟-吡啶-2-基)-甲醇(420mg，3.31mmol)在二氯甲烷(15mL)中的0℃溶液中。將反應物在0℃攪拌3小時並用異丙醇淬滅。用二氯甲烷(50mL)、然後用飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)稀釋反應物，然後，分離有機相，乾燥(硫酸鎂)，過濾並在真空中濃縮，得到油。將該油用鹽酸(10mL，3M二噁烷溶液)在室溫處理30分鐘。過濾收集所得固體並用最少量的冷乙醚洗滌，得到200mg(33％)黃色固體。MS(APCI)m/z 146[C6H5ClFN+H]+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.42(s，1H)，7.56-7.37(m，2H)，4.67(s，2H)。
實施例181 N-[6-氰基-9-(5-氟-吡啶-2-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將氫化鈉(60％於油中，80mg，1.99mmol)混懸於DMF(2mL)並冷卻至0℃。經由注射器緩慢加入N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(253mg，0.90mmol)在DMF(2mL)中的溶液，並攪拌30分鐘，然後溫至環境溫度達60分鐘。加入2-氯甲基-5-氟-吡啶鹽酸鹽(180mg，0.99mmol)並攪拌反應物約12小時。用飽和氯化銨水溶液(5mL)淬滅反應。加入乙酸乙酯(50mL)並用水(50mL)、然後用鹽水(2×50mL)洗滌溶液。分離有機相，經硫酸鎂乾燥，過濾並在減壓下蒸發。將所得殘餘物用乙醚(10mL)研磨5分鐘，然後過濾，得到187mg(53％)標題化合物，為淺黃色固體，mp 235-238℃(分解)；MS(ESI)m/z[391C23H23FN4O+H]+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.43s，1H)，7.78(s，1H)，7.38-7.25(m，3H)，6.67(dd，J＝8.6，4.2Hz，1H)，5.58(d，J＝7.8Hz，1H)，5.35(s，2H)，4.40(br s，1H)，3.14(dd，J＝15.4，5.0Hz，1H)，2.79(br s，2H)，2.60(dd，J＝15.4，7.6Hz，1H)，2.34(五重峰，J＝6.8Hz，1H)，2.15(br s，1H)，2.02-1.95(m，1H)，1.16(d，J＝6.9Hz，6H)。
製備58 (6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-甲醇
將正丁基鋰(2.5M己烷溶液，9.40mL，23.3mmol)緩慢加至2-溴-5-氟-吡啶(3.42g，19.4mmol)和乙醚(200mL)的-78°溶液。將反應物在-78℃攪拌1小時，然後加入二甲基甲醯胺(2.00mL，25.5mmol)，繼續攪拌另外1小時。將反應物溫至室溫，在真空下除去溶劑。將粗物質溶解於甲醇(50mL)並冷卻至0℃。加入硼氫化鈉(1.47g，38.9mmol)，使反應物歷經12小時緩慢溫至室溫。用飽和碳酸氫鈉水溶液(20mL)淬滅反應，然後加入乙酸乙酯(100mL)。分離各層，用硫酸鎂乾燥所得有機層，過濾並在真空下濃縮，得到黃色固體。通過柱色譜(矽膠；10％至50％乙酸乙酯/己烷)純化粗固體，得到1.66g(42％)標題化合物，為黃色固體。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.50-7.40m，1H)，7.35-7.25(m，1H)，4.80(s，2H)，3.30(s，1H)。
製備59 (3-氟-吡啶-2-基)-甲醇
將(6-溴-3-氟-吡啶-2-基)-甲醇(850mg，4.13mmol)溶解於甲醇(40mL)，然後用氮吹掃溶液。加入披鈀炭(200mg 5％溼)並在氫氣氛(2氣囊)下將混合物攪拌20小時。通過
過濾混合物，用甲醇洗滌濾餅。在減壓下濃縮濾液並將所得殘餘物溶解於氯仿(150mL)。用飽和碳酸氫鈉水溶液(75mL)洗滌有機相，經硫酸鎂乾燥，過濾並濃縮，得到433mg(82％)標題化合物，其未經進一步純化即可使用。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.40(m，1H)，7.42-7.36(m，1H)，7.29-7.23(m，1H)，4.84(s，2H)，3.97(br s，1H)；MS(APCI)m/z 110[C6H6FNO-H2O+H]+。
製備60 2-氯甲基-3-氟-吡啶
將(3-氟-吡啶-2-基)-甲醇(215mg，1.69mmol)溶解於二氯甲烷(10mL)並冷卻至0℃。加入亞硫醯氯(160μL，2.20mmol)並將反應物攪拌1小時。加入二氯甲烷(50mL)，將反應物與飽和碳酸氫鈉水溶液(2×40mL)和鹽水(2×40mL)攪拌。分離並經硫酸鎂乾燥有機部分，過濾，在加壓下濃縮，得到198mg(80％)產物，其未經進一步純化即可使用。MSm/z 146，148[C6H5ClFN+1]+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.41-8.44(m，1H)，7.41-7.47(m，1H)，7.28-7.34(m，1H)，4.75(d，J＝2.0Hz，2H)；19F NMR(282MHz，CDCl3)δ-123.8。
實施例182 N-[6-氰基-9-(3-氟-吡啶-2-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將氫化鈉(60％礦物油分散體，114mg，1.64mmol)混懸於二甲基甲醯胺(7mL)並冷卻至0℃。加入N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備3)(385mg，1.37mmol)在二甲基甲醯胺(3.5mL)中的溶液。數分鐘後，將反應物溫至室溫，攪拌30分鐘，之後加入2-氯甲基-3-氟-吡啶(製備60)。將反應物攪拌過夜，然後用乙酸乙酯(100mL)稀釋。相繼用鹽水(3×75mL)、水(75mL)和鹽水(75mL)洗滌反應混合物。分離有機層，經硫酸鎂乾燥，過濾並在減壓下濃縮。利用快速色譜純化[矽膠，梯度0∶100至20∶80(90∶10∶1二氯甲烷∶甲醇∶濃氫氧化銨)二氯甲烷]，得到184mg(38％)標題化合物，為類白色固體。m.p.＝213-216℃；MSm/z 391[C23H23FN4O+1]+；1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ8.29-8.31(m，1H)，7.92(d，J＝1.2Hz，1H)，7.84(d，J＝7.6Hz，1H)，7.71-7.78(m，1H)，7.58(d，J＝8.5Hz，1H)，7.38-7.44(m，2H)，5.56(s，2H)，3.99-4.04(m，1H)，2.73-3.00(m，3H)，2.49-2.55(m，1H)，2.37(七重峰，J＝6.8Hz，1H)，1.96-2.00(m，1H)，1.76-1.83(m，1H)，1.01(d，J＝6.8Hz，6H)。
實施例183 (R)-N-[6-氰基-9-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
基本上按照實施例147所述工藝、使用N-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-異丁醯胺(製備35)(0.7mmol，200mg)、無水二甲基甲醯胺(10mL)、氫化鈉(60％礦物油分散體，1.2eq.，0.85mmol，34mg)和2-溴甲基-6-氟-吡啶(製備41)(0.85mmol.，162mg)的1mL無水DMF溶液製備標題化合物。將所得混合物在室溫攪拌30分鐘，然後用水(40mL)緩慢淬滅反應，以沉澱白色固體。經由過濾收集產物，用己烷洗滌濾餅。將濾餅溶解於乙酸乙酯和二氯甲烷，用硫酸鎂乾燥所得溶液並汽提至幹。自二氯甲烷/己烷結晶產物並在40℃真空下乾燥，得到242mg(87％)白色固體。LCMS 100％(m/z)391(M+1，APES-pos)；1H NMR(DMSO，400MHz)
7.94(d，1H，J＝1.3Hz)，7.90(dd，1H，J＝15.9，8.4Hz)，7.82(d，1H，J＝7.5Hz)，7.58(d，1H，J＝8.4Hz)，7.40(dd，1H，J＝8.4，1.8Hz)，7.05(dd，1H，J＝8.1，2.4Hz)，6.92(dd，1H，J＝7.3，2.4Hz)，5.44(s，2H)，4.06-3.95(m，1H)，2.97(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.97(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.88-2.68(m，2H)，2.52(dd，1H，J＝14.9，8.1Hz)，2.42-2.31(m，1H)，2.00-1.91(m，1H)，1.86-1.74(m，1H)，0.99(d，3H，J＝3.1Hz)，0.98(d，3H，J＝2.6Hz)。
