漢防己甲素納米乳注射劑及其製備方法

2023-12-01 22:33:01 1

專利名稱：：漢防己甲素納米乳注射劑及其製備方法
技術領域：
：本發明涉及一種漢防己甲素注射液及其製備方法，更具體地說是一種漢防己甲素納米乳注射劑及其製備方法。
背景技術：
：納米乳是一種透明、熱力學穩定且各向同性的油水混合系統，一般由油相，水相、表面活性劑與助表面活性劑組成。納米乳可自發形成，製備工藝簡單，其分散相質點多為球形，大小均勻，粒徑通常在10100nm。作為新型給藥系統它具有穩定，緩釋，可提高藥物生物利用度及發揮靶向等作用。靜脈注射給藥後，被體內網狀內皮系統吞噬而被動進入肝脾，達到肝耙向作用。漢防己甲素(tetrandrine，TET)，又稱粉防己鹼，是從防己科千金藤屬植物粉防己的塊根中提取的雙苄基異喹啉類生物鹼。實驗研究證明，TET有抗肝纖維化，降低門靜脈高壓，防治腫瘤等作用，臨床可用於慢性肝炎、肝硬化的治療。但TET不溶於水，且安全性較低，治療窗窄，有效治療量約為中毒致死量的66%。現有普通片劑和其鹽的注射液，規格分別為20mg/片和30mg/支，2ml/支。普通製劑生物利用度不高，且無組織靶向性，既影響了該藥的治療效果，又容易產生毒副作用。中國專利CN1813737A公開了一種漢防己甲素固體脂質納米粒及其製備方法。該專利為提高漢防己甲素生物利用度、降低毒副作用及提高肝耙向性，採用脂質材料、乳化，劑製成漢防己甲素固體脂質納米粒。但固體脂質納米粒載藥能力有限，而且脂質材料往往具有多晶型，影響藥物釋放效果。中國專利CN1813736A公開了一種漢防己甲素注射乳劑及其製備方法。該專利為提高漢防己甲素生物利用度、降低毒副作用及延緩藥效，採用高壓乳勻方法製備乳劑。該法採用的配方和製法製得的乳劑一般粒徑超過100nm，不是透明溶液，穩定性不理想，進而影響藥物釋放效果。
發明內容本發明是為避免上述現有技術所存在的不足之處，提供一種外觀透明、粒徑在10100nm的漢防己甲素納米乳注射劑及其製備方法，以提高漢防己甲素的溶解度，進而提高其生物利用度，增加肝靶向性，降低用藥劑量和毒副作用，提高療效和安全性。本發明解決技術問題所採用的技術方案是本發明的漢防己甲素納米乳注射劑，其特徵在於按重量百分含量計，其構成為漢防己甲素0.5%—2.0%表面活性劑10.0%_30.0%助表面活性劑0.0%—10.0%油3.0Q/0—15.00/o等張劑1.5%—3.0%穩定劑0.5%_2.5%水50.%—75.0%。所述的表面活性劑是吐溫類、泊洛沙姆188、聚乙二醇-維生素E琥珀酸酯、聚氧乙烯蓖麻油中一種或一種以上，優選為吐溫80和/或聚乙二醇-維生素E琥珀酸酯；所述的助表面活性劑是司盤80、卵磷脂、無水乙醇、甘油、聚乙二醇400、丙二醇中的一種或一種以上；優選為聚乙二醇400和/或丙二醇；所述的油是中鏈甘油三酯、大豆油、橄欖油、油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯、維生素E中的一種或一種以上；優選為大豆油和/或油酸乙酯；所述的等張劑是甘油；所述的穩定劑是油酸；所述的水是注射用水。本發明的漢防己甲素納米乳注射劑，其特徵在於所述的納米乳的粒徑在10100nm之間。本發明的漢防己甲素納米乳注射劑的製備方法，其特徵是在常溫常壓下按如下步驟操作a、按所需用量取漢防己甲素、表面活性劑、助表面活性劑、油、等張劑、穩定劑和注射用水，備用；b、首先將漢防己甲素溶於表面活性劑和助表面活性劑的混合液中，再加入油、等張劑和穩定劑，混勻為混合料備用；c、將步驟b所得的混合料攪拌，同時滴加水直至體系形成澄明的液體，即得粒徑為10100nm的漢防己甲素納米乳。