製造生物聚合物的方法
2024-03-01 04:42:15
製造生物聚合物的方法
【專利摘要】本發明涉及一種製造生物聚合物的方法，包括以下工序：提供培養基，包括一碳源、一氮源及複數礦源；將真菌接種於所述培養基，接種量體積百分比是0.2-10％；培養所述培養基；過濾所述培養基，從而分離所述真菌與所述培養基；以及淨化所述生物聚合物；其中所述碳源對所述氮源的摩爾比率是5:1，所述培養基的酸鹼值是pH5-9，溫度是25-45℃，接種量體積百分比是0.2-2％，搖床轉速是50-200轉數/分，培養時間是12-60小時。所製得的生物聚合物分子量是2.466x104-2.68x104道爾頓，具有複數官能團、複數化學元素、糖、蛋白質，最低絮凝效率90％，酸鹼值是pH3-7，溫度是10-10℃。
【專利說明】製造生物聚合物的方法
【技術領域】
[0001]本發明涉及於製造生物聚合物的方法，特別是涉及黃麴黴培養，以製造如生物絮凝劑、生物助凝劑等的生物聚合物的方法。
【背景技術】
[0002]當水體由於大量的有害物質，如微生物、膠體及毒性物質入侵而產生不利影響，從而發生水汙染。危險的化學品處理不當而排至下水道將導致毒性物質進入生態系統，於是汙染水供給，而危害水生生物。凝結及絮凝的工序是常見移除水中膠體或懸浮物質的手法。如眾所周知，膠體是帶有負離子(約_30mV)，因此一般會採用正離子合成聚合物以中和膠體電荷，促使凝聚物沉澱。這些聚合物非常的昂貴，會汙染環境，並且處理時必須遵守安全預防措施。為克服這些存在的問題，替代且適合的方案是採用的通過菌株從活性汙泥製造的微生物絮凝劑或生物絮凝劑。
[0003]美國專利公開案2002/0074295A1揭示了一種處理汙染液體的工序，所述液體與兩種帶相反電荷的聚合物材料接觸，其中至少一所述聚合物材料帶有支鏈，並且該些聚合物材料是以來自天然來源種類為佳(例如，藻類、細菌之類)。能使凝聚物形成且將所述凝聚物自所述液體分離。所述第一種和第二種聚合物材料可選自由多糖、蛋白質、脂質以及多羥基醇所組成的群族。然而該公開的專利的缺點在於必須採取兩段水處理工序，首先，汙染液體以第一種聚合物 材料(自藍綠藻取得的具負離子，有支鏈的聚合物材料)進行處理，接著一段時間後，與第二種聚合物材料(自聚氨基葡糖取得的具正離子，無支鏈的聚合物材料)接觸，以消除水中的汙染物。此兩段水處理工序不僅不便且耗時，更需要大劑量的聚合物材料，方能降低水中汙染物的濃度。
[0004]由於可生物降解無毒及其降解中間物不會引發二次汙染的特性，微生物產生的生物絮凝劑已獲得產學界的多所關注。已知數種微生物能製造生物絮凝劑，例如醬油麴黴、擬青黴、紅串紅球菌、無花果沙雷菌以及膠質芽孢桿菌。例如，美國公告專利5，250，201揭示了一種從液體分離藍藻細菌，特別是菌株J-1的方法，以及一種培養藍藻細菌以製造作為可使水中的碳氫化合物及油類形成乳狀液的乳化劑的聚合物。該公開專利更有關以淨化及分離技術製造的聚合物質，以及通過採用藍藻細菌的排出物質，影響石油二次開採的方法。乳化劑的乳化作用是與溫度及PH酸鹼值息息相關，研究顯示其在約26°C，pH酸鹼值在5-9的範圍內，能達到100%最大值。然而，該公開專利的缺點即在於乳化劑的乳化作用必須有限的溫度及PH酸鹼值範圍內，方能維持其最佳作用。