製備61 (6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸苄基酯
合併4-氰基苯肼鹽酸鹽(27.4g，162mmol)和(4-氧代-環己基)-氨基甲酸苄基酯(製備42)(40.0g，162mmol)於乙酸(800mL)中。加熱反應物至90℃過夜，然後冷卻至室溫並在減壓下濃縮。在二氯甲烷中研磨殘餘物，棄去濾餅。在減壓下濃縮濾液。通過快速色譜純化所得殘餘物(矽膠，9∶1氯仿∶丙酮)。使所得物質自苯中結晶，得到38.8g(69％)標題化合物。m.p.＝141-143℃；質譜(m/e)344[C21H19N3O2-1]-；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.15(s，1H)，7.73(s，1H)，7.29-7.38(m，7H)，5.12(s，2H)，4.89-4.92(m，1H)，4.18(m，1H)，3.09(dd，J＝5.0，15.5Hz，1H)，2.78-2.91(m，2H)，2.59(dd，J＝7.0，15.5Hz，1H)，2.07-2.17(m，1H)，1.93-2.05(m，1H)。
製備62 (R)-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸苄基酯
使用製備型HPLC在以下條件下拆分外消旋(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸苄基酯(製備61)(43.28g)Chiralcel OD柱(8×35cm)，MeOH/0.2％二甲基乙基胺(DMEA)流動相，流速350mL/min，240nM UV檢測。使用20mL(666mg)13CHCl3/MeOH稀釋的注射液，運行時間18.2分鐘，疊級循環注射(2次通過色譜柱以完全分離兩種異構體)。所洗脫的第一異構體為S異構體(21.34g)，98.2％ee。所洗脫的第二異構體是R異構體(20.45g)，95.0％ee，得到標題化合物。
製備63 (R)-6-氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲腈
合併(R)-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸苄基酯(製備62)(7.1mmol，2.44g)於無水乙醇(100mL)中。向攪拌的溶液加入5％鈀/碳(600mg)。用氫吹掃並填充反應容器(3×)，在氫、大氣壓下攪拌反應混合物約18小時。經
過濾反應混合物，用甲醇洗滌濾餅。汽提濾液至幹，經乙酸乙酯/甲醇/己烷結晶分離第一批產物，得到720mg純產物。汽提結晶母液至幹，經快速色譜純化並分離另外的產物(25％甲醇/二氯甲烷等度)，總產率1.17g(78％)。LCMS 100％(m/e)212(M+1，APES-pos)，210(M-1，APES-neg)；1H NMR(DMSO，400MHz)δ11.29(s，1H)，7.81(d，1H，J＝0.9Hz)，7.36(dd，1H，J＝8.4，0.9Hz)，7.30(dd，1H，J＝8.4，1.8Hz)，3.11-3.02(m，1H)，2.87(dd，1H，J＝15.4，4.8Hz)，2.79-2.70(m，2H)，2.28(dd，1H，J＝15.4，8.4Hz)，1.97-1.89(m，1H)，1.78(s，2H)，1.66-1.54(m，1H)。
製備64 6-氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲腈
合併(4-氧代環己基)氨基甲酸叔丁基酯(40.9g，192mmol)和4-氰基苯肼鹽酸鹽(25.0g，147mmol)於濃鹽酸(100mL)和水(200mL)中，回流加熱18小時。冷卻，收集沉澱。用Na2CO3溶液洗滌，與CHCl3、無水EtOH、再與CHCl3共沸，得到25.5g白色固體(82％)。MS(ES)m/z 212(M+1)。
製備65 (R)-(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸甲基酯
合併6-氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲腈(2.4mmol，0.5g)與三乙胺(4.7mmol，0.66mL)於DMSO(10mL)中，同時攪拌。加入氯甲酸甲酯(3.6mmol，275μL)並將所得混合物在室溫攪拌5-10分鐘。用水(35mL)淬滅，用乙酸乙酯(200mL)稀釋反應混合物。分離各層，用鹽水(100mL)洗滌有機層。用乙酸乙酯再洗滌鹽水層(2×100mL)並用硫酸鎂乾燥合併的有機層。過濾，在真空中濃縮，得到粗產物，其未經進一步純化即可使用。對反應混合物進行LCMS，然後處理，得到masses 270.0(APCI-pos)和所需產物268.0(APCI-neg)。
製備66 (6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸甲基酯
基本上按照製備65所述工藝、使用6-氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲腈(製備64)(500mg，2.37mmol)、三乙胺(660μL，4.73mmol)和氯甲酸甲酯(275μl，3.55mmol)製備標題化合物，得到460mg(75％)白色固體。1H NMR(DMSO，400MHz)δ11.35(s，1H)，7.85(s，1H)，7.31-7.39(m，3H)，3.72-3.82(m，1H)，3.53(s，3H)，2.93(dd，J＝4.8，14.8Hz，1H)，2.80-2.82(m，2H)，2.45-2.52(m，1H)，1.97-2.02(m，1H)，1.72-1.79(m，1H)。
實施例184 [6-氰基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸甲基酯
在氮氣下合併(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸甲基酯(460mg，1.7mmol)和無水二甲基甲醯胺(15mL)。冷卻混合物至0℃，加入二(三甲基甲矽烷基)氨化鉀(0.5M甲苯溶液，3.4mL，1.7mmol)。攪拌所得混合物30分鐘，然後加入3-氟苄基溴(210μL，1.7mmol)，攪拌反應混合物4小時，使其緩慢溫至室溫。用水(50mL)淬滅反應，用乙酸乙酯萃取產物(2×50mL)。用硫酸鎂乾燥合併的萃取液並在真空中濃縮。經由快速色譜(25％乙酸乙酯/己烷等度)純化產物，得到475mg(74％)白色固體。LCMS(方法E)100％(m/z)378(M+1，APCI-pos)；1H NMR(DMSO，400MHz)δ11.33(s，1H)，7.85(s，1H)，7.46(d，1H，J＝7.9Hz)，7.39-7.27(m，7H)，5.03(q，2H，J＝8.8Hz)，3.87-3.75(m，1H)，3.87-3.75(m，1H)，2.96(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.85-2.77(m，2H)，2.55-2.49(m，1H)，2.07-1.97(m，1H)，1.85-1.71(m，1H)。
實施例185 (6(R)-氰基-9-吡啶-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸甲基酯
合併(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸甲基酯(1.4mmol，370mg)、無水二甲基甲醯胺(15mL)、碳酸銫(4.1mmol，1.34g)和2-氯甲基吡啶鹽酸鹽(1.8mmol，295mg)。在氮氣下於50℃攪拌所得漿液24小時。緩慢加入水(約50mL)淬滅反應，使得鹼溶解，產物沉澱。過濾收集產物，用己烷洗滌濾餅。在40℃、真空下乾燥產物過夜，得到385mg(78％)。LCMS93％(m/e)361(M+1，APES-pos)；1H NMR(DMSO，400MHz)
8.48(ddd，1H，J＝4.8，1.8，0.9Hz)，7.92(d，1H，J＝1.3Hz)，7.70(td，1H，J＝10.9，3.9Hz)，7.56(d，1H，J＝8.4Hz)，7.33(d，1H，J＝7.5Hz)，7.25(ddd，1H，J＝7.5，4.8，0.9Hz)，7.00(d，1H，J＝7.9Hz)，5.45(q，2H，J＝12.4Hz)，3.82-3.69(m，1H)，3.53(s，3H)，2.98(dd，1H，J＝15.6，5.1Hz)，2.93-2.84(m，1H)，2.80-2.68(m，1H)，2.53(dd，1H，J＝15.4，9.7Hz)，2.06-1.97(m，1H)，1.82-1.69(m，1H)。