本發明的漢防己甲素納米乳注射劑的製備方法，其特徵是在常溫常壓下按如下步驟操作a、按所需用量取漢防己甲素、表面活性劑、助表面活性劑、油、等張劑、穩定劑和注射用水，備用；b、將表面活性劑、助表面活性劑、油、等張劑和穩定劑混勻，攪拌，同時滴加水直至體系形成澄明的液體；c、加入漢防己甲素，攪拌溶解，即得粒徑為10100nm的漢防己甲素納米乳。一、穩定性試驗-.1、高速離心對漢防己甲素納米乳穩定性的影響將納米乳放入高速離心機中，以10000r/min速度離心20min，觀察，未見分層、沉澱、渾濁等現象，納米乳溶液均保持澄清透明。2、光照加速實驗將漢防己甲素納米乳注射劑，置於光照40001x(普通日光下，室溫)下留樣10天，分別於放置5，10d時取樣，測定納米乳性質參數，結果均未發現分層、沉澱、渾濁等現象，納米乳溶液均保持澄清透明。納米乳的電導率、粘度、載藥量無明顯變化。3、溫度對漢防己甲素納米乳穩定性的影響製備納米乳分別置於4°C、25°C、37"條件下留樣3個月觀察，分別在0，1，2，3月時對樣品進行外觀形態觀察、電導率、粘度及載藥量等一系列納米乳性質測定，均未發現分層、沉澱、渾濁等現象，納米乳溶液均保持澄清透明。納米乳的電導率、粘度、載藥量無明顯變化。二、漢防己甲素納米乳及其注射液在小鼠體內的分布取昆明種小鼠，雌雄各半，100隻，體重25—30g，隨機分為20組，每組5隻，給藥前12h禁食不禁水，其中IO組尾靜脈注射漢防己甲素納米乳(含量為10mg/ml，按10mg/kg小鼠體重劑量給藥)，作為實驗組；另外10組注射漢防己甲素注射液(給藥劑量相同)，作為對照組。實驗組和對照組於給藥後5、15、30min、1、2、5、12、24、36、48h分別摘眼球取血，取血後立即處死動物，迅速解剖取出心、肝、脾、肺、腎等組織器官。各器官分別稱重，處理生物樣品後採用高效液相色譜法測定各樣品的漢防己甲素含量，計算各臟器中藥物含量。結果見表l、2。表l注射液組小鼠血液與各組織中藥物濃度(n=5)tableseeoriginaldocumentpage7由表中數據可以看出，納米乳延緩了藥物在血漿中的釋放，當給藥12h後，注射液組中漢防己甲素僅有0.31ug/ml，而納米乳組中仍達到lug/ml以上；而且注射液在5min-10min出現明顯突釋效應，而納米乳在血漿中的釋放比注射液組呈現更平滑的趨勢。在肝臟中，納米乳組藥物濃度明顯高於注射液組，脾臟的藥物濃度也有所升高，這可能與納米乳粒徑一般為10-100nm，粒子容易被網狀內皮系統(RES)吞噬有關。而腎臟中納米乳組的藥物濃度相比注射液組有較為顯著下降，提示納米乳具有降低漢防己甲素在腎臟蓄積的趨勢。為了進一步分析小鼠體內藥動學參數，應用DAS2.0藥動學程序對小鼠血液的體內藥時數據進行處理，以靜脈給藥模型進行擬和，具體參數見表3。表3漢防己甲素在小鼠血漿中的藥動學參數(n-S.x士s)tableseeoriginaldocumentpage8*P<0.05與納米乳組相比。從藥動學參數來看，納米乳組血漿AUC大於注射液組，且納米乳組血漿滯留時間明顯延長，MRT分別為95h和42h。顯示納米乳可以延緩藥物釋放。為進一步分析評價納米乳的靶向性，本研究計算了靶向指數TI，公式如下:TI-(AUCo.co)納米乳/(AUCo-oo)注射液，應用DAS2.0藥動學程序對小鼠各臟器的體內藥時數據進行處理，以靜脈給藥模型進行擬合，得納米乳組與注射液組各臟器AUC，按照靶向指數公式計算，具體結果見表4。