一種雞皮膚顏色相關的分子標記及其應用的製作方法
2023-05-21 13:55:36
一種雞皮膚顏色相關的分子標記及其應用的製作方法
【專利摘要】本發明公開了一種雞皮膚顏色相關的分子標記及其應用。所述分子標記為SEQIDNO:1所示序列中的第342處的C/T鹼基突變。利用引物SEQIDNO:2和SEQIDNO:3對其進行擴增，將所得擴增產物用限制性內切酶MspI酶切，根據酶切結果來判斷該突變位點的基因型。本方法操作簡便，結果可靠。通過對上述C/T突變位點的檢測，可以確定目標雞群皮膚顏色這一性狀的基因型，也可以通過基因型判別某一個體的皮膚顏色，為有目的地對雞群膚色性狀進行選擇提供依據，提高後代雞群皮膚顏色的一致性。
【專利說明】—種雞皮膚顏色相關的分子標記及其應用
【技術領域】
[0001]本發明屬於生物【技術領域】，具體涉及一種雞皮膚顏色相關的分子標記及其應用。【背景技術】
[0002]在一些國家和地區，消費者習慣性地將鮮亮的黃色皮膚視為肉雞產品優質和優味的標誌，雞皮膚的黃度是決定其市場價格的重要因素之一。雞皮膚呈現的黃色是由β類胡蘿蔔素和葉黃素等黃色素沉積的結果，取決於遺傳因素，受飼料、環境、飼養、生理健康、同一隻雞不同部位等因素的影響。雞的白色膚色和黃色膚色是由一對等位基因Ww控制的，白色為W，對於黃色w為顯性，該等位基因通過影響β_類胡蘿蔔素在皮膚中的沉積從而影響皮膚表皮外層的顏色。資料顯示，雞本身攜帶的BCD02基因能使有色的類胡蘿蔔素降解為無色的物質。等位基因ww能抑制BCD02基因在皮膚表皮中的表達，允許類胡蘿蔔素在皮膚中沉積而使雞的皮膚呈現黃色；等位基因WW和Ww不能抑制BCD02表達，類胡蘿蔔素會被分解而使雞的皮膚呈現白色。
[0003]在實際飼養生產應用中，還能通過增加日糧中葉黃素、類胡蘿蔔素的份量以及添加著色劑使雞的膚色變黃。由於現代育種及飼養技術的迅速發展，家禽的飼養期短，生長速度快，因而單純依賴飼料中的天然色素已滿足不了人們對商品雞皮膚色澤的要求，添加各類著色劑成為現代養禽業中廣泛採用的方法。添加著色劑對肉雞生產沒有任何營養價值，雖然尚未發現會產生任何副作用，但不能完全承認其安全性，使用著色劑亦會增加養殖成本(每羽雞色素成本約0.1元)。因此，從長遠考慮，最根本的方式，是通過育種，有針對性地對攜帶等位基因WW的雞苗進行選擇飼養，提高其後代雞群膚色的一致性。因此，建立一種快速鑑別雞皮膚顏色相關基因型的方法，對於優質雞育種具有重要作用。
【發明內容】
[0004]本發明要解決的技術問題是為了克服現有技術中缺乏快速鑑別雞皮膚顏色相關基因型方法的缺陷，提供一種雞皮膚顏色相關的分子標記。
[0005]本發明的另一個目的在於提供一種利用雞皮膚顏色相關的分子標記快速鑑別雞皮膚顏色相關基因型的方法。
[0006]本發明的目的通過以下技術方案予以實現:
一種雞黃白皮膚顏色相關的分子標記，所述分子標記為SEQ ID NO:1所示序列中的第342處的C/T鹼基突變。
[0007]一種快速鑑別上述分子標記的方法，包括如下步驟:
S1.以雞B⑶02基因的DNA序列為參考，設計如下引物並進行PCR擴增:
正向引物:5，— AGGGGAGATCACAACGGACAAGA— 3』，
反向引物:5』 — GCTGGTGTTCTCCGAGTCTATA— 3』。
[0008]S2.將所得擴增產物用限制性內切酶Msp I酶切，
若只有一條帶，則該突變位點處是TT純合型，即雞的膚色為黃色；若有兩條帶，則該突變位點處是CC純合型，即雞的膚色為白色；
若有三條帶，則該突變位點處是CT雜合型，即雞的膚色為白色。
[0009]上述分子標記在雞皮膚顏色性狀輔助選擇中的應用。
[0010]本發明的有益效果是:本發明提供的方法操作簡便，結果可靠。通過對上述c/τ突變位點的檢測，可以確定目標雞群皮膚顏色這一性狀的基因型，也可以通過基因型判別某一個體的皮膚顏色，為有目的地對雞群膚色性狀進行選擇提供依據，提高後代雞群皮膚顏色的一致性。
【專利附圖】
【附圖說明】[0011]圖1是通過PCR獲得的白皮膚和黃皮膚固始雞B⑶02基因部分DNA序列；W1、W2為白皮膚雞B⑶02基因的PCR擴增片段；Y1、Y2為黃皮膚雞B⑶02基因的PCR擴增片段。
[0012]圖2是對上述兩隻白皮膚固始雞和兩隻黃皮膚固始雞的BCD02基因部分DNA序列進行對比的結果。
[0013]圖3是用限制性內切酶Msp I對上述406bp的B⑶02基因片段進行基因分型的電泳圖譜，瓊脂糖凝膠濃度為2.0%。
【具體實施方式】
[0014]下面結合說明書附圖和具體實施例對本發明作進一步的說明，但本發明保護的範圍並不局限於此。
[0015]實施例1 S1.引物設計
根據BCD02基因(GENBANK登錄號為:NC_006111.3)上的一個位點(位置:Chr24:6135267,Gallus_gallus-4.0)，利用GeneTool軟體設計一對引物，該引物擴增得到的DNA序列如SEQ ID NO:1所示，全長406bp。引物序列如下:
【權利要求】
1.一種雞黃白皮膚顏色相關的分子標記，其特徵在於，所述分子標記為SEQ ID N0:1所示序列中的第342處的C/T鹼基突變。
2.權利要求1所述雞黃白皮膚顏色相關的分子標記在雞皮膚顏色輔助選擇中的應用。
3.一種利用權利要求1所述的分子標記快速鑑別雞皮膚顏色基因型的方法，包括如下步驟: S1.以雞B⑶02基因的DNA序列為參考，設計引物B⑶02F和B⑶02R，並進行PCR擴增:BCD02F和BCD02R引物序列如SEQ ID NO: 2~3所示； S2.將所得擴增產物用限制性內切酶MspI酶切；若只有一條帶，則該突變位點處是TT純合型，若有兩條帶，則該突變位點處是CC純合型，若有三條帶，則該突變位點處是CT雜合型。
【文檔編號】C12N15/11GK103834642SQ201410050812
【公開日】2014年6月4日 申請日期:2014年2月14日 優先權日:2014年2月14日
【發明者】張細權, 許繼國, 聶慶華, 詹惠娜 申請人:華南農業大學