實施例186 (R)-[6-氰基-9-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸甲基酯
基本上按照實施例147所述工藝、使用(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸甲基酯(700mg，2.6mmol)、無水二甲基甲醯胺(30mL)、氫化鈉(60％礦物油分散體，12.5mg，3.1mmol)和2-溴甲基-6-氟-吡啶(製備41)(594mg，3.1mmol)的1mL無水DMF溶液製備標題化合物。將所得混合物在室溫攪拌30分鐘，然後用水(100mL)緩慢淬滅反應。用乙酸乙酯萃取粗產物(2×100mL)，用鹽水洗滌合併的有機萃取液。用硫酸鎂乾燥，過濾並在真空中濃縮。經由快速色譜純化產物(5％MTBE/二氯甲烷15分鐘，步進梯度至10％MTBE)。合併產物級分並濃縮，直至固體開始結晶。加入己烷作為反溶劑，過濾收集產物，用己烷洗滌濾餅，得到第一批產物。汽提母液並如上純化另外的產物，得到總產量502mg(51％)白色固體。LCMS 100％(m/e)379(M+1，APES-pos)；1H NMR(DMSO，400MHz)
7.94-7.87(m，2H)，7.57(d，1H，J＝8.4Hz)，7.39(dd，1H，J＝8.4，1.3Hz)，7.33(d，1H，J＝7.5Hz)，7.05(dd，1H，J＝8.1，2.4Hz)，6.91(dd，1H，J＝7.5，2.2Hz)，5.43(q，2H，J＝12.9Hz)，3.82-3.70(m，1H)，3.53(s，3H)，3.53(s，3H)，2.99(dd，1H，J＝15.2，5.1Hz)，2.92-2.82(m，1H)，2.79-2.67(m，1H)，2.53(dd，1H，J＝15.2，9.0Hz)，2.53(dd，1H，J＝15.2，9.0Hz)，2.07-1.98(m，1H)，1.83-1.70(m，1H)。
實施例187 (R)-9-(3-氟苄基)-6-異丁醯基氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲酸甲基酯
在Parr反應器中合併(R)-N-(9-苄基-6-溴-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(實施例122)(4.00g，9.02mmol)、醋酸鈉(2.96g，36mmol)和二氯[1，1』-二(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物(0.368g，0.45mmol)於甲醇(36mL)中。充入一氧化碳(55psi)並在95℃加熱20小時。濃縮並經二氧化矽色譜處理，用5-20％EtOAc/CHCl3洗脫，得到3.3g(87％)白色棉絮狀固體，將其淤漿於乙醚中過濾收集。MS(ES)m/z 423(M+1)；HPLCRt＝1.93min(100％). 實施例188 (R)-N-(9-苄基-6-異丁醯基氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲酸
將(R)-9-(3-氟苄基)-6-異丁醯基氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲酸甲基酯(2.54g，6.01mmol)加至過量LiOH在甲醇/水/THF(33∶33∶33)中的溶液並在70℃攪拌24小時。在真空中濃縮，在水和EtOAc/Et2O之間分配。用鹽酸水溶液使水層呈酸性，用EtOAc萃取。用鹽水洗滌，自EtOAc層過濾固體並淤漿於熱EtOAc中。過濾收集，乾燥，得到2.35g(96％)白色固體。MS(ES)m/z 409(M+1)，HPLCRt＝1.93(100％)。
實施例189 (R)-[9-(3-氟-苄基)-6-異丁醯基氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-基]-氨基甲酸乙基酯
合併(R)-N-(9-(3-氟苄基)-6-異丁醯基氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲酸(實施例188)(0.281g，0.67mmol)和疊氮磷酸二苯酯(1.3mL，0.67mmol)以及三乙胺(0.73mL，0.67mmol)於苯(3mL)中並回流加熱18小時。加入無水乙醇並再加熱4小時。在真空中濃縮，使所得殘餘物在EtOAc和水之間分配。分離並經硫酸鈉乾燥EtOAc層。過濾，在真空中濃縮。將所得殘餘物重新溶解於最少量的EtOAc並通過二氧化矽墊，得到0.248g(83％)標題化合物。mp169-171℃；MS(ES)m/z 452(M+1)，HPLCRt＝2.2min(89％)。
實施例190 (R)-[9-(3-氟-苄基)-6-異丁醯基氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-基]-氨基甲酸甲基酯
基本上按照實施例189所述工藝自(R)-N-(9-(3-氟苄基)-6-異丁醯基氨基-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲酸(實施例188)(1.00g，2.4mmol)製備標題化合物。通過矽膠色譜純化，用20-80％EtOAc/己烷梯度洗脫，得到0.35g(34％)產物。mp111-115℃；MS(ES)m/z 438(M+1)。
實施例191 (R)-N-[6-乙醯基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將(R)-N-[6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]異丁醯胺(實施例123)(2.07g，5.32mmol)用甲基溴化鎂(9mL)在回流的四氫呋喃中處理18小時。用MeOH淬滅，過濾，除去固體，並在真空中濃縮。用1N HCl/THF處理殘餘物並回流2小時。加入乙酸乙酯，過濾，除去不溶沉澱並在真空中濃縮濾液，得到2.7g(74％)黃色固體。MS(ES)m/z 407(M+1)；HPLCRt＝2.3min(97％)。
實施例192 (R)-N-[9-(3-氟-苄基)-6-異噁唑-5-基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
合併(R)-N-[6-乙醯基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例191)(0.055g，0.14mmol)和二甲基甲醯胺縮二甲醇(0.81g，6.8mmol)並在100℃加熱82小時。在真空中濃縮並用鹽酸羥胺(0.012g，0.18mmol)在二噁烷中於23℃處理所得殘餘物1小時，然後簡短溫至40℃。用水稀釋，過濾收集0.029g固體。自EtOAc/己烷重結晶，得到淡黃色固體。mp238-241℃；MS(ES)m/z 432(M+1)；HPLCRt＝2.59(85％)。
製備67 環丙烷甲酸(4-羥基環己基)醯胺
將環丙基碳醯氯(200g，1.74mol)滴加至12升機械攪拌的燒瓶中含反-4-氨基環丙基己醇(272g，2.60mol)和碳酸鉀(360g，2.60mol)的甲醇(6.9升)中。在室溫、氮氣下攪拌18小時。在真空中濃縮，將殘餘物重新混懸於MeOH(1升)和二氯甲烷(3升)並過濾。在真空中濃縮濾液，重新混懸於異丙醇中，過濾並再次蒸發，得到311g(66％)類白色固體。mp220-222℃；MS(ES)m/z 184(M+1)。
製備68 環丙烷甲酸(4-氧代環己基)醯胺
基本上按照製備2所述工藝自環丙烷甲酸(4-羥基環己基)醯胺(379g，2.07mmol)製備標題化合物，得到141g(38％)白色晶體。mp155-157℃；MS(ES)m/z 182(M+1)。
製備69 環丙烷甲酸(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-醯胺
基本上按照製備3所述工藝自環丙烷甲酸(4-氧代環己基)醯胺(51.3g，283mmol)和4-氰基苯肼鹽酸鹽(48.0g，283mmol)製備標題化合物，得到57.0g(72％)淺黃色固體。mp231-233℃；MS(ES)m/z 280(M+1)。
實施例193 環丙烷甲酸[6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]醯胺
基本上按照實施例1所述工藝自環丙烷甲酸(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)醯胺(3.00g，10.7mmol)和3-氟苄基溴(2.2g，11.8mmol)製備標題化合物，得到1.4g(34％)米色固體。mp207-209℃；MS(ES)m/z 388(M+1)；HPLCRt＝2.28min(100％)。