[0005]如他，美國公告專利4，948，733揭示了衍生自野生株生枝動膠菌115，名為生枝動膠菌115SL以及生枝動膠菌115SLR兩種新的菌株。生枝動膠菌的培養冷凍_70°C儲存在含有7%二甲亞碸與15%甘油的胰化酪蛋白大豆培養液(TSB)培養基中。無論是儲存在胰化酪蛋白大豆培養液培養基中，或者儲存在是化學成分為一公升蒸餾水含有25克葡萄糖、2*K2HP04、1*KH2P04、1*NH4C1、0.2 克 MgSO4.7Η20、0.01 克酵母抽提物的培養液，其中葡萄糖、MgSO4.7Η20、酵母抽提物及鹽均分別高壓消毒，生枝動膠菌的菌株均進行常規培養。100毫升的生枝動膠菌培養成長轉動搖床或攪拌生物反應器(200轉數/分)，30°C為期長達兩周。由於不會如其母菌株115生長表多糖莢膜層，此兩新菌株會產生新的表多糖(EPS)且具備母菌株所沒有，且可取的數種特質，包括改良的培養特性，115SL表多糖反而不局限在細胞周圍的區域分泌黏液層。由於細胞不會受制在因營養素限制而致使其低速率成長或死亡的絮體內，新菌株具備了更一致且可複製的成長循環及增加的成長率。是以，表多糖的產量更為一致且滴定濃度更高。將表多糖從細胞分離也更加容易且更合算。然而，生枝動膠菌的菌株必須在高成本的高鹽度培養基中培育。此外，由於在水處理時，無莢膜細胞的周圍較少電荷出現，因此無莢膜層的生枝動膠菌菌株恐致使金屬結合能力的降低。
[0006]於是，提供本發明，一種在適當的培養基及環境條件中培養微生物菌株的有效方法，以製造最佳量的生物聚合物物質十分必要。並且，此生物聚合物物質或可有助於減低水汙染，繼而有助於永續水產養殖的生物多樣性。
【發明內容】
[0007]本發明的主要目的在於提供一種製造生物聚合物的方法，無需使用合成聚合物以大幅降低生產成本。
[0008]本發明的另一目的在於提供一種培養真菌的方法，以製造用於液體澄清及水處理的生物聚合物。
[0009]本發明的又一目的在於提供一種培養真菌的方法，以製造最佳量的生物聚合物。
[0010]於是，通過下 述本發明的揭示以實現前述目的。本發明涉及一種製造生物聚合物的方法，包括以下工序提供培養基，包括一碳源、一氮源及複數礦源；將真菌接種於所述培養基，接種量體積百分比是0.2-10% ;將黃麴黴接種於所述培養基，接種量體積百分比是0.2-10% ;培養所述培養基；過濾所述培養基，從而分離所述黃麴黴與所述培養基；淨化所述生物聚合物；其中所述碳源對所述氮源的摩爾比率是5:1，所述培養基的酸鹼值是PH5-9，溫度是25-45°C，接種量體積百分比是0.2_2%，搖床轉速是50-200轉數/分，培養時間是12-60小時。所製得的生物聚合物分子量是2.466x104-2.68x104道爾頓，具有複數官能團、複數化學元素、糖、蛋白質，最低絮凝效率90%，酸鹼值是pH3-7，溫度是10-100°C。
【專利附圖】
【附圖說明】
[0011]為能從下述詳細說明進一步了解本發明的技術特徵與內容，下面結合較佳實施例的附圖進行說明。
[0012]圖1a顯示生物絮凝劑與複數碳源(蔗糖、葡萄糖、果糖、乳糖、澱粉以及甘油)在高嶺土懸濁液72小時培養後的絮凝效率；
[0013]圖1b顯示生物絮凝劑與複數氮源(蛋白腖、酵母抽提物、穀氨酸、尿素、硫酸銨、硝酸銨以及硝酸鈉)在高嶺土懸濁液72小時培養後的絮凝效率；
[0014]圖1c顯示碳源/氮源的摩爾比率對生物絮凝劑製造的影響；
[0015]圖2顯示培養基中的pH酸鹼值對生物絮凝劑製造的影響；
