一種20(s)-原人參二醇微球及其製備方法和應用的製作方法

2023-05-21 14:35:06 1

一種20(s)-原人參二醇微球及其製備方法和應用的製作方法
【專利摘要】本發明公開了一種20(S)-原人參二醇微球及其製備方法和應用。所述微球是由20(S)-原人參二醇與聚乳酸-羥基乙酸或由20(S)-原人參二醇磷脂複合物與聚乳酸-羥基乙酸和納米羥基磷灰石製成，平均粒徑為1～5μm。所述微球的製備是採用乳化溶劑揮發法，包括油相的製備、油相注入水相後的乳化、溶劑揮發及後處理步驟。實驗結果表明：本發明提供的20(S)-原人參二醇微球的體外長期釋放曲線符合Higuchi方程，無明顯突釋，體外長期釋放約30天，可達到體外長期緩釋效果，可望作為活性成分用於製備治療或預防抑鬱症藥物的緩釋製劑，具有廣闊的應用前景。
【專利說明】一種20 (S)-原人參二醇微球及其製備方法和應用
【技術領域】
[0001]本發明涉及一種20 (S)-原人參二醇微球及其製備方法和應用。
【背景技術】
[0002]據世界衛生組織統計，到2020年抑鬱症可能成為僅次於心臟病的第二大疾患，抑鬱症患者是自殺的高危人群，約有10%~15%的患者可因此而自殺。對於這類嚴重威脅人類健康的疾病，目前臨床上多採用化學合成藥物治療，在治療方面，西藥抗抑鬱(如常用的阿米替林、氟西汀等)主要是通過抑制腦內單胺類遞質的重吸收，使腦內NE、5-HT等遞質的含量增加。但是，長期使用這些藥物有降低單胺類遞質合成，抑制性功能的副作用。從現有的研究資料看，抑鬱症的病因很複雜，其治療也不應僅僅局限於神經系統，這一現象提示抑鬱症治療確應更多地立足於通過多途徑、多靶點、多層次發揮作用的傳統藥物。 [0003]中國藥學典籍《神農本草經》把人參列為上品，言其具有「主補五臟，安精神，定魂魄，止驚悸，明目，開心益智，久服有輕身延年之功效」，從人參活性成分中篩選抗抑鬱藥物具有較好的可行性。近來科學研究表明，人參皂苷在體內的藥物活性不是通過其原型吸收發揮作用的，皂苷只是藥物的前體，只有通過胃腸道菌群的去糖代謝活化後，才轉化成具有藥物療效的活性成分，從同類皂苷去糖後得到的某些苷元或次苷不僅改變了其母體皂苷的療效，而且還因除去了糖原而使其藥用活性增強。20 (S)-原人參二醇為原人參二醇型皂苷元，是一些人參皂苷的代謝產物或酸鹼水解產物，具有較強的抗抑鬱和抗腫瘤活性，臨床常用於抑鬱症的預防及治療作用。
[0004]高分子複合物儘管是物理共混，但複合物卻表現出了與單組分聚合物區別很大的性質及特點，因此高分子複合物在很多領域應用的研究得到了重視。磷脂複合物是義大利學者Bombardelli在研究脂質體時發現的一種新型載藥系統，中藥活性成分與磷脂在一定條件下形成磷脂複合物後，可使藥物親脂性明顯增強，作用時間延長，不良反應降低，同時可增強在胃腸道中的吸收，提高生物利用度，增強藥理作用。
[0005]微球注射劑在延長藥物在體內外釋放時間，維持平穩有效的血藥濃度，提高患者順應性的同時，其骨架材料又具有良好的生物相容性、生物可降解性和較低毒性，具有以下潛在優勢:藥物包封在微球內後，具有明顯的控制釋放及延長藥物療效的作用；微球注射劑可消除常釋注射劑多次給藥產生的體內藥物濃度峰谷現象，獲得平穩長時間的有效濃度；增強藥物的靶向性；在緩釋長效的同時不會明顯增加毒性，或由於靶向性而降低毒副作用。由於抑鬱症存在需長期給藥的特點，因此，研製用於抑鬱症長期治療的微球緩釋製劑，可以達到減少用藥次數及給藥劑量，降低毒副作用，提高患者用藥的順應性。

【發明內容】