實施例194 (R)-環丙烷甲酸[6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]醯胺
如實施例123所述、使用iPrOH/MeOH/庚烷作為洗脫劑將環丙烷甲酸[6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]醯胺拆分為其對映體。首先洗脫的是異構體1(R)，為標題化合物，e.e.＞99.8％mp208-210℃；MS(ES)m/z 389(M+1)。
實施例195 環丙烷甲酸[6-氰基-9-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
基本上按照製備45所述工藝自環丙烷甲酸(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)醯胺(製備69)(10.0g，35.8mmol)和2-溴甲基-6-氟-吡啶(製備44)(7.49g，39.4mmol)製備標題化合物，得到4.30g(31％)赭色固體。使用手性色譜法基本上如實施例194所述拆分對映體，但是使用0.2％DMEA/EtOH作為洗脫劑。首先洗脫的是(R)-異構體。將固體淤漿於EtOAc並過濾，得到標題化合物。m.p.＝243-245℃；MS(ES)m/z 389(M+1)。
實施例196 環丙烷甲酸[6-氰基-9-(吡啶-2-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
基本上按照製備45所述工藝自環丙烷甲酸(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)醯胺(製備69)(19.0g，68.0mmol)、2-溴甲基-6-吡啶氫溴酸鹽(22.4g，88.4mmol)和碳酸銫(57.5g，177mmol)製備標題化合物。基本上按照實施例195所述工藝、但是使用100％EtOH作為洗脫劑拆分一部分外消旋產物，得到R-異構體，為8.56g黃色固體。e.e＝100％；mp239-241℃；MS(ES)m/z 371(M+1)。
實施例197 N-[9-(3-氟-苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
混合N-(6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(製備3)(8.1g，20.8mmol)、Al-Ni催化劑(15.0g，231mmol)於90％甲酸中(125mL)。回流加熱3小時，然後用MeOH稀釋並趁熱過濾。濃縮並使殘餘物在NaHCO3水溶液/EtOAc之間分配。乾燥有機層(MgSO4)並濃縮，得到5.9g黃色半固體。使用矽膠色譜純化，用30-75％EtOAc/己烷洗脫，得到3.3g(40％)白色固體。MS(ES)m/z 393(M+1)，391(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝4.41(100％)。
實施例198 N-[6-二氟甲基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
按照Lal，G.S.等人(J.Org.Chem.(1999)64，7048)所述工藝，合併N-[9-(3-氟-苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(1.29mmol，506mg)和二(2-甲氧基乙基)胺四氟化硫(21.9mmol，485mg)於二氯甲烷(8mL)中。在氮氣下回流攪拌的反應混合物7小時。用飽和碳酸氫鈉水溶液淬滅反應並用乙酸乙酯稀釋混合物。分離各層，用水、稀鹽酸水溶液和水洗滌有機層(3×)。將有機層用硫酸鈉乾燥並汽提至幹。經由快速色譜(5％乙酸乙酯/二氯甲烷-25min.，步進梯度至10％乙酸乙酯)純化產物，得到175mg(33％)。LCMS 100％(m/e)415(M+1，APES-pos)；1H NMR(DMSO，400MHz)δ7.64(s，1H)，7.31-7.20(m，4H)，6.93(td，1H，J＝11.9，4.2Hz)，6.76-6.72(m，1H)，6.64-6.59(m，1H)，5.50(d，1H，J＝7.9Hz)，5.26(s，2H)，4.46-4.36(m，1H)，3.16(dd，1H，J＝15.4，5.3Hz)，2.81-2.71(m，1H)，2.70-2.61(m，2H)，2.36-2.25(m，1H)，2.15-1.97(m，2H)，0.00(s，2H)，1.62(s，2H)，1.14(d，3H，J＝5.3Hz)，1.13(d，3H，J＝4.8Hz)。
實施例199 N-[9-(3-氟-苄基)-6-(甲氧基亞氨基-甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將N-[9-(3-氟-苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例197)(粗品，506mg，1.29mmol)加至甲氧基胺鹽酸鹽(140mg，1.48mmol)和吡啶(10mL)的懸液中。在環境溫度攪拌反應物12小時。在真空下除去吡啶，將所得殘餘物溶解於乙酸乙酯(100mL)。用飽和硫酸銅水溶液(2×50mL)和水(2×50mL)洗滌。分離有機層，經硫酸鎂乾燥，過濾並在真空下濃縮，得到脂狀黃色固體。將該固體用柱色譜純化(矽膠；10％至50％乙酸乙酯/己烷)，得到183mg(34％)標題化合物，為白色固體。mp180-182℃；ESI MS m/z 422[C25H28FN3O2+H]+；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.28(s，1H)，7.79(s，1H)，7.45(d，J＝7.9Hz，1H)，7.26-7.17(m，2H)，6.93(t，J＝7.1Hz，1H)，6.75(d，J＝7.6Hz，1H)，6.62(d，J＝9.1Hz，1H)，5.49(br d，J＝7.0Hz，1H)，5.24(s，2H)，4.40(br s，1H)，3.97(s，3H)，3.15(dd，J＝15.8，4.7Hz，1H)，2.71-2.61(m，3H)，2.28(七重峰，J＝6.8Hz，1H)，2.07-2.00(m，2H)，1.14(d，J＝6.7Hz，3H)，1.12(d，J＝6.7Hz，3H)。
實施例200 (R)-N-[9-(3-氟苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將Al-Ni催化劑[12635-27-7](3.0g)加至(R)-N-(6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺(實施例123)(2.50g，6.42mmol)在甲酸(96％，40mL)和水(5mL)中的懸液。加熱反應混合物至90℃達18小時，然後加入2g新鮮Al-Ni催化劑。加熱至回流達18小時，冷卻至60℃，用甲醇(30mL)稀釋並恢復加熱。當開始回流時，趁熱通過濾紙過濾反應混合物。在真空中濃縮濾液。用水(30mL)和飽和NaHCO3水溶液(30mL)稀釋殘餘物，然後萃取至EtOAc中(3×150mL)。乾燥有機相(MgSO4)，過濾並濃縮，得到2.25g(89％)標題化合物，為棕色固體。MS(ES)m/z 393(M+1)；HPLC(方法B)Rt＝4.57min(91％)。
實施例201 (R)-N-[9-(3-氟苄基)-6-(甲氧基亞氨基-甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將甲氧基胺鹽酸鹽(613mg，7.34mmol)加至(R)-N-[9-(3-氟苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例200)(2.40g，6.11mmol)在吡啶(40mL)中的溶液。將反應混合物在室溫攪拌18小時。在真空中濃縮反應物並用EtOAc(175mL)稀釋。用水洗滌有機相(3×75mL)，乾燥(MgSO4)，過濾並濃縮，得到粗產物(2.22g)，為棕色泡沫。於40g矽膠上純化粗產物(15-80％EtOAc/己烷)，得到261mg(10％)標題化合物，為黃色片狀固體。在40g矽膠上重新純化不純部分(50-80％(1％(2M NH3/MeOH)/CH2Cl2)/己烷)並合併經純化的物質，得到673mg(26％)標題化合物，為黃色片狀固體。MS(ES)m/z 422(M+1)，420(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝7.98min(99％)。
製備70 環丙烷甲酸[9-(3-氟苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