[0016]圖3顯示培養基中的溫度對生物絮凝劑製造的影響；
[0017]圖4顯示培養基中的黃麴黴接種量對生物絮凝劑製造的影響；
[0018]圖5顯示培養基的搖床轉速對生物絮凝劑製造的影響；[0019]圖6顯示培養基中存在的礦源對生物絮凝劑製造的影響；
[0020]圖7顯示黃麴黴成長曲線與生物絮凝劑製造的變化的關係；
[0021]圖8顯示生物絮凝劑的pH酸鹼值及熱穩定度；
[0022]圖9a顯示生物絮凝劑的表面；
[0023]圖9b顯示高嶺土懸濁液的表面；
[0024]圖9c顯示通過生物絮凝劑形成的凝聚物。
【具體實施方式】
[0025]因應所需，於此公開發明的詳細實施例；然而，應該理解公開的本發明的實施例僅是本發明的示例，而可以各種的形式來實施本發明。因此，於此公開的具體功能細節不應被解釋為限制，而僅應解釋為權利要求的基礎。應了解附圖和詳細說明並非意圖將說明書限於所公開的特定形式，而是相反地，意圖涵蓋屬於權利要求的精神和範圍內的所有改進、均等物和替代方 案。另外，在本文中使用的任何標題僅出於組織目的並且並非意圖限制說明書的範圍。如本文使用，措詞「可以」用來表達許可意義(即，意指「具有可能性」)，而非強制意義(即，意指「必須〃)。同樣地，措詞「包括(include)，，,包括(including)」和「包括(includes) 」意指「包括但不限於」。並且除非另外的注釋，措詞「一」表示「至少一」，而措詞「複數」表示「一或多」。術語按照那些在相關領域技術人員常規的用法來理解。在上述的各附圖中，相似的附圖標記應被理解為表示相同、相似或者相應的特徵或功能。以下參照圖la-9c對本發明進行描述。
[0026]本發明涉及一種製造生物聚合物的方法，包括以下工序:
[0027]提供培養基，包括一碳源、一氮源及複數礦源；
[0028]將真菌接種於所述培養基，接種量體積百分比是0.2_10%，所述真菌實在斜面培養基中進行培養；
[0029]培養所述培養基，條件為搖床轉速是0-250轉數/分，培養時間是12-96小時，溫度是 15-45 0C ；
[0030]過濾所述培養基，從而分離所述真菌與所述培養基；
[0031]淨化所述生物聚合物；
[0032]其特徵在於:
[0033]所述真菌是黃麴黴；
[0034]所述碳源是選自由蔗糖、葡萄糖、果糖、乳糖、澱粉以及甘油所組成的群族；
[0035]所述氮源是選自由蛋白腖、酵母抽提物、穀氨酸、尿素、硫酸銨、硝酸銨以及硝酸鈉所組成的群族；
[0036]所述複數礦源是選自由鎂、鉀、鐵、氯以及其任意組合所組成的群族；
[0037]所述碳源對所述氮源的摩爾比率是5:1，所述培養基的pH酸鹼值是5-9，溫度是25-450C，接種量體積百分比是0.2-2%,搖床轉速是50-200轉數/分，培養時間是12-60小時。
[0038]在本發明製造生物聚合物的方法的一較佳實施例中，所述培養基是在轉動搖床或攪拌生物反應器中進行培養。
[0039]在本發明製造生物聚合物的方法的一較佳實施例中，所述碳源是蔗糖。[0040]在本發明製造生物聚合物的方法的一較佳實施例中，所述氮源是蛋白腖。
[0041]在本發明製造生物聚合物的方法的一較佳實施例中，所述培養基的pH酸鹼值是7。
[0042]在本發明製造生物聚合物的方法的一較佳實施例中，所述培養基的溫度是40°C。
[0043]在本發明製造生物聚合物的方法的一較佳實施例中，所述接種量體積百分比是2%。