表4納米乳組與注射液組靶向參數比較(n-5.x士s)tableseeoriginaldocumentpage8從表中可知，靜脈注射納米乳與普通注射劑相比在主要臟器組織的分布具明顯的選擇性；漢防己甲素納米乳肝臟的靶向指數達到2.934，表明其具有一定的肝臟趨向性，而在其他臟器中心臟、腎臟中TI分別為0.493、0.398。表明納米乳組較注射液有降低漢防己甲素在腎及心臟中分布的趨勢。結果表明本發明製備的漢防己甲素納米乳性質穩定，具有緩釋性和肝臟耙向性，能提高藥物的生物利用度，降低毒副作用。本發明的給藥途徑主要採用肌肉注射或靜脈注射方式。本發明對鎮痛、肝纖維化、肝硬化、肝癌等治療有積極作用。與己有技術相比，本發明的有益效果體現在1、本發明通過增大表面活性劑的用量至處方量的10%以上或使用助表面活性劑，輕微攪拌即可製成粒徑在10100nm的納米乳劑，大大增加了漢防己甲素的分散性，提高了藥物生物利用度低，並具有緩釋性和肝靶向性。2、本發明製得的漢防己甲素納米乳為油冰納米乳，稀釋實驗表明，其可以進一步加入注射用水、生理鹽水、葡萄糖溶液等稀釋，形成澄清透明的納米乳。3、本發明具有納米乳熱力學穩定的共性，可熱壓滅菌或濾過除菌。4、本發明製備方法簡單，攪拌均勻即可實現乳化，便於工業化生產。圖1為本發明方法所製備的漢防己甲素納米乳的粒徑分布圖。圖2為本發明方法所製備的漢防己甲素納米乳透射電鏡圖。以下通過具體實施方式，對本發明作進一步說明。具體實施例方式實施例ha、取漢防己甲素0.6g、吐溫-8015.5g、聚乙二醇4007.8g、油酸乙酯5g、甘油1.5g、油酸0.5g和注射用水70g，備用；b、將漢防己甲素溶於吐溫-80和聚乙二醇400的混合液中，加入油酸乙酯、甘油及油酸，混勻，備用；c、在常溫常壓下攪拌，同時緩慢滴加所述量的注射用水，直至體系形成澄明的液體，即得外觀透明的漢防己甲素納米乳。d、將漢防己甲素納米乳進行灌裝、滅菌，製得漢防己甲素納米乳注射劑。經檢測，該漢防己甲素納米乳的平均粒徑為16.8nm。實施例2:a、取漢防己甲素1.2g、聚乙二醇-維生素E琥珀酸酯15.0g、丙二醇8.0g、注射用大豆油10.0g、甘油2.0g、油酸2.0g和注射用水62g，備用；b、將漢防己甲素溶於聚乙二醇-維生素E琥珀酸酯和丙二醇的混合液中，加入注射用大豆油、甘油及油酸，混勻，備用；c、在常溫常壓下攪拌，同時緩慢滴加所述量的注射用水，直至體系形成澄明的液體，即得粒徑在10100nm，外觀透明的漢防己甲素納米乳。d、將漢防己甲素納米乳進行灌裝、滅菌，製得漢防己甲素納米乳注射劑。經檢測，該漢防己甲素納米乳的平均粒徑為21.5nm。實施例3:a、取漢防己甲素1.8g、聚乙二醇-維生素E琥珀酸酯19.5g、丙二醇7.0g、大豆油15.0g、甘油1.2g、油酸2.5g和注射用水50.5g，備用；b、將聚乙二醇-維生素E琥珀酸酯、丙二醇、油酸乙酯、甘油、油酸混勻，在常溫常壓下攪拌，同時緩慢滴加注射用水直至體系形成澄明的液體；c、加入漢防己甲素，攪拌溶解，即得粒徑在10100nm，外觀透明的漢防己甲素納米乳。d、將漢防己甲素納米乳進行灌裝、滅菌，製得漢防己甲素納米乳注射劑。經檢測，該漢防己甲素納米乳的平均粒徑為18.3nm。實施例4:a、取漢防己甲素1.2g、吐溫-8022.0g、聚乙二醇4005.0g、油酸乙酯8.0g、甘油2.3g、油酸2.5g和注射用水59.0g，備用；b、將吐溫-80、聚乙二醇400、油酸乙酯、甘油、油酸混勻，在常溫常壓下攪拌，同時緩慢滴加注射用水直至體系形成澄明的液體；c、加入漢防己甲素，攪拌溶解，即得粒徑在10100nm，外觀透明的漢防己甲素納米乳。