基本上按照實施例200所述工藝、使用環丙烷甲酸[6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]醯胺(實施例193)(0.500g，1.29mmol)和鋁-鎳催化劑(1.3g)在90％甲酸(10mL)製備標題化合物，得到0.32g(64％)淺棕色固體。MS(ES)m/z 391(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)δ9.90(s，1H)，8.19(d，1H)，8.04(s，1H)，7.61(d，1H)，7.57(d，1H)，7.37(dd，1H)，7.15(m，1H)，6.81-6.92(m，2H)，5.44(s，2H)，4.08(m，1H)，3.03(dd，1H)，2.57-2.82(m，4H)，2.00(m，1H)，1.59(m，1H)，1.82(m，1H)，0.65(m，4H)。
實施例202 環丙烷甲酸[9-(3-氟苄基)-6-(甲氧基亞氨基-甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
合併環丙烷甲酸[9-(3-氟-苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺(製備70)(0.32g，0.82mmol)、甲氧基胺(0.21g，2.4mmol)和氫氧化鈉(0.049g，1.3mmol)於EtOH(15mL)中。加入足量的水以溶解氫氧化鈉並攪拌18小時。用水稀釋，用EtOAc萃取。經Na2SO4乾燥EtOAc萃取液並通過矽膠墊過濾兩次，得到0.21g(61％)類白色固體。MS(ES)m/z 420(M+1)。
製備71 (R)-環丙烷甲酸[9-(3-氟苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
合併(R)-環丙烷甲酸[6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]醯胺(實施例194)(3.70g，9.55mmol)和鎳-鋁催化劑(10.0g)於90％甲酸中並在90-100℃加熱18小時。用甲醇稀釋，過濾，除去催化劑，並在真空中濃縮濾液。加入固體NaHCO3中和濾液，然後置於乙酸乙酯/水中。經Na2SO4乾燥乙酸乙酯部分，過濾並蒸發，得到3.53g(95％)標題化合物，為泡沫。MS(ES)m/z 391(M+1)；1H NMR(DMSO-d6)δ9.90(s，1H)，8.19(d，1H)，8.04(s，1H)，7.61(d，1H)，7.57(d，1H)，7.37(dd，1H)，7.15(m，1H)，6.81-6.92(m，2H)，5.44(s，2H)，4.08(m，1H)，3.03(dd，1H)，2.57-2.82(m，4H)，2.00(m，1H)，1，82(m，1H)，1.59(m，1H)，0.65(m，4H)。
實施例203 (R)-環丙烷甲酸[9-(3-氟-苄基)-6-(羥基亞氨基-甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
合併(R)-環丙烷甲酸[9-(3-氟苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺(製備71)(1.50g，3.82mmol)、鹽酸羥胺(0.801g，11.5mmol)和氫氧化鈉(0.23g，5.76mmol)並在氮氣下攪拌1.5小時。用水稀釋並用EtOAc萃取。使暗殘餘物通過二氧化矽墊，用50％EtOAc/己烷洗脫，得到1.27g(82％)標題化合物。MS(ES)m/z 406(M+1)。
實施例204 (R)-環丙烷甲酸[9-(3-氟-苄基)-6-(5-甲基-異噁唑-3-基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
將丙炔氣體鼓入密閉試管中(R)-環丙烷甲酸[9-(3-氟-苄基)-6-(羥基亞胺基-甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺(實施例203)(0.065g，0.16mmol)在二氯甲烷和NaOCl溶液中的溶液。將試管加蓋並於23℃攪拌16小時。使反應物在二氯甲烷和水之間分配。分離並經Na2SO4乾燥有機部分，得到0.045g褐色固體。通過矽膠色譜純化，用20-80％EtOAc/梯度洗脫，得到0.030g(42％)類白色固體。mp190-192℃；MS(ES)m/z 444(M+1)。
實施例205 (R)-環丙烷甲酸[9-(3-氟-苄基)-6-(1-甲氧基亞氨基-甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
基本上按照實施例204所述工藝自(R)-環丙烷甲酸[9-(3-氟苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺(製備71)(3.10g，7.94mmol)、甲氧基胺鹽酸鹽(1.99g，23.8mmol)和氫氧化鈉(0.48g，11.9mmol)製備標題化合物。使用矽膠色譜純化，用10％EtOAc/CH2Cl2洗脫，得到1.94g(58％)產物。mp200-203℃；MS(ES)m/z 420(M+1)。
實施例206 環丙烷甲酸[9-(3-氟苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
基本上按照實施例200所述工藝自環丙烷甲酸[6-氰基-9-(吡啶-2-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺(實施例196)(1.00g，2.70mmol)和Al-Ni催化劑(3.0g)製備標題化合物，得到0.78g(77％)褐色固體。MS(ES)m/z374(M+1)。
實施例207 環丙烷甲酸[6-(1-甲氧基亞氨基-甲基)-9-吡啶-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
基本上按照實施例204所述工藝自環丙烷甲酸[9-(3-氟苄基)-6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺(實施例206)(0.62g，1.66mmol)、甲氧基胺鹽酸鹽(0.416g，4.98mmol)和氫氧化鈉(0.100g，2.5mmol)製備標題化合物，得到0.54g(81％)褐色固體。mp88-92℃；MS(ES)m/z 403(M+1)。
實施例208 (R)-環丙烷甲酸[6-(1-甲氧基亞氨基-甲基)-9-吡啶-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
類似於實施例194所述，但是使用0.2％DMEA/MeOH作為洗脫劑、使用手性色譜於Chiralcel OD-H柱上拆分環丙烷甲酸[6-(1-甲氧基亞氨基-乙基)-9-吡啶-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺。首先洗脫的是(R)-異構體。濃縮洗脫液並將殘餘物淤漿於EtOAc。過濾收集，得到標題化合物。mp215-217℃；MS(ES)m/z 403(M+1)。
製備72 環丙烷甲酸(6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-醯胺
基本上按照實施例205所述工藝自環丙烷甲酸(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-醯胺(10.2g，36.5mmol)和Al-Ni催化劑(20.0g)製備標題化合物，得到6.80g(66％)橙黃色固體。MS(ES)m/z 283(M+1)。
製備73 環丙烷甲酸[6-(甲氧基亞氨基-甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
基本上按照實施例202所述工藝、自環丙烷甲酸(6-甲醯基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-醯胺(製備72)(6.50g，57.3mmol)、甲氧基胺鹽酸鹽(4.81g，57.6mmol)和氫氧化鈉(1.84g，46.0mmol)製備標題化合物，得到6.00g(84％)產物。MS(ES)m/z 312(M+1)。
實施例209 (R)-環丙烷甲酸[6-(1-甲氧基亞氨基-甲基)-9-吡啶-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺
基本上按照實施例1所述工藝、自環丙烷甲酸[6-(甲氧基亞氨基-甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺(製備73)(6.00g，19.3mmol)和2-溴甲基-6-氟-吡啶(製備44)(4.03g，21.2mmol)製備標題化合物。得到9.2g橙棕色泡沫。通過矽膠色譜純化該物質，用20-80％EtOAc/己烷洗脫，得到2.65g黃色固體。類似於實施例194所述通過手性色譜於Chiralcel OD-H柱上、但是使用0.2％DMEA/MeOH作為洗脫劑拆分對映體。首先洗脫的是(R)-異構體。濃縮洗脫液並將殘餘物淤漿於EtOAc。過濾收集，得到標題化合物。mp223-225℃；MS(ES)m/z 421(M+1)。
製備74 N-[6-(2，2，2-三氟乙醯基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
混合4-三氟乙醯基苯肼(基本上如Tschirret-Guth，R.A.等人，J.Am.Chem.Soc.(1999)121，4731所述製備)(2.6g，12.7mmol)和N-(4-氧代環己基)異丁醯胺(2.2g，12mmol)於含濃HCl(20mL)的EtOH(100mL)中。回流反應18小時，冷卻至環境溫度並在真空下除去EtOH。萃取產物至EtOAc中，乾燥(MgSO4)，過濾並濃縮，得到2.0g黃色半固體。通過矽膠色譜純化(ISCO(120g)使用50％至100％EtOAc/己烷歷經60分鐘)。獲得590mg(14％)N-[6-(2，2，2-三氟乙醯基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺，為黃色固體。MS(ES)m/z 353(M+1)，351(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝3.69min(98％). 實施例210 N-[9-(3-氟-苄基)-6-(2，2，2-三氟乙醯基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
混合N-[6-(2，2，2-三氟乙醯基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(製備74)(428mg，0.93mmol)、間-氟苄基溴(216mg，1.11mmol)、Cs2CO3(650mg，2mmol)和DMF(10mL)。將反應物在50℃溫熱18小時，冷卻並在水/鹽水/EtOAc之間分配。分離並乾燥有機層(MgSO4)，過濾並濃縮，得到590mg粗產物。通過矽膠色譜純化，用10％至60％EtOAc/己烷洗脫，得到68mg(16％)標題化合物，為淺黃色固體。MS(ES)m/z 461(M+1)；HPLCRt＝3.43min(95％)。
實施例211 (R)-N-[6-甲醯基-9-(2-甲基-噻唑-4-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
按照基本上如實施例200所述的工藝、使用(R)-N-[6-氰基-9-(2-甲基-噻唑-4-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例151)(134mg，0.34mmol)製備標題化合物。在12g矽膠上純化粗產物{30-70％[4％(2MNH4/MeOH)/CH2Cl2]/己烷}，得到58mg(43％)標題化合物，為白色固體。MS(ES)m/z 396(M+1)，394(M-1)；1H-NMR(CDCl3)δ10.01(s，1H)，8.01(d，1H，J＝1.3Hz)，7.72(dd，1H，J＝8.4，1.8Hz)，7.35(d，1H，J＝8.4Hz)，6.47(s，1H)，5.57(d，1H，J＝7.9Hz)，5.37(d，2H，J＝2.6Hz)，4.43(m，1H)，3.18(dd，1H，J＝15.9，5.3Hz)，2.86(t，2H，J＝6.4Hz)，2.73(s，3H)，2.66(m，1H)，2.34(m，1H)，2.15(m，1H)，2.03(m，1H)，1.16(d，6H，J＝7.0Hz)。
實施例212 (R)-N-[6-(甲氧基亞氨基-甲基)-9-(2-甲基-噻唑-4-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺
將(R)-N-[6-甲醯基-9-(2-甲基-噻唑-4-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-異丁醯胺(實施例211)(53mg，0.13mmol)和甲氧基胺·HCl(22mg，0.27mmol)溶解於吡啶(1mL)。將反應混合物在25℃攪拌18小時。用水(2mL)、1N HCl(1mL)和EtOAc(10mL)稀釋反應混合物。加載混合物至Varian ChemElut CE1005固相萃取柱(Varian部件編號12198006)，然後洗脫，收集並濃縮50mL EtOAc，得到粗產物(59mg)，為白色固體。在8g矽膠上純化(50-60％EtOAc/己烷)，得到34mg(62％)標題化合物，為白色固體。MS(ES)m/z 425(M+1)，469(M+HCO2-)；1H NMR(CDCl3)δ8.16(s，1H)，7.63(d，1H，J＝1.3Hz)，7.44(dd，1H，J＝8.6，1.5Hz)，7.24(d，1H，J＝8.5Hz)，6.36(s，1H)，5.55(d，1H，J＝7.9Hz)，5.29(td，2H，J＝24.7，9.0Hz)，4.41(m，1H)，3.96(s，3H)，3.13(dd，1H，J＝15.4，4.8Hz)，2.80(m，2H)，2.68(s，3H)，2.62(dd，1H，J＝15.6，6.8Hz)，2.30(m，1H)，2.14-1.97(m，2H)，1.14(d，6H，J＝6.6Hz)。
製備75 [6-氰基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸苄基酯
基本上按照實施例184所述工藝、使用(6-氰基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)-氨基甲酸苄基酯(製備61)和3-氟苄基溴製備標題化合物，得到1.34g(51％)產物。LCMS 100％(m/e)454(M+1，APCI-pos)。
製備76 6-氨基-9-(3-氟-苄基)-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲腈
基本上按照製備63所述工藝、使用[6-氰基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-氨基甲酸苄基酯製備標題化合物，得到粗產物。經快速色譜純化產物(10至25％甲醇/二氯甲烷)，得到含有～25％共洗脫雜質的稠密的油。自二氯甲烷/己烷結晶產物，得到少量(40mg，35％)用於分析。LCMS75％(m/z)320(M+1，APCI-pos)。
實施例213 N-[6-氰基-9-(3-氟-苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-N』，N』-二甲基甲磺醯胺
混合6-氨基-9-(3-氟-苄基)-6，7，8，9-四氫-5H-咔唑-3-甲腈(製備76)(900mg，2.8mmol)、三乙胺(600μL，4.2mmol)於二氯甲烷(15mL)中。加入二甲基氨磺醯氯(391μL，3.64mmol)並在環境溫度攪拌過夜。將反應物與水/二氯甲烷振蕩並乾燥有機層(Na2SO4)。濃縮，得到1.44g褐色油。通過矽膠色譜純化，使用10％至60％EtOAc/己烷洗脫，得到630mg(53％)標題化合物，為白色固體。MS(ES)m/z 427(M+1)，425(M-1)；HPLC(方法B)Rt＝6.14min(100％)。
製備77 環丙烷甲酸(2，2-二氟-6，7，8，9-四氫-5H-1，3-二氧雜-9-氮雜-環戊二烯並[b]芴-6-基)-醯胺
基本上按照製備3所述工藝、使用(2，2-二氟-苯並[1，3]二氧雜環戊烯-5-基)-肼鹽酸鹽(製備10)和環丙烷甲酸(4-氧代環己基)醯胺(製備68)製備標題化合物，得到7.12g(80％)產物。
實施例214 環丙烷甲酸(2，2-二氟-9-吡啶-2-基甲基-6，7，8，9-四氫-5H-1，3-二氧雜-9-氮雜-環戊二烯並[b]芴-6-基)-醯胺
基本上按照實施例1所述工藝、使用環丙烷甲酸(2，2-二氟-6，7，8，9-四氫-5H-1，3-二氧雜-9-氮雜-環戊二烯並[b]芴-6-基)-醯胺和2-溴甲基吡啶氫溴酸鹽製備標題化合物。通過矽膠色譜純化粗產物，用0-100％EtOAc/二氯甲烷洗脫。再次運行矽膠色譜，用5-40％EtOAc/二氯甲烷洗脫，得到0.42g(4.7％)白色固體。MS(ES)m/z 426(M+1)。
實施例215 環丙烷甲酸[2，2-二氟-9-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-6，7，8，9-四氫-5H-1，3-二氧雜-9-氮雜-環戊二烯並[b]芴-6-基]-醯胺