[0044]在本發明製造生物聚合物的方法的一較佳實施例中，所述搖床轉速是200轉數/分。
[0045]在本發明製造生物聚合物的方法的一較佳實施例中，所述培養時間是60小時。
[0046]本發明更涉及一種所述的製造生物聚合物的方法所製得的生物聚合物，所述生物聚合物的分子量是2.466x104-2.68x104道爾頓，具有複數官能團、複數化學元素、糖、蛋白質，PH酸鹼值在3-7間，溫度在10-100°C間的最低絮凝效率是90%。
[0047]在本發明製得的生物聚合物的一較佳實施例中，所述複數官能團是選自由羥基、碳氫化物、醯胺原子團、羧基、胺類、甲氧基以及其任意組合所組成的群族。
[0048]在本發明製得的生物聚合物的一較佳實施例中，所述複數化學元素包括碳、氫、氧、氮以及硫。
[0049]以下是本發明一種製造生物聚合物的方法的實施例，以使本發明的優點更明顯易懂。應該理解下述本發明的實施例僅是示例，而非對本發明的限制。
[0050]實施例
[0051]真菌，黃麴黴菌株44-1由馬來西亞吉隆坡，馬來西亞博特拉大學生物學研究所微生物保藏單位，生物技術機構，生物工業實驗室，生物技術部門(UNiCC)分離並且保存。黃麴黴存貯培養是在瓊脂斜面培養基，溫度維持在4°C，並且每30-40天進行一次隔代培養。瓊脂斜面培養基包含4g/L馬鈴薯提取物、20g/L葡萄糖、15g/L瓊脂，初始pH酸鹼值是
5.6±0.2。
[0052]提供的培養基包括一碳源、一氮源及複數礦源，所述碳源是選自由蔗糖、葡萄糖、果糖、乳糖、澱粉以及甘油所組成的群族；所述氮源是選自由蛋白腖、酵母抽提物、穀氨酸、尿素、硫酸銨、硝酸銨以及硝酸鈉所組成的群族；所述複數礦源是選自由鎂、鉀、鐵、氯以及其任意組合所組成的群族。在一較佳實施例中，所述培養基包含30g/L蔗糖作為碳源，
3.0g/L蛋白腖作為氮源，0.5g/L含水硫酸鎂(MgSO4.7Η20)，0.5g/L氯化鉀(KCl)，0.01g/L硫酸亞鐵(FeSO4)，1.0g/L磷酸氫二鉀(K2HPO4)，初始pH酸鹼值調整成6.0。在另一較佳實施例中，其中的氯化鉀亦可以以氯化鈉、氯化鈣、氯化鎂、氯化錳(II)以及氯化鐵(III)提供。在一較佳實施例中，所述碳源對所述氮源的摩爾比率以0:11:1、2:1、3:1、4:1、5:1、10:1、20:1、30:1、40:1 及 50:1 進行測試。
[0053]然後將黃麴黴接種於所述培養基，以產生黃麴黴接種體，接種量體積百分比是0.2-10%。在一較佳實施例中，所述培養基是在瓊脂斜面培養基中培養。含有黃麴黴的所述瓊脂斜面培養基切成數塊，並且浸泡在100毫升的蒸餾水中。黃麴黴懸浮在蒸餾水中，然後通過轉動搖床或攪拌生物反應器以30°C進行24小時的培養。隨後過濾懸浮的黃麴黴獲得黃麴黴接種體。
[0054]培養工序通過調整多個培養參數，例如碳源、氮源、碳源對氮源的摩爾比率、pH酸鹼值、溫度、搖床轉速、培養時間，以獲得如生物絮凝劑、生物助凝劑及類似其的生物聚合物。在一較佳實施例中，生物絮凝劑是細菌，真菌，藻類及酵母所分泌的細胞外或細胞內的生物聚合物物質。生物絮凝劑的組成及特性視微生物絮凝劑-產生菌、培養基組成以及環境條件而決定。