[0006]針對現有技術存在的上述問題，本發明的目的是提供一種可應用於製備抗抑鬱症的緩釋藥物製劑的20 (S)-原人參二醇微球及其製備方法，以滿足活性成分20 (S)-原人參二醇作為緩釋抗抑鬱藥物的應用要求。[0007]為實現上述發明目的，本發明採用的技術方案如下:
[0008]一種20 (S)-原人參二醇微球，由20 (S)-原人參二醇與聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)或由20 (S)-原人參二醇磷脂複合物與聚乳酸-羥基乙酸(PLGA)和納米羥基磷灰石(nHAP)製成，平均粒徑為I~5 μ m。
[0009]一種製備所述的20 (S)-原人參二醇微球的方法，包括如下操作:
[0010]a)將20 (S)-原人參二醇和聚乳酸-羥基乙酸或20 (S)-原人參二醇磷脂複合物和聚乳酸-羥基乙酸及納米羥基磷灰石溶於由乙酸乙酯與二氯甲烷組成的混合溶劑中，形成油相；其中:20 (S)-原人參二醇及20 (S)-原人參二醇磷脂複合物與聚乳酸-羥基乙酸的質量比均為1:4~1:8 ;聚乳酸-羥基乙酸與混合溶劑的質量體積比為80mg:1mL~120mg:1mL ;納米羥基磷灰石與聚乳酸-羥基乙酸的質量比為1:6~1:3 ;
[0011]b)以質量百分比濃度為0.1~0.5%的聚乙烯醇(PVA)水溶液為水相，控制在35~45°C下，將步驟a)製得的油相緩慢注入水相中；其中:油相與水相的體積比為1:10~1:50 ；
[0012]c)在35~45 °C下高速攪拌使乳化；
[0013]d)繼續攪拌，使體系中的有機溶劑完全揮發；
[0014]e)離心分離，用蒸餾水洗滌所收集的固體，然後進行真空乾燥，即得所述的20 (S)-原人參二醇微 球。
[0015]所述的混合溶劑優選由乙酸乙酯與二氯甲烷按1:4體積比組成。
[0016]所述的聚乙烯醇優選低聚合度、部分醇解型的聚乙烯醇，進一步優選為聚合度為500、醇解度為88%的聚乙烯醇。
[0017]步驟c)中所述的攪拌速度優選為1000~1500轉/分鐘。
[0018]步驟d)中所述的攪拌速度優選為850~2000轉/分鐘。
[0019]步驟e)中所述的離心速度優選為2000~4000轉/分鐘。
[0020]步驟e)中所述的真空乾燥溫度優選為35~40°C。
[0021]上述20 (S)-原人參二醇微球的一種應用，是用於製備以20 (S)-原人參二醇為活性成分的抗抑鬱症藥物的緩釋製劑。
[0022]所述的緩釋製劑優選為皮下或肌肉注射製劑。
[0023]本發明中所述的20 (S)-原人參二醇磷脂複合物是由20 (S)-原人參二醇與磷脂形成的複合物；所述磷脂可為卵磷脂或豆磷脂，較優的為卵磷脂，包括注射用卵磷脂PL-100M和注射用高純度卵磷脂PC-98T，最優的為注射用高純度卵磷脂PC-98T。注射用卵磷脂PL-100M和注射用高純度卵磷脂PC-98T均可購自上海艾韋特醫藥科技有限公司。日本專利技術(Patent N0.3844508)生產的PC-98T，是採用特殊提取工藝使磷脂醯膽鹼含量超過98%，為純白色粉末狀的天然磷脂，保質期可達36個月，SFDA批准文號為F20090024 ;卵磷脂PL-100M的磷脂醯膽鹼含量為80%，SFDA批准文號為F20090025。
[0024]本發明中所述的20(S)_原人參二醇磷脂複合物的製備工藝，可參照如下工藝製得:
[0025]稱取20(S)_原人參二醇和磷脂(投料比為1:1)於IOOmL磨口圓底燒瓶中，加入甲醇，調整20 (S)-原人參二醇濃度為20mg/mL，然後在40°C水浴中攪拌4h，減壓回收有機溶劑，殘餘物用適量乙酸乙酯充分溶解，濾過，分離濾液，回收乙酸乙酯，剩餘物進行真空乾燥，即得20(S)_原人參二醇磷脂複合物；收集沉澱，乾燥並稱重，按以下公式計算出20 (S)-原人參二醇與磷脂的結合百分率:20 (S)-原人參二醇與磷脂的結合率％= (Al -AD) /Al X 100%，其中，Al為20 (S)-原人參二醇的初始投藥量，AD為沉澱量。
[0026]與現有技術相比，本發明具有如下有益效果:
[0027]本發明提供的20 (S)-原人參二醇微球，在掃描電鏡下顯示其外部為密實結構，表面光滑，外觀圓整，分散性好；其平均粒徑在5μπι以下，流動性好；且其體外長期釋放曲線符合Higuchi方程，無明顯突釋，體外長期釋放約30天，可達到體外長期緩釋效果；因此，本發明所述的20 (S)-原人參二醇微球可作為活性成分用於製備治療或預防抑鬱症藥物的緩釋製劑，以減少抑鬱症患者的用藥次數及給藥劑量，降低毒副作用，提高用藥的順應性?』另外，本發明製備方法簡單，無需特殊設備，適於規模化生產。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0028]圖1為本發明所述的20 (S)-原人參二醇微球的掃描電鏡照片；
[0029]圖2是由20(S)_原人參二醇所制微球的體外長期釋放曲線；
[0030]圖3是由20 (S)-原人參二醇磷脂複合物所制微球的體外長期釋放曲線。
【具體實施方式】
[0031]下面結合實施例和附圖對本發明作進一步詳細、完整地說明。
[0032]實施例1
[0033]將20mg20(S)_原人參二醇和IOOmg PLGA溶於ImL由乙酸乙酯-二氯甲烷(按體積比1:4)組成的混合溶劑中，製得油相；在40°C水浴中，將製得的油相緩慢注入50mL的水相(由聚合度為500、醇解度為88%的聚乙烯醇形成的質量百分比濃度為0.5%的水溶液)中；以1300r/min高速攪拌乳化5min ;再以850r/min繼續攪拌4h,使體系中的有機溶劑(乙酸乙酯和二氯甲烷)完全揮發；離心(轉速3000r/min，IOmin)分離，用蒸餾水洗滌收集到的固體3次，最後於37°C真空乾燥36h，所得白色粉末即為發明所述的20 (S)-原人參二醇微球。
[0034]1、外觀評價
[0035]取所獲得的20 (S)-原人參二醇微球適量混懸於0.02%(w/w)吐溫80的溶液中超聲lmin，使其均勻分散，雷射粒度分析儀測定微球的粒徑，本實例所得微球的平均粒徑為
1.16 μ m0
[0036]圖1為所獲得的20(S)_原人參二醇微球的掃描電鏡照片，由圖1可見:微球的外部為密實結構，表面光滑，外觀圓整，分散性好。
[0037]2、平均載藥量、包封率及收率測定
[0038](I)色譜條件
[0039]Agilent Eclipse XDB-C18 色譜柱(4.6mmX 150mm, 5 μ m),流動相為乙臆-水(88:12)，流速為1.0mL.mirT1，柱溫為25°C，檢測波長為203nm。理論塔板數按20 (S) -PPD峰計算不低於7000。
[0040](2)標準曲線
[0041]取20 (S)-原人參二醇對照品約10mg，精密稱定，置IOmL容量瓶中，加甲醇溶解並稀釋至刻度，搖勻，得濃度為1.0680mg.mL-1的溶液，作為對照品儲備液；分別將20 (S)-原人參二醇微球用對照品儲備液稀釋成質量濃度為0.02136，0.1068，0.2136，0.5340，