基本上按照實施例1所述工藝、使用環丙烷甲酸(2，2-二氟-6，7，8，9-四氫-5H-1，3-二氧雜-9-氮雜-環戊二烯並[b]芴-6-基)-醯胺和2-溴甲基-6-氟-吡啶(製備44)製備標題化合物。通過矽膠色譜純化粗產物，用5-50％EtOAc/二氯甲烷洗脫，得到0.29g(46％)白色固體。MS(ES)m/z 444(M+1)。
生物學數據 表I 「Ex」＝實施例編號 「nd」＝未測定 「n」＝用於計算平均值的試驗次數 ＊AR EC50n＝1 所選實施例的體內數據 表II 就表II所列實施例而言，與去勢的僅溶媒的對照組相比，精囊和/或前列腺顯示沒有顯著重量改變。
序列表
伊萊利利公司
可用作雄激素受體調節劑的四氫咔唑衍生物(SARM)
X-16663
3
PatentIn version 3.3
1
15
DNA
人工
合成構建體
1
ggttcttgga gtact15
2
15
DNA
人工
合成構建體
2
tgtacaggat gttct15
3
15
DNA
人工
合成構建體
3
tgtacaggat gttct1權利要求
1.下式化合物或其藥學可接受的鹽
式I
其中
R1代表氫、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、SCH3、C(＝S)NH2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、CH＝NOH、COR1a、OR1b、SO2R1c、NHCOR1d，或任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷素、滷代(C1-C4)烷基或滷代(C1-C4)烷氧基；
R1a代表氫、氨基、羥基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基或滷代(C1-C4)烷基；
R1b代表(C1-C4)烷基、環丙基或環丙基甲基；
R1c代表氨基或(C1-C4)烷基；
R1d代表(C1-C4)烷氧基；
R2代表氫、滷素、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基，或R1和R2一起形成下式基團
R3代表NHCOR3a或NHSO2R3b；
R3a和R3b在每次出現時各自獨立地代表(C1-C6)烷基、滷代(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、環丙基、環丁基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺或N(CH3)OCH3；且
R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺、NHSO2CH3或COOCH3；或任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、(C1-C4)烷基、滷素或羥基。
2.根據權利要求1的化合物，其中R1代表氰基、滷素、(C1-C4)烷基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a、OR1b、SO2R1c、NHCOR1d，或任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷素、滷代(C1-C4)烷基或滷代(C1-C4)烷氧基。
3.根據權利要求2的化合物，其中R1代表氰基、滷素、(C1-C4)烷基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a，其中R1a代表氫、羥基、甲基、甲氧基、乙氧基、氨基或三氟甲基；OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基；SO2R1c，其中R1c代表甲基或乙基；NHCOR1d，其中R1d代表甲氧基或乙氧基；或選自下組的5至6元雜芳基呋喃基、噻吩基、吡咯基、四唑基、噻唑基、異噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、氰基、(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基、滷素、滷代(C1-C4)烷基或滷代(C1-C4)烷氧基。
4.根據權利要求3的化合物，其中R1代表氰基、溴、氯、氟、甲基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a，其中R1a代表氫、羥基、甲基、甲氧基、乙氧基、氨基或三氟甲基；OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基；SO2R1c，其中R1c代表甲基或乙基；NHCOR1d，其中R1d代表甲氧基或乙氧基；或選自下組的5至6元雜芳基噻唑基、噻二唑基、異噁唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基，各自任選被選自氰基、氨基、(C1-C4)烷基或滷素的第一取代基和為(C1-C4)烷基的第二取代基取代。
5.根據權利要求1至4任一項的化合物，其中R2代表氫、甲基、乙基、丙基、異丙基、甲氧基、乙氧基、氟、溴、氯，或R1和R2一起形成下式基團
6.根據權利要求1至5任一項的化合物，其中R3代表NHCOR3a，其中R3a在每次出現時代表甲基、乙基、異丙基、CH(C2H5)2、CH(CH3)CH2CH3、CF3、甲氧基、乙氧基、環丙基、環丁基、NH(CH3)或N(CH3)2；或R3代表NHSO2R3b，其中R3b在每次出現時代表環丙基、NH(CH3)、N(CH3)2或N(CH3)OCH3。
7.根據權利要求6的化合物，其中R3代表NHCOR3a，其中R3a代表異丙基。
8.根據權利要求1至7任一項的化合物，其中R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、甲基、甲氧基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、NH(CH3)、NH(C2H5)、N(CH3)2、NHSO2CH3或COOCH3；或選自下組的5至6元雜芳基呋喃基、噻吩基、吡咯基、四唑基、噻唑基、異噻唑基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噁唑基、異噁唑基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基和三嗪基，任選被一或兩個獨立地選自氨基、(C1-C4)烷基或滷素的取代基取代。
9.根據權利要求8的化合物，其中R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、甲基、甲氧基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、NH(CH3)、NH(C2H5)、N(CH3)2、NHSO2CH3或COOCH3；或選自下組的5至6元雜芳基噻吩基、噻唑基、吡啶基或吡嗪基，各自任選被一或兩個獨立地選自氨基、(C1-C4)烷基或滷代的取代基取代。
10.根據權利要求9的化合物，其中R4代表任選被1或2個選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、甲基、甲氧基、CF3、OCF3、CHF2、OCHF2、NH(CH3)、NH(C2H5)、N(CH3)2、NHSO2CH3或COOCH3；或選自下組的5至6元雜芳基噻吩基、噻唑基、吡啶基或吡嗪基，各自任選被選自氨基、甲基、氟或氯的取代基取代。
11.下式化合物或其藥學可接受的鹽
式I(a)
其中
R1代表氰基、滷素、(C1-C4)烷氧基、滷代(C1-C4)烷氧基、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3或COH；
R3代表NHCOR3a；
R3a代表(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、環丙基、環丁基、NH-(C1-C4)烷基胺或N，N-(C1-C6)二烷基胺；且
R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、(C1-C4)烷基或滷素。
12.根據權利要求11的化合物，其中R1代表氰基、氟、溴、氯、甲氧基、OCF3、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3或COH。
13.根據權利要求12的化合物，其中R1代表氰基、氟、溴、氯、甲氧基、OCF3、CH＝NOCH3或COH。
14.根據權利要求11-13任一項的化合物，其中R3代表NHCOR3a，其中R3a代表異丙基、甲氧基、環丙基或N(CH3)2。
15.根據權利要求14的化合物，其中R3代表NHCOR3a且其中R3a代表異丙基。
16.根據權利要求11-15任一項的化合物，其中R4代表選自下組的5至6元雜芳基噻吩基、噻唑基、吡啶基或吡嗪基，每個任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代氨基、(C1-C4)烷基或滷素。