[0055]在另一較佳實施例中，培養基是通過轉動搖床或攪拌生物反應器以搖床轉速0-250轉數/分，溫度15-45°C，進行12-96小時的培養。隨後進行過濾從而分離黃麴黴為殘渣形態，生物絮凝劑為濾液形態。將黃麴黴的生物質放置在烤爐中4個小時，以80°C進行乾燥。
[0056]生物絮凝劑的淨化
[0057]2公升95%冷乙醇(4°C )加入I公升含有生物絮凝劑的濾液以獲取沉澱物。將獲取的所述沉澱物再溶解在100毫升的去離子水。將50毫升，2%的氯化十六烷吡啶(CPC)加入溶液中並且攪拌。三小時後,收集所述沉澱物並溶解在100毫升，0.5摩爾的氯化鈉溶液中。然後再將2公升95%冷乙醇加入以獲取沉澱物。以乙醇衝洗所述沉澱物。且溶解所述沉澱物在5毫升的去離子水並予以真空乾燥。I公升含有生物絮凝劑的濾液可獲得約
0.402克的純生物絮凝劑。
[0058]絮凝效率的決定
[0059]高嶺土懸濁液是用以測量含有生物絮凝劑濾液的絮凝效率。2克的高嶺土(德國莫克產)懸濁於I公升的去離子水中。將I毫升含有生物絮凝劑的濾液加入99毫升的高嶺土懸濁液在400毫升 的燒杯中後，以I摩爾的氫氧化鈉或鹽酸將pH酸鹼值調整成7.0。將混合物以200轉數/分劇烈地攪拌I分鐘後，再以80轉數/分緩慢地攪拌5分鐘。然後通過可沉降固體測定儀(JLT6，VELP SCIENTIFICA，Italy)使其定立5分鐘。通過分光亮度計(GENESYS10UV, Thermo Scientific, USA)以550納米，測量澄清液(獲得的上清液)的光密度(OD)。將含有生物絮凝劑的濾液以空白培養基取代，進行同樣條件的對照控制試驗。絮凝作用及可依據下述公式計算:
[0060]絮凝效率=(A-B)/AXlOO %
[0061]A及B分別是對照試驗與樣品上清液的0D550 (550納米的光密度)。
[0062]圖1a顯示生物絮凝劑與多種碳源(葡萄糖、果糖、乳糖、澱粉以及甘油)相同濃度取代蔗糖在高嶺土懸濁液72小時培養後的絮凝效率。當果糖及甘油作為培養基中的碳源，生物絮凝劑相對較低時，對生物絮凝劑產量而言，以蔗糖、澱粉及葡萄糖為較佳的碳源。然若如因圖1a顯示的最高的生物絮凝劑，蔗糖可選作為單獨的碳源。
[0063]在相同的培養基中培養黃麴黴研究氮源的影響。圖1b顯示除了僅氮源作改變。總的來說，有機氮源(蛋白腖、酵母抽提物及尿素)有利於通過黃麴黴產生生物絮凝劑，而非有機氮源，硫酸銨及硝酸鈉則會導致較低的生物絮凝劑產量，但硝酸銨會影響澱粉培養基的生物絮凝劑製造。如圖1b顯示，對生物絮凝劑製造而言，蛋白腖是較佳的。
[0064]如圖1c顯示，當碳源對氮源(C:N)的摩爾比率增加至5:1，可觀察到生物絮凝劑產量明顯地增加。再增加的C:N摩爾比率則無相對的影響，甚至導致生物絮凝劑產量的降低。此表示C:N摩爾比率5:1對生物絮凝劑製造而言是較佳的。
[0065]培養基的pH酸鹼值亦會影響微生物絮凝劑-產生菌的養分吸收與酶促反應。介於PH酸鹼值範圍2-9之間，屬酸的pH酸鹼值範圍2-4的絮凝效率最低。pH酸鹼值範圍5_9對生物絮凝劑製造而言是較佳的。然，如圖2所示，pH酸鹼值7對生物絮凝劑製造而言是最佳的。
[0066]圖3顯示培養基中的溫度對生物絮凝劑製造的影響。培養溫度超過25°C後，絮凝效率顯著地在40°C時達到86.2%。最大的酶促反應僅能在最佳溫度獲得。較低的培養溫度可致使黃麴黴部分地蟄伏，其產生生物絮凝劑的酶促系統無法完全激活。因此，如圖3所示，對生物絮凝劑製造而言的最佳溫度是40°C。