d、將漢防己甲素納米乳進行灌裝、滅菌，製得漢防己甲素納米乳注射劑。經檢測，該漢防己甲素納米乳的平均粒徑為24.0nm。實施例5:a、取漢防己甲素1.0g、吐溫-8029.0g、油酸乙酯7.5g、甘油2.5g、油酸2.5g和注射用水57.5g，備用；b、將吐溫-80、油酸乙酯、甘油、油酸混勻，在常溫常壓下攪拌，同時緩慢滴加注射用水直至體系形成澄明的液體；c、加入漢防己甲素，攪拌溶解，即得粒徑在10100nm，外觀透明的漢防己甲素納米乳。d、將漢防己甲素納米乳進行灌裝、滅菌，製得漢防己甲素納米乳注射劑。經檢測，該漢防己甲素納米乳的平均粒徑為32.5nm。圖1為實施例1所製備的漢防己甲素納米乳粒徑圖。圖2為實施例1所製備的漢防己甲素納米乳電鏡照片(X50000倍)。權利要求1.一種漢防己甲素納米乳注射劑，其特徵在於按重量百分含量計，其構成為漢防己甲素0.5％-2.0％表面活性劑10.0％-30.0％助表面活性劑0.0％-10.0％油3.0％-15.0％等張劑1.5％-3.0％穩定劑0.5％-2.5％水50.％-75.0％。2、根據權利要求l所述的漢防己甲素納米乳注射劑，其特徵在於所述表面活性劑是吐溫類、泊洛沙姆188、聚乙二醇-維生素E琥珀酸酯、聚氧乙烯蓖麻油中一種或一種以上；所述的助表面活性劑是司盤80、卵磷脂、無水乙醇、甘油、聚乙二醇400、丙二醇中的一種或一種以上；所述的油是中鏈甘油三酯、大豆油、橄欖油、油酸乙酯、肉豆蔻酸異丙酯、維生素E中的一種或一種以上；所述的等張劑是甘油；所述的穩定劑是油酸；所述的水是注射用水。3、根據權利要求2所述的漢防己甲素納米乳注射劑，其特徵在於所述表面活性劑為吐溫80和/或聚乙二醇-維生素E琥珀酸酯；所述的助表面活性劑為聚乙二醇400和/或丙二醇；所述的油為大豆油和/或油酸乙酯。4、根據權利要求1所述的漢防己甲素納米乳注射劑，其特徵在於所述的納米乳的粒徑在10100nm之間。5、一種權利要求1所述漢防己甲素納米乳注射劑的製備方法，其特徵是在常溫常壓下按如下步驟操作a、按所需用量取漢防己甲素、表面活性劑、助表面活性劑、油、等張劑、穩定劑和注射用水，備用；b、首先將漢防己甲素溶於表面活性劑和助表面活性劑的混合液中，再加入油、等張劑和穩定劑，混勻為混合料備用；C、將步驟b所得的混合料攪拌，同時滴加水直至體系形成澄明的液體，即得粒徑為10100nm的漢防己甲素納米乳。6、一種權利要求1所述漢防己甲素納米乳注射劑的製備方法，其特徵是在常溫常壓下按如下步驟操作a、按所需用量取漢防己甲素、表面活性劑、助表面活性劑、油、等張劑、穩定劑和注射用水，備用；b、將表面活性劑、助表面活性劑、油、等張劑和穩定劑混勻，攪拌，同時滴加水直至體系形成澄明的液體；c、加入漢防己甲素，攪拌溶解，即得粒徑為10100nm的漢防己甲素納米乳。全文摘要本發明公開了一種漢防己甲素納米乳注射劑及其製備方法，由漢防己甲素、表面活性劑、助表面活性劑、油相和水相組成。本發明納米乳製備方法簡單，其外觀透明，粒徑在10-100nm；本發明納米乳穩定性好；能顯著提高漢防己甲素的溶解度，從而提高藥物的生物利用度；並且改變藥物的體內過程，增加對肝臟的靶向性，降低毒副作用，提高療效。文檔編號A61P1/16GK101278912SQ20081002484公開日2008年10月8日申請日期2008年5月15日優先權日2008年5月15日發明者蕾吳,桂雙英申請人:安徽中醫學院