17.根據權利要求16的化合物，其中R4代表選自下組的5至6元雜芳基噻吩基、噻唑基、吡啶基或吡嗪基，各自任選被選自氨基、甲基、氯或氟的取代基取代。
18.下式化合物或其藥學可接受的鹽
式I(b)
其中
R1代表氫、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、C(＝S)NH2、CH＝NOCH3、CH＝NOH、COR1a、OR1b、SO2R1c、NHCOR1d；
R1a代表氫、氨基、羥基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基或滷代(C1-C4)烷基；
R1b代表(C1-C4)烷基、環丙基或環丙基甲基；
R1c代表(C1-C4)烷基；
R1d代表(C1-C4)烷氧基；
R2代表氫、滷素、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基；或R1和R2一起代表下式基團
R3代表NHCOR3a或NHSO2R3b；
R3a和R3b在每次出現時各自獨立地代表(C1-C6)烷基、滷代(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、環丙基、環丁基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺或N(CH3)OCH3；且
R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺、NHSO2CH3或COOCH3。
19.根據權利要求18的化合物，其中R1代表羥基、氰基、氟、氯、溴、硝基、甲基、CF3、CHF2、OCF3、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a、OR1b、SO2R1c或NHCOR1d。
20.根據權利要求19的化合物，其中R1代表氰基、氟、氯、溴、甲基、CF3、CHF2、OCF3、OCHF2、CH＝NOCH3、CH＝NOCH2CH3、C(NOCH3)CH3、C(NOCH2CH3)CH3、COR1a，其中R1a代表氫、羥基、氨基、甲基、甲氧基、乙氧基或CF3；OR1b，其中R1b代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丙基甲基；SO2R1c，其中R1c代表甲基；或NHCOR1d，其中R1d代表甲氧基或乙氧基。
21.根據權利要求18-20任一項的化合物，其中R2代表氫、溴、氯、氟、甲基或甲氧基或R1和R2一起代表下式基團
22.根據權利要求18-21任一項的化合物，其中R3代表NHCOR3a，其中R3a在每次出現時代表甲基、乙基、異丙基、CH(C2H5)2、CH(CH3)CH2CH3、CF3、甲氧基、乙氧基、環丙基、環丁基、NH(CH3)或N(CH3)2；或R3代表NHSO2R3b，其中R3b在每次出現時代表環丙基、NH(CH3)、N(CH3)2或N(CH3)OCH3。
23.根據權利要求22的化合物，其中R3代表NHCOR3a，其中R3a代表異丙基。
24.根據權利要求18-23任一項的化合物，其中R4代表任選被第一取代基和第二取代基取代，第一取代基選自氨基、羥基、氰基、溴、氯、氟、硝基、甲基、甲氧基、CF3、CHF2、OCF3、OCHF2、NH(C2H5)、N(CH3)2、NHSO2CH3或COOCH3，第二取代基選自溴、氯、氟或甲基。
25.根據權利要求24的化合物，其中R4代表任選被選自氰基、溴、氯、氟、甲基或甲氧基的取代基取代的苯基。
26.下式化合物或其藥學可接受的鹽
式I(c)
其中
R1代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、(C1-C4)烷基或滷素；
R3a代表(C1-C6)烷基、滷代(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、環丙基、環丁基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺或N(CH3)OCH3；且
R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺、NHSO2CH3或COOCH3。
27.下式化合物或其藥學可接受的鹽
式I(c)
其中
R1代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的5至6元雜芳基氨基、氰基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷素、CF3、CHF2、OCF3或OCHF2；
R3a代表(C1-C6)烷基、滷代(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、環丙基、環丁基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺或N(CH3)OCH3；且
R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺、NHSO2CH3或COOCH3。
28.根據權利要求26或27的化合物，其中R1代表選自下組的5至6元雜芳基噻唑基、噻二唑基、異噁唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基，各自任選被選自氨基、甲基或氟的第一取代基和為甲基的第二取代基取代。
29.根據權利要求26-28任一項的化合物，其中R3a代表甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基或環丁基。
30.根據權利要求26-29任一項的化合物，其中R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氨基、羥基、氰基、滷素、硝基、(C1-C4)烷基、(C1-C4)烷氧基、滷代(C1-C4)烷基、滷代(C1-C4)烷氧基、NH-(C1-C4)烷基胺、N，N-(C1-C6)二烷基胺、NHSO2CH3或COOCH3。
31.根據權利要求30的化合物，其中R4代表任選被1或2個獨立地選自下組的取代基取代的苯基氰基、滷素、(C1-C4)烷基或(C1-C4)烷氧基。
32.根據權利要求31的化合物，其中R4代表任選被選自下組的取代基取代的苯基氰基、氟、甲基或甲氧基。
33.治療選自下列病症的方法肌肉質量或強度下降、虛弱、性腺機能減退、骨質疏鬆、骨量減少、骨質量或密度減少(獨立或因雄激素去除療法發生)、骨折、肌肉減少、年齡相關性功能衰退(ARFD)、性慾減少、雄性或雌性性功能降礙、勃起功能障礙、抑鬱、前列腺癌、認知能力降低或嗜睡，所述方法包括向有需要的患者使用有效量的根據權利要求1的化合物。
34.根據權利要求33的方法，其中所述病症是骨質疏鬆、骨量減少、虛弱、雄性或雌性性功能障礙或前列腺癌。
35.藥物組合物，該藥物組合物包含作為活性成分的根據權利要求1-32任一項的化合物以及藥學可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
36.根據權利要求1-32任一項的化合物在製備用於治療骨質疏鬆症、骨折、雄性或雌性性功能障礙或前列腺癌的藥物中的用途。
37.根據權利要求1的化合物，用於治療。
38.化合物，該化合物為(S)-N-(6-氰基-9-(3-氟苄基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基)異丁醯胺或其藥學可接受的鹽。
39.化合物，該化合物為環丙烷甲酸[6-氰基-9-(6-氟-吡啶-2-基甲基)-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺或其藥學可接受的鹽。
40.化合物，該化合物為(R)-環丙烷甲酸[6-(1-甲氧基亞氨基-甲基)-9-吡啶-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺或其藥學可接受的鹽。
41.化合物，該化合物為(R)-環丙烷甲酸[6-(1-甲氧基亞氨基-甲基)-9-吡啶-2-基甲基-2，3，4，9-四氫-1H-咔唑-3-基]-醯胺或其藥學可接受的鹽。
全文摘要
本發明提供式(I)化合物或其藥學可接受的鹽；包含有效量的式(I)化合物以及適合的載體、稀釋劑或賦形劑的藥物組合物；和治療生理障礙、特別是虛弱、骨質疏鬆、骨量減少和雄性或雌性性功能障礙的方法，所述方法包括向有需要的患者施用有效量的式(I)化合物。
文檔編號C07D209/88GK101203491SQ200680022629
公開日2008年6月18日 申請日期2006年6月21日 優先權日2005年6月24日
發明者K·R·菲勒斯, J·E·格林, P·K·賈達夫, D·P·馬修斯, D·A·尼爾, E·C·R·史密斯 申請人:伊萊利利公司