[0067]圖4顯示培養基中的黃麴黴接種量對生物絮凝劑製造的影響。黃麴黴接種體的接種量體積百分比從0.2至2%逐漸增加。當菌株的接種量體積百分比為2%時，生物絮凝劑的絮凝效率達到86.6%。然而，再徒增接種量亦未能致使更高的絮凝效率。2%的接種量體積百分比，對黃麴黴而言是最佳的接種量，能促使黃麴黴適應培養基，並助長生物絮凝劑的生產率。
[0068]圖5顯示培養基的搖床轉速在50-200轉數/分時，生物絮凝劑產量最高。增加最大速度至250轉數/分，則致使生物絮凝劑產量降低。搖床轉速決定了培養基中的溶氧度，其亦會影響黃麴黴的養分吸收與酶促反應。200轉數/分的搖床轉速是生物絮凝劑製作的最佳速度。
[0069]圖6顯示培養基中存在的礦源對生物絮凝劑製造的影響。如圖6所示鈉、鉀、鈣、鎂的存在會促進黃麴黴的生物絮凝劑製作，但鐵存在則會發生抑制。參見圖6，鉀是用於生物絮凝劑製作的最佳礦源。
[0070]圖7顯示黃麴黴成長曲線與生物絮凝劑製造的變化的關係。總的來說，生物絮凝劑產量與生物質的成長成正比且隨時間增加。生物絮凝劑的絮凝效率在60小時早期穩定階段即增至最大(87.2% )，表示生物絮凝劑是通過生物合成的長成而製造。抗絮凝酶類的活性，致使在晚期穩定階段絮凝效率開始降低。72小時後，黃麴黴的死亡率開始超過其產生率。菌株進入衰退階段，生物絮凝劑的絮凝效率逐漸下降。對應絮凝效率屬性，PH酸鹼值的屬性顯示pH酸鹼值在48小時內從7.0降至5.3，接著在96小時內稍微增至5.6。因此，60小時是生物絮凝劑製作的最佳培養時間。
[0071]生物絮凝劑的特性描述
[0072]生物絮凝劑的成分分析
[0073]純化生物絮凝劑的化學分析顯示全部糖與全部蛋白質的比例分別是28.3%及5.7%。此結果顯示生物絮凝劑主要是一多糖生物絮凝劑。通過三氟乙酸將純化生物絮凝劑水解，以確定其他糖類，例如中性糖，糖醛酸以及氨基糖。純化生物絮凝劑的元素分析，其碳(C)、氫⑶、氧(O)、氮(N)及硫⑶的主要成分重量百分比分別是29.9%、4.8%、34.7%、3.3%及2.0 %。通過凝膠滲透色譜法(GPC)系統，生物絮凝劑的分子量確定是2.466x104-2.68x104 道爾頓。
[0074]生物絮凝劑的官能團分析
[0075]純化生物絮凝劑的紅外線譜顯示約在3285CHT1的寬展峰值，羥基團的特徵，以及約在2927CHT1的弱C - H伸縮吸收帶。在1333與1633CHT1的峰值皆因COO-鍵非對稱振動。在1538CHT1的峰值則歸於NH彎曲振動。在1007CHT1的強吸收峰值顯示C - O伸縮振動以及甲氧基團的存在，亦即現有所有糖衍生物的典型特徵。
[0076] 生物絮凝劑的pH酸鹼值穩定性[0077]圖8顯示生物絮凝劑的pH酸鹼值及熱穩定度，其中在pH酸鹼值3.0-7.0的範圍內，絮凝效率可超過90 %。當pH酸鹼值高於7後，絮凝效率明顯下降。
[0078]生物絮凝劑的熱穩定度
[0079]生物絮凝劑的熱穩定度研究顯示生物絮凝劑非常的穩定(圖8)。若生物絮凝劑的PH酸鹼值維持在3.0-7.0之間，則由於生物絮凝劑的成分是多糖，因此在廣泛的溫度範圍內(10-100°C)絮凝效率均超過90%。
[0080]澄清液的生物絮凝劑機制