0.8544mg.mL—1的系列標準溶液；分別精密吸取上述對照品溶液與對照品儲備液各20 μ L注入高效液相色譜儀，按照色譜條件進行測定，記錄峰面積，以質量濃度(mg^mL-1)為橫坐標，峰面積A為縱坐標繪製標準曲線，得回歸方程Y=13004X+40.405 (r=0.9996)。
[0042]結果表明，20⑶-原人參二醇微球的濃度在0.02136~1.0680mg.mL—1範圍內呈良好的線性關係。
[0043](3)平均載藥量和包封率測定
[0044]稱取所獲得的20⑶-原人參二醇微球5mg，精密稱定，加0.5mL 二氯甲烷渦旋，充分破壞微球結構，再加入甲醇定容至5mL，離心收集上清液，用0.45 μ m微孔濾膜過濾，按照色譜條件測定藥物含量。按下述公式計算微球載藥量和包封率，並按照合格微球質量計算收率，公式為:
[0045]微球的載藥量(%) =(微球中實際含藥量/乾燥後微球總量)X 100%
[0046]藥物的包封率(%)=(實際載藥量/理論載藥量)X 100%
[0047]表1為本實施例所獲得的20 (S)-原人參二醇微球的檢測結果。
[0048]表1.微球質量檢測結果
[0049]
【權利要求】
1.一種20 (S)-原人參二醇微球，其特徵在於:是由20 (S)-原人參二醇與聚乳酸-羥基乙酸或由20 (S)-原人參二醇磷脂複合物與聚乳酸-羥基乙酸和納米羥基磷灰石製成，平均粒徑為I~5 μ m。
2.—種權利要求1所述的20 (S)-原人參二醇微球的製備方法，其特徵在於，包括如下操作: a)將20(S)-原人參二醇和聚乳酸-羥基乙酸或20 (S)-原人參二醇磷脂複合物和聚乳酸-羥基乙酸及納米羥基磷灰石溶於由乙酸乙酯與二氯甲烷組成的混合溶劑中，形成油相；其中:20 (S)-原人參二醇及20 (S)-原人參二醇磷脂複合物與聚乳酸-羥基乙酸的質量比均為1:4~1:8 ;聚乳酸-羥基乙酸與混合溶劑的質量體積比為80mg:1mL~120mg:1mL ；納米羥基磷灰石與聚乳酸-羥基乙酸的質量比為1:6~1:3 ; b)以質量百分比濃度為0.1~0.5%的聚乙烯醇水溶液為水相，控制在35~45°C下，將步驟a)製得的油相緩慢注入水相中；其中:油相與水相的體積比為1:10~1:50 ； c)在35~45°C下高速攪拌使乳化； d)繼續攪拌，使體系中的有機溶劑完全揮發； e)離心分離，用蒸餾水洗滌所收集的固體，然後進行真空乾燥，即得所述的20(S)_原人參二醇微球。
3.如權利要求2所述的製備方法，其特徵在於:所述的混合溶劑是由乙酸乙酯與二氯甲烷按1:4體積比組成。
4.如權利要求2所述的製備方法，其特徵在於:所述的聚乙烯醇選用聚合度為500、醇解度為88%的聚乙烯醇。
5.如權利要求2所述的製備方法，其特徵在於:步驟c)中所述的攪拌速度為1000~1500轉/分鐘。
6.如權利要求2所述的製備方法，其特徵在於:步驟d)中所述的攪拌速度為850~2000轉/分鐘。
7.如權利要求2所述的製備方法，其特徵在於:步驟e)中所述的離心速度為2000~4000轉/分鐘。
8.如權利要求2所述的製備方法，其特徵在於:步驟e)中所述的真空乾燥溫度為35~40。。。
9.一 種權利要求1所述的20 (S)-原人參二醇微球的應用，其特徵在於:是用於製備以20 (S)-原人參二醇為活性成分的抗抑鬱症藥物的緩釋製劑。
10.如權利要求9所述的應用，其特徵在於:所述的緩釋製劑為皮下或肌肉注射製劑。
【文檔編號】A61P25/24GK103976957SQ201310050858
【公開日】2014年8月13日 申請日期:2013年2月8日 優先權日:2013年2月8日
【發明者】王冰, 陶建生, 陳玉璽, 張彤, 駱慧琳, 臧傳琪 申請人:上海中醫藥大學