[0081]在水體中無論是膠體或微粒的雜質均帶負電荷，因此採用帶正離子的生物絮凝劑將使絮凝最有效。生物絮凝劑表面(圖9a)與膠體間的庫倫相互作用會產生吸引及膠體表面的電荷中和，致使凝聚物的形成(圖9c)以及降低兩者間的電反斥力。表1顯示生物絮凝劑與高嶺土懸濁液(配製混水)的界達電位，其中具有-9.3mV的界達電位的已處理的高嶺土懸濁液趨向絮凝以具備較澄清的液體。圖9b顯示高嶺土懸濁液的表面。在一較佳實施例中，凝聚物的形成或可懸浮在液體的頂部、沉在液體的底部，或可易自液體過濾或移除。在一較佳實施例中，界達電位表示分散系中鄰近相似的帶電微粒(維生素)間的相斥程度。OmV的界達電位顯具液體澄清工序中的最佳絮凝表現。
[0082]表1:生物絮凝劑、高嶺土懸濁液及已處理的高嶺土懸濁液的界達電位。
[0083]
【權利要求】
1.一種製造生物聚合物的方法，包括以下工序: 提供培養基，包括一碳源、一氮源及複數礦源； 將真菌接種於所述培養基，接種量體積百分比是0.2-10% ； 培養所述培養基，條件為搖床轉速是0-250轉數/分，培養時間是12-96小時，溫度是15-45 0C ； 過濾所述培養基，從而分離所述真菌與所述培養基； 淨化所述生物聚合物； 其特徵在於: 所述真菌是黃麴黴； 所述碳源是選自由蔗糖、葡萄糖、果糖、乳糖、澱粉以及甘油所組成的群族； 所述氮源是選自由蛋白腖、酵母抽提物、穀氨酸、尿素、硫酸銨、硝酸銨以及硝酸鈉所組成的群族； 所述複數礦源是選自由鎂、鉀、鐵、氯以及其任意組合所組成的群族； 所述碳源對所述氮源的摩爾比率是5:1，所述培養基的pH酸鹼值是pH5-9，溫度是25-450C，接種量體積百分比是0.2-2%,搖床轉速是50-200轉數/分，培養時間是12-60小時。
2.如權利要求1所述的製造生物聚合物的方法，其特徵在於:所述培養基是在轉動搖床或攪拌生物反應器中進行培養。
3.如權利要求1所述的製造生物聚合物的方法，其特徵在於:所述碳源是蔗糖。
4.如權利要求1所述的製造生物聚合物的方法，其特徵在於:所述氮源是蛋白腖。
5.如權利要求1所述的製造生物聚合物的方法，其特徵在於:所述培養基的酸鹼值是pH7。
6.如權利要求1所述的製造生物聚合物的方法，其特徵在於:所述培養基的溫度是40。。。
7.如權利要求1所述的製造生物聚合物的方法，其特徵在於:所述接種量體積百分比是 2 。
8.如權利要求1所述的製造生物聚合物的方法，其特徵在於:所述搖床轉速是200轉數/分。
9.如權利要求1所述的製造生物聚合物的方法，其特徵在於:所述培養時間是60小時。
10.如權利要求1所述的製造生物聚合物的方法所製得的生物聚合物，其特徵在於:所述生物聚合物的分子量是2.466xl04t-2.68xl04道爾頓，具有複數官能團、複數化學元素、糖、蛋白質，酸鹼值在PH3-7間，溫度在10-100°C間的最低絮凝效率是90%。
11.如權利要求11所述的生物聚合物，其特徵在於:所述複數官能團是選自由羥基、碳氫化物、醯胺原子團、羧基、胺類、甲氧基以及其任意組合所組成的群族。
12.如權利要求11所述的生物聚合物，其特徵在於:所述複數化學元素包括碳、氫、氧、氣以及硫。
【文檔編號】C12R1/67GK103998612SQ201280053572
【公開日】2014年8月20日 申請日期:2012年8月30日 優先權日:2011年11月2日
【發明者】阿茲尼·愛德利斯, 艾哈邁德·H.·羅札伯, 諾拉菲薩·阿布杜拉, 羅斯法裡贊·穆罕默德 申請人:馬來西亞博特拉大學